Algunos aspectos de biologa celular de procariotas Tantas diferencias entre procariotas y eucariotas?

Algunas reflexiones

Dra. Susana Castro-Sowinski Prof. Adj. Seccin Bioqumica y Biologa Molecular Facultad de Ciencias Universidad de la Repblica

Tamao y complejidad

La compartimentacin es un elemento clave de la clula eucariota

Procariota
0.25 x 1.2 a 1.5 x 4 m

Eucariota

10 m

1027 clulas cerebrales en toda la historia 1030 clulas microbianas en la Tierra

Ms microorganismos por gramo de suelo que personas en la Tierra

Planctomycetes, Verrucomicrobia, Chlamydiae (PVC)

El superfilum

Eu = eucariotas, Pl = Planctomycetes, Ch =Chlamydiae, Ve = Verrucomicrobia Ar = Archaea.

La dicotoma eucariota-procariota est basada en la organizacin celular

Protozoarios sin mitocondria: Giardia, Trichomonas, Entamoeba y Microsporida

La existencia de un ncleo se convierte en la definicin bsica para definir un eucariota

Los procariotas No poseen ncleo?

Gemmata obscuriglobus

Seccin de una clula de Gemmata. NB membrana doble rodeando el cuerpo nuclear; N zona nuclear

Arbol filogentico de la vida

Una hiptesis reciente sugiere que los mecanismos de endocitosis son la etapa primaria hacia la compatimentacin

Los procariotas Realizan endocitosis?

Las bacterias utilizan las protenas degradndolas en la superficie celular por medio de proteasas e incorporan los pptidos resultantes. El pptido ms largo que es capaz de unirse a un receptor bacteriano es de 35-aa

Internalizacin de protenas (GFP) en G. obscuriglobus, localizacin en el parifoplasma

ADN MEMBRANA

TEM, deteccin de GFP por inmuno-gold

Endocitosis en bacterias visualizacin de vesculas

Origen de la organizacin en la clula eucariota: - Endosimbiosis bacterias o arqueas - Autognesis invaginacin de la membrana interna y engullicin del material

Homloga a Clatrina de Eucariotas - La funcin principal es recubrir las vesculas en el proceso de transporte entre membranas

Los procariotas Poseen un solo cromosoma, circular? Los Vibrios comnmente tienen dos
cromosomas
2.96 Mb

Poseen genes de vitalidad para la clula

1.07 Mb

Brucella sp 2 cromosomas Pseudomonas capacia 3 cromosomas (3.4, 2.5 y 0.9 Mb)

Borrelia burgdorferi 1 cromosoma lineal

El genoma ms pequeo identificado al momento es Carsonella rudii, una Proteobacteriam, endosimbionte obligado de Pachypsylla venusta (insecto), de 159,662 pb o 0.159 Mb, predicho 182 genes

E. coli Clula de 2 x 1 m

La visin tradicional del plegamiento del cromosoma bacteriano 50-400 lazos de ADN negativamente superenrrollados de 10 Kb, topolgicamente independientes por lmites dinmicos

Cromosoma de 1 mm

Histonas bacterianas! Protenas asociadas al nucleoide

Pequeas protenas bsicas de unin al ADN, con carga positiva, bajo peso molecular y gran abundancia
H-NS induce la formacin de puentes; regulador global transcripcional (silenciamiento), centinela (AT) Fis promueve la formacin de ramificaciones;

IHF produce el curvamiento pronunciado del ADN, acta como un factor de transcripcin. Trabaja en asociacin con otras NAPs
HU- estabiliza el curvamiento del ADN, condensa el ADN en una fibra e interacciona con ADN de simple cadena. Arquitectura, mantiene la estructura del nucleoide Dps y CbpA formacin de agregados

H-NS - Histone-like Nucleoid Structuring Protein Fis Factor for inversion stimulation IHF Integration host factor HU -

La abundancia de histonas bacterianas dependen del estado de crecimiento de la bacteria

Proveen el marco para la regulacin transcripcional global

Estructura a escala de nm

Estructura a escala de um: localizacin durante el ciclo celular

Estructura a escala intermedia

Dominios topolgicos de 10 Kb

Focos de transcripcin

Organizacin en macrodominios

Protenas con propiedades de unin al ADN a regiones especficas formacin de macrodominios

SeqA, SlmA y MatP actuaran como marcadores que permiten la correcta orientacin del cromosoma para asegurar que la divisin celular ocurra cuando la replicacin ha finalizado

Las protenas asociadas al nucleoide se encargan de la organizacin, replicacin, segregacin, reparacin y expresin del cromosoma bacteriano

El gran dogma del citoesqueleto en eucariotas

Protenas del citoesqueleto se definen por su capacidad de polimerizar en filamentos lineales juegan un papel estructural o regulatorio durante la organizacin de las estructuras internas de la clula. Mantiene la forma de la clula actan como plataformas para el transporte de protenas y ensamblado en forma espacial y temporal (por ejemplo, recoleccin, organizacin y actividad de las protenas implicadas en la divisin celular) contribuyen a la integridad mecnica de la clula

facilita la movilidad celular (usando estructuras como las cilias y flagelos)

