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Universidad de Amrica Estudiantes: Laura Montao, Paola Tarazona, Mnica Fitat, Luis Cruz, Natalia Alonso.

Bogot, 11 de abril de 2012 ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR

INTRODUCCION
En los 50 aos, desde que se hizo la primera observacin de la resonancia magntica nuclear (NMR), la tcnica se ha convertido en una herramienta indispensable para la qumica. Desde la poca del primer espectrofotmetro comercial NMR, ha tenido un impresionante xito en resolver problemas qumicos (1). En los primeros aos, las aplicaciones del protn NMR fueron rpidamente extendidos a estudios estructurales de la mayora de clases de compuestos orgnicos. La utilidad de NMR en el estudio del sistema qumico dinmico y anlisis conformacional han ayudado a tener una idea ms clara acerca de estos (2). Desde entonces, el rea de aplicacin ha presenciado una evolucin vigorosa, resaltada por varios avances revolucionarios importantes en la instrumentacin y mtodos. El desarrollo de poderosos imanes superconductores y la introduccin del mtodo de transformacin de pulsos de Fourier (3) aumento en gran medida la sensibilidad y el poder de resolucin del mtodo. La mejora en la sensibilidad significa que la NMR podra ser extendida a casi todos los elementos de la tabla peridica. Tcnicas de dos dimensiones (4) fueron descubiertas y rpidamente desarrollada para brindar el qumico con la habilidad de descubrir las conectividades nucleares con gran detalle. Las tcnicas para espectros de solidos de alta-resolucin (5) e imgenes de resonancia magntica emergieron como ramas principales del rea de aplicacin. Hoy en da el espectrofotmetro NMR incluye los avances de los ltimos 50 aos en instrumentos verstiles y fciles de usar. La adquisicin de informacin automatizada y procesamiento, proveen acceso a los experimentos ms tiles en una forma rutinaria. Mejoras tecnolgicas continan impulsando avances en aplicaciones de NMR. La reciente introduccin de tcnicas de gradiente de campos de pulso en espectrofotmetros de altaresolucin as como tridimensional y tcnicas de dimensiones superiores promete que las aplicaciones de NMR continuaran diversificando y creciendo.

COMO FUNCIONA
PRINCIPIOS FSICOS Y QUMICOS La siguiente corta discusin de NMR usa un poco de matemtica para hacerlo ms simple. Descripciones rigurosas de las bases fsicas de NMR pueden ser encontradas en las referencias 6-9. Ncleos magnticamente activos tienen una propiedad conocida como espn. Como resultado de tener espn, ncleos magnticamente activos tambin tienen un momento magntico y momento angular. El radio magnetogrico es el radio de esas dos 1

propiedades. Cada isotopo magnticamente activo tiene un caracterstico radio magnetogrico. Cuando un ncleo es puesto en un campo magntico externo, B0, dos aspectos del mismo fenmeno fsico pueden ser observados: divisin nuclear de Zeeman y precesin nuclear. La divisin Zeeman resulta de la creacin de 2l+1 estados magnticos de energa, donde l es el nmero cuntico de spin. Ncleos con una masa atmica y un nmero atmico par tienen I=0. Tales ncleos no pueden producir una seal NMR. Para ncleos con spin tales como 1H, 13C, 15N, 19F y 31P, los resultados de la divisin Zeeman son en dos niveles de energa, mostrados en la figura 17.1. La energa de separacin de estos niveles es proporcional a la fuerza de B0. La Tabla 17.1 muestra algunas propiedades nucleares de los ncleos ms comnmente observados. La precesin nuclear es ilustrada en la figura 17.2. Precesin es el movimiento de un cuerpo giratorio cuyo eje de rotacin est cambiando constantemente la orientacin. El eje de rotacin describe un cono alrededor del eje del campo magntico externo. La frecuencia precesional de cualquier ncleo es igual al de la fuerza del campo magntico (B0) por el radio magnetogrico. En el campo magntico B0, el ncleo precesional puede tener su momento magntico alineado con el campo, el cual es el estado de mnima energa, o alineado en contra del campo en el estado ms alto. Esto es algo anlogo al comps magntico, el cual est en un estado de mnima energa que cuando se alinea con el campo magntico de la tierra apunta al norte. Este requerir la entrada de alguna energa para poner el comps en un estado de mxima energa para apuntas al sur. En una muestra de NMR hay una gran coleccin de ncleos con cierta cantidad de energa cintica. La distribucin del ncleo entre los dos estados de energa dependen de la temperatura, la fuerza del campo magntico, y el radio precesional. Cerca del cero absoluto, casi todos los ncleos estarn en el estado de mnima energa. A temperatura ambiente, sin embargo, el ncleo tiene suficiente energa cintica para estar casi distribuido uniformemente entre los estados de energa. Solo hay un pequeo exceso de ncleos en el estado de mnima energa, del orden de 1 parte en 105. Esta es una razn para la baja sensibilidad de la tcnica de NMT. MODELO VECTOR Los principios bases de NMR pueden ser descritos usando un modelo vector. Un conjunto de coordinadas Cartesianas es mostrada en la Figura 17.3, con el eje del campo magntico B0, orientado en la direccin Z positiva. La suma de los momentos magnticos del exceso de ncleos en el estado de mnima energa puede ser representada por un vector de magnetizacin neto M. Este vector tal vez visto como un imn, el cual puede ser rodeado con una bobina de alambre. Este arreglo de imn-y-bobina puede ser hecho para que se comporte como si fuera un motor elctrico o un generador elctrico. En un motor, una corriente elctrica aplicada a la bobina provoca una rotacin del imn. Este es anlogo a la excitacin en espectroscopia NMR. En un generador, un imn rotatorio provoca una corriente elctrica en la bobina. Esto corresponde a la fase de deteccin de espectroscopia NMR. Esta orden bobina-y-muestra, llamada una sonda, es mostrada en la figura 17.4.
Figura 17.1 La divisin nuclear de Zeeman para el ncleo de espn .

Tabla 17.1 Propiedades nucleares de los ncleos ms comnmente observados.

PULSOS DE NMR Para poder observar el vector de magnetizacin neto, un segundo campo magntico, B1, es aplicado a la muestra en un ngulo recto a B0. El campo B1 est diseado para rotar a la misma frecuencia a la que el ncleo est haciendo precesin. B1 esta entonces esttico con respecto al ncleo de precesin. El vector de magnetizacin neto tiene un movimiento de precesin alrededor de B1, movindose lejos del eje Z. Esta coincidencia de la frecuencia del campo rotacional de B1 y la frecuencia de precesin del ncleo es llamada resonancia.
Figura 17.2 Precesin de un ncleo en el campo magntico B0

Figura 17.3 El vector de magnetizacin neta (M). (a) En equilibrio; (b) despus de un pulso.

