FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA DE OBSTETRICIA Y PUERICULTURA

GUA DE ACTIVIDADES PRCTICAS DE LABORATORIO MICROBIOLOGA

Profesora: Tecn !o"o M#$%co C%n&%a A'en$a(o

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NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO En la ejecucin de actividades prcticas de Laboratorio de Microbiologa, existir el riesgo de exposicin a cepas microbianas comensales, patgenas o potencialmente patgenas, por lo que en razn de su seguridad y del grupo de trabajo, usted tendr !a o)!%"ac% n de seguir y respetar las siguientes precauciones de bioseguridad: eber ingresar al laboratorio con delantal blanco, pelo largo tomado !en el caso de los "ombres, idealmente corto#, a$eitado, y con las u%as cortas, sin pintura&

El tiempo mximo de retraso para el ingreso a las actividades es de '( minutos& Los bolsos o moc"ilas quedarn en el mesn lateral del laboratorio, dejando sobre el mesn de trabajo )nicamente lpiz demogr$ico o plumn de tinta permanente, y lpiz de pasta color azul o negro para responder los controles escritos& *uando deba esperar su ingreso al laboratorio NO MANIPULE la duc"a de emergencias que se encuentra en el pasillo de circulacin& Mantenga su tel+$ono celular apagado dentro del bolso cuando se encuentre dentro del laboratorio& ,ntes de ubicarse en su puesto de trabajo, lave cuidadosamente las manos siguiendo las indicaciones re$eridas a lavado clnico& -odo el material que use en el laboratorio debe considerarse como . CONTAMINADO / y, por lo tanto, debe manejarse con cuidado, procurando no dejarlos en los mesones sino eliminarlos slo en los recipientes dispuestos para ello& En la eventualidad de cualquier accidente, por peque%o que parezca, debe comunicarse inmediatamente al pro$esor a cargo de la actividad& 0espete s%e*+re las indicaciones que se darn durante las primeras actividades prcticas respecto al uso del mec"ero para la esterilizacin de asas, tubos u otros materiales& Est estrictamente pro"ibido ingerir cualquier tipo de alimento o bebida en el laboratorio& 1ams debe sacar material contaminado o cultivos bacterianos $uera del laboratorio& 2o "aga bromas, ni permita que sus compa%eros las "agan, con cultivos bacterianos o material contaminado& 3uien tenga un comportamiento inadecuado a las normas del laboratorio, deber abandonar el laboratorio inmediatamente y quedar consignado en el acta de clases& ,l terminar su trabajo prctico debe limpiar su rea de trabajo con la solucin desin$ectante que se le proporcionar& 4u microscopio debe quedar igualmente limpio y debidamente guardado& ,ntes de abandonar el laboratorio lave cuidadosamente sus manos&

550ecuerde66

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E! +r%nc%+a! res+onsa)!e $e s, se",r%$a$ es ,s&e$

INSTRUCTIVO DE LAVADO DE MANOS

'& ,plicar una dosis de producto, extenderlo por toda la super$icie de las manos y $riccionarlas "asta que queden secas !78#& 9& *uando se laven las manos con agua y jabn, mojarlas con agua y aplicar la cantidad de producto necesaria para extenderlo por toda la super$icie de las mismas& :& ;rotarse en+rgicamente ambas palmas con movimientos rotatorios y entrelazar los dedos para cubrir toda la super$icie& Enjuagarse las manos con agua y secarlas completamente con una toalla desec"able& 4iempre que sea posible, utilizar agua corriente limpia& <tilizar la toalla para cerrar el gri$o !78#& =& ,segurarse de que las manos est+n secas& <tilizar un m+todo que no las contamine de nuevo& *erciorarse de que las toallas no se utilicen varias veces o por varias personas !78#& 2o emplear agua caliente porque la exposicin repetida a ella eleva el riesgo de dermatitis !78#& >& ?ara el lavado de las manos con agua y un jabn no antimicrobiano pueden emplearse jabones simples lquidos, en pastilla, en "ojas o en polvo& Las pastillas de jabn deben ser peque%as y colocarse sobre rejillas que $aciliten el drenaje !77#& IMPORTANTE: EL USO DE GUANTES NO SUSTITUYE AL LAVADO DE MANOS !;<E2-E: 70E*-07*E4 4,27-,07,, 9((># E L, @M4 4@80E A7B7E2E E L,4 M,2@4 E2 L, ,-E2*7C2

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LABORATORIO N- . 8,*-E07,4 D ,BE2-E4 EE-E02@4 Muc"os microorganismos !M&@&# son nocivos para el ser "umano, por lo que desde varios siglos atrs se "an buscado y empleado diversos m+todos $sicos o qumicos de eliminacin y destruccin, tendientes a evitar en$ermedades, alteracin de elementos u otros e$ectos indeseables que puedan producir en el medio donde se encuentran& Entre estos procesos de eliminacin de microorganismos se encuentra la es&er%!%/ac% n, que abarca los procesos orientados a destruir toda $orma de vida !virus, bacterias, "ongos, parsitos, etc&# que pueda existir en instrumentos, sustancias u otro tipo de materiales& Estos m+todos de esterilizacin son cruciales en la clnica m+dica y "ospitalaria, por su papel en el control de posibles $uentes de in$eccin para el "ombre& -ambi+n se considera entre estos m+todos la $es%nfecc% n, que est orientada a la disminucin de la carga potencialmente in$ectante desde piel, mucosas y tejidos propios del paciente& CLASIFICACION DE LOS METODOS DE ESTERILI0ACION METODOS FISICOS *alor 0adiaciones METODOS 1UIMICOS esin$ectantes ,ntis+pticos METODOS MECANICOS ;iltracin *entri$ugacin <ltrasonido

.2

METODOS FISICOS

F!a*ea$o o L!a*ea$o: Exposicin directa a la llama por un tiempo mnimo de '( segundos&

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Ca!or seco: Esterilizacin por aire caliente circulante en Aornos ?asteur& La esterilizacin se produce en todo material vivo debido al aumento exagerado de los procesos oxidativos& 1eringas, agujas y material de vidrio que se desee dejar libre de pirgenos: 9((F * durante :( a G( minutos& Material de vidrio !tubos de ensayo, placas petri, $rascos para toma de muestras#: 'H(F * por G( minutos&

Ca!or 34*e$o: ,ccin de vapor saturado a baja presin, con mayor poder de penetracin que el calor seco, produce la muerte de microorganismos por la coagulacin de las protenas del protoplasma& 4e emplea I,utoclaveI& 4e recomienda principalmente para la esterilizacin de medios de cultivo a temperaturas entre '(> a '9(F *&

Ra$%ac%ones: 4e utiliza para materiales que no resisten altas temperaturas o sustancias qumicas, principalmente material de plstico& Ra$%ac%ones ,!&ra'%o!e&as: 4e utilizan para descontaminacin principalmente de aire y algunos equipos&

