BOLETN TCNICO

Printed in USA Volume 7(1) 2008

Actividad Antioxidante en Bioestimulantes y Productos Nutrientes Foliares Seleccionados, Comercialmente Disponibles

Importancia de los Antioxidantes en Reduccin del Estrs Abitico
Liang J. Li, Ph.D., Jess Martineau, Ph.D., C.P.Ag, C.S. and Elizabeth Wozniak, Ph.D. Traducido por: Harvey E. Arjona, Ph.D. Profesor Asociado Universidad Nacional de Colombia
peroxidasa y catalasa, eliminan las especies activas de oxgeno y toman parte en sntesis, degradacin y reciclaje de antioxidantes. Estas enzimas existen en diferentes compartimentos celulares y diferentes tejidos para proteger y regular diferentes rutas metablicas. Radicales libres altamente reactivos y especies de oxgeno se forman en sistemas biolgicos en exceso durante el estrs abitico, tales como fro o altas temperaturas, alta luminosidad, especialmente exposicin UV, polucin, toxinas, altas concentraciones de ozono atmosfrico, etc. (Nilsen y Orcutt, 1996). El estrs abitico puede representar hasta un 65% de las prdidas en rendimiento de los cultivos (Bray et al., 2000). Los antioxidantes inhiben el dao celular limpiando los radicales libres. Hay numerosos reportes que muestran la importancia de los antioxidantes en reducir los efectos negativos del estrs abitico en plantas (Park et al., 2006; Ervin et al., 2005; Liu y Huang, 2002; Zhang y Schmidt, 1995). Las aplicaciones externas de antioxidantes pueden reducir la severidad o eliminar el dao potencial causado por el estrs abitico. Aplicaciones externas de algunos antioxidantes probaron tener efectos elicitores (Wingate at al., 1988; Norris, 1991). En este Boletn se describe la actividad antioxidante de bioestimulantes y fertilizantes foliares

Introduccin Los antioxidantes son sustancias que tienen la habilidad de prevenir la oxidacin de otras sustancias removiendo radicales libres e inhibiendo reacciones de oxidacin. Los radicales libres son productos normales del metabolismo celular y son utilizados en un nmero importante de reacciones metablicas. Sin embargo, an un pequeo exceso de radicales activos pueden causar dao celular oxidando lpidos, cidos nucleicos y protenas, resultando en alteracin de las funciones membranales, desnaturalizacin de protenas e inhibicin de la actividad enzimtica. Las clulas tienen muchos mecanismos de proteccin para eliminar los radicales libres (McKersie, 1996; Taiz y Zeiger, 2002). Los carotenoides y algunas xantofilas previenen la formacin de oxgenos en extremo reactivos absorbiendo excesos de energa de molculas exitadas de clorofila. Algunas sustancias, como tocoferoles, son solubles en lpidos y, como parte de las membranas celulares, protegen los lpidos de la peroxidacin. Otras molculas, como ascorbato o glutatin, son solubles en agua y reaccionan con oxgeno activado directamente o ayudan a reciclar otras molculas a su estado reducido. Las enzimas, incluyendo superxido dismutasa, ascorbato

