VIII Encontro Sobre Abelhas

ii
Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP) (Cmara Brasileira do Livro, SP, Brasil) Encontro sobre Abelhas : Biodiversidade e Uso Sustentado de Abelhas (8. : 2008 : Ribeiro Preto, SP) VIII Encontro sobre Abelhas : Biodiversidade e Uso Sustentado de Abelhas / [editores David De Jong, Tiago Mauricio Francoy, Weyder Cristiano Santana]. -Ribeiro Preto, SP : FUNPEC Editora, 2008. Vrios organizadores. 1. Abelhas - Congressos I. De Jong, David. II. Francoy, Tiago Mauricio. III. Santana, Weyder Cristiano. 08-07799 ndices para catlogo sistemtico: 1. Congressos : Abelhas : Zoologia 595.79906 Anais do VIII Encontro sobre Abelhas. Ribeiro Preto. 2008. De Jong, D.; Francoy, T.M.; Santana, W.C., editores. lxiii + 749 p.:il.; CD-ROM CDD-595.79906
iii
ANAIS DO VIII ENCONTRO SOBRE ABELHAS RIBEIRO PRETO 23 a 26 de julho de 2008 Hotel JP, Ribeiro Preto
Comisso Organizadora
Vera Lucia Imperatriz Fonseca - Presidente Tiago Mauricio Francoy 1 Vice-Presidente Lionel Segui Gonalves 2 Vice-Presidente Zil Luz Paulino Simes 1 Secretrio Mrcia Maria Gentile Bitondi 2 Secretrio Evandro Camillo 1 Tesoureiro Carlos Alberto Garfalo 2 Tesoureiro David De Jong Comisso Cientfica Klaus Hartmann Hartfelder Relaes Exteriores
Editores
David De Jong Tiago Mauricio Francoy Weyder Cristiano Santana
Comisso Cientfica
David De Jong Ademilson Espencer Egea Soares Alexandre dos Santos Cristino Anete Pedro Loureno Camila Maia da Silva Daiana Almeida de Souza Francis de Morais Franco Nunes Geusa Simone de Freitas Ivan Paulo Akatsu Marcia Regina Cavichio Issa Marina Lopes Grassi Matheus de Oliveira Bazoni Michelle Manfrini Morais Michelle Prioli
iv
Moyss Elias Neto Mnica Mazzei Florecki Rodrigo Pires Dallacqua Rogrio Aparecido Pereira Vanessa de Andrade Bugalho Weyder Cristiano Santana
Assessoria
Aline Mackert dos Santos Amanda Freire de Assis Ana Durvalina Bomtorin Ana Rita Tavares de Oliveira Baptistella Camila Calixto Moreira Dias Cristiano Menezes Fernanda Carvalho Humann Gisele de Carvalho Pinto Cabral Liliane M. Fres de Macedo Mauro Prato Mipsi Cristina Mori Omar Martins Patrcia Nunes Silva Paulo Emilio F. de Alvarenga Rosana Almeida Vera Lucia Castelo Figueiredo
Patrocinadores
CNPq CAPES FAPESP Ministrio do Meio Ambiente (MMA) Universidade de So Paulo (USP) Pr-Reitoria de Ps-Graduao-USP Ps-Graduao em Entomologia, FFCLRP-USP Ps-Graduao em Gentica, FMRP-USP Ps-Graduao em Biologia Comparada, FFCLRP-USP Apis Flora 6-P Marketing & Propaganda
Prefcio
O Encontro Sobre Abelhas, evento cientfico realizado a cada dois anos em Ribeiro Preto, para discusso de temas nas amplas reas da biologia, gentica e comportamento de abelhas em geral e tecnologias vinculadas a essas reas, tem crescido cada vez mais, servindo como uma vitrine da pesquisa Brasileira sobre abelhas. Para o VIII Encontro so previstos sete conferncias plenrias, 17 simpsios com 72 palestrantes, e 326 trabalhos cientficos em forma de posters (painis) sobre Avanos em criao de abelhas, Avanos em gentica e fisiologia de abelhas, Biologia da polinizao, Biologia e manejo de abelhas africanizadas, Comportamento de abelhas, Conservao da biodiversidade de abelhas tropicais, Ecologia de abelhas nativas, Morfologia de abelhas, Ninhos de abelhas, Pragas, parasitas e doenas de abelhas tropicais, Produtos das abelhas, Sistemtica e biogeografia de abelhas e Uso sustentvel de abelhas. O tema principal do VIII Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto Biodiversidade e Uso Sustentvel de Abelhas . Neste ano de 2008 comemoramos 10 anos do International Workshop on the Conservation and Sustainable Use of Pollinators in Agriculture, with Emphasis on Bees, que deu origem Declarao de So Paulo sobre a conservao e uso sustentado dos polinizadores. Esta Declarao foi o documento apresentado Conveno da Diversidade Biolgica para a criao de um programa relacionado conservao e uso sustentado de polinizadores, concretizada na Conferncia das Partes 5, ocorrida em Nairbi no ano de 2000. Desde ento, o tema tem sido trabalhado nos Encontros Sobre Abelhas de Ribeiro Preto, que congregam os pesquisadores brasileiros da rea, em nmeros expressivos. Cada vez mais este um frum de debates de idias e de apresentao de panoramas globais sobre as pesquisas que se destacam no momento nas diversas reas que usam as abelhas como objeto de estudo. Neste ano temos destaques importantes. O Catlogo de Abelhas Neotropicais um dos pontos expressivos da atividade da pesquisa taxonmica do Brasil. Baseado na obra do Padre Moure, o Catlogo conta ainda com importante captulo sobre os Meliponini neotropicais, de autoria de Joo Maria F. de Camargo e Silvia Regina de Menezes Pedro, onde a literatura existente foi revista e atualizada at 2005. Alm de ter uma verso impressa de 2007, o catlogo ser disponibilizado online, certamente com grande impacto e possibilidade de consultas por todos. A plenria de Gabriel A. R. Melo vai tratar deste tema com detalhes. Discusses sobre a Tecnologia da Informao e a disponibilizao de informao online sero feitas em simpsios especializados.
vi
Temos muitos palestrantes ilustres em toda a programao, do Brasil e do exterior. Entre as palestras selecionadas, vamos falar tambm da organizao social das abelhas, com plenrias de Robert Page Jr., Mandian Srinivasan , Charles Claudianos, alm de inmeras apresentaes orais. Com relao ao uso sustentado das abelhas, as plenrias so de Claire Kremen, Juliet Osborne, e Braulio S. F. Dias. Reunimos aqui no VIII Encontro Sobre Abelhas de Ribeiro Preto pesquisadores de quatro pases da Amrica Latina (Mxico, Colmbia, Argentina, Brasil), Estados Unidos, Canad, Alemanha, Espanha, Inglaterra, Polnia, Sucia e Austrlia. Pesquisadores do Brasil todo estaro presentes, de Norte ao Sul do Pas. Agradecemos o apoio financeiro recebido das agncias de apoio pesquisa cientfica: FAPESP, CAPES, CNPQ, e da Universidade de So Paulo, atravs da pr-Reitoria de PsGraduao. O empenho da comisso organizadora deste evento foi no sentido de mostrarmos o panorama geral de pesquisas com abelhas no Brasil e no mundo, neste ano em que comemoramos os 10 anos da Declarao de So Paulo sobre a conservao e uso sustentado dos polinizadores, uma iniciativa brasileira de impacto internacional. Vera Lucia Imperatriz Fonseca Presidente do VIII Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto
vii
Paulo Nogueira-Neto, o nosso homenageado

Paulo Nogueira Neto um nome importante quando falamos do estudo das abelhas indgenas sem ferro no Brasil e no mundo. Durante muitos anos tem atuado incansavelmente para o maior conhecimento e preservao destas abelhas. Como preserv-las, o que comem, onde vivem, como cri-las em pequenas populaes e como utiliz-las na polinizao, so alguns dos pontos de interesse de suas pesquisas. Dr. Paulo uma pessoa extraordinria, generosa nas suas aes e ao mesmo tempo rgida em relao aos seus princpios inabalveis. Sempre apoiou o desenvolvimento de seus alunos e colegas de trabalho; um conciliador, com sabedoria. As honrarias que tem recebido geralmente se referem ao trabalho incansvel realizado em prol do meio ambiente e do desenvolvimento sustentado. Podemos destacar aqui a criao e estruturao da Secretaria Especial do Meio Ambiente do Ministrio do Interior, embrio do Ministrio do Meio Ambiente; sua atuao na construo das leis ambientais do Brasil; seu trabalho contnuo em conselhos de organizaes no governamentais e governamentais; sua atuao na Comisso Brundtland, que cunhou o termo desenvolvimento sustentado no seu relatrio final, denominado Nosso Futuro Comum; sua atuao no CONAMA desde a sua criao. Dr Paulo foi reconhecido atravs de inmeros prmios, no exterior (por exemplo, Prmio Paul Getty, Prmio Duke of Edinburg, Comanda da Arca Dourada dos Pases Baixos) e no Brasil (Ordem Rio Branco, Prmio Moinho Santista, Trofu Guerreiro da Educao, entre muitos outros). A ele rendemos nossas homenagens especiais como destaque na contribuio cientfica para as abelhas sem ferro, neste ano em que o VIII Encontro Sobre Abelhas de Ribeiro Preto tem como tema Biodiversidade e uso sustentado de abelhas. Receba o nosso respeito, a nossa estima, o nosso agradecimento singelo pela contribuio importante e consistente, pelo exemplo de integridade e amor pelas abelhas. Vera Lucia Imperatriz Fonseca Presidente do VIII Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto
viii
Warwick Estevam Kerr, Paulo Nogueira Neto e Padre Jesus Moure em 1951
Dr. Paulo em uma visita ao meliponrio da FFCLRP em maro de 2008, foto de Cristiano Menzes.
ix
INDICE
Anais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
C O N F E R N cIA S
DEVELOPMENTAL EVOLUTION OF dIVISION OF LABOR
Robert Page Jr.
02
MORE THAN A HONEY MACHINE: VISION, NAVIGATION ANd COGNITIVE CAPACITY OF HONEY BEES
Mandyam Srinivasan
03
MOLECULAR MAKINGS OF MEMORY: NEUREXIN ANd NEUROLIGIN IN THE HONEY BEE

Charles Claudianos, Sunita Biswas, Judith Reinhard, John Oakeshott, Robyn Russell, Alexandre dos Santos Cristino, Mandyam V. Srinivasan
04
HONEY BEE POLLINATION CRISIS: CAN NATIVE BEES TAKE UP THE SLACK?
Claire Kremen
05
S I MP SIO S
SiMpsiO 1 A TecnOLOGia da InFOrMaO e Os POLiniZadOres
Coordenador: Antonio Mauro Saraiva
INTEROPERABILITY WITHIN THE INTERNATIONAL POLLINATOR INITIATIVE

Michael Ruggiero
08 09 10
REdE BRASILEIRA dE COLEES dE INSETOS POLINIZAdORES

Vanderlei Peres Canhos
A REdE TEMTICA dE POLINIZAdORES dA IABN

Antonio Mauro Saraiva
xi
REdES dE CONTROLE E REdES dE SENSORES SEM FIO APLICAdAS S PESQUISAS COM MELIPONNEOS
Carlos Eduardo Cugnasca
11
INSTRUMENTAO VIRTUAL PARA PESQUISAS COM UdIO E VdEO EM MELIPONNEOS

Andr Riyuiti Hirakawa
12
MONITORAMENTO dE COLNIAS dE ABELHAS AFRICANIZAdAS NAS ATIVIdAdES dE ENXAMEAO E FORRAGEAMENTO

Lionel Segui Gonalves, David De Jong, Gesline F. Almeida, Pedro R. Prado (Apilab-USP, Ribeiro Preto-SP
13
SiMpsiO 2 HOW tO Find a FLOWer SMaLL Brains ResOLvinG COMpLeX TasKs

Coordenador: Michael Hrncir
FINdING A FLOWER A COMPLEX TASK AT THE INdIVIdUAL ANd THE COLONY LEVEL
Michael Hrncir
15 16 19
VISUALLY GUIdEd NAVIGATION IN HONEY BEES

Mandyan Veerambudi Srinivasan
HOW HONEY BEES LEARN ANd PROCESS COMPLEX FLORAL SCENTS

Judith Reinhard, Michael Sinclair, Charles Claudianos, Mandyam V. Srinivasan
EARLY OLFACTORY EXPERIENCES WITHIN THE HONEY BEE HIVE: ECOLOGICAL IMPLICATIONS FROM BEHAVIORAL ANd PHYSIOLOGICAL APPROACHES
Walter M. Farina, Andrs Arenas, Vanesa Fernndez
20
INdIVIdUAL ANd SOCIAL LEARNING IN THE STINGLESS BEE MELIPONA QUAdRIFASCIATA

Sofia Ins Mc Cabe, Klaus Hartfelder, Walter M. Farina
22
xii
OLFACTORY INFORMATION USE ANd GUIdANCE OF NESTMATES TO FOOd IN STINGLESS BEES

Stefan Jarau
24
Coordenadores: David De Jong, Dejair Message
SiMpsiO 3 PatOLOGia de AbeLhas
PERIOdICAL HONEY BEE COLONY LOSSES IN GERMANY: RESULTS FROM A 4 YEAR MONITORING PROJECT
Peter Rosenkranz
27
METAGENOMIC ANALYSIS OF MICROORGANISMS IN HONEY BEES FROM BRAZIL
Erica Weinstein Teixeira, Dejair Message, Yanping Chen, Jeffery Pettis, Jay D. Evans
34
EFEITOS PROVOCAdOS POR AGROTXICOS EM ABELHAS NO BRASIL 41

Osmar Malaspina, Tiago Favaro de Souza, Elaine Cristina M. da Silva Zacarin, Aline da Silva Cruz, Daiane de Jesus
DOENAS dE ABELHAS NO SUL dO BRASIL

Aroni Sattler
49 50
NEW ANd EXOTIC dISEASE THREATS FOR BRAZILIAN BEES

David De Jong, Dejair Message
SiMpsiO 4 GenOMics, prOteOMics and MOLecULar evOLUtiOn

Coordenador: Zil Luz Paulino Simes
NATURAL EXPERIMENTS IN dEVELOPMENTAL BIOLOGY: THE CASE OF HONEY BEE POLYPHENISM

Angel Roberto Barchuk
54
OdORANT RECEPTOR EXPRESSION IN HONEYBEES: A CASE FOR ENVIRONMENTALLY dRIVEN PLASTICITY?

Charles Claudianos, Judith Reinhard, Julie Lim, Michael Sinclair, Mandyam V. Srinivasan
56
xiii
SiMpsiO 5 POLiniZaO na AGricULtUra: UMa abOrdaGeM ecOssistMica

Coordenador: Breno Magalhes Freitas
VISITANTES FLORAIS E POLINIZAO dA CASTANHA dO BRASIL (BERTHOLLETIA EXCELSA) EM CULTIVO COMERCIAL NA FLORESTA AMAZNICA
Breno Magalhes Freitas, Marcelo Casimiro Cavalcante
58
RISK ASSESSMENT OF GM COTTON TO FLOWER VISITORS IN BRAZIL 65

Carmen Pires, Carolina F. Cardoso, Maria A. Lima, Fernando A. Silveira, Lcio A. O. Campos, Paulo A. V. Barroso, Edison Sujii, Eliana Fontes
RESTORING ANd MONITORING POLLINATOR COMMUNITIES ANd FUNCTION IN CALIFORNIAS CENTRAL VALLEY
Claire Kremen, Katharina Ullman, Mace Vaughan
71
A POLINIZAO dE CULTURAS OLEAGINOSAS COM POTENCIAL PARA PROdUO dE BIOdIESEL: UM ESTUdO dE CASO COM A MAMONA (RICINUS COMMUNIS L.)
Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Breno Magalhes Freitas, Marcelo de Oliveira Milfont, Eva Mnica Sarmento da Silva
72
SiMpsiO 6 Apresentaes Orais dOs Ps GradUandOs dO PrOGraMa de EntOMOLOGia - FFCLRP-USP

Coordenadores: Aline Mackert dos Santos, Cristiano Menezes
RECONHECIMENTO EM ABELHA SEM FERRO: UMA ABORdAGEM QUMICA E COMPORTAMENTAL
Tlio Marcos Nunes, Izabel Cristina Casanova Turatti, Norberto Peporine Lopes, Ronaldo Zucchi
81
UTILIZAO dE NINHOS-ARMAdILHA dE dIFERENTES COMPRIMENTOS POR FMEAS dE CENTRIS (HETEROCENTRIS) ANALIS (FABRICIUS, 1804) (HYMENOPTERA, APIdAE: CENTRIdINI) 87
Juliana Duarte de Souza Alonso, Carlos Alberto Garfalo
xiv
ENXAMEAO E CRESCIMENTO INICIAL dE COLNIAS dE ABELHAS SEM FERRO: O CASO dE PLEBEIA REMOTA 95
Patrcia Nunes-Silva, Sergio Dias Hilrio, Denise de Araujo Alves, Prsio de Souza Santos Filho, Vera Lucia Imperatriz Fonseca
MULTIPLICAO dE COLNIAS dE NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS (HYMENOPTERA, APIdAE) UTILIZANdO RAINHAS PROdUZIdAS IN VITRO
Cristiano Menezes, Vera Lucia Imperatriz Fonseca
103
THE EFFICIENCY IN dETECTING, UNCAPPING ANd REMOVING dEAd BROOd IN AFRICANIZEd HONEY BEES
Michelle Manfrini Morais, Rogrio Aparecido Pereira, Tiago Mauricio Francoy, Ktia Peres Gramacho, David De Jong, Lionel Segui Gonalves
108
SiMpsiO 7 BiOLOGia e Gentica de AbeLhas seM FerrO

Coordenador: Ana Maria Bonetti
SEX ANd CASTE IN AMAZONIAN MELIPONA BEES
Carlos Gustavo Nunes-Silva, Spartaco Astolfi-Filho, Gislene Almeida Carvalho-Zilse
116
AdAPTAES dAS ABELHAS SEM FERRO AO CLIMA TEMPERAdO dO SUL dO BRASIL

Betina Blochtein, Sidia Witter, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca
121
PROGRAMA E SELEO dE COLNIAS dE MELIPONA SCUTELLARIS VISANdO O AUMENTO dA PROdUO dE MEL NO ESTAdO dA BAHIA 131
Carlos Alfredo Lopes de Carvalho, Rogrio Marcos de Oliveira Alves, Gislene Almeida Carvalho-Zilse
NINHOS dE MELIPONNEOS EM UM REMANESCENTE dE MATA COM ARAUCRIA NO RIO GRANdE dO SUL

Sidia Witter, Letcia Azambuja Lopes, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca, Betina Blochtein, Bruno Brito Lisboa, Cludio Mondin
132
xv
Coordenadores: Betina Blochtein, Giorgio Cristino Venturieri
SiMpsiO 8 MeLipOnicULtUra SUstentveL
SOBRE SEXO E CASTAS dAS ABELHAS MELIPONA

Paulo Nogueira Neto
140
STINGLESS BEES IN MXICO: PRESENT STATUS ANd PERSPECTIVES FOR THE FUTURE
Jos Javier G. Quezada-Eun, Jorge A. Gonzalez-Acereto, Luis A. Medina-Medina
142
REVISO dAS RELAES ENTRE FORdEOS (DIPTERA, PHORIdAE) E ABELHAS INdGENAS SEM FERRO (APIdAE, MELIPONINI) E TCNICAS dE CONTROLE
Felipe Andrs Len Contrera, Giorgio Cristino Venturieri
146
POTENCIAL NECTARFERO dO AAZEIRO (EUTERPE OLERACEA MART. ARECACEAE) NA AMAZONIA ORIENTAL
Giorgio C. Venturieri, Milene S. Souza, Charles A. B. Pereira, Silvane T. Rodrigues
154
O VALOR dOS SUBSTRATOS dE NIdIFICAO PARA AS ABELHAS SEM FERRO (MELIPONINI) NO CERRAdO (MARANHO, BRASIL) E A MELIPONICULTURA COMO FERRAMENTA dE SUSTENTABILIdAdE E CONSERVAO
Rgo, M.M.C., Albuquerque, P.M.C. de, Venturieri, G.
159
Coordenadores: Carlos Alberto Garfalo, Isabel Alves dos Santos
SiMpsiO 9 NinhOs ArMadiLha
A UTILIZAO dE NINHOS-ARMAdILHA NO ESTUdO dA ESTRUTURA SOCIOGENTICA dE NINHOS dE EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIdAE)

Rogrio Oliveira Souza, Marco Antonio Del Lama
168
xvi
TRAP-NESTING AS A METHOdOLOGY FOR THE STUdY OF SOLITARY BEE ECOLOGY ANd BEHAVIOR
Jordi Bosch, Sergio Osorio
175
A ORIENTAO E O SOMBREAMENTO dOS NINHOS-ARMAdILHA INFLUENCIAM AS TAXAS dE CAPTURA?

Roberta P. Ferreira, Celso F. Martins
186 192
BIOLOGIA dA NIdIFICAO EM HYLAEUS (COLLETIdAE)

Guaraci Duran Cordeiro, Isabel Alves dos Santos
O USO dE NINHOS-ARMAdILHA EM ESTUdOS REALIZAdOS NO PARQUE MUNICIPAL dAS ARAUCRIAS, GUARAPUAVA (PR)
Maria Luisa Tunes Buschini, Jesiani Rigon, Juliano Cordeiro, Mary Ellen Reis Diniz
198
ABELHAS (HYMENOPTERA, APOIdEA) NIdIFICANdO EM NINHOSARMAdILHA NA ESTAO ECOLGICA dE CAETETUS, GLIA, SP

Carlos Alberto Garfalo
208
SiMpsiO 10 CaUsas, cOnseQncias e cOntrOLe de enXaMeaes eM Apis mellifera

Coordenador: Lionel Segui Gonalves
MAIN FACTORS RELATEd TO SWARMING, ABSCONdING ANd MIGRATION OF HONEY BEES ANd HOW TO CONTROL THEM
Zbigniew Lipiski
218
ENXAMEAO INdUZIdA POR AUMENTO dE TEMPERATURA EM ABELHAS AFRICANIZAdAS

Gesline Fernandes de Almeida, Lionel Segui Gonalves
221
COMMUNICATION SIGNALS USEd IN QUEEN REPLACEMENT ANd COLONY RELOCATION dECISIONS IN HONEY BEES
Stanley Scott Schneider
222
xvii
COMO OS COMPORTAMENTOS dE MIGRAO E ABANdONO dAS ABELHAS AFRICANIZAdAS TORNARAM POSSVEL A APICULTURA NO NORdESTE dO BRASIL
Breno Magalhes Freitas, Raimundo Maciel Sousa, Isac Gabriel Abraho Bomfim
224
SiMpsiO 11 COMpOrtaMentO de abeLhas seM FerrO

Coordenadores: Sidnei Mateus, Fabio Santos do Nascimento
BIOLOGIA COMPORTAMENTAL dE TRIGONA PELLUCIdA COCKERELL, 1912, (HYMENOPTERA, APIdAE, MELIPONINI). 233
Sidnei Mateus, Ronaldo Zucchi
THE LAYING OF FUNCTIONAL EGGS BY MELIPONA BICOLOR (HYMENOPTERA, MELIPONINI) WORKERS ANd THEIR CELL-SEALING PERFORMANCE
Dirk Koedam, Vera L. Imperatriz-Fonseca
241 244
THE ROLE OF LEKS IN THE REPROdUCTION OF STINGLESS BEES

Elizabeth Engels, Wolf Engels
CONFLITO ENTRE RAINHA E OPERRIAS NA PROdUO dE MACHOS EM COLNIAS dE MELIPONA SCUTELLARIS (APIdAE: MELIPONINI) 245
Denise A. Alves, Tom Wenseleers, Tiago Mauricio Francoy, Vera L. Imperatriz-Fonseca, Paulo Nogueira-Neto, Prsio S. Santos-Filho
THE BEHAVIORAL ROLE OF CUTICULAR HYdROCARBONS IN EUSOCIAL BEES: ARE THEY THEY THE SAME IN STINGLESS BEES?
Fbio S. Nascimento, Ivelize C. Tannure-Nascimento, Ronaldo Zucchi
247
SiMpsiO 12 FerraMentas para avaLiaO da biOdiversidade eM abeLhas

Coordenador: Tiago Mauricio Francoy
A MORFOMETRIA GEOMTRICA dE ASAS E A IdENTIFICAO dOS MELIPONINI
Tiago Mauricio Francoy, Lionel Segui Gonalves, Vera Lucia Imperatriz Fonseca
252
xviii
MOLECULAR ECOLOGY OF THE STINGLESS BEE NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS

Oliveira EJF, Freitas GS, Soares AEE, Contel EPB
255
REVISO dAS ANLISES dE HIdROCARBONETOS CUTICULARES EM ABELHAS SEM FERRO

Tlio Marcos Nunes
262
BIOdIVERSIdAdE dE MELIPONINEOS: CONTRIBUIO dA BIOLOGIA MOLECULAR BARCOdING THE BEES OF THE WORLd
Rute Magalhes Brito, Flavio de Oliveira Francisco, Geraldo Moretto, Maria Cristina Arias*
268 276
Laurence Packer, Jason Gibbs, Cory Sheffield, Peter Kevan
Coordenadores: Celso Feitosa Martins, Maria Cristina Gaglianone
SiMpsiO 13 BiOLOGia de AbeLhas SOLitrias
DINMICA TEMPORAL E ESPACIAL dE ABELHAS SOLITRIAS NO SEMI-RIdO dO NORdESTE dO BRASIL

Fernando Csar Vieira Zanella
284
UTILIZAO dE RECURSOS FLORAIS POR EUGLOSSA ANNECTANS (HYMENOPTERA, APIdAE, EUGLOSSINI) BIOLOGIA dE NIdIFICAO E ASPECTOS COMPORTAMENTAIS dE XYLOCOPA ORdINARIA E XYLOCOPA FRONTALIS NO NORTE FLUMINENSE
Andr Sarlo Bernardino, Maria Cristina Gaglianone
Marilda Cortopassi-Laurino, Lvia Leal Dornelles, Anne Zillikens, Josefina Steiner
292
299
BIOLOGIA dE NIdIFICAO dA HOSPEdEIRA MONOECA HAEMORRHOIdALIS (SMITH, 1854) E INTERAES COM ABELHAS, VESPAS E BESOUROS PARASITAS (HYMENOPTERA: APIdAE, MUTILLIdAE; COLEOPTERA: MELOIdAE) 305
Lo Correia da Rocha-Filho, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo
xix
CARACTERSTICAS COMPORTAMENTAIS dAS ESPCIES dE EUGLOSSA LATREILLE (HYMENOPTERA, APIdAE) E A ORIGEM dE EUSSOCIALIdAdE NAS ABELHAS
Solange C. Augusto, Carlos Alberto Garfalo
310
SiMpsiO 14 BiOGeOGraFia de abeLhas eM reas abertas na AMrica dO SUL

Coordenador: Fernando Amaral da Silveira
BIOGEOGRAFIA dE ABELHAS dE REAS ABERTAS NA AMRICA dO SUL: UMA RETROSPECTIVA

Fernando Amaral da Silveira
317
BIOGEOGRAFIA dE REAS ABERTAS dA AMRICA dO SUL COM NFASE EM ABELHAS dA TRIBO TAPINOTASPIdINI
Antnio J.C. Aguiar, Gabriel A. R. Melo
322
BIOGEOGRAFIA HISTRICA dE EXOMALOPSIS (PHANOMALOPSIS) MICHENER & MOURE, 1957 (APIdAE: EXOMALOPSINI) 327
Eduardo A. B. Almeida, Fernando A. Silveira
BIOGEOGRAPHY OF THE XEROMELISSINAE (HYMENOPTERA: COLLETIdAE)

Laurence Packer, Eduardo A.B. Almeida
332
SiMpsiO 15 Apresentaes Orais dOs Ps GradUandOs dO LabOratriO de BiOLOGia dO DesenvOLviMentO de AbeLhas - LBDA - USP
Coordenador: Aline Mackert dos Santos
EXOESQUELETO dE APIS MELLIFERA: MOdELO ONTOGENTICO NA INVESTIGAO dA MATURAO CUTICULAR EM ABELHAS CORBICULAdAS
Moyss Elias-Neto, Mrcia Maria Gentile Bitondi
339
xx
GENES COdIFICAdORES dE PROTENAS CUTICULARES EM ABELHAS APIS MELLIFERA: EXPRESSO dIFERENCIAL E REGULAO dURANTE A FORMAO dO EXOESQUELETO
Michelle Prioli Miranda Soares, Moyss Elias Neto, Mrcia Maria Gentile Bitondi
346 354 365
EXPRESSO dE CAdERINAS EM GNAdAS dE APIS MELLIFERA

Mnica M. Florecki, Klaus Hartfelder
A VIA dE SINALIZAO dE INSULINA EM APIS MELLIFERA

Sergio Vicente de Azevedo, Klaus Hartfelder
O STATUS NUTRICIONAL E A dINMICA dO METABOLISMO dO HORMNIO JUVENIL NA VIdA AdULTA dE APIS MELLIFERA
Aline Mackert, Gustavo Conrado Couto Rosa, Ana Durvalina Bomtorin, Marcela A. F. Bezerra Laure, Mrcia Maria Gentile Bitondi, Zil Luz Paulino Simes
375
SiMpsiO 16 AvanOs ObtidOs aps 10 anOs da DecLaraO de SO PaULO sObre POLiniZadOres

Coordenadores: Vera L.I. Fonseca, Marina C. P. P. Landeiro
OS CURSOS INTERNACIONAIS SOBRE POLINIZAO NO BRASIL

Blandina Felipe Viana
385
SiMpsiO 17 DesvendandO a prpOLis: da abeLha aO hOMeM

Coordenador: Ademilson E.E. Soares
USO dE RESINAS PELAS ABELHAS E FATORES QUE ALTERAM A PROdUO dE PRPOLIS

Ademilson Espencer Egea Soares
387
ESTUdO dAS FONTES VEGETAIS dE PRPOLIS BRASILEIRA POR ESPECTROMETRIA dE MASSAS

Alexandra Christine Helena Frankland Sawaya
393
xxi
PHENOLIC COMPOSITION, ANTIMICROBIAL ANd IN VITRO ANTIOXIdANT ACTIVITIES OF BRAZILIAN REd PROPOLIS
T.L.C. Oldoni, I.S.R. Cabral, P.L. Rosalen, M. Ikegaki, S.M. Alencar
401
DETERMINAO dE ORIGEM GEOGRFICA dA PRPOLIS VERdE E PARMETROS BIOLGICOS ASSOCIAdOS

Esther Margarida Bastos
408
RESU MOS
AvanOs eM criaO de abeLhas
410
WEBLABS DE SERVIOS AMBIENTAIS - UM ESTUDO DE CASO EM COLNIAS DE MELIPONA QUAdRIFASCIATA

Marcelo Succi de Jesus Ferreira, Pedro Luiz Pizigatti Crrea, Antnio Mauro Saraiva
411
PRODUO DE RAINHAS EM PLEBEIA LUCII MOURE (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA)
Lila Vianna Teixeira, Mara Garcia Tavares, Lucio Antonio de Oliveira Campos
412 413
MONITORAMENTO DE APIRIO ATRAVS DE REDES DE AUTOMAO

Miguel dos Santos Alves Filho, Carlos Eduardo Cugnasca, Rafael de Aquino Cunha, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Antonio Mauro Saraiva
AQUECEDORES DE BAIXO CUSTO PARA MELIPONICULTURA

Ayrton Vollet Neto, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Cristiano Menezes
414
EMERGNCIA E MANUTENO DE APIS MELLIFERA (HYMENOPTERA: APIdAE) EM CMARAS CLIMATIZADAS

Deodoro Magno Brighenti, Csar Freire de Carvalho, Carla Regina Guimares Brighenti, Stephan Malfitano Carvalho
415
BOMBUS ATRATUS REARING FOR POLLINATION MANAGEMENT IN COLOMBIA

Maria Teresa Almanza, Jos Ricardo Cure, Dieter Wittmann
416
xxii
PRODUO IN VITRO DE RAINHAS EM TETRAGONISCA ANGUSTULA LATREILLE 1811 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI) 417
Mauro Prato, Ademilson Espencer Egea Soares
ALIMENTAO COM DIFERENTES TIPOS DE PLEN EM COLNIAS DE SCAPTOTRIGONA dEPILIS E MELIPONA QUAdRIFASCIATA (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Mara Martins Franco, Fernando Mendes Barbosa, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Fernanda Helena Nogueira-Ferreira, Cristiano Menezes
418
CUPINZEIROS (CUPIM DE MONTCULO) COMO COLMIA ARTIFICIAL PARA ABELHAS SEM FERRO COM NIDIFICAO SUBTERRNEA 419
Robson Mendes, Pedro Jovchelevich, Dirk Koedam
RAINHAS DE NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS PRODUZIDAS IN VITRO SO VIVEIS

Cristiano Menezes, Vera Lucia Imperatriz Fonseca
420
RELAO ENTRE A DENSIDADE, TEMPERATURA E UMIDADE NA PRODUO DE MACHOS EM SCAPTOTRIGONA POSTICA (HYMENOPTERA, MELIPONINI)
Naiara Rabelo Valle, David Barros Muniz, Lenira de Mello Lacerda
421
AvanOs eM Gentica e FisiOLOGia de abeLhas

Bruno Berger, Carminda da Cruz-Landim
422
ACID PHOSPHATASE PATTERNS ON NARCOTIZED HONEYBEE QUEENS 423 PROTENAS DE ESTOCAGEM E IMUNIDADE EM ABELHAS APIS MELLIFERA: UMA RELAO DEPENDENTE DA DIETA
Anete Pedro Loureno*, Juliana Ramos Martins, Karina Rosa Guidugli-Lazzarini, Mrcia Maria Gentile Bitondi, Zil Luz Paulino Simes
424
AVALIAO DA ADEQUAO DA REGIO CITOCROMO OXIDASE I/ CITOCROMO OXIDASE II PARA ESTUDOS DE VARIABILIDADE GENTICA POPULACIONAL EM XYLOCOPA FRONTALIS
Cndida Maria Lima Aguiar, Gilberto Marcos de Mendona Santos, Marco Antonio Costa
425
xxiii
PERFIL RFLP DA REGIO CITOCROMO OXIDASE I/CITOCROMO OXIDASE II DE XYLOCOPA FRONTALIS
Gilberto Marcos de Mendona Santos, Cndida Maria Lima Aguiar, Marco Antonio Costa
426
EFEITO DA DIETA PROTICA SOBRE A EXPRESSO DE VG, TTULO DE VG E HJ NA HEMOLINFA DE OPERRIAS DE MELIPONA QUAdRIFASCIATA (APIDAE: MELIPONINI)
Weyder Cristiano Santana, Erica Tanaka, Karina Rosa Guidugli Lazzarini, Klaus Hartfelder
427
EMPREGO DAS PROTENAS PRINCIPAIS DA GELIA REAL (MRJPS) COMO MARCADORES MOLECULARES PARA PRODUO DE GELIA REAL EM APIS MELLIFERA AFRICANIZADA 428
Tatiane Vicente Baitala, Patricia Faquinello, Maria Claudia Colla Ruvolo-Takasusuki, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo
VARIABILIDADE GENTICA DOS LOCOS DAS PROTENAS PRINCIPAIS DA GELIA REAL (MRJPS) EM APIS MELLIFERA AFRICANIZADAS PRODUTORAS DE GELIA REAL
Tatiane Vicente Baitala, Patricia Faquinello, Ana Lucia Stuchi, Maria Claudia Colla Ruvolo-Takasusuki, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo
429
ESTRUTURA SOCIOGENTICA INTRANIDAL DE CENTRIS TARSATA (HYMENOPTERA: APINAE) DETERMINADA POR MARCADORES ALOZMICOS
Camilla Helena da Silva, Marco Antnio Del Lama
430
A SEQNCIA DE CDNA E O PERFIL DE EXPRESSO DO RECEPTOR DE ECDISONA (ECR) EM APIS MELLIFERA E SUA POSSVEL FUNO NA DETERMINAO DE CASTAS
Aline Carolina Aleixo Silva Teles, Angel Roberto Barchuk, Zil Luz Paulino Simes
431
EXPRESSO DIFERENCIAL DE GENES RELACIONADOS AO PROCESSO REPRODUTIVO EM OPERRIAS DE APIS MELLIFERA

Liliane M. F. de Macedo, Karina R. Guidugli-Lazzarini, Marcela A. F. Bezerra Laure, Zil Luz Paulino Simes
432
xxiv
CONSEQNCIAS DO SILENCIAMENTO DO GENE CODIFICADOR DE VITELOGENINA NO DESENVOLVIMENTO PS-EMBRIONRIO DE RAINHAS DE APIS MELLIFERA
Francis Morais Franco Nunes, Luiz Roberto Aguiar, Vera Lcia Castelo Figueiredo, Klaus Hartfelder, Zil Luz Paulino Simes
433
ANLISE DE LIGAO GENTICA PARA ESTUDO DE HOMOLOGIA DE GENES ESTERSICOS DE APIS MELLIFERA
Keize Nagamati Junior, Ktia Maria Ferreira, rika de Simone Molina, Marco Antnio Del Lama
434
ORGANIZAO ESTRUTURAL OVARIANA DE ABELHAS SEM FERRO MELIPONA QUAdRIFASCIATA

rica Donato Tanaka, Weyder Cristiano Santana, Klaus Hartfelder
435
CARACTERIZAO DO GENE CODIFICADOR DA PROTENA HP19 EM APIS MELLIFERA
Guaracini Aparecida Loterio, Juliana Ramos Martins, Mrcia Maria Gentile Bitondi
436
MTODO NO-LETAL DE AMOSTRAGEM DE DNA EM ABELHAS EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIDAE)

Cntia Akemi Oi, Marco Antnio Del Lama
437
INFLUNCIA DA DIETA ALIMENTAR SOBRE O DESENVOLVIMENTO LARVAL DE OPERRIAS APIS MELLIFERA

Juliana Ramos Martins, Rodrigo Pires Dallacqua, Luis Roberto Aguiar, Mrcia Maria Gentile Bitondi
438
HETEROCRONIA DA MATURAO DO EXOESQUELETO ENTRE CASTAS E SEXOS DE APIS MELLIFERA

Moyss Elias Neto, Mrcia Maria Gentile Bitondi
439
CARACTERIZAO DO GENE AMELGRP, CODIFICADOR DE UMA PROTENA CUTICULAR RICA EM GLICINA

Michelle Prioli Miranda Soares, Mrcia Maria Gentile Bitondi
440
xxv
EFEITOS DOS ECDISTERIDES NA EXPRESSO DE FTZ-F1 UM POSSVEL REGULADOR DA TRANSCRIO DE VITELOGENINA NO TEGUMENTO E NO CORPO INTEIRO DE PUPAS DE APIS MELLIFERA 441
Tathyana Rachel Palo Mello, Angel Roberto Barchuk, Aline C. A. S. Teles, Michelle Prioli M. Soares, Mrcia M. Gentile Bitondi, Zil Luz Paulino Simes
A VIA DE SINALIZAO INSULNICA EM ABELHAS APIS MELLIFERA: EXPRESSO DIFERENCIAL DOS PEPTDEOS INSULNICOS E DOS RECEPTORES DE INSULINA EM LARVAS DE RAINHAS E OPERRIAS 442
Sergio Vicente de Azevedo, Klaus Hartfelder
O PADRO DE DISPERSO SEXO-ASSIMTRICO NOS EUGLOSSNEOS (HYMENOPTERA: APIDAE: EUGLOSSINI)? UM ESTUDO DE CASO: EUGLOSSA CORdATA
Natlia de Campos Muradas Cerntola, Marco Antnio Del Lama
443
CARACTERIZAO FUNCIONAL DAS ESTERASE DE TETRAGONISCA ANGUSTULA COM A UTILIZAO DE PCMB

Ana Lcia Paz Barateiro Stuchi, Tatiane Vicente Baitala, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo, Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki
444
PERFIL DE EXPRESSO E ANLISE DOS PROMOTORES DE GENES POTENCIALMENTE ENVOLVIDOS EM VIAS DE DIFERENCIAO SEXUAL SOMTICA EM APIS MELLIFERA DESENVOLVIMENTO CASTA-ESPECFICO DAS PERNAS POSTERIORES DE APIS MELLIFERA
Flvia Cristina de Paula Freitas, Alexandre dos Santos Cristino, Zil Luz Paulino Simes
445
Ana D. Bomtorin, Marcela A. F. B. Laure, Angel R. Barchuk, Zil L. P. Simes
446
INFLUNCIA DO PARASITA VARROA dESTRUCTOR NA RESPOSTA IMUNE DE OPERRIAS E ZANGES DE APIS MELLIFERA
Patrick Almsy Zanello, Anete Pedro Loureno, Zil Paulino Simes
447
QUANTIFICAO DO CONTEDO GENMICO DE TRS ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, MELIPONINAE) POR CITOMETRIA DE FLUXO
Denilce Meneses Lopes, Carlos Roberto de Carvalho, Wellington Ronildo Clarindo, Milene Miranda Frana, Mara Garcia Tavares
448
xxvi
EXPRESSO DE LOCALIZAO DE CADERINAS EM OVRIOS DE RAINHAS E TESTCULOS DE LARVAS DE APIS MELLIFERA

Mnica Mazzei Florecki, Klaus Hartfelder
449
A COLONIZAO DE UMA REA POR ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO - UM ESTUDO DE CASO: PARTAMONA HELLERI (FRIESE, 1990) (HYMENOPTERA: APIDAE: MELIPONINI) 450
Ktia Maria Ferreira, Marco Antonio Del Lama
IDENTIFICAO DO GENE DA ENZIMA METIL FARNESOATO EPOXIDASE DE APIS MELLIFERA E SUA RELAO COM O STATUS NUTRICIONAL
Gustavo Conrado Couto Rosa, Zil Luz Paulino Simes, Aline Mackert
451
MITOCHONDRIAL GENE ORDER AND THE EVOLUTION OF BEES (HYMENOPTERA, APIDAE)

Maria Cristina Arias, Daniela Silvestre
452
INFLUNCIA DA DISTNCIA GEOGRFICA SOBRE A SIMILARIDADE GENTICA DE ABELHAS MELIPONA QUINQUEFASCIATA POR INTERMDIO DO TESTE DE MANTEL, USANDO A REGIO ITS-1 PARCIAL DO DNA RIBOSSMICO NUCLEAR.) 453
Jlio Otvio Portela Pereira, Darci de Oliveira Cruz, Daniel Macedo de Melo Jorge, Davi Coe Torres, Carlos Eduardo Alves Soares, Breno Magalhes Freitas, Thalles Barbosa Grangeiro
BiOLOGia da pOLiniZaO IDENTIFICATION OF CALMODULIN-BINDING PROTEINS IN BRAIN OF WORKER HONEYBEES
454
Luciana Karen Calbria, Liudy Garcia Hernandez, Renata Roland Teixeira, Marcelo Valle de Sousa, Foued Salmen Espindola
455
ALTERAES NEUROFISIOLGICAS CAUSADAS PELO FORRAGEAMENTO EM OPERRIAS DE APIS MELLIFERA
Cynthia Renata de Oliveira Jacob, Hellen Maria Soares, Lilian M. M. Cesar Tognoli, Roberta C. F. Nocelli, Osmar Malaspina, Mario Sergio Palma
456
xxvii
ESTIMATES OF GENETIC AND PHENOTYPIC PARAMETERS FOR WEIGHT AND THORAX MORPHOMETRIC MEASUREMENTS IN APIS MELLIFERA AFRICANIZED QUEENS
Vagner de Alencar Arnaut de Toledo, Fabiana Martins Costa-Maia, Elias Nunes Martins, Patrcia Faquinello, Alexandre Leseur dos Santos, Maria Josiane Sereia
457
PERFIS DE HIDROCARBONETOS CUTICULARES DA ABELHA APIS MELLIFERA E SUA RELAO COM O EIXO IDADE-FUNO
Carlos H. Lobo, Michelle Manfrini, Rogrio A. Pereira, Marcela A. B. Lauri, Luis Aguiar, Zil L. P. Simes, Jrgen Heinze, Klaus Hartfelder
458
FORRAGEAMENTO E POTENCIAL POLINIZADOR DE SCAPTOTRIGONA BIPUNCTATA (MELIPONINI) EM INFLORESCNCIAS DE CUPANIA VERNALIS (SAPINDACEAE) EM TRS COROAS, RS, BRASIL 459
Daniela Loose Ferreira, Annelise de Souza Rosa, Irving Bolzan, Diego Kwecko Lima, Betina Blochtein
LEVANTAMENTO DE ABELHAS E ATUAO NA POLINIZAO DE ESPCIES VEGETAIS EM REMANESCENTE DE CERRADO, CAMPO GRANDE, MS
Jennifer Elaine Maier, Mrcia Rocha Vicente, Renato Gatti Fernades, Paulo Alexandre Bogiani, Maria Rosngela Sigrist
460
ABELHAS VISITANTES DE DAVILLA KUNTHII (DILLENIACEAE) NA AMAZNIA CENTRAL, ASPECTOS ECOLGICOS E COMPORTAMENTAIS 461
Andr Rodrigo Rech, Maria Lucia Absy, Fatima Cristina Manente Balestieri, Jos Benedito Perrella Balestieri, Carlos DÀpolito Junior
ABELHAS E VESPAS COMO POLINIZADORES DE IPOMOEA PESCAPRAE (CONVOLVULACEAE)

Eliana de Medeiros Oliveira, Anne Zillikens, Josefina Steiner
462
DB EXPERTS - BANCO DE DADOS DE ESPECIALISTAS EM ESPCIES POLINIZADORAS
Diogo Borges Krobath, Prof. Dr. Antonio Mauro Saraiva, Prof. Dr. Pedro Luiz Pizzigatti Correa, Etienne Amrico Cartolano Jnior, Elizabeth Sellers
463
COMPORTAMENTO DE VISITA DE ABELHAS SILVESTRES EM FLORES DE BERINJELA (SOLANUM MELONGENA L.)

Elizandra Goldoni Gomig, Maria Jos de Oliveira Campos
464
xxviii
BEE-VISITING FAUNA OF NASTURTIUM (TROPAEOLUM MAJUS)

Carlos DÀpolito Jnior, Andr Rodrigo Rech, Alcides Moraes Neto, Fatima Cristina de Lazari Manente Balestieri, Jos Benedito Perrella Balestieri
465
A DEPENDNCIA MTUA ENTRE CORdIA LEUCOCEPHALA (CORDIACEAE) E CEBLURGUS LONGIPALPIS (ROPHITINAE: HALICTIDAE)
Paulo Milet-Pinheiro, Clemens Schlindwein
466 467
AGENTES POLINIZADORES NA CULTURA DE ABBORA CAIPIRA

Guilherme dos Reis Vasconcelos, Andr Luiz Halak, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Darclet Teresinha Malerbo-Souza
AGENTES POLINIZADORES E PRODUO DE SEMENTES EM CULTURA DE GIRASSOL
Guilherme dos Reis Vasconcelos, Andr Luiz Halak, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Darclet Teresinha Malerbo-Souza
468
COMPORTAMENTO DE FORRAGEAMENTO DE ABELHAS EM FLORES DE GOSSYPIUM BARBAdENSE (MALVACEAE) NO DISTRITO FEDERAL BRASIL
Viviane Cardoso Pires, Aline Costa Botelho, Glauce Cristina P. C. Gonalves, Pablo Bernardo C. das Chagas, Fernando A. Silveira, Edison R. Sujii, Eliana Fontes, Carmem S. S. Pires
469
VISITANTES FLORAIS DE COUEPIA UITI (MART. & ZUCC.) BENTH. EX HOOK. F. (CHRYSOBALANACEAE), NO PANTANAL DO MIRANDA ABOBRAL, MATO GROSSO DO SUL, BRASIL
Samuel Boff, Morgana Sazan, Andra Cardoso Arajo, Arnildo Pott
470
BIOLOGIA FLORAL DO URUCUZEIRO BIXA ORELLANA CULTIVADOS NA REGIO DE CAUCAIA NO ESTADO DO CEAR
Francisca Ligia Aurelio Mesquita, Thiago Mahlmann Vitoriano Lopes Muniz, Marcelo de Oliveira Milfont, Breno Magalhes Freitas, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo
471
VISITANTES FLORAIS DO BAMBURRAL (HYPTIS SUAVEOLENS) E POTENCIAIS POLINIZADORES, NA CHAPADA DO APODI, MUNICPIO DE LIMOEIRO DO NORTE, ESTADO DO CEAR, NO ANO DE 2008 472
Jlio Otvio Portela Pereira, Roberto Henrique Dias da Silva, Trsio Thiago Lopes Alves, Joo Paulo de Holanda Neto, Crisanto Alves de Arajo, Daniel Santiago Pereira
xxix
VISITANTES FLORAIS EM CULTURA DE MANGA (MANGIFERA INdICA)
Andr Luiz Halak, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos
473
VISITANTES FLORAIS DE BUTIA CAPITATA (MART.) BECC. EM ARAMBAR, RIO GRANDE DO SUL
Juliana Stephanie Galaschi Teixeira, Sidia Witter, Letcia Azambuja Lopes, Bruno Brito Lisboa, Gilson Schlindwein, Adilson Tonietto
474
PRODUO DE FRUTOS EM CULTIVOS DE MELO (CUCUMIS MELO) EM FUNO DA DISTNCIA DE INSTALAO DAS COLMEIAS 475
Jos Hugo de Oliveira Filho, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo
INFLUNCIA DO COMPORTAMENTO DE PASTEJO DAS ABELHAS MELFERAS APIS MELLIFERA NA PRODUO E QUALIDADE DOS FRUTOS EM CULTIVOS DE MELO CUCUMIS MELO
Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo, Breno Magalhes Freitas
476
FIDELIDADE DE APIS MELLIFERA A FLORES DE BRASSICA NAPUS (CV. HYOLA 432) NO RIO GRANDE DO SUL, BRASIL EFICINCIA DE POLINIZAO POR BEIJA-FLORES E ABELHAS EM AECHMEA LINdENII (BROMELIACEAE)
Livia Leal Dorneles, Anne Zillikens & Josefina Steiner
Annelise de Souza Rosa, Diego Kwecko Lima, Andressa Paladini, Sdia Witter, Betina Blochtein
477
478
ASSOCIAO OBRIGATRIA ENTRE UMA ABELHA E UMA PLANTA AQUTICA EM ALAGADOS EFMEROS DE CAATINGA
Airton Torres Carvalho, Clemens Schlindwein
479
ABELHAS GENERALISTAS COMO POLINIZADORES DE PORTULACCEAS EFMERAS NO NORDESTE DO BRASIL

Carlos Eduardo Pinto, Clemens Schlindwein
480
xxx
COLETA DE RESINA POR ABELHAS (HYMENOPTERA: APIDAE) EM CLUSIA NEMOROSA G. MAY. (CLUSIACEAE) E DALECHAMPIA SCANdENS L. (EUPHORBIACEAE) EM REA DE RESTINGA
Orleans Silva, Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Albuquerque
481
PADRO DE ATIVIDADE DIRIA DO GNERO XYLOCOPA NAS FLORES DE CAESALPINIA PYRAMIdALIS ( LEGUMINOSAE, CAESALPINIOIDEAE)
Murilo Dantas de Miranda, Miriam Gimenes, Patrcia Oliveira-Rebouas
482
ASSOCIAO DE FLORES DE TURNERACEAE COM ABELHAS OLIGOLTICAS E POLILTICAS NO PARQUE NACIONAL DO CATIMBAU, PERNAMBUCO
Diana Corra de A. Penante, Paulo Milet-Pinheiro, Clemens Schlindwein
483
POLINIZAO E PRODUTIVIDADE DO CAJUEIRO ANACARdIUM OCCIdENTALE NO NORDESTE BRASILEIRO

Joo Paulo de Holanda Neto, Raimundo Maciel Sousa, Robert Paxton, Breno Magalhes Freitas, Tarsio Thiago Lopes Alves, Crisanto Alves Arajo
484
COMPORTAMENTO DE PASTEJO DO ANTHIUdIUM SP. NAS FLORES DO BAMBURRAL (HYPTIS SUAVEOLENS)
Crisanto Alves Arajo, Joo Paulo de Holanda Neto, Jlio Otavio Portela Pereira, Daniel Santiago Pereira, Roberto Henrique Dias da Silva, Tarsio Thiago Lopes Alves
485
AVALIO DO POTENCIAL DE PRODUO NCTAR DO BAMBURRAL HYPTIS SUAVEOLENS NA CHAPADA DO APODI
Crisanto Alves Arajo, Joo Paulo de Holanda Neto, Tarsio Thiago Lopes Alves, Roberto Henrique Dias da Silva, Daniel Santiago Pereira, Jlio Otavio Portela Pereira
486
AGENTES POLINIZADORES NA CULTURA DE BERINJELA (SOLANUM MELONGENA L.)
Andr Luiz Halak, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos
487
BIOLOGIA FLORAL E POLINIZAO DE CUCURBITA MOSCHATA DUSCHENE (CURCUBITACEAE) NA REGIO DE DOURADOS-MS
Sedilei Pereira Da Silva, Jos Benedito Perrella Balestieri, Mnica Maria Bueno de Moraes, Ftima Cristina De-Lazari Manente-Balestieri
488
xxxi
VISITANTES FLORAIS E SUCESSO DA POLINIZAO NATURAL EM UMA POPULAO DE QUALEA PARVIFLORA (VOCHYSIACEAE) NO PARQUE ESTADUAL DA SERRA DE CALDAS NOVAS, GO
Alice Maria Guimares Fernandes Vilhena, Solange Cristina Augusto, Paulo Eugnio Alves Macedo de Oliveira
489
ENTOMOFAUNA VISITANTE DE SENNA MACRANTHERA (COLLAD.) IRWIN & BARNEBY, NA REGIO DE DOURADOS- MS, DURANTE SEU PERODO DE FLORAO
Maria Lcia Rossi Rigoni, Jos Benedito Perrella Baletieri, Monica Maria Bueno de Moraes, Ftima Cristina De Lazari Manente-Balestieri
490
DIVERSITY, FORAGING BEHAVIOUR, AND DIEL PATTERN OF BEES VISITING FLOWERS OF AECHMEA NUdICAULIS (BROMELIACEAE) ON SANTA CATARINA ISLAND, SOUTHERN BRAZIL
Simone Grohme, Anne Zillikens, Josefina Steiner
491
CARACTERIZAO POLNICA DE PLANTAS APCOLAS DE REA URBANA NA UNIVERSIDADE DE SO PAULO, CAMPUS RIBEIRO PRETO, SP
Natlia de Paula S, Ademilson Espencer Egea Soares, Marilda Cortopassi-Laurino
492
ABELHAS DAS ORQUDEAS: EVIDNCIA DE INTERAES ATRAVS DA PRESENA DE POLNEAS ADERIDAS

Mariana Taniguchi, Isabel Alves-dos-Santos, Rodrigo B. Singer
493
RELAO ENTRE MELIPONA CAPIXABA E ORQUDEAS DA SUBTRIBO MAXILLARIINAE
Helder Canto Resende, Fbio de Barros, Lcio Antnio de Oliveira Campos, Mara Garcia Tavares, Tnia Maria Fernandes Salomo
494
INTERAES ENTRE ABELHAS COLETORAS DE LEO E FLORES dE ANGELONIA (PLANTAGINAECEAE) EM DIFERENTES REAS DE VEGETAO ABERTA DO BRASIL
Aline Cristina Martins, Antonio Jos Camillo de Aguiar, Isabel Alves dos Santos
495
ECOLOGIA DA POLINIZAO DE LYCOPERSICON ESCULENTUM (SOLANACEAE)
Thlita Gianini Brito Franco, Ftima Cristina De Lazari Manente Balestieri, Jos Benedito Perrella Balestieri
496
xxxii
INFLUNCIA DA FASE DE FLORESCIMENTO NO VINGAMENTO E QUALIDADE DOS FRUTOS EM CULTIVOS DE MELO (CUCUMIS MELO)
Jos Hugo de Oliveira Filho, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo
497
INSETOS VISITANTES NAS FLORES EM CULTURA DE CAF (COFFEA ARABICA) NO MUNICPIO DE ALTINPOLIS - SP
Ana Paula Roncolato; Andr Palma Ribeiro; Guilherme dos Reis Vasconcelos; Andr Luiz Halak; Flvio Augusto Santos Silva; Darclet Teresinha Malerbo-Souza
498
INVENTRIO E FENOLOGIA DA FLORA APCOLA DA UNIVERSIDADE DE SO PAULO, CAMPUS RIBEIRO PRETO, SP

Natlia de Paula S, Ademilson Espencer Egea Soares, Marilda Cortopassi-Laurino
499
BiOLOGia e ManeJO de abeLhas aFricaniZadas
500
Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo
COLETA DE PLEN POR PASTEJO INDUZIDO EM ABELHAS MELFERAS APIS MELIFERA NA CULTURA DO MELO CUCUMIS MELO 501
ANLISE DOS COMPORTAMENTOS HIGINICO E DEFENSIVO COMO NDICES DE SELEO EM PROGRAMAS DE MELHORAMENTO GENTICO EM COLNIAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS, APIS MELLIFERA L.
Daiana Almeida De Souza, Katia Peres Gramacho
502
SELEO DE COLMEIAS PARA O PROGRAMA DE MELHORAMENTO GENTICO EM ABELHAS APIS MELLIFERA DO ESTADO DO CEAR 503
Joo Paulo de Holanda Neto, Raimundo Maciel Sousa, Roberto Henrique Dias da Silva, Tarsio Thiago Lopes Alves, Crisanto Alves Arajo
INFLUNCIA DO DIXIDO DE CARBONO NA MORTALIDADE DE APIS MELLIFERA (HYMENOPTERA: APIDAE)

Deodoro Magno Brighenti, Csar Freire de Carvalho, Carla Regina Guimares Brighenti, Stephan Malfitano Carvalho
504
xxxiii
VISITAO DE ABELHAS APIS MELLIFERA EM POPULAES DE BACCHARIS dRACUNCULIFOLIA PARA COLETA DE RESINA
Paula So-Thiago, Rnia Mara Santana, Andr Gabriel Ferreira Calaa da Costa, Esther Margarida A. F. Bastos
505
RAO ARTIFICIAL COMO FONTE ALTERNATIVA DE ALIMENTO PARA ABELHAS MELFERAS (APIS MELLIFERA L.)
Dayana Francys Pessoa Monteiro, Breno Magalhes Freitas, Marcelo de Oliveira Milfont, Alessandra Pinto de Oliveira, Ellen Pereira Borges
506
RELAO DO COMPORTAMENTO HIGINICO E GANHO DE PESO SEMANAL DE COLMIAS EM PROCESSO DE SELEO MASSAL PARA PRODUO DE MEL
Izabel Christina da Silva, Dejair Message, Geraldo Neri Ferreira, Cosme Damio Cruz
507
COMpOrtaMentO de abeLhas ESTUDO DAS ATIVIDADES DIRIAS DOS MACHOS DE EULAEMA NIGRITA (EUGLOSSINA, APIDAE), NA ISCA DE VANILINA EM UM FRAGMENTO DE MATA URBANA EM SALVADOR (BA), EM DIFERENTES MESES DO ANO
Miriam Gimenes, Pedro Nascimento Melo
508
509
ATIVIDADE EXTERNA DA ABELHA JANDARA MELIPONA SUBNITIdA EM TERESINA, PI
Levi Saimon Monteiro Lopes Neves, Maria Teresa do Rego Lopes, Fbia de Mello Pereira Ricardo Costa Rodrigues de Camargo, Mrdyla de Sousa Marques
510
ABELHAS (HYMENOPTERA, APIDAE) REGISTRADAS EM PRAAS DO MUNICPIO DE JUIZ DE FORA, MG

Lvia Cabral de Castro, Fbio Prezoto
511
EFEITO DA DIMINUIO DA DENSIDADE POPULACIONAL SOBRE O POP DE SCAPTOTRIGONA POSTICA (HYMENOPTERA, MELIPONINA)
Genilson Rodrigues Ferreira Lima, Lenira de Melo Lacerda, Gisele Garcia Azevedo, R, Sidnei Mateus
512
xxxiv
SALIVA SERVING AS PHEROMONE - CARRIER, SIGNALLING RESOURCE LOCATIONS IN TRIGONA BEES
Dirk Louis P. Schorkopf, Stefan Jarau, Wittko Francke, Robert Twele, Ronaldo Zucchi
513
COMO SCAURA LONGULA (APIDAE, MELIPONINI) PROTEGE SEU NINHO ATRAINDO VESPAS OPORTUNSTICAS POLYBIA EMACIATA
Marilda Cortopassi-Laurino, Mariana Taniguchi, Paulo Nogueira-Neto
514
RESULTADOS PRELIMINARES SOBRE A ATIVIDADE EXTERNA DE MELIPONA PARAENSIS (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) EM UM MELIPONRIO NO DISTRITO DE FAZENDINHA, AMAP, BRASIL 515
Patrcia dos Santos Vilhena, Richardson Ferreira Frazo, Arley Jos Silveira da Costa
COLNIA MISTA DE NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS E SCAPTOTRIGONA AFF. dEPILIS (APIDAE: MELIPONINI) E INDIVDUOS PRODUZIDOS
Ktia Paula Aleixo, Cristiano Menezes, Vera Lcia Imperatriz Fonseca
516
POLIETISMO ETRIO ENTRE AS OPERRIAS DE TRIGONA PALLENS (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)

Filipi Rogrio Silva, Sidnei Mateus, Ronaldo Zucchi
517
VISITANTES FLORAIS EM CULTURA DE CAF (COFFEA ARBICA) NO MUNICPIO DE CARMO DO PARANABA - MG

Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos, Andr Luiz Halak, Flvio Augusto Santos Silva, Darclet Teresinha Malerbo-Souza
518
COMPORTAMENTO DE COLETA DE PLEN POR OPERRIAS DE MELIPONA FLAVOLINEATA (APIdAE: MELIPONINA) EM UM FRAGMENTO DE CERRADO NO MUNICPIO DE URBANO SANTO MA, BRASIL
Ccero Alves Lima Jr., Gisele Garcia Azevedo, Mrcio Romero Marques Carvalho, Lenira de Melo Lacerda, Sidnei Mateus
519
COMPORTAMENTO DA ABELHA EUGLOSSA SP. EM CULTURA DO URUCUM (BIXA ORELLANA) PRESENTE NO MUNICPIO DE CAUCAIA, ESTADO DO CEAR
Francisca Ligia Aurelio Mesquita, Thiago Mahlmann Vitoriano Lopes Muniz, Breno Magalhes Freitas
520
xxxv
INTERAES ENTRE OXYTRIGONA TATAIRA SMITH, 1863 (HYMENOPTERA, APOIDEA, MELIPONINA) E HOMPTEROS EM UMA REA URBANA DE ARACAJU-SE
Larissa Batista Lima, Kamila F.A. Santana, Maxwell Souza Silveira
521
INFLUNCIA DO FLUXO ALIMENTAR NOS SINAIS DE RECRUTAMENTO (DANA E VIBRAES TORCICAS) EM APIS MELLIFERA 522
Camila Maia - Silva, Michael Hrncir, Walter Marcelo Farina
VISITAO DE APIS MELLIFERA NA CARAMBOLA (AVERRHOA CARAMBOLA L.)
Danielle de Abreu Silva, Michelle de Oliveira Guimares, Weverton Filgueira Pacheco, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Breno Magalhes Freitas
523
EFEITO DA PRESENA DE ABELHAS FORRAGEADORAS DURANTE O PERODO DIURNO E NOTURNO NO COMPORTAMENTO HIGINICO REALIZADO PELAS ABELHAS AFRICANIZADAS APIS MELLIFERA L. 524
Vanessa de Andrade Bugalho, Tiago Maurcio Francoy, Lionel Segui Gonalves
COMPARAO DE ALGUNS PARMETROS TEMPORAIS RELACIONADOS DIVISO DE TRABALHO DENTRO DE COLMIAS HIGINICAS E NO HIGINICAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS APIS MELLIFERA 525
Michelle Manfrini Morais, Vanessa de Andrade Bugalho, Tiago Maurcio Francoy, Rogrio Ap. Pereira, Lionel Segui Gonalves
UTILIZAO DE PORTA-ISCA PARA OBSERVAO DA ATIVIDADE DE VO DOS MACHOS DE EUGLOSSINA (HYMENOPTERA, APIDAE) 526
Pedro Nascimento Melo, Miriam Gimenes
MACHOS DE CEBLURGUS LONGIPALPIS (ROPHITINAE: HALICTIDAE) GUARDAM ALIMENTO/RECURSO PARA COPULAR

Paulo Milet-Pinheiro, Airton Torres Carvalho, Reisla Oliveira, Clemens Schlindwein
527
RAIO DE VO DE FRIESEOMELITTA VARIA (APIDAE: APINAE: MELIPONINI)
Ana Rita Tavares de Oliveira Baptistella, Camila Calixto Moreira de Souza, Ivan Paulo Akatsu, Ademilson Espencer Egea Soares
528
xxxvi
ATIVIDADE DE COLETA DA ABELHA APIS MELLIFERA NO DECORRER DO ANO
Flavio Augusto Santos Silva, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Andr Luis Santos Silva, Andr Luiz Halak, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos
529
NOTA SOBRE ALGUMAS ABELHAS-SEM-FERRO (MELIPONINI) DA AMAZNIA CENTRAL E SUAS ESTRATGIAS PARA A COLETA DE PLEN: OPORTUNISMO E ROUBO
Charles Fernando dos Santos, Maria Lcia Absy
530
VISITANTES FLORAIS DO ALGODOEIRO GOSSYPIUM HIRSUTUM EM QUIXERAMOBIM E QUIXER NO ESTADO DO CEAR

Eva Monica Sarmento da Silva, Breno Magalhes Freitas, Mrcia de Ftima Ribeiro, Thiago Mahlmann Lopes, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo
531
COMPORTAMENTO DE BOMBUS MORIO NAS FLORES DE URUCUM

Sheila Alves Abreu, Rita de Cssia de Souza Carvalho, Ricardo Moreira Santos, Raquel Prez-Maluf
532
RELAO ENTRE A REA DA CORBCULA, QUANTIDADE DE PLEN TRANSPORTADO E O PESO DA OPERRIA DE APIS MELLIFERA 533
Daniel Comiran Dallasta, Angelair Rodrigues Balbino, Valter Vieira Alves Jnior, Anna Ktia Brizola Bonacina, Matheus Comiran Dallasta
COMPORTAMENTO DE PASTEJO DA ABELHA APIS MELLIFERA NAS FLORES DE GERGELIM (SESAMUM INdICUS)
Patrcia Barreto de Andrade, Eva Mnica Sarmento da Silva, Breno Magalhes Freitas
534
COMPARAO DO COMPORTAMENTO HIGINICO DE ABELHAS AFRICANIZADAS APIS MELLIFERA EM PERODOS DIURNO E NOTURNO EM TRS TIPOS DE FAVOS
Rogrio Aparecido Pereira, Michele Manfrini Morais, Tiago Mauricio Francoy, Lionel Segui Gonalves
535
BIOLOGIA DE NIDIFICAO DE XYLOCOPA (NEOXYLOCOPA) FRONTALIS (OLIVIER) (HYMENOPTERA, APIDAE, XYLOCOPINI) EM MORRETES, PR, BRASIL
Paola Marchi, Gabriel A. R. Melo
536
xxxvii
CARACTERIZAO DO PROCESSO DE CONSTRUO E APROVISIONAMENTO DE CLULAS DE CRIA (POP) DE MELIPONA (MICHMELIA) FLAVOLINEATA FRIESE, 1900 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA EM COLNIAS COM DIFERENTES TAMANHOS POPULACIONAIS
Marcos Henrique Rodrigues Carvalho, Gisele Garcia Azevedo, Lenira de Melo Lacerda, Alexandre Santana Azevedo
537
COMPORTAMENTO DE PASTEJO DE ABELHA CANUDO (SCAPTOTRIGONA SP.) EM MAMONEIRA (RICINUS COMMUNIS L.)
Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Breno Magalhes Freitas, Marcelo de Oliveira Milfont, Eva Mnica Sarmento da Silva
538
NIDIFICAO DE XYLOCOPA (MONOXYLOCOPA) SP (HYMENOPTERA, APIDAE) NUMA PORO DE HBITAT DO SEMI-RIDOZ 539
Maise Silva Santana dos Santos, Clemens Schlindwein, Mauro Ramalho
PREFERNCIA NA UTILIZAO DE NINHOS-ARMADILHA POR FMEAS DE TETRAPEdIA dIVERSIPES (KLUG, 1810) (HYMENOPTERA, APIDAE, ANTHOPHORIDAE)
Janaina Fernandes da Silva, Carlos Alberto Garfalo
540
COMPOSIO NUTRICIONAL DE FUNGOS SAPROFTICOS COLETADOS POR ABELHAS AFRICANIZADAS NO BRASIL

Anna Frida Hatsue Modro, Izabel Christina da Silva, Dejair Message, Cynthia Fernandes Pinto da Luz
541
DIVISO ETRIA DE TRABALHO ENTRE OPERRIAS DE MELIPONA QUAdRIFASCIATA QUAdRIFASCIATA
Priscilla Morgana Ferreira Guimares de Figueiredo, Lucas Amaral Oliveira, Jos Oliveira Dantas, Fbio Santos do Nascimento
542
ESTUDO PRELIMINAR DO COMPORTAMENTO DE COLETA DE NCTAR EM MELIPONA (MICHMELIA) FLAVOLINEATA (HYMENOPTERA, APINAE, MELIPONINA)
Rafael Cabral Borges, Joo Marcelo Silva Abreu
543
xxxviii
USO DE VDEO PARA MONITORAO EM TEMPO REAL DE COLMIA DE ABELHAS SEM FERRO
Eurpedes Laurindo Lopes Jnior, Antonio Mauro Saraiva, Joo Eduardo Kogler Jr., Srgio Dias Hilrio, Vera Lucia Imperatriz Fonseca
544
OCUPAO DE DORMITRIO POR PEREIRAPIS SP. (HALICTIDAE, AUGOCHLORINI): MACHOS PREFEREM CHEGAR PENUMBRA
Carlos Eduardo Pinto, Airton Torres Carvalho, Clemens Schlindwein
545
STINGLESS BEES (MELIPONA SCUTELLARIS) LEARN TO ASSOCIATE THEIR
Andr Vieira Rodrigues, Ana Carolina Roselino, Michael Hrncir
546
CRONOGRAMA DE ABELHAS MANDAAIA, MELIPONA QUAdRIFASCIATA LEPELETIER, 1836, EM COLNIA ARTIFICIAL NO CAMPUS DE SOROCABA DA UFSCAR
Natasha Marcili Laganaro, Srgio Rodrigues Morbiolo, Fbio Camargo Abdalla
547
EFEITO DO TAMANHO COLONIAL NA PRODUO DE RAINHAS EM MELIPONA (MICHMELIA) FLAVOLINEATA FRIESE, 1900 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA)
Alexandre Santana Azevedo, Gisele Garcia Azevedo
548
NDICE DE MORTALIDADE DE APIS MELLIFERA APS VISITAS A FLORES DE NEEM INDIANO (AZAdIRACHTA INdICA) EM CONDIES DE LABORATRIO
Jos Everton Alves, Breno Magalhes Freitas, Jos Ribeiro do Nascimento, Antnio Alves de Oliveira Jnior
549
TREINO DISCRIMINATIVO UTILIZANDO RESPOSTAS DIFERENCIADAS EM ABELHAS MELIPONA QUAdRIFASCIATA

Antonio Mauricio Moreno, Gerson Yukio Tomanari, Deisy das Graas de Souza
550
PERFIL DE HIDROCARBONETOS CUTICULARES DE RAINHAS FISOGSTRICAS DE MELIPONA MARGINATA E SUA RELAO COM O SUCESSO NA TROCA DE RAINHAS ENTRE COLNIAS
Maria Juliana F. Caliman, Izabel Cristina C. Turatti, Ronaldo Zucchi
551
xxxix
COnservaO da biOdiversidade de abeLhas trOpicais COMUNIDADES DE ABELHAS DA FLONA DA RESTINGA DE CABEDELO, PARABA, BRASIL
Maria Cristina Madeira da Silva
552
553
DIVERSIDADE DE ABELHAS E RECURSOS FLORAIS NA FLORESTA NACIONAL CONTENDAS DO SINCOR, BA
Rita de Cssia de Souza Carvalho, Ricardo Moreira Santos, Sheila Alves Abreu, Raquel Prez-Maluf, Avaldo de Oliveira Soares Filho
554
VARIVEIS QUE AFETAM A MODELAGEM DA DISTRIBUIO GEOGRFICA: UM ESTUDO EM CENTRIS TRIGONOIdES (CENTRIDINI, APIDAE) 555
Tereza Cristina Giannini, Isabel Alves-dos-Santos, Antonio Mauro Saraiva
PROPOSTA DE EXTENSO DO ESQUEMA DARWIN CORE PARA SUPORTAR DADOS DE POLINIZAO POR ABELHAS
Etienne Amrico Cartolano Jnior, Tereza Cristina Giannini, Renato De Giovanni, Pedro Luiz Pizzigatti Correa, Antonio Mauro Saraiva
556
MODELAGEM DA DISTRIBUIO GEOGRFICA DE POLINIZADORES POR MEIO DO OPENMODELLER
Antonio Mauro Saraiva, Tereza Cristina Giannini, Isabel Alves-dos-Santos
557
UMA FERRAMENTA DE ENTRADA E PUBLICAO DE DADOS DE RELACIONAMENTO DE POLINIZADORES O PORTAL DO PROJETO BIOTA (BIOABELHA)
Etienne Amrico Cartolano Jnior, Antonio Mauro Saraiva, Pedro Luiz Pizzigatti Correa
558
Julyana Mayumi Kudo, Pedro Luiz Pizzigatti Corra, Antonio Mauro Saraiva, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Tereza Cristina Giannini
559
UTILIZANDO O SOFTWARE SPECIFY PARA CATLOGO DE ESPCIES E ESPCIMES
Leandro Halle Najm, Pedro Luis Pizzigatti Correa, Julyana Mayumi, Antonio Mauro Saraiva
560
xl
PROVEDORES DE DADOS DE POLINIZADORES PARA PORTAIS DE BIODIVERSIDADE
Pablo Salvanha, Pedro Luiz Pizzigatti Correa, Antonio Mauro Saraiva, Paulo Venancio Lopes
561
PORTAL DE BUSCA DE RELACIONAMENTO PARA POLINIZADORES DIVERSIDADE DE ABELHAS E FENOLOGIA DA FLORAO DAS PLANTAS MELFERAS EM FRAGMENTOS DA MATA ATLANTICA NO MUNICPIO DE IARA, SANTA CATARINA
Bruna de Costa Alberton, Beatriz Wessler, Mainara Figueiredo Cascaes, Jaqueline Bonazza Rodrigues, Birgit Harter-Marques
Paulo Venncio Lopes, Antonio Mauro Saraiva, Pedro Luiz Pizzigatti Corra, Pablo Salvanha
562
563
EXTINO DE BOMBUS BELLICOSUS NA PORO NORTE DE SUA DISTRIBUIO
Aline Cristina Martins, Gabriel A. R. Melo, Francisco C. C. Barreto
564
DIVERSIDADE GENTICA DE EULAEMA NIGRITA (APIDAE: EUGLOSSINI) DE QUATRO RESERVAS LEGAIS E UMA RESERVA GOVERNAMENTAL NO SUL DO BRASIL
Gabriele Antico Freiria, Amlia Nelci Teresita Pascual, Natasha Verdasca Meliciano, Douglas Caldeira Giangarelli, Silvia Helena Sofia
565
FAUNA DE ABELHAS DA RESERVA NATURAL DE RIO CACHOEIRA, ANTONINA, PARAN, BRASIL

Claudiv Matos Maia, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo
566
UMA ARQUITETURA ORIENTADA A SERVIOS PARA COMPARTILHAMENTO DE DADOS ENTRE WEBLABS
Leonardo Nicacio Bessa, Prof. Pedro Luiz Pizzigatti Corra, Marcelo Succi de Jesus Ferreira, Cris Gianini, Prof. Antonio Mauro Saraiva
567
POPULATION ANALYSIS OF PARTAMONA MULATA AND PARTAMONA HELLERI (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI) IN BRAZIL 568
Maria Cristina Arias, Rute Magalhes Brito
DIFERENCIAO DE SEXOS EM QUATRO ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO BASEADO EM MORFOMETRIA GEOMTRICA DAS ASAS 569
Raphael Antonio de Oliveira Silva, Tiago Mauricio Francoy, Vera Lucia Imperatriz-Fonseca
xli
ABUNDNCIA DE EULAEMA NIGRITA LEPELETIER, 1841 (APIDAE, EUGLOSSINA) EM FRAGMENTOS FLORESTAIS URBANOS E RURAIS NA REGIO DE RIO BRANCO, ACRE
Danielle Storck-Tonon, Elder Ferreira Morato
570
EVOLUTIONARY AND ECOLOGICAL EVENTS THAT INFLUENCED THE POPULATION STRUCTURE IN PLEBEIA REMOTA, A STINGLESS BEE FROM BRAZIL
Flvio de Oliveira Francisco, Maria Cristina Arias
571
AVALIAO DO POTENCIAL DE REAS AGRCOLAS COMO HABITAT DE ABELHAS POLINIZADORAS
Gleiciani Brger Patricio, Maria Jos de Oliveira Campos, Eduardo Magalhes Borges Prata, Elizandra Goldoni Gomig, Bruno Ferreira, Jernimo Kahn Villas-Bas
572
ESTUDO PRELIMINAR DAS RELAES ENTRE ABELHAS (HYMENOPTERA, APOIDEA) NA EXPLORAO DE RECURSOS NATURAIS NO CERRADO EM DOURADOS (MS)
Anna Ktia Brizola-Bonacina, Jos Chaud-Netto, Valter Vieira Alves-Jnior, Adan Rider Aristimunho Torres, Filipe Ruiz Zambo, Valeska Marques Arruda, Erico Nomura
573
UTILIZAO E ESTUDO COMPARATIVO DO USO DE NINHOS ARMADILHA PARA ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, APIDAE)
Ricardo Caliari Oliveira, Cristiano Menezes, Raphael Antnio de Oliveira Silva, Ademilson Espencer Egea Soares, Vera Lcia Imperatriz Fonseca
574
ESTUDO DA OCORRNCIA E COMPETIO ENTRE ESPCIES DE MELIPONNEOS E ABELHAS AFRICANIZADAS (HYMENOPTERA: APIDAE), EM FRAGMENTOS FLORESTAIS DA FAZENDA MONTE ALEGRE, KLABIN S.A. PR
Edson Aparecido Proni, Oilton Jos Dias Macieira
575
RECURSOS ALIMENTARES UTILIZADOS POR ABELHAS DO GNERO XYLOCOPA EM FRAGMENTOS DE CERRADO NA REGIO DO TRINGULO MINEIRO
Cludia Ins da Silva, Paulo Eugnio Alves Macedo de Oliveira
576
xlii
DISPERSO DE ABELHAS EUGLOSSINA (HYMENOPTERA: APIDAE) EM MATRIZES DE CANA-DE-ACAR E PASTAGEM NO NORTTE FLUMINENSE
Willian Moura de Aguiar, Maria Cristina Gaglianone
577
ABELHAS (HYMENOPTERA: APIDAE) DE UMA REA DE DUNAS MARGINAIS (PRAIA DE PANAQUATIRA, SO JOS DE RIBAMAR-MA, BRASIL): ABUNDNCIA, DIVERSIDADE E SAZONALIDADE 578
Fabiana dos Santos Oliveira, Mrcio Wesley Alves Mendona, Mrcia Cristina Silva Vidigal, Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Correia de Albuquerque
ESTRUTURA GENTICA DE EUGLOSSA PLEOSTICTA (HYMENOPTERA: APIDAE) DE DOIS REMANESCENTES DE MATA ATLNTICA NO SUL DO BRASIL
Francielly Medeiros de Oliveira, Alessandra Novaga Alves, Gabriele Antico Freiria, Douglas Caldeira Giangarelli, Silvia Helena Sofia
579
ANLISE GENTICA DE EUGLOSSA PLEOSTICTA (HYMENOPTERA, APIDAE, EUGLOSSINI) DE DOIS FRAGMENTOS FLORESTAIS MANTIDOS COMO RESERVAS LEGAIS
Alessandra Novaga Alves, Gabriele Antico Freiria, Francielly Medeiros de Oliveira, Douglas Caldeira Giangarelli, Silvia Helena Sofia
580
ESTRUTURA GENTICA DE EUGLOSSA CORdATA (HYMENOPTERA, APIDAE, EUGLOSSINI) DE DUAS REAS URBANAS 581
Leandro Nunes de Andrade, Olavo Pinhatti Colatreli, Karen Mayumi Suzuki, Silvia Helena Sofia
DISTRIBUIO E DIVERSIDADE DE ABELHAS EUGLOSSINAS (HYMENOPTERA, APIDAE) NUM GRADIENTE DE FITOFISIONOMIAS DO BIOMA CERRADO NA REGIO DE VAZANTE E PARACATU, MINAS GERAIS
Gabriel Caixta Martins, Valria Lopes de Castro, Edilene Aparecida Leonel, Jefferson Luiz Antunes Santos, Mata Vasconcelos Santos, Guilherme Pereira Cruz, Melinda Rodrigues de Souza, Cludia Ins da Silva
582
LOCOS MICROSSATLITES PARA MELIPONA RUFIVENTRIS (HYMENOPTERA: APIDAE)
Denilce Meneses Lopes, Filipe Oliveira Silva, Tania Maria Fernandes Salomao, Lucio Antonio de Oliveira Campos, Mara Garcia Tavares
583
xliii
RELAES ENTRE ESTRUTURA DO HABITAT E OCORRNCIA DE ABELHAS E VESPAS SOLITRIAS
Bruno Ferreira, Jos Eduardo de Oliveira, Maria Jos de Oliveira Campos
584
GENETIC VARIABILITY OF A SMALL POPULATION OF FRIESEOMELITTA VARIA (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI) THROUGH RFLP OF MITOCHONDRIAL DNA
Paulo Henrique Pereira Gonalves, Maria Cristina Arias
585
MICROSATELLITE LOCI ANALYSIS IN POPULATION OF MELIPONA MARGINATA

Alisson Roberto Campos Moresco, Maria Cristina Arias
586
INFLUNCIA DA SAZONALIDADE NA CONECTNCIA DE UMA REDE DE INTERAO MUTUALSTICA ENTRE PLANTAS E VISITANTES FLORAIS, EM UMA REGIO DE CERRADO, ITIRAPINA, SP 587
Maria Rodrigues Vianna, Astrid de Matos Peixoto Kleinert
A POLINIZAO COMO UM SERVIO DO ECOSSISTEMA: UMA ESTRATGIA ECONMICA PARA A CONSERVAO

Flvia Monteiro Coelho Ferreira, Paulo De Marco Junior
588
DIVERSIDADE DA FAUNA DE ABELHAS DA SUBTRIBO EUGLOSSINA (HYMENOPTERA; APOIDEA; APIDAE) NA ESTAO ECOLGICA DE GUA LIMPA, CATAGUASES-MG
Guilherme do Carmo Silveira, Alice Alves Rodrigues, Georgina Maria de Faria Mucci
589
ESPECTRO POLNICO DE AMOSTRAS DE PLEN COLETADOS NAS CORBCULAS DE TETRAGONISCA ANGUSTULA LATREILLE (APIDAE: MELIPONINA) NA ILHA GRANDE, RIO DE JANEIRO
Leila Nunes Morgado, Rodrigo Morais Nunes, Maria Cristina A. Lorenzon, Vnia Gonalves-Esteves
590
ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) DA ILHA DE SANTANA-AP
Lorena Oliveira de Souza, Richardson Ferreira Frazo, Arley Jos Silveira da Costa
591
xliv
A COMUNIDADE DE ABELHAS EM UM FRAGMENTO DE MATA ATLNTICA, NO MUNICPIO DE MARACAJ, SUL DE SANTA CATARINA 592
Mainara Figueiredo Cascaes, Bruna de Costa Alberton, Beatriz Wessler, Jaqueline Bonazza Rodrigues, Birgit Harter-Marques
FLORA VISITADA E UTILIZAO DOS RECURSOS FLORAIS POR ABELHAS SILVESTRES (HYMENOPTERA, APIDAE) EM UMA REA DE DUNAS NA PRAIA DE PANAQUATIRA, MUNICPIO DE SO JOS DE RIBAMAR, MA, BRASIL
Mrcia Cristina Silva Vidigal, Fabiana dos Santos Oliveira, Mrcio Wesley Mendona, Mrcia Maria Corra Rego, Patrcia Maia Correia Albuquerque
593
POLLINATION NETWORK OF A MELITTOPHILOUS COMMUNITY IN THE BRAZILIAN CERRADO: ECOLOGICAL PARAMETERS GIVE INSIGHTS INTO NETWORK STRUCTURE
Simone Caroline Cappellari, Rosana Tidon, John L. Neff, Beryl B. Simpson
594
QUANTO TEMPO AINDA SOBREVIVER A RESTRITSSIMA MELIPONA CAPIXABA?
Helder Canto Resende, Tnia Maria Fernandes Salomo, Mara Garcia Tavares, Lcio Antnio de Oliveira Campos
595
APIFAUNA ATRADA POR ARMADILHA MOERICKE EM REA AGRCOLA NO MUNICPIO DE RIOS CLARO, SP
Luceli de Souza, Maria Jos de Oliveira Campos
596
ESTRUTURA GENTICA DE MELIPONA MANdACAIA SMITH, 1863 (HYMENOPTERA, APOIDEA) NO ESTADO DA BAHIA
Margarete do Valle Werneck, Lucio Antnio de Oliveira Campos, Ana Maria Waldschmidt, Rogrio Marcos Alves, Henrique Batalha Filho, Carolina Gonalves dos Santos
597
COMUNIDADE DE ABELHAS EM FRAGMENTOS DA MATA ATLNTICA EM PERNAMBUCO

Poliana Yumi Ojima, Clemens Peter Schlindwein
598
AS ABELHAS DO GNERO CENTRIS DAS DUNAS DE SANTO ANTNIO (BA): DIVERSIDADE E USO DOS RECURSOS FLORAIS 599
Patrcia Oliveira-Rebouas, Miriam Gimenes, Hosana Amorim, Vinina Ferreira, Murilo Dantas
xlv
VARIABILIDADE GENTICA DO LOCO CSd EM MELIPONA COMPRESSIPES MANAOSENSIS (HYMENOPTERA, APIDAE) EM POPULAO DE CATIVEIRO
Izaura Bezerra-Francini, Klilton Barbosa da Costa, Gislene Almeida Carvalho-Zilse
600
CONSERVAO AMBIENTAL, RIQUEZA DE ABELHAS E POLINIZAO DO MARACUJ-AMARELO NO TRINGULO MINEIRO 601

Marcela Yamamoto, Ana Anglica Almeida Barbosa, Paulo Eugnio Oliveira
EcOLOGia de abeLhas nativas
602
VARIAO SAZONAL E DIVERSIDADE DE MACHOS EUGLOSSINI (HYMENOPTERA, APIDAE) EM FRAGMENTOS DE FLORESTA NO SUL DE MINAS GERAIS, BRASIL
Jos Carlos Simo Cardoso Junior, Maria Jos de Oliveira Campos
603
EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIDAE) DE QUATRO FRAGMENTOS DE MATA ATLNTICA DO ESTADO DE SO PAULO

Guaraci Duran Cordeiro, Heber Couto Cavalheiro, Isabel Alves-dos-Santos
604
OLIGOLETIA EM ALAGADOS SAZONAIS NA CAATINGA: PROTOdISCELIS (PARACOLLETINAE) E MONOCOTILEDNEAS BASAIS 605

Airton Torres Carvalho, Clemens Schlindwein
ESTUDO POPULACIONAL DE NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) ATRAVS DE MARCADORES MICROSSATLITES E MTDNA
Amanda Freire de Assis, Eddy Jos Francisco Oliveira, Geusa Simone de Freitas, Ademilson Espencer Egea Soares
606
FONTES DE ALIMENTO UTILIZADAS POR DUAS ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO EM UM REMANESCENTE FLORESTAL NO MUNICPIO DE SIDERPOLIS, SANTA CATARINA
Jaqueline Bonazza Rodrigues, Mainara Figueiredo Cascaes, Bruna de Costa Alberton, Beatriz Wessler, Birgit Harter-Marques
607
xlvi
VARIAO NO TAMANHO CORPORAL DE MACHOS DE EUFRIESEA NIGROHIRTA EM AMBIENTES COM FITOFISIONOMIAS DISTINTAS EM OURO PRETO, MG
Cristiane Martins, Rudo P. Ferreira, Marina C. Dutra, Caio B. Mentone, Yasmine Antonini
608
ESTRUTURA ETRIA DAS POPULAES DE EULAEMA CINGULATA (APIDAE: EUGLOSSINA) EM FRAGMENTOS DA REGIO DE OURO PRETO, MG
Marina C. Dutra, Rudo P. Ferreira, Cristiane Martins, Caio B. Mentone, Yasmine Antonini
609
ABELHAS GENERALISTAS (MELIPONINA) E SUCESSO REPRODUTIVO DE RVORES COM FLORADA EM MASSA DE STRYPHNOdENdRON PULCHERRIMUM (WILLD.) HOCHR., NA MATA ATLNTICA (BAHIA) 610
Daniela Monteiro, Mauro Ramalho, Ciro Tavares Florence, Jaqueline Figueredo Rosa, Marlia Dantas e Silva, Marli Emilia Almeida
HETEROGENEIDADE NA ABUNDNCIA DE EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIDAE) EM REA DE CERRADO DO PARQUE ESTADUAL SERRA DE CALDAS NOVAS, GO
Rafael Fosca de Freitas, Solange Cristina Augusto
611
BIONOMIA DA ESPCIE CLEPTOPARASITA PROTOSIRIS GIGAS MELO, 2006 E SUA ASSOCIAO COM A ABELHA HOSPEDEIRA MONOECA HAEMORRHOIdALIS (SMITH, 1854) (APIDAE: OSIRINI, TAPINOTASPIDINI)
Lo Correia da Rocha-Filho, Gabriel A. R. Melo
612
BAIXA PRODUO DE RAINHAS EM NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS DURANTE A PRIMAVERA E VERO (APIDAE, MELIPONINAE) 613
Gisele de Carvalho Pinto Cabral, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca
ESTRUTURA DE COMUNIDADES DE ABELHAS EUGLOSSINA EM FRAGMENTOS DA REGIO DE OURO PRETO, MG
Ri udo P. Ferreira, Cristiane Martins, Marina C. Dutra, Caio B. Mentone, Yasmine Antonini
614
RECURSOS LIMITANTES DA DENSIDADE DE NINHOS NATURAIS DE MELIPONNEOS EM UM FRAGMENTO FLORESTAL 615

Paulo Emlio Ferreira e Alvarenga, Ivan Paulo Akatsu, Ademilson Espencer Egea Soares
xlvii
ALGUMAS PLANTAS VSITADAS PARA OBTENO DE PLEN POR OPERRIAS DE MELIPONA FASCICULTA SMITH, 1858 EM ANAJATUBA, REGIO DA BAIXADA MARANHENSE
Mrcia Cristina Silva Vidigal, Fabiana dos Santos Oliveira, Gracy Chrisley Alencar Carvalho, Ana Carolina Alves Malheiros Arajo, Monique Hellen Martins Ribeiro, Mrcia Maria Corra Rego, Patrcia Maia Correia Albuquerque
616
PROJETO MELIPONRIOS DIDTICOS (JOO PESSOA, PB)

Jernimo Kahn Villas-Bas, Celso Feitosa Martins
617
FAUNA DE ABELHAS DA RESERVA NATURAL DO RIO CACHOEIRA, ANTONINA, PARAN, BRASIL

Claudiv Matos Maia, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo
618
ABELHAS E VESPAS VISITANTES DE FLORES EM CAPES NO PANTANAL SUL

Samuel Boff, Andrea Cardoso Araujo, Arnildo Pott
619
MEGALOPTA (HYMENOPTERA: HALICTIDAE) COLETADAS COM ISCAS AROMTICAS NA REGIO CENTRO-OESTE DO ESTADO DE SO PAULO, BRASIL
Ftima do Rosrio Naschenveng Knoll, Leandro Mattos Santos
620
NATIVE BEES ASSEMBLAGE AS POLLINATORS OF TIMBER TREES IN THE AMAZON FOREST CANOPY: SPECIALIZED AND GENERALIZED SYSTEMS
Mrcia Motta Maus, Paulo Eugnio A. M. de Oliveira
621
ANLISE FAUNSTICA DE ABELHAS EM REAS DO PARQUE FLORESTAL DE PATROCNIO E NOVA PONTE CAXUANA S/A REFLORESTAMENTO 622
Jos Eustquio dos Santos Jnior, Sebastio Ferreira Lima, Rosinalva da Cunha dos Santos
INFLUNCIA DA IDADE DA RAINHA SOBRE O POP DE SCAPTOTRIGONA POSTICA (HYMENOPTERA, MELIPONINA)

Genilson Rodrigues Ferreira Lima, Alexandre Santana Azevedo, Marcos Henrique Rodrigues Carvalho
623
xlviii
OCORRNCIA SAZONAL DE OPERRIAS, RAINHAS E MACHOS EM FAVOS MADUROS DE MELIPONA BICOLOR SCHENCKI (APIDAE; MELIPONINI), EM AMBIENTE NATURAL DE CLIMA SUBTROPICAL, EM SO FRANCISCO DE PAULA, RS, BRASIL
Ney Telles Ferreira Junior, Betina Blochtein
624
PROPORO E DISTRIBUIO ESPACIAL DE OPERRIAS, RAINHAS E MACHOS EM FAVOS DE MELIPONA BICOLOR SCHENCKI GRIBODO, 1893 (APIDAE; MELIPONINI) EM AMBIENTE NATURAL, NO SUL DO BRASIL
Ney Telles Ferreira Junior, Betina Blochtein
625
CAPACIDADE DE RESISTNCIA S VARIAES DE TEMPERATURA EM OPERRIAS DE TRIGONA SPINIPES (FABRICIUS, 1973) (HYMENOPTERA:APIDAE) DURANTE OS PERODOS DE VERO E INVERNO
Oilton Jos Dias Macieira, Edson Aparecido Proni
626
COMUNIDADE DE ABELHAS (INSECTA: HYMENOPTERA) E PRINCIPAIS FONTES DE RECURSOS FLORAIS NO CAMPUS DA UNIVERSIDADE ESTADUAL DO NORTE FLUMINENSE, CAMPOS DOS GOYTACAZES, RJ
Joo Manoel da Silva Neto, Maria Cristina Gaglianone
627
REDE DE INTERAO ENTRE ABELHAS E PLANTAS EM FLORESTA OMBRFILA MISTA, PORTO UNIO, SANTA CATARINA
Cristiane Krug, Isabel Alves-dos-Santos, Vanilde Citadini-Zanette
628
ESTRUTURA DE UMA COMUNIDADE DE ABELHAS EM AREA DE FLORESTA OMBRFILA DENSA MONTANA EM SO BENTO DO SUL, SC 629
Denise Monique Dubet da Silva Mouga, Cristiane Krug
COMUNIDADE DE EUGLOSSINI (HYMENOPTERA, APIDAE) DA ESTAO ECOLGICA DOS CAETETUS, GLIA, SP

Jos Carlos Serrano, Carlos Alberto Garfalo
630
CONHECENDO A DIVERSIDADE DE ABELHAS DAS ORQUDEAS (APIDAE: EUGLOSSINI) DA AMAZNIA

Ana Cludia Oliveira Arajo, Marcio Luiz de Oliveira
631
xlix
MODELAGEM DA DISTRIBUIO GEOGRFICA POR MEIO DO OPENMODELLER: ESTUDO DE CASO DE PLANTAS E POLINIZADORES
Tereza Cristina Giannini, Antonio Mauro Saraiva, Isabel Alves-dos-Santos
632
NESTING OF TRIGONA C.F. SPINIPES IN THREE PHYTOPHYSIOGNOMIES OF CERRADO IN ITIRAPINA, SO PAULO

Fabiana C. Pioker, Astrid de Matos Peixoto Kleinert
633
VARIAO DA DIVERSIDADE DE MELIPONINA (APIDAE; MELIPONINA) EM FRAGMENTOS DE HBITATS FLORESTADOS DE MATA ATLNTICA NA BAHIA
Marlia Dantas e Silva, Mauro Ramalho, Ciro Tavares Florence, Paulo Csar Gouva Leo, Joo Paulo Loyola Oliveira, Daniela Monteiro, Jaqueline Figueredo Rosa, Zafira Evelma Gurgel, Marli Emlia Almeida
634
ATIVIDADE DE COLETA DA ABELHA TETRAGONISCA ANGUSTULA NO DECORRER DO ANO
Flvio Augusto Santos Silva, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Andr Lus Santos Silva, Andr Luiz Halak, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos
635
ANLISE PROTICA E DE AMINOCIDOS DO ALIMENTO LARVAL DE TETRAGONISCA ANGUSTULA LATREILLE 1811 (APIDAE, MELIPONINI)
Mauro Prato, Ademilson Espencer Egea Soares
636
ANLISE DAS ALTERAES NO PERFIL QUMICO EM COLNIAS RFS DE ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Lucas Garcia von Zuben, Tlio Marques Nunes, Izabel Cristina Casanova Turatti, Norberto Peporine Lopes, Ronaldo Zucchi
637
COMPOSTOS VOLTEIS LIBERADOS POR RAINHAS VIRGENS DE MELIPONA QUAdRIFASCIATA (APIDAE: MELIPONINI) FLORA APCOLA DA CAATINGA CEARENSE DE IMPORTNCIA PARA AS ABELHAS JANDARAS (MELIPONA SUBNITIdA)
Jos Everton Alves, Breno Magalhes Freitas, Celso Braga Magalhes, Emanuelle Bruna Rodrigues Carneiro, Fbio Carreiro Chaves de Melo
Adriana Pianaro, Cristiano Menezes, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca, Anita Jocelyne Marsaioli
638
639
ABELHAS SOLITRIAS (HYMENOPTERA, APOIDEA) NIDIFICANDO EM CAVIDADES PREEXISTENTES NA ESTAO ECOLGICA DE RIBEIRO PRETO, MATA SANTA TERESA, RIBEIRO PRETO, SP
Janaina Fernandes Silva, Carlos Alberto Garfalo
640 641
GROUP FORAGING IS BENEFICIAL FOR STINGLESS BEES

Elinor M. Lichtenberg, Vera L. Imperatriz-Fonseca, James C. Nieh
A COMUNIDADE DE ABELHAS (HYMENOPTERA, APIDAE) E SUAS FONTES FLORAIS NO PARQUE NACIONAL DA SERRA DO ITAJA, SANTA CATARINA, BRASIL
David Richard da Luz, Gustavo Valadares Barroso
642
PRODUO DE OPERRIAS, MACHOS E RAINHAS EM COLNIAS DE PLEBEIA EMERINA (FRIESE, 1900) (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Juliana Stephanie Galaschi Teixeira, Betina Blochtein
643
FORMAO DE NOVAS COLNIAS DE PLEBEIA REMOTA (APIDAE, MELIPONINI)
Tarsila Amorim Coelho, Denise de Arajo Alves, Isabel Alves dos Santos
644
ESTUDO PRELIMINAR DA COMUNIDADE DE ABELHAS (HYMENOPTERA, APOIDEA, APIFORMES) EM UMA LOCALIDADE URBANA DE ARACAJU SE
Berla Santos Cruz, Anderson Barbosa, Maxwell Souza Silveira
645
ANLISE DO CUSTO DA PRODUO DE MACHOS EM MELIPONA (MICHMELIA) FLAVOLINEATA FRIESE, 1900 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) EM COLNIAS SOBRE DIFERENTES TAMANHOS POPULACIONAIS
Alexandre Santana Azevedo, Gisele Garcia Azevedo, Marcos Henrique Rodrigues Carvalho, Genilson Rodrigues Ferreira Lima
646
li
MOrFOLOGia de abeLhas
647
INTERFACE DE AUTOMAO DOS PROCEDIMENTOS MANUAIS NA IDENTIFICAO DE ABELHAS SEM FERRO E PADRONIZAO DA TROCA DE DADOS USANDO MORFOMETRIA GEOMTRICA 648
Jsus Franco Bueno, Tiago Maurcio Francoy, Vera Lucia Imperatriz-Fonseca, Antonio Mauro Saraiva
MORFOMETRIA DE MACHOS E FMEAS DE EUGLOSSA ANNECTANS DRESLER 1982 (HYMENOPTERA, APIDAE, EUGLOSSINI) 649
Mrcia de F. Ribeiro, Srgio Dias Hilrio, Marilda Cortopassi-Laurino
AVALIAO MORFOMTRICA DO APARELHO FERROADOR DE OPERRIAS DE APIS MELLIFERA (HYM.: APIDAE) AFRICANIZADAS, EM RELAO AO TAMANHO DA GLNDULA CIDA
Anna Ktia Brizola-Bonacina, Emi Nasu, Valter Vieira Alves Jnior
650
FLIGHT MUSCLE DIFFERENTIAL DEVELOPMENT IN WORKERS, QUEENS AND MALES OF APIS MELLIFERA AND SCAPTOTRIGONA POSTICA (HYMENOPTERA: APIDAE)
Fernanda Fernandez-Winckler, Carminda Cruz-Landim
651
DESENVOLVIMENTO DAS PAPILAS RETAIS EM MELIPONA QUAdRIFASCIATA ANTHIdIOIdES E MELIPONA SCUTELLARIS

Carolina Gonalves Santos, Jos Eduardo Serro
652
HISTOQUMICA DA VLVULA CARDACA E DA PORO ANTERIOR DO VENTRCULO EM ABELHAS (APIDAE)

Stphanie A.M.V. Teixeira, Jos Eduardo Serro
653
ESTUDOS MORFOLOGICOS DA GLANDULA INTRA-MANDIBULAR dE MELIPONA SCUTELLARIS HISTOLOGIA DE APIS MELLIFERA INFECTADA POR NOSEMA CERANAE
Dbora Linhares Lino de Souza, Jos Eduardo Serro
Douglas Elias Santos, Edmilson Amaral de Souza: Jos Eduardo Serro
654
655
lii
IMMUNOCYTOCHEMICAL LABELING OF CELL DEATH AND CELLULAR STRESS PROTEINS AS A TOOL FOR TOXICOLOGICAL STUDIES OF HONEY BEES ULTRASTRUCTURE OF THE CEPHALIC SALIVARY GLANDS OF WORKERS AND QUEENS OF APIS MELLIFERA AND SCAPTOTRIGONA POSTICA (HYMENOPTERA, APIDAE) IN DIFFERENT PHASES OF LIFE
Silvana Beani Poiani, Carminda da Cruz-Landim
Elaine Cristina Mathias da Silva-Zacarin, Ales Gregorc, Daiane de Jesus, Osmar Malaspina
656
657
DIFFERENTIAL CELL DEATH DURING MUSHROOM BODIES DEVELOPMENT OF WORKERS, QUEENS AND MALES OF APIS MELLIFERA (HYMENOPTERA: APIDAE)
Thaisa Cristina Roat, Carminda da Cruz-Landim
658
SCANNING ELECTRONIC MICROSCOPY (S.E.M.) OF MORPHOLOGICAL TRAITS OF TAXONOMIC INTEREST OF SOME MELIPONINI BEES (HYMENOPTERA: APIDAE)
Eda Flavia Lotufo Rodrigues Alves Patricio
659
RELAO ENTRE O TAMANHO DOS ESPERMATOZIDES DAS ABELHAS CORBICULADAS E OS DIFERENTES NVEIS DE SOCIABILIDADE
Samira Ravaiano, Rudo Paiva Ferreira, Yasmine Antonini, Uyr Zama
660
NinhOs de abeLhas
661
POSTURA DA RAINHA DA ABELHA CANUDO SCAPTOTRIGONA POLYSTICTA MOURE, 1950, EM CAIXA PADRONIZADA, NA AMAZNIA ABELHAS SEM FERRO (MELIPONINI) E SEUS NINHOS NO CERRADO DE BALSAS, MA, BRASIL
Klilton Barbosa-Costa, Aramis da Cruz Noronha, Gislene Almeida Carvalho-Zilse
662
Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Correia de Albuquerque
663
liii
TRAP NEST SCOUTER: UM SOFTWARE PARA COMPUTADOR DE MO DESTINADO A AUXILIAR EM PESQUISAS COM NINHOS-ARMADILHA USADOS NA OBTENO DE ENXAMES DE ABELHAS MELIPONINI
Eduardo Matheus Marion Jorge, Antonio Mauro Saraiva
664
DIVERSIDADE DE NINHOS DE MELIPONINA (APIDAE) NA ESCALA DA PAISAGEM EM MOSAICO NO CORREDOR CENTRAL DA MATA ATLNTICA (BA)
Marlia Dantas e Silva, Mauro Ramalho, Zafira Evelma da Rocha Gurgel, Ciro Tavares Florence, Paulo Csar Gouva Leo, Joo Paulo Loyola Oliveira, Daniela Monteiro, Jaqueline Figueredo Rosa, Marli Emlia Almeida
665
DIVERSIDADE E SAZONALIDADE DE ABELHAS E VESPAS SOLITRIAS (HYMENOPTERA: APOIDEA) EM NINHOS-ARMADILHA NA REGIO DE OURO PRETO, MG
William de Oliveira Sabino, Yasmine Antonini
666
LONGEVIDADE E TAMANHO DE NINHO GREGRIO DE EUGLOSSA ANNECTANS EM REA URBANA
Marilda Cortopassi-Laurino, Sergio Dias Hilrio, Mrcia de Ftima Ribeiro, Paulo Nogueira-Neto
667
ATRATIVIDADE DE ABELHAS SOLITRIAS (HYMENOPTERA, APOIDEA) S CORES E MATERIAIS

Carina de Oliveira, Maria Cristina Lorenzon
668
INFLUNCIA DO COMPRIMENTO E DIMETRO DOS NINHOS-ARMADILHA NO COMPORTAMENTO DE NIDIFICAO DE CENTRIS (HETEROCENTRIS ) ANALIS (FABRICIUS)
Carina de Oliveira, Guaraci Duran Cordeiro, Maria Cristina Affonso Lorenzon
669
NOTAS SOBRE A BIOLOGIA DE EUGLOSSA (EUGLOSSA) ANOdORHYNCHI NEMSIO (APIDAE, EUGLOSSINA): ESTRUTURA DO NINHO E ESPCIES PARASITAS ASSOCIADAS
Paola Marchi, Luiz R. R. Faria Jr., Gabriel A. R. Melo
670
EFEITO DO COMPRIMENTO DO NINHO-ARMADILHA NA RAZO SEXUAL DA PROGNIE DE CENTRIS (HETEROCENTRIS) ANALIS (FABRICIUS, 1804) (HYMENOPTERA, APIDAE, CENTRIDINI)
Juliana Duarte de Souza Alonso, Carlos Alberto Garfalo
671
liv
BIOLOGIA DE NIDIFICAO DE MEGACHILE (CHRYSOSARUS) AFFABILIS (HYMENOPTERA: MEGACHILIDAE) EM NINHOS-ARMADILHA EM UMA REA ANTRPICA EM CAMPOS DOS GOYTACAZES, RJ 672
Jos Luiz Pontes da Silva Jnior, Maria Cristina Gaglianone
ABELHAS QUE NIDIFICAM EM NINHOS-ARMADILHA (HYMENOPTERA, ACULEATA) EM UMA REA DE MATA PR-AMAZNICA DA RESERVA BIOLGICA DA MERCK, SO JOS DE RIBAMAR/MA 673
David Barros Muniz, Gisele Grcia Azevedo, Lenira M. Lacerda
RECURSOS ALIMENTARES UTILIZADOS POR ABELHAS COLETORAS DE LEO EM REAS DE CERRADO DO TRINGULO MINEIRO-MG
Lace Souza Rabelo, Alice Maria Guimares Fernades Vilhena, Thatiana Martins dos Santos Mesquita, Esther Margarida Alves Ferreira Bastos, Solange Cristina Augusto
674
OCUPAO DE NINHOS ARMADILHA POR ABELHAS E VESPAS (HYMENOPTERA) EM TRS FISIONOMIAS DE MATA ATLNTICA NO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
Frederico Machado Teixeira, Maria Cristina Gaglianone
675
NESTING OF APIS MELLIFERA INSIDE AN EMPTIED NEST OF TRIGONA C.F. SPINIPES IN THE CERRADO OF ITIRAPINA, SO PAULO 676
Fabiana Curtopassi Pioker, Astrid de Matos Peixoto Kleinert
DISTRIBUIO DE NINHOS DE ABELHAS SEM FERRO NA ESTAO ECOLGICA DO PANGA (UBERLNDIA, MG)
Estefane Leoncini Siqueira, Fernanda Helena Nogueira-Ferreira
677
A FAUNA URBANA DE ABELHAS INDGENAS SEM-FERRO (HYMENOPTERA; APOIDEA; APIDAE) NA REA URBANA DE CATAGUASES, MG
Talitta Guimares, Paula Netto, Matheus Campista Carvalho, Georgina Maria de Faria Mucci, Lcio Antnio de Oliveira Campos
678
ABELHAS SOLITRIAS OCUPANTES DE NINHOS-ARMADILHA EM QUATRO LOCALIDADES NO ESTADO DE SO PAULO

