www.anmat.gov.ar/fna/consulta _publica/VITAMINA_A.doc http://www.accessdata.fda.gov/s cripts/cdrh/cfdocs/cfCFR/CFRS earch.cfm?fr=184.1444 maltodextrin http://www.fda.gov/Food/FoodI ngredientsPackaging/Generally RecognizedasSafeGRAS/GRAS SubstancesSCOGSDatabase/uc m261263.

htm dextrose VITAMINA A

H3C CH3 CH3 CH3 O CH3 R

Se emplean tambin las Unidades Internacionales (UI) para expresar la actividad de la Vitamina A. 1 UI de Vitamina A equivale a la actividad de 0,300 g de todo-(E)-retinol . La actividad de los otros steres de retinol se calcula estequiomtricamente, de modo que 1 UI de Vitamina A equivale a la actividad de: 0,344 g de acetato de todo-(E)-retinol, 0,359 g de propionato de todo-(E)-retinol, 0,550 g de palmitato de todo-(E)-retinol, 1 mg de equivalente de retinol corresponde a 3333 UI. Caracteres generales - El acetato de retinol se presenta como cristales de color amarillo plido, con un punto de fusin de aproximadamente 60 C. Cuando funde, el acetato de retinol, tiende a formar una masa sobreenfriada. El propionato de retinol se presenta como un lquido oleoso pardo rojizo. El palmitato de retinol es un slido lipoideo amarillo claro, o si se funde, un lquido oleoso amarillo, con un punto de fusin de aproximadamente 26 C. Todos los steres de retinol son solubles o parcialmente solubles en etanol, miscibles con solventes orgnicos y prcticamente insolubles en agua. La Vitamina A y sus steres son muy sensibles a la accin del aire, luz, calor y los agentes oxidantes y cidos. Sustancia de referencia retinol SR-FA. steres de

R=H R=CO-CH3 R=CO-C2H5 R=CO-C15H31

C20H30O C22H32O2 C23H34O2 C36H60O2

PM: 286,5 PM: 328,5 PM: 342,5 PM: 524,9

Sinonimia - Palmitato de Retinol. Definicin - La Vitamina A refiere a un nmero de sustancias de estructura muy similar (incluyendo los ismeros (Z), que se encuentran en tejidos animales y que poseen actividad semejante). La sustancia principal y biolgicamente ms activa es aquella que posee todos sus enlaces en posicin (E): todo-(E)-3,7-dimetil-9-(2,6,6-trimetilciclohex1-enil)nona-2,4,6,8-tetra-en-1-ol (C20H30O). La vitamina A se emplea en forma de steres tales como acetato, propionato y palmitato. La expresin ster de retinol sinttico se refiere a un ster de retinol sinttico (acetato, propionato o palmitato) o una mezcla de steres de retinol sinttico. La actividad de la Vitamina A se debe expresar en equivalentes de retinol (ER). 1 mg de ER corresponde a la actividad de 1 mg de todo-(E)retinol. La actividad de los otros steres de retinol se calcula estequiomtricamente, de modo que 1 mg de ER de Vitamina A equivale a la actividad de: 1,147 mg de acetato de todo-(E)-retinol, 1,195 mg de propionato de todo-(E)-retinol, 1,832 mg de palmitato de todo-(E)-retinol.

CONSERVACIN En envases inactnicos de cierre perfecto. ENSAYOS [NOTA: efectuar la valoracin y todos los ensayos tan rpidamente como sea posible, evitando la exposicin a la luz actnica y al aire, a los agentes oxidantes, a los catalizadores de oxidacin, como por ej., cobre, hierro), a los cidos y al calor. Identificacin Emplear la siguiente tcnica cromatogrfica: Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromatografa) recubierta con gel de slice para cromatografa con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm de espesor. Fase mvil - Ciclohexano y ter (80:20). Solucin estndar - Preparar una solucin de aproximadamente 0,01 mg de steres de retinol SR-FA por l (3,3 UI de cada ster por l) en ciclohexano. Estabilizar con una solucin de butilhidroxitolueno al 0,1 %.

Solucin muestra - Preparar una solucin de aproximadamente 3,3 UI de Vitamina A por l en ciclohexano. Estabilizar con una solucin de butilhidroxitolueno al 0,1 %. Procedimiento - Aplicar por separado sobre la placa 3 l de Solucin muestra y 3 l de Solucin estndar. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la placa de la cmara, marcar el frente del solvente y dejar secar al aire. Examinar la placa bajo luz ultravioleta a 254 nm: el cromatograma obtenido a partir de la Solucin estndar debe presentar las manchas individuales de los steres correspondientes. El orden de migracin debe ser: acetato, propionato y palmitato de retinol. La composicin de la Solucin muestra se debe confirmar por la correspondencia de la o las manchas principales obtenidas a partir de la Solucin estndar. Lmite de retinol Fase estacionaria y Fase mvil - Proceder segn se indica en Identificacin. Solucin muestra - Preparar una solucin de aproximadamente 330 UI de Vitamina A por l en ciclohexano. Estabilizar con una solucin de butilhidroxitolueno al 0,1 %. Solucin estndar - Agitar 1 ml de la Solucin muestra con 20 ml de solucin de hidrxido de tetrabutilamonio 0,1 M en alcohol isoproplico, durante 2 minutos y diluir a 100 ml con ciclohexano. Estabilizar con una solucin de butilhidroxitolueno al 0,1 %. Procedimiento - Aplicar por separado sobre la placa 3 l de Solucin muestra y 3 l de Solucin estndar. Dejar secal las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la placa de la cmara, marcar el frente del solvente y dejar secar al aire. Examinar la placa bajo luz ultravioleta a 254 nm: a excepcin de la mancha principal en el cromatograma obtenido a partir de la Solucin muestra, ninguna mancha debe ser ms intensa que la mancha principal obtenida con la Solucin estndar (1 %). [NOTA: en el cromatograma obtenido a partir de la Solucin estndar se debe observar slo trazas o no se debe observar ninguna mancha correspondiente al ster de retinol.] Sustancias relacionadas Determinar el mximo de absorcin de la solucin empleada en el ensayo Actividad (ver 470. Espectrofotometra ultravioleta y visible). La solucin debe presentar un mximo de absorcin

entre 325 y 327 nm. Medir las absorbancias A a 300, 350 y 370 nm y calcular la relacin A/A326 para cada longitud de onda: ninguna de las relaciones A/A326 debe ser mayor de: 0,593 a 300 nm. 0,537 a 350 nm, 0,142 a 370 nm. ACTIVIDAD Examinar por espectrofotometra de absorcin ultravioleta (ver 470. Espectrofotometra ultravioleta y visible). Pesar exactamente entre 25 y 100 mg de Vitamina A, disolver en 5 ml de pentano y diluir con alcohol isoproplico hasta una concentracin de 10 a 15 UI por ml. Determinar la absorbancia a la longitud de onda de mxima absorcin, aproximadamente 326 nm. Calcular la actividad de la Vitamina A en Unidades Internacionales por g por la frmula siguiente:

A326V 1.900 100 P

en la cual A326 es la absorbancia a 326 nm, P es el peso de Vitamina A en g, V es el volumen total al que ha sido diluida la Vitamina A para dar una concentracin de 10 a 15 UI por ml y 1.900 es el factor de conversin de la absorbancia especfica de los steres de retinol en Unidades Internacionales por g. ROTULADO En el rtulo se debe indicar el nmero de Unidades Internacionales por g y el nombre del ster o steres.