Accin de antimicrobianos

Ana Mara Velasco1,Julin Ovalle2 1,2 programa de Ingeniera de alimentos Dirigido a: Alfredo Lpez Molinello Microbiologa de Alimentos Fecha de elaboracin: 18-09-2012
Resumen Un antimicrobiano es una sustancia que mata o impide el crecimiento de microbios como hongos, virus, parsitos y bacterias. Se puedes sintetizar natural o artificialmente, los naturales (antibiticos) se obtienen a partir de microorganismos como hongos y bacterias, y los artificiales (agentes qumicos) por sntesis qumica. Los efectos de los antimicrobianos pueden ser bacteriostticos o bactericida, el bacteriosttico impide el crecimiento de microorganismos mientras acta (vuelven a crecer en su ausencia) y el bactericida tiene efectos letales y su accin es irreversible. En la prctica se hizo una siembra de las bacterias E. Coli y Pseudomona en cuatro cajas de Petri (dos por cada una), despus se colocaron antibiticos y agentes qumicos (uno por caja), los antibiticos se sacaron de empaques ycon ayuda de una pinza estril se colocaron en puntos especficos de la siembra en donde se pudiese observar su accin en la caja y ver si las bacterias crecan en su presencia; los agentes qumicos fueron alcohol, Decol y detergente preparados previamente, los cuales se humedecieron en un papel de confeti y se tambin se colocaron en diferentes reas (distantes) de la siembra y se dej incubar por dos das para posteriormente observar si haba crecimiento microbiano. Los resultados arrojaron que la bacteria Pseudomona es resistente a todos los 6 antibiticos pero no al Decol que es un agente qumico, y E. Coli es resistente a los antibiticos salvo vancomycinatetracyclinaystreptomycina; y tampoco lo es para el decol. Esto indica que la bacteria Pseudomona es ms resistente a los antibiticos queE. Coli y ambas son vulnerables al decol. En conclusin no todas las bacterias son igual de resistentes a los antimicrobianos que pueden diferir en su accin bactericida o inhibidora. Los usos pueden ser muy amplios en cuanto a la limpieza, desinfeccin y combate de enfermedades. Palabras claves: Antimicrobianos, mecanismos de accin, vas metablicas Introduccin Un antibitico ha sido definido como una sustancia qumica producida por un microorganismo capaz de inhibir el desarrollo de otros microorganismos. Los antibiticos manipulaciones consideran como modificados qumicas tales. aun Un por se

agente

antimicrobiano

es

activo

contra

los

Desde el punto de vista prctico existen distintos tipos de antimicrobianos: Desinfectantes: slo se aplican a

microorganismos y puede ser producido en forma natural por microorganismos o sintticamente en el laboratorio. Muchas bacterias y algunos hongos presentan resistencia a los agentes antimicrobianos y algunos virus han desarrollado resistencia a los agentes antivirales ms actuales. Los patrones de resistencia cambian en forma constante y no importa lo rpidamente que se introduzcan teraputicos parecen superarlos. los nuevos los agentes microbios a los

sistemas inanimados y eliminan la carga microbiana total. Sanitizantes: slo se aplican a sistemas inanimados y disminuyen la carga

microbiana total. Antispticos: reducen y controlan la presencia potencialmente de microorganismos slo se

patgenos,

pueden aplicar externamente en seres vivos (piel y/o mucosas). Antimicrobianos de uso sistmico: reducen y controlan la presencia de microorganismos que han invadido los tejidos. pudiendo absorbidos inyectados. Los agentes antimicrobianos de uso Actan ser por en el organismo, (va oral), y/o

porque siempre Incluso

dispuestos entre

neumococos, que por dcadas han permanecido invariablemente

susceptibles a niveles de penicilina G menores de 0.04 U/ml, han aparecido cepas que han desarrollado resistencia a esta droga. Ya que no se puede predecir la

ingeridos piel

(apsitos)

sistmico se pueden clasificar segn su origen, efecto antimicrobiano, espectro de actividad y mecanismo de accin. Origen: Naturales: se obtienen a partir de

susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es necesario estudiar la

sensibilidad individual de cada patgeno a estas drogas, pudindose elegir

microorganismos etc.).