Heber Couto Cavalheiro, Guaraci Duran Cordeiro, Isabel Alves-dos-Santos
679
lv
OCORRNCIA DE NINHOS DE ABELHAS SEM-FERRO (HYMENOPTERA, MELIPONINA) EM DIFERENTES SUBSTRATOS NA FAZENDA PITANGUEIRAS, PARQUE NACIONAL DA SERRA DA BODOQUENA, MATO GROSSO DO SUL, BRASIL
Felipe Varussa de Oliveira Lima, Jos Benedito Perrella Balestieri
680
OCUPAO DE NINHOS-ARMADILHA POR ABELHAS SOLITRIAS NA MATA ATLNTICA DE PERNAMBUCO INTERIOR DE MATA, BORDA E CANAVIAL
Adauto Alex dos Santos, Clemens Schlindwein
681
EFEITO DO TAMANHO DO FRAGMENTO SOBRE A NIDIFICAO DE ABELHAS SOLITRIAS EM REA DE MATA ATLNTICA DE PERNAMBUCO
Adauto Alex dos Santos, Clemens Schlindwein
682
NIDIFICAO DE XYLOCOPA SPP. EM REAS DE CERRADO DO TRINGULO MINEIRO
Talles Marques Chaves-Alves, Camila Nonato Junqueira, Paulo Eugnio Alves Macedo de Oliveira & Solange Cristina Augusto
683
DIVERSIDADE DE ABELHAS SOLITRIAS E OCUPAO DE NINHOS-ARMADILHA EM REA DE CERRADO

Thatiana Martins dos Santos Mesquita, Solange Cristina Augusto
684
DISTRIBUIO DOS NINHOS DE ABELHAS SOCIAIS EM DUAS RESERVAS DE CERRADO, UMA EM TRS LAGOAS/MS E OUTRA EM ANDRADINA/SP
Maria Elisa Rebustini, Laila Cristine Moreira Prado, Maicon Ricardo Zieberg Passini, Patrcia de Carvalho de Oliveira, Tatiele Cristina da Silva Pina
685
NESTING BIOLOGY OF MONOECA SPEC. NOV. ON SANTA CATARINA ISLAND

Anne Zillikens, Josefina Steiner
686
LEVANTAMENTO DAS ABELHAS SOLITRIAS QUE NIDIFICAM EM CAVIDADES PREEXISTENTES EM REA DE MATA ATLNTICA (SETE BARRAS, SP, BRASIL)
Paola Marchi, Gabriel A. R. Melo
687
lvi
ARQUITETURA DE NINHOS DE ABELHAS E VESPAS SOLITRIAS (INSECTA, HYMENOPTERA) EM REMANESCENTES DE MATA DE TABULEIRO NO NORTE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
Marcelita Frana Marques, Maria Cristina Gaglianone
688
NIDIFICAO SIMULTNEA EM UMA CAVIDADE PELAS ESPCIES TRIGONA HYPOGEA E CEPHALOTRIGONA CAPITATA (HYMENOTPTERA: APIDAE: MELIPONINI)
Victor Gardim Rodrigues, Filipi Rogrio Silva, Lucas Jos Bevilaqua, Sidnei Mateus, Ronaldo Zucchi
689
PraGas, parasitas e dOenas de abeLhas trOpicais CARACTERIZAO GENTICA DO CARO VARROA dESTRUCTOR PELA TCNICA RAPD EM COLNIAS DE APIS MELLIFERA NO ESTADO DE SANTA CATARINA E FERNANDO DE NORONHA-PE
Francisco Estevo Carneiro, Roger Strapazzon, Sabrina Alejandra Ramirez, Jos Carlos Vieira Guerra Jr, Geraldo Moretto
690
691
DETERMINAO DA VARIABILIDADE GENTICA DO CARO VARROA dESTRUCTOR EM COLNIAS DE ABELHAS APIS MELLIFERA DO ESTADO DE SANTA CATARINA ATRAVS MARCADORES MICROSSATLITES MENOR INFESTAO E REPRODUO DO CARO VARROA dESTRUCTOR EM COLMIAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS (APIS MELLIFERA L.) COM ALTO GRAU DE COMPORTAMENTO HIGINICO EFEITO TXICO DO INSETICIDA FIPRONIL PARA ABELHAS APIS MELLIFERA
Tiago Favaro de Souza, Osmar Malaspina
Roger Strapazzon, Francisco Estevo Carneiro, Sabrina Alejandra Ramirez, Geraldo Moretto
692
Marcia R. C. Issa, Michelle M. Morais, Rogrio A. Pereira, David De Jong, Lionel S. Gonalves
693
694
DIAGNSTICO DE INTOXICAO POR PLEN EM CASOS DE CRIA ENSACADA BRASILEIRA NO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
Marta Rodrigues Pacheco, Ortrud Monika Barth, Maria Cristina Affonso Lorenzon
695
lvii
PARASITISMO POR PHYSOCEPHALA (DIPTERA: CONOPIDAE): UM IMPORTANTE FATOR DE MORTALIDADE PARA FMEAS E MACHOS DE CENTRIS (HETEROCENTRIS) ANALIS (HYMENOPTERA, APIDAE) 696
Lucas Tadeu Pelogia Caldano, Jos Carlos Serrano, Carlos Alberto Garfalo
OCORRNCIA DE FORMIGAS DO GNERO ECTATOMA SMITH PREDANDO MOSCAS SARCOPHAGIDAE QUANDO EM ATAQUE S ABELHAS MELIPONA QUINQUEFASCIATA LEPELETIER (APIDAE, MELIPONINAE)
Thiago Mahlmann, Favzia Freitas de Oliveira
697
AVALIAO DO INDICE DE INFESTAO DO CARO VARROA dESTRUCTOR EM COLNIAS DE APIS MELLIFERA NA REGIO DE BLUMENAU SANTA CATARINA
Francisco Estevo Carneiro, Roger Strapazzon, Geraldo Moretto
698
INFESTATION LEVELS OF MITE VARROA dESTRUCTOR IN AFRICANIZED COLONIES SUBMITTED FOR ROYAL JELLY AND QUEEN PRODUCTION
Priscila Wielewski, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo, Patrcia Faquinello, Fabiana Martins Costa-Maia, Elias Nunes Martins, Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki
699
NEW CLEPTOPARASITES AND LIFE HISTORY DATA FROM TWO SPECIES OF EUFRIESEA
Rafael Kamke, Anne Zillikens, Josefina Steiner
700
EFEITO DE LANTANA CAMARA (VERBENACEAE) NA SOBREVIVNCIA DE OPERRIAS DE APIS MELLIFERA (HYMENOPTERA, APIDAE) 701
Andrigo Monroe Pereira, Jos Chaud-Netto
ATIVIDADE TXICA DO LEO LIMONENO, POR INGESTO, EM OPERRIAS DE ABELHAS APIS MELLIFERA E SCAPTOTRIGONA POSTICA TOXICIDADE DE EXTRATOS BOTNICOS ABELHA APIS MELLIFERA
ris Martins Diamantino, Osmar Malaspina, Tiago Favaro de Souza
702
Vnia Maria Xavier, Dejair Message, Marcelo Coutinho Picano, Izabel Christina da Silva, Gerson Adriano Silva, Jander Fagundes Rosado, Emerson Cristi de Barros
703
lviii
EFEITO TXICO DO IMIDACLOPRIDE PARA OPERRIAS DE APIS MELLIFERA AFRICANIZADA
Caroline de Almeida Rossi, Osmar Malaspina, Tiago Favaro de Souza
704
OCORRNCIA DE PARASITISMO EM EXOMALOPSIS AUREOPILOSA SPINOLA, 1853 (HYMENOPTERA, APIDAE) POR HORCOMUTILLA SP. CASAL, 1962 (HYMENOPTERA, MUTILLIDAE)
Felipe Varussa de Oliveira Lima, Rogrio Silvestre, Rodrigo Aranda, Jos Benedito Perrella Balestieri
705
EFEITO DO MEL DA MAMONEIRA (RICINUS COMMUNIS) NA LONGEVIDADE DE ABELHAS APIS MELLIFERA L. SOB CONFINAMENTO
Marcelo de Oliveira Milfont, Breno Magalhes Freitas, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Isac Gabriel Abraho Bomfim, Marcelo Casimiro Cavalcante
706
PrOdUtOs das abeLhas FLORA DE IMPORTNCIA POLINFERA PARA APIS MELLIFERA (L.) NA REGIO DE VIOSA, MG
707 708
Anna Frida Hatsue Modro, Dejair Message, Cynthia Fernandes Pinto da Luz, Joo Augusto Alves Meira Neto
VARIAO DE PARMETROS FSICO-QUMICO DO MEL ARMAZENADO NAS CONDIES AMBIENTAIS DO ESTADO DO CEAR 709
Fernanda Farias Martins, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Maria Silvia Frota, Crisanto Alves Arajo
ASPCTOS QUALITATIVOS DE MIS PRODUZIDOS NA REGIO NORTE DO ESTADO DO CEAR
Fernanda Farias Martins, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Maria Silvia Frota, Crisanto Alves Arajo
710
CARACTERSTICAS FSICAS, ORGANOLPTICAS E MICROBIOLGICAS DO MEL DE MELIPONA FASCICULATA SMITH ESTOCADO EM DIFERENTES CONDIES DE LUMINOSIDADE E TEMPERATURA 711
Nadia Sleiman Mattar, Maria Jos Abigail Mendes Arajo, Gisele Garcia Azevedo, Rosane Nassar Meireles Guerra, Murilo Srgio Drummond, Flvia Raquel Fernandes do Nascimento
lix
PRODUO DE PRPOLIS EM REGIO DE TRANSIO CAATINGA-CERRADO DO ESTADO DO PIAU
Maria Teresa do Rego Lopes, Fbia de Mello Pereira, Ricardo Costa Rodrigues de Camargo, Jos Maria Vieira Neto, Valdenir Queiroz Ribeiro
712
TIPIFICAO DO MEL PRODUZIDO POR APIS MELLIFERA L. EM PLANTIO COMERCIAL DE MAMONEIRA RICINUS COMMUNIS L.
Marcelo de Oliveira Milfont, Breno Magalhes Freitas, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Camila Queiroz Lemos, Michelle de Oliveira Guimares, Favzia Freitas de Oliveira
713
ESPECTRO POLNICO DO MEL DA TIBA (MELIPONA FASCICULATA SMITH, 1854, HYMENOPTERA, APIDAE)
Adriana Ceclia Lima Martins, La Maria Medeiros Carreira, Claucyanne Mendes Vieira, Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Correia de Albuquerque
714
AVALIAO DOS PARMETROS DE QUALIDADE DOS MIS DE MELIPONA FASCICULATA SMITH DA REGIO DO CERRADO MARANHENSE 715
Carlos Alexandre Holanda, Maria Clia Pires Costa
ESTUDO TOXICOLGICO PR-CLINICO AGUDO COM O EXTRATO HIDROALCOLICO DA PRPOLIS DE SCAPTOTRIGONA SP.
Maria Jos Abigail Mendes Arajo, Nadia Sleiman Mattar, Aramys Silva Reis, Mrcia Cristina Gonalves Maciel, Izabel Cristina Portela Boga Serra, Maria Nilce de Sousa Ribeiro, Adelson de Souza Lopes, Flvia Raquel Fernandes do Nascimento
716
POTENCIAL ANTIMICROBIANO DE PRPOLIS BRASILEIRA VERDE, PRETA E VERMELHA
Denise de Oliveira Scoaris, Tatiana Kelly Silva, Ana Carolina Peixoto Moreira, Esther Margarida Alves Ferreira Bastos
717
ESTUDO IN VITRO DA VIABILIDADE DE ESPOROS DE PAENIBACILLUS LARVAE EXPOSTOS A DOSAGENS SUCESSIVAS DE EXTRATO DE PRPOLIS VERDE
Esther Margarida Alves Ferreira Bastos, Ademilson Espencer Egea Soares, Denise de Oliveira Scoaris, Marla Spivak
718
PRODUO DE GELIA REAL EM COLNIAS RECRIAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS SUPLEMENTADAS COM RAES ELABORADAS COM LEO DE LINHAA E PALMA
Vagner de Alencar Arnaut de Toledo, Maria Josiane Sereia, Patrcia Faquinello, Fabiana Martins Costa-Maia, Ana Lcia Paz Barateiro Stuchi, Antnio Cludio Furlan
719
lx
ANLISE MELISSOPALINOLGICA DE AMOSTRAS DE MEL DE APIS MELLIFERA ORIUNDAS DA REGIO NORTE DO ESTADO DO PIAU 720
Ricardo Costa Rodrigues Camargo, Alyne Freire de Melo, Leudimar Aires Pereira, Fbia de Mello Pereira, Maria Teresa do Rgo Lopes
ANLISE DOS PARMETROS FSICO-QUMICOS E MICROBIOLGICOS DO MEL DE SCAPTOTRIGONA (HYMENOPTERA, APIDAE, APINAE) DO MUNICPIO DE LUIZ ANTNIO, SO PAULO, BRASIL 721
Daniela Yumi Yamamoto, Ivan Paulo Akatsu, Osmar Malaspina, Ademilson Espencer Egea Soares
ADULTERAO DE MEL VENDIDOS NAS FEIRAS LIVRES DE BOA VISTA, RORAIMA
Silvio Jos Reis Da Silva, Fabiola Cristina Gibson Alves, Juliana Patrcia Ribeiro Pereira, Rosiclede Lbo
722
PARMETROS FSICO-QUMICOS E QUMICOS DE PRPOLIS DE SCAPTOTRIGONA SP. (TUBI)
Alexandre Michel Costa Nogueira, Richard Pereira Dutra, Bruno Vincius de Barros Abreu, Marisa Cristina Aranha Batista, Maria Jos Abigail Mendes Arajo, Maria Clia Pires Costa, Maria Nilce de Sousa Ribeiro
723
EFEITO ANTIBACTERIANO DO EXTRATO ETANLICO DA PRPOLIS SOBRE BACTRIAS PATOGNICAS DE PEIXE

Eva Mnica Sarmento da Silva, Nara Patrcia Cavalcanti Andrade, Ana Paula Soares dos Santos, Claudia Luiza Paes Barretto Villaa, Cristina Crewer da Costa, Mateus Matiuzzi da Costa
724
IDENTIFICAO DA FLORA DOS MES ORIGINRIOS DAS ILHAS FLORESTA E LARANJEIRA, MUNICPIO DE QUERNCIA DO NORTE, PARAN, BRASIL
Eloi Machado Alves, Cssia Mnica Sakuragui, Emi Rainildes Lorenzetti, Alethia Alves da Silva, Carolina Antunes Neves, Vagner Alencar Arnaut de Toledo, Augusta Carolina de C. C. Moreti, Luis Carlos Marchini
724
DESEMPENHO DE COLMIAS DE APIS MELLIFERA ALIMENTADAS COM DIETAS ARTIFICIAIS PARA PRODUO DE GELIA REAL
Regina Helena Nogueira Couto, Leomam Almeida Couto, Daniel Nicodemo
726
lxi
ANLISE SENSORIAL E INTENO DE COMPRA DE LEITE DE CABRA FERMENTADO COM LACTOBACILLUS ACIdOPHILUS ENRIQUECIDO COM PLEN E MEL DE ABELHAS AFRICANIZADAS, MUNICPIO DE SOBRAL CE
Joo Nelson Melo Vasconcelos, Jlio Otvio Portela Pereira, Masu Capistrano Camura Portela, Raimundo Sousa Maciel, Antonia Daiana Andrade Arajo, Paulo Roberto Costa Oliveira, Wycisludia Brando Silva, Ana Roberta Arajo Silva
727
ANLISE FSICO-QUMICA DE LEITE DE CABRA FERMENTADO COM LACTOBACILLUS ACIdOPHILUS ENRIQUECIDO COM PLEN E MEL DE ABELHAS AFRICANIZADAS, MUNICPIO DE SOBRAL CE 728
Joo Nelson Melo Vasconcelos, Jlio Otvio Portela Pereira, Masu Capistrano Camura Portela, Raimundo Sousa Maciel, Antonia Daiana Andrade Arajo, Clara Mtia de Paula, Mrcia Meneses Portela, Rafael Ricardo Dutra
ETNOCONHECIMENTO SOBRE A IDENTIFICAO DO MEL DE ABELHA PELOS MORADORES DO BAIRRO DO LAGUINHO, MACAP, AP, BRASIL
Eliane Rocha Rodrigues, Daniel de S Cavalcante, Lorena Oliveira de Souza, Arley Jos Silveira da Costa
729
ANLISE MELISSOPALINOLGICA DE AMOSTRAS DE MEL DE ABELHAS NATIVAS DE UMA PROPRIEDADE LOCALIZADA NA ZONA RURAL DE TERESINA-PI
Alyne Freire de Melo, Ricardo Costa Rodrigues Camargo, Fbia de Mello Pereira, Maria Teresa do Rgo Lopes, Leudimar Aires Pereira
730
SisteMtica e biOGeOGraFia de abeLhas ABELHAS DE RORAIMA. POR QUE TANTAS ESPCIES EM TO POUCO ESPAO?
731
Marcio Luiz de Oliveira, Slvio Jos dos Reis Silva, Marcone C. Silva, Ana Cludia O. Arajo, Maria Ivonei Albuquerque, Sheila F. Tavares.
732
AVANOS RECENTES NA SISTEMTICA E TAXONOMIA DE AUGOCHLORINI (HALICTINAE)

Rodrigo B. Gonalves
733
lxii
COMPARAO GENTICA ENTRE DIFERENTES ESPCIES DE EUGLOSSA (HYMENOPTERA: APIDAE: EUGLOSSINI) BASEADA EM MARCADORES MOLECULARES A APIFAUNA DO PARQUE ESTADUAL DO ITACOLOMI, OURO PRETO, MG ABELHAS MELIPONINA (HYMENOPTERA, APIDAE) DA REGIO CENTRO-OESTE DO AMAP
Richardson Ferreira Frazo, Arley Jos Silveira da Costa
Giangarelli, D.C., Freiria, G.A., Colatrelli, O.P., Suzuki, K.M., S.C. Augusto., Sofia, S.H.
734
William de Oliveira Sabino, Rudo de Paiva Ferreira, Yasmine Antonini.
735
736
REVISO DAS ESPCIES DE HYLAEUS FABRICIUS, 1793 (HYMENOPTERA, COLLETIDAE) PRESENTES NO ESTADO DE MINAS GERAIS, BRASIL
Rodolfo Csar Costa Arantes, Fernando Amaral da Silveira
737
DISTRIBUIO GEOGRFICA DAS ESPCIES BRASILEIRAS DO GNERO MEGALOPTA SMITH 1853 (APIDAE: HALICTINAE)
Leandro Mattos Santos, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo, Fernando A. Silveira
738
FILOGENIA E EVOLUO DO POLIMORFISMO CEFLICO EM RHINOCORYNURA SCHROTTKY (HALICTINAE, AUGOCHLORINI)

Rodrigo B. Gonalves, Gabriel A. R. Melo
739
PHYLOGENETIC RELATIONSHIPS AMONG SPECIES OF GENUS SCAURA (HYMENOPTERA: MELIPONINI) INFERRED FROM MTDNA SEQUENCES
Alayne Magalhes Trindade Domingues, Sidnei Mateus, Maria Cristina Arias
740
FIRST RECORD OF OBLIGATORY CLEPTOPARASITISM IN ANDRENINE BEES (HYMENOPTERA, APIDAE)

Gabriel Augusto Rodrigues de Melo, Kelli dos Santos Ramos
741
DIFERENCIAO DE 24 SUBESPCIES DE APIS MELLIFERA POR TCNICA DE MORFOMETRIA GEOMTRICA

Marina Lopes Grassi, Vanessa de Andrade Bugalho, Tiago Mauricio Francoy, Lionel Segui Gonalves
742
lxiii
NOTES ON THE BEE GENUS CENTRIS: TAXONOMY, DIAGNOSIS AND GEOGRAPHIC DISTRIBUTION OF THE SPECIES OF THE GROUP HYPTIdIS (HYMENOPTERA: APIDAE: CENTRIDINI) 743
Felipe Rodrigo Vivallo Martnez-, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo
UsO sUstentveL de abeLhas MELIPONICULTURA E GERAO DE RENDA EM BOA VISTA DO RAMOS AM

Ana Laura B. Mantovani, Jernimo K. Villas-Bas
744
745
ENSINO DE BIOLOGIA: UMA PROPOSTA DE VISITA MONITORADA SOBRE O TEMA ABELHAS MELIPONNEAS, NO CAMPUS DA FUNDAO SANTO ANDR
Natlia Brianezi de Almeida, Mrcia Zorello Laporta
746
DIAGNSTICO SCIO-ECONMICO DAS FAMLIAS MELIPONICULTORAS DE BOA VISTA DO RAMOS AM

Ana Laura B. Mantovani, Jernimo K. Villas-Bas
747
USO DO MEL DE ABELHA POR MORADORES DO BAIRRO DO LAGUINHO, MACAP-AP: UM ESTUDO ETNOCIENTFICO
Eliane Rocha Rodrigues, Lorena Oliveira de Souza, Daniel de S Cavalcante, Arley Jos Silveira da Costa
748
AVALIAO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E CICATRIZANTE DE GIS CONTENDO EXTRATO PADRONIZADO DE PRPOLIS EFICCIA PR-CLNICA E CLNICA
Andresa A. Berretta; Juliana Maldonado Marchetti
749
CO N F E R NCIAS
Developmental Evolution of Division of Labor

Robert E. Page, Jr., School of Life Sciences, Arizona State University, Tempe, AZ How does complex social behavior evolve? What are the developmental building blocks of division and labor and specialization, the hallmarks of insect societies? Recent behavioral, genetic, and genomic studies have revealed the developmental origins in the evolution of division of labor and specialization in foraging worker honey bees, the hallmarks of complex insect societies. Selective breeding for a single social trait, the amount of surplus pollen stored in the nest (pollen hoarding) revealed a phenotypic architecture of correlated traits at multiple levels of biological organization in facultatively-sterile female worker honey bees. Genetic mapping has demonstrated that the phenotypic architecture is a consequence of a genetic architecture rich in pleiotropy and epistasis possibly affecting a reproductive signaling pathway. Gene knockdown of a single hormone involved in reproductive signaling affects the entire phenotypic architecture and provides strong support for our hypothesis that division of labor and foraging specialization are derived from the reproductive cycle of solitary insects.
More Than a Honey Machine: Vision, Navigation, and Cognitive Capacity in Honey Bees
Mandyam V. Srinivasan Queensland Brain Institute, University of Queensland and ARC Centre of Excellence for Vision Science St. Lucia, Queensland 4072, Australia E-mail: M.Srinivasan@uq.edu.au Insects, in general, and honeybees, in particular, perform remarkably well at seeing and perceiving the world and navigating effectively in it, despite possessing a brain that weighs less than a milligram and carries fewer than 0.01% as many neurons as ours does. Although most insects lack stereo vision, they use a number of ingenious strategies for perceiving their world in three dimensions and navigating successfully in it. Our studies of honeybee vision reveal that flying insects perceive the world in three dimensions and navigate safely in it by using cues derived from image motion, rather than complex stereo mechanisms. The talk will describe the visual cues that insects use to regulate flight speed, compensate for headwinds and crosswinds, negotiate narrow gaps, estimate distance flown, and execute smooth landings. Our research on honeybee perception and cognition is also beginning to reveal that these insects may not be the simple, reflexive creatures that they were once assumed to be. For example, bees can learn rather general features of flowers and landmarks, such as colour, orientation and symmetry, and apply them to distinguish between objects that they have never previously encountered. Bees exhibit top-down processing: that is, they are capable of using prior knowledge to detect poorly visible or camouflaged objects. They can navigate through labyrinths by learning path regularities, and by using symbolic signposts. They can learn to form complex associations and to acquire abstract concepts such as sameness and difference. Bees are also capable of associative recall: that is, a familiar scent can trigger recall of an associated colour, or even of a navigational route to a food location. Recent work suggests that honeybees are capable of counting landmarks that are encountered sequentially on the way to a food source. And, like humans and a range of other animals, bees display left-right asymmetries in brain function, learning sights and smells better with their right eye and right antenna, respectively. All of these observations suggest that there is no hard dichotomy between invertebrates and vertebrates in the context of perception, learning and cognition; and that brain size is not necessarily a reliable predictor of perceptual capacity.
Molecular Makings of Memory: Neurexin and Neuroligin in The Honey Bee

Charles Claudianos1, Sunita Biswas2,3, Judith Reinhard1, John Oakeshott2, Robyn Russell2, Alexandre dos Santos Cristino4, and Mandyam V. Srinivasan1 1 The Queensland Brain Institute, The University of Queensland, St Lucia QLD 4072, Australia, c.claudianos@uq.edu.au 2 CSIRO Entomology, Black Mountain, Canberra ACT Australia 3 Research School of Biological Sciences, The Australian National University, Canberra ACT Australia 4 Instituto de Matemtica e Estatstica, Universidade de So Paulo, So Paulo, Brazil Several vertebrate studies highlight neuroligins and neurexins (cell adhesion binding partners) as critical to synapse development and function in the central nervous system. Our genome analysis concerning enzyme families associated with environmental response provided the first comprehensive look at these molecules in invertebrates. We isolated and characterised five neuroligins and one neurological neurexin from the honeybee, and examined localisation and developmental expression of these molecules. Neuroligins and neurexin I were found to be highly expressed throughout the adult honeybee brain including the higher order processing centre, the mushroom bodies. This suggests that the neuroligin/neurexin system has a broadly similar role in synaptogenesis in insects as in vertebrates, with the scope to generate substantial functional diversity through alternative splicing. To investigate the role of neuroligins and neurexin I in the adult honeybee brain, we conducted a quantitative expression analysis using three different experimental paradigms: environmental deprivation, associative learning, and unilateral or bilateral amputation of the antennae. Neuroligin 1 and neurexin I expression was clearly correlated with sensory input, learning and memory. Our results establish the honeybee as a model for investigating neurological disease, as aberrations to the neuroligin/neurexin complex have been associated with a number of neuro-psychiatric disorders such as autism, Aspergers and schizophrenia in humans.
Honey Bee Pollination Crisis: Can Native Bees Take Up The Slack?
Claire Kremen Department of Environmental Science, Policy and Management College of Natural Sciences University of California, Berkeley ckremen@nature.berkeley.edu Honey bees have become an essential farming input for modern intensive cultivation of numerous crops yet the number of managed colonies has been in decline for decades. Recent sudden and mysterious declines (Colony Collapse Disorder) compounded this problem and left bee-keepers and growers in the United States in a panic last year. Can native bee communities fill the gap? I will explore two farming landscapes one in New Jersey/Pennsylvania and one in California to ask under what conditions native bees can meet demands for pollination services and/or alleviate our sole dependence on honey bees. More specifically, in California, only farms near natural habitat had bee communities sufficiently diverse and abundant to provide complete pollination services to watermelon, a highly pollinatordependent crop. In contrast, most farms in a New Jersey landscape had diverse bee communities capable of providing complete pollination. I argue that both proximity to natural habitat and habitat heterogeneity within the vicinity of the farm determine the characteristics of bee communities and thus of the pollination services they provide. In New Jersey, agricultural landscapes are a heterogeneous mix of natural habitat patches, old fields, organic and conventional farms. Thus, in New Jersey, whether bees are nesting on a farm, in natural habitat patches or in old fields, smaller farm sizes and heterogeneous landscapes lessen the distance between nesting and feeding sites, so that bees can find ample forage resources within foraging range of the nest anywhere in the landscape. In contrast, in California, where the landscape is dominated by large, intensively-managed farms that contain few floral resources, floral resource distribution may limit nest site selection and hence bee distributions. Bee species may not find enough forage resources in the intensively managed landscape to nest there, accounting for the low diversity communities found in such landscapes. Abundant, high diversity communities may therefore be limited to natural areas or farms bordering natural areas.
SI MPS IOS
SI MPSIO 1
A TECNOLOGIA DA INFORMAO E OS POLINIZADORES
Coordenador: Antonio Mauro Saraiva
Interoperability Within the International Pollinator Initiative

Michael Ruggiero Smithsonian Institution, Washington, DC, USA The International Pollinator Initiative (IPI) is an important element of the Convention on Biological Diversitys work program for agricultural biodiversity. There are four major components of the IPI: assessment, adaptive management, capacity building, and mainstreaming. Several international activities have begun that support these components, including the North American pollinator Protection Campaign, IABIN Pollinator Thematic Network, GBIF Global Pollinator Species Campaign, FAO Conservation and Management of Pollinators for Sustainable Agriculture through an Ecosystem Approach, and other regional efforts. It is important that all of these activities cooperate so that the data collected and knowledge developed are not lost and time and money are not wasted. One way of achieving cooperation is through the common use of data standards and exchange protocols. The standards and protocols that have been developed and adopted are reviewed.
Rede Brasileira de Colees de Insetos Polinizadores

Vanderlei Perez Canhos Centro de Referncia em Informao Ambiental- CRIA Recentes avanos associados implementao de iniciativas globais, regionais e locais esto catalisando esforos coordenados de digitalizao e disponibilizao de dados sobre meio ambiente, clima e biodiversidade na Internet. A infra-estrutura compartilhada de dados on-line resultante destes esforos est ampliando o acesso dinmico a dados e informaes. A rede speciesLink (http://splink.cria.org.br/) um sistema distribudo de informao voltado integrao dinmica de dados primrios de espcimes armazenados em colees biolgicas distribudas. Utiliza avanos correntes em protocolos de comunicao e gerenciamento de bancos de dados, software livre e de cdigo aberto, e tcnicas de espelhamento de dados em ns regionais conectados via Internet. Este sistema de informao disponibiliza tambm ferramentas de apoio para a correo e visualizao de dados e indicadores das colees associadas rede. A rede speciesLink implementada com o apoio da Fapesp (2001-2005) vem sendo ampliada graas o apoio de outras fontes de financiamento, incluindo a JRS Biodiversity Foundation, o Ministrio de Cincia e Tecnologia (MCT) e a Infraestrutura Global de Informao sobre Biodiversidade (Global Biodiversity Information Facility GBIF ). No momento a rede speciesLink integra cerca de 2,5 milhes de registros de mais de 130 de colees e sub-colees distribudas. A Rede de Insetos Polinizadores est sendo desenvolvido para atender a demanda de programas associados Conveno sobre a Diversidade Biolgica. A apresentao ser focada na metodologia e arquitetura adotada e nos esforos voltados ampliao da rede e melhoria da qualidade dos dados, e na integrao deste sistema com outras redes internacionais e com catlogos de espcies.
10
A Rede Temtica de Polinizadores da Iabin

Antonio Mauro Saraiva Escola Politcnica da Universidade de So Paulo Laboratrio de Automao Agrcola Desde 1999 diversas atividades e projetos vm sendo realizados em parceria pelo Laboratrio de Automao Agrcola (Poli-USP) e o Laboratrio de Abelhas (IB-USP) visando aplicar as tecnologias da informao no desenvolvimento de ferramenta de apoio s pesquisas e disseminao da informao sobre polinizadores, com foco em abelhas meliponini. Essas iniciativas cresceram em importncia com a confirmao do declnio dos polinizadores e das mudanas globais e a conseqente urgncia de se estudar esses polinizadores visando a sua preservao e uso sustentado. Sistemas de instrumentao so fundamentais para melhorar a qualidade e aumentar a quantidade dos dados coletados em experimentos. Para atender essa demanda esto em desenvolvimento redes de sensores para variveis ambientais e para atividade de vo em colnias, sistemas de aquisio de dados de udio e vdeo em tempo-real, via Internet, com software de gravao e anlise dos sinais (www.ib.usp.br/vinces). O uso de computadores de mo como ferramenta para coleta de dados em campo, tambm foi explorado, gerando os softwares Etholog (para estudos comportamentais) e TrapNestScouter (para ensaios com ninhos armadilha). Para a organizao e a disponibilizao dos dados coletados e das informaes processadas necessrio dispor-se de sistemas de informao adequados que prioritariamente devem ser acessveis via Internet. Exemplos desses sistemas a WebBee (www.webbee.org.br) e, mais recentemente, a Rede Temtica de Polinizadores (pollinators.iabin.net) da Rede Interamericana de Informaes sobre Biodiversidade, IABIN, em parceria com o CoEvolution Institute, Smithsonian Institution e NBII, dos EUA. A evoluo dos sistemas acompanha a evoluo da tecnologia, com a adoo de modelos distribudos para esses sistemas, baseados em portais e provedores de dados que se comunicam segundo protocolos e padres de dados aceitos internacionalmente.
11
Redes de Controle e Redes de Sensores Sem Fio Aplicadas s Pesquisas com Meliponneos
Carlos Eduardo Cugnasca Escola Politcnica da Universidade de So Paulo Laboratrio de Automao Agrcola Atualmente os modernos sistemas de monitoramento e atuao vm sendo desenvolvidos com redes de controle, que se caracterizam por distribuir as atividades de aquisio de dados, atuao e controle em diversos mdulos (ou ns). Essa alternativa fruto de diversas evolues: da microeletrnica, que viabilizou processadores e dispositivos eletrnicos de tamanho reduzido, baixo custo, apesar da alta capacidade de processamento e armazenamento, e da tecnologia de redes, com o desenvolvimento de protocolos especficos para atender s necessidades de automao e controle, muitos deles padronizados e abertos. Dessa maneira, os sistemas com arquitetura centralizada vm sendo substitudos pelos de arquitetura distribuda, tendo-se como principais vantagens a interoperabilidade, o uso de mltiplos meios de comunicao (com ou sem fio), o crescimento incremental e a maior facilidade de se elaborar alteraes, importante em sistemas destinados pesquisa. Assim, vm sendo desenvolvido e avaliado um sistema de monitoramento e controle, baseado em redes de controle, para colnias de meliponneos instaladas em um laboratrio de pesquisa. Utilizou-se LonWorks (ANSI / EIA 709.1), uma das principais tecnologias empregadas atualmente em sistemas de automao distribudos. Ela implementa os seis primeiros nveis do modelo OSI do protocolo da rede de controle, restando o desenvolvimento do nvel de aplicao de cada n da rede. Desenvolveu-se um n bsico para o monitoramento de cada colnia, para a medio de temperatura e umidade internas, contagem da entrada e sada de abelhas, controle da temperatura e um microfone para captura dos sons gerados pelas abelhas. Externamente as grandezas do ambiente so medidas por uma estao meteorolgica. Esses ns foram industrializados por uma empresa nacional. Para o monitoramento de colnias externas est-se desenvolvendo um sistema baseado em mdulos funcionalmente similares, porm de consumo muito baixo, operando com baterias, e com comunicao sem fio de baixo alcance, com capacidade de estabelecer redes ad hoc, na qual as informaes vo sendo transferidas de n para n, at chegarem ao computador de coleta de dados.
12
Instrumentao Virtual para Pesquisas com udio e Vdeo em Meliponneos

Andr Riyuiti Hirakawa Escola Politcnica da Universidade de So Paulo Laboratrio de Automao Agrcola A disseminao do uso da Tecnologia da Informao (TI) pode ser notada nos mais diversos setores do conhecimento, produo e de servios. Com a TI possvel implementar desde um simples sistema de informao para auxlio nas atividades at a criao de novas ferramentas e processos. Mais recentemente, e com a disseminao das redes de computadores mundial, a Internet, novas possibilidades foram lanadas como a utilizao da Internet para a monitorao e controle de processos distncia. Nasce assim o conceito dos laboratrios distncia por meio da Web, ou o WebLab, que permite realizar experimentos distncia utilizando os recursos e os servios da Internet, originando ento a instrumentao virtual. Nesse contexto, o projeto Vinces (FAPESP/KyaTera) tem como um dos objetivos a pesquisa e o desenvolvimento de uma infra-estrutura, que inclui uma rede de computadores de alta velocidade, ferramentas de software e servios da Web, para auxlio nas atividades de pesquisa em meliponneos. Por meio do uso de equipamentos (sistema de captao de udio e vdeo e instrumentos diversos) instalados em computadores conectados rede de alta velocidade, utilizando-se tambm de ferramentas de software, possvel disponibilizar informaes dos experimentos em colmias de meliponneos. As informaes dos experimentos compem a gama de instrumentos virtuais, e que, para o projeto Vinces, inclui: a aquisio do som emitido pelas abelhas; o vdeo da colmia em tempo-real; variveis ambientais na colmia de temperatura e umidade; e a contagem de abelhas. As informaes dos instrumentos virtuais so transmitidas por meio da Internet e podem ser acessadas pelo uso de um Browser (navegador) tpico. Apesar da aparente virtualizao, as informaes provenientes dos experimentos refletem estritamente (no tempo e espao) o que ocorre fisicamente na colmia. As vantagens do uso de WebLab so: o grande poder de disseminao e a capilaridade elevada aliada ao baixo custo envolvido.
13
Monitoramento de Colnias de Abelhas Africanizadas nas Atividades de Enxameao e Forrageamento.

Lionel Segui Gonalves, David De Jong, Gesline F.Almeida, Pedro R. Prado (Apilab-USP, Ribeiro Preto-SP) As atividades de enxameao e forrageamento de abelhas Africanizadas Apis mellifera L. tem sido cada vez mais pesquisadas em programas de melhoramento de abelhas. A enxameao pode ser reprodutiva (durante a poca de reproduo) e por abandono (quando as condies no so favorveis). O Forrageamento corresponde a atividade de coleta de alimento (plen, nctar e gua). Vrios so os fatores que podem influenciar no mau funcionamento de uma colnia ( ex: falta de gua, falta de alimento,stress, temperatura, umidade etc) As abelhas africanizadas apresentam uma alta tendncia para enxamear.No nordeste brasileiro as enxameaes por abandono chegam a atingir taxas de mais de 50% ao ano, o que representa um grande prejuzo para os apicultores. Para se analisar com detalhes as atividades de enxameao e forrageamento necessrio um monitoramento das atividades das abelhas, havendo a necessidade de mecanizao dos registros de entrada e sada individual das abelhas mediante a instalao de sensores ou foto-clulas (apidmetros) nas entradas das respectivas colmias e do registro desses dados em computador. Com o objetivo de se estudar as causas das enxameaes e a capacidade de produo (forrageamento) das abelhas africanizadas foram construidas cmaras climticas dotadas de sensores de temperatura, umidade e apidmetros, bem como instalao de 10 colmeias sobre balanas eletrnicas especiais dotadas de sensores para registros peso em tempo real bem como de dados cumulativos de cada colmeia em computadores. As pesquisas esto sendo realizadas no Campus da USP de Ribeiro Preto e da UFERSA de MossorRN. Para os estudos de forrageamento no Apilab, em Ribeiro Preto-SP j foi testado todo o equipamento. J temos registros em grficos de ganho de peso dirio de cada colmeia, bem como dados de monitoramento de mais de 60 dias e em breve iniciaremos os trabalhos sobre dietas alimentares. Quanto a enxameagem foram instaladas dentro das Cmaras Climticas duas colmias experimentais contendo abelhas e uma sem abelhas como controle, alm de outro controle. Uma colnia de abelhas Apis mellifera mantm normalmente a temperatura interna de 34,5.C.Foram induzidas enxameaes artificiais por abandono mediante aumento da temperatura interna, de 28 a 50. e monitoradas as atividades das abelhas durante 24 horas por dia, do incio da induo at o final das enxameaes. Foram obtidas vrias enxameaes por abandono ao se atingir a temperatura de 41.C no interior das colmias. Comprovou-se que tanto a temperatura interna como a umidade relativa e falta de gua so fatores que interferem diretamente no comportamento enxameatrio das abelhas. Esses resultados simulam o ambiente natural das abelhas no nordeste brasileiro, nos levando a recomendar aos apicultores a colocarem suas colmias sombra ou meia sombra e com disponibilidade de gua para evitar as enxameaes. (Auxlio BIOTA FAPESP, SEBRAE).-
14
SI MPS IO 2
HOW TO FIND A FLOWER SMALL BRAINS RESOLVING COMPLEX TASKS
Coordenador: Michael Hrncir
15
Finding a Flower - A Complex Task at the Individual and the Colony Level
Michael Hrncir Universidade de So Paulo, FFCLRP Departamento de Biologia, Avenida Bandeirantes 3900, Ribeiro Preto - SP, 14040-901, Brazil E-mail: michael.hrncir@gmx.at, Tel: +551636024684, Fax: +551636024684 Colonies of highly eusocial bees (honey bees and stingless bees) often comprise several hundred to several thousand individuals. The survival of the colonies greatly depends on the success of foraging individuals in finding and in collecting carbohydrates (usually nectar) and proteins (usually pollen). Both are stored within the nest to guarantee a permanent food supply. Thus, the foragers ability to find and exploit profitable food sources is a crucial pre-requisite to ensure the survival of the colony during possible events of resource scarcity. How do bees find a flower? Although this question appears to be childish at first sight, it integrates different sophisticated problems: Do nave foragers have any innate preferences to approach a certain food source? Do foraging bees have any information about a food source prior to leaving the nest? How do bees find the food source? What kind of information do bees gather on their foraging trip? Do foraging bees pass on the gathered information and how does this information spread among the members of the colony? Hence, the simple act of finding a flower actually comprises a variety of sensory challenges for bees both at the individual level and at colony level. Insects have traditionally been considered small and simple reflex machines. Studies in honeybees, however, revealed that these insects, besides the small size of their brain, are capable to provide solutions to a wide range of ecologically relevant problems. The present symposium intends to give an insight into these fascinating capacities and abilities of bees using the example of how foraging individuals cope with the challenge to find a flower. Financially supported by FAPESP P06/50809-7 and P06/53839-4
16
Visually Guided Navigation in Honey Bees

Mandyam V. Srinivasan Queensland Brain Institute, University of Queensland and ARC Centre of Excellence for Vision Science, St. Lucia, Queensland 4072, Australia E-mail: M.Srinivasan@uq.edu.au Although most insects lack stereo vision, they use a number of ingenious strategies for perceiving their world in three dimensions and navigating successfully in it. Our studies reveal that flying insects perceive the world in three dimensions and navigate safely in it by using cues derived from image motion, rather than complex stereo mechanisms. For example, distances to objects are gauged in terms of the apparent speeds of motion of the objects images, rather than by using complex stereo mechanisms (Lehrer et al., 1988; Srinivasan et al., 1989). Objects are distinguished from backgrounds by sensing the apparent relative motion at the boundary (Srinivasan et al., 1990). Collisions with objects or surfaces are avoided by turning away from areas in the visual field that produce high speeds of image translation (Srinivasan and Zhang 1997) or high rates of image expansion (Tammero and Dickinson 2002). Narrow gaps are negotiated safely by balancing the apparent speeds of the images in the two eyes (Kirchner and Srinivasan 1989; Srinivasan et al., 1991). The speed of flight is regulated by holding constant the average image velocity as seen by both eyes (David, 1982; Srinivasan et al., 1996; Baird et al., 2005). This ensures that flight speed is automatically lowered in cluttered environments, and that thrust is appropriately adjusted to compensate for headwinds and tail winds. Visual cues are also used to compensate for crosswinds. Bees landing on a horizontal surface hold constant the image velocity of the surface as they approach it, thus automatically ensuring that flight speed is close to zero at touchdown (Srinivasan et al., 2000). Bees approaching a vertical surface hold the rate of expansion of the image of the surface constant during the approach, again ensuring smooth docking. Foraging bees gauge distance flown by integrating optic flow: they possess a visually-driven odometer that is robust to variations in wind, body weight, energy expenditure, and the properties of the visual environment (Esch and Burns, 1995; Srinivasan et al., 2000; Esch et al., 2001; Dacke and Srinivasan, 2007). Some of these principles are offering novel, computationally elegant solutions to persistent problems in machine vision and robot navigation (Horridge, 1987; Franceschini et al., 1992; Duchon and Warren, 1994; Sobey, 1994; Santos-Victor et al., 1995; Chahl and Srinivasan, 1997; Weber et al., 1997; Chahl and Srinivasan, 2000; Lambrinos et al., 2000; Chahl et al., 2003; Corke, 2004; Ruffier and Franceschini, 2004; Srinivasan et al., 2004; Beyeler et al., 2006; Srinivasan et al., 2006; Zufferey and Floreano, 2006; . The talk will also describe the use of insect-based strategies to design, implement and test biologically-inspired algorithms for the guidance of autonomous terrestrial and aerial vehicles.
References
Baird E, Srinivasan MV, Zhang SW and Cowling A (2005). Visual control of flight speed in honeybees. J. Exp. Biol. 208: 3895-3905. Beyeler A, Mattiussi C, Zufferey JC and Floreano D (2006). Vision-based altitude and pitch estimation for ultra-light indoor microflyers. In: Proceedings of the IEEE International Conference on Robotics and Automation, Orlando, USA, 2836-2841.
17
Chahl JS, Thakoor S, Bouffant NL, Stange G, Srinivasan MV, Hine B, Zornetzer S (2003). Bioinspired engineering of exploration systems: A horizon sensor/attitude reference system based on the dragonfly ocelli for Mars Exploration Applications. J. Robot. Syst. 20: 35-42. Chahl JS and Srinivasan MV (1997). Reflective surfaces for panoramic imaging. Appl. Optics 36: 8275-8285. Chahl JS and Srinivasan MV (2000). A complete panoramic vision system, incorporating imaging, ranging, and three-dimensional navigation. In: Proceedings, 2000 IEEE Workshop on Omnidirectional Vision, Hilton Head Island, USA, 104-111. Corke P (2004). An inertial and visual sensing system for a small autonomous helicopter. J. Robot. Syst. 21: 43-51. Dacke M and Srinivasan MV (2007). Honeybee navigation: Distance estimation in the third dimension. J. Exp. Biol. 210: 845-853. David CT (1982). Compensation for height in the control of groundspeed by Drosophila in a new Barbers Pole wind tunnel. J. Comp. Physiol. A 147: 485-493. Duchon AP and Warren WH (1994). Robot navigation from a Gibsonian viewpoint. In: Proceedings of the IEEE International Conference on Systems, Man and Cybernetics, San Antonio, USA, 2272-2277. Esch H, and Burns JE (1995). Honeybees use optic flow to measure the distance of a food source. Naturwissenschaften 82: 38-40. Esch H, Zhang SW, Srinivasan MV and Tautz J (2001). Honeybee dances communicate distances measured by optic flow. Nature (Lond.) 411: 581-583. Franceschini N, Pichon JM and Blanes C (1992). From insect vision to robot vision. Phil. Trans. R. Soc. Lond. B 337: 283-294. Horridge GA (1987). The evolution of visual processing and the construction of seeing systems. Proc. R. Soc. Lond. B 230: 279-292. Kirchner W and Srinivasan MV (1989). Freely-flying honeybees use image motion to estimate object distance. Naturwissenschaften 76: 281-282. Lambrinos D, Moller R, Labhart T, Pfeifer R and Wehner R (2000). A mobile robot employing insect strategies for navigation. Robot. Auton. Syst. 30: 39-64. Lehrer M, Srinivasan MV, Zhang SW and Horridge GA (1988). Motion cues provide the bees visual world with a third dimension. Nature (Lond.) 332: 356-357. Ruffier F and Franceschini N (2004). Visually guided micro-aerial vehicle: automatic take off, terrain following, landing and wind reaction. In: Proceedings of the IEEE International Conference on Robotics and Automation, New Orleans, USA, 2339-2346. Santos-Victor J, Sandini G, Curotto F and Garibaldi S (1995). Divergent stereo in autonomous navigation: From bees to robots. Int. J. Comput. Vis. 14: 159-177. Sobey PJ (1994). Active navigation with a monocular robot. Biological Cybernetics 71: 433-440. Srinivasan MV and Zhang SW (1997). Visual control of honeybee flight. In: Orientation and communication in arthropods (Lehrer M, ed.). Birkhuser Verlag, Basel, pp. 95-114. Srinivasan MV, Lehrer M, Zhang SW and Horridge GA (1989). How honeybees measure their distance from objects of unknown size. J. Comp. Physiol. A 165: 605-613. Srinivasan MV, Lehrer M and Horridge GA (1990). Visual figure- ground discrimination in the honeybee: the role of motion parallax at boundaries. Proc. R. Soc. Lond. B 238: 331-350. Srinivasan MV, Lehrer M, Kirchner WH and Zhang SW (1991). Range perception through apparent image speed in freely-flying honeybees. Vis. Neurosci. 6: 519-535.
18
Srinivasan MV, Zhang SW, Lehrer M and Collett TS (1996). Honeybee navigation en route to the goal: visual flight control and odometry. J. Exp. Biol. 199: 237-244 Srinivasan MV, Zhang SW, Altwein M and Tautz J (2000). Honeybee navigation: nature and calibration of the odometer. Science 287: 851-853. Srinivasan MV, Zhang SW, Chahl JS, Barth E and Venkatesh S (2000). How honeybees make grazing landings on flat surfaces. Biol. Cybern. 83: 171-183. Srinivasan MV, Zhang SW, Chahl JS, Stange G and Garratt M (2004). An overview of insect inspired guidance for application in ground and airborne platforms. Proc. Inst. Mech. Engnrs. Part G: J Aerospace Engineering 218: 375-388. Srinivasan MV, Thurrowgood S and Soccol D (2006). An optical system for guidance of terrain following in UAVs. In: Proceedings of the IEEE International Conference on Advanced Video and Signal Based Surveillance (AVSS 06), Sydney, Australia, 51-56. Tammero LF and Dickinson MH (2002). The influence of landscape on the free flight behaviour of the fruit fly Drosophila melanogaster. J. Exp. Biol. 205: 327-343. Weber K, Venkatesh S and Srinivasan MV (1997). Insect inspired behaviours for the autonomous control of mobile robots. In: From living eyes to seeing machines (Srinivasan MV and Venkatesh S, eds.). Oxford University Press, Oxford, 226-248. Zufferey JC and Floreano D (2006). Fly-inspired visual steering of an ultralight indoor aircraft. IEEE Trans. Robotics 22: 137-146.
19
How Honey Bees Learn and Process Complex Floral Scents

Judith Reinhard, Michael Sinclair, Charles Claudianos, Mandyam V. Srinivasan The University of Queensland, Queensland Brain Institute, Brisbane QLD 4072 - Australia E-mail: j.reinhard@uq.edu.au, Tel: +61733466321, Fax: +61733466301 Key words: honey bee, olfaction, learning Honeybees (Apis mellifera L.) are exposed to countless floral scents in their natural foraging environment, most of which are complex chemical mixtures (Chen et al., 2003; Knudsen et al., 2006). While processing of single odorants has been well studied in honeybees, it is still unclear how bees learn and process scent mixtures - even though complex scents play a crucial role in finding the right flowers. Using the well-known Proboscis-Extension-Reflex Assay (Kuwabara, 1957), we investigated olfactory learning of floral scent mixtures. In this assay bees were first trained to associate a mixture of 14 odorants with a sugar reward, until they responded by extending their probsocis every time they smelled the scent mixture. The thus trained bees were then tested with the single odorants: A positive response, i.e. extension of the proboscis, to smelling a single odorant meant that bees recognized the single odorant as representative of the previously learnt scent mixture. As scents we used experimental mixtures of commonly occurring floral odorants, that are found in at least 50% of all the plants investigated so far, including limonene, (E)-Ocimene, Myrcene, Linalool, -Pinene, -Pinene, Benzaldehyde, Benzyl alcohol, Methyl-2-hydroxybenzoate, 2-Phenylethanol, and 6-Methyl-5-hepten-2one (Knudsen et al., 2006). Our results show that honeybees only learn a selection of key compounds as representative of the entire mixture. The number and type of key compounds learnt is not fixed but depends on the composition of the scent mixture. We will discuss the potential neural mechanisms underlying this process. Together with the bees well-known ability to generalize, the strategy of key compound learning keeps flower recognition flexible: Bees are able to find and return to rewarding flowers within the constantly varying scent environment presented by flowering plants. Funded by CSIRO Food Futures Flagship.
References
Chen F, Tholl D, DAuria JC, Farooq A, Pichersky E and Gershenzon J (2003). Biosynthesis and emission of terpenoid volatiles form Arabidopsis flowers. The Plant Cell 15: 481-494. Knudsen JT, Eriksson R, Gershenzon J, and Stahl B (2006). Diverstiy and distribution of floral scent. The Botanical Review 72: 1-120. Kuwabara M (1957). Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene, Apis mellifica. J. Fac. Sci. Hokkaido Univ. Ser. VI, Zool. 13: 458-464.
20
Early Olfactory Experiences Within the Honey Bee Hive: Ecological Implications From Behavioral and Physiological Approaches
Walter M. Farina, Andrs Arenas, Vanesa Fernndez Grupo de Estudio de Insectos Sociales. Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental, IFIBYNE-CONICET, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Argentina E-mail: walter@fbmc.fcen.uba.ar, Tel: +541145763445 Early appetitive experiences have important consequences on odor-mediated behavior in insects. Due to the changing behavioral contexts to which honeybees and other social insects are exposed during the adult lifespan, they are ideal models to analyze the effect of particular sensory stimuli perceived during early adulthood on later behavior. Because of the division of labor based in polyethism, activities like nectar collection and its processing are highly coordinated within these colonies. When scented nectar spreads into a beehive, food is transferred from the active foragers (often the oldest workers) to middle-aged food processors, and then it is distributed to the youngest bees (Grter et al., 2006, Grter and Farina, 2007). This passage of food occurs through mouth-tomouth trophallactic interactions and leads to the establishment of long-term associative memories in the food-recipient partners. These memories can be evoked even days after they are formed inside the colony (Farina et al., 2005, Arenas et al., 2008). This opens the possibility that those young hive bees that can establish memories of rewarded odors could use them later on when they reach their foraging age. The putative information networks formed during the nectar circulation would be functional not only when a new resource is discovered, but also when it re-appears within the hives surroundings. Specifically, our goal is to understand how early influences can later on affect honeybees foraging behavior. We established olfactory memories in young worker bees reared under different experimental conditions and then performed behavioral and physiological recordings of the bees at an age in which they normally initiate foraging task. Landing responses of free-flying bees, laboratory behavioral assays and brain activity patterns show that early appetitive experiences have important consequences on the odor-mediated responses of foraging-age bees.
Financially supported by CONICET, ANPCYT and UBACYT
References
Farina WM, Grter C and Daz P (2005). Social learning of floral odours inside the honeybee hive. Proc. R. Soc. B 273:1923-1928. Grter C, Acosta LE and Farina WM (2006). Propagation of olfactory information within the honeybee hive. Behav. Ecol. and Sociobiol. 60: 707715.
21
Farina WM, Grter C, Acosta LE and Mc Cabe S (2007). Honeybees learn floral odors while receiving nectar from foragers within the hive. Naturwissenschaften 94: 55-60. Grter C and Farina WM (2007). Nectar distribution and its relation to food quality in honeybee (Apis mellifera) colonies. Insect. Soc. 54: 87-94. Arenas A and Farina WM (2008). Age and rearing environment interact in the retention of early olfactory memories in honeybees. J. Comp. Physiol. A, DOI:10.1007/s00359-008-0337-z.
22
Individual and Social Learning in the Stingless Bee Melipona quadrifasciata

Sofa I. Mc Cabe1, Klaus Hartfelder2, Walter M. Farina1 1 Grupo de Estudio de Insectos Sociales. Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental, IFIBYNE-CONICET, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires Argentina E-mail: mccabe@bg.fcen.uba.ar, Tel: +541145763445 2 Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, Brazil Floral scents guide insect pollinators during their final approach to flowers (Menzel, 1999). In eusocial insects this cue can be learned during foraging in the field (Gerber et al., 1996), but also within the nest (Farina et al., 2005; Arenas et al., 2007). We assessed the Brazilian stingless bee Melipona quadrifasciata for individual olfactory learning abilities and evaluated the possibility that the food scent could be learned during social interactions occurring within the nest. We performed a differential classical conditioning assay using the Proboscis extension response (PER) paradigm (Takeda, 1961; Bitterman et al., 1983), which is a powerful tool to study associative learning in honeybees. First, we olfactory-conditioned M. quadrifasciata workers in the PER protocol that until now had not been successfully established for a stingless bee species (Mc Cabe et al., 2007; Figure 1). Figure 1. Example of nave Melipona quadrifasciata bees performance during a differential PER conditioning using Phenylacetaldeyde (PHE) or Linalool (LIO) alternatively as rewarded (CS+) or non-rewarded (CS-) odors. Percentage of bees that extended the proboscis (% PER) during five pairs of trials (Training, left panels), and bees that responded during a testing period 15 min after training (Test, right panels). * Discrimination index (CS+-CS-) different from zero (Hypothesis testing, p<0.05). ** p<0.01, Fishers exact test. (Modified from Mc Cabe et.al., 2007) After verifying that they perform satisfactorily in this task, we evaluated the influence of prior food-odor experiences within the colony over their leaning performance. Previous exposure to scented sucrose solution inside the nest increased the learning performance compared to bees fed with unscented soAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
23
lution. Focusing on the recruitment behavior we trained bees to collect scented sucrose solution and then captured the recruits before contacting the solution at the feeder. In this way, any interaction with the food odor must have occurred inside the hive. Recruits were able to discriminate better than those recruited to unscented food. This implies that M. quadrifasciata bees are able to learn the association food - odor inside their colonies during social interactions with nestmates. Financially Supported by CONICET, ANPCYT, CAPES-SECYT
References
Arenas A, Fernndez VM and Farina WM (2007). Floral odor learning within the hive affects honeybees foraging decisions. Naturwissenschafften 94: 218-222. Bitterman ME, Menzel R, Fietz A and Schfer S (1983). Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera). J. Comp. Psychol. 97: 107-19. Farina WM, Grter C and Daz PC (2005). Social learning of floral odours inside the honeybee hive. Proc. R. Soc. B 272:1923-1928. Gerber B, Geberzahn N, Hellstern F, Klein J, Kowalksy O, Wstenberg D and Menzel R (1996). Honey bees transfer olfactory memories established during flower visits to a proboscis extension paradigm in the laboratory. Anim. Behav. 52: 1079-1085. Mc Cabe SI, Hartfelder K, Santana WC and Farina WM (2007). Odor discrimination in classical conditioning of proboscis extension in two stingless bee species in comparison to Africanized honeybees. J. Comp. Physiol. A 193: 1089-1099. Menzel R (1999). Memory dynamics in the honeybee. J. Comp. Physiol. A 185: 323-340. Takeda K (1961). Classical conditioned response in the honey bee. J. Insect. Physiol. 6: 168-179.
24
Olfactory Information Use and Guidance of Nestmates To Food in Stingless Bees

Stefan Jarau Institute for Experimental Ecology, University of Ulm, Albert-Einstein-Allee 11, 89081 Ulm, Germany E-mail: stefan.jarau@uni-ulm.de, Tel: +497315022665, Fax: +497315022683 Chemical compounds play an outstanding role in a vast number of communication systems of living organisms. The information carrying molecules, which are known as semiochemicals, have been classified into several groups depending on the identity of sender and receiver and on who benefits from the transmitted information (reviewed, e.g., in Wyatt, 2003). In short, intraspecific chemical signals are termed pheromones, which can release a specific behavior (releaser pheromones) or developmental process (primer pheromones) in its receiver, whereas semiochemicals acting between individuals belonging to different species are called allelochemicals. These can either benefit the receiver at the cost of the sender (kairomones), benefit the sender at the receivers cost (allomones), or benefit sender and receiver alike (synomones). In addition to pheromones and allelochemicals chemical cues substances not primarily emitted for the purpose of communication often can act as a source of information for animals. Social insects are one, if not the, example for organisms whose daily life heavily depends on chemical communication. For example, Wilson (1990) estimated that for the vast majority, or maybe all, species of social insects at least 90% of the communication is mediated principally by chemicals. During the food exploitation and recruitment process of the advanced eusocial stingless bees a variety of chemical cues and signals that inform the foragers and their recruited nestmates about the existence and/or the location of a particular resource indeed play a dominant role. Flower odours clinging to a bees body can serve as a source of information about the foods quality, and help the searching bees to find it in the field. In addition, odours incidentally left by foragers when sitting on a food source can either attract or repel other bees depending on their prior experience with that type of resource. Apart from such chemical cues true pheromone signals deposited by foragers of certain species as spots at and around a food source as well as along a certain distance from the feeding site towards the nest most effectively and accurately guide recruits towards the food find (Lindauer and Kerr, 1960). Figure 1. A forager of the stingless bee Trigona recursa deposits a trail pheromone mark on her way back from a food source towards her nest. The emitted volatiles are subsequently used
25
by recruited nestmates to orient towards the feeding site. The arrow points to the extended glossa of the bee, which is rubbed over the surface while the labial glands secretion containing the pheromone is released. (Photograph by Stefan Jarau) Whereas the importance of cues for stingless bee foraging behaviour and their chemical nature is only little explored, trail pheromones have received more attention by researchers. However, only recently have the glands that produce them as well as the chemical structure of some pheromone compounds unequivocally been elucidated for a few species. All compounds identified so far belong to the chemical class of esters and are secreted from the bees labial glands (Figure 1) (Jarau et al., 2004, 2006; Schorkopf et al., 2007; reviewed in Barth et al., 2008), which disproves the formerly prevailing mandibular gland paradigm. Experiments with both natural gland extracts and synthetic compounds have further revealed that the chemical composition of trail pheromones (relative proportions of single compounds) is nest specific in Trigona corvina, Scaptotrigona pectoralis (Dambacher and Jarau; Hemmeter and Jarau; unpublished data). The effect of the pheromones in releasing trail following behaviour is also nest specific in these two species, but there are interesting differences between them, which probably can be explained by the different foraging strategies and/or levels of aggressiveness of T. corvina and S. pectoralis. The demonstrated nest specificity may help to avoid competition for resources and, at least in the aggressive species, costly combats between foragers belonging to different colonies that can lead to considerable losses of workers in the involved colonies. Future research should focus on the possible role of nest specific trail pheromones for resource partitioning between neighbouring conspecific nests in natural habitats using species with different levels of aggressiveness to test this hypothesis.
References
Barth FG, Hrncir M and Jarau S (2008). Signals and cues in the recruitment behavior of stingless bees (Meliponini). J. Comp. Physiol. A 194: 313-327. Jarau S, Hrncir M, Zucchi R and Barth FG (2004). A stingless bee uses labial gland secretions for scent trail communication (Trigona recursa Smith 1863). J. Comp. Physiol. A 190: 233-239. Jarau S, Schulz CM, Hrncir M, Francke W, Zucchi R, Barth FG and Ayasse M (2006) Hexyl decanoate, the first trail pheromone compound identified in a stingless bee, Trigona recursa. J. Chem. Ecol. 32: 1555-1564. Lindauer M and Kerr WE (1960). Communication between the workers of stingless bees. Bee World 41: 29-41 and 65-71. Schorkopf DLP, Jarau S, Francke W, Twele R, Zucchi R, Hrncir M, Schmidt VM, Ayasse M and Barth FG (2007). Spitting out information: Trigona bees deposit saliva to signal resource locations. Proc. R. Soc. B 274: 895-898. Wilson EO (1990). Success and dominance in ecosystems: the case of the social insects. Ecology Institute, Oldendorf/Luhe. Wyatt TD (2003). Pheromones and animal behaviour. Communication by smell and taste. Cambridge University Press, Cambridge.
26
SI MPS IO 3
PATOLOGIA DE ABELHAS
Coordenadores: David De Jong, Dejair Message
27
Periodical Honey Bee Colony Losses in Germany: Results From a Four-Year Monitoring Project
Peter Rosenkranz & the Working Group of the German Apicultural Institutes (representative of the Working group of German Bee Institutes) Keywords: Colony losses, CCD, Monitoring, Bee Diseases, Varroa, Pesticides, Beekeeping Periodical losses of honey bee colonies are a well known and are reported over decades from different countries phenomenon (Wilson & Menapace 1979, Gnaedinger 1984). In temperate climates most colony collapses occur over winter. In tropical and subtropical climates, weakening and collapse of bee colonies can also be observed during the dry season. Some typical factors are suspected to be responsible for the weakening or dying of colonies: Bee diseases, insufficient nutrition (including lack of pollen sources), bad weather and pesticides. During the winter 2002/ 2003 both in Germany and in most other European countries more than a third of the bee colonies died. However, two aspects complicated the analysis of this disaster: First, the data based on reports from the beekeeper organizations and not on independent surveys. Second, we observed an extremely uneven distribution of the damages: Some beekeeper did not loose a colony at all, other lost 60 to 100%. Beekeeper in France (Bonmatin et al. 2005) and in Germany blamed the use of Neonicotinoides for the above average losses. This new generation of active ingredients (for instance Imidacloprid, Fipronil, Clothianidin) is widely used as insecticides in plant protection particularly for the dressing of seed in sunflower, maize and oils seed rape. Most Neonicotinoides are poisoning to bees, even in extremely low concentrations. Therefore, representatives of the professional beekeeper organizations are afraid that traces of residues in pollen or nectar may cause death or weakening of bees and brood. Unfortunately, a clear scientific explanation for the periodical colony losses was lacking and the discussion about the reasons for the Bienensterben became more and more emotional, speculative and political. The CCD discussion at the United States enforced this discussion (Johnston 2007, Van Engelsdorp et al. 2007). Therefore, we decided to establish a long-term monitoring project in order (i) to collect exact and independent data on colony losses and (ii) to collect continuously colony data over several years. Therefore, in the case of extraordinarily colony losses we should be able to analyze retrospective certain factors of the dead colonies.
Structure of the Monitoring Project

A project board was established including the German Ministry of Agriculture, 9 German Apicultural institutes, the beekeeper organizations, the farmer organizations and three companies of the plant protection industry. The latter participated in financing the project however, without enjoying any privilege on methods, data and interpretation of results. One meeting of the project board and a yearly report published in the Net are obligatory. For the project we established cooperation with 125 beekeepers with more than 7.000 colonies distributed all over the country (Fig 1). Problematic
28
agricultural crops like maize and rape are sufficiently represented around the apiaries. All together, more than 7,000 colonies are kept by the beekeepers. Ten colonies of each beekeeper are used for detailed data sampling.
Data Record
The statistics of colony losses and management details like movement of colonies, swarming, honey yields, treatments etc. are recorded by the beekeeper. All monitoring beekeepers are supervised by scientists from the institutes. Four times a year, the each beekeeper is visited for exchange of experience and taking samples of honey, bee bred (collected pollen) and bees. These samples are analyzed at the laboratories of the institutes for: - Pollen analysis in order to specify the foraging activities - Residue analysis of bee bred: a multi method based on HPLC-MS-MS was developed to analyze about 560 active ingredients with detection limits between 1 5 (10) ppb (g per kg). - Honey bee diseases: . two times a year, Varroa infestation before winter, tracheal mites, American foulbrood (AFB), 4 honey bee viruses before winter (DWV, APV, SBV, KBV). We developed a special data base system where all data can be registered online by the responsible scientists of each bee institute.
29
Statistical Analysis
Two factors were used for statistical analysis: colony mortality over winter (yes or no) and quality of overwintering. For the latter, the colonies were classified in 5 groups according to the difference in colony strength before and after winter. Based on the nominal scaling of the colony mortality, a non-parametric Mann-Whitney-U-Test was used to compare certain factors in survived and collapsed colonies, respectively. Homogeneity of data was confirmed by Chi-Square-tests and a Bonferroni-Fisher correction was used for the significance values.
Results and Discussion

The colony winter mortality within the monitoring beekeeper ranged, on average, from 7 to 13% (Fig 2). This represents the normal and by the beekeepers accepted loss of colonies over winter. The somewhat higher loss in the second year may be caused by the extreme cold weather with about 3 month of continuous frost. However, the losses calculated from surveys (between 2,000 and 4,000 beekeepers) indicated significant higher losses (14 26%, Fig 2). Obviously, our monitoring beekeepers do reflect a positive selection rather than the standard beekeeper. Some individual monitoring beekeepers complained exceptional losses; most of them could be explained by the lack of treatment in late summer. This is also supported by the experience during last winter. The higher losses during the winter 2007/ 2008 are related to extraordinary high infestation levels which have already been detected within the project during the summer 2007. Although we recommended an intensive treatment against Varroosis by time, many of the standard beekeepers did not perform this treatment consequently.
30
The honey yields during the seasons of the years 2005 2007 were good and above average indicating that the colonies were in a good shape during these periods: Year 2005 2006 2007 No of Apiaries 110 112 106 Average Honey Yield per Colony [kg] 39.5 49.0 42.8
In the bee bred from 105 colonies in spring 2005 and 2006 we could detect 42 active ingredients, most of them in traces near the detection limit. Most abundant were Coumaphos (acaricide), fungicides and herbicides detectable in more than 30 samples each. Insecticides were analyzed only in few cases, most abundant were Thiaclopride which is used in flowering rape as a non bee toxic compound. Neonicotinoides (Imidaclopride, Fipronil, Clothianidine) were not found with 1ppp detection limit. For Imidaclopride in rape (Gaucho) an additional experiment were performed in 2004 revealing no detectable levels of residues in flowers and nectar. In two samples of bee bred (n=48), residues of 1ppb were measured. The analysis of honey bee diseases did not reveal tracheal mites at all and only in less than 10% of the samples low levels of AFB spores (no clinical symptoms). Infestations with were found in 17% (year 2007) to 45% (year 2006) of the samples. Most infestations were at low or middle level without clinical symptoms: Spring 2005 Spring 2006 Spring 2007 No infestation 67 55 83 Low infestation 13 24 10 Middle infestation 12 13 5 Strong infestation 8 8 3
The average Varroa infestation levels of adult bees at the beginning of the winter (most colonies were brood-free at that time) were about 5% in all years. However, at single apiaries or in individual colonies infestation levels of 10% and more could be measured. Such apiaries and colonies, respectively, had clearly exceeded the damage threshold. The levels of Virus infestations varied according to Virus, year and region (Fig 3) with abundances from 6% to 18% in all Viruses except Kashmir Bee Virus (KBV). It should be mentioned that only the heads of the bees were used for PCR analysis. This results in lower abundances than whole body analysis but reflects better the clinical situation within the colony. Correlation analysis: In total, 3.198 data sets were used for the analysis. We could not detect any correlation between the locations of the apiaries (i.e. the presence of certain crops) and mortality during winter or quality of overwintering (p>0.1). The correlation coefficients were: Oil seed rape: r = 0.173 (2005) / 0,005 (2006) Maize: r = 0.063(2005 2007) Sunflower: r = 0.324(2005 2007) Also the infestation did not show any correlation with colony losses. It should be mentioned
31
that in the year 2007 we already had more than . In the positive 2008 samples, we only detected so far. It seems that currently in Europe is replaced by the (Higes et al. 2006). Colony losses are highly significant correlated with the infestation level of adult bees before winter and the presence of Deformed Wing Virus (DWV) in autumn. The infestation with Acute Bee Paralysis Virus (ABPV) is just not significant due to the Bonferoni correction. Surprisingly, also the age of the queen has a significant effect on the risk of colony loss (one year old queens are better than older ones). Parameter Varroa/ Bee in Oct. ABPV DWV SBV Age of the Queen Colony Strength in October n Average SE p 0,00001* 0,0418 0,00115* 0,4996 0,000001* 0,000001*
Survived: 2246 2,9 0,1 (5,9) Dead: 240 14,0 1,1 (17,0) Survived: 691 Dead: 68 Survived: 692 Dead: 68 Survived: 692 Dead: 68 Survived: 2687 0,41 0,57 Dead: 244 0,64 0,61 Survived: 2827 12,3 5,1 Dead: 276 10,8 5,2
32
As the level of Varroa infestation itself is significantly correlated with the abundance of DWV (Yue et al. 2007), the Varroa infestation in autumn is the most striking and probably crucial factor for the mortality of honey bee colonies during winter. The abundance of DWV and the colony strength in October are also influenced by the level of Varroa infestation (Yue et al. 2007) and may, therefore, only reflect secondary symptoms of damages due to Varroosis.
Concluding Remarks
Our monitoring project is worldwide unique. An important point is that we only use colonies and data from beekeepers. Therefore, we really reflect the situation in the field and not the results of special experimental designs. From the experience of the first 4 years we can state the following: - The amount of work has been underestimated, especially for coordination, organization and control of the data base. Depending on the number of monitoring beekeeper, a 50% position is covered exclusively with monitoring activities. - Also the financing of the project was underestimated. About 750,000 per year would be necessary to cover the full costs. - The cooperation with the beekeeper worked and works pretty well. Three are only very few cases of beekeeper who abandoned the cooperation, most of them because of personal reasons. This is important for the interpretation of results with the beekeeper organization and with politicians. - Through the project we have hard data on colony mortality at our disposal. This reduces speculations on the extinction of honey bees. - Especially the results of our residue analysis facilitate an objective and constructive discussion on the reasons for colony losses. - We could clearly show that winter mortality is not directly correlated with environmental factors an. Also the emotionally discussed seed dressing by Imidacloprid did not create significant residues not did we see any effect on honey bee colonies in the field. However, the current case of damage and dying of about 12,000 honey bee colonies in the Rhine valley through the drift of Clothianidin from badly dressed maize seed demonstrates that there remains a risk through insecticides which are extremely toxic to bees. - Honey bee colonies rather succumb to a permanent pressure through Varroosis. Even small inattentiveness during treatment will increase the risk of colony damages. This was also supported by checking the treatment methods in the apiaries of our beekeepers. - However, our monitoring project can not finally answer the question whether sublethal or synergistic effects of several factors (including plant protection) cause a weakening of bees and a dwindling (Bortolotti et al. 2003, Bonmatin et al. 2005) of bee colonies during the season. To clarify this, more detailed projects with specific data collections are necessary. - However, our monitoring project is a crucial tool to detect future problems of honey bee health and represents an important basis for a constructive dialogue with beekeepers and farmers organizations.
References
Bonmatin JM, Moineau L, Charvet R, Colin ME, Fleche C, Bengsch ER (2005). Behaviour of imidacloprid in fields. Toxicity for honey bees. In: Environmental Chemistry, Green hemistry and Pollutants in Ecosystems. Lichtfouse R, Schwarzbauerm J and Robert D (eds), Springer, New York, Pp. 483-494.
33
Bortolotti LR, Montanari J, Marcelino P, Medrzycki S, Maini A, Porrini C (2003). Effects of sublethal imidacloprid doses on the homing rate and foraging activity of honey bees. Bulletin of Insectology 56:63-67. Gnaedinger F (1984). Winter losses of bee colonies at the region of Baden (South Germany). , 297-299 (in German). Higes M, Martin R, Meana A (2006). , a new microsporidian parasite in honeybees in Europe. 92:93-95. Johnson R. (2007). Recent Honey Bee Colony Declines; Updated August 14, 2007; Order Code RL33938 http://www.fas.org/sgp/crs/misc/RL33938.pdf Van Engelsdorp D, Cox Foster D, Frazier M, Ostiguy N, Hayes J (2007). Fall dwindle disease: Investigations into the causes of sudden and alarming colony losses experienced by beekeepers in the fall of 2006. Preliminary report: First revision. http://maarec.cas.psu.edu/pressReleases/FallDwindleUpdate0107.pdf Yue C, Schroeder M, Gisder S, Genersch E (2007). Vertical transmission routes for deformed wing virus (DWV) of honey bees. . 88, 2329-2336. Wilson WT, Menapace DM. (1979). Disappearing disease of honey bees: a survey of the United States. 119:Part I:118-119, Part II:184-186, 217.
34
Metagenomic Analysis of Microorganisms in Honey Bees From Brazil

Erica Weinstein Teixeiraa, Dejair Messageb, Yanping Chenc, Jeffery Pettisc and Jay D. Evansc
a
(Running title: Brazilian bee pathogens)
Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios, SAA-SP, Av. Prof. Manoel Cesar Ribeiro, 1920. CP: 07, 12400-970 Pindamonhangaba, So Paulo, Brazil. b Universidade Federal de Viosa, Departamento de Biologia Animal, Viosa, Minas Gerais, Brazil. c USDA-ARS Bee Research Laboratory, Beltsville, MD, USA.
Abstract
Alternative approaches including metagenomic and genetic screening can be extremely useful and can accelerate important discoveries related with a current phenomenon that is affecting honey bees around the world (characterized by the depopulation or sudden losses of hives). To determine possible causes for the decline in honey bee colonies from southeastern Brazil, and in particular to test the likelihoods of specific predicted causative agent(s) for this condition, a diverse set of analyses was proposed. These analyses form part of a more extensive Epidemiological Evaluation Program for bees in southeastern Brazil. Here we present an overview about part of this Program. Three viruses were identified (Acute bee paralysis virus - ABPV, Black queen cell virus - BQCV, and Deformed wing virus - DWV) in 1,920 analyzed bees, and a multiplex RT-PCR assay was developed and validated. Although strategy adopted to analyze data in details is still being evaluated and prepared by the authors, the first results indicated that ca. 26 % of the samples carried Israeli Acute Paralysis Virus (IAPV), and some isolates for this virus were found. Nosema ceranae, Melissococus pluton, Leptomonas apis, and Spiroplasma apis were also detected. Pathological, epidemiological, and widespread studies remain to be conducted once no single pathogen seems overly predominant in declining bee colonies. Key words: Africanized honey bees; pathogens; RT-PCR; real-time RT-PCR; colony collapse disorder.
Introduction
In a strict sense metagenomic surveys provide data for understanding the genetic components of entire ecological communities. Recently, metagenomic efforts have focused on describing the microbial components of ecosystems ranging from the open ocean, to the human digestive tract. In the last few years this cultivation-independent approach has produced many exciting discoveries, and especially the identification of many organisms that are either new to science or not previously associated with a given ecosystem or biological sample. The feasibility and applicability of modern molecular techniques in identifying organisms is evident and such techniques are being used widely. A current phenomenon that is affecting honey bees around the world, characterized by the depopulation or sudden losses of hives, remains without
35
a recognizable underlying cause, despite much effort using many analytic strategies. As such, alternative approaches including metagenomic and genetic screening, can be extremely useful and can accelerate important discoveries. Honey bees, like other organisms, face disease agents including viruses, bacteria, fungi, protozoa, parasitic mites and nematodes (Bailey and Ball, 1991; Ellis and Munn, 2005). One factor in the success of Africanized honey bees (AHBs, hybrid resulted from crosses between European and African honey bee subspecies) across the Americas seems to be higher levels of resistance toward mites and other pathogens (Aumeier, 2001; Guzmn-Novoa et al., 1999; Mondragn et al., 2005; Moretto and Mello Jr., 1999; Moretto and Mello Jr., 2001; Rosenkranz, 1999; Vandame et al., 2002). Nevertheless, in the last five years, decreased worker bee populations can be observed in some areas of southeastern Brazil. These losses tend to occur between March and July, and have in some cases been correlated with specific brood symptoms and, sometimes, few dead adult bees in front of the colony. Nevertheless, the defining trait observed by beekeepers is simply the occurrence of significant and unexpected production losses. Consequently, in Brazil terms like depopulation or decline best describe the observed problem. This contrasts somewhat with Colony Collapse Disorder (CCD), a recent phenomenon observed in the USA, and defined by: sudden loss of the colonys adult population with very few bees found near the dead colonies; several frames with capped brood indicating that colonies were relatively strong shortly before the loss of adult bees; food reserves that have not been robbed, despite living colonies in the area, suggesting avoidance of the dead colony by other bees; minimal evidence of wax moth or small hive beetle damage; a laying queen often present with a small, 100-bees, cluster of young attendants (Pettis, 2007). To determine possible causes for the decline in honey bee colonies from Brazil, and in particular to test the likelihoods of specific predicted causative agent(s) for this condition, a diverse set of analyses was proposed. These analyses form part of a more extensive Epidemiological Evaluation Program for bees in southeastern Brazil. All analyses converged to the same purpose: to evaluate the prevalence of various parasites and pathogens of brood and adults bees, or other causes (like pesticides and toxic nectar and pollen), which could be involved directly or indirectly in such losses. Based on the obtained results, the intention is to develop control methods without the use of chemotherapy, to make sure that the apicultural products in Brazil will remain viable productive without drugs. Here we present an overview about part of this Program that is being addressed in collaboration among Brazilian and American scientists from USDA, Beltsville, USA. Initially, and considering the fact that viruses have emerged as one of several candidates for these losses, we developed a study termed Virus infections in Brazilian honey bees. In this study different viruses were detected and a multiplex RT-PCR assay was validated (Teixeira et al., 2008). After that, searching for similarities between the problem that is happening in the USA (CCD) and the problem that is severely impacting beekeepers in southeastern Brazil we evaluated the presence of Israeli Acute Paralysis Virus (IAPV) in those samples, since IAPV was detected in 83% CCD-affected honey bee colonies in the USA, and could be involved in such phenom enon maybe like a good marker for that (Cox-Foster et al., 2007). Additionally, the presence of others microorganisms was evaluated ( Nosema apis, Nosema ceranae, Paenibacillus larvae, Melissococus pluton , Spiroplasma apis and Leptomonas apis ), and lastly, applying knowledge about honey bee immune gene expression, we evaluated genes related to antimicrobial, melanization and recognition processes, as well.
36
Material and methods

Africanized adult honey bees were sampled from 200 colonies from 10 apiaries (20 colonies/apiary and 20 bees/colony) located in a representative area (Altinpolis, So Paulo, Brazil) where the abnormality has been observed in the last five years, during the autumn time in 2007. Prior to shipment to the United States, to avoid RNA degradation all samples were grounded in RNAlater Tissue Collection (RNA stabilization solution, Ambion). After shipment time (~3 days) at room temperature all samples were stored at -800 C. RNA isolation, cDNA synthesis, primers designed, amplicon sizes, amplification conditions, sequences, and other details related with virus identification and multiplex RT-PCR assay are described in Teixeira et al. (2008). Nucleotide sequences of the amplified products were determined and confirmed to be the expected species using BLAST at the US-NIH National Center for Biotechnology Information (www.ncbi.nlm.nih.gov). In order to address if IAPV nucleic acid was present, PCR primers were the same used in Chen and Evans (2007; IAPV-F1a: GCGGAGAATATAAGGCTCAG, IAPV-R1: CTTGCAAGATAAGAAAGGGGG). Strategy adopted to analyze data in details is still being evaluated and prepared by the cooperative group (Teixeira et al., unpublished data). RT-PCR assays were conducted for five additional pathogens (the bacteria Melissococcus pluton and Paenibacillus larvae, the microsporidian Nosema apis and Nosema ceranae, the trypanosoma Leptomonas apis, and Spiroplasma apis). DNA extraction was performed using 5 L of the supernatant from each collection above in 100 L of a 5% Chelex-100 (Bio-Rad). The solution was incubated at 950C for five minutes, performing a total of 192 compound samples, randomly sorted in two 96-well plates. The DNA concentrations and purity were evaluated by Thermo Scientific NanoDropTM. Oligonucleotide primer pairs previous designed were used to amplify nucleic acid of two Nosema species (Chen et al., 2008), Paenibacillus larvae (PLS18, Evans, 2006; F: 5-TTCACGGCTAACAAAATTAAACA-3, R: 5-TTCGCAGAAGTTCCGGTTAC-3), Melissococcus pluton (F 5-ACGCCTTAGAGATAAGGTTTC-3 R 5-GCTTAGCCTCGCGGTCTTGCGTC-3), and Spiroplasma apis (F: 5-cttttagtttgacggtaccttaccag-3, R: 5-aaccgcctacgcaccctat-3). For Leptomonas apis we designed a primer pair (TrypITS1 F: 5-GTCGTTGTTTCCGATGATGG-3, TrypITS1 R: 5-CCGTTTGCGTTCAAAGATTC-3) to generate a 120 bp product, based on a partial rRNA sequence generated in our initial screening (Genbank accession pending). PCR reaction mixture of 25 L consisted of a primer concentration of 0.2 M each, 1 U Taq with proscribed 1 buffer (Roche Applied Sciences), a final concentrations of 1 mM dNTP mix and 2 L of DNA template (~ 45.85 ng/ L). Reactions were carried out with a thermal protocol consisting of 960 C for 2 min., then 3 cycles of 960 C for 30 sec., 600 C for 30 sec. (-10C/Cycle), 650 C for 1 min., followed by 35 cycles of 960 C for 30 sec., 560 C for 30 sec., 650 C for 1 min, and a final extension at 650 C for 2 min. Positive and negative controls were included. PCR products were visualized on a 1.7% (w/v) agarose gel containing ethidium bromide. Nucleotide sequences of the amplified products were determined and confirmed to be the expected species using BLAST at the National Center for Biotechnology Information (NCBI). Conditions described by Evans (2006) were adopted as to develop real-time RT-PCR like an initial diagnosis for viruses (except for IAPV), as to develop a quantitative-PCR array to measure transcript levels for 192 compound samples of 10 bees each and a set of four honey bee immunegenes selected validated previously (Evans, 2006). The four-set genes included in this study comprises different categories of gene function in bees: immune end product abaecin F (5- CAGCATTCGCATACGTACCA - 3) R (5- GACAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
37
CAGGAAACGTTGGAAAC - 3), and hymenopt F (5 - CTCTTCTGTGCCGTTGCATA - 3) R (5- GCGTCTCCTGTAATTCCATT - 3); pathogen recognition Bgluc2 F (5-TTCTTTTCATGACGAATTGTTTT- 3) R (5-CCGTTCGAATGTGGTGAAC - 3; CyP4G11 F (5-CAAAATGGTGTTCTCCTTACCG- 3) R (5-ATGGCAACCCATCACTGC- 3). As in Evans and Pettis (2005), threshold cycle (Ct) numbers for the immune-peptide gene abaecin were subtracted from the RPS5 threshold used like honey bee control (housekeeping gene) to normalize data for each sample prior to statistical analyses (RPS5 F: 5- AATTATTTGGTCGCTGGAATTG-3, R: 5-TAACGTCCAGCAGAATGTGGTA-3). Bee samples, RNA extraction and cDNA synthesis were the same as used in Teixeira et al. (2008). Transcript levels were quantified for acute bee paralysis virus (ABPV), black queen cell virus (BQCV), deformed wing virus (DWV), N. apis, and N. ceranae. To confirm the apparently low levels or absence of N. apis, we also screened for N. apis using PCR and a gel-based assay as described in Chen et al., 2008. Statistical analysis was performed using the SAS JMP software package. We carried out analyses of variance using the CT values as dependent variables since these showed a more normalized distribution that did the transformed (biological) variables.
Results
While screening for the six more common viruses in adult honey bees from Brazil (Acute bee paralysis virus - ABPV, Black queen cell virus - BQCV, Deformed wing virus - DWV, Chronic bee paralysis virus - CBPV, Kashmir bee virus - KBV, and Sacbrood virus SBV), nucleic acid only of the three first viruses were identified (ABPV, BQCV, and DWV) in 1,920 analyzed bees (Teixeira et al., 2008). In order to detect simultaneously these three target viruses (ABPV, BQCV, and DWV) the authors developed and validated a multiplex RT-PCR assay, which generated unique amplicon sizes of 700 bp, 500 bp and 129 bp., respectively. Products of the expected size and sequence were obtained (Genbank accession numbers EU292210, EU292211 and EU292212 for ABPV, BQCV, and DWV, respectively). In relation to the prevalence of the virus, 52, 71 and 39 samples were positive for ABPV, BQCV, and DWV, respectively. Forty three samples were co-infected colonies 15 with ABPV and DWV, 19 with BQCV and DWV, and 21 with ABPV and BQCV, and among them only 6 with all of three viruses. Among adult bee samples analyzed from brood area, our first results indicated that ca. 26% carried IAPV. Transcript abundances of immune-response genes in honey bees in relation to Nosema ceranae, N. apis, ABPV, BQCV, and DWV are shown in the Figure 1. The colors, ranging from green to red, corresponding to relatively low levels to high levels of expression, while dark ray cells represent moderate expression levels. N. apis was essentially absent from our analyses (green cells). There is not a strong trend in terms of immune-gene expression in samples collected from declining versus healthy colonies. Correlations between the Ct values of pathogens were low (from -0.005 to 0.19), although significant (P< 0,05) in some cases (ABPVxBQCV, ABPVxDWV, Leptomonas apisxABPV, and Nosema ceranaexDWV). These few cases may indicate synergistic impacts of pathogen species. In RT-PCR gel assays, no samples were positive for either N. apis or P. larvae. Only two samples were infected with M. pluton. Leptomonas apis nucleic acid was present in 36/94 samples that were screened and sequenced. Spiroplasma apis was detected in 68 samples, but these primers co-amplified other 18S sequences, and so need further analysis. Correlations between the Ct values of pathogens are shown in Table 1.
38
Figure 1. Array diagram showing expression patterns of honey bee immune genes and pathogens in relation to sample disease status (S = sick, H = healthy), and collection site (I = inside bees, O = outside bees) for colonies collected in 10 apiaries (as in Teixeira et al., unpublished data). Genes surveyed (vertical names) are the honey bee genes Abaecin, cytochrome P450, hymenoptaecin, and B-glucan recognition protein and bee pathogens Nosema apis, Deformed wing virus, N. ceranae, trypanosome, Black queen cell virus and Acute bee paralysis virus. Table 1. Correlation matrix of the Ct values of the pathogens ABPV BQCV DWV N. ceranae * P< 0.05 BQCV 0.146* -- -- -- DWV 0.189* 0.072 -- -- N. ceranae 0.035 -0.041 0.002 -- Leptomonas apis -0.160* 0.097 -0.005 0.118
Discussion
Three different bee viruses, ABPV, BQCV and DWV, were described during a screening of RNAs from 1,920 individual adult bees from Brazil and a multiplex RT-PCR assay was developed and standardized for these target viruses, validated to be precise and sensitive (Teixeira et al., 2008). The authors demonstrated in this first published assay using molecular techniques in Brazilian bees that viruses are considerably less prevalent compared to elsewhere, including when compared with a previous South American evaluation from Uruguay (Antnez et al., 2006). Previously, Message et al. (1996), using double-immune diffusion, detected the presence of APV (=ABPV), BQCV, FV (Filamentous Virus), and CWV (Cloud Wing Virus) in Brazil, but not DWV, CBPV, KBV, and SBV. Although our IAPV data set is still under evaluation, we found at least several isolates for this virus that are distinct from other discistroviruses. We could observe that IAPV from Brazil seems to be different in average 2.18 % (by 1.54 % - 3.11 %) from isolates from Israel (Maori et al., 2007) and differs on average 2.44 % (by 0 % - 4.94 %) from isolates in the U.S. (Chen and Evans, 2007). Additionally we found an interesting diversity among Brazilian samples (by 0 % to 4.23 %, and 1.8 % in average), considering the total alignment length of 462 base pairs. Leptomonas apis, a trypanosome parasite of bees, was the microorganism most frequently found in all analyzed adult bee samples. This species appears not to be strongly tied to disease, either by presence/absence tests or
39
quantitative PCR (Figure 1). It is important consider that all insect species are known to harbor a rich and complex community of microorganisms in their guts and other body regions. This microbiota participates in many types of interactions ranging from pathogenesis to obligate mutualism (Dillon and Dillon, 2004; Dharne et al., 2006). It is interesting to mention that part of the symptoms described by beekeepers and scientists for CCD are observed in Brazil when the honey bees collect pollen from Stryphnodendron spp. In this case strong colonies abandon their hives in a few days leaving strong amounts of brood with Brazilian Sac Brood-like disease and food reserves. Normally the strongest colonies are more affected because necessity of pollen is higher. On the other hand some of these symptoms are quite different of CCD because strong brood mortality is observed. The larvae fail to pupate and remain stretched on their backs, with their heads towards; fluid accumulates between the body of the diseased larvae and its unshed skin (Carvalho & Message, 2004). Such observation permit us wonder about possible involvement of toxic nectar or pollen in the actual abnormality.
Conclusion
While the results presented here confirm the presence of diverse microorganisms carried by AHB samples from Brazil, pathological, epidemiological, and widespread studies remain to be conducted. In addition, no single pathogen seems overly predominant in declining bee colonies. Acknowledgements We thank David De Jong for sample help and Dawn Lopez for laboratory assistance. This work was supported by CNPq, Brazil (EW), and by USDA-NRI grants AG2004-36504-14277 (JDE).
References
Antnez K, DAlessandro B, Corbella E, Ramallo G, Zunino P (2006). Honeybee viruses in Uruguay. J. Invertebr. Pathol. 93: 67-70. Aumeier P (2001). Bioassay for grooming effectiveness towards Varroa destructor mites in Africanized and Carniolan honey bees. Apidologie 32: 81-90. Bailey L, Ball BV (1991). Honey Bee Pathology. 2nd Ed. Academic press, London. Carvalho ACP and Message D (2004). A scientific note on the toxic pollen of Stryphnodendron polyphyllum (FFbaceae, Mimosoideae) which causes sacbrood-like symptoms. Apidologie. 35: 89-90. Chen Y, Evans JD (2007). Historical presence of Israel Acute Paralysis Virus in the United States. Am. Bee J. 147 (12): 1027-1028. Chen Y, Evans JD, Smith, IB, Pettis JS (2008). Nosema ceranae is a long-present and wide spread microsporidian infection of the European honey bee (Apis mellifera) in the United States. J. Invertebr. Pathol. 97: 186-188. Cox-Foster DL, Conlan S, Holmes EC, Palacios G et al. (2007). A metagenomic survey of microbes in honey bee colony collapse disorder. Science 318: 283-287. Dharne M, Patole M, Shouche YS (2006). Microbiology of the insect gut: tales from mosquitoes and bees. J. Biosci. 31 (3): 293-295. Dillon RJ and Dillon VM (2004). The gut bacteria of insects: nonpathogenic interactions. Annu. Rev. Entomol. 49: 71-92.
40
Ellis JD and Munn PA (2005). The worldwide health status of honey bees. Bee World. 86: 88-101. Evans JD (2006). Beepath: An ordered quantitative-PCR array for exploring honey bee immunity and disease. J. Invertebr. Pathol. 93: 135-139. Evans JD and Pettis J (2005). Colony-level impacts of immune responsiveness in honey bees, Apis mellifera. Evolution 59: 2270-2274. Guzmn-Novoa E, Vandame R, Arechavaleta ME (1999). Susceptibility of European and Africanized honey bees (Apis mellifera L.) to Varroa Jacobsoni Oud. in Mexico. Apidologie 30: 173-182. Maori E, Lavi S, Mozes-Koch R, Gantman Y, Peretz Y, Edelbaum O, Tanne E, Sela I (2007). Isolation and characterization of Israeli acute paralysis virus, a dicistrovirus affecting honeybees in Israel: evidence for diversity due to intra- and inter- species recombination. J. Gen. Virol. 88: 3428 - 3438. Message D, Ball B V, Allen M (1996). Ocorrncia de viroses em abelhas no Brasil e na Argentina. In: Anais dos Congressos, Seminrios e Encontros Brasileiros de Apicultura. CD (Coordenador: Aroni Sattler, UFRGS). 11 Congresso Brasileiro de Apicultura. Painel (Portuguese). Mondragn L, Vandame R, Spivak M (2005). A multifactorial study of the resistance of honeybees Apis mellifera to the mite Varroa destructor over one year in Mexico. Apidologie 36: 345-358. Moretto G, Mello Jr LJ (1999). Varroa jacobsoni infestation of adult Africanized and Italian honey bees (Apis mellifera) in mixed colonies in Brazil. Genet. Mol. Biol. 22,: 321-323. Moretto G, Mello Jr LJ, (2001). Infestation and distribution of the mite Varroa jacobsoni in Africanized honey bee (Apis mellifera) colonies. Interciencia 26: 394-396. Pettis, J. (2007). Honey Bee Colony Collapse Disorder in the United States. Ann. 9th International Pollination Symposium on Plant-Pollinator Relationships Diversity in Action. Ames, Iowa, U.S. June 24-28. 206 pp. Rosenkranz P (1999). Honey bee (Apis mellifera L.) tolerance to Varroa jacobsoni Oud. in South America. Apidologie 30: 159-172. Teixeira EW, Chen Y, Message D, Pettis J and Evans JD (2008). Virus infections in Brazilian honey bees. J. Invertebr. Pathol. In press (DOI: 10.1016/j.jip.2008.03.014). Vandame R, Morand S, Colin M-E, Belzunces LP (2002). Parasitism in the social bee Apis mellifera: Quantifying costs and benefits of behavioral resistance to Varroa destructor mites. Apidologie 33: 433-445.
41
Efeitos Provocados por Agrotxicos em Abelhas no Brasil.

