1

Expresin de los resultados

analticos
Ao 2011
QUMICA ANALTICA I
Teora N 1:
Introduccin
Etapa post-analtica
Ctedra de Qumica Analtica I
http://www.fbcb.unl.edu.ar/catedras/analitica/
Docencia
Asignaturas:
Qumica Analtica I
Control de Calidad (Bioqumica)
Cursos:
Elementos/Tpicos de Quimiometra (grado/posgrado)
Sensores y biosensores electroqumicos (posgrado)
Investigacin
Laboratorio de Desarrollo Analtico y Quimiometra (LADAQ)
Laboratorio de Sensores y Biosensores (LSB)
Vinculacin y Transferencia Tecnolgica
Laboratorio de Control de Calidad de Medicamentos (LCCM)
Qumica Analtica I
Clase Nivel I o Teora: 2 horas semanales,
viernes de 8 a 10 hs. en Aula 2.1.
PUNTUALIDAD.
Clase Nivel II o Resolucin de Problemas:
2.30 horas semanales (aulas en transparente).
Clase Nivel III o Trabajos Prcticos: 4 horas
semanales en Laboratorio de Qumica Analtica II,
planta baja (frente a fotocopiadora).
Clases de Consulta: horarios en transparente.
Usar este horario para consultas de TP,
problemas, teora y cualquier otro trmite
(NO ACUDIR EN CUALQUIER HORARIO)
Qumica Analtica I
14 de octubre
15 de noviembre
2
Ctedra de Qumica Analtica I
http://www.fbcb.unl.edu.ar/catedras/analitica/
Hctor Goicoechea
(Profesor Titular)
Juan C. Robles
(Profesor Adjunto)
Silvia Hernndez
(ProfesoraAdjunta)
Mara S. Cmara
(ProfesoraAsociada)
Silvia Fabiano
(J. Trab. Pract.)
Mercedes De Zan
(J. Trab. Pract.)
Julia Culzoni
(J. Trab. Pract.)
Luciana Vera Candioti
(J. Trab. Pract.)
Yamile Caro
(J. Trab. Pract.)
Carla Teglia
(J. Trab. Pract.)
Pablo Giordano
(BecarioCONICET)
AgustinaSchenone
(BecariaCONICET)
GonzaloSantiago
(Auxiliar)
Quela Alcarz
(Auxiliar)
RominaWanderkauven
(Auxiliar)
Mauro Porcel de
Peralta (Auxiliar)
Celeste Onaindia
(Pasante)
Matas Marchisio
(Pasante)
FlorenciaPicech
(Pasante)
FedericoKarp
(Pasante)
Pgina web Ctedra de Qumica Analtica I
http://www.fbcb.unl.edu.ar/catedras/analitica/
Ciencia metrolgica que
desarrolla, optimiza y aplica
herramientas de amplia naturaleza,
que se concretan en procesos de
medida qumica encaminados a
obtener informacin de calidad.
(M. Valcrcel, 1999, Principios de Qumica
Analtica, Ed. Springer)
Qumica Analtica: Introduccin
1
3
Por que se ensea Q.A.?
Incumbencias en Bioqumica:
Ser profesional responsable para ejercer la direccin tcnica del
laboratorio de anlisis clnicos.
Realizar e interpretar anlisis clnicos y otros que contribuyan a
la presuncin, diagnstico, pronstico y tratamiento de las
enfermedades del hombre y a la preservacin de la salud.
Animales?
Realizar e interpretar anlisis bromatolgicos, toxicolgicos y de
qumica legal.
Intervenir en la confeccin de normas y patrones de tipificacin
de materias primas y reactivos, utilizndolos en la ejecucin de
los anlisis clnicos, bromatolgicos, etc.
Incumbencias en Biotecnologa:
Planificar, desarrollar y controlar procesos biotecnolgicos en
escala de laboratorio, planta piloto e industrial.
Realizar y supervisar el control de calidad de insumos y
productos empleados en biotecnologa.
Clasificaciones
Genricas de la Q.A.
Otras
Segn la tcnica
empleada
Segn finalidad y tipo