Figura 17.4 Un espectrmetro NMR incluyendo el imn solenoide superconductor. La seccin superior del bloque de la consola es donde el pulso de excitacin es producido. La seccin inferior es el sistema receptor de seal NMR. La vista ampliada muestra una muestra con la bobina, rodeada por el imn solenoide.

B1 puede ser aplicado para una cantidad suficiente de tiempo para rotar M al plano X-Y. Esto es llamado una rotacin de 90, o un pulso de 90. El campo B1 luego se apaga, y M permanece en el plano X-Y, rotando a una frecuencia de precesin nuclear relativa a la bobina. Este imn giratorio produce una corriente en la bobina. Esto es la seal NMR. La seal es llamada un decaimiento de induccin libre (DIL). Esto es porque es producido por 4

un vector de magnetizacin neto de movimiento de precesin libre, induciendo una corriente en la bobina, y decaimiento con el tiempo as acorde el sistema vuelva al equilibrio. RELAJACION Despus de un pulso de excitacin, los espn pierden su exceso de energa por interactuar con los alrededores y M vuelve a su estado de equilibrio. Este proceso exponencial es llamado relajacin red-espn. Se caracteriza por una constante de tiempo exponencial T1. El componente de la magnetizacin en el plano X-Y tambin se relaja a travs de mecanismos adicionales. Esto es llamado relajacin espn - espn. El decaimiento es caracterizado por una constante de tiempo exponencial T 2. El decaimiento exponencial de DIL en su mayora es provocado por la falta de homogenizacin de B0. La constante de tiempo de decaimiento observada es T2*. El ancho de la lnea a la mitad de la altura de una lnea NMR es igual a 1/T2*. DESPLAZAMIENTO QUIMICO El ncleo experimenta los efectos de pequeos campos magnticos en su medio ambiente directo. Los electrones circundantes producen campos magnticos en el ncleo que pueden ya sea oponerse o reforzar el campo externo ms largo. Cuando el campo magntico local se opone al campo exterior o, el ncleo se dice que est blindado. Un ncleo blindado experimenta una fuerza menos efectiva en el campo y resuena a una frecuencia menos. Como resultado, cada tipo de ncleo en una molcula puede tener una frecuencia de resonancia un poco diferente. Esta diferencia es llamada desplazamiento qumico. El espectrmetro NMR mide con precisin todas las frecuencias de resonancia de un ncleo de una muestra en unidades de Hertz, o ciclos por segundo. El desplazamiento qumico est definido como la diferencia entre la frecuencia de resonancia de un ncleo en un tipo de ambiente qumico y un ncleo de referencia, dividido por la frecuencia del espectrmetro. A causa de que la frecuencia del espectrmetro esta usualmente en el rango de mega Hertz, mientras el rango del desplazamiento qumico esta en Hertz o en kilo Hertz, el radio esta expresado en partes por milln. La tabla 17.2 da los tpicos rangos de desplazamiento qumico de dos espines ms populares de ncleo . Compuestos de referencia tales como tetrametil silano (TMS) proveen escalas de desplazamientos qumica acordados para todos los espectrmetros. Una discusin excelente de desplazamientos qumicos puede ser encontrada en la referencia 10. ACOPLAMIENTO ESPIN-ESPIN El pequeo campo magntico del ncleo ejerce un efecto en los ncleos vecinos llamado acoplamiento espn - espn. El efecto transmitido a travs de los enlace es por los electrones enlazados. Si un ncleo sin acoplamiento produce una sola lnea de resonancia, esta lnea es dividida en dos mediante acoplamiento con un ncleo vecino. El patrn de -acoplamiento para un ncleo contiene 2nI+1 lneas, donde n es el nmero de ncleos vecinos y I es el nmero cuntico de espn. Acoplamientos pequeos pueden venir de los ncleos ms distantes, algunas veces a varios enlaces de distancia. Los patrones de acoplamiento pueden ser ms complicados debido a un efecto conocido como acoplamiento fuerte, si la diferencia del desplazamiento qumico entre el ncleo acoplado es pequeo. 5

La constante de acoplamiento es medida en Hertz y es independiente de la fuerza del campo magntico externo. La magnitud de la contante de acoplamiento puede dar informacin acerca de la relacin estereoqumica entre el ncleo acoplado. Acoplamientos de enlace triple depende del coseno del ngulo diedro en medio del ncleo acoplado. Esta dependencia es conocida como la relacin Karplus y este ha sido usado en anlisis estereoqumica durante 40 aos. El acoplamiento espn espn es una herramienta bastante til tanto para establecer conectividad a travs de enlaces entre tomos en una molcula como para establecer relaciones estereoqumicas.

Tabla 17.2 Regiones generales de desplazamiento qumico para H y C

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EFECTO OVERHAUSER NUCLEAR El efecto Overhauser nuclear (EON) es un tema complejo que es discutido en una reciente monografa definitiva (12). El efecto puede ser usado para proveer informacin acerca de las relaciones espaciales de tomos en una molcula o para mejorar la respuesta de un ncleo insensible. El efecto ocurre solo entre un ncleo que comparte un acoplamiento dipolar, es decir que el ncleo esta tan cerca uno de otro que so dipolos 6

magnticos interaccionan. La aplicacin ms comn de EON es para el mejoramiento de la sensibilidad del espectro 13C y para determinar las relaciones espaciales entre protones en una molcula. Ejemplos del uso de EON pueden ser encontrados en la seccin de aplicaciones de este captulo.

