Trtatamiento Microbiolgico

Eduardo Benalczar G. Julio 2003

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Las eu carias es un grupo de m icroorganism os que incluyen a las algas, hongos y protozoarios. Algas: Son plantas unicelulares que contienen clorofila. A travs de la fotosntesis fabrican sus alim entos, para lo cual utilizan la luz solar com o fuente de energa y del CO2 extraen el carbn. A pesar de que requieren de luz solar para su crecim iento, tam bin se desarrollan lentam ente en la oscuridad. Las algas pueden form ar lim o en la superficie del agua que se identifica fcilm ente por el color verde o verde-azulado. A m enudo se encuentra en los sitios estancados o en las torres de enfriam iento. Estn presentes en el agua de m ar, aunque no com o lim os. Existen en cantidades im portantes en la m ayora de aguas de m ar y contribuyen substancialm ente al taponam iento. H on gos: Generalm ente crecen m ejor en am bientes aerbicos y causan pocos problem as en los sistem as de inyeccin. Protozoarios: Son la form am s sim ple de vida anim al. Se encuentran en aguas frescas y salinas, y requieren de oxgeno para vivir. En los sistem as de inyeccin de agua se hallan en los tanques y piscinas. Tam bin se encuentran en los filtros cuando el agua es aireada. El 3 control de los otros m icroorganism os, elim inar la poblacin de protozoarios.

Los ocanos en el mundo contienen especimenes que se los conoce como plancton. Este trmino es aplicado a todos los animales y plantas que viven libremente en el agua, los cuales por su limitada fuerza de movimiento, derivan junto a las corrientes de agua marina. Esto no significa que no puedan nadar; algunos crustceos y larvas de peces pueden nadar muy bien, pero no son capaces de moverse ms rpido que las corrientes marinas. El plancton puede ser agrupados por tam aos: Megaloplancton: animales grandes como el jellyfish. Macroplancton: visibles al ojo humano, tamao de 1 mm. Microplancton: organismos de tamao menor a 1mm y mayor a 75 micras Nanoplancton: ms pequeos, incluye plantas minsculas, bacterias y especimenes llamados flagellatos. Ultraplancton: flagellatos de tamao menor a 5 micras.
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2) Clasificacin de las bacterias:

Se pueden clasificar de varias formas: Tam ao y form a: Las bacterias son extremadamente pequeas, alrededor de 0.5 micras de dimetro, y existen miles de especies. Las bacterias tienen formas variadas como esferas, cilindros rectos o cilindros curvados. Por la forma que tienen se las conoce como: i) Una sola esfera: coccus Varias esferas: cocc Como informacin de inters, una cadena de cocc se llama streptococcus, mientras una forma plana de las cocc se conoce como staphylococus. ii) Cilindro recto: bacillus iii) Cilindros curvos: Vibrio: sola curva en forma de C Sigmoid: forma de S Spirillum: dos o ms curvas en forma de espiral o tornillo 5

 Crecim iento: La principal razn por la cual las bacterias crean m uchos problem as es la velocidad con que ellas pueden m ultiplicarse o reproducirse. Algunas pueden duplicar su poblacin en 20 m inutos bajos condiciones ideales, lo que significa que una sola bacteria puede llegar a ser una prspera colonia en pocas horas. Un puado de lim o del agua puede contener tantas bacterias com o la poblacin m undial. Las bacterias pueden soportar un am plio rango de tem peraturas de 14 a 210 F, valores de pH de 0 10.5, y concentraciones de oxgeno de 0 a casi 100%. Sin em bargo, en los sistem as de agua, ellas crecen m ejor en un rango de pH de 5-9 y tem peraturas m enores a 180 F. Prefieren agua fresca, pero tam bin pueden desarrollarse en salm ueras. Se adaptan con facilidad a las condiciones de los sistem as y son resistentes. Las bacterias pueden vivir en grupos o colonias adheridas a los slidos de la superficie del m etal llam adas sessile, o en los slidos suspendidos del agua. Cuando se encuentran con los SST en el agua, se las conoce com o planctnicas, nadadoras o flotadoras. La m ayora de bacterias son sessile. Se ha reportado que en un sistem a tpico existen 1,000 a 100,000 veces m s las bacterias en los depsitos adheridos a las paredes, que las flotantes. Tam bin se ha dem ostrado que las bacterias sessile cuando crecen producen una sustancia pegajosa llam ada polisacrido, que utiliza para cem entarse o adherirse a las superficies slidas. La produccin continua de polisacrido form a una biom asa que rodea y cubre a la bacteria. Esta biom asa puede llegar a ser bastante gruesa, 1 m m de espesor. Dentro de las capas de polisacridos pueden coexistir colonias de dos tipos diferentes de 6 bacterias, creando una poblacin m ixta adherente.

 Requerim iento de oxgeno: Una clasificacin comn en los sistemas petroleros es saber si una bacteria necesita o no oxgeno para vivir; se clasifican en: i) Bacterias aerbicas: requieren oxgeno para crecer ii) Bacterias anaerbicas: crecen mejor en ausencia de oxgeno iii) Bacterias facultativas: crecen en presencia o ausencia de oxgeno.

b) Problemas originados por las bacterias:

Como se indic anteriormente, las bacterias pueden generar corrosin y taponamiento. Pueden afectar a la corrosin en los sistemas petroleros de la siguiente forma: i) Produciendo H2S, por lo tanto incrementan la corrosin. ii) Producen cidos orgnicos que inician o aceleran la corrosin del metal debajo de las colonias. iii) Producen enzimas que pueden incrementar la corrosin por participacin directa en el proceso electroqumico. iv) Oxidan el hierro soluble en el agua, causando la precipitacin y forman depsitos llamados tuberclos que aceleran la corrosin mediante la formacin de celdas de concentracin. v) Por combinacin de los tems anteriores. El taponam iento puede resultar de la accin bacteriana debido a la formacin de biomasas de bacterias, la generacin de productos de corrosin como FS, o la precipitacin del hierro soluble del agua.

1) Bacterias Reductoras de Sulfato (SRB): Las bacterias reductoras de sulfato causan los m ayores problem as en los sistem as de inyeccin de agua. Ellas reducen los iones sulfato o sulfito del agua en iones sulfuro, form ndose H2S com o subproducto. SRB SO4= S= + 2H+ S= + Fe++ S= H 2S(g) FeS(s) (5-101) (5-102) (5-103)

Cuatro tipos de problem as pueden resultar de la accin reductora de estas bacterias: o Pueden precipitar directam ente de la reaccin de corrosin y causar picaduras directam ente entre las colonias y el m etal, com o se observa en la figura 5-69. o La generacin de H2S puede increm entar la corrosividad del agua. S el sistem a es agrio, el H2S adicional generado por las bacterias tendr poco o no afectar la corrosividad del agua. Sin em bargo, si el sistem a fue originalm ente dulce, la adicin de H2S por las bacterias, aum entar considerablem ente la velocidad de corrosin y generar picaduras en todas partes. o La presencia de SRB en los sistem as originalm ente dulces, crea la posibilidad de producir fracturam iento por sulfuros y am pollam iento del acero dulce. o La corrosin agria produce el slido insoluble sulfuro de hierro que es un excelente m aterial taponante. En las experiencias de cam po con un slido form ado por sulfuro de hierro, parafinas y carbonatos, la accin taponante se produjo en las tuberas horizontales, reduciendo el dim etro interno hasta en un 60 %; en las lneas verticales o tubing de los pozos inyectores, no se tuvo m ayores 9 inconvenientes, igual en la cara de la form acin.