de informacin
Segn tamao inicial
de muestra (escala de
trabajo) Segn concentracin
de los analitos
Segn naturaleza de
muestra o analito
(orgnico, inorgnico,
bioqumico)
Anlisis
culitativo
Anlisis
cuantitativo
Anlisis
estructural
Otros
Anlisis
clsico
Anlisis
separativo
Anlisis
instrumental
Proceso Analtico Total
Definicin del problema
analtico
Decisin sobre el mtodo
mas apropiado
P.M.Q
Interpretacin de los
resultados para resolver el
problema
Proceso de medida qumica
(PMQ) o Proceso Analtico (PA)
Conjunto de operaciones que separa a la
muestra sin tomar, sin medir, sin tratar de
los resultados generados y expresados
segn los requerimientos del problema
analtico planteado
Muestra
Resultados
P M Q
Herramientas
Fsicas
Qumicas
Matemticas
4
Etapas generales de un PMQ
Operaciones
previas
Medicin y
transduccin de la
seal
Adquisicin y
tratamiento de
datos
Muestra
Resultados
PMQ
Medicin y transduccin
de la seal
Cuantitativa Cualitativa
Mtodos
determinativos
Fsicoqumicos Biolgicos Qumicos
Instrumentales Volumtricos Gravimtricos
cido-Base
Complejos
Precipitacin
xido-Reduccin
Mtodos
determinativos
Fsicoqumicos Biolgicos Qumicos
1
Mtodos
determinativos
Fsicoqumicos Biolgicos Qumicos
5
1
Mtodos
determinativos
Fsicoqumicos Biolgicos Qumicos
Qumicos
Volumtricos Gravimtricos
cido-Base
Complejos
Precipitacin
xido-Reduccin
Operaciones
previas
Medicin y
transduccin de la
seal
Adquisicin y
tratamiento de
datos
PMQ
Mtodos qumicos:
Escala de trabajo
Segn tamao inicial de muestra
Ultra-micro anlisis Micro anlisis Semi-micro anlisis Macro anlisis
0.001 g 0.01 g 0.1 g
Trazas Micro componentes Macro componentes
0.01 % 1 %
Segn la concentracin de los analitos se
diferencian tres tipos de determinaciones
1
6
1
Mtodos de anlisis por titulacin
Se basan en la medicin de la cantidad de un reactivo de
concentracin conocida consumida por el analito
Titulacin volumtrica: medida del volumen de
solucin de concentracin conocida
Titulacin gravimtrica: medida de la masa del
reactivo
Titulacin coulombimtrica: el reactivo es una
corriente elctrica constante y de magnitud
conocida. Se mide el tiempo requerido
Titulacin volumtrica: Aspectos
generales
Metodologa absoluta que se basa en el empleo de estndares
analticos que reaccionan estequiomtricamente con el analito
Estndares
Primarios
Secundarios
Muestra
conteniendo al
analito
Sistema
indicador
del punto
final
Reaccin volumtrica:
A + R P
Ca
2+
+ Y
4-
---> Ca
2-
Y
cido base
Formacin de complejos
Precipitacin
Redox
Adicin, condensacin o
sustitucin
7
Concepto de Peso Equivalente
Es el nmero de moles de:
- Cargas positivas o negativas que intervienen por
mol de sustancia
- Electrones que intercambia por mol de sustancia
en una reaccin redox.
Ejemplos:
- El BaCl
2
contiene 2 equivalentes porque en su disociacin genera 2
moles de cargas (+) y 2 moles de cargas (-).
- El dicromato en una reaccin de precipitacin interviene con cuatro
moles de cargas (-), contiene 4 eq, mientras que en una reaccin
redox, en medio cido, interviene con 6 electrones, luego contiene 6
equivalentes (el Cr(III) en cambio tiene interviene con 3 electrones).
