CENTRO FEDERAL DE EDUCO TECNOLGICA DE MINAS GERAIS CAMPUS TIMTEO

INVESTIGAO CRIMINAL ATRAVS DE ANLISE SANGUNEA

PROFESSORA: TATIANA DIAS

ALINE MARCELINO

Investigao criminal
INTRODUO:
A partir da descoberta dos antgenos eritrocitrios, tornou-se possvel a idia de discriminar indivduos atravs de anlises sangneas. Os antgenos eritrocitrios so herdados geneticamente e definidos por seqncias de aminocidos especficos constituindo uma protena ou por carboidratos ligados a estas protenas ou a lipdios. Dessa forma, podemos empregar a biologia molecular e sua utilizao na identificao humana criminal.

Estruturas de antgenos eritrocitrios

OBJETIVOS:
A investigao criminal tem por finalidade a apurao da autoria de um delito, de suas causas e suas circunstncias. Alguns exemplos:

Identificao de suspeitos em casos de violncia sexual (estupros, atentado violento ao pudor, atos libidinosos) Identificao de cadveres carbonizados ou em decomposio Identificao de corpos mutilados Identificao de peas sseas e rgos humanos Investigao de paternidade Produo de perfis de material gentico recuperado a partir de evidncias de natureza biolgica presentes em suportes diversos encontrados em locais de crimes (manchas de sangue, manchas de esperma, manchas de saliva, plos e outros)

INVESTIGAO CRIMINAL PELO DNA:

As tcnicas de investigao e de prova criminal experimentaram uma verdadeira revoluo com o desenvolvimento da biotecnologia, sobretudo, diante da possibilidade de identificao de criminosos e esclarecimentos de crimes por meio dos caracteres genticos. A colheita e anlise dos dados genticos a partir de vestgios humanos encontrados no cenrio do crime tm-se confirmado como meio eficaz de prova tambm no processo penal. A prova pelo DNA visa, basicamente, ao esclarecimento da autoria do crime. Ela realizada pela identificao de uma sequncia de bases nitrogenadas no interior da molcula do cido desoxirribonucleico (DNA), cuja disposio (ordem sequencial) diferente e nica para cada indivduo, exceto nos casos de gmeos univitelinos em que essa sequncia de bases praticamente igual. Os mtodos de identificao fundamentados na anlise direta do cido desoxirribonuclico ostentam pelo menos duas vantagens sobre os mtodos convencionais de identificao: a estabilidade qumica do DNA, mesmo aps longo perodo de tempo, e a sua ocorrncia em todas as clulas nucleadas do organismo humano, o que permite condenar ou absolver um suspeito com uma nica gota de sangue ou atravs de um nico fio de cabelo encontrado na cena do crime.

Identificao e separao de cadeias especficas da molcula de DNA

Coleta de amostras biolgicas que podem ser saliva, sangue, esperma e cabelo com raiz, entre outros. Extrao e purificao do DNA. Corte com enzimas de restrio (tesouras moleculares que reconhecem e cortam seqncias especficas do DNA). Eletroforese: onde, atravs de uma corrente eltrica, so separados os fragmentos de DNA por tamanho. A partir da, formada uma espcie de cdigo de barras que a identificao individual e intransfervel de cada indivduo.

MTODOS:
RFLP

A fim de reconhecer os locos (stios) onde ocorreram mutaes foi desenvolvida a tcnica conhecida pela sigla RFLP, do ingls Restriction Fragment Length Polymorphism, ou Poliformismo de Comprimento de Fragmento de Restrio. Este mtodo se baseia no corte que as enzimas de restrio so capazes de fazer onde existem apenas certas seqncias especficas de nucleotdeos. Estas enzimas so uma espcie de tesoura biolgica que vo cortar o DNA em locais especficos, chamados de posies de restrio, gerando fragmentos de DNA de tamanhos diferentes e seqncias especficas. Para separar os fragmentos de DNA cortados pelas enzimas de restrio, utilizase a tcnica de eletroforese, que consiste na separao das espcies de uma soluo coloidal pela influncia de um campo eltrico.

Devido ao fato das pessoas terem uma seqncia de nucleotdeos diferentes entre si, pode-se identificar uma pessoa pela evidncia deixada no local do crime a partir da comparao dos resultados obtidos pelos exames de DNA. No esquema acima, temos um suspeito que supostamente teria estuprado a vtima. Em (a) temos a coleta de smen na vtima e posterior exame. Tambm feita a anlise do DNA a partir de uma amostra de sangue do suspeito. Em (b) so representadas as enzimas de restrio que tm a capacidade de cortar o ADN em lugares onde uma determinada seqncia de nucleotdeos ocorre. A tesoura simboliza as enzimas necessrias para a seleo de seqncias especficas. Em (c) ilustra-se os pedaos de ADN separados pela eletroforese. Em (d) mostrado um padro conhecido como DNA fingerprint. Observe que os padres oriundos do smen coletado e do sangue do suspeito coincidem, indicando que o smen do suspeito e que este est ligado ao crime.

