OBTENO DO LCOOL ETLICO VIA FERMENTAO DO CALDO DE CANA-DE-ACAR.

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RESUMO A fermentao lcoolica um processo anarobico, que compreende um conjunto de reaes enzimaticamente controladas, atravs das quais uma molcula orgnica de acar convertida, pela ao de leveduras, em lcool etlico e dixido de carbono, liberando energia. Os produtos finais de metabolizao iro depender das condies ambientais em que a levedura se encontra, a intensidade da fermentao depende do tipo de acar, o que faz com que bebidas diferentes, produzidas pela fermentao de matrias-primas especficas, apresentem diferentes teores alcolicos.O etanol pode ser obtido por diferentes processos bioqumicos, como a via fermentativa e via sinttica, a partir de fontes diversas. No Brasil, destaca-se a produo atravs da cana-deacar, que de significativa importncia para o desenvolvimento econmico do pas. Palavras-chave: fermentao, levedura, etanol , cana-de-acar. ABSTRACT Fermentation and an anaerobic process, comprising a set of enzymatically controlled reactions through which an organic molecule of sugar is converted by the action of yeast, ethyl alcohol and carbon dioxide, releasing energy. The end products of metabolism will depend on the environmental conditions in which the yeast is the intensity of the fermentation depends on the type of sugar, which causes different beverages produced by fermentation of particular raw materials, have different levels alcolicos.O ethanol can be obtained by various biochemical processes, such as via fermentation and synthetically and from different sources. In Brazil, there is the production by cane sugar, which is of significant importance for the country's economic development. Keywords: fermentation, yeast, ethanol, cane sugar. 2.OBJETIVO Obteno do lcool tilico pela fermentao do caldo de cana-de-acar. ______________________________________________________________

3. INTRODUO O lcool pode ser obtido por dois tipos de processos: aqueles que utilizam matria-prima da indstria petroqumica e os que utilizam converso da biomassa, que baseiam-se na tecnologia de fermentao. No caso especifico do Brasil, que possui privilegiada situao geogrfica e condio dafoclimtica to potencialmente capacitada produo de biomassas, esta matria-prima torna-se vantajosa na obteno de lcool em relao ao eteno de nafta, que alm do mais, basicamente importado. (MACEDO, 1993) O lcool etlico pode ser obtido a partir de vegetais ricos em acar, classificados como sacarneos, amilceos e celulsicos, entre eles esto a cana-de-acar, a beterraba e as frutas do amido, extratos da mandioca, do arroz, do milho, e da celulose extrada dos eucaliptos. Grande parte do lcool produzido no Brasil obtido atravs da cana-de-acar, embora existam diferentes matrias-primas para a sua produo, todas elas derivam do mesmo processo, a fermentao alcolica, que consiste numa reao anaerbica, realizada por microorganismos que degradam parcialmente a glicose obtendo como produto final lcool etlico e dixido de carbono. Segundo Macedo (1993) Bechner, no sculo 17, afirmou que somente os lquidos aucarados so capazes de entrar em fermentao alcolica, para ele o lcool se formava durante o processo de fermentao, julgando erradamente, no entanto, a necessidade de ar para causar o fenmeno que ele considerava semelhante combusto. Os estudos iniciais sobre fermentao alcolica relacionavam-se apenas a formao dos produtos inicial e final. Black, no sculo 18, postulou que o lcool e o dixido de carbono eram os nicos produtos formados durante a fermentao, no entanto Lavoisier, em 1789, encontrou alm destes produtos, um outro que ele chamou de cido actico. Em 1815 Gay-Lussac determinou a formulao da estequiometria da fermentao e Pauster (1863) demonstrou a fermentao alcolica como um processo anaerbico. A partir da as reaes enzimticas responsveis pela transformao qumica do acar em etanol no interior das leveduras comearam a ser elucidadas. No processo os acares so transformados em lcool, segundo a reao simplificada de Gay Lussac: C12H22O11 + H2O C6H12O6 + C6H12O6 C6H12O6 2CH3CH2OH + 2CO2 + 23,5 kcal No processo de transformao dos acares em etanol h desprendimento de gs carbnico e calor. Utiliza-se uma levedura especial para fermentao alcolica, a Saccharomyces cerevisiae ,que um aerbio facultativo, responsvel pela produo das enzimas fundamentais para o processo. As leveduras so microorganismos que atuam enzimaticamente (zimase) sobre os glicdios, produzindo etanol e dixido de carbono. Neste