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52 METODOS 1UMICOS Des%nfec&an&es: Beneralmente son bactericidasJ se aplican sobre objetos inanimados& Ejemplo: ;ormald"edo, Blutarald"edo, @rto$talalde"do, *loro, ,lco"ol&

An&%s#+&%cos: -ienen menor toxicidad para los tejidos, pudiendo utilizarse para desin$ectar tejido "umano& Ejemplo: ?ovidona yodada, ,gua oxigenada, ,lco"ol&

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TRABA6O DE LABORATORIO .2 ACCION DE AGENTES 1UIMICOS SOBRE LAS BACTERIAS Ma&er%a!es: ?lacas de ,gar Mac *onKey ?lacas de ,gar sangre ' ml de suspensin bacteriana en caldo nutritivo& ,gua corriente ,gua destilada ,gua jabonosa PROCEDIMIENTO N- . 1. <sted tiene una batera de N tubos conteniendo cada uno ' ml de suspensin bacteriana& -rabaje cada tubo de la manera que a continuacin se se%ala, dispensando con una pipeta pasteur plstica la solucin que se indica: 4olucin de cloro (&>L Etanol al M(L Etanol NGL ,lco"ol yodado ,gua oxigenada

AGUA AGUA AGUA CLOR ETAN CORRIEN DESTILA JABONO O OL TUBO TE DA SA 0.5% 70% 1 1ml 2 1ml 3 1ml 4 1ml 5 1ml 6 7 8 9
OO El tubo N corresponde a un tubo control ESTERILI0ACI7N DEL ASA MICROBIOL7GICA

ETAN OL 96%

ALCOH OL YODAD O

AGUA OXIGENA CONTRO DA L

1ml 1ml 1ml 1ml

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2.

<na vez preparado cada tubo, realice una siembra de la suspensin en una placa de ,gar Mac *onKey& RECUERDE MARCAR LA PLACA con el n)mero de la suspensin correspondiente&

2 1 4 5 3 6

4embrar cada solucin en un espacio de la placa 4embrar en $orma de estra

Estra

3. 4.

<na vez realizada la siembra, se debe incubar las placas en estu$a a :M P* por 9= "oras& <na vez cumplido dic"o lapso de tiempo, las placas se retirarn de la estu$a y se guardarn a = P* para su posterior evaluacin del crecimiento bacteriano, comparando el grado de desarrollo entre las di$erentes placas& *ompare el crecimiento de cada espacio de la placa con el crecimiento bacteriano del tubo 2F N, registrando los resultados obtenidos, de acuerdo a los criterios 472 *0E*7M7E2-@, E4*,4@, M@ E0, @ @ ,8<2 ,2-E, en la siguiente tabla

5.

TUB O 1 2 3 4 5 6 7 8 9

SOLUCI N ESTERILI!ANTE A"LICADA AGUA CORRIENTE AGUA DESTILADA AGUA JABONOSA CLORO 0.5% ETANOL 70% ETANOL 96% ALCOHOL YODADO AGUA OXIGENADA CONTROL

CRECI#IENT O BACTERIANO

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PROCEDIMIENTO N- 5 '& 9& :& =& >& ?ara esta actividad, no lave sus manos& En una placa de cultivo de ,gar sangre, "aga : divisiones, como se muestra en la gr$ica& En la primera seccin de la placa deposite su dedo, tal como si $uese a marcar su "uella digital& Luego lave sus manos con jabn y repita el procedimiento anterior en la segunda seccin de la placa& ?osteriormente limpie su dedo con alco"ol yodado y repita el mismo procedimiento ya descrito pero en la seccin tres&

4eccin 2F':

edo solo edo con jabn edo con alco"ol yodado

1 3

4eccin 2F9: 4eccin 2F::

G& M&

<na vez "ec"os los procedimientos antes se%alados, lleve la placa a incubacin en estu$a a :MF* por 9= "oras& ?asado el perodo de incubacin observe el crecimiento bacteriano en la placa y registre sus observaciones en la tabla:

SECCI N "LACA 1 2 3

CONDICIONES DEDO SIN LA$AR DEDO LA$ADO CON AGUA Y JAB N DEDO LA$ADO CON ALCOHOL YODADO

CRECI#IENTO BACTERIANO

El registro de crecimiento bacteriano se "ace indicando los siguientes criterios: 4in crecimiento Escaso Moderado

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,bundante

LABORATORIO N- 5 M@0;@L@BQ, 8,*-E07,2, Las bacterias seg)n su mor$ologa se pueden clasi$icar en: .2 Cocos 8esf#r%cas9& ?resentan $orma es$+rica o casi es$+rica ya que sus dimetros !largo y anc"o# son casi iguales& Los cocos se pueden clasi$icar seg)n su agrupacin en: *+lulas agrupadas en ?ares ! iplococos# *+lulas agrupadas en cadenas cortas y largas !estreptococos# *+lulas agrupadas en $orma de racimo !esta$ilococos# 52 Bac%!os o Bas&ones 8c%!:n$r%cas92 Estas c+lulas se caracterizan porque uno de los ejes o dimetro es notablemente mayor que el otro, de tal manera que se observan como bastoncitos de di$erente anc"o y longitud& e acuerdo a su agrupacin se pueden presentar: 4in agrupacin o agrupacin irregular *+lulas aisladas en parejas *+lulas en cadenas isposicin celular, una al lado de la otra ;2 <e!%co%$a!es o c,r'as 8Es+%ra!es92 Beneralmente de presentacin aisladaJ las c+lulas son muy largas en relacin a su anc"o y se observa una torcin alrededor de su eje !espiras#&

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La observacin de la mor$ologa bacteriana se realiza utilizando colorantes biolgicos que permiten aumentar el contraste entre la c+lula bacteriana y el medio que las contiene& La t+cnica ms utilizada para el estudio de la mor$ologa bacteriana es la tincin de Bram&

TINCION DE GRAM Esta tincin $ue desarrollada por *"ristian Bram en 'HH=& , pesar del tiempo transcurrido la tincin apenas se "a modi$icado y es uno de los primeros pasos que se realiza para cualquier identi$icacin bacteriana, permitiendo con esto la orientacin adecuada de un diagnstico clnico& La t+cnica es capaz de di$erenciar las bacterias en dos grandes grupos: Bram !R# y Bram !S# !gram positivas y gram negativas#&

La di$erenciacin entre gram positivas y gram negativas se basa en el componente estructural de la pared celular de las bacterias&

GRAM NEGATIVA
Presentan una membrana interna rodeada por una pared celular delgada de peptidoglucano. Hacia el lado externo tienen una membrana que recubre la pared celular. Entre la membrana interna y externa se encuentra el espacio peripl smico que contiene en!imas importantes para la nutrici"n. #a membrana externa presenta una estructura llamada lipopolisac rido $#P%& El #P% est 'ormado por tres regiones( el polisac rido ) $antgeno )&* una estructura polisac rida central $+,)& y el lpido - $endotoxina&.