Las bacterias SRB se las encuentra con mayor probabilidad en las reas estancadas o de baja velocidad, y debajo de las escalas o sedimentos. Sitios comunes para la actividad bacteriana en los sistemas de inyeccin de agua son los tanques, filtros y puntos m uertos del sistema; as como en los pozos que son fuentes de agua.

Figura 5-69
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 Tipos de bacterias SRB: Alrededor de nueve fam ilias o gneros de bacterias SRB se conocen. Sin em bargo, la m ayora de problem as de corrosin se atribuyen a los m iem bros de dos fam ilias: . Las especies m s conocidas de estas fam ilias se Desulfovibrio y Desulfotom aculum detallan en la tabla 5-28, y son las responsables de la corrosin. Tabla 5-28
Gnero
Desulfovibrio

Especies
africanas

desulfuricans salexig ens

vulgaris Desulfotomaculum nigrificans * orientis *A ntiguamente Clostridium nigrificans

Form a Sigmoid rod Vibrio Vibrio Vibrio

rod curved rod

De los organism os reductores de sulfato, el m s encontrado en los cam pos petroleros pertenece al gnero Desulfovibrio. ar esporas, que es una estructura que se form a dentro Desulfotom aculum puede form del cuerpo de una bacteria. Las esporas son resistentes a la tem peratura, cidos, alcoholes, desinfectantes, secantes, enfriadores y m uchas otras condiciones adversas. Pueden perm anecer por cientos de aos y luego germ inar en condiciones favorables. Una espora tiene varias caractersticas de un germ en, pero no es una estructura 11 reproductiva.

 Efecto de la salinidad: Las SRB se encuentran en rangos de salinidades desde cerca de cero hasta la saturacin. M uchas desulfovibrio toleran la sal y pueden crecer en concentraciones de NaCl tan altas como 100,000 ppm. M ayores concentraciones tienden a limitar el crecimiento. Dos especies de desulfovibrio tienen requerimientos especficos de salinidad. Desulfovibrio salexigens se desarrollan en una concentracin mnima de 25,000 ppm, mientras que la Desulfovibrio vulgaris requieren una carga menor a 10,000 ppm. Desulfotomaculum rara vez se encuentran en aguas con ms de 20,000 ppm de NaCl. Por encima de 20,000 ppm, la poblacin es casi siempre Desulfovibrio.

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 Efecto de la presin, tem peratura y pH: Las SRB como grupo de familia de este tipo de bacterias, tienen tolerancia relativa a la temperatura desde 40-170 F, un rango de pH entre 5 y 9, y presiones hasta de 14,500 psi. Valores absolutos de estas variables en ambientes naturales no se ha podido establecer con certeza. Los siguientes rangos se han obtenido en laboratorio en un medio artificial: o Desulfovibrio: el rango ptimo de crecimiento es de 77-110 F, con una lmite mximo de 120 F. o Desulfotomaculum nigrificans: la temperatura ptima de crecimiento es 130 F. Disminuye un poco el crecimiento a 150-160 F, y pueden sobrevivir a 170 F. o Desulfotomaculum orientis: tienen un ptimo crecimiento a una temperatura de 85-100 F, pero cuando la temperatura es de 108 F se mueren.

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 Nutricin: La bacterias absorben sus nutrientes directamente del ambiente que les rodea. Cada clula contiene protenas llamadas enzimas que les ayuda a descomponer las molculas nutrientes y extraen la emerga de estas. Las bacterias SRB requieren un nmero grande de nutrientes para crecer. Algunos de estos son: o Carbn: las SRB son heterotrficas, estos significa que todas o la mayora de sus clulas de carbn estn derivadas de substancias orgnicas y generan CO2 cuando crecen. Utilizan materiales orgnicos disueltos en el agua como los cidos orgnicos o alcoholes como fuente de carbn. Aparentem ente no pueden usar los hidrocarburos del petrleo. o Nitrgeno y Fsforo: o Hierro disuelto: tienen un absoluto requerimiento por concentraciones relativamente altas de hierro disuelto. o Sulfato, Sulfito, Bisulfito, o iones Tiosulfato: el diagnstico primario es que crecen con la reduccin de iones sulfato a sulfuro, pero pueden tambin crecer con sulfito y otros compuestos reducidos a sulfuros. La falta de cualquiera de los nutrientes nom brados lim itar el crecim iento. Una fuente de nitrgeno es rara y siempre ser un limitante en el crecimiento de las SRB en los sistemas de inyeccin de agua. Por lo tanto, es improbable que los 14 el compuestos que contienen nitrgeno como los inhibidores de corrosin estimulen crecimiento bacteriano.

 Efecto del oxgeno disuelto y el sulfuro de hidrgeno: Las SRB se encuentran en las superficies oxigenadas de las aguas como los ocanos. Estn generalmente en muy pequeos nmeros y no se multiplican a una velocidad apreciable. Sin embargo, si el agua es desaireada antes de la inyeccin, el ambiente ser libre de oxgeno e ideal para su crecimiento. Es posible que crezcan en los sistemas aireados con la ayuda de las bacterias aerbicas. Estas formarn limo adherente en la superficie metlica y consumen oxgeno en su crecimiento; generan un ambiente anaerbico debajo de los depsitos, suministrando un medio apropiado para el crecimiento de las SRB. El sulfuro de hidrgeno disminuye la velocidad de crecimiento y puede, en altas concentraciones, bajar el crecimiento a cero. Esto es verdad porque el sulfuro de hidrgeno reaccionar con el hierro disuelto para formar sulfuro de hierro, eliminando uno de sus nutrientes.

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Reservorios agrios: Por accin de bacterias SRB Inicialmente fueron reservorios dulces Generalmente se inyecta agua con sulfatos Concentraciones altas de H2S en gas de pozos productores (3,100 mg/L) Reservorios someros por baja temperatura favorecen crecimiento El agua de los pozos inyectores enfra el entorno y crecen bacterias EL H2S producido viaja con el agua de inyeccin a los pozos productores Las bacterias se desarrollan en la matriz porosa y los biocidas no son totalmente efectivos Zobell calcul que las SRB podran viajar entre 2 y 40 pies por ao. Los efectos de un reservorio agrio se presentan con el aumento de la corrosin en las facilidades de produccin por fracturamiento por sulfuros y/o ampollamiento por hidrgeno.

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2) Bacterias oxidantes del hierro:

Son capaces de oxidar los iones ferrosos en el agua y formar una envoltura de hidrxido frrico alrededor de ellos en su crecimiento. Las principales bacterias son Siderocapsa, Gallionella y Sphaerotilus. Se clasifican como bacterias aerbicas, auque pueden crecer tambin en ambientes con concentraciones bajas de oxgeno (< 0.5 ppm). Las bacterias oxidantes del hierro pueden causar problemas de corrosin y taponamiento. No participan directamente en el proceso de corrosin, pero ayudan al desarrollo de las SRB bajo la capa de hidrxido o creando celdas de concentracin de oxgeno. Un gran nmero de estas bacterias pueden causar la precipitacin de importantes cantidades de hidrxido frrico y producir taponamiento. Se las encuentra generalmente en aguas frescas y en algunas ocasiones en salmueras.

