ERITROCITO

ESTRUCTURA Y FUNCIONES
Bioq. GONZALO OJEDA CATEDRA HEMATOLOGIA CLINICA Fa.C.E.N.A UNNE 2011

Valores hematimtricos normales en nios

GR (millones/mm3) Nacimiento y primeras semanas 2 semanas 4 semanas 6 semanas 8 semanas 12 semanas 6 meses a 5 aos Hb (g%) Hto (%)

5.6-6.0 4.8 4.0 3.6 3.4 3.8 4.9

18.5

58

10.5 11.6 12.513.0

30 35 36-40

Valores hematimtricos normales en adultos

GR Varones Mujeres Hb (g%)
17.0

Hto 40 48

4.5 5.5 13.5

4.0 4.8 11.5 37 44 14.0 Menopausia Los valores se van asemejando a los del varn Aosos Valores semejantes a los del varn sin diferencia por sexo

EL ERITROCITO TIENE LA MISION FUNDAMENTAL DE PROTEGER Y TRANSPORTAR LA HEMOGLOBINA PARA QUE ESTA PUEDA INTERVENIR EN LA FUNCION RESPIRATORIA

PROERITROBLASTO O PRONORMOBLASTO

ERITROBLASTO BASFILO

ERITROBLASTO POLICROMATFILO

ERITROBLASTO ORTOCROMTICO

ISLOTE ERITROBLSTICO

RETICULOCITOS (ABC)

7 m

2 m

Volumen fL

Superficie m

90 90

140 97

MEMBRANA ERITROCITARIA
LIPIDOS PROTEINAS HIDRATOS DE CARBONO

LIPIDOS
40% DEL PESO SECO DE LA MEMBRANA PLP Y COLESTEROL AGL Y GLUCOLIPIDOS EN MUY BAJA PROPORCION

Lpidos de la membrana eritrocitaria

Fosfolpidos
Fosfatidilcolina

4.2 mol /10 hemates (lecitina) 26-30% 27-29% 25-27% 1-2% 2-3% 4.0 mol /10 hemates 0.1 mol /10 hemates 0.3 mol /10 hemates

Fosfatidiletanolamina Esfingomielina Fosfatidilserina Lisolecitina

y otros

Colesterol AGL Glucolpidos

PROTEINAS
52% DEL PESO SECO INTEGRALES PERIFERICAS

PROTEINAS del CITOESQUELETO

ESPECTRINA (BANDAS 1 Y 2) ANKIRINA (BANDAS 2.1-2.2-2.3 y 2.6) PROTEINAS 4.1-4.2 y 4.9 ACTINA (BANDA 5) TROPOMIOSINA TROPOMODULINA ADUCINA ESTOMATINA (BANDA 7.2)

PROTEINAS DE MEMBRANA

ANALISIS DENSITOMTRICO

Complejo de anclaje

Filamentos de sp

ESPECTRINA (sp)

DIMEROS FIBRILARES FORMADOS CADA UNO DE ELLOS POR CADENAS : y

 sp gen SPTA 1 (crom 1) sp gen SPTB (crom 14)

ESPECTRINA (sp)
LA CLONACION DEL GEN MARCO EL INICIO DEL ESTUDIO MOLECULAR DE LA MEMBRANA DEL ERITROCITO UTILIDAD?? ..... CONOCER EL ORIGEN DE LAS MEMBRANOPATIAS ERITROCITARIAS

ACTINA (45kDa)

ACTINA (BANDA 5) CONTIENE ENTRE 12 Y 16 MONOMEROS, SE UNE A LA sp Y ESTABILIZA LAS UNIONES ENTRE LAS 2 SUBUNIDADES

PROTEINA 4,1 (SINAPSINA)

2 fosfoproteinas 4.1a y 4.1b Protena globular con 200000 copias/clula. Posee dominios de unin a glicoforina C, banda 3 y fosfoinositoles. Estabiliza las uniones sp-actina y sp-glicoforina

ANKIRINA (BANDA 2,1)

