DETERMINACIN E IDENTIFICACIN DE ENTEROBACTERIAS EN LOS ROS RMAC, CHILLN Y LURN

INTRODUCCIN: Esta investigacin nos servir para conocer el tipo de enterobacterias que se encuentran en las cuencas de los 3 ros que abastecen a la ciudad de Lima (Rmac, Lurn, Chilln) y el riesgo que se corre al consumir alimentos que son cultivados en la cercana de estos ros, ya que estos son regados con las aguas de sus cauces y las cuales no se encontraran en las condiciones necesarias para el riego de cultivos. OBJETIVOS:

Objetivos Generales:

Demostrar la presencia de enterobacterias patgenas en los 3 ros estudiados. Y tambin verificar que el cambio brusco de concentracin de enterobacterias es producido por desages y ros.
Objetivos Generales:

o Identificar de qu tipo de enterobacterias se trata.

o

Concientizar a las personas en lo que respecta a la contaminacin de los ros.

ENTEROBACTERIAS:

Las enterobactericeas (Enterobacteriaceae) son una familia de bacterias Gram negativas que contiene ms de 30 gneros y ms de 100 especies que pueden tener morfologa de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros rganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuticos. Sucumben con relativa facilidad a desinfectantes comunes, incluido el cloro. Con frecuencia se encuentran especies de Enterobacteriaceae en la bio-industria: para la fermentacin de quesos y productos lcteos, alcoholes, tratamientos mdicos, produccin de toxinas en el uso de cosmticos, fabricacin de agentes antivirales de la industria farmacutica, etc. Caractersticas:

En la definicin clsica de una Enterobacteriaceae se usan siete criterios bsicos, adicional a la aparicin de nuevos mtodos taxonmicos para incluir a ciertos gneros que no cumplen con todos los siguientes criterios, pero que forman parte de esta familia:

Son bacterias gram negativas, la mayora bacilos, otros cocobacilos y otros pleomrficos. No son exigentes, son de fcil cultivo. Son oxidasa negativo (excepto Plesiomonas, que es oxidasa positivo), es decir, carecen de la enzima citocromo oxidasa. Son capaces de reducir nitrato en nitrito. Tambin son capaces de sintetizar la glucosa, (glucosa positivo). Son anaerbicos facultativos. Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaerbicas con o sin la produccin de gas (en especial glucosa y lactosa), y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones aerbicas. Muchos gneros tienen un flagelo que sirve para desplazarse, aunque algunos gneros no son mviles.

METODOLOGA:
TOMA DE MUESTRAS ESTERILIZACIN DE REA DE TRABAJO CONTEO DE COLONIAS PREPARACIN DEL AGUA PEPTONADA PREPARACIN DEL MEDIO DE CULTIVO DIFUSIN DE MUESTRAS SIEMBRA DEL AGUA Y SUS DILUCIONES EN EL MEDIO DE PLATE COUNT CULTIVO DE LA MUESTRA DE AGUA EN EL MEDIO MacCONKEY SIEMBRA DEL AGUA Y SUS DILUCIONES EN EL MEDIO MacCONKEY RESIEMBRA PARA PURIFICAR LAS COLONIAS OBTENIDAS OBSERVACIN MICROSCPICA DE LOS CULTIVOS SELECCIONADOS PREPARACIN DEL FROTIS TINCIN GRHAM OBSERVACIN SIEMBRA DE LAS COLONIAS PURAS EN AGAR ENDO Y ADC PRUEBAS BIOQUMICAS PARA ENTEROBACTERIAS PREPARACAIN DEL AGAR TSI IDENTIFICACIN DE LAS ENTEROBACTERIAS INTERPRETACIN DE LAS PRUEBAS DE IDENTIFICACIN BIOQUMICA TSI

Pico de flauta rojo/profundidad amarillo: Medio Alcalino/cido (Alc/A). Glucosa fermentada; lactosa o sacarosa no fermentada. Pico de flauta amarillo/profundidad amarillo: Medio cido/cido (A/A). Glucosa, lactosa y/o sacarosa fermentada. Pico de flauta rojo/profundidad rojo: Medio Alcalino/Alcalino (Alc/Alc) Produccin de H2S: Medio de color negro. Produccin de gas durante la fermentacin de cualquiera de los azcares. Hay formacin de burbujas con quebraduras en el fondo del agar.

Reaccin negativa: No hay fermentacin de ninguno de los carbohidratos

RESULTADOS Para el conteo de colonias o Rmac Chosica o Rmac Puente Trujillo o Chilln Santa Rosa de Quives o Chilln La Ensenada o Lurn Playa o Lurn Cieneguilla Aislamiento en agar Mac Conkey o Rmac Chosica o Colonias Fucsias: Regular Tamao. o Colonias Rosadas: En menor cantidad. o Colonias Cremas: En mayor cantidad. o Rmac Puente Trujillo o Colonias Fucsias: En mayor cantidad que las de Chosica pero bien definidas. o Colonias Rosadas: Escasas, pero de gran tamao. o Colonias Cremas: En menor cantidad que las de Chosica pero bien definidas. o Lurn Playa o Colonias Transparentes: De gran tamao y amorfas. o Colonias Rosadas: Uno de coloracin rosa plido y de tamao regular. o Colonias Cremas: Escasas y de menor tamao. o Lurn Cieneguilla o Colonias Fucsia: No se observaron. o Colonias Rosadas: No se observaron. o Colonias Cremas: De gran tamao y amorfas. o Chilln Santa Rosa de Quives o Colonias Rosadas: Cinco de color plido. o Chilln La Ensenada o Colonias Fucsias: Dos y de gran tamao. Pequeas y abundantes. o Colonias Rosadas: Escasas y pequeas. o Colonias Cremas: Abundantes y amorfas.
o