3) Bacterias formadoras de limo:

Son capaces de producir abundante limo en las superficies de las tuberas. Las principales son Pseudomonas, Flavobacterium, Enterobacter, Escherichia y Bacilus. Ocasionan taponamiento y contribuyen a la corrosin como las bacterias oxidantes de hierro, recubriendo una parte de la superficie. Se puede encontrar en aguas salinas o frescas, en ambientes aerbicos y anaerbicos. Sin embargo, estn comnmente es sistemas aerbicos con baja salinidad.
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4) Cultivo de bacterias:
Tiene com o objetivo hacer que las bacterias se desarrollen en un am biente artificial; es una tcnica estndar para estim ar su poblacin. U na m uestra de agua que contiene bacterias se coloca en un lquido conocido com o m edio de cultivo, que es una solucin form ada de agua y nutrientes para que las bacterias de inters crezcan y se m ultipliquen. En algunos m edios de cultivo se colocan indicadores de crecim iento; por ejem plo, en las SRB se aade un clavo de hierro, para que el H2S producido reaccione con el hierro y form e el precipitado negro insoluble de sulfuro de hierro. La com posicin del agua para un m edio de cultivo puede ser arbitraria, por ejem plo 10,000 ppm de NaCl, o puede ser hecha m uy sim ilar al agua analizada. Existen varias posibilidades para usar el agua com om edio de cultivo: o U sar una solucin de cloruro de sodio de concentracin sim ilar al agua de inters. o Preparar un agua sinttica de com posicin sim ilar al agua de inters. o U sar agua esterilizada del cam po, cuando sea factible. La com posicin del agua, incluyendo los m icronutrientes, sern m uy sim ilares al sistem a actual com o sea posible. La norm a API RP 38 describe el m todo recom endado para exam inar las aguas de inyeccin y se em plean en la m ayora de laboratorios.
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Tcnica de la dilucin

1 mL de muestra de agua 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

Nmero de botella Factor de dilucin

1:10

1:100

1:1,000

1:10,000

1:100,000

1:1000,000

Figura 5-70
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Las reglas de juego establecen que no se puede transferir parte de una bacteria de una botella inoculada a otra. Esto quiere decir que cuando se retira 1 mL de la botella inoculada que contiene 10 mL de lquido, debe haber al menos 10 bacterias en la botella, o un promedio de 1 bacteria por mL, antes de la transferencia. Por ejemplo, si hubieran solo 8 bacterias en la botella, el promedio de la poblacin sera 0.8 bacteria por mL, y la transferencia no puede ocurrir de acuerdo a las reglas. En una forma anloga, si hubieran 15 bacterias en una botella, el promedio de la poblacin es de 1.5 bacterias por mL. Como es permitido un nmero determinado de transferencias, al retirar un mL de muestra se coger una bacteria para la prxima botella. Ejemplo adicionales se presentan en la tabla 5-29. Tabla 5-29
Nm ero de series
U n mL de muestra original Primera botella Segunda botella Tercera botella Cuarta botella

1
10 10 1 0 0

2
50 50 5 0 0

3
90 90 9 0 0

4 5 Nm ero de bacterias
100 100 10 0 0 250 250 25 2 0

6
600 500 50 5 0

7
850 850 85 8 0

8
1000 1000 100 10 1

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 Tipos de cultivos: En la prctica, dos tipos de medios de cultivo se utilizan normalmente, por lo tanto, dos series separadas de diluciones se realizan: una para las SRB y otra para las bacteria totales o generales. o Bacterias Reductoras de Sulfato: las bacterias contadas por este mtodo incluyen Desulfovibrio. Desulfotomaculum tambin pueden ser detectados. Sin embargo, si las condiciones del sistemas son favorables para el desarrollo de las Desulfotomaculum, se deber emplear un medio especfico para su identificacin. El medio utilizado para las SRB es el descrito en la norma API RP 38. Una vez que las botellas han sido inoculadas, se recomienda incubar por un perodo de 28 das. La temperatura de incubacin ser la que tenga el sitio de muestreo del sistema, con una variacin de 9 F. S esta temperatura no se puede obtener, se pondr en una estufa ente 77 y 100 F. La botella puede contener hierro ferroso o un clavo de hierro. El crecimiento de bacterias se obtiene cuando en las botellas se observa un precipitado negro de FeS, producto de la reaccin entre el H2S y los iones ferrosos.

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o Conteo de bacterias generales: L as botellas para las bacterias generales, heterotropica y facultativa, em plean un m edio de cultivo diferente. U n perodo de incubacin de 5 das es com n. El conteo de bacterias generales incluye las bacterias aerbicas generales, com o las form adoras de lim o, y puede tam bin incluirse a las bacterias anaerbicas y facultativas. No incluye las bacterias oxidantes de hierro, que son difciles de cultivar en un m edio artificial; y, generalm ente se detectan a travs del m icroscopio. Tres tipos de m edio de cultivo se utilizan para la determ inacin de las bacterias heterotrpicas: i) Caldo de cultivo estndar: el crecim iento se detecta por la form acin de una turbidez que es ocasionada por las clulas de las bacterias, siendo evidente cuando el conteo excede 1000,000 por m L . ii) Dextrosa de rojo fenol: este m edio contiene azcar y rojo fenol que es un indicador cido-base y cam bia de rojo a am arillo cuando el pH del m edio de cultivo baja a m enos de 6.6. Cuando el azcar es ferm entada u oxidada por la bacteria, varios cidos orgnicos se producen, dim inuyendo el pH y cam biando el color del indicador. El crecim iento bacteriano se presenta por cam bio de color, turbidez o am bos. L a turbidez indica la presencia de bacterias generales y el cam bio de color la presencia de bacterias productoras de cido. iii) Tioglicolato: este m edio es usado para detectar bacterias anaerbicas heterotrpicas. El crecim iento se observa por la generacin de turbidez. U na vez inoculadas las botellas, se colocan en una incubadora o estufa a la m ism a 22 tem peratura que las SRB.

 Conteo final: Como regla comn se tiene que las bacterias generales aparecern dentro de los tres primeros das del cultivo; y, las SRB de dos a cuatro semanas. Las botellas deben examinarse diariamente y anotar los resultados. La lectura final se reportar despus de 5 das para las bacterias generales y 28 para las SRB, a menos que la experiencia proporcione resultados aceptables con anticipacin. Interpretacin de resultados: El nmero de bacterias presentes en el mililitro original del agua inoculada en la primera botella puede ser estimada usando la tabla 5-29. Tabla 5-29
No botella inoculada
1 2 3 4 5 6

Factor de dilucin
1:10 1:100 1:1,000 1:10,000 1:100,000 1:1'000,000

No de bacterias observadas (bacteria/m L)

1a9 10 a 99 100 a 999 1,000 a 9,999 10,000 a 99,999 100,000 a 999,999

No de bacterias reportadas (bacteria/m L)

10 100 1,000 10,000 100,000 1'000,000

Por ejemplo, si en las botellas 1, 2 y 3 crecen despacio, pero las botellas 4 a 6 permanecen claras, el agua contendr de 100 a 999 bacterias por mL, y el conteo23 reportado ser de 1,000 bacterias/mL.