MANTIENE LA INTEGRIDAD DE LA MEMBRANA ERITROCITARIA UNIENDOSE A LA BANDA 3 Y A LA CADENA DE LA sp UNE EL CITOESQUELETO A LA MEMBRANA LIPIDICA SUS MUTACIONES CONDUCEN A ESFEROCITOCIS HEREDITARIA EN UN 40-60%

GLUCOFORINAS
Son cuatro glucoprotenas (A, B, C, D) ricas en cido silico. Poseen 3 dominios: citoplasmtico, hidrofbico y extracelular (muy glicosilado). La glicoforina C juega un papel primordial en la unin del esqueleto de la membrana a la bicapa lipdica por su interaccin con la protena 4.1.

Glucoforinas
Banda PAS-1 PAS-2 PAS-3 PAS-4 Tipo A B C D Ag de grupo MN Ss Gerbich Componente D Nomenclatura GPA GPB GPC GPD Ubicacin 4q28-q31 2q-14-q21 4q28-q31 4q21-q31

RESUMIENDO ..
Interacciones horizontales Las diferentes uniones y asociaciones entre protenas dentro del plano del esqueleto de membrana, dan deformabilidad Entre molculas de sp para formar dmeros y oligmeros. Entre sp, actina y protena 4.1, estabilizada por aducina y tropomiosina.

Interacciones verticales: Fijan el esqueleto de membrana a la bicapa lipdica. Entre sp y protena banda 3, estabilizada por ankirina. Entre protena 4.1 ,banda 3 y algunas glicoforinas

Complejo de unin del esqueleto de la membrana eritrocitaria.

TRANSPORTE TRANSMEMBRANA
Canal aninico
Bomba de Ca

Cotransporte Bomba Na/K

Difusion pasiva

Contratransporte

Banda 3 - Canal aninico

Existen aproximadamente 1.000.000 de copias por clula, formando dmeros y tetrmeros unidos no covalentemente. Presenta 3 dominios Contiene oligosacridos ramificados en la superficie externa, que expresan especificidades antignicas de grupos sanguneos. Tiene dos funciones bien establecidas: Transporte de aniones (intercambio Cl- y HCO3-). Unin fsica a la bicapa lipdica con el esqueleto de membrana (ankirina, protena 4.1 y protena 4.2) Sera el receptor para Plasmodioum falciparum

Trasporte de agua
ACUAFORINA: 85% DEL INTERCAMBIO OSMOTICO DE AGUA SU DEFICIT SE CONSIDERA CAUSA DE AH Difusin facilitada siguiendo el gradiente de Na

El receptor de EPO
SENSOR RENAL
Factor inducible por Hipoxia HIF_1 Genes inducibles por hipoxia ( Gen EPO )

RION

EPO
OXIGENACION

Jak/STAT

Ras/MAPK NUCLEO

PROGENITOR ERITROIDE

ERITROCITOS

El receptor de EPO

Pero . qu funciones cumple la EPO?

Hematopoytica Vasculognica Antiapopttica

OTRAS PROTEINAS
Protenas del factor Rh Molculas de MHC Enzimas (AchE, G3PD, etc) DAF y otras molculas reguladoras

Alteraciones de la membrana eritrocitaria

Evaluables por: Tcnicas clsicas (Ham, autohemlisis, isopropanol, etc) PFOE Electroforesis en SDS-PAGE Inmunoelectroforesis Biologa Molecular SI Frotis de sangre perifrica?

Frotis de sangre perifrica

Esferocitos Eliptocitos

Acantocitos

Test de autohemlisis

0 -0,2%

0 -0,9%

TEST DE HAM

CURVA DE FOE

HEMOGLOBINA

HEMOGLOBINA
TETRAMERO DE 68 kDa CON CUATRO GRUPOS HEM EXISTEN 6 TIPOS DE CADENAS GLOBINICAS

VARIANTES
2 1 Crom 16 Crom 11

Cadenas tipo 16 p 13.3 141 aa

G A

Gower 1: 2/2 Gower 2: 2/ 2 Portland: 2/ 2 Hb Fetal: 2 /2 Hb A: 2/2 Hb A2 : 2/ 2

Cadenas tipo No 11 p 15.5 146 aa

SINTESIS DEL GRUPO HEMO

Cooperativismo alostrico

LA MOLECULA SUFRE UN CAMBIO EN SU CONFORMACION ( ALOSTERIA ) EN EL SENTIDO DE LA EXPANSION CUANDO INCORPORA O2 Y DE CONTRACCION CUANDO LO LIBERA

