Cromatografa en capa fina Objetivo Por medio de un mtodo de separacin de pigmentos se conocern las diferentes tcnicas de la cromatografa Marco

terico La cromatografa es una tcnica que se basa en la separacin de los componentes de una mezcla debido a la influencia de dos efectos contrapuestos los cuales son: Retencin: Es el efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un slido o un lquido anclado a un soporte slido. Desplazamiento: Es el efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase mvil, que puede ser un lquido o un gas. Cuando ocurre una migracin de los componentes de una mezcla a lo largo de la fase estacionaria, impulsados por la fase mvil, es conocido con el nombre de elucin. La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionara, mientras que la mvil atraviesa el sistema desplazando a los componentes de la mezcla a distinta velocidad, dependiendo de la magnitud de sus interacciones relativas con ambas fases. Las dos fases se eligen de forma que los componentes de la muestra se distribuyan de modo distinto entre la fase mvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de la fase mvil; por el contrario los componentes que se unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan en bandas o zonas discretas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente. Hay diferentes tcnicas de cromatografa; estas son: cromatografa en papel, en columna en columna, en gases y la que se trabajar en este laboratorio que es la cromatografa de capa fina Cromatografa en capa fina En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascender, por capilaridad, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta, produciendo "manchas" de los componentes. En la cromatografa en capa fina, el grado de elucin de las sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado, El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte

rgido, que pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister. Los tamaos de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5x2 cm. Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirn otras tcnicas de revelado. Eluyentes ms comunes para cromatografa en capa fina ter de petrleo - cloruro de metileno n-hexano - acetato de etilo ciclohexano - acetona ' tolueno - iso-propanol dietil-ter - etanol t-butil-ter - metanol cloroformo - cido actico Reveladores ms comunes para cromatografa en capa fina Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse mediante: Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a F366), el nmero que aparece como subndice nos indica Ia longitud de onda de excitacin del indicador utilizado" La introduccin de la placa en vapores de yodo El roco con una solucin de agua/H2SO4 1:1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero. hasta carbonizar los compuestos. Adsorbentes ms comunes para cromatografa en capa fina. Gel de slice (se utiliza en el 80% de las separaciones) Oxido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica) Celulosa (Nativa o micro-cristalina) Poliamidas

Rf en la cromatografa de capa fina

Rf es el registro, es una relacin de distancias, y se define como: p1 = (a) distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicacin (b) distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.

fjfjfjfjffj

frente del eluyente

muestra

punto de aplicacin

Toxicidad de los reactivos Tolueno acetato de etilo 8:2: LD50 (oral en ratas): 11.3 ml/Kg, 5620 mg/Kg LC50 (inhalado en ratas): 1600 ppm/8 h Niveles de irritacin a ojos en humanos: 400 ppm RQ: 5000 IDLH : 10000 ppm Mxico: CPT: 1400 mg/m3 (400 ppm ) Estados Unidos: TLV TWA: 1400 mg/m3 (400 ppm ) Reino Unido: Periodos largos: 1400 mg/m3 (400 ppm) Francia: VME: 1400 mg/m3 (400 ppm) Alemania: MAK: 1400 mg/m3 (400 ppm) Suecia: Periodos cortos: 1500 mg/m3 (400 ppm) Periodos largos: 700 mg/m3 (200 ppm) Hexano acetona 7:3 RQ: 1 IDLH: 5000 ppm Mxico: CPT: 360 mg/m3 (100 ppm). Estados Unidos: TLV TWA: 180 mg/m3 (50 ppm ) Reino Unido: Periodos largos: 360 mg/m3 (100 ppm) Periodos cortos:450 mg/m3 (125 ppm) Francia: VME: 50 mg/m3 (170 ppm) Alemania: MAK:180 mg/m3 (50 ppm) Suecia: Periodos cortos: 250 mg/m3 (75 ppm) Periodos largos: 180 mg/m3 (50 ppm) Preparacin de cromatoplacas y capilares

Se pueden utilizar cromatofolios ya preparados (comerciales), o bien, preparar las cromatoplacas en el laboratorio.(figura 1) Para preparar las cromatoplacas, se introducen dos portaobjetos juntos, limpios y secos, en una suspensin de gel de slice al 35% en acetato de etilo, se dejan secar al aire y se separan con cuidado. Se preparan 6 cromatoplacas y se ordenan sobre una hoja de papel. Para aplicar las soluciones a las cromatoplacas ulilice capilares, que previamente deber ser estirados en la flama del mechero (flama pequea), con el fin de que tengan el dimetro adecuado. Para mayor claridad de los resultados, incluya en su informe los dibujos de las cromatoplacas a tamao natural

Procedimiento Separacin de la muestra

Figura 2

Figura 3

Figura 4

Figura 5

Figura 6

Figura 2. Preparar placa de tamao adecuado Figura 3. Disolver una pequea cantidad de la muestra y mediante un capilar de vidrio pinchar en la parte inferior de la placa Figura 4. Introducir la placa en un beaker, el beaker debe estar saturado en el vapor del disolvente, por lo que debe contener el papel filtro. Figura 5. Cerrar el recipiente y esperar a que el lquido suba por capilaridad Figura 6. Revelar la placa

Bibliografa
Quirored, Manual de laboratorio, [disponible en lnea] recuperado el da 5 de septiembre del 2013 http://www.ugr.es/~quiored/lab/oper_bas/crom.htm Quimica orgnica, cromatografa de capa fina, [disponible en lnea] recuperado el da 5 de septiembre del 2013 http://organica1.org/1311/1311_6.pdf Tcnicas cromatogrfica, [disponible en lnea] recuperado el da 5 de septiembre del 2013 en http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica%20ambiental/Tema6.p df