o Problem as com unes en la interpretacin del crecim iento: existen una serie de acontecimientos comunes que pueden interferir en la interpretacin de los resultados obtenidos con la tcnica de dilucin seriada. Algunos son: i) Todas las botellas indican crecim iento: si todas las botellas tienen indicios de crecimiento bacteriano, no es posible estimar su poblacin. Por ejemplo, s las seis botellas de una serie son positivas, se debera reportar que la poblacin es igual o m ayor a 1000,000 por m L. ii) Inm ediatam ente positivas: s la prim era botella inoculada para detectar SRB se negrea despus de dos horas, esto no es por accin de las bacterias. Las SRB crecen rpido pero no demasiado rpido. El color negro es el sulfuro de hierro resultante de altas concentraciones de H2S en la muestra de agua que reacciona con el hierro disuelto en el medio de cultivo. S aparece el precipitado negro en la primera botella del cultivo de SRB en menos de dos horas, se deben tomar las siguientes precauciones: I. Proceder con la dilucin seriada. Las botellas 2 a 6 generalmente permanecern claras y pueden ser usadas para detectar el crecimiento. II. Recoja unos 50 mL de agua en una botella esterilizada y adicione una tableta de Alkaseltzer. El Alkaseltzer eliminar la mayor parte de H2S de la muestra, cuando la tableta se ha disuelto completamente, tomar un mililitro con una jeringuilla esterilizada e inicie la inoculacin.

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Similarmente, s la prim era botella para detectar las bacterias generales se vuelve turbia, o am arilla en el caso del rojo fenol, despus de una hora de la inoculacin, no ser por accin de las bacterias. Puede ser por efecto de alta turbiedad en la muestra o un pH muy bajo que causa cambio de color. i) Botellas interm edias claras (bottle skipping): algunas veces una de las botellas del medio de una serie inoculada permanece clara, mientras que las botellas aledaas indican la presencia de bacterias. S esto ocurre, el salto u omisin de una botella se ha presentado, y el resultado a reportarse ser de la botella mayor que muestre la presencia de bacterias. Por ejemplo, se asume que en una serie inoculada, las botellas 1, 2 y 4 indican el crecimiento bacteriano, mientras que las botellas 3, 5 y 6 permanecen claras despus del tiempo apropiado de incubacin. Existen algunas explicaciones posibles incluyendo una contaminacin accidental de la botella 4. Sin embargo, rara vez se conocer porque ha ocurrido, y tendr que hacerse cuestionamientos razonables al problema. En este ejemplo, s se considera que las botellas fueron numeradas correctamente, se reportar el valor de la cuarta botella 10,000/mL; aunque se recomienda repetir la incubacin para ratificar o rectificar los resultados.
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 Significado de los resultados: Este m todo perm ite estim ar el nm ero de bacterias planctnicas flotantes en el agua. Debido a que la m ayora de bacterias en un sistem a son del tipo sessile, pegadas a las superficies slidas, no es un buen m todo para calcular el nm ero de bacterias presentes o viviendo en un sistem a. No obstante, es una prueba m uy rpida y ha provedo resultados satisfactorios del nivel de actividad bacterial. Am enudo el nm ero absoluto de bacterias en una agua es de m enos im portancia que los cam bios en la poblacin. S el nm ero de bacterias aum enta desde la fuente de agua hasta el pozo inyector, es casi un hecho que la actividad bacterial est aum entando considerablem ente, y ser una fuente de problem as graves de corrosin y/o taponam iento. En form a anloga, el increm ento de la poblacin bacteriana en un sitio especfico del sistem a es un inicio de crecim iento de las bacterias. o Conteo de bacterias generales: si el conteo es m enor a 10,000 organism os por m L no se consideran problem ticas en un sistem a no tratado. Com o regla general valores de 100,000/m L indica una fuerte posibilidad de taponam iento y se necesitar tratam iento con biocidas. Paralelam ente a un alto grado de contam inacin, se presentarn dism inucin del caudal de inyeccin e increm ento de la presin de inyeccin, as com o taponam iento de los filtros. Una parte de la poblacin bacteriana crecer en las superficies slidas y no se detectar por esta tcnica. o SRB: la presencia de una sola bacteria reductora de sulfato se considera com o un potencial problem a. Las SRB son bacterias sessile y este m todo solo detecta las bacterias planctnicas o flotantes. Com o los depsitos son num erosos, existirn num erosas bacterias adheridas en las paredes del sistem a por cada bacteria que 26 est flotando en el agua.

b) Deteccin rpida de las bacterias y mtodos de conteo:

La tcnica del cultivo depende del desarrollo de las bacterias para su identificacin. Pueden estar presentes en una muestra dada, pero no pueden crecer en un medio de cultivo, y no detectarn. Adicionalmente, el crecimiento se demora , y el uso de esta tcnica y el conteo no es rpido. Hay una serie de mtodos que permiten conocer ms rpidamente la poblacin bacteriana en los sistemas petroleros. Estos detectan directamente las bacterias o enzimas que estn asociadas con una tipo de bacteria en particular. Algunos de las tcnicas ms comunes de valoraciones rpidas de bacterias se resumen a continuacin. Para informacin ms completa se puede revisar la norma NACE TM 0194, Field Monitoring of Bacterial Growth in Oilfield Systems.

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 Exam inacin al m icroscopio: La tcnica del microscopio es extremadamente til para microbilogos entrenados. Por ejemplo, las bacterias oxidantes de hierro y formadoras de limo pueden ser rpidamente identificadas con una fase de contraste en el microscopio. Sin embargo, es a menudo difcil distinguir las bacterias de los slidos suspendidos. o M icroscopio Fluorescente: para reconocer a una bacteria del medio que lo rodea se aplica un tinte o tintura, que le permitir fluorecer o resplandecer cuando es expuesta a una luz ultravioleta de apropiada longitud de onda. Se pueden distinguir fcilmente de partculas no vivientes de tamao y forma similar, observndolas a travs del microscopio con luz UV. Esta tcnica se conoce como M icroscopa fluorescente y permite contar directamente las bacterias en un corto tiempo. Las clulas son concentradas por filtracin a travs de una membrana de policarbonato en una superficie plana. Las membranas de acetato de celulosa retienen las partculas de slidos suspendidos.

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I. Tintura para clulas: las clulas totales pueden obtenerse usando tintes, que se combinan con el material celular presente en las clulas vivas o muertas. Los tintes usados para este propsito son el anaranjado de acridina y el DAPI (4,6 diamidio-2-fenilindole). El nmero total de clulas vivas puede ser determinado usando el tinte FDA (diacetato fluorescente). II. Tintura anticuerpo: el tinte fluorescente es ligado a los anticuerpos, los cuales buscarn las clulas de las SRB. Por lo tanto, solo las bacterias reconocidas por los anticuerpos fluorescern bajo el microscopio. La m ayor ventaja de este mtodo es la velocidad, los resultados se obtienen en dos horas. La m ayor lim itacin del mtodo son los anticuerpos que se han manufacturado para un tipo especfico de SRB. Sin embargo, un gran nmero de anticuerpos para SRB pueden ser combinados para que la prueba sea muy general. El mtodo detecta clulas vivas y muertas.Desafortunadamente, se necesita personal entrenado en esta tcnica, por lo que el mtodo no es muy usado en el campo.