QUE HACE
INSTRUMENTACION El espectrmetro moderno NMR es uno de los instrumentos analticos ms sofisticados disponibles. Mejoras continuas en tecnologa magntica, circuitos electrnicos, potencia de los ordenadores, y tcnicas experimentales han resultado en un instrumento con una extraordinaria resolucin de problemas de alimentacin. Mejoras en la sensibilidad y estabilidad de los instrumentos han incrementado el rango de problemas donde NMR puede ser usado. Interfaces automatizados de usuarios hacen que el uso de los instrumentos sea fcil de usar, incluso para algunas de las tcnicas ms avanzadas (13). Un diagrama de un espectrmetro NMR es mostrado en la figura 17.4. Los principales componentes son un imn solenoide superconductor, transmisores de radio frecuencia y amplificadores de corriente para generar campos B1, una sonda para descargar campos B1 a la muestra y recibir la seal NMR, un sistema receptor de radio frecuencia y un computador para procesar la informacin. El imn superconductor es una bobina solenoide clavada con un alambre superconductor. Una vez que ha sido cargado con corriente directa, el diseo superconductor produce una campo magntico fuerte y homogneo que llega a ser estable durante aos, siempre que la bobina se mantenga debajo de su temperatura critica. Esto se logra mediante la inmersin de la bobina en helio lquido. El imn esta aloja en un criostato, el cual es un sistema de termos concntricos encerrados en un recipiente al vaco. El termo de helio lquido est rodeado por termos de nitrgeno lquido y el recipiente al vaco rodea el termo de nitrgeno lquido. Los gases de evaporacin pasan por la parte superior del criostato a travs de chimeneas ventilacin/llenado. La velocidad del crigeno vaporizado es monitoreada de cerca, y los lquidos se completan a medida que sea necesario. El imn debera estar alojado en una habitacin de temperatura controlada, lejos del flujo de trfico y libre de vibraciones. Aire comprimido seco y limpio es necesario para el sistema neumtico usado para las muestras de espines y muestras de elevacin, dentro y fuera de la sonda. Incorporado en el imn hay partculas superconductoras criognicas, las cuales son pequeos electroimanes que producen un campo magntico correctivo para el ajuste de homogeneidad. Estos estn ajustados al tiempo de energizacin magntica. Otro conjunto de bobinas de pletinas, llamada pletinas a temperatura ambiente, rodean la sonda. Estos estn ajustados para la mxima homogeneidad del campo para cada muestra, ya sea manualmente o bajo el control de un computador. Las muestras deben ser rotadas usando una ruleta de corriente de aire para un campo magntico de homogeneidad mejorada en el plano X-Y. El reciente sistema de pletina introducido puede mantener una homogeneidad tan buena en el plano X-Y que no se requiere rotacin. La fuerza del campo magntico se mantiene en un valor constante para cada muestra por un circuito de bloqueo campo-frecuencia. Este sistema monitorea la frecuencia de 7

resonancia de tomos de deuterio en el solvente. El sistema de bloqueo compensa cualquier cambio en la frecuencia mediante el ajuste de la fuerza del campo magntico para mantener una frecuencia de bloqueo estable. Esta estabilidad es esencial para la eficacia de la eficiencia de la seal o para experimentos de largos periodos de tiempo. La sonda consiste de un alambre de bobina rodeando el espacia de la muestra y organizado para producir un campo magntico perpendicular a el campo externo. La bobina es parte de un circuito sincronizado que, cuando es sincronizado propiamente para la frecuencia de resonancia de escogencia y ajustando la impedancia a la fuente transmisora, descarga el campo B1 a la muestra. Muchas sondas son capaces de operar a varias temperaturas. Despus de un pequeo retraso (microsegundos) para disipar la energa del campo pulsado, las funciones de la bobina actan como el detector de seal NMR. El vector de magnetizacin es desviado por el movimiento de precesin del pulso del campo magntico alrededor del eje del campo B0 y produce una corriente en la bobina. Esta corriente es la seal NMR. Un amplificador sensible previo, localizado tan cerca como sea prctico de la bobina, capta y amplifica la dbil seal. La seal amplificada pasa a un sistema receptor que tiene tres funciones: amplificacin, mesclado, y deteccin de fase en cuadratura. El proceso de mesclado, o heterodino, produce diferentes frecuencias des la seal de radiofrecuencia NMR. Al final, un rango de seales de audio (kHz) resulta. La deteccin de fase en cuadratura se logra por medio de la divisin de la seal NMR en dos canales, cuyas fases estn a 90 de distancia. Una vez que estos dos canales han sido creados, un correcto funcionamiento necesita que cada etapa de amplificacin sea igual en los dos canales y que una diferencia de fase de exactamente 90 sea mantenida. Un correcto balance de cuatro canales minimiza los artefactos espectrales. Esta tcnica mejora la el radio de relacin seal-ruido de una sola adquisicin, un 40% sobre un instrumento con un solo conducto. La conversin de la seal anloga NMR a forma digital pone algunas limitaciones al sistema receptor. La seal anloga debe ser lo suficientemente fuerte para activar el bit ms dbil del convertidor anlogo-a-digital (A/D), sin embargo, no es lo suficientemente fuerte para ser manejado para activar todos los bits del A/D. Si la seal anloga excede el rango del A/D, el decaimiento de la induccin libre (DIL) se dice que es seccionada. La distorsin de la lnea base y las seales imitadas entonces comenzaran aparecer en el espectro. Si la seal anloga es muy dbil, la resolucin se puede perder. La mayora de los espectrofotmetros estn equipados para ajustar automticamente el ingreso del receptor apropiadamente. Si una muestra exhibe seales dbiles en presencia de seales fuertes (tal como las lneas de los solventes), las seales dbiles pueden perderse. Un A/D de 12 bit puede acomodarse a una seal mxima de 2048 unidades y una seal mnima de 1 unidad. En la prctica, con un A/D de 12 bit, este problema de rango dinmico empieza en el punto donde la seales ms fuertes son aproximadamente mil veces tan intenso como las seales dbiles. Varias tcnicas para suprimir las lneas del solvente estn disponibles. Tal supresin del solvente permite amplificaciones incrementadas del DIL, tal que las lneas dbiles son fciles de detectar.

La ltima limitacin del sistema A/D se refiere a la tasa a la cual la frecuencia de audio es muestreada. Acorde al teorema de Nyquist, la tasa de muestreo debe ser el doble de rpida as como la ms alta frecuencia de ser detectada. Las seales que tienen una frecuencia ms alta que la tasa de muestreo puede manejar aun apareciendo en el espectro, pero a una inexacta frecuencia. Prestarle cuidadosa atencin al ancho de la ventana espectral y el centro del rango de frecuencia observado puede minimizar este problema. Una vez en el computador, todas las frecuencias en el tiempo de la seal de dominio son convertidas al espectro de frecuencia mediante la trasformacin de Fourier. La informacin del sistema entonces es mostrada y traza el espectro NMR como se indica. EL ESPECTRO NMR DE ALTA RESOLUCION La resolucin en el espectro NMR es definido como el ancho de la lnea a una altura media de un conveniente seal NMR clara. En trminos de ser capaz de separar diferentes lneas NMR, la resolucin es controlada por las tres variables principales: la fuerza del campo magntico, homogeneidad del campo magntico y tiempo de adquisicin. Con un dado instrumento, solo las ltimas dos estn sujetas a un control del operador. El efecto de la fuerza del campo magntico es ilustrado en la figura 17.5 (a). A mayores fuerzas del campo magntico se producen una dispersin espectral mayor. Esto significa que dos ncleos con diferentes desplazamientos qumicos tienen una separacin de frecuencia ms larga en campos ms altos. Una diferencia de desplazamiento qumico de 1 ppm incluye una rango de frecuencia de 60 Hz en un campo magntico de 60 MHz, pero 1 ppm en imanes de 600 MHz incluye un rango de frecuencia de 600 Hz. La dispersin espectral incrementada disponible a una mayor intensidad del campo es la principal razn por la cual los campos altos son tiles. El efecto de la homogeneidad del campo magntico en la resolucin es ilustrada en la figura 17.5 (b). Una buena homogeneidad del campo produce un buen perfil de lnea porque todo el ncleo que est contribuyendo a una lnea de resonancia est teniendo un movimiento de precesin a la misma velocidad independientemente de su ubicacin en la muestra. Los gradientes del campo magntico dan a lugar perfiles de lneas ampliadas o distorsionadas.

