Glucosa y envejecimiento

Anthony Cerami, Helen Vlassara y Michael Brownlee

Considerado antao inerte, el azcar ms abundante del organismo puede alterar ciertas protenas, contribuyendo as al deterioro general que acompaa al envejecimiento

medida que envejecemos, nuestras clulas y tejidos van experimentando cambios que llevan al deterioro y muerte del organismo. Las clulas pierden eficacia y capacidad para reparar el material daado; simultneamente, los tejidos van ganando en rigidez. Por dar un ejemplo: los pulmones y el msculo del corazn se expanden menos eficazmente, los vasos sanguneos se endurecen y los ligamentos y tendones se tensan. Los ancianos tienen tambin mayor predisposicin a desarrollar cataratas, aterosclerosis y cncer, entre otras enfermedades. Pocos investigadores atribuiran esos efectos diversos a una sola causa. Pero nosotros hemos descubierto que hay un proceso muy conocido, utilizado en la decoloracin y el endurecimiento de alimentos, que podra contribuir al deterioro de las clulas y de los tejidos que acompaa a la edad. Se trata de la unin qumica de la glucosa con las protenas (y, segn hemos descubierto, con los cidos nucleicos). La unin enzimtica de la glucosa con las protenas se produce en un sitio especfico, sobre una molcula determinada y para un fin concreto. Por el contrario, el proceso no enzimtico aade glucosa al azar sobre cualquiera de los sitios que se ofrecen a todo lo largo de cualquier cadena polipeptdica. Fundados en los estudios in vitro e in vivo desarrollados en nuestro laboratorio, proponemos que esa glicosilacin no enzimtica de ciertas protenas desencadena en el organismo una serie de reacciones qumicas que culminan en la formacin y acumulacin final de enlaces cruzados (crosslinks) irreversibles entre molculas proteicas adyacentes. Si la hiptesis se demostrara correcta, ayudara a explicar por qu diversas protenas, en particular las que constituyen la estructura de los tejidos y rganos, se van entrecruzando de forma
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progresiva a medida que las personas envejecen. Aunque hasta ahora nadie ha descrito satisfactoriamente el origen de esos puentes, muchos investigadores coinciden en que el entrecruzamiento generalizado de protenas contribuye probablemente al endurecimiento y a la prdida de elasticidad caractersticos de los tejidos envejecidos. Tambin nosotros proponemos que la adicin no enzimtica de glucosa a los cidos nucleicos puede deteriorar gradualmente el ADN. Los qumicos especialistas en alimentacin conocen desde hace mucho las etapas del proceso de alteracin de las protenas por la glucosa, pero hasta hace poco eran escasos los bilogos conscientes de que esos mismos procesos podan desarrollarse tambin en el organismo. Las reacciones no enzimticas entre la glucosa y las protenas, denominadas en su conjunto reaccin de Maillard, o de oscurecimiento, parecen complicadas, pero son bastante sencillas si se comparan con muchas reacciones bioqumicas. Comienzan con la atraccin mutua entre un grupo aldehdo (CHO) de la glucosa y un grupo amino (NH2) de una protena. Las molculas se combinan y forman lo que se conoce por base de Schiff (vase la figura 3), producto inestable que rpidamente y de modo espontneo evoluciona hacia una situacin ms estable, si bien todava reversible: la formacin de compuestos conocidos por productos Amadori. Si una protena permanece en el organismo durante meses o aos, algunos de esos productos Amadori se van deshidratando poco a poco y sufren una postrer transformacin en nuevas estructuras derivadas de la glucosa. Pueden stas combinarse con diversos tipos de molculas para dar lugar a formas irreversibles, que hemos denominado productos finales de glicosilacin avanzada (AGE, por advanced glycosylation end products).