Osmar Malaspina, Tiago Favaro de Souza, Elaine Cristina M. da Silva Zacarin, Aline da Silva Cruz e Daiane de Jesus. *Centro de Estudos de Insetos Sociais e Depto de Biologia, Instituto de Biocincias, Unesp, Rio Claro, SP. email: malaspin@rc.unesp.br
Abstract
Irrational use of insecticides in agroecosystems may provoke the unbalance on bees population, causing the disappearance of several species in fields of crops and concerning many researchers around the world. Most of the scientific papers only mention the effects of acute toxicity to bees and the effects of sub lethal doses of insecticides are little studied, mainly in Brazil. These studies are important, because pollinators have great economic value in agriculture, primarily for the conservation of plant species and allow the reduction of negative effects on apiculture industry. The purpose of this research was to analyze the assess the presence of insecticides in samples of dead bees, sent from crops from So Paulo state and morphological changes in bees Apis mellifera after application of insecticides. Two analytical methods were used to detect residues of groups of pesticides in the bees and in the honey: technique of gas chromatography (GC / MS) and technique in a liquid phase chromatography (LC / MS). The results showed no pesticide residues within the limits of detection setted (0.01 mg / kg). Already the technique of chromatography liquid phase was done only for the group of neonicotinoids, the results identicated wastes of insecticides above the permitted limit (0.01 mg / kg) for samples of bees collected in Boa Esperana do Sul. Although the morphology of the brain has not presented any apparent structural change, the morphological analysis of the ventricles of larvae and workers suggest a significant change in cell tissues, after application of fipronil. Palavras-chave: abelhas, mortalidade, intoxicao, morfologia, fipronil.
Introduo
Os agentes polinizadores e a reproduo vegetal proporcionada por sua ao so elementos cruciais no funcionamento de quase todos os ecossistemas terrestres, incluindo aqueles dominados pela agricultura (KEVAN, 1999). No entanto, o uso irracional de inseticidas nos agroecossistemas pode ocasionar o desequilbrio da populao de abelhas que visitam estes locais. O consumo anual de agrotxicos no Brasil superior a 300 mil toneladas de produtos formulados. Expresso em ingredientes ativos, isto representa mais de 130 mil toneladas de consumo anual destes produtos qumicos no pas. Nos ltimos quarentas anos, o consumo de agrotxicos aumentou 700%, enquanto a rea agrcola aumentos apenas 78% (Spadotto et. al., 2004). Estes dados mostram a situao alarmante da agricultura, o que pode acarretar em srios danos ao meio ambiente.
42
Essa cultura pode ser uma das possveis causas do desaparecimento de vrias espcies de abelhas dos campos de cultivo, e isso vem preocupando muitos pesquisadores no mundo todo, o que pode ser demonstrado pela publicao de artigos na Europa (OSBORNE et al. 1991; WILLIANS, 1988; PORRINI et al., 2002; CELLI e MACCAGNANI, 2003), Estados Unidos (BATRA, 1995; MAYER, LUNDEM, 1999), Amrica Central (ROUBIK, 1978) e na Amrica do Sul (AIZEN, FEISINGER, 1994; MORAES et al., 2000, MALASPINA, SILVA-ZACARIN, 2006). Recentemente, Fletcher e Barnett (2003) realizaram um levantamento sobre os freqentes acidentes de envenenamento de abelhas com pesticidas nos apirios do Reino Unido. O trabalho foi feito em conjunto com apicultores e agricultores e os principais componentes encontrados em amostras de abelhas mortas foram organofosforados (42%) e carbamatos (29%). Os acidentes foram provocados pelo uso incorreto na aplicao de inseticida (32%) e principalmente pelo uso de inseticidas proibidos ou no-especificados (48%). Em 2002, nos apirios franceses, foram realizados monitoramentos em colnias de abelhas Apis mellifera. Os estudos foram realizados em cinco apirios, distribudos ao acaso. Para cada apirio, cinco colnias de abelhas receberam coletores de plen, que foram visitados quatro vezes por ano. Nessas visitas, o plen coletado foi enviado para analises residuais, onde foram encontrados 19 compostos de elevada toxicidade para as abelhas, entre estes foram citados, fipronil, imidaclopride, cipermetrina, aldicarb, lindane, deltametrina, endosufan, dimetoato e outros (Chauzat et al., 2006). Alm dos efeitos de toxicidade aguda levando a morte das abelhas, os inseticidas podem tambm provocar alteraes comportamentais nos indivduos, que ao longo do tempo acarretar srios prejuzos na manuteno da colnia. Segundo para Medrzychi et al. (2003), em algumas circunstncias, o efeito de inseticidas nas abelhas no imediatamente notado, sendo necessrias avaliaes das doses subletais de seus princpios ativos para que seja possvel observar sua influncia na sobrevivncia e comportamento destas. Uma das hipteses para este fato foi sugerida por Bortolotti et al. (2003), estudando os efeitos das doses subletais de imidaclopride sobre as abelhas, verificou que estes inseticidas atuam sobre o as atividades de comportamento de forrageamento, alterando-as e dificultando o seu retorno colnia na provncia de Bologna, Itlia. Decourtye et al. (2003) verificou reduo da movimentao, da mobilidade e diminuio da capacidade de comunicao das abelhas, interferindo em suas atividades sociais e dificultando retorno colnia logo aps as coletas, quando submetidas a doses subletais do inseticida Gacho, cujo princpio ativo o imidaclopride. Decourtye et al. (2004, 2005) tambm verificaram que as abelhas tratadas com doses subletais de inseticidas imidaclopride, fipronil e deltametrina, apresentam alteraes no desempenho de aprendizado e memria durante o processo de forrageamento. O fipronil, conhecido comercialmente como Regent, um inseticida fenilpirazlico introduzido no controle de pragas, mas que afeta outros insetos no-alvo, causando a sua mortalidade. Em doses subletais, o fipronil pode afetar a percepo gustativa, o aprendizado olfatrio e a atividade motora das abelhas que so funes essenciais no forrageamento destes insetos (HASSANI et al., 2005). Pesquisas atuais realizadas na Europa revelam que o inseticida fipronil, utilizado nos cultivares explorados pelas abelhas, provoca a morte de 10 a 65% dos indivduos depois de 10 dias da aplicao deste composto qumico (COLIN, 2004). A disseminao do uso de muitos agrotxicos, porm, no consenso em pases da Europa e Estados Unidos, haja vista que a Frana proibiu o inseticida Gacho, cujo princpio ativo o imidaclopride, em 1999, aps uma longa batalha judicial. O inseticida Regent foi igualmente proibido naquele pas, pois da mesma forma seu componente qumico, o fipronil, mostrou ser altamente txico para muitos animais, especialmente as abelhas, causando baixas de at 40% nos apirios franceses (Godoy, 2005).
43
No Brasil, tm ocorrido muitos relatos de apicultores sobre a mortalidade sbita de suas abelhas, em diversas regies do pas, como Piau no municpio de Simplcio Mendes, no interior do Rio Grande do Sul, Minas Gerais e no interior Estado de So Paulo. No Estado de So Paulo os relatos foram mais presentes na regio central, nos municpios de Rio Claro, Pirassununga, Araras, Mogi Mirim, Piracicaba, Brotas, Boa Esperana do Sul, So Rita do Passa Quatro, So Carlos e Tabatinga. Em todos os casos foram relatos dos apicultores e a mdia de nmero de colmias atingidas e perdidas foi ao redor de 400 para cada caso. Infelizmente na grande maioria dos casos, no foi possvel coletar amostras das abelhas mortas para anlise e comprovao da contaminao. Inmeras suspeitas j foram levantadas a fim de encontrar os motivos da intoxicao e morte das abelhas. Entre alguns motivos esto as mudanas climticas globais, que alteram o regime de chuvas de muitas regies, provocando secas prolongadas, a intoxicao por plantas txicas e, principalmente a exposio das abelhas aos agrotxicos em nossos campos de cultivo.
Objetivos
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a mortalidade de abelhas africanizadas pela aplicao de agrotxicos e verificar seus efeitos na morfologia interna de larvas e operrias.
Materiais e Mtodos
Amostras com abelhas mortas foram coletadas em apirios onde ocorreram mortalidade de grande nmero de indivduos e provenientes dos municpios de So Carlos, Tabatinga e Boa Esperana do Sul, localizados nos Estado de So Paulo. Em muitos desses casos foi possvel a confirmao atravs de relatos pessoais de testemunhas, da aplicao dos agrotxicos em culturas prximas aos apirios (50 a 800m) por avio. Posteriormente, as amostras foram encaminhadas para um laboratrio especializado em anlises de resduos de pesticidas. Foram utilizados dois mtodos analticos para deteco de resduos de grupos de pesticidas nas abelhas: tcnica em cromatografia em fase gasosa, com detector seletivo de massas (GC/MS) e pela tcnica em cromatografia em fase lquida, com detector seletivo de massas (LC/MS). Para os estudos dos efeitos na morfologia interna, os experimentos foram realizados em condies de laboratrio e as analises foram feitas atravs de microscopia de luz e eletrnica de transmisso. As anlises morfolgicas dos rgos/tecidos foram realizadas aps a aplicao do inseticida fipronil nas larvas e operrias de Apis mellifera. Regies do intestino e do crebro, escolhidas para os estudos foram dissecadas e fixadas em formalina neutra, tamponada em acetona, na proporo 9:1, durante uma hora e trinta minutos a 4 C. Posteriormente, o material foi hidratado em quatro banhos, de cinco minutos cada, em mistura de acetona e fixador em que, gradualmente, a concentrao de acetona foi aumentada at obter a condio de acetona pura, quando foram realizados mais trs banhos com durao de cinco minutos cada. Aps o material ser desidratado, foi transferido para a resina de embebio, onde permaneceu durante mais 24 horas e, posteriormente, includo em moldes plsticos contendo resina como polimerizador. A embebio e incluso foram efetuadas com resina Leica. Os blocos foram mantidos em estufa a 37C e depois de polimerizados, foram colocados em suportes de madeira para a seco (4m de espessura) em micrtomo. As seces foram recolhidas em lminas de vidro, previamente limpas, e coradas com hematoxilina de Harris durante 5 minutos, depois lavadas em gua corrente por aproximadamente 5 minutos e, em
44
seguida, corado com eosina tambm por 5 minutos. As lminas foram novamente lavadas em gua corrente para retirar o excesso de corante. Posteriormente foram secas e diafanizadas em xilol, montadas em Blsamo do Canad e cobertas com lamnulas para a observao do microscpio de luz e eletrnico.
Resultados e Discusso
A tcnica de cromatografia de fase gasosa foi realizada para identificar compostos qumicos dos grupos dos organoclorados (aldrin, endosulfam, DDT, DDE, dodecaclaro, BHC), organofosforados (acefato, azinfs, dimetoato, diclorvs, esfenvalerato), piretrides (bifentrina, cipermetrina) e fenilpirazlicos (fipronil) em um total de 75 compostos para 4 amostras de abelhas. Para essa tcnica, os resultados obtidos com estas anlises no apresentaram resduos de pesticidas nos limites de deteco estabelecidos (0,01mg/kg). J a tcnica de cromatografia em fase lquida foi realizada apenas para o grupo dos neonicotinides e identificou em seu resultado, resduos acima do permitido (0,01mg/kg) por lei. Essa amostra foi coletada em apirio localizado no municpio de Boa Esperana do Sul, onde ocorreu a mortalidade de 400 colmias. O apirio estava localizado prximo a uma cultura de citrus e a aplicao do agrotxico foi feita por avio. O inseticida fipronil foi aplicado em doses subletais para operrias recm-emergidas e larvas de Apis mellifera. Dessa maneira, foram realizados bioensaios em que abelhas operrias recmemergidas receberam alimento contaminado com com fipronil nas concentraes de 0,1g/kg. Para as larvas, o tratamento o fipronil foi adicionado ao alimento nas seguintes concentraes: 0,1 g/g, 0,4 g/g e 1 g/g. Analisando o ventrculo de abelhas tratadas durante quatro dias das abelhas adultas tratadas com fipronil e coletadas 48h aps a administrao oral, observou-se intensificao da liberao de clulas mortas para o lmen (Fig. 2), alm de variao quanto ao nvel de compactao do ncleo das clulas digestivas presentes no epitlio, podendo ser encontrados alguns ncleos com maior compactao cromatnica, nas clulas com caractersticas de autlise, enquanto grande parte das clulas apresenta ncleos com cromatina descompactada e contendo grande quantidade de nuclolos. A secreo apcrina continuou sendo liberada por vrias clulas digestivas. Quanto s clulas regenerativas no foi observada nenhuma alterao morfolgica evidente, somente presena, ao seu redor, de clulas digestivas com extensa rea citoplasmtica degradada e com ncleo condensado. O grupo controle apresentou morfologia tpica (Fig. 1). Quanto aos ncleos, foram observados blebs (borbulhas) e sinuosidades no envoltrio nuclear, tambm encontradas durante a degenerao das clulas do intestino de Apis mellifera (GREGORG e BOWEN, 1996) e em clulas de glndulas salivares larval em processo de degenerao de Apis mellifera (SILVA-ZACARIN et al., 2007) Todavia, foram encontradas, no grupo tratado com fipronil, clulas cujo ncleo apresentava um halo pericromatnico, diferindo do tpico ncleo apopttico em que a cromatina condensada se deposita na periferia do ncleo (SILVA-ZACARIN et al., 2007 in press). Todo o grupo experimental continha clulas com sinais de alteraes citoplasmticas, mas com o ncleo aparentemente ntegro, provavelmente entrando em numa fase autofgica, podendo levar posteriormente a morte celular ou no (LOCKSHIN; ZAKERI, 2004). No grupo experimental analisado tambm foram encontradas mitocndrias alteradas, inchadas com evidncias de perda de cristas ou altamente compactadas. Alteraes na mitocndria tambm so encontradas em clulas dos msculos intersegmentares ventrais de insetos, que so reabsorvidos na passagem da larva para a pupa (LOCKSHIN; WILLIAMS, 1964; LOCKSHIN; BEAULATON, 1974).
45
Para os experimentos com larvas, anlise ultraestrutural dos ventrculos evidenciou algumas alteraes morfolgicas nas larvas tratadas com 0,1 g/g de fipronil, tais como pequenos vacolos na regio apical das clulas digestivas, retculo endoplasmtico rugoso iniciando a formao de futuras figuras mielnicas e reas vacuolizadas no citoplasma basal (Fig. 3). Alm disso, as mitocndrias apresentaram-se muito eltron-densas e os ncleos apresentaram-se picnticos, contendo um halo pericromatnico, ou com pronunciadas evaginaes do envelope nuclear (Fig. 3). O grupo controle apresentou morfologia tpica (Fig. 4). Embora, experimentos comportamentais realizados por Hassani et. al. (2005) sugerem que o inseticida fipronil altera a percepo gustativa, o aprendizado olfatrio e a atividade motora das abelhas, as analises morfolgicas realizadas no crebro destes insetos, aps a aplicao tpica de fipronil com doses subletais e letais (0,1 e 1,0ng/abelha, respectivamente), no apresentaram nenhum tipo de alterao estrutural ou de morte celular. As regies analisadas so principalmente aquelas ligadas a memria e ao aprendizado, situadas nos corpos pedunculados (mushroom bodies).
Agradecimentos
FAPESP, CNPq.
Figura 1. Seces histolgicas coradas com Hematoxilina-Eosina (H-E). Ventrculo de abelha do grupo controle, mostrando integridade das clulas digestivas (Dc) com secreo apcrina (as) tpica e ninho de clulas regenerativas (Rc). Aumento: 200x. Dc: clula digestiva; Rc: clulas regenerativas.
Figura 2. Seces histolgicas coradas com Hematoxilina-Eosina (H-E). Ventrculo de abelha tratada com fipronil (0,1ng/abelha), coletada aps 48 horas da administrao do xarope contaminado. Nota-se intensa eliminao de clulas para o lmen. Aumento: 200x. as: secreo apcrina; Dc: clula digestiva; Ec: clula eliminada para o lmen; L: lmen; N: ncleo; Rc: clulas regenerativas.
46
Figura 3. Fotomicrografia eletrnica de transmisso de ultra-seco do ventrculo de larva de operria de A. mellifera no 4 instar. Larva tratada com 0,1 g/g de fipronil, apresentando evaginaes muito pronunciadas no envelope nuclear (asteriscos). n: ncleo.
Figura 4. Fotomicrografia do ventrculo de larva de operria de A. mellifera no 4 instar corada com Hematoxilina-Eosina (H-E). Larva do grupo controle apresentando morfologia tpica, com clulas cbicas e homogneas, bordadura em escova bem caracterstica (bb), membrana peritrfica bem preservada (pm) regio de absoro. bb: bordadura em escova; Fb: corpo gorduroso; L: lmen; n: ncleo; p: gro de plen; pm: membrana peritrfica.
Referncias Bibligrficas.
AIZEN, M.A.; FEINSINGER, P. Forest fragmentation, polination, and plant reproduction in a Chaco dry Forest, Argentina. Ecology. Durham. n.75, p.330-351, 1994. BATRA, S.W.T. Bees and polination in our changing environmente. Apidologie. Avignon. n. 26, p. 361- 370, 1995. BORTOLOTTI, L.; MONTANARI, R.; MARCELINO, J.; MEDRZYCHI, P.; MAINI, S.; PORRINI, C. Effects of sub-lethal imidacloprid doses on the homing rate and foraging activity of honey bees. Bulletin of Insectology. Bologna. v. 56, n. 1, p. 63-67, 2003. CELLI, G.; MACCAGNANI, B. Honey bees as bioindicators of environmental pollution. Bulletin of Insectology. Bologna. v. 56, n. 1, p. 137-139, 2003.
47
CHAUZAT, M.; FAUCON, J.; MARTEL, A.; LACHAIZE, J.; COUGOULE, N.; AUBERT, M. A survey of pesticides residues in pollen loads collected by honey bees in France. Journal of Economic Entomology. Lanham. v. 99, n. 2, p. 253-262, 2006. COLIN, M.E. Un medio ambiente que mata las abejas. Estudios de imidacloprid y fipronil en Europa. Vida Apcola. Barcelona. n.128, 2004. DECOURTYE, A.; LACASSIE, E.; PHAM-DELEGUE, M. H. Learning performaces of honey bees are differentially affected by imidacloprid according to the season. Pest Management Science. Brighton. v. 59, p. 269-278, 2003. DECOURTYE, A.; DEVILLERS, J.; CLUSEAU, S.; CHARRETON, M.; PHAM-DELEGUE, M. H. Effects of imidacloprid and deltamethrin on associative learning in honeybees under semifield and laboratory conditions. Ecotoxicology and Environmental Safety. New York. v. 57, p. 410-419, 2004. DECOURTYE, A.; DEVILLERS, J.; GENECQUE, E.; LE MENACH, K.; BUDZINSKI, H.; CLUSEAU, S.; PHAM-DELEGUE, M. H. Comparative sublethal toxicity of nine pesticides on olfactory learning performances of the honeybees Apis mellifera. Archives of Environmental Contamination and Toxicology. New York. v. 48, p. 242-250, 2005. FAO (Organizaes das Naes Unidas para a Agricultura e Alimentao). Pesticides Residues in food. Report of the joint meeting of the FAO Painel of Experts on Pesticides Residues in Foods and the Environment and the WHO Core Assessment Group. Lyon, 215p, 1998. FLETCHER, M; BARNETT, L. Bee poisoning incidents in the United Kingdom. Bulletin of Insectology. Bologna. v. 56, n. 1, p. 141-145, 2003. HASSANI, A. K.; DACHER, M.; GAUTHIER, M. ARMENGAUD, C. Effects of sublethal doses of fipronil on the behavior of the honeybee (Apis mellifera). Pharmacology Biochemistry and Behavior. Fayetteville . v. 82, p. 30-39, 2005. GODOY, J. Alarme contra inseticidas assassinos de abelhas. Lunes, Mxico. online. http://tierramerica.net/2004/0313/pacentos.shtml . Acesso em 15 out. 2005. GREGORC, S.; BOWEN, I.D. Programmed cell death in honeybee (Apis mellifera) larvae midgut. Cell Biol. Int. London, v.21, p.151-8,1996. KEVAN, P. G. Pollinators as bioindicators of yhe state of the environment:: species, activity and diversity Agriculture, Ecosystems and Environment, Amsterdam, v. 74, p. 373-393, 1999. MALASPINA, O.; SILVA-ZACARIN, E. C. M. Cell makers for ecotoxicological studies in target organs of bees. Brazilian Journal of Morphological Scienses. So Paulo. v. 23, n. 3/4, p. 303-309, 2006. MAYER, D. F.; LUNDEN, J. D. Field and laboratory tests of the effects of fipronil on adult female of Apis mellifera, Megachile rotundata and Nomia melanderi. Journal of Apicultural Research. Cardiff. v. 38, v. 3-4, p. 191-197, 1999. MEDRZYCKI, P.; MONTANARI, R.; BORTOLOTTI, L.; SABATINI, A. G.; MAINI, S.; PORRINI, C. Effects of imidacloprid administered in sub-lethal doses on honey bee behaviour: Laboratory tests. Bulletin of Insectology. Bologna. v. 56, n. 1, p. 59-62, 2003. MORAES, S. S.; BAUTISTA, A. R. L.; VIANA, B. F. Avaliao da toxicidade aguda (DL50 e CL50) de inseticidas para Scaptrotigona tubiba (Smith) (Hymenoptera: Apidae): via de contato. Anais Sociedade Entomolgica Brasil. Jaboticabal. v. 29, n.1, p. 31-37, 2000. LOCKSHIN, R.A.; BEAULATON, J. Programmed cell death. Cytochemical evidence for lysosomes during the normal breakdown of the intersegmental muscles. J. Ultrastruct. Res. New York, v.46, p.43-62, 1974a.
48
LOCKSHIN, R.A.; WILLIAMS, C.M. Programmed cell death. II Endocrinepotentiation of the breakdown of the intersegmental muscles of silkmoths. J. Insect Physiol. Oxford, v. 10, p. 643, 1964. LOCKSHIN, R.A.; ZAKERI, Z. Apoptosis, autophay, and more. J. of Biochem. & Cell Bio. Exeter, v. 36, p. 2405-2419, 2004. OSBORNE, J.L.; WILLIANS, I.H.; CORBET, S.A. Bees, pollination and habitat change in the European Community. Bee World. Cardiff. v.72, p.99-116. 1991. PORRINI C., GHINI S., GIROTTI S., SABATINI A.G., GATTAVECCHIA E., CELLI G. Use of honey bees as bioindicators of environmental pollution in Italy. In, Honey bees: Estimating the Environmental Impact of Chemicals (Devillers J. e Pham Delgue M.H. Eds). Taylor & Francis, London and New York, p. 186-247, 2002. ROUBIK, D.W. Competitive interactions between Neotropical pollinators and Africanized honeybees. Science. Estados Unidos. n.201, p.1030-1032.1978. SPADOTTO, C. A.; GOMES, M. A. F.; LUCHINI, L. C.; ANDREA, M. M. de. Monitoramento do risco ambiental de agrotxicos: princpios e recomendaes. Jaguarina: Embrapa Meio Ambiente, 2004. 29 p. (Embrapa Meio Ambiente. Documentos, 42). SILVA-ZACARIN, E. C. M. ; GREGORC, A. ; SILVA DE MORAES, R. L. M. . In situ localization of heat-shock proteins and cell death labeling in the salivary gland of acaricide-treated honeybee larvae. Apidologie. Versailles, v. 37, p. 507-516, 2006. SILVA-ZACARIN, E. C. M. et al. Programmed cell death in the larval salivary glands of Apis mellifera (Hymenoptera, Apidae). J. Biosci. Bangalore, v. 32, p. 309-328, 2007. WILLIANS, C.S. Conserving Europes bees: why all the buzz? Trends in Ecology and Evolution. London. v.10, n.8, p. 309-310. 1995.
49
Doenas de Abelhas no Sul do Brasil

Aroni Sattler Universidade Federal do Rio Grande do Sul Faculdade de Agronomia, Departamento de Fitossanidade. Av. Bento Gonalves 7712. CEP. 91.540-000 PORTO ALEGRE/RS/BRASIL.. E-mail: aronisattler@yahoo.com.br A partir de 1989 iniciamos um programa de monitoramento da sanidade dos apirios do Rio Grande do Sul com o objetivo de localizarmos com a antecedncia necessria, possveis focos de novas doenas nas nossas abelhas. Em 2001 constatamos pela primeira vez a presena de esporos da Cria Ptrida Americana (Paenibacillus larvae subsp. larvae) num estabelecimento apcola no Rio Grande do Sul, mais precisamente em mel e plen importados, mel em favo de cria e em abelhas que estavam pilhando restos do entreposto, no entanto ao investigarmos apirios num raio de 10 km do estabelecimento no constatamos sintomas clnicos da doena. Ao comprovarmos a ocorrncia do primeiro foco de Cria ptrida Americana no estado do Paran com sintomas clnicos caractersticos em colmias a partir de agosto de 2006 o Ministrio da Agricultura do Brasil comunicou oficialmente OIE (Organizao Internacional de Epizotias) sobre o episdio em 24 de novembro de 2006. Desta forma a apicultura brasileira comea a escrever uma nova pgina sobre a sanidade dos seus apirios, cujas conseqncias podem ser minimizadas, caso o monitoramento preventivo das doenas e as medidas de controle sejam adotadas com a agilidade necessria. No caso do foco de Cria Ptrida Americana no Paran, apenas as medidas mais urgentes foram adotadas pelo Ministrio da Agricultura para manter a credibilidade junto aos organismos internacionais, mas para defender os interesses diretos dos apicultores brasileiros, resta muito por ser feito. Este foco de Cria Ptrida Americana no Paran, certamente apenas o primeiro de vrios outros que devero surgir brevemente em outros estados brasileiros. Simultaneamente, vrios relatos nos meios de comunicao internacional, nos do conta de perdas expressivas de colmias no continente americano e europeu, cujas causas ainda no foram totalmente elucidadas. No inverno e primavera de 2006, especialmente no Rio Grande do Sul, as perdas de colmias foi de aproximadamente 40%, mas no se pode atribuir a esta mortandade as mesmas causas da CCD. No nosso caso ficou evidente que o inverno prolongado e muito frio aliado com uma primavera chuvosa e irregular causou uma desnutrio acentuada nas colmias, tornando-as ainda mais sensveis ao nvel alto de nosemose e varroase. Esta conjuntura mundial de doenas e pragas, geram uma necessidade de estratgias de controle que no comprometam a qualidade dos produtos das colmias brasileiras para o mercado interno e externo. O embargo ao mel brasileiro, por parte da Comunidade Europia, constitui-se num episdio que nos serve de alerta e estmulo para adotarmos as medidas necessrias com a maior brevidade possvel.
50
New and Exotic Disease Threats for Brazilian bees

David De Jong1, Dejair Message2 1 Depto. de Gentica, FMRP-USP, Ribeiro Preto, SP ddjong@fmrp.usp.br 2 Universidade Federal de Viosa, Viosa, MG Many of the known diseases and pests of honey bees have not yet become established in Brazil. Therefore, it is important to maintain vigilance to avoid new problems that could affect bee health, and consequently colony production, the quality of bee products and the important pollination services that the bees provide. Fortunately, till now the Africanized bees in Brazil have been capable of adapting to the diseases and pests that have been introduced to this country. Recently, there has been news from the states of Rio Grande do Sul and Parana about bees and honey contaminated with the bacteria Paenibacillus larvae. These contaminations were associated with honey illegally imported from other countries. Fortunately, this disease is not yet established in Brazil, even though it has been present in a neighboring country, Argentina, since at least 1989. This disease causes concern because it kills affected colonies. In many countries, the colonies are treated by burning the bees, frames and combs. It is also possible to treat affected colonies with antibiotics, such as Terramycin; however, this has resulted in problems with resistance and contamination of the honey (De Jong, 1996; Message and De Jong, 1998). Chalkbrood disease, caused by the fungus Ascosphaera apis (De Jong, 1976; De Jong and Morse, 1976), has been found in several states, including Rio Grande do Sul, Minas Gerais and So Paulo. It began to appear about 10 years ago, but still has not spread to most of Brazil, and it has not caused serious problems till now. This fungus was probably introduced in imported pollen, because bee larvae that have died of this disease have been found in imported pollen. Unfortunately, when importers package the pollen pellets, they find it difficult to market the remaining powdered pollen, which is not well accepted by consumers. Instead of disposing of this powdered pollen, they often feed it to the bees. Contaminated pollen can easily transmit chalkbrood (De Jong and Morse, 1976) and other diseases. Till now, perhaps because of the warm climate and the hygienic capacity of our bees, chalkbrood has not been as serious a problem as it was in the USA and Europe. Large-scale losses of honey bees in the USA, which has been named disappearing disease or colony collapse disease (CCD), has been associated with a recently described virus, Israeli Acute Paralysis Virus (IAPV) (Cox-Foster et al., 2007). Many samples of bees collected from Brazilian apiaries who had disease problems were analyzed in 2007 to check for this virus, but it has not bee found yet in this country. This virus was found in royal jelly imported from China into the USA (CoxFoster et al., 2007). Since Brazil also imports royal jelly from China, and knowing that beekeepers sometimes rear queens using royal jelly that they purchase in the market, the currently policy of allowing importation of this product should be revised. A pathogen that has been associated with bee mortality and colony loss in this country in recent years is Nosema. Nosema apis, a protozoan that attacks the intestine (ventriculus) of adult bees, has been known from Brazil since before the arrival of the African bee in 1956; however, Nosemosis was not a problem for our bees, as it was considered to be a disease of bees in cold climates. The finding
51
of large quantities of spores of Nosema in colonies with signs of weakening and even colonies losses, led to an investigation to determine if this pathogen had changed. It was found that a new species, Nosema ceranae, which was already causing problems with bee mortality in Europe (Paxton et al. 2007), was associated with these losses. It is quite probable that this disease was introduced through the importation of honey bee queens from Europe or the USA. The mite Varroa destructor has been found in Brazil since 1978, and has not provoked serious problems (De Jong 1997); however, a new haplotype of this mite, which is called the Korean/Russian haplotype of Varroa destructor, has been provoking higher infestations in recent years. Initially, only the Japanese/Thai type (less virulent) was found (Carneiro et al., 2007). Apparently, our honey bees initially adapted to a less virulent mite and now were are experiencing an adaptation to this new type of Varroa. This demonstrates that even diseases and parasites that already exist in our country should be carefully observed and regulated, because the introduction of new genetic lines from other countries, to which our bees are not adapted, can be prejudicial. The small hive beetle, Aethenia tumida, originally from African, has destroyed thousands of colonies in the USA in recent years; however, this pest has not yet been found in Brazil. As this beetle is not a parasite, but instead lives on various types of food found in the colony, including pollen, bee brood and other organic matter, there is great danger of introducing this new pest in bee products or bee hives. This beetle does not depend on a live host and can live for long periods away from bees (Hood and Miller, 2005). Another bee mite, Tropilaelaps clareae, is a very lethal parasite for Apis mellifera in Asia and parts of Africa. Different from Varroa, which in tropical regions of South America generally does not kill honey bee colonies, Tropilaelaps clareae is especially mortal in tropical regions, and does not survive freezing winters. This mite cannot survive for more than a few days without access to honey bee brood. However, it outcompetes Varroa destructor when the two mite species are in the same Apis mellifera colonies. It is quite likely that this mite would provoke massive loss of honey bee colonies if it were to be introduced to South America (De Jong, 1997). Another pest that is both very dangerous and biologically interesting is a subspecies of Apis mellifera found in South Africa, Apis mellifera capensis, the Cape bee. This bee has seriously affected beekeeping in South African and neighboring countries. Though it had already existed on the southern coast of South Africa, the introduction of hundreds of colonies to the interior of the country, well past the zone of hybridization with Apis mellifera scutellata, has had grave consequences for the latter subspecies, the same bee that was introduced to Brazil, giving origin to the Africanized bees. A clone of this parthenogenic bee has invaded and eliminated hundreds of thousands of commercial honey bee colonies in south Africa. Small groups of workers of Apis mellifera capensis invade colonies of Apis mellifera scutellata; the capensis workers become pseudo-queens with the capacity to produce diploid worker or queen larvae. The original queen of the colony ends up dying, with great loss of colonies and production (Beekman and Oldroyd, 2008). Beekeepers and authorities should know about these exotic pests and diseases and should avoid the importation of bees, used beekeeping equipment (including hives and combs), and uncontrolled bee products, especially pollen, honey and royal jelly. It would also be very useful to have illustrated manuals of both established and exotic diseases and pests so that new introductions can be rapidly found, identified and controlled. One important aspect of bee pathology that can no longer be ignored is the action of pesticides. Although they have always been a problem for bees in Brazil, there have been increasing losses in recent years that have sometimes been confused with possible bee disease problems. Specifically, a
52
new and extremely deadly group of insecticides, the neo-nicotinoids, including Fipronil and Imidacloprid, have been introduced into Brazilian agriculture with deadly consequences. Though they are extremely toxic for bees, even with normal usage as systemics applied in the soil, they are often being applied as sprays, both from the ground and the air, killing both honey bees and native stingless bees, constituting both a menace to beekeeping and an ecological disaster. Some countries, such as France, have banned these insecticides due to their affects on bees. The amount of active material needed to kill a bee is so small that it is difficult to detect these pesticides in dead and dying bees. It is also necessary to know before the tests which chemicals have been applied, information that is often hard to obtain by the beekeeper. Recently, a fully documented case of the loss of over 400 colonies in Brotas, SP, due to a neonicotinoid, thiametoxam, was reported by Malaspina and de Souza (2008). Both of us have witnessed considerable honey bee colony mortality due to these insecticides in recent years, including mortality of colonies of four species of stingless bees and an apiary of 15 colonies of Africanized honey bees in an incident in 2007 in So Simo, SP. Certainly, if we are wish to maintain a viable beekeeping industry and the bees of all species that we need for pollinating cultivated and native plants, we will need to find ways of controlling the use of these extremely deadly new pesticides.
References
Beekman M, Oldroyd, BP. 2008. When workers disunite: Intraspecific parasitism by eusocial bees. Annual Review of Entomology 53:19-37. Carneiro FE, Torres RR, Strapazzon R, Ramirez SA, Guerra JCV, Koling DF, Moretto G. 2007. Changes in the reproductive ability of the mite Varroa destructor (Anderson e Trueman) in Africanized honey bees (Apis mellifera L.) (Hymenoptera : Apidae) colonies in southern Brazil. Neotropical Entomology 36:949-952. Cox-Foster DL, Conlan S, Holmes EC, Palcios G et al. 2007 A Metagenomic Survey of Microbes in Honey Bee Colony Collapse Disorder. Science 318:283-287. De Jong, D. l976. Experimental enhancement of chalk brood infections. Bee World 57:114-115. De Jong D. 1996. Loque americana, o grande perigo para o futuro da apicultura brasileira. Mensagem Doce 39:11-12. http://www.apacame.org.br/mensagemdoce/72/artigo.htm De Jong D. 1997. Varroa and other mite parasites of brood. In: Morse, RA. Pests, Predators and Diseases of Hoeny Bees. 3ed. A.I. Root Co., Medina, Ohio, USA. pp. 279-327. De Jong D, Morse RA. l976. Chalk brood: a new disease of honey bees in the U.S. New Yorks Food and Life Sciences Quarterly 9(2):12-14. De Jong D, Morse RA, Eickwort GC. 1982. Mite pests of honey bees. Annual Review of Entomology 27:229-252. Hood WM, Miller GA. 2005. Evaluation of an upper hive entrance for control of Aethina tumida (Coleoptera : Nitidulidae) in colonies of honey bees (Hymenoptera : Apidae). Journal of Economic Entomology 98:1791-1795. Message D, De Jong D. 1998. Disperso internacional da bactria Paenibacillus larvae, causadora da doena de abelhas Cria Ptrida Americana atravs da comercializao de mel. Mensagem Doce 50: 8-12. http://www.apacame.org.br/mensagemdoce/50/artigo.htm Malaspina O, de Souza TF. 2008. Reflexos das Aplicaes de Agrotxicos nos Campos de Cultivo para a Apicultura. Anais do 17 Congresso Brasileiro de Apicultura, Belo Horizonte, MG, Brasil (CD). 4 pp. Paxton RJ, Klee J, Korpela S, et al. 2007. Nosema ceranae has infected Apis mellifera in Europe since at least 1998 and may be more virulent than Nosema apis. Apidologie 38:558-565.
53
SI MPS IO 4
GENOMICS, PROTEOMICS AND MOLECULAR EVOLUTION
Coordenador: Zil Luz Paulino Simes
54
Natural Experiments in Developmental Biology: The Case of Honey Bee Polyphenism

Angel Roberto Barchuk
Depto. Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Alfenas. Rua Gabriel Monteiro Silva 714 - Cep 37130-000 Campus Unifal-MG, Alfenas, Minas Gerais, Brazil. Tel. +55 35 3299 1300 Mobile +55 35 9129 8706, emails: barchuk@unifal-mg.edu.br, arbarchuk@yahoo.com
As an experimental scientific area developmental biology needs to test the behavior of the studied phenomenon in varied and controlled conditions, for example, after disturbing a developmental path, thus allowing the identification of underlying key factors. In addition of doing that, developmental biologists can also rely on natural experiments. A plethora of these can be found in nature and many occur in insects. The differential horn and testis development in beetles, head width in ants, seasonal forms in butterflies, are only some of these examples. In highly eusocial bees, polyphenism is generally determined by discrete switches during postembryonic development, and commences with the differential feeding of female larvae. The nutritional stimuli trigger an endocrine response that is manifested by an elevated juvenile hormone (JH) titer in queen larvae when compared to workers. In honeybees, differential feeding of female larvae promotes the occurrence of two different phenotypes, the queen and the worker, from a single genotype, through incremental alterations which affect general growth and character state alterations that result in the presence or absence of specific structures. Microarray analyses of Apis mellifera ESTs revealed 240 differentially expressed genes between developing queens and workers (Barchuk et al. 2007, BMC Dev Biol). Many genes recorded as up-regulated in prospective workers appear to be unique to A. mellifera, suggesting that the worker developmental pathway involves the participation of novel genes. Workers up-regulate more developmental genes than queens, whereas queens up-regulate a greater proportion of physiometabolic genes, including genes whose products are known to regulate the rate of mass-transforming processes and the general growth of the organism, like tor. Many differentially expressed genes are likely to be involved in processes favoring the development of caste-biased systems, like brain, legs and ovaries. Putative gene regulatory networks suggest usp, crc, RfaBp and actin as key genes in the developmental pathway leading to the worker phenotype. In addition, key genes in leg development (ultrabithorax and abdominal-A) turned out to be overexpressed in early pupal stages of workers (Bomtorin et al., poster at this meeting). Silencing these genes would be particularly advantageous for gaining novel insights into the biological function of these genes in the context of caste differentiation in honeybees. Preliminary knock-down experiments using usp as target showed that Usp participates in the mechanism that regulates the progression of pupal development in A. mellifera. Knock down experiments also suggest that the expression of regulatory genes like ftz-f1 and jhe, a gene encoding a juvenile hormone esterase (Mackert et al. 2008, Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol), depends on Usp. Vitellogenin (vg), the gene coding for the main yolk protein in honeybees is differentially expressed between castes (Barchuk et al. 2002, J Insect Sci; Piulachs et al. 2003, Insect Biochem Mol Biol), and does not seem to be under Usp regulation, thus suggesting that the previously observed induction of vg expression by JH during the final stages of pupal development is mediated by yet unknown tranAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
55
scription factor complexes (Barchuk et al. 2008, J Insect Physiol). Combinations of knock down experiments to down-regulate genes like usp, EcR, ftz-f1 (Palo Mello et al., poster at this meeting), RfaBp and ubx during larval and pupal development are currently underway to help unravel the proximal mechanisms leading to the caste-specific development of honeybee systems. Financial support: FAPESP; Unifal-MG
56
Odorant Receptor Expression in the Honeybee: A Case of Environmentally Driven Plasticity?

Charles Claudianos, Judith Reinhard, Julie Lim, Michael Sinclair, and Mandyam V. Srinivasan The University of Queensland, Queensland Brain Institute, Brisbane QLD 4072, Australia, j.reinhard@uq.edu.au Honeybees (Apis mellifera L.) are exposed to countless floral scents in their natural foraging environment. Type and abundance of floral scents vary with geographic location and season. Bees are known to show preferences for certain scents, but reports on these preferences are inconsistent. Using the well-known Proboscis-Extension-Reflex Assay (PER), we investigated olfactory learning preferences of individual floral scent components, and determined expression patterns of olfactory receptor proteins (OR) potentially involved in floral scent processing using qRT-PCR. Our results demonstrate that honeybees indeed learn certain floral odorants better than others, however the preferences are in no correlation to the molecular structure or physico-chemical properties of the tested odorants. Behavioural data and OR expression patterns indicate that sensory exposure in the foraging environment may cause olfactory preferences, suggesting that honeybee olfaction is not entirely hard-wired, but subject to experience-based modulation at the molecular level. Funded by CSIRO Food Futures Flagship.
57
SI MPS IO 5
POLINIZAO NA AGRICULTURA: UMA ABORDAGEM ECOSSISTMICA
Coordenador: Breno Magalhes Freitas
58
Visitantes Florais e Polinizao da Castanha do Brasil (Bertholletia excelsa) em Cultivo Comercial na Floresta Amaznica
Breno Magalhes Freitas1, Marcelo Casimiro Cavalcante2.
1. Professor do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal do Cear, Fortaleza-CE. 2. Aluno de Mestrado do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal do Cear, Fortaleza-CE.
Endereo: Av. Mister Hull, s/n C.P. 12168, Campus do Pici 60.021-970 Fortaleza-CE, fone/fax: (85)3366-9701- freitas@ufc.br
Abstract
Floral visitors and pollination of Brazil nut (Bertholletia excelsa) in a commercial cultivation within the Amazon rainforest The Brazil nut (Bertholletia excelsa) is an economically important nut crop of Brazil, though knowledge of its pollination biology is scant and restricted to studies with wild trees. The present work aimed to investigate some aspects of the Brazil nut tree floral biology and the potential impact of a cultivation of Brazil nut within the rainforest in the diversity and abundance of floral visitors. The experiment was carried out in the farm Aruan, county of Itacotiara, state of Amazonas, Brazil in a cultivated area of 600 ha of Brazil nut trees. Blooming was monitored throughout the season for information on floral biology as well as floral visitors. Results suggests that the flowering pattern of the Brazil nut tree produces an attractive floral display to a variety of visitors, among them 19 bee species out of which 16 are potential pollinators and the specific frequency and abundance to flowers vary along the blooming period. It was concluded that commercial cultivation of the Brazil nut tree in the rainforest keeps the diversity of floral visitors and potential pollinators similar to that of wild trees and field size probably do not constitute a problem because these large bees usually fly long distances between different groups of Brazil nut tree within the forest.
Introduo
A castanha-do-Brasil ou castanha-do-par (Bertholletia excelsa), uma das riquezas da floresta Amaznica, representa importante componente na pauta de exportao da regio. Sua explorao desempenha papel fundamental na organizao socioeconmica de grandes reas extrativistas da floresta Amaznica (Silva, 2002). No ano de 2006 a produo chegou a 28,806 mil toneladas, sendo mais de 90% destinada para o exterior, atingindo o segundo lugar no ranking mundial de exportaes de castanha (IBGE, 2006). A proporo de flores que finalmente vingam um fruto muito baixa: entre 0,28 e 0,40%, podendo, potencialmente, aumentar com a atividade dos polinizadores. Grande parte desta perda se deve, provavelmente, a falta e/ou qualidade da polinizao, assim como a proporo de aborto de frutos pode ser importante: frutos abortados so encontrados no solo da floresta durante o perodo de maturao (Pinheiro & Albuquerque, 1968; Zuidema, 2003).
59
No existem informaes sobre os requerimentos de polinizao de B. excelsa, assim como h poucas e localizadas informaes de polinizadores potenciais, principalmente em reas experimentais de universidades ou em estado nativo na mata, havendo assim a necessidade de observaes em reas de cultivo. Na Amaznia existem algumas iniciativas de cultivo de castanheira visando sua explorao racional. No entanto, so escassas as informaes sobre a polinizao desses indivduos mesmo em ambientes naturais, apesar de sua importncia para o estabelecimento de plantaes e atividades de enriquecimento (Zuidema, 2003). Nunca se investigou como ocorreria a polinizao em reas de monocultivo de B. excelsa, uma vez que este constitui um ambiente totalmente artificial e pouco comum na produo dessa espcie. Porm, reas cultivadas de castanha-do-Brasil esto se tornando mais comuns e se torna necessrio conhecer o que ocorreria quando ao invs de uma ou poucas rvores de castanheira cercada por mata nativa, passa-se a ter centenas ou milhares dessas rvores quase que de forma contnua. Esta nova situao pode interferir de forma decisiva na diversidade, quantidade e eficincia dos visitantes florais e potenciais polinizadores da castanheira, com consequncias diretas na produtividade, rentabilidade e sustentabilidade do empreendimento. Material e Mtodos O experimento foi conduzido na Fazenda Aruan, localizada na Rodovia Manaus-Itacoatiara, km 215, municpio de Itacoatiara, Estado do Amazonas, com coordenadas geogrficas de 3 030.63S e 58501.50O. A rea total da propriedade compreende 12.000 hectares, sendo destes 3.600 hectares de castanha-do-Brasil em cultivo, com 20 diferentes variedades, sob espaamento de 20x20m, perfazendo um total de aproximadamente 1.300.000 rvores. Destas, 318.000 so rvores de castanheira-do-Brasil enxertadas, em fase de incio de produo de frutos, e 900.000 rvores para produo de madeira, alm de reas para reposio florestal conforme normas do IBAMA. A cada 600 hectares de cultivo de castanha, existem faixas de 500 metros de mata nativa, alm de faixas de aproximadamente 12 metros de mata secundria entre os cultivos de castanheiras. Foram escolhidas cinco rvores, de trs variedades distintas (Abufari, 609 e Desconhecida), que estivessem no perodo produtivo e em florao. Montaram-se estruturas de andaimes ao lado das rvores, permitindo assim o acesso a maior rea da copa para captura dos visitantes florais e coleta de dados referentes biologia floral da espcie e freqncia e abundncia das espcies de abelhas visitantes florais de B. excelsa. A coleta de dados referente freqncia e abundncia das espcies de abelhas foi realizada em trs momentos distintos da florao do cultivo. Sendo esses momentos representados por 5, 25 e 50% das rvores do cultivo em florescimento. Resultados e Discusso O perodo da florada foi de trs meses, sendo precedida pela troca total da folhagem da rvore. As flores so todas hermafroditas e se desenvolvem em panculas retas verticais nas extremidades dos ramos com um nmero mdio de inflorescncias por ramo de 4,01 0,11 (n=143), uma mdia de 27,550,68 flores por inflorescncia (n=101), e as inflorescncias com uma mdia de 17,390,40 cm de comprimento (n=124). A abertura das flores ocorreu da base para o pice da inflorescncia, com uma mdia de 0,590,04 flores abertas por dia por inflorescncia (n=173), variando de zero a trs flores abertas. A antese iniciava ainda na escurido, s 3:00 horas, sendo que todas as flores encontravam-se abertas as 4:00 horas da manh (n=150).
60
Foi registrado visitando as flores de B. excelsa, himenpteros (abelhas), lepidpteros (borboletas e mariposas) e aves (beija-flores). Dentre os himenpteros, uma grande variedade de espcies de abelhas foi observada e coletada visitando as flores da castanheira-do-Brasil. Essas abelhas constituam 19 espcies pertencentes a trs Famlias (Anthophoridae, Apidae e Megachilidae), conforme a Tabela 1. Entre elas, 16 foram tidas como potenciais polinizadoras. So elas: Xylocopa frontalis (Xylocopini); Epicharis (Epicharana) flava, Epicharis (Epicharana) conica, Epicharis (Epicharis) umbraculata, Epicharis (Parepicharis) zonata, Centris (Ptilotopus) denudans, Centris (Ptilotopus) americana, Centris (Heterocentris) carrikeri, Centris (Xanthemisia) ferruginea, Centris (Ptilotopus) denudans (Centridini); Eulaema (Eulaema) meriana, Eulaema (Apeulaema) mocsaryi, Eulaema (Apeulaema) cingulata, Eufrisea purpurata, Eufrisea flaviventris (Euglossina); Bombus (Fervidobombus) transversalis (Bombina); Megachile sp.1 (Megachilidae), conforme ilustrado na Tabela 1. No primeiro momento da florada, quando apenas 5% das rvores estavam florescendo, observou-se a presena de sete espcies de abelhas nas flores, das quais a mais abundante relativamente foi Xylocopa frontalis (72%), seguida da Centris denudans (8%) e da Eulema meriana (7%) (Figura 1A). No segundo momento (25% da florada) encontrou-se tambm sete espcies nas rvores, havendo uma reduo da abundncia relativa de Xylocopa frontalis (69%), entretanto verificou-se a presena de novas espcies e ausncia de outras que haviam no incio do florescimento (Figura 1B). J no terceiro momento (50% da florada) verificou-se nove espcies, havendo uma maior homegeneidade das espcies visitantes, com uma reduo da Xylocopa frontalis (28%), fazendo com que Eulaema mocsaryi fosse a mais abundante (37%), e assim como anteriormente, observou-se novas espcies e ausncia de outras nesse momento da florada das castanheiras (Figura 1C). Essas 19 espcies foram observadas ao longo de toda a florada, entretanto como a maior disponibilidade de alimento na rea provinha de castanheiras, sendo quase que a nica fonte de alimento para as abelhas, isso pode t-las concentrado no incio da florada nas poucas rvores onde havia muitas flores, provavelmente justificando a alta ocorrncia de algumas espcies. Por outro lado, a no ocorrncia de algumas espcies nesse perodo foi, provavelmente, em funo da baixa atratividade deste estgio do florescimento, para aquelas espcies. medida que a florada aumentava, a visitao das flores por novas espcies claramente demonstrou o aumento na atratividade da cultura, enquanto que o desaparecimento ou reduo proporcional da freqncia de outras espcies pode ter sido simplesmente por, no sendo abundantes, terem se dispersado mais na rea com o aumento de opes de locais de pastejo. No entanto, no se pode descartar a possibilidade de uma reduo quantitativa devido a sazonalidade das espcies. Entretanto, considerando todo o perodo de florao das rvores estudadas, percebe-se uma dominncia de Xylocopa frontalis (63%) na abundncia das espcies de abelhas visitantes da castanheira, seguida por Eulaema mocsaryi (12%) e de forma mais homognea, Eulema meriana (7%), Centris denudans (6%), Epicharis conica (4%) e Bombus transversalis (3%), e em menores propores as demais (Figura 2). Essa grande riqueza e diversidade de espcies de abelhas na rea do estudo so favorecidas pela vegetao de mata nativa e secundria no entorno da cultura, uma vez que o cultivo se encontra localizada em rea de Floresta Amaznica. Mesmo existindo uma fragmentao do ecossistema natural, atravs do plantio de grandes reas de castanheiras, essas abelhas conseguem voar longas distncias em busca dos recursos florais para alimentar suas crias e a si mesmas. Embora, KREMEN et al. (2002; 2007), afirmarem que o desmatamento para a instalao de monoculturas leva reduo do hbitat natural e perda da sua conectividade funcional, provocando alteraes em larga escala na paisagem natural e criando um ambiente hostil para os polinizadores ao eliminar as fontes primrias de recursos alimentares e locais de nidificao, o cultivo da castanheira dentro do hbitat natural da espcie e
61
cercada por matas ainda intactas parece minimizar esses efeitos, fundamentais para a sua manuteno e reproduo, considerando a diversidade e quantidade visitantes nas flores desse estudo. RICKETTS et al. (2007) sintetizando resultados de 23 estudos (com 16 culturas em cinco continentes) para estimar o padro geral do relacionamento entre os servios de polinizao e distncia das reas de habitat natural e semi natural, verificaram uma reduo de 50% na riqueza de espcies distncias de 1500m e queda na taxa de visitao de 50% j com distncias inferiores a 1km do habitat natural. No entanto, na floresta nativa as castanheiras se encontram em pequenos agrupamentos, mas dispersos a grandes distncias de outros agrupamentos, fazendo com que esses polinizadores nativos tenham que voar longos percursos em busca do plen e nctar dessas plantas. Assim, provavelmente o tamanho das reas cultivadas com a castanheira no seja um problema para seus polinizadores.
Concluses
Os principais visitantes florais da castanheira-do-Brasil sob cultivo na Floresta amaznica so 21 espcies de Himenpteros, das Famlias Anthophoridae, Apidae e Megachilidae, dos quais 19 podem ser consideradas potenciais polinizadoras da espcie vegetal. O cultivo da castanheira-do-Brasil na Floresta Amaznica mantm a diversidade de visitantes florais e polinizadores potenciais similares de agrupamentos nativos dessa espcie, provavelmente em funo da floresta do entorno que provem ambiente propcio para manuteno dos polinizadores potenciais no perodo de no florescimento da cultura. O tamanho das reas cultivadas com a castanheira-do-Brasil no constituiu dificuldades para seus polinizadores, uma vez que essas abelhas normalmente voam longas distncias entre agrupamentos isolados de castanheiras nativas em busca dos seus recursos florais. Tabela 1: Visitantes florais e potenciais polinizadores da castanheira-do-Brasil (Bertholletia excelsa) em cultivo, no municpio de Itacoatiara-AM. 2007.
62
Figura 1: Abundncia relativa das abelhas coletadas nas flores de uma rvore no A) primeiro (5%), B) segundo (25%) e C) terceiro (50%) momento da florada da castanheira-do-Brasil (Bertholletia excelsa), no municpio de Itacoatiara (AM) em 2007.
abelhas/ espcie
20 19
19
4 7
Xylocopa frontalis Centris denudans Eulaema meriana Centris americana Bombus transversalis Eufrisea purpurata Eulaema mocsaryi
188
abelhas/ espcie
18 22 2 5 4 124 5
Xylocopa frontalis Centris denudans Eulaema meriana Centris americana Eulaema mocsaryi Epicharis conica Epicharis zonata
abelhas/ espcie
6 28
2 3
Xylocopa frontalis Centris denudans Eulaema meriana Eulaema mocsaryi Epicharis conica Epicharis flava Megachile sp. 1 Eufrisea flaviventris Centris denudans
37 11
63
Figura 2: Abundncia relativa das abelhas coletadas nas flores durante todo perodo de florao da castanheira-do-Brasil (Bertholletia excelsa), no municpio de Itacoatiara (AM) em 2007.
Abundncia de abelhas visitando B. excelsa
2 5 32 21 4 6 19 36 31 340 66 6
Xylocopa frontalis Centris denudans Eulaema meriana Centris americana Bombus transversalis Eufrisea purpurata Eulaema mocsaryi Epicharis conica Epicharis flava Epicharis zonata Megachile sp. 1 Eufrisea flaviventris Centris denudans
Agradecimentos
Empresa Agropecuria Aruan, pelo espao cedido execuo do trabalho e ao proprietrio Sr. Sergio Vergueiro, pelo incentivo pesquisa e apio. Ao Dr. Warwick Kerr pela indicao da propriedade. Dra. Mrcia Maus da Embrapa (Cpatu-Belm), pela contribuio na conduo dos trabalhos. Capes, pela bolsa de estudos que possibilitou a conduo do trabalho. Universidade Federal do Cear.
Referncia Bibliogrficas
Cavalcante MC (2008). Visitantes florais e potenciais polinizadores da castanheira-do-brasil (Bertholletia excelsa H. & B.), na floresta Amaznica. Tese (Mestrado) Departamento de Zootecnia, UFC, Fortaleza. IBGE (2006). Produo da extrao vegetal e da silvicultura. (ftp://ftp.ibge.gov.br/Producao_Agricola) Kremen C, Williams NM, Thorp RW (2002). Crop pollination from native bees at risk from agricultural intensification. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 99, 1681216816. Kremen C, Williams NM, Aizen MA, Gemmill-Herren B, Lebuhn G, Minckley R et al. (2007). Pollination and other ecosystem services produced by mobile organisms: a conceptual framework for the effects of land-use change. Ecol. Lett., 10, 299314. Pinheiro E e Albuquerque M (1968). Castanha-do-par: In: BRASIL. Ministrio da Agricultura. Livro anual da agricultura. Braslia, 224-33. Ricketts, T.H; Regetz, J.; Steffan-Dewenter, I.; Cunningham, S.A; Kremen, C.; Bogdanski, A.; Gemmill-Herren, B.; Greenleaf, S.S; Klein, A.M; Mayfield, M.M; Morandin, L.A; Ochieng, A; Viana. B.F. (2008). Landscape effects on crop pollination services: are there general patterns? Ecology Letters, 11, 499-515.
64
Silva, F.A (2002). Aplicao de microondas no processo de beneficiamento de castanha-do-Brasil (Bertholletia excelsa). Tese (Mestrado), Departamento de Engenharia de Alimentos, Faculdade de Engenharia de Alimentos, UNICAMP, Campinas. Zuidema, P.A (2003). Demography and management of the brazil nut trees (Bertholletia excelsa). Riberalta: PROMAB, scientific series 6, 111 p. (Disponvel em http://www.promab.org/index_ esp.html)
65
Risk Assessment of GM Cotton to Flower Visitors in Brazil.

Carmen Pires1, Carolina F. Cardoso2, Maria A. Lima3, Fernando A. Silveira2, Lcio A. O. Campos3, Paulo A. V. Barroso4, Edison Sujii1 and Eliana Fontes1. 1 Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, Distrito Federal. 2 Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, Minas Gerais. 3 Universidade Federal de Viosa, Viosa, Minas. 4 Embrapa Algodo, Campina Grande, Paraba. Corresponding author: Carmen Pires, Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, Caixa Postal 02372, Braslia, DF, Brasil, 70.849-970, E.mail: cpires@cenargen.embrapa.br, Fone: (61) 34484682, Fax: (61) 34484673
Abstract
Flower visitors are an important ecological group for environmental risk analysis of genetically modified cotton because of the possible direct effects of the transgene on pollination service and pollen transportation and gene flow. Flower visitors were surveyed in three cotton species and five production areas in Brazilian Mid-west. Seventy seven species of wild bees were colleted on cultivated cotton, Gossypium hirsutum latifolium, besides Apis mellifera. The bee faunas were different among the sampling sites with only two species out of 78 being common to all areas. The large number of species and the difference on local bee fauna makes the selection of priority species on a regional scale necessary before analysis of potential impacts of Bt cotton are proceeded. The framework outlined by the GMO ERA Project (www.gmo-guidelines.info) was used for species prioritization. From four species preliminarily selected, Trigona spinipes and A. mellifera were used as model for the development of bioassay methodology for toxicity tests on larval stages. In addition, we studied, in the field, the forage behaviour of the most abundant pollinator species on cultivated cotton and G. barbadense, wild cotton, to evaluate the role of the selected species on pollen transference and what resource those species carry to the nest (pollen/nectar). The degree of exposure of that species to the toxin expressed by the plant was accessed throughout this study. These results will support the development of strategies to minimize or prevent gene flow among cotton species and to promote the co-existence between GM and non-GM cotton. Key words: biossafety, bees, gene flow, Gossypium hirsutum, Gossypium barbadense.
Introduction
Embrapa - Brazilian Enterprise for Agriculture Research supported a network of biosafety research projects with the objective to develop methodologies for the environmental risk assessment of genetically modified (GM) plants. One project focused on insect resistant GM cotton. This crop raises
66
important environmental risk assessment (ERA) issues in Brazil. Cotton is cultivated in small and large areas and in regions with distinct environmental conditions. A high diversity of arthropods is found associated with the genus Gossypium and significant variations exist among different regions. Wild relatives of cotton occur in the country, what raises the possibility of gene flow and possible reductions of crop genetic diversity. The analyses of environmental risk of GM plants begin with the identification of important ecological functions in production systems and natural environments that could be affected by the introduction of a GM plant. In the case of cotton in Brazil, four ecological groups were selected: natural enemies, non-target herbivores of the GM plant, pollinators and soil micro-organisms, besides the issue of transgene flow to wild cotton species. In this context, flower visitors were considered as an important ecological function for ERA because of the possible direct effects of Bt cotton on pollination service in natural and agroecosystems, and the role of flower visitors on pollen transportation and consequent gene flow. With regard to non-target organisms, for assessing the environmental safety of GM cotton resistant to insects it was used the methodology proposed by Hilbeck et al. (2006) to: identify the possible adverse effects on biodiversity; select functional groups (or ecological functions) for risk assessment; select species and the ecosystem processes. The first step in implementing this methodology was the construction of lists of species considering the different production regions and production systems (Arpaia et al. 2006, Hilbeck et al. 2006). Official lists of endangered species can help in that process, but publications with faunistic surveys are indispensable. Data from literature on biodiversity associated with cotton to the Brazilian situation was initially incomplete. In the specific case of pollinators, even species of bees that does not occur in the neotropical region are erroneously cited in the national literature as pollinators of cotton in the country (Silveira, 2003).
Flower visitors inventory

Initially, for selecting species of pollinators for the ERA, inventories of flower visitors in Gossypium hirsutum var. latifolium were conducted in different regions of production during the years 2003, 2004, 2005 and 2006 (Cardoso 2008; Pires et al. 2006). Additionally, we collected bees visiting the wild/ feral species of G. barbadense, G. mustelinum and G. hirsutum var. marie-galante (moc cotton) in one location in Paraba satate in 2003, and in G. barbadense and G. mustelinum in the Federal District in 2005, 2007 and 2008. The studies on G. hirsutum latifolium were conducted on commercial farms with and without insecticide applications and also on experimental fields. For the wild species, the samplings were conducted on individuals planted in the experimental fields and also in backyard plants kept in rural areas. In general, the surrounding landscape in which the sampling areas were inserted consisted of a mixed of landscape elements including, pasture, other crops, riparian vegetation and Cerrado vegetation, most of the natural vegetation with high anthropic interference. Information about diversity and abundance of bees on flowers was obtained. Bees are the main flower visitors of cultivated and wild/feral species of cotton. Taking in account the flower visitor sampling of 2003 in Federal District and 2005 in Bahia, Gois, Mato Grosso and So Paulo states, from 153 insect species collected on flowers, 47.40% (72 species) are from three families of bees (Apidae, Halictidae, Megachilidae) and 49.78% (1,630) of the total number of individuals collected (3,274) are bees (Pires et al. 2006). One species of the genus Exomalopsis is a new species, not described in the literature. As predicted, more species were collected in areas without insecticide application and in areas nearby natural vegetation.
67
Seventy seven species of wild bees were colleted on cultivated cotton, G. hirsutum latifolium, besides Apis mellifera, a domesticated species introduced in the country 163 years ago for commercial purpose (table 1). In G. hirsutum latifolium, 48 species of bees were collected in the Federal District (DF), 19 in Bahia (BA), 29 in Mato Grosso (MT), nine in Gois (GO), five in So Paulo (SP) and only Apis mellifera in Cear (CE). The most abundant wild species on flowers of G. hirsutum were: Geotrigona mombuca (BA), Melissoptila cnecomala (DF), Paratrigona lineata (DF, MT), Partamona mulata (MT), Trigona spinipes (DF, BA), Tetragonisca angustula (SP), Scaptotrigona depilis (GO) and Xylocopa hirsutissima (GO). On the wild species of Gossypium, 23 species were collected in the state Table 1. Absolute and relative abundance of the most abundant species of bees collected on Gossypium hirsutum latifolium flowers in three Brazilian states from 2003 to 2006. States and year of sampling Absolute1 and relative2 Abundance NTotal = 164 Apis mellifera: 116 (4.46) 70.73% Trigona spinipes: 16 (0.62) Geotrigona mombuca: 8 (0.31) Examalopsis sp.2: 5 (0.19) Paratrigona lineata: 3 (0.12) NTotal = 1,232 Apis mellifera : 864 (5.78) 70.13% Paratrigona lineata: 99 (0.66) Melissoptila cnecomala: 77 (0.52) Trigona spinipes: 39 (0.26) Melissodes nigroaenea: 31 (0.21) NTotal = 2,043 Apis mellifera: 17.11 (1905) 93.25% Paratrigona lineata: 0.24 (27) Alepidosceles cfr. imitatrix: 0.23 (26) Partamona mulata: 0.22 (25) Melissodes nigroaenea: 0.11 (12) Sampling effort 3 (per year, in hours)
Bahia (2005) Federal Distrito (2003 to 2006) Mato Grosso (2005)

1 2
60h
2003 = 40.5h 2004 = 43.2h 2005 = 16.3h 2006 = 39.6h
111.30h
Absolute abundance = total number of individuals per species Relative abundance (number in parenthesis) = number of individuals per hour. The relative abundance of each species in the different locals was calculated dividing the total number of individuals by the sampling effort. 3 The sampling effort in each local, expressed in hours, was calculated multiplying the number of hours of sampling by the number of collectors. NTotal = total number of specimens collected per state.
68
of Paraba, 10 in DF and three species in the northwest of Minas Gerais. In the state of Paraba, Ceratina sp.3 and C. chloris were the most abundant species, followed by Melitoma segmentaria, Lithurgus huberi, Ptilothrix cfr. plumata, T. spinipes and Augochlora sp.2. Other insects were collected in lower abundance. Apis mellifera was the most abundant species on cultivated cotton in all sampling areas, however, with very low abundance on the wild species and was not found in G. mustelinum. Only three specimens of A. mellifera were found on G. barbadense out of total 316 individuals collected in 2007 and 2008 (V. Pires, unpublished data). The bee faunas on cultivated cotton were very different among the sampling sites with only two species out of 78 being common to all cotton-producing areas. The large number of flower-visiting species and the difference on local bee fauna make the selection of priority species on a regional scale necessary before analysis of potential impacts of Bt cotton are proceeded.
Species selection for ERA

Based on the 2003 inventory, a list of possible pollinator species was compiled for Mid-west region, the largest cotton production area. The framework and criteria outlined by the Arpaia et al (2006) and Hilbeck et al (2006) were used for species prioritization: a) geographic distribution, b) abundance in the crop and the surrounding environment, c) association with the crop, d) significance as pollinator on GM crop, in others crops and in natural areas, e) direct probability of exposure to Cry1Ac protein insecticide and for establishment of risk hypotheses and planning experiments to test these hypotheses. Information from literature about life history and ecology of different species was used in the process. Even with lack of information for the majority of the wild bees, such as significance as pollinator, four species were preliminarily selected. From those, one of the wild species (Trigona spinipes) and Apis mellifera were used as model for the development of bioassay methodology for acute toxicity and sublethal effect evaluations on worker larvae (Siqueira, 2008). For T. spinipes the natural food collected in the nests was used in the bioassays. The concentration of the toxin to be tested was defined, taking into account the amount of pollen in the larval food and the level of expression of the toxin in the cotton pollen. The activity of the toxin after incorporation in the natural food of bees was tested in a bioassay using a target insect. A protocol was developed for worker bees reared from egg to adult (91% of survivorship in the control). No significant differences among the tested treatments were found in relation to mortality, corporal size and weight, and developmental time of the larvae (Siqueira, 2008). These results indicated that the developed methodology is adequate for toxicity tests on T. spinipes larvae and could easily be adapted to other stingless bee species.
Base line information and ERA

To fill out the gaps in the base line information (see Species Selection Matrix in Arpaia et al 2006) and proceed with the risk assessment, the forage behaviour of the most abundant bee species on G. hirsutum latifolium and G. barbadense was studied in the field. These studies were conducted to evaluate the role of different species on pollen transference and consequent gene flow, and to confirm what resources those species carry from the cultivated cotton to the nest (pollen and/or nectar). Knowledge about forage behaviour is important to access the degree of exposure of that species to the GM crop and to the toxin expressed by the plant. This information also will be useful to support the development of strategies to minimize or prevent gene flow among cotton species and to promote the co-existence between GM and conventional cotton fields.
69
Twelve bee species were common to G. hirsutum latifolium and G. barbadense (V.Pires, unpublished data). The majority of wild bee species, such as Paratrigona lineata, besides A. mellifera, collected preferentially nectar in the flowers of cultivated cotton, G. hirsutum latifolium (Cardoso, 2008). During the foraging behavior, A. mellifera rarely touchs the stigma, but touchs the anthers and loads pollen on the body surface, which could be carried to their nests. Although, Melissodes nigroaenea and Melissoptila cnecomala occur in very low abundance on cultivated cotton flowers, they collected pollen on approximately 100% of the flower visits. These two wild species were more common on cotton areas without or with low insecticide application and in cotton areas nearby natural vegetation, such as experimental fields. This behavior favors the exposure of these species to the Bt protein contained in the pollen grain. Experiments of first visit showed that M. nigroaenea, M. cnecomala and A. mellifera are equally efficient pollinators of cultivated cotton. Melissodes nigroaenea touched the stigma in approximately 100% of the flower visits on cultivated cotton (Cardoso, 2008) and on G. barbadense (V. Pires unpublished data). Apis mellifera, due to the high abundance and distribution on the different cotton production areas could be considered the major carrier of pollen among flowers of cultivated cotton, G. hirsutum latifolium. However, because of their almost absence on flowers of G. barbadense, the chances of A. mellifera to transport pollen from cultivated cotton to this wild cotton species is very small (V. Pires unpublished data). Additional studies run on field conditions and in different regions of Brazil are necessary to evaluate the role of bees on natural cross-pollination and consequent gene flow from cultivated cotton to G. barbadense. Our experience with visiting bees on cotton shows that, for many crops with potential to be genetically modified, relevant information needed for the evaluation of the potential risk to non-target organisms, especially bees, and those needed to support the development of strategies of gene flow management is not yet available for the Brazilian environmental conditions. Also, we found that significant resources and time needs to be allocated to raise information that forms the baseline for a solid, scientifically founded risk assessment.
Acknowledgments
We would like to thank the FINEP, FACUAL, CAPES and CNPq for the financial support.
References
Arpaia S, Fonseca VLI, Pires CSS, Silveira FA (2006). Non-target and biodiversity impacts on pollinators and flower visiting insects. In: Environmental Risk Assessment of Genetically Modified Organisms: A Case Study of Bt Cotton in Brazil (HILBECK A, ANDOW D, FONTES E, eds.). CABI Publishing, London, 155-174. Cardoso CF (2008). Abelhas (Hymenoptera, Apoidea) nas flores do algodoeiro (Gossypium hirsutum var. latifolium cv. Delta Opal - Malvaceae) no Distrito Federal - contribuio aos estudos de biossegurana, no contexto da introduo de variedades transgnicas no Brasil. Masters thesis, Instituto de Cincias Biolgicas, UFMG, Belo Horizonte. Hilbeck A, Andow D, Fontes E. (2006). Environmental Risk Assessment of Genetically Modified Organismos - Methodologies for Assessing Bt Cotton in Brazil. v. 2, CABI Publishing, London. Pires C, Silveira FA, Cardoso CF, Oliveira GM, Pereira FFO, Souza VV, Nakasu EYT, Paes JS de O, Teles E, Silvie P, Rodrigues S, Miranda J, Scomparini A, Bastos C, Oliveira GS, Oliveira
70
JE, Santos JB, Barroso PAV, Sujii E, Fontes E (2006). Visitantes florais em espcies cultivadas e no cultivadas de algodoeiro (Gossypium spp.), em diferentes regies do Brasil. Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia (2006). Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento no. 148. Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, Braslia. Silveira F. 2003. As abelhas e o algodo Bt no Brasil Uma avaliao preliminar. In: PIRES, C. S. S. , FONTES, E. M. G., SUJII, E. R. (eds). Impacto Ecolgico de Plantas Geneticamente Modificadas O Algodo Resistente a Insetos como Estudo de Caso. Braslia, EMBRAPA. p. 195-215 Siqueira MAL (2008). Avaliao dos efeitos da toxina Cry1Ac do Bacillus thuringiensis em abelhas indgenas sem ferro e africanizadas. Doctoral thesis, Departamento de Biologia Animal, UFV, Viosa.
71
Restoring and Monitoring Pollinator Communities and Function in Californias Central Valley
Claire Kremen1, Katharina Ullman2, and Mace Vaughan2 Dept of Environmental Sciences, Policy and Management, University of California, 137 Mulford Hall, Berkeley, CA 97520-3114 USA; 2. Xerces Society, 828 SE Hawthorne Blvd., Portland, Oregon 97215 USA Previous work has shown that bee pollinator communities in the most intensively farmed regions of Californias Central Valley are depauperate and low in abundance relative to less intensively farmed regions. Although on-farm management is probably partially responsible for some of these differences, the principal factor appears to be the proximity and proportion of the landscape that contains natural or semi-natural habitat. Is it possible to restore pollinator communities and pollination function within this intensively farmed region by restoring pollinator habitat? Since 2006, we have worked with farmers in this region to install pollinator-friendly riparian buffers (20 30 m but extending up to several km in length) along the edges of farm fields, and have monitored pollinator communities before and after restoration on both restored and control sites along 350 m transects using a beyond-BACI design. We encouraged farmers to utilize buffer plantings of shrubs, forbs and trees that bloom successively across the flight periods of the most important crop pollinating bees. We also selected plants that appear to be the most important floral resources for this group of bees, based on our prior plant-pollinator network studies. Each year, we monitor pollinator communities utilizing two main techniques standard for sampling these taxa (netting at flowers and pan-trapping with blue, white and yellow bowls, http://online.sfsu.edu/~beeplot/) three times during the spring-summer season. We simultaneously monitor floral diversity and abundance, vegetation, and score sites for potential bee nesting suitability. We are also developing a protocol for monitoring pollination function at replicated sets of potted crop plants (canola, sunflower) at each site. Use of potted plants assures both that nutrients, water and soil can be controlled, and that we can measure pollination function on the same crop across all restored and control sites. The measure of function at each site will be the difference between seed set for flowers exposed to the ambient pollinator community compared to flowers given supplemental cross-pollen to establish maximum seed set. Finally, we have developed a protocol for training citizen scientists in collecting observational data on the pollinator fauna. We will train citizen scientists using this protocol, which classes pollinators into rough categories) and then test the effectiveness of data collected by citizen scientists in identifying diversity and abundance trends among sites by comparing it against specimen-based data from netting and pan-traps collected simultaneously across sites. The talk will primarily explain the study design and methods employed, given that only the data from before restoration is currently available for analysis.
72
A Polinizao de Culturas Oleaginosas com Potencial para Produo de Biodiesel: Um Estudo De Caso Com A Mamona (Ricinus communis L.)1
Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Breno Magalhes Freitas, Marcelo de Oliveira Milfont, Eva Mnica Sarmento da Silva3 1 Parte da dissertao de mestrado do primeiro autor. rizzardo.zoot@gmail.com 2 Universidade Federal do Cear, Centro de Cincias Agrrias, Departamento de Zootecnia, Av. Mister Hull, s/n, Campus do Pici CP 12168 CEP 60021-970. Fortaleza, Cear, Brasil. freitas@ufc.br. Home page: www.abelhas.ufc.br. 3 Universidade Federal do Vale do So Francisco, UNIVASF. Colegiado de Zootecnia, avenida Jos de S Manioba, s/n Centro - Petrolina, PE. Pollination of oil-producing crops with potential to biodiesel production: a case study with castor bean (Ricinus communis L.)
Abstract
Brazil has a well-succeeded historic in biofuel (alcohol) production and is now investing heavily in biodiesel derived from a variety of crops. However, little is known about pollination system in most of these crops. The present work aimed to assess the pollination requirements, role of floral visitors and potential yield increment with bee introduction to a castor bean (Ricinus communis L.) crop. The work was carried out in Ncleo de Produo Comunitria Santa Clara (NPCSC), county of Canto do Buriti, state of Piau, Brazil. Results showed that honeybee (Apis mellifera) is the only floral visitor in commercial crops, flowers set fruits by both hand cross-pollination and hand autopollination, but the latter sets significantly (p<0.05) higher numbers of fruits. Wind is the main pollinating agent, but areas with honeybees produce significantly (p<0.05) heavier seeds, with more oil content and oil with higher caloric value. It was concluded that the castor bean plant pollination system is anemophily with predominance of autopollination, but the action of pollen harvesting by honeybees probably increases the amount of self pollen in suspension around the panicle affecting the crop productivity producing heavier fruits and seeds and greater amounts of oil of higher caloric value. Key words: Apis mellifera, anemophilly, biofuel, pollinator
Introduo
O Brasil possui um histrico bem sucedido e reconhecimento mundial na produo de biocombustveis com o Programa Nacional do lcool. Atualmente, vem investindo no programa de produo
73
de biodiesel, combustvel com grandes vantagens ecolgicas e sociais quando comparado ao combustvel tradicional derivado do petrleo, o diesel (Holanda, 2004). O biodiesel pode ser produzido a partir de uma srie de espcies vegetais, como o babau (Orbygnia speciosa Mart., Barb. Rodr.), canola (Brassica napus L. e Brassica rapa L.), dend (Elaeis guineensis, Jacq.), girassol (Helianthus annuus L.), mamona (Ricinus communis L.), pinho manso (Jatropha curcas L.), soja (Glycini max L., Merril), entre outras, bem como a partir de gordura animal e restos de frituras. Devido ao elevado teor de leo nas sementes, tolerncia a diversas condies edafoclimticas e adaptao ao semi-rido, a mamoneira pode ser considerada uma alternativa para a agricultura familiar, sendo a mais difundida para a produo de biodiesel no Nordeste Brasileiro. uma espcie vegetal oleaginosa de origem africana, que se acredita ter sido introduzida no Brasil pelos escravos durante a colonizao portuguesa. Adaptou-se to bem s condies brasileiras que hoje encontrada em vrias regies, desde o Rio Grande do Sul at o Amazonas, crescendo de forma subespontnea em reas rurais, cuja vegetao nativa original foi removida e tambm em terrenos no edificados de reas urbanas. Atualmente, cultivada em vrios pases ao redor do mundo, sendo a ndia, China e Brasil os maiores produtores. Seu cultivo ainda visa extrao do leo, mas como principal foco a produo de biodiesel. Apesar do potencial produtivo da cultura da mamona, observado em ensaios experimentais (Severino et al., 2006), com produes acima de 1500 kg/ha para diversas variedades cultivadas no municpio de Quixeramobim, serto cearense, a produtividade mdia brasileira baixa, 673kg/ha (CONAB, 2007). Mesmo com o acentuado acrscimo de produtividade em relao aos 321 kg/ha do final da dcada de 90, este valor bem inferior China (978kg/ha), ndia (1.221 kg/ha) e a mdia mundial (1.014 kg/ha) (Alves et al., 2004). No entanto, questes relacionadas produtividades inferiores ao potencial agronmico da cultura no so peculiaridades explorao comercial da mamona, mas um problema que vem afetando a maioria dos cultivos mundiais e que tm preocupado produtores e entidades envolvidas com o sistema agrcola global (FAO, 2004). Mesmo com o crescimento da agricultura mundial a partir de 1960, que transformou pequenos plantios manuais em grandes reas de produes intensivas e tecnificadas, com monoculturas, plantio direto, aplicaes macias de defensivos agrcolas etc., levantamentos tm mostrado um crescente declnio na produtividade de algumas culturas. Quando avaliadas em pequenos canteiros so de tima produo, mas em grandes reas nem sempre atingem os objetivos previstos. Isto pode ser atribudo a vrios fatores, como maior exigncia de nutrientes, pH do solo, requerimento de gua e clima, alm da perda de polinizadores naturais que so responsveis pela polinizao de diversas espcies vegetais cultivadas pelo homem. A perda de agentes biticos em reas agrcolas j chegou a situaes to extremas que em culturas como ma (Malus domestica Borkh), melo (Cucumis melo L.), maracuj (Passiflora edulis Sims), kiwi (Actinidia deliciosa A. Chev, C.F. Liang & A.R. Ferguson), melancia (Citrullus lanatus Thunb., Matsun & Nakai), entre outras, para assegurarem nveis de produtividade competitivos no mercado e que possam gerar algum lucro, os produtores tm que optar entre alugar abelhas ou pagar pessoas para fazerem polinizao manual (Free, 1993; Freitas, 1995). A mamoneira, no entanto, uma incgnita. Embora existam indicaes de que seja polinizada pelo vento (Tvora, 1982; Beltro e Severino, 2006), no h nas literaturas nacional e internacional qualquer trabalho consistente que possa fornecer alguma informao sobre os requerimentos de polinizao desta espcie. Assim sendo, o presente trabalho se props a investigar aspectos da biologia floral, requerimentos de polinizao e o papel de agentes polinizadores biticos na sua polinizao.
74
Material e Mtodos
O trabalho foi realizado em uma rea de 3.115ha destinados ao plantio de mamona, predominantemente da variedade BRS 149 Nordestina, no Ncleo de Produo Comunitria Santa Clara (NPCSC), situado no municpio de Canto do Buriti - PI (080832,4S e 432712,9W e 441m de altitude. O clima do municpio Semi-rido mido, com temperatura mdia de 30,2C e 64,80% de umidade relativa (Medeiros, 2000). As avaliaes referentes a biologia floral foram feitas atravs da marcao de flores masculinas e femininas e acompanhamento desde a antese at a senescncia ou vingamento de frutos, aos 15 dias. Quanto ao requerimento de polinizao da cultura e eficincia de polinizao por Apis mellifera foram realizados atravs do mtodo de ensacamento de flores com telas de fil ou sacos de papel, e com avaliao de reas com ou sem introduo de colnias de abelhas melferas, alojadas em colmias racionais, em cultivo de mamoneira. A anlise estatstica foi realizada atravs da metodologia de Modelos Lineares Generalizados (Demtrio, 1993; Dobson, 2001). A resposta considerada segue uma distribuio binomial(n,p) e a funo de ligao utilizada foi a logit=log(p/(1-p)), sendo p a proporo de frutos vingados. Os frutos das reas com e sem introduo de abelhas foram colhidos e conduzidos aos Laboratrios de Nutrio Animal e Laboratrio de Sementes da Universidade Federal do Cear, Fortaleza - CE, para determinaes da matria seca, extrato etreo, energia bruta do extrato etreo (Silva e Queiroz, 2002), e testes referentes qualidade fisiolgica das sementes: Teste de germinao (Brasil, 1992), vigor-primeira contagem de germinao, emergncia de plntulas (Nakagawa, 1999), ndice de velocidade de emergncia (Maguire, 1962) e peso seco da parte area. A comparao das mdias foi realizada atravs da ANOVA, para p<0,05.
Resultados e Discuso
A mamoneira mostrou-se uma planta monica com racemos terminais, que na variedade BRS149 Nordestina constitudo basicamente por flores femininas na regio apical e masculinas na poro basal, com raras flores hermafroditas. A antese ocorreu a qualquer momento do dia ou durante a noite e, 15 dias aps a fecundao, os frutos apresentaram-se desenvolvidos, com os estiletes secos, ou as flores no fecundadas em senescncia. Devido ao padro de abertura das flores masculinas e deiscncia das anteras, a maior disponibilidade de plen ocorreu entre 6h e 8h da manh, decrescendo nas horas mais quentes do dia, e apresentando um leve aumento a partir das 16h com abertura de novas flores (Rizzardo, 2007). Este decrscimo da disponibilidade de plen estava atrelado a senescncia de grande parte das flores masculinas (Figura 1). Em plantio comercial, a Apis mellifera foi a nica espcie de abelha observada visitando as flores/nectrios da mamoneira, constituindo-se no visitante mais freqente, tanto para coleta de plen quanto de nctar. Por outro lado, em mamoneiras situadas prximas a vegetao nativa, alm de formigas (Formicidae), vespdeos (Vespidae) e abelhas Apis, a abelha sem ferro canudo (Scaptotrigona sp.) tambm foi observada fazendo visitas. A abelha melfera visitou a mamoneira durante todo o dia: a coleta de plen ocorreu principalmente cedo da manh, as 7h, aumentando progressivamente at as 9h, acompanhando a maior liberao de plen pela planta; a coleta de nctar teve incio por volta das 7h, estendendo-se por todo dia, com picos as 9h e 15horas (Rizzardo,2007). No h na literatura mundial referncias ao padro de forrageamento de Apis ou qualquer outra espcie de abelha em R. communis.
75
60 50
Liberao de plen Abscio Curva ajustada equao y = -0,2348x4 + 4,0354x3 - 21,833x2 + 35,039x + 30,714 R 2 = 0,9515 L
Nmero de flores m
40 30 20 10 0 06:00 08:00
10:00
12:00 Horrio
14:00
16:00
18:00
Figura 1 Padro de disponibilidade de plen no ambiente e formao da camada de absciso de flores masculinas da mamoneira (Ricinus communis var. BRS 149 Nordestina) no Campus do Pici da Universidade Federal do Cear. Fortaleza-CE. 2007. A mamona vingou significativamente (p<0,01) mais frutos quando autopolinizada do que por meio de polinizao manual cruzada (Tabela 1). Embora possa ser polinizada e vingar frutos tanto por meio do prprio plen quanto do de outras plantas da mesma espcie, conforme observado por Gurgel (1945) e Ribeiro Filho (1966), a mamoneira se beneficiou mais da autogamia, uma vez que a autopolinizao manual, ao colocar nos estigmas uma grande e ilimitada quantidade de auto-plen, vingou mais de 98% de vingamento, enquanto que o mesmo tratamento realizado com plen cruzado levou a apenas 80,49% de vingamento (Tabela 1). Segundo Tvora (1982), a mamoneira uma planta predominantemente autgama, mas isto no acarreta em problemas de endogamia para a cultura. O tratamento de polinizao restrita com fil apresentou ndices de vingamento semelhantes aos obtidos com a polinizao manual cruzada e polinizao livre. Isto permite inferir que o vento o principal agente polinizador da mamoneira, j que as flores protegidas por fil da visitao de agentes Tabela 1 Vingamento de frutos da mamoneira (Ricinus communis L.) sob diversos tratamentos de polinizao. Canto do Buriti, PI, 2006. Tratamentos de Polinizao Autopolinizao manual Livre com introduo de abelhas Restrita com fil Livre (Testemunha) Polinizao cruzada manual Restrita com papel N de flores por Tratamento 75 47 166 60 82 61 Vingamento 74 44 143 49 66 14 (%) 98,67 a 93,62 b 86,14 b 81,67 b 80,49 b 22,95 c p-valor 0.00806 0.08132 0.40714 7.55x10-06 0.85966 2.12x10-09
Mdias seguidas por letras diferentes diferem significativamente entre si, (p<0,05).
76
biticos vingaram igualmente quelas expostas aos visitantes florais (polinizao livre testemunha). Essas observaes esto de acordo com outros autores que tambm relatam anemofilia na mamoneira (Tvora, 1982; Beltro e Severino, 2006). No entanto, o vento, seja no caso da polinizao restrita com fil ou na polinizao livre, promove essencialmente a polinizao cruzada entre as plantas, pois seus ndices tambm no diferem daqueles produzidos pelo tratamento de polinizao cruzada. A polinizao restrita com saco de papel produziu resultados insignificantes j que o plen cruzado trazido pelo vento no pde penetrar nos sacos e tambm permite concluir que a planta no possui mecanismos de autopolinizao. Provavelmente, a taxa de alogamia na mamoneira seja bem maior do que os 40% preconizados por Gurgel (1945) e Ribeiro Filho (1966). Finalmente, pode-se concluir que para incrementar a produtividade da mamoneira seria necessrio aumentar a quantidade de auto-plen depositada nos estigmas a nveis similares aos produzidos pelo tratamento de autopolinizao manual. O tratamento livre com introduo de abelhas foi o que alcanou percentuais de vingamento mais prximos do de autopolinizao manual. De fato, a anlise estatstica mostra significncia marginal (p=0,081) com relao ao vingamento em reas com e sem introduo de abelhas (93,62% contra 81,67%, respectivamente), sugerindo haver realmente uma diferena no percentual de vingamento (14,63%) quando as abelhas esto presentes ou ausentes (Rizzardo, 2007). Novos experimentos com um nmero de repeties maiores do tratamento de polinizao livre com abelhas potencialmente demonstrariam essas diferenas com maior clareza. Considerando que a deiscncia da antera da mamoneira explosiva e dispara ao toque (Bianchini e Pacini, 1996) e que o plen da mamoneira leve e pulverulento, facilmente mantido em suspenso no ar e carregado pelo vento, possvel que devido maneira pela qual as abelhas melferas coletam plen, rebuscando as anteras com as pernas dianteiras e jogando o plen sobre o corpo (Winston, 1987), uma grande quantidade deste seja dispersado no ar, aumentando a proporo de auto-plen que atinge os estigmas das flores femininas na mesma pancula. Isto elevaria os ndices de autopolinizao, explicando o percentual de vingamento marginalmente superior do tratamento livre com introduo de abelhas em relao testemunha (livre, sem introduo de abelhas) e prximo ao de autopolinizao manual. Finalmente, necessrio observar que o tratamento com introduo de abelhas foi, dentre os tratamentos que podem ocorrer naturalmente no campo, aquele que produziu os melhores ndices de polinizao, uma vez que a autopolinizao manual seria uma condio ideal, mas invivel de se praticar em larga escala at o presente momento (Rizzardo et al., submetido). Comparando-se os resultados obtidos em reas com e sem introduo de colnias de A. mellifera, o peso mdio do racemo secundrio foi 63,77% superior ao peso daqueles produzidos na rea sem introduo de abelhas (66,67g e 40,71g, respectivamente). O nmero de frutos por cacho comportouse da mesma forma, com acrscimo de 41,35%, aumentando a produo mdia de 15,84 para 22,39 frutos. Bem como no peso dos frutos, onde o acrscimo foi de 15,15%, elevando-se de 2,31g na rea sem introduo de abelhas para 2,66g para a rea com colmias de abelhas melferas (Tabela 2). Provavelmente as abelhas contriburam para aumentar a disponibilidade de auto-plen nos estigmas, promovendo uma melhor polinizao, tanto quantitativamente quanto qualitativamente. A maior quantidade de gros de plen presentes no ar aumenta a possibilidade de que estes cheguem aos estigmas de forma mais homognea, em maior quantidade e beneficiando mais flores. Quanto maior a quantidade de gros de plen depositados no estigma, melhor ser a competio destes em fecundar o vulo, possibilitando que os gros com maior viabilidade, vigor e velocidade para emisso do tubo polnico, possam efetuar a fecundao (Free, 1993). Para as anlises fsico-qumicas, as sementes provenientes da rea povoada com colnias de abelhas melferas apresentam valores significativamente superiores (p<0,05) em todos os parmetros
77
analisados. Alm do maior peso registrado, as sementes possuem maior teor de leo (extrato etreo) e energia bruta, quando comparadas com as sementes oriundas de rea sem introduo de abelhas. Os pesos de 100 sementes (54,46g com abelhas e 47,32g sem abelhas) esto abaixo daqueles relatados como padro, 68g, pela Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria (EMBRAPA Algodo, 2001), produtora da BRS 149 Nordestina. Porm, Severino et al. (2004), encontraram variao entre 36,0 a 75,0g no peso de sementes da mamoneira BRS 149 Nordestina, mostrando que essa caracterstica bastante instvel nesta variedade (Tabela 2). Tabela 2 Nmero de frutos, peso mdio do racemo secundrio, peso do fruto, avaliao do peso mdio (g) de 100 sementes, extrato etreo e energia bruta do leo de sementes de mamoneira, proveniente de reas com introduo e sem introduo de colmias racionais povoadas com abelhas melferas (Apis mellifera). Canto do Buriti, PI, 2006. Variveis* N frutos por racemo secundrio Peso de racemo secundrio (g) Peso do fruto (g) Peso de 100 sementes (g) Extrato etreo (%) Energia bruta do leo (kcal/kg) rea com colmias 22,39a 66,67a 2,66a 54,46a 54,48a 9006,81a rea sem colmias 15,84b 40,71b 2,31b 47,32b 49,94b 8843,29b N de Repeties 101 101 7** 7+ 7+ 7+
Mdias seguidas por letras diferentes na mesma linha diferem significativamente entre si, (p<0,01). *Dados expressos em matria natural. ** Cada repetio representa o valor mdio de um lote com 100 frutos. + Cada repetio representa o valor mdio de um lote de 25 sementes. O rendimento de leo nas sementes oriundas da rea sem introduo de abelhas, 49,94%, foi superior ao relatado pela EMBRAPA Algodo (2001), 48,90%. Bem como aos 48,09% por Tambascia e Teixeira (1986), e prximo aos 50,20% encontrados por Severino et al. (2006b). Porm, o teor de leo encontrado nas sementes da rea com introduo de abelhas, 54,48%, foi 9,1% superior, (p<0,01), aos obtidos no tratamento sem introduo de abelhas e tambm aos encontrados na literatura, sugerindo que a abelha melfera, de fato, contribuiu para uma melhoria na qualidade dos frutos, no que diz respeito ao contedo de leo. Alm das sementes terem apresentado maior peso e maior teor de extrato etreo, pde-se perceber que a introduo de abelhas em rea de mamona tambm afetou a qualidade do leo produzido, apresentando-se com valor energtico significativamente maior (p<0,01) em relao quela sem introduo de abelhas (Rizzardo, 2007). Costa Neto et al. (2000) encontraram que o leo da mamoneira possui 8.913 kcal/kg. Este resultado superior aos obtidos nas sementes da rea sem introduo de colnias de abelhas, 8.843 kcal/kg, porm, inferiores aos da rea com colmias, 9006,81 kcal/kg. De acordo com Free (1993) e Freitas (1995), a polinizao intermediada pelas abelhas pode contribuir para incrementos na produo de vrias culturas por meio da formao de frutos mais pesados, com maior teor de leo e melhor conformao.
78
Concluses
O presente estudo permite concluir que a mamoneira uma espcie vegetal de polinizao predominantemente anemfila, que aceita tanto a autopolinizao quanto a polinizao cruzada, mas se beneficia principalmente da autopolinizao. A mamoneira constitui fonte de nctar e plen para as abelhas Apis mellifera. A presena de Apis mellifera no cultivo da mamoneira apresenta potencial de aumento na produtividade da cultura, peso de frutos e sementes, teor e energia do leo das sementes.
Agradecimentos
Ao BNB: ETENE-FUNDECI, pelo apoio financeiro ao projeto. FUNCAP e CNPq por bolsas de mestrado para M.O. Milfont e R.A.G. Rizzardo, respectivamente e Produtividade em Pesquisa para B.M. Freitas. Tambm a Brasil Ecodiesel, na pessoa da Dr. Francineuma Ponciano de Arruda, por ceder a rea de estudo e incondicional apoio logstico.
Referncias Bibliogrficas
Alves MO et al. (2004). Possibilidades da mamona como fonte de matria-prima para a produo de biodiesel no Nordeste Brasileiro. Fortaleza: Banco do Nordeste do Brasil. Beltro NEM e Sevevino LS (2006). Ecofisiologia. In: Mamona: o produtor pergunta, a Embrapa responde (Severino LS, Milani M e Beltro NEM, eds.) Embrapa Informao Tecnolgica, Braslia, DF, 171-179. Bianchini M, & Pacini E (1996). Explosive anther dehiscence in Ricinus communis L. involves cell wall modifications and relative humidity. Inter. Journal of Plant, v.157, n.6, p.739-745. BRASIL (1992), Ministrio da Agricultura. Regras para anlise de sementes. Braslia: SNAD/CLAV. CONAB. Quinto levantamento de avaliao da safra 2006/2007. Ministrio da Agricultura Pecuria e Abastecimento. Fevereiro 2007. http://www.conab.gov.br/conabweb/download/safra/5levsafra.pdf. Acessado em 19 fev. 2007. Costa Neto PR et al. (2000). Produo de biocombustvel alternativo ao leo diesel atravs da transesterificao de leo de soja usado em frituras. Qumica Nova, v.23, n.4, p.531-537. Demtrio CGB (1993). Modelos Lineares Generalizados na Experimentao Agronmica, 5o SEAGRO e 38a RBRAS. Porto Alegre, DE/UFRGS. Dobson AJ (2001). An Introduction to Generalized Linear Models. 2nd ed. London: Chapman & Hall/ CRC. EMBRAPA ALGODO. O cultivo da mamona GERANEGCIO. 1998-2001. http://www.geranegocio.com.br/html/geral/mamona/mamona.html, acessado em 14 fev. 2007. FAO (Food and Agriculture Organization) (2004). Conservation and management of pollinators for sustainable agriculture - the international response. In: Solitary bees: conservation, rearing and management for pollination. (Freitas BM, Pereira JOP, eds.) Imprensa Universitria. Fortaleza, CE. 19-20. Free JB (1993). Insect pollination of crops. 2 ed. London: Academic Press. Freitas BM (1995). The pollination efficiency of foraging bees on apple (Malus domestica Borkh) and cashew (Anacardium occidentale L.). Thesis, University of Wales, Cardiff, UK.
79
Gurgel JTA (1945). Estudos sobre a mamoneira (Ricinus communis L.). Piracicaba, s.ed. Holanda A (2004). Biodiesel e incluso social. Braslia: Cmara dos Deputados, Coordenao de Publicaes. Maguire JD (1962). Speed of germination aid in selection aid evolution for seedling emergence and vigor. Crop Science. v.2, n.2, p.176-177. Medeiros RM (2000). Estudo agrometeorolgico para o estado do Piau. Teresina, PI. Nakagawa J (1999). Testes de vigor baseados no desempenho de plntulas. In: Vigor de sementes: conceitos e testes (Krzyzanowski FC, Vieira RD, Frana Neto JB, eds.). Londrina: ABRATES. 1-24. Ribeiro Filho J (1966). Cultura da mamoneira. Viosa, MG: UFV. RIZZARDO RAG, (2007). O papel de Apis mellifera L. como polinizador da mamoneira (Ricinus comunis L.): avaliao da eficincia de polinizao das abelhas e incremento da produtividade da cultura. Dissertao (Mestrado em Zootecnia) Universidade Federal do Cear, Fortaleza. Rizzardo, RAG et al. (submetido) Increasing yield and quality of castor bean (Ricinus communis L.) oil by honey bee (Apis mellifera) pollination. Apidologie. Severino LS et al. (2004). Caracterizao do volume, densidade, germinao e desenvolvimento inicial de sementes de mamona em diferentes faixas de peso. EMBRAPA Algodo, Campina Grande, PB. (Embrapa Algodo. Documentos, 123). Campina Grande. Severino LS (2006). Curiosidades. In: Mamona: o produtor pergunta, a Embrapa responde. (Severino LS, Milani M, Beltro NEM, eds.) Braslia, DF: Embrapa Informao Tecno lgica, p.243-248. Severino LS et al. (2006). Growth and yield of castor bean fertilized with macronutrients and micronutrients. Pesq. Agrop. Bras., v.41, n.4, p.563-568. Silva DJ, Queiroz AC (2002). Anlise de Alimentos: mtodos qumicos e biolgicos. 3 ed. Viosa: UFV, 2002. 235p. Tambascia MB e Teixeira JPF (1986). Mamona: determinao quantitativa do teor de leo. Bragantia, v.45, n.1, p.23-27. Tvora FJAF (1982). A cultura da mamona. Fortaleza: EPACE. Winston ML (1987). The Biology of the honey bee. Harvard University Press.
80
SI MPS IO 6
APRESENTAES ORAIS DOS PS GRADUANDOS DO PROGRAMA DE ENTOMOLOGIA - FFCLRP-USP
Coordenadores: Aline Mackert dos Santos, Cristiano Menezes
81
Reconhecimento em Abelhas Sem Ferro.

