Universidade Federal de So Joo del-Rei Engenharia de Bioprocessos Bioqumica do Metabolismo

Parte 1: Controle das principais vias e especializao dos rgos

Integrao metablica
Juliano Lemos Bicas

Sumrio
Introduo Resumo das vias metablicas principais Especializao dos rgos Concluso Exerccios

Sumrio
Introduo Resumo das vias metablicas principais Especializao dos rgos Concluso Exerccios

Introduo
Interligao metablica
ATP: moeda corrente de energia no metabolismo
- Fonte de energia p/ contrao muscular, transporte ativo etc. - Gerada pela oxidao de molculas (glicose, AG, aa). - Utilizada em biossnteses.

NADH: poder redutor

- Formado nas vias de oxidao e utilizado para sntese de ATP.

NADPH
- Principal doador de eltrons nas biossnteses redutoras.

Vias de sntese e degradao

- Quase sempre diferentes.

Metablitos comuns = interligao

Glicognio

Glicose

Nucleotdeos

Triacilgliceris

Aulas Aula 13 411 5 6 3 2a 9 ee 312 11 ATP

Glicose-6-fosfato
gliclise / gliconeognese

Ribose-5P
Via das Pentosesfosfato

cidos graxos

fosfoenolpiruvato

ATP
NADPH

sntese / oxidao cidos graxos

Piruvato Acetil-CoA
Aminoacidos glicognicos oxalacetato
C.K.

Lactato

ATP

Corpos cetnicos Aminoacidos cetognicos

NADH FADH2

NADH

FADH2 ATP

Fosforilao oxidativa Protenas

Introduo
Regulao (recproca) das vias de sntese e degradao
Manuteno da homeostase (equilbrio dinmico), frente a variaes no fluxo (resposta demanda); Evitar ciclo ftil; Ocorre em pontos onde as reaes podem ser independentemente controladas (reaes irreversveis); Rotas compartimentadas (mitocndria x citossol).

Introduo
Estratgias de controle metablico
Interaes alostricas
Interaes no-covalentes Deteco rpida de sinais Ajuste da atividade c/ sinais Ex.: Fosfofrutoquinase, Acetil-CoA carboxilase

Introduo
Estratgias de controle metablico
Interaes alostricas Modificao covalente
Ex.: fosforilao enzimtica Com frequncia em resposta a hormnios Cascatas de amplificao Mais duradouras (s a min) que interaes alostricas (ms a s) Ex.: glicognio sintase

Introduo
Estratgias de controle metablico
Interaes alostricas Modificao covalente Ajustes nos nveis enzimticos
Altera velocidade de sntese e degradao de enzimas Longo prazo (h ou dias) Basicamente altera frequncia de transcrio do gene Depende da [S] ou da presena de hormnios

Introduo
Estratgias de controle metablico
Interaes alostricas Modificao covalente Ajustes nos nveis enzimticos Compartimentao
Clulas eucariticas Gliconeognese Ciclo da ureia Citoplasma: Via glicoltica Via pentoses-fosfato Sntese AG Memb. mitocondrial interna: Fosforilao oxidativa Matriz mitocondrial: -oxidao Ciclo de Krebs Cetognese

Introduo
Estratgias de controle metablico
Interaes alostricas Modificao covalente Ajustes nos nveis enzimticos Compartimentao Especializao metablica dos rgos
rgos com diferentes papeis metablicos Resultado da expresso gnica diferenciada

Sumrio
Introduo Resumo das vias metablicas principais Especializao dos rgos Concluso Exerccios

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: viso geral

Via glicoltica:
Objetivo: Degradao
anaerbica da glicose para produo de energia; 10 reaes, 3 das quais irreversveis; Rendimento: 2 ATP e 2 NADH por molcula de glicose;

Glicose
gliconeognese

Gliconeognese:
Objetivo: fornecer glicose (manuteno da glicemia). Formao de glicose a partir de piruvato (outros substratos nocarboidrato), revertendo as 3 reaes irreversveis da via glicoltica. Custo: 4 ATP e 2 GTP (6 ATP eq.); 2 NADH.