La mayora de los AGE presentan un color pardo amarillento, son fluorescentes y exhiben propiedades espectrogrficas especficas. Y son muchos los que pueden establecer enlaces cruzados con las protenas adyacentes, lo que resulta ms importante an para el organismo. Se desconoce la estructura qumica precisa de los productos finales de glicosilacin avanzada y de la mayora de los derivados AGE. Pero hay datos que indican que los AGE suelen formarse por la unin de un producto Amadori con la glucosa o con otro azcar. Tales productos finales podran tender puentes con otras protenas unindose a los grupos amino. En ocasiones podran fusionarse dos productos Amadori, originando un AGE que es otro entrecruzado. El nico entrecruzado derivado de la glucosa del que se conoce la estructura qumica constituye precisamente un ejemplo de ese tipo. Se trata del 2-furanil-4(5)(2-furanil)-1H-imidazol, o FFI. Aislado inicialmente en el laboratorio (de una mezcla del aminocido lisina, la protena albmina y la glucosa), el FFI se encontr luego en el organismo.

el estudio de la diabetes, enfermedad caracterizada por la presencia de elevados niveles de glucosa en la sangre, se deriv la conviccin de que la reaccin de oscurecimiento poda transcurrir tambin en el organismo, y de que incluso poda daarlo. A. Cerami y Ronald J. Koenig indicaron a mediados de los aos setenta que la sangre de los diabticos contena niveles superiores a los normales de hemoglobina A1c, una variante de la hemoglobina, el componente proteico de los glbulos rojos encargado de transportar oxgeno. Interesados por el motivo de esa elevacin de los niveles de la protena, decidieron determinar su estructura. La hemoglobina A1c es un producto Amadori. Como sucede con la mayora
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de los productos Amadori formados en los alimentos, la cantidad de hemoglobina A1c viene condicionada por el nivel de glucosa en sangre: cuando es alto, tambin lo es la cantidad de productos Amadori. (Diversos investigadores han identificado desde entonces unas dos docenas de protenas Amadori en el hombre y, como caba esperar, su concentracin en los diabticos duplicaba o triplicaba la presentada por los no diabticos.) Estos datos revelan que la glucosa, que baa los tejidos y las clulas del organismo entero, no es la molcula biolgicamente inerte que la mayora

de los bilogos crea. El azcar no reacciona en su configuracin cclica, pero el anillo se abre lo bastante a menudo para permitir la formacin de productos Amadori. La glucosa, el azcar menos reactivo del organismo, tiene el mayor efecto potencial sobre las protenas porque es el ms abundante. La reactividad de la glucosa hizo que Cerami pensara que su exceso en la sangre de personas con diabetes incontrolada podra constituir algo ms que un indicador de la enfermedad. Si el azcar poda unirse a las protenas del organismo en reacciones

no sometidas al control enzimtico, pens, su presencia en cantidades excesivas quiz contribuyera a las complicaciones de la diabetes: el abanico de trastornos que van desde una sensacin de malestar general hasta la insuficiencia renal, afeccin comn entre los diabticos, a los que acorta la vida. Pudiera ser que la elevacin de los niveles de glucosa actuara especialmente sobre las protenas de vida larga, formndose abundantes productos terminales de glicosilacin avanzada. La acumulacin de AGE modificara a su vez de manera indeseable los tejidos del organismo.

1. MACROFAGO (cuerpo de superficie rugosa del centro), clula que elimina desechos de los tejidos, a punto de ingerir glbulos rojos (discos lisos) a los que se han unido productos finales de glicosilacin avanzada, o AGE. Los AGE son molculas derivadas de la combinacin de glucosa y de protena sin participacin de enzimas, proceso denominado, en su conjunto, reaccin de Maillard, o de oscurecimien-

to. Los autores postulan que los AGE van acumulndose sobre clulas y protenas de vida larga, formando enlaces cruzados que deterioran los tejidos. Los macrfagos retiran las protenas alteradas, pero pierden eficacia con el envejecimiento del individuo. En esta micrografa, realizada por David M. Phillips, las clulas aparecen aumentadas 10.000 dimetros.