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 Fotom etra ATP: Los anlisis ATP determinan muy rpido los organismos vivos presentes en un agua de inyeccin. No es especfico para bacterias, pero la mayora de organismos presentes en las aguas petroleras son bacterias. Es particularmente til en la evaluacin de tratamientos con biocida. La bases del mtodo son: i) El ATP (adenosina trifosfato) est presente en las clulas de todos los organismos vivos. ii) El ATP es destruido en los 20 minutos que la clula muere por la liberacin de la enzima ATP-destroying. iii)La cantidad de ATP por clula es una funcin lineal del volumen de la clula, por ejemplo, el doble del volumen resultar en el doble de ATP.

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 Determ inacin de enzim as: o M ediciones de H idrogenaza: esta prueba se usa para detectar la presencia de la enzim a hidrogenaza, que es producida por las bacterias que utiliza el hidrgeno com o fuente de energa. El hidrgeno es generado en el ctodo en m uchas reacciones de corrosin. Este es utilizado por bacterias com o las SRB que despolarizan el ctodo y aceleran la velocidad de corrosin. La prueba de la hidrogenaza se desarrolla usando m uestra de sessile. La m uestra es expuesta a una solucin extractora de la enzim a, y el grado de oxidacin del hidrgeno, en una atm sfera libre de oxgeno, se obtiene por un cam bio de color. Los resultados pueden obtenerse entre 30 m inutos y 4 horas. Un tiem po de exposicin de 12 horas generalm ente se usa para propsitos de com paracin. La prueba puede realizarse en el cam po o en el laboratorio. o M ediciones de APS Reductasa: se basa en la definicin funcional de la reduccin del sulfato, es decir, incluye las bacterias capaces de reducir en un m edio anaerbico el sulfato a sulfito. El nico requerim iento para este proceso es la presencia de la enzim a APS Reductasa, que est presente en todas las SRB, por lo tanto al m edir el contenido de esta enzim a se conocer el nm ero total de SRB presentes. La prueba requiere cerca de 20 m inutos y puede llevarse a cabo en el cam po o laboratorio usando test kids com erciales. El lm ite m nim o de deteccin por este m todo es de 1,000 clulas/m L, aunque la sensibilidad puede increm entarse 31 por concentracin de la m uestra.

a) M uestro del agua para anlisis de bacterias:

Las m uestras se tom an para la determ inacin de las bacterias sessile y planctnicas, siendo m s com n cuantificar el nm ero de bacterias planctnicas. 1) Puntos de m uestreo: Tom ar m uestras de agua en los siguientes puntos del sistem a de inyeccin: F uentes de agua: cabezal del pozo, arroyos, charca, estanque, ocano o agua producida. Recipientes, tanques y filtros: tom e una m uestra a la entrada y salida, as com o en la descarga de los retrolavados en los filtros. Pozos inyectores: tom e una m uestra en varios pozos inyectores localizados a varias distancias, especialm ente en los extrem os. 2) M uestreo para anlisis de bacterias planctnicas: La tcnica de m uestreo es sim ilar a la descrita en la prim era parte de este captulo. Sin em bargo, algunas consideraciones adicionales se requiere: Si utiliza un recipiente usado, debe esterilizarlo para elim inar la contam inacin; de preferencia em plee recipientes nuevos. El uso de m angueras de plstico o caucho que han sido usadas previam ente es considerado com o una posible fuente de contam inacin. Utilice m angueras o tuberas nuevas; y, de no ser posible, drene por lo m enos un m inuto antes de tom ar la m uestra. No contam ine con oxgeno la m uestra para anlisis de SRB 32 Un procedim iento alternativo es tom ar directam ente del chorro de agua la m uestra con una jeringuilla esterilizada y cultivarla inm ediatam ente.

3) M uestreo para bacteria sessile:

El m ecanism o de Robbins fue desarrollado en la Universidad de Calgary por Robbins y Cocterton para estim ar la poblacin de las bacterias sessile en un sistem a de agua. Se inserta un cupn pequeo, esterilizado y de acero dulce, o una especie de botn (stud) a travs de la pared de una pieza de pulgada de dim etro, de form a que la cara del botn est pegado a la pared interna de la tubera. Efectivam ente, estos dispositivos pasan a ser parte de la pared de la tubera y facilitan un sitio para el crecim iento de las bacterias sessile. Las corrientes laterales de agua del sistem a fluyen a travs del m ecanism o, y despus de un tiem po definido de exposicin, los botones son rem ovidos, y el nm ero de bacterias en cada botn se evala por uno de los m todos conocidos. Probetas biolgicas com erciales basadas en el principio del m ecanism o de Robbins son sum inistradas por varios proveedores. Estas consisten de un soporte que contiene de cinco a ocho botones o cupones. Estn disponibles en dos versiones: Sistem as para alta presin: Este tipo de probeta contiene de cinco a seis botones y estn diseados para conectarse a accesorios de alta presin, figura 5-71. No se pueden instalar con sistem as de acceso a altas presiones (retriver). Sistem as para baja presin: Esta probeta contiene 8 botones est sujeta a un tapn roscado de dos pulgadas. La parte del sistem a donde se coloca la probeta debe estar aislada por vlvulas y poder despresurizar para colocarla y extraerle. 33

Figura 5-71

34

El proceso general para usar las probetas biolgicas es el siguiente: 1) Esterilizar los botones empapando en alcohol etlico, insertar en el contenedor de plstico con pinzas. No toque con los dedos. 2) Instalar la probeta en el sistema, preferentemente en el fondo de la lnea, en la posicin horaria 5 o 7. 3) Despus de un tiempo definido, dos a seis semanas, recuperar la probeta del sistema y extraer rpidamente los botones. Evitar la contaminacin de estos, no tocar con los dedos. 4) Determinar el nmero de bacterias adheridos a la superficie de cada botn. Existen tres mtodos: i) Cada botn se coloca en un tubo de ensayo de plstico que contiene una solucin especial y esferas de vidrio. Las bacterias son desalojadas del botn colocando el tubo de plstico en una centrfuga o agitando vigorosamente por dos minutos. Una parte de la solucin se toma y se evala el contenido bacteriano por el mtodo ATP o por dilucin seriada. ii) Raspar la masa depositada en los botones con un bistur esterilizado. Los slidos retirados, botones y el bistur se colocan en una solucin especial, y luego son limpiados con un mecanismo ultrasnico. Una muestra de la solucin se evala por dilucin seriada o por el mtodo ATP. iii) La poblacin bacteriana en la superficie de los botones puede ser determinada por examinacin directa con el microscopio fluorescente. Se recomienda raspar las escalas o slidos de las paredes de las tuberas, o recoger de los sitios donde se acumulen, para examinar la presencia de bacterias. El cultivo puede realizarse en botellas con tapas roscadas. Un laboratorio especializado o compaa de qumicos debera contactarse si se decide cultivar los residuos de escala.
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d) Control qumico de microorganismos:

1) Tipos de qum icos: Los qumicos usados para control de las bacterias pueden ser clasificados en varias formas: Funcin: i) Bactericida: es un qumico que m ata a las bacterias. ii) Bacteriostato: es un qumico que retarda o inhibe el crecimiento de las bacterias iii) Biocida: es un qumico que m ata otras formas de vida adems de las bacterias. iv) Bioestato: es un qumico que retarda o inhibe el crecimiento de otras formas de vida adems de las bacterias.

