Compuestos fenlicos

Extraccin: Material fresco o seco: solucin alcohlica hidrlisis cida o bsica HCL 2 M 0-5 h NaOH 2M em nitrgeno 4 h

Identificacin: Cromtografa en capa fina (CCF) Cromatografa en papel (CP) Cromatografa de gases Cromatografia de lquidos Espectrometra de masas

Cromtografa en capa fina (bidimensional)

Revelador: Vanillin 10% en etanol Ac. Sulfrico conc. 2:1 Vanillin (1g ) en 10 ml de HCl conc. Solucin de FeCl3 al 2 % Reactivo de Gibbs 2,6 Clorimida de 2,6-diclororquinona al 2 % (2,6dichoroquinone chloroimide) + vapores de NH4OH Solucin de Sulfato crico amoniacal

Cuantificacin: Fenoles totales: preparacin de la solucin (Reactivo de FolnCiocalteau) Anlisis espectrofotomtrico 615 nm

Curva de (estndar)

calibracin:

fenol

Antocianinas

Extraccin: Material fresco: Acido metanol al 3 % 48 horas trifluoroactico-

Identificacin: Cromtografa en capa fina (CCF) Cromatografa en papel (CP) Cromatografa de gases Cromatografia de lquidos

Espectrometra de masas Cromtografa en papel

Eluyente:

BAW (butanol: c. actico: H2O 4:1:5 ) Forestal: HCl conc-ac. actico-agua (3:30:10 ) Frmico: HCl-c. frmico-H2O (2:5:3)

Revelador: Sin tratamiento qumico. Observacin en el visible

Cuantificacin:

Anlisis espectrofotomtrico Barrido en el visible Uso de estndares

Flavonoides

Agliconas: insolubles en agua, poco solubles en mezclas hidroalcohlicas, solubles en disolventes orgnicos Hetersidos:solubles en agua y en mezcla hidroalcohlicas, insolubles en disolventes polares Agentes quelantes: Forman complejos (FeCl3) y Al (AlCl3)

con

metales

Fe

Extraccin: Material fresco o seco: solucin acuosa de etanol

Identificacin: Cromtografa en capa fina (CCF) Cromatografa en papel (CP) Cromatografa de gases Cromatografia de lquidos Espectrometra de masas Cromtografa en capa fina papel Revelador: Solucin de FeCl3 al 2 % 2,4-dinitrofenihidrazina al 2.5 % en HCl 3 M (flavanonas) o en

Cuantificacin: Flavonoides. Solucin de AlCl3 al 10 % Anlisis espectrofotomtrico y colorimtrico (absobancia a 415 nm) Curva de calibracin: uso de estndares comerciales

Terpenoides Lactosas sesquiterpnicas

Extraccin: Material: diclorometano ter dietlico-ter de petrleo-metanol

Identificacin:

Cromatografa en capa fina (CCF) Cromatografa de gases Cromatografia de lquidos Resonancia Magntica Nuclear (RMN1 H y RMN-13C) Espectrometra de masas

Cromtografa en capa fina

Revelador:

Vanillin 10% en etanol ac. sulfrico conc. 2:1 Vapores de Yodo H3PO4 al 10 % en etanol KMnO4 al 0.5 en acetato cprico saturado Disolucin diluda de KMnO4 Reaccin de Badljet: Soln A: 1 g de cido pcrico en 100 ml agua+Soln B: 10 g de NaOH en 100 ml agua. Mezclarlas 1:1. Coloraci rojiza.

Saponinas Extraccin: Reflujo con acetato de etilo durante 48 hora Identificacin: a. Espuma. La formacin de espuma a partir de la dilucin de un extracto vegetal. 1g en 100 ml de agua calentar y agitar espuma estable 1 cm de altura en tubos calibrados (15 a 30 min en reposo) b. Efecto hemoltico. En donde nicamente se observa la solucin de eritrocitos transparente de color rojo. c. Reaccin coloreada con reactivo de Liebermann-Burchard (anhdrido actico/cido sulfrico) d. Reaccin colorida con reactivo de CarrPrice (SbCl3) e. Reaccin colorida con aldehdo aromtico en cido sulfrico (vainillina, anisaldehdo)

Cromatografa en capa fina Soporte: Silica gel (Merck) Eluyente: hexano: acetato de etilo (7:3) Agente cromognico: reactivo de LiebermannBurchard Saponinas esteroidales: Color azul Saponinas triterpnicas Color rosa Cuantificacin: a. Gravimetra: solucin acuosa, hidrlisis, se obtienen las sapogeninas (agliconas) libres que precipitan y se determinan por peso. b. Cromatografa de alta resolucin (CLAR, HPLC). c. ndice hemoltico. La hemlisis es un proceso en el cual la membrana de la clula se degrada y permite el paso de la hemoglobina al exterior de la clula. una

suspensin de eritrocitos en solucin salina opaca, si se agrega saponinas la solucin con los eritrocitos se pone transparente y roja. Para determinar bajas concentraciones se requiere de una solucin salina con eritrocitos, en donde la cantidad de stos es conocida, el resultado es expresado en ndice hemoltico (espectrofotometra) saponinas totales. d. Colorimtrico: anisaldehdo (saponinas esferoidales) Identificacin Resonancia Magntica Nuclear (RMN1 H y RMN-13C) Espectrometra de masas (EM)