Tlio Marcos Nunes (1), Izabel Cristina Casanova Turatti (2), Norberto Peporine Lopes (2), Ronaldo Zucchi (1). (1) Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, So Paulo. (2) Departamento de Fsica e Qumica, Faculdade de Cincias Farmacuticas de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, So Paulo. Universidade de So Paulo, Avenida Bandeirantes, 3900, Ribeiro Preto (SP) 14040-901, Brasil. * Correponding author: Tlio Marcos Nunes Tel.: +55-016-3602-3826; fax: +55-016-3602-3694. E-mail address: tulionunes@usp.br Present address: Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Avenida Bandeirantes, 3900, Ribeiro Preto (SP) 14040-901, Brazil. Recognition in stingless bees: combining chemical and behavioral analysis
Abstract
The ability to discriminate among genetic related individuals has a main importance in the Kin selection Hamiltons theory. Social insects use odor cues in recognition systems, and the main used cues are compounds present in their cuticle. These cues may originate from endogenous and exogenous sources. The exogenous cues may be absorbed from nest materials, food or even from the queen. There are numerous reports concerning the origin of these cues in ants, termites, honeybees and solitary bees, although, little is known about the stingless bees. Therefore, the present work aims at to study the chemical composition of Frieseomelitta varias cuticle and the verification of food and nest materials influence in the constitution of the cues used in recognition systems. A total of 48 compounds were identified in the cuticle of F. varia. The behavioral tests, in agreement with the chemical analyses, showed that the individuals absorb chemical compounds from the nest material. However, the results show that food convergence imply neither in the higher acceptance of the individuals, nor in a chemical convergence. Palavras chave: reconhecimento, abelhas sem ferro, hidrocarbonetos cuticulares, Frieseomelitta varia.
Introduo
Os ninhos de insetos sociais apresentam uma grande variao na complexidade de suas estruturas, abrigando uma srie de recursos indispensveis manuteno da estrutura social, tais como: ovos, larvas, indivduos jovens, estoques de alimento, entre outros. Nesses casos, a capacidade de reconhecimento entre companheiros de ninho de fundamental importncia, impedindo possveis danos causados por inimigos naturais, representados tanto por indivduos da mesma espcie quanto por animais parasitas e cleptobiticos (Wilson, 1971; Hlldobler and Wilson, 1990). O reconhecimento ocorre atravs de duas etapas principais: a liberao de uma pista pelo animal e o reconhecimento dessa pista por um segundo indivduo (Beecher, 1982; Sherman and Holmes,
82
1985). Tanto em invertebrados como vertebrados, o reconhecimento mediado por pistas olfativas (revisado por Hepper, 1986). A utilizao de sinais olfativos provavelmente decorre do baixo custo energtico, tanto na produo das pistas quanto na recepo e no processamento (Alcock, 1993). Diversos estudos qumicos e comportamentais confirmam que as pistas utilizadas no reconhecimento so representadas por compostos qumicos associados cutcula dos insetos, sendo a maior parte dos compostos identificados hidrocarbonetos, divididos em alcanos, alcenos e alcanos com ramificao. (Pfennig et al., 1983; Breed and Stiller, 1992; Singer and Espelie, 1992; Gamboa et al., 1996). A cutcula dos insetos recoberta por uma camada de ceras impermeveis, constitudas por hidrocarbonetos de alto peso molecular, cuja funo primria seria a de proteo contra desidratao (Lockey, 1988). Secundariamente, estes compostos tambm apresentam funes comunicativas, tais como reconhecimento de espcies, importantes para a manuteno social e comportamentos relacionados corte em vrias espcies. Nos insetos sociais, esses compostos esto relacionados discriminao entre companheiros e no companheiros de ninho, reconhecimento de castas, alm de apresentar pistas especficas para cada tarefa em execuo. Alm disso, esses compostos podem indicar dominncia e sinalizar fertilidade. Finalmente, uma outra funo identificada para tais compostos a de feromnio utilizado na marcao de trilhas de forrageamento (Howard, 1993; Clment and Bagnres, 1998; Singer et al., 1998; Vander Meer and Morel, 1998; Steinmetz et al. 2003; revisado por Howard and Blomquist, 2005). Nos insetos sociais, cada indivduo na colnia possui seu prprio perfil de compostos cuticulares, que constitui uma assinatura qumica individual. Essas substncias podem ter origem endgena, ou seja, ser produzidas pelo prprio indivduo, caracterizando uma origem gentica; ou apresentar uma origem exgena, sendo adquiridos a partir do meio externo (Carlin, 1989; revisado por Lorenzi et al., 1996). A origem desses compostos apresenta uma grande variao nos diversos grupos de insetos sociais analisados e, embora possa ser encontrada uma extensa literatura a respeito da origem de tais compostos em formigas, cupins, vespas e abelhas do gnero Apis, pouco se conhece a respeito da composio e origem de tais compostos nas abelhas sem ferro (Meliponini). At o presente momento, a origem, constituio qumica e o papel dos compostos cuticulares nos Meliponini so virtualmente pouco conhecidos em relao a outros grupos de insetos sociais. Desta forma, uma grande rea da biologia das abelhas sociais Neotropicais ainda permanece desconhecida. Este estudo motivado pela oportunidade de se conhecer melhor os compostos qumicos cuticulares de abelhas sem ferro e compreender a funo desses na mediao do reconhecimento intra- e inter-colonial em Frieseomelitta varia.
Materiais e Mtodos
Anlises comportamentais: abordagem geral dos testes de discriminao entre os indivduos manipulados experimentalmente. Para a realizao dos testes de reconhecimento foi acoplada uma caixa experimental ao tubo que conecta a colnia ao meio externo. A caixa experimental apresenta sua poro superior coberta por vidro, possibilitando a visualizao de seu interior. lateral dessa caixa foi conectado um tubo de 1 cm de dimetro e 4 cm de comprimento para a introduo dos indivduos a serem testados. Antes da introduo, os indivduos foram coletados e acondicionados individualmente em pequenos frascos de vidro (3.5cm x 2.0cm). O frasco era, ento, colocado em uma caixa de isopor com gelo por cerca de dois minutos para a diminuio da atividade locomotora. Aps os
83
dois minutos, a abelha a ser testada era retirada do frasco e inserida na caixa experimental atravs do tubo lateral. As interaes apresentadas entre o indivduo introduzido e os demais indivduos da caixa experimental foram registradas durante cinco minutos. Comportamentos agressivos apresentados pelos guardas como mordidas nas pernas e asas, imobilizao e deposio de resina foram considerados como rejeio, enquanto que a ausncia de tais comportamentos e a entrada do indivduo introduzido na colnia foram consideradas como aceitao. Anlises qumicas: verificao dos padres de hidrocarbonetos cuticulares Para a deteco e identificao das substncias qumicas presentes na cutcula dos indivduos, foram extrados os compostos cuticulares das abelhas, escolhidas de acordo com a manipulao experimental, por meio de banhos em solvente apolar (hexano a 50-500 l) por 1 minuto. Todos os indivduos coletados foram acondicionados independentemente em pequenos frascos de vidro (3.5cm x 2.0cm) ou em tubos eppendorf (1,5 ml) e posteriormente congelados. Antes da extrao, as abelhas tiveram o ultimo par de pernas retirado a fim de evitar contaminao com resina, visto que operrias velhas dessa espcie, em geral, so encontradas com grande quantidade desse material. As amostras foram analisadas em um sistema de Cromatografia Gasosa Acoplada a Espectrometria de Massas SHIMADZU, modelo GCMS-QP2010, equipado com coluna capilar de silicone (DB-5MS) e utilizando hlio como gs carreador a 1 ml/min. Para a correta identificao dos compostos foram realizadas comparaes dos espectros de massa com a biblioteca Wiley e com dados de ons diagnsticos presentes na literatura. A quantificao foi baseada nas reas de pico obtidas pelos cromatogramas. O protocolo de temperatura utilizado foi: 150C-280C a uma taxa de 3C/ min (mantido por 15 min). As anlises qumicas foram todas realizadas com o auxlio do programa GCMSsolutions for Windows (Shimadzu Corporation). Caracterizao do perfil cuticular de Frieseomelitta varia Primeiramente foi realizada a caracterizao do perfil cuticular da espcie Frieseomelitta varia buscando analisar a maior diversidade encontrada dentro da espcie. Para tal, foram utilizadas 20 operrias velhas, identificadas pela colorao escura, 20 operrias recm emergidas, identificadas pela sua colorao clara e pela atividade que desempenhavam na colnia. Foram analisados, tambm, sete machos recm emergidos coletados ainda no interior das colnias e oito machos velhos coletados em uma nuvem de machos formada na entrada de uma das colnias que continha uma rainha virgem. Alm disso, foram analisadas seis rainhas virgens e quatro rainhas fisogstricas. Manipulaes experimentais Alm da caracterizao do perfil qumico da espcie foram realizados testes de reconhecimento e anlises qumicas buscando avaliar a origem das pistas utilizadas no reconhecimento. Para essas investigaes foram testados a influncia do contato (por dez e vinte minutos) de indivduos recm emergidos com os materiais de construo do ninho; e o efeito da convergncia alimentar por um ms.
Resultados
A anlise dos compostos cuticulares da espcie Frieseomelitta varia resultou em um total de 48 compostos identificados. A maior parte das substncias encontradas representada por hidrocarbonetos, divididos entre alcanos saturados, insaturados, alcenos, um alcino e alcadienos. Esses compostos
84
apresentam cadeias longas variando de 21 a 31 tomos de carbono. Os alcanos foram os compostos mais abundantes para todos os grupos e, entre os alcanos, o heptacosano foi o mais abundante para a maior parte dos grupos, exceto nas rainhas fisogstricas, nas quais o pentacosano foi superior. Na verificao da aquisio de pistas de reconhecimento a partir dos materiais de construo do ninho, os testes realizados com dez minutos de contato com o material do ninho da prpria colnia ou com uma segunda colnia mostraram, tanto para as anlises comportamentais, quanto para as anlises qumicas, que o grupo controle no separado do grupo teste. No entanto, nas comparaes entre os indivduos que permaneceram em contato por 20 minutos, as anlises qumicas e comportamentais acusaram uma separao significativa entre os grupos controle e teste. Na verificao de alteraes no padro de reconhecimento atravs da convergncia alimentar, os testes comportamentais e qumicos no acusaram variaes ao longo de todo ms avaliado.
Discusso
Os resultados encontrados esto de acordo com a maioria dos estudos com compostos cuticulares de insetos sociais encontrados na literatura, os quais apontam essas substncias como assinaturas qumicas individuais que carregam informaes a respeito da casta, idade, sexo e status reprodutivo dos indivduos (revisado por Howard and Blomquist, 2005). A maior parte dos compostos encontrados na anlise do perfil cuticular de operrias de F. varia tambm foram descritos para as outras espcies de abelhas sem ferro j analisadas e presentes na literatura (Melipona bicolor: Abdalla et al., 2003; Melipona scutellaris e Melipona rufiventris: Pianaro et al., 2007; Scaptotrigona bipunctata: Jungnickel et al., 2004; Frieseomelitta varia e Lestrimelitta limao: Nunes et al., 2008a; Schwarziana quadripunctata: Nunes et al., 2008b). Para todas essas espcies, os compostos foram principalmente hidrocarbonetos de cadeias variando de 19 a 33 tomos de carbono. As maiores concentraes so encontradas para os compostos de cadeias mpares. Com exceo de Melipona bicolor, estudada por Abdalla et al. (2003), todas as demais espcies j estudadas apresentaram maiores concentraes de alcanos, principalmente aqueles com cadeias com 27 e 29 tomos de carbono. Dentro das questes relacionadas ao desenvolvimento ovariano das operrias dos himenpteros sociais, um problema a longo tempo levantado o meio atravs do qual as rainhas mantm seu status reprodutivo e reconhecem o status dos demais indivduos. Embora nas abelhas melferas tenham sido identificados feromnios provenientes da glndula mandibular exercendo as funes acima citadas, muitos estudos recentes indicam que os hidrocarbonetos cuticulares atuam como pistas primrias de fertilidade em alguns insetos sociais (Monnin et al., 1998; Peeters et al., 1999; revisado por Howard and Blomquist, 2005). Endler et al. (2004) mostraram que em colnias de formigas da espcie Camponotus floridanus, a rainha marca seus ovos com hidrocarbonetos cuticulares e esses compostos atuam como indicadores da presena da rainha resultando na no oviposio de operrias. De modo semelhante, os compostos identificados para as rainhas fisogstricas de F. varia podem atuar como sinalizadores da presena da rainha, desencadeando toda a gama de comportamento apresentada pelas operrias com a rainha, tais como corte, alimentao e aqueles relacionados ao processo de aprovisionamento e postura (POP). Os resultados dos experimentos de reconhecimento e das anlises qumicas realizados com os indivduos que permaneceram em contato com cerume do prprio ninho ou de um segundo ninho mostram claramente que ocorre uma transferncia de pistas utilizadas no reconhecimento atravs de um breve contato com o cerume. Na verificao da influncia da alimentao nas pistas utilizadas no
85
reconhecimento, os resultados mostraram que, em F. varia, a convergncia alimentar no resulta em uma convergncia no perfil cuticular dos indivduos. Consequentemente, essa mudana alimentar no resulta em alteraes nas porcentagens normais de rejeio de indivduos no companheiros de ninho. No so encontrados na literatura estudos relatando a influncia da alimentao no reconhecimento em abelhas eussociais. No entanto, nas formigas Argentinas (Linepithema humile), Liang and Silverman (2000) relatam que o perfil cuticular dos indivduos muda de acordo com a sua alimentao. Diferentemente das abelhas, essas formigas se alimentam de outros insetos (no caso especfico do estudo, baratas). Os autores relatam que nesse estudo, as formigas adquiriram alguns compostos cuticulares dos insetos ingeridos e esses compostos foram importantes no reconhecimento de no companheiros de ninho. Entretanto, nesse caso, existe a possibilidade da aquisio dos compostos cuticulares ter sido ocasionada pelo contato dessas formigas com suas presas e no pela ingesto da mesma.
Agradecimentos
Agradecemos o apoio financeiro da Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP) concedido a TMN (Proc. 2007/59058-7) e RZ (Proc.04/09479-8, Programa Equipamentos Multi-usurios 2).
Bibliografia
Abdalla FC, Jones GR, Morgan ED and Cruz-Landim Cda (2003). Comparative study of the cuticular hydrocarbon composition of Melipona bicolor Lepeletier, 1836 (Hymenoptera, Meliponini) workers and queens. Genetics and Molecular Research 2: 191-199. Alcock J (1993). Animal Behavior: An Evolutionary Approach, 5th edn. Sinauer, Sunderland. Beecher MD (1982). Signature systems and kin recognition. American Zoologist. 22: 477-490. Breed MD and Stiller TM (1992). Honey bees, Apis mellifera, nestmate discrimination: hydrocarbon effects and the evolutionary implications of comb choice. Animal Behaviour. 43: 875883. Carlin NF (1989). Discrimination between and within colonies of social insects: Two null hypotheses. Netherlands Journal of Zoology. 39: 86-100. Clment J-L and Bagnres AG (1998). Nestmate recognition in termites. In: Pheromone communication in social insects (Vander Meer RK, Breed MD, Winston, ML and Espelie KE, eds). Westview, Boulder, 57-58. Endler A, Liebig J, Schmitt T, Parker JE, et al. (2004). Surface hydrocarbons of queen eggs regulate worker reproduction in a social insect. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 101: 2945-2950. Gamboa JG, Grudzien TA, Espelie KE and Bura EA (1996). Kin recognition in social wasps: combining chemical and behavioural evidence. Animal Behaviour. 51: 625-629. Hepper PG (1986). Kin recognition: functions and mechanisms. Biological Reviews. 61: 6393. Hlldobler B and Wilson EO (1990). The Ants. Cambridge, Massachusetts: Harvard University Press. Howard RW (1993). Cuticular hydrocarbons and chemical communication. In: Insect lipids: chemistry, biochemistry and biology (Stanley-Samuelson DW and Nelson DR, eds) University of Nebraska Press. Lincoln, 179-226. Howard RW and Blomquist GJ (2005). Ecological, behavioral, and biochemical aspects of insect hydrocarbons. Annual review of entomology. 50: 371-393.
86
Jungnickel H, da Costa AJS, Tentschert J, Patricio EFLRA, et al, (2004). Chemical basis for inter-colonial aggression in the stingless bee Scaptotrigona bipunctata (Hymenoptera: Apidae). Journal of Insect Physiology. 50: 761-766. Liang D and Silverman J (2000). You are what you eat: Diet modifies cuticular hydrocarbons and nestmate recognition in the Argentine ant, Linepithema humile. Naturwissenschaften. 87: 412416. Lockey KH (1988). Lipids of the insect cuticle: origin, composition and function. Comparable Biochemistry and Physiology. 89B: 595-645. Lorenzi MC, Bagnres AG and Clment JL (1996). The role of cuticular hydrocarbons in social insects: is it the same in paper wasps? In: Natural History and Evolution of Paper Wasps (Turillazzi S and West-Eberhard MJ, eds.) Oxford University Press, UK, 178-189. Monnin T, Malosse C and Peeters C (1998). Solid-phase microextraction and cuticular hydrocarbon differences related to reproductive activity in queenless ant Dinoponera quadriceps. Journal of Chemical Ecology. 24: 473490. Nunes TM, Nascimento FS, Turatti ICC, Lopes NP, et al, (2008a). Nestmate recognition in a stingless bee: does the similarity of chemical cues determine guard acceptance? Animal Behaviour. 75: 1165-1171. Nunes TM, Turatti ICC, Mateus S, Nascimento FS, et al, (2008b). Cuticular hydrocarbons in the stingless bee Schwarziana quadripunctata (Hymenoptera, Apidae, Meliponini): differences between colonies, castes and age. Genetics and Molecular Research. Accepted. Peeters C, Monnin T and Malosse C (1999). Cuticular hydrocarbons correlated with reproductive status in a queenless ant. Proceedings of the Royal Society of London. 266: 13231327. Pfennig DW, Gamboa GJ, Reeve HK, Shellman-Reeve J, et al, (1983). The mechanism of nestmate discrimination in social wasps (Polistes, Hymenoptera: Vespidae). Behavioral Ecology and Sociobiology. 13: 299305. Pianaro A, Flach A, Patricio EFLRA, Nogueira-Neto P, et al, (2007). Chemical changes associated with the invasion of a Melipona scutellaris colony by Melipona rufiventris workers. Journal of Chemical Ecology. 33: 971-984. Sherman PW and Holmes WG (1985). Kin recognition: issues and evidence. Fortschritte der Zoologie. 31: 437-460. Singer TL and Espelie KE (1992). Social wasps use nest paper hydrocarbons for nestmate recognition. Animal Behaviour. 44: 63-68. Singer TL, Espelie KE and Gamboa GJ (1998). Nest and nestmate discrimination in independentfounding wasps. In: Pheromone communication in social insects (Vander Meer RK, Breed MD, Winston ML and Espelie EK,eds). Westview, Boulder, 104-125. Steinmetz I, Schmolz E and Ruther J (2003). Cuticular lipids as trail pheromone in a social wasp. Proceedings of the Royal Society of London. 270: 385-391. Vander Meer RK, Morel L (1998). Nestmate recognition in ants. In: Pheromone communication in social insects (Vander Meer RK, Breed MD, Winston ML and Espelie EK, eds). Westview, Boulder, 79-103. Wilson EO (1971). The insect societies. Belknap Press. Harvard, University Press Massachussets.
87
Utilizao de Ninhos-Armadilha de Diferentes Comprimentos Por Fmeas de Centris (Heterocentris) analis (Fabricius, 1804) (Hymenoptera, Apidae: Centridini)
Use of trap-nests of different lengths by Centris (Heterocentris) analis (Fabricius, 1804) (Hymenoptera, Apidae: Centridini) females Juliana Duarte de Souza Alonso*, Carlos Alberto Garfalo Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP, Departamento de Biologia, rea de concentrao: Entomologia Avenida Bandeirantes 3900, CEP 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil Fone: +55-16-3602-3816 e-mail: alonso_juliana@pg.ffclrp.usp.br, garofalo@ffclrp.usp.br
Abstract
The use of trap-nests of different lengths by Centris (Heterocentris) analis (Fabricius, 1804) (Hymenoptera, Apidae: Centridini) females was studied at three habitats in Ribeiro Preto, SP, Brazil, from January 2006 to November 2007. The goal of this study was to evaluate the effects of the length of trap-nests in the selection of the nesting cavities by females of C. analis and in the number of brood cells constructed per nest. The trap-nests consisted of tubes made with black cardboard, with four different sizes of trap-nests (6 mm (inside diameter) x 5.5 cm (length), 6 mm x 6.0 cm, 6 mm x 6.5 cm and 6 mm x 7.0 cm). A total of 221 nests and 726 cells were built at three habitats, and the highest nesting frequencies occurred during the hot and wet season. The frequency of occupation of the trap-nests by females ranged among the habitats: on the campus of USP the females used mainly the smallest traps while in other habitats the different traps were used in similar proportions. Concerning the number of brood cells constructed per nest, three-celled nests occurred with highest frequency in the smallest trap-nests; three- and four-celled nests occurred in similar frequencies in trap-nests of 6.0 cm length; in the 6.5 cm and 7.0 cm trap-nests, four-celled nests were the most frequent; furthermore, five-celled nest occurred only in 7.0 cm trap-nests. With the results here obtained is possible to affirm that C. analis has potential to be used as pollinator in agricultural fields. Palavras-chave: ninho-armadilha, Centris, nidificao, abelha solitria
Introduo
Atualmente, estimado que existam mais de 16.000 espcies de abelhas em todo mundo, com a maioria delas sendo de espcies solitrias (Michener, 2000). Cerca de 5% do total das espcies de
88
abelhas solitrias (Krombein, 1967) apresentam o hbito de nidificar em cavidades preexistentes. Essas cavidades podem ser o interior da medula de plantas, orifcios existentes em rvores, galerias feitas em madeira por besouros ou outros insetos, em gomos de bambu, em orifcios existentes em paredes de construes de alvenaria, em ninhos abandonados de outras espcies, etc. As cavidades preexistentes naturais representam um recurso escasso no ambiente, devido a mudanas ambientais tais como o desmatamento, fragmentao, queimadas e monoculturas, geradas pela expanso e mecanizao da agricultura, o que limita o crescimento das populaes de abelhas que as utilizam (Vinson et al., 1993). Diante disso, a ausncia ou um acentuado declnio de polinizadores em determinadas localidades do mundo tem estimulado o uso de ninhos-armadilha para proporcionar locais de nidificao e, conseqentemente, com uma adequada tcnica de manejo, aumentar as populaes e assim garantir a polinizao de diversas culturas (Bosch & Kemp, 2002; Garfalo et al., 2004). As espcies de Centris so importantes polinizadores de plantas que produzem leo, como a famlia Malpighiaceae, sendo inclusive conhecidas como abelhas coletoras de leo (Buchmann, 1987; Vogel & Machado, 1991). Centris analis uma espcie de abelha solitria bastante comum, ocorrendo desde o Mxico at o Brasil (Moure, 1960). C. analis tem sido a espcie mais abundante nos ninhos-armadilha em estudos feitos no estado de So Paulo (Camillo et al., 1995; Garfalo, 2000; Gazola, 2003). Essa abundncia uma caracterstica importante quando buscamos identificar espcies potenciais que possam ser trabalhadas no sentido de manej-las adequadamente em programas de polinizao controlada. Vieira-de-Jesus & Garfalo (2000) descreveram o comportamento de nidificao de C. analis em ninhos-armadilha; Gazola & Garfalo (2003) estudaram o comportamento de ataque de Leucospis cayennensis (Leucospidae) a ninhos de C. analis e Couto & Camillo (2007) estudaram a influncia da temperatura na mortalidade de imaturos de C. analis. Embora tais trabalhos tenham fornecido informaes importantes sobre a biologia daquela espcie, vrios outros aspectos necessitam ainda ser abordados para que seja possvel o desenvolvimento de tcnicas de manejo adequadas a uma populao de polinizadores. Entre aqueles aspectos, merecem destaques as abordagens experimentais que relacionam as dimenses das cavidades usadas para a nidificao e produtividade. Como observado em outras espcies (Stephen & Osgood, 1965; Torchio & Tepedino, 1980; Vicens & Bosch, 2000; Bosch & Kemp, 2002), tais aspectos tm forte influncia no nmero de clulas produzidas por ninho. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do comprimento dos ninhos-armadilha na seleo das cavidades de nidificao pelas fmeas de C. analis e no nmero de clulas de cria construdas por ninho.
Material e Mtodos
O estudo foi desenvolvido em trs locais de Ribeiro Preto, So Paulo, Brasil: no Campus da Universidade de So Paulo, de janeiro de 2006 a novembro de 2007, em um ambiente urbano e uma rea rural, de janeiro a novembro de 2007. Seguindo a metodologia apresentada por Serrano & Garfalo (1978), os ninhos-armadilha consistiam de tubos confeccionados com cartolina preta, com uma das extremidades fechada com o mesmo material. Foram usados ninhos-armadilha (=NA) de quatro tamanhos diferentes: 6,0 mm (dimetro interno) x 5,5 cm (comprimento), 6 mm x 6,0 cm, 6 mm x 6,5 cm e 6 mm x 7,0 cm. Esses tubos foram inseridos em orifcios feitos em placas de madeira (55 orifcios por placa), que foram colocadas em prateleiras sob coberturas (no Campus da USP e na rea rural) existentes nos locais de estudo, e suspensa em uma rvore na rea urbana. Nas trs localidades, as placas foram colocadas a uma distncia de 1,5 m do solo. Um total de 65 ninhos-armadilha de cada tamanho foi disponibilizado no Campus da USP, 26 na rea rural e 13 na rea urbana. Durante o perodo de estudo, os ninhos-armadilha colocados no Campus da USP e na rea rural foram inspecionaAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
89
dos, diariamente, com o auxlio de um otoscpio. As atividades de nidificao das fmeas em ambos os locais foram monitoradas durante o perodo de estudo. Aps serem completados, os ninhos eram levados para o laboratrio e substitudos por NA similares aos retirados. No laboratrio, os ninhos foram introduzidos em tubos de ensaio, de tamanhos apropriados. Quando da emergncia dos adultos, eles eram coletados, marcados e liberados no local de estudo do Campus da USP. Aps alguns dias da ltima emergncia, os ninhos eram abertos e seus contedos analisados. De acordo com o Sistema Internacional de Kppen, o clima de Ribeiro Preto AW: tropical, com uma estao, quente e chuvosa, estendendo-se de setembro a abril; e uma estao fria e seca, estendendo-se de maio a agosto.
Resultados
Nmero de ninhos construdos e perodo de atividades de nidificao Durante todo o perodo de estudo foi construdo um total de 221 ninhos, sendo 91 no Campus da USP, 76 na rea rural e 54 ninhos na rea urbana. A distribuio das nidificaes entre as estaes foi de 193 ninhos na quente/mida e 28 ninhos na fria/seca. Utilizao dos ninhos-armadilha de diferentes comprimentos No Campus da USP foram construdos 36 ninhos nos NA menores (39,56%), 25 naqueles com 6,0 cm (27,47%), 12 nos NA com 6,5 cm (13,19%) e 18 deles nos NA maiores (19,78%). A anlise estatstica revelou haver diferena significante na utilizao dos diferentes NA, sendo que aqueles de menor dimenso foram os mais utilizados (x2 = 14,011, gl = 3; p<0,05). Na rea rural foram construdos 19 ninhos nos NA menores (25%), 20 naqueles com 6,0 cm (26,32%), 16 nos NA com 6,5 cm (21,05%) e 21 deles nos maiores (27,63%). No foi observada diferena significante na utilizao dos diferentes NA (x2 = 0,736, gl = 3; p>0,05). Do total de ninhos construdos na rea urbana, 15 deles foram feitos nos NA menores (27,78%), 12 naqueles com 6,0 cm (22,22%), 13 nos NA com 6,5 cm (24,07%) e 14 deles nos maiores (25,93%). A utilizao dos diferentes ninhos pelas fmeas foi semelhante, no havendo diferena significante (x2 = 0,37, gl = 3; p>0,05) (Figura 1). Figura 1 - Nmero total de ninhos construdos por fmeas de Centris analis de acordo com o comprimento do ninho, durante o perodo de janeiro de 2006 a novembro de 2007, nas trs localidades de Ribeiro Preto, SP (letras diferentes, em colunas pertencentes a um mesmo local, indicam diferena estatisticamente significante) (teste do x2).
5,5 cm 40 35 30 25 20 15 10 5 0 6,0 cm 6,5 cm 7,0 cm
Nmero total de ninhos construdos
a b b c a a a a a a a a
Campus USP
rea rural Local de estudo
rea urbana
90
Atividades de nidificao Os ninhos construdos no Campus da USP possuam um total de 277 clulas. O nmero de ninhos por fmea variou de um (38 fmeas) a seis (uma fmea) e o nmero de clulas de uma (trs fmeas) a 18 (uma fmea). Cada fmea construiu, em mdia, 1,57 0,97 ninhos e 4,7 3,23 clulas. O tempo mximo em que uma fmea permaneceu nidificando na rea foi 22 dias e o tempo utilizado por cada fmea para construir uma clula variou de um a trs dias, com maior freqncia para a construo de uma clula por dia. As fmeas que ocuparam os NA na rea rural construram 260 clulas. O nmero de ninhos por fmea variou de um (26 fmeas) a quatro (duas fmeas) (x = 1,65 0,87 ninhos) e o de clulas de duas (uma fmea) a 12 (cinco fmeas) (5,65 2,97 clulas). O tempo mximo em que uma fmea permaneceu nidificando na rea foi 15 dias. O tempo utilizado por cada fmea para construir uma clula variou de um a trs dias, com a maior freqncia sendo uma clula por dia. Analisando a utilizao dos NA por cada fmea, verificou-se que das 59 fmeas que nidificaram no Campus da USP, 38 delas construram apenas um ninho. Entre as fmeas que construram dois ninhos (n=12), apenas cinco delas (41,67%) fizeram seus ninhos em NA de mesmo comprimento. Das fmeas que construram trs ninhos (n=7), duas (28,57%) usaram NA de tamanhos idnticos, trs fmeas (42,86%) construram dois dos seus ninhos em NA de dimenses idnticas e duas fmeas (28,57%) construram seus ninhos em NA de diferentes comprimentos. A nica fmea que construiu quatro ninhos utilizou trs NA de comprimentos semelhantes e a fmea que construiu seis ninhos utilizou cinco NA de dimenses similares. Das 46 fmeas que estiveram em atividades na rea rural, 26 fizeram apenas um ninho e 12 fmeas construram dois ninhos, sendo que apenas uma delas (8,33%) estabeleceu seus ninhos em NA de iguais comprimentos. Das fmeas restantes, seis fizeram trs ninhos, sendo que duas delas (33,33%) ocuparam dois NA de comprimentos iguais para a construo de dois dos seus ninhos. As duas fmeas que construram quatro ninhos utilizaram apenas dois NA de dimenses idnticas. Nmero de clulas construdas por ninho No total de ninhos obtidos (n=221), o nmero de clulas construdas por ninho variou de uma (n= 9) a cinco (n= 8), com aqueles com trs clulas ocorrendo em maior freqncia (46,6%). Nos NA de menor comprimento ocorreu uma maior freqncia de ninhos com trs clulas (78,6%) enquanto nos NA de 6,0 cm as maiores freqncias foram de quatro e trs clulas por ninho. Os NA de 6,5 cm continham principalmente quatro clulas (n=26) como tambm observado para os NA maiores (n = 27). A anlise estatstica revelou que h diferena significante no nmero de clulas construdas por ninho entre os NA de diferentes comprimentos. Nos NA com 6,0, 6,5 e 7,0 cm de comprimento houve uma maior freqncia de ninhos contendo um maior nmero de clulas do que a freqncia observada em NA de menor comprimento (teste de Kruskal-Wallis e Dunns Method, H= 45,95, gl= 3; p<0,001) (Figura 2), embora o nmero de clulas construdas por ninho tenha sido fracamente correlacionado com o comprimento dos ninhos (r=0,36; p<0,05). Figura 2 - Nmero de clulas construdas por ninho pelas fmeas de Centris analis, de acordo com o comprimento do ninho-armadilha, no perodo de janeiro de 2006 a novembro de 2007. Os ninhos-armadilha com 6,0, 6,5 e 7,0 cm apresentaram maior nmero de clulas por ninho que os ninhos-armadilha de menor comprimento (letras diferentes indicam haver diferena estatisticamente significante) (teste de Kruskal-Wallis e Dunns Method, H= 45,95, gl= 3; p<0,001).
91
uma clula 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
duas clulas
b
trs clulas
a
quatro clulas
a
cinco clulas
a
Porcentagem
5,5
6,5
Comprimento dos ninhos (cm)
Discusso
Segundo Jesus (1995), Gazola & Garfalo (2003) e Couto (2004), e semelhante ao observado neste trabalho, C. analis nidificou preferencialmente na estao quente/mida e esteve ausente ou em pequena freqncia na estao fria/seca. Esse padro de nidificao deve estar relacionado com fatores climticos, uma vez que eles influenciam a disponibilidade de recursos necessrios para a construo das clulas e o aprovisionamento dos ninhos. Com isso, pode-se afirmar que C. analis apresenta uma sazonalidade pronunciada. Este fato deve ser cuidadosamente considerado para o desenvolvimento de uma tcnica de manejo, pois o servio de polinizao controlada dessa espcie deve apresentar eficincia em campos agrcolas, em perodos pr determinados. Diversos trabalhos mostraram certa constncia no dimetro dos NA utilizados pelas fmeas de C. analis, baseados na estreita relao entre o dimetro corporal da fmea e o da cavidade. No entanto, os efeitos que diferentes comprimentos poderiam acarretar na utilizao de tais cavidades, no foram abordados em experimentos anteriores. Em Osmia cornuta (Megachilidae), contudo, Bosch (1994) disponibilizando NA com trs diferentes comprimentos, observou que os maiores foram os mais atrativos. Em outro trabalho, Bosch (1994b) ofereceu NA de quatro diferentes comprimentos e verificou que o menor foi o menos aceito e que os demais foram utilizados de forma semelhante. Visando o incremento populacional de Ancistrocerus gazella (Eumenidae), Wearing & Harris (1999) verificaram que a disponibilidade de ninhos com diferentes comprimentos no resultou em uma utilizao diferenciada deles. No presente estudo, os resultados mostraram que a utilizao diferencial dos NA ocorreu apenas em um dos locais de nidificao, pois as fmeas de C. analis que nidificaram no Campus da USP usaram principalmente os NA de menor comprimento, enquanto que as fmeas que fundaram ninhos nas outras duas localidades usaram os NA de forma similar, independente do comprimento. Esses resultados mostram que fmeas de C. analis no apresentaram restries no uso das cavidades de diferentes comprimentos disponibilizadas. Isso sugere que cavidades de outros comprimenAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
92
tos devem ser testadas a fim de se estabelecer o comprimento ideal para aumentar a produo de indivduos, por ninho, de C. analis em agroecossistemas. Considerando as atividades de nidificao das fmeas, Vieira-de-Jesus & Garfalo (2000) relataram que trs e nove foram os maiores valores para o nmero de ninhos e nmero de clulas, respectivamente, que uma fmea de C. analis produziu e que o tempo mximo que uma fmea permaneceu nidificando na rea de estudo foi 30 dias. No presente trabalho, o tempo de permanncia das fmeas nas reas de nidificao foi menor do que aquele relatado por aqueles autores, embora os valores para produtividade mxima por fmea, tanto em relao aos nmeros de ninhos como o de clulas, tenham sido maiores. Apesar do tempo utilizado por cada fmea para completar uma clula variar de um a trs dias, em geral, elas fizeram uma clula por dia, como tambm reportado por Jesus (1995). No Campus da USP foi observado um maior nmero de fmeas utilizando NA de mesmo comprimento em comparao com os ninhos construdos pelas fmeas da rea rural. Esse aspecto dever ser melhor compreendido em trabalhos futuros para avaliar se ocorre preferncia por um tamanho especfico de NA ou se a utilizao dos ninhos aleatria. Diversos estudos mostram que a dimenso da cavidade pode influenciar o nmero de clulas construdas por ninho pelas fmeas de abelhas solitrias. Contudo, poucos estudos tiveram o enfoque direcionado para os efeitos dos diferentes comprimentos de NA no nmero de clulas feitas por ninho. Alguns trabalhos mostraram no haver relao entre o comprimento do NA e o nmero de clulas construdas (Boesi et al., 2005; Mendes & Rgo, 2007) enquanto outros, como observado neste trabalho, mostraram que o aumento do comprimento dos NA gerou um aumento no nmero de clulas construdas por ninho (Tepedino & Parker, 1983, 1984; Bosch, 1994b; Wearing & Harris, 1999). O nmero mximo de clulas por ninho observado neste trabalho, similar ao encontrado por Aguiar et al. (2005), no havia sido relatado em trabalhos anteriores com C. analis (Vieira-de-Jesus & Garfalo, 2000; Gazola & Garfalo, 2003; Couto & Camillo, 2007). Isso decorreu do fato daqueles autores usarem, praticamente, apenas ninhos similares aos menores aqui disponibilizados. A necessidade de incrementar a populao de C. analis visando sua utilizao em programas de polinizao controlada indica que trabalhos futuros devero testar NA de outros comprimentos com o objetivo de identificar o nmero mximo de clulas que uma fmea dessa poder aprovisionar por ninho.
Concluso
Com os resultados aqui obtidos possvel afirmar que C. analis possui potencial para ser utilizada como espcie polinizadora em campos agrcolas, atravs do desenvolvimento de tcnicas adequadas de manejo, uma vez que alm de utilizar frequentemente NA, j possui muitos aspectos de sua ecologia conhecidos.
Agradecimentos
Ao CNPq pelo suporte financeiro
Referncias
Aguiar CML, Garfalo CA and Almeida GF (2005). Trap-nesting bees (Hymenoptera, Apoidea) in areas of dry semideciduous forest and caatinga, Bahia, Brazil. Revta. Bras. Zool. 22(4): 1030-1038.
93
Boesi R, Polidori C, Tormos J, Bevacqua S, Ass JD and Andrietti F (2005). Trap-nesting Ancistrocerus sikhimensis (Hymenoptera: Eumenidae) in Nepal: Nest structure and associates (Hymenoptera: Chrysididae; Acarina: Saproglyphidae). Florida Entomol. 88(2): 135-140. Bosch J (1994). Improvement of field management of Osmia cornuta (Latreille) (Hymenoptera, Megachilidae) to pollinate almond. Apidologie. 25: 71-83. Bosch J (1994b). Osmia cornuta Latr. (Hym., Megachilidae) as a potencial pollinator in almond orchards. J. Appl. Ent. 117: 151-157. Bosch J and Kemp WP (2002). Developing and establishing bee species as crop pollinators: the example of Osmia spp. (Hymenoptera: Megachilidae) and fruit trees. Bull. Entomol. Research. 92: 3-16. Buchmann SL (1987). The ecology of oil flowers and their bees. Annu. Rev. Ecol. Syst. 18: 343-369. Camillo E, Garfalo CA, Serrano JC and Muccillo G (1995). Diversidade e abundncia sazonal de abelhas e vespas solitrias em ninhos armadilhas (Hymenoptera, Apocrita, Aculeata). Revta. Bras. Entomol. 39(2): 459-470. Couto RM (2004). Influncia da temperatura e umidade no desenvolvimento de imaturos de Centris (Heterocentris) analis (Fabricius 1804). Dissertao de Mestrado. Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP. 60 p. Couto RM and Camillo E (2007). Influncia da temperatura na mortalidade de imaturos de Centris (Heterocentris) analis (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Iheringia. 97(1): 51-55. Garfalo CA (2000). Comunidades de abelhas (Hymenoptera, Apoidea) que utilizam ninhos-armadilha em fragmentos de matas do Estado de So Paulo. Anais do IV Encontro sobre Abelhas. Ribeiro Preto, SP, Brasil. p. 121-128. Garfalo CA, Martins CF and Alves-dos-Santos I (2004). The brazilian solitary bee species caught in trap nests. In: Solitary bees: Conservation, Rearing and Management for Pollination. (Freitas BM, Pereira JOP, eds.)Fortaleza: Imprensa Universitria. p.77-84. Gazola A L (2003). Ecologia de abelhas e vespas solitrias (Hymenoptera, Apoidea) que nidificam em ninhos-armadilha em dois fragmentos de floresta estacional semidecidual no Estado de So Paulo. Tese de Doutorado. Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto -USP. 106 p. Gazola AL and Garfalo CA (2003). Parasitic behavior of Leucospis cayennensis Westwood (Hymenoptera: Leucospidae) and rates of parasitism in populations of Centris (Heterocentris) analis (Fabricius) (Hymenoptera: Apidea: Centridini). J. Kansas Entomol. Soc. 76 (2): 131-142. Jesus BMV (1995). Comportamento de nidificao e abundncia sazonal de Centris (Heterocentris) analis (Fabricius, 1804) (Hymenoptera, Anthophoridae). Dissertao de Mestrado. Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP. 69 p. Krombein KV (1967). Trap-nesting wasps and bees: life histories, nests and associates. Washington: Smithsonian Press. 569p. Mendes FN and Rgo MMC (2007). Nidificao de Centris (Hemisiella) tarsata Smith (Hymenoptera, Apidae, Centridini) em ninhos-armadilha no Nordeste do Maranho, Brasil. Revta. Bras. Entomol. 51(3): 382-388. Michener CD (2000). The Bees of the World. Baltimore: The John Hopkins University Press. 913 p. Moure JS (1960). Notes on the types of the Neotropical bees described by Fabricius (Hymenoptea: Apoidea). Studia Ent. 3: 97-160. Serrano JC and Garfalo CA (1978). Utilizao de ninhos artificiais para o estudo bionmico de abelhas e vespas solitrias. Cinc. Cult. 30: 597-598. Stephen WP and Osgood CE (1965). Influence of tunnel size and nesting medium on sex ratio in a leaf-cutter bee, Megachile rotundata. J. Econ. Entomol. 58: 965-968.
94
Tepedino VJ and Parker FD (1983). Nest size, mortality and sex ratio in Osmia marginata Michener. Southwest. Entomol. 8(3): 154-167. Tepedino VJ and Parker FD (1984). Nest selection, mortality and sex ratio in Hoplitis fulgida (Cresson) (Hymenoptera: Megachilidae). J. Kansas Entomol. Soc. 57(2): 181-189. Torchio PF and Tepedino VJ (1980). Sex ratio, body size and seasonality in a solitary bee, Osmia lignaria propinqua Cresson (Hymenoptera: Megachilidae). Evolution. 34: 993-1003. Vicens N and Bosch J (2000). Pollinating efficacy of Osmia cornuta and Apis mellifera (Hymenoptera: Megachilidae, Apidae) on red delicious apple. Environ. Entomol. 29(2): 235-240. Vieira-de-Jesus BM and Garfalo CA (2000). Nesting behaviour of Centris (Heterocentris) analis (Fabricius) in southeastern Brazil (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Apidologie. 31: 503-515. Vinson SB, Frankie GW, Barthell J (1993). Threats to the diversity of solitary bees in a neotropical dry forest in Central America, p.53-81. In: Hymenoptera and biodiversity (LaSalle J and Gauld ID, eds.). Wallingford, UK: C.A.B.International. 348p. Vogel S and Machado ICS (1991). Pollination of four sympatric species of Angelonia (Scrophulariaceae) by oil-collecting bees in NE Brazil. Plant Syst. Evol. 178: 153-178. Wearing CH and Harris AC (1999). Evaluation of the predatory wasp, Ancistrocerus gazella, for biological control of leafrollers in otago fruit crops: Prey composition, nest structure and wasp productivity from artificial nests. Bioc. Sci. Tech. 9: 315-325.
95
Enxameao e Crescimento Inicial de Colnias De Plebeia remota

Patrcia Nunes-Silva1, Sergio Dias Hilrio2, Denise de Araujo Alves2, Prsio de Souza Santos Filho2 & Vera Lucia Imperatriz Fonseca2. 1 Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto SP, Brasil. Av. Bandeirantes, 3900 - Bloco 2 - 14040-901. Ribeiro Preto - SP Brasil. Telephone/FAX: 55 16 36023815. E-mail address: pnsilva@usp.br
2
Departamento de Ecologia, Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo SP, Brasil. 05508-900. Swarming and initial growth in stingless bee colonies: the case of Plebeia remota.
Abstract
In honey bees and stingless bees colony multiplication occurs through swarming. In this study, we observed the sequence of the colony foundation process and the initial growth of the combs. Four swarms of this species were observed. These swarms occupied hives that had the storage pots and building material of the colonies that previously occupied these hives. During the beginning of the establishment of the new colonies, all swarmed colonies used superseded colonies build materials that were inside the hives they occupied. The period between the starting of occupation and the beginning of queen oviposition was variable and ranged from 4 to 13 days. The colonies did not have the same initial growth and those with a queen that started ovipositing ealier constructed bigger brood combs. This species showed periodicity in POP (provisioning and oviposition process). The periods between each oviposition varied more in the beginning of the queen oviposition than two years after the swarming, including the number of cells in each POP, but it was not found differences between the periods of the two moments. This might be a reflex of the varying conditions of the nest, especially in relation to the food available for provisioning the cells. The presence of resources in the occupied cavity and the fecundity of the queen are factors that might influence the success of a new colony. Palavras-chave: enxameao, Plebeia remota, crescimento colonial, abelha sem ferro.
Introduo
Nos insetos sociais, a reproduo dos indivduos no o nico tipo de reproduo. Ocorre tambm a reproduo das colnias, que nas abelhas Apis e nas abelhas sem ferro, ocorre por enxameao, ou seja, uma rainha e um grupo de operrias partem da colnia-me para fundar uma nova colnia (Oster & Wilson, 1978; Nogueira-Neto, 1954). Vrias diferenas so encontradas entre o processo enxameatrio desses dois grupos de abelhas. Uma diferena marcante que nas abelhas sem ferro, mesmo aps a partida da rainha com o grupo de operrias, ainda h ligao entre a colnia me e a colnia filha atravs de forrageiras que levam recursos (alimento e materiais de construo) para
96
a colnia filha. J nas abelhas Apis, aps a partida do enxame, no h mais nenhuma conexo entre as duas colnias (Nogueira-Neto, 1954; Michener, 1974; Sakagami, 1982; Nogueira-Neto, 1997). A primeira descrio do processo enxameatrio de abelhas sem ferro foi feita por Nogueira-Neto (1954), baseada em suas observaes em vrias espcies. Desde ento poucos estudos abordaram o comportamento enxameatrio dessas abelhas (ex. Juliani, 1967; Da Silva et al., 1972; Terada, 1972; Wille & Orozco, 1975; Inoue et al., 1984; Nogueira-Ferreira & Soares, 1998; van Veen & Sommeijer, 2000). Em geral, o processo enxameatrio consiste nos seguintes passos: encontro de um local adequado para nidificao; transporte de materiais de construo para esse local, construo de uma entrada, remoo do lixo e cobertura das paredes com batume; construo de potes de alimento; chegada da rainha virgem com o grupo de operrias; realizao do vo nupcial pela rainha, construo das clulas de cria pelas operrias e incio da oviposio pela rainha. Ao longo desse processo, as forrageiras tornam a colnia filha progressivamente mais independente da colnia me (Engels & Imperatriz-Fonseca, 1990). Existe pouca informao sobre as condies da colnia me antes da enxameao, o investimento (operrias e recursos) na colnia filha e a influncia dos fatores ambientais neste processo (Inoue et al., 1984; Roubik, 1989; Engels & Imperatriz-Fonseca, 1990). Alm disso, o processo de escolha do local de nidificao tambm no est claro. As abelhas devem ser atradas pelo odor do cerume ou por outros estmulos presentes em locais que j foram habitados, e os recursos presentes nele devem significar uma economia em trabalho e material (Nogueira-Neto, 1954). A periodicidade do processo de aprovisionamento e postura (POP) da colnia filha no incio de seu desenvolvimento nunca foi estudada. Na verdade, nenhum aspecto deste comportamento neste momento inicial da colnia. O POP de Plebeia remota caracterizado por uma construo sincrnica de clulas, aprovisionamento simultneo dessas e uma rpida sucesso de oviposio (Sakagami & Zucchi, 1974; Zucchi et al., 1999). Cada ciclo de construo e oviposio dura de quatro a seis horas e meia, ocorrendo de quatro a seis ciclos por dia (van Benthem et al., 1995) Neste trabalho, estudamos a seqncia do processo de fundao da colnia, o crescimento inicial dos favos e o ritmo do POP durante esta fase, para entender a dinmica do estabelecimento de um novo ninho. Alm disso, discutimos alguns fatores que devem determinar o sucesso de colnias recm-fundadas.
Material e mtodos
Plebeia remota (Holmberg, 1903) nidifica em cavidade em tronco de rvores e a entrada do ninho construda com prpolis escura, a qual permite a entrada ou a sada de apenas um indivduo por vez. Os favos de cria so horizontais e formam uma pilha, mas tambm so encontrados favos construdos em espiral. No outono e no inverno h uma parada na construo de clulas de cria pelas operrias e na oviposio pela rainha (van Benthem et al., 1995). Em novembro de 2004, trs enxames de P. remota ocuparam trs colmias vazias que estavam localizadas no interior do Laboratrio de Abelhas (Instituto de Biocincias USP; 2333S, 4643O). Uma delas no sobreviveu e a mesma colmia foi ocupada por outro enxame de P. remota em fevereiro de 2005. Estas colmias vazias continham o material de construo das colnias que ocupavam estas colmias anteriormente. No primeiro ms de crescimento, as trs primeiras colnias que enxamearam foram filmadas e a quarta foi fotografada diariamente. O nmero de clulas construdas a cada 24 horas foi contado e a
97
mdia do nmero de clulas construdas por dia por colnia calculada. Essas mdias foram comparadas pelo teste de Kruskal-Wallis. Apenas favos terminados foram considerados na anlise. Cinco parmetros foram inter correlacionados (correlao de Spearman, n=4): nmero de dias entre comeo da ocupao e o incio da oviposio pela rainha, nmero mximo e mnimo de clulas ovipositadas em um dia e tamanho mdio do favo de cria (nmero de clulas). Aps aproximadamente dois anos, as condies das trs colnias que sobreviveram foram avaliadas pelo nmero total de potes de alimento e clulas de cria (de favos terminados) em cada colnia. No foi considerado o nmero mdio de clulas de cria por favo porque a colnia 4 possua favos com tamanhos muito variveis. Alm disso, as colnias 2, 3 e 4 foram filmadas continuamente por sete dias e estes filmes usados para avaliar a periodicidade da construo de clulas e da oviposio pela rainha (processo de aprovisionamento e postura POP). Foi verificado se havia um ritmo, se esse ritmo era estvel e se o ritmo do incio da construo de clulas logo aps a enxameao era diferente do ritmo observado dois anos aps o estabelecimento das colnias. Esse ritmo foi analisado atravs do perodo entre oviposies. Foi possvel analisar 23 seqncias dos filmes do primeiro ms de oviposio, cujas duraes variaram entre oito e 24 horas. J os filmes de dois anos aps a enxameao forneceram sete seqncias de 24 horas. Tabelas de Buys-Ballot foram construdas para as seqncias e o periodograma de Enright usado para determinar o perodo (P) da construo de clulas e oviposio pela rainha nessas seqncias (Enright, 1965; Minors & Waterhouse, 1989; Benedito-Silva, 1997). Perodos de duas a oito horas foram testados para cada seqncia e um teste de significncia (Qp) aplicado a eles (Sokolove & Bushell, 1978). Os perodos usados para representar uma seqncia foram aqueles que tiveram a maior significncia. A moda dos perodos dessas seqncias foi calculada, visto que esta medida indica a concentrao dos dados em um valor (Zar, 1999) e, nesse caso, o perodo mais repetido na seqncia, ou seja, o perodo predominante, e assim, o que mais representativo. A proporo freqncia da moda/total de perodos tambm foi calculada. O teste de MannWhitney foi usado para verificar se os perodos do primeiro e do segundo momento foram iguais. O primeiro momento da colnia 1 foi comparado com o segundo momento da colnia 4 (que a substituiu) e o primeiro momento das colnias 2 e 3 foram comparados com seus respectivos segundos momentos. Nessas anlises apenas os perodos significantes foram considerados, no entanto, na anlise da variao, os perodos no significantes tambm foram considerados.
Resultados
Durante o incio do estabelecimento do novo ninho, todas as colnias usaram os materiais de construo presentes nas colmias que ocuparam. Alm disso, no observamos o transporte desses materiais da(s) colnia(s) me(s) para as colnias filha(s). As operrias transformaram o cerume presente nos pilares de cerume tpicos do invlucro de P. remota. A colnia 4, como j mencionado, enxameou na colmia que tinha sido antes ocupada pela colnia 1, cujo material de construo e potes de alimento foram deixados na colmia. Dessa maneira, esta colnia tambm pode ter usado o alimento que estava presente. Antes do incio da oviposio, novos potes de alimento j existiam no ninho de todas as colnias. O intervalo de tempo entre o comeo da ocupao e o incio da oviposio variou entre 4 e 13 dias (Colnia 1: 8 dias; Colnia 2: 13 dias; Colnia 3: 6 dias; Colnia 4: 4 dias). Embora os dados sejam limitados (apenas quatro enxames), pertinente apontar que a sobrevivncia de colnias recm-estabelecidas de P. remota foi de 0,75.
98
O nmero mdio de clulas construdas e operculadas por dia foi diferente em cada colnia (H = 52.0567; p = 0.0000; Tabela 1) e o tamanho dos favos construdos por essas colnias tambm foi diferente (H = 9.8692; p = 0.0197; Tabela 2). A colnia 4 teve o maior nmero de clulas construdas por dia, seguida pelas colnias 3, 2 e 1. Assim como o nmero mdio de clulas construdas por dia, o crescimento das colnias medido em nmero total de clulas operculadas tambm foi maior na colnia 4, seguido pelas colnias 3, 2 e 1. Dessa maneira, evidente que as colnias no tiveram o mesmo crescimento inicial. Tabela 1 - Nmeros mnimo, mximo e mdio de clulas construdas por dia por colnias recm-enxameadas de Plebeia remota, e respectivos desvios padres. Colnia 1 Colnia 2 Colnia 3 Colnia 4 Dias de observao 35 31 30 31 Mnimo 0 0 2 2 Mximo 61 92 126 149 Mdia 22,2 35,7 74,2 85,3 Desvio padro 16,8 25,6 31,7 42,5
Tabela 2 - Tamanho dos favos (nmero de clulas) construdos por colnias recm enxameadas de Plebeia remota. *favos no terminados no final do perodo de observao no foram considerados na anlise. Favo 1 Favo 2 Favo 3 Favo 4 Favo 5 Favo 6 Favo 7 Favo 8 Favo 9 Colnia 1 178 262 280 57* - - - - - 240,0 54,4 Colnia 2 83 200 235 218 234 139 - - - 184,8 61,2 Colnia 3 89 171 161 309 334 306 325 317 215* 251,5 95,5 Colnia 4 160 344 463 429 498 428 340 13* 380,3 113,1
Nmero mdio de clulas por favo desvio padro
Apenas a correlao entre o nmero de dias do comeo da ocupao at o incio da oviposio pela rainha e o tamanho mdio do favo (nmero de clulas) foi significativa (rs = -1.000, p = 0.0005, n = 4). Isto indica que o tamanho mdio do favo foi inversamente relacionado com o nmero de dias at a rainha comear a ovipositar. Dessa forma, o vigor da rainha deve ser refletido pela sua maturao precoce e pelos favos grandes produzidos nos ninhos em que elas esto. Duas tendncias sugeriram que as rainhas que comearam a ovipositar precocemente tambm tiveram maior fecundidade: a correlao entre o nmero de dias at comear a ovipositar e o nmero mximo e mnimo de clulas ovipositadas em um dia. No entanto, essas correlaes no foram estatisticamente significantes.
99
A avaliao do nmero de potes de alimento e de clulas de cria presentes nas colnias 2, 3 e 4 aps dois anos de existncia das colnias mostrou que a colnia 4 apresentava o maior nmero de potes de alimento (222) e de clulas de cria (3299 clulas em quatro favos). A colnia 3 tinha 160 potes de alimento e 2594 clulas (em cinco favos) e a colnia 2 apresentou 25 potes de alimento e 1857 clulas de cria (em cinco favos). P. remota apresentou periodicidade na construo de clulas e oviposio. A porcentagem de perodos significantes no primeiro ms de oviposio foi de 34,8%, 43,5% e 52,2% para as colnias 1, 2 e 3, respectivamente. Dois anos aps a enxameao foi de 100,0%, 57,1% e 100,0% para as colnias 2, 3 e 4, respectivamente. No houve diferena dos perodos entre as oviposies do primeiro ms de oviposio e de dois anos aps a enxameao (p>0.05). No primeiro momento, o valor dos perodos variou muito. Esta variao foi expressa pela freqncia da moda em relao ao nmero total de perodos no momento (tabela 3). Assim, os perodos entre cada oviposio variaram mais (menor proporo freqncia da moda/total de perodos) no primeiro ms de oviposio do que dois anos depois da enxameao. A anlise feita tambm considera o nmero de clulas ovipositadas em cada POP. Dessa forma, uma maior variao ocorreu no nmero de clulas ovipositadas por POP no primeiro ms de oviposio. Tabela 3 - Proporo do nmero de repeties da moda dos perodos do total de perodos dos dois momentos (incio da postura da rainha e dois anos aps a enxameao). * e **: conjunto dos perodos, considerando tambm os perodos que no foram significativos (p>0.05). NRm: nmero de repeties da moda. ***de cada moda (3 modas). ****da moda de maior repetio. Incio da NRm/Total de postura da perodos significativos rainha Moda todos* os perodos (NR) NRm/Total de perodos** Dois anos NRm/Total de aps a perodos significativos enxameao Moda todos* os perodos (NR)NRm/ Total de perodos** Colnia 1 0,375 5 0,304 - - - Colnia 4 - - - 0,714 5 0,714 Colnia 2 0,200*** 5 0,217 0,857 6 0,857 Colnia 3 0,400**** 5 0,304 0,750 5 0,571
100
Discusso
A seqncia observada no processo enxameatrio dessas quatro colnias de P. remota foi similar seqncia geral observada nas abelhas sem ferro (Engels & Imperatriz-Fonseca, 1990). Como van Veen & Sommeijer (2000), tambm observamos a presena de potes de alimento antes do incio da oviposio pela rainha. No entanto, no observamos o transporte de materiais de construo da colnia me para a colnia filha, como visto em muitos outros estudos (Terada, 1972; Wille & Orozco, 1975; Inoue et al., 1984; van Veen & Sommeijer, 2000). Ao invs disso, as novas colnias utilizaram os recursos que j existiam nas colmias que ocuparam, como tambm observado por NogueiraNeto (1954). Dessa maneira, a intensidade do transporte de recursos da colnia me para a colnia filha deve depender das condies do local de nidificao, como verificado por Inoue e cols. (1984). Nesses quatro casos de enxameao, havia muito material de construo nas colmias, e no caso da colnia 4, possivelmente at alimento, o que deve ter provido condies para o desenvolvimento das colnias sem a necessidade de transporte desses materiais da colnia me. Considerando esse fato e que as colnias no tiveram o mesmo desenvolvimento, hipotetizamos que a colnia 4 teve um crescimento maior porque havia maior quantidade de recursos disponveis para esta colnia. Isto deve ter facilitado o crescimento e, dessa forma, esta colnia cresceu mais rapidamente. Concordamos com Nogueira-Neto (1954) que a presena de cerume no local de nidificao possa ser um atrativo para as abelhas escoteiras, visto que observamos a ocupao de colmias com este material, mas raramente observamos a ocupao de colmias vazias e no usadas mantidas fora do laboratrio. Embora o nmero de colnias observadas seja pequeno, a sobrevivncia de colnias de P. remota foi similar relatada por Slaa (2006) para colnias silvestres de Tetragonisca angustula (0,75) e de outras abelhas sem ferro em conjunto (0,86). Muitos fatores afetam a reproduo, o desenvolvimento e a sobrevivncia das colnias, como a disponibilidade de locais de nidificao, de materiais de construo e de alimento (Roubik, 1989) e o esforo reprodutivo (operrias, recursos e durao da dependncia) da colnia me na colnia filha (Inoue et al., 1984). Dessa maneira, a condio inicial da colnia deve ter um impacto no desenvolvimento futuro de novas colnias, porque mesmo aps dois anos de enxameao, as colnias que tiveram um maior desenvolvimento inicial ainda so as mais fortes. Alm disso, como as rainhas que comearam a ovipositar mais cedo pertenciam a colnias que apresentaram favos maiores, a fecundidade da rainha que fundou o ninho tambm deve ser um fator importante para o sucesso do enxame. Detectamos periodicidade no POP de P. remota. Assumimos que essa periodicidade seja o ritmo, visto que, apesar de no terem sido controladas as condies ambientais, j foi detectado ritmo no POP de outras espcies de abelha sem ferro, como em Scaptotrigona aff depilis (Giannini, 1999). O perodo entre os POP em P. remota varia entre quatro a seis horas e meia (van Benthem et al., 1995). Neste estudo, perodos de quatro a seis horas foram encontrados, mas os perodos mais comuns foram os de cinco e seis horas, como no estudo citado. Aqui, o perodo o tempo entre um ciclo de oviposio e o prximo. A durao deste ciclo caracterstico de cada espcie (Sakagami, 1982; Oda et al., 2007). Dessa forma, esperado que os perodos encontrados no primeiro ms de oviposio no difiram dos perodos encontrados dois anos aps a enxameao, como verificado. No entanto, os perodos do primeiro ms de oviposio foram mais variveis que os de dois anos aps a enxameao, incluindo o nmero de clulas ovipositadas por POP. Isto mostra que quando a oviposio pela rainha tem incio, as colnias ainda esto em adaptao e as condies devem variar muito neste momento. Uma das razes possveis que o alimento ainda esteja sendo estocado, possiAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
101
velmente havendo grande flutuao de alimento disponvel para aprovisionar as clulas. Observamos abelhas, provavelmente forrageiras, que depositaram suas cargas de plen diretamente nas clulas de cria que foram ovipositadas e operculadas posteriormente, indicando essa possvel ausncia temporria de alimento para aprovisionar as clulas. No entanto, essas oscilaes podem ser comuns e no possvel descartar a influncia da temperatura (Velthuis et al., 1999). Este estudo aponta alguns fatores que podem determinar o desenvolvimento e estabelecimento dos enxames, que claramente depende, entre outros fatores, dos recursos disponveis para a nova colnia, assim como possivelmente a escolha do local de nidificao. Estudos sobre a dinmica populacional das abelhas sem ferro apontam que a disponibilidade de locais de nidificao e de alimento so importantes fatores para a enxameao (Hubbell & Johnson, 1977; Slaa, 2006). Entretanto, a enxameao muito pouco estudada nas abelhas sem ferro e ainda estamos comeando a entender as regras que comandam a reproduo das colnias.
Agradecimentos
Agradecemos ao CNPq pelo suporte financeiro (proc. no 135074/2005-3 para PNS e no 140169/2000-8 para SDH).
Benedito-Silva AA (1997). Aspectos metodolgicos da cronobiologia. In: Cronobiologia: princpios e aplicaes (Marques N & Menna-Barreto L, eds). Editora da Universidade de So Paulo, So Paulo, 215-238. Da Silva DLN, Zucchi R & Kerr WE (1972). Biological and behavioural aspects of the reproduction in some species of Melipona (Hymenoptera: Apidae, Meliponinae). Anim Behav 20: 123-132. Engels W & Imperatriz-Fonseca VL (1990). Caste development, reproductive strategies, and control of fertility in honey bees and stingless bees. In: Social Insects: An evolutionary approach to castes and reproduction (Engels W, ed). Springer-Verlag, Berlin, 167-230. Enright JT (1965). The search for rhythmicity in biological time series. J Theor Biol 8: 426-468. Giannini, KM (1999). Interpretao do processo de aprovisionamento e oviposio de Scaptotrigona aff. depilis (Moure,1942) (Hymenoptera,Apidae,Meliponinae) segundo um enfoque cronobiolgico. Doctoral thesis, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, USP, Ribeiro Preto. Hubbell SP & Johnson LK (1977). Competition and nesting spacing in a tropical stingless bee community. Ecology 58: 949-963. Inoue T, Sakagami S, Salmah S and Yamane S (1984). The process of colony multiplication in the Sumatran stingless bee Trigona (Tetragonula) laeviceps. Biotropica 16: 100-111. Juliani LA (1967). A descrio do ninho e alguns dados biolgicos sobre a abelha Plebeia julianii Moure, 1962 (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Rev Bras Ent 12: 31-58. Michener CD (1974). The Social Behavior of the Bees: a comparative study. Belknap Press of Harvard University Press, Cambridge, Massachusetts. Minors DS & Waterhouse JM (1989). Analysis of biological time series. In: Biological Rhythms in Clinical Practice (Arendt J, Minors DS, Waterhouse JM, eds). Wright, London, 272-293. Nogueira-Ferreira FH & Soares AEE (1998). Male aggregations and mating flight in Tetragonisca angustula (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Iheringia, Ser. Zool. 84: 141-144.
102
Nogueira-Neto P (1954). Notas bionmicas sobre Meliponneos. III. Sobre a enxameagem. Arq Mus Nac (Rio) 42: 419-451. Nogueira-Neto P (1997). Vida e criao das abelhas indgenas sem ferro. Nogueirapis, So Paulo. Oda GA, Bellusci S & Marques MD (2007). Daily rhythms related to distinct social tasks inside an eusocial bee colony. Chronobiol Int 24: 845-858. Oster, GF & Wilson EO (1978). Caste and ecology in the social insects. Princeton University Press, Princeton. Roubik DW (1989). Ecology and natural history of tropical bees. Cambridge University Press, Cambridge. Sakagami SF (1982). Stingless bees. In: Social insects III (Hermann HR, ed). Academic Press, New York, 361-423. Sakagami SF & Zucchi R (1974). Oviposition behavior of two dwarf stingless bees, Hypotrigona (Leurotrigona) muelleri and H. (Trigonisca) duckei, with notes on the temporal articulation of oviposition process in stingless bees. J Fac Sci Hokkaido Uni Ser VI., Zool 19: 361-421. Slaa, EJ (2006). Population dynamics of a stingless bee community in the seasonal dry lowlands of Costa Rica. Insect Soc 53: 70-79. Sokolove PG & Bushell WN (1978). The chi square periodogram: its utility for analysis of circadian rhythms. J Theor Biol 72: 131-160. Terada Y (1972). Enxameagem em Frieseomelitta varia Lep. (Hymenoptera, Apidae). In: (Cruz Landim C, Heblin NJ, Lello E & Takahashi CS, (eds) Homenagem Warwick E. Kerr. Editora UNESP, Rio Claro, 293-299. Wille A & Orozco E (1975). Observations on the founding of a new colony by Trigona cupira (Hymenoptera: Apidae) in Costa Rica. Rev Biol Trop 22: 253-287. Van Benthem FDJ, Imperatriz-Fonseca VL & Velthuis HHW (1995). Biology of the stingless bee Plebeia remota (Holmberg): observations and evolutionary implications. Insect Soc 42: 71-87. Van Veen JW & Sommeijer MJ (2000). Colony reproduction in Tetragonisca angustula (Apidae, Meliponini). Insect Soc 47: 70-75. Velthuis HHW, Koedam D & Imperatriz-Fonseca, VL (1999). The rate of brood cell production in the stingless bee Melipona bicolor fluctuates with nest box temperature. Rev Etol 2: 141-145. Zar JH (1999) Biostatistical analysis. Prentice Hall Inc., New Jersey. Zucchi R, Silva-Matos EV, Nogueira-Ferreira FH & Azevedo GG (1999). On the cell provisioning and oviposition process (POP) of the stingless bees nomenclature reappraisal and evolutionary considerations (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Sociobiology 34: 65-86.
103
Multiplicao de Colnias de Nannotrigona testaceicornis (Hymenoptera, Apidae) Utilizando Rainhas Produzidas in Vitro
Cristiano Menezes1*; Vera Lucia Imperatriz Fonseca2 1 - Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo - Ribeiro Preto - SP menezes.cristiano@pg.ffclrp.usp.br 2 - Instituto de Biocincias - Universidade de So Paulo - So Paulo - SP
Abstract
Colony multiplication of Nannotrigona testaceicornis (Hymenoptera, Apidae) using in vitro queens The commercial use of stingless bees is limited by difficulties to produce colonies in a large scale. The aim of this work is to test a new methodology for colony multiplication, which is based on the foundation of small colonies with in vitro produced queens. The experiment was performed based in two strong colonies of Nannotrigona testaceicornis. We produced 21 in vitro queens and each one was introduced in one small colony. The colonies were kept closed for 18 days to make sure that the gynes would be mature enough when the colonies were opened to outside. Out of 21 gynes, eight died before the opening of the hive to outside and two died after it. Six of them made the nuptial flight, but never came back. Five queens succeeded and founded new colonies. Although the number of successful colonies was not as big as expected, this method is very promising. This was the first trial of founding colonies with the new method of in vitro rearing queens in Nannotrigona testaceicornis, where the experimental conditions are still being improved. The number of founded colonies certainly will increase as the experimental conditions progresses.
Introduo
A meliponicultura pode ser considerada uma atividade de desenvolvimento sustentvel (Cortopassi-Laurino et al., 2006), com concretas possibilidades de aplicao na polinizao agrcola (Slaa et al., 2006), a exemplo do que ocorre em companhias de biotecnologia de criao de polinizadores em outros pases (Velthuis, 2002; Velthuis e Van Doorn, 2006). O papel efetivo das abelhas sem ferro na polinizao j foi confirmado para pelo menos 18 culturas agrcolas diferentes e sua utilizao em estufas foi bem sucedida com 11 de 13 espcies de abelhas testadas (Heard, 1999; Slaa et al., 2006; Castro et al., 2006). A principal limitao para a utilizao comercial desses polinizadores a dificuldade de produo de colnias em larga escala, o que prejudicado pelas baixas taxas de reproduo natural dessas abelhas e restries das tcnicas de manejo disponveis (Cortopassi-Laurino et al., 2006). Atualmente existem vrios mtodos diferentes que podem ser empregados na multiplicao de colnias, cada um especfico para a pesquisa ou manejo adotado nos trabalhos de meliponicultura (Kerr et al.,
104
1996; Nogueira-Neto, 1997; Heard e Dollin, 2000; Quezada-Eun et al., 2001; Cortopassi-Laurino et al., 2006; Klumpp, 2007). Entretanto, todos os mtodos baseiam-se na formao de apenas uma colnia filha a partir de uma colnia forte. Assim, considerando um perodo de recuperao de trs meses para a colnia me, no mximo quatro colnias filhas podem ser formadas em um ano e nem sempre todas conseguem sobreviver. Dependendo da espcie e das condies ambientais esse nmero pode ser ainda menor. Os fatores que restringem a multiplicao de colnias para a maioria das espcies so o nmero restrito de rainhas (para todos os gneros e espcies que produzem clulas reais), o longo tempo de amadurecimento da nova rainha e o lento crescimento das colnias filhas. possvel que esse processo seja otimizado com a utilizao de rainhas produzidas in vitro, pois permitiria a obteno de grandes quantidades de rainhas em curtos perodos de tempo e aceleraria o processo de formao de novas colnias. O objetivo do presente trabalho verificar a viabilidade de um novo mtodo de multiplicao de colnias de abelhas sem ferro, baseado na produo de rainhas in vitro, fundao e crescimento de pequenas colnias, utilizando a espcie Nannotrigona testaceicornis como modelo experimental.
Material e Mtodos
Produo de rainhas in vitro A determinao de castas das abelhas sem ferro regulada pela quantidade de alimento ingerida pela larva (Camargo, 1972a), com exceo do gnero Melipona e dos casos de rainhas miniaturas (revisado por Hartfelder et al., 2006). Em Nannotrigona testaceicornis, 100% das larvas fmeas geram rainhas quando ingerem maior quantidade de alimento larval (Menezes et al., 2006). O volume adotado para a criao das rainhas in vitro foi de 50L. Foi utilizada a tcnica descrita por Conceio Camargo (1972b), com algumas modificaes. As larvas e o alimento larval foram retirados de clulas de cria de duas colnias fortes de N. testaceicornis. Foram transferidas 100 larvas recm eclodidas (0-2 dias de vida) para alvolos artificiais, que so orifcios de uma placa de acrlico com 5mm de dimetro e 8mm de profundidade contendo 50L de alimento larval. A placa de acrlico foi mantida em estufa B.O.D. com temperatura constante de 28C ( 1). Formao e crescimento das mini-colnias As mini-colnias foram formadas em colmias de observao (10x10x4cm, medidas internas) com um vidro na parte superior. A partir das mesmas duas colnias fortes utilizadas para a criao das rainhas, foram formadas 21 mini-colnias no mesmo dia em que suas respectivas rainhas emergiram. Cada uma recebeu cerca de 40-50 operrias, um favo com cerca de 40-50 pupas prestes a emergir e um pequeno pedao de invlucro. Elas foram mantidas fechadas durante 18 dias em estufa B.O.D. (28 C 1) e receberam mel e plen proveniente de Scaptotrigona depilis diariamente at o fim do experimento. Assim que as rainhas emergiram, elas foram introduzidas nas mini-colnias dentro de um tubo plstico perfurado. Isso impediu que elas fossem atacadas nesse momento e providenciou melhor aceitao pelas operrias no dia seguinte, quando o tubo plstico foi aberto e a rainha liberada. No 18 dia, as mini-colnias foram abertas para o ambiente para que as rainhas pudessem realizar o vo nupcial. Foram mantidas lado a lado, cerca de 60 cm uma da outra. No dia da abertura, cada colnia recebeu mais um favo com cerca de 40-50 pupas prestes a emergir e cerca de 40-50 operrias. Esse procedimento foi repetido quinzenalmente at que as rainhas iniciaram a postura. Dessa
105
forma, a populao das mini-colnias foi mantida com cerca de 100-150 operrias at o momento da postura. Quando a postura foi iniciada as mini-colnias receberam cerca de 80-100 operrias, um favo com cerca de 80-100 pupas prestes a emergir, dois potes de plen de N. testaceicornis e a colmia foi acrescida com mais uma gaveta simples (10x10x4cm). A evoluo da postura das rainhas foi acompanhada diariamente, por meio de mapeamento de favo.
Resultados
Entre as 100 transferncias larvais realizadas, emergiram 21 indivduos adultos com morfologia de rainha. Duas das rainhas apresentaram problemas de formao nos tarsos das pernas posteriores. As 21 rainhas introduzidas em mini-colnias foram aceitas pelas operrias, pois no foram observadas agresses srias contra elas. Apesar de terem sido aceitas, nove rainhas (43%) morreram durante a primeira etapa do experimento, ou seja, enquanto foram mantidas fechadas na estufa. As 13 mini-colnias que possuam rainhas vivas foram abertas ao ambiente quando elas possuam 18 dias de vida. Baseado nos dados existentes para o amadurecimento das rainhas virgens de Scaptotrigona postica (Engels e Engels, 1988), estima-se que todas as rainhas j estavam maduras no momento da abertura para o ambiente, assim o vo nupcial deveria ocorrer imediatamente ou nos prximos dias. Duas dessas rainhas foram encontradas mortas dentro da colnia; seis realizaram o vo nupcial e no retornaram; cinco realizaram vo nupcial e retornaram, fundando sua mini-colnia com sucesso. A oviposio iniciou-se, em mdia, com 55 dias de vida (n = 5, 21), mnimo de 43, mximo de 81. Trs das rainhas iniciaram postura poucos dias aps se tornarem fisogstricas (6 dias, 2 dias e 1 dia, respectivamente), enquanto as outras duas demoraram muitos dias (22 dias e 27 dias, respectivamente).
Discusso
A tcnica de criao de rainhas in vitro desenvolvida por Conceio Camargo (1972b) tem sido estudada e aprimorada nos ltimos anos, o que permitiu aumentar as taxas de sobrevivncia nas transferncias larvais, chegando a mais de 90% em alguns casos (Menezes e Imperatriz-Fonseca, 2007). Estes aprimoramentos tm permitido realizar pesquisas bsicas e aplicadas que antes eram inviveis para a maioria das espcies de abelhas sem ferro. A tcnica j est sendo usada para estudar o comportamento das abelhas sem ferro, aspectos da comunicao qumica e atuao de feromnios, presses seletivas envolvidas na escolha e aceitao das rainhas, determinao de castas, programas de melhoramento de colnias, entre outros (Flach et al., 2006; Menezes et al., 2006; Pianaro, A, Menezes, C, Imperatriz-Fonseca, VL e Marsaioli, AJ, dados no publicados). Contudo, a utilizao da tcnica freqentemente esbarrava em um obstculo crucial, a dvida sobre a capacidade dessas rainhas de fundar colnias. Conceio Camargo (1972a) foi a primeira a mostrar que rainhas produzidas in vitro so capazes de fundar colnias normalmente. Essa autora realizou um experimento com Scaptotrigona postica semelhantemente ao presente trabalho, utilizando 5 rainhas. Duas foram mortas pelas operrias, duas voaram e no voltaram e uma conseguiu fundar uma colnia. Recentemente, Mauro Prato (2008) conseguiu fundar uma colnia de Tetragonisca angustula com uma rainha produzida in vitro, introduzindo-a em uma colnia rf. O presente trabalho confirmou que as rainhas de N. testaceicornis produzidas in vitro tambm so aptas a fundar colnias e realizar oviposio normalmente. Esses dados representam um avano muito importante para futuras pesquisas que dependem de grande nmero de rainhas em curtos perodos de tempos ou de condies alimentares controladas e manipulveis.
106
O mtodo de multiplicao apresentado no presente trabalho , no mnimo, igualvel aos mtodos tradicionais, pois duas colnias fortes produziram cinco colnias filhas em seis meses. Utilizando mtodos tradicionais, as duas colnias fortes usadas no experimento poderiam formar no mximo quatro colnias filhas no mesmo perodo, 6 meses (Kerr et al., 1996; Nogueira-Neto, 1997; QuezadaEun et al., 2001; Cortopassi-Laurino et al., 2006; Klumpp, 2007). Esta foi a primeira tentativa de utilizao do mtodo e, portanto, muitas dificuldades encontradas podem ser superadas futuramente mediante pesquisa cientfica e aprimoramento das tcnicas. Experimentos j esto em andamento para superar os obstculos encontrados. Dessa forma, o sucesso do mtodo dever aumentar na medida em que avancem os estudos sobre sua utilizao e sobre os aspectos relacionados da biologia e manejo das abelhas sem ferro. O presente trabalho abre novas possibilidades de pesquisa bsica e aplicada nas abelhas sem ferro. Representa o incio do caminho para conseguir produzir colnias de abelhas sem ferro em larga escala. Mas evidencia o sucesso da criao de rainhas em condies experimentais, in vitro.
Agradecimentos
Os autores agradecem FFCLRP-USP pelo suporte logstico, ao programa de ps-graduao em Entomologia e Fapesp pelo suporte financeiro (proc. 04/15801-0 e 07/50218-1).
Bibliografia
Camargo CA (1972)a. Determinao de castas em Scaptotrigona postica Latreille (Hymenoptera, Apidae). Rev. Bras. Biol. 32: 133-138. Camargo CA (1972)b. Produo in vitro de intercastas em Scaptotrigona postica Latreille. (Hymenoptera, Apidae). In: Homenagem W. E. Kerr: 37-45. Castro MS, Koedam D, Contrera FAL, Venturieri GC, Parra GN, Malagodi-Braga KS, Campos LO, Viana M, Cortopassi-Laurino, M, Nogueira-Neto P, Peruquetti RC, Imperatriz-Fonseca, VL (2006). Bee management for pollination purposes: Stingless bees. In: Bees as pollinators in Brazil: assessing the status and suggesting best practices (Imperatriz-Fonseca VL, Saraiva AM and De-Jong D, eds.). Holos Editora, Ribeiro Preto, 75-88. Cortopassi-Laurino M, Imperatriz-Fonseca VL, Velthuis HHW and Nogueira-Neto P (2001). Stingless bee rearing as an activity for sustainable development. In: Proceedings of the 37th International Apicultural Congress. Cortopassi-Laurino M, Imperatriz-Fonseca VL, Roubik D, Dollin A, Heard T, Aguilar I, Venturieri G, Eardley C and Nogueira-Neto P (2006). Global Meliponiculture: challenges and opportunities. Apidologie 27: 275-292. Engels E and Engels W (1988). Age-dependent queen atractiveness for drones and mating in the stingless bee, Scaptotrigona postica. J. Apic. Res. 27: 3-8. Flach A, Marsaioli AJ, Singer RB, Amaral MC, Menezes C, Kerr WE, Batista-Ferreira LG and Corra AG (2006). Pollination by sexual mimicry in Mormolyca rigens: a floral chemistry that remarkably matches the pheromones of virgin queens of Scaptotrigona sp. J. Chem. Ecol. 32: 59-70. Hartfelder K, Market GR, Judice CC, Pereira GAG, Santana WC, Dallacqua R and Bitondi M (2006). Physiological and genetic mechanisms underlying caste development, reproduction and division of labor in stingless bees. Apidologie 37: 144-163. Heard TA (1999). The role of stingless bees in crop pollination. Ann Rev Entomol. 44: 183-206.
107
Heard TA and Dollin AE (2000). Stingless bee keeping in Australia: snapshot of an infant industry. Bee World. 81: 116-125. Kerr WE, Carvalho GA and Nascimento VA (1996). Abelha uruu: biologia, manejo e conservao. Ed. Fundao Acanga, Belo Horizonte. Klumpp J (2007). Australian stingless bees: a guide to sugarbag beekeeping. Earthling Enterprises, Brisbane. Menezes C and Imperatriz-Fonseca VL (2007). Stingless bees in vitro rearing in Scaptotrigona aff. depilis (Apidae, Meliponini) In: Proceedings of the 40th Apimondia International Apicultural Congress, Melbourne. Menezes C, Bonetti AM and Kerr WE (2006). Quantidade de alimento larval necessria para produo de rainhas de Nannotrigona testaceicornis em laboratrio. In: Anais do XVI Congresso Brasileiro de Apicultura, Aracaju. Nogueira-Neto P (1997). Vida e criao de abelhas indgenas sem ferro. Editora Nogueirapis, So Paulo. Prato M (2008). Produo in vitro de rainhas em Tetragonisca angustula Latreille, 1811 (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). In: Anais do 17 Congresso Brasileiro de Apicultura e 3 de Meliponicultura, Belo Horizonte. Quezad-Eun JJG, May-Itza WJ and Gonzalez-Acereto JA (2001). Meliponiculture in Mexico: problems and perspectives for development. Bee World. 82: 160-167. Slaa EJ, Snchez-Chaves LA, Malagodi-Braga KS and Hofstede FE (2006). Stingless bees in applied pollination: practice and perspectives. Apidologie, 37: 293-315. Velthuis HHW (2002). The historical background of the domestication of the bumble-bee, Bombus terrestris, and its introduction in agriculture. In: Kevan P and Imperatriz-Fonseca VL (Eds.) Pollinating Bees - The Conservation Link Between Agriculture and Nature, Braslia. Velthuis HHW and Van Doorn A (2006). A century of advances in bumblebee domestication and the economic and environmental aspects of its commercialization for pollination. Apidologie 37: 1-31.
108
The Efficiency in Detecting, Uncapping and Removing Dead Brood in Africanized Honey Bees
Michelle Manfrini Morais1*, Rogrio Aparecido Pereira1, Tiago Mauricio Francoy1, Ktia Peres Gramacho3 , David De Jong2 and Lionel Segui Gonalves1 1 Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo - email: mmanfrini@rge.fmrp.usp.br 2 Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo 3 Faculdade de Tecnologia e Cincias FTC, Salvador
Abstract
The hygienic behavior of the honey bees is based in a three steps process including punctuation of the cell followed by uncapping and removing diseased, dead, damaged or parasited brood inside the cell. We evaluated in periods of one hour the time that hygienic and non hygienic colonies of Africanized honey bees spend to detect, uncap and remove pin killed brood using small spinning frames placed in observation hives. We found out that hygienic colonies are significantly faster in detecting, uncapping and removing dead brood in the cells (P < 0.001). Our results indicate that hygienic bees should have physiological and behavioral differences, what leads to the better performance in this task. When compared with other data from honey bees of European origin, the Africanized bees were also more efficient when performing the hygienic behavior.
Introduction
The hygienic behavior of the Apis mellifera bees consists on the detection by workers of diseased, dead or damaged brood. This detection is normally followed by the uncapping of the cells and the selective removal of the abnormal brood. This behavior is genetically controlled by two pairs of recessive genes (u=uncapping and r=removal). When in homozygosis (uu/rr), they allow the bee to detect and to remove the abnormal brood (Rothenbuhler, 1964a,b). Though other studies suggest different numbers of genes responsible for the control of this behavior (Moritz 1998; Gramacho, 1999; Lapidge et al., 2002), the hypothesis of Rothenbuhler is the only one experimentally proved. In a colony of A. mellifera, a great intra colonial variability is found due to the great number of males which mates with the queen (Adams et al., 1977), leading to the existence of several subfamilies inside a colony (Page & Robinson, 1991). Thus, all the colonies are able to detect and remove diseased or dead brood, but in different rates (Gramacho & Spivak, 2003). In addition, the expression of this behavior can vary in colonial or in individual levels (Spivak et al., 2003). Typically, bees from a hygienic colony uncap and remove abnormal brood faster than a non hygienic colony.
109
However, in spite of being a very important behavior, the mechanisms used by the bees to identify the dead or diseased brood is not completely clarified yet. Masterman et al. (2001) demonstrated through proboscis extension reflex that hygienic bees can discriminate between healthy and diseased brood at lower thresholds than non hygienic bees. Gramacho and Spivak (2003) also found out that the bees collected while uncapping cells were more sensitive to odors than those collected while removing the brood. Gramacho (1995) compared the hygienic behavior of Africanized, Italian, Carniolan and hybrids and was able to demonstrated that Africanized bees presented a more efficient hygienic behavior than all other groups (P< 0.05) while Carniolan bees were the least efficient in the removal of dead brood. In 1999, Gramacho studied with more details in Germany the uncapping and removal time of dead brood in colonies of A. m. carnica. Palacio et al. (2005) evaluated the time that selected hygienic and non hygienic colonies of European bees spent to uncap and to remove dead brood in observation hives and verified that the hygienic colonies were much more efficient than the non hygienic. It is well known that Africanized bees are resistant to brood diseases and one of the factors that lead to this resistance is the accentuated hygienic behavior. Thus, the aim of this study is to evaluate the time of uncapping and removal of dead brood by hygienic and non hygienic colonies of Africanized honey bees in order to verify the efficiency of these bees in this task.
Material and Methods

Seventy colonies of Africanized honey bees were tested to hygienic behavior using the pinkilled test (Newton & Ostasiewsk (1986) modified by Gramacho & Gonalves 1994). These colonies were classified in three different groups according to the percentage of removed brood after 24 hours. Those which removed 80% or more of the dead brood were classified as hygienic colonies and those which removed 40% or less were classified as non hygienic. The colonies which removed values between 41%and 79% were classified as intermediate and were not used in this study. These percentages were obtained after three consecutive tests with an interval of 15-20 days between them . Four hygienic and four non hygienic colonies with the most extreme values were selected and queens were produced from two colonies of each type. They were instrumentally inseminated with the semen of about 10 drones, which were produced by the other two colonies and introduced in fourframes Langstroth nucleus. After 60 days, two hygienic (H) and two non hygienic (NH) observation hives were mounted using bees from these colonies in order to verify the time of uncapping and removal of the dead brood. For a better visualization of the hygienic behavior, the observation hives were adapted with the introduction of a small special fixed spinning frame based in the rotatory comb device described by Gramacho (1999). It consists of a small part of comb inserted between two glass pieces of 2.54 cm x 15 cm x 5 cm with a small wood block in each extreme. These spinning frames were introduced in normal Langstroth hives in our apiary (211006S 465136W). When the brood reached 10 to 14 days old, the spinning frame was removed from the colonies, the brood was pin-killed using number 1 entomological pin and the spinning frame was introduced in the observation hives. The fixed spinning frame allows the observation of the whole process of detecting, uncapping and removal facilitating the visualization of the contact between adult bees and the dead brood during the hygienic process. Ten pupae were killed at each of the three tests and the stages of uncapping and removal were recorded according to the methodology proposed by Palacio et al. (2005). We inspected the stages in intervals of one hour from 0 hours until the complete removal of the dead brood.
110
The following codes were used to analyze the uncapping stages: U0: Only the hole made by the pin-kill test was detected. No honey bee activity was detected. U1: Less than a half of the cell was uncapped. U2: Fifty percent of the cell was uncapped. U3: More than half of the cell was uncapped. U4: The cell was completely uncapped. The stages of removal were recorded as follow: R0: The worker brood was untouched. R1: The honey bees began removal but the worker brood was still inside the cell. R2: Less than 50% of the worker brood was removed. R3: Fifty percent of the worker brood was removed. R4: More than 50% of the worker brood was removed. R5: Less than 50% of the worker brood remained in the bottom of the cell. R6: Worker brood was totally removed. A total of 60 cells were analyzed for each group (hygienic and non hygienic) and the mean times of detection, uncapping and removal were compared using Mann-Whitney test.
Results
We compared the stages of detection (punctuation of the cell), uncapping and removal of hygienic (H) and non hygienic (NH) bees. When comparing the time of detection of the dead brood in the cells, the H bees were significantly more efficient than the NH bees (P < 0.001) (Table 1). We considered the time of detection the moment when the brood was first uncapped in any stage. In one hour after the beginning of the test, 43% of the dead brood had already been detected in H against 25% in NH. After 3 hours 93% of the dead brood had already been detected in H against 70% in NH. The maximum time that a brood became undetected was 6 hours in H against 28 hours in NH (Figure 2). Table 1 - Total time spent by hygienic and non hygienic Africanized bees for detecting, uncapping and removing the dead brood in hours since the perforation of the brood. Different letters in the same row indicate significant statistical differences at a P < 0.001. Total detection time Total uncapping time Total removal time Hygienic 0.90 1.13a 2.20 1.50a 5.95 3.16a Non Hygienic 2.93 4.87b 5.65 5.34b 12.40 5.79b
The total time of uncapping was significantly different in H and NH (P < 0.001) with H being more efficient (Table 1). After one hour, 43% of the dead brood was completely uncapped in H and just 7% in NH. The most pronounced difference between two observation times was after two hours of the perforation, when 67% of the brood in H colonies was already uncapped against 25% in NH colonies. The maximum time to uncap a cell was 7 hours in H and 29 hours in NH (Figure 3). As the other two observations, the total time of removal of the dead brood was also significantly shorter in H colonies than in NH colonies (P < 0.001) (Table 1). NH colonies took 6 hours to remove completely the first brood. At this moment, 53% of the dead brood had already been removed by H colonies. The most pronounced difference between the two groups in this task happened 8 hours after the beginning of the experiments, when 87% of the brood had already been removed in H colonies and just 32% in the NH colonies (Figure 4). The maximum time to remove a dead brood by the H colonies was 15 hours while the NH colonies took 35 hours. It is worth to mention that the H colonies
111
removed two dead pupae in less than 10 minutes after the beginning of the experiments, demonstrating the great sensibility of these bees. Figure 2 - Time of detection of the pin killed brood by hygienic and non hygienic bees in observation hives.
Hygienic 100% Non Hygienic
80%
% of removed brood
60%
40%
20%
0% 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 Hours
Figure 3 - Total time of uncapping of dead brood by hygienic and non hygienic Africanized bees after the perforation of the cell
80%
% of uncapped brood
60%
40%
20%
0% 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 Hours
112
Figure 4: Time of removal of the dead brood by hygienic and non hygienic Africanized bees after the perforation of the brood.
80%
% of detected brood
60%
40%
20%
0% 0 2 4 6 8 10 12 14 Hours 16 18 20 22 24 26 28
Discussion
In spite of hygienic behavior is a very well studied subject, most of the research is focused on the final efficiency of the colonies and the intermediate steps of this behavior are still not clear. In this work we analyzed hour per hour the stages of uncapping and removal of the dead brood to verify if there are differences in these intermediate procedures in two groups of honey bees (H and NH). As the hygienic colonies were more efficient in detecting the dead brood inside the capped cell, there may be some physiological differences between the two groups. In fact, differences in the olfactory discrimination hability between H and NH honey bees were already detected using proboscis extension reflex (Masterman et al., 2000). Gramacho et al. (2003), despite not showing significant differences in the number of olfactory structures in the antennas, found out that this number is slightly higher in the hygienic bees. The hygienic bees were also more efficient in uncapping and removing the dead brood, indicating that, besides physiological, there is also a behavioral difference between the two groups. Pereira et al. (in prep) showed that non hygienic bees spend more idle time than the hygienic ones. This may also help to explain the more effective work of the hygienic bees in uncapping and removing the dead or damaged brood. Gramacho (1999), studying the time of uncapping and removal of dead brood in A. m. carnica, found that the bees started to work on the perforated cell after two hours. Palacio et al. (2005) observed that one hour after the pin killing of the brood is already enough time to verify the detection of the dead brood. In fact, our data show that some dead brood were already uncapped and removed after 5 to 10 minutes, indicating the great sensibility of the Africanized hygienic bees in this behavior. The accentuated hygienic behavior are claimed to be one of the most important factors contributing to the great disease resistance in these bees (Guerra Jr et al., 2000).
113
Gramacho (1995) demonstrated that the Africanized bees presented a more efficient hygienic behavior than the European bees. However the first study that evaluated the intermediate stages of hygienic behavior was done by Gramacho (1999), with intervals of two hours and using Langstroth hives and by Palacio et al. (2005) using observation hives. Gramacho (1999) evaluated the uncapping and removal stages until 10 hours after the perforation and Palacio et al. (2005) observed until 6 hours after the perforation. Both studies verify the stages just 24 hours after the perforation once they checked the maximum time in the initial stages. Gramacho (1999) found removal rates between 1% and 31.6% of removed brood 6 hours after the pin killing and Palacio et al. (2005) found relative percentages of removal of 64% for H colonies and 26% for NH colonies. Our data show that H colonies removed 58% and NH colonies removed only 8% of the dead brood. Despite both works (Gramacho, 1999; Palacio et al., 2005) are done with honey bees of European origin, a fair comparison is only possible with the data from Gramacho (1995, 1999), since she uses real percentages while Palacio et al. (2005) work with relative percentages. Thus, we come to the conclusion that the efficiency of the hygienic behavior is higher in Africanized bees not only in the final results, but in all the stages involved in this task.
Acknowledgements
We dedicated this work to Prof. Dr. Warwick Estevam Kerr in the occasion of his 85th birthday. We are also profoundly in debt with our apiary technician Adelino Penatti. Financial support was provided by CAPES, CNPq and FAPESP.
Bibliography
Adams, J., Rothman, E.D., Kerr, W.E. and Paulino, Z.L. (1977). Estimation of Number of Sex Alleles and Queen Matings from Diploid Male Frequencies in a Population of Apis mellifera. Genetics 86: 583-596. Gramacho, K.P. (1995). Estudo do Comportamento Higinico em Apis mellifera como subsidio a programas de seleo e Melhoramento Gentico em abelhas . M. Sc. Thesis, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, USP, Ribeiro Preto, SP, Brasil. Gramacho, K.P. (1999). Fatores que interferem no Comportamento Higinico das abelhas Apis mellifera. Ph.D. thesis, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, USP, Ribeiro Preto, SP, Brasil. Gramacho, K.P. and Gonalves, L.S (1994). Estudo comparativo dos mtodos de congelamento e perfurao de crias para avaliao do comportamento higinico em abelhas africanizadas. In: Anais do Congresso Latinoiberoamericano de Apicultura, 4: Cordoba, Argentina, p - 45. Gramacho, K.P.; Gonalves, L.S; Stort, A.C. and Noronha, A.B. (2003). Is the number of antennal plate organs (sensilla placodea) greater in Africanized honey bees ? Genetics and Molecular Research 2:309-316. Gramacho, K.P. and Spivak, M (2003). Differences in olfactory sensitivity and behavioural responses among honey bees bred for hygienic behavior. Behav Ecol Sociobiol. 54: 472-479. Guerra, Jr; J.C.V.; Gonalves, L.S. and De Jong, D. (2000). Africanized honey bees (Apis mellifera L) are more efficient at removing works brood artificially infested with the parasitic mite Varroa jacobsoni than are Italian bees or Italian/Africanized hybrids. Genetics and Molecular Biology. 23: 89-92.
114
Lapidge, K.L, Oldroyd, B.P. and Spivak, M. (2002). Seven suggestive quantitative trait loci influence hygienic behavior of honey bees. Naturwissenschaften 89: 565-568. Masterman, R, Ross, R, Mesce, K and Spivak, M (2001). Olfactory and behavioral response thresholds to odors of diseased brood differ between hygienic and non-hygienic honey bees (Apis mellifera L.). J Comp Physiol. 187: 441-452. Moritz, R.F.A. (1988). A reevaluation of the two-locus model for hygienic behavior in honey bees (Apis mellifera L.). J. Hered., 79: 257-262. Page, R.E.Jr. and Robinson, G.E. (1991). The genetics of division of labour in honey bee colonies. Adv Insect Physiol 23: 117-169. Palacio, M.A., Flores, J.M., Figini, E., Ruffinengo, S., Escande, A., Bedascarrasbure, E., Rodriguez, E. and Gonalves, L.S. (2005). Evaluation of the time of uncapping and removing dead brood from cells by hygienic and non-hygienic honey bees. Genetics and Molecular Research 4, 1: 105-114. Rothenbuhler, W.C. (1964a) Behaviour genetics of nest cleaning in honey bees. I. Responses of four inbred lines to disease-killed brood. Anim. Behav. 12: 578-584. Rothenbuhler, W.C. (1964b) Behaviour genetics of nest cleaning in honey bees. IV. Responses of F1 and backcross generations to disease-killed brood. Am. Zool. 4: 111-123.
115
SI MPS IO 7
BIOLOGIA E GENTICA DE ABELHAS SEM FERRO
Coordenador: Ana Maria Bonetti
116
Sex and Caste in Amazonian Melipona Bees

Carlos Gustavo Nunes-Silva1,2, Spartaco Astolfi-Filho2, Gislene Almeida Carvalho-Zilse3
1
Universidade Federal do Amazonas, UFAM Programa de Ps-Graduao em Biotecnologia, Manaus, Brazil 3 Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA/CPCA) Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia, Manaus, Brazil
2
Universidade Nilton Lins, Laboratrio de Entomologia, Avenida Nilton Lins 3259, 69.058-030, Manaus, Brazil e-mail: cnunes@niltonlins.br
Abstract
Social bees are one of the most studied insect groups, due to its popularity, economic and ecological importance. However, some of the biological questions about these animals has constituted a challenge. One of these questions is the origin of social life. In stingless bees Melipona (Hymenoptera; Apidae) many studies has been conducted throughout the years and showed important implications in the caste and sex determination system. A well feed brood can produce of virgin queens, and the late larval stages have a crucial role in the caste determination due to the Juvenile Hormone levels produced. In the other hand sex determination happens according to the csd gene segregation which seems to be regulated in the first hours of development in Apis honeybees. How does caste and sex determination mechanisms may interact and how does it work to determine the social role in the colony? This questions can possibly be answered by studies at genomic level, using molecular biology approaches. Using the RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) technique, a novel gene was cloned, sequenced and analyzed. The analysis show that this predict gene product have 64% of identity and 75% of similarity with its equivalent feminizer gene (fem) in A.mellifera.
Introduction
Stingless bees Stingless honeybees (Apidae, Meliponinae) are distributed over the tropical and southern subtropical regions throughout the word (Michener, 2000). The genus Melipona (Apidae, Meliponini) holds approximately 50 species, occurring along the Neotropical region. At least 40 species exist in Brazil, most of them in the Amazon basin (Silveira et al., 2002). These native bees have an essential role in the ecosystem maintenance, mainly due to its pollination service (Kerr et al., 1996). As well, Melipona bees are the most extensively reared stingless bee in the Brazilian territory (Carvalho-Zilse, unpublished data). The variability in physiological, ecological and behavioral traits makes Melipona stingless bees unique among other groups of social hymenoptera. Sex and caste determination The haplodiploid sex determination system is probably common to all hymenopterans (bees, wasp and ants), appearing sporadically in others insects orders (Bull, 1983). In this mechanism males originate from unfertilized eggs (haploid) and females arise from fertilized eggs (diploid). Females are always heterozygous for a pair of distinct alleles at the sex-determining locus, whereas males are
117
hemizygous. However, males also can originate from fertilized eggs producing the so called diploid males which are always homozygous. As observed in honeybees and some stingless bees species, diploid males can be produced by inbreeding (Dzierzon, 1845; Adams et al, 1977; Kerr, 1987; Carvalho, 2001). In Apis this homozygous males are eaten by workers before they emerge from its brood cells (Woyke, 1980) . Instead, no contact between larvae and workers occurs in Melipona bees, which brood cells are sealed by the workers after queen oviposition. In this case diploid males are killed as they leave the brood cell (Kerr et al., 1996). Therefore, there is a lethality being diploid male and, this means a selection pressure to increase the number of distinct alleles of the sex determiner gene (Yokoyama and Nei, 1979; Charlesworth, 2004). Studies estimate to exist around 20 alleles of the sex determiner gene (designated as csd complementary sex determiner) in honeybee (Mackensen, 1955; Laidlaw et al., 1956; Adams et al., 1977; Cook, 1993; Cook and Crozier, 1995; Beye et al., 2003) and from 16 to 36 in Melipona bees (Kerr and Vencovsky, 1982; Carvalho, 2001) which are among several estimation of allele number for other species (se recent review in Wilgenburg et al., 2006). In honeybees, a single queen can be mated many times, therefore the number of distinct alleles is greater than in single or low mated stingless bees (Contel and Kerr, 1976; Peters et al. 1999; Paxton et al., 1999b; Palmer et al 2002; Paxton, 2003). With the cloning of the csd and its molecular analysis (Beye et al., 2003, Beye 2004; Hasselmann and Beye, 2004; Hasselmann et al., 2008) and, the honeybee genome released (Honeybee Genome Consortium, 2006), the virtually known csd gene became real and, to understand the sex determination mechanism in honeybee and other bee species, turned it in a feasible task. The presence of castes among females and a system of seasonal production of males is essential to life in society for the high eusocial bees. The sex determination genes appear to be in the beginning of a regulatory cascade in which originate different phenotypes. The caste, in bees, is determined by means of biochemical pathways during the development, regulated by genetic expression capable to generate two alternative phenotypes: worker (sterile female) and queen (complete female). However, the caste determination systems existing among the high eusocial bees are yet poorly understood in their genetic basis and seems to be fairly complex as diverse (Evans and Wheeler, 2000; Hartfelder et al. 2006). There is a known caste determination mechanism proposed by Kerr (1946, 1948, 1950) to the Melipona genus, in which the quantity of food versus genetics (genes xa and xb - each one with two alleles) lead the whole downstream events in caste determination. These genes, when in double heterozygosis, would be activated by the Juvenile Hormone (HJ) which limit of production would be determined by a minimum of intake food for the larvae at the developmental stage (Bonetti, 1984; Nunes-Silva et al., 2006). In adequate feeding conditions, there is the enough HJ production by the corpora allata glands which would activate other different feminizing genes bringing to a segregation of three workers to one queen (25% of queens) (Kerr et al., 1996). The search for morphological markers, experiments with JH and, molecular genetic markers are the approaches used to tackle such issues, confirming or adjusting the Kerrs genetic hypothesis (see extent review in Hartfelter, 2006). Material and Methods Samples of Melipona compressipes were collected from colonies at the Bee Research Group (GPA) INPA, Manaus, Brazil. Total RNA from immature instars and adults was isolated by using the TRIzol protocol (Invitrogen), and mRNAs were obtained by using Dynabeads Oligo(dT)25 (Dynal Biotech, Invitrogen). First- and second-strand cDNA was synthesized by following the instructions of the RevertAid H Minus kit protocol (Fermentas).
118
Conserved sets of primers were designed based on sequences of 5 and 3RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) fragments by following the protocol of the FirstChoice RLM-RACE kit (Ambion). PCRs were performed under standard conditions (Hasselmann and Beye, 2004) including proofreading Pwo DNA Polymerase. PCR fragments were cloned into pGEM-T vector (Promega). Cloned fragments were subjected to sequencing (MWGBiotech, Ebersberg, Germany). Reads were assembled by using STADEN PACKAGE VERSION 4.6. To verify sequence similarities between A. melliferas fem sequences they were aligned by using the CLUSTALX program (Thompson et al., 1997). The sequences were manually edited by using the BIOEDIT program. At the present time we are setting RT-PCR experiments to verify the gene fem expression in all the bee stages of development.
Results and Discussion

Using the RACE technique, the gene fem was cloned, sequenced and analyzed.The analysis show that this predict gene product have 64% of identity and 75% of similarity with its equivalent (Fem) in A. mellifera, possessing the same protein domains: Arginine-Serine (RS-domain) and Proline (Proline rich domain). Besides that, fem is expressed in all immature instars and adults. It has been found expressed in males, workers and queens, showing the same pattern of A. mellifera, in which this gene is also expressed in all developmental stages and in both sex and caste. The gene fem in M. compressipes as in Apis , lacks the hyper variable region which characterizes its paralogue csd (Beye et al., 2003; Hasselmann et al. 2008). So far there is no indication of csd presence as it occurs in the genus Apis, suggesting a distinct way of regulation. Thus, both genes csd and fem, are evidently paralogues coding for SR-type proteins, which are thought to be involved generally in the regulation of RNA splicing (Blencowe et al., 1999). Probably, the csd gene is not the universal molecular basis of complementary sex determination in Melipona bees, suggesting that other unknown molecular signals are the primary sex determiners in this species (Hasselmann et al., 2008). Therefore, further analysis are needed to uncover molecular characterization of this primary signal (Evans, et al., 2004) in stingless bees in order to elucidate population-genetics issues since the haplodiploidy has unique consequences to the population ecology and social evolution in these insects. In eusocial bees, the reproductive roles of the colony members would be frequently set by events that occur in the development stages (Evans and Wheeler, 1999 and 2000). Among these events, could the fem gene be involved in caste determination as well? The sequence generated in this study is available in GenBank under the accession number EU139305 (M. compressipes fem). Acknowledgments We are grateful to CNPq, DAAD, FAPEAM and IBAMA for the grants, financial aid and partnership. Also we thank to Profs. Martin Beye and Martin Hasselmann and, as well, their lab team for the support, ideas, facilities and great research environment.
References
Adams J, Rothman ED, Kerr WE, Paulino, ZL (1977). Estimation of the number of sex alleles and queen matings from diploid male frequencies in a population of Apis mellifera. Genet., 86(3):583-596.
119
Beukeboom LW (1995). Sex determination in Hymenoptera: a need for genetic and molecular studies. BioEssays, 17(9): 813-817. Beye M (2004). The dice of fate: the csd gene and how its allelic composition regulates sexual development in the honey bee, Apis mellifera. BioEssays, 26 (10): 1131-1139. Beye M, Hasselmann M, Fondrk MK, Page RE, et al. (2003). The gene csd is the primary signal for sexual development in the honeybee and encodes an SR-type protein. Cell, 114: 419-429. Blencowe B, Bowman J, McCracken S, Rosonina E (1999). SR-related proteins and the processing of messenger RNA precursors. Biochem. Cell Biol., 77: 277-291 . Bonetti AM (1984). Efeitos do hormnio juvenil no desenvolvimento ovariano de Melipona quadrifasciata. Rev. Bras. Biol., 44(4): 509-518. Bull JJ (1983). Evolution of Sex Determining Mechanisms. Benjamin/Cummings Publishing Company Menlo Parck. 92p. Carvalho GA (2001). The number of sex alleles (CSD) in a bee population and its practical importance. Jour. Hym. Res., 10(1): 10-15. Carvalho GA, Kerr WE, Nascimento VA (1995). Sex determination in bees XXXIII. Decrease of xo heteroalleles in a finite population of Melipona scutellaris (Apidae, Meliponinae). J. Braz. Genet. 18(1): 13-16. Charlesworth D (2004). Sex determination: balancing selection in the honey bee. Curr. Biol., 14: R5 68R569. Contel EPB, Kerr WE (1976). Origin of males in Melipona subnitida estimated from data of an isozymic polymorphic system. Genetica 46, 271277. Cook JM, Crozier RH (1995). Sex determination and population biology in the Hymenoptera. Trends in Ecol. Evol.,10: 281-286. Cook JM. (1993). Sex determination in the Hymenoptera: a review of models and evidence. Heredity, 71: 421-435. Dzierzon, J. (1845). Gutachen ber die von Herrn Direktor Sthr im ersten und zweiten Kapitel des General-Gutachens aufgestellten Fragen. Eichstdt Bienenzeitung 1:109-113, 119-121. Evans JD, Shearman DCA, Oldroyd BP. 2004. Molecular basis of sex determination in haplodiploids. Trends Ecol. Evol. 19(3):120. Evans JD, Wheeler DE (1999). Differential gene expression between developing queens and workers in the honey bee, Apis mellifera. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96(10):5575-5580. Evans JD, Wheeler DE (2000). Expression profiles during honeybee caste determination. Genome Biol., 2(1):222-234. Hartfelder K, Makert GR, Judice CC, Pereira GAG, et al. (2006). Physiological and genetic mechanisms underlying caste development, reproduction and division of labor in stingless bee. Apidologie, 37:144163. Hasselmann M, Beye M (2004). Signatures of selection among sex-determining alleles of the honey bee. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 101: 48884893. Hasselmann M, Gempe T, Schiott M, Nunes-Silva CG, et al. (2008). Evidence for the evolutionary nascence of a novel sex determination pathway. Nature. In press Kerr W.E. (1950b) Genetic determination of castes in the genus Melipona, Genet. 35, 143152. Kerr WE (1946). Formao das castas no gnero Melipona (Illiger, 1806). In: Anais Esc. Sup. Agric. Luiz de Queiroz 3:299-312. Kerr WE (1948) Estudos sobre o gnero Melipona. In: Anais Esc. Sup. Agric. Luiz de Queiroz .5: 181 291.
120
Kerr WE (1987). Sex determination in bees. XXI. Number of xo-heteroalleles in a natural population of Melipona compressipes fasciculata (Apidae). Insect Soc., 34(4):274-279. Kerr WE (1997). Sex determination in honey bees (Apinae and Meliponinae) and its consequences. Braz. Journ. Genet., 4: 601-611. Kerr WE, Carvalho GA, Nascimento VA (1996). Abelha Uruu: biologia, manejo e conservao. Fundao Acanga, Paracatu-MG.143pp. Kerr WE, Vencovsky R (1982). Melhoramento gentico em abelhas. I. Efeito do nmero de colnias sobre o melhoramento. Braz. Journ. of Genet. (5): 279-285. Laidlaw HH, Gomes FP, Kerr WE (1956). Estimations of the number of lethal alleles in a panmictic population of Apis mellifera. Genet. 41: 179-188. Mackensen O (1955). Further studies on a lethal series in the honey bee. J. Hered. 46: 72-74. Michener CD (2000). Bees of the world. The Johns Hopkins University Press, Baltimore and London. 453pp. Nunes-Silva CG, Kerr WE, Bonetti AM, Carvalho-Zilse GA (2006). Effect of juvenile hormone III and heat shock in caste determination in Melipona scutellaris Latreille, 1811 (Hymenoptera, Apidae). Magistra, 18:100-102. Palmer KA, Oldroyd BP, Quezada-Euan JJG, Paxton RJ, et al. (2002). Paternity frequency and maternity of males in some stingless bee species. Mol Ecol., 11:21072113 Paxton RJ, Bego LR, Shah MM, Mateus S (2003). Low mating frequency of queens in the stingless bee Scaptotrigona postica and worker maternity of males. Behav Ecol Sociobiol., 53:174181 Paxton RJ, Weichuh N, Engles W, Hartfelder K, et al. (1999b). Not only single mating in stingless bees. Naturwissenschaftern, 86:143146. Peters JM, Queller DC, Imperatriz-Fonseca VL, Roubik DW, et al. (1999). Mate number, kin selection and social conflicts in stingless bees and honeybees. Proc R Soc Lond B, 266:379384. Silveira FA, Melo GA, Almeida EAB (2002). Abelhas brasileiras: sistemtica e identificao. 1st edn. Fund. Araucria, Belo Horizonte - MG.204pp. Staden R Beal KF, Bonfield JK (2000). The Staden package, 1998. Methods Mol. Biol., 132, 115130. The Honeybee Genome Sequencing Consortium (2006). Nature, 443, 931949. Thompson JD, Gibson TJ, Plewniak F, Jeanmougin F, et al. (1997). The CLUSTAL_X windows interface: flexible strategies for multiple sequence alignment aided by quality analysis tools. Nucleic Acids Res., 25:48764882. Whiting PW (1943). Multiple alleles in complementary sex determination of Habrobracon. Genet., 24: 110-111. Wilgenburg E, Driessen G, Beukeboom LW (2006). Single locus complementary sex determination in Hymenoptera: an unintelligent design? Frontiers in Zoology, 3:1-6. Woyke J (1980). Effect of sex allele homo-heterozigozity on honeybee colony populations and their honey production. I. Farovable development conditions and unrestricted queens. Journ. Apicult. Res., 19(1):53-63. Yokoyama S, Nei M (1979). Population dynamics of sex-determining alleles in honey bees and selfincompatibility alleles in plants. Genet., 91, 609-626.
121
Adaptaes das Abelhas Sem Ferro ao Clima Temperado do Sul do Brasil