via glicoltica

Piruvato

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: regulao

Regulao hormonal Glicose, insulina = via glicoltica, gliconeognese Glicose, glucagon = via glicoltica, gliconeognese adrenalina = via glicoltica, gliconeognese Interaes alostricas principais resultados: ATP, ADP = via glicoltica, gliconeognese ATP, ADP = via glicoltica, gliconeognese

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: regulao
Interaes alostricas via glicoltica Frutose-1,6-bifosfato
+

gliconeognese
Fosfoenolpiruvato carboxiquinase

Fosfoenolpiruvato
Piruvato quinase

ADP

Oxalacetato

ATP

Piruvato
Complexo piruvato desidrogenase

Piruvato carboxilase

Acetil-CoA Ciclo de Krebs

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: regulao
Interaes alostricas gliconeognese Frutose-6-fosfato
ATP +
Fosfofruto quinase

AMP ADP ATP Citrato

Pi
Frutose-1,6-bifosfato fosfatase

ADP

Frutose-1,6-bifosfato via glicoltica

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: regulao
Interaes alostricas gliconeognese
Fosfofruto quinase 1

via glicoltica

Frutose-6-fosfato
Frutose-1,6-bifosfato fosfatase Frutose-2,6-bifosfato fosfatase Fosfofruto quinase 2

Frutose-1,6-bifosfato

Frutose-2,6-bifosfato

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: regulao
Sensibilidade a hormnios (fgado) gliconeognese
Fosfofruto quinase 1

via glicoltica Frutose-1,6-bifosfato

Frutose-1,6-bifosfato fosfatase

Frutose-6-fosfato

+ Frutose-2,6-bifosfato
fosfatase

Fosfofruto quinase 2

Frutose-2,6-bifosfato
Fosforilao enzimtica (AMPc)

Glucagon/Adrenalina

Principais rotas metablicas

Via glicoltica e gliconeognese: regulao
Sensibilidade a hormnios (fgado) gliconeognese
Fosfofruto quinase 1

via glicoltica

Frutose-6-fosfato
Frutose-1,6-bifosfato fosfatase Frutose-2,6-bifosfato fosfatase Fosfofruto quinase 2

Frutose-1,6-bifosfato

Frutose-2,6-bifosfato
Desforilao enzimtica Insulina

Principais rotas metablicas

Via das pentoses fosfato: viso geral

Via alternativa gliclise para degradao de glicose; Fornece NADPH para biossntese de cidos graxos e ribose-5-fosfato (precursor de cidos nuclicos)

Glicose

ATP

Glicose-6-fosfato
NADPH

Glicono--lactona-6-fosfato 6-fosfogliconato
NADPH CO2

Ribulose-5-fosfato Frutose6-fosfato + Gliceraldedo -3-fosfato Xilulose-5-fosfato Sedoeptulose7-fosfato Eritrose-4-fosfato + Ribose-5-fosfato Gliceraldedo3-fosfato Frutose-6-fosfato

Principais rotas metablicas

Via das pentoses fosfato: regulao

Atividade das desidrogenases dependente da relao [NADPH]/ [NADP+] (competio pelo stio ativo/interaes alostricas) + NADP+ NADPH

Glicose-6fosfato

Glicose-6-fosfato desidrogenase

Glicono--lactona6-fosfato

Principais rotas metablicas

Descarboxilao do piruvato e Ciclo de Krebs: viso geral

Piruvato

CO2 NADH

Acetil CoA
NADH

Oxidao do piruvato a CO2 com formao de cofatores reduzidos; 4 NADH + 1 FADH2 + 1 8 1 GTP por piruvato (8 2 FADH + 2 2 NADH + 2 2 GTP por glicose).

