NUTRICIN MICROBIANA

Composicin qumica de Escherichia coli

Molcula
Macromolculas totales Protenas Polisacridos Lpidos ADN ARN

% del peso seco

96 55 5 9.1 3.1 20.5

Monmeros totales
Aminocidos y precursores Azcares y precursores

3
0.5 2

Nucletidos y precursores
Iones inorgnicos Total

0.5
1 100%

Macronutrientes en los medios de cultivo

Elemento
Carbono (C)

Forma encontrada en el medio ambiente

CO2, compuestos orgnicos

Forma qumica en los medios de cultivo

Glucosa, malato, acetato, piruvato, cientos de otros compuestos o en mezclas complejas (extracto de levadura, peptona y otros)

Hidrgeno (H)
Oxgeno (O) Nitrgeno (N)

H2O, compuestos orgnicos

H2O, O2, compuestos orgnicos NH3, NO3-, N2, compuestos orgnicos nitrogenados

H2O, compuestos orgnicos

H2O, O2, compuestos orgnicos Inorgnicos: NH4Cl, (NH4)2SO4, KNO3, N2 Orgnicos: Aminocidos, bases nitrogenadas de nucletidos y otros compuestos de nitrgeno

Macronutrientes en los medios de cultivo

Elemento
Fsforo (P) Azufre (S)

Forma encontrada en el medio ambiente

PO43H2S, compuestos orgnicos de S, metales (FeS, CuS, ZnS, NiS y otros)

Forma qumica en los medios de cultivo

KH2PO4, Na2HPO4 Na2SO4, Na2S2O3, Na2S, cistena u otros compuestos orgnicos con azufre

Potasio (K) Magnesio (Mg)

K+ en solucin o como sales de K Mg2+ en solucin o como sales de Mg

KCl, KH2PO4 MgCl2, Mg2SO4

Macronutrientes en los medios de cultivo

Elemento
Sodio (Na)

Forma encontrada en el medio ambiente

Na+ en solucin o como NaCl y otras sales de Na

Forma qumica en los medios de cultivo

NaCl

Calcio (Ca)

Ca2+ en solucin o como CaSO4 y otras sales de Ca Fe2+ o Fe3+ en solucin como FeS, Fe(OH), otras muchas sales de Fe

CaCO3, CaCl2

Fierro (Fe)

FeCl3, FeSO4 y otras soluciones de fierro (o Fe3+ EDTA, Fe2+ citrato)

Macronutrientes, el caso del hierro: siderforos

Los siderforos son molculas orgnicas capaces de quelar el hierro para su posterior interiorizacin a la clula.

Micronutrientes en los medios de cultivo

Elemento
Cobalto Cobre Manganeso

Funcin celular
Vitamina B12, transcarboxilasa Protenas, citocromo c oxidasa, SOD Activador enzimtico, SOD.

Molibdeno
Nquel Selenio Tungsteno Vanadio Zinc

Enzimas, nitrogenasa de molibdeno, nitrato reductasa.

Hidrogenasa, monxido de carbono deshidrogenasa. Hidrogenasas, aminocido seleniocistena. Formato deshidrogenasa Nitrogenasa de vanadio Anhidrasa carbnica, alcohol deshidrogenasa.

Factores de crecimiento
Vitamina
cido p-amino benzoico (PABA)
cido flico Biotina Niacina (cido nicotnico) Cobalamina (B12) Riboflavina cido pantotnico Tiamina (B1) Complejo B6 (piridoxal, piridoxamina) Grupo Vitamina K, quinonas

Funcin
Precursor del cido flico
Metabolismo de carbono, transferencia de grupos metilo Biosntesis de cido grasos, beta descarboxilaciones, fijacin de CO2 Precursor del NAD; transferencia de electrones en reacciones redox Reduccin y transferencia de fragmentos de un solo carbono. Precursor de FAD, FMN, transporte de electrones. Precursor de la CoA Alfa descarboxilaciones, transcetolasas. Transformaciones de aminocidos y cetocidos. Transportadores de electrones (ubiquinonas, menaquinonas, etc.)

Microorganismos

Clasificacin
Luz Fottrofas

Fuente de energa xido-reduccin Quimitrofas Compuestos orgnicos Quimioorgantrofos Fuente de carbono Compuestos orgnicos Quimioorganohetertrofos CO2 Quimioorganoauttrofos

Fuente de carbono
Compuestos orgnicos Fotohetertrofos CO2 Fotoauttrofos

Compuestos inorgnicos Quimiolittrofos

Fuente de carbono

Compuestos Orgnicos Mixtrofos

CO2 Quimiolitoauttrofos

Medios de Cultivo
Composicin Estado
Naturales o Complejos Sintticos o qumicamente definidos Lquido Fluido 0.1% de agar Semislido 0.2 a 0.8% de agar Slido 1.5 a 2% de agar

Uso

Enriquecidos o nutritivos De enriquecimiento Selectivos Diferenciales De transporte De mantenimiento o conservacin Pruebas Bioqumicas

Clasificacin de los medios de cultivo: por su composicin

Naturales o complejos. Son medios que no tienen una composicin definida. Los ingredientes que pueden contener estos medios son sangre, suelo, frutas, extracto de levadura, peptonas o el agua de la llave.

Los medios sintticos o qumicamente definidos son aquellos cuya composicin es completamente conocida, sus componentes son extrapuros, como los medios empleados para investigacin.

Clasificacin de los medios de cultivo: por su estado

Medios lquidos. Generalmente tienen componentes completamente solubles. Son tiles para la propagacin de microorganismos pero en ellos no se pueden detectar contaminaciones. Los medios fluidos contienen agar al 0.1%, el medio tiene una consistencia lquida pero la presencia de agar disminuye la velocidad de disolucin del O2 ambiental. Se emplea generalmente en el cultivo de microorganismos anaerobios y microaeroflicos.