Betina Blochtein, Sidia Witter, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca3 Departamento de Biodiversidade e Ecologia, Faculdade de Biocincias, Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul (PUCRS). Av. Ipiranga, 6681, Fone: 5133203545, betinabl@pucrs.br 2 Centro de Meteorologia Aplicada. Fundao Estadual de Pesquisa Agropecuria (FEPAGRO). Rua Gonalves Dias, 570. CEP: 90130-060 Porto Alegre-RS. sidia-witter@fepagro.rs.gov.br 3 Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto/USP, Depto. Biologia. Av. Bandeirantes, 3900, Monte Alegre, Ribeiro Preto, SP. CEP: 14040-901. veralif@ffclrp.usp.br
Abstract
Rio Grande do Sul state is the austral limit for stingless bees occurrence in Brazil, and for survival in its temperate climate stingless bees need special adaptations. Among others, the brood cells construction stops or diminishes in autumn and winter, and the flight activity of foragers diminishes as well. Here we analyze the published papers according to the behavioral answers of stingless bees to the temperate climate conditions. Concerning the brood cells construction, variations are inter and intraspecific, and 3 patterns occur: obligate reproductive diapause; facultative reproductive diapause; absence of reproductive diapause. In all studied colonies, the lower brood cell construction occurred at lower temperature and solar incidence. Nevertheless, during the reproductive diapause flight activity occur when temperature is enough to allow the bee flights. Among the abiotic conditions, temperature is limiting for flight activity. Nowadays, when climate change occurs, it is necessary to monitor bee species concerning diapause behavior in order to help management for their conservation and sustainable use.
Resumo
O Rio Grande do Sul representa o limite austral de distribuio da maioria dos Meliponini no Brasil e as condies de clima temperado exigem adaptaes para a sua sobrevivncia. Entre outras mudanas comportamentais verifica-se a reduo ou interrupo das atividades reprodutivas e a diminuio das atividades de vo. Este estudo reavalia a questo das respostas comportamentais de abelhas Meliponini sob condies de clima temperado do Sul do Brasil, a partir da anlise de trabalhos existentes. Quanto ao ritmo de oviposio h variaes entre espcies e entre colnias da mesma espcie, nas quais evidenciam-se trs padres: 1.diapausa reprodutiva obrigatria; 2.diapausa reprodutiva facultativa; 3.ausncia de diapausa reprodutiva. Em todas as colnias, o menor ritmo de postura coincidiu com as menores taxas de temperatura e de insolao mensal. Apesar da reduo das atividades no interior das colnias em perodos adversos, quando as condies meteorolgicas so favorveis, h atividade de vo mesmo durante a diapausa reprodutiva. Dentre os fatores abiticos que influenciam a atividade de vo, analisados nas distintas estaes do ano, somente a temperatura um fator limitante. No atual cenrio de mudanas climticas
122
necessrio o monitoramento de espcies para detectar mudanas em padres comportamentais e adotar medidas para a conservao e o uso sustentvel da biodiversidade. Palavras-chave: Meliponini, diapausa reprodutiva, Rio Grande do Sul, Melipona, Plebeia
Introduo
Os desmatamentos e a fragmentao de habitats tm sido apontados como importantes causas da diminuio das populaes de abelhas nativas, pois a sobrevivncia das abelhas depende, entre outros fatores, de recursos florais para a alimentao e de locais adequados para a nidificao (Michener, 1974; Roubik, 2006). Fragmentos de florestas conservadas so essenciais para a manuteno das populaes de abelhas sem ferro, em especial s espcies de Melipona e de Plebeia, as quais so predominantemente associadas a estes ecossistemas. Estudos em andamento no nordeste do Rio Grande do Sul (RS) indicam que Melipona bicolor schencki Gribodo, 1893 exigente quanto s espcies e ao dimetro das rvores para alojar seus ninhos (Witter et al., 2006). Os troncos com maior dimetro possivelmente proporcionam o isolamento trmico necessrio sobrevivncia destas colnias, pois nesta regio o inverno rigoroso (Instituto de Pesquisas Agronmicas, 1989). As mudanas climticas que vm sendo monitoradas pelo Intergovernmental Panel on Climate Change, desde 1979, confirmam que a Terra est em processo de aquecimento em uma velocidade sem precedentes. Neste cenrio, as conseqncias destas mudanas para as diferentes florestas que constituem a Mata Atlntica so distintas e, segundo as previses, seus efeitos deletrios sero piores nas regies Nordeste e Sul do Brasil, especialmente para a Mata de Araucrias (Joly, 2007). Neste ecossistema, no RS, trs espcies de Melipona so consideradas ameaadas de extino (Blochtein & Harter, 2003). Esta situao preocupante porque as abelhas so importantes agentes polinizadores e, portanto, essenciais para a conservao da biodiversidade (Gary, 2003) e para o incremento da produtividade de numerosos cultivos (Klein et al., 2006; Slaa et al., 2006; Ricketts et al., 2008). O territrio do RS representa o limite austral de distribuio da maioria das abelhas sem ferro ocorrentes no Brasil (Nogueira-Neto, 1997). Sob condies de clima temperado desta regio, com baixas temperaturas (Maluf, 2000) especialmente no outono e inverno, assim como outros animais, os insetos dependem para a sua sobrevivncia de adaptaes bioqumicas e fisiolgicas que resultam em modificaes das suas atividades ou metabolismo (Delinger, 1986, Leather et al. 1993, Nechols et al., 1999). Uma das conseqncias s condies adversas pode ser a interrupo temporria num determinado estgio de desenvolvimento ou da atividade reprodutiva (Nechols et al., 1999). Em Apis mellifera, a diapausa reprodutiva manifesta-se com a ausncia de cria (Seeley, 1985). Entre os Meliponini que se distribuem em regies com inverno relativamente rigoroso, h espcies que reduzem suas atividades sob condies climticas desfavorveis. No Sudeste e Sul do Brasil a interrupo das atividades de postura de ovos pelas rainhas (diapausa reprodutiva) ocorre em Plebeia julianii Moure, 1962 (Juliani, 1967), P. droryana (Friese, 1900) (Terada, 1980), P. saiqui (Holmberg, 1903) (Imperatriz-Fonseca & Oliveira, 1976; Pick & Blochtein, 2002a, b), P. emerina Friese 1900, (KleinertGiovannini, 1982; Santos, 2007), P. wittmanni Moure & Camargo, 1989 (Wittmann, 1989; Freitas & Wittmann, 1997), P. remota (Holmberg, 1903) (Benthem et al., 1995; Ribeiro et al., 2003), P. nigriceps (Friese 1901) (Witter et al., 2007) e M. marginata obscurior Moure, 1971 (Borges & Blochtein, 2005).
123
Durante este perodo adverso as atividades externas das abelhas tambm diminuem e comum a escassez de floradas. Assim, a reduzida disponibilidade de alimentos e a elevada necessidade de consumo de mel para a termorregulao das colnias tornam-se fatores crticos sobrevivncia das abelhas. A adoo de medidas para a conservao e manejo racional das espcies de Meliponini de regies de clima temperado depende do conhecimento da ecologia das espcies. Visando caracterizar sazonalmente as respostas comportamentais das abelhas sob condies de clima temperado, este trabalho tem como objetivo compilar e analisar comparativamente os conhecimentos sobre meliponneos do RS, especificamente quanto produo de crias e ao comportamento no interior dos ninhos.
Material e Mtodos
Origem dos dados e locais dos estudos. Os dados utilizados nesta sntese foram obtidos de Freitas (1994), Pick & Blochtein (2002a,b), Borges & Blochtein (2005, 2006) e Ferreira (2008). As colnias de Plebeia saiqui (n=4), Melipona marginata obscurior (n=4) e M. bicolor schencki (n=5), consideradas nestes estudos, so oriundas do nordeste do Rio Grande do Sul, respectivamente dos municpios vizinhos de So Francisco de Paula, Cambar do Sul e Rolante. Foram realizados em ambiente natural da regio de origem dos ninhos, a qual marcada pelo encontro de trs formaes fitoecolgicas que compreendem as Florestas Ombrfila Mista (Mata com Araucaria) e Ombrfila Densa (Mata Atlntica senso estrito) e os Campos de Altitude. As colnias foram instaladas no Centro de Pesquisas e Conservao da Natureza Pr-Mata da PUCRS (Pr-Mata), em So Francisco de Paula, RS (2927S/2935S e 5008W/5015W), onde a maior extenso da rea est na cota altimtrica de 900m, e a vegetao predominante a Mata com Araucria. O clima temperado supermido com regime pluviomtrico anual de 2.162mm anual (Maluf, 2000). As colnias de P. wittmanni so (n=3) oriundas de Canguu, no sul do RS, Brasil, na rea de domnio do bioma Pampa onde predomina a vegetao de Campo. As abelhas foram estudadas em Porto Alegre, na Depresso Central do Estado, onde o clima temperado permido com precipitao anual mdia de 1.309 (Maluf, 2000).
Resultados
Perodos de postura e de diapausa reprodutiva. Considerando-se as espcies estudadas quanto ao perodo e durao da diapausa reprodutiva, verifica-se que este fenmeno varia entre espcies e entre colnias da mesma espcie (Tabela I). As espcies de Plebeia consideradas cessaram a oviposio por cerca de 3 a 6 meses. Tambm em M. marginata obscurior registrou-se a interrupo de construo de clulas de cria, exceo de uma das colnias que no exibiu diapausa reprodutiva, embora o nmero de favos e de clulas tenha se reduzido consideravelmente. Nesta espcie, o nmero de favos nas colnias foi de 2 a 8, apresentando-se em maior nmero na primavera e no vero. Na primavera ocorreu o maior nmero mdio de clulas nos favos e no vero o maior nmero de favos. Em M. bicolor schencki as variaes do nmero de clulas nas colnias foram semelhantes ao longo das estaes. Na primavera e vero os favos apresentaram maior nmero de clulas, embora o nmero de favos tenha permanecido sem variao significativa nas quatro estaes.
124
Tabela I - Colnias de Meliponini em diapausa reprodutiva ( ) e em perodo de postura das rainhas ( ), em So Francisco de Paula, RS, Brasil. (n) nmero de colnias monitoradas.
Espcie Plebeia saiqui P. wittmanni Melipona m. obscurior Vero Jan Fev Mar outono Abr Mai Jun n=1 n=3 n=3 n=1 n=1 n=1 n=1 M. bicolor schencki n=5 Ferreira 2008 Borges & Blochtein 2006 Inverno Jul Ago Set primavera Out Nov vero Dez Fonte Pick & Blochtein, 2002b Freitas, 1994
Entre as espcies que realizam paradas de postura pelas rainhas, respectivamente P. saiqui, P. wittmanni e M. marginata obscurior a diapausa limita-se a meses de outono e inverno. Acrescenta-se que neste perodo as colnias de M. bicolor schencki, apesar de no exibirem diapausa reprodutiva, reduzem significativamente a quantidade de crias. Comparando-se o ritmo de oviposio sazonal das colnias, evidenciam-se trs padres: 1. diapausa obrigatria, exibida por P. saiqui e P. wittmanni (diapausa em todas as colnias) 2. diapausa facultativa em M. marginata obscurior (diapausa em parte das colnias) 3. ausncia de diapausa, em M. bicolor schencki (diminuio das clulas de cria nos favos) Fatores que influenciam no perodo de diapausa reprodutiva. Comparando-se dados climticos (Tabela II) na regio dos estudos com P. saiqui, M. marginata obscurior e M. bicolor schencki e a atividade de postura percebe-se relao entre estes fatores. Em junho e julho quando a oviposio pelas rainhas nas colnias de todas as espcies cessou (Tabela I) ou reduziu-se, verificaram-se as menores taxas de temperatura e de insolao mensal. Em contrapartida a umidade relativa (Tabela II) no esteve relacionada ao ritmo de postura. Tabela II - Elementos climticos mensais do Rio Grande do Sul dos municpios de (1) So Francisco de Paula e (2) Vacaria*, RS, Brasil, respectivamente dos perodos de 1931-1960 e 1957-1984. Fonte: Instituto de Pesquisas Agronmicas (1989). *Devido ausncia de dados de umidade relativa para So Francisco de Paula usou-se os dados da cidade prxima (Vacaria).
Vero Jan (1) Temperatura C (1) Umidade relativa (%) (2) Insolao total mensal (horas e dcimos) 19,1 83 Fev 18,4 85 Mar 17,6 85 Outono Abr 13,9 86 Mai 12,4 85 Jun 11,3 85 Inverno Jul 11,0 81 Ago 12,3 79 Set 13,3 83 Primavera Out 15,8 85 Nov 17,5 82 Vero Dez 14,4 79
217,5 199,8 195,0 193,8 176,6 141,5 165,6 167,3 173,8 193,6 212,0 237,0
125
Longevidade das operrias. Considerando-se os perodos de 2 a 6 meses de diapausa nas distintas espcies de Meliponini estudadas, e o elevado nmero de indivduos que permaneceram nas colnias at o reincio das atividades reprodutivas, pode-se inferir uma elevada longevidade das operrias. Esta situao foi ilustrada em P. wittmanni, a partir de operrias marcadas, as quais emergiram no perodo de pr-diapausa e sobreviveram at 274 dias. Nas demais, apesar da prolongada diapausa (174 dias para P. saiqui e 120 dias para M. marginata obscurior) no final do inverno as populaes mantiveram-se elevadas (observao pessoal). Comportamento no interior dos ninhos. Nas distintas espcies de Meliponini estudadas, o comportamento durante o perodo de postura caracterstico. As abelhas deslocam-se ativamente e distribuem-se por todo o ninho, enquanto a rainha encontra-se freqentemente sobre os favos. As abelhas reagem rapidamente frente a distrbios provocados durante o manejo e as construes so constantes. Em contrapartida, no perodo de diapausa as atividades ficam muito reduzidas. As abelhas deslocam-se lentamente e muitas permanecem imveis e agrupadas cobrindo parte do assoalho e das paredes das colnias (P. wittmanni). Em P. saiqui as abelhas se ocultam entre as lminas de invlucro que cobrem favos de cria remanescentes ou que ocupam todo o ninho, inclusive recobrindo os potes de alimento. Atividades de vo. Os registros das atividades externas das abelhas de trs espcies estu dadas no RS (Tabela III) evidenciam que vos ocorrem nas quatro estaes do ano. Nos horrios em que as condies climticas so favorveis ao vo, mesmo em diapausa reprodutiva as abelhas desenvolvem atividades externas (Tabela III). Comparativamente na primavera-vero e no outono-inverno as abelhas no so mais exigentes quanto aos fatores meteorolgicos para iniciarem suas atividades de vo (Tabela III). Entretanto, a amplitude diria de atividades externas reduzida em 3, 4 e 6 horas dirias, respectivamente para M. marginata obscurior, P. saiqui e M. bicolor schencki, quando comparados os perodos de maior e menor atividade ao longo do ano (Tabela IV). Tabela III - Valores mnimos e mximos dos fatores meteorolgicos registrados durante o perodo de vo de espcies de Meliponini em So Francisco de Paula, RS, Brasil. (POST) perodo de postura da rainha, (DIA) perodo de diapausa reprodutiva, (P-V) primavera-vero, (O-I) outonoinverno, (-) ausncia de dados.
Espcie Plebeia saiqui Ano 1998/1999 Perodo Irrad. solar (W/m) Temp. (C) Umid. (%) Vento (m/s) POST DIA Melpona marginata obscurior 2002/2003 P-V O-I Melpona bicolor schencki 2006/2007 POST 20-804 27-531 2-1015 303-311 2-2620 11,8-26,7 11-24 14,3-26 13,7-30,5 9,2-38,4 42-107 37-90 55-100 20-98 0-8,2 0-9,3 0-10,3 0-4 0-39,8 Pick & Blochtein 2002b Borges & Blochtein 2005 Ferreira 2008 Fonte
126
Tabela IV - Amplitude diria de atividades de vo registrada para de espcies de Meliponini em So Francisco de Paula, RS, Brasil. (POST) perodo de postura da rainha, (DIA) perodo de diapausa reprodutiva, (P) primavera, (V) vero, (O) outono, inverno.
Espcie Plebeia saiqui Ano 1998-1999 Perodo POST DIA Melipona m. obscurior 2002/2003 P-V O-I M. bicolor schencki 2006/2007 P V O I Horrio 6-19 8-17 6-18 8-17 6-19 7-17 7-16 9-16 Horas/dia 13 9 13 10 13 10 9 7 Ferreira 2008 Borges & Blochtein 2005 Fonte Pick & Blochtein (2002b)
As atividades de vo mais intensas das abelhas tambm so registradas sob distintas condies meteorolgicas ao longo das estaes do ano. Nos perodos adversos as operrias de P. saiqui e M. marginata obscurior tornam seus vos mais tardios e necessitam de temperaturas mais elevadas, enquanto para M. bicolor schencki no so evidenciados picos de vo ao longo do dia (Tabela V). Com relao irradiao solar e a umidade relativa ao longo do ano (Tabela V), no se verificou correlao com os picos de atividades de vo. Dentre os fatores analisados tanto nos perodos de diapausa e oviposio quanto nas distintas estaes do ano, somente a temperatura diretamente relacionada s atividades externas das abelhas das trs espcies estudadas, em todas as situaes (Tabela VI). Quanto aos demais fatores, em ordem de importncia esto irradiao solar, a umidade relativa e finalmente, com menor valor o vento (Tabela VI). Tabela V - Horrios e fatores meteorolgicos com registros dos picos de atividades de vo de espcies de Meliponini em So Francisco de Paula, RS, Brasil. (POST) perodo de postura da rainha, (DIA) perodo de diapausa reprodutiva, (P-V) primavera-vero, (O-I) outono-inverno, (-) ausncia de dados.
Espcie Plebeia saiqui Ano 1998/1999 Hora 11-12 (POST) 13-14 (DIA) Melpona marginata obscurior 2002/2003 9-11 (P-V) 10-15 (O-I) M. bicolor schencki 2006/2007 7-17 (POST) Irrad. solar (W/m) > 300 > 300 >300 Temp. (C) >19 >21 >19 > 19 17,7-24,5 Umid. (%) <79 <69 81-90 48-74 Fonte Pick & Blochtein 2002b
Borges & Blochtein 2005 Ferreira 2008
127
Tabela VI - Correlao entre fatores abiticos e a atividade de vo de espcies de Meliponini, em So Francisco de Paula, RS, Brasil. (+) positiva, (-) negativa, (+/-) positiva em determinados meses, (POST) perodo de postura da rainha, (DIA) perodo de diapausa reprodutiva, (P-V) primaveravero, (O-I) outono-inverno.
Espcie Plebeia saiqui Ano 1998/1999 Estado da colnia Irrad. solar (W/m) Temp. (C) Umid. (%) Vento (m/s) POST DIA Melpona marginata 2002/2003 obscurior Melipona bicolor schencki P-V O-I 2006/2007 POST + + +/+ +/+ + + +
+
Fonte Pick & Blochtein (2002b) Borges & Blochtein 2005 Ferreira 2008
+ + +/-
+/-
Discusso
Embora os estudos sobre os padres reprodutivos sazonais no Sul do Brasil sejam restritos, verifica-se que as abelhas de diferentes espcies respondem distintamente s condies climticas adversas. A diapausa em P. wittmanni e P. saiqui parece caracterstica das espcies do gnero tambm na regio Sudeste do Brasil, onde foi constatada em P. julianii (Juliani, 1967), P. droryana (Terada, 1980), P. emerina (Kleinert-Giovannini, 1982; Santos, 2007) e P. remota (Holmberg, 1903) (Benthem et al., 1995; Ribeiro et al., 2003). Com relao s espcies de Melipona, Nogueira-Neto (1970) comenta que M. quadrifasciata, em So Paulo, s vezes paralisa temporariamente a construo de favos de cria no incio do inverno ou mesmo no final do vero. Entretanto no h registros detalhados sobre este comportamento. At o momento, o nico registro de ocorrncia de diapausa reprodutiva para o grupo Melipona reporta ao RS. Em M. marginata obscurior (Borges & Blochtein, 2005) as colnias exibem diapausa facultativa, justamente em perodo coincidente com P. wittmanni e P. saiqui. Em contrapartida, na espcie simptrica M. bicolor schencki (Ferreira, 2008) as rainhas no cessam a postura de ovos. Levando-se em considerao que a temperatura parece ser um dos fatores diretamente relacionados a diapausa, e as abelhas tm baixa capacidade de termorregulao, sugere-se que o tamanho das operrias possa estar associado ao fenmeno da diapausa em ambientes com clima temperado, a exemplo do RS. Esta suposio pode ser reforada quando se compara o tamanho, progressivamente maior das espcies de Plebeia (diapausa obrigatria) com M. marginata obscurior (diapausa facultativa) e M. bicolor schencki (ausncia de diapausa). Diferenas inter e intraespecficas na durao da diapausa no mesmo local e no mesmo perodo so evidentes. Em colnias da mesma espcie e no mesmo local observam-se perodos diferenciados de diapausa, a exemplo de P. saiqui com respectivamente 76, 80, 100 e 169 dias de interrupo de atividades de postura (Pick & Blochtein, 2002). O mesmo ocorre em P. remota, sobre a qual se notou uma diferena de 6 semanas no perodo de diapausa das colnias (Van Benthem et al., 1995). Fenmeno semelhante tambm foi constatado em M. marginata obscurior, em que uma colnia no apresentou diapausa e nas demais este estado de inatividade reprodutiva perdurou por cerca de 1, 3 e cinco meses, respectivamente (Borges & Blochtein, 2006). Alm da assincronia da diapausa, tambm verificada em P. remota, colnias comportaram-se distintamente quanto aos perodos de incio e trmino da diapausa ao longo de trs anos (Ribeiro et al, 2003). Possivelmente estas variaes esto relacionadas a mecanismos endgenos, associados s condies climticas originais, bem como
128
outros fatores a exemplo da oferta de floradas. Este ltimo fator tambm foi referido por Winston (2003) que relata que a oferta de recursos florais para abelhas domsticas um fator que influencia significativamente na produo da cria. Velthuis et al. (1999) mencionam que o nmero de clulas de cria produzidas influenciado pela temperatura no interior da colnia, sendo que em temperaturas baixas a produo menor. Possivelmente o investimento energtico para a termorregulao e a diminuio das taxas metablicas dos insetos em temperaturas baixas (Kitazawa et al., 1963; Danielviskii, 1965; Tauber et al., 1986; Xu et al., 1995) induzem reduo do investimento das colnias na produo da cria. Uma anlise preliminar realizada por Ribeiro e Imperatriz-Fonseca (2000), relacionando fatores meteorolgicos diapausa indicou que o nmero de colnias inativas de P. remota foi maior quando a temperatura foi menor, sugerindo a temperatura como a varivel mais relacionada diapausa. Ribeiro et al. (2003) identificaram correlao entre a diapausa e a temperatura, precipitao e comprimento do dia, entretanto somente o ltimo fator foi significativo em todos os casos analisados. No RS percebe-se, nas distintas espcies de Meliponini, estreita relao entre a reduo da postura/diapausa e os perodos com temperaturas mais baixas e insolao reduzidos. Entretanto, em setembro embora as temperaturas e a insolao ainda estejam relativamente baixas, as atividades de vo aumentam relativamente e a postura reinicia ou se eleva. Possivelmente a oferta de floradas da regio estimule as atividades de coleta de alimentos e seu ingresso nos ninhos estimule a produo de crias, pois mesmo em diapausa, quando h condies para vo, as abelhas visitam flores e coletam nctar e plen corroborando com as observaes de Kleinert-Giovannini (1982) e Hilrio (2000). Dentre os fatores determinantes para o vo a temperatura a varivel mais diretamente relacionada a esta atividade e, em M. bicolor schencki responde por at 32,3% do vo. As caractersticas climticas, especialmente a temperatura e a precipitao, tambm esto diretamente correlacionadas com a distribuio de espcies arbreas de Mata Atlntica (Salis et al, 1995; Torres et al, 1997; Scudeller, 2002). Segundo Joly (2007), neste cenrio de mudanas climticas necessrio o monitoramento de espcies de diversos grupos taxonmicos para ajudar a detectar mudanas em padres e determinar a capacidade de disperso e/ou migrao de espcies. Estas informaes so de fundamental importncia para a adoo de polticas que assegurem a conservao e o uso sustentvel da biodiversidade.
Benthem FDJV, Imperatriz-Fonseca VL, Velthuis HW. (1995). Biology of the stingless bee Plebeia remota (Holmberg). Observation and evolutionary implications. Insectes Sociaux 42 (1): 71-87. Blochtein B & Marques BH (2003). Himenpteros. In: Livro vermelho da fauna ameaada de extino no Rio Grande do Sul (Fontana CS, Glayson AB and Reis RB Org.). EDIPUCRS, Porto Alegre, 95-109. Borges FV & Blochtein B (2005). External activities of Melipona marginata obscurior Moure (Hymenoptera, Apidae), in distinct times of the year, at So Francisco de Paula, Rio Grande do Sul, Brazil. Revista Brasileira de Zoologia. 22 (3): 680-686. Borges FV & Blochtein B (2006). Variao sazonal das condies internas de colnias de Melipona marginata obscurior Moure, no Rio Grande do Sul, Brasil. Revista Brasileira de Zoologia. 23 (3): 711-715. Danilevskii, AS (1965). Photoperiodism and Seasonal Development of Insects. Oliver and Boyd, Edinburgh. Delinger, DL (1986). Dormancy in tropical insects. Annual Review Entomology. 31: 239-264.
129
Ferreira NT. (2008). Atividades de vo e representatividade de sexos e castas em favos de Melipona bicolor schencki Gribodo, 1893 (APIDAE; MELIPONINI) em ambiente natural, no sul do Brasil: uma abordagem sazonal. Dissertao de Mestrado, Faculdade de Biocincias, PUCRS, Porto Alegre. Freitas SW (1994). Polietismo etrio entre operrias, oviposio e substituio de rainhas em Plebeia wittmanni Moure & Camargo, 1989 (Hymenoptera: Apidae, Meliponinae). Dissertao de Mestrado, Instituto de Biocincias, PUCRS, Porto Alegre. Freitas S & Wittmann D (1997). Poliginia temporria em Plebeia wittmanni Moure & Camargo, 1989 (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Biocincias. 5 (2): 61-69. Gary W, Gretchen LI, Daily C, Ehrlich PP (2003). Population diversity and ecosystem services. Ecology and Evolution. 18 (7):331-336 Hilrio SD; Imperatriz-Fonseca VL & Kleinert AMP (2000). Flyght activity and colony strength in the stingless bee Melipona bicolor bicolor (Apidae, Meliponinae). Revista Brasileira de Biologia. 60 (2): 299-306. Imperatriz-Fonseca V.L. & Oliveira MAC (1976). Observations on a queenless colony of Plebeia saiqui (Friese) (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Boletim do Museu de Zoologia, da Universidade de So Paulo. 1: 299-312. Instituto de Pesquisas Agronmicas (1989). Atlas agroclimtico do Estado do Rio Grande do Sul. Porto Alegre. Secretaria de Agricultura e Abastecimento. Joly CA (2007). Biodiversidade e mudanas climticas: contexto evolutivo, histrico e poltico. Ambiente e Sociedade. 10 (1): 165-168 Juliani L (1967). A descrio do ninho e alguns dados biolgicos sobre a abelha Plebeia julianii Moure, 1962 (Hymenoptera, Apidae). Revista Brasileira de Entomologia. 12: 31-58. Kitazawa T, Kanda T, Takami T (1963). Changes of mitotic activity in the silkworm egg in relation to diapause. Bull. Seric. Exp. Sta. 18: 283-295. Klein A, Vaissieri BE, Cane JH, Stefan-Deventer I, Cunninghan SA, Kremen C, Tscharntke T (2006). Importance of pollinators in changing lanscapes for world crops. Proceedings of the Royal Society. 1-11. Kleinert-Giovannini A (1982). The influence of climatic factors on flight activity of Plebeia emerina Friese (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae) in winter. Revista Brasileira de Entomologia. 26 (1): 1-13. Leather SR, Walters KFA, Bale JS (1993). The ecology of insect overwintering. Cambridge, University Press. Maluf, JRT (2000). Nova classificao climtica do Estado do Rio Grande do Sul. Revista Brasileira de Agrometeorologia. 8(1):141-150. Michener CD (1974). The Social Behavior of the Bees. Cambridge, Harvard University Press. Nechols JR, Tauber MJ, Tauber CA, Masaki S (1999). Adaptations to hazardous seasonal conditions: dormancy, migration and polyphenism. In: Ecological Entomology (Huffaker CB & Gutierrez AP, eds). John Wiley & Sons, New York, 159-200. Nogueira-Neto P (1970). A Criao de Abelhas Indgenas sem Ferro (Meliponinae). So Paulo, Chcaras e Quintais. Pick AR, Blochtein B (2002a). Atividades de coleta e origem floral do plen armazenado em colnias de Plebeia saiqui Holmberg (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae) no sul do Brasil. Revista Brasileira de Biologia. 19 (1)1: 289-300. Pick AR & Blochtein B (2002b). Atividade de vo de Plebeia saiqui (Holmberg) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini) durante o perodo de postura da rainha e em diapausa. Revista Brasileira de Zoologia. 19 (3) 827-839.
130
Ribeiro MF, Imperatriz-Fonseca VL (2000). Seasonal partial inactivity in the stingless bee Plebeia remota(Hymenoptera, Apidae). P.849. In: Abstracts of XXI International Congress of Entomology. Foz do Iguau. 1288p. Ribeiro MF, Imperatriz-Fonseca VL, Santos Filho PS (2003). A interrupo da construo de clulas de cria e postura em Plebeia remota (Holmberg) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). p. 177-188. In: Apoidea Neotropica: homenagem aos 90 anos de Jesus Santiago Moure. (Melo GAR & Alves dos Santos I eds.) Editora UNESC, Cricima, 320p. Ricketts TH, Regetz J, Steffan-Dewenter I, Cunninghan SA, Kremen C, Bogdanski A, GemmillHerren B, Greenleaf SS, Klein AM, Mayfield MM, Morandin LA, Ochieng A, Viana BF (2008). Landscape effects on crop pollination services: are there general patterns? Ecology Letters. 11 (5), 499515. Roubik DW (2006). Stingless bee nesting biology. Apidologie. 37:124-143. Salis SM, Shepherd GJ, Joly CA (1995). Floristic comparison between mesophytic forests of the interior of the state of So Paulo, S.E. Brazil. Vegetatio. 1(119):155-164. Santos CG (2007). Aspectos comportamentais e morfolgicos de Plebeia emerina (Friese, 1900) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini) relacionados prpolis. Dissertao de Doutorado. Faculdade de Biocincias PUCRS, Porto Alegre. Scudeller VV (2002). Anlise fitogeogrfica da Mata Atlntica, Brasil. Tese de Doutorado, Ps-Graduao em Biologia Vegetal, IB, UNICAMP, Campinas. Seeley T.D. (1985). Honeybees Ecology. Princeton, Princeton University Press. 201p. Slaa EJ, Sanches-Chaves LA, Malagodi-Braga KS, Hofstede FE (2006). Stingless bees in applied pollination: practice and perspectives. Apidologie. 37(2):293-315. Tauber MJ, Tauber CA & S. Masali (1986). Seasonal adaptations of insects. New York, Oxford University Press, 411p. Terada Y (1980). Estudos bionmicos em colnias de Plebeia (Plebeia) droryana Friese 1900 (Hymenoptera, Meliponinae) na regio de Ribeiro Preto, estado de So Paulo. Tese de Doutorado. Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto. Torres RB, Martins FR, Kinoshita LS (1997). Climate, soil and tree flora relationships in forests in the state of So Paulo, southestern Brazil. Revista Brasileira de Botnica. 20 (1):41-49. Velthuis HHW, Koedam D. & Imperatriz-Fonseca VL (1999). The rate of brood cell production in the stingless bee Melipona bicolor fluctuates with nest box temperature. Revista de Etologia. 2 (1): 141-145. Winston, M. L. 2003. A biologia da abelha, Porto Alegre, Magister. 276p. Witter S, Lopes L, Dias F, Imperatriz-Fonseca VL (2006). A guaraipo negra (Melipona bicolor schencki Gribodo 1893) uma rara espcie de abelha nativa sem ferro (Meliponini) e sua conservao em um fragmento de Mata de Araucrias do Rio Grande do Sul. Mensagem Doce. 8: 12-21. Witter S, Blochtein B, Andrade F, Wolff LF, Imperatriz- Fonseca VL (2007). Meliponicultura no Rio Grande do Sul (1): Contribuio sobre a biologia e conservao de Plebeia nigriceps (Friese, 1901) (Apidae, Meliponini). Bioscience Journal. 23: 134-140. Xu WH, Sato Y, Ikeda M, Yamashita O (1995). Stage-dependent and temperature-controlled expression of the gene encoding the precursor protein of diapause hormone and pheromone biosynthesis activating neuropeptide in the silkworm, Bombyx mori. Journal of Biological Chemistry. 270: 3804-3808.
131
Programa e Seleo de Colnias de Melipona scutellaris Visando o Aumento da Produo de Mel no Estado da Bahia
Carlos Alfredo Lopes de Carvalho1; Rogrio Marcos de Oliveira Alves2; Gislene Almeida Carvalho-Zilse3 1 Grupo de Pesquisa Insecta, Universidade Federal do Recncavo da Bahia, Cruz das Almas, Bahia. calfredo@ufrb.edu.br 2 Aluno do Curso de Doutorado em Cincias Agrrias da Universidade Federal do Recncavo da Bahia, Cruz das Almas, Bahia. 3 Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia, Manaus, Amazonas Melipona scutellaris a principal espcie de abelha sem ferro em volume de mel produzido por colnia na Bahia. Com ampla distribuio na regio litornea e na Chapada Diamantina, as suas colnias apresentam caractersticas que possibilitam a seleo de acessos com caractersticas de interesse para a produo de mel. Nesse sentido, iniciou-se em 2006 um programa de seleo de colnias visando o aumento de produtividade, que se constituiu das seguintes etapas: a) transferncia de 60 acessos provenientes de vrias regies da Bahia para o Meliponrio da UFRB em Cruz das AlmasBA; b) aclimatizao das colnias e padronizao do tipo de caixa; c) mensurao dos parmetros: dimetro dos favos, altura e dimetro dos potes de mel e de plen, nmero e volume dos potes de mel, peso das rainhas e comprimento da glossa das operrias; d) diviso dos acessos aos 90 dias formao das rainhas F1; e) mensurao dos parmetros das colnias com rainhas F1; f) diviso das colnias com rainhas F1, aps 90 dias da sua formao formao das rainhas F2; g) mensurao dos parmetros das colnias com rainhas F2, aps 90 dias da sua formao; h) agrupamento das colnias em classes de desempenho; i) orfanao das 25% colnias menos produtivas e introduo das rainhas das 25% colnias mais produtivas; j) mensurao dos parmetros das colnias que tiveram substituio de rainhas; k) transferncia de dez colnias de cada classe de desempenho (pouco produtiva, medianamente produtiva e produtiva) para floradas eucalipto; l) avaliao quinzenal da produtividade em mel das colnias. Palavras chave: abelhas sem ferro, urucu, meliponicultura.
132
Ninhos de Meliponneos em um Remanescente de Mata com Araucria no Rio Grande do Sul

Sidia Witter1, Letcia Azambuja Lopes2, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca2, Betina Blochtein3, Bruno Brito Lisboa1, Cludio Mondin3 1 Centro de Meteorologia Aplicada e Laboratrio de Fitopatologia. Fundao Estadual de Pesquisa Agropecuria (FEPAGRO). Rua Gonalves Dias, 570. CEP: 90130-060 Porto Alegre-RS. sidia-witter@fepagro.rs.gov.br ; bruno-lisboa@fepagro.rs.gov.br 2 Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto/USP, Depto. Biologia. Av. Bandeirantes, 3900, Monte Alegre, Ribeiro Preto, SP. CEP: 14040-901. leazambuja@pg.ffclrp.usp.br; veralif@ffclrp.usp.br 3 Departamento de Biodiversidade, Faculdade de Biocincias, Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul (PUCRS). Av. Ipiranga, 6681, Fone: 5133203545, betinablo@pucrs.br ; cmondin@pucrs.br
Introduo
As abelhas sociais destacam-se nos ecossistemas, pois so importantes polinizadores das florestas midas (Momose et al., 1998). Dentre as abelhas sociais, a maior parte das espcies de Meliponini depende de rvores vivas para construo dos ninhos (Nogueira-Neto, 1970; Roubik 1983, 1989, 2006; Vergara et al., 1986), ocupando ocos, tanto nos troncos como nos ramos das rvores. O tamanho das abelhas sem ferro bem como a populao de seus ninhos varia muito (Roubik, 1983, 2006), assim como suas necessidades de nidificao, apresentando, portanto, exigncias diferentes com relao qualidade do habitat (Batista et al. 2003, Antonini & Martins, 2003). Com a diversidade encontrada nos Meliponini espera-se uma grande variao nos quesitos relacionados com a nidificao. A literatura sobre ninhos de Meliponini na natureza bastante reduzida. Pouco se conhece sobre a distribuio natural destes ninhos e, em especial sobre gnero neotropical Melipona. De acordo com Silveira et al. (2002) vrias espcies de Melipona tm se mostrado dependentes dos ambientes florestais, no sendo encontradas nos ambientes abertos, a no ser nas margens das matas. Os ninhos naturais Melipona bicolor schencki so pouco conhecidos e raramente encontrados. Alm disso, trata-se de uma espcie que se encontra na lista da fauna ameaada de extino no Rio Grande do Sul. Melipona bicolor schencki foi inicialmente descrita como Melipona nigra Lepeletier, 1836 e colocada na sinonmia de Melipona bicolor Lepeletier, 1836 por Moure (1975). Observaes referentes morfologia de Melipona bicolor mostram que existem diferenas marcantes relacionadas com a colorao dos plos do mesoscuto e metassoma nas populaes ao longo de sua distribuio geogrfica (ferrugem ou preto). Melipona bicolor schencki apresenta os plos do trax predominantemente negros e as cerdas eretas dos tergos abdominais douradas, enquanto que em Melipona bicolor bicolor os plos do trax so fulvos e os do abdmen so negros na base e palha para o pice. No est esclarecido ainda se so espcies distintas (Camargo, comunicao pessoal). Segundo Moure et al. (2007), Melipona bicolor schencki ocorre em Misiones (Argentina), Alto Paran (Paraguai), Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paran, So Paulo, Rio de Janeiro.
133
Plebeia saiqui ocorre em Minas Gerais, Rio de Janeiro, So Paulo, Paran, Santa Catarina e Rio Grande do Sul (Moure et al. 2007). Seus ninhos so encontrados em ocos em rvores, barrancos, ou outros locais, desde que os ocos sejam de tamanho apropriado e no aquecidos pelo sol em demasia (Nogueira-Neto, 1970). As entradas dos ninhos so curtas e construdas com prpolis e das colnias so de tamanho mdio (Nogueira-Neto, 1970). A construo dos favos de cria suspensa em perodos de outono e inverno, caracterstica da diapausa reprodutiva (Pick & Blochtein, 2002). Nos levantamentos realizados desde 1984 no Rio Grande do Sul, exemplares de Melipona bicolor schencki foram coletados nas flores nos municpios de Osrio, Canela e Cambar do Sul e Plebeia saiqui em Osrio, Canela, Cambar do Sul, So Francisco de Paula e Planalto (Wittmann & Hoffmann, 1990; Alves-Dos-Santos, 1999). No estado, verifica-se uma predominncia de ocorrncia natural dessas espcies na Regio Ecoclimtica Planalto Superior Serra do Nordeste com vegetao tpica da Floresta com Araucria, Floresta Subtropical e Campos (Maluf & Caiaffo, 2001). O bioma Mata Atlntica, um dos mais ricos conjuntos de ecossistemas em termos de diversidade biolgica do planeta (MMA, 1998), engloba a Floresta com Araucria e Campos de altitude. So os mais altos, frios e midos ecossistemas representantes nos trpicos (Lauer, 1989; Por et al, 2005). Entretanto, os desmatamentos, a fragmentao dos ecossistemas, a introduo da abelha domstica e a coleta predatria so apontadas como fatores que comprometeram a sobrevivncia dessas abelhas (Blochtein & Harter, 2003). Este trabalho fornecer subsdios para programas de conservao e manejo Melipona bicolor schencki em seu habitat natural, incentivando atitudes conservacionistas, oportunizando aes que possam gerar benefcios econmicos para as comunidades que interagem em ambiente ecologicamente importante como o da Mata de Araucrias. Assim pretende-se responder as seguintes questes: Quais as espcies de rvores que Melipona bicolor schencki e P. saiqui usam para construo dos seus ninhos na Mata de Araucria? Qual a altura dos ninhos? Qual o padro de distribuio destes ninhos, e qual a densidade dos mesmos na rea estudada?
Material e Mtodos
rea de Estudo No nordeste do Rio Grande do Sul predominam as Florestas com Araucria, Subtropical e Campos (Maluf & Caiaffo, 2001).O trabalho foi realizado em um fragmento conservado de Floresta Ombrfila Mista de 250 ha, localizado em Cambar do Sul (2902S 5008W) com altitudes de 980 a 1047m. A regio se enquadra no clima Cfb (temperado mido) de acordo com a classificao de Koeppen, tendo temperaturas mdias oscilando entre 14,4 a 16,8C, com mnimas de - 5,4 e mximas de 38,4C (Vianello & Alves, 1991). As precipitaes pluviais anuais variam de 1.412 a 2.162 mm e a umidade relativa de 76 a 83% (Maluf & Caiaffo, 2001). Ninhos A localizao dos ninhos foi realizada em dois anos consecutivos (2006/2007), atravs de inspees em rvores, com auxlio do proprietrio da rea que meliponicultor e adota prticas conservacionistas. Para a identificao das espcies de abelhas, indivduos foram coletados junto s entradas dos ninhos ou, em colnias estabelecidas no alto dos troncos, as mesmas foram observadas com auxlio de binculos. As amostras de abelhas coletadas nos ninhos encontram-se depositadas no Museu de Cincias e Tecnologia da PUCRS. A altura dos ninhos em relao base dos troncos foi medida com auxlio de trena. Os dados obtidos das coordenadas geogrficas de cada ninho, bem como os limites da propriedade foram plotados
134
no programa computacional GTM PRO , o qual foi utilizado para obter-se a rea total de mata a fim de calcular a densidade dos ninhos, obtida atravs do nmero de ninhos (60) por rea de floresta (171 ha). O material botnico foi coletado para preparao de exsicatas e identificado por especialista. O material foi depositado nos Herbrios da PUCRS e da FEPAGRO. Anlise estatstica O ndice de disperso do vizinho mais prximo (R) (Clark & Evans, 1954) foi usado a fim verificar o padro de distribuio dos ninhos. O ndice de distribuio a razo entre a distncia mdia observada do vizinho mais prximo e a distncia mdia esperada do vizinho mais prximo se os ninhos forem distribudos aleatoriamente. Se a distncia dos ninhos aleatria, R aproxima-se de 1. Se a distribuio for agregada o valor de R aproxima-se de 0.
Resultados
Foram localizados na rea de estudo 60 ninhos de Meliponini, 42 de Melipona bicolor schencki e 18 de Plebeia saiqui. Resultados preliminares indicam 17 espcies de rvores utilizadas por estas duas espcies de abelhas para nidificao na Floresta com Araucria (Tabela 1). Em Lauraceae foram encontrados 52% dos ninhos. As espcies arbreas comuns entre Melipona bicolor schencki e P. saiqui utilizadas para construo dos ninhos foram a canela vermelha (Lauraceae), canela (Lauraceae), bugre (Anacardiaceae), cana (Aquifoliaceae), camboat (Sapindaceae) e guaraper (Cunonaceae). Tabela 1 - Resultados preliminares dos percentuais e nmeros de ninhos em rvores utilizadas por Melipona bicolor schencki (Mbs) e P. saiqui (Ps) para nidificao na Mata com Araucria em Cambar do Sul/RS.
rvore Famlia da planta N/ninhos % ninhos (Nome popular) Mbs Ps Mbs Canela vermelha Canela Bugre Cana Aroeira Ip amarelo Carne de vaca Aucara Guaviroveira Guaraper Camboat Curunilha Cambu Murta Pessegueiro Erva-mate Conserva Total 17 Lauraceae 14 02 33,33 Lauraceae 09 06 21,44 Anacardiaceae 08 01 19,05 Aquifoliaceae 03 01 7,14 Rutaceae 01 2,38 Bignoniaceae 01 2,38 Clethraceae 01 2,38 Asteraceae 01 2,38 Myrtaceae 01 2,38 Cunonaceae 01 01 2,38 Sapindaceae 01 01 2,38 Rhamnaceae 01 2,38 Myrtaceae 01 Myrtaceae 01 Myrtaceae 02 Aquifoliaceae 01 No identificada 01 42 18 100 Ps 11,1 33 5,6 5,6
5,6 5,6 5,6 5,6 11,1 5,6 5,6 100
135
Segundo informao do meliponicultor, dono da propriedade, os ninhos de P. saiqui podem posteriormente serem ocupados por M. bicolor schencki, indicando uma provvel associao entre as duas espcies. Durante os dois anos de monitoramento na rea de estudo verificou-se a perda de 3 ninhos de Melipona bicolor schencki em conseqncia do ataque de tatu (Dasypodidae) um inimigo natural muito comum na rea, e por excesso de umidade. Melipona bicolor schencki constri os ninhos tanto na base dos troncos como em alturas superiores a 180 cm, faixa que corresponde a 50% dos ninhos estudados. Entretanto, observou-se uma maior freqncia de ninhos com altura de 25 cm acima da superfcie do solo. P. saiqui constri seus ninhos em alturas superiores a 50 cm acima da superfcie do solo bem como, em alturas superiores (at 1000 cm), mas a maioria dos ninhos (88,89%) est localizada acima de 100 cm. Verificou-se que os ninhos de Melipona bicolor schencki e Plebeia saiqui na rea estudada esto distribudos aleatoriamente (R= 0, 640, n=60) (Figura 1). A densidade de ninhos dessa espcie no stio de estudo foi de 0,35/ha.
Discusso
Os resultados indicam que os ninhos naturais de Melipona bicolor schencki e P. saiqui na Mata de Araucria so preferencialmente encontrados em Lauraceae (51,6% dos ninhos). Kerr (1980) observou que as abelhas sem ferro constrem seus ninhos em apenas 12 das mais de 200 espcies de plantas no cerrado e Antonini & Martins (2003) verificaram especificidade no cerrado entre rvores e ninhos de abelhas, isto , Melipona quadrifasciata nidificando em Caryocar brasiliense (95,83% dos
136
ninhos localizados). De acordo com Martins et al. (2004), as abelhas sem ferro nidificam em diferentes espcies arbreas na caatinga, entretanto mais de 75% dos ninhos localizam-se em apenas duas espcies Caesalpinia pyramidalis (41,9% dos ninhos) e Commiphora leptophloeos (33,9%). Metade dos ninhos de Melipona subnitida foi encontrada em C. leptophloeos enquanto Melipona asilvai nidificou principalmente em C. pyramidalis. Hubbell & Johnson (1977) estudando os padres de disperso das abelhas Meliponini da Costa Rica e, observaram que as abelhas ocupavam apenas 25 das 74 espcies de rvores disponveis. Mas algumas das espcies de rvores que no continham ninhos na Costa Rica apresentavam ninhos em outras regies, no encontrando especificidades entre rvores e ninhos. Aparentemente o ndice de disperso dos ninhos das duas espcies de Meliponini, na rea de estudo, aleatrio. Embora o esforo de amostragem no tenha sido igual em toda rea, a identificao de ninhos pelo agricultor ao longo de pelo menos 30 anos de observao confirma que o nmero de ninhos de Melipona bicolor schencki represente totalidade na rea estudada. Exceo feita rea prxima ao Arroio Taimbezinho (Figura 1), excluda da rea de estudo, que no foi investigada pelo produtor por possuir relevo acidentado, havendo probabilidade de encontrar novos ninhos. J o nmero de ninhos de P. saiqui na rea precisa ser mais investigado. Acredita-se que numa anlise mais aprofundada a disperso dos ninhos de meliponneos na rea esteja relacionada com a sucesso florestal dentro da propriedade (visvel empiricamente), assim, avaliaes da fitossociologia so fundamentais para confirmar a disperso aleatria dos ninhos de meliponneos verificada nesse estudo. O clculo para o ndice de disperso proposto por Clark & Evans (1954) sugere a incluso de faixas de fronteiras ao redor dos ninhos. Nesse trabalho a rea utilizada para o clculo restringe-se aos limites da floresta delimitada na propriedade rural. Assim em etapa futura pretende-se aprofundar esse estudo a fim de compatibilizar o clculo com a metodologia proposta. A rea de estudo um fragmento bastante conservado de Mata de Araucria protegida h mais de 70 anos pelos proprietrios. Pouco se conhece sobre quais plantas atraem abelhas sem ferro para construo dos ninhos. O dimetro relativamente grande dos troncos onde foram encontrados os ninhos de Melipona bicolor schencki e a conscincia conservacionista do proprietrio pode ter contribudo para existncia de tantos ninhos naturais dessa espcie na rea de estudo, cercada por reflorestamento com Pinus. De acordo com Antonini & Martins (2003) a estreita associao encontrada entre Melipona quadrifasciata e Caryocar brasiliense pode ser devido ao tamanho relativamente grande dessa rvore, que protegida naquele bioma, em relao a outras do cerrado. Segundo esses autores, a descoberta de ninhos naturais dessa espcie de abelha at o momento na rea de estudo deve-se grande distribuio da espcie arbrea preferencial para nidificao e sua proteo por regulamentaes federais. O plantio de Pinus no entorno da propriedade estudada acaba reduzindo a pastagem apcola, por que resulta na substituio de reas com diversas espcies vegetais por uma nica espcie de planta que no produz flores, portanto sem interesse apcola (Amoroso & Ries, 2005). Alm disso, retiram da regio os potenciais locais para construo dos ninhos das abelhas sem ferro e em especial de Melipona bicolor schencki, uma espcie ameaada. O desaparecimento de espcies de abelhas sem ferro pelo desmatamento ou extrativismo implica na diminuio de espcies vegetais importantes em nossos ecossistemas, pois as plantas cujas flores so polinizadas pelas abelhas tero sua capacidade de produzir sementes diminudas e em breve desaparecero. Entretanto, a meliponicultura traz para a regio onde praticada melhores frutos e maior produo de sementes. O declnio das populaes de abelhas pode acarretar na queda da produtividade agrcola. Fica evidente a necessidade de ampliar os conhecimentos sobre ninhos de abelhas sem ferro em estado natural, e incentivar o replantio das rvores que servem de abrigo aos ninhos.
137
Sugerimos a implantao de viveiros com mudas das plantas importantes para nidificao de abelhas nativas como atividade que gera renda para a propriedade rural, e campanhas para o plantio destas mudas includas em programas de reflorestamento na regio. Agradecimentos Ao meliponicultor Slvio de Macedo Carvalho cuja conscincia conservacionista possibilitou a realizao desse estudo e trabalhos futuros. Ao Dr. Luciano Kayzer Vargas pelo auxlio com a estatstica. Ao CNPQ, processo 311381/2006-5.
ALVES-DOS-SANTOS I (1999). Abelhas e plantas melferas da mata atlntica, restinga e dunas do litoral norte do Estado do Rio Grande do Sul. Revista Brasileira de Entomologia. 43 (3/4):191-223. AMOROSO LS and RIES JE (2005). Apicultura na Regio Fisiogrfica dos Campos de Cima da Serra do Rio Grande do Sul - Uma Viso Regional. In: X Seminrio Estadual de Apicultura, IV Encontro Estadual de Meliponicultores, Cambar do Sul, RS. ANTONINI Y and MARTINS RP (2003). The value of a tree species (Caryocar brasiliense) for stingless bee Melipona quadrifascita quadrifasciata. Journal of Insect Conservation. 3:164-167. BATISTA MA, RAMALHO M, SOARES EE. (2003). Nest sites and abundance of Meliponini (Hymenoptera: Apidae) in heterogeneous habitats of the Atlntic Rain Forest, Bahia, Brasil. Lundiana. 4 (1):19-23. BLOCHTEIN B and MARQUES BH (2003). Himenpteros. In: Livro vermelho da fauna ameaada de extinao no Rio Grande do Sul (Fontana CS, Glayson AB and Reis RB Org.). EDIPUCRS, Porto Alegre, 95-109. CLARK P and EVANS F (1954). Distance to nearest neighbor as a measure of spatial relationships in populations. Ecology. 35:445-453. HUBBELL SP, JOHNSON LK (1977) .Competition and nest spacing in a tropical stingless bee community. Ecology. 58:949-963. KERR WE (1984). Histria parcial da cincia apcola no Brasil. In: V Congresso Brasileiro de Apicultura E III Congresso Latino-Ibero-Americano de Apicultura,Viosa, 47-60. LAUER W. (1989). Climate and weather. In: Tropical rain forest ecosystems, Ecosystems of the World (H. Lieth and M.J.A. Werger, eds.). Elsevier, Amsterdam, 750. MALUF JRT & CAIAFFO MRR (2001). Regies Ecoclimticas do Estado do Rio Grande do Sul. In: XII Congresso Brasileiro de Agrometeorologia e III Reunio Latino-Americana de Agrometeorologia, Fortaleza, 151-152. MARTINS CF, CORTOPASSI-LAURINO M, KOEDAM, D, IMPERATRIZ-FONSECA V L (2004). Espcies arbreas utilizadas para nidificao por abelhas sem ferro na Caatinga (Serid, PB; Joo Camara, RN). www.biotaneotropica.org.br/v4n2/pt/fullpaper?bn00104022004+pt, acesso em agosto 14, 2006. MMA (Ministrio do Meio Ambiente) (1998). Diretrizes Para a Poltica de Conservao e Desenvolvimento Sustentvel da Mata Atlntica. MMA, Braslia. MOMOSE K, YUMOTO T, NAGAMITSU T, KATO M, NAGAMASU H, SAKAI S, HARRISON R, ITIOKA T, HAMID AA, INOUE T (1998). Polination biology in a lowland dipterocarp forest in Sarawak. Malaysia. 1. Characteristcs of the plant-pollinator community in a lowland dipterocarp forest. Americam Journal of Botany. 85:1477-1501.
138
MOURE JS (1975). Notas sobre as espcies de Melipona descritas por Lepeletier em 1836 (Hymenoptera - Apidae). Revista Brasileira de Biologia. 35(4)615-623. MOURE JS, URBAN D, MELO GAR (2007). Catalogue of bees (Hymenoptera, Apoidea) in the neotropical region. Sociedade Brasileira de Entomologia, Curitiba. NOGUEIRA-NETO P (1970). A Criao de Abelhas Indgenas sem Ferro Meliponinae). Chcaras e Quintais, So Paulo. PICK RA and BLOCHTEIN B (2002). Atividades de vo de Plebeia saiqui (Holmberg) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini) durante o perodo de postura da rainha e em diapausa. Revista Brasileira de Zoologia. 19:827-839. POR F. D. (1992). Sooretama the Atlantic Rainforest of Brazil. SPB Academic Publishing, The Hague. ROUBIK DW (1983). Nest and colony characteristics of stingless bees from Panama (Hymenoptera: Apidae). Journal of the Kansas Entomological Society. 56:327355. ROUBIK DW (1989). The Ecology and Natural History of Tropical Bees. Cambridge University Press, Cambridge. ROUBIK DW (2006). Stingless bee nesting biology. Apidologie. 37:124-143. SILVEIRA FS, MELO GA, ALMEIDA EA (2002). Abelhas Brasileiras: Sistemtica e Identificao. Fernando A. Silveira, Belo Horizonte. VIANELLO RL and ALVES AR (1991). Meteorologia Bsica e Aplicaes. Universidade Federal de Viosa, Imprensa Universitria, Viosa. VERGARA C, VILLA A, NATES G (1986). Nidificacin de meliponinos (Hymenoptera: Apidae) de la regin central de Colombia. Revista de Biologia Tropical. 34(2):181-184. WITTMANN D and HOFFMAN M (1990). Bees of Rio Grande do Sul, southern Brazil (Insecta, Hymenoptera, Apoidea). Iheringia. 70:17-43.
139
SI MPS IO 8
MELIPONICULTURA SUSTENTVEL
Coordenadores: Betina Blochtein, Giorgio Cristino Venturieri
140
Sobre Sexo e Castas das Abelhas Melipona

Paulo Nogueira-Neto Professor Emrito De Ecologia Ib-Usp Para quem estuda a formao dos sexos e castas das abelhas Meliponini, necessrio, antes de mais nada, verificar quais os processos vitais que levam a isso. A confuso enorme, nesse campo. Warwick E. Kerr (1987, p.83-84 e 1996 tiba, p. 111) disse ser cada vez mais evidente que as interaes genticas para a determinao do sexo se do em duas etapas, uma no embrio e outra no larvo pr-defecante (=prepupa). Trata-se de um evidente equivoco, pois antes da segunda etapa o sexo j est determinado. A segunda etapa trata apenas da determinao das castas (operrias e rainhas). Assim, necessrio esclarecer primeiro que a formao dos sexos comea algumas horas aps a postura dos ovos. Segundo Warwick E. Kerr (1987 p. 82-92), em 1909 e 1911 Hegner notou que as primeiras clulas da nova abelha em formao, migram dentro do ovo. Clulas haplides (com apenas uma srie de cromossomas) determinam o testculo. Clulas diplides (com 2 sries de cromossomas, uma do pai e outra da me) determinam em conjunto o ovrio. Assim, basicamente, nos insetos Himenpteros os organismos haplides so masculinos e os diplides so femininos, com a exceo dos machos diplides. W. E. Kerr e A. B. Cunha (1957) atribuem o sexo principalmente a um interessante balano gentico entre genes masculinizantes e genes feminilizantes, embora no caso dos machos diplides a explicao de Warwick E. Kerr (1987) seja diferente, passando por uma mutao e uma situao especial, complicada. A interveno de um forte estresse aqui apresentada pela primeira vez, para explicar a existncia de machos diplides. Seja l como for, nas primeiras horas de vida de um embrio de abelhas Meliponini, que se define o sexo da abelha em formao. Conceio A. Camargo (1974) mostrou a existncia de um lcus gentico (lugar cromossmico) xo ou XO ocupado por um gene sexual ou por um dos seus alelos, que depois W. E. Kerr (1987 p. 274) calculou ao todo serem 20, em M. compressipes fasciculata (tiba). Mais adiante veremos melhor o que um gene alelo. Os genes que ocupam os loci xo do origem a uma ou mais enzimas que constituem a meu ver a base do hormnio sexual dos Meliponini. Os machos diplides praticamente no servem para nada. So verdadeiros parasitas, pois prejudicam as colnias de Meliponini. A presena desses machos, a meu ver poderia ser explicada como conseqncia de uma grave situao de estresse, que tornaria no aditivos os genes sexuais feminilizantes. Isso daria em todas as clulas de uma abelha diplide uma pequena vantagem aos genes masculinizantes, mesmo em se tratando de genes homozigotos. Em outras palavras, os genes masculinizantes normalmente no so aditivos, ao contrrio do que ocorre com os genes feminilizantes. Assim, normalmente h uma vantagem dos genes feminilizantes nas abelhas diplides, o que determina que estas sejam fmeas. Mais adiante mostrarei, tambm, porque as minhas pequenas populaes de abelhas Meliponini, embora normais so fortemente homozigotas, apesar disso ser considerado pelo Professor e amigo Warwick Kerr como algo impossvel. Para ele, todos os homozigotos no lcus XO so machos diplides. Discordo desse ponto de vista, por motivos ligados deriva gentica (Princpio de Sewal Wright), como explicarei. Os machos diplides, a meu ver, so tambm caracterizados por terem no embrio presumivelmente uma baixa produo do hormnio sexual. Essa baixa produo pode ser causada por
141
uma situao ambiental de estresse, ou porque seus portadores tm uma situao gentica que leva a essa baixa produo. A causa prxima que torna no aditivos os genes feminilizantes seria direta ou indiretamente a presena de uma baixa quantidade de hormnio sexual no embrio. Contudo, como expliquei acima, tanto o estresse ambiental de causas diversas, como o estresse fisiolgico causado pela baixa quantidade de hormnio sexual, tm o mesmo efeito prtico, ou seja, so fatores responsveis pela perda da capacidade aditiva dos genes feminilizantes. O resultado a formao de machos diplides, quando essas causas ocorrem em conjunto ou separadamente. No decorrer deste item do Dicionrio vou insistir, repetidamente, nos conceitos e fatos aqui expostos. Constituem novas explicaes para a presena dos machos diplides na vida real das colnias de abelhas Meliponini. NOTA: Este trabalho parte do Dicionrio da Meliponicultura (Criao das Abelhas Indgenas sem Ferro), de minha autoria e j em processo de publicao (Paulo Nogueira-Neto, 2008).
Bibliografia
CAMARGO - 1974 - Produo de machos diplides de Melipona quadrifasciata. Cincia e Cultura v. 26 n. 7, p. 267 KERR, W. E. - 1987 Biologia, manejo e gentica de Melipona compressipes fasciculata. Tese de Professor Titular da Universidade Federal do Maranho. Re-editado em 1996 pela Universidade Federal do Maranho. KERR, W. E. & CUNHA, A. B. - 1957 - A genetical theory to explain sex determination by arrehnotokous parthenogenesis. Forma et Functio 1 (4) p.33-36 NOGUEIRA-NETO P.- 1997 - Vida e criao de abelhas indgenas sem ferro Editora Nogueirapis 446 p. NOGUEIRA-NETO, P. - 2002 Inbreeding and building up small populations of stingless bees. Revista Brasileira de Zoologia. 19 (4) p. 1181-1214 NOGUEIRA-NETO, P. - 2008 - Dicionrio da Meliponicultura (Criao das abelhas indgenas sem ferro). Em processo de publicao. Editora Nogueirapis.
142
Stingless Bees in Mxico: Present Status and Perspectives for the Future.
Jos Javier G. Quezada-Eun; Jorge A. Gonzalez-Acereto; Luis A. Medina-Medina. Departamento de Apicultura- Campus de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias- Universidad Autnoma de Yucatn. E-mail: qeuan@uady.mx The eusocial stingless bees are amongst the most important pollinators in the subtropics due to the diversity of species and number of individuals. In Mxico 46 species of stingless bees have been reported (Ayala 1999) of which a third inhabit the Yucatan Peninsula (Quezada-Eun 2005). Mexico has a long tradition in the use of native bees that dates back to Prehispanic times when their honey was subject of intensive commerce. Presently, the Yucatan Peninsula remains as the main center of stingless bee culture in the country. Stingless beekeeping (meliponiculture) in this area is based on one species, Melipona beecheii (locally called Xunan kab -lady bee) whose colonies are kept in hollow logs (Gonzlez-Acereto et al. 2006). The honey and wax of other stingless bee species (including M. yucatanica) traditionally have been obtained by harvesting feral colonies but were not domesticated. In central Mxico (Puebla and Veracruz) meliponiculture is based on the exploitation of Scaptotrigona mexicana that is kept in clay pots (Quezada-Eun 2005). In the Yucatan Peninsula, heavy deforestation, extensive live stock production and poor economic profits, are threatening M. beecheii due to a reduction of places where feral and managed colonies can feed and nest (Gonzlez-Acereto et al. 2006). We are currently developing a program to rescue colonies of M. beecheii considering four main objectives: 1. Increasing numbers of colonies and improving management techniques. 2. Develop a system to provide colonies to peasant farmers and train them in their use. 3. Propose alternative uses for colonies in addition to honey production. 4. Reforestation and maintenance of diversity.
Increasing numbers of colonies and improving management techniques

The use of traditional hollow logs has many disadvantages in terms of the care and supervision that can be provided to colonies (Quezada-Euan et al 2001; Gonzalez Acereto and De Araujo-Freitas 2005). We have proposed the use of hive boxes as an alternative to hollow logs. Several types of hive boxes have been successful at keeping stingless bees (Nogueira-Neto 1997). We aimed for a simpler and cheaper model and suggest the use of the called FMVZ/ UADY hinge model. The model consists of a simple box which walls are attached by means of hinges. This simple system makes the box easy to open from any side and thus division and transference of colonies is not damaging. Boxes of appropriate sizes have been developed for M. beecehii and other species based on the natural space occupied by feral colonies in hollow trees. Techniques for feeding colonies and control of parasitic flies have also been important to ensure survival of colonies after transferring or dividing them.
143
Apart from xunan kab, at least 3 other species are prone to domestication and could be used either for their good honey or alternative uses, namely: Scaptotrigona pectoralis (kan tsak), Trigona nigra (xiik) and Nannotrigona perilampoides (bol). Cephalotrigona zexmeniae is another honey producing species but its nests have proven difficult to keep alive in artificial lodges.
A system to provide colonies to peasant farmers and train them in their use.
The stingless bee colonies at the CCBA are mainly obtained from rural villages after the clearance of forest patches for agriculture, thus rescuing them from dying out. Presently, our stingless bee yard has ca. 250 colonies of 10 species of which 40% are kept in hive boxes. Our stingless bee yard is used as a source of biological material to groups of beekeepers and as a teaching center to train beekeepers in the management and reproductions of stingless bee colonies. Several courses are given all year round not only at the faculty but also in situ at the communities. This has proven extremely useful in increasing the interest and promoting the keeping of stingless bees even in areas where they had been unknown. At least 400 colonies of stingless bees have been incorporated to meliponaries in the villages where the courses have been held, reflecting the positive effect of the extension work (Gonzalez-Acereto et al. 2006). Another positive effect of the extension courses is the creation in 2003 of the so-called Ecological Farms. This project is a joint effort of the CCBA/UADY and the agency for Rural Development of the local government. The objective of these farms is promoting the use of agroecological activities including stingless bee keeping as part of an integral program of crop and livestock production. To date there are three of these farms.
Propose alternative uses for colonies in addition to honey production.

At the present time stingless bee products still face the problem of marketing. The small amounts produced and the lack of characterization prevents the establishment of a secure and large scale market. However, some local producers have started selling honey, propolis and pollen and the demand also seems to be increasing due to the ecological production and attributed medicinal properties (Quezada-Eun 2005). Efforts to characterize and evaluate such medicinal properties are urgent. The growing interest in these products abroad and their status as agro ecological products may well gain them a position in the local and international market provided they are in a continuous supply and with the required quality. One major line for the alternative use of stingless bees is the pollination of commercial crops. There is evidence that stingless bees are efficient pollinators of some neotropical crops like tomato, pepper, squash and avocado (Melndez 1997, Slaa et al., 2000; Can-Alonzo et al 2005). Some of the stingless bee species with potential for pollination in enclosures are: Trigona nigra, Scaptotrigona pectoralis, Melipona beecheii and Nannotrigona perilampoides. Our efforts have concentrated on N. perilampoides because it is an adaptable, rustic and widely distributed species. In a first study we provided evidence that N. perilampoides adapted well to enclosures and efficiently pollinated greenhouse tomatoes in tropical climates and suggested that it could be used as an alternative to bumble bees (Bombus spp.) (Cauich et al 2004; Cauich et al 2006). In a second experiment, we evaluated N. perilampoides on large-scale greenhouse pollination against the imported bumble bee, Bombus impatiens. The results showed that tomato pollinated by N. perilampoides set less fruit than B. impatiens but that hot pepper pollinated with N. perilampoides set
144
more fruit than those visited by B. impatiens . It was also evident that N. perilampoides has the advantage of foraging at higher temperatures. Moreover, the risk of introducing exotic and expensive pollinating bees could be greatly reduced and this needs to be considered too (Palma et al. 2008 a; 2008b).
Reforestation and maintenance of diversity.

Vast extensions of the Yucatan Peninsula were deprived of their original forests in the XIX early XXth centuries for sisal (Agave fourcroydes) cultivation. Nowadays most sisal plantations are abandoned; however, many plants in these secondary growth patches have become central as sources of nectar for the important beekeeping industry of the Yucatan Peninsula. But most important, these patches also provide refuge and nesting places for many stingless bees and solitary bees that act as pollinators of nearby crops (Quezada-Eun et al. 2008; submitted). Nevertheless, these sites are considered with no utility and thus are being removed to expand suburban areas and roads. A campaign to preserve these sites that are the source of the Yucatan honey and many wild pollinators needs to be established. Recent studies have also shown the existence of ecotypes in local stingless bee species (De la Rua 2007; Quezada-Eun et al. 2007). It is important that these ecotypes are preserved since they may represent genetic pools better adapted to their regions. The movement of colonies between regions should be avoided in order to stop loosing locally adapted resources and reducing the genetic diversity. The study of stingless bees started in Yucatan in the 1980s, since then it has experienced an increasing interest from farmers, scientists and government. The recent advances in the study of the biology and management techniques provide a support for the future growth of the activity. We have organized a project where all these different aspects have been combined with promising results and a positive perspective for the activity in the future. Similar projects conducted at other states of the Yucatan Peninsula and Mxico could guarantee a conservation of stingless bees and provide additional income to rural families. Nevertheless, there are still major problems to be solved: deforestation is increasing and the niches for food collection and nesting are rapidly diminishing so regulations for logging and reforestation need to be urgently applied. A positive factor for the activity is the growing investment in enclosed crop production. Research needs to be conducted on the management of colonies for prolonged use under these conditions and on methods to induce growth and production of colonies in order to avoid decimation of feral populations for pollination. ACKNOWLEDGEMENTS: We thank Fundacin PRODUCE/Yucatn, CONACYT- and the IFS for funding the research that had allow us to organize this project.
References
Ayala, R. (1999) Revisin de las abejas sin aguijn de Mxico (Hymenoptera: Apidae: Meliponini). Folia Entomol. Mex. 106: 1-123. Can-Alonzo C.; Quezada-Eun, J.J.G.; Xiu-Ancona, P.; Moo-Valle, H.; Valdovinos-Nuez, G. R.; Medina-Peralta, S. (2005) Pollination of criollo avocados (Persea americana) and the behavior of associated bees in subtropical Mxico. J. Apic. Res. 44: 3-8. Cauich, O.; Quezada-Euan, J.J.G.; Macias-Macias, O.; Reyes-Oregel, V.; Medina-Peralta, S.; Parra-tabla, V. (2004) Behavior and pollination efficiency of Nannotrigona perilampoides (Hymenoptera: Meliponini) on greenhouse tomatoes (Lycopersicon esculentum) in subtropical Mxico. J. Econ. Entomol. 97(2): 475-481.
145
Cauich, O.; Quezada-Euan, J.J.G.; Melndez- Ramirez, V.; Valdovinos-Nuez, G. R; Moo-Valle, H. (2006) Pollination of habanero pepper (Capsicum chinense) and production in enclosures using the stingless bee Nannotrigona perilampoides Cr. (Apidae: Meliponini) (Submitted) De la Ra, P.; May-Itz, W. de J.; Serrano J.; Quezada-Eun, J.J.G. (2007).Sequence and RFLP analysis of the ITS2 ribosomal DNA in two Neotropical social bees, Melipona beecheii and Melipona yucatanica (Apidae: Meliponini). Insectes Sociaux 54:418-423. Gonzlez A.J.; De Araujo-Freitas, C. (2005) Manual de meliponicultura mexicana. Universidad Autnoma de Yucatn/Fundacin Produce Guerrero. 46 pp. Gonzlez-Acereto, J.A.; Quezada-Eun J.J.G.; Medina-Medina L. A.. (2006) New perspectives for stingless beekeeping in the Yucatan: results of an integral program to rescue and promote the activity. Journal Apicultural Research 45 (3):234-239. Melndez, R.V. (1997) polinizacin y biodiversidad de abejas nativas asociadas a cultivos hortcolas en el estado de Yucatn, Mxico. M.Sc. thesis, Universidad Autnoma de Yucatn, Mrida, Mxico. 90 pp. Nogueira NP,(1997) Vida e Criacao de Abelhas Indgenas sem Ferrao, Editora Nogueirapis, So Paulo, Brasil. Palma, G.; Quezada-Eun, J.J.G.; Reyes-Oregel, V.; Melndez, V.; Moo-Valle. H. (2008a) Production of greenhouse tomatoes (Lycopersicon esculentum) using Nannotrigona perilampoides, Bombus impatiens and mechanical vibration (Hym.: Apoidea). J. Appl. Entomol. 132:7985. Palma, G.; Quezada-Eun, J.J.G.; Melndez, V.; Irigoyen, J.; Valdovinos-Nuez. G. R.; Rejon, M. (2008b) Comparative Efficiency of Nannotrigona perilampoides, Bombus impatiens (Hymenoptera: Apoidea), and mechanical vibration on fruit production of enclosed habanero pepper J. Econ. Entomol. 101: 132-138. Quezada-Eun, J.J.G. (2005) Biologa y uso de las abejas sin aguijn de la pennsula de Yucatn, Mxico (Hymenoptera: Meliponini). Tratados 16, Ediciones de la Universidad Autnoma de Yucatn. 112 pp. Quezada-Eun, J.J.G.; May-Itz, W. de J.; Gonzlez- Acereto, J.A. (2001) Meliponiculture in Mxico: problems and perspective for development. Bee World 82: 160-167. Quezada-Eun J.J.G.; Paxton, R.J.; Palmer K.E.; May-Itz, W. de J.; Tay, W.T.; Oldroyd, B.P. (2007) Morphological and molecular characters reveal differentiation in a Neotropical social bee, Melipona beecheii (Apidae: Meliponini). Apidologie 38:247-258. Slaa, E. J.; Sanchez, L. A.; Sandi, M.; Salazar, W. A. (2000) Scientific note on the use of stingless bees for comercial pollination in enclosures. Apidologie 31: 141-142.
146
Reviso das Interaes Entre Fordeos (Diptera: Phoridae) e Abelhas Indgenas Sem Ferro (Apidae: Meliponini), e Tcnicas de Controle.
Felipe Andrs Len Contrera1,* & Giorgio Cristino Venturieri2 1 Bolsista de Fixao de Recursos Humanos na Amaznia CNPq/Embrapa Amaznia Oriental Laboratrio de Botnica. Tv. Dr. Enas Pinheiro s/n. CP.48, CEP 66095-100, Belm/PA, Brasil. 2 Pesquisador Embrapa Amaznia Oriental - Laboratrio de Botnica. Tv. Dr. Enas Pinheiro s/n. CP.48, CEP 66095-100, Belm/PA, Brasil. * Autor para correspondncias: felipe.contrera@pq.cnpq.br, Tel: +55+91+32041197 Revision of the interactions between phorid flies (Diptera: Phoridae) and stingless bees (Apidae: Meliponini), and control techniques.
Abstract
Phorid flies are one of the most important plagues of stingless bees. The majority of phorid flies species (Megaselia scalaris and Pseudohypocera kertezsi) that attack stingless bees invade their nests to oviposit in the pollen pots, in the cells with exposed larval food and in the garbage area. The emerging larvae originated from these eggs nourish with the resources from the colony, leading to its weakening and even to its destruction. Other species, such as from the genus Melaloncha, oviposit directly in the workers and drones that are outside the nests, leading them to death, what makes them parasitoids. However, the diversity and biology of phorid flies are poorly known. From the estimated 10,000 species that exist in the Neotropics, just 10% are known. Stingless beekeepers from several regions from Brazil and from other locations from Americas use several techniques for the control of phorids, based in its vast majority in traps containing vinegar. In this article are reviewed the main aspects of phorid flies biology, and the effectiveness of traditional control techniques commonly used by stingless beekeepers was tested. In colonies of Melipona fasciculata infected by phorid flies, three phorid-traps were placed, one with red vinegar, the other with white vinegar and other with a mixture 3:1 of water and pollen of M. flavolineata. There was no significant difference between treatments, but the phorid-traps based on pollen and water were ineffective in protecting the colony, because phorid flies were able to oviposit in and the larvae were able to survive inside them. Key-words: Phorid flies, Megeselia scalaris, Pseudohypocera kertezsi, Melaloncha spp., stingless bees, acetic acid
Resumo
Os fordeos so uma das pragas mais importantes das abelhas indgenas sem ferro. A maioria das espcies de fordeos (e.g. Megaselia scalaris e Pseudohypocera kertezsi) que atacam abelhas sem ferro,
147
invade seus ninhos para ovipositar dentro dos potes de plen, nas clulas de cria com alimento larval exposto e lixeira. As larvas originadas desses ovos ento se alimentam dos recursos da colmia, levando ao seu enfraquecimento e podendo at mesmo lev-lo a sua destruio. Outras espcies, como as do gnero Melaloncha, ovipositam diretamente nas operrias e zanges que estejam fora dos ninhos, levando-os morte, sendo assim parasitides. Entretanto, a diversidade e biologia dos fordeos so pouco conhecidas. Do total estimado de 10.000 espcies existentes nos Neotrpicos, apenas 10% conhecida. Meliponicultores de vrias regies do Brasil e outras partes das Amricas utilizam diversas tcnicas artesanais de controle de fordeos, baseados em sua grande maioria em armadilhas contendo vinagre. Neste artigo so revisados os principais aspectos da biologia dos fordeos, e a eficincia de mtodos de controle tradicionalmente usados pelos meliponicultores foram testados. Em colnias de Melipona fasciculata que continham fordeos, foram colocadas trs caa-fordeos, um com vinagre tinto, outro com vinagre branco e outro com uma mistura 3:1 de gua e plen de M. flavolineata. No houve diferena significativa entre os tratamentos, embora os caa-fordeos base de plen e gua tenham se mostrado pouco eficientes por permitirem que fordeos adultos ovipositassem neles e que as larvas de fordeos fossem capazes de sobreviver neles. Palavras-Chave: Fordeos, Megeselia scalaris, Pseudohypocera kertezsi, Melaloncha spp., meliponneos, cido actico
Introduo
Os fordeos (Diptera, Phoridae) so um dos grupos mais importantes de parasitas e parasitides das abelhas sem ferro (Apidae, Meliponini) nos Neotrpicos, causando a morte de muitas colmias e podendo provocar dessa maneira muitos prejuzos aos meliponicultores (Nogueira-Neto, 1997; Alves et al., 2006). O grupo ainda muito pouco conhecido, e somente se conhece aproximadamente 10% do total de espcies que existam (cerca de 10.000), de acordo com Brown (2005a). Segundo Nogueira-Neto (1997) diversos gneros de fordeos podem parasitar ou predar as colnias de abelhas sem ferro, como Aphiochaeta, Melaloncha, Melitophora Megaselia e Pseudohypocera, alm de Apocephalus altaviporous e A. apivorous, que parasitam ninhos de Trigona fulviventris e T. dorsalis, respectivamente. (Brown, 1996, 1997). Alm dessas espcies, Dohrniphora trigonae, parasita ninhos de T. carbonaria na Austrlia (Disney and Bartareau, 1995). A amplamente distribuda P. kerteszi (foto em http://www.phorid.net/central_american_diptera/ diptera_central_america_image_pseudohypocera.html) uma das maiores pestes de ninhos de abelhas sem ferro nas Amricas Central e do Sul, alm de tambm atacar ninhos de Apis mellifera (Robinson, 1981; Nogueira-Neto, 1997). Dentre os fordeos, esta a espcie de maior ocorrncia no Sul do Brasil, e tambm na Amaznia (Nogueira-Neto, 1997). Os adultos desta espcie so pequenos, de 2,25 a 3,0 mm de comprimento (ver reviso da sua morfologia e morfometria em Pereira, 2006). Os machos e fmeas so similares em aparncia, sendo as fmeas geralmente maiores (Robinson, 1981; Pereira, 2006). O acasalamento das moscas adultas ocorre no ar, fora dos ninhos (Portugal-Arajo, 1977), embora Pereira (2006, p. 30) sugira que machos possam entrar nos ninhos para procurar acasalar com as fmeas. A cpula tambm pode ocorrer em laboratrio, com o tempo de acasalamento variando de 32 a 90 segundos (Chaud-Netto, 1980). As fmeas adultas dessa espcie procuram entrar nos ninhos de meliponneos para ovipositar. Os adultos no causam danos diretos s colnias, mas as larvas se desenvolvem se alimentando dos recursos da colmia, principalmente o plen (Disney and Bartareau, 1995), e quando alcanam altas densidades, podem matar as larvas das abelhas, para se alimentarem delas, sendo nesse caso parasitas, embora sejam primariamente cleptoparasitas (Robroek et al., 2003b).
148
No comeo de uma infestao observada em M. beecheii, as fmeas adultas ovipositavam primeiramente nos potes de plen abertos, na lixeira, e na parede dos potes de plen fechados. Com o aumento da populao de fordeos, as fmeas comearam a ovipositar nos favos de cria, sendo que elas faziam buracos na sua superfcie, para poderem botar seus ovos dentro destes. A infestao nessa fase se espalhou ao longo do ninho, sendo observada oviposio at nos depsitos de prpolis (Robroek et al., 2003a). Esse padro de oviposio observado em diversas espcies de meliponneos do gnero Melipona. O aumento da densidade de larvas Chaud-Netto (1980) encontrou uma mdia de oviposio de 66,4 ovos por fmea em condies de laboratrio. O tempo de desenvolvimento de ovo at adulto varivel, com durao aproximada de 13 a 16 dias segundo estudos feitos na Costa Rica e em El Salvador (Robroek et al., 2003b) e de 9 a 11 dias, segundo Perez (1975, apud Nogueira-Neto, 1997). A razo sexual nessa espcie, assim como em M. scalaris, diferente em estudos de laboratrio e dentro dos ninhos. Chaud-Netto (1980) e Robroek et al., (2003b) encontraram uma razo sexual aproximada de 1:1 em condies de laboratrio, e em ninhos de M. fasciculata, na regio de Belm, foi encontrada uma razo sexual enviesada, com predominncia quase total de fmeas (96,8%, Tabela 1), assim como em M. beecheei (Robroek et al., 2003a). Infestaes de P. kerteszi em ninhos de meliponneos foram observadas em Cephalotrigona capitata (Salt, 1929; Prado, 1976; Nogueira-Neto, 1997), M. beecheii (Disney, 1994; Robroek et al., 2003a; 2003b), M. capixaba (Nogueira-Neto, 1997), M. compressipes manaosensis (Pereira, 2006), M. fasciculata (neste trabalho e em Pereira, 2006), M. flavolineata (este trabalho), M. interrupta (Brues, 1928), M. quadrifasciata (Prado, 1976; Nogueira-Neto, 1997; Moretto, 2000), M. seminigra (Portugal-Arajo, 1977; Pereira, 2006), M. scutellaris (Nogueira-Neto, 1997; Pereira, 2006), Oxytrigona tataira (Nogueira-Neto, 1997), Scaptotrigona postica (Nogueira-Neto, 1997), Scaura sp. (Pereira, 2006), Schwarziana quadripunctata (Borgmeier, 1930), Tetragona clavipes (Nogueira-Neto, 1997), Trigona amalthea (Salt, 1929; Prado, 1976) e T. spinipes (Salt, 1929). A biologia de M. scalaris semelhante, em muitos aspectos biologia de P. kertezsi, embora com algumas diferenas. As larvas de M. scalaris (foto em http://www.phorid.net/phoridae/mscalaris. html) se alimentam de um grande espectro de material orgnico em decomposio, sendo amplamente generalistas, e dessa maneira suas larvas so fceis de cultivar em laboratrio. As larvas de M. scalaris podem se tornar facultativamente predadoras, parasitides ou parasitas, e sua ocorrncia foi observada em vrios casos, como em casos fornsicos, como uma peste de culturas de invertebrados em laboratrios, e em casos de miases em humanos e animais domsticos (Disney, 2008). Em condies de laboratrio, a razo sexual encontrada foi aproximadamente 1:1 (Macieira et al., 1983), mas em ninhos de M. fasciculata foram encontradas principalmente fmeas nas armadilhas contendo vinagre tinto, vinagre branco, e plen com gua (91,6% de fmeas, Tabela 1). De acordo com Kerr (1996), na regio da Baixada Maranhense e So Lus, M. scalaris a nica espcie de fordeo que ocorre nos ninhos de meliponneos, particularmente em M. fasciculata. Assim como em P. kerteszi, as fmeas adultas de M. scalaris procuram entrar nos ninhos de meliponneos para ovipositar e as larvas tm o mesmo comportamento alimentar da P. kerteszi. As larvas dessa espcie so encontradas principalmente nas lixeiras e em poucas ocasies nos potes de plen de colnias de M. fasciculata (Kerr, 1996). Os adultos dessa espcie so significativamente menores do que a P. kerteszi. O gnero Melaloncha (foto em http://www.phorid.net/phoridae/phorselva/melalon.htm) um grupo de fordeos exclusivamente Neotropical. Todas suas espcies so parasitides de abelhas adultas da Famlia Apidae, especialmente abelhas sem ferro (Meliponini) e abelhas africanizadas (Apis mellifera), e h um caso registrado de endoparasitismo (espcie no identificada do subgnero UdaAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
149
mochiras) nas abelhas halictdias Megalopta ecuadoria e M. genalis (Wcislo et al., 2004). O comportamento de ataque registrado para as diferentes espcies de Melaloncha geralmente consiste na mosca procurando inserir seu ovipositor (mantido curvado) na regio da cabea das abelhas atacadas, para injetar seus ovos (Brown and Kung, 2006). Uma reviso recente do grupo aumentou o nmero conhecido de espcies de 32 a 167, com uma estimativa que existam de 200 a 300 espcies desse gnero (Gonzalez and Brown, 2004; Brown, 2005a; 2005b; Brown and Kung, 2006; Kung, 2008). Brown & Kung (2006) fizeram uma reviso das espcies de abelhas sem ferro atacadas pelas diferentes espcies de Melaloncha, que so as seguintes: Leurotrigona muelleri, Partamona cupira, Paratrigona ornaticeps, Plebeia frontalis, Plebeia. aff. jatiformis, Plebeia spp, Tetragona clavipes, Tetragona sp., Tetragonisca angustula fiebrigi, Trigona corvina, T. fulviventris, T. setentrionalis, T. silvestriana, Trigonisca atomaria, T. scabiosa e Trigonisca sp. Neste trabalho foi testada a eficincia de tcnicas de controle de fordeos tradicionalmente utilizadas no Brasil, com dados obtidos em experimentos com a espcie Melipona fasciculata (tiba ou uruu-cinzenta).
Materiais e Mtodos
Um dos mtodos de controle de fordeos mais populares (alm do uso de leos de copaba e andiroba (Freire et al., 2006)), a utilizao de armadilhas internas base de vinagre (cido actico), que denominaremos a partir de agora de caa-fordeos. Segundo Nogueira-Neto (1997, p. 375), esses caa-fordeos foram idealizados pela Profa. Dra. Vera Lcia Imperatriz-Fonseca por volta de 1994. Eles consistem em pequenos tubos de vidro que se comunica com o exterior atravs de um funil de plstico ou vidro ou atravs de uma abertura direta numa tampa de plstico. Segundo Nogueira-Neto (1997, p. 375), o funil parece funcionar melhor que a abertura direta na tampa, embora no existam dados a respeito da eficincia de cada abertura. A entrada do funil ou o buraco da tampa de plstico devem ser suficientes para que o fordeo possa entrar, mas no as operrias. O caa-fordeo ento preenchido at a metade (ou menos) com vinagre, cujo odor cido parece atrair as moscas, que caem no lquido e morrem (Nogueira-Neto, 1997). Alm dos tubos de vidro, podem ser usados tambm frascos de exames laboratoriais, ou frascos de filmes fotogrficos vazios, que funcionam to bem quanto os tubos de vidro. Tradicionalmente, utiliza-se vinagre tinto para compor o caa-fordeo, pois se acredita que ele tenha uma maior atratividade que o vinagre branco. Entretanto, no existe nenhum dado que comprove a maior eficincia do vinagre tinto em detrimento do vinagre branco. Alguns meliponicultores da regio Amaznica, por pouco acesso a vinagres e ao custo extra que ele traria sua prtica, preferem usar uma mistura de plen da prpria colnia com gua ao invs do vinagre. Para avaliar a eficincia de cada tipo de armadilha,foram feitos experimentos (ainda em andamento) com a espcie M. fasciculata no Campus experimental da Embrapa Amaznia Oriental, em Belm (PA), iniciados em julho de 2007. Caso fosse constatada a presena de fordeos em colnias da espcie estudada (atravs de inspees rotineiras), trs caa-fordeos eram colocados nas colnias. Um dos frascos continha vinagre tinto comercial (acidez voltil 4,4%, conforme fabricante), outro vinagre branco (acidez voltil 4,0%, conforme fabricante), da mesma marca, e o outro continha uma mistura 3:1 de gua e plen de M. flavolineata que tnhamos armazenado em refrigerador. As armadilhas foram deixadas dentro das colmias (prximo tampa) durante 7 dias, pois muitas vezes as operrias tampavam a entrada do frasco com resina e cerume. Foram usados caa-fordeos com uma abertura direta na tampa, sem funil nesse experimento. Aps o perodo de coleta, as armadilhas eram retiradas e o nmero de fordeos era contado, discriminando entre sexo e espcie.
150
Resultados
A espcie mais freqente nos ninhos foi a P. kertezsi, seguida da M. scalaris, com uma predominncia de fmeas em ambas as espcies (Tabela 1). No houve diferena significativa entre os tratamentos tanto para a P. kertezsi (Kruskal-Wallis: H =1,72; G.L.=2; N= 51; P =0,42, Figura 1), quanto para a M. sacalaris (Kruskal-Wallis, H =2,26; G.L.=2; N= 51; P =0,32, Figura 2) embora os caa-fordeos base de plen e gua tenham se mostrado pouco eficientes. Isso se deu porque, embora elas tenham capturado fordeos adultos, as fmeas puderam botar seus ovos no lquido, e as larvas permaneceram vivas dentro do frasco at o momento da sua retirada das colmias. Muitas dessas armadilhas base de plen e gua tambm acabaram propiciando um ambiente para a proliferao de fungos, devido s condies quentes e midas das colnias. Tabela 1 - Nmero de fmeas e machos de Pseudohypocera kertezsi e Megaselia scalaris capturados em caa-fordeos deixados durante sete dias em colnias de Melipona fasciculata, e que continham vinagre tinto ou vinagre branco ou uma mistura 3:1 de gua e plen de M. flavolineata. Tinto P. kertezsi M. scalaris 121 68 4 8 Branco 179 59 5 6 Plen + gua 108 37 4 1 Total 408 164 13 15
Figura 1 - Mdia de fmeas de Pseudohypocera kertezsi capturadas dentro de colnias de Melipona fasciculata atravs de caa-fordeos contendo vinagre tinto ou vinagre branco ou uma mistura 3:1 de gua e plen de Melipona flavolineata. As letras iguais acima dos eixos indicam no haver diferenas significativas entre os caa-fordeos (teste de Kruskal-Wallis). EP = Erro Padro e DP = Desvio Padro).
151
Figura 2 - Mdia de fmeas de Megaselia scalaris capturadas dentro de colnias de Melipona fasciculata atravs de caa-fordeos contendo vinagre tinto ou vinagre branco ou uma mistura 3:1 de gua e plen de Melipona flavolineata. As letras iguais acima dos eixos indicam no haver diferenas significativas entre os caa-fordeos (teste de Kruskal-Wallis). EP = Erro Padro e DP = Desvio Padro).
Discusso
Os resultados mostram que no existe diferena significativa entre os caa-fordeos contendo vinagre tinto ou branco, embora os experimentos ainda estejam em andamento. Tambm existe a possibilidade de serem feitos ensaios com cidos acticos de diferentes concentraes, mas para o meliponicultor comum, muitos deles agricultores familiares, com pouco acesso a materiais caros, as armadilhas base de vinagre so mais acessveis e prticas. Os caa-fordeos base de plen e gua se revelaram pouco eficientes e desaconselhvel o seu uso, por permitirem a oviposio dos fordeos e por serem um meio para a proliferao de fungos dentro das colmias.
Agradecimentos
Agradecemos ao Dr. Brian Brown (Natural History Museum of Los Angeles County, EUA) e ao Dr. Henry Disney (Cambridge University Museum of Zoology, Reino Unido) pela ajuda com a identificao dos fordeos e pela bibliografia oferecida, e ao CNPq pela bolsa de pesquisa concedida ao primeiro autor (Processo 553390/2006-6).
Referncias
Alves RMO, et al. (2006) Criao de abelhas nativas sem ferro (Hymenoptera: Apidae): autosustentabilidade na comunidade de Jia do Rio, municpio de Camaari, Estado da Bahia. Magistra 18: 221-228.
152
Borgmeier T (1930) Zur Morphologie und Biologie von Pseudohypocera nigrofascipes Borgmeier & Schmitz. Zool. Anz. 90: 92-104. Brown BV (1996) A further species of Apocephalus, sungenus Mesophora (Diptera, Phoridae) parasitic on stingless bees (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Studia Dipterologica 3: 231-235. Brown BV (1997) Parasitic phorid flies: a previously unrecognized cost to aggregation behavior of male stingless bees. Biotropica 29: 370-372. Brown BV (2005a) Malaise trap catches and the crisis in Neotropical dipterology. Am. Entomol. 51: 180-183. Brown BV (2005b) Revision of the Melaloncha (M.) furcata-group of bee-killing flies (Diptera: Phoridae). Insect Systematics & Evolution 36: 241-258. Brown BV; Kung G-A (2006) Revision of the Melaloncha Ungulata-group of bee-killing flies (Diptera: Phoridae). Contrib. Sci. (Los Angel.) 507: 1-31. Brues CT (1928) Some Colombian Phoridae from the nests of stingless bees. Psyche (Stuttg). 35: 134-137. Chaud-Netto J (1980) Biological studies on Pseudohypocera kerteszi (Phoridae, Diptera). Experientia 36: 61-62. Disney RHL (1994) Scuttle Flies: The Phoridae. Chapman & Hall; London, pp. Disney RHL (2008) Natural History of the Scuttle Fly, Megaselia scalaris. Annu. Rev. Entomol. 53: 39-60. Disney RHL; Bartareau T (1995) A new species of Dohrniphora (Diptera: Phoridae) associated with a stingless bee (Hymenoptera: Apidae) in Australia. Sociobiology 26: 2292-239. Freire DdCB; Brito-Filha CRdC; Carvalho-Zilse GA (2006) Efeito dos leos vegetais de andiroba (Carapa sp.) e Copaba (Copaifera sp.) sobre fordeo, pragas de colmias, (Diptera: Phoridae) na Amaznia Central. Acta Amazonica 36: 366-368. Gonzalez L; Brown BV (2004) New species and records of Melaloncha (Udamochiras) bee-killing flies (Diptera: Phoridae). Zootaxa 730: 1-14. Kerr WE (1996) Biologia e manejo da tiba: a abelha do Maranho. EDUFMA; So Lus, 156 pp. Kung G-A (2008) Two New Species of the Melaloncha ungulata Group of Bee-Killing Flies (Diptera: Phoridae). Sociobiology 51: 491-496. Macieira OJD; Chaud-Netto J; Zanon AM (1983) Oviposition rate and relative viability of descendants from couples of Megaselia scalaris (Diptera: Phoridae) reared in different experimental conditions. Rev. Bras. Biol. 43: 223-228. Moretto G (2000) Treatment against the forid fly Pseudohypocera kerteszi in Melipona quadrifasciata Lep. Acta Scientiarum 22: 651-653. Nogueira-Neto P (1997) Vida e criao de abelhas indgenas sem ferro. Editora Nogueirapis; So Paulo, 445 pp. Pereira CD (2006) Atividade sazonal e morfometria de fordeos (Diptera: Phoridae) e seus parasitides em colmias da Tribo Meliponini (Hymenoptera: Apidae) na Amaznia. Doctoral Thesys. Instituto de Pesquisa da Amazonia/Universidade Federal do Amazonas; 152 pp. Portugal-Arajo Vd (1977) Contribuio para o conhecimento da biologia de Pseudohypocera kerteszi (Enderlein, 1912), seu acasalamento e captura (Diptera, Phoridae). Acta Amazonica 7: 153-155. Prado APd (1976) Records and descriptions of phorid flies, mainly of the Neotropical Region (Diptera; Phoridae). Studia Entomologica 19: 561-609. Robinson GE (1981) Pseudohypocera kertezsi (Enderlein) (Diptera: Phoridae), a pest of the honey bee. Fla. Entomol. 64: 456-457.
153
Robroek BJM; de Jong H; Sommeijer MJ (2003a) The behaviour of the kleptoparasite, Pseudohypocera kertezsi (Diptera, Phoridae), in hives of stingless bees (Hymenoptera, Apidae) in Central America. Proc. Sect. Exp. Appl. Entomol. Neth. Entomol. Soc. (N.E.V.) 14: 65-70. Robroek BJM; de Jong H; Sommeijer MJ (2003b) The development of Pseudohypocera kertezsi (Diptera, Phoridae), a kleptoparasite in nests of stingless bees (Hymenoptera, Apidae) in Central America. Proc. Sect. Exp. Appl. Entomol. Neth. Entomol. Soc. (N.E.V.) 14: 71-74. Salt G (1929) A contribution to the ethology of the Meliponinae. Trans. R. Entomol. Soc. Lond. 77: 431-470. Wcislo WT, et al. (2004) The evolution of nocturnal behaviour in sweat bees, Megalopta genalis and M. ecuadoria (Hymenoptera: Halictidae): an escape from competitors and enemies? Biol. J. Linn. Soc. Lond. 83: 377-387.
154
Potencial Nectarfero do Aazeiro (Euterpe oleracea Mart. - Arecaceae) na Amaznia Oriental

Giorgio C. Venturieri, Milene S. Souza, Charles A. B. Pereira, Silvane T. Rodrigues Embrapa Amaznia Oriental, Caixa Postal 48, CEP: 66.095-100, Belm, PA, e-mail: giorgio@ cpatu.embrapa.br, telefone (91) 32041197, fax (91) 32769845.
Abstract
Nectar production potential of the assai tree (Euterpe oleracea Mart. - Arecaceae) in western Amazon The assai tree is a typical palm from the Amazon region, important for the diet and economy of human populations of the Amazon estuaries. In the Amazon region, E. oleracea blossom and fructify almost during the entire year. However, differently from what happens with the vast majority of the plants of the region, E. oleracea blossoms more intensely in the raining period of the year, making it an important source of nectar and pollen for native bees, especially in periods of food shortage. The present work, performed in Belm, PA, Brazil, evaluated the volume and percentage of sugar contained in the flowers, the number of female and male flowers produced by inflorescence and the number of inflorescences produced by year. Volume was measured with microcapillaires, and the percentage of sugar was measured using a portable refractometer adapted to small samples. The volume of nectar per male and female flowers was 1.84l and 1.4l, respectively. The sugar percentage in male and female flowers was 46.9% and 53%, respectively. Each stem produces, in average, six inflorescences by year. In a monoculture plantation of the assai palm, the space between shrubs is 5x5 meters, resulting in 400 shrubs by hectare. In each shrub, there are four stems, totalizing 1,600 stem and 9,600 inflorescences per hectare. The total volume of nectar produced, by year, in these conditions is 999.11 liters/ha, which for Melipona flavolineata, totalize 763.75 liters of honey by year, since its honey has 64.1% of sugar. For M. fasciculata, which honey has 73.89% of sugar, we estimate a production of 662.46 liters of honey by year. Key-words: meliponiculture, bees, honey production.
Introduo
O aazeiro uma tpica palmeira do esturio amaznico, muito importante na dieta e economia das populaes tradicionais da regio, em especial das populaes ribeirinhas. Segundo o IBGE (2007) o aaizeiro o mais importante produto florestal no madeireiro do Brasil; somente com seus frutos (desta planta tambm se extrai palmito, largamente exportado) foram obtidos R$ 103,2 milhes em 2006, correspondendo cerca de 20% de toda economia gerada neste setor. Na Amaznia Oriental o aaizeiro flora e frutifica quase o ano todo, contudo, ao contrrio do que acontece com a maioria das plantas da regio, o aaizeiro floresce mais intensamente no perodo
155
de maior intensidade das chuvas, que nas proximidades de Belm corresponde aos meses de maro a junho (Jardim, Kageyama, 1994a; Jardim, Kageyama, 1994b; Oliveira, 2002). Isso faz desta planta uma importante fonte de nctar e plen para as abelhas nativas, especialmente em perodos em que normalmente existe escassez destes recursos. O aaizeiro altamente dependente de polinizao cruzada, auto-incompatvel e possui flores masculinas e femininas sendo ofertadas em perodos distintos em um mesmo indivduo (Venturieri 2008). Nos ltimos anos, apoiada por projetos que visam o desenvolvimento sustentvel da Amaznia, a meliponicultura cresceu, sendo hoje praticada em caixas de criao padronizada que facilitam tanto o manejo como a coleta higinica e gil dos produtos da colmia. Contudo, o conhecimento sobre a flora apcola da regio restrito, se comparado com a diversidade existente na regio (Oliveira 2003; Venturieri e Fernandes, 2003). Sem este conhecimento a sustentabilidade da meliponicultura fica comprometida, impossibilitando um melhor rendimento da atividade e o consrcio com culturas agrcolas autctones. Este trabalho faz uma estimativa da capacidade de produo de mel por duas espcies de abelhas indgenas sem ferro, Melipona fasciculata e M. flavolineata, introduzidas em um plantio comercial de aaizeiro. O potencial produtivo foi obtido indiretamente com base nos dados quantitativos de florescimento, volume de nctar e concentrao de aucares.
Material e mtodos
A contagem das flores e inflorescncias e medies do nctar foram tomadas nos campos de pesquisa da Embrapa Amaznia Oriental, em Belm, PA, Brasil, utilizando-se indivduos adultos com cerca de 10 anos de idade. Avaliou-se a biologia floral com especial referncia ao fluxo, volume e teores de acares contidos no nctar. Avaliou-se tambm o nmero de flores e emitidas por inflorescncia e o nmero de inflorescncias emitidas por ano. As inflorescncias, ou rquilas, foram isoladas com sacos plsticos microperfurados. Esta prtica foi utilizada a fim de proteger as flores da ao de visitantes em busca de nctar. O volume foi medido com o auxlio de microcapilares de 1l e o teor de acares (Bx) com refratmetro porttil Bellingham & Stanley) adaptado para pequenas amostras. Neste caso eram utilizados microcapilares de 2 l. O volume e a concentrao de acares, em flores , foi avaliada em intervalos de 30 minutos, comeando s 9:30 h, quando as flores abriam, at as 12:30 h, quando as flores se desprendiam das rquilas. No caso de flores , as medies comearam s 9:00 h e se estenderam at as 14:00 h, intervalo de tempo em que estas flores permaneciam ativas, secretando pequenas quantidades de nctar. Para a medio do volume individual de cada flor, devido ao pouco nctar disponvel, foram utilizadas diversas flores em um mesmo horrio, escolhidas aleatoriamente at completar 2 l. Para o clculo do volume do nctar contido na flor, dividiu-se o volume total obtido pelo nmero de flores utilizadas nas amostras. O comportamento de coleta dos visitantes florais foi observado diretamente. Amostras de abelhas foram coletadas, identificadas e depositadas na coleo de abelhas da Embrapa Amaznia Oriental.
Resultados e discusso
O nmero mdio de flores e por inflorescncia foi de 40.973 e 20.486, respectivamente. O volume total de nctar por flor e foi de 1,84 l e 1,4 l, respectivamente (Figura 1). Os teores de acares em flores e flores foi de 46,9% e 53%, respectivamente.
156
Figura 1 - Fluxo de nctar ao longo do dia em flores masculinas e femininas de aaizeiro (Euterpe oleracea Arecaceae).
Segundo Nogueira et al. (2005) cada estipe d, em mdia, seis inflorescncias por ano, e segundo estes mesmos autores, em um plantio comercial do tipo solteiro, com o espaamento entre touceiras de 5 m x 5 m, so cultivadas 400 touceiras por hectare. Se em cada touceira forem deixados quatro estipes, ter-se-ia 1.600 estipes e 9.600 inflorescncias por hectare. O volume total estimado de nctar produzido por ano, nestas condies, seria de 999,11 litros/ha, o que para mis de Melipona flavolineata daria um potencial de produo de at 763,75 litros, considerando que seu mel apresenta 64,1% de aucares totais (Venturieri et al. 2007). Para M. fasciculata, onde o teor de aucares totais em seu mel de 73,89 % (Venturieri et al. 2007), estima-se uma capacidade de produo de 662,46 litros de mel. Diversos Apoidea foram observados nas inflorescncias coletando nctar e/ou plen, incluindo M. fasciculata (Figura 2a) e M. flavolineata (Figura 2b).
157
Figura 2. Visitantes florais do aaizeiro (Euterpe oleracea Arecaceae) coletando nctar e plen em Belm, PA. a. uruu-amarela (Melipona flavolineata); b. uruu-cinzenta (Melipona fasciculata).
Desse modo, o aaizeiro tem um grande potencial para a meliponicultura, especialmente para as espcies M. fasciculata e M. flavolineata, que podem explorar o grande potencial de produo de nctar desta planta. Diversos outros fatores tambm indicam seu potencial, como: uma florao mais intensa nos perodos mais chuvosos do ano, quando outras plantas no floram, alm de uma florao num horrio (entre 9:30 h e 14:00 h) quando a intensidade das chuvas menor na regio de Belm. Desse modo, em programas de produo integrada, o consrcio entre meliponneos e esta importante fruteira amaznica uma boa oportunidade para o melhor aproveitamento dos recursos naturais da regio Amaznica.
Agradecimentos
Este trabalho recebeu o apoio financeiro do Global Environment Facility GEF, Projeto de Conservao e Utilizao Sustentvel da Diversidade Biolgica Brasileira - PROBIO/Ministrio do Meio Ambiente MMA e Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico CNPq. Ao Dr. Felipe Contrera pelas valorosas sugestes.
Bibliografia
Dafni, A. (1992). Pollination Ecology: A Practical Aproach. Oxford: IRL. IBGE. (2007). Comunicao Social: Produo da Extrao Vegetal e da Silvicultura 2006. Disponvel em: <http://www.ibge.gov.br/home/presidencia/noticias/noticia_ impressao.php?id_noticia=1052>. Acessado em: 16 de junho de 2008. Kearns, CA & Inouye, DW (1993). Techniques for Pollination Biologists. University Press of Colorado. Jardim, MAG; Kageyama, PY (1994a). Fenologia de Euterpe oleracea Mart. Boletim do Museu Paraense Emlio Goeldi. Botnica, v. 10, n. 1, p. 77-82. Jardim, MAG; Kageyama, PY (1994b). Fenologia de florao e frutificao em populao natural aaizeiro (Euterpe oleracea Mart.) no esturio amaznico. IPEF. Instituto de Pesquisas e Estudos Florestais, v. 47, p. 62-65. Nogueira, OL (Org.); Figueirdo, FJC. (Org.) ; Muller, AA (Org.) (2005). Sistemas de Produo de Aa. 1. ed. Belm: Embrapa Amaznia Oriental.
158
Oliveira, MSP (2002). Biologia Floral do Aaizeiro. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento:Embrapa Amaznia Oriental 08: 1-26. Oliveira, FPM (2003). Potencial apcola de plantas amaznicas. In: 54 Congresso Nacional de Botnica, 3 Reunio Amaznica, 2003, Belm. Anais do 54 Congresso Nacional de Botnica. Venturieri, GC; Fernandes, MM (2003). Plantas visitadas por Meliponina no Estado do Par. In: 54 Congresso Nacional de Botnica, 2003, Belm, PA. Anais do 54 Congresso Nacional de Botnica, p. 261-263. Venturieri, GC; Oliveira, PS, Vasconcelos, MAM; Mattietto, RA (2007). Caracterizao, colheita, conservao e embalagem de mis de abelhas indgenas sem ferro. Belm: Embrapa Amaznia Oriental. Venturieri, GC (2008). Floral biology and management of stingless bees to pollinate Euterpe oleracea Mart. (Arecaceae) in western Amazon. In: Ministry of the Environment. (Org.). Pollinators Management in Brazil. Brasilia.
159
O Valor dos Substratos de Nidificao Para as Abelhas Sem Ferro (Meliponini) no Cerrado (Maranho, Brasil) e a Meliponicultura Como Ferramenta de Sustentabilidade e Conservao
Rgo, M.M.C.1; Albuquerque P.M.C. de1; Venturieri, G.2 (1-Laboratrio de Estudos sobre Abelhas - LEA, Departamento de Biologia, Universidade Federal do Maranho - UFMA, So Lus MA, e-mail: regommc@uol.com.br, Telefone: (98) 21098544, Fax: (98) 21098540. 2- EMBRAPA Amaznia Oriental, Belm-PA)
Abstract
The majority of stingless bees nest in hollows of trees, alive or dead. The Meliponini nests were looked for from July/2006 to November/2007 in a cerrado area at Balsas-MA Brazil (07 42 58.5 S and 46 11 19.8 W), numbered and mapped with the aid of a GPS receiver. Nest characteristics like its height above the ground, stem diameters at breast height (DBH) of the trees and or branches diameters were annotated, as soon as the popular name of floral species, where the nests were found. A total of 110 stingless bee nests of 22 species were located. Among those, Scaptotrigona was the most abundant genus (36.4% of nests), followed by Frieseomellita (16.4%) and Oxytrigona (12.7%). The bees known as tubi (two belonging to Scaptotrigona genus), tatara (Oxytrigona), man-de-abreu (Frieseomellita flavicornis), bor (Tetragona quadrangula) and jata (Tetragonisca angustula) were the most common species. The nests were found mainly in main trunks and branches of sucupira-amarela (Pterodon aff. polygalaeflorus - Fabaceae), pequi (Caryocar brasiliense - Caryocaraceae) and pu (Mouriri grandiflora - Melastomataceae). Trees with larger diameter of the main trunk and bigger hollows were preferentially selected by bigger bees, like uruu species (Melipona flavolineata) and tiba (Melipona fasciculata), both not so abundant in the Maranhao cerrado anymore.The stingless bees from Maranho cerrado nest in some tree species with hollows in their trunks, but the enviroment destroyed by human action has been slowing down the nesting places and threatening these important insects. Palavras-chave: ninhos, abelhas sem ferro, Balsas, agricultura familiar
Introduo
O Maranho abriga uma grande variedade de ecossistemas, como as florestas, cerrados, restingas e manguezais, com floradas freqentes e abundantes, que proporcionam uma diversidade de nichos para as abelhas. Muitas espcies de plantas nestes ambientes servem de abrigo para as abelhas construrem seus ninhos. No cerrado, por exemplo, ninhos de abelhas sem ferro, Meliponini, tm sido localizados, principalmente, em cavidades pr-existentes de rvores vivas ou mortas (Rgo & Brito, 1996 a, b; Rgo et al, 2007; Rgo et al, 2008).
160
Essas abelhas tambm constroem ninhos expostos, subterrneos, no interior de ninhos ativos ou abandonados de outros animais, como cupins, formigas e pssaros; tambm aproveitam construes humanas postes, tubulaes, paredes para instalar seus ninhos (Schwarz, 1948; Kerr et al., 1967; Camargo, 1970, 1994; Nogueira-Neto, 1970; Wille & Michener, 1973; Wille, 1983; Almeida & Laroca, 1988; Rgo & Brito, 1996 a; Barreto & Castro, 2006; Roubik, 2006). Embora no haja relatos conclusivos que atestem a vulneralidade dos Meliponini fragmentao dos habitats, considerando que a grande maioria, constri seus ninhos nos troncos das rvores (Camargo, 1970; Rgo & Brito, 1996 a; Antonini & Martins, 2003; Martins et al., 2004; Camargo & Pedro, 2007) esta hipotese deve ser avaliada. A freqente extrao da madeira quer seja pelo corte, derrubada ou queima, nas reas de cerrados j bastante modificadas, impede que as populaes destas espcies se mantenham numerosas. Pequenas reas de recursos florais tambm so insuficientes para a conservao de suas colnias. O processo de desmatamento e a expanso de fronteiras agrcolas tm reduzido a riqueza e abundncia dos Meliponini (Viana & Melo, 1987), o que contribui para a sua extino localizada. A endogamia tambm outro fator a ser considerado. Segundo Kerr & Vencovsky (1982) necessrio um nmero mnimo, de 44 colnias, na rea de reproduo a fim de se evitar o problema. Esses efeitos negativos j so perceptveis em muitas localidades pelo rareamento de espcies, em condies naturais, principalmente as do gnero Melipona, em reas antes, comumente amostradas. No Maranho so conhecidas cerca de 57 espcies de abelhas sem ferro (Rebelo et al., 2006), mas a grande maioria no produz mel indicado para o consumo humano ou em quantidade suficiente para o aproveitamento comercial. As espcies criadas para este fim no Estado so a tiba (Melipona fasciculata Smith) e a uruu (Melipona flavolineata Friese). Para a produo de prpolis, a tubi (Scaptotrigona postica (Latreille)). Outras espcies no Brasil so tambm utilizadas: Melipona subnitida Ducke (no Cear), M. crinita Moure & Kerr, e M. seminigra Friese (na Amaznia), M. scutellaris Latreille (no nordeste at o sul da Bahia) e M. quadrifasciata Lepeletier (Minas Gerais, So Paulo e Paran). Os Meliponini esto sendo ultizados tambm para a polinizao de cultivares de importncia econmica, como a Melipona quadrifasciata na polinizao do tomate (Del Sarto et al. 2005) e M. subnitida, do pimento (Cruz et al. 2004). O uso de abelhas sem ferro para fins de comercializao de seus produtos uma atividade j algum tempo difundida, mas sua criao para fins de repovoamento de espcies pouco abundantes, conservao e polinizao recente, e em alguns Estados brasileiros ainda muito incipientes. Somase a isto, os efeitos negativos da destruio dos habitats sobre a comunidade de abelhas e seus hospedeiros florais, cada vez mais freqentes e na maioria dos casos irreversveis. Algumas reas no Estado do Maranho, por exemplo, onde j foram realizados inventrios de abelhas esto completamente destrudas. o caso dos cerrados no municpio de Chapadinha (Rgo, 1998) que revelou uma grande abundncia de abelhas sem ferro, e reas de floresta como no municpio de Buriticupu (Rebelo et al., 2006) onde foram amostradas inclusive espcies, at ento no descritas para o Estado. Embora seja relatado que as abelhas sem ferro, especialmente as do gnero Melipona utilizam determinadas espcies florais para a construo de seus ninhos (Martins & Antonini, 2003; Rgo & Brito, 1996 a; Rgo et al., 2008) e aparentemente, espcies menores de Meliponini sejam consideradas oportunistas quanto ao local de fundao dos ninhos, dependendo mais da disponibilidade dos recursos florais e de sua prpria capacidade de adaptar-se ao meio, h poucos trabalhos que confirmem ou refutem esses comportamentos. Trabalhos sobre inventrios e distribuio de ninhos tambm so escassos, podendo-se citar os estudos de Hubbell & Jonhson (1977); Roubik (1979, 1983), Taura & Laroca (1991), Oliveira et al. (1995) Rgo & Brito (1996 a); Barreto & Castro (2006) e Eltz et al. (2006).
161
Assim sendo, este estudo foi elaborado para responder as seguintes questes: Que espcies de Meliponini residem no stio de estudos? As espcies de Meliponini discriminam espcies arbreas para a fundao de seus ninhos? As espcies de Melipona selecionam espcies arbreas com dimetros mais espaosos para nidificar? Os ninhos de Meliponini estariam agregados uns aos outros? A explorao do mel de abelhas sem ferro, na rea de estudos, estaria afetando a manuteno dos ninhos? O freqente manuseio de rvores de troncos mais espaosos, na rea de estudo, estaria afetando a fundao de ninhos, dessas espcies? As espcies arbreas onde as abelhas constroem seus ninhos so tambm suas fontes de recursos florais? Que espcies de abelhas devem ser selecionadas para criao, na rea de estudo?
Material e Mtodos
Este trabalho foi conduzido de julho/ 2006 a novembro/ 2007 em uma rea de cerrado, no povoado de Santa Luzia, municpio de Balsas, sul do Maranho (07 42 58.5 S e 46 11 19.8 W). Esta rea sofre intensa presso ambiental devido implantao de grandes projetos agrcolas e florestais, mas ainda, com atividades extrativistas e a degradao (principalmente o fogo) causada pela populao circunvizinha que sobrevive dos seus recursos naturais. Fortalecer as comunidades da regio o primeiro passo no sentido de minimizar as presses antrpicas neste importante ecossistema. Estas formaes de Cerrado apresentam grande heterogeneidade ambiental e elevada biodiversidade, sendo consideradas como reas de altssima prioridade para a preservao (vide Hotspots da biodiversidade- Conservao Internacional). Os ninhos de abelhas foram devidamente numerados e sua localizao determinada pelo Sistema de Posicionamento Global (GPS). Caractersticas como altura da entrada do ninho em relao ao solo, dimetro do tronco das rvores na altura do peito (DAP) e dimetro dos galhos com ninhos fundados foram anotados, assim como o nome popular das espcies florais, hospedeiras dos ninhos. Os carregamentos polnicos das corbculas e dos potes de armazenamento de plen de algumas colnias selecionadas para criao foram submetidos ao processo de acetlise de Erdtman (1966); as lminas de plen esto sendo analisadas por especialistas, com o auxlio da palinoteca referncia das plantas inventariadas na mesma rea, e com quelas do Museu Goeldi. Para a implantao do Meliponrio a metodologia utilizada foi a coleta de ninhos e sua transferncia para caixas racionais, que a princpio ficavam expostas no beiral das casas dos moradores, para finalmente serem disponibilizadas no Meliponrio coletivo, construdo no stio de estudos. Posteriormente foram realizadas algumas divises de colnias fortemente estabelecidas. As colnias divididas (colnias matrizes) forneceram elementos (favos, abelhas, potes de plen e mel, etc.) para a formao das colnias filhas. As colnias foram alimentadas com xarope de acar, para acelerar o crescimento e as caixas (Modelo Embrapa) vedadas com fita gomada, aps cada reviso. Ninhos de abelhas localizados em locais altos, como galhos de rvores tambm foram coletados para compor a lista das espcies que residem na rea. Foram integrados ao Projeto moradores da prpria comunidade. Para isto, o Lea - Laboratrio de Estudos sobre Abelhas/UFMA, juntamente com a EMBRAPA Amaznia Oriental ministraram treinamentos: cursos, palestras e aulas prticas de campo que foram efetuadas ao longo do projeto nas dependncias da comunidade em locais com infra-estrutura pronta, que facilitou a execuo das atividades.
Resultados
Foram amostrados 110 ninhos de 22 espcies de Meliponini dentre os quais, 39% estavam agregados a outros ninhos de abelhas sem ferro; a maioria dos ninhos (61%) encontrava-se isolado.
162
Do total de ninhos amostrados, apenas trs (2,7%) eram de Melipona, sendo um de tiba, Melipona fasciculata e dois de uruu, Melipona flavolineata (Tabela 1). Esses ninhos foram amostrados em troncos de jatob (Hymenaea sp.- Fabaceae), folha larga (Salvertia convallariodora - Vochysiacae) e capito do campo (Terminalia sp. - Combretaceae) respectivamente, e estavam isolados dos demais ninhos de Meliponini, tambm inventariados. Tabela 1 - Ninhos inventariados no Cerrado de Balsas-MA, Brasil 2006 Meses Total Frieseomellita flavicornis (Fabricius) Frieseomellita sp. Lestrimellita limao (Smith) Melipona fasciculata Smith Melipona flavolineata Friese Oxytrigona tatara Smith Partamona ailyae Camargo Partamona sp. Scaptotrigona sp. Scaptotrigona sp1. Tetragona quadrangula (Lepeletier) Tetragona dorsalis (Smith) Tetragona sp. Tetragona sp1. Tetragonisca angustula (Latreille) Trigona amazonensis (Ducke) Trigona fulviventris Gurin Trigona pallens (Fabricius) Trigona spinipes (Fabricius) Trigona sp. Trigona sp.1 Trigona sp.2 2007
jul ago set out jan fev mai nov total 20 18 10 16 7 14 17 8 110 1 0 0 0 0 4 1 1 8 1 1 0 1 0 0 0 0 1 0 1 0 0 5 0 2 0 1 2 0 0 7 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 1 1 2 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 4 0 0 0 0 1 2 0 7 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0 1 1 0 0 0 0 6 0 1 0 0 1 0 1 1 0 1 0 0 1 0 1 0 1 0 0 0 0 1 0 0 1 0 3 1 2 6 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 1 0 0 1 0 1 0 0 0 5 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 17 1 5 1 2 14 5 5 37 3 4 1 1 1 3 1 1 4 1 1 1 1
O gnero Scaptotrigona predominou com 36,4% de ninhos quantificados, seguido de Frieseomellita (16,4%) e Oxytrigona (12,7%). O nmero de espcies amostradas foi bastante representativo quando comparado ao de outras reas de cerrado j inventariadas no Maranho (Rgo & Brito, 1996 a, b; Rgo, 1989; Rgo et al., 2007).
163
A sucupira, Pterodon aff. polygalaeflorus e o pequi, Caryocar brasiliense, destacaram-se dentre as espcies arbreas, como os substratos mais atrativos para as abelhas sem ferro, com o maior nmero (21% e 20% respectivamente) de ninhos fundados (Figura 1). Diferentemente de outra rea de cerrado, leste do Estado (Rgo, 1989), onde a maioria dos ninhos (88%) foi encontrada em Salvertia convallariodora, uma espcie muito freqente em fisionomia de cerrado mais arbrea conhecida como cerrado. Considerando que a sucupira e o pequi so polinizadas por abelhas solitrias e morcegos respectivamente, e mesmo que ocasionalmente os Meliponini coletem nctar em suas inflorescncias, essas abelhas parecem no os utilizarem como fontes de plen durante seu forrageamento. Anlises polnicas dos potes de alimento dos ninhos de algumas espcies selecionadas para a criao esto sendo realizadas para a obteno de dados mais conclusivos sobre suas fontes de alimento, naquele cerrado. O dimetro (DAP) das espcies arbreas em que foram encontrados os ninhos de Melipona so maiores, quando comparado queles de outras rvores que abrigaram a maioria das outras espcies de abelhas sem ferro, na mesma rea, e encontram-se descritos na tabela 2. Figura 1 - Substratos mais utilizados pelos Meliponini para nidificao, no cerrado de BalsasMA, Brasil.
164
Tabela 2 - Espcies de abelhas, substratos arbreos, com ninhos, e suas medidas (Dimetro na altura do peito-DAP; e altura) inventariados no cerrado de Balsas, MA.
Espcies Frieseomellita flavicornis Frieseomellita sp. Lestrimellita limao Melipona fasciculata Melipona flavolineata Nome popular Mane de abreu Limo Tiba Uruu Substratos arbreos Sucupira/ Pterodon aff. polygalaeflorus Piqui/ Caryocar brasiliensis Catinga de porco/ Terminalia aff. fagifolia Aroeira(mouro)/Myracroduon urundeuva Sucupira/ Pterodon aff. polygalaeflorus Piqui/ Caryocar brasiliensis Jatob/ Hymenaea sp. Folha larga/ Salvertia convallariodora Capito do campo/ Terminalia sp. Sucupira/ Pterodon aff. polygalaeflorus Piqui/ Caryocar brasiliensis Catinga de porco/ Terminalia aff. fagifolia Pau terra da folha mida/ Qualea sp Jatob/ Hymenaea sp. Pu/ Mouriri cf. grandiflora Caraba/ Tabebuia sp. Sambaba/ Curatella sp. Quina brava/ Ascomium sp. Folha larga/ Salvertia convallariodora Pu/ Mouriri cf. grandiflora Piqui/ Caryocar brasiliensis Jatob/ Hymenaea sp. Pau terra/ Qualea parviflora Caxamorra/ Sclerolobium paniculatum Folha larga/ Salvertia convallariodora Capito do campo/ Terminalia sp. Copaba/ Copaifera aff. langsdorffii Sucupira/ Pterodon aff. polygalaeflorus Sucupira/ Pterodon aff. polygalaeflorus Pau terra/ Qualea parviflora Canudeiro/ No Identificada Pu/ Mouriri cf. grandiflora Pu/ Mouriri cf. grandiflora Piqui/ Caryocar brasiliensis Sucupira/ Pterodon aff. polygalaeflorus Copaba/ Copaifera aff. langsdorffii Aroeira/ Myracroduon urundeuva Catinga de porco/ Terminalia aff. fagifolia Angico/ Piptadenia sp. Gonalo Alves/ Astronium fraxinifolium Pau-pombo/Hirtella aff. ciliata Piqui/ Caryocar brasiliensis Caju/ Anarcardium sp. Anais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil DAP (m) 0,53 1,00 0,67 2,33 0,69 1,18 1,23 1,28 1,55 0,50 0,73 1,00 1,28 1,09 1,23 1,12 0,70 1,50 1,55 1,30 0,84 0,90 1,04 0,80 1,03 1,46 0,94 2,60 1,06 1,55 0,93 1,10 0,98 0,79 0,68 0,94 1,60 1,18 1,28 1,00 1,90 1,02 1,34 1,28 1,44 0,82 0,89 1,44 0,80 0,60 0,51 1,10 0,90 Altura (m) 2,18 10,0 1,06 7,00 2,14 2,00 1,12 6,00 6,00 1,63 0,73 1,28 1,50 3,50 3,00 10,0 3,00 5,00 1,50 2,40 1,50 1,55 1,60 3,00 4,00 0,43 10,0 1,98 8,00 2,30 1,50 3,25 2,00 2,32 2,03 1,00 10,0 8,00 8,00 0,55 > 10,0 6,00 2,50 0,85 4,50 1,80 3,00 1,50 0,06 5,00 0,30 2,00 1,70
Oxytrigona tataira
Tatara
Scaptotrigona flavisetis
Tubi brabo
Scaptotrigona sp1. Tetragona dorsalis Tetragona quadrangula Tetragona sp. Tetragona sp1. Tetragonisca angustula Trigona spinipes Trigona sp. Trigona sp1. Trigona sp2.
Tubi manso Boca de vidro Bor Tubi de macaco Jata Arapu Boca de sapo Sanhar -
165
Os resultados da Anlise multivariada/ regresso mtipla realizada entre as espcies de abelhas e o substrato com ninhos fundados, e as medidas: DAP, altura e largura das espcies vegetais, mostraram que h correlao entre as espcies de abelhas e a largura do substrato (R = 0,20; R2 = 0,04; p = 0,04; tolerncia < 0,05). Na rea especfica de estudos e em reas adjacentes no havia at ento, a criao racional de abelhas (meliponicultura); quando ocasionalmente eram encontrados ninhos de Melipona (tiba ou de uruu) o mel era retirado de forma predatria, o que ao longo do tempo, contribuiu para a diminuio das populaes dessas espcies no stio de estudos. Outro fator tambm a ser considerado o freqente corte de madeira na localidade o que impede ou retarda o crescimento das rvores deixando-as pequenas e com os troncos finos, pouco espaosos (vegetao com aspecto de cerrado novo) e, portanto, no utilizado para a fundao de ninhos por espcies maiores de Meliponini. Alm de tiba e uruu, tambm foram selecionados para criao as espcies de tubi (Scaptotrigona sp.), jata (Tetragonisca angustula) e man de abreu (Frieseomellita flavicornis). Estas abelhas compem a coleo (meliponrio) e esto sendo utilizadas para fins de pesquisa e exemplificao da biodiversidade local. O povoado de Santa Luzia (Balsas-MA) dispe de um balnerio aberto ao pblico, s margens do Rio Balsas, que a comunidade utiliza como turismo ecolgico; o meliponrio estabelecido integra-se a esta alternativa de sustentabilidade. Um total de 25 ninhos compe o Meliponrio da comunidade de Santa Luzia, no cerrado, BalsasMA. Estes esto sendo desmembrados at atingir um total de 40 ninhos em caixas racionais. A manuteno e a multiplicao do meliponrio ficou a cargo da comunidade que recebeu treinamento para tanto.
Agradecimentos
Ao CNPq (processo: 505503/2004/2) pelo apoio financeiro.
Almeida, MC; Laroca, S (1988). Trigina spinipes (Apidae, Meliponinae): taxonomia, bionomia e relaes trficas em reas de restinga. Acta. Biol. Par., 17: 67-108. Antonini, Y; Martins, RP (2003). The value of a tree species (Caryocar brasiliense) for a stingless bee Melipona quadrifasciata quadrifasciata. J. Ins.Cons. 7: 167-174. Barreto, LS; Castro, MS (2007). Ecologia de nidificao de abelhas do gnero Partamona (Hymenoptera: Apidae) na caatinga, Milagres, Bahia. Biota Neotropica, 7(1): 137-142. Camargo, JMF (1970). Ninhos e biologia de algumas espcies de meliponneos (Himenptera: Apidae) da regio de Porto Velho, territrio de Rondnia, Brasil. Rev. Biol. Trop., 16(2): 207-239. Camargo, JMF (1994). Biogeografia de meliponini (Himenoptera: Apidae, Apinae): a fauna amaznica. In: Anais do 1 Encontro Sobre Abelhas de Ribeiro Preto, pp.46-59. Camargo, JMF; Pedro, SRM (2007). Notas sobre a bionomia de Trichotrigona extranea Camargo & Moure (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). Rev. bras. Ent. 51(1): 72-81. Cruz, DO; Freitas, BM; Silva, LA; Silva, EMS & Bomfim, IGA. (2004) Adaptao e comportamento de pastejo da abelha jandara (Melipona subnitida Ducke) em ambiente protegido. Acta Sci. 26: 293-298. Del Sarto, MCL; Peruquetti, RC & Campos, LAO (2005). Evaluation of the Neotropical stingless bee Melipona quadrifasciata (Hymenoptera: Apidae) as pollinator of greenhouse tomatoes. J. Econ. Entomol. 98: 260-266. Eltz, T; Brhl, CA (2002). Determinants of stingless bee nest density in lowland dipterocarp forests of Sabah, Malaysia. Oecologia, 131: 27-34.
166
Erdtman, G (1966). Pollen morphology and plant taxonomic. Stockholm, Almqvist & Wilsell. Hubbell, SP; Johnson, L (1977). Competition and spacing in a tropical stingless bees community. Ecology, 58: 949-963. Kerr, WE; Sakagami, SF; Zucchi, R; Portugal-Araujo, V; Camargo, JMF (1967). Observao sobre a arquitetura dos ninhos e comportamento de algumas espcies de abelhas sem ferro das vizinhanas de Manaus, Amazonas (Himenoptera: Apoidea). Simpsio sobre a Biota Amaznica, Zoologia, 5: 255-309. Kerr, WE; Vencovsky, R (1982). Melhoramento Gentico em Abelhas. Efeito do Nmero de Colnias Sobre o Melhoramento. Rev. Brasil.Gentica. 5(2): 279-285. Martins, CF; Cortopassi-Laurino, M; Koedam, D; Imperatriz-Fonseca, VL (2004). Tree species used for nidification by stingless bees in the brazilian caatinga (Serid, PB; Joo Cmara, RN). Biota Neotropica, 4(2): 1-8. Nogueira-Neto, P (1970). A criao de abelhas indgenas sem ferro (Meliponinae). 2. ed. Tecnapis, 365pp. Oliveira, ML; Morato, EF; Garcia, MVB (1995). Diversidade de espcies e densidade de ninhos de abelhas sociais sem ferro (Himenptera, Apidae, Meliponinae) em floresta de terra firme na Amaznia Central. Revta. Bras. Zool., 12(1):13-24 . Reblo, JMM; Rgo, MMC.; Albuquerque, PMC (2003). Abelhas (Hymenoptera, Apoidea) da regiao setenRgo, MMC & Brito C (1996). Abelhas (Apidae, Meliponini) em um ecossistema de cerrado s.l. (Chapadinha-MA): distribuio de ninhos In: Anais do II Encontro de sobre Abelhas. Resumos... Ribeiro Preto, SP, v.2, p.238-247. Rgo, MMC & Brito, C (1996b). Meliponneos (Hymenoptera, Apidae) em um ecossistema de cerrado s. l. (Leste do Maranho, Br.) In: Anais do II Encontro sobre Abelhas. Resumos... Ribeiro Preto, SP, v.2, p.278. Rgo, MMC (1998). Abelhas silvestres (Hymenoptera, Apoidea) em um ecossistema de cerrado s.l (Chapadinha-MA, Brasil): uma abordagem biocentica. Ribeiro Preto. Tese (Doutorado). Universidade de So Paulo. Rgo, MMC; Albuquerque, PMC; Ramos, MC. & Mendes, FN (2007). Abelhas do cerrado s. l. dos Gerais de Balsas. In: Cerrado Norte do Brasil (Barreto, L. org.). USEB, Pelotas, 157-163. Rgo, MMC; Albuquerque, PMC; Venturieri GC (2008). Menos Locais para ninhos. Cincia Hoje 247: 50-51 Roubik, D (1979). Nest and Colony Characteristics of Stingless Bees from French Guiana (Himenptera: Apidae). J. Kansas Entomol. Soc., 52 (3):443-470 Roubik, D (1983). Nest and Colony Characteristics of Stingless Bees from Panam (Himenptera: Apidae). J. Kansas Entomol. Soc., 56 (3):327-355 Roubik, D (2006) Stingless bee nesting biology..Apidologie, 37: 124-143. Taura, HM; Laroca, S (1991). Abelhas altamente sociais (Apidae) de uma rea restrita em Curitiba (Brasil): distribuio dos ninhos e abundncia relativa. Acta. Biol. Par. 20 (1,2,3,4):85-101 Schwarz, HF (1948). Te stingless bees (Meliponinae) of the Western Hemisphere. Bull. Amer. Nat. Hist. 90: 1-546. Viana, BF; Melo, GAR (1987). Conservao de Abelhas. Informe Agropecurio. 13: 23-27. Wille, A (1983). Biology of the stingless bees. Ann. Rev. Entomol., 28:41-64. Wille, A; Michener, CD (1973). The nest architecture of stingless bees with special reference to those of Costa Rica (Himenptera: Apidae). Rev. Biol. Trop., 21:1-278.
trional do Estado do Maranhao, Brasil. In: G.A.R. Melo; I. Alves-dos-Santos. (Org.). Apoidea Neotropica: Homenagem aos 90 Anos de Jesus Santiago Moure. Criciuma: UNESC, v. 1, p. 265-278.
167
SI MPS IO 9
NINHOS ARMADILHA
Coordenadores: Carlos Alberto Garfalo , Isabel Alves dos Santos
168
A Utilizao de Ninhos-Armadilha no Estudo da Estrutura Sociogentica de Ninhos de Euglossini (Hymenoptera: Apidae).

