Introduccin:

La obtencin y el correcto de muestras sanguneas permiten la exactitud en resultados de la muestra. La parte experimental de la inmunologia requiere estudios que competen todo el sistema inmunolgico. En la sangre encontramos estructuras que participan activamente en la inmunidad del individuo como los glbulos blancos. Existen procesos especficos que ayudan al experimentador obtener las estructuras requeridas para determinado experimento, donde la toma de muestra debe ser con la mayor pulcritud e higiene para asegurar la inocuidad de la muestra y la seguridad del donante. En el siguiente informe se explicara la forma adecuada de tomar la muestra y luego de esta el tratamiento que la muestra requiera para determinados estudios.

b!etivos:
"onocer las vas de toma de muestra sangunea del cuy y del ave #eali$ar con satisfaccin la toma de muestra de estas especies. #eali$ar toma de muestras con y sin anticoagulante sabiendo a que examen esta dirigido cada muestra %aber los pasos para obtener el suero animal %aber los pasos para obtener el plasma sanguineo %aber los pasos para reali$ar lavado de glbulos ro!os

&arco terico:
Sangre:
%angre, sustancia lquida que circula por las arterias y las venas del organismo. La sangre es ro!a brillante o escarlata cuando ha sido oxigenada en los pulmones y pasa a las arterias' adquiere una tonalidad m(s a$ulada cuando ha cedido su oxgeno para nutrir los te!idos del organismo y regresa a los pulmones a trav)s de las venas y de los peque*os vasos denominados capilares. En los pulmones, la sangre cede el dixido de carbono que ha captado procedente de los te!idos, recibe un nuevo aporte de oxgeno e inicia un nuevo ciclo. Este movimiento circulatorio de sangre tiene lugar gracias a la actividad coordinada del cora$n, los pulmones y las paredes de los vasos sanguneos.

Composicin de la sangre:
La sangre est( formada por un lquido amarillento denominado plasma, en el que se encuentran en suspensin millones de c)lulas que suponen cerca del +,- del volumen de sangre total. .iene un

olor caracterstico y una densidad relativa que oscila entre /,0,1 y /,011. En el adulto sano el volumen de la sangre es una onceava parte del peso corporal, de +,, a 1 litros. 2na gran parte del plasma es agua, medio que facilita la circulacin de muchos factores indispensables que forman la sangre. 2n milmetro c3bico de sangre humana contiene unos cinco millones de corp3sculos o glbulos ro!os, llamados eritrocitos o hemates' entre ,.000 y /0.000 corp3sculos o glbulos blancos que reciben el nombre de leucocitos, y entre 400.000 y 500.000 plaquetas, denominadas trombocitos. La sangre tambi)n transporta muchas sales y sustancias org(nicas disueltas.

Eritrocitos:
Los eritrocitos 6 glbulos ro!os o hemates6, son los elementos formes cuantitativamente m(s numerosos de la sangre. La hemoglobina es uno de sus principales componentes y su ob!etivo es transportar el oxgeno hacia los diferentes te!idos del cuerpo. Los eritrocitos se derivan de las c)lulas madre comprometidas denominadas hemocitoblasto. La eritropoyetina, una hormona de crecimiento producida en los te!idos renales, estimula a la eritropoyesis, es decir, la formacin de eritrocitos y es responsable de mantener una masa eritrocitaria en un estado constante. Los eritrocitos, al igual que los leucocitos tienen su origen en la m)dula sea.

Proceso de desarrollo:
Las etapas de desarrollo morfolgico de la c)lula eritroide incluyen 7en orden de madure$ creciente8

9roeritroblasto Eritroblasto basfilo Eritroblasto policromatfilo Eritroblasto ortocrom(tico #eticulocito :emate, finalmente, cuando mitocondrias.

ya

carece

de

n3cleo

; medida que la c)lula madura, la produccin de hemoglobina aumenta cambiando el color del citoplasma en muestras de sangre te*idas con la tincin de <right, de a$ul oscuro a gris ro!o y ros(ceo. El n3cleo paulatinamente se vuelve picntico y es expulsado fuera de la c)lula en la etapa ortocrom(tica. La membrana del eritrocito en un comple!o bilpido = protenico, el cual es importante para mantener la deformabilidad celular y la

permeabilidad selectiva. ;l enve!ecer la c)lula, la membrana se hace rgida, permeable y el eritrocito es destruido en el ba$o. La vida media promedio del eritrocito normal es de /00 a /40 das. La concentracin eritrocitaria varia de acuerdo al sexo, edad, ubicacin geogr(fica. %e encuentran concentraciones m(s altas en $onas de gran altitud, en varones y en reci)n nacidos. Las disminuciones por deba!o del rango de referencia resultan en un estado denominado anemia. Esta alteracin provoca hipoxia tisular. El aumento de la concentracin de eritrocitos 7 eritrocitosis 8 es menos com3n. La hemlisis es la destruccin de los eritrocitos enve!ecidos y sucede en los macrfagos del ba$o e hgado. Los elementos esenciales, globina y hierro, son conservados y reutili$ados. La fraccin hem de la mol)cula es cataboli$ada a bilirrubina y excretada a trav)s del tracto intestinal. La rotura del eritrocito a nivel intravascular libera hemoglobina directamente a la sangre. ;qu, la mol)cula se disocia en dmeros y , los cuales se unen a la protena de transporte, haptoglobina. Esta transporta los dmeros al hgado donde posteriormente son cataboli$ados a bilirrubina y excretados.