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 Com posicin qum ica: o Qum icos Inorgnicos: i) Cloro: es el biocida inorgnico m s usado en los sistem as de inyeccin de agua. Se usa preferentem ente en aguas superficiales com o agua de m ar o frescas de ros, lagos, etc. En la siguiente seccin se analiza con m ayor detalle este biocida. ii) Dixido de cloro ClO2: es usado com o un bactericida en aguas industriales. Se produce in situ por la m ezcla de clorato de sodio (NaClO3) o clorito de sodio (NaClO2) con cido clorhdrico para obtener ClO2. Tam bin puede obtenerse de la reaccin de clorito de sodio con cloro. Es un fuerte oxidante y reacciona con los sulfuros en el agua para form ar sulfatos. Las principales desventajas son la fuerte corrosividad al acero y la posibilidad de crear una m ezcla com bustible cuando se pone en contacto con petrleo, lim itando el uso com o biocida en las operaciones de produccin.
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o Qum icos Orgnicos: Aldehdos, com puestos de am onio cuaternario y am inas son ejem plos com unes de bactericidas orgnicos. i) Aldehdos: los glutaraldehdos son am pliam ente usados para el control bacteriano. La Acrolena (CH2=CH-CHO) se usa tam bin, pero con m enos frecuencia; adem s, es un buen secuestrante de sulfuro de hidrgeno, pero es incom patible con los secuestrantes de oxgeno y m uchos inhibidores de corrosin y escala. El form aldehdo o form ol (CH2O) es tam bin un secuestrante de sulfuro de hidrgeno, pero su uso est restringido por sus caractersticas de agente cancergeno. Los aldehdos no tienen una buena penetracin en las biom asas y se m ezclan con otros com puestos com o am onios cuaternarios para m ejorar esta caracterstica. ii) Am inas y quats: los com puestos de am onio cuaternario y de fsforo cuaternario son com nm ente referidos com o quats. Tienen una buena actividad superficial y actan com om uy buenos detergentes. Su uso est lim itado para aguas de bajsim a salinidad com o las de m ar o frescas. Las am inas son m uy sim ilares a los quats y tienen una buena actividad superficial. Cuando se aplican continuam ente se com portan com o inhibidores de corrosin. 38

2) Clorinacin:
Es m uy usado porque es uno de los bactericidas m enos caro y m s efectivo. Cuando se adiciona al agua, el cloro gas se hidroliza para form ar cidos hipocloroso e hipoclrico: Cl2 + H2O H+ + Cl- + HOCl (5-104)

El cido hipocloroso se ioniza para form ar el ion hidrgeno y el ion hipoclororito: HOCl Efecto del pH: El grado de ionizacin depende del pH. V alores m enores a 5, el cloro m olecular est presente; por encim a de este pH, los iones HOCl y OCl se form an. Los porcentajes relativos de estas especies en funcin del pH se indican en la figura 572. La efectividad del cloro depende de la especie que est presente. Por ejem plo, el poder bactericida del HOCl es m ucho m ayor que el OCl . Por lo tanto, a pH altos, la efectividad del cloro dism inuye. Se debe indicar que la actividad o concentracin es solo del 1-10% a valores de pH entre 8 y 9. Sin em bargo, en aguas que contienen iones brom uro, com o las aguas de m ar, el cloro oxida a los iones brom uro a la form a de HOBr, que es todava un efectivo biocida a pH de 89. La cantidad de cloro requerido com o bactericida es funcin del tiem po y la tem peratura, adem s del pH. La velocidad de elim inacin de bacterias se increm enta con la tem peratura y dism inuye con el pH. H+ + Cl(5-105)

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El cloro residual o cloro libre es la cantidad total de cloro presente com o Cl2, HOCl y OCl-, despus de que ha elim inado los m icroorganism os del agua, y constituye una cantidad de reserva para futuras contam inaciones. La inyeccin continua de cloro debe ser suficiente para m antener un cloro residual de 0.2-0.5 ppmen el cabezal del pozo inyector. En la tabla 5-30 se m uestra algunos datos de la relacin entre el pH y la cantidad de cloro residual requerido en un tiem po de 10 m inutos.
100 90

HOCl
80

OCl-

% de concentracin

70 60 50 40 30

Tabla 5-30
pH 6-8 8-9 9-10 Cloro residual (ppm ) 0,2 0,4 0,8

20 10 0 4 5 6 7 8 9 10

pH

40

Figura 5-72

 Dem anda de cloro: Com o el cloro es un fuerte oxidante, reacciona con m uchos m ateriales y no puedesobrar suficiente qum ico para m atar las bacterias. Por lo tanto, es necesario establecer la cantidad de cloro que reaccionar con otros m ateriales, a fin de establecer la cantidad total que se requiere. La cantidad usada por el sistem a se conoce com o dem anda de cloro. La cantidad de cloro que debe inyectarse para m atar las bacterias es:
Cloro requerido para control bacteriano = Cloro total inyectado Dem anda de cloro

(5-106)

Algunos de los m ateriales con los que reaccionar el cloro son: o Ion ferroso: 1 ppmde cloro oxidar 1.6 ppmde ion ferroso a ion frrico. o Sulfuro de hidrgeno: form ar iones sulfuro e hidrgeno o Com puestos orgnicos: algunos inhibidores de corrosin y qum icos controladores de escala. o Ion sulfito: de los secuestrantes de oxgeno. Esto significa que el uso de cloro est lim itado a sistem as que no tengan H2S o iones ferroso. El cloro no se em plea norm alm ente en sistem as que tienen lneas de inyeccin de agua m uy largas y no protegidas internam ente. El cloro atacar al acero y ser necesario inyectar cantidades m ayores con el propsito de obtener un residual de 0.2-0.5 ppmen los extrem os. 41

 Com patibilidad: La com patibilidad con otros qum icos que se em plean en el sistem a debe revisarse. En el caso de secuestrantes de oxgeno, dos de los siguientes procedim ientos pueden seguirse: i) El cloro puede inyectarse aguas abajo (downstream) una distancia prudente, para perm itir que el secuestrante reaccione prim ero, antes de alcanzar el punto de inyeccin del cloro. ii) S el cloro va a ser inyectado aguas arriba (upstream) de la inyeccin de secuestrante, una dosis adicional de este se requerir para com pensar la prdida por reaccin con el cloro. Se debe revisar si se requiere adicionar m s cloro u otro biocida, despus de la inyeccin del secuestrante para m antener el control bacteriano.