GRAM POSITIVA
%u pared externa de la en.oltura celular es del peptidoglucano murena* que es un polmero de /0acetil020,0glucosamina* con n0 acetilmur mico. Esta mol1cula se polimeri!a gran cantidad de .eces* de modo que se 'orma una malla especial* llamada s culo de murena. ,ic2o compuesto es de .ital importancia para conser.ar la 'orma y darle rigide! a la c1lula bacteriana

i$erenciaremos entre bacterias gram positivas !BR# y gram negativas !BT# radica en la composicin y grosor de su envoltura celular& La pared gruesa de las bacterias Bram !R# permite

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que el colorante quede atrapado en su interior, mientras que las bacterias Bram !T# por poseer una pared mas delgada son decoloradas $cilmente&

La t+cnica para la tincin requiere de cuatro pasos en que se aplican soluciones bsicas: '& ?rimer colorante: Cr%s&a! V%o!e&a *olorante bsico que en contacto con las c+lulas reacciona con ellas colorendolas de un color azul intenso& 9& 4olucin mordiente: L,"o! ,ct)a como laca o mordiente, $ijando la tincin y aumentando la a$inidad entre el colorante y las c+lulas bacterianas& :& ,gente ecolorante: A!co3o!=Ace&ona Es un disolvente orgnico que retira el colorante no internalizado por las c+lulas& =& *olorante de contraste: Safran%na Es un colorante bsico que ti%e las c+lulas luego de ser decoloradas por el solvente orgnico& 4e mani$iesta de una coloracin rosada intensa& Los dos grupos bacterianos que distingue esta t+cnica di$ieren en el color con el que $inalmente aparecen& Las bacterias Bram !R# se te%irn de azul por el cristal violeta y no perdern esta coloracin en los pasos sucesivos& Las bacterias Bram !S# se te%irn de rosado intenso por la sa$ranina, ya que estas bacterias pierden la coloracin inicial del cristal violeta&

Grac%as a !a T%nc% n $e Gra* +,e$en e'a!,arse: Af%n%$a$ T%n&or%a!> Morfo!o":a ? A"r,+ac% n

COCACEAS GRAM POSITIVAS AGRUPACIN EN RACIMOS

BACILOS GRAM NEGATIVOS AGRUPACIN IRREGULAR

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COCACEAS GRAM POSITIVAS AGRUPACIN EN CADENA

BACILOS GRAM POSITIVOS AGRUPACIN EN CADENA

TRABA6O DE LABORATORIO Ma&er%a!es ?ortaobjetos Microscopio ,ceite de inmersin .2 Pre+arac% n )ac&er%ana: 4et de -incin de Bram ?lacas con bacterias Bram !R# y Bram !T# *ubetas de tincin

En un portaobjeto colocar una gota de agua o caldo est+ril y a partir de una placa de cultivo se toma una colonia con el asa y posteriormente se realiza una disolucin de las bacterias extradas del cultivo con el agua&

La preparacin se seca a temperatura ambiente o al calor de un mec"ero teniendo la precaucin de no exponerla demasiado al $uego directo, ya que esto perjudica la evaluacin de la $orma y tincin de las bacterias& <na vez seca la lmina se ti%e&

@2 T%nc% n 14

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Ejecute la t+cnica de la $orma que a continuacin se detall:

'& isponga la preparacin bacteriana sobre la cubeta dise%ada para realizar la tincin& '& *ubra la lmina con *ristal violeta durante ' minuto& 9& Lave el exceso de colorante con agua

:& *ubra con Lugol durante ' minuto& =& Lave el exceso de lugol con agua&

>&

ecolore con solucin alco"olT acetona durante 9( segundos&

G& Lave con abundante agua para eliminar el exceso de disolvente&

RESULTADOS Y OBSERVACIONES:

M& *ubra la lmina con 4a$ranina durante :( segundos& H& 4ecar la preparacin y observar al microscopio con aceite de inmersin& 2@-,: Luego de cada lavado elimine el exceso de agua para evitar la dilucin del colorante o solucin empleada& isponga cada solucin durante el tiempo estrictamente estipulado&

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Res,!&a$os e %n&er+re&ac% n:

'& ,l microscopio, observe la $orma de de las bacterias usando el objetivo =(x, $ijndose especialmente en el color de la preparacin para clasi$icarlas en Bram R o Bram T& Ej: 8acilos Bram !R#, 8acilos Bram !T#, *ocaceas Bram !R# o *ocaceas Bram !T# 9& Establezca la $orma en que se agrupan las bacterias observadas& Ej: En cadena, racimos, agrupacin irregular, etc&

OBSERVACI7N MICROSC7PICA
%OR#A TINCI N GRA# AGRU"ACI N

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LABORATORIO N- @

CULTIVO E IDENTIFICACION DE BACTERIAS

MEDIOS DE CULTIVO Y MATODOS DE SIEMBRA El cultivo de las bacterias en el laboratorio es esencial para la identi$icacin de estos microorganismos& El cultivo consiste en observar el crecimiento de las bacterias en medios especiales que contengan los nutrientes que $avorezcan su desarrollo& El medio que contiene estas sustancias alimenticias se denomina medio de cultivo y existen en gran variedad& ?ara el crecimiento bacteriano adems de un medio de cultivo adecuado es necesario mantener condiciones de temperatura, "umedad y pA& CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO Los medios de cultivo son una mezcla equilibrada de nutrientes que en concentraciones adecuadas y con condiciones $sicas ptimas permiten un buen crecimiento de los microorganismos& *ontienen una base mineralJ $uente de carbono, nitrgeno y azu$reJ atms$era adecuada y los $actores de crecimiento necesarios& Los medios de cultivo se pueden clasi$icar de acuerdo a su estado y de acuerdo a sus componentes& Se"4n s, es&a$o

4e pueden clasi$icar en slidos, lquidos y semislidos& El estado del medio o consistencia se obtiene a partir de un agente solidi$icante !agar# que en mayor o menor concentracin permite obtener el estado adecuado para el medio ,&T Medios lquidos: el crecimiento de las bacterias se mani$iesta por turbidez en todo el medio& 8&T Medios slidos: el crecimiento de las bacterias se observa en $orma de colonia en la super$icie del medio& *&T Medios semislidos: el crecimiento de las bacterias se mani$iesta por turbidez en todo el medio y por colonias en la super$icie&

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Se"4n s, co*+os%c% n:

,&T Me$%os )Bs%cos: @torgan un mnimo de nutrientes a las bacterias& 8&T Me$%os *eCora$os: *ontienen sustancias enriquecedoras como sangre, suero, etc&

*&T Me$%os se!ec&%'os: Medio que slo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e in"ibe el de otros& &T Me$%os $%ferenc%a!es: 4on aquellos destinados a demostrar alguna propiedad bioqumica de la bacteria& ;&T Me$%os se!ec&%'os=$%ferenc%a!es: metablica de las bacterias& emuestran capacidad $ermentativa o

