HEMATOLOGIA AUTOMATIZADA Dr.

Marcos Kneip Fleury*

A automao aplicada aos exames hematolgicos trouxe nos ltimos anos, uma srie de vantagens aos profissionais do Laboratrio de Anlises Clnicas. Os sistemas automatizados oferecem preciso, velocidade de processamento e reprodutibilidade maiores que os mtodos manuais, a baixo custo. Wallace Coulter, em 1956, desenvolveu o primeiro sistema de contagem de clulas sanguneas baseado na impedncia eltrica. Este princpio consiste na diferena de potencial eltrico que estas produzem ao passarem por um orifcio num tubo de vidro localizado entre dois eletrodos. Desde esta poca, muita coisa mudou. Os sistemas se aperfeioaram incorporando outras tecnologias, permitindo que vrias caractersticas celulares pudessem ser analisadas simultaneamente. Os novos equipamentos ainda utilizam a impedncia eltrica para a contagem de hemcias, leuccitos e plaquetas, valendo-se principalmente do tamanho da partcula para diferenciar umas das outras. A espectrofotometria utilizada para a dosagem da hemoglobina permitindo o clculo da hemoglobina globular mdia (HGM) e da concentrao de hemoglobina globular mdia (CHGM). A incorporao da tica laser aos equipamentos de hematologia possibilitou contagens mais precisas em amostras com maior nmero de clulas e tambm a anlise de componentes celulares internos. A utilizao da radiofrequncia permitiu a avaliao da estrutura interna celular, da relao ncleo/citoplasma, da densidade e complexidade nuclear alm da granularidade. Existem ainda, sistemas onde a imunofenotipagem usada para a identificao imunolgica de clulas imaturas e indiferenciadas com alta preciso, permitindo tambm a diferenciao de sub-populaes de clulas maduras, estas ltimas, cada vez mais utilizadas na prtica clnica. Recentemente, a incluso da anlise de fluorescncia aos equipamentos de ltima gerao, proporcionou a capacidade de quantificar os cidos nuclicos, DNA e RNA, permitindo uma avaliao de maturidade celular em leuccitos, plaquetas e hemcias jovens, os reticulcitos. Muito se discute sobre a capacidade dos equipamentos em determinar caractersticas numricas e morfolgicas das clulas sanguneas. Se estes substituiro definitivamente a mo

de obra humana na realizao de exames hematolgicos e uma srie de outras questes. O fundador da Sociedade Internacional de Hematologia Laboratorial (ISLH) Dr. Berend Houwen, publicou em um artigo sobre automao, uma frase que parece definir perfeitamente bem o que se apresenta atualmente na rea de automao em hematologia: Na prtica, os sistemas automatizados so capazes de identificar a maioria, seno todas, as clulas em amostras normais, mas falham em faz-lo em casos patolgicos mais graves. indiscutvel que os equipamentos podem realizar contagens e avaliar caractersticas morfolgicas de modo muito preciso. Entretanto, quando nos deparamos com diferenas significativas nos resultados obtidos automtica e manualmente como, por exemplo, o nmero de moncitos, a dvida de como relatar o resultado se torna um problema bastante comum. Como interpretar estes resultados? Os equipamentos automatizados identificam os moncitos por meio do tamanho da clula, complexidade do ncleo, relao ncleo/citoplasma e complexidade citoplasmtica. Portanto, clulas grandes, com ncleo com cromatina pouco condensada e citoplasma abundante com poucas estruturas, seriam classificadas pelo equipamento como moncitos. Diante desta descrio morfolgica, os profissionais de hematologia poderiam indagar: - No poderiam ser linfcitos reativos? Ou clulas blsticas? A resposta sim, poderiam. Ento, como esta dvida pode ser resolvida? Realizando a hematoscopia. Na verdade temos que aprender a conhecer os equipamentos que utilizamos, saber de suas capacidades e, principalmente, de suas limitaes. Enfim, entender como o equipamento enxerga as clulas e como as identifica. Os sistemas automatizados realizam a contagem diferencial em cerca de 20.000 clulas, o que constitui uma amostragem bastante representativa. Em contrapartida, as contagens manuais so realizadas com 100 ou 200 clulas na maioria dos casos. Sendo assim, se no existirem suspeitas da presena de clulas blsticas ou linfcitos reativos, a contagem automatizada certamente se aproxima mais da verdade do que a manual. Entretanto, se a amostra for de uma criana pequena, possvel que o equipamento tenha interpretado os linfcitos reativos como moncitos. preciso que estejamos sempre atentos a estas e outras questes para que os recursos disponveis nos equipamentos sejam realmente utilizados e que estes se tornem ferramentas efetivas para o diagnstico. Cabe ao profissional do laboratrio, bem formado e ciente dos avanos tecnolgicos, estabelecer a conexo entre a automao e o conhecimento tradicional,

entre o digital e o manual, entre o laser e a morfologia tica, fazendo que os sistemas automatizados sejam um aliado ao trabalho dirio dos hematologistas laboratoriais. A contagem diferencial automatizada ainda no substitui realizada manualmente. Os equipamentos automatizados nos permitem uma maior dedicao s amostras que realmente necessitam de mais ateno.

* O Dr. Marcos Kneip Fleury PhD em Hematologia, Professor Adjunto do Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas da Faculdade de Farmcia da UFRJ.