processo h a quebra das molculas dos glicdios em monossacardeos, pela enzima invertase. Esses monossacardeos so em seguida submetidos ao de outra enzima, denominada zimase, produzindo o etanol. A fermentao constitui-se um importante processo industrial, sendo responsvel por todo o lcool usado em bebidas e combustveis. O lcool etlico o mais comum dos alcois e caracteriza-se por ser um composto orgnico, obtido atravs da fermentao de substncias amilceas ou aucaradas, e tambm mediante a processos sintticos. Existem diversas utilizaes para o lcool etlico como: produo de bebidas alcolicas, aplicaes na indstria qumica e farmacutica, combustvel veicular e a produo de energia eltrica Como combustvel, o lcool tem a vantagem de ser uma fonte de energia renovvel e menos poluidora que os derivados do petrleo. O Brasil emprega o etanol como biocombustvel desde o fim da dcada de 70, aps os chamados choques do petrleo, mas o interesse mundial mais recente por esta alternativa se deve principalmente comprovao do aquecimento global e necessidade de reduzir-se a emisso de novas quantidades de carbono na atmosfera. 4. MATERIAIS E MTODOS 4.1 MATERIAIS 4.1.1 EQUIPAMENTOS Balo de destilao de 1000 mL; Erlenmeyer de 50 mL, 250 mL e 1000 mL; Bquer de 150 mL e 2000 mL; Balo de fundo redondo de 1000 mL e 500 mL; Provetas; Tubo de vidro; Condensador tubo reto; Coluna de fracionamento; Mangueira; Fita adesiva Fita indicadora de Ph Termmetro;

Refratmetro; Basto de vidro Placa de aquecimento; Manta de aquecimento; Controlador de temperatura; Porcelana porosa;
4.1.2 REAGENTES

Caldo de cana; Fermento biolgico (18g); gua de Brio; leo vegetal; 4.2 OBTENO DE LCOOL ETLICO VIA FERMENTAO Com o material limpo e esterelizado, o procedimento iniciou-se. Primeiro colocou-se 1,5L do caldo-de-cana em um bquer com capacidade para 2L, depois uma pequena amostra do caldo-de-cana foi retirada para medir o Grau Brix (O Grau Brix indica o teor aproximado de acar no mosto),nesse caso o grau brix foi de 19,9. Feito isso, olhou-se o teor de pH, utilizando a fita de pH, que indicou: pH igual a 5. Em seguida, levou-se o bquer que continha o caldo-de-cana para aquecer em uma chapa de aquecimento at atingir a temperatura de 72C, quando a temperatura chegou a 72C, levou-se para resfriar em uma bacia com gua, um banho de gelo, at a temperatura atingir 32C, o aquecimento e depois resfriamento um processo chamado esterelizao. Essas medidas da temperatura foram lidas em um termmetro. Aps isso, medimos 10mL da soluo de Pasteur que j continha todos os sais necessrios nessa mesma soluo. Em um balo de fundo chato, colocou-se trs pacotinhos de fermento biolgico, cada um com 10g, sendo um total de 30g de fermento biolgico, foi adicionado o contedo do bquer com o mosto no balo, agitou-se. Ligou-se com uma mangueira o balo de fundo chato at um erlenmeyer de 250mL, nesse erlenmeyer foi colocado, um pouco de gua de cal, querosene e leo comum de cozinha, lacrou-se tudo e o balo foi vedado, o