Trazabilidad
Trazabilidad de los resultados analticos
- La calidad de los resultados analticos exige que estos
sean trazables: que puedan relacionarse directamente con
las unidades patrones del S.I. (amperio, kilogramo, mol,
metro y segundo).
- La trazabilidad exige una cadena ininterrumpida de
comparaciones que une el resultado obtenido con los
estndares del sistema internacional y que, en anlisis qumico,
pasa por las sustancias de referencia, los patrones qumicos tipo
primario y secundario, los estndares fsicos, los pesos
atmicos, etc.
- El concepto de trazabilidad se aplica tanto al resultado de un
anlisis, como a una medida cualquiera, al instrumento con el
que se obtiene, el mtodo que se aplica y el laboratorio mismo.
- Cuando un resultado es trazable implica que ha sido
obtenido en un laboratorio trazable, aplicando instrumentos
trazables y un mtodo trazable.
Mtodos Qumicos:
Requerimientos de la Reaccin Analtica
Mtodos Volumtricos:
Cuantitativa
Estequiomtrica
Mtodos Gravimtricos:
Cuantitativa
Selectiva
Generar un precipitado con: Estructura morfolgica adecuada
Solubilidad baja Composicin conocida
Selectiva
Rpida
Indicacin del punto final
Mtodos Cualitativos:
Observable
Sensible
Selectiva (Especfica)
Rpida
Reproducible (fiable y robusta)
8
En los ltimos aos, los qumicos analticos
hemos incrementado el uso de herramientas
como la matemtica, la estadstica y la lgica
formal (programacin) :
Disear o seleccionar procedimientos.
Informacin qumica.
Conocimiento sobre sistemas qumicos
Quimiometra (Massart 1997)
aunque el trmino fue introducido por
Wold en los comienzos de los 70s
Adquisicin y tratamiento de datos
Propiedades
analticas
supremas
Exactitud
Representatividad
Propiedades
analticas
bsicas
Precisin
Sensibilidad
Selectividad
Propiedades
complementarias
Rapidez
Costos
Seguridad
Propiedades analticas
Grado de concordancia entre el
resultado de
a) una determinacin o
b) la media de n resultados
y el valor verdadero verdadero del analito
en la muestra.
Exactitud
Valor universalmente
aceptado como
verdadero
Propiedades Supremas
Muestreo adecuado
Representatividad
Propiedades
Supremas
9
Propiedades
Bsicas
Precisin
Indica dispersin de resultados entre s y con
respecto a su media.
Exactitud y precisin
Inexacto e
impreciso
Exacto y
preciso
Inexacto y
preciso
Exacto e
impreciso
Exactitud y precisin
Inexactos e imprecisos
Exactos y precisos
Exactos pero imprecisos
Precisos pero inexactos
Precisin
Uso incorrecto del trmino precisin
10
Errores en Qumica Analtica Errores en Qumica Analtica
Errores
aleatorios o
indeterminados
fluctuantes
Distribucin
Normal de
Gauss
Precisin
Errores
sistemticos o
determinados
Alteraciones
operacionales y
sistemticas
bien definidas
Desviaciones
de signo
determinado
Exactitud
Exactitud
Bias o Sesgo
Cuando se refiere
a un resultado
|x
i
- |
Cuando se refiere
a un mtodo
(n < 30 det)
| - |
' x
x ' x
Veracidad
Cuando se refiere
a un mtodo
(n > 30 det)
| - | ' ' x
Problema tpico de laboratorio
) / (
) (
) / ( ) (
] / [ mmol mg PF
mL V
mL mmol M mL V
L g CaCO
CaCO
muestra
EDTA EDTA
3 3