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 Tipos de cloro: El cloro est disponible en varias form as. Sin em bargo, desde el punto de vista del control bacteriano, realm ente no im porta cual es elegido o usado, porque form ar las m ism as cantidades relativas de Cl2, HOCl y OCl-, una vez adicionado al agua, dependiendo del pH. o Cloro lquido: es sum inistrado en recipientes de acero a alta presin, en tam aos desde 105 lb a 1 tonelada. Cuando se despresuriza para su inyeccin, este se vaporiza y se adiciona al agua con un clorinador, com o se indica en la figura 5-73. El agua fluye a travs del eyector a alta velocidad creando un vaco que abre un resorte opuesto al diafragm a de la vlvula check en el cuerpo del eyector. Cuando la vlvula check se abre, el vaco es transm itido al regulador, causando que el diafragm a abra la vlvula de entrada de cloro. El gas cloro pasa a travs del m edidor de flujo y de la vlvula de control del eyector, donde se m ezcla y se disuelve en el agua.
43 Precaucin: el cloro es m uy venenoso y debe m anejarse con m ucho cuidado

Equipo para suministrar cloro gaseoso

Figura 5-73

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o Generadores de Hipoclorito: el hipoclorito (OCl-) puede producirse en soluciones acuosas salinas por electrolisis. La solucin salina se pasa a travs de una celda electroltica especial llam ada generador de hipoclorito, que contiene dos electrodos: nodo y ctodo. U na corriente elctrica im presa de DC fluye del nodo al ctodo, a travs de la solucin salina. Los iones hidrgeno se convierten en cloro gas en el ctodo y los iones cloruro se convierten el iones OCl- en el nodo com o se indica en la figura 5-74.

La m ezcla del gas H2 y de la solucin de OCl- que sale del generador, se pasa por un separador gas-agua para elim inar el hidrgeno gas de la solucin, antes de que se adicione al agua del sistem a. El hidrgeno es venteado por razones de seguridad, porque tiene un lm ite de inflam abilidad bajo con el aire (4.1 %). Los generadores de hipoclorito son com nm ente em pleados en los sistem as de inyeccin de agua de m ar por la necesidad de elim inar el transporte y alm acenam iento del cloro lquido.

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Generador de Hipoclorito

Figura 5-74

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o Soluciones de hipoclorito: existen soluciones de hipoclorito de sodio o calcio lquidas que estn disponibles y se puede inyectar con una bom ba de qum ico convencional. La concentracin de hipoclorito de sodio es del 6-12 %, dependiendo del proveedor. Estas soluciones se usan raram ente porque tienen un costo relativo alto con relacin a otras fuentes de sum inistro de cloro. o Hipoclorito de calcio slido Ca(OCl)2: se puede encontrar en el m ercado hipoclorito de calcio slido. El principal problem a es la preparacin de la solucin acuosa a inyectar, necesitndose de un agitador especial por la corrosividad, y evitar el desperdicio del slido. La ventaja es que por cada in calcio se dispondr de dos iones hipoclorito.

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a) Seleccin de qumicos
La seleccin de los qum icos para el control bacteriano es sim ilar a la seleccin de los inhibidores de corrosin o escala. Prim eram ente se debe conocer que tipo de bacteria o bacterias estn en el sistem a, luego realizar una prueba de elim inacin in situ con diferentes bactericidas, y finalm ente su eleccin en base al m ejor rendim iento tcnico y econm ico. Algunos aspectos se considerarn en la seleccin: Controlar o elim inar ?: La decisin de usar un bactericida o un bacteriostato es determ inada por el tipo de bacteria en el sistem a. Las SRB requieren un bactericida porque se requiere elim inar o m atar a todas las bacterias por los problem as graves que producen. Com o un nm ero razonable de bacterias form adoras de lim o se puede tolerar, sin tener problem as serios, un bacteriostato se usa a m enudo para su control.

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 Resistencia a los qum icos controladores de bacterias: Con frecuencia se escucha que las bacterias han desarrollado resistencia a los qum icos controladores de bacterias. Al parecer las bacterias pueden realizar una m utacin gentica que las hace evolucionar y se dificulta su exterm inacin; aunque en la prctica, se piensa que esto no ocurre. La aparente creacin de una fuerza de resistencia se evidencia por el hecho de que un biocida gradualm ente dism inuye su efectividad. La explicacin m s com n se refiere a una adaptacin selectiva de las bacterias a los biocidas. Esto significa que ciertos m iem bros de una poblacin bacterial son fcilm ente destruidas por un biocida dado, m ientras otros tipos de bacterias no. Despus de un cierto tiem po, las bacterias m s resistentes al biocida llegan a ser gradualm ente dom inantes en la com unidad, y la efectividad del tratam iento qum ico dism inuye. Este fenm eno no ocurre siem pre. Sin em bargo, porque esto es posible, es una buena idea seleccionar com om nim o dos biocidas. De esta m anera, si el prim er qum ico que inicia el tratam iento pierde eficiencia, el tratam iento alternado con el segundo, que ser de una com posicin diferente, resolver el problem a. Las bacterias no desarrollan una inm unidad al cloro. Sin em bargo, a las concentraciones norm ales de tratam iento, el cloro tiene lim itada capacidad de penetracin en los depsitos y m asas orgnicas, y no es m uy efectivo en sistem as sucios. La efectividad puede m ejorarse con la adicin de un surfactante apropiado. 49

 Com patibilidad con el agua y otros qum icos: Se debe asegurar que el qum ico sea com patible con el agua Algunos precipitarn o form arn sales en salm ueras de alta concentracin. Tam bin se revisar la com patibilidad con el secuestrante de oxgeno y los inhibidores de corrosin y escala. Tiem po de las pruebas: A cualquier bactericida le tom a un cierto tiem po elim inar las bacterias. Por lo tanto, se debe conocer el tiem po que necesita un qum ico en particular, para realizar este trabajo a varias concentraciones. U nm todo especfico para las SRB se describe en la norm a NACE Estndar TM 0194. Es necesario conocer el tiem po para elim inar las bacterias, especialm ente cuando se usa un tratam iento batch o peridico.

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 M todos de tratam iento: Cuando se aplique el bactericida en form a continua, se requiere concentraciones altas al inicio para m antener las bacterias bajo control, y luego se estabilizan las concentraciones a valores m enores. En los tratam ientos batch se requiere una alta concentracin peridica para elim inar todas las bacterias. La concentracin, tam ao del batch y el tiem po de contacto se puede obtener de las pruebas de dilucin seriada, para luego ajustar los parm etros con los datos de cam po obtenidos con el transcurso del tiem po. En la m ayora de casos, los biocidas orgnicos se inyectan en form a peridica o batch porque tienen un m ejor desem peo tcnico y econm ico que los tratam ientos continuos. Tam bin la adaptacin selectiva es m s probable en los tratam ientos continuos porque las bacterias estn expuestas a concentraciones bajas de los qum icos. Debido a que las bacterias no desarrollan inm unidad con el cloro, este se inyecta en form a continua. La concentracin debe ser los m s baja posible para m inim izar la corrosin y el costo del tratam iento.

