I PARCIAL

Ruby N. Gutirrez 5.1

Lab N1 tinciones simples y compuestas

- Tinciones o Simples 1 slo tinte Morfologa Violeta cristal; Azul de metileno o Carbol fucsina o Compuestas 2 ms reactivos o tintes Clasificar bacterias segn caractersticas especiales. - Bacterias (morfologa) o Individual o Agrupacin Cocos Racimos (Staphylos) Bacilos Cadenas (streptos) Espiroquetas Pares (diplococos) Espirilos Ttradas Cocobacilo = bacilo que tiende a ser esfrico - Tincin de Gram: (+) = Prpura x el violeta cristal; (-) = Rojo o Extender, secar y fijar con calor o Violeta cristal (tie las bacterias) o Yodo de Gram (fija la tincin en gram positivas) o Alcohol acetona (decolora en gram negativas) o Safranina (colorante de contraste) - Tincin de Moeller (esporas): esporas tien de rojo, bacilos de celeste Bacillus subtilis o Carbol fuchina mechero (esperar vapores, no hervir!!) =permite q entre el colorante o Enjuagar o cido sulfrico 1% o Enjuagar o Azul de metileno o Secar - Tincin de Anthony (cpsula): Tincin negativa: lo q queremos ver no se tie, se tie el medio Klebsiella pneumoniae; Bacillus anthracis o Leche descremada al 20% o Frotis secar al aire o Violeta cristal 1% o Lavar con sulfato de cobre secar o Observar principalmente los bordes

Lab N 2 Cultivo de bacterias y morfologa colonial

- Clasificacin de los medios segn caractersticas fsicas: o Lquidos (caldos) o Slidos Tubos Inclinado (en pico de flauta) Profundo e inclinado (aguja) Platos Petri mtodo de estras = + utilizado para aislar colonias o Semislidos: para obtener motilidad inocular con aguja Si se observa turbiedad = la bacteria posee movimiento En forma de aguja = la bacteria no se mueve (vertical) - Segn caractersticas qumicas (depende de la composicin de los medios de cultivo) o Nutritivos: para bacterias poco exigentes; posee lo mnimo que necesita una bacteria para crecer. BHI (Brain Heart Infusion) o Enriquecidos: medio nutritivo + nutriente especfico Agar sangre Agar chocolate (sangre hervida)

Thayer Martin = Agar chocolate + antibiticos suprime bacterias que no queremos q crezcan o Diferenciales MacConkey EMB o Selectivos Thayer Martin (Neisseria gonnorrohoeae) MacConkey: contiene violeta cristal y rojo neutro (indicador de cuando cambia el pH) Gram (-) - Caractersticas a evaluar en las colonias o Tamao o Elevacin o Forma o Consistencia o Borde o Color Resultados - MacConkey: Klebsiella pneumoniae (+) - Agar sangre: Staphylococcus aureus B hemlisis - Agar nutritivo: Bacillus subtilis - Agar inclinado: Staphylococcus aureus y Escherichia coli - Agar profundo: Klebsiella pneumoniae - Caldos: Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniae lquido ms turbio - Semislido: Escherichia coli se mueve El conteo de colonias es importante para conocer la velocidad de reproduccin de la bacteria y gracias a esto elegir as el antibitico adecuado para su tratamiento

LAB N3 EFECTO DE LOS AGENTES FSICOS Y QUMICOS SOBRE LAS BACTERIAS

Muerte o destruccin de los microorganismos = prdida de la capacidad de multiplicarse en conjunto de condiciones conocidas Ausencia de crecimiento no es igual a esterilidad Esterilidad: destruccin de todas las formas vivientes Pasteurizacin: utilizacin del calor para matar las formas vegetativas de las bacterias Desinfeccin: empleo de agentes qumicos (superficies) Antisptico: sobre tejidos vivos (cuerpo) Asepsia: evita q lleguen a un ambiente protegido Antibitico: natural Antimicrobiano: artificial Mtodos fsicos (agentes externos) o Calor hmedo (autoclave Parmetros: 15 lbs, 15 min, 121C) = desnaturalizacin rpida de las protenas o Calor seco (horno) o Filtracin o Rayos UV exposicin directa: dao directo al ADN formando dmeros de timina; prdida de la capacidad para replicarse. Mtodos qumicos o Se clasifican segn su composicin de alcoholes, perxido de oxgeno, yodforos, fenlicos, glutaraldehdo y compuestos de amonio cuaternario. o Antibiticos Resultados o Mejor desinfectante: clorox 10%, Lysol, fenol o Luz UV (sin tapa): Bacillus subtilis esporas; Serratia marcescens pigmento rojo = se produce al exponerse a factores adversos. o Difusin en plato: cualitativo. Medio ms empleado = Meller Hinton Antibiograma Turbidez = 0,5 de la escala de McFarland Pseudomona aeruginosa (bacilo gram -); Enterococcus faecalis (coco gram +) o Mtodo de dilucin: cuantitativo.