LAS BACTERIAS TIENE UN CITOESQUELETO CONSTITUIDO POR PROTEINAS SIMILARES A LA ACTINA Y TUBULINA DE EUCARIOTAS

Comparten un 15% de los aa, pero comparten la estructura terciaria y motivos de estructura secundaria

T U B U L I N A

A C T I N A

FILAMENTOS INTERMEDIOS

Homlogo de tubulina

Primer elemento del citoesqueleto identificado en bacterias - Define el plano de divisin - recluta las protenas de divisin celular y sntesis de la pared

Forma esfrica

Homlogo de actina

Forma de bastn

Segundo elemento del citoesqueleto bacteriano identificado.

MreB controla el ancho de las bacterias de forma bacilar como Escherichia coli.
Las bacterias que naturalmente son esfricas no tienen el gen que codifica MreB. Las bacterias que presentan genes MreB tambin pueden ser de forma helicoidal.

Reclutamiento de enzimas involucradas en la sntesis de la pared celular

Control temporal y espacial de la incorporacin de pptidoglicanos y cidos teicoicos los filamentos de MreB rotan alrededor de la clula de una manera dependiente de la sntesis del peptidoglicano

Homlogo de actina

Funcin celular de MerB y homlogos de MerB Regulacin de la forma celular

Regulacin de la sntesis de la pared Polaridad celular

Organizacin de organelos
Segregacin de cromosomas

Homlogo de actina

ParM otro homlogo de actina, involucrada en la segregacin de plsmidos

Microfotografa de fluorescencia: en verde el filamento de ParM y en rojo el plsmido

Homlogo de actina

Magnetospirillum

MamK un homlogo de actina que pertenece a un grupo evolutivo diferente de MerB

Criotomografa electrnica- se observan los

magnetosomas

Homlogo de actina

Los procariotas No poseen organelos subcelulares?

Magnetospirillum

MAGNETOSOMA Invaginacin de la membrana citoplasmtica

Las bacterias magnetotcticas estn ampliamente distribudas en los ambientes acuticos. El magnetosoma (acumulan biometales magnticos), les ayuda a navegar segn el campo magntico de la Tierra

Homlogo de actina

Homlogo de filamentos intermedios

Crescentina el tercer elemento identificado

Forma de bastn curvado

Filamentos intermedios de crescentina en verde, marcador con GFP, y membranas en rojo

Homlogo de filamentos intermedios

Caulobacter sp.

Elementos de citoesqueleto de Caulobacter crescentus

Crescentina, de polimerizacin espontnea. Se ubica en la curvatura interna de la clula (localizacin asimtrica), dndole esa forma caracterstica

Protenas del citoesqueleto bacteriano, elementos no cannicos - sin homlogos en eucariotas

Walker A Cytoskeletal ATPase (WACA) ParM (segregacin de plsmidos y cromosomas) y MinD (regula el sitio de divisin) ESCRT involucrada en la divisin en algunas bacterias y arqueas Bactofilinas regula la diferenciacin celular en Caulobacter CtpS una enzima con una funcin adicional como elemento de citoesqueleto

Funcin CTP sintetasa

Regulacin de la curvatura celular a travs de CreS

CtpS doble papel, funcin enzimtica regulada por su polimerizacin y funcin en la morfognesis, que depende de su polimerizacin pero no de su actividad enzimtica CreS recluta a CtpS, quien controla que no se produzca un curvamiento excesivo

La hiptesis - los elementos de citoesqueleto evolucionaron a partir de enzimas que polimerizan formando estructuras filamentosas
Modelo de la evolucin del citoesqueleto a partir de enzimas reguladas por polimerizacin

Regulacin de la actividad enzimtica por otro mecanismo (prdida de filamentacin) (Hexoquinasa)

Duplicacin y divergencia
Enzimas reguladas por polimerizacin (Acetil-CoA carboxilasa) Enzima con un doble papel (CTP sintasa de Caulobacter)
Prdida de actividad metablica. Filamento con un papel estructural (MreB)

Eubacteria Ncleo Histonas No* Si

Arquea No Si

Eucariota Si Si

Operones policistrnidos
Intrones corte y empalme Citoesqueleto Endocitosis

Si
Si Si Si*

Si
Si Si No

Si
Si Si Si

Organelos
Cromosomas Plsmidos

Si
Uno o varios circular o lineal Si

?
Uno circular? Si

Si
Mas de uno, lineal Hongos, mitocondrias, cloroplastos

Diferenciacin y comunicacin
Aminocido iniciador de protenas Peptidoglicano

Si
N-formil metionina

?
Metionina

Si
Metionina

Si*

No

No