=
EDTA 0.0534 (0.0004) M
Vg = 8.36 mL 8.38 mL 8.38 mL 8.42 mL 8.98 mL
( Incertidumbre lectura con bureta?)
CaCO
3
g/L ? Intervalo de confianza ?
10.00 ( 0.02) mL solucin de muestra
Clculo:
Cifras
significativas
Dgitos
relevantes ms
el primero
afectado por la
incertidumbre
Operaciones entre datos con diferentes
cifras significativas:
El resultado final no puede tener mas cifras
significativas que el dato inicial con el menor
nmero de las mismas.
Incertidumbre absoluta y relativa
Incertidumbre relativa (Ir)
Valor de Ia dividido por la medida. Por ejemplo, si
se dispensan los 10,00 mL de la pipeta, entonces
Ir = 0,02/10,00 (se tendr una Ir = 2/1000 = 1/500
o 0,2 %)
Incertidumbre absoluta (Ia)
Margen de incertidumbre asociado a
una medida. Por ejemplo Ia = 0,02 mL
cuando se lee un volumen en una pipeta
volumtrica de 10,00 mL
11
Incertidumbres absolutas de
material de laboratorio
Matraces:
50,00 mL (Ia = 0,05 mL)
100,00 mL (Ia = 0,08 mL)
Pipetas volumtricas:
25,00 mL (Ia = 0,03 mL)
Bureta:
Ia = 0,02 mL por lectura
Balanza analtica:
Ia = 0,1 mg por lectura
Clculo por
propagacin
Propagacin de la incertidumbre
En la mayora de los experimentos se
deben hacer clculos con varios nmeros,
cada uno de los cuales presenta una
incertidumbre
Reglas:
Suma y resta: usar la Ia
Multiplicacin y divisin: usar la Ir
Operaciones combinadas: resolver primero
suma/resta y luego multiplicacin/divisin
Propagacin de incertidumbre.
Ejemplos
Sumas y restas:
1,76 (0,03) + 1,89 (0,02) 0,59 (0,02) = 3,06 (Ia
res
)
(Ia
res
)
2
= (Ia
1
)
2
+ (Ia
2
)
2
+
(Ia
3
)
2
= 0,03
2
+ 0,02
2
+
0,02
2
Ia
res
= 0,04
1
Multiplicacin y divisin:
Primero se deben calcular las Incertidumbres
relativas
(Ir
res
)
2
= (Ir
1
)
2
+ (Ir
2
)
2
+
(Ir
3
)
2
Qu pasa con la bureta y la balanza?
Cmo se expresa un resultado?
Cunto es la Ir?
6,00 mL
6,50 mL
7,00 mL
6,10 mL
Mnima divisin: 0,10 mL
Apreciacin: 0.02 mL
(Ia por lectura)
Incertidumbre absoluta:
(Ia) (Ia)
22
= (Ia = (Ia
11
) )
22
+ (Ia + (Ia
22
) )
22
= (0,02) = (0,02)
22
+ (0,02) + (0,02)
22
= 0,02 = 0,02
8 8
= 0.03 = 0.03
Que masa mnima podemos pesar?
Bureta: cifras significativas
12
Propagacin de incertidumbre.
Ejemplos
Combinadas
Primero se deben resolver las sumas y restas
Titulacin de 10,00 mL de sol. de Ca(II) con EDTA
0,0534 (0,0004) M gastndose:
8,36 8,38 8,38 8,42 y 8,98 mL
Datos: PA
Ca
= 40,078 ( 0,004)
PA
C
= 12,011 ( 0,001)
PA
O
= 15,9994 ( 0,0003)
Ia(pipeta) = 0.02 mL
Ajuste de cifras significativas de un
resultado individual
) / ( 04 , 0 467 . 4 008 , 0
008 , 0
] )
000 . 25
1
( )
500
1
( )
134
1
( )
287
1
[(
000 . 25
1
07 . 100
004 , 0
500
1
00 , 10
02 , 0
134
1
0534 , 0
0004 , 0
287
1
36 , 8
03 , 0
004 , 0 ] ) 0003 , 0 ( ) 001 , 0 ( ) 004 , 0 [(
) / (
) (
) / ( ) (
] / [
2 / 1 2 2 2 2
.
2 / 1 2 2 2
3 3
L g Ia
Ir
Ir
Ir
Ir
Ir
Ir
Ia
mmol mg PF
mL V
mL mmol M mL V
L g CaCO
result
result
result
PF
muestra vol
M
vol
PF
CaCO
muestra
EDTA EDTA
= =
=
+ + + =
= =
= =
= =
= =
= + + =