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f) Aplicacin de los qumicos:

Lim pieza del sistem a: La prim era regla para tener xito con los bactericidas es m antener el sistem a lim pio. U n com pleto trabajo de lim pieza es necesario y solo tiene un propsito: rem over todos los obstculos entre el bactericida y la bacteria. Si el bactericida no entra en contacto con las bacterias, no las m ata . Se recom ienda: o Lim piar todas las lneas de conduccin de agua y tubing com o se recom end en la seccin de Control de Incrustaciones; puede usarse solventes, cidos diluidos y raspadores si es necesario. o Abra todos los tanques, recipientes y filtros, y m anualm ente lim pie todos los lodos y escala acum uladas. Debe preparar un sitio apropiado para la disposicin final o encapsulam iento, con el propsito de no contam inar las reas de depsito. Este trabajo adicional tiene un costo que debe cuantificarse. o Reverse el flujo en los pozos inyectores, si la cara de la form acin est taponada con depsitos de bacterias o lim o. U n fuerte agente oxidante com o hipoclorito de sodio es norm alm ente usado para com batirlos. Para tener m ayor efectividad, luego se adiciona una solucin de cido clorhdrico.
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Limpieza del sistema

La solucin de hipoclorito de sodio m ata a las bacterias y disuelve com pletam ente la m asa biolgica de polisacridos. El cido disuelve cualquier m aterial inorgnico soluble en l y neutraliza la solucin alcalina del hipoclorito; adem s, previene la precipitacin de com puestos del agua de form acin, que son m enos solubles a pH bsicos, com o el carbonato de calcio. L as soluciones de hipoclorito de sodio son bastante corrosivas y deben inhibirse prim ero antes de su uso. En pruebas desarrolladas por Dowell, expuso un m uestra de tubing N-80 a una solucin no inhibida del 5 % de hipoclorito de sodio a 176 F y presin atm osfrica, resultando una velocidad de corrosin de 664 m py. Em pleando despus un inhibidor apropiado, se redujo la corrosin a valores aceptables.

Al tener los bactericidas ciertas propiedades de detergencia, en los sistem as que no estn m uy sucios, la aplicacin del qum ico ser suficiente. Sin em bargo, rara vez se tienen este tipo de sistem as, por lo tanto, se preferir la lim pieza m ecnica y qum ica. Cuando se utilice un bactericida en una lnea de inyeccin a un pozo, la detergencia del qum ico aflojar los slidos de la superficie interna de la tubera, y sern transportados hacia la form acin, esto puede ocasionar taponam iento. Se recom ienda instalar filtros de cartuchos en el cabezal del pozo.
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 Elim inar reas estancadas y de baja velocidad: Exam inar la posibilidad de elim inar las reas donde se produzca estancam iento del agua o la velocidad de las m ism as sea m enor a 3 ft/s. Las bacterias se desarrollan m s rpido en sitios de baja m ovilidad o estancados, m odificaciones al sistem a com o reducir el dim etro interno de las tuberas, ayudarn a controlar m ejor el crecim iento bacteriano. Esterilizar el sistem a: U na vez que el sistem a ha sido lim piado, este debera esterilizarse. Esto significa que las bacterias deben aniquilarse totalm ente, em pleando una fuerte batch de biocida con suficiente tiem po de residencia. No se debe olvidar de realizar el tratam iento qum ico a las lneas, tanques, filtro, pozos inyectores; y, la fuente de agua, que pueden ser pozos productores.

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 Instituir el tratam iento: En este punto el tratam iento es norm al, y la aplicacin de los bactericidas puede ser tipo batch o continuo. Los qum icos deberan adicionarse tan cerca com o sea posible de la fuente de agua, y en un rea donde exista una buena m ezcla por agitacin. Los sitios com unes de aplicacin de los bactericidas son: o o o o Lneas de tom a de agua superficiales En la parte anular de los pozos surtidores de agua. En el m anifold de una estacin de produccin Despus de la bom ba de sum inistro de agua

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a) Evaluacin de los programas de tratamiento qumico:

Para conocer si los bactericidas seleccionados estn actuando o no en el sistem a, se debe m onitorear perm anentem ente. U n buen program a de m onitoreo incluir algunos de los siguientes procedim ientos, llevados a cabo en form a peridica: 1) Inspeccionar los puntos de inyeccin de qum icos para asegurarse que los productos que se est aplicando sean los seleccionados y estn en la dosis recom endada. 2) Estim ar la poblacin de las fam ilias de bacterias planctnicas en las m uestras de agua, em pleando la dilucin serial u otros m todos de cultivos. 3) Estim ar la poblacin total de planctnicas en el agua usando los m todos ATP o Fluorescencia M icroscpica. 4) Estim ar la poblacin bacteriana sessile usando el m ecanism o de recoleccin de Robbins, m todo ATP o la Fluorescencia M icroscpica. 5) M edir las concentraciones de H2S. 6) Exam inar visualm ente el agua y los slidos suspendidos. 7) Inspeccionar internam ente los depsitos internos y la corrosin. Debe tenerse en cuenta que es m uy factible controlar a la poblacin de bacterias planctnicas, pero es extrem adam ente difcil acabar con las bacterias sessile, y estas son las causantes de los m ayores problem as en el sistem a. Cuando esto sucede, se debe a la presencia de escala, productos de corrosin o depsitos que protegen a las bacterias de la accin del bactericida, inhabilitando la penetracin del qum ico en la biom asa.
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h) Radiacin ultravioleta (UV):

Es m uy conocido que la luz ultravioleta elim inar las bacterias. Esta interrum pe el crecim iento al producir alteraciones en las clulas que im pide que se m ultipliquen. Sin em bargo, unidades ultravioletas com erciales, capaces de tratar grandes volm enes de agua, estuvieron disponibles desde la m itad de la dcada de los ochenta. Cuando el agua contiene bacterias que fluyen a travs de una unidad con luz ultravioleta, la probabilidad de elim inar una bacteria dada, depende del tiem po de exposicin y de la intensidad de la luz que alcance la bacteria. La intensidad que alcance a una bacteria depende de:
2 i) La salida de la lm para, m edida en m iliwats/cm . ii) La distancia entre la fuente de luz U V y la bacteria. iii) La naturaleza y cantidad de m ateria suspendida en el agua. Partculas suspendidas dispersarn una parte de los rayos U V , por lo tanto reducen la cantidad que penetrar en el agua. iv) Cualquier m aterial que pueda absorber la luz U V dism inuir la intensidad. Pelculas de slidos pueden acum ularse en las ventanas de cuarzo, reduciendo la intensidad de la luz U V . Las ventanas de cuarzo son em pleadas porque son transparentes a la longitud de onda de los rayos U V .

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Radiacin ultravioleta
U na curva tpica de respuesta a la dosis aplicada de los rayos U V se indica en la 2 figura 5-75. La dosis est expresada en m iliwats-seg/cm , que es el producto de la intensidad de salida m ultiplicada por el tiem po de exposicin. La elim inacin relativa se expresa com o la fraccin de sobrevivencia, que es el nm ero de clulas que han sobrevivido dividida para el nm ero original de clulas. Los resultados en un cam po determ inado fueron de +99.9% de bacterias SRB elim inadas. Adem s, se tuvo un costo m enor con la luz UV, en relacin a un tratam iento qum ico con biocida. La radiacin U V se utiliza para prevenir la entrada de bacterias planctnicas a un sistem a. Cualquier bacteria que escape a la elim inacin en la unidad U V , se m ultiplicar en el sistem a, es decir, no se tiene un efecto residual de la radiacin. Por lo tanto, es m uy probable que se requiera de un tratam iento qum ico posterior en los sistem as que han utilizado la radiacin U V . Debe recordarse que el uso de la luz UV est lim itado a sistem as lim pios, con bajo contenido de slidos suspendidos y poca cantidad de slidos disueltos o petrleo suspendido, debido a la habilidad de estos m ateriales de reducir la intensidad de la luz a travs del agua.
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100

Porcentaje sobrevivencia (Ns/No * 100)

10

0,1

0,01

0,001 0 5 10 15 20 25 30 35

Dsis U V (miliwat-seg/cm2)

Figura 5-75

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