(hongos,

Bacterias,

entonces el agente apropiado (el ms activo contra el patgeno, el menos txico para el husped, con las

Sintticos: se obtienen totalmente por sntesis qumica. Semisintticos: modificaciones se obtienen qumicas por de

caractersticas

farmacolgicas

apropiadas y el ms econmico), que proporciona mayores posibilidades de una evolucin favorable.

antimicrobianos naturales, con el fin de mejorarlos.

Efecto: BACTERIOSTTICO: la mxima

por parte de estos microorganismos, de enzimas capaces de destruir la

concentracin no txica que se alcanza en suero y tejidos impide el desarrollo y multiplicacin de los microorganismos, sin destruirlos, pudiendo estos

penicilina, conocidas con el nombre de betalactamasas.Estas enzimas, y

producidas por numerosas bacterias

actimicetos, convierten la penicilina en cido peniciloico de un inactivo, segundo por la

multiplicarse nuevamente al desaparecer el agente antimicrobiano. Sirven para complementar los mecanismos

liberacin

grupo

carboxilo.La resistencia no mediada por penisilinasas se conoce con el nombre de resistencia ala meticilina y se debe a una alteracin de la transpeptidasa blanco,la resistencia adquirida es

defensivos del husped. BACTERICIDA: su accin es letal sobre los microorganismos, por lo que stos pierden irreversiblemente su viabilidad o son lisados. Espectro de actividad: Amplio: actan sobre un gran nmero de especies microbianas (ej.

consecuencia de la seleccin de cepas resistentes naturales, que habitualmente son mantenidas bajo control por la sepa parental sensible (Gennaro A, 2003). La resistencia de bacterias no solo es un problema de salud pblica, en la

TETRACICLINA). Intermedio: actan sobre un nmero limitado de microorganismos (ej.

comunidad, porque hay infecciones de la comunidad, que se atienden en forma ambulatoria, como por ejemplo infeccin de vas urinarias, que son producidas por bacterias: E.Coli; antes eran S. pneumoniae, que a ampicilina,

MACROLIDOS). Reducido: actan sobre un pequeo nmero de especies microbianas (ej. POLIMIXINA). Mecanismos de accin: Inhibicin de la sntesis de la pared celular, alteracin de la permeabilidad celular, Inhibicin de la sntesis proteica, Inhibicin de la sntesis de DNA y RNA. (Guas de laboratorio de microbiologa, Universidad de la Salle). La resistencia de numerosas bacterias Gram positivas y Gram negativas a las penicilinasas se debe a la produccin,

sensibles

penicilina y hoy son resistentes (Bentez J, 2012) E.Colies resistente un 81.2% a la Eritromicina (Uribe A et Al ,1998). El antibitico Estreptomicina inhibe el crecimiento de la bacteria E. Colila, mayor parte de las bacterias E.Colison sensibles a este antibitico, en su presencia su crecimiento se detiene. (Mangiarotti J, 1987)

La Estreptomicina Amino clucocido, es un bactericida eficaz en medio alcalino extracelular, Acta en la subunidad ribosomal 30 s, inhibiendo la traduccin del RNAm y por lo tanto la sntesis proteica microbacteriana (Reyes M at AL, 2006) La Tetraciclina es inhibidor de la sntesis de protenas Son introducidas en la clula por un sistema de transporte activo formando un complejo con iones Mg2+. Dentro de la clula, el complejo Tetraciclina-Mg2+ se une a residuos

penicilinas y amino glucsidos. (Chirinos J, 2011) La Vancomicina es un glicopptido que forma un complejo con la regin D-Ala-DAla del precursor del peptidoglicano. El complejo formado impide la