=
Solucin parcial al problema
Parmetros estadsticos que
estiman el valor central
Media aritmtica
Mediana
Se ordenan los
datos segn su
magnitud y se
elige/n el/los
central/es
(semisuma).
n
x
x
n x x x x
n
i
i
n

=
=
+ + + =
1
2 1
/ ) ....... (
Como inferimos sobre la
exactitud y la precisin?
13
n < 30
n > 30
Desviacin estndar
Varianza: su propiedad
mas importante es la
aditividad
Parmetros estadsticos que estiman
dispersin
x
s
RSD =
% 100 RSD
x
s
CV = =
Desviacin
estndar relativa
Coeficiente de
variacin
1
1
2

=
=
n
x xi
s
n i
i
) (
1
1
2

=
=
n
x
n i
i
i
) (

1
2
2

=

n
x x
s
i
) (
77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38 77.38
53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48 53.48
78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61 78.61
94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94 94.94
66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15 66.15
54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16 54.16
69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74 69.74
80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38 80.38
Herramientas para graficar
mediciones repetitivas
Histogramas
Curva de
distribucin
normal

+

=1 dx x f ) (
Distribucin Normal
La ecuacin de la curva viene dada por la expresin:
La desviacin estndar ( ) mide la distancia desde
la media ( ) hasta el punto de inflexin de la curva.
[ ]
2 2
2 / ) ( exp
2
1
) (

= x x f
) , (
2
N x
Distribucin Normal
Cambiando los parmetros y se obtienen
infinitas curvas cuya forma es indicadora de la
distribucin de los errores
14
[ ]
2 2
2 / ) ( exp
2
1
) (

= x x f
Cambio de variables:
tablas
Estandarizacin
de variables
(

=
2
exp
2
1
) (
2
z
z f

=
xi
z
Valores de z y de probabilidad para dos colas
p = 0,05
z = 1,96
x 3s Contiene aproximadamente el 99.7 % de las
observaciones ( = 0.003)
x s Contiene aproximadamente el 68 % de las
observaciones ( = 0.32)
x 2s Contiene aproximadamente el 95 % de las
observaciones ( = 0.05)
/2 = 0.025
Intervalos de confianza
Si se utilizan promedios de replicados, la funcin de
probabilidad obtenida sigue el modelo de distribucin
Gaussiana o normal (Teorema del Lmite Central).
An cuando la poblacin original no est distribuida
normalmente, tiende a la distribucin normal cuando
aumenta n
Desviacin
estndar de la
media.
) 1 (
) (
2

= =

n n
x x
n
s
s
i
x
Distribucin de las medias
15
Distribucin de las medias
pH
4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0
F
re
c
u
e
n
c
ia
d
e
v
a
lo
re
s
in
d
iv
id
u
a
le
s
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
pH
4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0
F
re
c
u
e
n
c
ia
d
e
s
u
m
a
s
d
e
v
a
lo
re
s

0
20
40
60
80
100
Frecuencia de valores individuales
(n = 8250 medidas de pH)
Frecuencia de las medias de 25
valores de pH
Para una distribucin normal el 95 % de los datos cae
dentro de los lmites z=-1,96 a z=1,96 ( 1,96 )
Existe un 95 % de
probablilidad de que
el estimador de
este comprendido
en ese rango
n
x
n

96 . 1 96 . 1 + < <
n
z x

= Con (100-) de probabilidad
Intervalos de confianza
Si n < 30, s deja de ser un buen estimador; es necesaria una
correccin:
Distribucin t (tablas)
Intervalos de confianza
) 30 (
2 /

|

\
|
= n
n
s
z x K

) 30 (
2 /
<
|

\
|
= n
n
s
t x K

Tabla t de una cola

n-1 0.05
1 12,711
2 4,30
3 3,18
4 2,78
16
Volviendo al problema
EDTA 0.0534 (0.0004) M
Vg = 8.36 mL 8.38 mL 8.38 mL 8.42 mL 8.98 mL
( Incertidumbre lectura con bureta?)
CaCO
3
g/L ? Intervalo de confianza ?
10.00 ( 0.02) mL solucin de muestra
Clculo:
) / (
) (
) / ( ) (
] / [ mmol mg PF
mL V
mL mmol M mL V
L g CaCO
CaCO
muestra
EDTA EDTA
3 3

