4- PESQUISE E PROCURE DESCREVER DE MANEIRA DETALHADA, COMO OCORRE/FUNCIONA O PROCESSO DE CARREGAMENTO E DESCARREGAMENTO DO FLOEMA NAS DIFERENTES ESTRUTURAS DAS

PLANTAS: COLMO , FRUTO, E RAIZ ( TUBRCULOS). PROCURE LEVAR EM CONSIDERAES OS 3 (TRS) TIPOS DE CELULAS DIFERENCIADAS QUE FORMAM A ESTRUTURA BSICA DO MESMO COM SUAS RESPECTITIVAS FUNES. O Floema um tecido de conduo responsvel pelo transporte e distribuio de elementos nutritivos, principalmente acares, desde as reas de sntese, que so as folhas fotossinteticamente ativas, ou a partir e rgos de reserva, at as reas de consumo desses elementos nutritivos, que so as folhas novas, flores ou frutos em desenvolvimento. um sistema de transporte, constitudo por um conjunto de clulas vivas especializadas chamadas de elementos crivados (elementos do tubo crivado e clulas crivadas), juntamente com as clulas companheiras e as clulas do parnquima vascular (que armazenam e liberam molculas nutritivas) e, em alguns casos, fibras, esclereides (para proteo e sustentao do tecido) e clulas lactferas (clulas que contm ltex). Sua origem ocorre a partir da diferenciao de clulas do cmbio vascular em direo ao exterior, e est, portanto, localizado na parte mais externa da rea vascular, podendo ser e origem primria ou secundria, sendo o floema primrio denominado protofloema que posteriormente ser distendido e destrudo durante o alongamento do rgo. O floema nada mais do que a parte interna da casca das plantas com crescimento secundrio. Nas plantas com crescimento primrio, o floema tambm ocupa a poro externa dos caules, exceo sendo feita para as gramneas, cujos vasos de floema e xilema esto distribudos m vrios feixes dispersos no crtex. Contudo, em cada feixe, o floema tambm ocupa a poro mais externa. CARREGAMENTO DO FLOEMA O carregamento do floema na regio da fonte envolve o movimento dos produtos dos cloroplastos nas clulas do mesofilo para as clulas do tubo crivado. Esse processo ocorre nas nervuras terminais das folhas. Analisando-o sob o ponto de vista anatmico e bioqumico, vemos que a triose fosfato produzida no estroma dos cloroplastos deve ir para o citoplasma e se converter em sacarose. A sacarose deve migrar das clulas do mesofilo para a vizinhana dos Tubos crivados nas nervuras terminais das folhas.

Finalmente, a sacarose deve entrar no complexo Clulas Companheiras e Tubos Crivados. Existem dois tipos principais de carregamento: o simplstico (atravs dos plasmodesmas) e o apoplstico. Nesse ltimo caso, os acares presentes no espao intercelular e na parede celular (apoplasto) devem ser transportados ativamente para atravessarem a membrana citoplasmtica e entrarem no complexo CC-TC. H uma distino entre carregamento do floema e carregamento do complexo CCTC. O carregamento do floema refere-se ao caminho como um todo que os fotoassimilados tomam a partir do mesofilo at o complexo CC-TC. Por outro lado, o carregamento do complexo CC-TC restringe-se descrio da entrada do fotoassimilado neste. O carregamento do complexo CC-TC simplstico quando h uma continuidade simplstica entre este e as clulas adjacentes e apoplstico quando envolve a passagem dos solutos pela membrana. O carregamento do floema simplstico quando todo o caminho simplstico. De modo diferente, o carregamento do floema ser apoplstico se os plasmodesmas esto ausentes em algum ponto do caminho, independente do local onde h a descontinuidade simplstica. Desse modo, uma espcie pode ter carregamento apoplstico do floema, mesmo que o carregamento do complexo CC-TC seja simplstico. A via apoplstica de carregamento ocorre em plantas que possuem CC comuns ou clulas de transferncia nas nervuras terminais. Essas espcies transportam quase que exclusivamente a

sacarose. Plantas com carregamento via apoplasto esto presentes nas famlias Solanaceae (batata, tomateiro), Fabaceae (feijo, ervilha) Chenopodiaceae (beterraba), Asteraceae, Brassicaceae, Balsaminaceae, Boraginaceae e Geraniaceae. Espcies com CC intermedirias fazem carregamento via simplasto. Essas espcies transportam 20 a 80% de seus acares na forma de rafinose e/ou estaquiose, alm da sacarose. Exemplo de espcies com carregamento simplstico esto presentes nas famlias Cucurbitaceae (abobrinha, melo), Labiatae (Coleus blumei) e Convolvulaceae. Um requisito importante para o carregamento apoplstico a ausncia de transpirao na regio onde ele ocorre. Caso haja transpirao, a tenso gerada pelas foras de adeso e coeso no apoplasto pode carregar a sacarose, impedindo seu carregamento no complexo CC-TC. Os carregadores de sacarose so fundamentais para o carregamento apoplstico