transglicosilacin del disacrido-peptdico precursor y la cadena de peptidoglicano. En consecuencia se acumulan

precursores en el citoplasma y en la membrana citoplasmtica unidos al lpido transportador. La vancomicina no

penetra al citoplasma y slo interacta con el extremo terminal del pptido cuando el precursor es traslocado por el lpido transportador hacia la regin

fosfatos de la subunidad 30S, bloquean la unin de los ARNt-aminocido al sitio aminoacil del ribosoma e impiden el alargamiento de la cadena peptdica en formacin. Adems interfieren en la formacin del complejo de iniciacin 30S. (Somera M, 2011). En la resistencia a tetraciclina, El complejo determinante R mas el factor de transferencia de la resistencia es conocido como factor R. La aparicin de resistencia mediada por factores R es muy importante entre bacterias Gram negativas, en especial entre Enterobacterias. Entre los

externa de la membrana citoplasmtica. La vancomicina, adems de impedir la transglicocilacin, inhibe la

transpeptidacin de estos precursores al bloquear el sitio de ataque de las transpeptidasas y carboxipeptidasas.Se utiliza sobre microorganismos Gram

positivos,especialmente en Staphylococcus, enterococos y

algunos Clostridium.Los microorganismos Gram negativos son naturalmente resistentes a este

microorganismos capaces de transferir este tipo de resistencia a bacterias sensibles estn

antimicrobiano y se debe al reemplazo en el pentapptido de la D-Ala terminal por D-Lactato. Esta sustitucin produce una muy marcada disminucin de la afinidad entre la vancomicina y la regin D-Ala-D-Lac, y no afecta a la

Escherichiacoli, Salmonella, Shiguella, Kl ebsiella y pseudomonasaeruginosa. Por este mecanismo se produce resistencia a tetraciclinas, cloramfenicol, sulfonamidas,

transglicosilacin ni a la transpeptidacin. Esta resistencia esta codificada en

de un material. Pueden (y en muchos casos suelen) presentar efectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear slo sobre materiales

transposones, el ms conocido es el Tn1546 de enterococos (somera M, 2011). La Eritromicina inhibe la sntesis de protenas bacterianas al fijarse en forma reversible a la subunidad ribosomal 50s.La Eritromicina penetra en la pared celular bacteriana ms rpidamente en el estado no inico (Ake s at Al, 2002). RESISTENCIA A LA ERITROMICINA: Mutaciones en el cromosoma: provocan una modificacin de la subunidad

inertes(Rodrguez D, 2011). En la prueba con decol, la actividad antimicrobiana del cloro se atribuye en gran parte al acido hipocloroso no disociado, el mecanismo de accin se basa en la inactivacin de las reacciones enzimticas, de cidos nucledos y

desnaturalizacin de protenas de las clulas bacterianas, la accin microbicida es muy rpida. (Negroni A, 2009). El alcohol es considerado un antisptico es decir que reduce y controla la potencia de microorganismos potencialmente

ribosomal y una menor afinidad por la droga. Plsmidos: provocan una alteracin en el RNA 23S que origina una menor afinidad por la droga. Este tipo de resistencia puede ser constitutiva o inducible. Enzimas que inactivan al frmaco:

patgenos, la concentracin ms efectiva es al 70 % a concentraciones mayores pierde actividad como antisptico

(Castilla M at AL ,2006)

esterasas sintetizadas en enterobacterias hidrolizan e inactivan al antimicrobiano (somera M, 2011) Los detergente (o son Agentes germicidas) son todo qumicos)

desinfectantes agentes (sobre

antimicrobianos capaces de matar los microorganismos patgenos (infecciosos)

Metodologa

Para agentes qumicos

Para de antibiticos

Tomar una caja de Petri

Tomar una caja de Petri

Marcar cada una de las cajas con el nombre de las bacterias y tipo de agente a utilizar.