Eritrocitos en mamferos:
Los eritrocitos de los mamferos no poseen n3cleo cuando llegan a la madure$, es decir que pierden su n3cleo celular y por lo tanto su ;>?. 7los anfibios y aves tienen eritrocitos con n3cleo8. Los eritrocitos tambi)n pierden su mitocondria y utili$an la glucosa para producir energa mediante el proceso de gluclisis seguido por la fermentacin l(ctica. Los eritrocitos son producidos continuamente en la m)dula sea de los huesos largos. 7En el embrin, el hgado es el principal productor de glbulos ro!os.8 El ba$o act3a como reservorio de eritrocitos, pero su funcin es algo limitada en los humanos. %in embargo, en otros mamferos como los perros y los caballos, el ba$o libera grandes cantidades de glbulos ro!os en momentos de estr)s. ;lgunos atletas han tratado de explotar esta funcin del ba$o tratando de liberar sus reservas de eritrocitos mediante f(rmacos, pero esta pr(ctica pone en riesgo al sistema cardiovascular dado que )ste no est( preparado para soportar sangre cuya viscosidad sea superior a la normal. Leucocitos: Los leucocitos o glbulos blancos son un con!unto de c)lulas sanguneas cuya funcin principal es la defensa del organismo de sustancias a!enas o agentes infecciosos. Los leucocitos son c)lulas mviles que se encuentran en la sangre y forman lo que se llama la @serie blancaA. Estas c)lulas, a diferencia de los glbulos ro!os, no contienen pigmentos, por lo que se les

califica de glbulos blancos. %on c)lulas con n3cleo, capaces de moverse libremente mediante pseudpodos. %us dos tipos principales son los leucocitos polimorfonucleares y los linfocitos. Los primeros tienen su n3cleo con una apariencia de fragmentacin. Los segundos presentan un n3cleo bien unido e individuali$ado. Plasma sanguineo: El plasma sanguneo es la fraccin lquida y acelular de la sangre. Est( compuesto por agua el B0- y m3ltiples sustancias disueltas en ella. >e )stas las m(s abundantes son las protenas. .ambi)n contiene gl3cidos y lpidos, as como los productos de desecho del metabolismo. Es el componente mayoritario de la sangre, puesto que representa aproximadamente el ,,- del volumen sanguneo total. El +,- restante corresponde a los elementos formes 7tal magnitud est( relacionada con el hematocrito8. El suero, es el remanente del plasma sanguneo una ve$ consumidos los factores hemost(ticos por la coagulacin de la sangre. Composicin: El plasma es un fluido coloidal de composicin comple!a que contiene numerosos componentes. ;barca el ,,- del volumen sanguneo. Est( compuesto por un B/,,- de agua, adem(s de numerosas sustancias inorg(nicas y org(nicas 7solutos del plasma8, distribuidas de la siguiente forma:

9rotenas plasm(ticas 7C0-8 o fibringeno 7C-8 o inmunoglobulinas 75D-8 o alb3minas 7,+-8 o otras protenas 7/-8: EL>L, L>L, :>L, protrombina, transferrina... &etabolitos org(nicos 7no electrolticos8 y compuestos de desecho 740-8

fosfolpidos 74D0 mgFdL8, colesterol 7/,0 mgFdL8, triacilgliceroles 7/4, mgFdL8, glucosa 7/00 mgFdL8, urea 7/, mgFdL8, (cido l(ctico 7/0 mgFdL8, (cido 3rico 75 mgFdL8, creatinina 7/,, mgFdL8, bilirrubina 70,, mgFdL8 y sales biliares 7tra$as8.