erlenmeyer e a mangueira foram presos por uma fita e assim deixou-se o caldo fermentar durante uma semana. Depois desse tempo fermentando, foi feita a decantao do mosto, no erlenmeyer sobrou carbonato de brio que ficou aps a reao de fermentao. Aps feita a decantao, foi feito a montagem do aparelho para a destilao simples. Na destilao simples foi recolhido 1100mL do filtrado e colocado no balo de destilao junto com trs pedaos de porcelana porosa, o aparelho para a destilao foi montado e a destilao continuou at ser recolhido um quarto do total do filtrado, 275mL, anotou-se a temperatura a cada 2mL do filtrado que descia para a proveta, com uma velocidade de uma gota por segundo. Aps uma semana foi feita a destilao fracionada, com todo o aparelho montado foi colocado 300mL do filtrado em um balo de destilao com trs pedaos de porcelana porosa, aps comear a destilao, a cada 2mL anotouse a temperatura, com uma velocidade de uma gota por segundo, foi colocado em um primeiro erlenmeyer a frao que destilou at 82C, no segundo erlenmeyer recolheu-se a frao que destilou at 95C e no terceiro erlenmeyer a frao que destilou a partir de 95C. Aps a fermentao, foi recolhido um pouco do filtrado e colocado em um cadinho, acendeu-se com um fsforo para testar a combusto, esse mesmo procedimento foi feito aps a destilao simples e aps a destilao fracionada, sendo que a chama acendeu de forma mais forte depois da destilao fracionada, restando um pouco ainda do filtrado no cadinho.

4.3 FERMENTAO LCOOLICA A fermentao alcolica pode ser considerada como a oxidao anaerbica da glicose, pela ao de microorganismos, as leveduras, com a obteno de lcool etlico e gs carbnico como produto final. A equao da reao descrita abaixo: C6H12O6(s) + 6O2(g) 6CO2 + 6H&2O(l) As leveduras so os agentes biolgicos ativos responsveis pela fermentao alcolica e podem ser definidas como fungos especializados, monocelulares, desclorofilados. A escolha da levedura apropriada fundamental para o xito da fermentao, somente poucas espcies so utilizadas na fabricao de lcool, utiliza-se com maior frequncia a Saccharomyces cerevisiae. A levedura

a ser escolhida deve apresentar certos requisitos para a boa eficincia do processo , entre eles esto: Velocidade da fermentao: a quantidade de acar transformado em lcool por unidade de tempo e de massa de levedura deve ser elevada. Resistncia ao lcool: de grande interesse a obteno de leveduras que resistam a altas concentraes de etanol, uma vez que se pode operar com mostos com concentraes mais elevadas de acar. Eficincia da converso: capacidade da levedura de converter acar em etanol. Resistncia ao pH e antisspticos: a levedura precisa tolerar a baixa reao do meio e a antisspticos, j que um dos recursos usados para combater infeces do mosto e do vinho abaixar o pH ou adicionar antissptico. Estabilidade gentica: as propriedades anteriores devem ser mantidas nas geraes subsequentes da linhagem. Assim, os produtos finais de metabolizao iro depender das condies ambientais em que a levedura se encontra. Deste modo, enquanto uma poro de acar transformada em biomassa em aerobiose (CO 2 e H2O), a maior parte convertida em etanol e CO 2 em anaerobiose. A inverso da sacarose se d pela seguinte equao:

Enzima

C12H12O11 + H2O C6H12O6 + C6H12O6

Invertase (glicose) (frutose)

Cada molcula de sacarose (342g) produz duas molculas de acares redutores (360g).