Running title: Estrutura gentica de ninhos de Euglossini Rogrio Oliveira Souza e Marco Antonio Del Lama* Departamento de Gentica e Evoluo, Universidade Federal de So Carlos, Rodovia Washington Luis km 235, 13565905, So Carlos, SP * dmdl@power.ufscar.br - (16) 3351.8329 (fone); (16) 3351.8377 (fax)
Abstract
[The use of trap-nests in the study of the sociogenetic structure of Euglossini (Hymenoptera: Apidae) nests]. Adults from Eulaema nigrita (n = 8), Euglossa cordata (n = 11) and Euglossa townsendi (n = 7) nests had their DNA extracted and analysed for microsatellite loci in order to establish their sociogenetic structure. The results showed that the El. nigrita nests were founded by one female and, after that, other unrelated females shared the reproductive activites. Otherwise, most of the Eg. cordata and Eg. townsendi nets were founded by one female mated with one male; however, it was observed also one nest where different Eg. townsendi females shared the reproductive efforts. The use of trap-nests as a tool for nest sampling is discussed. Keywords: sociogenetic structure, Euglossini, nests, relatedness, sex ratio
Introduo
As abelhas euglossneas ou abelhas das orqudeas fazem parte do grupo de abelhas corbiculadas. Apresentam distribuio tipicamente neotropical (Brquez, 1997) e uma diversidade de comportamentos que vai do solitrio ao primitivamente social. A observao de que os machos coletavam fragrncias em flores de orqudeas levou ao isolamento e utilizao dos compostos caracterizados para atrair e capturar machos destas espcies. Graas a esta estratgia, foi possvel a descrio de um grande nmero de novas espcies e o estudo de fatores como sazonalidade e preferncia dos machos pelas fragrncias, o conhecimento da diversidade de es pcies em diferentes ambientes, o estudo da gentica de populaes e a ocorrncia de machos diplides, estimativas de tamanho populacional em experimentos de marcao e recaptura, entre outros temas (Braga, 1976; Janzen, 1981; Powell and Powell, 1987; Roubik and Ackerman, 1987; Ackerman, 1989; Campos et al., 1989; Wittmann et al., 1989; Roubik et al. 1996; Takahashi et al., 2001; Lpez-Uribe and Del Lama, 2007; Lpez-Uribe et al., 2008). Embora o conhecimento da biologia dos machos tenha avanado de uma forma significativa, estudos sobre o comportamento de fmeas so esparsos. Como os euglossneos constituem um grupo de abelhas que apresentam diferentes nveis de organizao social, estas espcies podem fornecer informaes relevantes para o conhecimento dos mecanismos que atuam no estabelecimento de sistemas sociais nos
169
himenpteros. Os ninhos neste grupo so comumente construdos em cavidades de rvores ou galhos, paredes de construes, segmentos de bambu, ninhos de cupins, folhas fixas, e uma gama de outros ambientes. Embora mais de 200 espcies de Euglossini j tenham sido descritas, apenas para 38 delas se conhece a estrutura dos ninhos (Ramirez et al., 2002). A grande dificuldade de se encontrar os ninhos produzidos pelas fmeas justifica a pouca informao sobre a estrutura nidal. Estudos com ninhos-armadilha ou ninhos naturais mantidos em caixas de observao tm contribudo sobremaneira para minimizar as dificuldades de se encontrar os ninhos na natureza. Graas a esta estratgia, tem incrementado de forma expressiva nosso entendimento sobre as relaes entre os indivduos de um ninho (Sakagami and Michener, 1965; Myers and Loveless, 1976; Garfalo, 1992; Santos and Garfalo, 1994; Arriaga et al., 1996). Escolhido o local, a fmea d incio coleta de material utilizado na construo das clulas, seja barro, excrementos ou resina. Aps construir uma clula e tendo aprovisionado-a com alimento, uma mistura de plen e nctar, ela deposita o ovo. Em alguns casos, pode ocorrer o compartilhamento do ninho por mais de uma fmea durante processos de reativao deste (Garfalo, 1985; Augusto and Garfalo, 2004). Se a biologia da nidificao tem sido crescentemente investigada, no se tem informao sobre as relaes genticas entre os indivduos do ninho e, por esta razo, torna-se necessria a realizao de estudos desta natureza. O objetivo deste trabalho foi averiguar a estrutura sociogentica de ninhos de Eulaema nigrita (Lepeletier, 1841), Euglossa cordata (Linnaeus, 1758) e Euglossa townsendi (Cockerell, 1904). Especial ateno foi dada ao parentesco intranidal, de forma a estimar, por meio de locos microssatlites, o nmero de fmeas e machos responsveis pela cria. Alm disso, observaes sobre o comportamento social e de nidificao foram confrontadas com os dados disponveis na literatura.
Material e Mtodos
Foram coletados 8 ninhos (N1 a N8) de Eulaema nigrita na rea do Campus da Universidade Federal de So Carlos, construdos no interior de blocos de concreto. Onze ninhos de Euglossa cordata (9 em ninhos-armadilha de bambu; um em tronco de Pinus e um em tronco de Bougainville sp) e 7 ninhos de Euglossa townsendi (todos fundados em ninhos-armadilha de bambu), foram coletados na rea urbana da cidade de So Carlos, na rea rural de Rifaina (SP) e nos Campi da UFSCar de Araras e So Carlos. Os ninhos foram trazidos para o laboratrio e mantidos temperatura ambiente at emergncia das crias. Os ninhos-armadilha utilizados apresentavam comprimento e dimetro variveis e os ninhos construdos em galhos de Pinus sp ou de Bougainville sp haviam sido anteriormente ocupados por Xylocopa sp. emergncia, os indivduos foram sexados, pesados e congelados 20C ou mantidos em lcool absoluto. Aps a ltima emergncia natural em cada ninho, aguardou-se um prazo mnimo de dois meses; decorrido este perodo, as clulas fechadas foram abertas para verificao do contedo. O DNA total foi extrado a partir de uma das pernas desses indivduos utilizando ou extrao salina / lcool para os indivduos emergidos (Paxton et al., 1996) ou extrao por Chelex 100 (Walsh et al., 1991) para as crias mortas. Amplificao por PCR de locos microssatlites foi realizada utilizando-se primers de El. nigrita e Eg. cordata marcados com fluorescncia (Souza et al., 2007). Os fragmentos gerados foram analisados em seqenciador MegaBACE 750 (GE - Applied BioSystems) de acordo com o padro de picos gerado para cada loco.
170
Resultados
Biologia da Nidificao - A entrada dos ninhos de El. nigrita apresentou cerca de 1,5 cm de dimetro, sendo revestida de barro, formando um pequeno tubo que se iniciava no interior dos blocos de construo, prolongando-se por cerca de 2,0 cm para o exterior e no excedendo 5,0 cm de comprimento total. O nmero de clulas produzidas por ninho variou de 1 a 90. Nos ninhos onde o nmero de clulas formadas foi muito baixo (N6 e N8), a morte ou o abandono do ninho pela(s) fmea(s) deve ser a causa mais provvel, j que nestes ninhos foi observada uma clula apical aberta. Em dois dos blocos contendo ninhos de E. nigrita foram coletadas fmeas mortas em seu interior (antes da operculao das clulas). As anlises genticas por microssatlites revelaram que estas eram as provveis responsveis por parte da postura. A mortalidade da cria em ninhos de El. nigrita oscilou entre 19% e 65%. Esta alta taxa de mortalidade verificada em um ninho deve ser atribuda elevada umidade no interior do bloco de concreto onde o ninho fora construdo. Os dados no indicaram mortalidade diferencial entre os sexos (p<5%) e a mortalidade das crias se deu em diferentes estgios do desenvolvimento (ovo, larva, pupas e adultos). Considerando a prole de seis ninhos, uma razo sexual muito desviada para machos foi verificada em El. nigrita (188 machos : 39 fmeas ver Tabela 1). Tabela 1 - Razo Sexual (RS) observada a partir de ninhos (nmero entre parnteses) e de indivduos coletados em flores de Thevetia peruviana. O teste de 2 foi feito para averiguar RS igual a 1:1 (NS = no significativo; * = significativo a nvel de 5%). fmeas 39 106 35 596 39 -machos 188 115 26 53 19 -2 0.36NS 1.32NS 6.89*
El. nigrita Eg. cordata Eg. townsendi
ninhos (6) flores ninhos (12) flores ninhos (7) flores
Em trs dos ninhos de Eulaema nigrita, observou-se a presena de clulas ocupadas por crias de Exaerete smaragdina (Gurin-Mneville, 1845); geralmente, as clulas ocupadas situavam-se na base do ninho (clulas basais). Em dois ninhos foi observada ainda a presena de Lasioderme sp (Coleoptera: Amobiidae) em algumas clulas. Este pequeno coleptero (2 a 3 mm) um consumidor de matria orgnica, sendo um dos principais problemas para os produtores de charutos. No foi observado, contudo, qualquer dano causado aos ninhos de El. nigrita. O incio da construo dos ninhos de E. cordata e E. townsendi foi verificado pela observao da atividade das fmeas ingressando nos ninhos-armadilha ou pela presena de parede resinosa no interior destes. O trmino das atividades de campo foi estabelecido pela ausncia de perfurao da parede de fechamento por vrios dias seguidos, indicando a provvel morte da fmea no interior do ninho. O nmero de clulas construdas por ninho e de indivduos emergidos variou de 1 a 14 nos ninhos de Eg. cordata e de 1 a 32 emergidos nos ninhos de Eg. townsendi. Nesta espcie, um dos ninhos apresentou 77 clulas, das quais emergiram 32 adultos, ou seja, mais da metade da postura ali feita j
171
havia emergido quando o ninho foi coletado. A taxa de mortalidade no foi significativamente diferente entre os sexos nestas espcies. Foi observada uma razo sexual de 35 fmeas : 26 machos (RS = 1:1) e 39 fmeas : 19 machos (RS = 2:1) em Eg. cordata e Eg. townsendi, respectivamente (Tabela 1). A mortalidade verificada nestas espcies ocorreu igualmente nos diferentes estgios do desenvolvimento. Reaproveitamento foi evidenciado no ninho do qual emergiram os 32 adultos referidos anteriormente. Este reaproveitamento foi presumido a partir da diferena de colorao da resina utilizada e do estado das clulas. Nos demais ninhos, por se tratarem de bambus e tocos dispostos h pouco tempo, no houve indcios de reaproveitamento de clulas. Gentica Intranidal - A anlise gentica dos ninhos utilizando os locos microssatlites revelou a presena de mais de uma fmea ovipositando nos ninhos de El. nigrita, com exceo de um ninho que continha apenas duas clulas produzidas possivelmente pela mesma fmea. Considerando o nmero de alelos e os hapltipos observados nos ninhos, a anlise de cada prognie evidenciou a presena de, pelo menos, 3 (N1), 2 (N2), 8 (N3), 6 (N4) e 7 (N5) fmeas responsveis pela postura em cada um dos ninhos analisados. O nmero de fmeas foi estimado com base no nmero de diferentes alelos apresentados pelos machos para cada um dos locos microssatlites. Para exemplificar, se em um determinado ninho 15 alelos de um certo loco foram observados nos machos, como estes so produzidos partenogeneticamente pelas fmeas e estas podem ter, no mximo, dois alelos distintos por loco, concluiu-se que so necessrias, pelo menos, oito fmeas para justificar este achado. Com relao aos adultos de Ex. smaragdina emergidos dos ninhos N2 e N3, estes foram analisados para os marcadores microssatlites e os resultados indicaram que estas fmeas poderiam ser consideradas irms completas. Para os ninhos de E. cordata e E. townsendi, a anlise gentica revelou que as proles devem ser resultantes de acasalamento nico (monndrico) de uma fmea em 15 dos 18 ninhos analisados. Em um ninho de E. cordata e outro de E. townsendi, no foi possvel atribuir a maternidade fmea que ocupava o ninho no momento de sua coleta; nestes dois ninhos, o nmero de clulas formadas era igual a dois. Com relao ao ninho de E. townsendi com 77 clulas, a disposio destas no bambu era em pequenos grupos de clulas, ligeiramente distantes uns dos outros e no de uma forma contnua. Os fentipos para os marcadores microssatlites sugerem a existncia de fmeas diferentes ovipositando em cada um destes grupos de clulas; contudo, a dificuldade em delimit-los e de identificar inequivocamente a origem de cada um dos indivduos emergidos no nos possibilita afirmaes mais conclusivas. Com base no nmero de alelos detectados nos machos, o nmero mnimo de fmeas que geraram os 32 adultos emergidos foi igual a 3.
Discusso
Os resultados observados sobre a biologia de nidificao (arquitetura dos ninhos) em El. nigrita so semelhantes aos descritos por Garfalo (1994). No foi observada uma causa aparente (exceto a elevada umidade no bloco onde foi encontrado o ninho N2) que pudesse justificar a alta mortalidade em El. nigrita no estgio de ovo. Nestas clulas fechadas, embora os ovos no tenham sido diretamente observados, de se supor que a postura tenha sido realizada pois as clulas estavam aprovisionadas. Uma alta taxa de mortalidade na fase de ovos foi igualmente relatada por Santos and Garfalo (1994). A presena de Ex. smaragdina nas primeiras clulas construdas nos ninhos N1, N2 e N3 indica que as fmeas desta espcie cleptoparasita aproveitam os momentos iniciais da construo
172
do ninho para gerar sua prole, evitando assim, conflitos diretos com as fmeas de El. nigrita. Estas iniciam os ninhos de forma solitria, mas podem posteriormente exibir um comportamento comunal (Pereira-Martins, 1991). Entretanto, Garfalo and Rozen (2001) relataram ataques contnuos de Ex. smaragdina a ninhos de El. nigrita, ovipositando tanto em clulas basais quanto nas apicais. Estes autores observaram que as fmeas de Ex. smaragdina faziam vos de aproximao, de modo a sondar a presena de fmeas da espcie hospedeira. Caso no detectassem a presena de El. nigrita, elas adentravam o ninho para realizar postura; porm, se alguma fmea se encontrava no interior do ninho, rapidamente a fmea de Ex. smaragdina deixava o ninho para evitar confrontos, embora o parasitismo tenha sido reportado em ninhos onde at cinco fmeas de El. nigrita estavam presentes (Garfalo and Rozen, 2001). Embora em nmeros absolutos no tenha ocorrido diferena no nmero de parasitas nos ninhos N2 e N3 (dois parasitas cada), onde a postura foi realizada por n 2 e por n 8 fmeas de El. nigrita, respectivamente, o parasitismo foi relativamente menor em N3. A maior defensividade do ninho contra predadores e parasitas presumida como mecanismo de presso seletiva que pode ter resultado na mudana de um hbito solitrio para uma vida comunal. Esta maior defensividade no foi observada por Santos and Garfalo (1994) envolvendo o besouro da espcie Meloetyphlus fuscatus, um parasita de ninhos de El. nigrita. Os ninhos de El. nigrita aqui analisados apresentaram maior defensividade associada ao maior nmero de fmeas no ninho, e o aparente reaproveitamento em N5 (ninho mais antigo) no resultou em aumento na taxa de parasitismo. O reaproveitamento de ninhos foi observado tambm em Eg. cordata (Garfalo, 1985) e Eg. townsendi (Augusto and Garfalo, 2004), onde um dos aspectos comuns a essas espcies foi a redistribuio das tarefas do ninho (postura e forrageamento). Usualmente, a fmea fundadora desempenha ali o papel de dominante (ovipositora) e, aps sua morte, tem incio a disputa pela funo de ovipositora, geralmente alada pela fmea mais antiga do ninho (Augusto and Garfalo, 2004). Os resultados da anlise dos locos microssatlites corroboram os relatos da literatura sobre a organizao social destas espcies. El. nigrita inicialmente solitria na fundao de seus ninhos e, posteriormente, novas fmeas podem se agregar. A diferena aqui observada que o parentesco entre as fmeas no parece ser fator determinante para formao e manuteno a longo prazo desta estrutura nidal (ninhos novos N3 e N4 vs. ninhos velhos N5). Entretanto, so necessrias maiores informaes sobre comportamentos tais como usurpao de clulas, diviso de trabalho e interaes agonsticas entre as fmeas no interior dos ninhos para que se possa compreender mais claramente como estes comportamentos esto relacionados aos nveis de parentesco e os possveis fatores que contribuem para a manuteno de um comportamento parasocial nesta espcie. O acasalamento nico parece ser a regra em El. nigrita como observado mais facilmente nos ninhos pequenos, embora um acompanhamento mais refinado, principalmente envolvendo grandes posturas, deva ser feito para que tal questo seja totalmente esclarecida. interessante notar que em Eg. cordata e Eg. townsendi, o hbito solitrio e a monandria so eventos comuns. Contudo, parece que a segunda espcie se comporta de forma mais flexvel, assemelhando-se ao observado em El. nigrita, ou seja, fmeas so aparentadas podem compartilhar o ninho. Em decorrncia da grande dificuldade de se localizar os ninhos de Euglossini na natureza, a estratgia de amostragem a partir dos ninhos-armadilha a grande ferramenta que se pode dispor para que estudos da gentica nidal possam ser realizados. A obteno destes ninhos permite ainda comparar dados da biologia destas espcies obtidos por meio de outras estratgias de amostragem. Como exemplo, pode-se confrontar a razo sexual estimada a partir de ninhos com a amostragem a partir de
173
flores (ver Tabela 1). Experimentos de marcao e recaptura de machos e adultos de Eulaema nigrita e Euglossa cordata ao visitarem flores de Thevetia peruviana (Apocynaceae) para a coleta de nctar em ambiente urbano revelam razes sexuais muito diferentes (Lpez-Uribe et al., 2008). Achados desta natureza, por exigirem uma justificativa, contribuem para o conhecimento de caractersticas da biologia destas espcies at o momento no identificadas. A estrutura sociogentica e o parentesco intranidal, a diviso do trabalho reprodutivo (fmeas ovipositoras vs. fmeas construtoras e forrageadoras), a ocorrncia de comportamentos agonsticos ou cooperativos entre fmeas, a determinao do sistema de acasalamento das fmeas (monandria vs. poliandria) so questes que podem agora ser averiguadas luz da estrutura gentica familial mediante o uso de marcadores genticos potentes (microssatlites). Estudos desta natureza permitiro explorar melhor os modelos j propostos sobre a evoluo e a manuteno dos diferentes nveis de organizao social.
Referncias
Ackerman JD (1989). Geographic and seasonal variation in fragrance choices and preferences of males euglossine bees. Biotropica 21: 340-347. Arriaga ER, Aguilar-Cuadriello JI and Hernndez EM (1996). Nest structure and parasite of Euglossa atroveneta Dressler (Apidae: Bombinae: Euglossini) at Unin Jurez, Chiapas, Mxico. J. Kansas Entomol. Soc. 69: 144-152. Augusto SC and Garfalo CA (2004). Nesting biology and social strucutre of Euglossa (Euglossa) townsendi Cockerell (Hymenoptera, Apidae, Euglossini). Insectes Soc. 51: 400-409. Braga PI (1996). Atrao de abelhas polinizadoras de Orchidaceae com auxlio de iscas-odores na campina, campinara e floresta tropical mida da regio de Manaus. Cincia e Cultura 28: 767-773. Brquez A (1997). Distributional limits of euglossine and meliponine bees (Hymenoptera: Apidae) in northestern Mexico. Pan-Pacific Entomologist 73: 137-140. Campos LAO, Silveira FA, Oliveira ML, Abrantes CV, Morato EF and Melo GA (1989). Utilizao de armadilhas para a captura de machos de Euglossini (Hymenoptera, Apoidea). Rev. Brasil. Zool. 6: 621-626. Garfalo CA (1985). Social structure of Euglossa cordata nests (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Entomol. Gener. 11, 77-83. Garfalo CA (1992). Comportamento de nidificao e estrutura de ninhos de Euglossa cordata (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Rev. Brasil. Biol. 52: 187-198. Garfalo CA (1994). Biologia de nidificao dos Euglossinae (Hymenoptera, Apidae). Anais do Encontro sobre Abelhas 1: 17-26. Garfalo CA and Rozen Jr JG (2001). Parasitic behavior of Exaerete smaragdina with descriptions of its mature oocyte and larval instars (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Am. Mus. Nov. 3349: 1-26. Janzen DH (1981). Reduction in euglossine bee species richness on Isla del Cao, a Costa Rican offshore island. Biotropica 13: 238-240. Lpez-Uribe MM and Del Lama MA (2007). Molecular identification of species of the genus Euglossa Latreille (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Neotrop. Entomol. 36: 712-720 Lpez-Uribe MM, Oi CA and Del Lama MA (2008). Nectar-foraging behavior of euglossine bees (Hymenoptera: Apidae) in urban areas. Apidologie (DOI: 10.1051/apido: 2008023)
174
Myers J and Loveless MD (1976). Nest aggregations of the euglossine bee Euplusia surinamensis (Hymenoptera: Apidae): individual interactions and the advantage of living together. Canad. Entomol. 108: 1-6 Paxton RJ, Thoren PA, Tengo J, Estoup A and Pamilo P (1996). Mating structure and nestmate relatedness in a communal bee, Andrena jacobi (Hymenoptera, Andrenidae), using microsatellites. Mol. Ecol. 5: 511-519. Pereira-Martins SR (1991). Biologia de Eulaema nigrita. 2. Atividades nidais. Papis Avulsos de Zoologia 37: 237-243. Powell AH and Powell GV (1987). Population dynamics of male euglossine bees in Amazonian forest fragments. Biotropica 19: 176-179. Ramrez S, Dressler RL and Ospina M (2002). Abejas euglosinas (Hymenoptera: Apidae) de la Regin Neotropical: Listado de especies con notas sobre su biologa. Biota Colombiana 3: 7-118. Roubik DW and Ackerman JD (1987). Long-term ecology of euglossine orchid-bees (Apidae: Euglossini) in Panama. Oecologia 73: 321-333. Roubik D.W., Weight L.A., Bonilla M.A. (1996) Population genetics, diploid males, and limits to social evolution of euglossine bees, Evolution 50, 931-935. Sakagami SF and Michener CD (1965). Notes on the nest of two euglossine bees, Euplusia violacea and Eulaema cingulata (Hymenoptera, Apidae). Annot. Zool. Jap. 38: 216-222. Santos ML and Garfalo CA (1994). Nesting biology and nest re-use of Eulaema nigrita (Hymenopetera, Apidae, Euglossini). Insectes Soc. 41: 99-110. Souza RO, Cervini M, Del Lama MA and Paxton RJ (2007). Microsatellite loci for euglossine bees (Hymenoptera: Apidae). Mol. Ecol. Notes 7: 1352-1356. Takahashi NC, Peruquetti RC, Del Lama MA and Campos LAO (2001). A reanalysis of diploid male frequencies in euglossine bees (Hymenoptera: Apidae). Evolution 55, 1897-1899. Walsh PS, Metzger DA and Higuchi R (1991). Chelex-100 as a medium for simple extraction of DNA for PCR-based typing from forensic material. Biotechniques 10: 506-513. Wittmann D, Radtke R, Hoffmann M and Blochtein B (1989). Seasonality and seasonal changes in preferences for scent baits in Euplusia violacea in Rio Grande do Sul/Brasil (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Entomol. Gener. 14: 217-221.
175
Trap-Nesting as a Methodology For the Study of Solitary Bee Ecology and Behavior
Jordi Bosch and Sergio Osorio Ecologia - CREAF, Universitat Autnoma de Barcelona, Bellaterra, Spain. Jordi.Bosch@uab.es; Sergi.Osorio@uab.es
Abstract
Some solitary bees, notably in the Megachilidae and Hylaeinae, but also in the Apinae, nest in pre-established cavities, such as old bee or wasp nests, beetle burrows in dead wood, hollow stems, and vacant snail shells. Because they readily accept artificial nesting materials, these species can be easily trap-nested. Trap-nesting affords a unique opportunity to examine and manipulate nests without damaging their contents, even while the nest is being constructed. In addition trap-nesting can be used as a standardized, repeatable sampling method. In this paper, we provide examples of studies that use trapnests to investigate various aspects of bee ecology and behavior, namely in the fields nesting behavior, nest location and recognition, community ecology, parental investment, and crop pollination. Our objective is to illustrate the versatility of trap-nesting as a methodological tool in bee biology studies. Key words: nesting behavior, nest recognition, bee communities, food webs, resource allocation, crop pollination
Introduction
With more than 16,000 species described worldwide (Michener, 2000), bees (Hymenoptera, Apiformes) display a notable variety of nesting habits (Malyshev 1935; Stephen et al., 1969; Roubik, 1989; OToole and Raw, 1991). Bee nesting behavior may be divided in three broad categories: 1) species that excavate their nests, usually underground (Andrenidae, Melittidae, Stenotritidae, most Halictidae, and Colletinae, and many Apinae) but sometimes in wood (Xylocopini, Lithurgini) or in softpith stems (Ceratinini, Allodapini, some Megachilidae); 2) species that build more or les free-standing nests, usually attached to stone walls, but sometimes to vegetation (some Megachilidae, Apis dorsata); 3) species that use pre-established cavities, including both social species (Apis, Bombus, Meliponini) that form colonies in large cavities (hollow tree trunks, abandoned rodent nests), and solitary species that nest in small cavities such as wood borings made by xylophagous beetle larvae or abandoned bee or wasp nests. The latter group (henceforth cavity nesters) includes most Megachilidae, most Hylaeus, and some Centridini, Xylocopini, Euglossini and Tetrapediini, as well as a few Anthophora and Colletes. Some Megachilidae nest in vacant snail shells, and some Hylaeus in abandoned galls. Because they readily accept artificial or semi-artificial nesting materials, cavity nesters can be easily trap-nested (Krombein, 1967). Usually, females nesting in trap-nests build linear series of cells. Each cell is typically provisioned with a loaf of pollen mixed with nectar, and one egg is laid on each provision. From a methodological perspective, trap-nests offer a series of advantages that greatly facilitate the study of cavity nesting species. To begin with, trap-nests are a convenient tool to obtain
176
large populations of the target species. Because their design and dimensions can be standardized, trap-nests constitute a very effective, repeatable sampling method. Trap-nests can be easily transported and stored, and even relocated, without compromising bee survival. Finally, trap-nests offer a unique opportunity to examine and manipulate the inside of a nest without destroying it, even while the nest is being constructed. The objectives of this study are: 1) to provide an overview of trap-nest designs; 2) to illustrate the versatility of trap-nests as a methodological tool for bee biology studies. For convenience, we divide these studies into five broad categories: nesting behavior, nest location and recognition, community ecology, parental investment, and crop pollination. We provide a few examples of studies in each of these categories. Our aim is not to review the extensive literature of studies using trap-nests, but to emphasize the methodological advantages of trap-nesting.
Trap-nests
With some variations, most trap-nests conform to one of four types (Torchio, 1982; Bosch and Kemp, 2001): solid blocks, hollow boxes, grooved boards, and bundles. In any case, it is important that the nesting cavities have a blind end, as females rarely accept cavities with both ends open. It is also important to seal any crevices to prevent entry of light, which would result in diminished attractiveness to females. Blocks Solid wood blocks with drilled holes closely reproduce conditions found by female cavity nesting bees in abandoned beetle burrows in dead trees. Paper straws can be inserted in each hole, so that the entire nest can be extracted without damaging its contents. It is advisable to use paraffined paper, as non-paraffined straws sometimes wick humidity from the pollen-nectar provisions and increase larval mortality. Plastic straws and paper straws coated with plastic-like materials are usually not suitable, as they tend to promote condensation and fungal growth within the nest. It is important to waterproof wood blocks, even inside the nest cavities. Without waterproofing, materials tend to swell with increasing humidity, causing cavities to shrink. Waterproofing needs to be done well in advance so that the nesting unit is dry when used, because the vapors of many wood finishing materials repel females and may cause mortality of early immature stages. For a more affordable type of nesting unit, styrene blocks can be used, but they are not as attractive as wood, and usually yield higher immature mortality. Boxes Paper tubes can also be set up in hollow boxes. Empty milk cartons have been extensively used because they provide a durable, water-proof material. A milk-carton trap-nest consists of a front wood board with drilled holes, through which paper straws sealed at the back are inserted, encased in a milk carton. Similar nesting materials can be built using a wood box, paraffin-coated cardboard, or some other waterproof material that does not trap excess moisture. Trap-nest boxes are inexpensive and easy to build, but are usually less attractive than wood blocks. Mortality is usually higher than in wood blocks because they do not provide good insulation against extreme temperatures and because parasitoids and predators can easily move from one nest to the other. Grooved boards Wood boards with semicircular grooves can be stacked to form nesting units that can be easily disassembled for nest inspection. Grooved boards should be tightly clasped together to prevent crevAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
177
ices through which light, parasites, and water might access the nesting cavity. Grooved boards can be used with or without paper or cardboard inserts. Bundles Reeds or thick cardboard tubes can be easily bundled together and used as trap-nesting units. These bundles can be encased in water-proof containers such as milk cartons to provide extra protection from water and direct sunlight. Reed sections should be cut so that the front of the nesting cavity is open and the back is sealed by the reed node. Reeds can be easily split length-wise for nest inspection. Irrespective of the trap-nest type used, it is important to adjust the size (inner diameter and length) to the preferences of the target species. Preferred inner diameter is highly correlated with female body size, although sometimes females will accommodate cell construction to cavity size, for example by building two parallel series of cells in wide cavities. In general, preferred cavity length is also correlated with body size, and females will typically not use all the space available in long cavities. Trap-nests should be attached to any substrates offering natural nesting cavities. Trunks of both live and dead trees offer good results. Old buildings, with wood beams, stone crevices or thatched roofs are also favorable substrates. Good results are also obtained in clay embankments and adobe walls, which usually host nests of burrowing bees that are occupied by cavity nesters when abandoned. For best results, trap-nests should be set up in a horizontal position.
Nesting behavior
Cavity nesters can sometimes be induced to nests in glass or clear acetate tubes, as long as these are covered with an opaque sleeve to prevent light access. Sleeves can then be removed while the bee is inside the nest, allowing for the observation of in-nest behavior, including cell construction, nectar and pollen deposition, egg laying and nest guarding. The use of glass tubes also allows for the observation of the behavior of cleptoparasites and other nests associates. Gerber and Klostermeyer (1970) used clear acetate tubes to film egg laying in Megachile rotundata. They described how abdominal contractions were briefly arrested during ovipositon of female eggs but not of male eggs. They related this pause to the pumping of sperm from the spermatheca resulting in the fertilization of female eggs. Glass tubes can also be inserted through the walls of observation booths. Upon entry of a bee inside the nest, the observer inside the booth can pull the tube out of the wall and place it under a stereomicroscope with a red light. When the bee is about to leave the nest, the glass tube can be re-inserted with no alteration of the bee behavior. Torchio (1984) used this method to make detailed observations on the use of the bilobed proboscis of Hylaeus bisinuatus as a paintbrush to spread the oral secretion used to line the nest cavity. In other studies (Torchio, 1989a, 1989b), he observed the interactions between Osmia spp. and their cleptoparasite Stelis montana. Among other findings, Torchio described how S. montana mimics the ovipositing behavior of its hosts, laying eggs on the surface of the provision when parasitizing O. lignaria, but burying it in a chamber within the provision when parasitizing O. californica and O. montana. He also observed females of S. montana entering Osmia nests and removing large bites of provision. These females then spread the chunks of robbed pollen-nectar on their body surface, presumably to mask olfactory evidence of their visitation into host nests. Other studies have used clear acetate tubes associated to an electronic recording balance to record nesting weight changes (corresponding to pollennectar or to nesting material deposition) during nest construction (Phillips and Klostermeyer, 1978). Once completed, nests offer a wealth of cues related to nesting behavior and life cycle, including nesting materials used, cell and nest cap architecture, provision shape, pollen specialization, egg location,
178
cocoon shape and structure, shape of fecal pellets, overwintering stage and voltinism. Nests built in trapnests can be easily dissected without damaging their contents, so that these traits can be scored and used to trace their evolution. Bosch et al. (2001) defined 29 characters from the nests of 11 Osmia species belonging to three subgenera, O. (Osmia), O. (Helicosmia), and O. (Cephalosmia). As many as 21 of these characters were informative, and thus could be used on their own or combined with other types of characters (molecular of morphological) to infer phylogenetic relationships. They then used the adults reared from the nests to build a molecular phylogenetic tree on which they mapped the behavioral / life cycle characters. O. (Osmia) and O. (Cephalosmia) showed a higher degree of consistency in nest characters than O. (Helicosmia). Among other things, Bosch et al. traced the evolution of cocoon structure (with increasing numbers of silk layers) and the transition from masticated leaf to mud as nest building material.
Nest location and recognition

The visual appearance of trap-nests and their immediate surroundings can be easily modified. Trap-nests can also be displaced and then relocated without damaging the contents of the nest, including the nesting female. Various studies have used these techniques to study nest location in cavity nesters (e.g., Osgood, 1974; Steinmann and Menzel, 1990; Torchio, 1991; Fauria and Campan, 1998; Campan and Lehrer, 2002; Gudot et al., 2005). Fauria et al. (2004) studied the role of visual landmarks in nest location in the leafcutting bee Megachile rotundata. They used a series of trap-nests blocks inserted in the centre of squared metal sheets (50 x 50 cm), and placed unique constellations of geometrical shapes around each trap-nest. They trained bees to nest in this situation and then exchanged the shape constellations and scored the behavior (inspection of other nesting cavities, incorrect nest choices) of returning bees. These changes resulted in only minor effects on the females, suggesting that other visual landmarks provided sufficient cues for nest location. Fauria et al. then conducted several manipulations to modify the edges of the nesting block and the metal sheet. As edges were displaced further away from the nesting block, returning bees became increasingly disoriented. When the edges of the metal sheet were hidden all females bypassed their nesting block, and inspected neighboring blocks in metal sheets whose edges had not been manipulated. These results suggested a hierarchical use of edges as visual landmarks related to their distance from the nest. Using the same species, Gudot et al. (2006a) found that both color patterns and three-dimensional cues increased the homing performance of returning females. In other studies (Vicens and Bosch 2000), nesting shelters containing nesting blocks with established females were displaced at night to various distances. The number of females that performed orientation flights in front of the newly located nesting shelters the following morning and the proportion of females that abandoned the shelter increased with moving distance, This trend did not change with the addition of visual landmarks in the surroundings of the nesting shelter. At intermediate distances (100-200 m) many of these females were found at the original nesting site hovering at the exact location of the missing shelter. Artificial nesting cavities are also a convenient tool for the study of olfactory cues used in nest marking (e.g., Steinmann, 1976; Gerber and Klostermeyer, 1972; Raw, 1992; Strohm et al.; 2002). Gudot et al. (2006b) used glass tubes inserted in an observation booth to study individual nest marking and recognition in Osmia lignaria. It was shown that upon leaving the nest, females often smeared an abdominal secretion on the walls of the nesting cavity. Gudot et al. then used glass tubes cut in three sections as nesting material. Once a female had started nesting, and while she was on a foraging bout, one or two of the sections were replaced by clean sections. They then recorded the behavior of the female upon returning to the nest. All females exposed to a control treatment (tube sections disassemAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
179
bled and reassembled) entered the nesting tube without hesitation and all deposited their pollen-nectar load on the provision. When the outer section was replaced, females stopped at the entrance, which they inspected with their antennae. Usually, these females checked adjacent nesting holes, and after several attempts, finally entered their nesting tube and deposited their pollen-nectar load. When the middle section was replaced, females entered their nesting tube without hesitation, but then abruptly stopped at the beginning of the middle section. These females checked other nesting cavities and after several attempts, most of them crossed the middle section of their own nest and deposited their pollennectar load. When both sections were replaced, most females ended up abandoning their nest.
Community and population ecology

Trap-nests represent a convenient, repeatable, standardized sampling method for community and population ecology studies. By using cavities of different sizes, nests of a range of solitary bee and solitary wasp species varying in body size can be obtained. Garfalo et al. (2004) list 60 bee species trap-nested in Brazil, and Tscharntke et al. (1998) found 33 species of bees and 55 species of wasps in Germany. Cavity-nesting bees and wasps represent small, easy-to-handle communities that are increasingly being used as bioindicators of habitat quality and quantity (habitat structure, habitat fragmentation, land uses, landscape pattern) (e.g. Aguiar et al. 2005; Frankie et al., 1998; Tscharntke et al. 2002; Steffan-Dewenter, 2003; Klein et al., 2002; Gathmann et al., 2004; Buschini, 2006; Makino et al., 2006; Loyola and Martins, 2007; Taki et al., 2008). For example, Tscharntke et al. (1998) used bundles of reed sections to survey 40 sites in Germany representing a diversity of field types, including barley fields, clover-grass mixtures, mown and unmown fallows and old orchards. They found that bee (but not wasp) abundance and species richness was positively correlated with plant species richness. They also found that fields with old trees had larger cavity nester populations that fields without trees. Percentage mortality (parasitism and predation) of cavity nesters was positively related to habitat age, and negatively to fragment isolation. In a study in 24 agroforestry sites in Indonesia, Klein et al. (2006) found that species richness of both cavity nesting bees and their parasites and predators increased with proximity to natural forests and increased light intensity through increased flower diversity. Tylianakis et al. (2005) incorporated a temporal dimension to the study of cavity nester communities. They found that intensive agricultural systems in Ecuador housed a high diversity of cavity nesters in certain months, but species turnover was greater in abandoned coffee plantations and forests, resulting in a higher overall diversity in these habitats. Trap-nests are also an appropriate methodology to study the structure of host-parasite, bee-plant, and wasp-prey interactions. A few recent studies have investigated the effect of habitat modification on food web structure of cavity nesting bees and wasps and their parasites and predators. Albrecht et al. (2007) analyzed 49 food webs in restored and intensively managed meadows in Switzerland. They found a greater diversity of plants in restored meadows, and this was accompanied by increased abundance and species richness of bees, wasps and their natural enemies. Mortality caused by parasites and predators and the diversity of specific trophic interactions were also higher in restored habitats. In intensively managed meadows at increasing distances from restored areas, they found that interaction diversity declined more rapidly than species diversity. Food web structure was clearly different in the two types of habitat. Linkage density (average number of links per species), interaction diversity, interaction evenness (a measure of the uniformity of energy flows along different pathways) and compartment diversity (a measure of diversity of subwebs with no lo links to other subwebs) were higher in restored meadows, indicating increased ecosystem stability. In a similar study, Tylianakis et al. (2007) analyzed
180
48 food webs in 5 habitat types representing a gradient of habitat modification (forests, abandoned coffee agroforests, coffee agroforests, pastures and rice paddies) in Ecuador. Their results show significant differences in food web structure along the gradient. Rate of parasitism, vulnerability (a measure of the ratio of host to parasitoid species), and interaction evenness differed significantly among habitats. Interestingly, host and parasite species richness did not vary across habitats, so that differences in food web structure were mostly explained by habitat modification. Tylianakis et al. conclude that perturbation of community structure may remain undetected when only conventional community descriptors are used.
Parental investment
By facultatively fertilizing their eggs, solitary bee females have a high degree of control over both the sex of their offspring. By adjusting the amount of food provisioned in each cell, these females also have a high degree of control over the size of their offspring, since body size is highly correlated to provision size. For these reasons, solitary bees are very appropriate models to study parental investment strategies. By using trap-nests, nest progression can be monitored, and the inside of the nest can be manipulated without damaging the progeny. In this way, variables related to parental investment and sex allocation, such as daily rate of provisioning, amount of food allocated to each sex, or sequence of male and female production, can be easily measured. Various studies have investigated parental investment and resource allocation in cavity nesting bees (e.g., Tepedino and Torchio, 1982; Frohlich and Tepedino 1986; Sugiura and Maeta 1989; Rust 1993; Paini and Bailey, 2002; Goodell, 2003; Bosch and Vicens, 2006; Seidelmann, 2006). Some of these studies have tested whether parental investment strategies conform to various theoretical models of parental investment (Conditional Sex Allocation, Optimal Allocation, Fishers theory of equal investment in both sexes). In a two-year study of a wild Osmia cornuta population, females allocated food resources in perfect agreement with Fishers theory (Bosch and Vicens, 2005). Sex allocation (investment in sons / investment in daughters) was 1 in both years, regardless of the currency used to measure parental investment (provision weight or foraging time). Despite yearly differences in weather conditions, offspring sex ratio and body size of either sex did not vary between years. However, in a later study (Bosch 2008), pollen-nectar availability was manipulated by releasing females in an almond orchard either before or after peak bloom. When exposed to decreased flower availability, females expressed slower provisioning rates, and biased the sex ratio of their progeny towards males, which require smaller provisions than females. Male offspring body size was similar to years with abundant resources, but body size of female offspring was smaller. This resulted in increased female mortality and an extremely male-biased secondary sex ratio. Other studies have found similar results in caged Megachile apicalis when the levels of floral resources were manipulated, and in free-flying Megachile rotundata when females were forced to fly increasing distances to reach their food sources (Kim, 1999; Peterson and Roitberg, 2006). Other studies have used a range of cavity sizes to study the effect of nesting cavity diameter and length on progeny sex ratio (e.g., Stephen and Osgood, 1965; Gerber and Klostermeyer, 1972; Tepedino and Torchio, 1989; Rust 1998; Bosch, 1994). The proportion of female offspring increases with increasing cavity diameter and length.
Crop pollination
Many studies have investigated the use of populations of cavity nesting bees to pollinate crops. Management of cavity nesters offers a series of advantages compared to management of
181
ground nesters. Trap-nests are easily transported and stored, which facilitates the use of cavity nesters as mobile pollinators. Trap-nests can also be exposed to different temperature regimes, allowing for the manipulation of emergence times and facilitating the synchronization of foraging activity with peak bloom of a diversity of crops differing in blooming time (e.g., Bosch and Kemp, 2003). Finally, populations in trap-nests can be easily inspected and nest ing materials can be disinfected to control levels of parasites and pathogens. It is not surprising that only a small proportion of the bees that have been developed as crop pollinators are ground nesters (Nomia melanderi, Rhophitoides canus ; Johansen et al., 1982; Ptacek, 1989; Cane, 1997), compared to a larger proportion of social species nesting in large cavities ( Apis spp., Bombus spp.; Free, 1993; Velthuis and van Doorn, 2006) or solitary species nesting in small cavities (Megachile spp., Osmia spp.). The alfalfa leafcutting bee, Megachile rotundata , which was developed as an alfalfa pollinator in the 1960s is currently the main alfalfa pollinator in the USA and Canada, and has been used in several European countries (e.g., Bohart, 1962; Stephen, 1962; Hobbs, 1967; Richards, 1984; Pitts-Singer, 2008). Also in the 1960s, the mason bee Osmia cornifrons was developed as an orchard pollinator in Japan, and is now the main apple and plum pollinator in this country (e.g., Yamada et al., 1971; Maeta and Kitamura, 1974; Maeta, 1978). Management systems have also been developed for two closely-related species Osmia lignaria , and Osmia cornuta , which are increasingly being used in the USA and Europe, respectively (e.g., Torchio, 1985, 1993; Bosch and Kemp, 2001, 2002; Krunic and Sta nisavljevic, 2006). Many other cavity nesting species have been investigated, with promising results, as potential crop pollinators (see references in Bosch et al., 2008). These studies have shown that populations of cavity nesting Megachile and Osmia can be sustained and managed in agricultural ecosystems, resulting in very significant increases in crop production (Bosch et al., 2006). These studies have adjusted nesting material design to large-scale management, and have outlined procedures to successfully rear populations. As a result of the establishment of these species as large-scale crop pollinators, nesting materials that can be used in basic research studies are now commercially available.
Concluding remarks
Bee nests are not easy to locate in natural habitats, and examination of their contents is time consuming and difficult to accomplish without damaging the bees. Studies similar to those outlined in this paper have also been conducted on ground nesting species, but the possibility to use artificial nesting materials allows for greater manipulation of the nest environment and facilitates observations, as well as nest analysis and data collection. Trap-nests can be x-rayed (Stephen and Undurraga, 1976), so that their contents can be assessed without dissecting the nest. Although most bee species are ground nesters, trap-nests afford the possibility to easily quantify bee populations of a variety of species in the Megachilidae, Colletidae and Apinae, as well as wasp species in the Eumenidae, Sphecidae, Crabronidae and Pompilidae. Because bees interact with plants and wasps with prey, and because nests in trap-nests are attacked by a variety of cleptoparasites, parasitoids and predators, trap-nests can be used as a standardized and repeatable sampling method for the study of biological interactions. Not surprisingly, the number of community ecology studies using trap-nests has rapidly increased over the last few years. We hope that this overview of trap-nesting studies will stimulate the use of trap-nests and stimulate the application of this methodology to new areas of the study of bee behavior and ecology.
182
References
Aguiar CML, Garfalo CA and Almeida GF (2005). Trap-nesting bees in areas of dry semideciduous forest and caatinga, Bahia, Brazil. Rev. Bras. Zool. 22: 1030-1038. Albrecht M, Duelli P, Schmid B and Mller C (2007). Interaction diversity within quantified insect food webs in restored and adjacent intensively managed meadows. J. Anim. Ecol. 76: 1015-1025. Bohart GE (1962) How to manage the alfalfa leaf-cutting bee (Megachile rotundata Fabr.) for alfalfa pollination. Utah Agric. Exp. Stn, Circular 144. Bosch J (1994). Osmia cornuta Latr. (Hymenoptera, Megachilidae) as a potential pollinator in almond orchards: releasing methods and nest-hole length. J. Appl. Ent. 117: 151-157. Bosch J (2008). Production of under-sized offspring in a solitary bee. Anim. Behav. 75: 809-816. Bosch J and Kemp WP (2001). How to manage the blue orchard bee as an orchard pollinator. Handbook Series, Book 5. Sustainable Agriculture Network, Beltsville. Bosch J and Kemp WP (2002). Developing and establishing bee species as crop pollinators: the example of Osmia spp. and fruit trees. Bull. Ent. Res. 92: 3-16. Bosch J and Kemp WP (2003). Effect of wintering duration and temperature on survival and emergence time in the orchard pollinator Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae). Environ. Entomol. 32: 711-716. Bosch J and Vicens N (2005). Sex allocation in the solitary bee Osmia cornuta: do females behave in agreement with Fishers theory? Behav. Ecol. Sociobiol. 58: 124-132. Bosch J and Vicens N (2006). Relationship between body size, provisioning rate, longevity and reproductive success in females of the solitary bee Osmia cornuta. Behav. Ecol. Sociobiol. 60, 26-33. Bosch J, Maeta Y and Rust RW (2001). A phylogenetic analysis of nesting behavior in the genus Osmia (Insecta, Hymenoptera, Megachilidae). Ann. Entomol. Soc. Amer. 94: 617-627. Bosch J and Kemp WP and Trostle GE (2006). Cherry yields and nesting success in an orchard pollinated with Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae). J. Econ. Entomol. 99: 408-413. Bosch J, Sgolastra F and Kemp WP (2008). Life cycle ecophysiology of Osmia mason bees used as crop pollinators. In: Bee Pollination in Agricultural Ecosystems (James RR and Pitts-Singer TL, eds.). Oxford University Press, Oxford, 83-104. Buschini MLT (2006). Species diversity and community structure in trap-nesting bees in Southern Brazil. Apidologie 37: 5866. Campan R and Lehrer M (2002). Discrimination of closed shapes by two species of bee, Apis mellifera and Megachile rotundata. J. Exp. Biol. 82: 367-372. Cane JH (1997). Ground-nesting bees: the neglected pollinator resource for agriculture. Acta Hort. 437: 309-324. Fauria K and Campan R (1998). Do solitary bees Osmia cornuta Latr. and Osmia lignaria Cresson use proximal visual cues to localize their nest? J. Insect Behav. 11: 649-669. Fauria K, Campan R and Grimal A (2004). Visual marks learned by the solitary bee Megachile rotundata for localizing its nest. Anim. Behav. 67: 523-530. Frankie GW, Thorp RW, Newstrom-Lloyd LE, Rizzardi MA, Barthell JF, Griswold TL, Kim JY and Kappagoda S (1998). Monitoring solitary bees in modified wildland habitats: implications for bee ecology and conservation. Environ. Entomol. 27: 1137-1148. Free JB (1993). Insect pollination of crops. 2nd Edition. Academic Press, London. Frohlich DR and Tepedino VJ (1986). Sex ratio, parental investment, and interparent variability in nesting success in a solitary bee. Evolution 40: 142-151.
183
Gathmann A, Greiler H-J and Tscharntke T (2004). Trap-nesting bees and wasps colonizing set-aside fields: succession and body size, management by cutting and sowing. Oecologia. 98: 8-14 Garfalo CA, Martins CF and Alves-dos-Santos I (2004). The Brazilian solitary bee species caught in trap nests. In: Solitary bees, conservation, rearing and management for pollination (Freitas BM and Pereira JO, eds.). Imprensa Universitria. Fortaleza, 77-84. Gerber HS and Klostermeyer EC (1970). Sex control by bees: a voluntary act of sex fertilization during oviposition. Science 167: 82-84. Gerber HS and Klostermeyer EC (1972). Factors affecting sex ratio and nesting behavior of the alfalfa leafcutter bee. Wash. Agric. Exp. Stn Tech. Bull. 73: 1-11. Goodell K (2003). Food availability affects Osmia pumila (Hymenoptera: Megachilidae) foraging, reproduction, and brood parasitism. Oecologia 134: 518-527. Gudot C, Bosch J and Kemp WP (2005). The relative importance of vertical and horizontal visual cues in nest location by Megachile rotundata (F.) (Hymenoptera: Megachilidae). J. Apic. Res. 44: 109-115. Gudot C, Bosch J and Kemp WP (2006a). Effects of three-dimensional and color patterns on nest location and progeny mortality in alfalfa leafcutting bee (Hymenoptera: Megachilidae). J. Econ. Entomol. 99: 626-633 Gudot C, Pitts-Singer TL, Buckner JS, Bosch J and Kemp WP (2006b). Olfactory cues and nest recognition in the solitary bee Osmia lignaria Say (Hymenoptera: Megachilidae). Physiol. Entomol. 31: 110-119. Hobbs GA (1967). Domestication of alfalfa leaf-cutter bees. Canada Department of Agriculture Publication 1313. Johansen CA, Mayer DF, Stanford A and Kious C (1982). Alkali bees: their biology and management for alfalfa seed production in the Pacific Northwest. Pacific Northwest Coop. Ext. Bull. 155. Kim JY (1999). Influence of resource level on maternal investment in a leaf-cutter bee (Hymenoptera: Megachilidae). Behav. Ecol. 10: 552-556. Klein AM, Steffan-Dewenter I, Buchori D and Tscharntke T (2002). Effects of land-use intensity in tropical agroforestry systems on coffee flower-visiting. Conserv. Biol.16: 1003-1014. Klein AM, Steffan-Dewenter I and Tscharntke T (2006). Rain forest promotes trophic interactions and diversity of trap-nesting Hymenoptera in adjacent agroforestry. J. Anim. Ecol. 75: 315323. Krombein KV (1967). Trap-nesting wasps and bees: life histories, nests and associates. Smithsonian Press, Washington, DC. Krunic MD and Stanisavljevic L (2006). The biology of the European orchard bee Osmia cornuta. Izdavac, Belgrade. Loyola RD and Martins RP (2007). Habitat components are effective predictors of trap-nesting Hymenoptera diversity. Basic Appl. Ecol. Doi:10.1016/j.baae.2007.06016. Maeta Y (1978). Comparative studies on the biology of the bees of the genus Osmia of Japan, with special reference to their managements for pollinations of crops (Hymenoptera: Megachilidae). Tohoku Natl Agric. Expt. Stn Bull., 57, 1-221. [In Japanese] Maeta Y and Kitamura T (1974). How to manage the Mame-ko bee (Osmia cornifrons Radoszkowski) for pollination of fruit crops. Ask Co Ltd, Naganoshi. [In Japanese] Makino S, Goto H, Inoue T, Sueyoshi M, Okabe K, Hasegawa M, Hamaguchi K, Tanaka H, and Okochi I (2006). The monitoring of insects to maintain biodiversity in Ogawa Forest Reserve. Environ. Monitor. Assess. 120: 477-485. Malyshev SI (1935). The nesting habits of solitary bees. Eos 2: 210-309
184
Michener CD (2000). The bees of the world. Johns Hopkins University Press, Baltimore. Osgood CE (1974) Relocation of nesting populations of Megachile rotundata, an important pollinator of alfalfa. J. Apic. Res. 13: 67-73. OToole C and Raw A (1991). Bees of the world. Blandford, London. Paini DR and Bailey WJ (2002). Seasonal sex ratio and unbalanced investment sex ratio in the Banksia bee Hylaeus alcyoneus. Ecol. Entomol. 27: 713-719 Peterson JH and Roitberg BD (2006). Impacts of flight distance on sex ratio and resource allocation to offspring in the leafcutter bee, Megachile rotundata. Behav. Ecol. Sociobiol. 59: 589-596. Phillips JK, Klostermeyer EC (1978). Nesting behavior of Osmia lignaria propinqua Cresson (Hymenoptera: Megachilidae). J. Kansas Entomol. Soc. 51: 91-108 Pitts-Singer TL (2008). Past and present management of alfalfa bees. In: Bee Pollination in Agricultural Ecosystems (James RR and Pitts-Singer TL, eds.). Oxford University Press, Oxford, 105-123. Ptacek V (1989). Nesting strips for Rhophitoides canus Ev. (Hymenoptera, Apoidea) in lucerne seed production. Sbornik Vedeckych Praci 11: 261-273. [In Czech] Raw A (1992) Solitary bees (Hymenoptera: Megachilidae), restricted to identical resources for nesting, recognized their own nests: an example of genetically determined personal scents? The Entomologist 111: 79-87. Richards KW (1984). Alfalfa leafcutter bee management in western Canada. Agriculture Canada Publication 1495 E, Ottawa. Roubik DW (1989). Ecology and natural history of tropical bees. Cambridge University Press, Cambridge. Rust RW (1993). Cell and nest construction costs in two cavity-nesting bees (Osmia lignaria propinqua and Osmia ribifloris biedermannii) (Hymenoptera: Megachilidae). Ann. Entomol. Soc. Am. 86: 327-332 Rust RW (1998). The effects of cavity diameter and length on the nesting biology of Osmia lignaria propinqua Cresson (Hymenoptera: Megachildae). J. Hym. Res. 7: 84-93. Seidelmann K (2006). Open-cell parasitism shapes maternal investment patterns in the red mason bee Osmia rufa. Behav. Ecol. 17: 839-848. Steinmann E (1976). ber die Nahorientierung solitrer Hymenopteren: Individuelle markierung der Nesteingnge. Mitt. Schweiz. Ent. Ges. 49: 253-258. Steinmann E and Menzel R (1990). Lernversuche mit der Einsiedlerbiene Osmia rufa (Linnaeus, 1758) (Hymenoptera, Apoidea). Mitt. Schweiz. Ent. Ges. 63: 99-103. Steffan-Dewenter I (2003). Importance of habitat area and landscape context for species richness of bees. Conserv. Biol. 17: 10361044. Stephen WP (1962). Propagation of the leaf-cutter bee for alfalfa seed production. Agric. Exp. Stn Oregon State Univ. Bull. 586. Stephen WP and Osgood CE (1965). Influence of tunnel size and nesting medium on sex ratios in a leaf-cutter bee, Megachile rotundata. J. Econ. Entomol. 58: 965-968. Stephen WP and Undurraga JM (1976). X-radiography, an analytical tool in population studies of the leafcutter bee, Megachile pacifica. J. Apic. Res. 15: 81-87. Stephen WP, Bohart GE and Torchio PF (1969). The Biology and External Morphology of Bees. Oregon State University, Corvallis. Strohm E, Daniels H, Warmers C and Stoll C (2002). Nest provisioning and a possible cost of reproduction in the megachilid bee Osmia rufa studied by a new observation method. Ethol. Ecol Evol. 14: 255-268.
185
Sugiura N and Maeta Y (1989). Parental investment and offspring sex ratio in a solitary mason bee, Osmia cornifrons (Radoszkowski) (Hymenoptera: Megachilidae). Jap. J. Entomol. 57: 861-875. Taki H, Viana BF, Kevan PG, Silva FO, Buck M. (2008). Does forest loss affect the communities of trap-nesting wasps (Hymenoptera: Aculeata) in forests? Lanscape vs. local habitat conditions. J. Insect Conserv. 12: 15-21. Tepedino VJ and Torchio PF (1982). Phenotypic variability in the nesting success among Osmia lignaria propinqua females in a glasshouse environment (Hymenoptera: Megachilidae). Ecol. Entomol. 7: 453-462. Tepedino VJ and Torchio PF (1989). The influence of nest-hole selection on sex ratio and progeny size in Osmia lignaria propinqua (Hymenoptera: Megachilidae). Ann. Entomol. Soc. Amer. 82: 355-360. Torchio PF (1982). Field experiments with the pollinator species, Osmia lignaria propinqua Cresson in apple orchards: II, 1976 studies (Hymenoptera: Megachilidae). J. Kansas Entomol. Soc. 55: 759-778. Torchio PF (1984). The nesting biology of Hylaeus bisinuatus Forster and development of its immature forms (Hymenoptera: Colletidae). J. Kansas Entomol. Soc. 57: 276-297. Torchio PF (1985). Field experiments with the pollinator species, Osmia lignaria propinqua Cresson in apple orchards: V, (1979-1980), methods of introducing bees, nesting success, seed counts, fruit yields (Hymenoptera: Megachilidae). J. Kansas Entomol. Soc. 58: 448-464. Torchio PF (1991). Use of Osmia lignaria propinqua (Hymenoptera: Megachilidae) as a mobile pollinator of orchard crops. Environ. Entomol. 20: 590-596. Torchio PF (2003). The development of Osmia lignaria as a managed pollinator of apple and almond crops: a case history. In: For non-native crops, whence pollinators of the future?, Stickler K and Cane JH, eds.). Thomas Say publications, Entomological Society of America, Lahnam, 67-84. Torchio PF (1989a). In-nest biologies and immature development of three Osmia species (Hymenoptera: Megachilidae). Ann. Entomol. Soc. Amer. 82, 599-615. Torchio PF (1989b). Biology, immature development, and adaptive behavior of Stelis montana, a cleptoparasite of Osmia (Hymenoptera: Megachilidae). Ann. Entomol. Soc. Amer. 82: 616-632. Tscharntke T, Gathmann A and Steffan-Dewenter I (1998). Bioindication using trap-nesting bees and wasps and their natural enemies: community structure and interactions. J. Appl. Ecol. 35: 708-719. Tscharntke T, Steffan-Dewenter I, Kruess A and Thies C (2002). Characteristics of insect populations on habitat fragments: A mini review. Ecol. Res. 17: 229239. Tylianakis JM, Klein AM, and Tscharntke T (2005). Spatiotemporal variation in the diversity of Hymenoptera across a tropical habitat gradient. Ecology 86: 3296-3302. Tylianakis JM, Tscharntke T and Lewis OT (2007). Habitat modification alters the structure of tropical hostparasitoid food webs. Nature 445: doi:10.1038/nature05429 Velthuis HHW and van Doorn A (2006). A century of advances in bumblebee domestication and the economic and environmental aspects of its commercialization for pollination. Apidologie 37: 421-451 Vicens N and Bosch J (2000). Nest site orientation and relocation of populations of the orchard pollinator Osmia cornuta (Hymenoptera, Megachilidae). Environ. Entomol. 29: 69-75. Yamada M, Oyama N, Sekita N, Shirasaki S and Tsugawa C (1971) The ecology of the megachilid bee Osmia cornifrons and its utilization for apple pollination. Bull. Aomori Apple Exp. Stn 15: 1-80. [In Japanese]
186
A Orientao e o Sombreamento dos Ninhos-Armadilha Influenciam as Taxas de Captura?

Roberta Pereira Ferreira & Celso Feitosa Martins Programa de Ps-Graduao em Cincias Biolgicas, Departamento de Sistemtica e Ecologia/CCEN, Universidade Federal da Paraba, Joo Pessoa, PB, Brasil, 58059-900, tel: +55 83 32167772, fax: 83 32167025, ferreirarp@gmail.com; cmartins@dse.ufpb.br English title: The orientation and shading affect trap nesting rates?
Abstract
After the extensive work about bee and wasps caught in trap nests by Krombein, the use of traps to get solitary Apoidea spread to many parts of the world. In Brazil the first study using the technique was performed in Ribeiro Preto (southeastern Brazil) by Serrano and Garfalo (1978). Currently there are people studying the trap nesting species everywhere in Brazil. The technique has been used to survey the species and to get biological data, most about nest structure and associated parasites. However, mainly due to the declining of bee populations related to the impact of human activities, there is a growing need to rear and increase the populations of crop pollinators. The aim of this study is to standardizing the techniques of rearing the Brazilian solitary bees and build large populations of them testing if the orientation of trap nests related to cardinal points, insolation and material used to build the blocks of trap nests have any effect on capture rates of bees and wasps species. Trypoxylon aurifrons and Centris analis were the most abundant trap nesting species. Preliminary results show that number of species is higher in shade and number of nests, accordingly to species and study area, was higher in trap nests oriented to West, South and North. Thus, numbers of nests oriented to East were lower, which is the main wind direction in the studied areas. Key words: Centris, Trypoxylon, trap nests, insolation, cardinal points
Introduo
Muitas espcies de Hymenoptera, como vespas e abelhas, utilizam orifcios preexistentes no ambiente como stios de nidificao. Tal hbito tornou vivel a utilizao de ninhos-armadilha, que uma metodologia de fcil aplicao, replicao e padronizao (Morato, 2000; Martins et al., 2002). Esta metodologia permite a obteno de rplicas (espaciais e temporais) padronizadas, atravs da exposio de igual nmero e tipos de ninhos-armadilhas, evitando diferenas provenientes de diferentes esforos amostrais realizados por diferentes coletores utilizando rede entomolgica, sendo utilizada no estudo de estrutura e indicadores de comunidades (Tscharntke et al., 1998). A amostragem com ninhos-armadilhas coleta somente as espcies que nidificam na rea no amostrando aquelas que estejam apenas transitando no local de estudo (Camillo et al., 1995). Alm de informaes sobre a diversidade e abundncia de espcies nidificantes em cavidades preexistentes, essa abordagem tambm possibilita o estudo da biologia das espcies, materiais de construo
187
utilizados, arquitetura dos ninhos, recursos fornecidos para as larvas e biologia das espcies parasitas (Garfalo, 2000). A utilizao de ninhos-armadilha para amostrar as abelhas que utilizam cavidades preexistentes foi iniciada por Krombein (1967), nos EUA. No Brasil, a tcnica foi utilizada primeiramente por Serrano & Garfalo (1978), e posteriormente inmeros estudos foram realizados em diversas regies do pas (ver reviso em Garfalo et al., 2004; Aguiar et al. 2005). A ocupao dos ninhos-armadilha influenciada por diversos fatores, como a disponibilidade de oferta, dimetros adequados, distribuio dos ninhos, parasitismo, grau de exposio solar, isolamento trmico, entre outros. Alm disso, segundo Vinson et al. (1993), as cavidades preexistentes apropriadas para nidificao de cada espcie de abelha ou vespa, representam um recurso escasso no ambiente que limitam o crescimento das populaes destas espcies. As atividades humanas tm causado efeitos diretos e indiretos sobre as comunidades de abelhas e plantas, devido expanso de reas utilizadas na agricultura e pecuria, resultando em fragmentao de matas e isolamento de habitat (Potts et al., 2005). Mais recentemente, tem sido destacado o declnio mundial de polinizadores, com impacto direto na produtividade agrcola e a necessidade premente de estudos para avaliar parmetros populacionais das abelhas (Biesmeijer et al., 2006; Klein et al., 2007). Visando definir parmetros e tcnicas para implementar o aumento das populaes de polinizadores em reas agrcolas, o presente projeto tem como objetivos verificar se h 1) influncia da orientao dos ninhos-armadilha em relao aos pontos cardeais, 2) do grau de insolao, e 3) da utilizao de diferentes substratos (madeira e cimento-vermiculita), nas taxas de captura das espcies de abelhas e vespas nidificantes em cavidades preexistentes. As respostas dessas perguntas propiciaro o aumento da produtividade de culturas polinizadas por espcies nidificantes em cavidades preexistentes, fornecendo informaes para planos de manejo de polinizadores.
Material e mtodos
Para a realizao deste estudo foram escolhidas duas reas agrcolas na mesorregio da Zona da Mata paraibana, prximas da zona litornea. A primeira rea situa-se na Estao Experimental de Mangabeira, pertencente EMEPA (Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuria da Paraba). A EMEPA circundada por uma vegetao de tabuleiro com elementos de Restinga e Mata Atlntica, que se encontra em um estgio inicial de alterao devido presena de reas loteadas prximas estao. A segunda rea de estudo est localizada no Stio Olho Dgua, municpio de Alhandra, PB. O municpio de Alhandra est localizado no litoral sul do estado, e essencialmente agrcola, sendo uma das principais reas produtoras de acerola, inhame, abacaxi, manga e mamo do estado. Desta forma, no so observadas reas de mata conservada nas proximidades. Nos dois locais de estudo, foram escolhidos duas reas de amostragem com diferentes graus de sombreamento (ensolarada e sombreada), sendo uma exposta diretamente ao sol e a outra debaixo de locais sombreados por telhas de argila. Nessas reas foram instalados ninhos-armadilha, constitudos por blocos perfurados para a insero de tubos de cartolina preta. Foram testados dois tipos de blocos: de madeira (conforme Aguiar & Martins, 2002) e de cimento-vermiculita (baseado em Lorenzon et al., 2004; e Cordeiro et al., 2006). Em cada tipo de bloco foram inseridos tubos de cartolina com 10 cm de comprimento, sendo 20 tubos de cada um dos dimetros de 0,5 a 1,0 cm, diferindo em 0,1 cm entre cada classe. Desse modo, foram disponibilizados 120 ninhos-armadilha (20 de cada um dos 6
188
dimetros) em cada conjunto de blocos de madeira ou cimento-vermiculita. Em cada um dos quatro pontos cardeais (norte, sul, leste, e oeste) foram instalados dois conjuntos (um de madeira e outro de cimento-vermiculita) de 120 ninhos-armadilha cada, totalizando 240 ninhos por ponto cardeal, e 960 no total (240 vezes quatro pontos cardeais). Desse modo, foram disponibilizados 960 ninhosarmadilha na rea sombreada e 960 na rea ensolarada, perfazendo 1920 ninhos-armadilha em cada um dos locais de estudo. Os ninhos foram instalados em 02 de agosto de 2007.
Resultados
Neste manuscrito, so apresentados os dados referentes aos ninhos coletados nos meses de agosto a outubro de 2007. Nos dois locais de estudo, foram coletados 538 ninhos e 810 indivduos, sendo a maioria amostrada em Alhandra (89,6% dos ninhos e 83,2% dos indivduos, Tabela 1). No total, oito espcies de abelhas, trs de Sphecidae e uma de Vespidae nidificaram nos locais estudados (sendo dez espcies em Alhandra e oito espcies na EMEPA). Centris analis e Trypoxylon aurifrons foram as espcies mais abundantes, juntas correspondendo a mais de 95% das nidificaes. Tabela 1 - Espcies construtoras de ninhos e indivduos emergidos, em Alhandra e na EMEPA. Espcies/Locais Ancistrocerus sp1 Centris analis Centris tarsata Dicranthidium arenarium Epanthidium tigrinum Hylaeus sp1 Megachile sp1 Megachile sp2 Tetrapedia dentipes Trypoxylon albitarse Trypoxylon aurifrons Sphecidae sp1 Total geral Ninhos Alhandra EMEPA Indivduos Alhandra EMEPA 63 9 4 1 4 2 49 136
2 5 89 18 264 3 4 5 2 10 1 2 4 2 1 3 2 2 3 1 4 2 1 1 377 28 378 1 1 482 56 674
Em ambos locais, a abundncia de ninhos das duas espcies mais abundantes foi maior na rea sombreada, embora Centris analis tambm tenha construdo alguns ninhos na rea ensolarada em Alhandra (Figuras 1 e 2). Em Alhandra, cerca de 70% dos ninhos de Trypoxylon aurifrons foram construdos nos blocos de cimento-vermiculita e o restante nos blocos de madeira. Por outro lado, na EMEPA houve um maior nmero de ninhos em blocos de madeira, todavia, o nmero de ninhos construdo foi bem menor que em Alhandra (Figura 1). Com relao aos pontos cardeais, observa-se que no houve diferena do nmero de ninhos de Trypoxylon aurifrons construdos nos blocos de cimento-vermiculita voltados para cada direo. Entretanto, foi maior o nmero de ninhos construdos nos blocos de madeira direcionados para o oeste, em Alhandra; e para o sul, na EMEPA (Figura 1a e b).
189
Figura 1 - Distribuio do nmero de ninhos de Trypoxylon aurifrons construdos de acordo com a orientao em relao aos pontos cardeais, insolao, e o tipo de material utilizado para suporte, em Alhandra (a) e na EMEPA (b).
Figura 2 - Distribuio do nmero de ninhos de Centris analis construdos de acordo com a orientao em relao aos pontos cardeais, insolao, e o tipo de material utilizado para suporte, em Alhandra (a) e na EMEPA (b).
Quanto Centris analis, observa-se em Alhandra que, alm de terem sido utilizados principalmente os ninhos-armadilha oferecidos em blocos de madeira, e dispostos na rea sombreada, estes foram construdos em maior nmero nos tubos voltados para as direes sul e oeste (Figura 2a). Na EMEPA, apesar do menor nmero de nidificaes, os ninhos foram construdos quase exclusivamente em blocos de madeira, direcionados para o norte, e na rea sombreada (Figura 2b).
190
Discusso
De modo geral, e para as duas espcies predominantes, Trypoxylon aurifrons e Centris analis, foi observado um maior nmero de nidificaes na rea sombreada. No caso de Centris analis, apesar do maior nmero de ninhos na rea sombreada, tambm foram construdos ninhos na rea ensolarada. Este fato foi observado por Couto & Camillo (2007), em Ribeiro Preto. Esses autores tambm verificaram que no houve diferena nas taxas de mortalidade entre as reas ensolaradas e sombreadas. Apesar de Couto & Camillo (2007), terem observado maior taxa de nidificao de Centris analis na rea ensolarada, os mesmos utilizaram um abrigo de telha de amianto para proteger os ninhos-armadilha do sol. Em nosso estudo, os ninhos-armadilha foram expostos diretamente ao sol, o que parece ter influenciado na menor taxa de nidificao na rea ensolarada. Quanto riqueza, o nmero de espcies amostradas nas duas reas de estudo prximo aos valores observados na Reserva Biolgica Guaribas (Aguiar & Martins, 2002; Martins et al., 2002), localizada no litoral norte da Paraba, considerando que os dados aqui apresentados correspondem a trs meses de coleta. Quanto ao direcionamento dos ninhos-armadilha, de modo geral foi observado que o nmero de nidificaes foi muito reduzido na direo leste, apesar da existncia de variaes entre as espcies. Considerando que a direo predominante do vento nas reas estudadas leste e sudeste, os dados, apesar de preliminares, sugerem que os ninhos-armadilha sejam voltados em direo oposta aos ventos predominantes, de acordo com a regio. De modo similar, as maiores taxas de nidificao de Centris analis em blocos de madeira, sugerem a utilizao preferencial deste material quando o objetivo for a criao desta espcie visando a polinizao. Como salientado anteriormente, os dados aqui apresentados ainda so preliminares, de modo que uma anlise mais detalhada ser efetuada aps completar um ano de coleta, e estudos mais aprofundados forem realizados.
Agradecimentos
Aos pesquisadores e administradores da EMEPA, em particular seu Diretor-Presidente, Miguel Barreiro Neto, o Diretor Tcnico, Camilo Flamarion de Oliveira Franco, e o administrador da estao experimental, Maildon Martins Barbosa, ao proprietrio do Stio Olho Dgua, Jos Adolfo Carniato. A CAPES pela bolsa concedida ao primeiro autor.
Referncias bibliogrficas
Aguiar AJC and Martins CF (2002). Abelhas e vespas solitrias em ninhos-armadilha na Reserva Biolgica Guaribas (Mamanguape, Paraba, Brasil). Revista Brasileira de Zoologia. 19 (Supl): 101-116. Aguiar CML, Garfalo CA, Almeida GF (2005). Trap-nesting bees (Hymenoptera, Apoidea) in areas of dry semideciduous forest and caatinga, Bahia, Brazil. Revista Brasileira de Zoologia. 22(4): 1030-1038. Biesmeijer JC, Roberts SPM, Reemer M, et al. (2006). Parallel declines in pollinators and insectpollinated plants in Britain and the Netherlands. Science. 313(5785): 351-354. Camillo E, Garfalo CA, Serrano JC, Muccillo G (1995). Diversidade e abundncia sazonal de abelhas e vespas solitrias em ninhos armadilhas (Hymenoptera, Apocrita, Aculeata). Revista Brasileira de Entomologia. 39(2): 459-470.
191
Cordeiro GD, Silva MRA and Lorenzon MCA (2006). Argamassa-cimento-vermiculita como alternativa para construo de ninhos-armadilha para abelhas solitrias (Hymenoptera, Apoidea). In: Anais do VII Encontro sobre abelhas, Ribeiro Preto, 33. Couto RM and Camillo E (2007). Influncia da temperatura na mortalidade de imaturos de Centris (Heterocentris) analis (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Iheringia, Sr. Zool. 97(1): 51-55. Garfalo CA (2000). Comunidades de abelhas (Hymenoptera, Apoidea) que utilizam ninhos-armadilhas em fragmentos de matas do Cerrado de So Paulo. In: Anais do IV Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto, Ribeiro Preto, 121-128. Garfalo CA, Martins CF and Alves-dos-Santos I (2004). The Brazilian solitary bee species caugth in trap nests. In: Solitary bees: conservation, rearing and management for pollination, (Freitas BM and Pereira JOP, eds.). Imprensa Universitria, Fortaleza,77-84. Klein AM, Vaissire BE, Cane JH, et al. (2007). Importance of pollinators in changing landscapes for world crops. Proc. Royal Society B. 274: 303-313. Krombein KV (1967). Trap nesting wasps and bees. Life histories, nests and associates. Smithsonian Institution Press, Washington, DC, 570p. Lorenzon MCA, Cidreira RG, Rodrigues EHV et al. (2004). Langstroth hive construction with cement-vermiculite. Scientia Agricola. 61(6): 573-578. Martins CF, Camarotti-de-Lima MF, Aguiar AJC (2002). Abelhas e vespas solitrias nidificantes em cavidades preexistentes na Reserva Biolgica Guaribas (Mamanguape, PB): uma proposta de monitoramento. In: Anais do V Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto, Ribeiro Preto, 40-46. Morato EF (2000). A tcnica de ninhos-armadilhas no estudo de comunidades de Aculeata solitrios. In: Anais do IV Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto, Ribeiro Preto, 111-117. Potts SG, Vulliamy B, Roberts S et al. (2005). Role of Nesting Resources in Organizing Diverse Bee Communities in a Mediterranean Landscape. Ecological Entomolog. 30: 78-85. Serrano JC and Garfalo CA (1978). Utilizao de ninhos artificiais para o estudo bionmico de abelhas e vespas solitrias. Rvta. Bras. Ent. 31: 237-241. Tscharntke T, Gathmann A, Steffandewenter I (1998). Bioindication using trap-nesting bees and wasps and their natural enemies: community structure and interactions. J. Appl. Ecol. 35: 708-719. Vinson SB, Frankie GW, Barthell J (1993). Threats to the diversity of solitary bees in a Neotropical Dry forest in Central America. In: Hymenoptera and Biodiversity (LaSalle J and Gauld ID, eds.). CAB International, 53-81.
192
Biologia de Nidificao em Hylaeus (Colletidae)

Guaraci Duran Cordeiro & Isabel Alves-dos-Santos Programa de Ps Graduao em Entomologia, FFCLRP/USP Lab. de Abelhas, Depto. Ecologia, IB-USP Rua do Mato 321, trav 14. Cidade Universitria, So Paulo, SP 05508-900 Telefone: 011 30917527 fax 30917533 Email: isabelha@usp.br Nesting biology of Hylaeus (Colletidae)
Abstract
In this paper we present data on the nesting biology of one Hylaeus species captured in trap-nests at the University Campus in So Paulo, Brazil. Females construct the nests mainly in cavities of 3mm diameter. The cells are made of a delicate and transparent membrane. The female builds opercula in the entrance from the beginnig of the nesting process, which has a small hole in the middle and allows the passage of the female. The larvae food consists of a liquid mass and analyses show preference for Myrtaceae and Mimosaceae pollen. Nest architecture is similar to other species in the group.
Biologia De Nidificao Em Hylaeus (Colletidae)