Figura 17.5 Espectro simulado (a) El efecto de la fuerza del campo magntico en una resolucin de ancho de lnea constante. (b)El efecto del ancho de lnea en una resolucin a fuerza de campo magntico constante.

El efecto de tiempo adquirido en la resolucin se define bajo. Una mayor adquisicin de tiempo significa que es posible una mejor resolucin. Una resolucin de 0.5Hz requiere un tiempo de adquisicin de 2 seg. En la prctica, el analista decide la resolucin requerida y que conjunto de tiempos adquiridos emplea, en consecuencia: Resolucin (Hz)=1/ tiempo de adquisicin (seg) El espectro de alta resolucin requiere un apropiado procesamiento de datos, el cual puede involucrar tcnicas de sin obturacin y una mejor resolucin. Hay otras variables que pueden degradar la resolucin en un espectro NMR. La vibracin del magneto o la muestra deben ser evitados. La amortiguacin de la vibracin de la vibracin del magneto es un soporte valido para controlar estos efectos. La fluctuacin de la temperatura gradientes pueden causar el cambio ampliacin. Los espectrmetros son usualmente equipados con contr4oles de temperatura, que pueden mantener la temperatura deseada en la sonda. Espectros de gradiente mejorado La introduccin de gradientes de campo magntico escudados ha hecho posible el uso de gradientes de campo de pulsos en la espectroscopia MNR de alta resolucin. Los escudos activos y otras tcnicas reducen la disrupcin de los campos locales acusado por las corrientes remolino, las cuales previamente hicieron el uso del gradiente poco prctico. El uso de los gradientes de campos pulsados reduce el tiempo experimental, minimiza los artefactos y permite nuevos niveles de supresin del solvente. Por ejemplo, los gradientes pueden ser usados para seleccionar caminos coherentes de transferencia, eliminando la necesidad de esquemas de fase cclica extensos. Los gradientes pueden minimizar errores de sustraccin asociados con la diferencia en experimentos tal como la deteccin inversa. Los gradientes ofrecen solventes de supresin con lnea gruesa y forma de lnea independiente y muchos solventes de supresin y eliminan la transferencia de magnetizacin de los picos del solvente previamente irradiado. Estas ventajas son 10

especialmente importantes en estudios de biomolculas diluidas en soluciones acuosas. Los gradientes tambin ofrecen un mtodo ideal para estudiar las propiedades de difusin. Las opciones del gradiente pueden ser obtenidos con nuevos espectrofotmetros con instrumentos y existentes. Slidos Las muestras con estado slido presentas problemas desafiantes. La lnea NMR en slidos tiende a ser casi amplia debido a los efectos de acoplamientos dipolares entre el ncleo y los efectos de desplazamiento qumico anisotropico (DQA). Ambos efectos son completamente reducidos en soluciones por el rpido volteo molecular. Soluciones ingeniosas a estos 2 problemas han hecho la espectroscopia NMR en estado slido una de las reas ms interesantes en el campo. Los efectos de DQA pueden producir lneas amplias de varios kilohertz. DQA se refiere a la dependencia direccional de la proteccin electrnica en una molcula. Es posible superar los efectos DQA girando rpidamente la muestra en un ngulo hacia el campo magntico, conocido como ngulo mgico. Las sondas solidas usan rotores giratorios para contener la muestra a medida que va rotando alcanza la velocidad del ngulo mgico giratorio (AMG) de 10 kHz, lo suficientemente rpido para remover los efectos DQA. El desacoplamiento del acoplamiento dipolar ms fuerte entre protones y carbonos en un slido orgnico puede lograrse con desacoplamientos de corriente alta o multiplicar la secuencia de la lnea del pulso. Esta tcnica usa una serie de pulsos para promediar las interacciones dipolo por la reorientacin de los giros. El acoplamiento dipolar es explotado para incrementar la sensibilidad de los ncleos menos sensibles usando una tcnica conocida como polarizacin cruzada. La polarizacin cruzada y el ngulo mgico giratorio (PCAMG) pueden producir espectros de alta resolucin para solidos.la figura 17.6 muestra el espectro PCAMG13C de un slido orgnico compuesto. Las lneas amplias en el espectro esttico son agudizadas drsticamente mediante la tcnica MAS. Los equipos requeridos para la espectroscopia en estado slido NMR incluye alto poder de transmisin y sondas diseadas para girar la muestra en altas velocidades. Los dos espectrofotmetros de slidos y espectrofotmetros multipropsito para soluciones y slidos estn disponibles. Existen espectrofotmetros que por lo general se les pueden acomodar accesorios de slidos.

Informacin analtica
Cualitativa
Entre muchas de las aplicaciones de la NMR. La principal sigue siendo la identificacin y prueba de la estructura qumica de compuestos. Hoy en da la espectroscopia NMR se encuentra equipada para reunir informacin estructural con una velocidad y conveniencia sin precedentes. A pesar de que estos problemas qumicos son nicos, casi todos son

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aprovechados para identificar el ncleo presente en una molcula y definir la relacin de acoplamiento entre ellas. Los experimentos bsicos establecidos eficientemente para la obtencin de esta informacin estn habitualmente disponible (13). Como la relacin de acoplamiento est identificada, los fragmentos de ciertas estructuras se vuelven evidentes. Adems los experimentos son realizados para detectar acoplamientos de largo rango y a travs de los espacios de acoplamiento en orden para conectar los fragmentos estructurales. Los dos experimentos, unidimensional y bidimensional, son usados. Usando un caso de ejemplo, los experimentos listados en la tabla 17.3 que se ilustra en esta seccin del captulo. Preparacin de la muestra Las muestras solubles se disuelven en solventes deuterados, que son solventes ordinarios que han tenido sus protones remplazados por tomos de deuterio. Para una alta calidad de trabajo, la muestras pueden ser filtradas y desmasificadas para remover impurezas paramagnticas tales como partculas de hierro y molculas de oxigeno.