CIM = Concentracin Inhibitoria Mnima (poco crecimiento bacteriano). Es la utilizada en el paciente. CMB = Concentracin Bactericida Mnima = no hay crecimiento. E-Test: cuantitativo. No vemos CBM punto donde convergen = CIM

LAB N4 MICROORGANISMOS DE FLORA NORMAL Y DEL AMBIENTE

Factores para poder colonizar o Cantidad y tipo de nutrientes o pH o potencial xido-reduccin o resistencia a sustancias antibacteriales locales como la bilis y lisozimas reas con mayor cantidad de microorganismos de flora normal o Cavidad oral o Intestino o Piel Atacan cuando hay un desequilibrio Beneficios de la flora normal o Sntesis de vitamina K y B12 o Absorcin de nutrientes o Evitan la colonizacin de patgenos mantienen el sistema inmune alerta Biopelcula: complejo de agregacin de microorganismos marcado por la excrecin de una matriz adhesiva protectora.

LAB N5 COCOS GRAM POSITIVOS

Staphylococcus = racimos crecen muy bien en medio de agar sangre bajo incubacin aerobia Streptococcus = cadenas crecen mejor en medios enriquecidos (Agar sangre), bajo condiciones aerobias o anaerobias (facultativos) S. aureus o Principal causante de infecciones purulentas agudas o Sobrevive a la desecacin o Causante de intoxicaciones alimentarias Streptococcus pyogens = bacteria carnvora faringoamigdalits estreptocccica, q puede producir fiebre reumtica y cardiopata agalactiae = sepsis neonatal pneumoniae = neumococo causante de neumonas y meningitis n cualquier edad. o Pueden clasificarse segn su hemlisis en alfa, beta y gamma hemolticos Enterococcus faecalis faecium o infeccin en personas hospitalarias o con imunodeficiencia Grupo de Lancefield o Streptococcus B-hemolticos del grupo B = S. agalactiae o Streptococcus B-hemolticos del grupo A = S. pyogens o Streptococcus B-hemolticos del grupo D = Enterococcus faecalis Resultados o CAMP punta de flecha = S. agalactiae: produce factor CAMP o MRSA (Staphylococcus aureus resistente a la meticilina) uso de vancomicina o S. aureus Osteomielitis Gastroenteritis Sndrome de piel escaldada Shock txico o Infecciones prenatales = Streptococcus agalactiae (grupo B)

Septicemia Faringitis estreptoccica Neumona

LAB N6 BACILOS GRAM POSITIVOS

- Corinebacterias (no esporulados) Pequeas Pleomrficas formaciones tipo letras chinas o empalizadas Crecen en agar sangre ambiente aerobio o Corynebacterium diphteriae: difteria o Listeria monocytogenes: causa espordica de meningitis y otras infecciones en fetos, neonatos y huspedes inmunosuprimidos Nacimiento del producto muerto o sepsis neonatal fulminante Crece a temperatura ambiente Gram positivos Adultos = fiebre y malestar general - Bacilos Anaerobios o facultativos Formadores de esporas Saprfitos excepto Bacillus anthracis o Bacillus anthracis Cadenas largas Causante del carbunco (lesin en la piel) Arma biolgica (2001) o Bacillus cereus Intoxicacin alimentaria - Resultados o L. monocytogenes Medio SIM = crece en forma de paraguas xq busca oxgeno o Medio SIM Sulfuro Indol Motilidad Mide la motilidad de la bacteria Medio semislido Amarillo o Gelatina = determinar la presencia de gelatinasa + al enfriar, no se endurece = la bacteria posee las enzimas para licuar la gelatina o Otros microorganismos como armas biolgicas = Francisella tularensis o Muestras para carbunco sintomtico Sangre Esputo Muestras de pus y lquido local (tejidos afectados) o Antimicrobianos contra Listeria Ampicilina Penicilina G Trimetropin / Sulfamethoxazol