B&T Me$%os es+ec%a!es: ?ermiten el aislamiento de una bacteria espec$ica& Los medios de cultivo se pueden disponer en di$erentes recipientes& Es as como en el laboratorio existen medios dispuestos en placas y en tubos&

3edio extendido en tubo o -gar tendido

METODOS DE SIEMBRA 4e pueden distinguir dos tipos de siembra: 18

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En super$icie: *orresponde a la modalidad ms empleada& En pro$undidad: 4e utiliza en las pruebas de identi$icacin bacteriana

Las siembras se pueden realizar directamente desde una muestra clnica que contenga un microorganismo, desde otro cultivo bacteriano o desde un inculo&

In c,!o: suspensin de bacterias en un volumen peque%o de medio lquido que generalmente es un caldo nutritivo bsico o agua destilada&

;orma correcta de sembrar en tubo Estra de crecimiento

-sa

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%iembra en pro'undidad $picadura&

%iembra en super'icie

Las siembras se pueden realizar con di$erentes elementos, entre ellos: a# 4iembra con asa: 4e puede realizar: tomando un inculo a partir de una suspensin de bacterias o para sembrar muestras biolgicas lquidas !orinas, lquido ce$alorraqudeo, etc&# ?ara $ormar una estra de crecimiento a partir de un inculo realizado con trula& ?ara realizar traspaso de bacterias de un medio a otro, tomando directamente una porcin de una colonia&

b# 4iembra con trula: La trula est compuesta de algodn "idr$ilo, lo que permite empapar este material con el $luido en el que se desea estudiar una bacteria& Beneralmente para que las bacterias permanezcan viables se utilizan medios de cultivo denominados Ide transporteI, en el que se sumerge la trula& La siembra se realiza depositando la trula sobre una seccin de la placa y posteriormente se realiza la estra de crecimiento con asa& c# 4iembra con pipeta pasteur: 4e realiza para sembrar bacterias en suspensin&

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TRABA6O DE LABORATORIO
Ma&er%a!es ?lacas de ,gar Mac *onKey y ,gar 4angre -ubos con caldo nutritivo -rulas est+riles para toma de muestra Proce$%*%en&o N- . '& @bserve y registre las caractersticas ms importantes de los medios de cultivo que se presentarn& 9& @bserve las caractersticas macroscpicas de las colonias bacterianas presentes en los cultivos que se le entregarn& !*olor, ;orma, Aemlisis, tama%o# Proce$%*%en&o N- 5: S%e*)ra '& <sted dispone de dos medios de transporte que contienen material biolgico contaminado con bacterias& !-rula 2F ' y 2F 9# 9& e la trula 2F ' realice una siembra en la mitad de una placa de agar Mac *onKey de la manera en que se explic $rente al grupo& *ultivos bacterianos ,sa ?ortaobjetos

:& 0ealice una suspensin en caldo nutritivo sumergiendo la trula en el tubo que contiene el medio& 2@-,: 2o olvide registrar la placa, tubo y portaobjeto con el n)mero de la trula trabajada y con una se%al que identi$ique a su grupo& =& e la trula 2F 9 realice una siembra en la mitad de una placa de agar 4angre&

>& 0ealice una suspensin en caldo nutritivo sumergiendo la trula en el tubo que contiene el medio& G& Luego de realizar estas siembras !placas y suspensiones# incube en estu$a a :MF * durante 9= "oras, tras las cuales debe evaluar el crecimiento bacteriano& Proce$%*%en&o N- ;: S%e*)ra $e *,es&ras )%o! "%cas

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'& 0ealice una toma de muestra de secrecin nasal de alguno de los integrantes del grupo& 9& 4iembre la muestra en las mitades restantes de las placas de agar sangre y Mac *onKey e incube durante 9= "oras a :MF *&

LABORATORIO N- D

ESTUDIO DE COCACEAS GRAM POSITIVAS

entro de las bacterias cocaceas Bram positivas destacan dos g+neros de gran importancia clnica: Staphylococcus y Streptococcus ,mbos g+neros son mor$olgicamente muy similares, sin embargo su identi$icacin en el laboratorio se basa en pruebas que determinan caractersticas propias de cada g+nero y ms a)n entre las especies pertenecientes a cada g+nero&

Staphylococcus
entro de este grupo destacan algunas especies de importancia clnica como son: Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus sapropyticus Staphylococcus hominis

En general, este g+nero se caracteriza por desarrollar colonias relativamente grandes, redondas, lisas y brillantes& ,l microscopio generalmente se agrupan en $orma de racimos& ?oseen una pigmentacin blanca, amarilla o dorada seg)n la especie& ,l cultivar estas bacterias en agar sangre pueden o no presentar "emlisis, es decir, lisan o rompen los glbulos rojos presentes en el medio de cultivo por la presencia de enzimas especiales para este $in& -ienen la caracterstica de crecer en medios con elevada concentracin de sal o cloruro de sodio, lo que les brinda una caracterstica di$erencial importante& @tras caracterstica que permiten su identi$icacin son la produccin de *atalasa, coagulasa y susceptibilidad a la 2ovobiocina& CATALASA Es una caracterstica de todas las especies de Staphylococcus. La catalasa es una enzima que desarrollan como mecanismo de de$ensa que les permite neutralizar los productos txicos derivados del metabolismo del oxgeno& Los Streptococcus no poseen catalasa, por lo que esta prueba es muy importante a la "ora de di$erenciar ambos grupos&

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COAGULASA Esta prueba es )til para identi$icar una especie de Staphylococcus en especial, el Staphylococcus aureus. La sntesis de esta enzima permite la coagulacin del plasma y una prueba positiva identi$ica con certeza a la especie mencionada& SUSCEPTIBILIDAD A LA NOBOVIOCINA Esta prueba es )til para di$erenciar el Staphylococcus sapropyticus de otras especies coagulasa negativo& 4e realiza poniendo en contacto las bacterias con el antibitico, lo que permite evaluar si "ay o no desarrollo bacteriano& La prueba positiva indica que existe resistencia a la novobiocina, por que a)n cuando el antibitico est presente, existe crecimiento& PRUEBA <e* !%s%s Ca&a!asa Coa",!asa No'o)%oc%na S. aureus E E E = S.epidermidis =FE E = = S.saprophyticus = E = E S.hominis =FE E = =

Streptococcus
La clasi$icacin de los Streptococcus se basa principalmente en la "emlisis que producen en agar sangre& Los tipos de "emlisis que se pueden observar son: Aemlisis parcial o Aemlisis: 4e visualiza como un anillo verdoso en torno a la colonia Aemlisis -otal o Aemlisis: 4e visualiza como un anillo transl)cido en torno a la colonia 4in "emlisis o Aemlisis: no se observa actividad "emoltica Existe otra clasi$icacin seg)n un componente estructural y se designan seg)n letras may)sculas: Brupo ,, 8, *, , B& ?ara di$erenciar las di$erentes especies existen pruebas especiales como: @ptoquina, 8acitracina e Aipurato de sodio& OPTO1UINA ?ermite di$erenciar Streptococcus pneumoniae "emoltico de otras especies "emolticas& 4lo el S.pneumoniae es sensible a la optoquina& BACITRACINA ?ermite di$erenciar Streptococcus "emoltico del grupo , !S. pyogenes# del resto de 4& "emoltico que no son sensibles a la bacitracina&

