Les modalits de rplication de la molcule dADN

Problme : chaque cycle cellulaire, la quantit d'ADN est divise par 2 dans la cellule au cours de la mitose. Un processus compensatoire, nomm rplication, se droule durant la phase S de l'interphase.

Activits
I. Expriences historiques - A partir du texte de Meselson et Stahl publi en 1958 (fichier pdf), rpondre au QCM. - Sous forme de schmas et en utilisant des couleurs diffrentes (bleu pour un brin ancien et rouge pour un brin nouveau), proposer deux hypothses pour la rplication de l'ADN, une sur le mode conservatif et une sur le mode semi-conservatif - En sappuyant sur vos rponses au QCM, choisir une hypothse sur le mode de rplication de lADN et la justifier. - Validation de lhypothse retenue : Raliser une srie de schmas de la rplication de lADN qui rendent compte des observations de Taylor et qui valident lhypothse retenue Consignes : choisir un fragment dADN dune dizaine de bases. Utiliser une couleur diffrente pour la base azote radioactive (thymidine tritie) Prcision : il suffit quun des 2 brins dune molcule dADN soit radioactif pour que la molcule dADN soit radioactive II. Visualisation molculaire - Ouvrir le fichier de lADN polymrase dans Rastop et faire apparatre les diffrentes chaines de manire diffrente. Distinguer les parties nucliques et les parties protiques. Faire un schma montrant les relations entre lenzyme (chaine A), la molcule dADN mre (chaines T et P) et le nouveau brin dADN (chaine D) Bilan : Rpondre au problme pos en une deux phrases

Donnes
- Document 1 : expriences de Meselson et Stahl

- Document 2 : exprience de Taylor

- Rastop + fiche technique - Fichier adnpolym.pdb (identifiant 1BPX)

Document 1 : expriences de Meselson et Stahl 1. Dans lhypothse propose par Watson et Crick pour la duplication de lADN : a. A chaque division, les deux anciens brins dADN restent assembls et une molcule entirement nouvelle est synthtise b. A chaque division les deux anciens brins dADN se sparent et sont associs chacun un nouveau brin pour former une nouvelle molcule hybride c. A chaque division, des fragments des anciens brins dADN sont associs des nouveaux pour former une nouvelle molcule dADN 2. Pour distinguer les brins dADN de la molcule initiale des brins dADN nouvellement forms, Meselson et Stahl utilisent : a. Des colorations diffrentes b. Des diffrences de densit c. Des marqueurs radioactifs 3. Meselson et Stahl travaillent sur lADN issu : a. De champignons microscopiques b. Dun singe antropomorphe c. Dune bactrie d. Dun protozoaire e. De la fille de Meselson 4. Pour diffrencier le brin ancien du brin nouveau de la molcule dADN, Meselson et Stahl utilisent un isotope : a. Du carbone b. Du fer c. De lor d. De lazote e. De loxygne 5. Pour sparer les ADN de diffrentes densits, Meselson et Stahl procdent par : a. Sdimentation b. Distillation c. Explosion d. Centrifugation e. Fusion nuclaire 6. Les molcules dADN utilises par Meselson et Stahl sont issues : a. De cellules bactriennes cultives pendant 14 gnrations dans du 14N b. De cellules bactriennes cultives pendant 1 gnration dans du 15N c. De cellules bactriennes cultives pendant 14 gnrations dans du 15N d. De cellules ufs cultives pendant 14 gnrations dans du 15N e. De cellules bactriennes cultives pendant 14 gnrations dans du 15O 7. Figure 4 : les rsultats obtenus par Meselson et Stahl montrent que les cellules bactriennes de la gnration 0 contiennent 100% dADN lourd. a. La gnration 1 contient 100% dADN lger b. La gnration 1 contient 100% dADN intermdiaire c. La gnration 1 contient 50% dADN lger et 50% dADN lourd d. La gnration 2 (1.9 sur le schma) contient 100% dADN intermdiaire e. La gnration 2 (1.9 sur le schma) contient 50% dADN lourd et 50% dADN intermdiaire f. La gnration 2 (1.9 sur le schma) contient 50% dADN lger et 50% dADN intermdiaire g. La gnration 3 contient 50% dADN lger et 50% dADN intermdiaire h. La gnration 3 contient 25% dADN lger et 75% dADN intermdiaire i. La gnration 3 contient 75% dADN lger et 25% dADN intermdiaire

Document 2 : Exprience historique de Taylor En 1957, quatre ans aprs la dcouverte de lADN, Taylor met en culture de jeunes plantules dans un milieu nutritif contenant un prcurseur marqu de lADN. Ce prcurseur est le nuclotide T de lADN dans lequel certains atomes dhydrogne ont t remplacs par lisotope radioactif de cet lment, le tritium (3H). Lorsque les cellules rpliquent leurs molcules dADN, elles incorporent ce prcurseur et lADN forme devient radioactif. Cette molcule est alors dtectable par la technique dautoradiographie : les cellules en culture sont crass et mises en contact avec un film photographique. Le rayonnement mis par les molcules radioactives impressionne le film formant ainsi une tache noire qui rvle la position de des molcules dans la cellule. Les plantules sont cultives pendant la dure dun cycle cellulaire sur ce milieu nutritif (milieu chaud ). Taylor prlve alors des racines et ralise une premire autoradiographie. Les plantules sont ensuite transfres dans un second milieu non radioactif (milieu froid ). Une seconde autoradiographie est ralise aprs un second cycle cellulaire puis une troisime aprs un troisime cycle cellulaire.