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10-2
10-3
10-4
1 ml
1 ml
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Suspensin madre: 45 min a T amb como mximo, antes de aadir el medio
30 1 C 72 3 h
RECUENTO DE ENTEROBACTERIAS EN PLACA (ISO 7402, 1993) 10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilucin 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)
10-2
10-3
10-4
1 ml
1 ml
1 ml
Suspensin madre: 45 min a T amb como mximo, antes de aadir el medio
X2 Aadir VRBG 15-20 ml, 45-50 C Agitar homogeneizando Aadir doble capa
37 1 C 24 h
de
10-2
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1 ml
1 ml
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Suspensin madre: 15 min a T amb como mximo, antes de aadir el medio
25 1 C 5 das
10-2
10-3
10-4
1 ml
1 ml
1 ml
X2 Aadir VRBL 15-20 ml, 45-50 C Agitar homogeneizando Aadir doble capa
Suspensin madre: 45 min a T amb como mximo, antes de aadir el medio
37 1 C 24 h
INVESTIGACIN DE Escherichia coli: PRESENCIA/AUSENCIA 10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilucin 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)
Filtrar a un tubo estril 10 ml de muestra 10 ml caldo EC (DC) con campana Durham precalentado a 44 C 44 C 24-48 h POSITIVO: Presencia de gas en 1/10 parte de la campana Confirmacin Prueba del indol 0,1 ml Caldo de triptona 44 C 24 h Aadir 3 o 4 gotas del reactivo de Kovacs NEGATIVO: no anillo rojo AUSENCIA NEGATIVO: Ausencia de gas en 1/10 parte de la campana AUSENCIA
PRESENCIA
RECUENTO DE Staphylococcus coagulasa positivo EN PLACA (ISO 6888, 1999) 10 g muestra 90 ml caldo peptona Dilucin 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)
10-2
10-3
10-4
0,1 ml
0,1 ml
X2 Extender el inculo con perlas de vidrio estriles 37 1 C 24 + 24 h Placas 15-150 colonias tpicas y no tpicas. Confirmacin: inocular tubos de BHI con 3 colonias tpicas y 3 colonias no tpicas 37 1 C 20-24 h Coagulasa
CATALASA Opcional
+
37 1 C 20-24 h Coagulasa positivo
25 g muestra 225 ml agua peptona tamponada Dilucin 10-1 Homogeneizar (2 min Stomacher)
37 1 C 18 2 h
37 1 C 18 2 h
M.K. R.V.
Colonias tpicas
Serologa -
Reacciones bioqumicas -
Confirmacin serolgica
AISLAMIENTO
ENRIQUECIMIENTO
PRE-ENRIQUECIMIENTO PRE
25 g muestra 225 ml caldo Fraser-demi Dilucin 10-1 Homogeneizar (30 seg Stomacher)
37 1 C 24 - 48 h
Verde grisceas, a veces con centro negro y rodeadas de halo negro, deprimidas en el centro (48h)
Pequeas, grisceas, rodeadas de halo negro. A las 48 h tienen reflejos verdosos y son deprimidas en el centro.
Listeria spp
37 1 C 18 - 24 h
Listeria monocytogenes
AISLAMIENTO
ENRIQUECIMIENTO
PRE-ENRIQUECIMIENTO PRE
Filtrar y preparar una dilucin seriada desde la dilucin 10-1 10 MIN, 80 c (destruccin de formas vegetativas)
10-2
1 ml
1 ml
Preparar una dilucin seriada dilucin 10-1 : slo han resistido las esporas dilucin 10-2
1 ml
PCA 15-20 ml, 45-50 C Agitar homogeneizando
1 ml
Schaedler 15-20 ml, 45-50 C Agitar homogeneizando Aadir doble capa
37 C 24 h 37 C 24 h 9Recuento placas Colonias 30-300 9Tincin Gram/esporas 9Recuento placas Colonias 30-300 9Tincin Gram/esporas RECUENTO ESPOROS AEROBIOS
37 C, JARRA ANAEROBIOSIS 24 h 9Recuento placas Colonias 30-300 9Tincin Gram/esporas RECUENTO ESPOROS ANAEROBIOS
PREPARACIN DE YOGUR
5 ml leche pasteurizada
Inocular con el cultivo iniciador (a partir de yogur comercial) 37 C 24 h Yogur FERMENTACIN LCTICA 37 C 24 h Leche lquida
PREPARACIN DE CERVEZA
75 C 1h Activacin amilasas. Hidrlisis del almidn a glucosa y maltosa 121 C 10 min Enfriar tubos T ambiente
Saccharomyces cerevisiae
T ambiente 3-7 das Cerveza FERMENTACIN ALCOHLICA
Inocular con
37 C 24 h
Tomar muestra de la nariz con hisopo estril Pasar dedos sin lavarse las manos Pasar dedos despus de lavarse las manos con un desinfectante
placa AMS
37 C 24 h
37 C 24 h
ANLISIS DE SUPERFICIES HISOPO Restregar Plantilla papel de aluminio con abertura de 9 cm2
Placa PCA
Placa VRBG
37 C 24 h
37 C 24 h
ufc/25 cm2