Conceptos Previos Biocatalizador es un catalizador de las reacciones bioqumicas de los seres vivos.

Se consideran biocatalizadores las enzimas, las hormonas y las vitaminas. Un biocatalizador reduce o aumenta la energa de activacin de una reaccin qumica, haciendo que sta sea ms rpida o ms lenta. Cada reaccin qumica en un ser vivo, ya sea unicelular o multicelular, requiere la presencia de uno o ms biocatalizadores enzimas!, pues si no e"istieran stas ocurriran en desorden total. #as enzimas son los catalizadores biolgicos que $acilitan las reacciones qumicas que tienen lugar en los seres vivos. Sin ellas las reacciones qumicas seran tan lentas que la vida se detendra. Protenas son biomolculas $ormadas por cadenas lineales de aminocidos. %l nombre protena proviene de la palabra griega &proteios&!, que signi$ica &primario& o del diosProteo, por la cantidad de $ormas que pueden tomar Enzimas son molculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones qumicas, siempre que sean termodinmicamente posibles' Una enzima hace que una reaccin qumica que es energticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy ba(a, sea cinticamente $avorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. )* %n estas reacciones, las enzimas act+an sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas di$erentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas signi$icativas. , las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimticas. Cintica qumica es un rea de la $isicoqumica que se encarga del estudio de la rapidez de reaccin, cmo cambia la rapidez de reaccin ba(o condiciones variables y qu eventos moleculares se e$ect+an mediante la reaccin general -i$usin, ciencia de super$icies, catlisis!. #a cintica qumica es un estudio puramente emprico y e"perimental. la qumica cuntica permite indagar en las mecnicas de reaccin, lo que se conoce como dinmica qumica. Velocidad de reaccin se de$ine como la cantidad de por unidad de tiempo. /or e(emplo, la o"idacin del atmos$ricas es una reaccin lenta que puede tomar combustin del butano en un $uego es una reaccin que segundo. sustancia que reacciona hierro ba(o condiciones muchos a0os, 1 pero la sucede en $racciones de

Ureasa %C*.2.1.2! es una enzima que cataliza la hidrlisis de urea a di"ido de carbono y amonaco.

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#a energa de activacin ! en qumica y biologa es la energa que necesita un sistema antes de poder iniciar un determinado proceso. #a energa de activacin suele utilizarse para denominar la energa mnima necesaria para que se produzca una reaccin qumica dada Sustrato es una molcula sobre la que act+a una enzima. Hidrlisis del griego' 345 hud6r!, agua. y 789:; lisis!, prdida o disociacin! a una reaccincido<base entre una sustancia, tpicamente una sal, y el agua.1 %sta reaccin es importante por el gran n+mero de conte"tos en los que el agua act+a como disolvente. =ambin se aplica a algunas reacciones cido<base en las que participa el agua y se rompe un enlace covalente. pH potencial de hidrgeno! es una medida de la acidez o alcalinidad de una disolucin. %l p> indica la concentracin de iones hidronio ?>*@AB presentes en determinadas sustancias. #a sigla signi$ica &potencial de hidrgeno& pondus Hydrogenii o potentia Hydrogenii. del latn pondus, n. C peso. potentia, $. C potencia. hydrogenium, n. C hidrgeno!. %ste trmino $ue acu0ado por el qumicodansSDrensen, quien lo de$ini como el logaritmo negativo en base 1E de la actividad de los iones hidrgeno. %sto es'

Solucinbuffer, es la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base con(ugada, es decir, saleshidrolticamente activas. =ienen la propiedad de mantener estable el p> de una disolucin $rente a la adicin de cantidades relativamente peque0as de cidos o bases $uertes. Se puede entender esta propiedad como consecuencia del e$ecto ion com+n y las di$erentes constantes de acidez o basicidad' una peque0a cantidad de cido o base desplaza levemente el equilibrio cido<base dbil, lo cual tiene una consecuencia menor sobre el p>. 1 Titulacin es un mtodo de anlisis que le permite determinar el punto $inal de una reaccin y por consiguiente la cantidad e"acta de un reactivo en el $rasco del titulacin. Se usa una bureta para liberar el segundo reactivo al $rasco y un indicador o el p><Fetro para detectar el punto $inal de la reaccin. n!i"idores enzim#ticos son molculas que se unen a enzimas y disminuyen su actividad. /uesto que el bloqueo de una enzima puede matar a un organismo patgeno o corregir un desequilibrio metablico, muchos medicamentos act+an

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como inhibidores enzimticos. =ambin son usados como herbicidas y pesticidas. Sin embargo, no todas las molculas que se unen a las enzimas son inhibidoras. los activadores enzimticos se unen a las enzimas e incrementan su actividad.

