Dissertacao Nicolas M Rodrigues

UNIVERSIDADE DE SO PAULO
ESCOLA POLITCNICA DEPARTAMENTO DE HIDRULICA E SANEAMENTO

NICOLAS MOURA RODRIGUES

Avaliao do efeito da lavagem com surfactante na biodegradao de um solo
contaminado por leo diesel

So Paulo
2011

contaminado por leo diesel.

Dissertao apresentada Escola
Politcnica da Universidade de So
Paulo para obteno do titulo de mestre
em engenharia

So Paulo
2011


contaminado por leo diesel.

Dissertao apresentada Escola
Politcnica da Universidade de So
Paulo para obteno do titulo de mestre
em engenharia

rea de Concentrao: Hidrulica e
Saneamento

Orientador: Prof. Dra. Maria Eugenia
Gimenez Boscov

So Paulo
2011

FICHA CATALOGRFICA

Rodrigues, Nicolas Moura
Avaliao do efeito da lavagem com surfactante na biodegra-
dao de um solo contaminado por leo diesel / N.M. Rodrigues.
-- So Paulo, 2011.
153 p.

Dissertao (Mestrado) - Escola Politcnica da Universidade
de So Paulo. Departamento de Engenharia Hidrulica e
Sanitria.

1.Solos (Contaminao) 2.leo diesel 3.Surfactantes 4.Bior-
remediao I.Universidade de So Paulo. Escola Politcnica.
Departamento de Engenharia Hidrulica e Sanitria II.t.

Dedico esta dissertao queles que fizerem bom uso dela.

AGRADECIMENTOS

Agradeo:

Profa. Maria Eugenia, pela confiana pessoal, orientao e dedicao para a
realizao deste trabalho;
Profa. Dione, pela orientao, to fundamental para moldar este trabalho;
Aos tcnicos do laboratrio de saneamento, Fabio e Laerte, pelo auxilio prestado;
Wandra, por toda a pacincia e solicitude;
EPA Engenharia, em especial ao Sergio Moreno, por todo apoio realizado, o qual
foi fundamental para que este trabalho fosse realizado;
Analitycal Technology, pela disponibilizao das anlises realizadas neste
trabalho;
Ao Anderson, por todas as discues de bar, to importantes na concepo deste
trabalho;
Rita, pelo apoio e encorajamento.
Ao Watanabe, pela impresso deste;
minha familia Leni, Roberto e Manoela, pelo afeto e amparo.
E em especial Mari, por toda pacincia, leituras, dicas e carinho ao longo desta
jornada.

Obrigado!

RESUMO

O leo diesel um dos derivados do petrleo mais consumidos no Brasil e
responsvel com grande nmero de reas contaminadas. Enquanto h tcnicas
consagradas para a remoo do leo diesel nas fases livre, vapor e dissolvida, as
solues para a remoo da fase residual ainda carecem de maior eficincia e/ou
menor custo. Este trabalho mostra os resultados de uma investigao laboratorial da
remoo de HPA de amostras indeformadas de um solo contaminado com leo
diesel por meio de ensaios de lavagem com solues do surfactante Lauril Sulfato
de Sdio (LSS) nas concentraes de 0,6, 1,5 e 3 CMC (concentrao micelar
crtica), seguido de um ensaio de respirometria para avaliar a capacidade de
biodegradao aerbia. Um equipamento foi desenvolvido especialmente para a
realizao dos ensaios de coluna utilizando os prprios anis de amostragem. Os
resultados mostraram que apenas na concentrao de 3 CMC foi possvel remover
HPA em concentraes acima do limite de deteco da tcnica analtica, e que essa
remoo foi inferior a 7,6 % da massa residual no solo. Os resultados de
respirometria mostraram que o solo sem a adio de surfactante degradou em mdia
1% do contaminante inicial, por semana. A influncia da lavagem na biodegradao
no demonstrou um comportamento regular e durou aproximadamente duas
semanas. A biodegradao posterior ao perodo de influncia do surfactante
apresentou alta correlao linear com a concentrao inicial de contaminante.

ABSTRACT
Diesel fuel is one of the most petroleum derivates consumed in Brazil and
responsible with large numbers of contaminated areas. While there are consecreated
techniques for the removal of diesel oil-free phases, vapor and dissolved, the
solutions to remove the residual phase still need greater efficiency and/or lower cost.
This work shows the results of a laboratory investigation of the removal of PAH
undisturbed samples of soil contaminated with diesel oil by soil flushing tests with
solutions of surfactant Sodium Lauryl Sulfate (SLS) at concentrations of 0,6, 1,5 and
3 CMC (critical micelle concentration), followed by a respirometric test to assess the
ability of aerobic biodegradation. A device was developed specifically for the test
column using their own sampling rings. The results showed that only the solution with
3 CMC concentration was able to remove PAH concentrations above the detection
limit of the analytical technique, and that this removal was less than 7.6% of residual
mass in the soil. The results showed in the soil respirometry without the addition of
surfactant biodegraded on average 1% per week of the initial contaminant. The
influence of flushing on the biodegradation has not established a regular pattern and
lasted about two weeks. The biodegradation after the period of influence of the
surfactant was highly correlated linearly with the initial concentration of contaminant.

LISTA DE FIGURAS
Figura 3.1 Nmero de reas contaminadas por tipo de contaminante no Estado de
So Paulo .............................................................................................. 23
Figura 3.2 Condio de gerenciamento das reas contaminadas cadastradas no
Estado de So Paulo ............................................................................. 24
Figura 3.3 Estrutura de alguns Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos .............. 26
Figura 3.4 - Condutividade hidrulica em funo do teor de umidade volumtrico ... 32
Figura 3.5 Permeabilidade de um fluido em funo da percentagem em volume no
meio ....................................................................................................... 33
Figura 3.6 - Drenagem e imbibio.. ......................................................................... 34
Figura 3.7 Histerese na curva de reteno de gua de um solo ............................ 35
Figura 3.8 Equilbrio de tenses entre dois fluidos e um slido.............................. 35
Figura 3.9 - Curvas tpicas da relao entre a concentrao de um dado composto
no solo e na gua .................................................................................. 40
Figura 3.10 Influncia da presena de ctions na adsoro de compostos
hidrofbicos ........................................................................................... 43
Figura 3.11 Estrutura bsica dos tipos de surfactantes existentes ......................... 45
Figura 3.12 Formas do surfactante em meio aquoso na presena ou no de uma
superfcie ............................................................................................... 46
Figura 3.13 Equilbrio de foras entre trs fluidos. ................................................. 47
Figura 3.14 Influncia da tenso superficial na saturao residual de gua no solo
............................................................................................................... 48
Figura 3.15 Relao entre a saturao residual de gua e a saturao residual de
leo no solo ........................................................................................... 48
Figura 3.16 Influncia da concentrao de surfactante na solubilizao dos
hidrocarbonetos ..................................................................................... 49
Figura 3.17 Habitat de solo contendo partculas minerais (Sa: areia, Si: silte, C:
argila), matria orgnica (OM), gua (W), razes (R), e microrganismos

do solo [bactria (B), actinomicetos (A), esporos de micorrizas e hifas
(My), hifas de fungos saprofticos (H), nematdio (N), protozorio ciliado
(CP), e um caro (M)]. ........................................................................... 51
Figura 3.18 Estgios de formao de biofilme em superfcies ............................... 53
Figura 3.19 Rota metablica da degradao bacteriana do naftaleno ................... 54
Figura 3.20 Rota metablica da degradao por fungos do naftaleno ................... 55
Figura 3.21 Rotas metablicas da degradao de antraceno por fungos e bactrias
............................................................................................................... 56
Figura 3.22 Rotas metablicas da degradao bacteriana do fenantreno ............. 57
Figura 3.23 Rotas metablicas da degradao do fenantreno por fungos ............. 58
Figura 3.24 Rotas metablicas da degradao do Benzo(a)pireno por fungos ...... 58
Figura 3.25 Potenciais de oxirreduo dos principais aceptores finais de eltrons 59
Figura 3.26 Curva caracterstica do crescimento microbiano em sistemas fechados
............................................................................................................... 60
Figura 3.27 Taxa de crescimento celular () em funo da concentrao de
substrato (C): Modelos de Monod e Haldane ........................................ 61
Figura 3.28 Efeito da concentrao de Alfonic 810-60 (A) e Novel II 1412-56 (B) na
dessoro do fenantreno em um solo predominantemente mineral
(Lima) .................................................................................................... 70
Figura 3.29 Efeito da concentrao de Alfonic 810-60 na mineralizao de
fenantreno nos dois solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico) ............. 71
Figura 3.30 Efeito da concentrao de Novel II 1412-56 na mineralizao de
fenantreno nos dois solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico) ............ 71
Figura 3.31 - Efeito da concentrao de Alfonic 810-60 na mineralizao de bifenil
nos dois solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico) ............................... 72
Figura 3.32 - Efeito da concentrao de Novel II 1412-56 na mineralizao de bifenil
nos dois solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico) .............................. 72
Figura 3.33 Concentraes de HPA no solo contaminado no instante inicial e aps
duas semanas de tratamento com e sem adio de LSS ...................... 74

Figura 3.34 Degradao do LSS no solo contaminado .......................................... 75
Figura 3.35 Efeito do LSS na degradao de hidrocarbonetos no solo. ................ 76
Figura 3.36 - Biodegrao do LSS no solo ................................................................ 77
Figura 3.37 Concentrao de HPA de baixo peso molecular (A) e de alto peso
molecular (B) em fase aquosa durante a percolao de 2 x 2,5 mM de
Sapogenat T-300. .................................................................................. 78
Figura 3.38 Comparao do HPA remanescente no solo aps a percolao sem
surfactante, com 5 mM de Akopal N-300 e 2 x 2,5 mM de Sapogenat T-
300. ........................................................................................................ 79
Figura 3.39 Saturao residual de leo lubrificante em lavagens com diferentes
concentraes de surfactante, velocidade de fluxo e porosidade para (A)
SDS e (B) Tween 80. ............................................................................. 80
Figura 3.40 leo mineral removido na lavagem com varias concentraes de
surfactante com vazo de (A) 5 mL/min. e (B) 50 mL/min. .................... 81
Figura 3.41 Concentrao de fenantreno na gua efluente da lavagem e eficincia
de remoo em funo da vazo de lavagem (concentrao de
Rhamnolipid = 0,5% (w/v)) ..................................................................... 82
Figura 3.42 - Concentrao de fenantreno na gua efluente da lavagem e eficincia
de remoo em funo do tipo de surfactante (concentrao de
surfactante = 0,5 % (w/v) e vazo = 2 mL/min)...................................... 83
Figura 4.1 Trado para amostra indeformada da SONDATERRA@........................ 86
Figura 4.2 Trado para coleta de amostra indeformada em utilizao ..................... 87
Figura 4.3 Amostra indeformada ............................................................................ 87
Figura 4.4 Bureta com tubo de mariotte adaptado ................................................. 91
Figura 4.5 Estrutura da clula de fluxo ................................................................... 92
Figura 4.6 Clula de fluxo montada ........................................................................ 93
Figura 4.7 Suporte de apoio das clulas de fluxo ................................................... 94
Figura 4.8 Cobertura do sistema com alumnio e a carga hidrulica aplicada ....... 95
Figura 4.9 Frascos de coleta do solo da lavagem .................................................. 97

Figura 4.10 Solo logo antes da mistura aps a lavagem ........................................ 98
Figura 4.11 Solo misturado aps as lavagens........................................................ 98
Figura 4.12 Armazenamento do solo misturado aps as lavagens ........................ 99
Figura 4.13 Mistura do solo contaminado sem lavagem (SS-01, 03, 04 e 05) ..... 101
Figura 4.14 Mistura do solo no contaminado sem lavagem Controle (SS-31 e
32) ....................................................................................................... 101
Figura 4.15 Respirmetro ..................................................................................... 104
Figura 4.16 Incubador a 20C .................... .......................................................... 104
Figura 5.1 Produo acumulada de CO2 nos respirmetros................................ 115
Figura 5.2 Resultados de biodegradao das triplicatas nas 4 primeiras semanas
............................................................................................................. 116
Figura 5.3 Variao da taxa de consumo de carbono por biodegradaao longo do
tempo ................................................................................................... 117
Figura 5.4 Comparao das taxas de consumo de carbono para a lavagem com
1,5 CMC e a condio de SCNA ......................................................... 118
Figura 5.5 Comparao das massas acumuladas de carbono consumido para a
lavagem com 1,5 CMC e a condio de SCNA ................................... 118
Figura 5.6 - Comparao das taxas de consumo de carbono para a lavagem com 0,6
CMC e SCNA....................................................................................... 119
Figura 5.7 - Comparao das massas acumuladas de carbono consumido para a
lavagem com 0,6 CMC e SCNA .......................................................... 120
Figura 5.8 Comparao das massas acumuladas de carbono consumido para a
lavagem com 0 CMC, 3 CMC e SCNA ................................................ 121
Figura 5.9 Percentual acumulado de biodegradao de carbono ao longo do tempo
............................................................................................................. 124
Figura 6.1 Cruzamento dos dados de massa biodegradada na 8 primeiras
semanas com a concentrao de LSS no meio................................... 127
Figura 6.2 Correlao entre a massa biodegradada acumulada nas 8 primeiras
semanas e a massa inicial de carbono ................................................ 128

Figura 6.3 Correlao entre a massa biodegradada acumulada e a massa inicial de
carbono para at a 2 semana (A) e entre a 2 e a 8 (B) .................. 129
Figura 6.4 - Correlao entre a Massa biodegradada acumulada (8 10 semana) e
a massa inicial de carbono .................................................................. 130
Figura 6.5 Condio de inibio observada como no modelo de Haldane ........... 131

LISTA DE TABELAS

Tabela 3.1 Composio de um leo diesel comercializado no Brasil ..................... 25
Tabela 3.2 Caractersticas fsico-qumicas do leo diesel ...................................... 26
Tabela 3.3 Classificao toxicolgica dos principais compostos do leo diesel..... 28
Tabela 3.4 Compostos controlados nos EUA, Holanda e Brasil ............................. 29
Tabela 3.5 - Compilao das equaes isotrmicas, suas propriedades em baixa e
alta concentrao e sua classificao de acordo com Giles et al., 1974
(continua) ............................................................................................... 41
Tabela 3.6 - Compilao das equaes isotrmicas, suas propriedades em baixa e
alta concentrao e sua classificao de acordo com Giles et al., 1974
(trmino) ................................................................................................ 42
Tabela 3.7 Modelos cinticos para nico substrato ................................................ 62
Tabela 3.8 Modelos cinticos de mltiplos substratos ........................................... 63
Tabela 3.9 Concentrao (ug/L) de HPA de alto peso molecular na gua aps a
lavagem com LSS .................................................................................. 73
Tabela 3.10 Eficincia de remoo e biodegradao de PCB ............................... 77
Tabela 3.11 Resumo dos estudos descritos na reviso bibliogrfica ..................... 84
Tabela 4.1 Porosidades totais e efetivas ................................................................ 96
Tabela 4.2 Correo de nutrientes e umidade das amostras utilizadas na
respirometria ........................................................................................ 103
Tabela 4.3 Massa de carbono existente nas amostras ........................................ 107
Tabela 5.1 Calculo do percentual de saturao do leo diesel no solo ................ 108
Tabela 5.2 Dados geotcnicos do solo estudado ................................................. 108
Tabela 5.3 Concentrao de TPH e de HPA nas amostras deformadas coletadas
nos 5 furos de sondagem estudados ................................................... 109
Tabela 5.4 Resultados de HPA do solo logo aps o termino da lavagem ............ 111

Tabela 5.5 Resultados de HPA da gua proveniente da lavagem do solo. .......... 112
Tabela 5.6 Percentual de remoo de HPA atravs da lavagem ......................... 113
Tabela 5.7 Taxa de consumo de carbono por biodegradao nos respirmetros em
mg/dia/50g de solo seco ...................................................................... 122
Tabela 5.8 Massa acumulada de carbono consumido na biodegradao nos
respirmetros em mg ........................................................................... 122
Tabela 5.9 Estatsticas da taxa de consumo de carbono por biodegradao nos
respirmetros em mg/dia/50g de solo seco ......................................... 123
Tabela 5.10 Estatsticas da massa acumulada de carbono consumido na
biodegradao nos respirmetros em mg ........................................... 123
Tabela 5.11 Percentual de carbono biodegradado em relao ao carbono inicial da
amostra ................................................................................................ 125
Tabela 5.12 Quantidade de CO2 produzida nos respirmetros em Micro Mols ... 125

LISTA DE SIGLAS
ABA Applied Biotreatment Association
ANP Agncia Nacional do Petrleo
API Americam Petroleum Institute
CMC Concentrao Micelar Crtica
COT Carbono Orgnico Total
COV Carbono Orgnico Voltil
DGGE Denaturing Gradient Gel Electrophoresis
EUA Estados Unidos da Amrica
fco frao de carbono orgnico
HPA Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos
HS Humic Substances
HTP Hidrocarbonetos Totais de Petrleo
IARC International Agency Research on Cancer
LNAPL Light Non Aqueous Phase Liquids
LSS Lauril Sulfato de Sdio
NAPL Non Aqueous Phase Liquids
PCB Polychloride Biphenyl
PCR Polymerase Chain Reaction
PID Photo Ionization Detector
QPCR Quantitative Polymerase Chain Reaction
SCNA Solo Contaminada No Alterado
SDS Sodium Dodecyl Sulfate
SNC Solo No Contaminado
TFLP Terminal Fragment Length Polymorphism

TTAB
Tetradecyl
Trimethyl Ammonium Bromide
UFC Unidades Formadoras de Colnias
USEPA United States Environmental Protection Agency

SUMRIO
1 INTRODUO ................................................................................................... 18
2 OBJETIVOS ....................................................................................................... 21
2.1 Objetivo Geral .............................................................................................. 21
2.2 Objetivos Especficos ................................................................................... 21
3 CONCEITUAO DO PROBLEMA ................................................................... 22
3.1 Contaminao do Solo por leo Diesel ....................................................... 22
3.1.1 Caracterizao fsico-qumica do leo diesel ........................................ 24
3.1.2 Efeitos do leo diesel na sade humana ............................................... 26
3.2 Distribuio de Hidrocarbonetos Menos Densos do que a gua no Meio
Ambiente Subterrneo ................................................................................ 29
3.2.1 Mobilidade natural ................................................................................. 31
3.2.2 Influncia do surfactante na mobilidade natural .................................... 44
3.3 Biodegradabilidade de Hidrocarbonetos no Solo ......................................... 51
3.3.1 Microbiota do solo .................................................................................. 51
3.3.2 Metabolizao de derivados do petrleo por microrganismos ............... 53
3.3.3 Avaliao da biodegradao ................................................................. 63
3.4 Lavagem de Solos com Surfactantes e Biorremediao .............................. 67
4 MATERIAIS E MTODOS ................................................................................. 85
4.1 Coleta de Amostras em Campo ................................................................... 85
4.2 Anlises Preliminares ................................................................................... 87
4.2.1 Contaminao........................................................................................ 88
4.2.2 Geotcnica ............................................................................................ 88
4.2.3 Quantificao do grau de saturao de leo diesel no solo .................. 88
4.3 Organizao da Investigao Laboratorial ................................................... 89
4.4 Lavagem ...................................................................................................... 89
4.4.1 Procedimento......................................................................................... 90

4.4.2 Quantificao de HPA extrado por lavagem ......................................... 99
4.5 Respirometria ............................................................................................. 100
4.5.1 Procedimento....................................................................................... 102
4.5.2 Quantificao da gerao de gs carbnico ........................................ 105
5 RESULTADOS ................................................................................................. 108
5.1 Preliminares ............................................................................................... 108
5.2 Lavagem .................................................................................................... 110
5.3 Respirometria ............................................................................................. 114
6 DISCUSSO .................................................................................................... 126
7 CONCLUSES ................................................................................................ 132
8 CONSIDERAES E SUGESTES DE CONTINUIDADE DOS ESTUDOS .. 133
9 REFERNCIAS ................................................................................................ 134

Anexo I - Relatrio Fotogrfico

18

1 INTRODUO
Quando um solo se apresenta contaminado com compostos qumicos txicos ou
carcinognicos, seu uso pode provocar riscos sade humana. Dependendo do tipo
de uso, o risco pode ser maior ou menor, sendo o uso residencial um dos mais
crticos, devido ao maior perodo de permanncia do indivduo e possvel presena
de crianas e idosos.
A maioria das reas contaminadas no Estado de So Paulo foi provocada por postos
de gasolina e indstrias (Cetesb, 2011), atividades que normalmente se localizam na
mancha urbana. Estas contaminaes provocam risco sade humana, ou
impedem que regies com anterior vocao industrial e que atualmente apresentam
grande interesse para o setor residencial possam cumprir sua funo social.
As situaes provocadas pela contaminao do solo geram conflitos de interesse na
sociedade, sendo, portanto, papel do Estado legislar, controlar e fomentar a
recuperao de reas contaminadas. No Brasil, esses conflitos ganharam
importncia durante o final da dcada de 90.
Muitos pases se depararam com este problema ainda na dcada de 70. Em 1980,
os Estados Unidos da Amrica iniciaram um dos mais audaciosos programas de
recuperao de reas contaminadas do mundo atravs do ato Comprehensive
Environmental Response, Compensation, and Liability (CERCLA), uma lei federal
norte-americana que criou uma taxa especial para consolidar o crdito conhecido
como Superfund. Este fundo gerenciado pela United States Environmental
Protection Agency (USEPA) e, desde sua criao, atua no somente na
recuperao, mas principalmente no desenvolvimento e consolidao de novas
tecnologias aplicveis reabilitao de reas contaminadas. Nos primeiros 25 anos
do fundo foram investidos 28 bilhes de dlares, provenientes principalmente das
indstrias qumicas e de petrleo.
Em outubro de 2007, representantes das agncias governamentais dos Estados
Unidos, Alemanha, China, Rssia, Moambique, Qunia, Filipinas e do Banco
Mundial formaram o Global Pollution Remediation Fund (GPRF) e propuseram-se a
remediar 400 reas altamente contaminadas distribudas pelo mundo. Estima-se que
estas remediaes afetaro positivamente a sade de 10 a 70 milhes de pessoas e
custaro entre 350 e 400 milhes de dlares (hpfund, 2010).
19