PCR

Inventado por Kary Mullis em 1984, o mtodo conhecido pela sigla PCR, do ingls Polymerase Chain Reaction ou reao em cadeia da polimerase, consiste na utilizao de uma enzima semelhante a DNA-polimerase, que no ncleo celular promove a replicao do material gentico, aumentando a quantidade de DNA para anlise e, conseqentemente, fazendo com que a quantidade de amostra necessria para o teste possa ser bem menor. Este mtodo pode ser utilizado junto ao RFLP. Desta forma, o DNA primeiramente seria amplificado pela tcnica PCR e depois se analisaria com a metodologia do RFLP.

Para realizar o PCR pode-se utilizar uma enzima isolada da bactria Thermus aquaticus, encontrada em giseres e em fontes quentes, chamada de Taq DNA Polimerase. Esta altamente adaptada a ambientes quentes e mantm-se com sua forma normal por longo tempo temperatura de 95 C, que necessria para abrir os duplos filamentos de DNA.

DNA MITOCONDRIAL:
O DNA est presente principalmente no ncleo das clulas. Contudo, um determinado tipo de DNA est nas mitocndrias, organelas existentes no citoplasma celular. O interesse forense no DNA mitocondrial est no fato dele ser mais resistente degradao que o nuclear. Assim, em grandes desastres (incndios, exploses, queda de avio, etc), quando mais difcil identificar os corpos, pode-se optar pela anlise deste, que constitudo apenas herana gentica materna.

DNA Mitocondrial

Impresses Digitais:
Com exceo dos gmeos verdadeiros, cada indivduo possui o seu prprio DNA, que nico. Com base neste princpio, em 1984, foi possvel desenvolver uma tcnica que visa identificar pores de DNA. Designa-se esta tcnica por Impresses Digitais Genticas ou DNA fingerprint.No DNA encontram-se as zonas de restrio, isto , sequncias que se repetem ao longo da molcula, cujos nmero e tamanho variam de indivduo para indivduo.

A partir de uma pequena amostra de material biolgico que contenha material gentico, como leuccitos ou mesmo um cabelo, por exemplo, faz-se a extraco do DNA. O DNA fragmentando em pequenos pedaos, em pequenas pores de tamanhos diferentes, depois de ser submetido ao trabalho das enzimas de restrio nas respectivas zonas de restrio. Seguidamente, estes fragmentos so colocados num meio apropriado, como por exemplo um gel, e submetidos a um campo elctrico que provoca a deslocao dos ditos fragmentos com velocidades diferentes. Ao fim de um certo tempo localizam-se em zonas diferentes do gel. A este processo designamos por Electroforese. O princpio da electroforese utilizado para a separao de DNA baseia-se na carga negativa global de uma poro de DNA. Portanto, ies livres, molculas de DNA ou fragmentos de DNA numa soluo podem ser separados aplicando-se uma carga elctrica. No final do processo as cadeias de DNA estaro prximas ao ctodo (positivo), que atrai, devido polaridade, molculas de carga negativa. O gel de poliacrilamida forma uma malha constituda por uma rede de polmeros que permite a migrao de molculas. Sendo assim, molculas de menor 6

peso molecular tero mais facilidade em atravessar a malha do gel, posicionando-se assim mais prximas do ctodo; enquanto que as molculas com maior peso apresentam mais dificuldade e posicionam-se mais prximas do nodo. A distncia que o fragmento percorreu a partir do ponto de aplicao comparada com a distncia que outros fragmentos de tamanhos conhecidos percorreram no mesmo gel.

Ao longo do DNA h bases que se repetem e que variam de indivduo para indivduo. possvel investigar problemas relacionados cincia forense, comparando fragmentos da molcula de DNA, na investigao criminal. Ao analisar pequenas quantidades de sangue, cabelo, smen ou qualquer outro tecido encontrado no local do crime, possvel utilizar a tcnica de DNA fingerprint que, depois de comparado com o dos suspeitos, pode fornecer pistas fiveis para a resoluo do crime. Como poderemos saber, ento, se um suspeito est relacionado com o crime? Neste exemplo podemos observar a amostra de sangue do suspeito, a amostra de sangue encontrado nas roupas do sujeito e a amostra de sangue da vtima. Atravs da tcnica do DNA fingerprint verificou-se que as bandas correspondentes poro de DNA da vtima so idnticas s bandas provenientes da poro de DNA referente amostra de sangue encontrado nas roupas do sujeito. Pode-se, assim, concluir que o suspeito seria o autor do crime.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
Disponvel em: < http://www.ic.pr.gov.br/modules/conteudo/conteudo.php?conteudo=7 />. Acesso em 18 de out. 2012. Disponvel em: < http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S151684842004000200012/>. Acesso em 18 de out. 2012. Disponvel em: < http://www.ebah.com.br/content/ABAAAALTwAD/ciencia-forense-examedna/>. Acesso em 18 de out. 2012. Disponvel em: < https://sites.google.com/site/geneticaemmovimentoo/impressoes-digitaisgeneticas/>. Acesso em 19de out. 2012.