Nas folhas fontes o acmulo de sacarose no complexo CC-TC faz com que o potencial osmtico (os) seja mais negativo nesse local do que no mesofilo. Em plantas com carregamento apoplstico, a sacarose do apoplasto entra no complexo CC-TC atravs de um carregador localizado na membrana plasmtica que faz simporte entre sacarose e prtons (H+). Para garantir o suprimento de prtons no apoplasto, necessrio a atividade de uma ATPase.A presena do carreador de sacarose importante tambm para garantir um fluxo contnuo desse acar vindo do mesofilo para o apoplasto, pois ele mantm o potencial qumico dessa substncia sempre baixo no apoplasto. O exemplo disso, a substncia sinttica denominada cida

paracloromercuribenzenosulfnico (PCMBS), o qual parece interferir no carreador de sacarose ou na ATPase, impede o carregamento apoplstico, mas no o simplstico. J foi evidenciado que tanto as ATPases, quanto um carreador de sacarose denominado SUC2 esto localizados na membrana plasmtica das clulas companheiras. Nas clulas de transferncia, esse conjunto est nas invaginaes voltadas para o TC. Um outro carreador denominado SUT1 (presente em Solanceas como tomateiro) est localizado no TC e no na CC. Contudo, o mRNA para SUT1 produzido na CC (pois o TC no tem ncleo). No carregamento apoplstico, antes da sacarose ser carregada no TC da fonte, deve haver um efluxo desse acar do mesofilo para o apoplasto. possvel que existam clulas especializadas no mesofilo para fazer tal processo. Sabe-se que o potssio (K +) estimula essa etapa de sada de fotoassimilados do simplasto para o apoplasto. Portanto, uma boa nutrio com potssio tende a aumentar a sacarose no apoplasto, e isso induz seu carregamento no TC e, em ltima anlise, o crescimento do dreno. Por outro lado, uma diminuio do contedo de sacarose no apoplasto da fonte pode reduzir drasticamente o carregamento de plantas que tem esse processo via apoplasto. Um exemplo disso ocorreu em tomateiro transgnico superexpressando invertase do apoplasto. O Carregamento Simplstico est Relacionado com a Formao de Polmeros de Sacarose No carregamento por simplasto, obviamente, no h a necessidade de um carreador de sacarose para que ela atravesse a membrana plasmtica. Contudo, o acmulo de acares no complexo CC-TC impede que esse processo seja feito por simples difuso,

pois com o passar do tempo o fluxo se reverteria. Uma hiptese para esse tipo de transporte seria o modelo de armadilha de polmero, proposto por Turgeon (1991). Nesse modelo, a sacarose move-se do mesofilo para a clula intermediria onde ela se converte em rafinose mantendo o gradiente de difuso. Rafinose e estaquiose no retornariam ao mesofilo, pois so muito grandes (os plasmodesmas que ligam o mesofilo CC devem ser menores que os que ligam o CC ao TC). DESCARREGAMENTO DO FLOEMA O Descarregamento na Regio do Dreno pode ser Simplstico ou Apoplstico. De todas as etapas do transporte no floema, o descarregamento o que parece estar mais diretamente ligado com as diferenas na capacidade de armazenamento entre os diferentes tipos de drenos. Com as perspectiva de se aumentar o descarregamento em drenos de interesse econmico, tais como frutos, sementes, tubrculos e razes tuberosas, esse processo vem sendo objeto de intensos estudos (Patrick, 1997; Oparka & Santa Cruz, 2000). Assim como o carregamento do floema que ocorre na fonte, o descarregamento que ocorre nos drenos envolve uma srie de etapas, tais como: 1) Descarregamento do soluto vindo do TC 2) ) Transporte a curta distncia depois do descarregamento at as clulas do dreno 3) Armazenamento e metabolismo do acar no dreno.