Na Holanda, pas considerado um dos mais avanados em polticas pblicas para a
qualidade de vida, o governo federal, atravs do Ministrio da Casa Civil (Ministry of
Housing), desenvolveu um programa de planejamento e desenvolvimento territorial
(Spatial Planing & Development) para organizar e coordenar as atividades de
recuperao de reas degradadas com os diversos nveis governamentais e com o
setor privado. Na Holanda, atualmente so 60.000 reas que necessitam ser
descontaminadas urgentemente (Ministry of Housing, 2010). De acordo com a
Agncia Europia do Ambiente (AEA, 2011), estima-se que existam 1,5 milhes de
reas contaminadas na Europa. Estes so alguns exemplos de quo importante
encontrar meios para remediar reas contaminadas.
No Brasil, assim como na maioria dos pases, o principio bsico de custeio da
remediao o do poluidor pagador. Em alguns pases, quando se verifica a
impossibilidade financeira ou at mesmo a no identificao do poluidor, o governo
responsabiliza-se por remediar a rea por meio de fundos especficos, situao que
ainda no ocorre no Brasil. Apesar de a problemtica das reas contaminadas ter
eclodido no Brasil na dcada de 90, somente em dezembro de 2009 a Federao,
pela Resoluo CONAMA 420/09, estabeleceu uma poltica nacional de recuperao
de reas contaminadas. Apesar do atraso brasileiro em relao legislao e a
ferramentas institucionais de fomento pesquisa de novas tecnologias de
remediao, a importncia social do problema no pas grande e deve aumentar
com a atual expanso do setor imobilirio residencial nas grandes cidades.
Para contribuir com esta demanda da sociedade, atualmente existem diversos
estudos cientficos (Cynthia et al., 2003; Ying et al., 2004; Aitken et al., 1998;
Sandrin et al., 2005) sobre remediao de orgnicos, a maior parte visando a
entender os processos envolvidos na interao entre os contaminantes e o meio
ambiente subterrneo. Esta investigao exaustiva vem contribuindo
significativamente para a formao de um conhecimento bsico sobre o tema.
Porm, necessrio transformar esse conhecimento no aperfeioamento das
tecnologias de remediao existentes, ou at mesmo no desenvolvimento de novas
tcnicas.
O presente trabalho investiga a viabilidade tcnica de uma estratgia de remediao
baseada na aplicao da tcnica de lavagem do solo com surfactante e posterior
20

biorremediao para reas contaminadas com contaminantes orgnicos, por meio
de ensaios laboratoriais com um solo contaminado com leo diesel em fase residual.
A lavagem de solo (soil flushing) consiste no fluxo de uma soluo aquosa de
surfactante atravs do solo contaminado, esteja ele na zona vadosa ou na zona
saturada. Para remover o contaminante necessrio um sistema de bombeamento
e tratamento da gua subterrnea. A biorremediao consiste na disponibilizao de
nutrientes e aceptores de eltrons para que microorganismos acelerem a
degradao dos compostos alvos.
Alguns estudos referentes aplicao da lavagem do solo com surfactante mostram
que ela pode provocar a inibio do processo biolgico (Rouse et al., 1994; Laha e
Luthy, 1991 e 1992; Roch e Alexander, 1995; Tsomides et al., 1995), enquanto
outros estudos, que tiveram por foco acelerar o processo biolgico, verificaram que a
dosagem de surfactante no meio pode provocar uma acelerao da biodegradao
(Deschnes et al., 1995; Thibault et al., 1995; Aronstein et al., 1991; Aronstein et al.,
1992; Jain et al., 1992; Margesin, 1999; Tiehm, 1994; Volkering, 1998), devido
principalmente maior biodisponibilidade dos contaminantes na gua.
Como a maior parte das pesquisas que identificaram inibio no utilizaram solos
contaminados in situ, isto , com microbiota j adaptada presena dos
contaminantes, e avaliaram a atividade microbiolgica por perodos curtos de tempo
(horas) provavelmente insuficientes para uma readaptao dos microorganismos
aps a lavagem, o presente estudo visa investigar o comportamento biolgico por
um perodo maior de tempo aps a lavagem de um solo com microbiota adaptada
presena dos contaminantes.

21

2 OBJETIVOS
2.1 Objetivo Geral
A pesquisa visa avaliar o efeito da lavagem com surfactante na biorremediao
aerbia de um solo contaminado com leo diesel, tendo como foco investigar se h
sinergia ou divergncia entre estas duas tcnicas de remediao in situ.

2.2 Objetivos Especficos
Promover a lavagem do solo em escala laboratorial em amostras
indeformadas.
Verificar a capacidade de remoo dos HPA com a lavagem do solo em 4
diferentes concentraes de surfactante.
Determinar a evoluo por 8 semanas da taxa de biodegradao dos solos
submetidos a lavagem.
Identificar possveis correlaes entre o comportamento da degradao e as
caractersticas da lavagem e intrnsecas ao solo.

22

3 CONCEITUAO DO PROBLEMA
3.1 Contaminao do Solo por leo Diesel
crescente a utilizao de biocombustveis e outras formas de obteno de
energia, porm o petrleo ainda a principal fonte energtica do mundo,
responsvel por 34,8% do total da energia consumida no mundo em 2009, o
que correspondeu a um volume de 13,4 trilhes de litros (BP, 2010).
Dados fornecidos pela Agncia Nacional do Petrleo mostram que em 2008
foram consumidos 108,8 bilhes de litros de derivados de petrleo no Brasil,
sendo 44,3 bilhes de leo diesel (ANP, 2009).
Do total de leo diesel consumido no Brasil, em mdia 96% foram utilizados por
3 categorias principais: o transporte, que concentra 75%; a agropecuria, com
16%, e a transformao em energia eltrica, que corresponde a
aproximadamente 5% (BiodieselBR, 2011)
Como o principal consumidor de leo diesel o transporte de carga, seja ela
leve (caminho) ou pesada (ferrovia e navegao), este combustvel encontra-
se em situaes de armazenamento, transferncia e transporte, amplamente
espalhado pelo territrio nacional e, na maioria das vezes, muito prximo das
aglomeraes humanas.
A Figura 3.1 mostra que, de acordo com os registros da Cetesb (2011), os 3
principais contaminantes do estado de So Paulo so os solventes aromticos,
combustveis lquidos e HPA (hidrocarbonetos policclicos aromticos), sendo
os dois ltimos diretamente relacionados ao leo diesel.

23

Figura 3.1 Nmero de reas contaminadas por tipo de contaminante no Estado de So
Paulo
Fonte: Cetesb (2011)

Apesar de a estatstica numrica ser relevante, seria fundamental associar
algum parmetro de magnitude e/ou risco das contaminaes para se
determinar prioridades no desenvolvimento de novas tcnicas.
Outra constatao importante consiste na identificao de que 68% das reas
contaminadas ainda no tiveram medidas de remediao implementadas
(Figura 3.2), ou seja, ainda existem muitas reas a serem remediadas.

24

Figura 3.2 Condio de gerenciamento das reas contaminadas cadastradas no Estado
de So Paulo
Fonte: Cetesb (2011)

A Cetesb tm 382 reas industriais contaminadas registradas (Cetesb, 2011).
Comparando-se com as 124.651 indstrias de transformao existentes no
Estado de So Paulo (IBGE, 2011), possvel concluir que o cadastramento de
reas contaminadas em So Paulo, apesar de ser o mais avanado dentre as
outras unidades da Federao, ainda tem muito trabalho pela frente.
Alm das reas j contaminadas e que necessitam de soluo, como o uso do
leo diesel no cessar em mdio prazo, incidentes de derramamento prximo
a populaes provavelmente ainda ocorrero; portanto, o desenvolvimento de
tcnicas eficazes de remediao continuar contribuindo para a sade pblica.

3.1.1 Caracterizao fsico-qumica do leo diesel
O leo diesel um combustvel derivado do petrleo, constitudo basicamente
por uma mistura de hidrocarbonetos formados por cadeias com 8 a 38 tomos
de carbono (C8 a C38), dos quais aproximadamente 40% so n-alcanos; 39%,
iso e cicloalcanos; 20%, hidrocarbonetos aromticos; e o restante formado
por isoprenides como enxofre, oxignio e nitrognio.
25

As caractersticas bsicas descritas na ficha de segurana do leo diesel
disponibilizada pela Petrobrs apresentam um produto inflamvel,
medianamente txico, voltil, isento de material em suspenso e com odor forte
e caracterstico (PETROBRAS, 2003). Contudo, a composio de um leo
diesel especfico depender da fonte do petrleo, do mtodo de produo e
dos processos de destilao. O leo diesel pode tambm conter vrios aditivos
na sua composio final, tais como inibidores de corroso, surfactantes e
aditivos, para melhorar sua estabilidade e viscosidade.
Como a composio do leo diesel influencia seu comportamento no meio
ambiente, em 2003 o CENPES (Centro de Pesquisas Leopoldo Amrico
Miguez de Mello, da Petrobrs) determinou a composio (Tabela 3.1) e a
caracterizao fsico-qumica (Tabela 3.2) de um leo diesel comercial.

Tabela 3.1 Composio de um leo diesel comercializado no Brasil
Compostos de
Interesse
Frao
Molar
(leo
Diesel)
Solubilidade
( ) ( )
Solubilidade
Efetiva
Calculada
( )
Solubilidade
Efetiva
Experimental
( )
Benzeno 5,50E-03 1780 9790 8580
Tolueno 3,93E-02 515 20239,5 18230
Etilbenzeno 4,54E-02 152 6900,8 4640
Xilenos Totais 6,94E-02 - - -
Naftaleno 1,26E-03 31 39,06 145,43
Acenaftileno 2,37E-06 16,1 0,038157 0,04
Acenafteno 3,14E-05 3,8 0,11932 1,09
Fluoreno 1,52E-04 1,9 0,2888 3,89
Fenantreno 4,05E-04 1,1 0,4455 5,37
Antraceno 1,22E-05 0,045 0,000549 0,05
Fluoranteno 1,32E-05 0,26 0,003432 0,03
Pireno 2,37E-05 0,13 0,003081 0,07
Benz(a)antraceno 2,07E-05 0,011 0,0002277 0,004
Criseno 1,52E-05 0,0015 0,0000228 0,006
Benzo(b)fluoranteno 2,30E-06 0,0015 0,00000345 -
Benzo(k)fluoranteno Na 0,0008 - -
Benzo(a)pireno Na 0,0038 - -
Fonte: Kaipper, 2003
26

Os compostos apresentados na Tabela 3.1 constituem apenas 16,2% em
moles da mistura do leo diesel, porm estes 16,2% so considerados os de
maior interesse ambiental e so todos aromticos.
Alm da caracterizao da frao molar dos compostos do leo diesel, a
Tabela 3.1 tambm apresenta a solubilidade (S
w
), a solubilidade efetiva obtida
experimentalmente e a solubilidade efetiva calculada a partir da aplicao da
Lei de Raoult para os compostos qumicos caracterizados.

Tabela 3.2 Caractersticas fsico-qumicas do leo diesel
Propriedades leo Diesel
Frmula ~ C8 a C30
Peso Molecular (g/mol) 200 220
Densidade relativa (a 20C, em mg/L) 0,8376
Viscosidade cinemtica (a 40C. em cSt) 2,88
Presso de Vapor (mmHg) 10,34
Ponto de Ebulio (C) 139,1
Ponto de Fulgor (C) 45
Solubilidade em gua (a 20C, em mg/L) 2,7-3,2
Tenso Superficial leo/ar (a 15C, em mN/m)* 27,3
Tenso Interfacial leo/gua (a 15C, em Mn/m)* 24
Fonte: Paludo, 2007

A Figura 3.2 apresenta a estrutura de alguns dos principais HPA presentes no
leo diesel.

Figura 3.3 Estrutura de alguns Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos
Fonte: Mazzuco, 2004

3.1.2 Efeitos do leo diesel na sade humana
A Tabela 3.3 apresenta a classificao da IARC (International Agency
Research on Cancer) e uma compilao dos resultados dos perfis toxicolgicos
27

apresentados pela ATSDR (Agency for Toxic Substances and Disease Registry
dos EUA) para os principais compostos existentes no leo diesel, do ponto de
vista ambiental.
A IARC classificou os compostos e substncias em uma escala que vai de 1
at 4, onde: 1 significa que o composto comprovadamente carcinognico
para seres humanos, 2A provavelmente carcinognico para humanos, 2B
possivelmente carcinognico para humanos, 3 no classificado como
carcinognico para humanos e 4 possivelmente no carcinognico para
humanos. A compilao realizada nos perfis toxicolgicos classifica os
resultados das pesquisas existentes em: E.C.H. (Efeitos Confirmados em
Humanos), S.E.H. (Sem Efeitos em Humanos), E.C.A. (Efeitos Confirmados em
Animais), S.E.A. (Sem Efeitos em Animais), E.I. (Estudos Inconclusivos) e
apenas um hfen (-), no caso de inexistncia de estudos relacionados.
Ressalta-se que os efeitos em animais somente foram apresentados quando os
estudos com humanos foram inconclusivos ou no existem, e a classe E.I.
utilizada quando no houve concluso dos estudos em humanos e animais.
Os estudos toxicolgicos existentes ainda so poucos e muitas vezes
dependentes de relatos acidentais, no caso de humanos. Apesar disso, a
Tabela 3.3 mostra que em geral, os compostos existentes no leo diesel so
txicos. A constatao da toxicidade destes compostos somada significativa
freqncia com que so encontrados no ambiente subterrneo motivou o
controle das concentraes destes compostos nos solos, a exemplo das
regulamentaes dos EUA (Estados Unidos da America), Holanda e Brasil,
apresentadas na Tabela 3.4. Dentre os compostos listados, apenas o
acenaftileno no controlado nos trs pases considerados.

28

Tabela 3.3 Classificao toxicolgica dos principais compostos do leo diesel
Inalao Oral Dermico Inalao Oral Dermico Inalao Oral Dermico Inalao Oral Dermico Inalao Oral Dermico Inalao Oral Dermico Inalao Oral Dermico
Benzeno 1 E.C.H. S.E.A E.I E.C.H. E.C.H. E.I. E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.C.A. - E.C.H. E.C.H. - E.I. E.I. - E.C.A. S.E.A. -
Tolueno 3 E.I - - E.C.H. E.C.H. - E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.I. E.C.A. - E.C.H. E.C.H. - E.I. E.I. - E.C.A. E.C.A. -
Etilbenzeno 2B E.C.A. E.C.A. - E.C.A. E.C.H. E.C.A. E.C.H. E.C.A. E.C.H. E.I. S.E.A. - E.C.H. E.I. - E.I. E.I. - E.C.A. - -
Xilenos Totais 3 E.I E.I. E.I E.C.H. E.C.H. E.C.A. E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.I. E.I. - E.C.H. E.C.A. E.C.A. E.I. S.E.A. - E.C.A. E.C.A. S.E.A
Naftaleno 2B E.C.A. E.I. - E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.C.H. E.C.H. - E.C.A. S.E.A. E.C.H. E.C.H. - - E.I. - - E.C.H. -
Acenaftileno -
Acenafteno 3
Fluoreno 3
Fenantreno 3
Antraceno 3
Fluoranteno 3
Pireno 3
Benz(a)antraceno 2B
Criseno 2B
Benzo(b)fluoranteno 2B
Benzo(k)fluoranteno 2B
Benzo(a)pireno 1
Indeno(1,2,3 cd)pireno 2B
Benzo(g,h,i)perileno 3
- S.E.A. - - E.C.A. - - E.C.H.
Efeitos sistemicos (muscular,
osseo, dermal, etc.)
E.C.A. - S.E.A. E.C.A.
Compostos
Classificao de
Carcinogenicidade da
IACR
Cancer
ATSDR
Neurologicos Sistema imunologico e linfatico Morte Desenvolvimento do feto Reprodutivos
E.C.A. E.C.A. E.C.A. E.C.A. S.E.A E.I. E.C.A. - E.I.

Fonte: USEPA, 2010 e IARC, 2009
29

Tabela 3.4 Compostos controlados nos EUA, Holanda e Brasil
Compostos Numero Cas
PRGs
(EUA)
Lista
Holandesa
CONAMA
420
Brasil
Benzeno 000071-43-2 X X X
Tolueno 000108-88-3 X X X
Etilbenzeno 000100-41-4 X X X
Xilenos Totais 001330-20-7 X X X
Naftaleno 000091-20-3 X X X
Acenaftileno 000208-96-8 - - -
Acenafteno 000083-32-9 X - -
Fluoreno 000086-73-7 X - -
Fenantreno 000085-01-8 - X X
Antraceno 000120-12-7 X X X
Fluoranteno 000206-44-0 X X -
Pireno 000129-00-0 X - -
Benz(a)antraceno 000056-55-3 X X X
Criseno 000218-01-9 X X X
Benzo(b)fluoranteno 000205-99-2 X - -
Benzo(k)fluoranteno 000207-08-9 X X X
Benzo(a)pireno 000050-32-8 X X X
Indeno(1,2,3 cd)pireno 000193-39-5 X X X
Benzo(g,h,i)perileno 000191-24-2
- X X

Segundo a Cetesb (2010), para se definir o risco de um composto presente no
ambiente a uma dada populao necessita-se avaliar trs aspectos: a toxicidade do
composto, a concentrao deste no ambiente e o caminho de exposio
populao. O fato de os compostos presentes no leo diesel serem txicos e o
manuseio deste produto ocorrer muito prximo e de forma bastante dispersa na
sociedade, demonstra a significncia das contaminaes por leo diesel.

3.2 Distribuio de Hidrocarbonetos Menos Densos do que a gua no Meio
Ambiente Subterrneo

Em uma rea contaminada com hidrocarbonetos do petrleo, os hidrocarbonetos
podem se apresentar em quatro diferentes estados ou fases no subsolo: dissolvidos
na gua intersticial, sorvidos no solo, volatilizados no ar do solo ou como LNAPL
30

(Light Non Aquous Phase Liquid) em fase residual ou livre (Wiedemeier et al., 1999).
Denomina-se fase separada o conjunto das fases residual e livre.
Em geral, a liberao dos hidrocarbonetos de petrleo para o meio sub-superficial
ocorre pela migrao vertical do lquido imiscvel atravs da zona no saturada do
subsolo, em cujos poros retida parte do LNAPL por capilaridade, criando uma fase
denominada residual. A parte que no fica retida e alcana a superfcie do lenol
fretico subterrneo, por ser menos densa que a gua e pouco solvel, forma a fase
livre. A migrao vertical de leo provocada pela infiltrao ou pelas flutuaes do
lenol fretico ocasiona a reteno dos hidrocarbonetos nos interstcios do solo, na
forma de filmes ou glbulos entre as fases ar e/ou gua, formando a fase residual,
que pode ser formada tanto na zona vadosa como na zona saturada (USEPA, 1990).
Na sub-superfcie, independentemente se em fase residual ou livre, o LNAPL
interage com a gua, o ar, o solo e a biota. A partio com a gua forma a fase
dissolvida, a qual prioritariamente formada na zona saturada pelo contato da gua
com a fase livre e residual, mas tambm forma-se a partir da infiltrao da gua em
uma zona vadosa contaminada com fase residual. A transferncia de massa de
LNAPL para gua formando a fase dissolvida conhecida como dissoluo.
A formao da fase sorvida ocorre da interao da matriz do solo com as fases
dissolvida e/ou vapor. O processo de transferncia de massa de um composto da
fase dissolvida e/ou vapor para uma superfcie slida denominado soro
(compreendendo a adsoro e a absoro), enquanto que a transferncia de massa
do composto sorvido para a dissolvida ou vapor a dessoro.
Quando o ar entra em contato com o LNAPL na fase separada ou na fase dissolvida,
forma-se a fase vapor. A transferncia direta do LNAPL conhecida por vaporizao
e a transferncia da fase dissolvida para o ar a volatilizao.
Em uma zona vadosa contaminada, pode-se observar a presena de todas as fases
citadas. Segundo Zaman (1989), os principais processos de mobilizao de massa
de hidrocarbonetos na zona vadosa so:
Percolao da fase separada (LNAPL);
Dissoluo dos compostos da fase residual/livre na gua infiltrante;
Evaporao dos compostos da fase residual/livre para a fase gasosa do solo;
31

Dessoro dos compostos da fase sorvida na gua infiltrante;
Volatilizao dos compostos da fase dissolvida para a fase gasosa do solo.
Os processos anteriormente descritos ocorrem naturalmente, mas podem ser
acelerados por meio da alterao antrpica do ambiente, como por exemplo, a
elevao da temperatura do meio ou a aplicao de surfactante na gua infiltrante. A
temperatura influencia o processo de vaporizao e volatilizao, enquanto a
existncia de um surfactante pode solubilizar os compostos em meio aquoso.
A biodegradao no um processo que promove a mobilidade da contaminao, e
sim a sua transformao em outros compostos. Porm, pode envolver a liberao de
biossurfactantes ao ambiente, promovendo uma alterao na transferncia de
compostos da fase separada e/ou da fase sorvida para a gua infiltrante. Este
processo, conhecido por solubilizao, ser analisado nos prximos captulos.

3.2.1 Mobilidade natural
A percolao de um lquido por um meio poroso foi inicialmente investigada para a
situao em que os poros estavam saturados. Em 1856, Darcy formulou a equao
da velocidade da gua que percola por um meio poroso saturado (Equao 1) e at
hoje esta equao considerada a base dos estudos de fluxo por meios porosos.

Q = k i A ou v = k i Equao 1
Sendo:
Q = vazo
K = coeficiente de permeabilidade (ou condutividade hidrulica)
I = gradiente hidrulico
A = rea total da seo transversal de solo
v = velocidade aparente de fluxo

O coeficiente de permeabilidade depende do solo e do fluido (Equao 2).
32

K = k / Equao 2
Sendo:
K = coeficiente de permeabilidade (ou condutividade hidrulica)
K = permeabilidade intrnseca do solo
= peso especfico do fluido
= viscosidade dinmica do fluido

Posteriormente, a aplicao desses conhecimentos na percolao da gua atravs
da zona vadosa mostrou que o fluxo era menor do que aquele previsto por Darcy e
que variava com a quantidade de gua presente. Isto porque o coeficiente de
permeabilidade da lei de Darcy na verdade uma funo do grau de saturao ou
do teor de umidade do solo (Figura 3.4).

Figura 3.4 - Condutividade hidrulica em funo do teor de umidade volumtrico
Fonte: Fredlund e Rahardjo, 1993

33

A funo permeabilidade pode tambm ser expressa por meio do conceito de
permeabilidade relativa, segundo o qual a permeabilidade de um determinado fluido
em meio poroso proporcional percentagem em volume deste fluido no meio
(Figura 3.5).

