UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Prueba de aglutininas fras.

Departamento Acadmico de Bioqumica
Anlisis Clnico II

2013
Profesor Responsable: Q.F. Dr. Juan Manuel Parreo Tipin. Alumna: Fiorella Yahaira Prez Guerrero Cdigo: 08040106 Ao de Estudio: Quinto Semestre Acadmico: 2013-II Laboratorio: Viernes 10:00- 14:00

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I.

INTRODUCCIN

Como sabemos las aglutininas son globulinas producidas por las mismas clulas que producen los anticuerpos frente a antgenos extraos y que hacen que los glbulos rojos se agrupen; su importancia clnica implica realizar una prueba de sangre con el objetivo de diagnosticar la presencia de enfermedades infecciosas, ciertos tipos de cncer, lupus eritematoso sistmico, signos de anemia hemoltica y alteracin que se caracteriza por la insuficiencia de glbulos rojos en la sangre debido a su destruccin prematura. Si bien esta prueba no es muy especfica en la determinacin de ciertas enfermedades, suele ser trascendental, ya que dichas clulas sanguneas son responsables de dotar de oxgeno a los tejidos corporales; por ello en el presente informe estudiaremos la importancia de dicha prueba, as como los mtodos empleados para determinarla y su significancia clnica frente a un resultado dado.

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II.

OBJETIVOS Identificar la presencia o ausencia de Crioaglutininas en suero. Diagnosticar y determinar las causas de enfermedades idiopticas por crioaglutininas como Infecciones, Anemias hemolticas, Linfoma, Lupus eritematoso o Cncer.

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III.

MARCO TERICO A. Crioaglutininas El anlisis de crioaglutininas se realiza con el objetivo de evaluar las condiciones que hacen que el cuerpo produzca ciertos tipos de anticuerpos (aglutininas) a nivel del sistema inmunitario en respuesta a una infeccin. Estas crioaglutininas fue descrito por primera vez hace ms de un siglo, y no son ms que inmunoglobulinas o anticuerpos monoclonales de clase IgM, que a temperaturas comprendidas entre 0 y 5 C, producen la aglutinacin de los hemates o son capaces de producir hemlisis; el antgeno blanco en el eritrocito es un oligosacrido del sistema I/i que es un precursor de los antgenos de los grupos sanguneos ABH y Lewis. Esto ocasiona tambin una lesin celular por lisis directa que ser mediada por la activacin del complemento. Dado que las IgM pueden fijar el complemento con facilidad, los glbulos rojos del paciente se recubren con el complemento. Habitualmente, la progresin de la cascada del complemento se detiene en la formacin de C3b, por la presencia de protenas protectoras en la superficie de los glbulos rojos.

Enfermedad crnica de Aglutinacin fra

B. Significancia clnica Las crioaglutininas se encuentran por lo general a niveles bajos en muchas personas normales o sanas; sin embargo cobran significado clnico cuando interfieren en las tipificaciones dando reacciones cruzadas a temperaturas por debajo de los 4C, causando as dolores en las extremidades, trombosis, aglutinacin y hemlisis.

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Su presencia puede seguir a una serie de infecciones o enfermedades crnicas como un linfoma, anemia hemoltica, Lupus eritematoso sistmico y cncer. Aglutininas fras o crioaglutininas VALORES NORMALES: sin aglutinacin en ttulos o por debajo de 1/40 VALORES ELEVADOS: Aglutinacin en ttulo mayores de 1/40

C. Enfermedades idiopticas por crioaglutininas elevadas El sndrome de crioaglutininas se presenta con una frecuencia de 30-40% y afecta generalmente a personas mayores de 40 aos. ENFERMEDAD Anemia hemoltica autoinmune Infeccin por estafilococos Mycoplasma pneumoniae CARACTERSTICAS De mayor frecuencia. Afecta a recin nacidos, mujeres en perodo de lactancia y personas con enfermedades crnicas o sistema inmunolgico debilitado. Con frecuencia de 25-35%, est asociado a sntomas de infecciones respiratorias. Ocasiona dolor torcico, tos seca, sudoracin excesiva, fiebre, escalofro y dolor de cabeza y garganta. Formacin de anticuerpos contra antgeno I. Linfomas, leucemia linfoctica crnica. Frecuencia del 15-20%. Origen generalmente monoclonal y caracterizado por la destruccin preferencial de clulas jvenes.