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Esas reflexiones hicieron pronto sospechar que la glucosa pudiera estar implicada en los cambios hsticos asociados con el envejecimiento normal. El efecto de la diabetes sobre muchos rganos y tejidos a menudo se describe como un envejecimiento acelerado, porque varias de las complicaciones que afectan a las personas que la sufren cataratas seniles, rigidez muscular y aterosclerosis son idnticas a las alteraciones que se presentan en la vejez, salvo que se desarrollan antes. Si, en efecto, el exceso de glucosa acelerase el desarrollo de esos achaques en los diabticos, sera razonable postular que, en cantidades normales, participase en su lenta aparicin en las dems personas a medida que envejecen. Los estudios de senescencia efectuados en nuestro laboratorio (que venan a complementar a los de diabetes) se abordaron con el propsito de determinar si los productos finales de la glicosilacin avanzada se acumulaban realmente en las protenas de vida larga del organismo y provocaban la formacin de estructuras de entrecruzamiento entre aqullas. Nuestro primer objetivo fueron los constituyentes proteicos mayoritarios del cristalino del ojo pues, segn se cree, esas protenas se conservan de por vida; se ajustaban, por tanto, al modelo de pro-

tenas susceptibles de acumular gran cantidad de productos finales de glicosilacin avanzada. Tambin pareca probable que la formacin de esos AGE, y de entrecruzados derivados de ellos, participara en el oscurecimiento y enturbiamiento del cristalino (es decir, en el desarrollo de cataratas seniles) que acompaan a la vejez. Vena a apoyar esa nocin el descubrimiento anterior de la existencia de dos tipos de enlaces cruzados en los agregados proteicos del cristalino humano aquejado de cataratas seniles. Un enlace tena color, seal de que poda tratarse de un AGE; el otro era una unin de tipo disulfuro formada entre los grupos sulfhidrilo (SH) del aminocido cistena. Experimentos in vitro realizados por Cerami, Victor J. Stevens y Vincent M. Monnier demostraron que, actuando sobre una solucin de aquellas protenas, la glucosa produca estructuras parecidas a las de las cataratas. Mientras que en ausencia de glucosa las soluciones que contenan cristalinos bovinos permanecan claras, cuando haba glucosa se formaban agregados de protenas, probable indicio de que entre las molculas se haban establecido enlaces cruzados. Los agregados difractaban la luz y convertan en opaca la solucin. Los anlisis de los enlaces tendidos entre las

molculas confirmaron la presencia de ambos tipos: uniones disulfuro y pigmentadas. Tambin descubrieron que los enlaces pigmentados de las cataratas seniles humanas eran de color pardusco y exhiban la caracterstica fluorescente de los productos finales de la glicosilacin avanzada. Se comprob incluso que algunos entrecruzamientos eran el producto de glicosilacin avanzada FFI.

2. FORMACION de uniones entrecruzadas derivadas de la glucosa, mostrada de modo muy esquemtico; comienza cuando la glucosa se une a un grupo amino (NH2) de una protena (arriba), por ejemplo el colgeno. El producto inicial, una base de Schiff, se transforma rpidamente en producto Amadori que, tras atravesar diversos estadios mal conocidos (flecha discontinua), se convierte en un AGE. Los AGE se parecen a cepos tendidos (en rojo), listos para apresar los grupos amino libres de alguna protena prxima y formar enlaces entrecruzados (abajo).