Marcar cada una de las cajas con el nombre de las bacterias y tipo de antibitico

Siembre de forma masiva las bacterias

Siembre de manera masiva las bacterias

Tome un papel de confeti impregnado con los agentes qumicos

Tome los 5 tipos de antibiticos y coloque sobre la siembra, separados entre s.

Ponga el confeti sobre la siembra

Incubar a la temperatura correspondiente.

Incubar a la temperatura correspondiente.

Observe resultados

registre

Observe resultados

registre

Resultados Prueba accin antimicrobiana en E. Coli Negativo Positivo (inhibidor dbil) Negativo Positiva (inhibidor) accin antimicrobiana Pseudomona Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Positivo (bactericida) Negativo

en

ANTIBITICOS

P10 PENICILINA VA30 VANCOMYCINA E15 ERYTROMICINA S10 STREPTOMYCINA TE30 Positiva (inhibidor) TETRACYCLINA AGENTES DETERGENTE Negativo QUMICOS DECOL Positivo (inhibidor) ALCOHOL Negativo Tabla 1. Resultados de accin de antimicrobianos en E. Coli y Pseudomona.

Imagen 1.Resultados de antibiticos en E. Coli.

Imagen 2. Resultados de agentes qumicos en E. Coli.

Imagen 3. Resultados de antibiticos en Pseudomona.

Imagen 4. Resultados de agentes qumicos en Pseudomona.

Anlisis de resultados En la prueba de accin antimicrobiana en E. Coli del antibitico p10 penicilina dio negativa es decir que la penicilina no inhibe el crecimiento esta bacteria ya que E. Coli es resistente (Gennaro A, 2003). La resistencia de numerosas bacterias Gram positivas y Gram negativas a las penicilinasas se debe a la produccin, por parte de estos microorganismos, de enzimas capaces de destruir la

En

la

prueba

de

tetraciclina,

Pseudomonadio un resultado negativo es decir que la bacteria es resistente a este antibitico lo cual confirma (Chirenos J, 2011) La aparicin por factores de R resistencia es muy Gram entre los

mediada importante negativas,

entre en y

bacterias especial entre

Enterobacterias

microorganismos capaces de transferir este tipo de resistencia a bacterias sensibles estn las Pseudomona. Por este mecanismo se produce resistencia a tetraciclinas y penicilinas; segn

penicilina, conocidas con el nombre de betalactamasas. Estas enzimas, y

producidas por numerosas bacterias

actimicetos, convierten la penicilina en cido peniciloico inactivo, por la

(somera M, 2011)

la resistencia a

tetraciclinas se debe a a l menos dos mecanismos Tetraciclinas, de el resistencia mecanismo a las ms

liberacin de un segundo grupo carboxilo adems que La resistencia no mediada por penisilinasas se conoce con el nombre de resistencia ala meticilina y se debe a una alteracin blanco,la de la

importante se debe a la disminucin en la acumulacin celular de la droga, esto se produce por una alteracin en el sistema de transporte que limita la captacin de Tetraciclina o a una va de eliminacin por bombeo del antimicrobiano,

transpeptidasa adquirida es

resistencia de la

consecuencia

seleccin de cepas resistentes naturales, que habitualmente son mantenidas bajo control por la sepa parental sensible.E. Coli que antes eran sensibles a penicilina hoy es resistente (Benites J, 2012). Y Pseudomonatambin arroj un resultado negativo es decir que tambin es

dependiente de energa, hacia el exterior de la clula. La alteracin en el sistema de transporte es producida por protenas inducibles que estn codificadas en plsmidos mecanismo y se transposones;el evidencia por otro una

resistente a la penicilina, lo cual confirma (Chirenos J, 2011).

