Practica N Objetivo Realizar la precipitacin de protenas Analizar las diferentes precipitaciones de protenas por los diferentes mtodos

Fundamentos Las protenas son molculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. El trmino protena proviene de la palabra francesa protine y esta delgriego (proteios), que significa 'prominente, de primera calidad'.1 Por sus propiedades fsico-qumicas, las protenas se pueden clasificar en protenas simples (holoproteidos), que por hidrlisis dan solo aminocidos o sus derivados; protenas conjugadas (heteroproteidos), que por hidrlisis dan aminocidos acompaados de sustancias diversas, y protenas derivadas, sustancias formadas por desnaturalizacin y desdoblamiento de las anteriores. Las protenas son indispensables para la vida, sobre todo por su funcin plstica (constituyen el 80% del protoplasma deshidratado de toda clula), pero tambin por sus funciones biorreguladoras (forma parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son protenas).2 Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolculas ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan: Estructural. Esta es la funcin ms importante de una protena (Ej: colgeno), Inmunolgica (anticuerpos), Enzimtica (Ej: sacarasa y pepsina), Contrctil (actina y miosina). Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actan como un tampn qumico), Transduccin de seales (Ej: rodopsina) Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibringeno)

Las protenas estn formadas por aminocidos los cuales a su vez estn formados por enlaces peptdicos para formar esfingocinas. Las protenas de todos los seres vivos estn determinadas mayoritariamente por su gentica (con excepcin de algunos pptidos antimicrobianos de sntesis no ribosomal), es decir, lainformacin gentica determina en gran medida qu protenas tiene una clula, un tejido y un organismo. Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados los genes que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a seales o factores externos. El conjunto de las protenas expresadas en una circunstancia determinada es denominado proteoma.

Materiales 04 gradillas con 10 tubos de ensayo Pipetas Probetas Embudo, bagueta, gotero

Reactivos Clara de huevo al 50% de dilucin y filtrado Solucin de sulfatos de amonio saturado y sobresaturado Solventes organicos (etanol,acetona) Acidos fuertes (. clorhidritco, sulfrico, ntrico, etc) Soluciones al 5% de metales pesados (nitrato de planta, de mercurio, acetato de plomo) Cloruro de sodio al 0.9% agua destilada Reactivo de biuret

Procedimiento Medir en un tubo de ensayo un 1ml de disolucin de protena (clara de huevo) Aadir igual volumen de solucin saturada de sulfatos de amonio, para observar la precipitacin de globulinas Filtrar el precipitado y en el filtrado aadir sulfato de amonio cristalizado hasta precipitacin completa de las albuminas Volver a filtrar y en el filtrado hacer la reaccin de biuret (reactivo especifico para protenas que producen una coloracin azulada) En los rpecipitados probar la solucin reversible de las protenas con agua y con NaCl al 0.9%

1. Explique en que consiste la des naturaleza de las protena, clases son las causas y las consecuencias, cuando se presentan Desnaturaleza de las protenas: se llama desnaturalizacin de las protenas a la perdida de las estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria) quedando la cadena polipeptidica reducida a un polmero estadstico sin ningna estrucutra tridimensional fija

Causas de la desnaturalizacin de protenas: la desnaturalizacin de las protenas ocurrepor la exposicin de estas a : Calor La luz ultravioleta cidos y bases Solventes orgnicos Sales de iones metlicos pesados

Consecuencias de la desnaturalizacin de las protenas: La desnaturalizacin provoca diversos efectos en la protena: 1.- cambios en las propiedades hidrodinmicas de la protena: aumenta la viscosidad y disminuye el coeficiente de difusin 2.- una drstica disminucin de su solubilidad, ya que los residuos hidrofbicos del interior aparecen en la superficie 3.- prdida de sus propiedades biolgicas 2. Por qu las protenas son solubles en soluciones acuosas o soluciones salinas? Son solubles por su propiedad de solubilidad; las protenas forman partede las dispersiones coliodales debido a su peso molecular. Son solubles porque los grupos R al ionizarse establecen puentes de hidrogeno con agua. Las protenas globulares son solubles debido a su funcin dinmica mientras que las filamentosas son solubles en agua ya que tienen funciones estructurales

3. por qu las algunas reacciones dan positivo con el reactivo de Biuret? La reaccin o prueba de BIURET es un mtodo que detecta la presencia de compuestos con dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para todas las protenas y pptidos cortos. El reactivo de Biuret consiste en una solucin acuosa de sulfato cprico (CuSO4) en medio alcalino (NaOH). Este reactivo da un ensayo positivo con los enlaces peptdicos entre aminocidos, cuando la solucin queda de color violeta. Esto se debe a que el cobre tiene la propiedad de formar iones complejos, especialmente entre los enlaces peptdicos. 4. De acuerdo a su observacin de precipitado de protena con (NH4)2SO4 y prueba de solubilidad. Explique en que caso es reversible y por que

5. Que aplicacin practica le dara Ud. A la precipitacoin de protenas