stos datos y otros parecidos indican que la glicosilacin no enzimtica de las lentes cristalinas puede contribuir a la formacin de cataratas a travs de dos mecanismos. Es probable que la glucosa altere la configuracin de las protenas e inste el afloramiento de grupos sulfhidrilo antes ocultos, que devendran susceptibles de combinacin con otros grupos sulfhidrilo prximos. Se formaran entonces uniones disulfuro y se iniciara la agregacin proteica. Posteriormente se reorganizaran los productos Amadori de las protenas, facilitndose la formacin de FFI y otros enlaces pigmentados que decoloraran el cristalino y le conferiran opacidad. Convencidos de que al menos un tipo de protenas sufre la reaccin de oscurecimiento y forma uniones no deseables, centramos nuestra atencin en la protena ms abundante del organismo: el colgeno. Esa protena extracelular de larga vida une entre s las clulas de muchos rganos y colabora en la constitucin del entramado que da forma y soporte a las paredes de los vasos sanguneos. Es tambin el componente mayoritario de los tendones, la piel, el cartlago y otros tejidos conjuntivos. Son muchos los investigadores que han puesto de manifiesto la formacin de colgeno en muchos tejidos, as como que su entrecruzamiento y rigidez aumentan con la edad. Las primeras pruebas de que el colgeno poda acoger a los productos finales de la glicosilacin avanzada se recabaron en estudios de la duramadre, la capa de colgeno que separa el cerebro del crneo. Monnier, Cerami y Robert R. Kohn demostraron que la duramadre de ancianos y diabticos exhiba una coloracin pardo amarillenta de propiedades fluorescentes y espectrogrficas comparables con las de los productos finales de la glicosilacin avanzada obtenidos in vitro. Como caba esperar, las protenas de personas afectadas de diabetes haban acumulado ms pigmento que las de los no diabticos. En estos ltimos individuos la coloracin aumentaba en proporcin lineal a la edad.
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3. ESTRUCTURA QUIMICA de las bases de Schiff de glucosa y protena y de los productos Amadori. Queda por desentraar

la de la mayora de los AGE pero se ha identificado uno de ellos: el 2-furanil-4(5)-(2-furanil)-1H-imidazol, FFI.

ruebas obtenidas en varios estudios indican que la glucosa no slo induce en el colgeno la formacin de AGE, sino tambin el establecimiento de uniones entrecruzadas. Por los trabajos de otros investigadores se conoce desde hace tiempo que, sometidas a tensin, cuesta ms romper las fibras de los tendones de la cola de ratas viejas que las fibras de ejemplares jvenes, indicio de que las fibras viejas estn ms entrecruzadas y son menos flexibles. Monnier, Cerami y Kohn intentaron imitar los efectos del envejecimiento incubando fibras de tendones de ratas jvenes en presencia de varios azcares. Las fibras acumulaban gradualmente los productos finales de la glicosilacin avanzada y mostraban un aumento concomitante del tiempo de rotura. Luego analizamos el establecimiento de uniones de entrecruzamiento en el colgeno purificado y en el artico. En el primer caso se incub la protena con glucosa en un tubo de ensayo; en el segundo caso se incub esencialmente en el organismo de animales diabticos que presentaban elevados niveles de glucosa en sangre. Los anlisis demostraron inequvocamente en ambos casos que la glucosa provocaba la formacin de un entrecruzado generalizado. Sospechamos que la formacin de enlaces cruzados entre derivados de glucosa y protenas de vida larga ayuda a explicar muchos de los sntomas del envejecimiento y muchas de las complicaciones de la diabetes, pero tales uniones no son las nicas que pueden daar al organismo. Hemos demostrado que los AGE dispuestos sobre el colgeno de las paredes arteriales y en las membranas basales de
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los capilares pueden, de hecho, capturar gran variedad de protenas plasmticas que, en circunstancias normales, son de vida breve. Aun cuando se incube primero el colgeno con glucosa y luego se lave en su totalidad el azcar libre, las protenas de vida larga conservan la capacidad de unirse covalentemente a ciertas molculas: albmina, inmunoglobulinas y lipoprotenas de baja densidad. Esas uniones quizs expliquen por qu tanto los ancianos como los diabticos estn predispuestos al desarrollo de aterosclerosis, que es la aparicin de una placa de clulas de msculo liso, colgeno (procedente de las clulas de la musculatura lisa) y lipoprotenas (las protenas ricas en colesterol que constituyen la fuente principal de grasa y colesterol de las lesiones aterosclerticas) en las paredes arteriales. No se conocen an los procesos exactos que instan el desarrollo de la aterosclerosis. Resulta concebible que la glucosa contribuya a la formacin de la placa fomentando la acumulacin progresiva de productos finales de glicosilacin avanzada sobre el colgeno de las paredes del vaso. Una vez formadas esas sustancias, el colgeno atrapara las lipoprotenas de baja densidad que circulan por el plasma, que a su vez podran constituir sitios de unin para otras lipoprotenas. Tericamente el colgeno modificado por la glucosa podra atrapar tambin el factor de Von Willebrand, una protena cuya funcin consiste, segn se cree, en promover la agregacin de las plaquetas (cuerpos pegajosos que participan en la coagulacin de la sangre). Las plaquetas liberaran un factor que estimula la prolife77