Cytozyme Laboratories, Inc. 134 South 700 West, Salt Lake City, Utah, USA

con calcio seleccionados, comercialmente disponibles. Los resultados se comparan con el comportamiento en campo de estos productos. Materiales y Mtodos Ocho bioestimulantes comercialmente disponibles se evaluaron: Auxym, fabricado por Italpolina (Italia), Biozyme, fabricado por Grupo Bioquimica Mexicana (Mexico), BM86, fabricado por Laboratories Gemer (Francia), Citogrower fabricado por Nutreco (Espaia), Crop+, fabricado por Cytozyme Laboratories, Inc. (USA), Kelpak, fabricado por Kelp Products Ltda. (Sur frica), Kendal, fabricado por Valagro (Italia) y Stimulate, fabricado por Stoller (USA). Adicionalmente se analizaron cinco productos foliares con calcio: BioNutriente Calcio Extra, fabricado por Cytozyme Laboratories, Inc. (USA), CaTransfer, fabricado por Plant Impact (UK), Defender Calcio, fabricado por Bioamerica S.A. (Chile), Calcio Metalosate, manufacturado por Albion Laboratories, Inc. (USA) y Nutri Calcio fabricado por CLI (USA). La actividad antioxidante de cada producto se determin usando el mtodo de radical libre DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) (Miller et al., 2000). El cido carboxlico Trolox, (S)-(-)-6-hidroxi-2,5,7,8 tetrametilchroman-2, se us como estandar de referencia. El cido ascrbico con actividad antioxidante conocida se prob como un control positivo para verificar la exactitud del anlisis. El estandar de referencia, el cido ascrbico y las muestras reaccionaron con solucin DPPH en solucin metanol/agua (relacin 3:2) durante una hora a 30oC. El cambio en absorbancia de color prpura oscuro a amarillo se midi a 517 nm usando un espectrofotmetro Genesys 10. La actividad antioxidante se expres como equivalentes micromol de Trolox (TE) estandar de referencia por 100 gramos de muestra. Cada producto se analiz en tres corridas independientes. Los datos se analizaron usando un anlisis estandar de varianza, LSD y prueba de rango mltiple de Duncan.

estadsticamente diferente de 10,133 TE/100g (Tabla 1); siete veces mayor que Biozyme, 14 veces mayor que Kendal,17 veces mayor que Auxym y 50 veces mayor que Stimulate. BM86, Kelpak y Citogrower no mostraron actividad antioxidante significativa. La alta actividad antioxidante en Crop+ sugiere que el producto ser ms efectivo en reducir los efectos negativos del estrs abitico que otros productos en el mercado. Al reducir los efectos del estrs abitico, el producto debera mejorar los rendimientos ms que otros bioestimulantes. Esto fue confirmado por ensayos de campo en que Crop+ verdaderamente prob ser ms efectivo que 20 otros bioestimulantes incrementando los rendimientos en un promedio de 12% sobre otros productos (Wozniak y Martineau, 2007). A travs de una actividad altamente antioxidante, Crop+ puede proteger el aparato fotosinttico ayudando al desarrollo de la clorofila en fotosntesis los cuales se incrementan con la aplicacin del producto (Wozniak y Martineau, 2008).
Tabla 1. Actividad antioxidante de ochoe bioestimulantes: Auxym, Biozyme, BM86, Citogrower, Crop+, Kendal, Kelpak y Stimulate, expresados como equivalentes micromol de un estandar de referencia, Trolox (TE) por 100 g de muestra. Promedio obtenido de tres corridas analticas independientes. Actividad Antioxidante Nombre del Producto TE/ 100 g muestra Crop+ 10,133 a* Biozyme 1,422 b Kendal 703 c Auxym 587 d Stimulate 203 e BM86 8 f Kelpak 0 f Citogrower 0 f
*LSD=95; Nmeros seguidos por diferentes letras son significativamente diferentes (p = 0.05).

BioNutrienteTM Calcio Extra mostr la mayor actividad antioxidante cuando se compar con los otros cuatro productos foliares con calcio. Los productos BioNutriente Calcio Extra y Nutri Calcio mostraron actividad antioxidante mayor a 1,000 TE/100 g (Tabla 2). Las diferencias estadsticas fueron altamente significativas comparados con otros productos. BioNutriente Calcio Extra mostr la mayor actividad estadsticamente significativa; casi tres veces mayor que Nutri Calcio y 13 veces mayor
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Resultados Crop+ mostr la mayor actividad antioxidante comparado con los otros seis bioestimulantes. Crop+ mostr la ms alta actividad antioxidante,
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que Calcio Metalosato. CaTransfer y Defender Calcio no tuvieron actividad antioxidante significativa. Los productos foliares con calcio son usados muy frecuentemente para mejorar la condicin postcosecha de los frutos. La actividad antioxidante en estos productos foliares debera mejorar sustancialmente el comportamiento del producto. Los productos nutricionales con calcio, con excepcin de la sal cloruro de calcio, generalmente contienen materia orgnica y reclaman cierto grado de quelacin/complejamiento. Puesto que el grado de quelacin/complejamiento no es medida fiable porque depende de la dilucin del producto y del grado de disociacin en agua (Li et al., 2007) la actividad antioxidante de los productos conlleva un importante beneficio y debera considerarse al seleccionar un producto para el manejo nutricional de un cultivo.
Tabla 2. Actividad antioxidante de cinco productos foliares con calcio: BioNutriente Calcio Extra, CaTransfer, Defender Calcio, Metalosate Calcio y Nutri Calcio, expresada como equivalente micromole de un estandar de referencia Trolox (TE ) por 100 g de muestra. Promedios obtenidos de tres corridas analticas independientes. Actividad Nombre del Producto Antioxidante TE/100 g muestra BioNutriente Calcio Extra 2,933 a* Nutri Calcio 1,022 b Metalosate Calcio 217 c CaTransfer 61 d Defender Calcio 13 d
*LSD=70; Nmeros seguidos por letra significativamente diferentes (p = 0.05). diferente son