Saturao
residual do leo
Saturao de
gua irredutvel
P
e
r
m
e
a
b
i
l
i
d
a
d
e

R
e
l
a
t
i
v
a
Saturao de gua
Saturao de leo
NAPL
gua

Figura 3.5 Permeabilidade de um fluido em funo da percentagem em volume no meio
Fonte: API, 2004

Quando existe mais de um fluido no meio poroso, a percolao de um deles implica
no deslocamento do outro; como o meio possui poros capilares, formam-se presses
que dificultam a percolao dos fluidos. A percolao de dois fluidos em um solo
pode ser dividida em dois processos, a imbibio (ou molhagem) e a drenagem. A
primeira ocorre quando o fluido de maior molhabilidade ao solo desloca o de menor
molhabilidade, como o processo de infiltrao da gua no solo no saturado (com
34

ar); na drenagem, ocorre o oposto, como quando o leo diesel flui na zona saturada,
ou quando o nvel dgua desce e ocorre entrada de ar no solo (Figura 3.6).

leo
Imbibio Drenagem
gua
OA
AS
OS
P
A
P
O
Solo Solo

Figura 3.6 - Drenagem e imbibio..
AS
= tenso interfacial entre a gua e o solo,
OS
= tenso interfacial entre o leo e o solo,
OA
= tenso interfacial entre o leo e a gua, P
A
= presso que a gua exerce sobre o leo,
P
O
= presso que o leo exerce sobre a gua
Fonte: Chatzis, 1983

Durante a drenagem, a presso capilar maior do que durante a imbibio, o que
acarreta a histerese na curva de reteno de gua do solo (Figura 3.7).

35

Figura 3.7 Histerese na curva de reteno de gua de um solo
Fonte: Modificado de Silva, 2005

A Figura 3.8 apresenta os vetores de tenso que atuam na interface entre as trs
fases slida, lquida e gasosa na zona vadosa.

LS
GL
SG
Slido
Gs ou Lquido
G
Lquido
L
S

Figura 3.8 Equilbrio de tenses entre dois fluidos e um slido
Fonte: Modificado de Bear, 1972
36

Analisando o equilbrio de foras ao longo desta interface, obtm-se a equao de
Young (Equao 3).

Equao 3
Sendo:
GL
= tenso superficial entre o gs e o lquido (mN/m);
= ngulo entre o solido e o fluido mais aderente (radianos);
SG
= tenso superficial entre o gs e o slido (mN/m);
LS
= tenso interfacial entre o liquido e o solido (mN/m).

Durante a infiltrao do leo diesel no solo, ocorre o processo de trapeamento, que
a formao de glbulos praticamente imveis de leo (Chatzis, 1983), que indica
uma forte tendncia de estabilizao do leo no solo. Porm, muitas vezes, algumas
alteraes no ambiente, como a drenagem ou evaporao da gua que ocupava um
poro adjacente bolha, pode promover a mobilizao do leo pela mudana do tipo
de fluido que interage com ela.
Existem muitos fatores que influem no trapeamento inicial e subseqente
mobilizao do leo, dentre eles: a geometria dos poros do solo; a tenso interfacial
e a diferena de densidade entre os dois fluidos percolantes.
Para analisar a capacidade de mobilidade de um fluido em uma zona capilar pode-
se utilizar o nmero capilar total (N
T
), que a soma do nmero capilar (N
c
) e o
numero Bond (N
B
). N
c
consiste na razo entre as foras de viscosidade mais
hidrosttica e a fora capilar, e N
B
, a razo entre a fora gravitacional e a capilar.

Equao 4

Equao 5
37

Equao 6

Sendo:
q = velocidade ou vazo especifica da gua (m/s);
= viscosidade da gua (kg/s*m);
= tenso interfacial entre os fluidos (mN/m);
= diferena entre a densidade dos dois fluidos (kg/m);
g = acelerao da gravidade (m/s);
R = raio representativo dos gros (m).

Quanto maior for o valor desses nmeros, maior a mobilidade entre os fluidos e,
portanto, menor ser a fase residual. Quando a drenagem ou evaporao da gua
mobiliza o leo diesel, ocorre alterao na tenso interfacial entre os fluidos (): com
a sada da gua, o leo passa a ter contato com o ar, e a tenso interfacial entre ar e
leo menor do que a entre gua e leo. Com isso, alguns glbulos trapeados so
mobilizados e a saturao residual diminui (Chatzis, 1983).
A passagem de gua pela zona vadosa especialmente diferente dos outros fluidos,
pois a gua apresenta forte molhabilidade ao solo, tanto em relao ao ar quanto em
relao ao leo diesel. Com isso, a gua transmitida atravs da conexo entre os
filmes que se formam na superfcie dos gros de solo. Ou seja, a fina camada de
gua presente na superfcie dos gros no fica imvel, ela transmite gua como se
fosse uma micro tubulao. Porm, este comportamento no significa que a gua
no pode ficar imvel, tudo depende da quantidade de gua disponvel.
Quando ocorre infiltrao de gua pelo solo contaminado no saturado, a gua
escoa pelos filmes que recobrem os gros prximos aos glbulos aprisionados. O
contato desta gua com os glbulos de leo diesel trapeados no solo provoca a
dissoluo preferencial dos hidrocarbonetos de maior solubilidade efetiva (Tabela
3.1) at que se atinja o equilbrio, caso haja tempo de contato suficiente. A gua
38

contaminada transmitida para a zona saturada e a regio circundante ao leo
renovada com gua limpa. Esta troca da gua promove o aumento da diferena de
concentrao entre a gua em contato com o leo e a concentrao de saturao, o
que acelera o processo de dissoluo.
Igualmente ao processo de dissoluo, o contato entre a fase residual e o ar da zona
vadosa provoca a vaporizao preferencial dos hidrocarbonetos de maior presso
de vapor efetiva, formando assim a fase gasosa. A formao de gradientes de
temperatura ao longo do dia e de concentraes de CO
2
faz com que o ar no solo se
movimente, renovando-se (Scanlon, 2002). Adicionalmente vaporizao, a
volatilizao dos compostos presentes na fase dissolvida para o ar do solo contribui
para a formao da fase gasosa, porm em magnitude significativamente menor.
A solubilidade de um composto e a taxa de transferncia da fase separada para a
gua variam com a temperatura, presena de cossolventes, intensidade inica da
gua, gradiente entre as concentraes dissolvida e de saturao, rea de contato e
a natureza do solvente e do soluto, o que normalmente descrito pela solubilidade
efetiva do soluto no solvente (Perry et al., 2008).
Os parmetros que interferem na cintica e no equilbrio da evaporao de um dado
composto existente na fase separada so, principalmente, a temperatura e a
presso de vapor efetiva, rea da superfcie de contato, presso do sistema e
presena de outras substncias no ar. J a volatilizao principalmente descrita
pela Lei de Henry, a qual considera que a concentrao no ar (presso parcial de
vapor) de um composto qumico diretamente proporcional concentrao deste
composto na soluo aquosa em equilbrio, e vice-versa, sendo que a constante de
Henry (H) descreve tal relao. Este parmetro, apesar de ser conhecido como uma
constante, varia significativamente com a temperatura, a salinidade e a presena de
surfactantes (Tomaz, 1990; MacGillivray e Shiaris, 1994; Munz e Roberts, 1987).
Assim como o contato entre a gua infiltrante e a fase separada promove a
transferncia de massa de hidrocarbonetos atravs da fase dissolvida, o contato da
gua com os gros de solo que apresentam hidrocarbonetos sorvidos tambm pode
promover a mobilizao dos mesmos. Este processo de transferncia conhecido
como dessoro e sua dinmica, assim como em outros processos de transferncia,
dependente da temperatura e da diferena entre a concentrao na fase lquida e
39

a concentrao de equilbrio com o solo, alm da adsoro competitiva que pode
ocorrer entre compostos presentes na gua infiltrante e outros previamente sorvidos.
A interao e transferncia de hidrocarbonetos entre a fase dissolvida na gua
intersticial do solo e a fase sorvida nas partculas slidas apresentam grande
complexidade e so descritas por curvas denominadas isotermas. Estudos
demonstram que a relao entre a concentrao que fica sorvida no solo e a que
fica dissolvida na gua varia tanto em funo da concentrao de contaminante
como tambm devido a alteraes do prprio meio ambiente (Giles et al., 1974;
Hinz, 1999), tais como a litologia do solo e o teor de matria orgnica previamente
sorvida.
Diversas equaes foram propostas para modelar matematicamente as condies
de equilbrio desta interao, conforme se pode observar na Tabela 3.5, Tabela 3.6
e Figura 3.9.
40

Classe Subgrupo
cncavo
Inclinao positiva
Inclinao negativa
convexo
convexo
Inclinao negativa
Inclinao positiva
Inclinao negativa
Inclinao negativa
linear
Inclinao zero Inclinao zero
S
T
= S com K
d
Inclinao negativa
patamar
Patamar com inflexo mnimo mnimo
Patamar, inflexo, patamar

Figura 3.9 - Curvas tpicas da relao entre a concentrao de um dado composto no solo e na
gua
Fonte: Giles, 1974
41

Tabela 3.5 - Compilao das equaes isotrmicas, suas propriedades em baixa e alta concentrao e sua classificao de acordo com Giles et
al., 1974 (continua)
Nome Equao Classe
Funes racionais
Langmuir
Langmuir dois stios
Langmuir modificado
Brunauer-Emmett-Teller
Farley-Dzombak-Morel

Fonte: Hinz, 1999
42

Tabela 3.6 - Compilao das equaes isotrmicas, suas propriedades em baixa e alta concentrao e sua classificao de acordo com Giles et
al., 1974 (trmino)
a
Para > 1 a equao de Freundlich descreve S1 e tem inclinao zero com c = 0 (listada em parnteses)
Nome Equao Classe
Funes de poder
Funes transcendentais

Fonte: Hinz, 1999

43

Estudos mais recentes (Zhang et al., 2008) identificaram que as concentraes de
alguns ctions na gua (Na, K, Cs e Ca) apresentam influncia no equilbrio de
soro dos HPA (Figura 3.10). Mostraram, tambm, a significativa influncia da
presena de matria orgnica, em especial das substncias hmicas (HS).

Figura 3.10 Influncia da presena de ctions na adsoro de compostos hidrofbicos
Fonte: Zang, 2008

Devido grande influncia do meio no processo de adsoro e dessoro, alguns
estudos foram desenvolvidos para estimar preliminarmente o K
d
(Coeficiente de
partio solo/gua) de um composto em um dado solo por meio da definio de uma
relao emprica entre o K
ow
(coeficiente de partio octanol/gua) e o K
oc

(coeficiente de partio matria orgnica/gua).

Equao 7

Diversos estudos foram desenvolvidos para definir os coeficientes a e b da Equao
7. Segundo Schwarzenbach (2003), os melhores valores para os HPA so a = 0,98 e
b = -0,32.
44

Para contaminaes com PAH onde o f
oc
(frao de carbono orgnico no solo) for
superior a 1%, adota-se como hiptese que a adsoro de compostos orgnicos
hidrofbicos no solo diretamente proporcional ao K
oc
, o que permite simplificar a
estimativa de K
d
(Karickhoff, 1979).

Equao 8

Ou seja, considera-se que o Kd se comportar como uma constante, como ocorre na
classe C. Outro aspecto que ignorado nesta simplificao so as diferentes
capacidades de adsoro dos vrios tipos de matria orgnica (cidos flvicos,
cidos hmicos e humina) e suas conformaes fsicas no solo (Pan, 2008)
O entendimento dos processos de soro e dessoro fundamental para avaliar a
mobilidade da contaminao, pois ocorre tanto no sentido de imobilizar (soro)
como no de mobilizar (dessoro) os poluentes. Quando o solo est contaminado, a
infiltrao de gua na zona vadosa tende a dessorver o contaminante do solo, pois
geralmente a gua que infiltra apresenta concentraes de poluentes menores do
que as de equilbrio.

3.2.2 Influncia do surfactante na mobilidade natural
Surfactantes so compostos constitudos de uma poro hidrofbica (apolar) e uma
poro hidroflica (polar). A poro apolar uma cadeia de hidrocarbonetos,
enquanto a polar pode ser inica (aninica ou catinica), no inica ou anftera
(Figura 3.11). Alguns exemplos de surfactantes inicos utilizados comercialmente
incluem steres sulfatados ou sulfatos de cidos graxos (aninicos), sais de amnio
(catinicos), polioxietilenos (no innicos) e amidoaminas (anfteros) (Nitschke e
Pastore, 2002; Rosen, 2004). Estes compostos podem ser produzidos quimicamente
(surfactantes sintticos) ou biologicamente (biossurfactantes).
45

hidrofbica hidroflica
Aninico(fosfatos, sulfonatos,
sulfatos...)
Catinico(Amnio quaternrio)
Anfotrico(betanas)
No-inicos (etoxilatos)

Figura 3.11 Estrutura bsica dos tipos de surfactantes existentes
Fonte: Inkline, 2010

A principal caracterstica de um surfactante sua capacidade de ligar compostos
polares aos apolares. Uma das consequncias da maior ligao entre as molculas
a reduo da tenso interfacial.
Em baixas concentraes, os surfactantes encontram-se na forma de monmeros, e
em altas, os monmeros se agregam formando micelas. A concentrao na qual se
inicia a formao de micelas chamada de CMC - Concentrao Micelar Crtica
(Maniasso, 2006).
As micelas so formadas pela interao entre as cadeias apolares do surfactante e
pela repulso dos grupos polares que formam pontes de hidrognio com a gua. Os
surfactantes tendem a se distribuir nas interfaces entre fases fluidas com diferentes
graus de polaridade. A formao de um filme molecular ordenado nas interfaces
reduz a tenso interfacial e superficial, sendo responsvel pelas propriedades nicas
dos surfactantes (Harwell, 1998; Nitschke e Pastore, 2002). A presena de micelas
provoca a formao da chamada solubilidade aparente. O processo de formao
desta solubilidade aparente conhecido como solubilizao (Volkering, 1998).
A aplicao de energia em um sistema contendo gua e leo provoca a emulso,
que a formao de pequenas bolhas. Estas bolhas podem ser de gua ou de leo,
dependendo do liquido predominante em volume. A emulso se diferencia da
solubilizao pelo fato de na solubilizao haver apenas uma fase e
consequentemente o sistema ser termodinamicamente estvel, enquanto na
46

emulso naturalmente ocorre a coalescncia, que promove a reagregao da fase
em emulso (Rosen, 2004).
Outra forma de organizao das molculas de surfactante so as hemimicelas, as
quais constituem formaes aderidas a uma superfcie, podendo estar ligadas
poro apolar do surfactante, deixando livre sua poro polar, ou poro polar,
disponibilizando a poro apolar ao meio. Nesta ltima situao, possvel que
outras molculas de surfactante liguem-se s cadeias apolares expostas e
organizem-se em uma estrutura conhecida como admicela (Figura 3.12). A
ocorrncia destas formaes observada em concentraes de surfactante abaixo e
acima da CMC (West e Harwell, 1992; Nayyar, 1994).

Micela

Figura 3.12 Formas do surfactante em meio aquoso na presena ou no de uma superfcie
Fonte: Volkering, 1998

A presena de surfactante no solo altera a percolao do LNAPL (mobilizao), a
dissoluo (solubilizao) na gua e a soro e dessoro do solo para a gua e
vice versa (West e Harwell, 1992; Bai et al., 1997).
A mobilizao do LNAPL alterada devido reduo das tenses interfaciais e
superficiais, com consequente aumento da relevncia da fora gravitacional exercida
47

sobre o LNAPL. As Equaes 4, 5 e 6 facilitam o entendimento de que a reduo da
tenso interfacial () promove um aumento na mobilizao da fase residual.
No caso de o leo estar prioritariamente em contato com o ar, encontrando-se a
gua apenas como filme sobre as partculas do solo (Figura 3.13), a presena de
surfactante na gua promove a reduo da tenso superficial gua/ar e interfacial
gua/leo, no alterando significativamente a tenso superficial leo/ar. Aplicando-
se na Equao 3 as tenses mostradas na Figura 3.13, se a diferena entre a tenso
superficial gua/ar e gua/leo ficar maior com a presena do surfactante, ento o
leo tender a se espalhar mais. Assim, para que o leo aumente sua mobilidade, o
surfactante deve promover uma maior reduo na tenso interfacial entre gua/leo
do que na tenso superficial entre gua/ar.

Ar

Figura 3.13 Equilbrio de foras entre trs fluidos.
Fonte: Modificado de Bear, 1972

J no caso de o leo estar preso pelo contato com a gua (zona vadosa ou
saturada), a reduo da tenso interfacial leo/gua e a reduo da tenso
interfacial gua/ar facilitam a percolao da gua e, consequentemente, do leo
tambm. Este fenmeno foi estudado por Jason et al. (2003), que verificaram que a
reduo da tenso interfacial da gua com as outras fases provoca uma reduo na
saturao residual de gua no solo (Figura 3.14), a qual promove a mobilidade do
leo (Figura 3.15).
48

Tenso Superficial (mN/metro)
S
a
t
u
r
a
o

r
e
s
i
d
u
a
l

d
e

g
u
a
Areia
CRA

Figura 3.14 Influncia da tenso superficial na saturao residual de gua no solo
Fonte: Jason et al., 2003

Figura 3.15 Relao entre a saturao residual de gua e a saturao residual de leo no solo
Fonte: Jason et al., 2003

O transporte de hidrocarbonetos pela dissoluo da fase residual pode ser
significativamente acelerado pela presena de um surfactante na gua infiltrante. De
acordo com Rosen (2004), o surfactante altera a quantidade de hidrocarbonetos
solubilizados se estiver em concentraes acima da CMC em gua (Figura 3.16). A
49

magnitude da solubilizao influenciada pela estrutura do surfactante e do produto
a ser solubilizado, pela intensidade inica da soluo, pela presena de aditivos
monomricos e polimricos e pela temperatura do ambiente (Rosen, 2004).

Concentrao da soluo de surfactante
Q
u
a
n
t
i
d
a
d
e

d
e

m
a
t
e
r
i
a
l

s
o
l
u
b
i
l
i
z
a
d
o

Figura 3.16 Influncia da concentrao de surfactante na solubilizao dos hidrocarbonetos
Fonte: Rosen (2004)

A notvel alterao na solubilizao provocada pelo surfactante necessita do contato
entre a soluo de surfactante e o leo. No caso da zona no saturada, muito se
discute sobre o real contato entre a soluo e a fase residual, uma vez que estudos
(Oliveira, 1997) mostram que devido ao fato de a fase residual impedir a passagem
da gua pelo poro em que est aprisionada, o contato da gua com a fase residual
mnimo, atuando prioritariamente o processo de difuso. Porm, a infiltrao de gua
na zona vadosa ocorre atravs da percolao em filmes de gua aderidos ao solo, o
que permite o contato direto com a fase residual.
A infiltrao pela zona vadosa depende do grau de saturao inicial e da funo de
permeabilidade do solo. No h como aumentar a vazo efetivamente pela aplicao
de presso hidrulica, como em poos parcial ou totalmente penetrantes no
50

aqufero. As foras de capilaridade predominam na zona vadosa, resultando em uma
fraca correspondncia entre aumento de presso e aumento de fluxo.
Apesar da limitao da velocidade de fluxo aparentemente ser um problema para a
aplicao da lavagem com surfactante na zona vadosa, Shin (2003) observou que
quanto menor a vazo, maior a concentrao de hidrocarbonetos no efluente
drenado e maior a eficincia de remoo. Isto provavelmente devido ao aumento
no tempo de contato entre a soluo e a fase residual. Portanto, estudos de
laboratrio que visem investigar a remediao atravs de lavagem da zona vadosa
preferencialmente devem ser desenvolvidos em condies de infiltrao prximas
das que ocorrem no campo para no subestimar a capacidade de remoo de
hidrocarbonetos. No entanto, difcil reproduzir tais condies em laboratrio.
Alm da promoo da solubilizao e da mobilizao, a aderncia do surfactante
nas superfcies (hemimicelas, Figura 3.12) pode provocar um aumento na
capacidade de o meio slido sorver hidrocarbonetos, uma vez que as superfcies dos
argilo-minerais so carregadas eletronegativamente e proporcionam a formao de
hemimicelas com a poro apolar exposta ao meio aquoso. Pode tambm ocorrer a
formao das admicelas, que neutralizam este possvel aumento na capacidade de
soro de hidrocarbonetos. A poro apolar do surfactante ainda pode se ligar
poro apolar do solo ou aos hidrocarbonetos adsorvidos no solo, ou provocar uma
competio entre o surfactante e os hidrocarbonetos pelos stios ativos apolares.
De acordo com Haigh (1996), o coeficiente de partio (K
d
) dependente da
concentrao de surfactante, sendo que em concentraes bem acima da CMC,
pode-se esperar a ocorrncia de um decrscimo no valor do K
d
, especialmente para
poluentes altamente hidrofbicos. J em concentraes abaixo ou perto da CMC, K
d

depende das propriedades do solo e do surfactante, ou seja, nem sempre a
aplicao de surfactante promove o aumento do processo de dessoro, podendo
ocorrer tambm o aumento da soro; este comportamento apresenta grande
complexidade e consequentemente difcil previsibilidade. Ressalta-se que mesmo
em condies de reduo do K
d
, a concentrao de hidrocarbonetos sorvidos no
solo pode aumentar, uma vez que as concentraes de hidrocarbonetos na gua
so muito superiores s concentraes sem a presena do surfactante.

51

3.3 Biodegradabilidade de Hidrocarbonetos no Solo
3.3.1 Microbiota do solo
O solo um meio que apresenta uma vasta ecologia, a qual tanto influenciada
pelas caractersticas do solo, como influencia na prpria formao do mesmo. Um
diagrama esquemtico da biota tpica de um solo mostrado na Figura 3.17.

Figura 3.17 Habitat de solo contendo partculas minerais (Sa: areia, Si: silte, C: argila),
matria orgnica (OM), gua (W), razes (R), e microrganismos do solo [bactria (B),
actinomicetos (A), esporos de micorrizas e hifas (My), hifas de fungos saprofticos (H),
nematdio (N), protozorio ciliado (CP), e um caro (M)].
Fonte: Sylvia et al., 1998
52

O solo constitudo por compostos inorgnicos e orgnicos. A parte orgnica
decorre de plantas, animais, insetos e outros materiais adicionados, os quais so
gradualmente transformados em hmus rico em nutrientes. Estes variados
componentes formam agregados heterogneos de vrios tamanhos. Em estado
avanado de decomposio, a matria orgnica mineralizada forma os cidos flvico
e hmico (Sposito, 1989).
Bactrias e fungos utilizam diferentes estratgias funcionais para aproveitar a
complexa matriz fsica do solo. A maioria das bactrias do solo localiza-se na
superfcie das partculas do solo, mais freqentemente em zonas de poros de menor
dimetro (2 a 6 mm em dimetro), onde so menos suscetveis a tornarem-se
alimento de protozorios, e necessitam de gua e nutrientes na sua imediata
vizinhana para se desenvolver (Prescott et al., 1999; Paul e Clark, 1996).
O local de crescimento permite dividir as bactrias em dois grupos, as planctnicas,
que flutuam na gua, e as ssseis, que aderem s superfcies e vivem em biofilmes
(Figura 3.18). Atualmente sabe-se que bactrias, ao ancorar-se a uma superfcie,
ligam diferentes tipos de genes, os quais as transformam efetivamente em diferentes
organismos. Recentes estudos tm revelado que existem significativas diferenas no
nvel da expresso dos genes quando as bactrias esto em biofilmes (Maier et al.,
2000 e CBE, 2011).