Na prxima fase a ZIMASE catalisa a reao de transformao da glicose e da frutose (C6H12O6) em etanol (C2H5OH) e gs carbnico (CO2), como mostra a equao abaixo: Enzima C6H12O6 + C6H12O6 (glicose) (frutose) Zimase 4C2H5OH + 4CO2 (etanol) (gs carbnico)

Para comprovar que o processo de fermentao obteve xito, coleta-se o gs carbnico formado durante o processo em uma soluo aquosa de hidrxido de brio, a reao qumica entre ambos forma um precipitado branco, o carbonao de brio. CO2 (g) + Ba(OH)2 (aq) --------- BaCO3 (s) + H2O(l)

Aps a fermentao, o lcool passa por destilaes. Passando esse, por sequncia, na maioria das vezes, pelo processo de desidratao, pois, o lcool etlico estar com concentrao superior a 97,2% em volume (95,6% em peso). Isso porque nessa concentrao, a mistura de gua e etanol azeotrpica (mistura lquida de duas ou mais substncias que se comporta como uma substncia nica, quando o vapor produzido pela evaporao parcial do lquido tem a mesma composio que o lquido. A mistura em ebulio constante apresenta um ponto mximo ou mnimo de ebulio, comparada com o de outras misturas das mesmas substncias). 4.4 DESTILAO um mtodo de separao extensamente estudado - os primeiros estudos cientficos documentados surgiram na Idade Moderna, por volta do ano 1900, com o alquimista Jaburu ibn Hayyan (Geber). baseado no fenmeno de equilbrio lquido-vapor de misturas. Em termos prticos, quando temos duas ou mais substncias formando uma mistura lquida, a destilao pode ser um mtodo para separ-las. Basta apenas que tenham volatilidades razoavelmente diferentes entre si. O uso da destilao como mtodo de separao disseminou-se pela indstria qumica moderna. Pode-se encontr-la em quase todos os processos qumicos industriais em fase lquida onde for necessria uma purificao. Em teoria, no se pode purificar substncias at 100% de pureza atravs da destilao. Para conseguir uma pureza bastante alta, necessrio fazer uma separao qumica do destilado posteriormente. A destilao tem suas limitaes. No se pode separar misturas azeotrpicas por destilao comum.

4.4.1. Destilao Simples

Separa um slido e um lquido de uma mistura homognea. Ela consiste em separar o lquido em forma de vapor e esse vapor depois condensado atravs de um aparelho chamado condensador. Primeiro foi feita a separao do liquido lentamente para um balo de fundo redondo(2000ml). Para fazer a analise do grau Brix, colocou-se 10 ml do liquido em um bquer e com o conta-gotas, colocou algumas gotas no refratmetro encontrando-se assim o valor em graus Brix. O processo de destilao comeou a uma temperatura de 70C. O aquecimento de uma soluo gua-lcool, at uma temperatura adequada, proporcionar a mudana de estado do lcool de lquido para vapor e, posteriormente, para o estado lquido, aps submeter o vapor ao resfriamento (condensao). No balo de destilao de 2000ml, colocou-se 1.100mL do mosto. Iniciou a destilao simples montando a cabea da destilao juntamente com o termmetro. A cada 2 mL era anotado a temperatura. Algumas gotas do destilado foram recolhidas para verificar a capacidade de combusto, essas gotas foram colocadas num cadinho e em contato com o fogo foi observado uma chama rpida e clara. Em banho de gelo foi colocado uma proveta de 25mL com 20mL do filtrado e um termmetro at atingir a temperatura de 20C. Aps atingir essa temperatura, 10 mL desse lquido foi pipetado e depositado no erlenmeyer previamente pesado e identificado em uma balana analtica. A destilao temperatura. prosseguiu at que um quarto do volume do filtrado colocado no balo. Essa destilao foi realizada no intervalo de 70-94.7C de