LAB N7 INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL

No son ETS xq podemos estar infectados, ms no enfermos x un mismo microorganismo Bacterias o Neisseria gonorrhoeae (Gonococo, GC) = gonorrea o Treponema pallidum = sfilis lcera: chancro duro (indolora y regular) o Chlamydia trachomatis = Linfogranuloma vnereo, uretritis inespecfica o Mycoplasma hominis = uretritis inespecfica o Ureaplasma urealiticum = uretritis inespecfica o Gardnerella vaginalis = vaginosis bacteriana o Haemophilus ducryii = chancro blando (lcera irregular y con dolor)

Virus o HPV = papiloma o HV II = herpes (lceras) o HBV = hepatitis B o HCV = hepatitis C o HIV = SIDA Hongos = Candida albicans (candidiasis) Parsitos = Trichomonas vaginalis (tricomoniasis) N. gonorrhoeae gram negativo o Diplococo o Se encuentra dentro de los PMN o Patogenicidad = fimbrias o Es ms comn y fcil de diagnosticar ya q se puede cultivar en Thayer Martin (ambiente microaeroflico) C. trachomatis: requiere clulas McCoy para su crecimiento Micoplasmas y Ureaplasmas colonias vistas bajo el microscopio Resultados o Lactobacillus = Gram positivos o Nugent 0 ausencia del morfotipo Clulas guas 1+ 1 Lactobacillus = altas [ ] normal 2+ de 1 a 4 Bacilos gram corto variables (Moviluncus) 3+ de 5 a 30 Gram negativos curvos 4+ de 30 en adelante o Treponema pallidum = espirilos color oscuro (chocolate) en tincin argntica o Fases de la sfilis y pruebas diagnsticas Primaria (chancro duro) = microscopa de campo oscuro Secundaria (ppulas) = test serolgico de sfilis (TSS) + Latente = TSS reagnico y treponmico + Terciaria = TSS + o Pruebas diagnsticas para C. trachomatis Cultivo celular Anlisis de orina Tincin de Gram Tcnicas de inmunofluorescencia o Pruebas treponmicas Fluorescencia de absorcin de anticuerpos treponmico Inmovilizacin de T. pallidum o Pruebas no treponmicas Prueba rpida de reagina plasmtica Prueba del lab.de investigacin de enf. Venreas

MICROSCOPIO
Distancia focal (punto focal) = distancia entre el eje ptico del lente y el foco Poder de magnificacin = relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto Magnificacin total = aumento del objetivo x aumento del ocular Poder de resolucin = distancia minima entre 2 puntos para q aparezcan separados Poder de definicin = nitidez de las imgenes obtenidas sobre todo respecto a sus contornos ML > resolucin (200nm) - ME 2nm o Muestras vivas o Muestras muertas o < costo o > aumento 300 000 veces o Fuente de luz o Haces de electrones o Fijadores de rutina o Tinciones de rutina o Aumento 2 500 veces M. fluorescencia clnica = inmunofluorescencia identificacin de un microorganismo unidos a anticuerpos x marcadores se tie la muestra con una sustancia fluorescente que absorbe la energa de las ondas cortas de luz y emite a longitud de ondas ms largas.

Apertura numrica = capacidad de captacin de la luz x las lentes del microscopio. Estos valores son constantes.

BACTERIAS
GRAM POSITIVAS - Staphylococcus aureus - S. epidermidis - Bacillus subtilis - Streptococcus pneumoniae - S. pyogenes - S. agalactiae - Enterococcus faecalis - Corynebacterium diphteriae Sensibilidad a antibiticos - Enterococcus faecalis penicilina - Pseudomona aeruginosa Fosfocil, Imipenem GRAM NEGATIVAS - Escherichia coli - Pseudomona aeruginosa - Neisseria gonorrhoeae - N. meningitidis - Klebsiella pneumoniae