Essa terceira etapa (armazenamento e metabolismo do fotoassimilado) o que denominamos alocao de assimilados e ser discutida posteriormente. A duas primeiras etapas constituem o descarregamento propriamente dito, o qual pode ser do tipo simplstico ou apoplstico. O descarregamento apoplstico admite duas possibilidades, sendo que o descarregamento do TC pode ser apoplstico (tipo1, Fig. 12) ou pode ser simplstico, possuindo uma etapa apoplstica posterior. O Tipo de Descarregamento varia com a Espcie e com o Estgio de Desenvolvimento A ocorrncia de descarregamento simplstico ou apoplstico varia de acordo com a espcie vegetal, o tipo de tecido ou rgo e a fase de desenvolvimento . Um bom exemplo o fruto de tomate, o qual possui um descarregamento simplstico e uma

acumulao de amido no comeo do desenvolvimento e posteriormente um descarregamento apoplstico e um acmulo de acares solveis. O tipo de descarregamento com maior capacidade de transporte o simplstico e por isso o apoplstico reservado para situaes especiais. O descarregamento do floema tende a ser simplstico (Fig. 12A e B) em drenos nos quais o carbono estocado em polmeros como amido e protenas, ao invs de sacarose. Regies meristemticas caulinares e radiculares normalmente tambm possuem descarregamento do tipo simplstico. Nos pices radiculares, os fotoassimilados chegam regio subapical desses rgos atravs dos elementos do protofloema. Existem plasmodesmas ligando os TCs desses elementos com as clulas meristemticas nos pices radiculares. O descarregamento nos pices caulinares parecido com o que ocorre no pice radicular. Um exemplo de pice caulinar que se transforma em um rgo de reserva o tubrculo de batata. Desse modo, o descarregamento desse dreno de estoque de polmeros simplstico (Fig. 12 A), assim como o meristema caulinar que o originou. Apesar de a cana-de-acar acumular acares solveis e no polmeros, o processo de descarregamento nos colmos que acumulam sacarose necessariamente simplstico, pois h uma barreira apoplstica na parede celular das clulas da bainha do feixe vascular (Fig. 12 B). (Castro, P.R.C; Kluge, R.A & Peres, L.E.P, 2005). O descarregamento apoplstico (Fig. 12 C e D) comum em monocotiledneas (ex. folhas jovens de milho), rgos de reserva que acumulam mono e dissacardeos ao invs de polmeros (ex. razes de beterraba e cenoura), frutos (tomate, uva, laranja) e em sementes em desenvolvimento. Nas sementes em desenvolvimento necessrio um descarregamento apoplstico, pois no h conexo simplstica entre o tecido materno e os tecidos do embrio (Fig. 12 D). O descarregamento apoplstico em razes que acumulam carboidratos como, a beterraba e a cenoura, feito em trs etapas: 1) Efluxo do acar para o apoplasto. 2) Passagem do acar para as clulas parenquimticas do floema. 3) Passagem simplstica para as clulas parenquimticas de estoque. As Enzimas Invertases so Fundamentais para o Descarregamento Apoplstico Durante o processo de descarregamento, necessrio que se mantenha o potencial de sacarose sempre baixo na clula receptora, para que no haja refluxo desse acar. Em rgos com descarregamento simplstico, o baixo potencial qumico de sacarose mantido pela respirao ou pela converso dos acares transportados em compostos necessrios para o crescimento ou em polmeros de estoque. J em rgos com descarregamento

apoplstico, as invertases desempenham um papel central na manuteno de um baixo potencial de sacarose para que haja uma chegada contnua desse composto nas clulas receptoras (Figura 13). A enzima invertase pode agir em diversos locais na clula receptora (Figura 14) e sua ao em conjunto com os transportadores de acares. Se a atividade da invertase no apoplasto, a entrada do assimilado na clula receptora requer a presena de transportadores de hexose na plasmalema. Por outro lado, se sua ao no citoplasma ou no vacolo, transportadores de sacarose devem estar presentes na plasmalema ou no tonoplasto, respectivamente. As invertases e os carreadores de acares tambm podem funcionar como mecanismos de recuperao de acares que se perdem para o apoplasto durante o descarregamento simplstico (Patrick, 1997). Desse modo, espcies com carregamento simplstico podem ter uma via apoplstica paralela. Um exemplo disso parece ser a batata, pois apesar de possuir um descarregamento simplstico, a superexpresso de invertase no apoplasto do tubrculo tende a aumentar a acumulao de matria seca nesse rgo. Tanto o Descarregamento Simplstico quanto o Apoplstico so Dependentes de ATP No descarregamento apoplstico pode haver necessidade de gasto de energia para que os assimilados atravessem membranas. Nesse tipo de descarregamento, o acar deve atravessar duas membranas: a do TC e a da clula receptora. s vezes h necessidade de atravessar a membrana do tonoplasto tambm, se a sacarose for armazenada no vacolo. Embora no haja necessidade de atravessar membranas no descarregamento simplstico, h necessidade de energia para o metabolismo e biossntese de polmeros de reserva. Em leguminosas, tanto a sada do TC quanto a entrada na clula receptora so processos ativos. Em trigo, a sada passiva (a favor de gradiente) e a entrada ativa. Tanto o transporte de hexose quanto o de sacarose costuma ser realizado em co-transporte (simporte) com prtons. Para manter um alto potencial de prtons utilizados no cotransporte, necessrio o gasto de energia atravs das ATPases. Pelo exposto acima, pode se concluir que trs protenas fundamentais esto envolvidas no descarregamento apoplstico do floema, ou seja: as invertases, as protenas transportadoras de acar atravs das membranas e as H+ - ATPases. O estudo e a manipulao da atividade dessas protenas pode ser a chave para aumentar o descarregamento em alguns drenos de interesse agronmico. No caso do descarregamento simplstico, o principal