NADH CO2

FADH2 GTP

NADH CO2

Principais rotas metablicas

Descarboxilao do piruvato e Ciclo de Krebs: regulao

Basicamente interaes alostricas ADP, AMP, NAD+ = Ciclo de Krebs e CPD ATP, NADH = Ciclo de Krebs e CPD Insulina: Complexo piruvado desidrogenase

Principais rotas metablicas

Complexo piruvato desidrogenase: regulao
Piruvato

+ + Insulina +

Complexo piruvato desidrogenase

ATP NADH

Acetil-CoA

Ciclo de Krebs

ADP NAD+

Principais rotas metablicas

Ciclo de Krebs: regulao

Isocitrato
Isocitrato desidrogenase

-Cetoglutarato

ATP NADH

Ciclo de Krebs

ADP NAD+

Principais rotas metablicas

Ciclo de Krebs: regulao

-Cetoglutarato
-cetoglutarato desidrogenase

Succinil-CoA

ATP NADH

Ciclo de Krebs

ADP NAD+

Principais rotas metablicas

Fosforilao oxidativa: viso geral

Regenerao (oxidao) dos cofatores reduzidos com sntese ATP Glicose

H+ + + + + H+ Espao intermembrana + + Membrana interna Matriz mitocondrial H+ ATP

NADH

NAD+ FAD

O2 + 2H+ H2O ADP + Pi

C. K.

FADH2

Principais rotas metablicas

Fosforilao oxidativa: regulao

NADH, NAD+ = fosforilao oxidativa NADH, NAD+ = fosforilao oxidativa ATP, ADP = fosforilao oxidativa ATP, ADP = fosforilao oxidativa
NADH ADP + Pi ATP NAD+

Citocromo c oxidado Citocromo c oxidase ([NADH]/[NAD+]) + +

Citocromo c reduzido

([ADP].[Pi]/[ATP])

Principais rotas metablicas

Glicognese e glicogenlise: viso geral

Glicognese:
Objetivo: Polimerizao de glicose para armazenamento; Consumo de 1 ATP + 1 UTP por unidade glicose adicionada ao ncleo de glicognio
Glicose

(Glicognio)n glicogenlise

Glicogenlise:
Objetivo: fornecer Glicose glicose (manuteno da glicemia fgado ou fornecer energia msculo).

(Glicognio)n+1

glicognese

Principais rotas metablicas

Glicognese e glicogenlise: regulao (sensibilidade a hormnios)
Glicose Gliclise (Glicognio)n Glicose-6fosfato Glicose-1fosfato Glicognio sintase (Glicognio)n+1 + Fosforilao enzimtica Glucagon, Adrenalina + Desfosforilao enzimtica Insulina UDP-Glicose
UTP ATP

Glicose

Glicognio fosforilase

Principais rotas metablicas

Biossntese e degradao de cidos graxos: viso geral
cidos graxos: Sntese Como? A partir de carboidratos (principal) e do excedente de protena da dieta Onde? Ocorre no citoplasma das clulas, a partir da unio seqencial de unidades de 2 C Quando? Relao ATP/ADP elevada Por qu? Estoque de excedente energtico cidos graxos: Oxidao Como? A partir de lipdeos da dieta ou estoque Onde? Ocorre na mitocndria das clulas, com liberao seqencial de unidades de 2 C Quando? Jejum, diabete tipo I Por qu? Fornecimento de energia

Principais rotas metablicas

Biossntese e degradao de cidos graxos: viso geral
Acil-ACP + Malonil-ACP
condensao
O R O

Acetil-CoA + Acil-CoA
Ciso de cadeia
OS(CoA ou ACP) OH O

Reduo (NADPH)
R

Oxidao (NAD+)
OS(CoA ou ACP)

desidratao
R

hidratao
OS(CoA ou ACP)

Reduo (NADPH)
R

Oxidao (FAD)
OS(CoA ou ACP)

Principais rotas metablicas

Biossntese e degradao de cidos graxos: regulao Velocidade e direo do metabolismo de acidos graxos depende fundamentalmente da relao insulina/glucagon

TAG (tecido adiposo)