FORMA T

FORMA R

METABOLISMO ERITROCITARIO
El eritrocito presenta 4 vas metablicas principales 1. Gluclisis anaerbica 2. Va de las pentosas fosfato Glutatin 3. Metabolismo nucleotdico 4. Sistema diaforsico

Gluclisis anaerbica

Va de las pentosas fosfato

G6PD

G6PD
1.

2.

El dficit congnito de la G6PD es la enzimopata ms frecuente y conduce a una forma de anemia hemoltica En el laboratorio la podemos detectar mediante el test de Brewer Nitrito de Na Dextrosa Azul de metileno

Muestra: sangre entera con EDTA o heparina Incubar 3 horas a 37C

Dficit total

Dficit parcial Nitrito + Glc + sangre Deficiente de G6PD + Azul de metileno ( control +)

Nitrito + Glc + sangre Normal + azul de metileno

Tubo de prueba

METABOLISMO NUCLEOTIDICO
VIAS QUE CONTRIBUYEN AL MANTENIMIENTO DEL POOL DE ATP Se destacan Adenilatocinasa (AK), Adenosina deaminasa (ADA) y Pirimidina-5-nucleotidasa (P5N)

VIA DE RESCATE DE PURINAS

ATP-asa ADP AdenosinaQuinasa
ADENOSIN A

ATP AK
AMP

APRT
PPi Adenina

ADP ATP P5N

ADA

H2O NH3

Uridina Citidina

UMP CM PPi Pi PIMP

Hipoxantina

PRPP
AM P ATP

RPPK
Shunt HMP

Inosina
Pi

PNP

R-1P

R-1,5P2

R-5P

PRM

SISTEMA DIAFORASICO

La enzima Diaforasa o metahemoglobinareductasa (citocromo b5 reductasa) contribuye a mantener el Fe en estado II

Meta Hb (III) GLUCOLISIS ANAEROBICA

Hb (II)
Azul de Metileno
NADPH DIAFORASA

Cit b5
NADH DIAFORASA

VIA DE LAS PENTOSAS

GA3P

1,3DPG

6PG

G6P

NAD

NADH

NADPH

NADP

Lactato

Piruvato

Pentosa-PO4

6PG

SISTEMA DIAFORASICO PRINCIPAL

SISTEMA DIAFORASICO SECUNDARIO

CAPACIDAD REDUCTORA
NAD NADH
MetaHb R NADHdep

Va principal Cit b5 Hb Cit b5 red Meta Hb Vas accesorias AM oxid AM red Hb Meta Hb

67%

NADP NADPH NADP NADPH NADP NADPH

MetaHb R NADPHdep

5%

GSH R GSH R

GSH GS-SG GSH GS-SG

dehidroasc ascrbico

Hb 16% MetaHb 12%

Hb MetaHb

Resumiendo ..

El dficit de G6PD es la enzimopata ms frecuente y puede manifestarse como una forma de anemia hemoltica Las 4 vas metablicas son de vital importancia para la supervivencia del eritrocito y trabajan de modo coordinado para mantener su integridad y la de la Hb Existen pruebas de laboratorio sencillas para evaluar anomalas eritrocitarias

Envejecimiento eritrocitario
Por que se destruyen los eritrocitos? Disminucin de las actividades enzimtica y gluclisis Cambios en la hemoglobina ( > HbA2 y MHb) Cambios en la membrana Cambios en las propiedades fsicas

Catabolismo de la Hb

Catabolismo del HEM

Hemo oxigenasa

Biliverdina reductasa

Hgado