"omponentes inorg(nicos 7/0-8 o ?a"l o Gicarbonato o Hosfato o "a"l4 o &g"l4

o o

I"l ?a4%

Experimentacin:
Materiales: Especies animales: "uy y Jallina ;gu!as numero 4/ y 45 x /`` .uberculinas y !eringas de 5ml Ietamina y xilacina .ubos de prueba con y sin E>.; ;lcohol y algodn %uero fisiolgico 9ara poder reali$ar la toma de muestra es necesario primero anestesiar al animal con un anestesico y un tranquili$ante. En este caso la xilacina y la Ketamina. 9ara los 4 tipos de animales se les calculo la dosis necesaria de acuerdo a su peso. 9ara el cuy: Ketamina: +0mgFKg ,00 mg +0mg ,00 mgFKg /ml x LM 0.0D mlFKg 0.0D ml L xM 0.0,4 LM 0./ ml /000 gr 1,0 gr

Xilacina: ,mlFKg 0.4,ml x LM0.4, /00gr 1,0 gr LM 0./14, X= 0. Para el pollo: Ketamina: ml

0mg! "g #ia intramuscular gr

0.0$ mg X

%000 &'0 gr

'00 mg 0mg X= 0.0$ Xilacina: $mg!"g 000mg $mg X= 0. ml

%ml X

X= 0.%( ml

0. ml %00ml X X

%000 gr &'0gr X= 0.%(

La )oma *e Muestra: El animal debe estar suavemente su!eto por un manipulador experimentado que, siempre que sea posible, deber( ser conocido por los animales. ?o hay tampoco que sobre valorar el papel clave desempe*ado por la persona que su!eta al animal y evidencia la vena. La vena debe locali$arse claramente 7si se tienen dudas, es me!or no hacerlo y buscar ayuda8 y la puncin llevada a cabo decididamente me!or que con vacilaciones. 9uede que el animal muestre signos de incomodidad 7Ncomo nosotrosO8 por e!emplo, puede chillar, pero se le debe tranquili$ar, trat(ndole con suavidad y habl(ndole. 9uede que se necesite alguna presin prxima al lugar de oclusin del retorno venoso con el fin de obtener suficiente volumen de sangre. La gota de sangre formada puede retirarse con un tubo capilar o con una micropipeta con punta de pl(stico. >espu)s de haber sacado la sangre, se debe mantener una presin suave pero firme sobre el lugar durante unos 50 segundos, lo que detendr( r(pidamente cualquier sangrado. .ambi)n hay varios preparados hemost(ticos de alginato de calcio, fibrillas de col(geno y espon!a gelatinosa que pueden servir de ayuda si persiste el sangrado. Manipulacin: Cu+: Los cobayos rara ve$ muerden. %on tmidos y la su!ecin debe hacerse firme pues tratan de escapar cuando se les manipula. %e su!etan muy bien colocando el dedo pulgar e ndice alrededor del cuello, con la palma de la mano sobre la espalda y el resto de los

dedos alrededor del cuerpo. "uando se mantiene colgado, la otra mano debe su!etar la parte inferior de su cuerpo. "uidado especial requiere la manipulacin de hembras gestantes pues son pesadas

),cnica: La parte m(s difcil es la introduccin de la agu!a P45 en vena. >eterminados pasos deben ser tomados en cuenta aunque solo la pr(ctica determina la eficiencia del procedimiento. La agu!a debe insertarse paralela a la vena y la punta de la agu!a dirigida al lumen de forma longitudinal. "uando se detecta que se introdu!o en vena, la aspiracin deben de hacerse lenta para evitar se colapse. La puncin en cora$n es el m)todo mas practico para la toma de sangre en peque*os roedores cuando solo se requieren unas gotas de sangre. .ambi)n se utili$ada en especies mayores. En esta t)cnica los animales deben ser anestesiados y su!etados. La agu!a debe ser insertada en el punto donde se siente el latido del cora$n.

&)todo para la extraccin de sangre del cora$n en rata. El latido del cora$n es palpado con el dedo y la agu!a es introducida pegada al dedo a trav)s del pecho en la c(mara cardiaca como se muestra en la figura i$quierda. Luego la sangre se extrae. La extraccin debe ser lenta y la cantidad limitada a menos que se decida la eutanasia del animal. %u!ecin e extraccin sangunea de la gallina: 9ara efectos de transporte colocar la mano por deba!o del animal su!etando las patas y las alas, el animal debe estar viendo hacia el su!eto. 9ara manipulacin del ave se debe colocar sobre una superficie cogiendo con una mano la cabe$a y fi!ando las alas y con la otra su!etar las patas. 9ara la extraccin se debe ubicar la vena radial que se encuentra por deba!o del ala. >esinfectar la $ona con un algodn h3medo de alcohol. Luego hacer puncin con el bisel de la agu!a P4/ hacia arriba en direccin a la vena esperar y extraer un poco y ver si la c(mara de la !eringa se llena de sangre si as es extraer lentamente la sangre. Luego retirar suavemente la agu!a y depositar en un recipiente con o sin anticoagulante. *atos extra: La vena marginal de la ore!a del cone!o es ideal para la extraccin de peque*os vol3menes de sangre y tambi)n puede ser usada para inyecciones intravenosas. En este lugar es simple la t)cnica. El (rea es afeitada y desinfectada con xilacina seguido de alcohol. La vena es dilatada seguida de la introduccin cuidadosa de la agu!a y la extraccin de la sangre. %e coloca la gasa en la puncin para evitar hematomas. El me!or m)todo para extraer mayores cantidades de sangre del cone!o es el uso de la arteria de la ore!a y un vacutainer de ,0 cc. "on esta t)cnica entre 50 a +0 cc de sangre pueden ser colectadas. El cone!o debe estar bien su!eto y evitarse los hematomas. 9uede consultar a los m)dicos veterinarios de la 29E;LQ "investav para cualquier duda. En el ratn la toma de muestra de sangre de la cola es 3til para hematocrito, conteos celulares y hemoglobina. La cola debe ser calentada en agua a +0 Q ,0R". El animal debe ser anestesiado antes. >espu)s de la desinfeccin de la cola, / o 4 mm de la punta de la cola pueden cortarse y la sangre recogida. %i la sangre no sale, se puede Sorde*arT la cola.