Enfermedades linfoproliferativas

Lupus eritematoso sistmico. Inducido por drogas Otros Con frecuencia de 1-5% como la penicilina y alfa metildopa. Frecuencia 5-1% en Hepatitis C, influenza, citomegaloviru, sarampin, endocarditis bacteriana, tularemia, cirrosis y tumores en el timo.

El estudio de crioaglutininas tambin hace posible la deteccin de algunos tipos de cncer, como linfoma y mieloma mltiple.

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D. Signos y sntomas En ciertos casos, los niveles altos de crioaglutininas pueden causar que la sangre se aglutine en los vasos sanguneos debajo de la piel cuando la piel est expuesta al fro. Esto provoca una piel plida y el entumecimiento de las manos y los pies.

Es posible que se presenten con ictericia, signos cutneos fenmeno de Raynaud, cianosis en extremidades, nariz, orejas y fatiga crnica por la anemia, generalmente con ttulos aglutininas mayores a 1/128.

IV.

PROCEDIMIENTO Mtodo: Fundamento: Muestra: Reactivos: M. Tromberg En la aglutinacin antgeno - anticuerpo (oligosacrido del sistema I/i - IgM) 3ml de sangre venosa. Citrato de sodio (anticoagulante) 3.8% Cloruro de sodio (medio) 0.9% Suero salino fisiolgico 6 tubos de ensayo Centrifuga Micropipetas

Materiales y Equipos:

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A. Mtodo Operatorio Extraer 3 ml de sangre venosa y llevarlo a 0.75ml de citrato de sodio al 3.8% (anticuagulante). LLevar a Centrifugar a 2 000 RPM por 5 min, con el objetivo de separar el plasma, plaquetas y globulos rojos.

Preparar una suspencin de hematies al 0.5% ( 0.05ml de GR en 10 ml de SSF).

0.3

[C]

SSF(ml) PLASMA (ml)

0.3 0.3 0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

SUSP. GR AL 0.5%(ml)

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

Dejar en reposo por 24h a 0-5C

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V.

RESULTADO El resultado se realiza de acuerdo con la intensidad de la aglutinacin que se registra en base a la tabla de consideraciones. N TUBO DE ENSAYO 1 2 3 4 5 6 LECTURA ++ ++ +++ +++ +++ +++

NOTA: Consideracin de lectura: Consideracin El disco se puede agitar sin romper. El disco al agitarlo se rompe en grandes fragmentos. El disco al agitarlo se rompe en pequeo fragmentos. El disco al agitarlo se rompe en pequeos fragmentos fcilmente y puede observarse al microscopio. El disco al agitarlo se rompe en muy pequeos fragmentos solo observables al microscopio. Lectura +++++ ++++ +++ ++ +

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VI.

DISCUCIN Este examen se realiza con el objetivo de diagnosticar algunas infecciones y determinar la causa de una anemia hemoltica; sin embargo por ser una prueba in vitro existen algunos factores que no hacen que la prueba sea muy especfica. Un factor importante en el diagnostico de esta prueba son las bajas temperaturas (0-5C) que se deben de manejar en todo el proceso y la agitacin del disco al observar la aglutinacin. Si bien los resultados obtenidos nos dan un ndice de lectura entre (++) y (+++), esto indicara que en el paciente se encuentra un nivel de crioaglutinina a titulo no mayor de 1/64. Otro punto importante a mencionar es el hecho de diferenciar entre crioaglutininas y aglutininas calientes que puede ayudar a entender por qu se est presentando la anemia hemoltica y poder dirigir la terapia.

VII.

CONCLUSIN

Se encuentra un nivel de crioaglutinina en suero a titulo no mayor de 1/64. No existe ndice de presentar enfermedad idioptica por crioaglutinina.