disminucin de la afinidad del ribosoma por el complejo de Tetraciclina-Mg2+ a en prueba el dio

causa

mutaciones E.Colila

cromosoma.En

positiva

segn

(somera

M,

2011)

positivo es decir el antibitico inhibe el crecimiento de la bacteria lo cual afirma (Mangiarotti J, 1987) que la mayor parte de las bacterias E.Colison sensibles a este antibitico, en su presencia el crecimiento se detiene.La inhibicin se debe a que la Estreptomicina es Amino clucocido, bactericida eficaz en el medio alcalino extracelular. Acta en la

tetraciclina es inhibidor de la sntesis de protenas Son introducidas en la clula por un sistema de transporte activo formando un complejo con iones Mg2+. Dentro de la clula, une el a complejo residuos

Tetraciclina-Mg2+ se

fosfatos de la subunidad 30S, bloquean la unin de los ARNt-aminocido al sitio aminoacil del ribosoma e impiden el alargamiento de la cadena peptdica en formacin. Adems interfieren en la formacin del complejo de iniciacin 30S. En La prueba de vancomicina se observ una inhibicin mnima de la bacteria E.Coliy una resistencia microorganismos como son E.coliy

subunidad ribosomal 30 s, inhibiendo la traduccin del RNAm y por lo tanto la sntesis proteica microbacteriana (Reyes M at AL, 2006)Pseudomona es resistente a este antibitico lo cual no permiti que fuese afectada. La prueba de tetraciclina

enPseudomona.Los Gram negativos

enPseudomonadio un resultado negativo es decir que la bacteria es resistente a este antibiticos lo cual confirma

Pseudomona

naturalmente

resistentes a este antimicrobiano La resistencia de los microorganismos a la vancomicina se debe al reemplazo en el pentapptido de la D-Ala terminal por DLactato. Esta sustitucin produce una muy marcada disminucin de la afinidad entre la vancomicina y la regin D-Ala-DLac, y no afecta a la transglicosilacin ni a la transpeptidacin. Esta resistencia esta codificada en transposones, el ms conocido es el Tn1546 de

(Chirenos J, 2011) pues

dice que la

aparicin de resistencia mediada por factores R es muy importante entre bacterias Gram negativas, en especial entre Enterobacterias y que entre los microorganismos capaces de transferir este tipo de resistencia a bacterias sensibles estn Pseudomonas. Por este mecanismo se produce resistencia a tetraciclinas, y penicilinas.Esta prueba para E.Colifue positiva es decir que inhibe el crecimiento de la bacteria segn (somera M, 2011) la tetraciclina es inhibidor de la sntesis de protenas Son introducidas en la clula por un sistema

enterococos.(Somera M, 2011) En la realizacin de la prueba de S10 Estreptomicina se observo un resultado

de

transporte

activo

formando

un

(infecciosos) de un material. Pueden (y en muchos casos suelen) presentar efectos txicos sobre tejidos vivos. Los desinfectantes, eliminan la carga

complejo con iones Mg2+. Dentro de la clula, el complejo Tetraciclina-Mg2+ se une a residuos fosfatos de la subunidad 30S, bloquean la unin de los ARNtaminocido al sitio aminoacil del

microbiana total, sin embargo a estas bacterias no las afect lo cual puede haber ocurrido porque tal vez la

ribosoma e impiden el alargamiento de la cadena peptdica en formacin. Adems interfieren en la formacin del complejo de iniciacin 30S. Para E.Coli en la prueba de Eritromicina dio un resultado negativo es decir que no inhibe el crecimiento de E.Colien la cual confirma (Uribe A et Al ,1998) que E.Coli es resistente un 81.2%, y esta resistencia se debe a Mutaciones en el cromosoma que provocan una modificacin de la subunidad ribosomal y una menor

concentracin de este fue muy poca. (Rodrguez D, 2011) En la prueba con decol, elimina