=
Presentacin de los resultados
] / [ , Ca de in Concentrac
mmol) 100,07(mg/
(mL) 10,00
(mmol/mL) 0,0534 (mL) 8,36
] / [
L g CO
L g CaCO
47 4
3
3
=

=
Vgastado CaCO
3
(g/L)
8,36 4,47
8.38 4,48
8,38 4,48
8,42 4,50
8,98 4,80
4,80 ????
Criterio de Dixon o test Q:
Dado un conjunto de datos:
X
q
: valor sospechoso
Rango = valor mas alto valor mas bajo
Resultados Discrepantes
(Outliers)
Resultados que no pertenecen
a un conjunto (muestra o
poblacin)
Baja probabilidad de
pertenecer
Para identificarlos estadsticamente (y asegurar una
distribucin normal) deben aplicarse:
pruebas de aceptacin/rechazo
rango
cercano mas valor
=
xq
Q
cal
Rechazo de datos: Test Q
4,47 4,48 4,48 4,50 4,80
RANGO = 0.33
DIFERENCIA DUDOSA = 0.30
Q calculada = Diferencia dudosa/Rango = 0.91
Para rechazar el dato dudoso, se debe cumplir que:
Q calculada > Q tabulada (para 95 % = 0.73)
se rechaza el valor 4,80
17
Vgastado CaCO
3
(g/L)
8,36 4,47
8.38 4,48
8,38 4,48
8,42 4,50
8,98 4,80
g/L , , : Resultado
, , x : Resultado
,
,
,
) ; . (
02 0 49 4
0184 0 485 4
18 3
01 0
485 4
1 4 05 0

=
=
=

n
s t
t
s
x
Expresin del resultado
Solucin
0.02 o 0.04 ?????
Solucin? Todava no
Estudios de Exactitud:
Comparacin de
mtodos
Uso de patrones (en
agua o adicionados a la
muestra)
Validacin
Aseguramiento de la calidad
Exactitud: Comparacin con un
valor aceptado como verdadero
Resultado obtenido: 4,49 0,04 (g/L)
V.U.A.V: 4,63 0,02 (g/L)
18 3 14
4
02 0
63 4 49 4
1 05 0
,
,
, ,
) ; . (
= > =

=
n
t t
n
s
x
t

Prueba de
hiptesis:
Como t
calc.
> t
tablas
Se rechaza la hiptesis de igualdad
de medias Error sistemtico
t
,
= 3,18
t
calculado
= 14
Probabilidad << 0,05
Como t
calc.
> t
tablas
Se rechaza la hiptesis de igualdad
de medias Error sistemtico
Comparacin con un valor
aceptado como verdadero
= 0,05
18
Se calcula el estadstico F
), 1 ( ), 1 (
2
2
2
1
2 1

=
n n
F
s
s
F
Siendo s1 > s2
F calculado debe ser
menor al F crtico
Comparacin de varianzas
Distribucin F
3.072
Errores en Qumica Analtica
Errores
aleatorios o
indeterminados
fluctuantes
Distribucin
Normal de
Gauss
Precisin
Exactitud
Bias o Sesgo
Cuando se refiere
a un resultado
|x
i
- |
Cuando se refiere
a un mtodo
(n < 30 det)
| - |
' x
x ' x
Errores
sistemticos o
determinados
Alteraciones
operacionales y
sistemticas
bien definidas
Desviaciones
de signo
determinado
Exactitud
Inexacto y
preciso
BIBLIOGRAFIA
Harris D.C., Anlisis qumico cuantitativo, Editorial Revert,
2da Ed. 2001.
Skoog D.A., West D.M., Holler F.J., Crouch S.R.
Fundamentos de Qumica Analtica, 8Edicin, Editorial
Thomson, 2005.
Miller J.C., Miller J.N., Estadstica y quimiometra para
Qumica Analtica, Ed. Pearson, 2002
Valcrcel M. Principios de Qumica Analtica, Ed. Springer-
Verlag Ibrica S.A, 1999.