Guaraci Duran Cordeiro& Isabel Alves-dos-Santos
Introduo
Abelhas solitrias que utilizam cavidades pr-existentes so passveis de captura atravs da oferta artificial de ninhos armadilhas. A tcnica foi universalmente difundida a partir dos trabalhos de Karl V. Krombein, que por 12 anos (1953-1964) coletou abelhas e vespas solitrias em armadilhas em diferentes regies dos Estados Unidos e estudou seus ciclos de vida (Krombein 1967). Nesta tcnica, cavidades artificiais de diferentes dimetros e profundidades so oferecidas na natureza, podendo ser em gomos de bambu ou blocos de madeira perfurados com o dimetro desejado. O uso de ninhos armadilhas permite a obteno de muitos dados relacionados biologia da espcie, como: razo sexual, contedo do alimento larval, arquitetura do ninho, parasitas associados, entre outros (Garfalo 2000, Morato & Campos 2000). Um sumrio das espcies de abelhas que utilizam este tipo de armadilhas no Brasil foi apresentado por Garfalo et al. (2004). Na lista contendo cerca de 60 espcies predominam abelhas da famlia Apidae (Centridini, Euglossini e Tetrapediini) e Megachilidae (Anthidiini e Megachilini). Alm destas duas famlias so raros os casos de abelhas da famlia Colletidae capturadas em ninhos armadilhas. No Brasil, Camillo et al (1996) capturaram Colletes rufipes e Alves dos Santos (2003) registrou duas espcies de Hylaeus em orifcios com 3mm de dimetro no campus da USP de So Paulo.
193
Famlia Colletidae
A famlia Colletidae mais abundante e diversificada nas regies temperadas da Austrlia e Amrica do Sul. A famlia dividida em cinco subfamlias, das quais quatro ocorrem na regio Neotropical: Colletinae, Diphaglossinae, Xeromelissinae e Hylaeinae. Todas espcies so solitrias apesar de algumas nidificarem em agregaes. Membros da subfamlias Xeromelissinae e Hylaeinae (que geralmente so pequenas e glabras) normalmente nidificam em cavidades pr-existentes, especialmente em gravetos e ramos secos (Michener 2000). O revestimento das clulas de cria, formando uma espcie de celofane, tido como uma sinapomorfia na famlia Colletidae (Cane 1983, Rozen 1984). O material secretado por glndulas salivares e de Dufour e espalhado pela glossa antes da polimerizao (Espelie et al. 1992). A proviso geralmente lquida ou semi-lquida. Foi sugerido que a principal fonte protica seria a levedura da fermentao do alimento lquido (Roberts 1971). Uma reviso sobre a biologia da nidificao na famlia Colletidae foi apresentada recentemente por Almeida (2008). Na subfamlia Hylaeinae somente o gnero Hylaeus (cosmopolita) ocorre na regio Neotropical (Griswold et al. 2006). So abelhas pequenas, praticamente glabras, geralmente negras com manchas amarelas, ferrugneas ou esbranquiadas. As fmeas no possuem escopa e o plen transportado no papo. A biologia da nidificao no gnero Hylaeus conhecida para algumas espcies do hemisfrio norte como H. asininus, H. bisinuatus, H. mesillae e H. modestus (Krombein 1967, Torchio 1984, Espelie et al. 1992). No Brasil, Sakagami & Zucchi (1978) registraram ninhos de H. tricolor em clulas abandonadas de vespas (Mischocyttarus e Trypoxylon) e observaram que mais de uma fmea utilizava o mesmo ninho, suspeitando assim de um comportamento parasocial. Vrias espcies da Austrlia foram estudadas quanto ao sistema de acasalamento e razo sexual (Alcock & Houston 1996, Paini & Bailey 2002). Espcies de Hylaeus capturados em NA foram utilizadas para estudar a composio qumica do revestimento celular e anlise polnica do alimento larval (Cane 1983, Scott 1994). Hylaeus so abelhas aparentemente de hbitos polilticos e so freqentes em flores de Myrtaceae, Melastomataceae, Rosaceae, Rubiaceae, Flacourticaceae e Rutaceae. Na Estao Biolgica de Boracia, municpio de Salespolis SP, com vegetao de Mata Atlntica, Wilms (1995) registrou 13 espcies de Hylaeus. No catlogo de abelhas da regio Neotropical a subfamlia Hylaeinae est representada por 77 espcies, sendo 19 espcies para o Brasil (Moure et al. 2007), porm este nmero certamente ser muito maior aps a reviso do gnero e subgneros de Hylaeus. No presente trabalho apresentamos dados sobre a biologia da nidificao de uma espcie de Hylaeus obtidos em NA no campus da USP em So Paulo.
Materiais e Mtodos
O estudo foi realizado no Laboratrio de Abelhas no campus da Universidade de So Paulo (2333S, 4643W), na cidade de So Paulo, durante 2 anos. Os ninhos de Hylaeus foram obtidos em ninhos-armadilha (NA) feitos com tubos de papel e inseridos em blocos de madeira. Os NA disponibilizados variaram o dimetro de 3 a 10 mm e comprimento de 3 a 12 cm. O local de estudo foi vistoriado periodicamente para observao da atividade das fmeas e retirada dos ninhos fundados. Aps a retirada, estes foram numerados, individualizados em tubos de ensaio e mantidos sob observao no laboratrio. Os ninhos foram abertos para registro da arquitetura interna, estgio de desenvolvimento, contagem do nmero de clulas, disposio das mesmas e para obteno de amostras do alimento larval. Os ninhos eram ento fechados novamente
194
para aguardar a emergncia dos adultos. Os indivduos emergidos foram coletados, sacrificados e preparados para coleo. Aps a emergncia dos adultos os ninhos foram abertos novamente para exame final do interior e registro da mortalidade. Algumas observaes externa da atividade das fmeas foram realizadas para obteno de dados da seqncia da construo do ninho, comportamento de parasitas, forma de coleta de alimento e horrios de atividade. Amostras do alimento larval foram coletadas para anlise polnica, em diferentes pocas do ano. Para anlise utilizamos o mtodo de acetlise proposto por Erdtman (1969). Lminas com os gros de plen foram examinadas em microscpio para estimativa e identificao. As abelhas foram identificadas at morfoespcies, devido falta de chave de identificao para espcies no gnero Hylaeus, bem como material para comparao em coleo. Os dados apresentados neste trabalho correspondem ao material obtido de uma espcie, que foi a mais freqente nos ninhos. As abelhas e todo material examinado encontram-se depositados na coleo CEPANN, do Laboratrio de Abelhas do IBUSP em So Paulo.
Resultados
Fmea de Hylaeus sp fundaram 186 ninhos na rea de estudo, ocupando principalmente cavidades com 3 mm de dimetro. Neste caso as clulas estavam dispostas linearmente. Porm, algumas fmeas ocuparam cavidades maiores (ex: 7mm) e nestes casos as clulas foram construdas pareadas ou intercaladas, com certa sobreposio. O nmero de clulas por ninho variou de 1 a 12 (com mdia de 4 clulas, n =50 ninhos). Vrias fmeas construram seus ninhos em cavidades anteriormente utilizadas por outras espcies de abelhas ou vespas (ex. Tetrapedia, Trypoxylon) ou de ninhos da prpria espcie. As fmeas de Hylaeus iniciam o processo de nidificao revestindo internamente a cavidade com uma membrana delicada e transparente e logo fazem o fechamento do ninho construindo um oprculo bastante caracterstico. Este oprculo formado por vrias camadas de fios sedosos presos nas laterais e soltos no centro, formando um emaranhado de fios. No centro deste oprculo permanece um minsculo orifcio, imperceptvel a primeira vista, e que se abre e fecha com a passagem da fmea, lembrando o funcionamento de um diafragma fotogrfico. A fmea ao chegar ou ao sair do ninho fora o redemoinho de fios sedosos no centro com a cabea e consegue passar pela pequena e estreita abertura que se abre e em seguida a sua passagem se fecha. Alm deste oprculo caracterstico, a fmea espalha uma fina camada de secreo ao redor do orifcio de entrada, deixando um aro esbranquiado com cerca de 1-1,5cm de dimetro (em orifcios de 3mm). As parties das clulas so feitas com o mesmo material do revestimento lateral, porm em alguns casos reforadas com pedaos de fibras vegetais. Observamos a ao de um parasita (uma espcie de Ichneumonidae) nos ninhos, durante ausncia da fmea. O parasita no penetra na cavidade do ninho, apenas introduz o aparelho ovipositor atravs do oprculo e faz a postura. Aps o trmino do ninho foi observado que o parasita no consegue perfurar a pelcula do oprculo. Neste momento a parede de fechamento est enrijecida. De 50 ninhos retirados no perodo de estudo e mantidos sob observao, emergiram 58 indivduos, sendo 22 fmeas e 36 machos, resultando numa razo sexual de 0,6:1. Em 15 ninhos registramos mortalidade total dos indivduos e em outros 6 a mortalidade foi parcial, somando 29 indivduos mortos em diferentes fases: 13 adultos pr-emergentes, 1 pupa e 15 larvas maduras. A causa da mortalidade em sua maioria no foi diagnosticada, porm registramos fungos no alimento larval
195
clulas de 11 ninhos e observamos a presena de caros em alguns ninhos aps a emergncia. Dez parasitides (Ichneumonidae sp.) emergiram de 11 ninhos e outros dois indivduos deste parasita foram registrados entre os mortos. O perodo para completar o desenvolvimento (de ovo at a emergncia do adulto) acompanhado em 12 clulas, foi em mdia 35 dias. Mas, verificamos que h variao ao longo do ano, provavelmente de acordo com as condies climticas. O desenvolvimento acompanhado de trs clulas construdas em meados de maio (ou seja, outono) durou entre 40-72 dias. O perodo de diapausa, como em muitas abelhas, passado na fase de larva madura. O espectro polnico encontrado em amostras do alimento larval provenientes de 16 ninhos revelou a predominncia de gros de plen de Myrtaceae e Mimosaceae, sendo que em dois ninhos foram registrados 100% plen de Myrtaceae. Outra famlia considerada como plen acessrio ou isolado ocasional foi Sapindaceae (entre 0,3-47% dos gros das amostras).
Discusso
O revestimento celular com substncia secretada pela glndula de Dufour pela fmea amplamente difundido entre as abelhas. Muitas abelhas combinam secrees da glndula de Dufour e glndula labial (Duffield et al. 1984), aplicando a mistura com as pecas bucais. Por exemplo, em Colletinae as secrees da glndula labial devem acelerar a polimerizao de lactonas para formar o revestimento to tipo celofane. O revestimento provavelmente previne a clula do excesso de umidade e ressecamento e defende contra infeco microbiana. A complexidade qumica da secreo da glndula de Dufour sugere que tambm tenha funo de comunicao, por exemplo, como reconhecimento do ninho, especialmente quando a secreo aplicada na entrada do ninho (Hefetz 1987, Guedot et al. 2006). Nos ninhos de Hylaeus sp. analisados neste trabalho a fmea espalha com a glossa uma fina camada de secreo ao redor do orifcio de entrada, deixando um aro esbranquiado caracterstico. Acreditamos que alm de uma possvel funo anti-microbiana e hidrofbico, esta substncia sirva como reconhecimento do ninho ao retorno da fmea. Porm, anlises da composio qumica de tal substncia e biostestes precisam ser feitos. Como estratgia de defesa a construo de um oprculo na entrada logo no incio da fundao do ninho deve impedir ou inibir o acesso de parasitas. Por exemplo, vespas do gnero Melittobia que estavam presentes na rea de estudo e atacaram todas as outras espcies de abelhas e vespas ocupantes dos NA, foram raras nos ninhos de Hylaeus sp. Mas, mesmo com aparncia protegida, os ninhos foram parasitados por uma espcie de Ichneumonidae, que introduz o ovipositor atravs do oprculo. Nas duas espcies de Hylaeus estudadas por Krombein (1967) nos Estados Unidos (H. asininus e H. modestus) emergiram os seguintes parasitas: Coelopencyrtus hylaei (Encyrtidae, Chalcidoidea) e Anthrax irroratus (Bombylidae). A arquitetura do ninho de Hylaeus sp. se assemelha em muitos aspectos quela descrita por Krombein (1967) para as duas espcies de Hylaeus norte-americanos, com membrana delicada e transparente revestindo o ninho e clulas, que so divididas por parties feitas com fibras de madeira. Ambas as espcies fundaram ninhos em cavidades preferencialmente com dimetro de 3,2mm, sendo em um caso com cavidade com 4,8mm, as clulas individuais foram dispostas pareadas. Krombein (1967) suspeitou de univoltismo para as duas espcies, com perodo de atividade entre abril e junho (primavera e vero no hemisfrio norte). No caso de Hylaeus sp. acreditamos que seja uma espcie com mais de uma gerao por ano, talvez at multivotina, pois registramos indivduos emergindo na primavera, vero e outono. Estes indivduos certamente estavam prontos para iniciar um
196
novo ciclo. Ninhos com ovos e larvas em diferentes fases de desenvolvimento tambm foram amostrados nas trs estaes. Mas, durante o inverno, nitidamente a atividade reduzida ou interrompida. A anlise do plen revelou a predominncia de gros de plen de Myrtaceae e Mimosaceae. Ambas famlias botnicas possuem espcies melferas e de grande importncia para as abelhas (Moreti et al. 2000) e esto de acordo com o registro de plantas apresentados por Wilms (1995) para as espcies de Hylaeus da Mata Atlntica. No campus da USP temos muitas reas florestadas com Eucalyptus (Myrtaceae) que provavelmente servem de alimento para estas abelhas. A riqueza de espcies do gnero Hylaeus na regio Neotropical grande e merece ser estudada com mais detalhes. Outras duas espcies de Hylaeus fundaram ninhos nas armadilhas da cidade universitria e recentemente capturamos ninhos de outra espcie no Parque Estadual da Serra da Cantareira. Em todos os casos foram disponibilizados ninhos armadilhas com dimetro entre 3-4mm, pouco utilizado em trabalhos semelhantes. Assim, recomendamos a ampliao da oferta de cavidades com dimetros variados, para que esta fauna de abelhas seja amostrada e estudada.
Agradecimentos
Ao VIII Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto, pela oportunidade de apresentar este trabalho. Aos colegas Marilda Cortopassi Laurino pelo auxlio na anlise do plen e Heber Couto Cavalheiro pelo auxlio na abertura dos ninhos. Fapesp pelo apoio financeiro (Processo: 04/15801-0) e incentivo aos nossos projetos com as abelhas nativas e pela bolsa de mestrado concedida ao primeiro autor (Processo: 07/51911-2).
Alcock J.; Houston T. F. (1996). Mating systems and male size in Australian hylaeine bees (Hymenoptera: Colletidae). Ethology. 102 (7): 591-610 Almeida, E. A. B. (2008). Colletidae nesting biology (Hymenoptera: Apoidea). Apidologie 39: 16-29. Alves-Dos-Santos, I. (2003). Trap-nesting bees and wasps on the University Campus in So Paulo, Southeastern Brazil (Hymenoptera: Aculeata). J. Kansas Entomol. Soc. 76: 328-334. Camillo, E.; Garfalo, C. A.; Serrano, J. C. (1996). Utilizao de ninhos armadilhas por Colletes rufipes Smith (Hymenoptera, Colletidae). In: Anais do II Encontro sobre abelhas de Ribeiro Preto. p. 332. Cane, J.H. (1983). Chemical evolution and chemosystematics of the Dufours gland secretions of the lactoneproducing bees (Hymenoptera: Colletidae, Halictidae & Oxaeidae). Evolution 37: 657674. Duffield, R.M., Fernandes A, Mckay S, J. W. Wheeler and R. R. Snelling. (1980). Chemistry of the Exocrine Secretions of Hylaeus modestus (Hymenoptera, Colletidae) Comparative Biochemistry & Physiology 67 (1): 159-162. Erdtman, G. (1969). Handbook of palynology. An introduction to the study of pollen grains and spores. Munksgaard, Copenhagen. Espelie K., Cane J., Himmelsbach D. (1992). Nest Cell Lining of the Solitary Bee Hylaeus bisinuatus (Hymenoptera, Colletidae). Experientia 48 (4): 414-416 Garfalo, C. A. (2000). Comunidade de abelhas (Hymenoptera, Apoidea) que utilizam ninhos-armadilha em fragmentos de matas do estado de So Paulo. In: Anais do IV Encontro sobre abelhas de Ribeiro Preto. p. 121.
197
Garfalo, C. A.; Camillo, E.; Serrano, J. C.; Muccillo, G. (1995). Diversidade e Abundncia Sazonal de Abelhas e Vespas Solitrias em Ninhos Armadilhas (Hymenoptera, Apocrita, Aculeata). Revista Brasileira Entomol. 39 (2): 459-470. Garfalo, C. A., Martins, C. F., Alves-dos-Santos, I. (2004) .The Brazilian solitary bee species caught in trap nests. In: International Workshop on solitary bees and their role in pollination, Beberibe, CE. Solitary Bees: conservation, rearing and management for pollination. Fortaleza: Impresa Universitria, p.77 84. Guedot C., Pitts - Singer T. L., Buckner J. S., Bosch J.& Kemp W. P. (2006). Olfactory cues and nest recognition in the solitary bee Osmia lignaria. Physiological Entomology 31: 110119 Griswold, T., P. E. Hanson, & I. Alves dos Santos. (2006). Apoidea: Abejas. In: I. Gauld & P. Hanson. Hymenoptera de la Regin Neotropical. American Entomological Institute 77: 734-785. Hefetz A. 1987. The role of Dufours gland secretions in bees. Physiological Entomology 12 (3): 243253. Krombein, K. V. (1967) Trap-nesting wasps and bees: life histories, nests and associates. Washington: Smithsonian Institution Press. 570p. Michener, C. D. (2000). The bees of the World. John Hopkins, Washington DC. Morato, E. F.; Campos, L. A. O. (2000). Efeitos da fragmentao florestal sobre abelhas e vespas solitrias em uma rea da Amaznia Central. Revista Bras. Zoologia 17: 429-444. Moreti, A.; Carmello C. C.; Carvalho, C. A. L.; Marchini, L. C.; Oliveira, P. C. F. (2000). Pollen spectrum of samples of Apis mellifera L., honey collected in Bahia State, Brazil. Bragantia 59 (1): 1-6. Moure, J. S., Urban, D. & Melo, G. A. R. (2007). Catalogue of Bees (Hymenoptera, Apoidea) in the Neotropical Region. Curitiba: Sociedade Brasileira de Entomologia v. 1. 1072 p. Paini, D. R. & Bailey, W.J. (2002). Seasonal sex ratio and unbalanced investment sex ratio in the Banksia bee Hylaeus alcyoneus. Ecological Entom. 27 (6): 713719. Roberts R.B. (1971) Biology of the crepuscular bee Ptiloglossa guinnae n.sp. with notes on associated bees, mites, and yeasts. J. Kans. Entomol. Soc. 44,283294. Rozen J.G. Jr. (1984). Nesting biology of diphaglossine bees (Hymenoptera: Colletidae). Am. Mus. Novit. 2786: 133. Sakagami S.F., Zucchi R. (1978) Nests of Hylaeus (Hylaeopsis) tricolor: the first record of non solitary life in colletid bees, with notes in communal and quasisocial colonies (Hymenoptera: Colletidae). J. Kans. Entomol. Soc. 51: 597614. Scott, V. (1994). Phenology And Trap Selection of 3 species of Hylaeus (Hymenoptera, Colletidae) in upper Michigan. Great Lakes Entomologist 27 (1): 39-47 Torchio, P. (1984). The Nesting Biology of Hylaeus bisinuatus Forster and Development of its Immature forms (Hymenoptera, Colletidae). J. Kansas Entomol. Soc. 57 (2): 276-297 Wilms, W. (1995). Die Bienenfauna in Kustenregenwald Brasiliens und ihre beziehungen zu Blutenplanzen: Fallstudie Boraceia, So Paulo. Dissertation. Tbingen. Universitt Tbingen.
198
O Uso de Ninhos-Armadilha em Estudos Realizados no Parque Municipal das Araucrias, Guarapuava (PR)
O uso de ninhos-armadilhas em Guarapuava (PR) Maria Luisa Tunes Buschini1; Jesiani Rigon1; Juliano Cordeiro1; Mary Ellen Reis Diniz1 1- Departamento de Biologia da Universidade Estadual do Centro-Oeste (UNICENTRO), Guarapuava (PR). Correspondncia: Profa Dra. Maria Luisa Tunes Buschini, Departamento de Biologia UNICENTRO, Rua Presidente Zacarias 874, Cep: 85010-990, Guarapuava (PR); email: isatunes@yahoo.com.br Use of trap nests in studies that have been done in the Parque Municipal das Araucrias, Guarapuava (PR).
Abstract
The species diversity and community structure of trap-nesting bees was studied from December 2001 to December 2003. Three different habitats (Araucaria forest, swamp and grassland) were investigated in terms of abundance, richness, diversity and similarity of bee communities. A total of 120 nests of 11 species were collected. The most abundant species were Centris tarsata, Megachile (Moureapis) sp. and Rinchocolletes sp. Swamp habitat yielded the greatest abundance and diversity of bee species. In this paper we also present information on nesting biology of Centris (Hemisiella) tarsata and Epanthidium nectarinioides and about which plants are used by Megachile (Moureapis) sp. in provisioning of larvae. A total of 67 nests of Centris tarsata were obtained from wood trap-nests of different diameters. This species showed a preference for open habitats, since it occurred only in swamp and grassland areas and has never occurred in araucaria forest. Nesting activity was more pronounced during the hot season, especially in December and January. Epanthidium nectarinioides also built their nests only in swamp and in grassland areas. Its nesting activity was also more pronounced in the hot season. A total of 80 pollen grain slides, from 16 nests of Megachile (Moureapis) sp. were analyzed, corresponding to 53% of the number of founded nests. Of these, 13 were collected in the swamp and 3 in the grassland. Although 99 flowering plants were collected close to the bees nidification site, in nest slides, the pollen of Ludwigia peruviana and Ludwigia sericea accounted for 99,6 % of the total amount of pollen collected. Palavras chave: comunidade, diversidade, Hymenoptera, ninhos-aramdilhas.
Introduo
O uso natural da terra no apenas resultou na diminuio da cobertura vegetal como tambm em uma assimtrica distribuio dos remanescentes, com tamanhos e formas variadas (Didham et
199
al., 1996). O desmatamento de florestas provoca, usualmente, a fragmentao da mata contnua, gerando o aparecimento de verdadeiras ilhas de matas isoladas umas das outras por reas cobertas com pastagens ou outro tipo de cultura. Pesquisas detalhadas vm sendo realizadas sobre o uso de bioindicadores na deteco e avaliao dos efeitos da fragmentao sobre determinados organismos (Devries e Walla, 2001). Embora nessas avaliaes ambientais os pesquisadores venham utilizando, predominantemente, os vertebrados, invertebrados como os insetos, que constituem mais da metade de todas as espcies animais, permitem fazer um diagnstico imediato a respeito das caractersticas dos habitats, devido a grande riqueza desses animais. Alguns estudos tm inferido a possibilidade de se utilizar vespas e abelhas solitrias, que nidificam em cavidades pr-existentes, como bioindicadores da qualidade do ambiente e da diversidade, em programas de conservao ambiental. Esses animais tm capacidade de refletir mudanas ecolgicas, atravs da avaliao da riqueza de espcies em suas comunidades, e da interao entre eles, seus predadores e seus inimigos naturais (Steffan-Dewenter, 2002; 2003). O Bioma Floresta de Araucria sofre, como todos os Biomas brasileiros esse processo de fragmentao acentuado, dada a utilizao dos espaos em atividades agropecurias e do avano cada vez maior do entorno das cidades. Essa diminuio acentuada na cobertura vegetal desse bioma indicao como rea de extrema importncia biolgica, ficando evidente sua prioridade em pesquisas que tratem do inventariamento de suas espcies. Um modo de caracterizar uma comunidade contar ou listar as espcies que esto ali presentes. Esse processo direto, que possibilita a descrio e comparao de comunidades atravs de sua riqueza de espcies, na prtica nem sempre fcil. Algumas espcies so difceis de serem localizadas, como o caso dos ninhos das abelhas solitrias. Por outro lado, como essas abelhas aceitam com facilidade orifcios artificiais introduzidos pelo homem nos ambientes naturais, ninhos-armadiha tm sido usados para captura de seus ninhos possibilitando a obteno de diversos dados sobre elas. As pesquisas que vm sendo realizadas no Parque Municipal das Araucrias visam caracterizar a estrutura da comunidade de abelhas solitrias que nidificam em ninhos-armadilha em fragmentos de Floresta Ombrfila Mista e em reas de Campo e de Vrzea. Alm disso, vm sendo realizados tambm estudos sobre a biologia de algumas das espcies capturadas e da relao dessas espcies com a flora local.
Materiais E Mtodos
Esses estudos vm sendo realizados desde dezembro de 2001 no Parque Municipal das Araucrias, no municpio de Guarapuava (PR), a 1.120 m de altitude (25 23 36 Sul, 512719 Oeste). O Parque possui uma rea de 104 ha sendo sua vegetao constituda por floresta ombrfila mista 42,75%, floresta de galeria 10,09%, campos 6,8%, vrzeas 7,13% e reas alteradas 33,23%. De acordo com a classificao climtica de Keppen, a regio de Guarapuava caracterizada pelo clima mesotrmico, mido e supermido, sem estaes secas. Os meses mais quentes apresentam temperaturas mdias de 22C. As geadas so severas e nos meses mais frios a temperatura mdia de 12C. Para captura das abelhas foram instalados ninhos armadilhas constitudos por um bloco de madeira com dimenso de 12 x 3,5 x 2,5 cm, serrado longitudinalmente e com um furo interno de 8 cm, e dimetros variando de 0,7; 1,0 e 1,3 cm. Esses ninhos foram agrupados em um bloco maior contendo 12 ninhos armadilhas, sendo 4 de cada dimetro. Cada bloco foi fixado a 1,5 m de altura em estaca tambm de madeira, em reas de campo, de vrzea e de mata com araucrias. Duas reas foram estudadas em cada habitat, com 2 transectos por rea e 4 estacas por transecto Foram realizadas
200
observaes a cada duas semanas, sendo os ninhos ocupados retirados e substitudos por peas vazias do mesmo dimetro. Posteriormente, eles foram transportados para o laboratrio e colocados em local apropriado at a emergncia dos adultos, os quais foram pesados, sexados e guardados na coleo entomolgica do Laboratrio de Biologia e Ecologia de Vespas e Abelhas da Unicentro. Para a caracterizao da comunidade de abelhas, as suas abundncias foram agrupadas conforme Whittaker (1965) (Figura 1) A frequncia de ocorrncia (FO) e a dominncia (D) das espcies foram calculadas de acordo com Palma (1975). Segundo esse autor, esses dois ndices juntos podem ser usados para agrupar as espcies em 3 categorias: espcies comuns, intermedirias e raras. A diversidade desses insetos em cada ambiente foi calculada atravs dos ndices de riqueza de Margaleff e de equitabilidade de Pielou. Com o ndice de Shannon-Wiener foi calculada a diversidade alfa para cada ambiente. A posteriori foi realizado o teste de T para testar a hiptese nula de no haver diferena significativa entre os valores desse ndice nos diferentes ambientes (Magurran, 2004). Visando investigar mudanas na composio das espcies entre os ambientes (diversidade beta) suas abundncias foram agrupadas atravs do Coeficiente de Distncia da Corda. Posteriormente foi feito o Cluster (UPMA) e construdo o drendrograma (Ludwig e Reynolds, 1988). A similaridade entre os ambientes, em termos de presena e ausncia de espcies, foi calculada atravs do ndice de Jaccard. Atravs do ndice de Shannon-Wiener calculou-se a diversidade gama para o Parque Municipal da Araucrias reunindo os dados dos trs ambientes.
Nos estudos sobre a biologia de nidificao de Centris tarsata os testes no paramtricos de Mann-Whitney e de Kruskall-Wallis foram usados para ver se existe diferena significativa entre os seus tempos de desenvolvimento e entre as larguras de suas cabeas. A razo sexual dessa espcie foi calculada dividindo-se o nmero de fmeas pelo nmero de machos. Posteriormente, foi aplicado o teste do qui-quadrado para ver se ela era significativamente diferente de 1:1. No foi usada nenhuma anlise estatstica sobre os dados referentes biologia de nidificao de Epanthidium nectarinioides pois o nmero de informaes foi bem reduzido.
201
Uma parcela dos ninhos fundados por Megachile (Moureapis) sp foi utilizada para retirada de seu material polnico e confeco de lminas permanentes pelo mtodo de acetlise (Miranda e Andrade, 1990). Para cada ninho confeccionou-se 5 lminas de gros de plen. Conforme verificado nos dados de 2001 a 2003, Megachile (Moureapis) sp. fundou ninhos apenas em ambiente de vrzea e campo. Assim, a coleta das plantas floridas foi realizada somente nestas reas entre maio de 2006 a abril de 2007 num raio de 500 m dos locais aonde os ninhos estavam sendo construdos. Foi retirado plen de botes florais e/ou flores de cada planta coletada para confeco de duas lminas permanentes por planta.
Comunidade de abelhas Foram coletadas de dezembro de 2001 a dezembro de 2003 120 ninhos de abelhas solitrias pertencentes a 11 espcies distribudas entre as famlias Megachilidae (72.7%), Apidae (18,2%) e Colletidae (9,1%) (Figua 1). As espcies mais abundantes foram Centris (Hemisiella) tarsata Smith com 44 ninhos (37%), Megachile (Moureapis) sp1 Raw com 30 ninhos (25,2%) e Rhynchocolletes sp Moure com 13 ninhos (10,9%). C. tarsata (D = 36.67%; FO = 26,92%), M. (Moureapis)sp1. (D = 25,00%; FO = 23,08%), Rhynchocolletes sp. (D = 10,83%; FO = 15,39%), Epanthidium nectarinioides Schrottky (D = 7,50%; FO = 11,54%), Megachile (Dactylomegachile) sp1 Mitcheell (D = 6.67%; FO = 11,54%), Anthodioctes claudii Urban (D = 4,17%; FO = 9,62%), Megachile sp1 Latreille (D = 3,33%; FO = 5,77%) e Megachile sp2 (D = 2,5%; FO = 5,77%) foram consideradas espcies intermedirias. Megachile (Austramegachile) fiebrigi Schrottky (D = 1,67%; FO = 3,85%), Xylocopa (Neoxylocopa) augusti Lepeletier (D = 0,83%; FO = 1,92%) e Megachile (Moureapis) sp2 (D = 0,83%; FO = 1,92%) foram consideradas espcies raras. Anthodioctes claudii e Megachile (Moureapis) sp2 foram coletadas apenas em mata de aruacrias, Megachile sp2 apenas na vrzea e Xylocopa augusti apenas no campo. Apenas Megachile sp1 foi encontrada tanto na mata de araucrias quanto no campo e Megachile (Austramegachile) fiebrigi na mata de Araucrias e vrzea. O nmero de espcies encontradas na vrzea (S = 7) e no campo (S = 7) foi igual e maior do que aquele encontrado na mata com araucrias (S = 4). O nmero de espcies estimado para o Parque Municipal das Araucrias, atravs da distribuio lognormal, foi de 12. Tanto o nmero de espcies encontrados nesse parque (n = 11) quanto o estimado pela distribuio lognormal so muito similares ao encontrado por Morato e Campos (2000) na Amaznia Central (S=14) e maior do que aquele encontrado por Viana et al. (2001) (S=7) e Aguiar e Martins (2002) (S = 8) na Bahia e na Paraba, respectivamente. Segundo Heithaus (1979) diferenas entre a riqueza de espcies de regies temperadas e tropicais podem resultar de diferenas tanto no tamanho amostral quanto no tamanho da rea amostrada. Independente disto, pode-se notar que a riqueza de abelhas no Parque apresenta um padro que vem sendo documentado na literatura de que esses insetos so mais abundantes em reas semi-deserticas e temperadas (Silveira et al., 2002). Na Amrica do Sul a riqueza de abelhas aumenta do cerrado para os campos sulinos no Brasil, e nas regies semi-deserticas da Argentina (Michener, 1979). Guarapuava uma regio subtropical e est localizada a 1.120 m de altitude e considerada a segunda cidade mais fria do Paran. Vrias hipteses vm sendo propostas para explicar a baixa diversidade de abelhas em regies tropicais (Silveira et al., 2002). Uma delas foi proposta por Roubik citada por Michener (1979), segundo a qual essas regies possuem um nmero maior de espcies eusociais do que as regies temperadas. Cada uma dessas espcies apresenta elevada populao de operrias que provocaria uma exausto nos recursos alimentares tornando-os pouco disponveis para as espcies solitrias. Dessa forma, as espcies sociais provocariam o deslocamento das outras espcies de abelhas para grandes
202
latitudes, e consequentemente, uma diminuio na diversidade de abelhas nas regies tropicais. A diversidade alfa na vrzea foi significativamente maior que na mata com araucrias (t = 4,497; p < 0,001) e que no campo (t = 2.636; p < 0.01). Embora o ndice de Shannon-Wiener tenha sido maior na mata com araucrias do que no campo, no houve diferena significativa entre eles (t = 0.753; 0,5 > p > 0,2). Com relao equitabibilidade, a mata com araucrias apresentou o maior valor (J=0,843) seguida da vrzea (J=0,784) e do campo (J=0,548). Por outro lado, o campo apresentou maior valor no ndice de riqueza (DMg = 3,59) do que a vrzea (DMg = 3,34) e a mata com araucrias (DMg = 3,00). Quanto presena e ausncia de espcies nos ambientes, a similaridade entre a vrzea e o campo foi maior (J = 0,625) que entre a vrzea e a mata com araucrias (J = 0,100) e entre o campo e a mata com araucrias (J = 0,100). A diversidade beta pode ser representada pelo dendrograma (Figura 2). A maior similaridade em relao abundncia das espcies ocorreu entre a vrzea e o campo sendo a mata com araucrias o ambiente mais dissimilar. Esses resultados indicam que existe uma diferena significativa entre a diversidade dessa guilda de abelhas na vrzea e nos outros dois ambientes (campo e mata com araucrias). Embora pelo Cluster e pelo ndice de Jaccard os ambientes mais similares em termos de abundncia e presena-ausnsia das espcies, respectivamente, tenham sido a vrzea e campo, isto pode ter ocorrido devido maior similaridade entre esses ambientes com relao taxa de luminosidade uma vez que suas temperaturas e umidades relativas do ar no foram significativamente diferentes pela anlise discriminante. Perez-Maluf (1993), Camillo et al. (1995) e Aguiar e Martins (2002) tambm registraram alta atividade das abelhas em reas abertas. Uma outra similaridade entre a vrzea e o campo provavelmente a grande disponibilidade de flores. Fye (1972) notou que em reas alteradas e abertas a atividade dessa guilda de abelhas foi mais pronunciada do que em florestas contnuas. Segundo esse autor, essas reas so colonizadas por plantas pioneiras que representam importantes fontes de alimento para os insetos, causando um aumento em suas populaes. Uma vegetao mais diversa fornece uma quantidade maior de plen, mantendo, dessa forma, um maior nmero de espcies de abelhas (Gathmann et al., 1994). Segundo Tscharntke et al. (1998) as abelhas necessitam de menos tempo para aprovisionar seus ninhos em um campo mais heterogneo do que em um ambiente mais uniforme.
203
Biologia de nidificao de Centris tarsata Foram coletados 67 ninhos, sendo mais freqentes as nidificaes no vero, com maior atividade no ms de Janeiro (Figura 3). Os ninhos foram construdos apenas em reas de campo (n=48) e vrzea (n=19). Frankie et al. (1988), observaram que as espcies de Centris coletadas por eles foram mais freqentes em reas sombreadas. Segundo eles esses ambientes possuem temperatures mais favorveis ao desenvolvimento de Centris pois altas temperatutas (38 oC to 40 oC) so responsveis pela elevada mortalidade na fase larval.
Essas abelhas utilizaram ninhos-armadilha de 0,7 cm (n=18), 1,0 cm (n=39) e 1,3cm (n=10) de dimetro e constroem ninhos com uma mistura de areia e substncias oleosas e, provavelmente, resina. Os ninhos so formados de 1 a 4 clulas nas armadilhas com 0,7 cm e de 1 a 6 clulas naqueles com 1,0 e 1,3 cm de dimetro. No menor dimetro as clulas tm um formato cilndrico e nos dois maiores elas so ovaladas e com formato de um barril. Internamente so brilhantes e bem lisas. Emergiram 62 fmeas e 42 machos dando uma razo sexual de 1,48 fmeas para 1 macho, significativamente diferente de 1:1 (2 = 3.846, df = 1, 0.05 < P < 0.0025). A disposio dos sexos nos ninhos no aleatria estando os machos nas clulas mais externas e as fmeas nas mais internas. Elas apresentaram cabeas significativamente mais largas que eles (Buschini e Wolff, 2006). Resultados semelhantes foram observados por Pereira et al. (1999) em Centris vittata Lepeletier e por Jesus e Garfalo (2000) em Centris analis Fabricius. Para Pereira et al. (1999) essa disposio dos sexos nos ninhos facilitaria a emergncia, pois os machos emergem antes das fmeas. Seus inimigos naturais foram: Bombyliidae, Mesocheira bicolor Fabricius, Coelioxys sp Latreille. e Meloidae. A porcentagem de parasitoides foi maior nas clulas mais internas. Esses parasitoides tambm foram encontrados nos ninhos de C. vittata (Pereira et al., 1999), C. analis (Jesus e Garfalo, 2000) C. dichrootricha Moure (Morato et al. 1999). Biologia de nidificao de Epanthidium nectarinioides Foram coletados 12 ninhos sendo mais freqentes as nidificaes no vero, com maior atividade no ms de Janeiro (n=7) (Figura 4). Os ninhos foram construdos apenas em reas de campo
204
(n=4) e vrzea (n=8). Essas abelhas utilizaram apenas ninhos-armadilha de 0,7 cm (n=7) e 1,0 cm (n=5) de dimetro. O comprimento mdio dos ninhos foi de 4,3 cm para os de 0,7 cm e 3,7 cm para os de 1,0cm de dimetro. O nmero mdio de clulas aprovisionadas foi de 3,1 e 3,6 para os ninhos com 0,7 e 1,0 cm, respectivamente. Foram observadas clulas vestibulares em trs ninhos, duas em ninhos de 0,7 cm e uma naqueles com 1,0 cm. Houve uma clula intercalar em apenas um ninho de 0,7 cm de dimetro. As clulas dos ninhos de 0,7 cm so arranjadas linearmente. J nos ninhos com 1,0 cm de dimetro so dispostas em duas fileiras paralelas, sendo uma na metade inferior e outra na superior dos ninhos-armadilha. Em cada uma dessas fileiras, as clulas so dispostas na diagonal. Todos os ninhos so feitos com resina e folhas mascadas e alguns deles (n=8) com um pouco de areia. A resina marrom escura, bem dura e perfumada. Em alguns deles (n=6), alm desse tipo de resina, observou-se a presena de um outro tipo, mais clara e menos rgida, que encontrada na entrada do ninho, e est geralmente misturada a um pouco de areia, tambm clara e muito fina. Ela encontrase sob a forma de gotculas ou como uma larga mancha na entrada do ninho. Essas caractersticas tambm foram observadas por Alves dos Santos (2004) nos ninhos de Anthodioctes megachiloides Holmberg. A resina reveste tambm, todo o orifcio interno do ninho, modelando as suas clulas e as parties entre elas. A utilizao de resina na construo do ninho amplamente difundida entre os diversos gneros de Anthidiini (Roubik, 1989). Normalmente o fechamento do ninho aparece com resina e uma maior quantidade de folhas mascadas. Os casulos tecidos pelas larvas so de cor marrom claro, finos como papel celofane e ficam aderidos parede da clula.
Emergiram 12 machos e quatro fmeas sendo a razo sexual de quatro machos para cada fmea. Todas as fmeas e a maioria dos machos (n=14) entraram em diapausa, com tempo mdio de desenvolvimento de 354 dias. Para as abelhas que no entraram em diapausa esse tempo foi de 77 dias. A principal causa de mortalidade nessa espcie foi falha no desenvolvimento. Ocorreu parasitismo em quatro clulas, sendo dois deles no identificados porque morreu ainda na fase de larva, e os outros dois eram Coelioxys e Bombilidae. Segundo Krombeim (1967) os inimigos naturais das abelhas da famlia Megachilidae so vrios, entre eles abelhas do gnero Coelioxys.
205
Levantamento das plantas utilizadas por Megachile (Moureapis) sp. no aprovisionamento de seus ninhos Ao todo foram analisadas 80 lminas de gros de plen provenientes de 16 ninhos o correspondente a 53% do nmero de ninhos fundados. Destes, 13 coletados na vrzea e 3 no campo. Apesar de terem sido coletadas 99 plantas floridas prximas aos locais de nidificao dessa abelha, nas lminas provenientes dos ninhos ocorreram somente os tipos polnicos de Ludwigia peruviana e Ludwigia sericea (Onagraceae). As duas espcies de Ludwigia possuem porte herbceo-subarbustivo e ocorreram somente na vrzea. Ludwigia sericea apresentou intensa florao principalmente no ms de fevereiro e Ludwigia peruviana em maro, embora seu perodo de florao ocorra alm desses meses. Esse perodo correspondeu tambm ao perodo de maior atividade de nidificao de Megachile (Moureapis) sp. (Figura 5). Um fato abordado por Vieira (2002) sobre as espcies de Ludwigia no Sudeste do Brasil, que todas as espcies apresentaram flores com durao de um dia, sendo o perodo de florescimento concentrado durante o incio do perodo seco quando seus polinizadores, abelhas oligolticas, esto ativas.
Segundo Laroca (1972) para que uma espcie de abelha seja especialista, necessrio que haja uma sincronia perfeita entre o florescimento da planta e o seu ciclo reprodutivo. Situao esta que se torna delicada quando o perodo de florescimento for curto e imprevisvel. Para Robertson citado por Antonini (1995), alguns fatores que levam a evoluo da oligoletia so, alm da sincronizao entre o perodo de florescimento e atividade das abelhas, o esforo para evitar competio, vos curtos e nidificao prxima s plantas utilizadas no aprovisionamento. Como estudos tm demonstrado o gnero Ludwigia polinizada por abelhas oligolticas. At o momento foram registradas 10 espcies especializadas na coleta de plen em Ludwigia, so elas: Panurgillus flavitarsis Schilindwein e Moure (Andrenidae), Diadasina distincta, Diadasina riparia (Ducke), Ptilothrix relata (Holmberg), Melissoptila paraguayensis (Brthes) (Apidae), Tetraglossula anthracina, Tetraglossula bigamica (Strand) (Colletidae) Pseudagapostemon
206
brasiliensis Cure, Pseudagapostemon pruinosus Moure (Halictidae) e Megachile brasiliensis Dalla Torre (Megachilidae) (Schlindwein, 2004). Sendo Megachile (Moureapis) sp. uma espcie oligoltica a ser acrescentada a esta lista. Raven (1979) salienta que abelhas que possuem cerdas ventrais rgidas e esparsas so bem sucedidas na coleta do plen apresentado por Onagraceae. E, alm disso, segundo Borges (1997) o prprio aspecto estrutural do plen de Ludwigia facilita a coleta pelos polinizadores especializados.
Referncias
Aguiar AJC e Martins CF (2002). Abelhas e vespas solitrias em ninhos-armadilha na Reserva Biolgica Guaribas (Mamanguape, Paraba, Brasil). Rev. Bras. Zool. 19: 101116. Alves dos Santos I (2002). A vida de uma abelha solitria. http://eco.ib.usp.br/beelab/solitarias.htm. Acesso em 12 de junho de 2008. Antonini Y (1995). Ecologia de populao de uma abelha solitria especialista Diadasina distincta (Holmberg, 1903): variao sazonal na razo sexual e no uso do plen. Dissertao de Mestrado, UFMG, Belo Horizonte. Borges JC (1997). Interaes entre espcies de Ludwigia (Onagraceae) e seus visitantes florais. Dissertao de Mestrado, UFMG, Belo Horizonte. Buschini MLT e Wolff LL (2006). Nesting biology of Centris(Hemisiella) tarsata Smith in southern Brazil (Hymenoptera, Aidae, Centridini). Braz. J. Biol. 66: 1091-1101. Camillo E, Garofalo CA, Serrano JC, Muccillo G (1995). Diversidade e abundncia sazonal de abelhas e vespas solitrias em ninhos armadilhas (Hymenoptera, Apocrita, Aculeata). Rev. Bras. Biol. 39: 459470. Devries PJ e Walla TR (2001). Species diversity and community structure in neotropical fruit-feeding butterflies. Biol. J. Linn. Soc. 74: 115. Didham RK, Ghazoul J, Stork NE, Davis AJ (1996). Insects in fragmented forests: a functional approach. Trends Ecol. Evol. 11: 255260. Fye RE (1972). The effect of forest disturbances on populations wasps and bees in Northwestern Ontario (Hymenoptera: Aculeata). Can. Entomol. 104: 16231633. Frankie GW, Vinson SB, Newstron LE, Barthell JF (1988) Nest side and habitats preferences of Centris bees in the Costa Rican dry forest. Biotropica 20: 301-310. Gathmann A, Greiler HJ, Tscharntke T (1994). Trapnesting bees and wasps colonizing set-aside fields: succession and body size, management by cutting and sowing. Oecologia 98: 814. Heithaus ER (1979). Community structure of neotropical flower visiting bees and wasps: diversity and phenology. Ecology 60: 190202. Jesus BM e Garfalo CA (2000). Nesting behaviour of Centris (Heterocentris) analis (Fabricius) in southeastern Brazil (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Apidologie 31: 503-515. Krombein KV (1967). Trap-nesting Wasps and Bees Life Histories, Nests and Associates, Smithsonian Press, Washington. Laroca S (1972). Notas sobre a biologia de Hylaeus cecidonastes Moure (Hymenoptera, Apoidea). Rev. Bras. Biol. 32: 285- 290 Ludwig JA e Reynolds JF (1988). Statistical ecology: a primer on methods and computing, John Wiley and Sons, New York. Magurran AE (2004). Measuring Biological Diversity, Blackwell Science, Oxford. Michener CD (1979). Biogeography of the bees. Ann. Missouri Bot. Gard. 66: 277347.
207
Miranda MMB e Andrade TAP (1990). Fundamentos de Palinologia. Imprensa Universitria: Fortaleza. Morato EF, Garcia MVB, Campos LAO (1999). Biologia de Centris Fabricius (Hymenoptera, Anthoporidae, Centridini) em matas continuas e fragmentos na Amaznia Central. Rev. Bras. Zool. 16: 1213-1222. Morato EF e Campos LAO (2000). Efeitos da fragmentao florestal sobre vespas e abelhas solitrias em uma rea da Amaznia Central. Revta Bras. Zool. 17: 429-444. Palma S (1975). Contribucin al estudio de los sifonoforos encontrados frente a la costa de Valparaiso. Aspectos ecolgicos. In: II Simpsio Latinoamericano sobre Oceanografia Biolgica, Univ. DOriente, Venezuela. Perreira M, Garfalo CA, Camillo E, Serrano JC (1999). Nesting biology of Centris (Hemisiella) vittata Lepeletier in southeastern Brazil (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Apidologie. 30: 327-338. Pres-Maluf R (1993). Biologia de vespas e abelhas solitrias, em ninhos-armadilhas, em ViosaMG. Dissertao de mestrado, UFV, Viosa. Raven PH (1979). A survey of reprodutive biology in Onagraceae. New Zealand Journal of Botany 17: 575- 593 Roubik DW (1989). Ecology and natural history of tropical bees, Cambridge University Press, Cambridge. Schlindwein C (2004). Abelhas e Flores: Especialistas so Polinizadores Efetivos? In: 55 Congresso Nacional de Botnica e 26 Encontro Regional de Botnicos de MG, BA, ES, Viosa, MG. Silveira FA, Melo GAR, Almeida EAB (2002). Abelhas Brasileiras: Sistemtica e Identificao, Idmar, Belo Horizonte. Steffan-Dewenter I (2002). Landscape context affects trap-nesting bees, wasps, and their natural enemies. Ecol. Entomol. 27: 631637. Steffan-Dewenter I (2003). Importance of habitat area landscape context for species richness of bees and wasps in fragmented orchard meadows. Conserv. Biol. 17: 10361044. Tscharntke T, Gathmann A, Steffan-Dewenter I (1998). Bioindication using trap-nesting bees and wasps and their natural enemies: community structure and interactions. J. Appl. Ecol. 35: 708719. Viana BF, Silva FO, Kleinert AMP (2001). Diversidade e sazonalidade de abelhas solitrias (Hymenoptera: Apoidea) em dunas litorneas no nordeste do Brasil. Neotrop. Entomol. 30: 245251. Vieira AOS (2002). Biologia reprodutiva e hibridao em espcies sintpicas de Ludwigia (Onagraceae) no Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, UNICAMP, Campinas. Whittaker RH (1965). Dominance and diversity in land plant communities. Science 147: 250260.
208
Abelhas (Hymenoptera, Apoidea) Nidificando em Ninhos-Armadilha na Estao Ecolgica dos Caetetus, Glia, SP
Running title: Abelhas nidificando em ninhos-armadilha Carlos Alberto Garfalo Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto-USP, Ribeiro Preto, SP, Brasil Autor para correspondncia: C.A. Garfalo e-mail: garofalo@ffclrp.usp.br Telefone: (16) 3602-3698 Fax: (16) 3602-4886
Abstract
Trap-nesting bees (Hymenoptera, Apoidea) in the Caetetus Ecological Station, Glia, SP. This paper reports data obtained concerning the occupation of trap-nests by solitary bees in a study carried out in the Caetetus Ecological Station (2220 e 2230 S and 4940 e 4945 W), one of the largest and most important remnants of semideciduous forest in So Paulo state , Brazil. Sampling was made from June 2006 to December 2007 utilizing bamboo canes and tubes made of black cardboard as trap-nests. The traps were inspected once a month with an otoscope. A total of 218 nests were made by nine species belonging to five genera and two families. Tetrapedia diversipes was the most abundant species while Epanthidium sp. occupied only one trap. Trap-nests were occupied from July 2006 to December 2007 with occupation peaks in October-November/06, February, July-August, and October/2007, and lowest values from June to September/2006. No significant correlation was found between the number of nests and temperature and monthly rainfall. Bamboo canes and small tubes made of black cardboard were the trap-nests preferred by species. The natural enemies associated with the nests were Mesocheira bicolor, Coelioxoides exulans, Coelioxoides cf. walteriae, and species of Coelioxys, Leucospis, Anthrax and Meloidae. Comparing the data obtained with those from other studied areas in So Paulo state, may be concluded that the Caetetus Ecological Station is one of the areas poorest in bee species that nest in preexisting cavities. Key Words: Apoidea, abundance, solitary bees, trap-nests, parasitism
Introduo
A floresta estacional semidecidual, caracterizada pela ausncia de conferas e pela perda parcial das folhas no inverno, revestia quase todo o interior do estado de So Paulo, parte de Minas Gerais, Mato Grosso do Sul e Gois, oeste do Paran e Santa Catarina, estendendo-se at o Rio Grande do Sul, na Bacia do Rio Turvo (Ramos et al., 2007). Esta floresta juntamente com a floresta ombrfila densa (da encosta atlntica) e a floresta ombrfila mista (mata de araucria) compem o denominado
209
domnio da Mata Atlntica (Ramos et al., 2007), um dos mais ameaados ecossistemas florestais brasileiros, apresentando atualmente 8% de sua rea original (MMA, 2000). A floresta estacional semidecidual foi o tipo florestal mais rpida e extensamente devastado em toda sua rea de ocorrncia natural. No estado de So Paulo, a devastao dessas florestas ocorreu associada expanso da fronteira agrcola, j que ocupavam os solos de maior fertilidade, em regies com relevo favorvel agricultura. Dos fragmentos remanescentes, poucos tm rea representativa e encontram-se preservados (Durigan et al., 2000). Este estudo examina a riqueza de espcies e abundncia de abelhas que nidificam em cavidades preexistentes e que ocorrem na Estao Ecolgica dos Caetetus, um dos ltimos fragmentos remanescentes significativos daquela extensa formao florestal existente no interior do estado de So Paulo. A presente contribuio parte de um estudo maior objetivando conhecer as comunidades de abelhas que nidificam em cavidades preexistentes em fragmentos de floretas do estado de So Paulo, Brasil.
Material e Mtodos
rea de estudo A Estao Ecolgica dos Caetetus (=EEC) est localizada entre as coordenadas geogrficas 2220 e 2230 S e 4940 e 4945 W, no limite norte da bacia hidrogrfica do mdio Paranapanema. A Estao possui 2176,10 ha e abrange reas dos municpios de Glia e Alvinlndia, SP. O clima, segundo a classificao de Kppen, do tipo Cwa, mesotrmico de inverno seco com temperaturas inferiores a 18oC no inverno e superiores a 22oC no vero. No ms mais seco o total da precipitao no passa de 30 mm, atingindo a precipitao anual de 1.100 a 1.700 mm (Tabanez et al., 2005). A cobertura vegetal apresenta uma alta sazonalidade e uma queda parcial de folhas a partir de algumas rvores durante a estao fria e seca (abril-setembro)(Ramos et al., 2007). A paisagem ao redor da Estao formada por remanescentes de floresta de vegetao nativa, pastagens e plantaes de caf e borracha. Os remanescentes nativos so principalmente de floresta semidecdua juntamente com floresta secundria e algumas reas de transio entre floresta e cerrado (Nunes e Galetti, 2007). Metodologia Conforme descrito por Camillo et al.(1995), os ninhos-armadilha (=NA) usados neste trabalho foram confeccionados com cartolina preta, na forma de pequenos tubos, com uma das extremidades fechadas com o mesmo material. Esses tubos eram de dois tamanhos: os menores, denominados de TP, possuam 5,8 cm de comprimento e 0,6 de dimetro, e os maiores, denominados de TG, tinham 8,5 cm de comprimento e 0,8 cm de dimetro. O outro tipo de NA usado foi gomos de bambu (=GB), com uma das extremidades fechadas por um n, de vrios dimetros e comprimentos. Em maio/06 foram selecionados trs stios para a instalao das estaes de amostragens. Em dois stios, um localizado prximo hospedaria e o outro junto recepo de visitantes, foram instalados dois suportes contendo os NA perfazendo um total de cinco estaes de coletadas identificadas como: EEC-2; EEC-3, EEC-4, EEC-5 e EEC-6. Em setembro do mesmo ano, outros dois stios foram selecionados e cada um deles recebeu uma estao de amostragem, EEC-7 e EEC-8 (Figura 1). Em cada stio foram disponibilizados 40 TP, 40 TG e 120 GB. Os GB foram amarrados em conjuntos de 20 unidades e introduzidos em 6 tubos de PVC enquanto os tubos de cartolina foram introduzidos em orifcios feitos em placas de madeira (cada uma com 40 orifcios). As placas de madeira e os tubos de PVC foram distribudos em suportes de ferro instalados nos locais de amostragens, protegidos de chuva e sol.
210
Figura 1 - Estao Ecolgica dos Caetetus, Glia e Alvinlndia, SP, com indicaes das localizaes das estaes de amostragem.
No perodo de junho de 2006 a dezembro de 2007, uma vez por ms, os NA foram inspecionados com o auxlio de otoscpios e todos aqueles que tinham sido utilizados e completados foram retirados do local, levados para o laboratrio e deixados temperatura ambiente. Para cada ninho coletado um novo NA correspondente era adicionado ao local. No laboratrio, os TP e TG foram introduzidos em tubos de vidro transparente apresentando comprimento com 4 a 6 cm maior que os dos NA e as entradas dos GB foram introduzidas em tubos de polietileno, de dimetros apropriados, com comprimento variando de 8-10 cm, fechados em uma das extremidades com uma rolha de cortia. Conforme os indivduos emergiam, eles se dirigiam para o interior dos tubos de vidro ou tubos de polietileno onde eram coletados. Em seguida, os indivduos eram mortos sob vapor de acetato de etila, alfinetados, etiquetados e depositados na coleo do Depto. de Biologia de FFCLRP.
Resultados
Riqueza de espcies e Abundncia Nove espcies de abelhas, distribudas por cinco gneros, Tetrapedia, Centris, Megachile, Epanthidium e Anthodioctes, e duas famlias, Apidae e Megachilidae, ocuparam 218 NA. Tetrapedia
211
diversipes foi a espcie que apresentou maior atividade de nidificao (67,4% do total de ninhos) seguida por Tetrapedia rugulosa e Centris analis com 9,6% dos ninhos cada uma delas. Epanthidium sp. e Anthodioctes sp. foram as espcies que usaram os NA uma nica vez (Tabela 1). Outros 16 ninhos foram estabelecidos nos NA. Nesses casos, contudo, as espcies no puderam ser identificadas pelo fato dos ninhos terem todos os imaturos mortos ou parasitados. Esses ninhos foram feitos por fmeas de Tetrapedia (n = 8), de Centris (n = 7) e de Megachile (n = 1). Tabela 1 - Espcies de abelhas, tipos de ninhos-armadilha utilizados e total de ninhos construdos na Estao Ecolgica de Caetetus, Glia e Alvinlndia, SP, no perodo de junho de 2006 a dezembro de 2007.
Tipos de ninhos-armadilha utilizados Espcie Tetrapedia diversipes Tetrapedia rugulosa Tetrapedia curvitarsis Centris (Heterocentris) analis Centris (Hemisiella) tarsata Centris (Hemisiella) sp. Megachile sp. Epanthidium sp. Anthodioctes sp. Gomos de bambu 73 9 5 6 4 3 1 1 2 8 Tubos pequenos 74 7 4 14 5 1 1 Tubos grandes
Total de ninhos e (%) 147 (67,4%) 21 (9,6%) 10 (4,7%) 21 (9,6%) 4 (1,8%) 3 (1,4%) 9 (4,1%) 1 (0,5%) 2 (0,9%)
Alm das espcies de abelhas que nidificaram nos NA, indivduos de pelo menos sete espcies de parasitas foram tambm criados a partir dos ninhos. Estas espcies pertencem s famlias Megachilidae e Apidae (Hymenoptera, Apoidea), Leucospidae (Hymenoptera, Chalcidoidea), Bombyliidae (Diptera) e Meloidae (Coleoptera). Tetrapedia diversipes foi a espcie hospedeira com maior nmero de inimigos naturais (Coelioxoides exulans, Coelioxoides cf. waltheriae, Leucopsis sp., Anthrax sp. e colepteros), seguida por Centris (Hemisiella) sp. (Mesocheira bicolor, Coelioxys sp. e Leucospsis sp.), Tetrapedia curvitarsis (Leucospis sp. e colepteros), T. rugulosa (C. cf. waltheriae) e Centris tarsata (M. bicolor). As espcies hospedeiras restantes no sofreram ataques de inimigos naturais. Utilizao dos ninhos-armadilha Das espcies que utilizaram mais de um tipo de NA, Megachile sp. e C. analis utilizaram os TP em maior freqncia, enquanto que T. diversipes, T. rugulosa e T. curvitarsis utilizaram em maior freqncia os GB embora a diferena na utilizao em relao aos TP tenha sido apenas de 1 ou 2 ninhos. Das espcies que utilizaram apenas um tipo de NA, com exceo de Anthodioctes sp, que nidificou em TP, as demais espcies nidificaram apenas em GB (Tabela 1).
212
Fenologia Independente da espcie, os 233 ninhos obtidos foram estabelecidos no perodo de julho/06 a dezembro/07 com uma maior freqncia de nidificao ocorrendo em fevereiro/07, com a construo de 31 ninhos, seguido pelos meses de julho e agosto/07, com 23 ninhos cada um, e pelo ms de outubro, com 22 ninhos. O perodo de junho a setembro/06 foi o que apresentou os menores nmeros de ninhos construdos (Figura 2). O nmero de ninhos no foi correlacionado com a temperatura mdia mensal (r = 0, 27; P = 0,27; n = 19) nem com os valores mensais de precipitao (r = 0,07; P = 0,77; n = 19). Figura 2 - Nmero mensal de nidificaes em ninhos-armadilha por espcies de abelhas na Estao Ecolgica dos Caetetus, Glia e Alvinlndia, SP, no perodo de junho de 2006 a dezembro de 2007.
A espcie mais abundante, T. diversipes, nidificou de outubro de 2006 at dezembro de 2007, apresentando maior atividade em fevereiro de 2007 (Figura 3). Nenhuma correlao foi tambm encontrada entre as atividades de nidificao e os parmetros climticos (r = 0,37; P = 0,12; n = 19, com relao temperatura e r = 0,14; P = 0,57; n = 19, em relao precipitao). As atividades de nidificao de T. rugulosa ficaram restritas a apenas cinco meses do perodo estudado: setembro e outubro de 2006 e julho a setembro de 2007, com maior atividade em agosto/07. Por outro lado, fmeas de T. curvitarsis utilizaram os NA apenas nos ltimos trs meses do perodo: de outubro a dezembro de 2007, em freqncias muito similares.
213
Figura 3 - Nmero mensal de nidificaes por fmeas de Tetrapedia diversipes, na Estao Ecolgica dos Caetetus, Glia e Alvinlndia, SP, no perodo de junho de 2006 a dezembro de 2007.
Utilizao dos ninhos-armadilha por estao de amostragem As estaes EEC-5 e EEC-6, com 74 e 66 ninhos, respectivamente, foram as que apresentaram um maior numero de NA ocupados enquanto as estaes EEC-2, EEC-7 e EEC-8 foram as menos produtivas em nmero de nidificaes (Figura 4). Tetrapedia diversipes, a espcie com maior nmero de ninhos coletados, nidificou em todas as estaes de amostragem, apresentando uma maior atividade na estao EEC-6 (Figura 4). Figura 4 - Nmero total de ninhos e nmero de ninhos de Tetrapedia diversipes coletados em cada uma das estaes de amostragem instaladas na Estao Ecolgica dos Caetetus, Glia e Alvinlndia, SP, no perodo de junho de 2006 a dezembro de 2007.
214
Discusso
O padro de ocupao dos NA pelas espcies de abelhas amostradas nesse trabalho, com a ocorrncia de um acentuado nmero de espcies raras (aqui representadas pelo pequeno nmero de ninhos construdos) e de poucas abundantes (representadas por numerosos ninhos construdos), foi similar quele que tem sido reportado em outros trabalhos feitos no Brasil (Camillo et al., 1995; Garfalo, 2000; Morato e Campos, 2000; Vianna et al., 2001; Aguiar et al., 2005; Buschini, 2006; Gazola e Garfalo, 2008), mostrando que tal padro compartilhado por todas as comunidades. Das espcies amostradas na EEC, C. analis e C. tarsata ocorreram em todas as outras reas j estudadas no estado de So Paulo e das trs espcies de Tetrapedia, curvitarsis s no ocorreu na Estao Ecolgica de Paulo de Faria, Paulo de Faria, e rugulosa s no ocorreu em Paulo de Faria e no Parque Estadual das Furnas do Bom Jesus, Pedregulho. A dominncia de T. diversipes observada neste trabalho, foi tambm relata por Camillo et al. (1995) para um dos habitats amostrados na Fazenda Santa Carlota e por Garfalo (2000) para a Serra do Japi. Das reas estudadas no estado de So Paulo, a EEC teve um nmero de espcies ocupando os NA similar quele reportado por Gazola e Garfalo (2008) para a Estao Ecolgica de Paulo de Faria. Ambas as Estaes s no foram as mais pobres em espcies, no estado, porque no estudo de Alves-dos-Santos (2003), em uma pequena floresta semidecidual secundria localizada no Campus da USP na cidade de So Paulo, apenas seis espcies de abelhas foram amostradas. Por outro lado, embora sendo similar ou mais rica em espcies do que a EEC e sendo amostradas durante 24 meses, os NA ocupados nas Estaes Ecolgicas de Jata, Luis Antnio, e de Paulo de Faria, e no Parque Estadual das Furnas do Bom Jesus e na Serra do Japi, Jundia, foram em nmero inferior quele obtido nesse trabalho. Entre os vrios fatores influenciando a riqueza de espcies e abundncia nas amostragens feitas com NA (Gathmann et al., 1994; Tscharntke et al., 1998; Aguiar e Martins, 2002), a localizao dos stios de amostragem (Camillo et al., 1995; Aguiar e Martins, 2002), a disponibilidade de substratos naturais para nidificao (Frankie et al., 1988; Morato e Campos, 2000; Viana et al., 2001) e o nmero de stios de amostragem devem ter um papel significativo naqueles parmetros. As amostragens sendo realizadas em vrios locais de uma mesma rea, como nesse trabalho, aumenta, certamente, o nmero de ninhos obtidos e, provavelmente, o nmero de espcies amostradas. Essa diferena metodolgica poderia explicar, pelo menos em parte, o maior nmero de ninhos obtidos nesse trabalho do que aqueles encontrados naquelas outras reas citadas anteriormente. Por outro lado, mesmo amostrando vrios locais da rea, os nmeros aqui apresentados quanto riqueza de espcies e a abundncia delas so menores do que aqueles obtidos nos estudos realizados na Fazenda Santa Carlota, Cajuru, por Camillo et al. (1995), a partir de um nico local de amostragem para cada ambiente estudado. Nesses casos, o resultado final deve estar diretamente relacionado com a riqueza e abundncia das espcies ocorrendo na rea o que sugere que a Fazenda Santa Carlota era um habitat muito mais rico e com maior abundncia de recursos disponveis s espcies do que a EEC. Evidentemente, a confirmao disso s poderia ocorrer a partir de estudos mostrando tais diferenas. Em relao localizao dos stios de amostragem, tem sido enfatizado que ambientes antropognicos so preferidos por inmeras espcies (Camillo et al., 1995; Aguiar e Martins, 2002; Gazola, 2003) o que resulta, em muitos casos, em coletas significantemente abundantes de ninhos e amostragem de espcies. Esse fato foi observado nesse trabalho ao ser constatado que as maiores freqncias de nidificao assim como maior diversidade de espcies nidificando ocorreram exatamente nas estaes localizadas ao lado das edificaes que servem de alojamentos para pesquisadores (EEC-3e 4) e recepo aos visitantes (EEC-5 e 6). Informaes a respeito da disponibilidade de substratos naturais
215
para nidificao no so disponveis para a EEC o que dificulta uma anlise desse parmetro em relao freqncia de utilizao dos NA. A utilizao de um NA por fmea de qualquer espcie depende, certamente, pelo menos, do dimetro dele. A utilizao dos gomos de bambu por quase todas as espcies ocorre por eles apresentarem dimetros variveis de forma a preencher os requisitos de escolha de cavidade de fmeas de vrias espcies. Com exceo de Megachile sp. e C. analis, as quais ocuparam unicamente ou com maior freqncia os TP, as outras espcies que utilizaram dois ou trs tipos de NA nidificaram em freqncias muito similares em dois deles, no evidenciando uma clara opo por um determinado tipo de cavidade. Ocorrncia de sazonalidade em insetos so caractersticas populacionais relacionadas com fatores climticos e disponibilidade de recursos (Young, 1982; Oertli et al., 2005) e tem sido reportada por vrios autores Frankie et al., 1998; Camillo et al., 1995; Pereira et al., 1999; Viana et al., 2001; Gazola e Garfalo, 2003; Aguiar e Garfalo, 2004; Aguiar et al., 2005; Thiele, 2005) trabalhando com NA. No perodo de desenvolvimento do presente trabalho no foram observadas diferenas marcantes nas freqncias de nidificaes entre as estaes fria/seca e quente/mida como tambm nenhuma correlao entre os fatores climticos com as atividades de nidificao das abelhas. interessante ressaltar que em ambas as estaes ocorreram picos de ocupao dos NA. Na estao quente/ mida ocorreu um pico no ms de fevereiro/07 enquanto na estao fria/seca os meses de julho e agosto apresentaram um elevado nmero de nidificaes. Por outro lado, no perodo compreendido de outubro/06 a setembro/07, T. diversipes mostrou uma maior atividade de nidificao na estao quente/mida (outubro/06-maro/07) construindo 66,2% do total de ninhos feitos naquele perodo. Embora no significantemente acentuada, esses dados sugerem uma tendncia para uma sazonalidade. Resultado similar foi reportado por Camillo (2005) para as atividades de T. diversipes no habitat da Fazenda Santa Carlota onde esta espcie foi dominante. O pouco conhecimento taxonmico sobre as espcies de inimigos naturais que atacaram os ninhos das abelhas que nidificaram na EEC dificulta uma anlise comparativa com as informaes j disponveis na literatura. Contudo, a ocorrncia de espcies de Coelioxoides associadas s espcies de Tetrapedia tem sido reportada por outros autores (Gazola, 2003; Alves-dos-Santos, 2003; Camillo, 2005; Aguiar et al., 2005) assim como a de Mesocheira bicolor associada com espcies de Centris (Aguiar e Martins, 2002; Aguiar et al., 2005; Gazola e Garfalo, 2008). Espcies de Leucospis, Coelioxys, Anthrax e colepteros melodeos so conhecidos como associados a ninhos de vrias espcies de abelhas que nidificam em cavidades preexistentes.
Agradecimentos
Ao Jos Carlos Serrano, pelo auxlio nos trabalhos de campo e no laboratrio e pela identificao da maior parte do material obtido, e Edilson Simo Ribeiro da Silva, pelo auxilio nos trabalhos de campo. Ao Instituto Florestal de So Paulo pela permisso para o desenvolvimento deste trabalho; aos funcionrios da Estao Ecolgica dos Caetetus pelo apoio logstico. A FAPESP pelo apoio ao desenvolvimento deste trabalho
Referncias
Aguiar AJC and Martins CF (2002). Abelhas e vespas solitrias em ninhos-armadilha na Reserva Biolgica Guaribas (Mamanguape, Paraba, Brasil). Rev. Bras. Zool. 19: 101-116. Aguiar CM and Garfalo, CA (2004). Nesting biology of Centris (Hemisiella) tarsata Smith (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Rev. Bras. Zool. 21: 477-486.
216
Aguiar CM, Garfalo CA and Almeida GF (2005). Trap-nesting bees (Hymenopera, Apoidea) in reas of dry semideciduous forest and caatinga, Bahia, Brazil. Rev. Bras. Zool. 22: 1030-1038. Alves-dos-Santos I (2003). Trap-nesting bees and wasps on the University Campus in So Paulo, Southeastern Brazil (Hymenoptera: Aculeata). J. Kansas Entomol. Soc. 76: 328-334. Buschini MLT (2006). Species diversity and community structure in trap-nesting bees in Southern Brazil. Apidologie 37: 58-66. Camillo E (2005). Nesting biology of four Tetrapedia species in trap-nests (Hymenoptera, Apidae, Tetrapediini). Rev. Biol. Trop. 53: 175-186. Camillo E, Garfalo CA, Serrano JC e Muccillo G (1995). Diversidade e abundncia sazonal de abelhas e vespas solitrias em ninhos armadilhas (Hymenoptera: Apocrita, Aculeata). Rev. Bras. Entomol. 39:459-470. Durigan G, Franco GADC, Saito M e Baitello JB (2000). Estrutura e diversidade do componente arbreo da floresta na Estao Ecolgica dos Caetetus, Glia, SP. Rev. bras. Bot.23: 371-383. Frankie GW, Vinson SB, Newstrom LE and Barthell JF (1988). Nest site and habitat preferences of Centris bee species in Costa Rica dry forest. Biotropica 25: 322-333. Frankie GW, Thorp RW, Newstrom LE, Rizzardi MA, Barthell JF, Griswold TL, Kim JY and Kappagoda S (1998). Monitoring solitary bees in modified wildland habitats: implications for bee ecology and conservation. Environ. Ecol. 27:1137-1148. Garfalo CA (2000). Comunidades de abelhas (Hymenoptera, Apoidea) que utilizam ninhos-armadilhas em fragmentos de matas do Estado de So Paulo. Anais do IV Encontro sobre Abelhas, Ribeiro Preto, 121-128. Gazola AL (1993). Ecologia de abelhas e vespas solitrias (Hymenoptera, Apoidea) que nidificam em ninhosarmadilha em dois fragmentos de floresta estacional semidecidual no Estado de So Paulo. Dissertao de Mestrado. Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto,USP, Ribeiro Preto. Gazola AL and Garfalo CA (2003). Parasitic behavior of Leucospis cayennensis Westwood (Hymenoptera: Leucospidae) and rates of parasitism in ppulations of Centris (Heterocentris) analis (Fabricius)(Hymenoptera: Apidae: Centridini). J. Kansas Entomol. Soc. 76: 131-142. Gathmann A, Greiler HJ and Tscharntke T (1994). Trap-nesting bees and wasps colonizing set-aside fields: succession and body size, management by cutting and sowing. Oecologia 98:8-14. Gazola AL e Garfalo CA (2008). Trap-nesting bees (Hymenoptera: Apoidea) in Forest fragments of the State of So Paulo, Brazil. Genet. Mol. Res. (in press). MMA (Ministrio do Meio Ambiente) (2000). Avaliao e aes prioritrias para a conservao da biodiversidade da Mata Atlntica e Campos Sulinos. MMA, Braslia. Morato EF and Campos LAO (2000). Efeitos da fragmentao florestal sobre vespas e abelhas solitrias em uma rea da Amazni Central. Rev. Bras. Zool. 17: 429-444. Nunes MFC e Galetti M (2007). Use of forest fragments by blue-winged macaws (Primolius maracana) within a fragmented landscape. Biodivers. Conserv. 16: 953-967. Oertli S, Mller A and Dorn S (2005). Ecological and seasonal patterns in the diversity of a species-rich bee assemblage (Hymenoptera: Apoidea: Apiformes). Eur. J. Entomol 102: 53-63. Pereira M, Garfalo CA, Camillo E and Serrano JC (1999). Nesting biology of Centris (Hemisiella) vittata Lepeletier in southeastern Brazil (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Apidologie 30: 1-12. Ramos VS, Durigan G, Franco GADC, Siqueira, MF e Rodrigues RR (2007). rvores da Floresta Estacional Semidecidual: Guia de Identificao. IF. Sr. Reg., So Paulo, n. 31, p. 137-141. Tabanez MF, Durigan G, Keuroghlian A, Barbosa AF, Freitas CA, Silva CEF, Silva DA, Eaton DP, Brisolla G, Faria HH, Mattos IFA, Lobo MT, Barbosa MR, Rossi M, Souza MG, Machado RB, Pfeifer RM, Ramos VS, Andrade WJ e Contieri WA (2005). Plano de Manejo da Estao Ecolgica dos Caetetus. IF Sr. Reg., So Paulo, n. 29, p. 1-104. Thiele R (2005). Phenology and nest site preferences of wood-nesting bees in a Neotropical lowland rain forest. Stud. Neotrop. Fauna Environ. 40: 39-48. Tscharntke T, Gathmann A and Steffan-Dewenter I (1998). Bioindication using trap-nesting bees and wasps and their natural enbemies: community structure and interactions. J. Appl. Ecol. 88: 592-599. Viana BF, Silva, FO and Kleinert AMP (2001). Diversidade e sazonalidade de abelhas solitrias (Hymenoptera: Apoidea) em dunas litorneas no nordeste do Brasil. Neotrop. Entomol. 30: 245-251. Young AM (1982) Population biology of tropical insects. Plenum Press. New York, USA.
SI MPSIO 10
CAUSAS, CONSEQNCIAS E CONTROLE DE ENXAMEAES EM APIS MELLIFERA
Coordenador: Lionel Segui Gonalves
218
Main Factors Related to Swarming, Absconding and Migration of Honey Bees And How to Control Them
Zbigniew Lipiski Janiny Wengris Str. 8, 10-765 Poland., tel.: 0048-604-645-390 e-mail: Lipinski@sprint.com.pl There are three main types of adaptive phenomenon of nest abandonment by honeybee swarms. Namely, swarming, absconding and migration (Hepburn and Radloff 1998). The expression of these behaviours by highly agitated honeybees is usually preceded by expression of a series of characteristic stereotypical behaviours (e.g. engorgement with nectar or honey, worker piping, dances) (Winston 1987). In general most of these behaviours can be classified either as subjective or objective symptoms of the emotional nature of the honeybee (Lipinski 2006a) Considering the common adaptive manner of expression of all types of nest abandonment by honeybee swarms, the whole process governing this phenomenon was called the adaptive process of nest abandonment by swarms (APNAS) by Lipiski (2001). However, due to some repeatable differences in the repertoire of behaviours performed by bees before nest abandonment, this phenomenon was categorized by this author (2001) into: (1) - swarming process of nest abandonment (SPNAS), (2) - absconding process of nest abandonment (APNAS) and (3) - migration process of nest abandonment (MPNAS). Interestingly, despite some intermediate typical and atypical forms of SPNAS, APNAS and MPNAS (Lipinski 2001), all of these phenomena are often enriched by such adaptive behaviours as: amalgamation of swarms in the air, usurpations of colonies by swarms etc (reviewed by Lipiski 2001). Significantly for the process of complex adaptation, all types of APNAS are expressed in terms of ongoing stress (Lipinski 1999, 2001, 2002). This psychobiological phenomenon, well known to the whole animal kingdom (Solomon et al 1998), includes invertebrates (Stefano 2002). Interestingly due to the psychophysiological background of stress reactions, the four groups of stimulations, also called factors, can be identified as being responsible for APNAS. These factors are as follows: 1. the level of genetic (inborn) propensity of a given geographical race of bees to nest abandonment in terms of swarming stress (described by Lipinski 2001). 2. the potency of environmental (e.g. lack or surplus of nectar or pollen, lack of water, high air pressure and temperature, robbing by other bees, strong odours, dark coloration of objects) and/or social stress (e.g. overgrowing of the nest by bees, social competition, queen loss ) (rev. by Winston 1987, Lipinski 2001). 3. the speed of decay of calming activity of some social (e.g. queen and young brood pheromones) and environmental (e.g. propolis) stimulations .(Lipiski 2006b), 4. accuracy in honeybee housing and management (e.g wrong hive ventilation, lack of space,combs, excessive smoking and hive examination Morse and Hooper 1985, Winston 1987) in terms of their growing up environmental (Morse and Hooper 1985, Winston 1987) and social stress (Lipinski 2001).
219
Considering that the emotional nature of the honeybee is strongly supported by its individual and per se colonial genetic make up, not only subspecies or races of bees, but also individual colonies of a given race can differ between each other in their sensitivity to stress stimulations and ability to fall into APNAS. As a result of this, highly emotional Africanized honey bees react faster to threatening overstimulation than the quieter European bees. Due to the respectively higher level of metabolism Africanized (A. m. scutellata) bees have compared to European ones. This is so great, that African workers and queens not only develop faster into imago than European bees (Abramson 2002), but also are more defensive and more prone to swarming (Caron 2001). Unfortunately for APNAS control, growing stress makes bees more resistant to the calming properties of some social (e.g. pheromones of queen substance) and environmental (e.g. nectar, propolis ) calming factors (Lipiski 2006b). This is because emotional agitation of stressed bees and the accompanying disturbance of cognitive processing of information can spark anxiety and subsequently halt expression of trophallaxis behaviour needed for the efficient spread of the mentioned calming substances among bees, which is finally manifested by swarm lift off (Lipiski 2001.2006a). Thus, not only emotional but also affective aspects of cognitive perception of stress stimulations influence the discussed process of APNAS, especially in the case of SPNAS. To which young, stress sensitive bees are particularly prone (Lipiski 2001). This is additionally confirmed by the fact that not only the genetic make up of honeybees, but also the psychobiological value of stress stimulation, in view of previous experiences and actual environmental and social context strongly influence the affective aspects of cognitive perception in honeybees (reviewed by Lipinski 2006a). Which means that emotional agitation of the colony not always means swarm release in the nearest future. All types of APNAS are some kinds of resultant of complicated psychobiological process of simultaneous emotional/affective perception of many different external and internal stress stimulations by the honeybee brain. However, in the case of typical MPNAS (stable migration) perception of lack of food, as the main environmental stimulation clearly dominates over other factors (Lipinski 2001). Considering that the stress factors mentioned earlier can evoke SPNAS and APNAS in respectively less emotional European bees, it becomes obvious that the general control of swarming, absconding and migration of honeybees depends on the effectiveness of their protection from excessive exposition to the long list of stress stimuli (reviewed by Lipiski 2001) All in connection with control of their genetic (calm) make up, and proper housing and management as well. The only problem which is still not fully solved is how to control SPNAS in highly emotional/affective strains of tropical bees Especially crossbreeds of Apis. mellifera. scutellata with European honey bees, known as Africanized bees (Goncalvez 1974). Nowadays, the limited selection of calm strains of these bees -in terms of neverlasting natural selection of drones for opposite emotional/affective traitsmakes such an enterprise difficult. Nevertheless, it can be observed that (1) - feeding can delay or even stop hunger absconding (migration) of A. cerana bees (Olsson 1989), (2) - keeping of Africanised bees on higher attitudes diminishes their defensiveness (reviewed by Caron 2001, Lipinski 2001) These observations clearly indicate that control of SPNAS in tropical honeybees also depends on the effectiveness of their protection from excessive exposition to stress stimuli. Moreover fact that colonies with African queens mated to European drones are less defensive (Caron 2001) indicates that selection can facilitate (to some extent) the control of APNAS development in these kind of bees. Observations made in South Africa in apiaries consisting of feral colonies of Apis mellifera scutellata (Kolasiski personal info) indicates that is possible to achieve up to a 40% higher honey harvest in colonies of these bees due to (1) reconstruction of standard hives and (2) - biotechnical manipulation with queen pheromones. The main purpose of this innovation is to force bees into nectar collecting instead of brood rearing, in terms of more efficient suppression of APNAS. It means
220
through the better contact of especially forager and honey processing bees with the calming properties of pheromones of queen substance - understood as a full blend of its pheromones. Considering that Africanized worker bees suffer excessive agitation during nectar collecting (Caron 2001). The other APNAS control method which works well in feral colonies of pure feral Apis mellifera scutellata bees depends on keeping these bees in mentioned reconstructed hives as artificially created working colonies with a supply of brood and worker bees from maternal colonies, under the protection of an excessively enriched bouquet of queen pheromones. In summary, the future of control of swarming, absconding and migration behaviours of tropical honeybees apart from the use of standard control measures, should undergo a more sophisticated method of selection for less emotional and less effective traits. It seems also that contemporary methods of investigation of unconditional and conditional learning in honeybees can be useful for this purpose. Considering lower levels of learning a proboscis conditioning task in African honey bees (reviewed by Abramson 2002). In the above context the mentioned changes in hive construction especially in colonies of African and Africanized bees, seems to be very useful.
References
Abramson, C.I. (2002) A scanning electron microscopy atlas of the Africanized killer honey bee of photographs for the general publics. Artexpress Editora e Grafica. Campina Grande. Brasil. Caron, D. (2001) Africanized honey bees in the Americas. A.I. Root Company, Medina, OH USA. Goncalves, L.S. (1974) The introduction of the African bee (Apis mellifera adansonii) into Brazil and some comments on their spread in South America. Am. Bee J. 114: 414-415,419. Hepburn, H.R., Radloff, S.E. (1998) Honeybees of Africa. Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg Lipiski, Z. (1999). Twelve thesis of the first complex theory of swarming in honey bees. Proceedings of XXXVI Congress of Apimondia,Vancouver 12-17 Sept.1999, 284. Lipiski, Z. (2001) Essence and mechanism of nest abandonment by honeybee swarms. Blenam. Olsztyn, Poland. Lipiski, Z. (2002) Psychobiological aspects of adaptive swarming behaviour in honey bees. Proceedings of the Six European Bee Conference. Cardiff, 2002.135-139. Lipinski, Z. (2005) Emotional nature of adaptive nest abandonment by honeybee swarms. Proceedings of 3rd European Congress on Social Insects. St. Petersburg, Russia, 22-27. August 2005. 80. Lipiski, Z. (2006a) The emotional nature of the honey bee. Journal of Apicultural Science 50(1): 49-62. Lipiski Z. (2006b). The calming properties of the honeybee queen, young brood and older bees. Journal of .Apicultural Science. 50(1): 63-70. Morse, R.A., Hooper T. (1985) The illustrated Encyclopaedia of Beekeeping. E.P Dutton Inc New York. First Edition. Olsson, J. (1989). Apis cerana management methods for prevention of absconding. Proceedi- ngs of the Fourth International Conference on Apiculture in Tropical Climates, Cairo , Egypt 6-10 November 1988. IBRA (1989) 453-457. Solomon P.,Berg L.R., Martin D.W., Villee C.A. (1998) Biology. Third edition. Sounders College Publishing, USA. Stefano G.B. (2002) The Blueprint for Stress can be found in Invertebrates Neuroendocri-nology Letters. 23: 85-93. Winston ML. (1987) The biology of the honey bee. Harvard University Press. Cambridge, MA, USA.
221
Enxameao Induzida por Aumento de Temperatura em Abelhas Africanizadas

Gesline Fernandes de Almeida e Lionel Segui Gonalves
Depto de Biologia da FFCLRP USP, Ribeiro Preto SP.
A atividade de abelhas melferas est definida como sada ou entrada de abelhas do ninho, com ou sem material (plen, nctar, etc). A entrada ou no de materiais est diretamente relacionada com os fatores biticos e abiticos, sendo importante uma boa interao entre esses fatores. Atravs desses fatores, alguns comportamentos das abelhas podem ser analisados, bem como os comportamentos enxameatrios. A enxameao tem trazido grandes prejuzos aos apicultores brasileiros e em especial nordestinos que registram perdas anuais de 50% ou mais por abandono. So vrios os fatores que podem influenciar no mau funcionamento da colnia e desencadear uma enxameao, tais como: falta de gua, stress, temperatura, umidade relativa, falta de alimento, etc. Estudos de monitoramento e registro das atividades dirias, assim como de temperatura e umidade relativa podem auxiliar em estudos com comportamento enxameatrio. Com o intuito de controlar o comportamento enxameatrio de abandono das abelhas africanizadas, neste estudo analisamos o comportamento de resposta de colnias de abelhas africanizadas durante a enxameao induzida por altas temperaturas. Os experimentos foram realizados no campus da USP de Ribeiro Preto SP e na Fazenda Experimental da UFERSA em Mossor RN. Foram utilizadas, para cada repetio, cinco colnias de abelhas africanizadas (Apis mellifera L.) instaladas em ncleos de fecundao tipo Langstroth (3 controle e 2 tratamento). Sensores de temperatura e umidade relativa interna foram instalados em todas as colnias, na regio central da cria, bem como no ambiente externo. Todas as colnias tiveram suas atividades de vo monitoradas por detectores de atividade (Apidmetro), e os dados foram enviados ininterruptamente dor dia para um software ao longo de 24 horas at a finalizao completa da enxameao induzida. Duas colnias experimentais sofreram induo a enxameao por aumento de temperatura ao mesmo tempo, proporcionada por uma cmara climtica dotada de sensores de temperatura e apidmetros. Foram realizadas 9 repeties; com as temperaturas de induo variando de 28 a 50 C, das 8:00 s 18:00h. Os resultados revelam que o aumento de temperatura (41C) provoca a sada em massa dos indivduos da colnia deixando cria e alimento, e, portanto, indicam abandono. A deciso de grupo para a partida de grande importncia e a comunicao intensa, principalmente minutos antes do vo e na formao da nuvem de abelhas. A temperatura e umidade relativa tm um efeito direto sobre a atividade de vo das colnias de abelhas africanizadas, como demonstrado nos registros dos ciclos.
Agradecimentos
CAPES, CNPq, FAPESP e SEBRAE
222
Communication Signals Used in Queen Replacement and Colony Relocation Decisions in Honey Bees
Stanley Scott Schneider Department of Biology, University of North Carolina, Charlotte, NC 28223, USA Colony reproductive decisions in social insects often require extensive interactions between sterile workers and reproductive castes. Here we investigate how workers in colonies of African and European honey bees use two communication signals, the vibration signal and worker piping, to influence (1) the behavior of the laying queen during swarming and colony relocation to a new nest site, (2) the rearing and development of virgin queens in queen cells, and (3) the behavior and fighting interactions of emerged virgin queens during the queen-replacement process. We investigated worker interactions with laying queens by examining vibration signal and piping activity in four European observation colonies preparing for reproductive swarming, and then inside the resulting swarm clusters. Workers performed vibration signals on the laying queens at variable, but increasing rates throughout the 2-4 weeks preceding swarm departure from the natal nests. Laying queens respond to the signal with increased locomotion, which in combination with reduced feeding from workers, may help to gradually prepare her for flight, through increased weight loss and perhaps increased responsiveness to stimuli that promote leaving the nest. Workers also performed piping on laying queens during the swarm-preparation period and there was always a pronounced increase in piping activity during the final 30-60 min before the issue of the primary swarm. Piping may cause queens to warm their flight muscles in preparation for flight and may be the signal that triggers immediate departure. When inside the swarm cluster, laying queens receive few interactions from workers and rarely receives vibration signals. However, during the final 2-3 hours before swarm lift off, the queen receives increasing piping activity from workers and is increasingly contacted by waggle dancers for nest sites, some of which pipe her. Thus, worker use a combination of vibration signals and piping to prepare the queen for flight and trigger departure with the primary swarm, and then use piping to stimulate queen flight during relocation to the new nest site. In combination, these two signals enable workers to coordinate queen behavior with colony reproductive and movement decisions. We observed worker-queen interactions during the queen-replacement process in 9 African and 12 European colonies. Workers often performed vibration signals on queen cells (worker piping on queen cells has not been observed). Queen cells that are vibrated at higher rates were more likely to produce emerged VQs, suggesting that the signal may have promoted queen developmental success. However, the function of vibration signals performed on queen cells is unknown. Emerged VQs frequently received vibration signals from workers, sometimes at extremely high rates, but there was tremendous variability in the vibration rates observed among VQs within the same colony and between different colonies. Much of this variability depended upon whether or not colonies produced afterswarms. In colonies without afterswarms, the queen replacement process was completed in 24-48 hours, the first-emerging virgin queen (VQ) typically inherited the natal nest even if multiple queens emerged, workers performed few vibration signals on emerged queens, and
223
all signaling activity was directed toward early emerging VQs. In contrast, if colonies did produce afterswarms, the queen replacement process required 5-6 days, there was no advantage for firstemerging queens, vibration rates on emerged queens were 25 times greater, and signaling activity was directed toward all VQs. Although vibration signal activity was more pronounced in colonies with afterswarms, the signal was consistently associated with increased VQ survival under all conditions. These trends were exhibited similarly in the African and European colonies, suggesting that they have broad applicability to queen-replacement decisions over a range of environmental and racial conditions. Our results suggest that worker behavior is a major determinant for the outcome of queen replacement, either through reduced interactions that allow first-emerged queens to rapidly eliminate rivals, or through increased use of interactions such as the vibration signal, which may allow workers to influence the ultimate fate of each emerged VQ. These behavior patterns may reflect the roles of cooperation and conflict between workers and queens in shaping honey bee reproductive decisions.
224
Como os Comportamentos de Migrao e Abandono das Abelhas Africanizadas Tornaram Possvel a Apicultura no Nordeste do Brasil
1
Breno Magalhes Freitas1; Raimundo Maciel Sousa2; Isac Gabriel Abraho Bomfim1 Departamento de Zootecnia CCA, Universidade Federal do Cear, C.P. 12168, Fortaleza CE, Brazil. 60.021-970. 2 Instituto Centro de Ensino Tecnolgico Centec, Sobral CE, Brazil. 62.040-730. E-mail: rdomaciel@yahoo.com.br Autor para correspondncia: Breno Magalhes Freitas. E-mail:freitas@ufc.br
Abstract
How absconding and migratory behaviors of feral Africanized honey bee (Apis mellifera l.) made beekeeping possible in NE Brazil. We investigated the annual movements of feral Africanized honey bee (Apis mellifera L.) colonies in the state of Cear, Brazil aiming to understand seasonal variation in their population. Arrival and absconding of Africanized honey bee (AHB) colonies in the semiarid county of Canind and humid city of Fortaleza (120 km apart) were recorded weekly from January 1999 to December 2001, and the data compared to rainfall records in both areas. Results showed that AHB colonies only nest in the semiarid during the rainy season and abscond during the dry season, in opposition to observations taken in Fortaleza. Only 5% colonies remained in the semiarid area for the whole year due to ant (Camponotus sp.) attacks and shortage of nectar and water during the dry season, most colonies migrating to coastal areas where the weather is milder and many plant species bloom at that time of the year. Excessive rainfall probably pushes AHB colonies back to semiarid during the rainy season. We concluded that absconding and migration are strategies that allow AHB colonies to survive in semiarid NE of Brazil, in opposition to European honeybees that never succeeded in establishing wild colonies in the region. Palavras-chave: absconding, migration, semiarid, survival strategy.
Introduo
A abelha melfera Apis mellifera L. uma espcie de abelha extica s Amricas trazidas por colonizadores europeus. No Brasil, acredita-se que a primeira introduo ocorreu em meados do sculo XIX, quando abelhas da raa europia A.m. mellifera foram trazidas de Portugal para o Estado do Rio de Janeiro e dali disseminadas para o Sul e Sudeste do pas. Posteriormente outras raas como A. m. ligustica, A. m. carnica e A. m. caucasica vindas da Europa e/ou Estados Unidos tambm foram trazidas para o pas (Wiese, 2005). No entanto, nas demais regies do Brasil, colnias dessas abelhas eram pouco comuns e geralmente restritas a pequenos criatrios pouco tecnificados. As abelhas melferas europias (AME) nunca obtiveram sucesso em estabelecer colnias silvestres no Nordeste do Brasil devido ao clima semiAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
225
rido predominante na maior parte desta regio. Por causa deste fato, a apicultura na regio restringiu-se a poucas reas costeiras e montanhosas, cujas condies ambientais eram toleradas pelas AME. Apenas aps a chegada das abelhas melferas africanas/africanizadas (AMA) nos anos 60 que foi estabelecida uma populao silvestre na caatinga e assim a apicultura prosperou (Freitas, 1991). Caatinga uma vegetao arbustiva que cobre a maior parte do nordeste brasileiro, com uma rea aproximada de 834.000 km2 (Andrade-Lima, 1981). O clima semi-rido, com duas estaes distintas ao logo do ano: a estao chuvosa (4-6 meses) e a estao seca (6-8 meses), dependendo do ano. Durante a estao seca, a luz solar intensa, as temperaturas chegam a atingir 37C, a gua se torna escassa e a maioria das espcies de plantas perde suas folhas (Arajo-Filho, 1990). O termo caatinga vem da lngua indgena Tupi. De acordo com Andrade-Lima (1981), caatinga deriva das palavras caa = vegetao ou floresta e tinga = branca, e significa floresta branca ou plida. Porm Lima-Verde (informao pessoal) acredita que o termo originado das palavras caa e tininga = seca, assim significando floresta ou vegetao seca. Esta ltima explicao parece mais provvel por causa das condies ridas que prevalecem na rea na maior parte do ano. A vida na caatinga durante a estao seca difcil para as colnias de abelhas melferas, devido ao longo perodo sem chuva e pouqussimas floradas. Contudo, as AMA esto hoje em dia entre os habitantes mais comuns da caatinga. Observaes preliminares mostraram que a presena de colnias silvestres de AMA na caatinga forte durante a estao chuvosa, mas elas se tornam escassas no perodo seco (Kerr, 1971; Sousa et al., 2000). O extrativismo predatrio de mel tem sido culpado pela forte reduo do nmero de colnias residindo na caatinga aps a estao chuvosa, mas um estudo realizado por Sousa et al. (2000) no municpio de Caridade - CE, monitorando 31 colnias silvestres protegidas da ao dos caadores de mel, mostrou que apenas 10% dessas colnias no abandonaram ou morreram durante a estao seca. Kerr (1971) sugeriu que as colnias de AMA poderiam migrar da caatinga para reas onde as condies ambientais fossem menos severas durante o perodo mais crtico do ano. Termos como enxameao, abandono e migrao tm sido largamente utilizados na literatura sobre abelhas e freqentemente empregados como sinnimos, embora signifiquem eventos distintos. Neste trabalho, o termo enxameao utilizado para significar uma diviso de carter reprodutivo em colnias de AMA, pela qual parte das operrias deixa o ninho junto com a rainha antiga em busca de um novo local, enquanto que as outras operrias permanecem na colnia com a nova rainha; abandono quando todas as abelhas adultas deixam o ninho para no mais retornarem a ele; enquanto que migrao significa o movimento de uma colnia de AMA entre regies ecologicamente distintas. Comportamentos como abandono e migrao tem sido relatados para outras espcies de abelhas melferas, como A. dorsata e A. laboriosa, em vrias partes do mundo (Seeley, 2006; Ahmad, 1989a e b; Winston, 2003). Porm pouco conhecido sobre as estratgias de sobrevivncia das abelhas africanizadas no semi-rido do Brasil, estratgias essas que as permitiram colonizar e prosperar na caatinga, enquanto que as AME apesar de terem sido introduzidas bem antes- falharam em se estabelecer na caatinga.
Material e mtodos
Para identificar possveis padres migratrios das AMA na regio nordeste do Brasil e determinar a importncia desses movimentos na habilidade dessas abelhas sobreviverem de modo silvestre nas condies do semi-rido brasileiro, foram feitas observaes nas cidades de Fortaleza (034302 S e 383235 N) e Canind (042132 S e 391842 N). Fortaleza a capital do Estado do Cear, est situada no litoral e cobre uma rea de 336 km2. Sua temperatura mdia de 23C, e durante a estao seca do ano apresenta florescimento de vrias espcies vegetais, tais como mangueira (Mangifera indica L.), cajueiro (Anacardium occidentale L.), coqueiro (Cocos nucifera L.), entre outras. Canind est situada
226
120 km ao sul de Fortaleza, seu clima semi-rido com uma temperatura mdia de 27C, e suas plantas florescem principalmente durante o perodo chuvoso (Freitas, 1991; Funceme, 1997). A chegada e o abandono das colnias de AMA uma rea de 1 km2 em Canind foram registradas semanalmente durante trs anos; de janeiro de 1999 at dezembro de 2001. As colnias tambm foram monitoradas para registrar atividades de vo e ataques de pagas e predadores. Durante o mesmo perodo, todas as chamadas legtimas recebidas pelo corpo de bombeiros em Fortaleza, solicitando a remoo de enxames de abelhas, foram checadas e registradas. Este mtodo de monitoramento de chegada de enxames Fortaleza provou ser muito eficiente, pois normalmente os cidados temem as AMA e avisavam a presena das mesmas aos bombeiros assim que qualquer enxame fosse visto. Dados coletados em Canind e Fortaleza foram comparados aos registros pluviomtricos em ambas as reas.
Observaes mostraram que a pluviosidade na cidade de Canind durante o perodo estudado foi menor do que a mdia histrica (35 anos) da rea, especialmente no ano de 1999 e 2001 (Tabela 1). Porm, em Fortaleza, a pluviosidade entre 1999 e 2001 foi similar a mdia histrica (Tabela 2). A chegada e nidificao de enxames de AMA em Canind aconteceram apenas durante o perodo chuvoso, entre os meses de janeiro e maio (Tabela 3). Tabela 1 Pluviosidade (mm) no municpio de Canind, Cear, Brasil, entre 1999 e 2001, e a mdia histrica de um perodo de 35 anos.
Ano 1999 2000 2001 Mdia Mdia histrica Jan 8,8 124,4 2 3,9 52,4 83,3 Fev 32,0 120,9 6,4 53,1 146,8 Mar 152,9 122,3 113,5 129,5 185,6 Abr 28,4 154,5 220,2 134,4 169,7 Mai 67,2 38,5 5,0 36,9 89,0 Jun 17,2 56,0 0 24,4 42,5 Ms Jul 0 45,5 0 15,2 13,4 Ago 0 59,2 0 19,7 5,6 Set 0 0 0 0 0,3 Out 0 0 0 0 0,6 Nov 18,5 0 0 6,2 3,4 Dez 45,0 9,2 0 18,0 15,9 370,0 730,5 369,0 489,8 756,1 Total
Tabela 2 Pluviosidade (mm) no municpio de Fortaleza, Cear, Brasil, entre 1999 e 2001, e a mdia histrica de um perodo de 35 anos.
Ano 1999 2000 2001 Mdia Mdia histrica Jan 67,8 233,4 103,2 134,8 116,8 Fev 145,8 171,4 89,4 135,5 199,6 Mar 231,5 192,8 172,4 198,9 339,4 Abr 325,6 507,7 708,1 513,8 349,2 Mai 408,2 171,5 80,1 219,9 220,4 Ms Jun 26,9 74,2 165,6 88,9 162,6 Jul 1,8 164,8 62,0 76,2 82,7 Ago 11,3 112,3 2,0 41,9 33,6 Set 44,1 153,3 9,3 68,9 26,9 Out 6,4 1,2 6,1 4,6 12,8 Nov 12,0 9,3 13,0 11,4 12,3 Dez 63,2 5,7 27,0 32,0 41,5 1344,6 1797,6 1438,2 1526,8 1597,8 Total
Tabela 3 Estabelecimento de colnias abelhas melferas africanizadas no municpio de Canind, Cear, Brasil durante trs anos.
Ano 1999 2000 2001 Mdia Jan 0 6 4 3,3 Fev 7 9 5 7,0 Mar 21 10 12 14,3 Abr 4 7 9 6,7 Mai 2 0 1 1,0 0 0 0 0 Ms Jun Jul 0 0 0 0 Ago 0 0 0 0 Set 0 0 0 0 Out 0 0 0 0 Nov 0 0 0 0 Dez 0 0 0 0 34 32 31 32,3 Total
227
A densidade de colnias na rea estudada teve seu pico entre abril e maio, com valores variando de 31 a 34 colnias/km2, dependendo do ano. O abandono aconteceu durante a estao seca, principalmente entre julho e outubro (Tabela 4). Tabela 4 Abandono de colnias abelhas melferas africanizadas no municpio de Canind, Cear, Brasil durante trs anos.
Ano 1999 2000 2001 Mdia Jan 0 0 0 0 Fev 0 0 0 0 Mar 0 0 0 0 Abr 0 0 0 0 Mai 0 0 0 0 Jun 0 0 0 0 Ms Jul 9 0 12 7,0 Ago 11 8 6 8,3 Sep 6 13 7 8,7 Out 3 6 6 5,0 Nov 2 2 0 1,3 Dez 0 1 0 0,3 31 30 31 30,7 Total
Em Canind, a maioria das colnias abandonou seus ninhos tanto devido aos prolongados ataques de formigas (Camponotus sp.), que foram observados durante vrias noites, quanto tambm escassez de nctar e gua. Porm, um pequeno nmero de colnias (mdia de 5%) situadas em locais privilegiados (prximos a rios, poos e reas frescas) permaneceu na rea de um ano para o outro. Essa valor metade do valor encontrado por Sousa et al. (2000) para o municpio vizinho de Caridade CE, mas a pouca pluviosidade sobre estes trs anos de estudo provavelmente teve um papel importante no aumento do abandono das colnias. De fato, os registros pluviomtricos mostraram que a chegada e o abandono das colnias de abelhas africanizadas na caatinga esto fortemente relacionados com a estao do ano (Figura 1).
Figura 1 - Mdias da chegada e abandono de colnias de abelhas africanizadas e pluviosidade (mm) no municpio de Canind, Cear, Brasil entre 1999 e 2001. Em 1999 e 2001, anos de pouca chuva e com uma curta estao chuvosa, a chegada das colnias foi atrasada, tmida no incio da estao e o abandono comeou j em julho e terminou em novembro. No ano 2000, um ano cuja pluviosidade foi similar mdia histrica, as colnias de AMA chegaram mais cedo e abandonaram mais tarde (Figura 1).
228
Em Fortaleza, os enxames chegaram o ano todo, mas seus nmeros aumentaram consideravelmente durante a estao seca, especialmente entre julho e outubro (Tabela 5; Figura 2), o mesmo perodo em que ocorria o maior abandono de colnias em Canind (Figura 3). Tabela 5 Chegada de colnias abelhas melferas africanizadas no municpio de Fortaleza, Cear, Brasil durante trs anos.
Ano 1999 2000 2001 Mdia Jan 83 165 142 130,0 Fev 102 153 124 126,3 Mar 114 124 145 127,7 Abr 77 96 118 97,0 Mai 79 103 139 107,0 Jun 114 407 186 325,7 Ms Jul 315 345 240 300,0 Ago 368 351 204 307,7 Set 223 477 239 313,0 Out 225 322 240 262,3 Nov 223 208 174 201,7 Dez 137 130 158 141,7 2060 2881 2109 2350 Total
Figura 2 - Mdias da chegada e abandono de colnias de abelhas melferas africanizadas e pluviosidade (mm) no municpio de Fortaleza, Cear, Brasil entre 1999 e 2001.
Figura 3- Mdias do abandono de colnias de abelhas melferas africanizadas no municpio de Canind e chegada no municpio de Fortaleza, Cear, Brasil entre 1999 e 2001.
229
Esta pesquisa sugere que a abelha africanizada habita o semi-rido nordestino do Brasil porque ela abandona a caatinga quando as condies se deterioram, migrando para reas mais favorveis. Entretanto, no possvel afirmar a partir desta pesquisa que as colnias de AMA abandonam Canind migrando para Fortaleza. Outras localidades litorneas ou vegetaes costeiras poderiam ser seus destinos, to bem como reas montanhosas midas situadas a 40 km do local estudado. A maioria das colnias de Canind e de outros municpios provavelmente voou para uma gama de lugares diferentes, uma vez que a densidade de enxames em Fortaleza variou de apenas 6,1 a 8,5 enxames km2, entre 1999 e 2001. O aumento em nmero de enxames que chega em Fortaleza quando a enxameao reprodutiva j no est mais acontecendo na caatinga (depois de junho), mas o abandono chega ao mximo l, sugere que as colnias de AMA migram para reas litorneas quando as condies ambientais se deterioram na caatinga semi-rida, como relatado anteriormente por Kerr (1971). Dados obtidos por Sousa et al. (2000) para a cidade de Caridade tambm reforam esta hiptese. Colnias de AMA em Fortaleza no foram monitoradas porque qualquer enxame ou colnia encontrado era exterminado pelos bombeiros. Porm, colnias estabelecidas na copa de rvores altas e topo de construes geralmente passavam despercebidas. A maioria dessas colnias abandonou seus ninhos durante a estao chuvosa em Fortaleza, ou porque no estavam adequadamente protegidas das chuvas intensas ou por causa da escassez de flores e outras fontes de alimento durante este perodo do ano. O mesmo pode ocorrer em outras reas litorneas do nordeste brasileiro, onde a maioria das floradas concentra-se na estao seca. Colnias que abandonam Fortaleza e outras reas litorneas durante a estao chuvosa migram de volta para a caatinga (Figura 1), fechando o ciclo. Os comportamentos de migrao e abandono mostrados pelas abelhas africanizadas, associados sua defensividade, tm sido considerados caractersticas indesejveis para a apicultura (Seeley, 2006; Winston 2003). Entretanto, foram exatamente o abandono e a migrao que permitiram a chegada dessas abelhas ao nordeste do Brasil, vindas da parte sul do pas e trazendo uma nova espcie rea, que mudou suas interaes ecolgicas (Taylor e Spivak, 1984). Tambm, essas caractersticas tm assegurado a sobrevivncia das abelhas africanizadas no nordeste brasileiro por meio dos movimentos das colnias entre diferentes reas ecolgicas quando seus recursos vitais melhoram ou deterioram, ao contrrio da abelha europia, que perece devido reduzida mobilidade de sua colnia. A chegada da AMA ao nordeste brasileiro provavelmente afetou a fauna de abelhas indgenas, embora impactos causados nas abelhas nativas pela introduo dessa abelha no novo mundo ainda permaneam controversos (Roubik, 1992). Parece que o abandono e a migrao das colnias de AMA durante o perodo mais crtico do ano evita competio com outras espcies de abelhas sociais e solitrias que residem na caatinga, em concordncia com o observado por Roubik et al. (1986). A presena de colnias silvestres de AMA na caatinga permitiu que pessoas pobres vivendo no semi-rido nordestino passassem a colher toneladas de mel e cera dos seus ninhos ao final de cada estao chuvosa, gerando assim uma nova fonte de alimento e renda. A bem sucedida presena das colnias de abelhas africanizadas na regio tambm estimulou a apicultura entre fazendeiros, e esta se transformou em uma nova atividade praticada em muitas propriedades rurais apesar da necessidade de boas prticas de manejo das abelhas e vegetao para manter as colnias de AMA nas colmias durante a estao seca. O abandono e a migrao de colnias silvestres de AMA mostraram potencial para a apicultura migratria que passou a ser praticada pela
230
maioria dos apicultores profissionais no nordeste do pas (Souza, 2004). Entretanto, a movimentao de abelhas realizada pelo homem provavelmente tem pouco impacto na regio porque os apicultores migram para as mesmas regies e na mesma poca do ano que as colnias silvestres, e no existem reas livres de colnias de AMA na regio.
Concluso
Os comportamentos de abandono e migrao permitiram as colnias de AMA estabelecerem populaes silvestres no semi-rido nordestino, ao contrrio das colnias de abelhas melferas europias, que nunca conseguiram sobreviver fora de apirios na regio. Os comportamentos de abandono e migrao so responsveis pelos movimentos freqentes das colnias de abelhas africanizadas no nordeste do Brasil, e tm provado serem as mais importantes caractersticas das colnias silvestres de AMA na regio. O Abandono e a migrao de colnias silvestres de AMA esto fortemente relacionados ao ciclo anual de chuvas.
Agradecimentos
Ns agradecemos ao Corpo de Bombeiros do Estado do Cear, sede Fortaleza, pelos dados das remoes de colnias e enxames de AMA desta cidade durante o perodo do presente estudo; A Fundao Meteorolgica do Estado do Cear (Funceme) pelos dados histricos de pluviosidade nos municpios de Canind e Fortaleza; e ao Conselho Nacional de Desenvolvimento da Cincia e Tecnologia CNPq pela bolsa de produtividade de B. M. Freitas e pela bolsa de I. G. A. Bomfim.
Referencias Bibliogrficas
Ahmad R (1989a). A note on the migration of Apis dorsata in Adaman and Nicobar islands. Bee World, v. 70, n. 2, p 62-65. Ahmad R (1989b). Methods to control migration of Apis dorsata colonies in Pakistan. Bee World, v.70, n.4, p 160-162. Andrade-lima D (1981). The caatingas dominium. Rev Bras Bot, v. 4, n. 2, p 149-153, 1981. Arajo-Filho JA (1990). Manipulao da vegetao lenhosa da caatinga para fins pastoris. EMBRAPA-CNPC; Sobral, Brasil. Freitas BM (1991). Potencial da caatinga para a produo de plen e nctar para a explorao apcola. M. Sc. Dissertao. Universidade Federal do Cear; Fortaleza, Brasil. Funceme (1997). Boletim meteorolgico anual. Funceme; Fortaleza, Brasil. Kerr WE (1971). Contribuio ecogentica de algumas espcies de abelhas. Cienc Cult , v. 23, p. 89-90. Roubik DW (1992). Ecology and natural history of tropical bees. Cambridge University Press; New York, USA. Roubik DW et al. (1986). Sporadic food competition with the African honey bee: projected impact on neotropical social bees. J Tropic Ecol , v. 2, p. 97111. Seeley TD (1985). Ecologia da abelha: um estudo de adaptao na vida social. Porto Alegre: Paixo. Sousa RM et al. (2000). Seasonal changes in Africanized honey bee (Apis mellifera L.) population of the caatinga vegetation in NE Brazil. In Erickson JR, EH et al. (Ed.) In: International ConferAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
231
ence on africanized honey bees and bee mites, 2., Tucson. Proceedings Tucson: The AI Root Company. p. 16-24. Souza DC (2004). Importncia socioeconmica. In: SOUZA, D.C. (Org.). Apicultura: manual do agente de desenvolvimento rural. Braslia: Sebrae. cap. 4. p. 35-40. Taylor OR; Spivak M (1984). Climatic limits of tropical African honeybees in the Americas. Bee World, v. 65, p. 38-47. Wiese H (2005). Apicultura. 2. ed. Guaba: Agrolivros, 2005. Winston ML (2003). A biologia da abelha. Porto Alegre: Magister.
232
SI MPSIO 11
COMPORTAMENTO DE ABELHAS SEM FERRO
Coordenadores: Sidnei Mateus, Fabio Santos do Nascimento
233
Biologia Comportamental de Trigona pellucida Cockerell, 1912, (Hymenoptera, Apidae, Meliponini).