mecanismo para garantir sua continuidade a sntese de polmeros, sobretudo o amido. A sntese de polmeros, ou seja, o metabolismo do acar transportado considerado alocao de assimilados.

SUBSTNCIAS TRANSPORTADAS Muito do que sabemos hoje sobre transporte no floema graas ao estudo dos afdeos (pulges e cochonilhas). Esses insetos introduzem seu aparelho bucal (rostro), diretamente no TC e ao analisarmos o contedo sugado podemos deduzir o que transportado no floema. Pulges anestesiados com fumigao de CO2 tm seus rostros isolados e estes continuam exsudando seiva, j que o floema est sobre presso. Essas anlises indicam que o principal soluto transportado no floema a sacarose. A

concentrao de sacarose transportada varia entre 0,3 a 0,9 M. Alm da sacarose, o floema transloca outros acares no redutores (pois so menos reativos), tais como: rafinose (sacarose + galactose), estaquiose (sacarose + 2 galactoses) e verbascose (sacarose + 3 galactoses). Acares cujos grupos aldedo e cetonas foram reduzidos a lcool (manitol, sorbitol) tambm so translocados. (Castro, P.R.C; Kluge, R.A & Peres, L.E.P, 2005; Taiz, L. & Zeiger, E., 2004).O floema tambm um importante transportador de nitrognio. O nitrognio ocorre no floema na forma de aminocidos (glutamato e aspartato) e aminas (glutamina, asparagina), mas nunca na forma de nitrato. Protenas essenciais para o funcionamento celular (tiorredoxina, quinases, ubiquitina, chaperonas) tambm so translocadas. Apesar do floema no transportar nitrato, ele transporta muitos nutrientes minerais, tais como: Mg 2+, PO43-, Cl- e K+ . Esse ltimo, o potssio, juntamente com a sacarose, o principal componente osmtico da seiva do floema. Alm do NO3-, o floema tambm no transporta Ca2+, SO42- e Fe. Como o Ca2+ mantido em baixas concentraes no simplasto e o floema tem citoplasma, compreensvel que ele no seja translocado via floema. A pouca mobilidade do Fe pode ser devido sua precipitao nas folhas velhas sob a forma de fosfatos ou xidos insolveis ou pela complexao com a fitoferritina, uma protena que se liga a Fe presente nas folhas. Substncias cidas tendem a ficar presas no floema, pois ele bsico. Por fim, o floema tambm transporta substncias sinalizadoras, sendo importante na comunicao entre as vrias partes das plantas. Entre as substncias sinalizadoras transportadas no floema, esto os hormnios vegetais do tipo auxina, giberelina, citocinina e cido abscsico. Outro importante sinal transportado pelo floema o RNA mensageiro (mRNA). Em experimentos de enxertia combinando uma planta de gentipo mutante especfico com outra de gentipo normal, pode se provar que substncias passadas pelo floema so capazes de modificar o fentipo de plantas no mutantes. A substncia em questo o mRNA da planta mutante (Kim et al., 2001). De modo semelhante, bem conhecido que ao enxertarmos planta no induzidas para o florescimento em plantas induzidas, uma substncia desconhecida (florgeno) capaz de ser passada atravs do floema para a planta no induzida, provocando seu florescimento. Alm de RNA, o floema tambm transporta outras macromolculas como peptdeos (ex. sistemina) e partculas virais (Oparka & Santa Cruz, 2000).

A gua a substncia mais abundante transportada no floema. Os solutos translocados, sobretudo carboidratos, esto dissolvidos em gua. A sacarose o acar mais comumente transportado nos elementos crivados. Em termos gerais, a concentrao na maioria das plantas fica em torno de 12 e 120 mg e acar por mL de volume de floema. (Taiz, L. & Zeiger, E., 2004 ; Kerbauy,