;unque es un m)todo 3til, tanto este como el corte de dedos en ratn deben ser evitado lo m(s posible. La toma de muestra en vena de la cola del ratn y la rata es posible. La vena se ve lateralmente cerca de la base de la cola, se requiere buena iluminacin y dilatacin para observarse me!or. El sangrado de la vena yugular en especie mayores es lo m(s adecuado. El sangrado del plexus orbital de la rata y del sinus orbital del ratn y el h(mster es lo m(s usual. U ml puede ser extrado con una frecuencia semanal usando estas t)cnicas. "uando se extraiga sangre del ratn, la rata y el h(mster de la perirbital del o!o, el tubo capilar se coloca en la mayor de las estructuras venosas orbtales. La extraccin de sangre en el seno orbital del ratn requiere que el tubo capilar entre directamente en el sinus orbital. "uando se usa en h(mster, el tubo capilar es colocado en el caudal del sinus orbital. En la rata se facilita cuando el tubo capilar se coloca encima del globo ocular y se alcan$a la vena mayor entre la m(s profunda y la vena superficial de la rbita El conocer la ubicacin de las estructuras venosas del ratn, la rata y el h(mster ayuda al )xito de la t)cnica. Es obligatoria la anestesia en toda t)cnica de extraccin de sangre periorbital.

Lavado de glbulos ro!os: /F/0 Eolumen : +., ml %oluto: 0., 7glbulos ro!os8 %olvente: +.0 7suero fisiolgico8

Cuestionario:
/. Vcon que finalidad se a*ade o no anticoagulante al tomar una muestra sanguneaW >ependiendo al tipo de examen que se quiera reali$ar por e!emplo en un examen de c)lulas, plaquetas, glbulos blancos, hemoglobina, suspensiones de eritrocitos, etc. ?o ser( posible si la muestra fue tomada sin anticoagulante puesto a que esta sangre ya estara coagulada en cambio si necesito la obtencin de suero la muestra debe tomarse sin anticoagulante ya que es una sustancia seme!ante al plasma que se obtiene de una muestra con

anticoagulante pero sin la presencia del fibrinogeno pues este se uso durante la coagulacin. 4. VXue diferencias hay entre el plasma y sueroW 9ara obtener el plasma y el suero las muestras necesitan distinto tratamiento luego de su extraccin. 9ara obtener el plasma la muestra se debe tomar con anticoagulante mientras que el suero se toma sin anticoagulante. El plasma y el suero son muy seme!antes en sus componentes sin embargo el carece de fibrinogeno ya que lo perdi al coagularse la sangre. 5. >elimite anatmicamente las vas de sangrado de cada una de las especies animales utili$adas durante la pr(ctica. En el cuy: La puncin cardiaca se hace en el lado i$quierdo del animal entre los espacios intercostales hasta llegar al cora$n. 9un$ar en la $ona en que los latidos sean m(s prominentes. En el ave: %e hace por deba!o del ala por los ligamentos se ubica la vena radial +. "on que finalidad se reali$a el lavado de glbulos ro!os %e utili$a para preparar suspensiones de glbulos ro!os.

,. #ealice los calculos para preparar /0ml de una suspensin de glbulos ro!os al 55 ml L LM 0.5 /00ml /0ml

Gibliografa:
http:FFYYY.monografias.comFtraba!osFsangreFsangre.shtml http:FFes.YiKipedia.orgFYiKiFJl-"5-G5bulosZro!os http:FFenciclopedia.us.esFindex.phpFLeucocito

http:FFes.YiKipedia.orgFYiKiF9lasmaZsangu-"5-;>neo http:FFes.YiKipedia.orgFYiKiF"irculaci-"5-G5nZdeZlaZsangre ;rticulo de scribd.com