53

Figura 3.18 Estgios de formao de biofilme em superfcies
Fonte: CBE, 2011

Os biofilmes podem ser formados por bactrias de uma nica espcie, porm, mais
freqentemente, consistem de muitas espcies, assim como tambm de fungos,
algas, protozorios, detritos e produtos de corroso. Essencialmente, biofilmes
podem se formar em qualquer superfcie exposta a bactrias e um pouco de
umidade. O comportamento dos biofilmes bacterianos muito mais complexo que o
das clulas em suspenso, pois as bactrias que vivem no biofilme apresentam
inter-relaes de dependncia muito mais fortes do que as que vivem em
suspenso. Dentro dessas comunidades, aparentemente cada clula tem uma
funo diferente; enquanto algumas clulas utilizam a energia disponvel para
acionar rotas metablicas que degradam compostos orgnicos, outras clulas
adjacentes, da mesma populao, utilizam os produtos degradados para produzir
novas clulas que so adicionadas ao ambiente (Maier et al., 2000; CBE, 2011).

3.3.2 Metabolizao de derivados do petrleo por microrganismos
A estrutura qumica dos poluentes orgnicos tem uma profunda influncia na
habilidade dos microrganismos metabolizarem estas molculas, especialmente com
54

respeito s taxas e extenso da biodegradao. Alguns compostos orgnicos so
rapidamente biodegradados enquanto outros so recalcitrantes, sendo os
hidrocarbonetos com baixo a mdio peso molecular e alcois exemplos de
compostos facilmente biodegradveis, enquanto os hidrocarbonetos policclicos
aromticos tendem a ser resistentes biodegradao (Alexander, 1994). Contudo,
vrios autores (Wiedemeier et al., 1999; Cerniglia e Heitkamp, 1989) demonstraram
que os hidrocarbonetos de anis aromticos fundidos, como os HPA, podem ser
metabolizados por bactrias, algas e fungos. Conforme se pode observar na
sequncia da Figura 3.19 Figura 3.24, estudos no somente provaram tal
degradao com identificaram as rotas metablicas dos principais HPA para
diferentes microorganismos.

Naftaleno
(+) cis 1,2 Diidroxi 1,2 diidronaftaleno
1,2 Diidroxinaftaleno
Cis o hidroxibenzal acido pirvico
Aldedo Saliclico
Acido Saliclico
Catecol
Caminho Orto Caminho Meta
Caminhos de fisso do Anel

Figura 3.19 Rota metablica da degradao bacteriana do naftaleno
Fonte: Cerniglia e Heitkamp, 1989
55

Naftaleno
Oxi-1,2-naftaleno
1-naftol (95%) trans 1,2 Diidroxi 1,2 diidronaftaleno
4-hidroxi-1-tetralona

Figura 3.20 Rota metablica da degradao por fungos do naftaleno

56

Antraceno
cis 1,2 Diidroxi 1,2 diidroantraceno
1,2 Diidroxiantraceno
cis-4-(2`-hidroxinaftaleno-3-yl)-2-oxobut-3acido enico
2-hidroxi-3-acido naftenico
2,3-diidroxinaftaleno
cido saliclico
catecol
Bactria Fungo
1,2 xido de antraceno
cis 1,2 Diidroxi 1,2
diidroantraceno
1-antrol
1-sulfato antril

Figura 3.21 Rotas metablicas da degradao de antraceno por fungos e bactrias

57

Fenantreno
diidrofenantreno
diidrofenantreno
1-hidroxi-2-acido naftico
3,4 diidroxifenantreno
1,2 diidroxinaftaleno
Cis o hidroxibenzal acido pirvico
Aldedo Saliclico
Acido Saliclico
Catecol
2-carboxibenzaldeido
2-carboxibenzaldeido
Acido o-ftlico
Caminhos de fisso do Anel

Figura 3.22 Rotas metablicas da degradao bacteriana do fenantreno

58

Fenantreno
(1,2 xido de Fenantreno) (9,10 xido de Fenantreno) (3,4 xido de Fenantreno)
1-Hidroxifenantreno
Glucosdio
Trans 1,2-Diidrodiol de
Fenantreno
Fenant reno
Fenantreno

Figura 3.23 Rotas metablicas da degradao do fenantreno por fungos

BP-Diol 2-Epxido (Anti)
BP-Diol 2-Epxido (Anti)
BP-Diol 1-Epxido (Sin)
Trans BP-7,8-Diidrodiol
(9,10-Epxido)
9-OH-BP
(7,8-Epxido)
(2,3-Epxido)
Benzo(a)pireno (BP)
(6-Fenxi Radical)
(6-OH-BP)
BP-1,6-Quinona BP-3,6-Quinona

Figura 3.24 Rotas metablicas da degradao do Benzo(a)pireno por fungos
59

A comunidade microbiana envolvida na degradao de compostos xenobiticos
pode ser dividida em microrganismos primrios e secundrios. Os primrios so
aqueles capazes de metabolizar o substrato principal fornecido ao sistema, enquanto
os secundrios no utilizam o substrato principal, mas os produtos liberados pelos
microrganismos primrios. A comunidade cientifica em geral aceita que nenhuma
espcie de microorganismo degrada completamente nenhum leo em particular
(Colwell e Walker,1977; Crapez et al., 2002).
As rotas metablicas apresentadas ocorrem na presena dos mltiplos aceptores
finais de eltrons, sendo que os microorganismos usam o aceptor
termodinamicamente mais favorvel at que este tenha sua concentrao ou
disponibilidade reduzida e permita que outros sejam utilizados seqencialmente, em
ordem de preferncia. Comumente, a ordem de preferncia : O
2
> NO
3
-
> MnO
2
>
FeOOH > SO
4
-2
> CO
2
, conforme ilustra a Figura 3.25 (Christensen et al., 2000).

Aerbia
Anaerbia

Figura 3.25 Potenciais de oxirreduo dos principais aceptores finais de eltrons
Fonte: Modificada de Stumm e Morgan, 1981

60

O processo de metabolizao de compostos orgnicos que utiliza o oxignio como
receptor final de eltrons chamado de respirao aerbia e origina, como produtos,
o dixido de carbono, a gua e a biomassa celular (Chapelle, 1993). Tipicamente, o
leo diesel e outros hidrocarbonetos de petrleo so biodegradados (catabolizados)
mais rapidamente em condies aerbias do que anaerbias (Parker e Burgos,
1999; Moller et al. , 1996; Stout e Lundergard, 1998; Widrig e Manning, 1995).
Alm de um aceptor de eltrons, os microorganismos necessitam de nutrientes para
formar as estruturas moleculares necessrias ao seu crescimento. Os nutrientes
necessrios so divididos em dois grupos: os macro nutrientes, que so o nitrognio
(N) e o fsforo (P), e os micronutrientes, K (potssio), Ca (clcio), Mg (mangans), S
(enxofre), Mn (magnsio), Fe (ferro), Cu (Cobre) e Zn (Zinco).
O processo de crescimento microbiano em um ambiente com recursos limitados
tipicamente descrito pela curva de crescimento apresentada na Figura 3.26, com a
ressalva de que o tempo de ocorrncia de cada fase varia significativamente com o
ambiente e o tipo de microorganismo.

Fase Lag
Fase de
Crecimento
Logartmico
Fase Estacionria
Fase de Declnio
Tempo (horas)
N
u
m
e
r
o

d
e

C
l
u
l
a
s

(
l
o
g
)

Figura 3.26 Curva caracterstica do crescimento microbiano em sistemas fechados
Fonte: Modificado de UNB, 2010

Os modelos cinticos de crescimento celular, iniciados por Monod em 1942,
descrevem de que forma a taxa de crescimento celular se relaciona com a
61

concentrao dos substratos (fontes de carbono) ou possveis inibidores (compostos
txicos biota). Os modelos comumente usados para descrever o crescimento
celular provenientes da degradao de compostos orgnicos so os desenvolvidos
por Monod e Andrews Haldane, apresentados na Figura 3.27, sendo que Monod
descreve a degradao de um substrato no inibidor e Haldane de um substrato
inibidor. No caso dos hidrocarbonetos, ambos os modelos podem ocorrer,
dependendo do meio em que se estuda e das concentraes aplicadas.

Concentrao de Substrato
T
a
x
a

d
e

C
r
e
s
c
i
m
e
n
t
o

C
e
l
u
l
a
r
max
max
S S
Haldane
Monod

Figura 3.27 Taxa de crescimento celular ( ) em funo da concentrao de substrato (C):
Modelos de Monod e Haldane
Fonte: Modificado de Costa (S.D.)

Outros modelos cinticos de crescimento celular tm sido desenvolvidos, os quais
podem ser classificados em dois grupos, os que descrevem o crescimento celular
em um nico substrato, como o caso dos modelos de Monod e Haldane, e os que
descrevem o crescimento em mltiplos substratos, consideravelmente mais
complexos do que os primeiros, podendo chegar a dezenas de variveis. A Tabela
3.7 e a Tabela 3.8 apresentam os modelos existentes para descrever os processos
com um ou mltiplos substratos, respectivamente.

62

Tabela 3.7 Modelos cinticos para nico substrato

x = biomassa, = taxa de crescimento celular,
mx
= taxa especfica de crescimento,
K
s
= constante de saturao, S = concentrao de substrato, K
i
= constante de inibio
Fonte: Trigueiro, 2008

63

Tabela 3.8 Modelos cinticos de mltiplos substratos

x = biomassa, = taxa de crescimento celular,
mx
= taxa especfica de crescimento,
K
s
= constante de saturao, S = concentrao de substrato, K
i
= constante de inibio
Fonte: Trigueiro, 2008

3.3.3 Avaliao da biodegradao
A avaliao da biodegradao de poluentes orgnicos txicos existentes num
determinado solo pode ser realizada por algumas tcnicas de laboratrio e em
campo.
A tcnica de laboratrio mais difundida e utilizada para determinar a biodegradao
aerbia em um solo a respirometria, a qual consiste na avaliao da produo de
CO
2
ou de consumo de O
2
em um ambiente fechado. Uma das principais limitaes
desta tcnica refere-se impossibilidade de avaliar a biodegradao de compostos
64

especficos, principalmente em contaminaes que envolvem misturas de
compostos, como o caso do leo diesel; porm, ela permite avaliar o comportamento
microbiolgico de forma global com um teste relativamente simples e barato. Para
determinar a evoluo da concentrao de cada composto de interesse
separadamente, utiliza-se o biorreator, o qual normalmente apresenta um volume de
solo maior do que o da respirometria, permitindo que ao longo do tempo sejam
coletadas amostras de solo e/ou gua suficientes para analisar cada composto.
Analogamente ao teste com o biorreator, o monitoramento da concentrao no solo
in situ ao longo do tempo, desconsiderando as perdas por processos fsico-quimicos,
tambm permite a determinao da taxa de biodegradao. No entanto, um
mtodo pouco prtico para avaliaes preliminares ou investigaes de diferentes
condies.
Pode-se tambm avaliar o potencial de biodegradao de um solo devido
presena de microorganismos heterotrficos pela contagem de Unidades
Formadoras de Colnias (UFC), tcnica amplamente utilizada em saneamento, mas
que apresenta grandes limitaes na avaliao de poluentes txicos, uma vez que o
substrato utilizado no crescimento no equivale ao contaminante, ocasionando
grande variao de comportamento entre os resultados de ensaios e de campo.
Outra forma de avaliao a medio da concentrao de desidrogenases, que so
enzimas que catalisam o processo de oxidao da matria orgnica atravs da
transferncia do hidrognio desta para o aceptor final de eltrons (Paul e Clark,
1989). No entanto, a desidrogenase pode estar reagindo rapidamente com a matria
orgnica o que impede seu acumulo, no havendo assim correspondncia entre sua
concentrao no meio e a real capacidade de biodegradao do solo.
Para alguns contaminantes j conhecidos, possvel avaliar a biodegradao que
ocorre na rea contaminada a partir da determinao da concentrao dos
compostos intermedirios de degradao, comparando-se suas concentraes s do
composto original. Esta tcnica uma forma grosseira de avaliao, pois o processo
de degradao de grande parte dos compostos ocorre rapidamente, no ocorrendo
grande acmulo de compostos intermedirios.
Pode-se ainda primariamente avaliar a evoluo da degradao pela comparao
entre a relao de certos compostos na mistura original de hidrocarbonetos e as
65

observadas no solo contaminado. No caso dos hidrocarbonetos, os alcanos
ramificados e isoprenides so degradados mais lentamente do que os alcanos
lineares, ou seja, a relao entre alcanos ramificados e lineares tende a aumentar ao
longo da biodegradao (Wang, 1994; Prichard e Costa, 1991; Kennicutt, 1988).
Mais recentemente, a biodegradao vem sendo estimada atravs de tcnicas
biomoleculares como o TFLP (Terminal Fragment Length Polymorphism), o DGGE
(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis), o PCR (Polymerase Chain Reaction) e o
QPCR, que so capazes de realizar uma anlise quantitativa de espcies
bacterianas. O fato de apenas aproximadamente 1% das bactrias serem cultivveis
(Amann et al., 1995) e a forma indireta de avaliao da biomassa pelas tcnicas
tradicionais (desidrogenase, respirometria e biorreator) representavam uma limitao
na determinao do comportamento microbiano, a qual vem sendo superada com a
aplicao das tcnicas biomoleculares, que extraem diretamente o material gentico
existente no meio. As tcnicas biomoleculares permitem avaliar as variaes na
ecologia microbiana e quantificar a biomassa em numero de clulas de um
determinado tipo de bactrias, o que permite determinar a presena e a quantidade
de biota capaz de degradar certo grupo de compostos com uma amostra de uma
rea contaminada. No entanto, estas tcnicas ainda so caras e pouco difundidas.
Uma das preocupaes levantadas por vrios estudos in vitro tem sido a possvel
produo de certos intermedirios da degradao dos HPA, particularmente di-
hidrodiis, os quais so mais txicos do que o composto original (Cerniglia, 1984).
No entanto, estudos da degradao de HPA em sedimentos sugerem que estes
compostos no acumulam no ambiente, pois so rapidamente transformados em
outros compostos (Herbes e Schwall, 1978).
Em uma reviso sobre estudos ecolgicos de bactrias que degradam
hidrocarbonetos, Rosenberg e Gutnick (1981) verificaram que microrganismos
capazes de degradar hidrocarbonetos esto potencialmente localizados em todas as
reas naturais, embora apresentem grandes variaes em suas concentraes
celulares, sendo que esta populao aumenta aps a adio do substrato
(hidrocarboneto) no solo (Pinholt et al., 1979). Assim, a proporo de
microrganismos hidrocarbonoclsticos dentro da comunidade microbiana depende
do grau de exposio do ambiente ao poluente. De acordo com Riser-Roberts
(1992), em ecossistemas no poludos estes microrganismos constituem menos de
66

1% da comunidade microbiana e em ecossistemas poludos podem chegar a
constituir 100% da comunidade.
Estudos com bactrias reconhecidamente degradadoras de HPA em solos naturais
mostraram que os consrcios de bactrias naturais do solo so mais eficazes na
remoo de HPA do que bactrias isoladas, possivelmente devido existncia de
uma grande gama de espcies que metabolizam os subprodutos da degradao dos
HPA, evitando seu acmulo e conseqentemente a inibio por toxicidade aos
metabolitos (Mueller et al.,1989; Wiesel et al., 1993).
A evoluo no tempo da degradao de um substrato pode ser descrita por uma
equao exponencial de primeira, segunda ou subseqentes ordens, sendo que a de
primeira ordem que mais se aplica para hidrocarbonetos do petrleo. A equao
de primeira ordem comumente utilizada descrita por:

Equao 8
Sendo:
= Concentrao do contaminante
= Concentrao inicial do contaminante
= Taxa especifica de biodegradao
= Tempo

Geralmente, as taxas de primeira ordem so expressas em termos de meia vida (t
1/2
)
do composto, a qual definida como o tempo necessrio para reduzir a
concentrao inicial a 50%:

Equao 9

O modelo de decaimento de primeira ordem (Equao 8) adota a hiptese de que a
taxa de biodegradao do soluto (variao da concentrao no tempo)
67

proporcional sua concentrao. Ou seja, um aumento na concentrao provoca
aumento na taxa de degradao, o que no obrigatoriamente verdade, porm tal
extrapolao tem sido aceita e esse modelo geralmente usado para determinar a
taxa de biodegradao de hidrocarbonetos dissolvidos na gua subterrnea
(Mazzuco, 2004).
Muitos estudos consideram que os microorganismos apenas conseguem absorver
os compostos (substrato) dissolvidos (Alvarez-Cohen et al., 1993; Ogram et al.,
1985; Rijnaarts et al., 1990; Scow e Alexander, 1992), entretanto outros mostram
que compostos adsorvidos e em fase separada (livre e/ou residual) esto at certo
ponto disponveis para os microorganismos sem a necessidade de dissoluo
(Gordon e Millero, 1985; Guerin e Boyd, 1992; Hermannson e Marshall, 1985).
Apesar disso, mesmo quando os compostos adsorvidos e em fase separada esto
disponveis para a absoro direta, eles so menos biodisponiveis do que os
compostos dissolvidos (Gordon e Millero, 1985; Bury e Miller, 1993; Hommel, 1990),
ou seja, a dessoro e a dissoluo representam processos essenciais na
biodegradao de substratos inicialmente adsorvidos e em fase separada.

3.4 Lavagem de Solos com Surfactantes e Biorremediao
De acordo com Beck e Jones (1995), Erickson et al. (1993), Luthy et al. (1994),
Weissenfels et al. (1992) e Wrdemann et al. (1995), o principal fator limitante da
biodegradao em solos contaminados com compostos hidrofbicos geralmente a
taxa de transferncia dos compostos sorvidos no solo e em fase separada para a
fase aquosa. Assim, a insero de surfactante num solo contaminado com
hidrocarbonetos pode aumentar a taxa de biodegradao atravs do aumento do
processo de dissoluo e possivelmente de dessoro. Outra forma pela qual os
surfactantes podem aumentar a taxa de biodegradao atravs da disperso de
glbulos de fase separada, aumentando assim a superfcie disponvel para a
dissoluo e absoro direta pelos microrganismos.
Devido grande utilizao de surfactantes na produo de detergentes, sua
toxicidade em microorganismos foi amplamente estudada, sendo que os dois
principais efeitos txicos observados foram: (i) ruptura da membrana celular atravs
68

da interao com componentes lipdicos e (ii) reao com enzimas fundamentais
para o funcionamento das clulas (Helenius e Simons, 1975). Em solos a inibio
pode ocorrer tambm pelo desprendimento das bactrias ssseis, aderidas ao solo.
Este desprendimento pode ser explicado por trs mecanismos: (i) pela alterao da
carga superficial das bactrias (ii) pela preveno da floculao e (iii) pela dissoluo
dos polmeros extracelulares responsveis pela formao do biofilme (Marchesi et
al., 1991; Jackson et al., 1994). Como a aderncia dos microorganismos pode alterar
o meio e sua prpria atividade, este efeito dos surfactantes pode ser importante no
processo de remediao, especialmente na biorremediao in situ, que tem a
distribuio da capacidade de degradao como um fator crucial.
Em condies de pH 7 ou superior, os surfactantes catinicos apresentam maior
toxicidade, enquanto que em ambientes cidos os aninicos apresentam maior
toxicidade. No entanto, independentemente do pH do meio, os surfactantes no
inicos so menos txicos do que os inicos (Volkering, 1998). De acordo com Laha
e Luthy (1991 e 1992), Roch e Alexander (1995) e Tsomides et al. (1995),
surfactantes em concentraes superiores CMC promovem inibio em
microorganismos degradadores de hidrocarbonetos hidrofbicos, o que at hoje no
totalmente explicado.
A biodegradabilidade dos surfactantes pode representar fatores positivos e
negativos. Os negativos so principalmente a possvel preferncia dos
microorganismos na degradao do surfactante em relao aos hidrocarbonetos, o
que promoveria uma reduo na disponibilidade de aceptores finais de eltron e de
nutrientes, e a possvel toxicidade de subprodutos de degradao dos surfactantes
(Holt et al., 1992; Tiehm, 1994), enquanto que os positivos consistem na remoo do
surfactante do meio, evitando impactos ambientais posteriores remediao. Outra
condio positiva a degradao do surfactante como substrato primrio, enquanto
os hidrocarbonetos so degradados cometabolicamente (Lee et al., 1995).
Diversos estudos relacionados lavagem e biorremediao de solo contaminado
com compostos orgnicos atravs da utilizao de surfactantes vm sendo
realizados ao longo dos ltimos 20 anos.
Os estudos sobre lavagem com surfactantes tiveram sua origem na recuperao de
petrleo em jazidas em fase final de explorao. Na dcada de 80 iniciaram-se os
69

estudos aplicados remediao de solo contaminado (Ellis et al., 1985; Nash et al.,
1987; Dworkin et al., 1988; Vigon e Rubin, 1989; Wilson, 1989). Durante a dcada de
90 a continuidade dos trabalhos de pesquisa e a realizao de diversos estudos em
campo demonstraram a efetividade do uso da lavagem com surfactante na
remediao de solo contaminado com compostos orgnicos hidrofbicos,
especialmente aqueles com significativa percentagem de saturao de fase
separada (Abdul et al., 1990; Ang e Abdul, 1991; Wilson e Clarke, 1991; West, 1992;
Black et al., 1992; Abriola et al., 1993
1
; Abriola et al., 1993
2
; Clarke et al., 1993).
Concomitantemente, iniciaram-se os estudos sobre a influncia do surfactante no
aumento da biodisponibilidade de compostos orgnicos hidrofbicos presentes em
solos contaminados (Wilson, 1985; Dworkin et al., 1988; Oberbremer et al., 1990;
Aronstein et al., 1991; Zang e Miller, 1992; Edwards, 1992; West, 1992; Bury e Miller,
1993; Rasiah e Voroney,1993; Ducreux, 1993 e 1995).
Diferentemente das pesquisas relativas lavagem, que consolidaram esta tcnica
como efetiva e mundialmente difundida, os estudos com surfactantes encontraram
resultados muitas vezes conflitantes, variando entre a estimulao da biodegradao
(Deschenes et al., 1995; Thibault et al., 1996; Aronstein et al., 1991; Aronstein et al.,
1992; Jain et al., 1992; Margesin, 1999; Tiehm, 1994) e sua inibio (Laha e Luthy,
1991 e 1992; Roch e Alexander, 1995; Rouse et al., 1994; Tsomides, 1995).
No intuito de evitar a toxicidade dos surfactantes sintticos, alguns pesquisadores
(Zang e Miller, 1992) utilizaram biossurfactantes e obtiveram resultados positivos,
porm sua aplicao em grande escala ainda bastante limitada economicamente.
Em 1991, Aronstein et al. conduziram um estudo que investigou a dessoro e a
mineralizao (biodegradao) de fenantreno e bifenil por meio da aplicao de dois
surfactantes (Alfonic 810-60 e Novel II 1412-56) em dois solos, um
predominantemente mineral (Lima) e outro orgnico (Edwards). Os contaminantes
foram estudados independentemente. As concentraes iniciais de fenantreno e
bifenil no solo eram de 1 g/g.
Nos ensaios de dessoro, os solos foram esterilizados e as concentraes de
surfactantes aplicadas foram 0,01, 0,1, 1, 10 e 100 g/mL. Apenas o fenantreno no
solo predominantemente mineral apresentou aumento da dessoro, para ambos os
70

surfactantes em suas mximas concentraes (Figura 3.28). No ocorreu aumento
na dessoro do bifenil nos dois solos e do fenantreno no solo orgnico.