DestilaoSimples

4.4.2. Destilao Fracionada Esse processo consiste no aquecimento de uma mistura de mais de dois lquidos que possuem pontos de ebulio diferentes. Assim, a soluo aquecida e separa-se inicialmente o lquido com menor ponto de ebulio e, em seguida, o lquido com o ponto de ebulio maior. A tcnica e a aparelhagem utilizada na destilao fracionada a mesma utilizada na destilao simples, apenas deve ser colocado um termmetro no balo de destilao, para que se possa saber o trmino da destilao do lquido de menor ponto de ebulio. O trmino da destilao do lquido de menor ponto de ebulio, ocorrer quando a temperatura voltar a se elevar rapidamente. A destilao fracionada tambm utilizada na separao dos componentes de uma mistura gasosa. Primeiro, a mistura gasosa deve ser liqefeita atravs da diminuio da temperatura e aumento da presso. Aps a liquefao, submete-se a mistura a uma destilao fracionada: o gs de menor ponto de ebulio volta para o estado gasoso. Esse processo utilizado para separao do oxignio do ar atmosfrico, que constitudo de aproximadamente 79% de nitrognio e 20% de oxignio e 1% de outros gases. No caso desta mistura o gs de menor ponto de ebulio o nitrognio. Foi preparada a aparelhagem para a destilao fracionada com um balo volumtrico com o destilado, trs porcelanas porosas, termmetro, coluna de destilao, e uma manta de aquecimento, utilizou-se tambm, papel alumnio em volta do sistema para manter a temperatura. A cada 2mL era observada a temperatura. Foi recolhida a primeira frao que foi destilada DE 72C at 82C. A segunda frao foi recolhida at uma temperatura de 95C e de 95C em diante foi recolhida a terceira frao. A frao que possui mais teor de lcool a primeira comparando com as outras duas fraes j que a faixa de ebulio do lcool entre 77 e 81C.

5. RESULTADO E DISCUSSO

6. QUESTIONRIO 1. Qual reao de invertase e zimase? Exemplifique-a As enzimas invertase e zimase esto presentes na levedura Saccharomyces cerevisiae e atuam como catalisadores biolgicos da reao. Na primeira fase a enzima invertase transforma a sacarose em dois acares redutores, que so ismeros, a frutose e glicose: C12H12O11 + H2O invertase
(sacarose)

> C6H12O6 + C6H12O6

(glicose) (frutose)

Na outra etapa, uma outra enzima, a zimase, catalisa a transformao da glicose e da frutose em etanol e dixido de carbono, que liberado em forma de bolhas, liberando calor no sistema: C6H12O6 + C6H12O6
(glicose) (frutose)

------ > C2H5 OH + CO2

zimase Calor Etanol gs carbnico

2. O que voc entende por fermentao? A fermentao lcoolica um processo anarobico, que compreende um conjunto de reaes enzimaticamente controladas, atravs das quais uma molcula orgnica de acar convertida, pela ao de leveduras, em lcool etlico e dixido de carbono, liberando energia. 3. Explique porque no devemos usar o mosto muito concentrado ou diludo? O mosto muito concentrado dificulta o processo de fermentao, que pode se tornar lenta devido a sua maior concentrao de acares. Se o mosto for muito diludo, tem-se uma destilao mais lenta , o que aumenta o tempo e os custos da produo.

4 . Para que serve a gua de Cal?

Para comprovar que a fermentao ocorreu, j que adicionando dixido de carbono a esta soluo, ocorre formao de um precipitado branco , o CaCO 3.

6. REFERNCIAS

ANCIES, A. W. da F. etal. Avaliao Tecnolgica do lcool Etlico. 3 ed. Braslia, 1981. FERREIRA, E. C. ; MENEZES, R. A Qumica da Produo de Bebidas alcolicas. Disponvel em: < qnesc.sbq.org.br/online/qnesc10/ > Acesso em: 16 de maro de 2012. MACEDO, L. C. H. lcool Etlico: da cachaa ao cereal. So Paulo: cone Editora, 1993 MENEZES, T. T. B. de . Etanol, o combustvel do Brasil. So Paulo: Editora Agronmica Ceres, 1980