TINCIN HEMATOXILINA-EOSINA

Principio Mtodo de tincin de rutina en histologa y citologa. Es una tincin basada en dos etapas, la primera una tincin nuclear por un colorante bsico (hematoxilina) y la segunda, una tincin citoplasmtica por un colorante xantenico cido (eosina). La hematoxilina en combinacin con sales de aluminio, hierro o cromo, forma un colorante activo, la hemateina, formada por oxidacin de la hematoxilina. Este se usa como colorante nuclear, tiendo los ncleos de color azul/negro y aportando un buen detalle de los mismos. Por este motivo, se suele usar junto con un colorante citoplasmtico, generalmente la eosina, que aporta una gradacin entre el rosa, y el rojo a las estructuras y matrices celulares de carcter catinico (a las que la hematoxilina no tie o lo hace muy dbilmente). Se consigue as un buen contraste de las preparaciones microscpicas facilitando su observacin Material Cortes parafinicos, cortes congelados, material citolgico clnico. Reactivos Cdigo 251299 256879 251301 255298 253949 256991 252081 251008 251769 192695 251085 251086 253681 Descripcin Eosina Amarillenta (C.I. 45380) DC (*) Eosina Amarillenta solucin alcohlica 1% DC (*) Eosina Amarillenta solucin hidroalcohlica 1% DC (*) Hematoxilina de Carazzi solucin DC (*) Hematoxilina de Harris solucin DC (*) Hematoxilina de Harris modificada solucin DC (*) Floxina B (C.I. 45410) DC Ac. Actico Glacial DC Xileno mezcla de ismeros DC (*) Etanol 70% v/v (BP) CODEX Etanol 96% DC (*) Etanol Absoluto DC (*) Eukitt , medio de montaje

(*)

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PGINA 1 DE 5

Preparacin de soluciones Solucin madre eosina: Disolver 1,0 g de Eosina Amarillenta (C.I. 45380) en agua y enrasar a 100,0 ml con agua.

Solucin madre de Floxina: Disolver 1,0 g de Floxina B (C.I. 45410) en agua y enrasar a 100,0 ml con agua.

Solucin madre eosina-floxina: Segn la presentacin de Eosina a usar, preparar lo indicado a continuacin. Mezclar los componentes y homogeneizar bien y guardar protegido de la luz.

1. Con Eosina Amarillenta (C.I. 45380)

Solucin madre eosina Solucin madre de Floxina Etanol 96% Ac. Actico Glacial

10 ml 1 ml 78 ml 0,4 ml

2. Con Eosina Amarillenta solucin hidroalcohlica 1%

Eosina Amarillenta solucin hidroalcohlica 1% Solucin madre de Floxina Etanol 96% Ac. Actico Glacial

10 ml 1 ml 78 ml 0,4 ml

3. Con Eosina Amarillenta solucin alcohlica 1% Eosina Amarillenta solucin alcohlica 1% Solucin madre de Floxina Agua 10 ml 1 ml 9 ml

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PGINA 2 DE 5

Procedimiento

ETAPA Desparafinar Hidratar Xileno Etanol absoluto Etanol 90% Etanol 70% Agua destilada Teir

REACTIVO 3 x 5 min 7 min 7 min 7 min 7 min o Harris 6 min 6-9 min muestra 5 min 10 - 20 s 5 min 1 min 5 min 5s 5s 1 min 5 min

TIEMPO

Si Hematoxilina de Harris modificada Si Hematoxilina Carazzi Agua corriente cido Actico 2% Agua corriente Etanol 96%

dependiendo

tamao

Lavar Virar la tincin (1) Lavar

Teir Deshidratar

Solucin de Eosina-Floxina Etanol 70% Etanol 90% Etanol absoluto Etanol absoluto

Aclarar

Xileno Xileno

5 s + secado 5 min 5 min + secado

Montar
(1)

Medio de montaje

Si se utiliza Hematoxilina de Carazzi obviar este paso.

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PGINA 3 DE 5

Resultado

Hematoxilina de Harris

Hematoxilina de Harris modificada azulados Diferentes tonalidades rosadas y rojizas.

Hematoxilina de Carazzi azul-violeta tenue

Ncleos Citoplasma y matriz

azulado intenso Diferentes tonalidades de rosa intenso a violeta.

diferentes tonos rosas

La tonalidad de los resultados diferir segn la Hematoxilina utilizada y no segn la Eosina.

Nota tcnica Filtrar cualquier poso presente en la disolucin. El microscopio usado debera corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnstico clnico. Si se utiliza un aparato automtico de tincin, deben tenerse en cuenta las instrucciones de empleo del fabricante del aparato y del software. Preparacin de las muestras Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnologa. Todas las muestras deben estar rotuladas inequvocamente. Diagnstico Los diagnsticos debern ser establecidos solamente por personas autorizadas y cualificadas. Cada aplicacin debera implicar controles adecuados para descartar resultados errneos. Almacenamiento La solucin de tincin debe almacenarse a temperatura ambiente. Caducidad El producto almacenado a temperatura ambiente y en envase bien cerrado, es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada en el envase. Notas sobre el empleo Para evitar errores, la tincin ha de ser realizada por personal especializado. Solamente para uso profesional. Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y aseguramiento de la calidad.

VERSIN: 1

PGINA 4 DE 5

Indicaciones para la eliminacin de residuos Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como desecho peligroso, debindose cumplir las directivas locales de eliminacin de residuos. Si se presentan ms preguntas acerca de la eliminacin, stas podrn ser tramitadas a travs de E-Mail: central@panreac.com Dentro de la UE tienen validez las prescripciones basadas en la Directiva 67/548/CEE del Consejo relativa a la aproximacin de las disposiciones legales, reglamentarias y administrativas en materia de clasificacin, embalaje y etiquetado de sustancias peligrosas, en la correspondiente versin vigente. Clasificacin de sustancias peligrosas Tener en cuenta la clasificacin de sustancias peligrosas en la etiqueta y las indicaciones en la ficha de datos de seguridad. Fabricante Panreac Qumica S.L.U. an ITW Company C/Garraf, 2 Polgono Pla de la Bruguera E-08211 Castellar del Valls (Barcelona) Espaa Tel. (+34) 937 489 400 Fax (+34) 937 489 401

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PGINA 5 DE 5