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VIII.

CUESTIONARIO 1. Qu son aglutininas en caliente? Los estudios de aglutininas en caliente o tambin conocida como la prueba de Widal se utilizan para determinar enfermedades infecciosas como: salmonelosis, richetsiosis, brucelosis. La reaccin de Widal, esta basado en el principio de aglutinacin antgeno-anticuerpo y fue desarrollada por Georges Fernand Isadore Widal, prestigioso mdico francs, en Junio de 1896, para el diagnstico serolgico de la fiebre tifoidea. La reaccin de Widal demuestra la presencia de anticuerpos aglutinantes (aglutininas) contra los antgenos H (flagelar) u O (somtico) de la Salmonella typhi u otras bacterias en el suero de los pacientes con fiebre tifoidea a una temperatura corporal de 37 C o mayor a ella. En el laboratorio se realizan diluciones seriadas para identificar hasta que dilucin se presenta la aglutinacin. Aglutininas Febriles: Sin aglutinacin de eritrocitos a titulo menor o igual a 1/80 diluciones.

2. Fundamento de dicha prueba.

Se fundamenta en el principio de aglutinacin antgeno-anticuerpo a una temperatura corporal de 37C o mayor a esta, en donde predomina la IgG que presentan una gran afinidad de unirse al antgeno capsular de ciertos organismos como la Salmonella.

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3. Interpretacin clnica de las aglutininas en caliente. Los niveles aumentados de aglutininas febriles pueden ser un ndice de la presencia de salmonelosis, fiebre tifoidea, tularemia, enfermedad por rikettsias o brucelosis. Un diagnstico de estas infecciones puede considerarse positivo si los ttulos inciales se cuadruplican entre una y cuatro semana; sin embargo, el clnico no puede esperar este tiempo para establecer un tratamiento, por lo cual se debe considerar la posibilidad de entrar a un tratamiento. 4. Fundamento e interpretacin clnica de las crioaglutininas.

FUNDAMENTO
En la aglutinacin antgeno - anticuerpo presente entre los hematies (antgeno blanco en el eritrocito es un oligosacrido del sistema I/i) y los anticuerpos producidos por nuetro cuerpo (anticuerpos monoclonales de clase IgM) a temperaturas comprendidas entre 0 y 5 C.

INTERPRETACIN CLNICA
Las crioaglutininas se encuentran por lo general a niveles bajos en muchas personas normales o sanas; sin embargo cobran significado clnico cuando interfieren en las tipificaciones dando reacciones cruzadas a temperaturas por debajo de los 4C. Su presencia puede seguir a una serie de infecciones o enfermedades crnicas como un linfoma, anemia hemoltica, Lupus eritematoso sistmico y cncer. VALORES NORMALES: sin aglutinacin en ttulos o por debajo de 1/40 VALORES ELEVADOS: Aglutinacin en ttulo mayores de 1/40

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IX.

BIBLIOGRAFA 1. American Association of Blood Bank. Manual Tcnico .13.ED. Buenos Aires: Edigraf; 2001 2. Correa Jimnez, Luz Mara. Ayudas diagnsticas, anlisis e interpretacin. Manizales, Universidad de Caldas, Centro Editorial 2002. 3. Schwartz RS. Autoimmune and intravascular hemolytic anemias. In: Goldman L, Schafer AI, eds. Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa:Saunders Elsevier; 2011:chap 163. 4. LotharT. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and assessment of clinical laboratory results, English edition, 1998. 5. Centro Mdico de la Universidad de Maryland. Aglutininas fras y febriles, Informacin general. University of Maryland Medical Center (UMMC) 6. Pagana KD, Pagana TJ. Gua de pruebas diagnsticas y de laboratorio. 8 Edicin. Espaa: Editorial Elsevier / Mosby; 2009. 7. Abraham E. Katime Ziga. Artculo de revisin: Reaccin de Widal interpretacin clnica. Rev. Panam Infectol 2006;8(2):40-44 8. Paul N. Lanken. Manual de cuidados intensivos. Editorial Mdica Panamericana. Madrid. 2003.

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