$%TE& %'ES ( E)U P*S $%TE& %'ES =ubos de ensayo con gradilla /ipetas de 2 y 1E ml Fatraz a$orado de 1EE ml HeaIer de JEE ml Hureta de )2 ml %rlenmeyer de 1)2 ml &E%CT V*S % UT ' +%& &E%CT V* ,*&$U'% Ureasa Urea Cloruro de mercurio Cloruro de hidrogeno Mndicador de =ashiro

E)U P*S Gradilla para tubos de ensayo /inzas para bureta Ha0o termostatado Soporte universal

C*-CE-T&%C .E,1K en bu$$er E,)2 F 1K E,1 L

C@ L>)!) >gCl) >CM

/ %0&%$%

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/ESC& PC *- /E &ESU'T%/*S E- E' '%B*&%T*& * Se e$ectu la prctica utilizando $orra(e verde bien picado %N,U! 1 gramo se sigui el procedimiento utilizando 1E m# de LaCl 1K en un tubo para centri$ugado, se agit se hizo centri$ugacin luego se separ el lquido de la $ase solida se a0adi LaCl . y se prepar solucin con >Cl al )2K para utilizar en gotas sobre

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el e"tracto %N,U. Lo se puedo hacer la evaluacin con el indicador de color porque en el laboratorio no haba

Se hizo preparacin de solucin con urea al E,)2F para e$ectuar el cuadro comparativo con el %N,U %"tracto de Norra(e para actividad Uresica! Se esperaba obtener en la solucin $inal un color azul verdoso que indicara /rueba /ositiva para la actividad Uresica. C*-C'US *-ES

, travs de la presente prctica de laboratorio hemos aprendido valiosos conceptos de la HM@OUPFMC, F%=,H@#MC,, comprendiendo por observacin directa en el laboratorio de los di$erentes procesos reactivos como la actividad Uresica. /ara este caso no pudo apreciar por medio visual el indicador de actividad Uresica por no disposicin del reactivo

P&1CT C% 2 Capacidad %mortiguadora 3 Potencial %mortiguador de muestras Biolgicas

&ESU$E-

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#os sistemas amortiguadores son de gran importancia porque equilibran la presencia de sustancias acidas y bsicas para mantener el /> dentro de los limites $isiolgicos. %n esta prctica se busca $undamentalmente que sistema tiene mayor capacidad amortiguadora y detectar en el laboratorio el $uncionamento de estos sistemas

/alabras claves' ,cidas, bsicas, /h, amortiguadora y $isiologicos

-T&*/UCC *-

, travs de la presente practica de laboratorio se llevara a cabo un e"perimento para comprobar sobre muestras su capacidad de amortiguacin. %ste estudio es importante por que nos permite entender el $uncionamiento ya sea a nivel de animales, plantas o ser humano como se regulan en el organismo proceso de vital importancia en las reacciones bioqumicas. Q como de esta de sustenta la vida

454 $%P% C*-CEPTU%'

C,/,CM-,HUNN%R S

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 HMC,RH@L,= @

mantiene S /> C@LS=,L=% S por medio de S C,/,CM-,,F@R=MGU,-@R , S se e"presa en S N@S=,=@ >%F@G#@HML ,

=,F/@L% S

452 $E-TE,%CT* C*-CEPTU%'

%C /* /EB ' 6 S%'

&eguladores de P! 7 %"sor"en e8ceso de iones H6 3 *H propiedades

componentes 7 e8clu3en %cidos 9uertes:acidos minerales;

Controlan meta"olismos acido "ase

Soluciones Bu99er:amortiguadoras; <

'ipidos 3 car"o!idratos

&egulan equili"rio Homeostatico >>>>>>>>>>>>>>>>> < "icar"onatos

e=emplos >>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>> < ,os9atos >>>>> >>> >>>>>>>>>>>>>> < Hemoglo"ina >>>>>>>>>>>>>>>>>>>>> >>>> < %minoacidos

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25 $%TE& %'ES ( $?T*/*S

254 ' ST% /E $%TE& %'ES ( E)U P*S Cuadro 4.lista de materiales y equipos utilizados en la prctica $%TE& %' . E)U P* %P' C%C .Bureta 0raduada Balanza analtica @A@@@4g Erlenme3er 42B ml Soporte universal %gitador de vidrio Titulacin Volumtrica Pesada:0ravimetra; Titulacin Volumtrica ,acilitar dosis9icacion reactivos Permite mezclar las soluciones

252 ' ST% /E &E%CT V*S UT ' +%/*S

Cuadro 2.Reactivos utilizados en la prctica &E%CT V*:-*$B&E; ,.&$U'% C*-CE-T&%C .$*'ECU'%& >Cl @A4Tcido Clorhdrico

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>idro"ido de Sodio

La@>

@A4-

25C P&*CE/ $ E-T*S Cuadro C.=cnicas analticas utilizadas en la prctica 1 V%& %B'E: -/ C%/*&; T?C- C% %-%'DT C% EV%'U%/%:*; UT ' +%/% pH $todo potenciomtrico Capacidad %mortiguadora $todo potenciomtrico

25C54 /rotocolos de muestras analizadas %laborar una $icha $ormato que muestre la in$ormacin $undamental sobre el origen de cada una. /or e(' especie, nombre cient$ico, lugar de muestreo , datos agroclimatolgicos , animales , etapa productiva , alimentacin etc.!