Resumen Los productos Cytozyme Crop+ y BioNutriente Calcio Extra mostraron la mayor actividad antioxidante al compararlos con siete otros bioestimulantes y cuatro productos foliares con calcio, respectivamente. La alta actividad antioxidante de estos productos agrega valor adicional y ayuda a explicar su superior comportamiento en el campo al reducir los efectos negativos del estrs abitico y mejorar los rendimientos ms que otros productos en el mercado. Referencias Bray, E., J. Bailey-Serres and E. Weretilnyk. 2000. Responses to abiotic stresses: In: W. Gruissem, B. Buchannan, R. Jones, eds. Biochemistry and
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Molecular Biology of Plants. American Society of Plant Physiologists, Rockville, MD. p 1158-1249. Ervin, E.H., X. Zhang and R.E. Schmidt. 2005. Exogenous Salicylic Acid Enhances PostTransplant Success of Heated Kentucky Bluegrass and Tall Fescue Sod. Crop Sci. 45:240-244. Li, L.J., J.R. Martineau and E.M. Wozniak. 2007. Are Chelated Foliar Products Truly 100% Chelated? I. Dissociation of Agricultural Foliar Nutrients in Aqueous Environment Cupric Ions. Plant Nut. Sust. Agric. 12(1):1-4. Liu, X. and B. Huang. 2002. Cytokinin Effects on creeping Bentgrass Response to Heat Stress. II. Leaf Senescence and Antioxidant Metabolism. Crop Sci. 42:466-472. Mc Kersie B.D. 1996. Oxidative Stress in Vegetables. Department of Crop Science, University of Guelph. (Internal Publication December, 1996). Miller, H.E., F. Rigelhof, L. Marquart, A. Prakash and M. Kanter. 2000. Antioxidant Content of Whole Grain Breakfast Cereals, Fruits and Vegetables. J. Am. Col. Nut. 19 (90003): 312S-319S. Nilsen, E.T. and D.M. Orcutt. 1996. Physiology of Plants Under Stess. Abiotic Factors. John Wiley & Sons, Inc., USA. Norris, D.M. 1991. Method for Inducing Resistance in Plants Using Environmentally Safe Antioxidants. USA Patent 5004493. Park, Eung-Jun, Z. Keknic and T.H.H. Chen. 2006. Exogenous Applications of Glycine Betaine Increases Chilling Tolerance in Tomato Plants. Plant Cell Physiology 47(6):706-714. Taiz, L. and E. Zeiger. 2002. Plant Physiology. 3rd Ed. Sinauer Associates, Inc., Publishers. Sunderland, MA, USA. Wingate, V.P.M., M.A. Lawton and C.J. Lamb. 1988. Glutathione Causes a Massive and Selective Induction of Plant Defense Genes. Plant Physiol. 87: 206-210. Wozniak, E.M. and J.R. Martineau. 2007. Cytozymes Products for Sustainable Agriculture and their Advantages over Other Products on the Market. Plant Nut. Sust. Agric. 10(1):1-6. Wozniak, E.M. and J.R. Martineau. 2008. Crop+ Stimulates Photosynthesis. Key Process for Plant Growth, Development and Productivity. Bulletin (6):1-3. Zhang, X. and R.E. Schmidt. 1995. Plant Growth Regulators Impact on Alpha-tocopherol Concentration of Poa pratensis Grown Under Low Soil Moisture. Agronomy Abstracts, p 146. Madison, WI, American Society of Agronomy.
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