Figura 3.28 Efeito da concentrao de Alfonic 810-60 (A) e Novel II 1412-56 (B) na dessoro
do fenantreno em um solo predominantemente mineral (Lima)
Fonte: Aronstein et al., 1991

Os solos no foram esterilizados nos ensaios de mineralizao, a qual foi aferida
pela tcnica de respirometria. As concentraes de surfactantes aplicadas foram 1,
10 e 100 g/ml. Para o fenantreno, a concentrao intermediria de surfactante (10
g/ml) promoveu um aumento significativo da biodegradao para ambos os solos e
surfactantes testados, enquanto que a adio de uma concentrao superior dos
surfactantes causou inibio da mineralizao para o solo mineral com ambos os
surfactantes aplicados (Figura 3.29 e Figura 3.30).
71

Figura 3.29 Efeito da concentrao de Alfonic 810-60 na mineralizao de fenantreno nos
dois solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico)

Figura 3.30 Efeito da concentrao de Novel II 1412-56 na mineralizao de fenantreno nos
dois solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico)
72

Nos testes com bifenil o estimulo biodegradao foi bem menos acentuado do que
o observado com o fenantreno (Figura 3.31 e Figura 3.32).

Figura 3.31 - Efeito da concentrao de Alfonic 810-60 na mineralizao de bifenil nos dois
solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico)

Figura 3.32 - Efeito da concentrao de Novel II 1412-56 na mineralizao de bifenil nos dois
solos (Lima/Mineral e Edwards/Orgnico)
73

Dos resultados obtidos concluiu-se que o estmulo biodegradao no depende do
aumento da dessoro e que o aumento tanto da dessoro quanto da biodegrao
dependem do tipo de contaminante, de solo e de surfactante (Aronstein et al., 1991).
Deschenes et al. (1995) investigaram a dessoro e a biorremediao de um solo
contaminado com creosoto proveniente de uma planta de tratamento de madeira
aps a adio de LSS ou SDS em concentraes abaixo e acima da CMC. Alinhado
a pesquisas que demonstraram maior capacidade de degradao dos consrcios
microbianos naturalmente adaptados, este estudo utilizou um solo contaminado in
situ.
Apesar de o creosoto apresentar dezenas de compostos orgnicos, apenas os HPA
foram avaliados. A dessoro dos HPA aumentou com a concentrao de LSS
(Tabela 3.9), porm a degradao diminuiu com a presena do surfactante em
relao degradao natural.

Tabela 3.9 Concentrao (ug/L) de HPA de alto peso molecular na gua aps a lavagem com
LSS

Fonte: Deschenes et al., 1995

74

Figura 3.33 Concentraes de HPA no solo contaminado no instante inicial e aps duas
semanas de tratamento com e sem adio de LSS

A inibio observada aparentemente no se deve toxidade advinda diretamente do
surfactante, uma vez que o mesmo apresentou razovel degradao (Figura 3.34),
mas sim da alta dissoluo de compostos txicos (Deschenes et al., 2009).

75

Figura 3.34 Degradao do LSS no solo contaminado

Alm dos HPA, o creosoto contm outros compostos que conhecidamente so mais
txicos aos microorganismos do que os HPA, como por exemplo o carbazole. Com
isso, entende-se que a escolha de um solo contaminado com creosoto para
investigar o efeito da aplicao de um surfactante na biorremediao de HPA no
a mais acertada, pois a dissoluo do carbazole pode estar provocando a toxicidade
observada.
Bramwell e Laha, em 2000, estudaram a influencia da adio de 4 diferentes
surfactantes (Tween 20, TTAB, LSS e Citrikleen) na solubilizao e na
biodegradao de fenantreno existente em um sistema solo-gua e em um sistema
somente aquoso, ambos com inoculao de Pseudomonas aeruginosa, espcie
conhecidamente capaz de degradar fenantreno. Foram adicionadas concentraes
de surfactantes que variaram de muito baixa (<0,001%) at muito alta (>>CMC). Os
resultados demonstraram que apenas em concentraes muito baixas houve um
pequeno aumento na mineralizao do fenantreno e em concentraes altas houve
inibio da biodegradao. Aps investigar a toxicidade dos surfactantes e verificar
que os mesmos no apresentam suficiente toxicidade para tal inibio, os autores
sugerem que o fator de inibio foi o aumento da concentrao de fenantreno na
gua, solubilizado pelo surfactante.
76

Margesin e Schinner (1999) avaliaram a biodegradao de leo diesel em um solo
natural temperatura de 10C e em um sistema aquos o com e sem a adio de LSS
ou SDS a concentraes abaixo da CMC. No solo a biodegradao apresentou-se
mais efetiva sem a adio de LSS, sendo progressivamente inibida com
concentraes maiores de LSS (Figura 3.35).

Figura 3.35 Efeito do LSS na degradao de hidrocarbonetos no solo.
Fonte: Margesin, 1999

Adicionalmente foi investigada a biodegradao do surfactante LSS ao longo do
tempo e verificou-se que em aproximadamente 15 dias todo o surfactante foi
consumido (Figura 3.36).
Neste estudo no foi apresentado um motivo claro para a inibio da biodegradao
dos hidrocarbonetos, porm a rpida degradao do surfactante sugere que o
mesmo no apresenta toxicidade, podendo a inibio ter ocorrido pela dissoluo de
compostos mais txicos do leo diesel, ou at mesmo por substituio de substrato.
Neste ltimo caso, a biota degrada preferencialmente o substrato mais acessvel,
reduzindo a degradao do substrato mais difcil.

77

Figura 3.36 - Biodegrao do LSS no solo
Fonte: Margesin, 1999

A remediao de solo contaminado por PCB (Polychloride Biphenyl) atravs da
lavagem seguida de biorremediao por Pseudomonas sp. LB400 foi investigada por
Billingsley et al. (2002). Investigou-se a solubilizao de PCB atravs da lavagem
com agitao (shaker) aplicando-se 8 surfactantes diferentes, inclusive o LSS.
Posteriormente solubilizao, a soluo de PCB foi submetida a um perodo de
incubao de 48h. Os surfactantes no inicos apresentaram maior capacidade de
solubilizar o PCB do que os aninicos, enquanto os aninicos estimularam mais a
biodegradao do PCB do que os no inicos (Tabela 3.10).

Tabela 3.10 Eficincia de remoo e biodegradao de PCB

Fonte: Billingsley, 2002
78

Ressalta-se que o surfactante que apresentou maior porcentagem de remoo por
biorremediao foi o LSS, sendo sua remoo mais acentuada nas primeiras horas
de incubao.
De acordo com Tiehm et al. (1997), a insero de surfactante num sistema de
recirculao em coluna proporcionou um aumento significativo na remoo de HPA
via solubilizao seguida de biodegradao (Figura 3.37).

Figura 3.37 Concentrao de HPA de baixo peso molecular (A) e de alto peso molecular (B)
em fase aquosa durante a percolao de 2 x 2,5 mM de Sapogenat T-300.
Fonte: Tiehm et al., 1997

79

O surfactante foi introduzido no sistema aps 200 horas de recirculao e provocou
a solubilizao dos HPA. Disponibilizados na fase aquosa, os HPAs passaram a ser
degradados e consequentemente sua concentrao diminuiu.
Ao trmino da recirculao o solo foi analisado e o resultado da influncia da
insero de surfactantes no meio claramente demonstrou sua eficcia na acelerao
da remediao do solo contaminado (Figura 3.38).

Figura 3.38 Comparao do HPA remanescente no solo aps a percolao sem surfactante,
com 5 mM de Akopal N-300 e 2 x 2,5 mM de Sapogenat T-300.
Fonte: Tiehm, 1997

Cho e Kim (2002) avaliaram a influncia da variao de tipo de surfactante, de
velocidade de fluxo, de porosidade do solo e da concentrao do surfactante
aplicado na remoo de leo lubrificante de motor de um solo contaminado. A
saturao inicial dos poros com leo lubrificante foi de 100%.
Os ensaios realizados em colunas de solo compactados demonstraram que, quanto
maior a velocidade e a concentrao de surfactante e menor a porosidade do solo,
maior a remoo de leo (Figura 3.39).

80

Figura 3.39 Saturao residual de leo lubrificante em lavagens com diferentes
concentraes de surfactante, velocidade de fluxo e porosidade para (A) SDS e (B) Tween 80.
Fonte: Cho, 2002

Este resultado permitiu aos autores estabelecer um modelo cintico de lavagem;
porm, atenta-se para o fato de que as fraes de saturao de LNAPL so
elevadas, em nvel de fase livre e no fase residual.
Estudos similares com saturao residual de leo inicial de 25% demonstraram
exatamente o contrrio em relao velocidade de fluxo.
Duffield e Campanelli (2003) investigaram a lavagem de um solo com diferentes
concentraes de surfactante LSS (0; 0,5; 1 e 2 CMC) com duas vazes diferentes
(5 e 50 mL/min) e com saturao inicial de NAPL aproximadamente de 25%. Os
resultados demonstraram uma tendncia clara de aumento da remoo com o uso
81

de solues de surfactante para a lavagem com vazo de 50 mL/min (Figura 3.40-
B), mas no para a vazo de 5 mL/min (Figura 3.40-A).

Figura 3.40 leo mineral removido na lavagem com varias concentraes de surfactante com
vazo de (A) 5 mL/min. e (B) 50 mL/min.
Fonte: Duffield e Campanelli, 2003

Apesar de o acrscimo na concentrao de surfactante ter demonstrado influncia
na remoo somente com vazo de 50 mL/min, a lavagem com vazo menor
(5mL/min) apresentou maior capacidade de remoo, mesmo sem a adio de
82

surfactante, o que explicado pelo maior tempo de contato e consequente
solubilizao do NAPL na vazo menor.
Shin e Kim (2003) estudaram a lavagem de um solo contaminado com leo diesel
com dois biosurfactantes (Rhamnolipid e Tween 80) em duas concentraes e duas
vazes de lavagem distintas (2 e 5 mL/min). Ao longo do estudo foram avaliadas as
concentraes de leo diesel e de fenantreno. Os resultados do estudo se
assemelham aos obtidos por Duffield e Camapanelli (2003), pois o principal fator que
influenciou a remoo foi a velocidade de lavagem, sendo removido mais
contaminante com a menor velocidade aplicada (Figura 3.41).

Figura 3.41 Concentrao de fenantreno na gua efluente da lavagem e eficincia de
remoo em funo da vazo de lavagem (concentrao de Rhamnolipid = 0,5% (w/v))
Fonte: Shin, 2003

A variao de concentrao de surfactante (0,3 e 0,5%) no demonstrou influncia
na remoo dos contaminantes enquanto o tipo de surfactante apresentou influncia
significativa, sendo o Rhamnolipid o que apresentou melhor remoo dos
contaminantes (Figura 3.42).

83

Figura 3.42 - Concentrao de fenantreno na gua efluente da lavagem e eficincia de remoo
em funo do tipo de surfactante (concentrao de surfactante = 0,5 % (w/v) e vazo = 2
mL/min).
Fonte: Shin, 2003

A grande influncia da vazo de fluxo na remoo obtida na lavagem demonstra que
estudos de bancada podem apresentar resultados significativamente diferentes dos
verificados em campo. Ressalta-se que em campo, normalmente, os fluxos so
menores do que os ensaiados em testes de coluna, o que pode representar
resultados melhores em campo do que em testes de coluna para condies de
saturao menores (<25%) ou piores em condies de saturao maiores (~100%).
A Tabela 3.11 apresenta um resumo das caractersticas principais dos estudos
acima apresentados.

84

Tabela 3.11 Resumo dos estudos descritos na reviso bibliogrfica
Publicao Estudo Pesquisadores
Metodo de
lavagem
Se em coluna,
amostra
indeformada ou
compactada?
Se emcoluna,
quantos poros totais?
Se em coluna, qual o
grau de saturao de
fase separada?
Anlises durante ou
s no final da
lavagem?
Contaminado
artificialmente ou
contaminao j
existente?
Contaminante
nico ou
multiplo?
Qual (is)
contaminante
(s)?
Biossurfactante ou
surfactante
sinttico?
Concentrao do
surfactante abaixo ou
acima da CMC?
Metodo de
medio da
biodegradao?
Condies biologicas do
estudo (introduo de cultura
especifica/solo
esterelizado/solo natural - no
contaminado/solo com biota
adaptada degradao)
Foram dadas
condies de
N e P para o
crescento
microbiano?
Consequencia da
Lavagem com
surfactante na
remoo
Obserevaes
Consequencia na
degrao como uso
do surfactante?
Observaes
Environmental
Geochemistry and Health,
Outubro de 2003
A biosurfactant-enhanced soil
flushing for the removal
of phenanthrene and diesel in
sand
Kyung-Hee Shin & Kyoung-
Woong Kim
Coluna Solo Compactado 20 - 25 poros totais
~10% de saturao de
fase separada
(considerando a
densidade total do solo
a 1,7 g/cm)
Anlises durante a
lavagem
Solo Contaminado
artificialmente
nico e Multiplos
contaminantes
NAPL (Diesel) /
fenantreno
Biossurfactante
(Rhamnolipd) /
Surfactante
sinttico (Tween
80)
Acima da CMC (100 x) X X X
Aumento da
remoo
Maior remoo quanto
menor foi a vazo
X X
Water, Air, and Soil
Pollution, 2003
Surfactant enhanced mobilization
of mineral oil within porous
media
A. R. Duffield, R. S.
Ramamurthy & J. R.
Campanelli
Lavagem em
Coluna
Solo Compactado 2 poros totais
25% de saturao de
fase separada
Anlises durante a
lavagem
Solo Contaminado
artificialmente
Contaminante
nico
NAPL (leo
mineral "branco")
Surfactante
sinttico (Triton X-
100)
Abaixo e acima da
CMC
X X X Inconclusivo
Maior remoo com
vazo menor
X X
Korean J. Chem. Eng,
2002
Kinetics of in situ Surfactant Soil
Flushing at Moderate Washing
Conditions
Daechul Cho and Hyun-
Su Kim
Lavagem em
Coluna
Solo Compactado 2 poros totais
100% de saturao de
fase separada
Anlises durante a
lavagem
Solo Contaminado
artificialmente
Contaminante
nico
NAPL ()
Surfactante
sinttico (LSS ou
SDS e Tween 80)
Abaixo e acima da
CMC
X X X
Aumento da
remoo
Maior remoo quanto
maior foi a vazo
X X
Enviromental Sciency
Technology, 1997
Surfactant-Enhanced Mobilization
and Biodegradation of Polycyclic
Aromatic Hydrocarbons in
Manufactured Gas Plant Soil
Andreas Tiehm, Michaels
Tieber Peterwerner e Fritz
H . Frimmel
Lavagem em
coluna
Solo Compactado ~500 poros totais No Apresentado
Anlises durante a
lavagem
Contaminao j
existente no solo
Multiplos
contaminantes
PAH
Surfactante
sinttico
Acima da CMC Anlises quimicas
Introduo de cultura
especifica
No
Aumento da
remoo
X
Aumento da
biodegradao para
todos PAHs
Os PAHs de menor peso
molecular apresentaram
maior biodegradao.
Biotechnology Letters,
2002
Remediation of PCBs in soil by
surfactant washing and
biodegradation in
the wash by Pseudomonas sp.
LB400
K.A. Billingsley, S.M.
Backus, S. Wilson, A.
Singh &O.P.Ward
Shaker X X X
Anlise apenas no
final da lavagem
Contaminado
artificialmente
Multiplos
contaminantes
PCB
Surfactantes
sintticos (diversos)
Abaixo e acima da
CMC
Anlises quimicas
Introduo de cultura
especifica
No
Aumento da
remoo
Apenas para surfactantes
inicos, os aninicos no
apresentaram aumento
na remoo
Aumento da
biodegradao
Apenas para surfactantes
aninicos, os inicos no
apresentaram estilimulao da
biodegradao.
Environmental Sciency
Technology, 1991
Effect of surfactant at low
concentration on the desorption
and biodegradation of sorbed
aromatic compounds in soil
Boris N. Aronstein,
Yolanda M. Calvillo e
Martin Alexander
Shaker X X X
Anlise apenas no
final da lavagem
Solo Contaminado
artificialmente
Contaminante
nico
Fenantreno e
Bifenil
Surfactante
Sinttico Alfonic
810-60 e Novel I1
1412-56
Abaixo e acima da
CMC
Respirometria
Solo combiota natural mas
no adaptada a contaminao
No
Aumentou
dessoro de
fenantreno e de
Bifenil no
O Aumento da dessoro
foi mais significativo
para concentraes
acima da CMC
Aumento da
biodegradao para o
fenantreno / Variou
entre aumento e
inibio para o bifenil
O aumento da degradao
para o fenantreno veio em
concentraes intermedirias
de surfactante e para o bifenil
emconcentraes altas / Os
resultados da diodegradao
apresentaram significativa
diferena para os dois tipos de
solo testados.
Hydrological Sciences
Journal, 1995
The effect of an anionic surfactant
on the mobilization and
biodegradation
of PAHs in a creosote-
contaminated soil
L. Deschnesa; P.
Lafrancea; J. P.
Villeneuvea; R. Samsonb
Lixiviao X X X
Anlise apenas no
final da lavagem
Contaminao j
existente no solo
Multiplos
contaminantes
Creosoto (PAH)
Surfactante
Sinttico / LSS ou
SDS
Abaixo e acima da
CMC
Anlises quimicas
Solo com biota naturalmente
adaptada a contaminao
Sim
Aumentou a
dessoro
Houve aumento em
concentraes acima da
CMC, observando
aumento diretamente
proporcional ao
aumento de tal
concentrao.
Houve inibio
concentraes altas
de surfactante e no
houve inibio para
baixas concentraes
No avaliou-se o motivo da
inibio, mas provavelmente
ocoreu pela toxicidade de
compostos do creosoto,
dissolvidos pela ao do
surfactante.
Biodegradation, Agosto
de 2000
Effects of surfactant addition on
the biomineralization and
microbial toxicity of
phenanthrene
Debbie-Ann P. Bramwell
& Shonali Laha
X X X X X
Solo Contaminado
Artificialmente
Contaminante
nico
Fenantreno
Surfactantes
Sintticos (Tween
20; LSS ou SDS;
TTAB)
Abaixo e acima da
CMC
Respirometria
Introduo de cultura
especifica
Sim X X
Houve inibio
concentraes
superiores CMC e
no houve nem
inibio nem
estimulo em
concentraes abaixo
da CMC
A inibio observada foi
decorrente da toxicidade do
composto solubilizado e no
do surfactante em si
Chemospher, 1999
Biodegradation of diesel oil by
cold-adapted microorganisms im
presence of sodiumdodecyl
silfate
R. Margesin and F.
Schinner
X X X X X
Solo Contaminado
Artificialmente
Multiplos
contaminantes
leo Diesel
Surfactante
Sinttico (LSS ou
SDS)
Abaixo do CMC Anlises quimicas
Introduo de cultura
especifica na sistema aquoso /
solo natural (no
contaminado)
Sim
(100:10:2)
X X
Houve inibio da
biodegradao
quanto maior foi a
concentrao de
surfactante aplicada.
No houve estudo sobre os
motivos da inibio.
85

4 MATERIAIS E MTODOS
A investigao experimental deste trabalho consistiu na realizao de ensaios de
lavagem, com surfactante (LSS ou SDS), de amostras indeformadas de solo
coletadas em rea contaminada com leo diesel, seguidos de ensaios de
respirometria para avaliar a biodegrao, alm de ensaios de respirometria em
amostras indeformadas no submetidas a ensaios prvios de lavagem. Procurou-se
avaliar o efeito da lavagem na remoo do contaminante (HPA) e sua influncia na
posterior biodegradao. O mtodo utilizado visou simular as condies naturais de
degradao, preservando a biota j desenvolvida no ambiente contaminado.

4.1 Coleta de Amostras em Campo
A coleta das amostras foi planejada para ser realizada em um ponto do terreno
reconhecidamente contaminado por leo diesel, a 1,5 m de profundidade,
correspondente metade da espessura da camada superficial de 3 m de solo
usualmente considerada nas anlises de risco.
Foram coletadas amostras indeformadas para determinao das caractersticas
geotcnicas e para a realizao dos testes de lavagem de solo, e amostras
deformadas para anlise qumica do solo.
Para garantir que as amostras representassem o ponto selecionado, decidiu-se
executar 5 furos de sondagem dentro de uma rea circular de 1 metro de raio,
retirando-se de cada furo 1 amostra deformada e 5 amostras indeformadas de 5 cm
de altura cada, totalizando assim 5 amostras deformadas e 25 amostras
indeformadas.
As amostras de solo foram coletadas em junho de 2009 nos 5 furos de sondagens
(SS-01; 02; 03; 04 e 05) a profundidades que variaram entre 1,7 e 2,0 m, dada a
impossibilidade mecnica de coleta de amostra indeformada na profundidade de 1,5
m devida presena de pedregulhos. O mtodo de sondagem foi o de trado
helicoidal manual de 2 polegadas de dimetro.
86

A coleta de amostras indeformadas foi realizada com o trado para amostragem
indeformada da SONDATERRA@ (Figura 4.1 e Figura 4.2). As amostras foram
coletadas em anis metlicos de 50 mm de dimetro por 53 mm de comprimento
(Figura 4.3). Para garantir vedao e consequente manuteno da umidade e dos
contaminantes, as amostras foram envolvidas com filme plstico, parafina e papel
alumnio. Aps a coleta, todas as amostras foram mantidas em recipiente com gelo
ou refrigerador, para que sua temperatura se mantivesse abaixo dos 4C.
Para a coleta de amostras deformadas foi utilizado um amostrador tubular aberto de
1,00 metro de comprimento e 2 de dimetro com liner descartvel. Assim que
coletado, o solo foi transferido do liner para frascos de vidro com vedao em teflon
e ento transportado para o laboratrio em recipiente trmico resfriado
temperatura mxima de 4C.