Lipase sensvel a hormnios

AG + Glicerol
Albumina srica

rgos-alvo Insulina

+
AG no citossol

Glucagon/Adrenalina

Degradao AG

Principais rotas metablicas

Biossntese e degradao de cidos graxos: regulao
Biossntese AG

Acetil-ACP
HSCoA ACP ATP HCO3ADP + Pi H+

Malonil-ACP
HSCoA ACP

Acetil-CoA Acetil-CoA carboxilase Palmitoil-CoA AMP + +

Malonil-CoA Citrato

Fosforilao enzimtica Glucagon/Adrenalina

Desfosforilao enzimtica Insulina

Principais rotas metablicas

Biossntese de colesterol: regulao

Biossntese Colesterol
2 NADPH 2 NADP+

3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA)

HMG-CoA redutase +

Mevalonato

Fosforilao enzimtica Glucagon/Adrenalina

Desfosforilao enzimtica Insulina

Sumrio
Introduo Resumo das vias metablicas principais Especializao dos rgos Concluso Exerccios

Especializao dos rgos

Crebro - Metabolismo respiratrio muito ativo (20%O2); - Independente da atividade mental;
Maior parte energia = manter bomba Na+K+ Potencial de membrana transmisso impulso GLI
Piruvato AcetilCoA CK FOx

Corpos cetnicos

ATP

- Condies normais: glicose nico combustvel (no utiliza AG!); - Estoque de glicognio ~nulo; - Portanto: necessita suprimento constante de glicose. - [GLI]sangue muito baixa = danos cerebrais, coma e at morte; - Jejum prolongado: uso de corpos cetnicos (poupa protenas);

Especializao dos rgos

Msculos esquelticos - Consumo ATP p/ trabalho mecnico(contrao) - Combustveis primrios varia com atividade:
Msculo relaxado: AG (tecido adiposo) ou corpos cetnicos (fgado) AcetilCoA (C. Krebs) F.Ox. Atividade moderada: Glicose (sangue) (+ AG ou corpos cetnicos) Piruvato (C. Krebs) F.Ox. Atividade mxima: fornecimento O2 insuficiente p/ fornecer ATP somente por F.Ox. Portanto: Glicose (glicognio) piruvato lactato fgado (ciclo Cori) Corpos cetnicos
Ciclo Cori

GLI
Piruvato AcetilCoA CK PO

AG

ATP

- Sem gliconeognese, incapaz de exportar glicose (s/ glicose-6fosfatase); - Reservatrio de energia em poca de jejum
Protenas aa piruvato alanina sangue fgado alanina piruvato glicose (ciclo da Glicose-Alanina)

Especializao dos rgos

Msculo cardaco - Atividade contnua; - Metabolismo aerbico ( mitocndiras)
Principal combustvel: AG. Corpos cetnicos e GLI (sangue) tambm so utilizados. Estado de repouso: AG Ciclo Krebs F.Ox ATP. Atividade + intensa = > consumo glicose.

- Falha no fornecimento de O2, ex: aterosclerose, trombose coronria

Morte da clula cardaca; Infarto, ataque cardaco (popular);

Especializao dos rgos

Tecido adiposo - adipocitos; - amplamente distribudo no corpo; - metabolicamente muito ativos;
Metabolismo glicoltico, CK e F.Ox. GLI
Glicerol fosfato Piruvato AcetilCoA CK FOx

TAG
AG AG + glicerol

ATP

Abundncia de glicose = glicose AG TAG estoque (embora sntese AG = majoritariamente nos hepatcitos)

- especializado no metabolismo de cidos graxos e estoque de lipdeos;

Estocam TAG provenientes do figado (VLDL) ou trato intestinal (quilomcron) Hidrlise de TAG (AG + glicerol) em resposta a hormnios AG podem ser utilizados p/ ressntese de TAG, glicerol no (s/ glicerol quinase) Glicerol fosfato proveniente do piruvato (gliceroneognese)

Especializao dos rgos

Rim - Excreo: uria, corpos cetnicos, amnia; - Recupera metablitos importantes; - pH do sangue (remove excesso H+ e reabsorve HCO3-); - Desaminao glutamina glutamato, e posterior transformao glutamato -cetoglutarato, que participa da gliconeognese
50% do suprimento corporal de glicose no jejum.