4. FIBRAS de colgeno, la protena ms abundante en el reino animal, ampliadas a 26.000 aumentos en esta micrografa electrnica de barrido de colgeno de embrin de pollo tomada por Christine McBride y David E. Birk. A medida que los animales y las personas envejecen, el entrecruzamiento de las molculas de protena de esas fibras provoca el endurecimiento de los tejidos del organismo entero. Aunque no se conoce la naturaleza exacta de todos los entrecruzamientos, los datos disponibles sealan que muchos de ellos podran ser derivados AGE.

racin de clulas de la musculatura lisa, que aadiran ms colgeno. Otros procesos en los que intervenga la glucosa estimularan la formacin de la placa (vase la figura 5). Debern efectuarse ms estudios para determinar la distinta participacin de los mecanismos citados y para evaluar su posible interaccin con otros procesos que contribuyan al desarrollo de la aterosclerosis. La captura y entrecruzamiento de protenas explicara tambin las agregaciones que se observan en las membranas basales de los capilares de personas ancianas (y el espesamiento ms rpido en los diabticos). El engrosamiento de una membrana basal especializada del rin, la matriz mesangial, provoca la insuficiencia renal de los diabticos. Menos conocidas son las consecuencias del espesamiento de la membrana basal renal en las personas no diabticas, aunque sospechamos que el proceso pueda contribuir a amortiguar, en los
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riones envejecidos, la capacidad de filtrar los desechos de la sangre. Por otra parte, con el paso del tiempo los capilares endurecidos del organismo se estrechan sobremanera o se ocluyen en las extremidades inferiores, donde la gravedad aumenta el ritmo de captura de protenas por las paredes de los vasos. Ello contribuye al empeoramiento de la circulacin y a la prdida de sensibilidad que los diabticos y los ancianos no diabticos experimentan en las extremidades. Los nervios sensoriales necesitan un aporte adecuado de sangre para funcionar correctamente. Puesto que el envejecimiento se registra tanto en el nivel celular como en el hstico, acometimos el examen de los efectos de la glucosa sobre el material que regula la actividad celular: los genes. El cido nucleico ADN, que contiene grupos amino, constituye, al menos en las clulas en reposo, una molcula de vida larga; por consiguiente, podra acumular, en princi-

pio, productos finales de glicosilacin avanzada. Esos AGE contribuiran al demostrado incremento de las alteraciones cromosmicas con la edad y al deterioro correlacionado de la reparacin, la replicacin y la transcripcin del ADN. Segn parece, esos cambios genticos merman la capacidad del organismo para renovar protenas de importancia decisiva en el normal funcionamiento y supervivencia de la clula. La glicosilacin no enzimtica podra tambin causar mutaciones que afectasen a la actividad del sistema inmunitario y originar algn tipo de cncer. Richard Bucala, Peter Model y Cerami se dieron cuenta de que, incubando ADN con glucosa, se producan inequvocamente compuestos coloreados fluorescentes. La coloracin no se produce con la rapidez descrita en las protenas, porque los grupos amino de los cidos nucleicos son mucho menos reactivos que los grupos amino de las protenas. No se ha investigado todava el efecto de los AGE sobre los cidos nucleicos de las clulas de mamfero, pero los estudios que hemos realizado con bacterias indican que la glicosilacin no enzimtica pudiera entorpecer el normal funcionamiento de los genes humanos. Si se incuba en glucosa un bacterifago (un virus bacteriano) de genoma de ADN y se le introduce en la bacteria Escherichia coli, disminuye la capacidad de los fagos para infectar las clulas de E. coli. El grado de disminucin depende del tiempo de incubacin, as como de la concentracin del azcar. Bucala y sus colaboradores descubrieron tambin que, si se aada el aminocido lisina a la mezcla de ADN y glucosa, se aceleraba la prdida de la actividad vrica. Presumiblemente el azcar reaccionaba con el aminocido, formndose un AGE-lisina, que se una inmediatamente al ADN. Puesto que las clulas de mamfero contienen protena y glucosa, parece probable que la unin covalente de protenas al ADN que se advierte en las clulas envejecidas responda a una reaccin similar. Se desconoce qu efectos derivan de esa unin de protenas con el material gentico.