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<IPURATO DE SODIO Los microorganismos que poseen la enzima "ipuricasa "idrolizan el "ipurato sdico $ormando benzoato sdico y glicina& La 2in"idrina es capaz de reaccionar con productos de esta reaccin lo que permite observan un color morado& Esta prueba permite identi$icar al S.agalactiae

ES1UEMA GENERAL DE IDENTIFICACI7N

Streptococcus
"emoltico O+&oG,%n "emoltico Bac%&rac%na

E
S. pneumoniae

=
otros

E
S. pyogenes

=
<%+,ra&o

E
S.agalactiae

=
otros

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TRABA6O DE LABORATORIO
HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH Ma&er%a!es ?lacas de agar sangre con Staphylococcus ?lacas de agar sangre con Streptococcus 4ensidiscos de 2ovobiocina y 8acitracina ?ortaobjetos -ubos con plasma ,sas ?inzas y $rascos de alco"ol ,gua @xigenada al :L

PROTOCOLOS DE TRABA6O PARA EL ESTUDIO DE COCCEAS GRAM 8E9 Es&,$%o $e Staphylococcus

Pr,e)a $e !a ca&a!asa '& 9& :& =& -ome una colonia de la placa de cultivo con un asa& ?erxido de "idrgeno al :L 4i se producen burbujas la reaccin es positiva& S% !a +r,e)a es +os%&%'a %n$%ca G,e es ,n S taphylococcus ? s% es ne"a&%'a es ,n Streptococcus

Pr,e)a $e !a coa",!asa '& -ome una colonia de la placa de cultivo con un asa& 9& 4umerja el asa en un tubo con aproximadamente ' ml de plasma& :& 7ncube a :MF * en estu$a de cultivo y observe peridicamente "asta = "oras de incubacin& =& La $ormacin de un cogulo en el $ondo del tubo indica una prueba positiva& Pr,e)a $e !a No'o)%oc%na 8;I "9 '& 9& :& =& 0ealice una siembra de la colonia en estudio en un agar sangre& En medio de la siembra coloque un sensidisco de novobiocina& 7ncube por 9= "oras aproximadamente a :MF *& -ranscurrido el tiempo de incubacin observe si existe un "alo alrededor del sensidisco para ver si "ay o no crecimiento bacteriano& >& 4i no existe crecimiento de las bacterias alrededor del disco, mida con una regla el dimetro del "alo o circulo que se observa alrededor de la novobiocina& 25

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G& La prueba es negativa cuando existe crecimiento alrededor del sensidisco y se dice que es resistente& M& La prueba es positiva cuando se observa un "alo de in"ibicin alrededor del disco de ms de 9' mm y se dice que es sensible&

Es&,$%o $e Streptococcus

Pr,e)a $e !a Bac%&rac%na '& 9& :& =& >& 0ealice una siembra de la colonia en estudio en U placa de agar sangre& En medio de la siembra coloque un sensidisco de bacitracina 7ncube por 9= "oras aproximadamente a :MF *& -ranscurrido el tiempo de incubacin observe si es sensible o resistente& Es sensible cuando se observa "alo de in"ibicin alrededor del disco&

Pr,e)a $e ca&a!asa

Pr,e)a $e Coa",!asa

Pr,e)a $e Bac%&rac%na

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LABORATORIO N- J

ESTUDIO DE ENTEROBACTERIAS
Las enterobacterias son bacilos Bram negativos, que en general no adoptan agrupaciones caractersticas, no $orman esporas y la mayora son mviles debido a que poseen $lagelos& 4e "an desarrollado una serie de medios para cultivarlas, aislarlas e identi$icarlas de acuerdo a sus propiedades bioqumicas& -odas las enterobacterias tienen la propiedad de $ermentar la glucosa y de no poseer actividad de la citocromo oxidasa& ,lgunas enterobacterias de importancia clnica son: Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Shigella sonnei Salmonella typhi

La orientacin bsica "acia el estudio de las enterobacterias es la identi$icacin de bacilos gram negativos a partir de la tincin de gram y de sus cultivo en agar Mac *onKey !selectivo para este grupo de bacterias#& <na vez realizadas estas observaciones se realiza una batera de > tubos que contienen los siguientes medios de cultivo: -47 !agar triple az)carT$ierro#, L7, !,gar lisinaT$ierro#, M7@ !agar movilidad, indol, ornitina#, agar *itrato y agar <rea& TSI: ?ermite identi$icar bsicamente la $ermentacin de az)cares tales como glucosa, lactosa y sacarosa por cambios de color en el medio& ,dems permite ver si producto de la $ermentacin se produce gas y cido sul$"drico o "idrgeno sul$urado& El medio es de color rojo por la presencia de un indicador de pA de este color& ?roducto de la $ermentacin se produce una acidez que "ace que el color vire a amarillo& El gas se evidencia por la $ormacin de burbujas y el cido sul$"drico por un color negro en el medio& LIA: Este medio evidencia si las bacterias descarboxilan la lisina o deaminan la lisina& -ambi+n permite ver la $ormacin de gas y de cido sul$"drico& La descarboxilacin de la lisina se observa por un color violceo en la pro$undidad del medio y la deaminacin de la lisina por un color rojo en la super$icie&

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MIO: Este medio es semislido, a di$erencia de los anteriores que son slidos& ?ermite el estudio de indol a partir de tript$ano, por ser semislido permite ver la movilidad de la bacteria, ya que cuando es as el medio se vuelve muy turbio, porque la bacteria puede crecer en todo el medio& -ambi+n permite observar la descarboxilacin de la ornitina que se evidencia por un color violceo en el medio& El indol se visualiza agregando un reactivo que provocar la $ormacin de un anillo color rojo& CITRATO: ?ermite evidenciar la utilizacin del citrato como )nica $uente de carbono& ?or medio de un indicador de pA se evidencia el viraje desde un color verde a un color azul, cuando se utiliza el citrato& UREA: ?ermite evidenciar la presencia de la enzima ureasa en la bacteria& 4e utiliza un medio de color naranja que por medio de un indicador de pA vira a $ucsia cuando existe esta enzima que "idroliza la urea presente en el medio& La interpretacin de las pruebas se realiza en base a tablas que de acuerdo a las propiedades entregadas por los medios de cultivo permiten identi$icar la bacteria correspondiente& Estas tablas se escogen de acuerdo a los resultados que presenten el -47 y el L7,& INTERPRETACI7N E INFORME DE LAS PRUEBAS TSI 8A"ar &r%+!e a/4car=f%erro9
?@478LE4 0E4<L-, @4 72;@0ME 72-E0?0E-,*7@2