Medio fluido de tioglicolato con resarzurina (indicador de oxido/reduccin)

Clasificacin de los medios de cultivo: por su estado

Los medios de cultivo semislidos contienen 0.2-0.8% de agar, son suaves y permiten observar la movilidad de los microorganismos. Esta consistencia es utilizada en los medios de transporte, pruebas de movilidad, bioqumicas y genticas. Los medios slidos contienen 1.5 -2.0% de agar, tienen consistencia dura lo que soporta el crecimiento microbiano. Se emplean para cultivo, aislamiento, diferenciacin, cuantificacin, pruebas de sensibilidad y en algunos casos para conservacin (inclinados).

Uso. Medios enriquecidos

Contienen componentes ricos nutritivamente lo que permite el crecimiento de microorganismos no exigentes. Ejemplos: Agar cuenta estndar (cuenta en placa) Agar-chocolate Agar Soya Tripticasena (TSA) Agar nutritivo (AN) Agar sangre (AS)

Enumeracin de microorganismos

Neisseria/Haemophilus

Streptococcus

Uso. Medios de enriquecimiento

Contiene componentes y condiciones que permiten el desarrollo de un tipo microbiano y disminuyen la velocidad de crecimiento de la microbiota acompaante. Ejemplos:

Caldo tetrationato Pre-enriquecimiento para Salmonella

Agua peptonada pH 9 Deteccin de V. cholerae

Caldo selenito Deteccin de Salmonella, Enterobacter sakazakii y Yersinia enterocolitica

Uso. Medios selectivos

Contiene componentes que permiten el desarrollo de un tipo microbiano e inhiben el crecimiento de los dems microorganismos. Ejemplos:
Agar Cetrimida

Caldo bilis verde brillante

Agar Pseudomonas

Agar Rosa de Bengala

Uso. Medios diferenciales

Contiene componentes que permiten diferenciar las actividades metablicas de los microorganismos inoculados. La presencia de indicadores o el uso de reveladores despus de la incubacin ponen de manifiesto la actividad. Ejemplos:

Agar DNAsa

Agar almidn

Agar cromognico para Candida

Uso. Medios diferenciales y Selectivos

Agar sal y manitol Agar eosina azul de metileno (EMB) Agar xilosa-lisina-desoxicolato (XLD) Agar Endo Agar Mac Conkey
Agar XLD

EMB

Agar sal-manitol

Agar Endo

Agar MacConkey

Uso. Medios de conservacin

Algunos medios de cultivo son empleados para la conservacin temporal de microorganismos, como son: Medio slido en caja a 4C (hasta 1 semana). Medio de agar inclinado 4C (hasta 2 semanas) con sello de glicerol estril a 4C (varios meses dependiendo del microorganismo). Medio fluido de tioglicolato con carne molida con sello de aceite mineral estril a temperatura ambiente (varios meses dependiendo del microorganismo). En la liofilizacin tambin se emplea la leche descremada (aos).

Uso. Medios de transporte

Son medios que se emplean para el transporte de muestras sin alterar la viabilidad y la proporcin de microorganismos. Tienen consistencia semislida, con amortiguador de pH y reducidos en nutrientes para preservar la proliferacin de microorganismos por varias horas. Las muestras se recolectan con asas o con hisopos de alginatos que no inhiben a los microorganismos.

Uso. Pruebas Bioqumicas

Son medios de cultivo que contienen nutrientes para evidenciar la actividad metablica de un microorganismo puro. Pueden emplear reveladores y/o indicadores.

Agar
Polmero extrado de algas rojas (de los gneros Gelidium y Gracilaria). El agar es un gelificante que se emplea en Japn desde el siglo XV. En 1859 se introdujo en Europa como alimento caracterstico de la cocina china y a principios del siglo XX se empez a aplicar en la industria alimentaria. Es una fuente de fibra y tiene capacidad de formacin de gel en proporciones muy bajas. Permite la elaboracin de gelatinas calientes.

Medios enriquecidos
MEDIO AGAR CHOCOLATE Haemophilus influenzae: colonias color perla Neisseria gonorrhoeae: colonias blanco-gris N. meningiditis: colonias gris-azul Composicin: Digerido pancretico de casena Peptona de soya Glucosa Extracto de levadura NaCl Bisulfito de sodio Agar Cofactores (vit B6) Sangre de oveja Agua destilada g/L 10 3 1 2 5 0.1 15 10 mL 45.5 mL 1L

Medios Selectivos
MEDIO AGAR ROSA DE BENGALA Se utiliza para inhibir el crecimiento bacteriano y restringe el tamao y altura de las colonias de hongos de rpido crecimiento. Composicin: Soytona Glucosa Fosfato monopotsico MgSO4 Rosa de Bengala Agar Agua destilada g/L 5 10 1 0.5 0.05 15 1L

Medios Diferenciales
MEDIO AGAR EOSINA AZUL DE METILENO
Escherichia coli: forma colonias grandes, azul-negras, verdes con brillo metlico Enterobacter/Klebsiella: forma colonias grandes, mucoides, azul negras Salmonella: forma colonias grandes, de incoloras a mbar Shigella: forma colonias grandes, incoloras-mbar Pseudomonas: forma colonias irregulares e incoloras Bacterias Gram positivas: no crecen

Composicin: Digerido pancretico de gelatina Lactosa Sacarosa Fosfato dipotsico Eosina Y Azul de metileno Agar Agua destilada

g/L 10 5 5 2 0.4 65 mg 13.5 1L