(bactericida) la bacteria Pseudomona e inhibe en E. Colila prueba la actividad antimicrobiana del cloro se atribuye en gran parte al acido hipocloroso no disociado, el mecanismo de accin se basa en la inactivacin de las reacciones enzimticas, de cidos nucledos y

desnaturalizacin de protenas de las clulas bacterianas y la accin

afinidad por la droga, a plsmidos que provocan una alteracin en el RNA 23S que origina una menor afinidad por la droga. Este tipo de resistencia puede ser constitutiva o inducible y por ultimo las enzimasesterasas sintetizadas en

microbicida es muy rpida (Negroni A, 2009) En la prueba con alcohol la respuesta fue negativa para ambas bacterias es decir que no se inhibi el crecimiento de la bacteria El alcohol es considerado un es decir que reduce y

enterobacterias hidrolizan e inactivan al antimicrobiano (Somera M, 2011). En los agentes qumicos E.Coliy

antisptico

controla la potencia de microorganismos potencialmente patgenos, la

Pseudomona fueron resistentes a el detergente estos Agentes desinfectantes (o germicidas) son agentes (sobre todo qumicos) antimicrobianos capaces de matar los microorganismos patgenos

concentracin ms efectiva es al 70 % a concentraciones mayores pierde

actividad como antisptico (Castilla M at AL ,2006) por locual puede haber dado negativo y tal vez el antisptico se vio

afectado por la concentracin ya que no fue la adecuada para actuar en los microorganismos. Conclusiones los agentes antimicrobianos tienen distintas formas de accin que son bactericida crecimiento o y inhibidora afectan de a de los forma

qumicos

son

sintetizados

en

laboratorio, por ejemplo el decol. La sensibilidad ante de los agentes

microorganismos

antimicrobianos es muy variada y depende espectros principalmente de de los del

actividad

antimicrobiano y de la resistencia de cada bacteria. La Estreptomicina acta inhibiendo la traduccin del RNAm, la Tetraciclina y la

microorganismos

diferente, en algunos hacen efecto y en otros no. Son utilizadas en limpieza, desinfeccin y combate de enfermedades y segn su grado de poder se utilizan en desinfectantes (eliminan la carga microbiana total), antispticos (controlan la presencia de microorganismos), sanitizantes (disminuyen la carga microbiana total) y antimicrobianos de uso sinttico (controlan la presencia de microorganismos en el organismo). Los que son txicos se suelen emplear en superficies inanimadas y los que son controladores se suelen aplicar en seres vivos como los antibiticos para enfermedades frecuentes los agentes antimicrobianos se

Eritromicinainhiben la sntesis de protenas, la vancomicina impide la transglicocilacin y la penicilina

altera la pared celular bacteriana. Los agentes qumicos como el alcohol actan desnaturalizando las protenas y las bacterias como E. Coli son menos resistentes ante estos agentes que las bacterias de generoPseudomona.

Bibliografa Gennaro A, (2003).Remington Farmacia, Volumen 2; Ed. Mdica Panamericana Resistencia Bacteriana a Antibiticos. (2012), Bentes J .Extrado de: http://www.medicosecuador.com/ espanol/articulos/242.htm Principales Avances en Investigacin Y Desarrollo Tecnolgico Por Sistemas de Produccin Pecuaria. (1998), Uribe A et Al. Extrado de

dividen en biolgicos y qumicos, los biolgicos son obtenidos de forma natural de microorganismos como hongos y bacterias, y los

:http://books.google.com.co/books ?id=-PWBqu4W90C&hl=es&source=gbs_na vlinks_s Mangiarotti J, (1987).Del gen al organismo: Biologa general; PICCIN Reyes M at AL, (2006).Neumologa peditrica; Ed. Mdica Panamericana Antimicrobianos, (2011). Somera M, Extrado de : http://es.scribd.com/doc/5155141 6/Antimicrobianos Los Mecanismos de la Resistencia Microbiana. Chirinos J, ( 2011).Extrado de :http://www.ucsm.edu.pe/ciemucs m/larev/mecre.htm Ake s at Al, (2002).Tratado de Medicina Critica y Terapia

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