Figura 4.1 Trado para amostra indeformada da SONDATERRA
@
87

Figura 4.2 Trado para coleta de amostra indeformada em utilizao

Figura 4.3 Amostra indeformada

4.2 Anlises Preliminares
Logo aps a coleta do solo nos 5 furos de sondagem as amostras deformadas foram
analisadas para parmetros de contaminao e geotcnicos.
88

4.2.1 Contaminao
Logo aps a coleta em campo, as amostras deformadas dos 5 pontos de sondagem
foram submetidas s anlises de HTP Fracionado (USEPA 8260B e 8015C) e HPA
(USEPA 8270D).

4.2.2 Geotcnica
Uma das 5 amostras indeformadas coletadas no ponto de sondagem SS-02 foi
submetida a anlises geotcnicas: f
oc
(frao de carbono orgnico) ou COT (carbono
orgnico total) do solo, matria orgnica, densidade de partculas, densidade do
solo, porosidade efetiva, porosidade total, condutividade eltrica, condutividade
hidrulica, umidade natural, gua disponvel, contedo de gua, pH (H2O), pH (KCl),
pH (CaCl2) e granulometria, segundo os mtodos de Kiehl (1979) e Embrapa (1999).
Outras duas amostras indeformadas coletadas no SS-02 foram submetidas s
anlises de condutividade hidrulica, porosidade efetiva e total, e granulomtrica.

4.2.3 Quantificao do grau de saturao de leo diesel no solo
Para obter-se a massa de TPH total por quilograma de solo foram somados os
resultados das diferentes fraes de TPH medidas. Com a massa total de TPH e a
densidade mdia do TPH, 0,8376 g/cm, determinou-se o volume de leo diesel
existente em 1 kg de solo para as 5 amostras analisadas. Como o solo apresentou
1,64 g/cm de densidade e porosidade de 0,25, tem-se que 1 kg de solo corresponde
a um volume de 609,8 mL e, portanto, a um volume de vazios de 152,4 mL. Assim,
dividindo-se o volume de leo diesel existente pelo volume de vazios obteve-se o
percentual de saturao de leo diesel no solo.

89

4.3 Organizao da Investigao Laboratorial
Como o solo se mostrou consideravelmente heterogneo tanto na observao de
campo durante a execuo das sondagens, como nos resultados das anlises
geotcnicas preliminares, decidiu-se organizar a investigao laboratorial de maneira
a reduzir a influncia da heterogeneidade.
Dezesseis amostras indeformadas, coletadas em 4 furos de sondagem, foram
separadas em 4 grupos, cada qual relacionado a uma condio de lavagem. Cada
grupo foi composto por 4 amostras, sendo cada amostra proveniente de um furo de
sondagem. Assim, cada condio de lavagem foi testada 4 vezes, ou seja, foram
realizados 4 ensaios para cada condio de lavagem, utilizando-se uma amostra de
cada furo de sondagem. Procurou-se evitar assim que alguma caracterstica
intrnseca a um dos pontos de sondagem interferisse na interpretao dos resultados
dos ensaios de lavagem.
Ao trmino dos ensaios de lavagem foi coletada uma alquota de cada amostra para
determinar a concentrao de HPA. O solo restante das amostras de um mesmo
grupo foi misturado e submetido ao ensaio respiromtrico, em triplicata.
Realizaram-se tambm ensaios de respirometria com uma mistura de 4 amostras
indeformadas provenientes das sondagens SS-01, 03, 04 e 05 (neste caso, o solo
contaminado no sofreu o processo de lavagem) e com uma mistura de solo no
contaminado e sem lavagem coletado nas sondagens SS-31 e 32, que serviu de
controle para a respirometria.

4.4 Lavagem
Ensaios de lavagem foram realizados com amostras indeformadas coletadas nos
pontos de sondagem SS-01, 03, 04 e 05. A lavagem foi realizada em ensaios de
coluna com quatro fluidos percolantes: gua deionizada e trs solues de LSS em
gua deionizada em diferentes concentraes.
O surfactante utilizado foi o LSS ou SDS tipo USP da marca Cintica (Anexo I Foto
1). Este surfactante apresenta grau de pureza de pelo menos 90%, o que no
representa um alto grau de pureza. A escolha de um produto com baixo grau de
90

pureza visou avaliar o impacto da lavagem do solo com um produto o mais prximo
possvel da realidade de aplicao, uma vez que em uma lavagem in situ o uso de
um produto com alto grau de pureza se tornaria financeiramente proibitivo.
As concentraes utilizadas foram de 0 CMC (apenas gua deionizada), 0,6 CMC,
1,5 CMC e 3 CMC. A concentrao micelar crtica do LSS considerada foi de 0,0082
M, ou seja, 2,36 g/L (Rose, 2008).

4.4.1 Procedimento
O teste de coluna foi realizado com fluxo ascendente, carga constante e em sistema
fechado, para evitar perdas por volatilizao.
O equipamento para os ensaios de lavagem foi desenvolvido especialmente para
esta pesquisa. O sistema de lavagem foi composto por trs partes principais:
reservatrio para a soluo de lavagem, clula de fluxo e recipiente para coleta do
efluente.
O reservatrio para a soluo de lavagem consistiu de uma bureta com um tubo de
Mariotte adaptado (Figura 4.4) para que a carga hidrulica na bureta se mantivesse
constante. Da bureta a soluo foi transferida para a clula de fluxo por mangueiras
de PEBD (Polietilino de Baixa Densidade) (Anexo I Foto 2).
91

Figura 4.4 Bureta com tubo de mariotte adaptado

O anel metlico de amostragem foi utilizado como o corpo principal da clula de
fluxo, evitando assim qualquer interferncia na estrutura da amostra. Para
proporcionar uma melhor distribuio do fluxo de entrada, pedras porosas de
dimetro igual ao do anel de amostragem (Anexo I Foto 3) foram acopladas s
amostras por meio de fitas de teflon (Anexo I Foto 4). Colocou-se um disco de
papel filtro de 45 m entre a pedra porosa e a amostra, e tambm na parte superior
da amostra. Ressalta-se que para evitar qualquer tipo de contaminao cruzada,
foram utilizadas pedras porosas diferentes para a lavagem de cada amostra.
A clula de fluxo composta pelo corpo central constitudo pelo anel metlico da
amostragem, por dois funis de vidro (Anexo I Foto 5 e Figura 4.6) e dois anis de
teflon (Anexo I Foto 6) acoplados para direcionar o fluxo da soluo para o corpo
principal da clula, e de uma estrutura para unir essas peas. Essa estrutura
constituda por um par de peas de madeira de seo circular vazada, formando o
topo e a base da clula, unidas por parafusos tipo rosca sem fim nas quatro
92

extremidades (Figura 4.5). Uma figura da clula de fluxo montada est apresentada
na Figura 4.6.

Figura 4.5 Estrutura da clula de fluxo
93

Figura 4.6 Clula de fluxo montada

Foi confeccionado um suporte de madeira para apoiar at 4 clulas de fluxo,
permitindo a realizao de 4 ensaios de lavagem simultneos (Figura 4.7).
94

Figura 4.7 Suporte de apoio das clulas de fluxo

Por fim, a soluo foi direcionada da parte superior da clula de fluxo at um
kitassato de 250 ml (Anexo I Foto 7), tambm atravs de mangueira de PEBD.
Para evitar a perda de contaminante por volatilizao, o sistema foi fechado atravs
da conexo entre a parte superior do kitassato, vedado com uma rolha de borracha
(Anexo I Foto 8), ao topo do tubo de Mariotte por uma mangueira de PEBD.
Utilizou-se fita de teflon para garantir a vedao da mangueira de PEBD no contato
com o vidro do tubo de Mariotte no topo da bureta. Para a conexo entre a
mangueira e o kitassato, foram utilizados pequenos pedaos de mangueira de
silicone (Anexo I Foto 9).
Tendo em vista que os HPA podem ser fotodegradados, durante a realizao da
lavagem, as partes do sistema a jusante da clula de fluxo foram cobertas com papel
alumnio (Figura 4.8).
95

20 cm

Figura 4.8 Cobertura do sistema com alumnio e a carga hidrulica aplicada

Durante a realizao da lavagem o ambiente foi mantido em temperatura constante
de 20C atravs de um ar condicionado digital (Anexo I Foto 10).
O ensaio de lavagem iniciou-se com a limpeza dos equipamentos (vidrarias) com
detergente neutro (Anexo I Foto 11), enxgue com gua deionizada seguida de
uma lavagem com diclorometano (Anexo I Foto 12) e novamente enxgue com
gua deionizada.
As solues de LSS utilizadas nas lavagens foram preparadas atravs da mistura
direta do LSS devidamente pesado (Anexo I Foto 13) com gua deionizada e
armazenadas em bales volumtricos de 1 L (Anexo I Foto 14) a 20C.
Com os materiais limpos e as solues preparadas, retirou-se a amostra do
refrigerador (Anexo I Foto 15) e abriu-se a vedao realizada em campo.
Antes da montagem da clula de fluxo, a pedra porosa foi submetida saturao
atravs de um fluxo ascendente de gua deionizada, com carga de
96

aproximadamente 3 cm de coluna dgua. A amostra foi ento colocada entre uma
pedra porosa (na sua base) e um papel filtro (no topo), formando assim o corpo
principal da clula de fluxo. A seguir, tambm para evitar o acmulo de ar no
sistema, com o papel filtro j posicionado sobre a pedra porosa, a mangueira e o
funil inferior da clula de fluxo foram preenchidos com a soluo de lavagem.
Uma vez montado o sistema de lavagem, a bureta foi posicionada de forma que o
tubo de Mariotte ficasse apenas 1 cm acima do nvel superior da amostra. Nesta
posio, a bureta foi aberta e aguardou-se o preenchimento da parte superior da
amostra. Em mdia este processo de saturao durou 10 horas.
Terminado o processo de saturao da amostra, a parte superior da clula de fluxo e
a mangueira que conecta a clula de fluxo e o kitassato foram preenchidas com a
mesma soluo da lavagem. Ento a bureta foi reposicionada a 20 cm acima da
entrada do kitassato, formando assim uma diferena de carga hidrulica de 20 cm
(Figura 4.8).
Uma vez iniciado, o processo de lavagem somente foi interrompido quando
apresentava risco de ultrapassar o volume meta durante a noite ou fim de semana,
perodos em que no era possvel acompanhar o ensaio.
Considerando-se as porosidades mdias totais e efetivas das 3 amostras
indeformadas analisadas (Tabela 4.1), todas as amostras lavadas foram submetidas
passagem de um volume de aproximadamente 3 poros totais ou 34 poros efetivos.

Tabela 4.1 Porosidades totais e efetivas
Amostra 01 Amostra 02
Amostra 03 (amostra
avaliada na epoca da
sondagem)
Porosidade Total % 30,2 39,0 25,0
Porosidade Efetiva % 2,5 1,7 4,0

Aps a lavagem, a amostra era retirada da clula de fluxo. Toda a gua existente na
parte superior e inferior da clula de fluxo e mangueiras, a montante e jusante da
lavagem, assim como a acumulada no kitassato, foi coletada e enviada para anlise
de HPA (USEPA 8270D), em frasco mbar de 500 mL (Anexo I Foto 16). A gua
97

coletada nos casos de necessidade de readequao da vedao foi adicionada
coleta final. Antes de enviar a amostra para a anlise de HPA, mediu-se o volume de
gua coletada em provetas de 200 mL.
Logo aps a abertura da clula de fluxo, a amostra indeformada de solo foi mantida
na posio horizontal para evitar a drenagem da gua existente no seu interior e
pesada ainda com o anel de coleta, o qual foi ento removido, limpo, seco e pesado.
Assim que retirada a amostra do anel metlico, coletou-se um torro, o qual foi
pesado e encaminhado para a estufa (Anexo I Foto 17) por pelo menos 20 horas.
Logo que retirado da estufa, o torro de solo foi resfriado em um dessecador (Anexo
I Foto 18) por pelo menos 10 minutos e, ento, novamente pesado.
Aps a coleta do torro, o restante da amostra de solo foi rapidamente
homogeneizado e dividido em dois frascos (Figura 4.9), um com aproximadamente
30 gramas e que foi encaminhado para anlise de HPA (USEPA 8270D) e o outro
armazenou o restante do solo para os ensaios de respirometria.

Figura 4.9 Frascos de coleta do solo da lavagem

Uma vez terminada a lavagem dos 4 grupos de amostras, correspondentes s 4
solues pesquisadas, aproximadamente 70g de solo de cada uma das amostras
(Figura 4.10) foram misturados com as amostras do mesmo grupo (Figura 4.11) e
ento armazenados (Figura 4.12).
98

Figura 4.10 Solo logo antes da mistura aps a lavagem

Figura 4.11 Solo misturado aps as lavagens
99

Figura 4.12 Armazenamento do solo misturado aps as lavagens

4.4.2 Quantificao de HPA extrado por lavagem
Para cada contaminante e cada ensaio foi realizado um balano de massa para
avaliar a porcentagem de HPA extrado pela lavagem, segundo as Equaes 10 e
11. Para realizar este balano utilizaram-se as concentraes de HPA no solo e na
gua aps a lavagem, o volume de gua utilizado na lavagem e o peso de solo da
amostra.

M
ic
= M
s
* C
s
* V
a
*C
a
Equao 10
Sendo:
M
ic
= Massa inicial de um dado composto na amostra (ug);
M
s
= Massa de solo da amostra em base seca (g);
C
s
= Concentrao de um dado composto no

solo (ug/g);
V
a
= Volume de gua utilizada na lavagem (litro);
C
a
= Concentrao de um dado composto na gua (ug/litro);
100

P
R
= V
a
*C
a
/ M
ic
Equao 11
Sendo:
P
R
= Percentual Removido;

Devido variao de procedimento (mudana no volume de solvente para extrao)
por parte do laboratrio que realizou as anlises de HPA, os limites de quantificao
diferiram entre as amostras, o que dificultou a interpretao dos resultados.

4.5 Respirometria
O mtodo de respirometria realizado teve como base a NBR 14.283/1999, porm,
com algumas modificaes apresentadas a seguir.
Foram realizados ensaios respiromtricos para cada mistura de amostras
submetidas lavagem com mesma concentrao de LSS, portanto, com 4 misturas
de solos lavados; para uma amostra proveniente da mistura de amostras coletadas
nas sondagens SS-01, 03, 04 e 05 (Figura 4.13), que se apresentavam
contaminadas, mas que no sofreram o processo de lavagem; e tambm para uma
mistura de solo no contaminado e sem lavagem que foi coletado nas sondagens
SS-31 e 32 e que serviu de controle para a respirometria (Figura 4.14). Portanto, a
respirometria foi realizada em 6 amostras, incluindo o controle (solo no
contaminado).
Tendo em vista a aparncia esbranquiada da amostra SS-32, apesar de todas as
descries geolgicas no terem reportado presena de carbonato de clcio na
rea, adicionou-se HCl 0,2N amostra para verificar se ela continha esse composto,
o qual poderia gerar uma elevada produo de CO
2
. O teste no provocou o
desprendimento de bolhas, o que indica que a descrio geolgica estava correta.

101

Figura 4.13 Mistura do solo contaminado sem lavagem (SS-01, 03, 04 e 05)

Figura 4.14 Mistura do solo no contaminado sem lavagem Controle (SS-31 e 32)
102

4.5.1 Procedimento
Aps a homogeneizao de cada amostra, uma alquota foi enviada para anlise de
Nitrognio Kjeldahl Total (SM 4500 B e C), Fsforo Total (USEPA 6010C), COT
(Embrapa 1999) e umidade (Embrapa 1999). Com os resultados dessas anlises,
avaliou-se a necessidade de balanceamento da relao C:N e C:P, que para o
mtodo respiromtrico aplicado foi de 60 e 300, respectivamente, alm da
necessidade de adio de gua. Os resultados mostraram que o solo apresenta
fsforo em abundncia, mas necessitou de adio de nitrognio e gua. A correo
de nitrognio foi realizada atravs da adio de Sulfato Amnio PA da marca
Cintica (Anexo I Foto 19) em soluo na gua destilada adicionada.
Cada uma das 6 amostras foi dividida de 3 amostras de 50 g de solo seco cada
(triplicatas). Como o solo no poderia ser aquecido, o estabelecimento da massa de
solo mido correspondente a 50 g de solo seco foi definida com base nos resultados
de umidade determinados anteriormente.
As amostras de solo contaminado apresentavam-se com umidade prxima da
saturao, concluso obtida pela comparao entre o volume de poros calculado de
152,4 mL/Kg de solo e a umidade em % em massa observada para cada amostra
(Tabela 4.2). Considerando-se que a NBR 14.283/1999 estabelece que a umidade
deve ficar entre 50 e 70% da capacidade de campo, o que significa uma umidade
significativamente menor do que a j observada nas amostras, arbitrariamente
escolheu-se corrigir a umidade das amostras para 30% em massa, uma vez que era
necessrio adicionar uma soluo s amostras e no seria possvel secar as
amostras, pois as mesmas perderiam os contaminantes existentes.
Ressalta-se que na norma o contaminante adicionado aps a secagem do solo e
correo da sua umidade. No entanto, este trabalho visa avaliar a biodegradao da
biota previamente existente, impossibilitando assim a secagem do solo.
Os resultados de umidade, massa de solo mido e concentraes de nitrognio,
fsforo e COT, assim como a quantidade de nitrognio e gua adicionados para se
atingir 30% de umidade e a relao C:N desejada em cada amostra esto
apresentados na Tabela 4.2. Alm do N e P adicionados gua, para os
103

respirmetros lavados com surfactante, foi adicionado surfactante na gua para
manter a concentrao de surfactante.

Tabela 4.2 Correo de nutrientes e umidade das amostras utilizadas na respirometria
SNC SCNA 0 CMC 0,6 CMC 1,5 CMC 3 CMC
Umidade (%) (m de gua/m solo seco) 2,6 15,2 16,3 18,0 17,7 16,7
Massa de solo Umido Natura de cada amostra (Medida) g 51,3 57,6 58,1 59,0 58,8 58,4
COT (%) (m de Carbono/m solo seco) 0,5 1,6 1,5 1,8 1,3 1,5
Concentrao de Nitrogenio Kjeldal medida no solo (m de N/m solo seco) (mg/kg) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Concentrao de Fosforo Total medida no solo (m de fsforo/m de solo seco)
(mg/kg)
683,9 699,1 800,4 671,2 750,1 574,6
Volume de gua a ser adicionada ml 13,7 7,4 6,9 6,0 6,2 6,6
Cancentrao de Sulfato de Amonio na gua a ser adicionada (g/litro) 1,5 8,2 8,5 11,9 8,5 9,1

Uma vez preparadas, as 18 amostras foram colocadas nos seus respectivos
respirmetros vedados com fita de teflon e silicone (Figura 4.15). A montagem do
respirmetro foi realizada conforme determina a NBR 14.283/1999, exceto pela
utilizao de cal sodada em substituio ascarita, devido no regulamentao da
ascarita por parte da ANVISA. Esta substituio vem sendo utilizada com bons
resultados por outros pesquisadores (Coraucci et al., 1997).
A preparao dos reagentes necessrios operacionalizao dos testes foi
realizada de acordo com o estabelecido na NBR 14.283/1999. O mtodo
respiromtrico utilizado consistiu em adicionar 10 mL de KOH 0,2N ao respirmetro
para reagir com o CO
2
produzido durante a incubao a 20C (Figura 4.16),
temperatura inferior definida pela norma, mas que representa mais fielmente as
condies de degradao em subsuperficie.
104

Figura 4.15 Respirmetro

Figura 4.16 Incubador a 20C
105

A cada perodo de uma semana em incubao os respirmetros foram retirados do
incubador um a um, para minimizar o tempo exposto a temperatura superior a 20C.
Coletou-se o KOH para titulao com HCl 0,1N e ento determinou-se a quantidade
de CO
2
produzida no respirmetro.
Este procedimento se manteve at a 8 semana de incubao, quando se encerrou
o perodo de incubao previsto. Decidiu-se investigar se o comportamento anmalo
observado nas duas primeiras semanas de incubao se repetiria caso fossem
adicionados 5 mL de gua com as respectivas concentraes de surfactante a todos
os respirmetros.

4.5.2 Quantificao da gerao de gs carbnico
A produo de CO
2
foi avaliada semanalmente para permitir a visualizao do
desenvolvimento da biodegradao ao longo do tempo.
O HCl utilizado na titulao foi padronizado contra carbonato de clcio (padro
primrio) e seu fator de padronizao foi considerado nos clculos que
determinaram a quantidade de CO
2
produzida nos respirmetros.
Na reao entre o KOH e CO
2
, cada molcula de CO
2
consome duas molculas de
KOH:

2KOH(aq) + CO
2
(g) K
2
CO
3
(aq) + H
2
O (aq) Equao 12

Na reao entre o KOH e o HCl que ocorre durante a titulao, a relao entre
consumo de HCl e KOH de um para um:

KOH
(aq)
+ HCl
(aq)
KCl
(s)
+ H
2
O
(aq)
Equao 13

Portanto, para cada duas molculas de HCl no consumidas na titulao (diferena
entre o titulado em um dado respirmetro e o titulado no branco) existe uma
molcula de CO
2
produzida no respirmetro.
106

O clculo da quantidade de mols de CO
2
produzido em um determinado
respirmetro, tendo como base os volume de HCl utilizado na titulao, foi realizado
conforme a Equao 14.