,marilloV,marill o 0ojoV,marillo 0ojoV0ojo

,V, WV, WVW

;ermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa 2o $ermentacin de Lactosa, ;ermentacin de glucosa y sacarosa 2o $ermentacin de glucosa, ni lactosa, ni sacarosa

LIA 8A"ar !%s%na=f%erro9

?@478LE4 0E4<L-, @4 72;@0ME 72-E0?0E-,*7@2

MoradoVMorado MoradoV,marillo 0ojoVMorado ,: ,cidoJ

WVW WV, 0V,

Lisina deaminasa negativa y Lisina descarboxilasa positiva Lisina deaminasa negativa y Lisina descarboxilasa negativa Lisina deaminasa positiva y lisina descarboxilasa positiva

W: ,lcalino

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7n$ormacin adicional que entrega -47 y L7,:

Pro$,cc% n $e <5S: 4e visualiza de color negro en el medio& 7ndica produccin de "idrgeno sul$urado y se in$orma como A94 !R# o !T# Pro$,cc% n $e "as $e "!,cosa: 4e visualiza con burbujas de aire en el medio o espacios vacos& 4e in$orma como B !R# o !T# MIO 8A"ar *o'%!%$a$> %n$o!> orn%&%na9
?@478LE4 0E4<L-, @4 72-E0?0E-,*7@2

-urbidez Movilidad positiva !R# -ransparencia Movilidad 2egativa !T# 7ndol ?ositivo ,nillo rojo en super$icie al agregar reactivo de Wovacs 7ndol 2egativo 2o se $orma anillo rojo al agregar el reactivo de Wovacs Morado en @rnitina positiva !R# pro$undidad @rnitina negativa !T# ,marillo en todo el medio CITRATO
?@478LE4 0E4<L-, @4 72-E0?0E-,*7@2

,zul intenso en *itrato positivo !R#: utilizacin de citrato como $uente de super$icie carbono Xerde en super$icie *itrato negativo !T# UREA
?@478LE4 0E4<L-, @4 72-E0?0E-,*7@2

;ucsia

<reasa positivo!R#: -iene la enzima ureasa para "idrolizar la <rea ?ermanece el mismo color <reasa negativo!T# del medio ! naranjo#

METODOS DE SIEMBRA: ME 7@ -47 L7, M7@ 47EM80, En pro$undidad y en super$icie ! ' picadura# En pro$undidad y en super$icie ! : picaduras# En pro$undidad

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*itrato 4immons <rea

En super$icie En super$icie

PICADURA$ Pin#%ar e& me'i( #(n a a en a)u*a

Siembra en u!er"i#ie

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INTERPRETACI7N DE LAS PRUEBAS

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TRABA6O DE LABORATORIO

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Ma&er%a!es ?lacas con bacterias Bram !T# -ubos con -47, L7,, M7@, *7-0,-@, <0E, ,sas en punta y anillo

'& @bserve las placas entregadas, anotando las caractersticas macroscpicas de las colonias 9& 0ealice la siembra de una colonia en los medios de identi$icacin bacteriana seg)n lo indicado en cada medio :& 7ncubar a :MF * por 'H a 9= "rs =& @bservar resultados y anotar la interpretacin de las pruebas >& 7denti$icar la bacteria con su g+nero y especie, llevando los resultados a las tablas de interpretacin TACNICA DE SIEMBRA

LABORATORIO N- K

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ANTIBIOGRAMA
*uando se realiza un cultivo de orina, sangre, "eces, piel o de cualquier otra parte de nuestro organismo, lo que intentamos es identi$icar al microorganismo causante de la in$eccin o en$ermedad que estemos pasando& <na vez que "emos logrado aislar el agente patgeno, cultivarlo e identi$icarlo, procederemos a averiguar cual es el tratamiento adecuado& Este procedimiento se realiza a trav+s de un I,2-787@B0,M,I que consiste en poner en contacto al microorganismo con distintos antibiticos para ver cual de ellos es el mejor a emplear como tratamiento& An&%)%o"ra*a El ,ntibiograma se de$ine como un m+todo de estudio de susceptibilidad bacteriana& El m+todo mas utilizado es el de Wirby 8auer, que se realiza en placa petri y en agar MuellerTAinton& ?ara su realizacin es necesario sembrar la bacteria que se "a aislado e identi$icado previamente, en $orma "omog+nea sobre toda la super$icie del agar a modo de tapizar +ste con el microorganismo& <na vez que se "a realizado esta siembra, se colocan sobre el agar discos peque%os empapados de sustancia antibitica que di$undir en el agar& ?osteriormente se incuba en condiciones adecuadas y por un tiempo determinado& !:MF*J 9= "oras# La sensibilidad o resistencia a estos antibiticos se eval)a por el crecimiento de las bacterias alrededor del disco& Sens%)%!%$a$: <na bacteria es sensible a un antibitico cuando no es capaz de crecer alrededor de +ste& Esto se mani$iesta a trav+s de un I"alo de in"ibicinI mnimo de$inido para cada antibitico& Res%s&enc%a: <na bacteria es resistente a un antibitico cuando +ste no es capaz de in"ibir su desarrollo y por lo tanto es capaz de crecer alrededor del disco que lo contiene&

I<a!o $e %n3%)%c% nI: *omprende la zona alrededor del disco en donde no se observa crecimiento de las bacterias& ?ara cada antibitico se encuentra descrito un "alo de in"ibicin mnimo que de$ine la verdadera sensibilidad de una bacteria a un antibitico ya que existe una relacin entre la concentracin del antibitico y su capacidad de in"ibir la cepa bacteriana& El "alo de in"ibicin se eval)a por el dimetro en mm alrededor del disco&

?or ejemplo:

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-etraciclina !:(g # 4ensible: 'N mm y 0esistente '= mm& <a!o $e %n3%)%c% n

Me$%c% n $e! $%B*e&ro $e! 3a!o Esta sensibilidad o resistencia viene indicada en una tabla

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TRABA6O DE LABORATORIO
Ma&er%a!es ?lacas de ,gar Mueller Ainton TRABA6O DE LABORATORIO -ubos de *aldo tripticasa

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HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH Ma&er%a!es ?lacas de ,gar Mueller Ainton ?lacas con bacterias Bram !R# y Bram !T# 4ensidiscos -rulas est+riles -ubos con *aldo -ripticasa ;rascos con alco"ol ?inzas

Es&,$%o $e !a sens%)%!%$a$ $e !as )ac&er%as a $%feren&es a"en&es )ac&er%anos Proce$%*%en&o '& <sted recibe una placa de cultivo a partir de la cual deber preparar un inculo 9& 0ealice una siembra con trula en una placa de agar Mueller Ainton, deslizndola en a lo menos tres direcciones, cubriendo de esta manera toda la super$icie de la placa& *uando introduzca en la suspensin bacteriana al momento de sembrar, tenga la precaucin de eliminar el exceso de lquido en las paredes del tubo& :& Luego de realizar el procedimiento anterior, deje secar la placa cerrada por unos minutos& =& eposite uno a uno los discos sobre la super$icie del agar, precaucin de esterilizar la pinza en la llama entre un disco y otro& teniendo la