Aislamiento por Resiembra en Agar MacConkey o Lurn Playa o Colonias cremas. o Lurn Cieneguilla o Colonias cremas. Listas para las pruebas bioqumicas. o Chilln Santa Rosa de Quives o Colonias cremas y rosado plido. o Chilln La Ensenada o Colonias fuscia, transparentes, rosado plido y crema. o Rmac Chosica o Colonias fucsias bien definidas, rosado plido bien definidas, cremas bien definidas. o Rmac Puente Trujillo o Colonias fucsia bien definidas, transparentes, rosado plido, crema

Siembra selectiva en Agar Endo y ADC Lurn Cieneguilla Endo Produccin de colonias verde brillante, rojas ADC Produccin de colonias rosa plido

Lurn - Playa Endo Produccin de colonias verde brillante ADC Produccin de colonias rosa plido punteadas, cremas, transparente punteadas.

Rmac Cantuta Endo Produccin de colonias verde brillante, rojas ADC Produccin de colonias transparentes, rosa plido.

Rmac Trujillo Endo Produccin de colonias verde brillante, rojas ADC Produccin de colonias rosa plido, transparente punteadas.

Chilln Santa Rosa de Quives Endo Produccin de colonias verde brillante, rojas ADC Produccin de colonias rosa plido, crema.

Chilln La Ensenada Endo Produccin de colonias verde brillante Produccin de colonias rojas ADC Produccin de colonias rosa plido, crema.

Pruebas Bioqumicas en Agar TSI Fondo Playa transparente ADC Cantuta transparente ADC Cieneguilla Puntos Rojos Endo Quives Rojo Endo Cieneguilla Verde B. Endo Cieneguilla Verde B. Endo Cieneguilla Transparente ADC P. Trujillo V. Brillante Endo Cantuta Cremosa ADC Ensenada V. Brillante Endo P. Trujillo V. Brillante Endo Ensenada Opaco Endo Quives Punto cremoso ADC Cieneguilla cremoso ADC Cantuta rojo opaco Endo Playa V. Brillante Endo Quives V. Brillante Endo Cantuta V. Brillante Endo AG A AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG Pendiente A NC/ALC ALC/ALC A A A A A A A A A A NC/ALC A NC/ALC A A H2S + + E.C Shiguella Disentirae Salmonella Paratiphy A. E.C E.C E.C E.C E.C Salmonella Paratiphy A E.C E.C E.C E.C Salmonella Enteritidis E.C Salmonella Paratiphy A E.C E.C

Pte. Trujillo Cremoso ADC Quives Transparente ADC Playa Cremoso ADC Playa rosado ENDO Cantuta Puntos ADC Ensenada Rosado ADC Playa Puntos transparentes ADC Quives Rosado ADC P. Trujillo Transparente ADC Quives Rosado ADC Ensenada Cremoso ADC Playa Transparente ADC Rio Lurin Cineguilla Rojo ENDO Rio Lurin Cineguilla Cremoso ADC Ensenada Claro ADC Ensenada Puntos ADC

AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG AG

ALC ALC ALC ALC ALC A ALC ALC A ALC ALC A N/ALC A A A

Salmonella Paratiphy A Salmonella Paratiphy A. Salmonella Paratiphy A Proteus Rettgeri Salmonella Paratiphy A. E.C Salmonella Paratiphy A. Salmonella Paratiphy A. E.C Salmonella Paratiphy A. Salmonella Paratiphy A. E.C Salmonella Paratiphy A. E.C E.C E.C

DISCUCIONES Al sacar 2 muestras de agua de diferentes puntos del Ro Lurn encontramos en ambas la prescencia de SPA y EC ; sin embargo en el punto de Cieneguilla hubo presencia de Salmonella Enteritidis y Lurn la prescencia de Proteus Rettgeri. En el ro Chilln a pesar de que las muestras se tomaran de diferentes puntos(Punto 1 Santa Rosa de Quives y Punto 2 La Ensenada), se encontr en ambos EC y SPA.

En las muestras de agua del ro Rmac tanto en Chisca como en el Puente Trujillo se encontr EC y SPA , pero en Chosica se presenci la Shiguella Disembirae. En los 3 ros (Lurn , Rmac y Chilln) se verific la presencia de EC y SPA.

CONCLUSIONES Ro Lurn en el distrito de Cieneguilla se encontr presencia de SPA ,EC, Salmonella Enteridis. Ro Lurn en el distrito de Lurn se encontr presencia de EC, SPA, Proteus Rettgeri. Ro Rmac en Chosica se presencia Shiguella Pisentirae, EC, SPA. Ro Rmac en el puente Trujillo se encaontr la presencia de EC, SPA. Ro Chilln en el distritp de Santa Rosa de Quives hay EC, SPA. Ro Chilln en La Ensenada se encontr presencia de EC, SPA.

INTEGRANTES : o o o o Fung Espinoza Eduardo Lino Alegre Fernando Rique del guila Nancy Urcuhuaranga Alan