Especializao dos rgos

Fgado - rgo central no metabolismo; - Manuteno (exporta) nveis adequados de nutrientes no sangue; - Equilibra glicose sangunea;
Captao ou liberao de GLI em resposta a hormonios e [GLI]

- Promove gliconeognese; - Define destino da glicose-6-fosfato (glicose, glicognio, acetilCoA ou via das pentoses fosfato); - Define destino de cidos graxos (acetil-CoA e corpos cetnicos, sntese de triglicrides e colesterol); - Promove degradao de aminocidos e sntese de protenas.
Degradao porfirinas e bases nitrogenadas, armazenamento Fe, detoxificaes etc.

Destinos da glicose-6fosfato no fgado

1. G6P GLI (G6P fosfatase) 2. G6P glicognio ( demanda GLI) 3. G6P Acetil-CoA CK F.Ox. Obs: AG combustvel preferido p/ prod. energia nos hepatocitos 4. G6P Acetil-CoA AG TAG (transporte p/ outros tecidos) 5. G6P Via Pentoses-P NADPH (sntese AG, detoxificao) e R5P (nucleotdeos)

Metabolismo de aminocidos no fgado

1. Sntese protenas 2. Exportao 3. Precursor metablitos 4. Excesso = piruvato (ou intermedirios C.K.) + NH3 5 e 10. piruvato (ou int. C.K.) glicose 6. piruvato acetil-CoA 7 e 8. acetil-CoA C.K. F.Ox. 9. acetil-CoA AG TAG (estoque) 11. Jejum = protenas musculares aa ciclo glicose-alanina

Metabolismo de cidos graxos no fgado

Na maioria dos casos: AG = combustvel oxidativo 1rio

Destinos finais AG: 7. AG fosfolip. e TAG (lipoproteinas de transp.) tecido adiposo (estoque) 8. AG livres albumina (transporte p/ msculos)

Excesso transportado p/ outros tecidos c/ corpos cetnicos

Sumrio
Introduo Resumo das vias metablicas principais Especializao dos rgos Concluso Exerccios

Concluso
Todas as vias so rigidamente controladas em pontos especficos Integrao
resposta caracterstica (muitas vezes opostas) para compostos equivalentes produtos/intermedirios de uma via interferem em outra (ex: citrato)

rgos = atividades especficas

Especializao em determinadas vias metablicas
Fgado: ameniza flutuaes no metabolismo causadas por ingesto intermitente de nutrientes.

PRXIMA AULA: Integrao metablica p.2

Sumrio
Introduo Resumo das vias metablicas principais Especializao dos rgos Concluso Exerccios

Exerccios
1. Descreva o papel da creatina/fosfocreatina na contrao muscular. Como e quando estas molculas so sintetizadas/consumidas?

2. O que , quando e como ocorre o Ciclo de Cori?

3. Descreva as diferenas entre as isoenzimas fosfofrutoquinase 2 e frutose-6-fosfatase do musculo cardiaco e do figado. Como elas respondem [cAMP]? Qual implicao fisiolgica desta diferena?

Bibliografia
1. Berg, J.M.; Tymoczko, J.L.; Stryer, L. Bioqumica. 6a. Ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. 2. Nelson, DL; Cox, MM. Lehninger - Princpios de bioqumica. Traduzido por Simes, A. A.; Lodi, W. R. N. 3 ed. So Paulo: Sarvier, 2002. 3. Marzzoco, A; Torres, BB. Bioqumica bsica. 2a. Ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1999. 4. Salway, J.G. Metabolismo passo a passo. 3a. Ed. Porto Alegre: Artmed, 2009. 5. Voet, D; Voet, JG. Bioqumica. 3a. Ed. Porto Alegre: Artmed, 2006.