>& Luego de realizar esta siembra incube en estu$a a :MF* durante 9= "oras, tras las cuales debe evaluar el crecimiento bacteriano y medir los "alos de in"ibicin& G& 4eg)n los resultados concluya la sensibilidad y resistencia de la bacteria que estudi de acuerdo a la in$ormacin que proporciona la tabla adjunta& M& Luego de evaluado el antibiograma complete el siguiente cuadro: An&%)% &%co ,sa$o D%B*e&ro $e! <a!o $e In3%)%c% n Sens%)!e o res%s&en&e

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LABORATORIO N- L

PARASITOS
PARASITISMO Es la asociacin entre dos seres o especies di$erentes, pudiendo vivir en el interior o super$icie de su "u+sped, el cual le proporciona las condiciones de ambiente y alimentacin que le son necesarios para conseguir su maduracin sexual y le causa al "u+sped da%o en sus estructuras o $unciones PARSITO Es todo organismo del reino animal o vegetal que vive a expensas de otro, de acuerdo a esta a$irmacin podemos decir que existen varios grados de parasitismo seg)n la dependencia ParBs%&os 4e adaptan con $acilidad a la vida libre o parasitaria fac,!&a&%'os ParBs%&os o)!%"a$os eben vivir siempre en el interior o en la super$icie de su "u+sped& Existen dos tipos: Te*+ora! permanecen en contacto con su "u+sped solo el tiempo necesario para alimentarse Per*anen&e necesitan obligatoriamente al "u+sped para sobrevivir ParBs%&o acc%$en&a! ParBs%&o %nes+ec:f%co ?arsito que se "ospeda en otro parsito Pse,$o +arBs%&o 7nvade al "u+sped que no es adecuado para el desarrollo de su especie -iene la capacidad de adaptarse a di$erentes especies de "u+spedes, en los cuales "abitualmente no vive ?arsito que se "ospeda en otro parsito Elemento animado o inanimado que se con$unde con un parsito

CICLO EVOLUTIVO DE UN PARASITO El conjunto de etapas y trans$ormaciones que experimenta un parsito durante su desarrollo, se conoce como c%c!o e'o!,&%'o o c%c!o )%o! "%co2 Estos ciclos pueden ser $%rec&os o *onoM#n%cos si el parsito requiere de un solo "u+sped para todo su desarrollo e %n$%rec&os o 3e&eroM#n%cos si necesita dos o ms "u+spedes

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CICLO DIRECTO

+U,SPED IN-ECTADO

-345E/6E

+ue.( /ui 0e O(1ui 0e

-ECALISMO +U,SPED SUSCEPTIBLE

-ECALISMO

Los ciclos directos o monox+nicos son simples: el "u+sped in$ectado trans$iere al medio ambiente las $ormas in$ectantes de los parsitos y estos llegan al "u+sped susceptible a trav+s del $ecalismo CICLO INDIRECTO +U,SPED DE-INITIVO Par3 i0( A'u&0(

H89%PE, SUSCEPTIBLE CARNIVORISMO

METACESTODOS &ar.a

-345E/6E

+ue.( /ui 0e O(1ui 0e

TE2IDOS

+U,SPED 5/6E73E,5-75)

-ECALISMO

larvas 39

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En los ciclos evolutivos indirectos o "eterox+nicos, los parsitos necesitan pasar por dos o ms "u+spedes de distinta especie para alcanzar su pleno desarrollo& El "u+sped in$ectado elimina al medio ambiente las $ormas in$ectantes, por $ecalismo llegan al "u+sped intermediario, en +ste se desarrolla un estado larval o metacestodo en los tejidos y llega al "u+sped susceptible a trav+s del carnivorismo <UASPED 4e denomina "u+sped al ser vivo que alberga un parsito y podemos distinguir: <,#s+e$ $ef%n%&%'o : En el cual el parsito alcanza su madurez sexual y se reproduce <,#s+e$ %n&er*e$%ar%o: ,lberga las $ormas larvales de los parsitos y se desarrolla parte de su ciclo biolgico <,#s+e$ +ara&#n%co: ,qu+l que transporta al parsito, pero en +l no se desarrolla ninguna etapa del ciclo biolgico CLASIFICACION DE LOS PARSITOS CLASIFICACION MORFOL7GICA F!a"e!a$os R%/ +o$os C%!%a$os A+%co*+!eMa <ELMINTOS

PROTO0OOS

Ne*a&o$os P!a&e!*%n&os Ces&o$os Tre*a&o$os

META0OOS ARTROPODOS

ArBcn%$os Cr,s&Bceos Insec&os

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CLASIFICACI7N TOPOGRAFICA ECTOPARSITOS: 4e ubican en la super$icie del cuerpo ENDOPARSITOS : Xiven en el interior del organismo

SEGNN LOCALI0ACI7N ENTEROPARASITOS: 4e ubican en el tubo digestivo <ISTOPARASITOS : 4e ubican en los tejidos <EMOPARASITOS: 4e ubican en la sangre ECTOPARASITOS : 4e ubican en la super$icie yVo en la piel

.2 PROTO0OOS Los protozoos estn constituidos por una sola c+lula que est $ormada por n)cleo citoplasma, la cual debe atender todas las necesidades vitales del individuo como movilidad, secrecin, excrecin, nutricin y reproduccin& 4u tama%o vara entre M y '9( micrones y durante su vida presentan dos $ormas evolutivas: Trofo/o:&o 1,%s&e ;orma vegetativa, de alimentacin y reproduccin activa Muy lbil a las condiciones ambientales ;orma de resistencia Metabolismo mnimo ?ermite la supervivencia de la especie debido a que puede permanecer muc"o tiempo en condiciones ambientales adversas

Existen varios protozoos de importancia m+dica, algunos de ellos son: Entamoeba histolytica Entamoeba coli Endolimax nana Giardia lamblia Trypanosoma cruzi

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CICLOS EVOLUTIVOS Entamoeba histolytica

Trofo/o:&o

1,%s&e

Giardia lamblia

Trofo/o:&o

1,%s&e

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Entamoeba coli

Trofo/o:&o

1,%s&e

Trofo/o:&o

1,%s&e

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Trypanosoma cruzi

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52 NEMATODOS 4on "elmintos redondos o cilndricos, alargados y aguzados en sus extremos& e tama%o variable, poseen un sistema digestivo, sistema excretor y son gusanos que presentan dimor$ismo sexual& Es una caracterstica que los mac"os son siempre ce menor tama%o que las "embras& 4e reproducen por "uevos que salen al exterior junto con las deposiciones del "u+sped& el "uevo nacen larvas que maduran mor$olgicamente pasando por cuatro estadios "asta alcanzar su estado adulto& Existen varios nematodos de importancia m+dica, algunos de ellos son: Ascaris lumbricoides Enterobius vermicularis Trichuris trichiura

