Previo 6 Cromatografa en capa fina

OBJETIVOS

Conocer la tcnica de cromatografa en capa fina, sus caractersticas y los

factores que en ella intervienen. Observar la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados. Emplear la tcnica de cromatografa en capa fina como criterio de pureza e identificacin de sustancias. ANTESCEDENTES a) Concepto de cromatografa. Tipos de cromatografa de adsorcin y cromatografa de particin. Ejemplos. La cromatografa puede definirse como un mtodo de separacin de sustancias, que se fundamenta en un principio de retencin selectiva para poder separar los componentes de una mezcla, lo cual permite identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. En las tcnicas cromatogrficas siempre hay una fase mvil que consiste en un lquido o un gas (generalmente, aunque tambin puede ser un fluido supercrtico), que arrastra a la muestra a travs de una fase estacionaria que se trata de un slido o un lquido fijado en un slido, en la cromatografa de capa fina se refiera a la fase mvil como eluyente. La cromatografa se basa en que los componentes de la mezcla interaccionan en forma distinta con la fase estacionaria.

* Tipos de cromatografa:
Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina Cromatografa de lquidos Cromatografa de gases Cromatografa de fluidos supercrticos

* Cromatografa de adsorcin.
Es una cromatografa que permite separar fsicamente los distintos componentes de una solucin por adsorcin selectiva de los constituyentes de la mezcla. El mtodo se denomina cromatografa lquido-slido y se abrevia como LSC, se dice que el mecanismo que predomina en este proceso de cromatografa es la adsorcin de los compuestos en la superficie slida.

* Cromatografa de particin.
Es aquella en la que la cromatografa se da por la particin del soluto entre dos fases lquidas, es decir que se lleva a cabo gracias a las solubilidades relativas del compuesto en una fase con respecto a la otra, por tanto las sustancias se ven retenidas en la fase en la que presentan mayor solubilidad.

b) Fenmeno de adsorcin. La propiedad de retencin. Concepto de Rf. Adsorcin: La adsorcin es un proceso por el cual los tomos, iones o molculas quedan retenidas en la superficie de un material; dentro de la qumica se dice que la adsorcin de una sustancia es su acumulacin en una determinada superficie interfacial entre dos fases. Concepto de Rf: Es una relacin de la distancia que recurre el eluyente y la distancia que recorre una muestra, se define de la siguiente forma: donde A es la distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicacin y B es la distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente. La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de expresar la posicin de un compuesto sobre una placa como una fraccin decimal, mide la retencin de un componente. Se define como: La distancia recorrida por el compuesto se mide generalmente desde el centro de la mancha, los clculos se simplifican si el denominador es 10. Para que los RF sean reproducibles deben ser fijadas una serie de condiciones (Espesor de la

placa, fase mvil, fase estacionaria, cantidad de muestra). El mximo valor de RF que se puede alcanzar es de 1, lo ideal es un RF entre 0.65 y 0.7.

c) La cromatografa en capa fina. Sus caractersticas y aplicaciones. Cromatografa en placa fina: En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascender, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta produciendo "manchas" de los componentes. En la cromatografa en capa fina (ccf), el grado de elucin de las sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado. El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rgido, que pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister. Los tamaos de la placa para ccf convencionales son: 20 x 20; 't0 x20 y 5x2 cm. Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirn otras tcnicas de revelado. Aplicaciones: Anlisis cualitativo de los componentes de una muestra.

d) Eluyentes, soportes y reveladores ms comunes para la cromatografa en capa fina. Eluyentes ms comunes para cromatografa en capa fina ter de oetrleo cloruro de metileno n-hexano acetato de etilo ciclohexano acetona tolueno iso-propanol dietil-ter etanol f-butil-ter metanol cloroformo cido actico

 Reveladores ms comunes para cromatografa en capa fina Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse mediante: a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a F366), el nmero que aparece como subndice nos indica Ia longitud de onda de excitacin del indicador utilizado" b) La introduccin de la placa en vapores de yodo c) El roco con una solucin de agualH2SOa 1 :1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero hasta carbonizar los compuestos. Adsorbentes ms comunes para cromatografa en capa fina. a) Gel de slice (se utiliza en el 80% de las separaciones) b) Oxido de Aluminio o Almina (cida, neutra o bsica) c) Celulosa (Nativa o micro-cristalina) d) Poliamidas Para la seleccin del adsorbente deber tomar las siguientes

consideraciones: a) Polaridad b) Tamao de partcula c) Dimetro d) rea Superficial e) Homogeneidad f) Pureza

e) Factores que influyen en una separacin por cromatografa de capa fina. a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben ms en la fase estacionaria. b) La cromatografa debe llevarse a cabo en un rea sin corrientes de aire. c) Limpieza de las placas. Muchas placas estn contaminadas con grasa o agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequea escala, stas deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y despus dejar secar completamente antes de aplicar la muestra. d) Pureza de los disolventes.

REFERENCIAS Cses Valcrcel, M., Henz Gmez, A. Tcnicas analticas de separacin, Editorial Revert, Espaa, 1988. Textos Cientficos.com. Cromatografa de capa fina. Consultado el 17 de Septiembre de 2013 desde http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/capa-fina