o se sabe todava por qu la unin al ADN de la glucosa, o de una protena glicosilada, obstaculiza la actividad normal de los bacterifagos, si bien en otro estudio se demostr que la glucosa provocaba una mutacin del ADN. Los investigadores aislaron plsmidos (fragmentos extracromosmicos de ADN bacteriano) portadores
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5. PRODUCTOS FINALES DE LA GLICOSILACION que, segn se sospecha, participan a travs de varios mecanismos en la gnesis de la aterosclerosis y, por tanto, de la enfermedad coronaria, a la que estn predispuestos diabticos y ancianos. Cuando se daa la pared interna de un vaso sanguneo sano (arriba), las protenas del plasma se pegan a la pared arterial (abajo). Los AGE del colgeno de la pared atrapan lipoprotenas de baja densidad (LDL), que se acumulan y forman dep-

sitos de colesterol en las placas aterosclerticas. Los macrfagos intentan extraer esas lipoprotenas, liberando en el proceso un factor que estimula la proliferacin de clulas de msculo liso y su sntesis de ms colgeno (azul). Finalmente, los AGE del colgeno podran capturar el factor de Von Willebrand, que provoca la adhesin de las plaquetas a la pared del vaso. Igual que los macrfagos, las plaquetas liberan un factor de proliferacin celular.

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de genes que conferan a E. coli resistencia contra los antibiticos ampicilina y tetraciclina. Seguidamente incubaron los plsmidos en glucosa6-fosfato, un azcar que reacciona antes que la glucosa, introdujeron el ADN en clulas bacterianas y expusieron las clulas a un antibitico. Muri la mayora de las clulas expuestas a la tetraciclina, mientras que la mayor parte de las expuestas a la ampicilina sobrevivi. Resulta evidente que algunos de los plsmidos incubados portaban el gen de resistencia a la ampicilina, pero haban perdido la actividad del gen de resistencia a la tetraciclina. Estudios adicionales evidenciaron que la mayora de los genes de resis-

tencia a la tetraciclina haban sufrido prdidas o inserciones de ADN. Sospechamos que los genes afectados haban capturado agregados de productos finales de glicosilacin avanzada y que las mutaciones derivaban del intento, por parte de las bacterias, de reparar el ADN modificado por los AGE. Tal conclusin se apoyaba tambin en la observacin de que el ADN de las bacterias que carecan de la enzima reparadora de ADN no mutaba. Para determinar mejor los efectos de los productos finales de glicosilacin avanzada sobre el ADN de clulas humanas estamos desarrollando mtodos nuevos para medir los AGE y las protenas glicosiladas en el ADN. Se necesita profundizar adems en el

conocimiento de los mecanismos celulares de reparacin de los cidos nucleicos glicosilados. El objetivo final de nuestro trabajo sobre envejecimiento y diabetes es encontrar el medio de prevenir o retrasar sus efectos debilitadores. Si nuestra hiptesis de glicosilacin es correcta, tales efectos podran mitigarse evitando la formacin de uniones de entrecruzamiento derivadas de la glucosa o bien aumentando la actividad de los procesos que eliminan los AGE. Para afrontar el primer punto hemos desarrollado, en colaboracin con Peter C. Ulrich, una prometedora droga llamada aminoguanidina. Se trata de una molcula pequea, del grupo de los compuestos conocidos por hidrazinas, que reacciona con los productos Amadori. Por lo que se ve, se une a los grupos carbonilo, impidiendo con ello que los productos Amadori se transformen en productos finales de glicosilacin avanzada.