Figura 17.6 Los espectros de slido.

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C estticos (abajo) y MAS (por debajo de) de I-Dopa en estado

ESPECTRO UNIDIMENSIONAL El punto de partida habitual de un estudio estructural es un espectro de protn. Estos son los 4 principales tipos de informacin presentes en el espectro. El numero de diferentes resonancias de protones. 12

Los desplazamientos qumicos de estas resonancias. La intensidad de las lneas del protn La multiplicidad o el patrn de acoplamiento.

Figura 17.7(a) muestra el espectro de protn de n-butil acetato. Hay 5 diferentes resonancias de protones que se integran a un total de 12 protones. La tripleta de dos protones en 4.2 ppm es debida a l grupo CH2-O, que usualmente las resonancias estn entre 3.5 y 4,5 ppm. Los 7 restantes protones entre 1 y 2 ppm representan el 2 grupo de metileno y un grupo de metil, al final de la cadena el n-butil alquilo. Los patrones de acoplamiento en este espectro pueden ser entendidos usando la regla 2nI+1. Por ejemplo, la tripleta de 4.1 ppm es debida al acoplamiento entre el CH2-O protones y un adyacente grupo de metileno.
Tabla 17.3 Experimentos para la obtencin de los desplazamientos qumicos, J-acoplamientos, y acoplamientos dipolares para la prueba de la estructura.

EXPERIMENTO Protn unidimensional y espectro del carbn Mejora sin distorsin por la polarizacin de transferencia (DEPT) de los espectros COSY XHCORR (correlacin de hidrogeno y cualquier otro ncleo), correlacin heteronuclear enlaces mltiples (HMCB) Retransmitido la coherencia de la transferencia (RELAY), correlacin total de espectroscopia (TOCSY) Correlacin por larga distancia de acoplamiento (COLOC), HMBC J-resuelto NOE diferencia, NOE espectroscopia (NOESY)

INFORMACIN Desplazamientos qumicos, constantes de acoplamiento de protones Identifica metinas, metilenos y metilos Identifica protn y relaciones Jacoplamientos Identifica protn- acoplamientos carbn Identifica protones de largo alcance acoplamiento de protones Identifica protn-acoplamiento de carbn de largo alcance Obtiene protn- protn o protn-contantes de acoplamiento de carbn Identifica a travs de - acoplamiento del espacio dipolar

El acoplamiento en esta molcula puede ser investigada usando desacoplamiento homonuclear. Esta tcnica es ilustrada en la Fig. 17.7 (b). Usando un campo magntico adicional, centrado en los protones de inters, esto es posible para saturar cualquier resonancia en el espectro. Esto remueve el efecto de acoplamiento del desacoplamiento de protones y simplifica el espectro. En este caso, la tripleta en 4.1 ppm se simplifica a un singlete y el sexteto de 1.4 ppm se simplifica aun cuarteto. Esto demuestra que el desacoplamiento del grupo metileno es localizado entre los metilenos simplificados. Por el desacoplamiento por etapas, el acoplamiento del protn completa una red de una molcula que puede ser descubierta. Fig. 17.7 muestra el protn desacoplado, espectro C de acetato de n-butil. Hay seis resonancias de carbonos. El desplazamiento qumico de estas lneas C les permite que se les asigne. La seal del carbonilo de carbn es de167 ppm, tpico para carbonilos ester. El

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carbn CH2-O es localizado a 64 ppm y los tres restantes carbonos de alquilo estn entre 35 y 10 ppm. Fig. 17.7 (d) muestra el DEPT-135 resultados. Este es llamado un espectro de carbn editado. Solo los carbonos protonados responden por lo que el disolvente y picos cuaternarios estn ausentes. El nmero de protones unido a un tomo de carbn determina la fase del pico del carbono. Los carbonos CH3 y CH dan una seal de fase positiva, mientras el carbn C H2 da un pico con fase negativa. Este experimento es mucho ms sensible que el experimento estndar C debido a un efecto llamado transferencia de polarizacin. Una variacin del experimento, llamado DEPT-90, los carbonos solo dan picos para C-H. Con estos tres experimentos, el nmero y tipo de carbn en una molcula puede ser determinado. EXPERIMENTOS BIDIMENSIONALES Bidimensionales experimentos proporcionan un eficiente significado de la determinacin de relaciones de acoplamiento entre tomos en una molcula. Un experimento bidimensional involucra la creacin y observacin de un dominio de un segundo dominio de tiempo, que empieza un segundo dominio de frecuencia despus de la transformacin de Fourier. Esto se hace mediante la recoleccin de una serie de FIDs, como se muestra en Fig. 17.8. Estos FIDs se adquieren despus de un par de pulsos que estn separados por un tiempo de retardo. Los experimentos bidimensionales ms complicados pueden implicar ms de dos pulsaciones y ms de un tiempo de retardo. El tiempo de retardo entra las pulsaciones es llamado el tiempo de evolucin. El tiempo de evolucin aumenta sistemticamente en cada sucesiva FID. Por lo tanto, cada nueva FID representa una nueva imagen de la evolucin del acoplamiento en la molcula. Despus de todo el FIDs ha sido la transformada de Fourier, el dato consiste en una serie de espectros en el cual la amplitud y fase de un cambio mximo en funcin de la cantidad de tiempo que el acoplamiento se le ha permitido evolucionar. Una nueva serie de FIDs es ahora construida teniendo un punto de cada uno de los espectros, como se muestra en la figura 17.8 la transformada de Furier de este FIDs produce un espectro bidimensional, como se muestra en la figura 17.8 como un contorno de terreno. Ncleos que comparten un acoplamiento-J produce un pico de correlacin. Este proceso puede ser usado para observar varios fenmenos diferentes que pueden ocurrir durante el tiempo de evolucin. Intercambio qumico, acoplamiento-J, acoplamiento (atraves del espacio) dipolar, y recientemente la difusin molecular (14) han sido todos usados para generar espectros en 2 dimensiones. Figura 17.9 (a) muestra una espectroscopia de correlacin (COSY) espectro de la regin aliftica de acetato de n-butilo. El COSY resulta de una muestra de contorno de terreno. El cual consiste de un sistema coordenado X-Y donde los ejes X y Y representa el cambio qumico. Los picos diagonales (donde X = Y) representa simplemente el dato de un espectro unidimensional y no contiene informacin de acoplamiento.
Figura 17.7 Anlisis de Acetato de n-butilo (a) el espectro de protn. Las intensidades integradas de pico aparecen debajo de cada pico. TMS es la referencia. Las letras minsculas marcan los picos asignados. (b) el espectro del protn de acetato de n-butilo con desacoplamiento homonuclear aplicado a 1.6 (la figura continua en la siguiente pagina)

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Figura 17.7 (c) El espectro C de acetato n-butil en CDCL3. El desacoplamiento del protn de banda ancha produce una sola line de carbn por cada tomo. TMS es la referencia. El pico de CDCl3 est a 77 ppm. Las letras en minscula marcan las asignaciones de cada pico. (d) el espectro DEPT-135 del acetato n-butil. Los carbonos CH3 y CH producen picos positivos y

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carbonos CH2 picos negativos.