$uestra 'ec!e

-om"re cienti9ico 'ugar Bos Taurus Bucaramanga

agroclimatologia Clima medioA precipitacin 42@@ mm alimentacin 9orra=esA etapa reproductiva

25C52 ,lu=ograma general de los procedimientos desarrollados que puede inclur E

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1.*.) %L %# #,H@R,=@RM@.
/esar /esar las las muestra muestra s s Fedir Fedir /> /> y y tomar tomar datos datos y y Colocarlas Colocarlas en en el el ermenyer ermenyer 2 2g g ,gitar ,gitar por por 1 1 mn mn ,dicionar ,dicionar 1EEml 1EEml de de agua agua destilada destilada ,gregar ,gregar 2 2 ml ml de>C# de>C# ,gitar ,gitar y y $iltrar $iltrar

Fedir Fedir /> /> /> />

C5 &ESU'T%/*S ( / SCUS .C54 T%B'%S /E /%T*S

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T%B'% /E /%T*S 4E -atos volumtricos para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas

Fuestras %gua destilada 'ec!e

Um F#! )E )E

U La@> E,1L m#! E,) *J

T%B'% 2E -atos potenciomtricos para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas Fuestra s Ualores %valuados Gm :g; Vm :ml; pH 4 pH 2

Harina ,orra=e *rina

T%B'% C5 Ualores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas. Fuestras H (mEq HCl /pH) H(mEqNaOH /pH) P :H; HCl P :H; -a*H

Harina ,orra=e *rina

C52 ECU%C *-ES /E C1'CU'* Capacidad amortiguadora

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C%'CU'*SE Capacidad amortiguadora

Capacidad amortiguadora del agua destilada

Capacidad amortiguadora de la lec!e

Potencial amortiguador agua destilada p p p C C C og

Potencial amortiguador lec!e

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p p p

C C C

og

Tcnica potenciiometrica orina

Tcnica potenciometrica !arina

C5C T%B'%S /E &ESU'T%/*S Ta"la 45 Ualores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas $uestras Concentrado (m ! "#$ %&p"' (m !(a)" %&p"'
>Cl La@>

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Harina ,orra=e Sangre *rina

1,V1

1,W

1,V)

E,X2

C5C54 0&1, C%S

C5I / SCUS .- /E &ESU'T%/*S

, travs del peresente laboratorio hemos podido apreciar el $unciobamiento de la capacidad de amortiguadora y potencial amortiguador de muestras biolgicas para este caso orina y harina de trigo. Q como utilizando los reactivos hemos detallado como reaccionan y generan el e$ecto analizado lo cual se puede apreciar con indicadores colorimtricos.

I5C*-C'US *-ES

%n este e"perimento se tomo el p> inicial de la harina y la orina y posteriormente se le adiciono acido clorhdrico y se volvi a medir el p>. /odemos observar que

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en la harina el p> descendi notablemente aumentando su nivel de acidez y en la orina aumento un poco, observando que la la harina tien un /> inicial ms alto que el de la orina #as clulas y organismos mantienen un p> espec$ico y constante manteniendo sus biomolculas en su estado inico ptimo que generalmente se encuentra alrededor de p> V.E. %n los organismos multicelulares el p> de los $luidos e"tracelulares est tambin $uertemente regulado. #a constancia en el p> se logra gracias a los amortiguadores biolgicos que son mezclas de cidos dbiles y sus bases con(ugadas. %stos amortiguadores biolgicos permiten sostener la vida, y son un mecanismo que se halla presente a nivel celular

B5 B B' *0&%,D%

0ranados $5 J5A K U-%/ modulo de Bioquimicameta"olicaABogota 2@4@

http'YYZZZ.medvet.una.ac.crYcarreraYmva2E2[/racticaJ.pd$ http'YYZZZ.medvet.una.ac.crYcarreraYmva2E2[/racticaJ.pd$ http'YYes.ZiIipedia.orgYZiIiYGl+cido http'YYquimicais$dX2.ZiIispaces.comY$ileYvieZYsoluciones<bu$$er*V)X.pd$ http'YYlaguna.$medic.unam.m"Y\evazquezYEJE*Yamortiguadores.html http'YYnutricionanimalpracticas.blogspot.comY)E1EYEJYpractica<no1*< actividad<ureasica.html

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U- VE&S /%/ -%C *-%' %B E&T% ( % / ST%-C % KU-%/ %scuela de Ciencias ,grcolas,/ecuarias y del Fedio ,mbiente<%C,/F, /rogramas' ]ootecnia. ,gronoma. Mngeniera ,gro$orestal

'%B*&%T*& *S /E B *)UD$ C% $ET%B.' C%L'B$

/ro$'^airo Granados.,FSc

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