Mols de CO
2
/50g de solo seco = (A-B) * M * f
HCl
* (1000 *2) Equao
14
Sendo:
A = o volume de HCl gasto para titular o branco, em mililitro;
B = o volume de HCl gasto para titular o respirmetro a ser avaliado, em mililitro;
M = molaridade terica do HCl;
f
HCl
= fator de padronizao do HCl (volume de Na
2
CO
3
0,1N / volume de HCl 0,1N);
1000 = correo do volume da soluo HCl de mililitro para litro;
2 = relao entre nmero de molculas de HCl titulado e CO
2
produzido.

Calculando-se o nmero de molculas de CO
2
produzidas em cada respirmetro e
dele subtraindo o nmero de molculas de CO
2
produzidas no controle foi possvel
determinar quantos mols de CO
2
foram produzidos pela biodegradao do leo
diesel. De acordo com a norma aplicada, a quantidade de C degradada pela biota
o dobro da quantidade de C

produzida em forma de CO
2
, sendo que a outra parte do
carbono degradado fica retida como massa celular resultante do crescimento dos
microorganismos (NBR 14.283/1999), ou seja, a quantidade C biodegradada duas
vezes a quantidade de CO
2
produzida.
Como foram realizadas anlises de COT antes do incio da respirometria para cada
uma das 6 amostras iniciais, pode-se correlacionar a taxa de biodegradao e o
carbono inicial proveniente da contaminao. Para determinar a quantidade de
carbono referente contaminao nas amostras de campo, descontou-se a
quantidade de carbono existente no solo no contaminado e adicionou-se a massa
adicionada na correo de nutriente do solo (Tabela 4.3).

107

Tabela 4.3 Massa de carbono existente nas amostras
Solo no Contaminado SCNA 0 CMC 0,6 CMC 1,5 CMC 3 CMC
COT (%) (m de Carbono/m solo seco) 0,53 1,55 1,48 1,82 1,34 1,53
Massa de carbono existente em cada amostra
de 50 mg aps a lavagem (mg)
265 775 740 910 670 765
Massa de carbono referente contaminao
por lo diesel e pelo LSS em cada amostra de
50g aps a lavaggem (mg)
- 510 475 645 405 500
Massa de carbono refferente ao LSS
adicionado na correo de nutriente do solo
(mg)
0 0 0 9 22 47
Massa de carbono referente contaminao
por lo diesel e pelo LSS em cada amostra de
50g no inicio da respirometria (mg)
0 510 475 654 427 547

A verificao da existncia de correlao entre biodegradao e massa inicial de
carbono importante, pois a taxa de produo de CO
2
pode ser influenciada pela
massa inicial de C e no apenas pelas condies de interesse do experimento.
Como as titulaes foram realizadas com diferena de algumas horas de uma
semana para outra, os resultados foram calculados de forma a expressar a
biodegradao em mg/dia e em massa acumulada.
Nos respirmetros lavados com surfactante, a massa de carbono biodegradada
considerada (com o desconto do controle) tem duas possveis origens: os
hidrocarbonetos provenientes do leo diesel e o prprio surfactante. A anlise dos
resultados considerou a possvel degradao do surfactante inserido, no incio e na
8 semana de incubao.
A anlise dos dados foi realizada de forma estatstica, considerando como variao
um intervalo de confiana de 90%, tendo como base a variao dos resultados dos
trs respirmetros de cada grupo.
108

5 RESULTADOS
5.1 Preliminares
Amostras deformadas dos 5 pontos de sondagem foram submetidas s anlises de
HTP Fracionado (USEPA 8260B e 8015C) e HPA (USEPA 8270D).
Pode-se observar significativa heterogeneidade nas concentraes medidas e das
caractersticas geotcnicas (Tabela 5.2 e Tabela 5.3), o que determinou o mtodo de
cruzamento das amostras para os ensaios de lavagem e respirometria, conforme no
captulo 4.3.
Considerando o mtodo exposto no item 4.2.3, foi calculado o percentual de
saturao de leo diesel nos 5 furos de sondagem (Tabela 5.1 e Tabela 5.3).

Tabela 5.1 Calculo do percentual de saturao do leo diesel no solo
Unidade SS-01 SS-02 SS-03 SS-04 SS-05
Volume de leo Diesel
ml/Kg 6,2 19,3 3,2 40,6 50,6
Percentual de Saturao
de leo diesel no solo
v /v 4,0% 12,7% 2,1% 26,6% 33,2%

Tabela 5.2 Dados geotcnicos do solo estudado
Amostra 01 Amostra 02
Amostra 03 (amostra
avaliada na poca da
sondagem)
Porosidade Total % 30,2 39,0 25,0
Porosidade Efetiva % 2,5 1,7 4,0
Condutividade Hidrulica (cm/h) 0,3 1,7 0,3
Argila % 11,3 28,0 15,6
Silte % 20,8 4,5 25,5
Cascalho % 2,1 3,1
Areia Muito Grossa % 6,1 5,7
Areia Grossa % 15,5 13,9
Areia Mdia % 17,0 16,3 12,5
Areia Fina % 6,1 15,1
Areia Muito Fina % 20,9 13,1
18,2
28,2

109

Tabela 5.3 Concentrao de TPH e de HPA nas amostras deformadas coletadas nos 5 furos de sondagem estudados
Composto
HPA
Naftaleno g/Kg 2.669 792 657 2.465 3.946
Acenaftileno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Acenafteno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Fluoreno g/Kg 1.093 454 504 2.359 1.801
Fenantreno g/Kg 2.604 726 829 2.486 3.166
Antraceno g/Kg 572 139 149 545 642
Fluoranteno g/Kg 241 130 60 321 349
Pireno g/Kg 464 148 95 432 554
Benz(a)antraceno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Criseno g/Kg 341 <38,31 <37,88 355 517
Benzo(b)fluoranteno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Benzo(k)fluoranteno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Benzo(a)pireno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Indeno(1,2,3-cd)pireno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Dibenzo(a,h)antraceno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
Benzo(g,h,i)perileno g/Kg <38,31 <38,31 <37,88 <39,22 <92,59
HPA Total (2) g/Kg 6.425 1.787 1.694 6.171 8.620
HTTP
Aromaticos > C8-C10 g/Kg 2.724 1.877 241 2.011 2.059
Aromaticos > C10-C12 g/Kg 89.912 56.379 42.448 174.039 120.857
Aromaticos > C12-C16 g/Kg 371.817 204.035 283.450 1.308.780 791.352
Alifcticos C6-C8 g/Kg 1.508 <1149,4 128 1.114 1.076
Alifcticos > C8-C10 g/Kg 39.712 27.751 3.570 28.684 11.982
Alifcticos > C10-C12 g/Kg 182.931 1.796.616 49.418 2.455.802 4.611.207
Alifcticos > C12-C16 g/Kg 1.035.617 7.117.935 563.015 13.412.594 19.308.892
Alifcticos > C16-C21 g/Kg 1.132.945 5.145.888 731.036 10.971.759 15.412.660
Alifcticos > C21-C32 g/Kg 1.107.282 1.458.206 176.495 2.963.628 484.183
HTP Total (soma das faixas) g/Kg 5.165.342 16.206.714 2.709.452 33.965.295 42.397.905
SS-04 SS-05 Unidade SS-01 SS-02 SS-03

110

5.2 Lavagem
A realizao do procedimento de lavagem teve por objetivo principal simular o
procedimento em campo e com isso promover os possveis impactos em uma
posterior biorremediao. Porm, adicionalmente, foram realizadas anlises de HPA
no solo e na gua, o que permitiu avaliar a capacidade de remoo dos HPA em
fase residual atravs da lavagem.
Os resultados das anlises de solo aps a lavagem esto apresentados na Tabela
5.4 e demonstram significativa variao entre amostras de diferentes furos de
sondagens e at mesmo entre as amostras de um mesmo furo de sondagem.
Observa-se que no foram identificados compostos em diversas amostras de solo
em limites detectveis pela tcnica analtica.
Calculando-se o percentual de remoo dos HPA atravs da lavagem segundo a
Equao 11, que considera tanto os resultados de concentrao no solo quanto os
resultados de concentrao na gua proveniente da lavagem do solo (Tabela 5.5),
obtiveram-se os percentuais de remoo apresentados na Tabela 5.6. Os vazios na
tabela correspondem aos casos em que no foi identificado o composto na anlise
de solo. Os percentuais que so precedidos do sinal < significam que foi detectado
o composto no solo, porm sua concentrao na gua ficou abaixo do limite de
quantificao da tcnica analtica, ou seja, calculou-se o limite mximo de remoo.
Enquanto que o percentual precedido de > significa que foi detectado composto na
gua, porm no foi detectado no solo, estabelecendo-se assim, um limite inferior do
percentual de remoo.
A lavagem realizada no promoveu a remoo de 13 dos 16 compostos estudados e
removeu pouco significativamente o naftaleno e o fenantreno. A remoo desses
dois compostos ocorreu principalmente na lavagem com concentrao de
surfactante de 3 CMC. O fluoreno de uma das amostras lavadas com 3 CMC
apresentou remoo mnima de 7,6%. Apesar da aparente relao entre a remoo
e a concentrao de surfactante, no pode-se correlacionar o porcentual de remoo
com a variao da concentrao de LSS de forma consistente.

111

Tabela 5.4 Resultados de HPA do solo logo aps o termino da lavagem
SS-01/1 SS-03/2 SS-04/3 SS-05/4 SS-01/2 SS-03/3 SS-04/4 SS-05/1 SS-01/3 SS-03/4 SS-04/1 SS-05/2 SS-01/4 SS-03/1 SS-04/2 SS-05/3
Massa de solo em base umida Kg 0,19654 0,19141 0,20587 0,202 0,19019 0,18783 0,17797 0,19915 0,21709 0,19161 0,19367 0,1951 0,18289 0,18581
Naftaleno g/Kg 1409,2 141,9 5119,2 2637,4 48,08 1679,4 3939,2 1000,1 < 12,17 746,1 2404 470,5 279,8 3038,8
Acenaftileno g/Kg < 11,59 34,83 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
Acenafteno g/Kg < 11,59 76,27 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 32,24 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
Fluoreno g/Kg 3960,7 93,02 679,4 1157,6 145,4 1387,9 2822,3 771,6 70,95 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 3321,1
Fenantreno g/Kg 5235,3 147,5 2088,1 3264,5 296,1 3480,8 6830,9 2574,8 102,3 177,5 500,3 300,1 218,4 6067,5
Antraceno g/Kg 732,3 < 11,95 211,7 907,4 < 12,38 < 121,7 2303,7 666 29,23 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
Fluoranteno g/Kg 603,7 < 11,95 227,1 170,7 < 12,38 219,7 512,4 131,2 50,19 29,91 50,11 23,14 39,43 522
Pireno g/Kg 1043,8 < 11,95 338,1 454,1 15,76 305,4 854,9 361,8 65,46 48,82 85,72 18,95 38,6 756,8
Benz(a)antraceno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
Criseno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 50,56 <11,52 59,12 163,2 < 248,1
Benzo(b)fluoranteno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 24,03 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
Benzo(k)fluoranteno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 13,05 <11,78 22,64 <11,64 17,83 < 248,1
Benzo(a)pireno g/Kg 22,69 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 31,15 <11,78 19,39 <11,64 <12,02 < 248,1
Indeno(1,2,3-cd)pireno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
Dibenzo(a,h)antraceno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 <11,78 15,79 <11,64 <12,02 < 248,1
Benzo(g,h,i)perileno g/Kg < 11,59 < 11,95 < 26,74 < 115,2 < 12,38 < 121,7 < 245,7 < 114,5 < 12,17 <11,78 <11,52 <11,64 <12,02 < 248,1
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0 CMC 0,6 CMC 1,5 CMC 3 CMC

112

Tabela 5.5 Resultados de HPA da gua proveniente da lavagem do solo.
Volume de gua L 0,162 0,180 0,169 0,279 0,292 0,151 0,169 0,134 0,186 0,113 0,166 0,125 0,118 0,144
Naftaleno g/L <0,15 <0,15 FALSO <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 2,92 <0,6 <0,6 <1,03
Acenaftileno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Acenafteno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Fluoreno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 1,11 <0,6 <0,6 <1,03
Fenantreno g/L <0,15 <0,15 0,395 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 3,07 2,16 0,819 1,2
Antraceno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Fluoranteno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Pireno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Benz(a)antraceno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Criseno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Benzo(b)fluoranteno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Benzo(k)fluoranteno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Benzo(a)pireno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Indeno(1,2,3-cd)pireno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Dibenzo(a,h)antraceno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
Benzo(g,h,i)perileno g/L <0,15 <0,15 <0,15 <0,6 <0,15 <0,6 <0,882 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <0,6 <1,03
1,5 CMC 3 CMC
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0 CMC 0,6 CMC

113

Tabela 5.6 Percentual de remoo de HPA atravs da lavagem
% <0,009%< 0,099% < 0,002%< 0,0314%< 0,477% < 0,029% < 0,021% < 0,040% - < 0,047% 0,104% < 0,082% < 0,138% 0,026%
% - < 0,403% - - - - - - - - - - - -
% - < 0,185% - - - - - - < 1,569% - - - - -
% < 0,003%< 0,151% < 0,018%< 0,072%< 0,158% < 0,035% < 0,030% < 0,052% < 0,719% - >7,607% - - < 0,0240%
% < 0,002%< 0,096% 0,015% < 0,025%< 0,078% < 0,014% < 0,012% < 0,016% < 0,500% < 0,199% 0,522% 0,459% 0,241% 0,015%
% < 0,017% - < 0,058%< 0,091% - - < 0,036% < 0,060% < 1,727% - - - - -
% < 0,020% - < 0,054% < 0,483% - < 0,219% < 0,163% < 0,306% < 1,013% < 1,169% < 1,013% < 1,63% < 0,972% < 0,1524%
% < 0,012% - < 0,036%< 0,182%< 1,44% < 0,158% < 0,098% < 0,111% < 0,779% < 0,720% < 0,595 < 1,987% < 0,993% < 0,105%
% - - - - - - - - - - - - - -
% - - - - - - - - - < 0,696% - < 0,646% < 0,237% -
% - - - - - - - - - < 1,451% - - - -
% - - - - - - - - < 3,788% - < 2,215% - < 2,125% -
% < 0,542% - - - - - - - < 1,623% - <2,576 - - -
% - - - - - - - - - - - - - -
% - - - - - - - - - - < 3,145% - - -
% - - - - - - - - - - - - - -
Pireno
Fenantreno
Antraceno
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Benzo(a)antraceno
Criseno
Benzo(b)fluoranteno
Benzo(k)fluoranteno
1,5 CMC 3 CMC
Dibenzo(a,h)antraceno
Benzo(g,h,i)perileno
A
m
o
s
t
r
a

p
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r
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v
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m
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n
t
o
.
Naftaleno
Acenaftileno
Benzo(a)pireno
Indeno(1,2,3-cd)pireno
Fluoranteno
Acenafteno
Fluoreno
0 CMC 0,6 CMC

114

5.3 Respirometria
Os resultados da quantidade em mols de CO
2
gerados nas 8 primeiras semanas de
incubao esto apresentados na Figura 5.1 e na Tabela 5.12, as quais incluem
tambm os resultados obtidos nas semanas seguintes 8 semana, quando foram
adicionados a cada respirmetro 5 mL da soluo correspondente.
Estes resultados demonstraram significativa consistncia, tendo em vista que os
resultados dos respirmetros em triplicata ficaram razoavelmente prximos uns dos
outros (Figura 5.2). Este comportamento, alm da consistncia do mtodo,
demonstra que as amostras que foram separadas em triplicatas tm suficiente
homogeneidade do ponto de vista de biodegradao.

115

0
0,0005
0,001
0,0015
0,002
0,0025
0,003
0,0035
0,004
0,0045
0,005
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
M
o
l
s
d
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C
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2
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p
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r
5
0
g

d
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s
o
l
o
Tempo de Incubao (horas)
Solo Contaminado No Alterado
SCNA - A
SCNA - B
SCNA - C
0
0,0005
0,001
0,0015
0,002
0,0025
0,003
0,0035
0,004
0,0045
0,005
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
M
o
l
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C
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2
p
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o
p
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r
5
0
g

d
e

s
o
l
o
0 CMC
0 CMC - A
0 CMC - B
0 CMC - C
0
0,001
0,002
0,003
0,004
0,005
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
M
o
l
s
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C
O
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o
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o
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o
r
5
0
g

d
e

s
o
l
o
0,6 CMC
0,6 CMC - A
0,6 CMC - B
0,6 CMC - C
0
0,001
0,002
0,003
0,004
0,005
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
M
o
l
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C
O
2
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o
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o
r
5
0
g

d
e

s
o
l
o
1,5 CMC
1,5 CMC - A
1,5 CMC - B
1,5 CMC - C
0
0,001
0,002
0,003
0,004
0,005
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
M
o
l
s
d
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C
O
2
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d
o
p
o
r
5
0
g

d
e

s
o
l
o
3 CMC
3 CMC - A
3 CMC - B
3 CMC - C
0
0,001
0,002
0,003
0,004
0,005
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
M
o
l
s
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C
O
2
p
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p
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5
0
g

d
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s
o
l
o
Solo No Contaminado
SNC - A
SNC - B
SNC - C

Figura 5.1 Produo acumulada de CO
2
nos respirmetros

116

Figura 5.2 Resultados de biodegradao das triplicatas nas 4 primeiras semanas
117

Observando-se a taxa de biodegradao nos ensaios respiromtricos ao longo do
tempo (Figura 5.3), em geral a maior taxa ocorreu no inicio do teste, em especial no
solo lavado com soluo concentrao de 1,5 CMC.

0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
T
a
x
a

d
e

b
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d
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g
r
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o

d
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C

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m

m
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/
5
0
g

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s
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o

s
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c
o
Taxa de Biodegradao mdia dos respirometros A, B e C de cada condio
Media SCNA
Media 0 CMC
Media 0,6 CMC
Media 1,5 CMC
Media 3 CMC

Figura 5.3 Variao da taxa de consumo de carbono por biodegradaao longo do tempo

Na primeira semana, a biodegradao na condio de lavagem com concentrao
de surfactante de 1,5 CMC foi 2 vezes superior observada na condio sem
lavagem (SCNA). Na segunda semana, a biodegradao nos respirmetros lavados
com soluo de 1,5 CMC de surfactante ainda se apresentou superior aos demais.
Nas 3 semanas seguintes, igualou-se condio SCNA, tornando-se novamente
ligeiramente maior nas ultimas 3 semanas de respirometria (Figura 5.3 e Figura 5.4).
118

0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
T
a
x
a

d
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b
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g
r
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C

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5
0
g

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s
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l
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s
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c
o
Taxa de Biodegradao (SCNA x 1,5 CMC)
Media SCNA
Media 1,5 CMC
Minimo SCNA
Maximo SCNA
Minimo 1,5 CMC
Maximo 1,5 CMC

Figura 5.4 Comparao das taxas de consumo de carbono para a lavagem com 1,5 CMC e a
condio de SCNA

Comparando-se a evoluo da massa acumulada de carbono consumido por
biodegradao na condio de 1,5 CMC e de SCNA possvel confirmar que a
superioridade da degradao promovida na primeira condio (Figura 5.5).

0
10
20
30
40
50
60
70
M
a
s
s
a

a
c
u
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c
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o

b
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o
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g
r
a
d
a
d
o

e
m

m
g
Massa acumulada de carbono biodegradado (SCNA x 1,5 CMC)
Media SCNA
Media 1,5 CMC
Minimo SCNA
Maximo SCNA
Minimo 1,5 CMC
Maximo 1,5 CMC

Figura 5.5 Comparao das massas acumuladas de carbono consumido para a lavagem com
1,5 CMC e a condio de SCNA
119

Diferentemente dos resultados obtidos no solo lavado com 1,5 CMC, os
respirmetros com solo lavado com 0,6 CMC apresentaram degradao inferior
condio de SCNA ao longo de quase todo o perodo de incubao (Figura 5.6).

0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
T
a
x
a

d
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b
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o

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C

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5
0
g

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o

s
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c
o
Taxa de Biodegradao (SCNA x 0,6 CMC)
Media SCNA
Media 0,6CMC
Minimo SCNA
Maximo SCNA
Minimo 0,6 CMC
Maximo 0,6 CMC

Figura 5.6 - Comparao das taxas de consumo de carbono para a lavagem com 0,6 CMC e
SCNA

Este comportamento resultou em uma biodegradao final inferior obtida na
condio de SCNA (Figura 5.7).

120

0
10
20
30
40
50
60
70
M
a
s
s
a

a
c
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m
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n
o

b
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g
r
a
d
a
d
o

e
m

m
g
Massa acumulada de carbono biodegradado (SCNA x 0,6 CMC)
Media SCNA
Media 0,6 CMC
Minimo SCNA
Maximo SCNA
Minimo 0,6 CMC
Maximo 0,6 CMC

Figura 5.7 - Comparao das massas acumuladas de carbono consumido para a lavagem com
0,6 CMC e SCNA

As outras condies de lavagem (0 CMC e 3 CMC) resultaram em degradaes
ligeiramente inferiores s observadas na condio de SCNA, porm sem ser
possvel afirmar tal comportamento de forma estatstica (Figura 5.8).
121

(A)
(B)

Figura 5.8 Comparao das massas acumuladas de carbono consumido para a lavagem com
0 CMC, 3 CMC e SCNA

Os resultados de massa de carbono biodegradada nos respirmetros e
correspondentes estatsticas, incluindo os resultados observados aps a 8 semana,
esto apresentados na Tabela 5.7,Tabela 5.8, Tabela 5.9 e Tabela 5.10.