Cada par simtrico de picos no diagonales tienen coordenadas de dos protones que comparten un acoplamiento. Tales picos son llamados correlaciones. En este espectro se muestran tres acoplamientos alquilo mostrados a lo largo de la cadena. Variaciones de los

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COSY experimentan estn disponibles para observar las mas pequeas, acoplamientos de largo alcance. Una segunda rutina del espectro doble dimensional es mostrada en la Fig. 17.9 (b). Este es un desplazamiento qumico de protn carbono, en el espectro de correlacin, conocido como el espectro de correlacin heteronuclear. En este espectro, cada pico de correlacin tiene una coordenada-x del desplazamiento qumico de un tomo de carbono y una coordenada-y del desplazamiento qumico de protones que estn directamente enlazados al carbono. En este punto de la determinacin de la estructura desconocida, todos los tomos de carbono y protones en la molcula son conocidos. Los fragmentos principales de la molcula son tambin conocidos. Usando el espectro COSY, por ejemplo, el enlace de la cadena del n-butil ha sido trazada claramente. Los dos fragmentos resultantes de la cadena pueden ahora ser conectados usando enlaces de largo alcance en experimentos de acoplamiento. La Figura 17.9 (c ) muestra una porcin del espectro de correlacin de largo alcance protn-carbono. Los picos de correlacin en este espectro se deben a la larga distancia del acoplamiento protn-carbono (COLOC). La figura est marcada para mostrar el acoplamiento de larga distancia de los protones de acetato de metilo al carbono carbonilo y de largo alcance de acoplamiento de los CH2-O protones al carbono carbonilo. Estos datos enlazan firmemente ambas porciones alquilo de cada molcula a la otra por medio del carbono carbonilo. Los datos del enlace de largo alcance de este tipo son a menudo la clave para resolver problemas estructurales.
Fig. 17.8. La generacin de un espectro bidimensional. (a) Un segundo dominio de tiempo es creado observando una serie de FIDs. (b) Cuando estos FIDs son transformado por Fourier. (c) El segundo dominio de tiempo FIDs son creados mediante la adopcin de un punto de cada uno de los espectros. (d) Cuando todo el segundo dominio de tiempo FIDs son transformado, los resultados de espectro bidimensional. Un grfico de contorno se muestra.

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Los espectrmetros modernos son equipados para realizar experimentos de correlacin de protn-carbn en el modo inverso (15). El mtodo que usa deteccin de protones para obtener correlaciones a la baja sensibilidad del ncleo en una molcula, tal como carbn o nitrgeno. Alta sensibilidad este mtodo de eleccin se hace cuando cantidades muy pequeas de muestra estn disponibles, este es el caso con muchos componentes biolgicos.
Figura 17.9 Anlisis de Acetato de n-butilo. (a) espectro proton-proton de correlacin de cambio qumico. (b) espectro proton-carbon de correlacin de cambio qumico. (c) espectro proton-carbon de largo alcance de correlacin de cambio qumico. Solo la regin carbonilo es mostrada.

ESPECTRO DE EFECTO OVERHAUSER NUCLEAR Es posible detectar tomos que estn uno cerca al otro en el espacio, aunque el acoplamiento-J es pequeo o inexistente. Una interaccin dipolo-dipolo entre 2 tomos uno cerca al otro puede ser usado para producir picos de correlacin unidimensional o bidimensional. El efecto es limitado a distancias interatmicas cortas, usualmente 4 Armstrong o menos. Un ejemplo del uso de EON est dado en la figura 17.10, que muestra diferentes espectros EON del naftaleno trisustituido. En esta molcula hay dos dobletes en el espectro del protn. Aunque es claro que los dos dobletes pueden ser asignados a los protones 1 y 4, no es evidente cual es cual. Solamente el protn 4 est suficientemente 17

cerrado al protn 5 para mostrar un EON. En la diferencia experimental EON, el protn 5 es irradiado con un campo de poder bajo inmediatamente despus de la adquisicin. Cualquier protn de acoplamiento dipolar a este protn mostrara una mejor seal intensa. Cuando el espectro de control es extrado de un espectro pre irradiado la mayora de los picos son cancelados y solamente los mejores picos permanecen. En muchos casos la seal mejorada observada es menos del 20%, posiblemente menos que pocas decimas del porcentaje. El espectro de diferencia es considerablemente simplificado, y es en gran parte independientemente del nmero de protones diferentes con cambios qumicos similares. As, el espectro de diferencia EON es una poderosa herramienta para realizar asignaciones de protones, simplificando espectros complicados, y diferenciando entre posibles soluciones a problemas estructurales. Una excelente discusin de de la tcnica se puede encontrara en la referencia 7. Figura 17.10 naftaleno trisustituido. (a) El control del espectro muestra todas las resonancias de los protones. (b) Espectro de diferencia EON. El experimento implica pre irradiacin de protn 5 a 8.5ppm. El espectro de diferencia permite la inequvoca distincin del protn 4 del protn 1.