Ascaris lumbricoides

<,e'o

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Enterobius ermicularis

<UEVO

Trichuris trichiura

<UEVO

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;2 CESTODOS Los *estodos son "elmintos aplanados dorsoventralmente, semejan cintas y por ello se les denomina Taenias. 4on de tama%o variable, tienen una constitucin mor$olgica en la que podemos di$erenciar esco!eM> es&r )%!a ? +ro"! &%$as2 4on de color blanco o grisceo, no poseen aparato digestivo, son "erma$roditas, se reproducen por "uevos y tienen un gran potencial bitico ya que la progltida grvida tiene la capacidad de almacenar gran cantidad de "uevos& Los "uevos son in$ectantes de inmediato y permanecen viables en el medio ambiente por muc"o tiempo& En su estado adulto viven en el intestino de vertebrados que son sus "u+spedes de$initivos, su estado larval lo desarrollan en di$erentes animales, los que constituyen los "u+spedes intermediarios& Existen varios cestodos de importancia m+dica, algunos de ellos son: Taenia solium Taenia saginata Diphyllobothrium latum Dypilidium caninum CARACTERSTICAS MORFOL7GICAS DE LOS CESTODOS

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Ci#&( e.(&u0i.( Taenia spp.

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Taenia sp

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@2 TREMATODOS 4on platelmintos cuyos adultos son aplanados dorsoventralmente y tienen aspecto ovalado o $orma de "oja& *asi todos son "erma$roditas& ?resentan un complicado ciclo evolutivo con $ases de multiplicacin asexuada en moluscos y $ases de multiplicacin sexuada en vertebrados y ocupan varios "u+spedes intermediarios para completar su ciclo& 4e reproduce por "uevos que son de gran tama%o& Mor$olgicamente estn constituidos por una cutcula escamosa provista de espinas, su cuerpo es de tejido esponjoso& ?osee una ventosa muscular peribucal y una ventosa ventral o acetbulo& La llegada al "u+sped de$initivo es a trav+s de va oral por consumo de la $orma in$ectante o metacercaria que se encuentra enquistada en los berros, en el interior del organismo se desenquista y alcanza su estado adulto& entro de los trematodos de importancia m+dica asciola hepatica

!asciola hepatica

C%c!o e'o!,&%'o

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D2 ARTR7PODOS 4on animales invertebrados de cuerpo segmentado, protegidos por un exoesqueleto de quitina y en general son ectoparsitos& En general son parsitos por s mismos o son e$icientes "u+spedes, transmisores de en$ermedades y por el veneno que puedan inocular provocan graves cuadros clnicos& Los principales artrpodos de inter+s medico son: insectos, arcnidos y crustceos Insec&os pteros Aempteros ,nopluros 4i$onpteros 8latarios moscas, mosquitos y tbanos triatomas y c"inc"es piojos pulgas cucarac"as

,rtrpodos terrestres con cuerpo constituido por cabeza, trax y abdomen ArBcn%$os ,ra%as Escorpiones Barrapatas Ycaros

,rtrpodos acuticos que se "an adaptado a la vida terrestre, la cabeza y el trax estn $usionados $ormando el ce$alotrax en ara%as y escorpiones, mientras que en las garrapatas y caros $orman juntos con el abdomen una sola masa corporal Cr,s&Bceos *yclops iaptomus *angrejos ,rtrpodos de tama%o variable, su cuerpo est $ormado por ce$alotrax y abdomen& ,lgunos de ellos son "u+spedes intermediarios de "elmintos del "ombre y de animales& Entre los artrpodos de importancia m+dica estn: !oxosceles laeta !atrodectus mactans Sarcoptes scabiei Pediculus humanus variedad capitis Phthirus pubis Pulex irritans

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Ara"as

Lo#osceles laeta

Latrodectus mactans

HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH

$ul%as

HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH

P%oCos

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Sarcoptes scabiei

C%c!o E'o!,&%'o

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TRABA6O DE LABORATORIO .2 PROTO0OOS: '&T @bserve al microscopio las preparaciones al $resco de deposiciones "umanas y realice un dibujo de lo observado 9&T 0ealice una comparacin de los quistes observados de acuerdo a lo siguiente: Entamoeba coli Giardia.lamblia

-ama%o ;orma 2F de n)cleos

-ama%o ;orma 2F de n)cleos

:&T @bserve la lmina en el microscopio de una muestra que contiene un tripomastigoto de Trypanosoma cruzi. 0ealice un dibujo

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52 NEMATODOS: '&T Examine la mor$ologa del parsito adulto y realice un dibujo Ascaris lumbricoides Enterobius ermicularis Trichuris trichiura

9&T @bserve al microscopio las preparaciones al $resco de deposiciones "umanas y realice un dibujo de los "uevos observados Ascaris lumbricoides Enterobius vermicularis Trichuris trichiura

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;2 CESTODOS: '&T Examine la mor$ologa del parsito adulto y realice un dibujo

9&T @bserve las preparaciones del compare sus estructuras Taenia solium

escolex de cestodos, realice un dibujo y &iphyllobothrium latum

Taenia sa%inata

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:&T @bserve los "uevos, realice un dibujo y compare Taenia sp &iphyllobothrium latum

=&T @bserve las progltidas grvidas de los cestodos, dibuje y compare Taenia solium Taenia sa%inata &iphyllobothrium latum

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LABORATORIO N- O

PARASITOS
@2 TREMATODOS '&T Examine la mor$ologa del parsito adulto y realice un dibujo, observe la ventosa peribucal y acetbulo !asciola hepatica

52= @bserve la preparacin con el "uevo de !asciola hepatica y realice un dibujo

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@bserve la preparacin que contiene un 1,%s&e 3%$a&:$%co y el parsito que lo produce& 0ealice un dibujo 1,%s&e 3%$a&:$%co Echinococcus %ranulosus

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D2 ARTROPODOS '&T Examine la mor$ologa del parsito adulto y realice una comparacin entre ambos arcnidos& 4i es necesario ay)dese con una lupa Lo#osceles laeta -ama%o *olor 2F de patas Latrodectus mactans

9&T @bserve al microscopio las caractersticas mor$olgicas de Pulex irritans y realice un dibujo

:&T @bserve al microscopio la preparacin de Sarcoptes scabiei y realice un dibujo

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=&T @bserve al microscopio las preparaciones de $ediculus humanus y $hthirus pubis" compare las caractersticas de ambos parsitos $ediculus humanus -ama%o ;orma *aractersticas de las ?atas $hthirus pubis

>&T @bserve al microscopio al parsito adulto y los "uevos o liendres del $ediculus humanus" realice un dibujo $ediculus humanus L%en$re

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