6. LOS PLASMlDOS, anillos extracromosmicos de ADN bacteriano, mutan al incubarlos con azcar, seal de que la glucosa podra participar en alguna de las alteraciones observadas en el envejecimiento. Despus de la incubacin, se insertaron en E. coli plsmidos dotados de genes que conferan a la bacteria resistencia frente a los antibiticos ampicilina y tetraciclina. Las clulas se reprodujeron normalmente en presencia de ampicilina, mientras que la mayora muri ante la tetraciclina. Al parecer, las enzimas bacterianas intentaban reparar los genes de resistencia a la tetraciclina que acumulaban AGE.

n ensayos del producto efectuados in vitro incubamos albmina con glucosa sola o bien con glucosa y aminoguanidina. Los productos finales de glicosilacin avanzada se formaron en la primera mezcla en media semana y se incrementaron progresivamente con el tiempo. Por el contrario, aun producindose igual cantidad de productos Amadori, en la mezcla de aminoguanidina se apreciaba una notable inhibicin de la formacin de AGE. De la misma forma, cuando incubamos colgeno con glucosa, la protena apareca extremadamente entrecruzada, mientras que la adicin de aminoguanidina bloqueaba casi todos los puentes intermoleculares derivados de glucosa. Resultados parecidos se han obtenido en estudios realizados en ratas diabticas. En la aorta de los animales tratados con aminoguanidina se concentraban menos productos finales de glicosilacin avanzada y menos entrecruzamientos que en la de ratas no tratadas. En un grupo distinto de ratas diabticas hemos demostrado que la aminoguanidina impide la acumulacin de inmunoglobulinas en la membrana basal de los capilares renales y la de lipoprotenas en la pared arterial. Se estn proyectando ensayos de la aminoguanidina en seres humanos. Si la droga resultase inocua, podran llevarse a cabo pruebas a largo plazo de su capacidad para prevenir las complicaciones diabticas. Puesto que la diabetes constituye, en ciertos aspectos, un modelo de envejecimiento, el xito de esos experimentos podra, en
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7. AMINOGUANIDINA, una droga experimental desarrollada en el laboratorio de los autores y que interfiere en la capacidad de los productos Amadori para sufrir los cambios que, en circunstancias normales, provocan el establecimiento de enlaces entrecruzados. Se estudia su eficacia y seguridad en los seres humanos.

nas muy entrecruzadas que terminan por acumularse. Adems, con la edad, el mecanismo de limpieza de desechos que constituyen los macrfagos parece ir perdiendo eficacia. En apoyo de esta ltima idea hemos descubierto que el nmero de receptores de AGE de que disponen los macrfagos de ratn disminuye a medida que envejecen. Tratamos de descubrir frmacos que aumenten el ritmo de extraccin de esos indeseables productos de glicosilacin avanzada, pero el tratamiento adecuado tendr que disolver los productos finales sin daar excesivamente las protenas, irreemplazables. En el caso de la mielina, una estimulacin exagerada de la captacin de AGE en protenas envejecidas o daadas podra desgastar la vaina de mielina, esencial para el funcionamiento nervioso.

ltima instancia, facilitar el estudio de las propiedades de la aminoguanidina (o de compuestos parecidos) para prevenir enfermedades relacionadas con la edad en sujetos no diabticos. Tambin estamos analizando el otro enfoque del tratamiento: incrementar la actividad de los sistemas de extraccin de los AGE del organismo. Aun cuando no pudiera impedirse la formacin de los productos finales de glicosilacin avanzada, cualquier sistema que resultara eficaz en la extraccin de AGE ayudara a contrarrestar el desarrollo de estructuras peligrosas a expensas de las protenas. Los macrfagos, las clulas carroeras que extraen desechos de los tejidos, constituyen, segn parece, uno de esos sistemas de eliminacin.