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CUANTITATIVO Adems de su papel en la determinacin de la estructura, NMR puede ser usado extensamente aplicado en qumica analtica. La tcnica es no destructiva, cuantitativa, y altamente selectiva para cada isotopo nuclear como la frecuencia de precisin de los diferentes isotopos estn separados por muchos megahertz. El mejor mtodo de trabajo con componentes puros, pero las mezclas tambin se pueden utilizar. La dispersin del cambio qumico a menudo hace para utilizar slo un tomo o grupo de tomos en una molcula con fines cuantitativos. EL ESPECTRO NMR CUANTITATIVO La intensidad de la seal NMR es directamente proporcional al nmero de ncleos en la sonda, haciendo un anlisis cuantitativo directo. Al igual que cualquier tcnica analtica, la cuantificacin tiene requisitos ms estrictos controles ms estrechos y exige que el anlisis cualitativo. Esto incluye una muestra-dependiente y consideracin instrumentacin-dependiente. La baja sensibilidad de la tcnica, casi siempre una seal promedio, la que conlleva sus propios requisitos. Un mtodo cuantitativo slido debe tener en cuenta el tiempo de relajacin longitudinal t1 t1, es una medida del tiempo requerido para el vector de magnetizacin neto vuelva al equilibrio despus de un pulso. Este es un proceso exponencial. Tabla 17.4 muestra el porcentaje de recuperacin de la magnetizacin de un pulso en funcin de t1. As, despus de 5 periodos t1, el vector de magnetizacin neto se ha recuperado un 99.3% de su valor de equilibrio. Sin embarro, si 2 pulsos de 90 son separados por un solo tiempo t1, el segundo generara una seal de solo 63.2% de la intensidad de la primera. Para evitar esta situacin claramente no cuantitativa, la tcnica cuantitativa estndar usada es un tiempo de espera o reciclar 5 tiempos ms largos en los ncleos medidos. t1 puede ser medido por una variedad de tcnicas. La estimaciones de t1 estn disponibles en la (esta palabra no la entend en la copias). A veces es posible aadir los reactivos de relajacin paramagnticos Cr+++ para disminuir t1 (a menudo por un orden de magnitud) y cort tiempo de anlisis. El NOE discutido previamente debe ser suprimido en el anlisis donde se trata la disociacin. El NOE ocurre solo en durante el periodo de desacoplamiento, incrementando al mximo despus de 5 periodos t1. Una tcnica simple llamada inversacerrada suprime el desacoplamiento el NOE usando un tiempo de espera de 5 periodos t1 con el desacoplador fuera y obteniendo un FID con el desacoplador. La estandarizacin de los resultados analticos se logra de la misma manera de otras tcnicas instrumentales. Adems de la exigencia de alta pureza, el NMR estndar debe producir una seal que puede distinguirse una muestra de impurezas. Esta puede ser interna, disolviendo en la misma solucin como el anlisis, o externa, usualmente contiene un tubo axila concentrado. Una curva de calibracin puede ser preparada con una serie de concentraciones de un estndar externo. La concentracin de un analito debe ser determinada aadiendo una cantidad conocida de un estndar puro a volumen medido de una solucin con una concentracin desconocida de analito. El nmero de ncleos equivalentes representados por cada pico en la muestra y los picos estndar deben ser tomados en cuenta. 19

Tabla 17.4 la recuperacin de magnetizacin de un pulse

Numero de periodos 1 2 3 4 5

Recuperacin 63.2% 86.5% 95.0% 98.2% 99.3%

El mtodo de adicin estndar trabaja bien en una NMR cuantitativa. Cantidades exactamente conocidas del analito son aadidas a la solucin de concentracin de analito desconocida. Una representacin grafica de los datos confirma que la respuesta lineal del analito en el intervalo de concentracin utilizado, y permite la extrapolacin a la concentracin original del analito. La pureza de un compuesto conocido puede ser determinada por NMR, a condicin de que en una muestra pura no esta disponible superposicin de la seal. Cantidades exactamente pesadas de la muestra y el estndar se colocan en la solucin y las reas de los picos son medidas. Con muestras replicadas y bastantes mediciones, el mtodo puede determinar purezas de 0.1% con una desviacin estndar tpica. La composicin de mezclas puede ser determinada de una manera sencilla si cada componente de la mezcla tiene picos de NMR reconocidos.

APLICACIONES
La espectroscopia NMR ha sido aplicada a una muy amplia variedad de problemas qumicos. En un ao tpico se pueden ver cerca de 4000 publicaciones de tcnicas y aplicaciones en NMR, junto con mas de 100 libros y artculos de revisin. Semestralmente aparecen artculos en Analytical Chemistry, proporcionando un punto de partida en aplicaciones particulares. Las mejoras constantes en la tcnica de NMR hacen que seguramente se ira adaptando a nuevos problemas en la estructura, reactividad, y dinmicas de los compuestos orgnicos e inorgnicos. El tema general de la prueba de estructura incluye aplicaciones como la conformacin de las estructuras de los productos de reaccin, diferenciacin de los ismeros, la determinacin de la estereoqumica y anlisis conformacional. El logro ms importante en esta rea ha sido el desarrollo de tcnicas para determinar la estructura de biomolculas de alto peso molecular, tales como las protenas y ADN en solucin. Estas molculas complejas con cientos de tomos y espectros altamente superpuestos, pueden ahora ser estudiados usando una combinacin de dos y tres dimensiones con muestras experimentales isotpicamente marcadas. La distancia de los limites interproton obtenida a travs de experimentos NOE son utilizados por los programas de modelado molecular para crear una estructura tridimensional. Tales estructuras son comparables a estructuras derivadas de estudios de difraccin de rayos X en cristales nicos. Algunos de los mas interesantes descubrimientos de la estructura de los polmeros ha venido de los estudios donde NMR 20

ha sido usado para identificar y cuantificar las caractersticas estructurales tales como distribuciones de secuencia de monmeros, el grado de ramificacin y reticulacin, cristalinidad, movimientos moleculares, conformacin, tacticidad, y la composicin de copolmero (17). Cada una de estas propiedades puede entonces ser relacionadas con las propiedades a granel del polmero. Como un ejemplo, la fig. 17,11 muestra un espectro de carbono cuantificado de un copolmero mixto de meta-paracresol y formaldehdo-novolak usado en foto resistencia para la fabricacin de semiconductores fotolitogrficos (18). El anlisis de la regin del puente de metileno del espectro permite el clculo de los tipos y cantidades del puente en la resina. Estos datos pueden ser directamente relacionados con importantes propiedades fsicas tales como la resistencia photospeed.
Figura 17.11 Espectros del carbn cuantitativos de la regin del puente de metileno de una mescla meta- y para cresol-formaldehido novalak. La estructura de abajo indica algunas de las estructuras de puente potenciales en el polmero. Los picos DMSO-d6 estn a la izquierda.