122

Tabela 5.7 Taxa de consumo de carbono por biodegradao nos respirmetros em mg/dia/50g de solo seco
SCNA - A SCNA - B SCNA - C 0 CMC - A 0 CMC - B 0 CMC - C 0,6 CMC - A 0,6 CMC - B 0,6 CMC - C 1,5 CMC - A 1,5 CMC - B 1,5 CMC - C 3 CMC - A 3 CMC - B 3 CMC - C
1 semana 1,10 1,14 0,91 0,89 0,44 0,57 0,85 0,89 0,83 1,92 2,07 2,05 0,82 0,72 0,83
2 semana 0,79 0,75 0,60 0,77 0,55 0,68 0,42 0,70 0,57 0,98 0,98 1,07 0,68 0,70 0,75
3 semana 0,76 0,74 0,52 0,80 0,56 0,62 0,16 0,44 0,24 0,52 0,78 0,68 0,44 0,66 0,66
4 semana 0,74 0,76 0,46 0,76 0,61 0,61 0,38 0,53 0,38 0,63 0,74 0,82 0,68 0,72 0,68
5 semana 0,74 0,70 0,45 0,76 0,70 0,62 0,37 0,47 0,27 0,58 0,84 0,74 0,43 0,58 0,54
6 semana 0,85 0,74 0,52 0,81 0,55 0,61 0,47 0,68 0,48 0,76 1,00 0,98 0,61 0,67 0,75
7 semana 0,67 0,61 0,48 0,70 0,40 0,48 0,33 0,48 0,23 0,67 0,82 0,70 0,25 0,35 0,46
8 semana 0,82 0,63 0,51 0,85 0,42 0,55 0,44 0,63 0,38 0,78 0,99 0,91 0,51 0,47 0,68
9 semana 0,93 0,84 0,66 0,74 0,36 0,51 0,57 0,63 0,47 1,38 1,52 1,45 0,32 0,68 0,41
10 semana 0,84 0,71 0,61 0,77 0,38 0,55 0,51 0,57 0,55 1,18 1,21 1,23 0,44 1,08 0,59

Tabela 5.8 Massa acumulada de carbono consumido na biodegradao nos respirmetros em mg
1 semana 7,73 8,00 6,40 6,27 3,07 4,00 6,00 6,27 5,87 13,47 14,53 14,40 5,73 5,07 5,87
2 semana 13,38 13,38 10,71 11,78 6,98 8,84 8,98 11,24 9,91 20,44 21,51 22,04 10,58 10,04 11,24
3 semana 18,81 18,68 14,54 17,48 11,08 13,34 10,41 14,54 11,88 24,28 27,08 26,94 13,88 14,81 16,01
4 semana 24,05 24,05 17,79 22,85 15,39 17,65 13,12 18,32 14,59 28,72 32,32 32,72 18,72 19,92 20,85
5 semana 29,12 28,85 20,85 28,05 20,19 21,92 15,65 21,52 16,45 32,72 38,05 37,79 21,65 23,92 24,59
6 semana 35,35 34,26 24,63 34,01 24,23 26,38 19,09 26,52 19,95 38,27 45,37 44,97 26,11 28,85 30,06
7 semana 40,17 38,67 28,08 39,10 27,14 29,83 21,45 29,98 21,64 43,08 51,28 50,06 27,93 31,35 33,38
8 semana 46,03 43,17 31,76 45,24 30,14 33,78 24,59 34,48 24,36 48,68 58,37 56,61 31,61 34,76 38,29
9 semana 52,48 49,08 36,44 50,46 32,64 37,38 28,59 38,88 27,68 58,40 69,05 66,81 33,84 39,58 41,20
10 semana 58,39 54,04 40,72 55,83 35,28 41,24 32,18 42,88 31,54 66,63 77,55 75,45 36,88 47,13 45,34

123

Tabela 5.9 Estatsticas da taxa de consumo de carbono por biodegradao nos respirmetros em mg/dia/50g de solo seco
Media
SCNA
Desvio
Padro
SCNA
Minimo
SCNA
Maximo
SCNA
Media 0
CMC
Desvio
Padro 0
CMC
Minimo 0
CMC
Maximo 0
CMC
Media 0,6
CMC
Desvio
Padro 0,6
CMC
Minimo 0,6
CMC
Maximo 0,6
CMC
Media 1,5
CMC
Desvio
Padro 1,5
CMC
Minimo 1,5
CMC
Maximo
1,5 CMC
Media
3 CMC
Desvio
Padro
3 CMC
Minimo
3 CMC
Maximo
3 CMC
1 semana 1,05 0,12 0,94 1,17 0,63 0,24 0,52 0,75 0,86 0,03 0,75 0,98 2,02 0,08 1,90 2,14 0,79 0,06 0,68 0,91
2 semana 0,72 0,10 0,62 0,81 0,67 0,11 0,57 0,76 0,56 0,14 0,47 0,66 1,01 0,05 0,92 1,10 0,71 0,04 0,62 0,81
3 semana 0,73 0,13 0,60 0,85 0,71 0,12 0,59 0,84 0,33 0,14 0,21 0,46 0,71 0,13 0,59 0,84 0,64 0,13 0,51 0,77
4 semana 0,66 0,17 0,50 0,82 0,66 0,09 0,50 0,82 0,44 0,09 0,27 0,60 0,73 0,10 0,57 0,89 0,70 0,02 0,54 0,86
5 semana 0,63 0,16 0,48 0,78 0,70 0,07 0,55 0,85 0,37 0,10 0,22 0,52 0,72 0,13 0,57 0,87 0,52 0,08 0,37 0,67
6 semana 0,72 0,18 0,55 0,89 0,68 0,14 0,51 0,84 0,56 0,12 0,39 0,72 0,94 0,14 0,77 1,10 0,70 0,07 0,53 0,86
7 semana 0,61 0,10 0,51 0,70 0,55 0,16 0,45 0,64 0,36 0,13 0,26 0,45 0,76 0,08 0,66 0,85 0,37 0,11 0,27 0,46
8 semana 0,67 0,16 0,52 0,82 0,62 0,23 0,47 0,77 0,49 0,13 0,34 0,64 0,92 0,11 0,77 1,07 0,57 0,11 0,42 0,72
9 semana 0,81 0,13 0,68 0,94 0,54 0,19 0,41 0,66 0,56 0,08 0,43 0,68 1,45 0,07 1,32 1,58 0,47 0,19 0,34 0,60
10 semana 0,72 0,12 0,61 0,83 0,56 0,20 0,45 0,68 0,55 0,03 0,43 0,66 1,21 0,03 1,10 1,32 0,70 0,34 0,59 0,81

Tabela 5.10 Estatsticas da massa acumulada de carbono consumido na biodegradao nos respirmetros em mg
Media
SCNA
Desvio
Padro
SCNA
Minimo
SCNA
Maximo
SCNA
Media 0
CMC
Desvio
Padro 0
CMC
Minimo 0
CMC
Maximo 0
CMC
Media 0,6
CMC
Desvio
Padro 0,6
CMC
Minimo 0,6
CMC
Maximo 0,6
CMC
Media 1,5
CMC
Desvio
Padro 1,5
CMC
Minimo 1,5
CMC
Maximo
1,5 CMC
Media
3 CMC
Desvio
Padro
3 CMC
Minimo
3 CMC
Maximo
3 CMC
1 semana 7,38 0,86 6,56 8,19 4,44 1,65 2,88 6,01 6,04 0,20 5,85 6,24 14,13 0,58 13,58 14,69 5,56 0,43 5,15 5,96
2 semana 12,49 1,54 11,03 13,95 9,20 2,42 6,90 11,50 10,04 1,14 8,96 11,13 21,33 0,81 20,56 22,11 10,62 0,60 10,05 11,19
3 semana 17,34 2,43 15,04 19,65 13,97 3,25 10,88 17,05 12,28 2,10 10,29 14,27 26,10 1,58 24,60 27,60 14,90 1,07 13,88 15,91
4 semana 21,97 3,62 18,53 25,40 18,63 3,83 15,00 22,27 15,34 2,68 12,80 17,89 31,25 2,20 29,16 33,35 19,83 1,07 18,82 20,85
5 semana 26,28 4,70 21,82 30,74 23,39 4,13 19,46 27,31 17,88 3,18 14,85 20,90 36,19 3,01 33,33 39,04 23,39 1,54 21,93 24,85
6 semana 31,41 5,90 25,81 37,02 28,21 5,14 23,33 33,09 21,85 4,07 17,99 25,71 42,87 3,99 39,08 46,66 28,34 2,03 26,42 30,27
7 semana 35,64 6,59 29,38 41,90 32,02 6,27 26,07 37,98 24,35 4,87 19,73 28,98 48,14 4,42 43,94 52,34 30,89 2,76 28,27 33,51
8 semana 40,32 7,55 33,15 47,49 36,39 7,88 28,91 43,87 27,81 5,78 22,32 33,29 54,55 5,16 49,65 59,46 34,89 3,34 31,71 38,06
9 semana 45,96 8,47 37,92 54,01 40,12 9,22 31,36 48,87 31,67 6,22 25,77 37,58 64,63 5,61 59,31 69,96 38,17 3,86 34,50 41,83
10 semana 51,01 9,23 42,24 59,77 44,07 10,56 34,05 54,09 35,49 6,37 29,44 41,54 73,09 5,79 67,59 78,59 43,08 5,46 37,89 48,26

124

Os resultados de massa biodegradada nos respirmetros expressos em
porcentagem de remoo em relao massa inicial de carbono na forma de leo
diesel e surfactante LSS em cada ensaio esto apresentados na Figura 5.9 e na
Tabela 5.11.

0
2
4
6
8
10
12
14
0 200 400 600 800 1.000 1.200 1.400 1.600
P
e
r
c
e
n
t
u
a
l

d
e

c
a
r
b
o
n
o

b
i
o
d
e
g
r
a
d
a
d
o

e
m

r
e
l
a
o

a
o

c
a
r
b
o
n
o

i
n
i
c
i
a
l

(
%
)

Percentual de biodegradao
SCNA
0 CMC
0,6 CMC
1,5 CMC
3 CMC

Figura 5.9 Percentual acumulado de biodegradao de carbono ao longo do tempo

Como no ensaio com lavagem concentrao de 1,5 CMC a amostra tinha a menor
quantidade inicial de carbono (Tabela 4.3) e a taxa de biodegradao foi a maior
(Figura 5.5), os resultados em percentual se destacam ainda mais como a
biodegradao mais significativa. O mesmo ocorreu de forma inversa para o ensaio
com lavagem concentrao de 0,6 CMC (amostra com maior quantidade inicial de
carbono e menor taxa de biodegradao).

125

Tabela 5.11 Percentual de carbono biodegradado em relao ao carbono inicial da amostra
1 semana 1,52% 1,57% 1,25% 1,32% 0,65% 0,84% 0,92% 0,96% 0,90% 3,15% 3,40% 3,37% 1,05% 0,93% 1,07%
2 semana 2,62% 2,62% 2,10% 2,48% 1,47% 1,86% 1,37% 1,72% 1,52% 4,79% 5,04% 5,16% 1,93% 1,84% 2,06%
3 semana 3,69% 3,66% 2,85% 3,68% 2,33% 2,81% 1,59% 2,23% 1,82% 5,69% 6,34% 6,31% 2,54% 2,71% 2,93%
4 semana 4,72% 4,72% 3,49% 4,81% 3,24% 3,72% 2,01% 2,80% 2,23% 6,73% 7,57% 7,66% 3,42% 3,64% 3,81%
5 semana 5,71% 5,66% 4,09% 5,91% 4,25% 4,61% 2,40% 3,29% 2,52% 7,66% 8,91% 8,85% 3,96% 4,37% 4,49%
6 semana 6,93% 6,72% 4,83% 7,16% 5,10% 5,55% 2,92% 4,06% 3,05% 8,96% 10,63% 10,53% 4,77% 5,27% 5,49%
7 semana 7,88% 7,58% 5,51% 8,23% 5,71% 6,28% 3,28% 4,59% 3,31% 10,09% 12,01% 11,73% 5,10% 5,73% 6,10%
8 semana 9,03% 8,47% 6,23% 9,52% 6,35% 7,11% 3,76% 5,28% 3,73% 11,40% 13,67% 13,26% 5,78% 6,35% 7,00%

Tabela 5.12 Quantidade de CO
2
produzida nos respirmetros em Micro Mols
SNC - A SNC - B SNC - C SCNA - A SCNA - B SCNA - C 0 CMC - A 0 CMC - B 0 CMC - C 0,6 CMC - A 0,6 CMC - B 0,6 CMC - C 1,5 CMC - A 1,5 CMC - B 1,5 CMC - C 3 CMC - A 3 CMC - B 3 CMC - C
1 semana 311 333 472 694 706 639 633 500 539 622 633 617 933 978 972 611 583 617
2 semana 311 339 411 589 578 533 583 517 556 478 561 522 644 644 672 556 561 578
3 semana 215 244 278 472 467 406 483 417 433 306 383 328 406 478 450 383 444 444
4 semana 294 300 350 533 539 450 539 494 494 428 472 428 500 533 556 517 528 517
5 semana 300 294 339 522 511 439 528 511 489 417 444 389 478 550 522 433 478 467
6 semana 289 294 372 572 539 472 561 483 500 458 522 461 544 617 611 500 519 542
7 semana 311 294 339 511 494 456 522 433 456 411 456 383 511 556 522 389 417 450
8 semana 256 239 306 506 450 417 517 389 428 394 450 378 494 556 533 417 406 467
9 semana 294 300 333 572 550 500 522 411 456 472 489 444 706 744 725 400 506 428
10 semana 183 183 244 444 406 378 422 311 361 350 367 361 539 550 556 328 511 372

126

6 DISCUSSO
O intuito de preservar as condies biolgicas adaptadas contaminao in situ
para uma avaliao mais realista acarreta a impossibilidade de controlar alguns
parmetros, como as caractersticas geotcnicas e a distribuio de contaminante
nas amostras. Isto torna o trabalho de interpretao dos resultados muito complexo,
pois no possvel isolar apenas uma varivel. Apesar dessa dificuldade, entende-
se que fundamental realizar alguns estudos de biodegradao com ensaios em
solos naturalmente contaminados, para verificar se as tendncias de comportamento
se assemelham quelas obtidas em estudos com contaminao artificial e/ou
inoculao de culturas bacterianas especficas.
Como os experimentos deste trabalho foram realizados com solo naturalmente
adaptado contaminao, o intuito principal foi identificar uma possvel tendncia de
comportamento da biodegradao aps a lavagem do solo com um surfactante.
Os resultados da lavagem (Tabela 5.6) demonstraram que at 1,5 CMC no houve
nenhum aumento da remoo de HPA, enquanto que para a lavagem com 3 CMC
houve um aumento na remoo de fenantreno em todas as amostras lavadas e para
naftaleno em uma das amostras. No entanto, o aumento de remoo foi
insignificante do ponto de vista prtico; a remoo mxima observada de fluoreno,
de 7,6%, no indica a tcnica de lavagem com surfactante para a remoo de HPA
residual. Apesar disso, o ensaio cumpriu seu principal objetivo, que foi o de simular a
lavagem do solo para permitir a avaliao de seu efeito na posterior biorremediao.
Em contrapartida, a biodegradao mostrou-se bastante efetiva para a remoo dos
compostos do leo diesel residual, pois se observou biodegradao de 8% de HPA
nos respirmetros com solo contaminado mas no submetido lavagem, no perodo
de 8 semanas.
O cruzamento dos dados de massa de carbono biodegradada nas 8 primeiras
semanas e da concentrao de LSS aplicada na lavagem (Figura 6.1) no
demonstra nenhuma tendncia clara.
127

0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5
M
a
s
s
a

d
e

c
a
r
b
o
n
o

b
i
o
d
e
g
r
a
d
a
d
a

(
m
g
)
Concentrao de LSS em CMC
Correlao Massa biodegradada x concentrao de LSS
(acumulado at 8 semana)

Figura 6.1 Cruzamento dos dados de massa biodegradada na 8 primeiras semanas com a
concentrao de LSS no meio.

Uma anlise superficial destes resultados pode induzir a concluso de que a
lavagem com surfactante na concentrao de 1,5 CMC promoveu um aumento da
biodegradao dos hidrocarbonetos presentes no solo. No entanto, conforme j
discutido anteriormente, os ensaios no tm como nica varivel a concentrao de
surfactante aplicada, mas tambm a variao de substrato (contaminante) presente
na amostra (Tabela 4.3) e a existncia de LSS como substrato para a
biodegradao.
Investigando-se a correlao entre a massa biodegradada acumulada at a 8
semana e a massa inicial de carbono das amostras, observa-se uma razovel
correlao linear inversamente proporcional (Figura 6.2), o que sugere um
comportamento tipicamente de substrato com toxicidade, que inibi a degradao.
128

y = -0,1005x + 91,293
R = 0,7546
0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
380,0 430,0 480,0 530,0 580,0 630,0 680,0
M
a
s
s
a

d
e

c
a
r
b
o
n
o

b
i
o
d
e
g
r
a
d
a
d
a

(
m
g
)
Massa Inicial de carbono (mg)
Correlao Massa biodegradada x Massa inicial (acumulado at 8 semana)

Figura 6.2 Correlao entre a massa biodegradada acumulada nas 8 primeiras semanas e a
massa inicial de carbono

Verificou-se que as duas primeiras semanas (Figura 6.3 - A) apresentaram
comportamento significativamente diferente das 6 semanas seguintes (Figura 6.3 -
B).
129

Figura 6.3 Correlao entre a massa biodegradada acumulada e a massa inicial de carbono
para at a 2 semana (A) e entre a 2 e a 8 (B)

Lembrando que o estudo de Margesin (1999) mostrou que o surfactante LSS foi
degradado nos 15 primeiros dias (Figura 3.36), sugere-se que a influncia do
surfactante ocorreu somente nas duas primeiras semanas. Esta concluso foi
reforada pela falta de correlao observada nos resultados obtidos aps a adio
130

de 5 mL de soluo de LSS nas respectivas concentraes em cada respirmetro
aps a oitava semana. (Figura 6.4).

y = -0,0328x + 26,809
R = 0,4581
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
380,0 430,0 480,0 530,0 580,0 630,0 680,0
M
a
s
s
a

d
e

c
a
r
b
o
n
o

b
i
o
d
e
g
r
a
d
a
d
a

(
m
g
)
Massa Inicial de carbono (mg)
Correlao Massa biodegradada x Massa inicial (8 - 9
semana)

Figura 6.4 - Correlao entre a Massa biodegradada acumulada (8 10 semana) e a massa
inicial de carbono

No perodo aps a adio dos 5 mL, na 8 semana, novamente as amostras na
condio de 1,5 CMC apresentaram um aumento significativo na taxa de
degradao. Com isto, a sugesto de que a presena de surfactante a 1,5 CMC
promove um aumento na biodegradao dos hidrocarbonetos aparentemente
mostrou-se verdadeira. No entanto, a massa de carbono adicionalmente
biodegradada aps a dosagem inicial de surfactante foi inferior massa de carbono
adicionada na forma de surfactante; ou seja, o aumento da biodegradao parece ter
ocorrido pela degradao do surfactante e no dos hidrocarbonetos.
Os resultados mostram claramente que a insero de surfactante no meio promove
uma alterao na biodegradao, variando entre o estmulo e a inibio, porm no
permitem uma avaliao mais aprofundada desta influncia.
Ressalta-se que o comportamento subseqente ao perodo de influncia do
surfactante foi claramente governado pela concentrao inicial de substrato, sendo
131

que para as amostras com menor quantidade de substrato observou-se maior
biodegradao de HPA, o que o comportamento tpico do modelo de Haldane, em
especial em relao ao intervalo de concentraes que provocam inibio (Figura
6.5).

Concentrao de Substrato
T
a
x
a

d
e

C
r
e
s
c
i
m
e
n
t
o

C
e
l
u
l
a
r
max
S
Haldane
Range de Inibio

Figura 6.5 Condio de inibio observada como no modelo de Haldane

A curva obtida na Figura 6.3 B representaria, portanto, o intervalo de
concentraes do substrato de inibio do modelo de Haldane.
Alm da observao do fenmeno de inibio nas condies de contaminao do
solo, possvel prever que com o tempo e a consequente reduo da quantidade de
substrato presente, existe a tendncia de a biodegradao aumentar, atingindo a
taxa de biodegradao mxima (
max
), para ento reduzir novamente.

132

7 CONCLUSES
A lavagem do solo contaminado com leo diesel por soluo de surfactante
LSS a concentraes at 3 CMC no acarretou remoo significativa de HPA
residual.
A biodegradao de leo diesel no solo sem a adio de surfactante
apresentou uma taxa de biodegradao mdia de 1% do carbono inicial por
semana.
A influncia do surfactante na biodegradao aparentemente limitou-se a
aproximadamente 14 dias aps sua adio, sendo que em geral o mesmo
provocou um aumento na massa de carbono biodegradada, porm no
superior massa de carbono adicionada na forma de surfactante.
No intervalo de tempo em que a presena do surfactante aparentemente no
mais apresentou influncia na biodegradao (2 a 8 semana de incubao),
observou-se uma correlao linear significativa (R= 0,9551 - Figura 6.3 - B)
entre a taxa de biodegradao e a massa inicial de contaminante.
A correlao observada foi inversamente proporcional, o que demonstrou que
o leo diesel apresenta cintica de biodegradao condicionada pela inibio
da degradao com o aumento da concentrao do prprio substrato
(contaminante), como descrito por Haldane.

133

8 CONSIDERAES E SUGESTES DE CONTINUIDADE DOS
ESTUDOS
As dificuldades de interpretao dos resultados de biodegradao neste estudo
seriam reduzidas caso a biodegradao tivesse sido avaliada por meio de ensaios
em biorreator, com anlises especficas dos compostos presentes no solo. Isto no
foi possvel pela restrio de volume de solo das amostras indeformadas, mas uma
sugesto para prximas pesquisas.
Apesar da possibilidade de ocorrer um acrscimo na biodegradao com a aplicao
do surfactante, a biodegradao naturalmente observada significativamente alta,
em especial em regies tropicais como o Brasil. No entanto, so poucas as
referncias nacionais de investigaes sobre taxas de biodegradao natural de
poluentes orgnicos no solo. A obteno e a organizao desse conhecimento so
fundamentais ao balizamento das tcnicas a serem aplicadas em reas
contaminadas por poluentes orgnicos.
Estudos que visem investigar a biodegradao natural de um determinado
contaminante no solo devem preferencialmente utilizar amostras de solo
previamente contaminado, ou seja, com a biota j adaptada contaminao. Tendo
em vista os resultados observados neste estudo, sugere-se que futuras
investigaes sejam realizadas com uma faixa mais larga de concentraes iniciais,
de modo a possibilitar a determinao dos parmetros cinticos de degradao
(Haldane ou Monod).
134

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Anexo I Relatrio Fotogrfico
143

Foto 1 Lauril Sulfato de Sdio utilizado
144

Foto 2 Mangueira de PEBD

Foto 3 Pedra porosa

145

Foto 4 Fixao e vedao da pedra porosa e dos papeis filtros com fita teflon

Foto 5 Funil de vidro
146

Foto 6 Anel de teflon

Foto 7 Kitassato de 250 ml
147

Foto 8 Rolha de borracha do kitassato

Foto 9 Conexo com mangueira de silicone
148

Foto 10 Manuteno da temperatura ambiente 20C

Foto 11 Detergente neutro
149

Foto 12 - Diclorometano
150

Foto 13 Pesagem do LSS

Foto 14 Armazenamento das solues de LSS
151

Foto 15 Refrigerador para conservao da amostra
152

Foto 16 Frasco mbar utilizado para coleta de gua

Foto 17 Estufa
153

Foto 18 Dessecador

Foto 19 Sulfato de amnio

Dissertacao Nicolas M Rodrigues

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