ace algunos aos que advertimos tal propiedad de las clulas carroeras, cuando examinamos la mielina de los nervios perifricos, que es una mezcla compleja de protenas de vida larga que forman la vaina de aislamiento que rodea las fibras nerviosas. Para simular los efectos de una exposicin prolongada a la glucosa en el organismo, incubamos mielina aislada en glucosa durante ocho semanas. A continuacin aadimos macrfagos a la mezcla. En esas condiciones, las clulas ingeran ms mielina que cuando la sustancia no se haba expuesto al azcar. Tambin eliminaban ms mielina de los animales diabticos que de los no diabticos, por la probable razn de que aqullos portan gran cantidad de productos finales de glicosilacin avanzada. Pruebas ms recientes indican que
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las seales que informan a los macrfagos sobre la captacin de protena son especficamente los productos finales de glicosilacin avanzada. Por ejemplo, hemos encontrado que el macrfago de ratn porta 150.000 receptores para los AGE que se forman sobre la albmina. Los macrfagos intentan ingerir toda protena que aparezca unida a productos finales de glicosilacin avanzada, FFI, pero los receptores de las clulas no reaccionan con ninguna de las sustancias distintas de AGE que se acumulan sobre las protenas, incluidos los productos Amadori. Aflor espectacularmente la afinidad de los macrfagos por los FFI, y por los productos finales de glicosilacin avanzada en general, cuando unimos FFI y otros AGE con las protenas de membrana de glbulos rojos normales. Los macrfagos de ratn captaron con ms avidez las clulas alteradas que las normales. (Adems de apoyar el argumento de que los macrfagos constituyen un sistema extractor de AGE, este hecho indica que los productos finales de glicosilacin avanzada desempean al menos un papel constructivo en el organismo: quiz sealen que una clula ha envejecido y tiene que eliminarse.) Por qu se acumulan los AGE sobre las protenas si el organismo dispone de un sistema para deshacerse de ellos? Carecemos de respuesta, pero resultan verosmiles algunas explicaciones. Por un lado, los productos finales suelen formarse en lugares de difcil acceso para los macrfagos. Por otro, parece cada vez ms difcil la extraccin de las prote-

ebemos contar con ms pruebas antes de poder afirmar con certeza que la glicosilacin no enzimtica de protenas contribuye a las alteraciones hsticas y celulares que caracterizan al envejecimiento. Los datos aportados indican que nuestra hiptesis es prometedora. Y ms importante an, nuestros descubrimientos afianzan la atractiva posibilidad de que algn da se desarrollen tratamientos para prevenir alguno de los cambios que tan a menudo convierten el envejecimiento en sinnimo de enfermedad.

BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA MODIFICATION OF DNA BY REDUCING SUGARS: A POSSIBLE MECHANISM FOR NUCLEIC ACID AGING AND AGE-RELATED DYSFUNCTION IN GENE EXPRESSION. Richard Bucala, Peter Model y Anthony Cerami en Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, vol. 81, n.o 1, pgs. 105-109; enero, 1984. H IGH -A FFINITY R ECEPTOR -M EDIATED UPTAKE AND DEGRADATION OF GLUCOSE-MODIFIED PROTEINS: A POTENTIAL MECHANISM FOR THE REMOVAL OF SENESCENT M ACROMOLECULES . Helen Vlassara, Michael Brownlee y Anthony Cerami en Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, volumen 82, nmero 17, pgina 5588-5592; septiembre, 1985. AMINOGUANIDINE PREVENTS DIABETESI NDUCED A RTERIAL W ALL P ROTEIN CROSS-LINKING. M. Brownlee, H. Vlassara, A. Kooney, P. Ulrich y A. Cerami en Science, volumen 232, nmero 4758, pginas 1629-1632; 27 de junio de 1986.

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