Mucho de lo que se conoce en la qumica orgnica ha sido posible gracias a estudios de RMN (19). La existencia de el anillo resonante in las estructuras aromticas es demostrada por el cambio en el desplazamiento qumico de los protones del anillo. La estructuras que estabilizan los carbonos localizados se han demostrado por los fuertes efectos de deslumbramiento en el espectro del 13C. La formacin de pares de iones de contacto y el equilibrio entre ellos y los pares de iones separados por disolvente puede ser estudiado por los espectros de RMN de los cationes de metales alcalinos. Interacciones de radicales libres en las molculas orgnicas se han estudiado qumicamente inducida por la polarizacin nuclear dinmica (CIDNIP). Ambos componentes de una mezcla racmica producir espectros MNR idnticos. Es posible producir diferentes espectros de cada enantimero mediante la creacin de especies diastereomricas. 21

Tres mtodos experimentales estn disponibles (20). Los diasteremeros pueden ser producidos por derivatizacin con un reactivo quiral. Aductos diastereomricos pueden formarse mediante el uso de disolventes quirales. Complejos diastereomricos de solvatacin pueden formarse mediante el uso de regentes de desplazamiento quiral. Como un ejemplo, la adicin gradual de un reactivo de desplazamiento quiral lantnido a una mezcla racmica se muestra en la fig. 17.12. La pureza enantiomrica de la mezcla puede ser calculada a partir de estos datos. NMR en los sistemas de equilibrio NMR ofrece un nico mtodo para el estudio de sistemas qumicos en equilibrio dinmico. Reacciones y procesos con constante de velocidad que van desde 10-2 seg-1 hasta 108 seg1 puede ser estudiada. Entra las muchas posible aplicaciones son las siguientes: reacciones qumicas, reordenamientos moleculares, enlace de valencia tautomera, cambios comformacionales, rotacin sobre los enlaces, inversiones de especies piramidales, formacin de especies solvatadas, interacciones de unin del ligando, unin enzima-substrato, y desnaturalizacin de protenas.
Figure. 17.12 Adicin gradual de un reactivo de desplazamiento quiral para una mezcla racmica. Un enantiomero reacciona con el aducto para formar un aducto diastereomrica.

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Figura 17.13 Series de espectros siguiendo el curso de una reaccin. Estructuras y 13C lneas de partida del material y del producto se dan a la izquierda. La reaccin es la epimerizacin enzimtica de ibuprofeno en una suspensin mitocondrial.

Un ejemplo del simple uso del NMR es un sistema dinmico es ilustrado en la figura 17.13. La velocidad de una reaccin qumica puede ser vista por la medida de concentracin de reactivos y productos como funcin del tiempo. En este caso (21) la enzima remueve un tomo de deuterio y esta es reemplazado por un tomo de hidrogeno o un 13C-etiquetado el sitio en ibuprofeno es seguido por 13C NMR. Este estudio muestra 3 fenmenos tiles: el sitio especifico de etiquetado, en la que el ncleo NMR-activo es sintticamente incorporado dentro de la molcula haciendo un sitio visible para el espectrmetro; el efecto del isotopo de deuterio que desplaza la resonancia de C-D lejos de la resonancia de C-H; y el acoplamiento C-D. La tripleta 1:1:1 es el resultado del acoplamiento entre 13C y 2H, con el spin 1. La unin de ligantes como pptidos con sitios activos de molculas largas como protenas, enzimas, membranas, y clulas receptoras pueden ser estudiadas por NMR. Los tipos de cambio y las uniones constantes pueden ser determinados por estudios de los tipo de relajacin y los cambios de qumicos del los ligantes. La estructura de los ligantes unidos y el sitio de unin pueden ser estudiados a travs de transferencia de NOE (22). La NOE que se acumula entre los protones, que se acercan uno al otro en el estado ligado se transfiere al ligando a la disociacin del complejo. Las lneas de NMR afilados del ligando libre permitir el estudio indirecto de la geometra de los complejos enlazados que son demasiado grandes para estudios convencionales de NMR. Una de las aplicaciones interesantes de NMR es en el estudio de sistemas sometidos a cambios qumicos. Los ncleos involucrados no necesitan ser participantes en la reaccin qumica o incluso una reorganizacin, ellos necesitan ser capaces de existir en un entorno magnticamente distinto. La apariencia de los espectros depende de la concentracin de intercambio de especies, velocidad de intercambio, y la velocidad de relajacin del sitio de intercambio. Para un rpido intercambio de especies, el espectro consiste en una resonancia individual en la media de los dos desplazamientos qumicos, convenientemente ponderados si las concentraciones de las dos especies no son iguales. 23

El Intercambiando lento de las especies produce dos seales distinta. Como la tasa lenta de intercambio aumenta, las resonancias se van acercando hasta que ellas se fusionan. En el punto de fusin la tasa de intercambio es 2.22 veces la diferencia del cambio qumico enter los sitios en la ausencia de intercambio. Este fenmeno es sujeto a anlisis cuantitativos, llamados anlisis completos de lnea de forma. El ancho de lnea de un pico de intercambio ampliado es inversamente proporcional a la vida til del ncleo en sitios de intercambio. Un numero de espectro es obtenido a diferentes temperaturas, especialmente a la temperatura de fusin, y si es posible, a la temperatura cuando el intercambio es lento. La entalpia libre de activacin del proceso es relativamente fcil de calcular. La energa de activacin de Arrhenius tambin puede ser obtenida, aunque el trabajo consume ms tiempo. Los sistemas de intercambio pueden con frecuencia ser identificados usando la transferencia experimental de saturacin. Los protones en un cambio qumico particular en una forma qumica son parcialmente saturados por irradiacin con un campo RF de poder bajo. En un intercambio para una nueva forma qumica los protones conservan esta saturacin. Cuando un espectro de control no irradiado es restado de un espectro irradiado, todas las seales no intercambiadas son canceladas. Los protones que tienen intercambio producen picos negativos. La figura 17.14 ilustra el uso de la transferencia experimental de saturacin para demostrar el equilibrio tautomerico entre cetona y hemicetal de un acido benzoico orto-cetona. Figura 17.14 Demostracin del equilibrio tautomerico usando la transferencia experimental de saturacin. El espectro de control muestra todas las resonancias en la parte superior. El espectro diferencial del fondo es obtenido por sustrayendo del espectro de control de un espectro per irradiado. La saturacin es transferida de orto protones en los anillos halogenados de uno tautomero (7.05ppm) al mismo protn en el otro tautomero (7.3ppm).

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TUERCAS Y PERNOS
COSTOS RELATIVOS Espectrofotmetros NMR pueden ser costar desde $50,000 hasta $1,000,000. El principal factor que controla el precio de compra es la fuerza del campo magnetico. Una gua aproximada del precio de compra es $750 a $1000 por MHz; eso es lo que un sistema a 400 MHz puede costar entre $300,000 y $400,000. Solidos Imgenes Gradientes Sondas Central de informacion Cambiador automatico de muestras mantenimiento Criogenos $100K $100K $50K $10-30K $5-$50K $40K 5-10% del precio de compra al ao $1-$3K por ao

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