Sidnei Mateus e Ronaldo Zucchi Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP, Departamento de Biologia, Av. Bandeirantes, 3900, CEP-14040-901, Ribeiro Preto, So Paulo, Brasil. sidneim@ffclrp.usp.br Behavioral Biology of Trigona pellucida Cockerell, 1912, (Hymenoptera, Apidae, Meliponini).
Abstract
Behavioral aspects on the stingless bees included in the genus Trigona are quite rare. Present contribution deals with the bionomics of Trigona pellucida of which results were closely compared with Trigona cilipes cilipes. Because both taxa are morphologically similar, present comparative bionomical account aims at to contribute towards their separate identity. Two nests of T. pellucida collected in Mato Grosso were used. All nests were found within inhabited termite nests located in living trees hollow trunks. Upon their transference to observation hives colonies were used for several bionomic studies as: division of labor allied to age polyethism, cell provisioning and oviposition (POP) analysis, cyclical royal cells production, etc. The latter aspect provided an excellent opportunity to analyze the relationships among royal cell cyclical production, neat occurrence o physogastric queen behavioral alterations signaling close gyne emergence, new gyne acceptance or rejection behaviors, etc. Moreover, undertaken comparative analysis shows a set of distinctive bionomical traits between T. pellucida and T. cilipes cilipes. Palavras chave: Meliponini, Trigona pellucida, diviso de trabalho, clula real, arquitetura de ninho, rainha virgem.
Introduo
Os meliponneos durante um longo perodo de evoluo foram gradualmente ocupando nichos ecolgicos existentes em seu ambiente. Se os ocos das rvores fossem suficientes para fazer face capacidade de reproduo destas abelhas, estas no deveriam ter se diversificado tanto quanto aos seus hbitos de construo de ninhos (Kerr et al., 1967). Os ninhos so construdos em ocos de rvores vivas, de rvores secas, postes de cerca, frestas em parede de alvenaria, alicerces, dentro de ninhos de outros insetos sociais como vespas, formigas e cupins, algumas espcies constroem ninhos areos e expostos e outras ninhos subterrneos ocupando cavidades preexistentes no solo. As colnias so perenes podendo viver vrios anos em um mesmo local. As espcies descritas do gnero Trigona apresentam uma notvel diversificao em ocupao de nichos: areo e exposto, Trigona spinipes, T. hyalinata, ocupando cavidades em tronco de rvores, T. truculenta e T. fuscipennis, em cavidade pr existentes no solo, T. recursa, dentro de ninhos de outros insetos sociais, T. cilipes cilipes, T. fulviventris e T. pallens (Wille & Michener, 1973; Wille, 1983; Michener, 1974, 2000; Roubik, 1989, 2006;
234
Rasmussen & Camargo, 2008). Uma das caractersticas marcantes em colnias de insetos eusociais a diviso de trabalho baseada na idade (Wilson, 1971), caracterstica que contribuiu para o sucesso ecolgico e evolutivo das abelhas sem ferro (Beshers & Fewell, 2001). Tarefas de manuteno do ninho, cuidados com a prole, coleta de alimento e defesa so tarefas de grupos etrios de operrias, podendo ser varivel dependendo das condies e necessidades da colnia. A plasticidade na alocao de tarefas reconhecida como essencial (Sommeijer et al., 1982; Simes & Bego, 1991; Robinson, 1992; Kolmes & Sommeijer, 1992; Beshers & Fewell, 2001). O processo de aprovisionamento e postura (Provisioning and Oviposition Process, POP) nas clulas para produo de novos indivduos autapomrfico entre os insetos sociais. As interaes entre rainha e operrias so complexas, o aprovisionamento da clula massal e as clulas de cria so utilizadas uma nica vez, assim, dezenas de clulas so construdas diariamente (Sakagami, 1982; Zucchi et al., 1999). Operrias de algumas espcies de meliponinae desenvolvem ovrio em colnias com rainha, dependendo da espcie podem produzir ovos trficos e reprodutivos simultaneamente, ou apenas ovos trficos ou ovos viveis. Trigona cilipes cilipes desenvolve ovrio mas nunca realiza postura (Silva-Matos et al., 2006). Outras espcies nunca desenvolvem ovrio (Boleli et al., 1999, 2000; conf. rev. em Faustino et al., 2002).
Material e Mtodos
Foram coletados dois ninhos de Trigona pellucida no municpio de Ribeiro Cascalheira no Estado do Mato Grosso. Um ninho foi coletado em uma propriedade rural (S1243251 W05204294), localizado no interior do tronco de uma rvore na borda de mata ciliar, e o outro foi coletado em rea de pastagem, localizado no interior de um tronco seco (S1245553 W05204100). No campo os ninhos foram filmados e fotografados e suas estruturas medidas para comparaes entre ninhos. No laboratrio, as colnias foram colocadas em caixa de observao e a temperatura mantida a 28oC. Foram alimentadas regularmente com soluo de gua e acar 50% e plen. Para o estudo da diviso de trabalho foram retirados favos em estgio de pupa e acondicionados em uma caixa menor, tambm com tampo de vidro conectada caixa maior com tubo plstico. As abelhas recm emergidas foram marcadas individualmente no trax segundo um cdigo de cores com tinta atxica, nos perodos da manh e da tarde. Posteriormente, elas foram devolvidas colnia. Uma pequena caixa com tampa de vidro foi conectada ao tubo de entrada, assim foi possvel visualizar as sadas e retornos das forrageadoras. Foram realizadas sesses dirias de registros em vdeo das diferentes atividades realizadas pelas operrias dentro da colnia, alm de observaes diretas. A partir das anlises em vdeo e das observaes diretas criou-se um catalogo comportamental das tarefas realizadas pelas operrias, e o processo de aprovisionamento e postura (POP) foi caracterizado.
Resultados
Os dois ninhos de T. pellucida foram encontrados associados com ninhos de trmitas, localizados no interior de tronco de rvore com ausncia total de invlucro, usando a energia trmica originria da colnia do hospedeiro. O tamanho dos ninhos coletados diferiu pouco, sendo de forma esfrica, as estruturas que compe a arquitetura dos ninhos foram muito semelhantes. O ninho compacto e com pouco espao interno no utilizado, as estruturas so muito prximas como os favos e potes de armazenamento de alimento. O batume externo forma uma carapaa grossa e resistente que previne a ao dos cupins e protege da umidade excessiva existente no interior dos troncos.
235
Descrio do ninho
Tubo de entrada - A entrada do ninho consiste em um pequeno tubo cilndrico de cermen escuro medindo 2,5 cm de comprimento estreitando na parte apical. Na parte basal o cermen duro de cor cinza, na parte apical de cor preta brilhante com pelotas de resina pegajosa de cor variada colocada em seu entorno. O dimetro da entrada na parte apical foi de 8 mm de forma oval, sendo mais larga na parte basal. A altura do tubo de entrada variou entre 15 a 50 cm em relao ao solo. O canal de ingresso at a cmera do ninho foi de comprimento e espessura varivel entre os ninhos coletados, sinuosos e revestidos por uma camada de cermen. Batume - O batume feito de cermen de cor escura, muito duro envolvia toda a estrutura do ninho (2 a 4 mm) isolando-o completamente do termiteiro, na superfcie externa muito spera havia material do termiteiro aderido, a superfcie interna era relativamente lisa com pequenos depsitos de resina. Inmeros pilares de sustentao dos favos e dos potes de alimento prendiam-se na superfcie interna do batume, sendo os mais externos duros e quebradios e os mais prximo do favo de cermen flexvel, com ausncia total de invlucro. Potes de mel plen - Os potes de alimento, numerosos circundavam toda superfcie interna do batume e o favo de cria, ligados firmemente uns aos outros e suportados por pilares de diferentes espessuras. De forma oval medindo entre 8 e 10 mm de dimetro, 0,9 a 1,1 centmetros de comprimento, a cor dos potes de mel e plen foi semelhante. Favos de cria - Favos horizontais sustentados por diversos pilares de dimetro variado presos aos potes de alimento e no batume. Os favos recm construdos eram de cor marrom escura, havia clulas em vrios estgios de construo, favos mais velhos com pupas eram de cor marrom. A distncia entre dois favos foi de 3 mm, entre eles havia diversos pilares de sustentao de dimetro variando entre 0,1 e 0,3 mm. Clulas reais foram encontradas nos favos novos, e em forma de casulo nos favos mais velhos. Detritos - O lixo produzido no ninho, como fezes, cadveres e resto de casulo foi encontrado em depsitos abaixo dos favos e potes de armazenamento, encontrou se duas reas prximas, uma com lixo seco e outra com lixo mido. Comportamento - Foi observada a presena de 2-4 abelhas na parte apical do tubo de entrada manipulando resina fresca, com a aproximao elas voavam ou entravam no tubo, onde ficam 3-4 indivduos. Durante a retirada do ninho diversas abelhas voavam em volta da cavidade e das estruturas exposta do ninho, no foram agressivas, podendo ser consideradas tmidas. No houve interao agonistica entre cupins e abelhas, mesmo ocorrendo o contato entre eles durante a retirada dos ninhos. Diviso de trabalho e POP em operrias de Trigona pellucida. No perodo de 02/08 a 20/10/2006 foram realizadas sesses dirias de filmagens e observao direta de 193 abelhas diferentes em uma colnia. Um catlogo de atos comportamentais foi criado a partir das analises de vdeo. A vida mdia das abelhas marcadas e observadas foi de 41,544 18,754, sendo a idade mxima observada para operrias, 79 dias. Atos comportamentais realizados pelas operrias Foram observadas 993 atos de raspar o favo novo (RCF) nesta atividade, a idade mdia das operrias foi de 7,51 2,84, idade mnima de 1 e mxima de 18 dias. Raspar cermen de casulos (RCC) foi uma atividade realizada por operrias jovens (n=24), a mdia de idade foi de 5 1,61, idade mxima de 9 e mnima de 3 dias. Foram observados 553 atos comportamentais de construo de clulas (CC), a mdia de idade das operrias foi de 7,71 2,05, idade mnima de 3 e mxima de
236
15 dias. Operrias jovens sem pigmento foram puxadas pelas asas ou pernas do interior de clulas em construo por operrias que estavam realizando esta tarefa, (MOR, n=6), idade mdia de 5,8 1,788, idade mnima de 3 e mxima de 7 dias. Trabalho com o lixo: Foram observadas 76 operrias macerando o lixo mido (MLU) com idade mdia de 17,76 8,68, idade mnima de 6 e mxima de 39 dias. Macerando lixo seco foram observadas 197 operrias (MLS), a idade mdia foi de 24,43 4,39, idade mxima de 35 e mnima de 7 dias. A construo de estruturas utilizando o lixo seco (CPS) foi observada 193 vezes, a idade mdia das operrias foi de 19,72 5,53, idade mxima de 32 e mnima de 4 dias. Atividade de coleta: Foram observadas 89 operrias entrando na colnia com resina na corbcula (RCR), a idade mdia foi de 37,40 8,80, idade mxima de 58 e mnima de 26 dias. A coleta de plen (CPO) foi realizada por operrias (n=23) com idade mdia de 49,69 10,01, idade mxima de 77 e mnima de 37 dias. Atividades com cermen: Atividades com cermen foi amplamente difundido entre as operrias, foram observadas operrias raspando o fundo da caixa, raspando potes de alimento, lamelas prximas do favo e macerando este material para utilizao. Foram observadas 198 operrias com idade mdia de 22,80 6,66, idade mxima de 48 e mnima de 4 dias. Operrias carregando cermen ou outro material nas mandbulas foi observada nos favos de cria e em diversos locais da colnia, a idade mdia foi 17,30 9,26, e idade mxima de 54 e mnima de 3 dias. Macerar resina (MRE) foi observado por 17 vezes, a idade mdia foi de 32,41 9,84, idade mxima de 55 e mnima de 16 dias. Atos comportamentais relacionados ao POP: Durante o POP algumas abelhas (n =8) ficaram agitam-se em volta das clulas sendo tratadas sem participar do processo (PRP). Foram observadas 10 abelhas e a idade mdia foi de 7,2 0,42, idade mnima de 7 e mxima de 8 dias. Nas clulas em colar (INSC, n=20) e antes da chegada da rainha, algumas operria faziam rpidas inseres, a idade mdia foi de 7,4 0,68, idade mnima de 6 de mxima de 8 dias. Durante o aprovisionamento, entre uma e outra descarga de alimento ocorrem vrias inseres de operrias na clula (INSP, n=129) sem depositar alimento, a idade mdia destas operrias foi de 9,32 1,18, idade mnima de 6 e mxima de 15 dias. Foram observadas 40 operrias (RGR) regurgitando alimento larval no interior da clula durante o aprovisionamento, a idade mdia das operrias foi de 9,3 1,23, idade mnima de 7 e mxima de 11 dias. Foram observadas (SIP) 39 operrias simulando postura aps o aprovisionamento, a idade mdia destas operrias foi de 8,33 1,77, idade mnima de 6 e mxima de 11 dias. Foram observadas 20 operrias marcadas operculando clula (OPE), a idade mdia foi de 8,6 2,66, idade mnima de 5 e mxima de 14 dias. Processo de aprovisionamento e postura nas clulas de cria A construo de clulas em T. pellucida do tipo sucessivo (Cy), o aprovisionamento da clula sucessivo (Py), ocorre agitao localizada durante o pr-aprovisionamento (lpr), o tratamento das clulas facultativamente grupado (Pc), a operculao dividida em duas fases, rotao e trabalho lateral. Durante o aprovisionamento a rainha movimentava-se em frente clula efetuando vibraes alares intercaladas com curtas paradas, concomitantemente, ela gira no sentido horrio e anti-horrio de forma alternada. Durante o pr-aprovisionamento, a rainha freqentemente expe de uma pequena gota entre as mandbulas. Durante o pr-aprovisionamento, 4 a 7 operrias ficavam em volta da clula em colar, o tempo entre a chegada da rainha at a primeira deposio de alimento na clula (n=9) foi de 3,77 1,23 segundos. A durao para 72 descargas de alimento larval foi de 3,32 0,83 segundos, sendo as trs primeiras mais longas e as ltimas mais rpidas, e nestas as operrias giravam no interior
237
da clula enquanto regurgitavam. A ltima operria a inspecionar a clula antes da postura da rainha, quase sempre simulava uma postura. Antes da postura, a rainha invariavelmente fazia inspeo na clula ingerindo ou no alimento, a durao mdia (n=12) foi de 2,87 0,95 segundos. A durao da postura da rainha (n=12) foi 5,03 0,50 segundos. A durao do tempo entre a sada da rainha da clula at inicio da operculao foi de (n=12) 3,23 1,14 segundos. A primeira fase da operculao (rotao) foi de 2,43 0,26 (n=12) segundos, a fase final da operculao (n=12) durou 1,05 0,26 segundos. A simulao de postura feita por operrias variou entre 2 a 5 por clula tratada, sendo a durao do comportamento menor do que 1 segundo. Produo de clula real e comportamento da rainha Neste estudo tivemos a oportunidade de observar a produo peridica (cclica) de clulas reais nas duas colnias. Na colnia (01/06) foram produzidas 13 clulas de rainhas no intervalo de 143 dias, o intervalo mdio foi de 12,90 2,84 dias, sendo o intervalo mximo de 20 e o mnimo de 10 dias. Na colnia (02/06), o fato foi observado em outro perodo do ano, foram produzidas 12 clulas de rainhas no intervalo de 125 dias, nesta colnia o intervalo mdio foi de 11,90 6,33, sendo o intervalo mximo de 20 e mnimo de 5 dias.
Discusso
O primeiro relato de Trigona pellucida foi feito por Cockerell 1912. A descrio sumria. O local de coleta foi Porto Velho e Rio Madeira, no h relatos sobre a arquitetura do ninho. No Brasil, T. pellucida ocorre nos estados do Mato Grosso, Par e Rondnia (Moure, Urban & Melo, 2007). Segundo Rasmussen e Camargo (2008), T. pellucida faz parte do grupo cilipes ocorrendo na regio centro oeste e amaznica. Os ninhos de T. pellucida foram localizados no interior de troncos de rvores envoltos por ninhos de trmites. Apesar de algumas semelhanas na arquitetura interna do ninho e da ocorrncia na mesma regio biogeogrfica com T. cilipes cilipes, a entrada do ninho, local de nidificao, caracteres morfolgicos como a forma da tbia, cor e venao das asas diferem muito entre estas duas espcies. Diferenas foram observadas entre as duas espcies quanto ao local de nidificao. A colnia de Trigona cilipes cilipes (Silva-Matos, 2006) foi coletada em Nova Xavantina MT. Estava localizado dentro de um ninho abandonado de Brachygastra lecheguana a 5 metros de altura, o tubo de entrada longo e ornamentado. Kerr et al., (1967) descrevem um ninho de T. cilipes cilipes dentro de um ninho de Azteca a 4 metros de altura, o tubo de entrada longo e bem ornamentado, e outro ninho desta espcies em um termiteiro, embora com caractersticas diferentes. Rasmussen (2004) descreve um ninho de Trigona cilipes dentro de um ninho ativo de Epipona tatua a 15 metros de altura no Peru. Trabalhos sobre o polietismo etrio em abelhas do gnero Trigona so raros, faremos comparaes com dados da literatura com espcies de outros gneros, embora com algumas diferenas nos mtodos utilizados por diversos autores. A longevidade mdia das operrias de T. pellucida foi de 41,54 18,75, sendo a idade mxima observada de 79 dias. Em T. pallens vida mdia das operrias foi de 29,4 dias (Silva, 2008), em Trigona (Tetragonula) minangkabau 37 dias, em operrias de Friesella schrottky 30,1 dias (Camilo-Atique, 1977), em Melipona bicolor 44,0 dias (Bego, 1983), para Melipona favosa foi 40,0 dias (Sommeijer, 1984), Frieseomelitta languida 33,3 dias (Ribeiro, 1989), e para Melipona compressipes fasciculata 42,5 dias (Giannini, 1997). A seqncia temporal dos principais atos comportamentais e tarefas realizadas de acordo com a idade das operrias de T. pellucida foram: trabalhos nos favos com cerume, aprovisionamento das clulas de cria, construo de pilares, cermen e trabalhos com o lixo, atividades de forrageio. A primeira tarefa realizada por
238
operrias foi raspar o favo novo de cria e favos velhos, o excesso de cermen retirado foi por elas utilizado ou repassado para uma abelha construtora. Os resultados para construo de clulas de cria so semelhantes ao encontrado em Trigona pallens (Silva, 2008), comparvel com Melpona favosa (Sommeijer, 1984) e difere de Trigona (Tetragonula) minangkabau (Inoue et al., 1996). A demais atividades com cermen so comparveis com T. pallens (Silva, 2008), Trigona (Tetragonula) minangkabau (Inoue et al., 1996), Melipona bicolor (Bego, 1983), Nannotrigona (Scaptotrigona) postica (Simes & Bego, 1991), e Melipona compressipes fasciculata (Giannini, 1997). Diferenas podem ser observadas quanto ao pico das atividades para cada espcie. A faixa etria das operrias que estiveram ligadas diretamente ao POP foi de 6 a 14 dias, realizando inspeo nas clulas, regurgitar alimento larval e opercular clula. Os dados so comparveis com T. pallens (Silva, 2008), Trigona (Tetragonula) minangkabau (Inoue et al., 1996), e com Melipona favosa (Sommeijer, 1984), os dados diferem quanto ao pico de atividade para cada espcie. A simulao de postura em clulas de cria tratadas durante o POP ocorreu entre 6-11 dias, as operrias passavam sobre a clula, faziam uma breve parada, esfregavam o abdmen na margem da clula, resultados semelhantes forma encontrados em T. cilipes (Silva-Matos, et al., 2006). O lixo produzido na colnia como fezes, cadveres e restos de casulo foi armazenado no fundo da caixa, este material foi macerado, misturado com cermen e utilizado na construo de estrutura de sustentao mais perifricas como pilares, estrutura do canal de ingresso e lamelas. A idade de operrias manipulando lixo pouco comparvel com outras espcies estudadas, sendo que, esta espcie reutiliza o lixo para construo de estruturas do ninho. A idade das forrageadoras de resina e de plen diferiu dos resultados apresentados para T. pallens (Silva, 2008), e foram comparveis com Trigona (Tetragonula) minangkabau (Inoue et al., 1996). Os fatores scio-reguladores que determinam produo de clula real nos Trigonini ainda so pouco conhecidos, porm, possveis sinais qumicos ou comportamentais emitidos por rainhas virgens na espcie estudada mostraram a relao entre a produo de clula real e a emergncia e eliminao de rainhas virgens na colnia. Nos primeiros dias de vida as rainhas virgens no foram agredidas por operrias e no foram percebidas quimicamente pela rainha. Passado alguns dias, provavelmente aps ocorrer mudanas fisiolgicas e hormonais, as rainhas virgens passaram a ser perseguidas/agredidas pelas operrias e desestabilizar o processo aprovisionamento e postura. Os sinais qumicos (presena) da rainha virgem deixavam a rainha agitada, freqentemente, esta deixava o favo de cria e andava por toda colnia. Quando a rainha virgem era pressa e estava sendo agredida por operrias, a rainha participava ativamente com mordidas, que s vezes era revidado pela rainha virgem. Aps a eliminao das rainhas virgens, o comportamento da rainha voltava ao normal e retomava as posturas. Foi observado um caso de substituio natural de rainha, onde uma colnia ficou rf por 47 dias. Aps o desaparecimento da rainha, uma rainha virgem permaneceu na colnia por 10 dias, foi agredida e eliminada pelas operrias. Em 27/12/06 foi observada outra rainha virgem, ainda pouco pigmentada, neste perodo foram observados machos na colnia. A rainha virgem permaneceu na colnia, passou a revidar agresses das operrias, andava por toda colnia vibrando as asas, tocando as operrias e fazendo contatos bucais. Em 19 e 20/01, foi at o tubo de entrada da colnia por vrias vezes, sempre muito agitada e com o abdmen inflado. Em 25/01/07, j com o abdmen pouco dilatado subiu em uma clula com alimento e no realizou postura, em 27/01/07 passou a realizar postura normalmente. Em 29/01/07 foi produzida a primeira clula real depois do perodo de orfandade. O POP observado em T. pellucida foi semelhante ao observado em T. cilipes cilipes (SilvaMatos et al., 2006). Ocorrendo variaes no nmero de clulas tratadas por processo, nmero de operrias simulando a postura. Em colnias normais, operrias de T. pellucida no botam ovos, apenas
239
simulam a postura. O desenvolvimento ovariano nesta espcie incipiente, diferente de T. cilipes cilipes (Silva-Matos et al., 2006). Os resultados referentes ao POP de T. pallens (Silva, 2008), difere de T. pellucida quanto durao de alguns componentes, mas apresenta o mesmo padro.
Agradecimentos
Agradecemos a FAPESP, CNPq e Depto. de Biologia da FFCLRP-USP. Agradecemos as pessoas que colaboraram no trabalho de campo: Wanderley M. Vital e famlia. Lazaro, Lucas e Divina. Eciele e famlia (MT), Rodolfo Mariano, Adolfo R. Calor. Na coleta de dados Juliana D. S. Alonso, Filipi R. Silva e Ana C. Roselino.
Referncias
Bego LR (1983). On some aspects of in Melipona bicolor bicolor Lepeletier (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Rev. Bras. Entomol. 27: 211-224. Beshers SN & Fewell HJ (2001). Models of division of labor in insect societies. Annual Review of Entomology, 46: 413-430. Boleli IC Simes ZLP e Bitondi MMG (1999).Cell death in ovarioles causes permanent sterility in Frieseomelitta varia workers bees. Journal of Morphology, 242: 271282. Boleli IC Simes ZLP e Bitondi MMG (2000). Regression of the lateral oviducts during the larvaladult transformation of the reproductive system of Melipona quadrifasciata and Frieseomelitta varia. Journal of Morphology, 243: 141151. Camillo-Atique C (1977). Estudo da variabilidade etolgica de Friesella incluindo a caracterizao de espcies crpticas (Hym., Meliponinae). Tese de doutorado, USP, Ribeiro Preto, 203p. Cockerell TDA (1912) New Bees From Brazil. Psyche (19) 41-61. Faustino CD Silva-Matos EV Mateus S and Zucchi R (2002). First record of emergency queen rearing in stingless bees (Hymenoptera, Apinae, Meliponini), Insectes Sociaux, 49. 111-113. Giannini KM (1997). Labor division in Melipona compressipes fasciculata Smith (Hymenoptera: Apidae: Meliponinae). An. Soc. Entomol. Brasil. 26(1): 153-162. Inoue T Salmah S Sakagami SF (1996). Individual variations in worker polyethism of the Sumatran stingless bee Trigona (Tetragonula) minangkabau (Apidae, Meliponinae). Jpn. J. Ent. 64(3): 641668. Kerr WE Sakagami SF Zucchi R Araujo VP Camargo JMF (1967). Observaes sobre a arquitetura dos ninhos e comportamento de algumas espcies de abelhas sem ferro das vizinhas de Manaus, Amazonas (Hymenoptera, Apoidea). Atas dos Simpsio sobre a biota Amaznica. (5) 255-309. Kolmes SA & Sommeijer MJ (1992). Ergonomics in stingless bees: changes in internidal behavior after partial removal of storage pots and honey in Melipona favosa (Hym. Apidae, Meliponinae). Insects Sociaux. 39: 215-232. Michener CD (1974). The social behavior of the bees: a comparative study. Belknap Press of Harvard Univ. Press, Cambridge, Massachusetts. 404p. Michener CD (2000). The bees of the World. University of Kansas Natural History Museum and Department of Entomology. The Johns Hopkins University Press Baltimore and London, 913p. Moure JS Urban D & Melo GAR (2007). Catalogue of Bees (Hymenoptera, Apoidea) in the Neotropical Region. Sociedade Brasileira de Entomologia, Curitiba, xiv + 1054p.
240
Rasmussen C (2004). A stingless bee nesting with a paper wasp (Hymenoptera: Apidae, Vespidae). Journal of the Kansas Entomological Society, (77) 593601. Rasmussen C & Camargo JMF (2008). A molecular phylogeny and the evolution of nest architecture and behavior in Trigona s.s. (Hymenoptera: Apidae: Meliponini). Apidologie. 39: 102-118. Ribeiro MF (1989). Estudos ecoetlogicos em Frieseomelitta languida, Moure & Camargo, in litt (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae).Tese de mestrado, USP, So Paulo, 129p. Roubik DW (1989). Ecology and Natural History of Tropical Bees. Cambridge Tropical Biology Series, Cambridge University Press, 514p. Roubik DW (2006). Stingless bee nesting biology, Apidologie 37, 124-143. Robinson GE (1992) Regulation of Division of Labor in Insect Societies. Annual Rewiew of Entomology. 37: 637-665. Sakagami SF (1982). Stingless bees, p. 361-423. In Hermann (ed.), Social Insects. Academic Press, New York, 459p. Silva FR (2008). Diviso de trabalho e processo de aprovisionamento e postura em Trigona pallens Fabricius, 1798 (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). Monografia, FFCLRP-USP. Depto. de Biologia, 41pp. Silva PR Bego LR & Sakagami SF (2001). On the cell provisioning and oviposition process (POP) of the stingless bee Scaptotrigona aff. depilis (Hymenoptera: Meliponinae). Sociobiology 38: 615638. Simes D & Bego LR (1991). Division of labor, average life span and life table in Nannotrigona (Scaptotrigona) postica Latreille (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Naturalia 16: 81-97. Silva-Matos EV Noll FB Mateus S and Zucchi R (2006). Non-Oviposing Nurse Workers With Developed Ovaries In Trigona cilipes cilipes (Hymenoptera, Meliponini). Braz. J. morphol. Sci. 23(3-4), 129-136. Sommeijer MJ Beuvens FT Verbeek HJ (1982). Distribution of labour among workers of Melipona favosa F.: construction and provisioning of brood cells, Insectes Soc. 29: 222-237. Sommeijer MJ (1984). Distribution of labor among workers of Melipona favosa F.: Age-Polyethism and worker oviposition. Insectes Sociaux. (31) 2. 171-184. Wille A (1983). Biology of the Stingless Bees. Ann. Rev. Entomol. 28: 41-64. Wille A Michener CD (1973). The nest architecture of stingless bees with special reference to those of Costa Rica (Hymenoptera, Apidae). Revta. Biol. Trop., Universidade de Costa Rica, v.21, Supl.1. Wilson EO (1971). The insect societies. Belknap Press. Harvard University Press. Massachussetts, 548p. Zucchi R Silva-Matos EV Nogueira-Ferreira FH & Azevedo GG (1999). On the cell provisioning and oviposition process (POP) of the stingless bees nomenclature reappraisal and evolutionary considerations (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae). Sociobiology 34(1):65-86.
241
The Laying of Functional Eggs by Melipona bicolor (Hymenoptera, Meliponini) Workers and Their Cell-Sealing Performance
Dirk Koedam1, Vera L. Imperatriz-Fonseca2 1 Departamento de Botnica, Instituto de Biocincias, UNESP, CP 510, CEP 18618-000, Botucatu, SP 2 Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, USP, Av. Bandeirantes, 3900, CEP 14040-901, Ribeiro Preto, SP Email: dkoedam@usp.br Many stingless bee species have their typical mass-provisioning and egg-laying processes well described (Sakagami, 1982; Zucchi, 1993). Shortly after egg deposition by the queen, brood cells are sealed by workers in a characteristic way, although the durations of the sealing procedure seem to differ slightly among species (Sakagami & Zucchi, 1974). From each brood cell always a single individual emerges (Sakagami, 1982). In many species workers are seen to lay non-functional eggs which serve as food to the queen, so-called trophic eggs (Sakagami & Zucchi, 1967). However, under certain conditions workers may lay functional eggs which will render male offspring (Beig, 1972; Velthuis et al., 2005). The nature of this worker activity becomes evident as they immediately close a cell after the deposition of such an egg. Not all functional eggs laid by workers hatch successfully because they can be replaced by an egg of another reproductive worker, or they can, during development, be eliminated by other offspring present in the same, sealed-off cell (Beig, 1972; Koedam et al, 2005; Koedam et al., 2007). We have good reasons to believe that cell sealing in Melipona bicolor for a large part serves to prevent intra-specific parasitism to happen (Koedam & Imperatriz-Fonseca, in prep.). This does not rule out that inter-specific parasitism does not play a role. Considering the best protection of exposed eggs in open cells, there should be a strong selection for workers to seal cells rapidly and efficiently. This means, for example, that unnecessary interruptions of cell-sealing behaviour should be selected against. It was already determined that reproductive M. bicolor workers were significantly more involved in the mass-provisioning of cells than non-reproductive workers (Cepeda, 2006). Reproductive workers were also seen participating in the sealing of cells which had received exclusively an egg of the queen (Koedam et al., 1999). Here we tried to find out whether these workers allocate their sealing investment equally over all cells or that they focus their sealing efforts on those cells having their own egg. Up till now reproductive workers have been observed to occur in small groups of which each individual may lay a small but different amount of eggs, varying from one up to eleven (Koedam et al., 1999; 2005; 2007). We furthermore determined whether individual differences in cell-sealing performance are linked to these differences in egg-laying capacity. We used a single queenright M. bicolor colony, with individually-marked workers and three physogastric queens, and film-recorded the oviposition of 501 cells for 496 hours continuously (Koedam et al., 2007). We quantified the cell-sealing performance of reproductive workers. In order to evaluate their sealing conduct, we used the performance of non-reproductive workers as a standard.
242
The results show that non-reproductive workers fully shut a cell mouth in about two-and-ahalf minutes where after they finalized the sealing procedure by shortly mandibulating the cell apex. Reproductive workers sealed cells equally fast but when cells were exclusively queen-oviposited, they began sealing sooner and with a higher frequency than non-reproductives. Still, overall the former executed the sealing of these cells significantly below average: they interrupted sealing more frequently, they abandoned the sealing of these cells more often prematurely and, finally, they spent on average less time in concluding sealing. For cells having their proper egg, they performed significantly above average: they occasionally interrupted cell sealing, they hardly ever abandoned sealing in advance, and they usually spent a large amount of time in finalizing the processes. This same double standard in cell-sealing performance of individual reproductive workers would become more distinct when they produced more eggs. Bad helping behaviour, getting worse with higher egg-laying capacity and therefore potentially, socially more costly, alone demonstrates why a worker caste should be in the best interest of a stingless bee colony when completely sterile or laying non-functional eggs only. This may be one of the reasons why worker male production in stingless bees is in general much lower than expected on basis of kin-selection theory (Peters et al., 1999; Tth et al., 2002).
References
Beig, D. 1972. The production of males in queenright colonies of Trigona (Scaptotrigona) postica. Journal of Apicultural Research, 11: 33-39. Cepeda, O. I. 2006. Division of labor during brood production in stingless bees with special reference to individual participation. Apidologie, 37: 175-190. Koedam, D.; Contrera, F. A. L.; Imperatriz-Fonseca, V. L. 1999. Clustered male production by workers in the stingless bee Melipona subnitida Ducke (Apidae: Meliponinae). Insectes Sociaux, 46:387-391. Koedam, D.; Contrera, F. A. L.; Fidalgo, A. O. & de, Imperatriz-Fonseca, V. L. 2005. How queen and workers share in male production in the stingless bee Melipona subnitida (Apidae, Meliponini). Insectes Sociaux, 52(2):114-121. Koedam, D.; Cepeda Aponte, O. I. & Imperatriz-Fonseca, V. L. 2007. Egg laying and oophagy by reproductive workers in the polygynous stingless bee Melipona bicolor (Hymenoptea, Meliponini). Apidologie, 38:55-66. Peters, J. M.; Queller, D. C.; Imperatriz-Fonseca, V. L.; Roubik, D. W.; Strassmann, J. E. 1999. Mate number, kin selection and social conflicts in stingless bees and honeybees. Proceedings of the Royal Society of London B, 266:379- 384. Sakagami, S. F. & Zucchi, R. 1967. Behavior studies of the stingless bee, with special reference to the oviposition process VI. Trigona (Tetragona) clavipes. Journal of the Faculty of Science, Hokkaido University, Series VI, Zool., 16(2):292-313. Sakagami, S. F. & Zucchi, R. 1974. Oviposition behavior of two dwarf stingless bees, Hypotrigona (Leurotrigona) muelleri and H. (Trigonisca) duckei, with notes on the temporal articulation of oviposition process in stingless bees. Journal of the Faculty of Science, Hokkaido University, Series VI, Zool., 19(2):361-421. Sakagami, S. F. 1982. Stingless bees. In: Hermann, H. R. (ed.), Social Insects. New York, Academic Press, III, pp. 361-424. Tth, E.; Strassmann, J. E.; Nogueira-Neto, P.; Imperatriz-Fonseca, V. L.; Queller, D. C. 2002. Male
243
production in stingless bees: variable outcomes of queen-worker conflict. Molecular Ecology, 11:2661-2667. Velthuis, H. W. W.; Koedam, D. & Imperatriz-Fonseca, V. L. 2005. The males of Melipona and other stingless bees, and their mothers. Apidologie, 36: 169-185. Zucchi, R. 1993. Ritualised dominance, evolution of queen-worker interactions and related aspects in stingless bees (Hymenoptera: Apidae). In: Inoue T., Yamane S. (eds.), Evolution of Insect Societies, Hakuhin-sha Publishing Co., Tokyo, pp. 207-249.
244
The Role of Leks in the Reproduction of Stingless Bees

Elisabeth Engels and Wolf Engels, Zoological Institute, University of Tbingen, Germany, and Departamento de Gentica, USP, Ribeiro Preto, S P, Brasilien Dedicated to the memory of Eva Crane (1912 2007) who 40 years ago observed with us the male aggregations in front of Scaptotrigona postica colonies in our meliponary at the Genetics Department on the USP Campus in Ribeiro Preto
Abstract
Stingless bees form male aggregations close to nests containing virgin queens. Numerous males can sit or fly around for periods of weeks or months, depending on the species-specific seasonal production of sexuals. Such male assemblies are leks without individual male mini-territories, instead stabilized by a male aggregation pheromone. The leks constitute of vagabonding males originating from many colonies perhaps faraway, however, not from the nests nearby. Migration and aggregation are essential proximate components of the male premating behaviour. A virgin queen starting for her nuptial flight is immediately chased by the waiting males. Because of the preceding male migration, her copulation with a brother participating in the lek is highly improbable. The panmictic effect of such male mass gathering ensures outbreeding, in particular important in case of monandry. Ultimately the role of leks in the reproductive strategy of stingless bees is contribution to the maintenance of a diverse genetic structure in local populations.
245
Conflito Entre Rainha e Operrias na Produo de Machos em Colnias de Melipona scutellaris (Apidae: Meliponini)
Denise A. Alves1; Tom Wenseleers2; Tiago Mauricio Francoy3; Vera L. Imperatriz-Fonseca1,3; Paulo Nogueira-Neto1 & Prsio S. Santos-Filho1 1 Depto. de Ecologia, IB, Universidade de So Paulo 2 Zoological Institute, University of Leuven 3 Depto. de Biologia, FFCLRP, Universidade de So Paulo As colnias de abelhas sem ferro so boas candidatas para se testar o balano entre cooperao e conflitos de interesses. Como regra geral, as rainhas so fecundadas por apenas um macho e, conseqentemente, as operrias so mais aparentadas aos seus prprios filhos (r=0.50) ou aos seus sobrinhos (r=0.375) do que aos seus irmos (r=0.25). Logo, o potencial conflito de quem produz os machos esperado. Tal conflito entre as castas pode ser detectado durante o POP (Processo de Aprovisionamento e Oviposio), em que algumas operrias com ovrios ativos colocam ovos reprodutivos, geralmente aps a oviposio da rainha, que daro origem aos machos. A avaliao desse conflito pode ser realizada com o uso de marcadores moleculares, como foi o caso do presente trabalho. Para isso, operrias e machos foram coletados em diferentes ninhos de Melipona scutellaris e as genotipagens foram feitas com auxlio de loci polimrficos de microssatlites. Os resultados obtidos indicam que uma proporo substancial dos machos eram filhos de operrias, o que corrobora com dados presentes na literatura para essa e outras espcies de abelhas sem ferro.
Bego LR (1982). On social regulation in Nannotrigona (Scaptotrigona) postica Latreille, with special reference to male production cycles (Hym., Apidae, Meliponinae). Bol. Zool. Univ. So Paulo, 7: 181-196. Beig D (1972). The production of males in queenright colonies of Trigona (Scaptotrigona) postica. Journal of Apic. Res., 11: 33-39. Chinh TX, Grob GBJ, Meeuwsen FJAJ and Sommeijer MJ (2003). Patterns of male production in the stingless bee Melipona favosa (Apidae, Meliponini). Apidologie 34: 161-170. Koedam D, Contrera FAL and Imperatriz-Fonseca VL (1999). Clustered male production by workers in the stingless bee Melipona subnitida Ducke (Apidae, Meliponinae). Insectes Soc., 46: 387-391. Koedam D, Velthuis HHW, Dohmen MR and Imperatriz-Fonseca VL (2001). The behavior of laying workers and the morphology and viability of their eggs in Melipona bicolor bicolor. Physiol. Entomol., 26: 254-259. Peters JM, Imperatriz-Fonseca VL, Queller D, Roubik DW, Strassmann JE (1999). Mate number, kin selection and social conflicts in the stingless bees and honeybees. Proc. R. Soc. of London B, 266: 379-384. Ratnieks FLW, Foster KR and Wenseleers T (2006). Conflict resolution in insect Societies. Annu. Rev. Entomol. 51: 581608.
246
Sommeijer MJ and van Buren NWM (1992). Male production by laying workers in queenright colonies of Melipona favosa (Apidae, Meliponinae). In: Biology and evolution of social insects J. BILLEN (Ed.), Leuven University Press, p.89-98. Sommeijer MJ, De Brujin LLM, Meeuwsen FJAJ and Martens EP (2003) Natural patterns of caste and sex allocation in the stingless bees Melipona favosa and M. trinitatis related to worker behaviour. Insectes Soc. 50: 38-44. Strassmann JE (2001). The rarity of multiple mating by females in the social Hymenoptera. Insectes Soc., 48: 1-13. Tth E, Queller DC, Dollin A and Strassmann JE (2004). Conflict over male parentage in stingless bees. Insectes Soc., 51: 1-11. van Veen JW, Arce HGA and Sommeijer MJ (2004). Production of queens and drones in Melipona beecheii (Meliponini) in relation to colony development and resource availability. Proceedings of the Section Experimental and Applied Entomology of the Netherlands Entomological Society (NEV), 15: 35-39. Velthuis HHW, Koedam D and Imperatriz-Fonseca VL (2005). The males of Melipona and other stingless bees, and their mothers. Apidologie, 36: 169-185. Financiamento: FAPESP (05/58093-8; 04/15801-0), CNPq (151947/2007-4; 480957/2004-5)
247
The Behavioral Roles of Cuticular Hydrocarbons in Eusocial Bees: Are They The Same in Stingless Bees?
Fbio S. Nascimento1, Ivelize C. Tannure-Nascimento2 & Ronaldo Zucchi2 =1 Departamento de Biologia, Universidade Federal de Sergipe; fabio.nascimento@pq.cnpq.br; 2 Departamento de Biologia, FFCLRP, Universidade de So Paulo
Abstract
This mini-review covers selected literature on some of the behavioral aspects involving cuticular hydrocarbons in social bees. Major topics involve the composition of epicuticular hydrocarbons and wax comb. Nestmate discrimination, food source marks and caste status may be the principal roles played by these compounds. In addition, we devoted our discussion comparing the studies made on honey bees, sweat bees and bumble bees with stingless bees.
Introduction
The studies on the epicuticular lipids have increased since the recent findings reported their importance in the biology of social insects. This interest is combined with the availability of methodologies and equipments for the analysis of volatile and semi volatile compounds, and the relative easiness of identification of the epicuticular components, led to an increase in the number of papers published on this topic (reviewed in Howard & Blomquist, 2005). In fact, chemical communication based on cuticular hydrocarbons without glandular origin seems to be common among eusocial termites, bees, wasps and ants (Breed, 1998; Clment & Bagnres, 1998; Gamboa, 1991). Cuticular hydrocarbons are involved in kin recognition at different levels including species, colony, gender and caste levels. The waxes present on the surface of insects play an essential role as anti-desiccatory barrier such as avoiding loss of water and also entry of pathogens. In social insects, the cuticle contains a mixture of different hydrocarbons that present quantitative variations among individuals. The best functional analogy of these compounds was provided by Blomquist et al. (1998): Cuticular hydrocarbons provide [social] insects with the chemical equivalent of the visually variable colored plumage of birds. So, these chemicals may be endless sources of studies in every individual, colony and population of social insect. Although stingless bees have much more species than Apis, so far few studies have deeply addressed the chemical composition and importance of cuticular hydrocarbons in these bees. Here we present a mini-review of the previously reported results on cuticular hydrocarbons in stingless bees and provide a comparison with honeybees and other eusocial bees.
248
Composition and function of cuticular lipids

Honeybees In terms of chemical compositions, cuticular waxes of honey bees are dominated by hydrocarbons with pronounced amounts of alkanes, alkenes, alkadienes and branched alkanes (Breed & Stiller, 1992). These chemical compounds have longer chains of carbon and constitute a blend that provides the cuticular signature. Other important compounds used as discriminatory cues are esters and alcohols. There are two main sources to acquire cuticular hydrocarbons: exogenous and endogenous sources. The exogenous source arises from chemicals acquired directly from the environment such as floral oils. The endogenous source is derived from physiological processes that are influenced by both genetic and environmental factors. Therefore, discrimination among subfamilies is expected in honeybee hives which would produce a detrimental effect for the entire colony because of nepotistic behavior (Arnold et al. 2000). However, mechanisms of transference of hydrocarbons such as trophallaxis and allogromming prevent distinct chemical segregation within the hives. Hydrocarbons present in the cuticular waxes of bees are widely assumed to function as cues (for nestmate and for kin) used in intracolonial and intercolonial recognition. In fact, waxes play important and various roles in the social life of honeybees, and some studies suggest a chemical continuum between waxes and cuticular surfaces of bees. This explains why younger individuals are likely to be accepted in non-nestmate colonies (Breed et al. 2004). Newly-emerged workers only acquire colony odor after few days in contact with nest materials. Wax comb swap between colonies can also modify the acceptance/rejection behavior of nest guards, showing that colony signature is changeable according to the non-heritable sources (DEttorre et al. 2006; Couvillon et al. 2007). Bumblebees Oldham et al. (1994) analyzed cuticular hydrocarbons of several Bombus terrestris and concluded that the blend of hydrocarbons was constant across different body parts, but that B. lapidarius, B. pascuorum and two B. terrestris subspecies differed in the relative quantities of different compounds. These species also present notable differences in regard to their tarsal extracts. It is known that bumblebees use hydrocarbons as scent marks or cues left on flowers by previous visitors. The composition of tarsal extracts comprises complex mixtures of long-chain alkanes and alkenes with between 21 and 29 carbon atoms. Cuticular hydrocarbons were rich in the extracts of B. hypnorum. Alkanes (linear and branched), alkenes, alkadienes, terpenes, acids and esters were the most compounds present in both Dufours glands and in cuticular washings (Ayasse et al. 1995). These compounds were significantly distinct within castes and between workers, suggesting that behavioral dominance and worker functions in these bees can be reflected by chemicals as well. Sweat bees Cuticular hydrocarbons may have important implications for the social behavior of primitively eusocial sweat bees. In Lasioglossum zephyrum, females are able to discriminate incoming nestmates from strangers (Greenberg, 1979). High relatedness of nests in aggregations is also a distinct feature that indicates the ability of recognition (Winston, 1992). Mating biology of the primitively eusocial sweat bee Lasioglossum (Evylaeus) malachurum is mediated by a female-produced sex pheromone. In this species, compounds identified as the volatile bouquets consisting of n-alkanes, n-alkenes and iso-pentenyl esters of unsaturated fatty cuticular constituents of virgin gynes were highly attractive to
249
males. Isopentenyl esters of unsaturated fatty acids were the key compounds in inducing male inspections as well as stimulating pounces and copulatory attempts (Ayasse et al. 1999). Stingless bees Studies on Melipona bees showed that epicuticular waxes are mostly composed by high saturated alkanes, alkenes and methyl-branched alkanes (Abdalla et al. 2003; Nascimento et al., unpublished data). In Melipona bicolor, quantitative and qualitative differences of chemical compounds were found between and within castes and genders (Abdalla et al. 2003). Similar results were also found in Schwarziana quadripunctata (Nunes et al. 2008). Odd long chained hydrocarbons (C19 to C33) were distinct between colonies, ages and castes. Examination of the cuticular lipids of Scaptotrigona bipunctata also showed clear differences of the cuticular hydrocarbon profiles between three colonies (Jungnickel et al., 2004). In this species, the cuticular lipids were a mixture of hydrocarbons (saturated and unsaturated alkanes and alkenes) within the range of C23C29. The sources of hydrocarbons in stingless bees are still unknown, but like cuticular hydrocarbons, chemicals present in the wax of some Trigona species consist of varying proportions of hydrocarbons, esters and free acids (Blomquist et al. 1985; Milborrow et al. 1987). However, the waxes of different stingless bee species are chemically simpler with a higher percentage of hydrocarbons and a lower percentage of monoesters than the wax of A. mellifera (Koedam et al. 2002). Hydrocarbons also seem to play a role as food source marks (Nieh, 1998). Recent studies showed that tendal glands of Melipona seminigra produce substances that are used as scent marks on flowers, therefore reducing both the time of searching and the time spent with the handling of nonrewarding flowers (Jarau et al. 2004; 2005). This secretion had 41 compounds that could be identified in the tendon gland and the tarsal extracts (Jarau et al. 2004). Recently, nestmate discrimination in stingless bees has been investigated regarding to the role of cuticular hydrocarbons (Jungnickel et al., 2004; Nunes et al., 2007; Pianaro et al. 2007). In S. bipunctata, 9-tricosene, 7-tricosene, 3-methyltricosane, pentacosane, hexacosane, 7-heptacosene and nonacosane had an important function to separate studied colonies based on recognition experiments. Friseomelitta varia guards seem to compare the chemical cuticular odors of incoming individuals and make acceptance decisions according to the similarity of the odors with their natal colony (Nunes et al. 2008). Linear and branched alkanes were the most important hydrocarbons separating colonies. Future studies Continued studies will undoubtedly reveal many new functions for hydrocarbons in social bees. However, bioassays are necessary test these putative functions in natural systems in order to identify which compounds are the most important mediator during behavioral contexts. Some progress is being made in understanding the composition and the function of cuticular hydrocarbons in stingless bees. However, this knowledge is limited compared with that obtained from honeybees. In all groups is necessary a broader approach using electrophysiological, biochemical, and molecular methods in the future studies of cuticular lipids.
References
Abdalla FC, Jones GR, Morgan ED and Cruz-Landim C (2003). Comparative study of the cuticular hydrocarbon composition of Melipona bicolor Lepeletier, 1836 (Hymenoptera, Meliponini) workers and queens. Genetics and Molecular Research, 2: 191-199.
250
Arnold G, Quenet B and Masson C (2000). Influence of social environment on genetically based subfamily signature in the honeybee. J. Chem. Ecol. 26: 2331-2333 Ayasse M, Engels W, Lbke G, Taghizadeh T and Francke W (1999). Mating expenditures reduced via female sex pheromone modulation in the primitively eusocial halictine bee, Lasioglossum (Evylaeus) malachurum (Hymenoptera: Halictidae). Behav. Ecol. & Sociobiol. 45: 95-106. Blomquist, G. J., Roubik, D. W. & Buchmann, S. L. 1985. Wax chemistry of two stingless bees of the Trigonisca group (Apididae: Meliponinae). Comparative Biochemistry and Physiology B, 82: 137-142. Breed MD (1998). Chemical cues in kin recognition: criteria for identification, experimental approaches, and the honey bee as an example. In: Vander Meer RK, Breed MD, Espelie KE,Winston ML, eds. Pheromone Communication in Social Insects: Ants, Wasps, Bees and Termites. Boulder, CO: Westview. Breed MD and Stiller TM (1992). Honey bee, Apis mellifera, nestmate discrimination: hydrocarbon effect and the evolutionary implications of comb choice. Animal Behaviour, 43: 875-883. Breed MD, Perry S and Bjostad LB (2004). Testing the blank slate hypothesis: why honey bee colonies accept young bees. Insectes Sociaux, 51: 12-16. Clment J-L, Bagnres A-G (1998). Nestmate recognition in termites. In: Vander Meer RK, Breed MD, Espelie KE, Winston ML, eds. Pheromone Communication in Social Insects: Ants, Wasps, Bees and Termites. Boulder, CO: Westview. pp. 12655. DEttorre P, Wenseleers T, Dawson J, Hutchinson S. and Ratnieks FLW (2006). Wax combs mediate nestmate recognition by guard honeybees. Animal Behaviour, 71: 773-779. Greenberg L (1979). Genetic component of bee odor in kin recognition. Science, 206: 1095-1097. Jarau S, Hrncir M, Ayasse M, Schulz C, Francke W, Zucchi R, Barth FG (2004). A stingless bee (Melipona seminigra) marks food sources with a pheromone from its claw retractor tendons. J. Chem. Ecol. 30:793804 Jarau S, Hrncir M, Zucchi R, Barth FG (2005). Morphology and structure of the tarsal glands of the stingless bee Melipona seminigra. Naturwissenschaften, 92: 147-150. Koedam D, Jungnickel H, Tentschert J, Jones GR and Morgan ED (2002). Production of wax by virgin queens of the stingless bee Melipona bicolor (Apidae, Meliponinae). Insectes Soc., 49: 229-233. Milborrow BV, Kennedy JM and Dollin A (1987). Composition of wax made by the Australian stingless bee Trigona australis. Australian Journal of Biological Sciences, 40: 15-25. Nunes TM, Nascimento FS, Turatti IC, Lopes NP and Zucchi R (2008). Nestmate recognition in a stingless bee: does the similarity of chemical cues determine guard acceptance? Animal Behaviour, doi:10.1016/j.anbehav.2007.08.028. Nunes TM, Turatti IC, Mateus S, Nascimento FS, Lopes NP and Zucchi R (2008). Cuticular hydrocarbons in the stingless bee Schwarziana quadripunctata (Hymenoptera, Apidae, Meliponini): differences between colonies, castes and age. Genetics and Molecular Research (in press). Pianaro A, Flach A, Patricio EFLRA, Nogueira-Neto P, Marsaioli AJ (2007). Chemical changes associated with the invasion of a Melipona scutellaris colony by Melipona rufiventris workers. J. Chem. Ecol. 33:971984. Winston, ML (1991). Semiochemical and insect sociality. In: Insect Chemical Ecology, an Evolutionary Approach. Bernard D. Roitberg. and Murray B. Isman (eds.). New York and London: Chapman and Hall.
251
SI MPSIO 12
FERRAMENTAS PARA AVALIAO DA BIODIVERSIDADE EM ABELHAS
Coordenador: Tiago Mauricio Francoy
252
A Morfometria Geomtrica de Asas e a Identificao dos Meliponini

Tiago Mauricio Francoy1 Lionel Segui Gonalves1 & Vera Lucia Imperatriz Fonseca2 1 Depto de Biologia Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto. 2 Depto de Ecologia Instituto de Bioscincias A biometria ou morfometria de abelhas uma ferramenta muito importante na avaliao da biodiversidade em abelhas que vem sendo usada h muito tempo e que ultimamente vem ganhando muita importncia devido ao seu baixo custo e grande eficincia apresentados. Atualmente, dois novos procedimentos tm se mostrado muito eficientes na identificao de espcies de abelhas e tambm no auxlio da determinao do grau de africanizao das abelhas Apis mellifera. O primeiro deles foi criado em meados dos anos 90, quando Schrder et al. (1995) desenvolveram um sistema semi-automtico de obteno de medidas, classificao e identificao de espcies. Neste sistema chamado ABIS (Automated Bee Identification System), os pontos de juno de nervuras das asas anteriores tinham que ser manualmente marcados e o sistema, atravs de um complexo mecanismo de reconhecimento de padres de imagens identificava as nervuras e extraia as caractersticas de cada uma das asas, criando uma impresso digital de cada uma das asas. Para um reconhecimento e classificao com maior confiabilidade, o sistema precisa primeiro ser treinado com pelo menos 30 indivduos por espcie. Uma vez feito esse treinamento, a identificao se torna extremamente rpida (Steinhage et al., 1997; Schrder et al., 2006). Uma automatizao deste sistema foi publicada em 2001 (Steinhage et al., 2001), com dois grandes melhoramentos que facilitavam o uso do software e aumentavam a preciso das classificaes. A primeira delas foi a deteco automtica dos pontos de juno de nervuras e marcao automtica dos landmarks utilizados na anlise. A segunda grande melhora no software foi a utilizao de Anlises Discriminantes de Kernel (KDA) ao invs da tradicional Anlise Discriminante Linear (LDA). As KDA se utilizam de funes discriminantes no lineares que se dobram no espao, permitindo uma melhor classificao dos grupos estudados e possibilitando uma taxa de acerto de at 99,8% nas classificaes dos indivduos dentro de suas respectivas espcies, mesmo quando os grupos utilizados na anlise apresentavam grandes similaridades, como no caso das abelhas do gnero Colletes, Andrena e Bombus. Drauschke et al., (2007) testaram o sistema com subespcies de Apis mellifera e tambm obtiveram um resultado muito bom, atingindo 94% de acerto nas taxas de classificao. Se levarmos em conta que so medidos mais de 40 caracteres de diversas partes do corpo destas abelhas pra uma identificao precisa da subespcie, o ABIS, por se utilizar somente de caractersticas extradas das asas anteriores, apresenta resultados muito bons. A outra metodologia a morfometria geomtrica, que tem se mostrado muito til em estudos de identificao de espcies de abelhas. O teste baseado nos deformaes relativas consiste na utilizao de marcos anatmicos (Rohlf & Marcus, 1993). Esses marcos anatmicos so pontos nos quais as estruturas biolgicas so analisadas e que permitem identificar as variaes de forma entre as mesmas estruturas morfolgicas nos diferentes exemplares em estudo (Rohlf, 1998).
253
Esta metodologia utiliza uma srie de tcnicas que visam descrever e representar a geometria das formas estudadas. Enquanto nas abordagens tradicionais a variao da forma estudada atravs da covariao entre pares de medidas lineares, a morfometria geomtrica capaz de descrever e localizar mais claramente as regies de mudanas na forma e, sobretudo de reconstruir e reconstituir graficamente estas diferenas (Bookstein 1991). Desta maneira, a metodologia foi testada em alguns grupos de abelhas sem ferro com o intuito de se testar a sensibilidade do mtodo na separao dos grupos de abelhas e sua aplicabilidade na identificao de espcies. O primeiro trabalho utilizando morfometria geomtrica para diferenciao de grupos de abelhas foi realizado com um grupo de abelhas africanizadas e suas subespcies ancestrais. A anlise de deformaes relativas dos padres de nervura de asa atingiu uma taxa de 85% de classificaes corretas nas subespcies de Apis mellifera (Francoy et al., 2006). Em abelhas sem ferro, o primeiro trabalho realizado com este tipo de anlise foi feito por Francisco et al. (2008) demonstrando que duas populaes de Plebeia remota no apresentam fluxo gnico, sendo que at o momento as populaes eram reconhecidas como sendo pertencentes mesma espcie. Juntamente com outros marcadores, como DNA mitocondrial e hidrocarbonetos de quitina, tais resultados foram reforados na proposio de que as populaes se tratam de duas espcies distintas. Anlises preliminares realizadas dentro do gnero Plebeia com seis espcies diferentes mostraram uma grande divergncia dentro dos grupos, sendo possvel a diferenciao de 93,4% dos indivduos corretamente nos testes de validao cruzada (Silva, 2006). A tcnica se mostrou tambm muito eficiente na discriminao de indivduos de diferentes populaes de Nannotrigona testaceicornis, atingindo um acerto de at 74% na classificao dos indivduos dentro de seus respectivos grupos (Mendes et al., 2007), bem como na diferenciao de duas subespcies de Melipona bicolor, onde foi conseguido um acerto de 86% de classificaes corretas (Francoy et al., dados no publicados). J foram tambm testadas diferenas entre os padres de venao de asa de machos e operrias de Plebeia flavocincta, os quais se apresentaram bem distintos, proporcionando uma discriminao de 99,5% dos indivduos (Silva 2006). Assim, atravs de exemplos bem simples, conseguimos demonstrar a eficincia, a rapidez e a facilidade do uso das novas tcnicas morfomtricas na identificao de abelhas africanizadas e suas influncias, bem como na identificao de outras espcies de abelhas, suas estruturas populacionais e suas origens geogrficas.
Referncias Bibliogrficas.
BOOKSTEIN, F. L. 1991 Morphometric tools for landmark data. Cambridge: Cambridge University Press DRAUSCHKE, M., V. STEINHAGE, A. POGODA, S. MLLER, T. M. FRANCOY, AND D. WITTMANN. 2007. Reliable Biometrical Analysis in Biodiversity Information Systems. pp. 25-36 in Fred, A. & Jain, A. K. eds. Proceedings of the 7th International Workshop on Pattern Recognition in Information Systems - PRIS 2007, Funchal, Portugal. FRANCISCO F.O., NUNES-SILVA P., FRANCOY T.M., WITTMANN D., IMPERATRIZ-FONSECA V.L., ARIAS, M.C., MORGAN E.D. 2008 Morphometrical, biochemical and molecular tools for assessing biodiversity. An example in Plebeia remota (Holmberg, 1903)(Apidae, Meliponini), Insectes Sociaux, DOI 10.1007/s00040-008-0992-7. FRANCOY, TM; GONALVES, LS; WITTMANN, D. 2006 Changes in the patterns of wing venation of Africanized honey bees over time. Anais do VII Encontro sobre Abelhas. p. 173-177.
254
MENDES M.F.M., FRANCOY T.M., NUNES-SILVA P., MENEZES C., IMPERATRIZ-FONSECA V.L. 2007 Intra-populational variability of Nannotrigona testaceicornis Lepeletier 1836 (Hymenoptera, Meliponini) using relative warp analysis, Biosci. J., 23, 147 152. ROHLF, F. J. 1998. On applications of geometric morphometrics to studies of ontogeny and phylogeny. Systematic Biology 47 147-158. ROHLF, F. J. & MARCUS, L. F. 1993. A Revolution in Morphometrics. Trends in Ecology & Evolution 8 129-132. SCHRDER, S., DRESCHER, W., STEINHAGE, V., KASTENHOLZ, B. 1995 An Automated Method for the Identification of Bee Species (Hymenoptera: Apoidea). Proc. Intern. Symp. on Conserving Europes Bees, Int. Bee Research Ass. & Linnean Society London, UK, 6-7. SCHRDER, S., WITTMANN, D., DRESCHER, W., ROTH, V., STEINHAGE, V., CREMERS, A.B. 2006 The new key to bees: Automated Identification by image analysis of wings. In Kevan, P. & Imperatriz-Fonseca, V.L. (eds.) Pollinating Bees. The conservation link between agriculture and nature. 2a Edio. pp 229 ; 236. SILVA, R. A. O. 2006 A morfometria geomtrica e a diferenciao de espcies do gnero Plebeia (Apidae, Meliponini). Monografia apresentada FFCLRP USP, Ribeiro Preto. 42 p. STEINHAGE V., ARBUCKLE T., SCHRDER S., CREMERS A.B., WITTMANN D. 2001 ABIS: Automated Identification of Bee Species, German Programme on Biodiversity and Global Change, Status Report 2001, Bonn, pp. 194195. STEINHAGE V., KASTENHOLZ B., SCHRDER S., DRESCHER W. 1997 A hierarchical approach to classify solitary bees based on image analysis, Mustererkennung 19. DAGM-Symposium, Braunschweig, Sept. 1517, 1997, Informatik Aktuell, Springer, pp. 419426.
255
Molecular Ecology of the Stingless Bee Nannotrigona testaceicornis

Oliveira EJF, Freitas GS, Soares AEE and Contel EPB Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, Brasil. e-mail: eddyfo@rge.fmrp.usp.br
Abstract
The development of cost-effective molecular tools allowing the amplification of minute amounts of DNA effectively opened the field of molecular ecology for stingless bees. Here we review some concepts, techniques and also the advances they have provided for the understanding of the population structure regarding the conservation of the Meliponini. Vertebrate conservation strategies routinely consider genetic factors, but their importance for invertebrate populations is poorly understood. Meliponini are important pollinators, and many species have undergone dramatic declines. As monandrous, social hymenopterans may be particularly susceptible to inbreeding due to low effective population sizes. By using microsatellite markers we intend to study population genetic structuring and gene flow, and also the relationships between genetic diversity, landscape genetics and isolation. Preliminary results suggest that surviving populations of this insect suffer from inbreeding as result of geographical isolation. Implications for the conservation of social hymenopterans are discussed. We also discuss future priorities and point out the main areas where our knowledge is still insufficient. Key words: Molecular Ecology, Meliponini, Stingless bees, microsatellites
Introduction
Ecology has matured during the past quarter century, with theoretical and quantitative developments in the description and modeling of populations, communities and ecosystems (Jones and Lawton, 1995). In parallel, the development of molecular biology techniques has spawned new ways of looking at organisms in the environment, assessing biological processes and activities, and studying population genetics and species distribution. Molecular ecology concerns the application of molecular techniques to questions in ecology, evolution, behavior and conservation biology (Carvalho, 1998). The trajectories of the ecological theory and of the molecular biology techniques development have converged during this decade, and the application of molecular techniques has begun to provide relevant information to ecological questions (Zehr and Voytek, 1999). A major contribution of molecular techniques has been to provide real measures of the biodiversity of the organisms, at the species, population and community levels, as well as numerous insights into population structure, and mating strategies, among many others (Gmez, 2005). Several technical and methodological developments in molecular biology have facilitated this approach, among these, refinement in DNA extraction protocols, polymerase chain reaction (PCR), design of conserved primers which allowed amplification and sequencing of genes of
256
virtually any organism, and, the divulgation of protocols for the development of species-specific microsatellite primers (Zane et al., 2002). The stingless bees and molecular ecology The Meliponini or stingless bees (Hymenoptera: Apidae) are one of the most abundant and ecologically important social invertebrates in tropical communities due to their keystone role in the pollination of large numbers of wild plants, as well as crops (Roubik, 1989). Compared to their sister group, the honeybees (Apini), the 400 known species of pantropical Meliponini have been little studied, the result being that even the classication of the group is still largely unresolved (Michener, 2000). Moreover, few extensive analyses have been conducted on the population structure of stingless bee species (cf. Castanheira and Contel, 2005; Arias et al., 2006). Habitat loss and fragmentation caused by intensifying the land use in agriculture, wooded land and built up areas have been identied as the main reason for the decline of biodiversity of the group, all over the world. The field of stingless bees biology has much to gain from molecular biology, as several themes have arose much theoretical debate with little suppot from empirical data. Some of these long formulated questions include: How many species have the Meliponini group? What are the patterns of variation across populations? What is the degree of genetic divergence between populations? How important is habitat fragmentation in dispersal and gene flow? How important are dispersal and gene flow in structuring stingless bees populations? How do land cover, agriculture and geographical patches inuence the species richness of declining, by stabling and increasing stingless bees populations? Does the landscape composition affect the genetic diversity of local populations and, if so, is this effect scale-dependent? The molecular ecological approach in Meliponini will provide new insights into those questions and also will revitalize many areas of stingless bees research. Technical and methodological advances in molecular ecology Significant progress had been made in understanding insect diversity and ecology by using classical genetic principles, for a long time. Common visible phenotypic markers were very useful to study patterns of dispersion, mating behaviour and inheritance of genetic traits. Although the phenotypic markers could be perceived during all the life span of the organisms and could be readily used for studies in field conditions, they suffered from many practical limitations. Because of such difficulties and with the concurrent advancement in biochemical methodologies, protein markers then became very helpful. They made a significant contribution in the early periods, when DNA technologies were not so much advanced as it is now (Loxdale and Lushai, 1998). The electrophoretic pattern of allozymes as detected in polyacrylamide or starch gels were used to identify different alleles of a given gene. Based on banding patterns, it was possible to determine the extent of heterogeneity of loci in a population, based on the variant allozymes produced by the individuals. Banding pattern of isozymes (products of different loci, but with the same function) could also be used for studying genetic variation within and between populations (Loxdale and Lushai, 1998). As result, labour-intensive studies using allozyme markers in stingless bees have yielded valuable data (Contel and Kerr, 1976, Falco and Contel, 1991; Castanheira and Contel, 1995). However, with the development of DNA-based marker systems, it was found out that greater levels of polymorphism could be obtained by using DNA markers than by using protein markers. This is because mutations in introns or even in the codons of a gene can potentially provide more variation at the DNA level than at the protein level. Moreover, DNA samples are more informative than proteins and they are obtained at overall time of development and in all tissues of the organism, unlike proteins.
257
Thus, DNA markers became the most suitable yardsticks for measuring genetic differences between individuals, or within and between related species or populations (Behura, 2006). Traditionally, mitochondrial DNA (mtDNA) has been a choice of marker for studying genetic variation in Meliponini species (Moretto and Arias, 2005; Arias et al., 2006). Mitochondrial gene sequences have been used for phylogenetic and population genetics studies, to infer about the evolutionary history of related species. More precisely, these markers have provided invaluable insights into the history and genetic basis of speciation and phenotypic evolution of recently diverged species (Behura, 2006). Microsatellites are also used as prevailing markers in insect studies because of the high abundance and highly variable nature of their loci in the genome. Microsatellites or simple sequence repeats (SSRs) are tandemly repeated motifs of 1-6 bases found in all prokaryotic and eukaryotic genomes analyzed to date. They are present in both coding and noncoding regions and are usually characterized by a high degree of length polymorphism (Behura, 2006). Despite their rising popularity in insect research, microsatellites have not yet become a major marker system in entomology. Recent studies have shown that microsatellite markers can be faithfully extended beyond population and ecological genetics in stingless bee (Paxton et al., 1999, Toth et al., 2003). The use of microsatellite markers in ecological studies is preferred as they are highly polymorphic in nature and are also abundant to generate large numbers of markers compared to other systems. Large numbers of microsatellites can be isolated by generating a genomic library of small fragments either amplified by PCR or generated by partial digestion of genomic DNA (Lunt et al. 1999) and enriched with simple sequences repeats (Zane et al., 2002). Although the cost involved in the initial setup (genomic library) is higher than that of the other markers, microsatellites provide several advantages, such as a higher information content (much more alleles as compared with allozymes); this is an essential feature in population and ecological studies where more number of genotypes are required for meaningful statistical analyses. However, recent findings have shown that in some cases microsatellites are not neutral markers as they are found involved in gene regulation, genetic hitchhiking, and sex-specific differential selection (Schlotterer 2000), and hence, they may not be useful for evolutionary and phylogenetic studies. Nevertheless, the development of these molecular markers in stingless bees represents a valuable resource for further molecular ecological studies in species of the group. Traditionally, microsatellite loci have been isolated from partial genomic libraries (selected for small insert size) of the species of interest, by the screening of several thousands of clones through colony hybridization with repeat containing probes. As mentioned above, although relatively simple, especially for microsatellite rich genomes, this approach can turn out to be extremely tedious and inefficient for species with low microsatellite frequencies. Microsatellite enrichment has also been developed to increase the proportion of clones in a given library containing the microsatellite motif of interest (Zane et al., 2002). Unfortunately, the de novo development of SSRs is a costly and time consuming endeavor (Zane et al., 2002). Added to this difculty is the fact that the polymerase chain reaction primers used to amplify SSRs are frequently species-specic, meaning that markers developed for one taxon cannot be readily transferred to another. So, in spite of reducing the general utility of preexisting markers, this lack of transferability also means that interspecic comparisons are often based on disparate sets of markers, effectively confounding species differences with possible locus-specic effects. DNA microsatellites from Nannotrigona testaceicornis. Currently, stingless bees species are endangered because of habitat fragmentation, and anthropogenic activities (primarily small agricultural fields and low-intensity suburban development). Knowledge of the processes that determine population genetic structure is of importance to conserve
258
and to manage the existing populations of endangered species. To investigate the genetic processes influencing the survival of a species, suitable molecular markers are required to apply for individual genotype characterization. Microsatellite markers have been proven to be very efficient for conservation genetics studies due to their reproducibility, multi-allelic nature, codominant inheritance, relative abundance and good genome coverage (Schlotterer, 2000). Ira, Nannotrigona testaceicornis (Lepeletier 1836), is a eusocial bee, that nests on tree cavities or cavities of man-made structures (Mendes et al, 2007). The colonies can have from 2,000 to 3,000 bees. These bees are black, very small, and usually have grey hair (Monteiro, 2001). In Brazil, this species is distributed through the States of Bahia, Esprito Santo, Gois, Minas Gerais, Rio de Janeiro and So Paulo (Silveira et al., 2002). Nevertheless, also occurs in Paran, Santa Catarina and Rio Grande do Sul, in the very South of Brazil (Mendes et al, 2007). The species has a large geographic distribution and occupies different biomes, including urban areas (Souza et al., 2002). The total DNA was extracted from a single adult of N.testaceicornis thorax preserved in alcohol using phenol/chloroform (Sambrook et al., 1989). Microsatellite markers were isolated according to the protocols of Billotte et al. (1999). The genomic DNA was digested with RsaI and the fragments were ligated to two double-strand adapters (RSA 21 and RSA 25), and then polymerase chain reaction (PCR) was performed using one strand of the adapter RSA 21 as primer. The PCR products were purified using the QIAquick gel extraction kit (QIAGEN). Two biotinylated probes (GA)8 and (AC)8 (Promega) were hybridized to the PCR products. The DNA fragments hybridized to biotinylated probes were captured using streptavidin-coated magnetic beads. The bound DNA was eluted from the magnetic spheres, re-amplified using RSA 21, and purified using the QIAquick gel extraction kit (QIAGEN). The DNA fragments were cloned according to the manufacturers protocol using the plasmid pGEM-T Easy vector (Promega) and transformed into Escherichia coli XlL1 Blue (Invitrogen). Ninety-eight positive clones were recovered through alkaline lysis (Sambrook et al. 1989), and inserts were sequenced using the BigDye Terminator version 3.1 Cycle Sequencing Kit and the ABI PRISM 377 sequencer. Sixty-tree of these clones (65%) contained microsatellite sequences with more than six repeat motifs and sufficient flanking sequences for primer design. We designed primer pairs using the primer 3 software (Rozen and Skaletsky 2000). We characterized, till now, five polymorphic loci in 100 individuals from a natural population collected at University of So Paulo (Ribeiro Preto Campus, Brazil). The PCR products were separated on a 8% denaturing polyacrylamide gel and visualized by silver-staining as described by Creste et al. (2001). Product sizes were estimated by comparison with a 10-bp DNA ladder (Promega). The microsatellite loci will be invaluable tools for conservation genetics surveys in many other Meliponini taxa, for example, for assessing the effect of landscape fragmentation on historical and contemporary gene flow, for species delimitation, and for studies on the origin and breakdown of reproductive barriers among closely related populations and/or species of stingless bees.
General conservation implications

Landscape genetics Landscape genetics provides information on how landscape and environmental features inuence population genetic structure. It is a new research area that integrates landscape ecology, spatial statistics and population genetics, and provides a framework for testing the relative influence on gene flow, genetic discontinuities, admixture of populations and spatial genetic struture (SGS) in natural populations (Manel et al. 2003; Storfer et al., 2007).
259
The habitat fragmentation is predicted to restrict gene flow, which can result in the loss of genetic variation and in inbreeding depression. The understanding of the landscape effects on genetic connectivity provides insight into fundamental biological processes such as: metapopulation dynamics, isolation, speciation, and ultimately, species distribution (Storfer et al., 2007).
Conservation
Two goals of any conservation programme should be ensuring the long-term survival of a species and maintaining ecological and evolutionary processes. Both goals require the preservation of genetic diversity (Hamrick and Godt, 1996). The loss of genetic diversity within natural populations has been observed in Meliponini species, but it is not the reason for the endangered status of the group, but one of the consequences of the extinction and fragmentation of natural populations. Considering that most remnant populations are getting smaller as a result of human disturbance, it is quite possible that the process of habitat fragmentation will lead to a loss of genetic diversity by dramatically increasing mating opportunities between relatives within small populations. Consequently, conservation and restoration genetics should focus on the maintenance of historically significant processes such as high levels of outbreeding and gene flow, and also on the large effective population size of the species. The intensification of agriculture has also propitiated a decline in the ratio of habitats in the adjacencies of country properties, an increase in the pesticide use, a decrease of floral resources in country properties, as well as an increase in the size of the cultivations, intensive use of the ground and of the water, as well as synthetic fertilizer. Finally, serious considerations regarding the management of a particular landscape or habitat must include (1) description of what makes up the baseline habitat(s) of conservation concern; (2) description of the human effects (differentiating between exogenous and endogenous disturbances); (3) general description of the state of alteration of the landscape from a human perspective, taking into account the land-use effects related to the degree of destruction and modification; and (4) additional landscape classification that takes into account the species of stingless bee of concern, in terms of their patterns and scale of resource use. Destruction and fragmentation of natural habitats is the major reason for the decreasing biodiversity (genetic diversity) in the agricultural landscape. Loss of populations may negatively affect biotic interactions and ecosystem stability. The habitat conservation is essential to maintain not only abundant and diverse bee communities, but also plant-pollinator interactions in economically important crops and endangered wild species of plants.
Acknowledgements
This research was funded by the FAEPA (Fundao de Apoio ao Ensino, Pesquisa e Assistncia), and BIOTA-FAPESP (Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo).
References
Arias MC, Brito RM, Francisco FO, Moretto G, et al. (2006). Molecular markers as a tool for population and evolutionary studies in stingless bees. Apidologie. 37:259274. Behura SK (2006). Molecular marker systems in insects: current trends and future avenues. Mol. Ecol. 15:30873113.
260
Billotte N, Lagoda PJL, Risterucci AM, Baurens FC (1999). Microsatellite-enriched libraries: applied methodology for the development of SSR markers in tropical crops. Fruits. 54:277288. Carvalho GR (1998). Advances in molecular ecology, IOS Press, Amsterdam. Castanheira EB and Contel EPB (1995). Isoenzymes related to flight activity of Tetragonisca angustula (Hymenoptera: Apidae: Miliponinae): Evidence of postranslational modification of the hexokinase and detection of new Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenese variants. Biochem. Genet. 33:365-375. Castanheira EB and Contel EPB (2005). Geographic variation in Tetragonisca angustula (Hymenoptera, Apidae, Meliponinane). Apic. Res. 44:101105. Contel EPB and Kerr WE (1976). Origin of males in Melipona subnitida estimated from data of an isozymic polymorphic system. Genetica. 46:271-277. Creste S, Neto AT, Figueira A (2001). Detection of single sequence repeat polymorphisms in denaturing polyacrylamide sequencing gels by silver staining. Plant Mol. Biol. Reptr. 19:299306 Falco TMMA and Contel EPB (1991). Genetic variability in natural populations of Brazilian social bees. II. Electrophoretic data for PGM and MDH give evidence for multiple fertilizations in stingless bees. Brazil. J . Genet. 14:47-59. Gmez A (2005). Molecular ecology of rotifers: from population differentiation to speciation. Hydrobiologia. 546:83-99. Hamrick JL and Godt MJW (1996). Effects of life history traits on genetic diversity in plant species. Phil. Trans. Roy. Soc. London Biol. Sci. 351:1291-1298. Jones CG and Lawton JH (1995). Linking species and ecosystems. Chapman and Hall, New York, New York, USA. Loxdale HD and Lushai G (1998). Molecular markers in entomology. Bull. Entomol. Res. 88:577-600. Lunt DH, Hutchinson WF, Carvalho GR (1999). An efficient method for PCR-based isolation of microsatellite arrays (PIMA). Mol. Ecol 8:891893. Manel S, Schwartz K, Luikart G, Taberlet P (2003). Landscape genetics: combining landscape ecology and population genetics. Trends Ecol. Evol. 18:189197. Mendes MFM, Francoy TM, Nunes-Silva P, Menezes C, et al. (2007). Intra-populational variability of Nannotrigona testaceicornis Lepeletier, 1836 (hymenoptera, meliponini) using relative warp analysis. Biosci. J. 23:147-152. Michener CD (2000). The bees of the world. The Johns Hopkins University Press, Baltimore and London. Monteiro WR (2001). Meliponiculuta - abelha ira (Nannotrigona testaceicornis). Mensagem Doce 60. Moretto G and Arias MC (2005). Detection of mitochondrial DNA restriction site differences between the subspecies of Melipona quadrifasciata Lepeletier (Hymenoptera: Apidae: Meliponini). Neotropical Entomol. 34: 381-385. Paxton RJ, Weischuh N, Quezada-Eun JJG (1999) Characterization of dinucleotide microsatellite loci for stingless bees. Mol. Ecol. 8:685-702. Roubik DW (1989). Ecology and natural history of tropical bees. Cambridge University Press, Cambridge. Rozen S and Skaletsky HJ (2000). primer 3 on the WWW for general users and for biologist programmers. In: Bioinformatics methods and protocols: methods in molecular biology (Krawetz S and Misener S, eds). Humana Press, Totowa, New Jersey, 365386 Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd edn. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York.
261
Schltterer C (2000). Microsatellite analysis indicates genetic differentiation of the neo-sex chromosomes in Drosophila americana americana. Heredity. 85: 610616. Silveira FA, Melo GAR, Almeida EAB (2002). Abelhas brasileiras Sistemtica e identificao. 1.ed. Editora Composio e Arte, Belo Horizonte. Souza LA, Pereira TO, Prezoto F, Faria-Mucci GM (2002). Nest foundation and diversity of Meliponini (Hymenoptera, Apidae) in an urban area of the municipality of Juiz de Fora, MG, Brazil. Biosci.J. 18:59-65. Storfer A, Murphy MA, Evans JS, Goldberg CS, et al. (2007). Putting the landscape in landscape genetics. Heredity. 98:128142. Toth E, Strassmann JE, Imperatriz-Fonseca VL, Queller DC (2003). Queens, not workers, produce the males in the stingless bee Schwarziana quadripunctata quadripunctata. Anim. Behav. 66:359-368. Zane L, Bargelloni L, Patarnello T (2002) Strategies for microsatellite isolation: a review. Mol. Ecol. 11: 116. Zehr JP and Voytek MA (1999). Molecular ecology of aquatic communities: reections and future directions. Hydrobiologia .401: 8-19.
262
Reviso das Anlises de Hidrocarbonetos Cuticulares em Abelhas Sem Ferro.

Hidrocarbonetos cuticulares em abelhas sem ferro.
Tlio Marcos Nunes
Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Avenida Bandeirantes, 3900, Ribeiro Preto (SP) 14040-901, Brasil. * Correponding author: Tlio Marcos Nunes Tel.: +55-016-3602-3826; fax: +55-016-3602-3694. E-mail address: tulionunes@usp.br Present address: Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Avenida Bandeirantes, 3900, Ribeiro Preto (SP) 14040-901, Brazil. Cuticle hydrocarbons in stingless bees: a review
Abstract
The epicuticle is a wax layer that recovers the insects cuticle. There is a wide range of studies concerning the composition of this cover and its function in insect behavior. Although there is a great number of investigations regarding this subject, little is known about this structure and its function in stingless bees. The aim of the present work is to summarize the knowledge about the variability of the cuticular hydrocarbons in this group of highly eusocial bees. The available studies showed differences between species concerning the cuticles chemical composition at different levels. The investigations also showed that, within a single species, there are differences between nests, and that, within a single nest, there are differences among individuals. For those individuals that share a single nest, the cuticles chemical composition can carry information concerning the age of the individual, its gender and its caste. Even though there are only few studies with reference to this topic in stingless bees, the results found so far show an enormous potential for investigating insect biology. Palavras chave: Abelhas sem ferro, hidrocarbonetos cuticulares, Meliponini, casta, sexo, idade.
Introduo
Nos insetos, o tegumento a camada mais externa que recobre o corpo e constitudo pela epiderme e pela cutcula (Guerino and Oliveira, 2002). A cutcula, por sua vez, recoberta por uma camada de cera denominada epicuticula. Essas ceras apresentam como funo primria a proteo contra desidratao e regulao da permeabilidade cuticular. Secundariamente, os compostos presentes nessa camada passaram a atuar como sinais olfativos, desempenhando um papel fundamental na comunicao dos insetos (Lockey, 1988). Esses compostos apresentam uma atuao muito ampla dentro dos vrios grupos de insetos j estudados e, embora um grande nmero de estudos j tenha sido realizado, novas funes de tais compostos e novas possibilidades de utilizao dessas pistas na compreenso da biologia dos insetos so constantemente reveladas. As funes j amplamente descritas na literatura para
263
essas substncias incluem a atuao como feromnios sexuais, pistas de reconhecimento para espcie, feromnios de territrio, alarme, recrutamento e defesa qumica, feromnios termo regulatrios e pistas para parasitas (Howard and Blomquist, 2005). Nos insetos sociais, esses compostos apresentam informaes a respeito da colnia de origem do indivduo, sua idade, linhagem gentica, casta, sexo, status reprodutivo e sua tarefa na colnia (Arnold et al., 1996; Endler et al., 2004; Howard and Blomquist, 2005; Monnin et al., 2006). Alm das funes anteriormente citadas, estudos recentes mostram que diferentes populaes apresentam diferentes perfis qumicos e que essa caracterstica pode ser utilizada em estudos de reconstrues biogeogrficas (Dapporto et al., 2004a; Dapporto et al., 2004b). As substncias que compe a epicutcula so basicamente hidrocarbonetos, distribudos entre alcanos, alcenos, hidrocarbonetos com ramificaes e alcadienos. Alguns outros compostos como alcois, cidos e steres tambm podem ser encontrados, porm, sempre em menores concentraes (Nunes et al., 2008a). Embora as anlises de hidrocarbonetos cuticulares em insetos sociais e suas funes tenham recebido grande ateno nos ltimos tempos, para o grupo das abelhas sem ferro, os estudos com esse enfoque permanecem escassos. O presente trabalho visa organizar as informaes j existentes a respeito de anlises de compostos cuticulares em abelhas sem ferro, mostrando diferenas nessa composio em diferentes nveis. Posteriormente, abordar tambm as metodologias utilizadas e possibilidades de aplicao para diferentes situaes. Variaes entre espcies Alguns estudos, embora no tenham tido como principal foco a comparao entre os perfis cuticulares de diferentes espcies de abelhas sem ferro, mostraram claras diferenas nessa composio. As diferenas encontradas so, na maior parte das vezes, na concentrao relativa de compostos comuns a duas espcies. No entanto, em alguns casos so encontradas diferenas qualitativas entre as espcies comparadas (Pianaro et al., 2007; Caliari et al., 2008; Nunes et al., 2008a). Pianaro et al. (2007) realizaram comparaes entre as espcies Melipona scutellaris e Melipona rufiventris e embora tenham considerado as espcies analisadas como quimicamente similares so encontradas grandes diferenas na abundncia relativa dos compostos identificados na anlise das ceras do abdmen das operrias. Segundo os autores, a cera de M. scutellaris foi composta principalmente de cerca de 25% de alcanos, 42% de alcenos e uma substncia caracterstica dessa espcie o acetato de triacontanil, enquanto a anlise da cera das operrias de M. rufiventris resultou cerca de 50% de alcanos, 35% alcenos e 7% de alcadienos. Nunes et al. (2008a) compararam os perfis qumicos cuticulares de operrias da espcie Frieseomelitta varia e da cleptoparasita Lestrimelitta limao e, da mesma forma, encontraram diferenas tanto qualitativas quanto quantitativas nos compostos identificados. Os picos com concentraes relativas acima de 10% na espcie F. varia foram o heptacosano e o nonacosano, enquanto para a espcie L. limao, apesar de encontrarmos concentrao parecida para o heptacosano, foram observadas concentraes superiores a 10% para o pentacosano e o nonacoseno. Variaes entre ninhos Alm das diferenas encontradas entre as espcies analisadas, nas comparaes entre colnias da mesma espcie (i. e. F. varia), Nunes et al. (2008a) encontraram variaes significativas entre os perfis cuticulares das operrias. Dentre quatro colnias de F. varia analisadas, os grupos de operrias foram separados, sendo que apenas na comparao entre duas dessas colnias, os compostos qumicos no separaram significativamente os indivduos.
264
Da mesma forma, para a espcie Schwarziana quadripunctata, a anlise de duas diferentes colnias mostrou uma clara separao entre os indivduos amostrados. As variaes so encontradas nas comparaes realizadas entre operrias jovens e velhas de cada colnia e tambm entre as rainhas virgens dessas colnias. Um dado importante mostrado nesse trabalho que mesmo dentro da mesma espcie, so encontradas, alm de diferenas nas concentraes relativas dos compostos entre as colnias, tambm diferenas com relao ausncia ou presena de alguns compostos (Nunes et al., 2008b). Ainda, segundo Jungnickel et al. (2004) nas anlises com Scaptotrigona bipunctata, a comparao dos compostos encontrados para guardas de diferentes colnias resultou em uma completa separao grfica na anlise dos componentes principais realizada. A anlise discriminante apontou que todos os indivduos testados foram colocados corretamente dentro do grupo de indivduos de mesma colnia. Variaes dentro do mesmo ninho Dentro de uma mesma colnia h uma grande variao nos compostos cuticulares dos indivduos (Abdalla et al., 2003; Nunes, 2008; Nunes et al., 2008b). Nunes et al. (2008b) mostraram diferenas entre a idade de operrias de uma mesma colnia de S. quadripunctata, pois nas duas colnias analisadas, os indivduos jovens estavam significativamente separados dos velhos atravs da composio qumica da cutcula e, mais uma vez, as diferenas encontradas foram tanto quantitativas quanto qualitativas. Alm da variao entre operrias de diferentes idades, tambm foram evidenciadas diferenas entre essas operrias e as rainhas virgens analisadas, mostrando que os compostos qumicos associados cutcula tambm apresentam variaes de acordo com a casta. Em Melipona bicolor, Abdalla et al. (2003) encontraram diferenas na composio da epicuticula entre os sexos. Assim como mostrado para S. quadripunctata, em M. bicolor so encontradas variaes entre indivduos de diferentes castas e idades. No entanto, diferentemente dos resultados encontrados em S. quadripunctata, no foram mostradas variaes claras entre indivduos recm emergidos e rainhas virgens (Abdalla et al., 2003; Nunes et al., 2008b). Alm das espcies citadas, testes com indivduos de Frieseomelitta varia confirmaram que o conjunto de compostos qumicos que recobrem a cutcula desses insetos separa as operrias e os machos de acordo com a idade, alm de separar os gneros (Nunes, 2008). Esses testes mostram, ainda, claras variaes entre rainhas virgens, rainhas fisogstricas e operrias nessa espcie. Metodologias aplicadas s anlises qumicas Embora a forma da coleta do material e a poro analisada tenham variado entre os estudos, todos os testes foram realizados com a utilizao de um sistema de cromatografia gasosa acoplado a um espectrmetro de massas (CG-EM). O sistema de cromatografia gasosa fornece os dados relacionados s concentraes relativas das substncias, alm de permitir a realizao dos clculos do ndice de reteno das substncias o qual, quando comparado s informaes presentes na literatura, pode auxiliar na correta identificao das substncias. A espectrometria de massas permite a identificao das substncias, seja pelos clculos aplicados aos padres de quebras encontrados, ou ainda pela comparao com bibliotecas comerciais. Dessa forma, a unio dessas duas ferramentas permite a identificao das substncias encontradas e a medida das concentraes dessas. Extrao por solvente A maior parte dos trabalhos encontrados na literatura a respeito da anlise de hidrocarbonetos cuticulares de insetos realiza a extrao das ceras a partir de banhos com solventes orgnicos apolares (Howard and Blomquist, 2005). Os solventes mais comumente utilizados so o hexano e
265
o pentano. O uso de solventes permite uma completa extrao das ceras presente na cutcula dos indivduos, podendo ser utilizado em comparaes quantitativas e qualitativas. No entanto, a utilizao de solventes orgnicos apenas pode ser feita em indivduos mortos, o que impede a anlise do mesmo indivduo em diferentes situaes experimentais, ou a realizao de testes comportamentais com o mesmo indivduo utilizado para as anlises qumicas. Existe ainda, a possibilidade de contaminao da amostra pelas secrees glandulares dos indivduos banhados. Anlise de amostras slidas Os resultados obtidos por Abdalla et al. (2003) foram realizados com a anlise dos compostos cuticulares presentes nas asas das abelhas testadas. Os testes foram realizados utilizando-se o injetor em fase slida descrito por Morgan (1990). Nesse aparato, pequenas amostras de insetos podem ser analisadas quanto sua composio qumica sem a utilizao de solventes. As amostras so acondicionadas em pequenos capilares de vidro e fechadas com fogo. Esse capilar ento inserido no injetor e analisado em um sistema de cromatografia gasosa e espectrometria de massas. A possibilidade de utilizao de pequena quantidade de material facilita a investigao da composio qumica de glndulas e permite a anlise de apenas partes dos indivduos, podendo esses ser utilizados posteriormente para outros testes. A anlise das asas das abelhas diminui a possibilidade de contaminao com secreo de glndulas abdominais e da cabea. Absoro dos compostos Alguns estudos presentes na literatura realizam a tcnica de absoro dos compostos cuticulares dos insetos para a anlise (Turillazzi et al., 1998; Schmitt et al., 2007). Esses processos permitem testes consecutivos em um mesmo indivduo, visto que essa absoro no o prejudica. Para a absoro, existe a possibilidade da utilizao de uma fibra de micro extrao em fase slida (em ingls SPME). Trata-se de uma fibra que pode ter diferentes composies, de acordo com o tipo de composto a ser absorvido. Aps o contato da fibra com o indivduo, a fibra analisada diretamente no sistema CG-EM. Como ocorre a absoro dos compostos, a anlise dessas substncias resulta em uma amostra dos constituintes da cutcula dos insetos, no podendo ser realizadas comparaes quantitativas dessas amostras. Uma outra possibilidade a utilizao de papel filtro na absoro dos compostos. Nesses estudos, um pequeno pedao de papel filtro limpo esfregado sobre a cutcula do inseto. Posteriormente, esse papel passa por um banho com solvente e o extrato resultante desse banho analisado no CG-EM.
Consideraes Finais
Embora relativamente pequena, a literatura a respeito das anlises da composio qumica da cutcula de abelhas sem ferro mostra um grande potencial na utilizao de tais anlises no estudo de diferentes reas da biologia desses insetos. Os resultados mostrados at agora evidenciam claras diferenas entre espcies, colnias, castas, sexo e idade; e mesmo diferenas dentro dessas categorias. Segundo os resultados observados nessas abelhas e com base na grande literatura presente a respeito de hidrocarbonetos de cutcula em outros grupos de insetos sociais fica claro o grande potencial dessas tcnicas em estudos comportamentais, evolutivos, fisiolgicos e ecolgicos.
266
Agradecimentos
Agradeo ao Prof. Dr. Ronaldo Zucchi pela leitura do manuscrito e ao Dr. M. Hrncir na ajuda com o abstract. Esse trabalho teve apoio financeiro da Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP Proc. 2007/59058-7).
Bibliografia
Abdalla FC, Jones GR, Morgan ED and Cruz-Landim Cda (2003). Comparative study of the cuticular hydrocarbon composition of Melipona bicolor Lepeletier, 1836 (Hymenoptera, Meliponini) workers and queens. Genetics and Molecular Research. 2: 191-199. Arnold G, Quenet B, Cornuet J-M, Masson C, et al. (1996). Kin recognition in honeybees. Nature. 379: p. 498. Caliari R, Nunes TM, Turatti ICC, Mateus S, et al. (2007). Anlise dos hidrocarbonetos cuticulares de colnias mistas de abelhas sem ferro (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). In: Anais do V Encontro Brasileiro de Ecologia Qumica, Londrina. Guerino AC and Oliveira VTPde (2002). Glndulas tegumentares do abdmen. In: Glndulas excrinas das abelhas (Cruz-Landim and Abdalla, eds). FUNPEC, Ribeiro Preto, 111-126. Dapporto L, Palagi E and Turillazzi S (2004a). Cuticular hydrocarbons of Polistes dominulus as a biogeographic tool: a study of populations from the Tuscan Archipelago and surrounding reas. Journal of Chemical Ecology. 30: 2139-2151. Dapporto L, Theodora P, Spacchini C, Pieraccini, et al. (2004b). Rank and epicuticular hydrocarbons in different populations of the paper wasp Polistes dominulus (Christ) (Hymenoptera Vespidae). Insectes Sociaux. 51: 279286. Endler A, Liebig J, Schmitt T, Parker JE, et al. (2004). Surface hydrocarbons of queen eggs regulate worker reproduction in a social insect. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 101: 2945-2950. Howard RW and Blomquist GJ (2005). Ecological, behavioral, and biochemical aspects of insect hydrocarbons. Annual review of entomology. 50: 371-393. Jungnickel H, da Costa AJS, Tentschert J, Patricio EFLRA, et al. (2004). Chemical basis for inter-colonial aggression in the stingless bee Scaptotrigona bipunctata (Hymenoptera: Apidae). Journal of Insect Physiology. 50: 761-766. Lockey KH (1988). Lipids of the insect cuticle: origin, composition and function. Comparable Biochemistry and Physiology. 89B: 595-645. Monnin T, Malosse C and Peeters C (1998). Solid-phase microextraction and cuticular hydrocarbon differences related to reproductive activity in queenless ant Dinoponera quadriceps. Journal of Chemical Ecology. 24: 473490. Morgan ED (1990). Preparation of small-scale samples from insects for chromatography. Analytica Chimica Acta. 236: 227-235. Nunes TM (2008). Reconhecimento parental em abelhas eussociais Neotropicais (Hymenoptera: Apinae, Meliponini): uma anlise dos mediadores qumicos e seus determinantes em Frieseomelitta varia. Masters thesis, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras, USP, Ribeiro Preto. Nunes TM, Nascimento FS, Turatti ICC, Lopes NP, et al. (2008a). Nestmate recognition in a stingless bee: does the similarity of chemical cues determine guard acceptance? Animal Behaviour. 75: 1165-1171.
267
Nunes TM, Turatti ICC, Mateus S, Nascimento FS, et al. (2008b). Cuticular hydrocarbons in the stingless bee Schwarziana quadripunctata (Hymenoptera, Apidae, Meliponini): differences between colonies, castes and age. Genetics and Molecular Research. Accepted. Pianaro A, Flach A, Patricio EFLRA, Nogueira-Neto P, et al. (2007). Chemical changes associated with the invasion of a Melipona scutellaris colony by Melipona rufiventris workers. Journal of Chemical Ecology. 33: 971-984. Schmitt T, Herzner G, Weckerle B, Schreier, P, et al. (2007). Volatiles of foraging honeybees Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) and their potencial role as semiochemicals. Apidologie. 38: 167-170. Turillazzi S, Sledge MF and Moneti G (1998). Use of a simple method for sampling cuticular hydrocarbons from live social wasps. Ethology, Ecology and Evoution. 10: 293297.
268
Biodiversidade de Meliponneos: Contribuio da Biologia Molecular

Biodiversidade molecular de Meliponneos Rute Magalhes Brito1, Flavio de Oliveira Francisco1, Geraldo Moretto2, Maria Cristina Arias1* 1 Departamento de Gentica e Biologia Evolutiva, Instituto de Biocincias - Universidade de So Paulo, So Paulo, SP. 2 Departamento de Cincias Naturais, Fundao Universidade Regional de Blumenau, Blumenau, SC. *Autor para correspondncia: Rua do Mato, 277 CEP 05508-090 So Paulo, SP Tel.: (11) 3091-7587 Fax: (11) 3091-7583 E-mail: mcarias@ib.usp.br Stingless Bee Biodiversity: Contributions of Molecular Biology
Abstract
The contribution of molecular analyses to characterization of species and its populations has become unquestionable. The use of molecular markers is one of the best approaches to evaluate genetic variability in populations and is essential to measure the biodiversity of ecosystems. In Brazil, destruction of Cerrado and Atlantic forest biomes has reduced bee populations, with negative impacts in pollinization of local vegetation. Studies aiming at preservation and conservation of these biomes biota are urgent and population molecular studies are crucial to reach this goal. In this work we utilized mitochondrial DNA and microsatellites as molecular markers to study genetic variability of natural populations of one species from Brazilian Cerrado (Partamona mulata) and three species from Brazilian Atlantic forest (Plebeia remota, Partamona helleri, and Melipona quadrifasciata quadrifasciata). Our data demonstrated that populations geographically distant are genetically isolated. Some populations may constitute independent evolutionary units, and this may be the reason for the detected absence of gene flow, indicating speciation events that have occurred in the past or are in progress. Paleogeographic and Paleoclimatic events may be associated to the isolation of populations and to recent speciation process. Recent fragmentation has also influenced the current population genetic structure. Palavras-chave: abelhas sem ferro, biodiversidade, marcadores moleculares
Introduo
As anlises moleculares tm contribudo cada vez mais para a caracterizao de espcies e de suas populaes. Tal potencial para investigao de questes em ecologia, evoluo e taxonomia se deve ao fato de que a variao gentica pode ser quantificada com grande preciso, mais do que outros tipos de medies ecolgicas. Conseqentemente, esse tipo de anlise fornece melhores dados para comparaes estatsticas (Beebee e Rowe, 2004).
269
Atualmente, vrios tipos de marcadores moleculares esto disponveis para anlises de biodiversidade. Marcadores moleculares so sees do genoma, geralmente pequenas quando comparadas ao tamanho total do genoma, escolhidas com inteno de serem representativas de regies maiores do DNA. Cada seo tratada como um nico loco o qual pode ser ou no um gene funcional. Tais marcadores podem ser acessados por meio de diversas tcnicas de biologia molecular. A escolha do marcador molecular, e conseqentemente a tcnica a ser empregada para o acesso variabilidade gentica dos organismos, est relacionada com o tipo de questo a ser investigada. Por exemplo, as isozimas so empregadas em anlises populacionais, pois este um marcador codominante e a determinao dos alelos fundamental para a investigao de fluxo gnico entre populaes. Entretanto, esta tcnica no desejvel para anlises filogenticas, pois variaes presentes no DNA podem no ser refletidas na seqncia de aminocidos das protenas, devido degenerao do cdigo gentico. Dados do DNA mitocondrial (DNAmt) so utilizados para genealogia de genes porque algumas regies dessa molcula acumulam mutaes mais rapidamente do que o DNA nuclear e, por ser haplide e de herana materna na maioria das espcies, tais mutaes acumuladas no so perdidas por meio de recombinao (Avise et al., 1987). O polimorfismo de tamanho de fragmentos de restrio (RFLP) tem sido uma das metodologias mais aplicadas para a caracterizao do DNAmt e para a deteco de variabilidade gentica entre populaes ou espcies. A fragmentao do DNA pode ser obtida pelo uso de enzimas capazes de clivar o DNA em seqncias especficas constitudas por quatro, cinco ou seis pares bases de comprimento. Em estudos populacionais, diferentes padres de tamanho de fragmentos de restrio podem ser encontrados entre diferentes indivduos. O polimorfismo de tamanho de fragmentos observado resulta de mutaes nos stios de restrio ou de inseres/delees (indels), ou rearranjos entre os stios de clivagem, como translocaes e inverses, que alteram a distncia entre os stios de restrio (Ferreira e Grattapaglia, 1998). A tcnica de RFLP, apesar de bastante informativa, pode ser bastante laboriosa quando envolve etapas de transferncia do DNA, separado em gel de agarose, para membrana de nitrocelulose, hibridao e revelao, num processo conhecido como Southern blot. A descrio de marcadores moleculares baseados na PCR (reao em cadeia da polimerase) aumentou a eficincia de deteco de polimorfismos no DNA, alm da reduo do tempo de execuo dos experimentos, do seu custo e da sua complexidade (Matioli e Passos-Bueno, 2001). A combinao da PCR com RFLP consiste na amplificao de regies do DNA, nuclear ou de organelas, previamente digesto com enzimas de restrio. Esse marcador apresenta codominncia tal com o RFLP isoladamente. O uso de primers para regies especficas do genoma faz com que os fragmentos analisados no sejam annimos. Desta forma, a comparao das bandas entre indivduos de uma populao torna-se mais precisa, aumentando a probabilidade de que bandas de mesmo tamanho sejam homlogas. Outra classe de marcador molecular amplamente utilizada em estudos populacionais a dos microssatlites. Estes, compreendem regies que apresentam um nmero varivel de repeties em tandem de 1 a 6 bases do DNA (Hancock, 1999), e que podem ser amplificadas via PCR. Os microssatlites so teis em estudos genticos por serem caracteres mendelianos, codominantes, seletivamente neutros e altamente polimrficos (Strassmann et al., 1996). Os diferentes alelos so caracterizados pelo comprimento exato em pares de bases de um fragmento obtido por meio de PCR, usando para isso primers que flanqueiam a regio das repeties in tandem. Sendo este um marcador codominante, possvel realizar a genotipagem dos indivduos e esses dados podem ser usados para estudos de estruturao populacional de uma espcie. Com base nesses dados, anlises estatsticas podem ento ser realizadas para indicadores de desvios do equilbrio de Hardy-Weinberg (EHW): alterao nas freqncias allicas, vis para excesso ou dficit de heterozigotos e desequilbrio de ligao. Tais desvios do EHW podem indicar a existncia ou no de fluxo gnico entre populaes.
270
Em vista do exposto acima, pode-se concluir que tanto o DNAmt quanto os microssatlites so ferramentas muito poderosas para se estudar a variabilidade gentica de espcies e suas populaes. Tal anlise de fundamental importncia para o conhecimento da biodiversidade de um determinado ecossistema. Entretanto, a devastao da vegetao nativa nos diversos ecossistemas brasileiros, vem ameaando de extino as espcies de abelhas que dependem de substratos como ocos de rvores para a nidificao. Ainda, de acordo com Viana e Melo (1987), o desmatamento causa o isolamento de reas remanescentes de ecossistemas contnuos. Esse isolamento pode representar vrias limitaes ao desenvolvimento das populaes como a reduo na disponibilidade de alimentos e de locais para nidificao, alm de afetar o tamanho das populaes. Em Mamirau (AM), a diminuio do nmero de ninhos de abelhas do gnero Melipona, pela ao de meleiros, causou uma reduo drstica na populao de macacos uacaris. Isso porque estas abelhas so polinizadoras de rvores frutferas, e esses frutos so o principal componente da dieta desses mamferos (Kerr, 1999). Alm da Amaznia, outros biomas que vm sofrendo com a perda de grandes reas de vegetao nativa so o Cerrado e a Mata Atlntica. A diminuio do tamanho populacional devido fragmentao do habitat pode levar diminuio da variabilidade gentica da populao (Beebee e Rowe, 2004), aumentando suas chances de extino. Diante dessa situao, torna-se urgente a realizao de pesquisas de preservao e conservao da biota desses biomas. Para atingir esses objetivos, estudos que enfoquem a gentica de populaes so de fundamental importncia. Com o intuito de conhecer a variabilidade gentica em populaes de abelhas sem ferro, e verificar as possveis conseqncias da degradao de seus habitats em suas estruturas genticas, utilizamos o DNAmt e os microssatlites na anlise populacional de trs espcies da Mata Atlntica (Plebeia remota, Partamona helleri e Melipona quadrifasciata quadrifasciata) e de uma espcie do Cerrado (Partamona mulata).
Material e Mtodos
Material Biolgico As espcies estudadas foram Plebeia remota, Partamona mulata, Partamona helleri e Melipona quadrifasciata quadrifasciata. Os locais de coleta e o nmero de ninhos amostrados esto apresentados na Tabela 1. Tabela 1: Locais de coleta e nmero de ninhos amostrados (entre parnteses) para Plebeia remota, Partamona mulata, Partamona helleri e Melipona quadrifasciata quadrifasciata. Espcie P. remota P. mulata P. helleri M. q. quadrifasciata Local de coleta e nmero de ninhos amostrados Blumenau, SC (12); Curitiba, PR (7); Prudentpolis, PR (35) e Cunha, SP (19). Cceres, MT (13); Cuiab, MT (12); Pocon, MT (14), Santo Antnio do Leverger, MT (6) e Campo Grande, MS (13). Blumenau, SC (8); Luiz Alves, SC (2); Biritiba-Mirim, SP (2); So Paulo, SP (11); Porto Firme, MG (3); Viosa, MG (8); So Miguel do Anta, MG (1); Colatina, ES (9); Ilhus, BA (1) e Coaraci, BA (2). Blumenau, SC (12); Mafra, SC (8) e Prudentpolis, PR (9).
271
DNAmt O RFLP do DNAmt total foi a tcnica utilizada para a anlise de P. remota. As enzimas de restrio utilizadas foram: BamH I, Bcl I, Bgl II, Cfo I, Cla I, EcoR I, EcoR V, Hae III, Hind III, Nde I, Pst I, Pvu II, Sca I, Xba I and Xho I. Os procedimentos para a extrao do DNA, realizao das digestes e visualizao dos fragmentos foram realizados de acordo com o descrito por Francisco et al. (2001). A tcnica de PCR-RFLP foi utilizada para as espcies de Partamona e para M. q. quadrifasciata. Quatro regies mitocondriais foram amplificadas (COII, ATPase8-ATPase6, cytB-ND1 e COIII-ND3) e submetidas digesto por seis enzimas de restrio (Bcl I, Cla I, Dra I, Hae III, Hind III e Hinf I) nas amostras de Partamona. Para M. q. quadrifasciata, sete regies mitocondriais foram amplificadas (ND2-COI, COI, COII, ATPase 8-ATPase 6-COIII,COIII-ND3,CytB-ND1,16S-12S) e posteriormente digeridas com 15 enzimas de restrio: Ase I, BamH I, Bcl I, Bgl II, Cfo I, Cla I, Dra I, EcoR I, EcoR V, Hae III, Hind III, Hinf I, Nde I, Pst I e Ssp I. Detalhes dos procedimentos realizados para a extrao do DNA, amplificao, digesto e visualizao dos fragmentos em Partamona e M. q. quadrifasciata podem ser vistos em Brito (2005) e Moretto e Arias (2005), respectivamente. Microssatlites As espcies P. remota, P. mulata e P. helleri tambm foram analisadas quanto variao de locos para microssatlies. O DNA molde para as reaes de PCR foi extrado de uma abelha por ninho pelo mtodo Chelex (Walsh et al., 1991). Os primers usados na amplificao dos microssatlites foram derivados de Melipona bicolor (Peters et al., 1998) e Scaptotrigona postica (Paxton et al., 1999). Descries das reaes de PCR, primers utilizados e visualizao dos produtos podem ser encontrados em Francisco et al. (2006).
Resultados
Plebeia remota Quinze hapltipos mitocondriais foram encontrados, e apenas dois foram encontrados em mais de uma populao (ambos em Curitiba e Cunha). Alm disso, anlises estatsticas mostraram que as quatro populaes esto isoladas geneticamente. A anlise por microssatlites mostrou que alelos exclusivos foram encontrados nas populaes de Cunha (3 alelos) e Curitiba (1 alelo). No geral, a diversidade gnica (nmero mdios de alelos por loco e taxa de heterozigose observada) detectada foi baixa e a anlise estatstica mostrou no haver diferenciao entre as populaes de Blumenau e Curitiba e entre Curitiba e Cunha. Partamona mulata Apenas dois hapltipos mitocondriais foram encontrados. O nico hapltipo exclusivo observado ocorreu em apenas um ninho de Campo Grande. Em relao anlise dos microssatlites, alelos exclusivos foram encontrados nas amostras de Cceres e Pocon (1 alelo em cada). Assim com em P. remota, a diversidade gnica encontrada tambm foi baixa. Anlises estatsticas mostraram isolamento gentico entre as populaes. Partamona helleri Foram encontrados 10 hapltipos mitocondriais distintos. Destes, trs so encontrados em mais de uma populao (Viosa/Blumenau, Colatina/So Paulo e Colatina/Viosa/So Paulo). Para essa espcie a anlise dos microssatlites detectou alelos exclusivos nas populaes de So Paulo (2 aleAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
272
los), Viosa (2 alelos) e Ilhus (1 alelo). Novamente, os valores de diversidade gnica foram baixos e as populaes mostraram-se isoladas geneticamente. Melipona quadrifasciata quadrifasciata Cinco hapltipos mitocondriais distintos foram detectados: dois exclusivos e nicos da populao de Prudentpolis, um de Mafra e um de Blumenau. O quinto hapltipo foi compartilhado pelas amostras de Mafra e Blumenau, sendo o mais freqente, o que sugere fluxo gnico e no diferenciao entre essas duas populaes. No entanto, a populao de Prudentpolis mostrou isolamento.
Discusso
Eventos Paleobiogeogrficos no Cerrado Partamona mulata ocorre em reas de cerrado e pantanal, as quais tm sido sistematicamente modificadas pelo desmatamento para a abertura de reas de plantio ou de pasto para criao de gado. Nesses casos, quando o solo no adequadamente tratado, os termiteiros afloram nas reas de pasto, o que incorre em ambiente propcio para enxameagem e instalao de abelhas termitfilas como P. mulata. reas como estas foram amostradas durante as coletas, em que ninhos foram encontrados muito prximos uns dos outros. Seria esperado mesmo que no observssemos diferenas no DNAmt destes ninhos pois a matrilinhagem provavelmente seria a mesma. Entretanto, amostras coletadas distncia de 100, 300 e at 600 km apresentaram o mesmo hapltipo. As mudanas climticas ocorridas na Amrica do Sul durante os ciclos de glaciaes do Pleistoceno podem ter contribudo para a diminuio da variabilidade gentica das populaes de P. mulata. Segundo AbSaber (1979), em funo da extenso em sentido sul-norte da corrente Falklands-Malvinas, houve condies para filtragem da umidade procedente do Atlntico. Isso criou uma faixa semi-rida desde o Uruguai e Rio Grande do Sul at o sul ou centro da Bahia. Isso teria propiciado a expanso de vegetao tpica de caatinga, restringindo a cobertura vegetal do tipo cerrado e floresta a ilhas de vegetao. Essa contrao das reas de cerrado pode ter contribudo para extino de populaes de P. mulata e confinamento de outras a essas ilhas de vegetao. Durante o fim do Tercirio inferior, um conjunto de mudanas integradas na poro central do Brasil como o nvel tectnico do territrio, a instalao de climas tropicais e subtropicais midos ou submidos e a instalao de sistemas hidrogrficos contriburam para circunscrio de uma aplainao chamada de pedeplancie cuiabana ou pediplano cuiabano (AbSaber, 1988). A recolonizao da rea de distribuio ocupada atualmente por P. mulata pode ter ocorrido ao final do ltimo perodo glacial datado de 13 a 20.000 anos, quando a umidade e temperatura permitiram a expanso das coberturas vegetais adaptadas a essas condies. possvel que populaes com variabilidade haplotpica reduzida pela fragmentao das reas de cerrado tenham se dispersado a partir do pediplano cuiabano, e colonizado reas em torno do Pantanal cuja formao geolgica mais recente, datada do Holoceno. A baixa diversidade gnica de locos microssatlites encontrada nas populaes de P. mulata sugere que elas passaram por um afunilamento recente. Embora a abertura de reas de pastagem no Cerrado possa propiciar o surgimento de novos termiteiros, oferecendo mais substratos de nidificao para P. mulata, os recursos dos quais essas abelhas se alimentam no esto disponveis. De fato, a localizao de ninhos nessas reas foi extremamente difcil, requerendo grande esforo de coleta. Tal degradao tambm seria responsvel pelo isolamento entre as populaes estudadas.
273
Efeitos da fragmentao da Mata Atlntica A distribuio atual dos organismos na Europa reflexo das mudanas climticas causadas pelas Glaciaes. Tais eventos comearam h cerca de 2,5 milhes de anos no final do Plioceno (Hewitt 1996) e foram mais intensas durante o Pleistoceno, com ciclos de 100.000 anos interrompidos por curtos perodos quentes (Hewitt 1996). As florestas expandiam durante o perodo quente e mido e contraam-se durante perodos de clima frio e seco. Os dados obtidos para Plebeia remota, Partamona helleri e M. q. quadrifasciata nos levam a inferir que esses eventos climticos foram os responsveis pela diferenciao das populaes com base na distribuio e freqncia dos hapltipos mitocondriais encontrados. Outro fenmeno natural que teve forte influncia na distribuio da vegetao no Sul e Sudeste do Brasil, e que pode ter levado contrao das florestas nessas regies foi o soerguimento da Serra do Mar. Este evento comeou no Tercirio e perdurou at o Pleistoceno. importante salientar que Prudentpolis teve duas espcies de abelhas estudadas: P. remota e M. q. quadrifasciata. Para ambas as espcies, as populaes deste local se mostraram isoladas das outras. Em P. remota tal isolamento foi to pronunciado que sugere um isolamento antigo (Plioceno). Alm disso, as abelhas dessa regio tambm so diferentes das abelhas de Cunha, no que se refere morfologia (Patrcio e Imperatriz-Fonseca, 2004; Francisco et al., 2008), comportamento (Ribeiro et al., 2003; Hilrio, 2005) e qumica (Patrcio e Imperatriz-Fonseca, 2004; Francisco et al., 2008). Todos esses dados sugerem que as populaes das espcies coletadas em Prudentpolis podem constituir unidades evolutivas independentes. Depois do ltimo perodo frio e seco no Holoceno as florestas se expandiram ocupando grande parte do territrio brasileiro. Esta distribuio foi recentemente alterada pela ocupao humana, o qual foi mais intensa nos sculos XIX e XX. Atualmente, a Mata Atlntica est reduzida a 7,5% da sua distribuio pr-colonizao (Myers et al., 2000). provvel que a fragmentao desse bioma nos dois ltimos sculos tenha causado afunilamentos populacionais nas espcies P. remota e P. helleri, diminuindo sua diversidade gnica, como observado na anlise por microssatlites.
Concluso
Este trabalho mostrou que marcadores moleculares so ferramentas eficazes para a anlise da biodiversidade das espcies de Meliponneos, permitindo relacionar os eventos Paleogeogrficos e Paleoclimticos com a histria evolutiva das espcies aqui estudadas. As anlises populacionais, demonstrando a estruturao de muitas populaes so de extrema importncia, pois esse conhecimento poder servir de subsdio para projetos de conservao e manejo dessas abelhas. Vale ressaltar que as evidncias de que as populaes residentes em Prudentpolis, tanto de P. remota quanto M.q. quadrifasciata, possam constituir novas espcies, reforam ainda mais a importncia desses estudos.
Agradecimentos
Agradecemos Susy Coelho pelo auxlio tcnico e FAPESP e CNPq pelo suporte financeiro.
AbSaber AN (1979). Os mecanismos da desintegrao das paisagens tropicais no Pleistoceno: efeitos paleoclimticos do perodo Wrm-Winsconsin no Brasil. Paleoclimas 8, 1-11. AbSaber AN (1988). O Pantanal mato-grossense e a teoria dos refgios. Rev. Brasil. Geograf. 50: 9-57.
274
Avise JC, Arnold J, Ball RM, Bermingham E, et al. (1987). Intraspecific phylogeography: The mitochondrial DNA bridge between population genetics and systematics. Ann. Rev. Ecol. Syst. 18: 489-522. Beebee TJC e Rowe G (2004). An Introduction to Molecular Ecology. Oxford University Press, New York. Brito RM (2005). Anlise molecular e populacional de Partamona mulata (Moure In Camargo, 1980) e Partamona helleri (Friese, 1900) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). Tese de Doutorado, Instituto de Biocincias, USP, So Paulo. Ferreira ME e Grattapaglia D (1998). Introduo ao Uso de Marcadores Moleculares em Anlise Gentica. 3a ed. EMBRAPA-CENARGEN, Braslia. Francisco FO, Silvestre D, Arias MC (2001). Mitochondrial DNA characterization of five species of Plebeia (Apidae: Meliponinae): RFLP, restriction maps and phylogenetic inferences. Apidologie 32: 323-332. Francisco FO, Brito RM, Arias MC (2006). Alelle number and heterozigosity for microsatellite loci in different stingless bee species (Hymenoptera: Apidae, Meliponini). Neotrop. Entomol. 35: 638-643. Francisco FO, Nunes-Silva P, Francoy TM, Wittmann D, et al. (2008). Morphometrical, biochemical and molecular tools for assessing biodiversity: an example in Plebeia remota (Holmberg, 1903) (Apidae, Meliponini). Ins. Soc. doi: 10.1007/s00040-008-0992-7. Hancock jm (1999). Microsatellites and other simple sequences: genomic context and mutational mechanisms. In: Microsatellites: Evolution and Applications (Goldstein DB, Schltterer C, eds.). Oxford University Press, New York, 1-9. Hewitt GM (1996). Some genetic consequences of ice ages, and their role in divergence and speciation. Biol. J. Linn. Soc. 58: 247-276. Hilrio SD (2005). Atividade de vo e termorregulao de Plebeia remota (Holmberg, 1903) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). Tese de Doutorado, Instituto de Biocincias, USP, So Paulo. Kerr WE (1999). Meliponicultura. A importncia da meliponicultura para o pas. http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio03/3hp_13.asp. Acessado em 10 de junho de 2008. Matioli SR e Passo-Bueno MRS (2001). Mtodos baseados em PCR para anlise de polimorfimos de cidos nuclicos. In: Biologia Molecular e Evoluo (Matioli SR, ed.). Holos Editora, Ribeiro Preto, 153-161. Moretto G e Arias MC (2005). Detection of mitochondrial DNA restriction site differences between the subspecies of Melipona quadrifasciata Lepeletier (Hymenoptera: Apidae: Meliponini). Neotrop. Entomol. 34: 381-385. Myers N, Mittermeier RA, Mittermeier CG, Fonseca GAB, et al. (2000). Biodiversity hotspots for conservation priorities. Nature 403: 853-858. Patrcio EFRA, Imperatriz-Fonseca VL (2004). S.E.M and GC-MS studies of Plebeia remota (Hymenoptera, Meliponini). In: Proceedings of the 8th IBRA International Conference on Tropical Bees and IV Encontro sobre Abelhas, Ribeiro Preto, 739. Paxton rj, weischun n, quezada-Eun jjg (1999). Characterization of dinucleotide microsatellite loci for stingless bees. Mol. Ecol. 8: 690-692. Peters JM, queller dc, imperatriz-fonseca vl, strassmann je (1998). Microsatellite loci for stingless bees. Mol. Ecol. 7: 784-787. Ribeiro MF, Imperatriz-Fonseca VL, Santos-Filho PS (2003). A interrupo da construo de clulas de cria e postura em Plebeia remota (Holmberg) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). In: Apoidea Neotropica: Homenagem aos 90 Anos de Jesus Santiago Moure (Melo GAR e Alves-dosSantos I, eds.). Ed. UNESC, Cricima, 177-188.
275
Strassmann JE, Sols CR, Peters JM, Queller DC (1996). Strategies for finding and using highly polymorphic DNA microsatellite loci for studies of genetic relatedness and pedigrees. In: Molecular Methods in Zoology and Evolution (Ferraris JD e Palumbi SR, eds.). Wiley-Liss, New York, 163-178, 528-549. Viana LS e Melo GAR (1987). Conservao de abelhas. Inf. Agrop. 13: 23-27. Waldschmidt AM, Lopes LA, Marco JrP, Campos LAO (2005). Genetics of Euglossini bees (Hymenoptera) in fragments of the Atlantic forest in the region of Viosa - MG. Braz. J. Biol. 65: 541-549. Walsh PS, Metzeger DA, Higuchi R (1991). Chelex 100 as a medium for simple extraction of DNA for PCR-based typing from forensic material. Biotechniques 10: 506-513.
276
Barcoding the Bees of the World

Laurence Packer1, Jason Gibbs1, Cory Sheffield1 and Peter Kevan2
1 2
Department of Biology, York University, 4700 Keele St., Toronto, ON, M3J 1P3, Canada Department of Environmental Biology, University of Guelph, Guelph, ON N1G 2W1, Canada Corresponding Author: Laurence Packer, Department of Biology, York University, 4700 Keele St., Toronto, ON., M3J 1P3, Canada, 416 736 2100 ext 66524, laurencepacker@yahoo.com
Abstract
We demonstrate the utility of DNA barcoding as a taxonomic tool for the study of bee diversity using two approaches. First, we demonstrate that the technique works well for the identification of all bee species present in a geographically restricted region for which our taxonomic understanding of bees was considered to be good. Secondly, we use this approach, combined with traditional morphological analysis, in a study of a taxonomically extremely difficult group of bees, the subgenus Dialictus (family Halictidae; genus Lasioglossum). Here, DNA barcoding proved essential for the delimitation of numerous species that were morphologically almost indistinguishable. We conclude that DNA barcoding is efficient at the detection of cryptic species, associating the sexes of dimorphic species, associating the castes of species with strong queen-worker dimorphism and as a generally useful tool for basic identification. A global campaign to barcode the bees of the world has been initiated; its inaugural meeting was held at York University in May, 2008 with Fernando Silveira representing Brazil.
Introduction
Identifying and describing biodiversity has long been the purview of taxonomists able to recognize subtle morphological differences among species. DNA barcoding is a new method that promises to speed taxonomic progress and allow accurate identification of species, even by those without taxonomic expertise (Hebert et al., 2003). DNA barcoding employs a short strand of a standard gene, the mitochondrial gene COI, to identify species (Figure 1).
Figure 1. Schematic diagram of animal mitochondrial DNA showing the barcode region.
277
The principle behind DNA barcoding is that the nucleotide sequence diversity of the DNA barcode gene fragment is greater between species than within species. This indeed has been found to be the case in the vast majority of taxa upon which the method has been tested. Another useful feature is the relatively cheap costs associated with semi-automated identifications. Currently, it costs approximately $7 to obtain a DNA barcode from a pinned specimen, a small amount in comparison to the cost of a taxonomists time for a group requiring careful examination, and perhaps genitalic dissection. Moreover, the costs are expected to decrease as methods improve. Accurate delimitation of species is crucial for understanding biodiversity. Especially problematic can be easily recognized species that may not be examined in as great detail as other, more difficult, species but may be a repository for cryptic species (Packer and Taylor, 1997). Integrative taxonomic approaches that combine morphological, molecular and other types of data are the best methods for describing biodiversity (Dayrat, 2005; Page et al., 2005), but DNA barcoding is increasing the rate at which new species are being discovered (Hebert et al., 2004) providing useful material for morphological comparison and description. The large number of highly diverse genera and subgenera among the bees makes species recognition by traditional difficult even though the task is a crucially important one because of the role of bees in pollination and their potential for environmental monitoring (Kevan et al., 1997; Zayed and Packer, 2005; NAS 2007). In addition to the sexual dimorphism that often makes association of the sexes in rare insects difficult, many bees have the complexity of discrete or continuous caste-based variation. For example, in the halictine bees, differences between queens and workers of the same species are often much greater than the differences between sister species. The extreme situation is exhibited by the Brazilian species Halictus lanei (Moure): the workers are difficult to distinguish from those of H. hesperus Smith, but queens and workers of each species have non-overlapping size distributions and allometric variation that results in entirely different morphologies between the castes (Janjic and Packer, 2001). We provide information on the current status of DNA barcoding of bees by making special reference to two detailed studies. One is an analysis of an entire bee fauna (the bees of Nova Scotia, Canada), a fauna that is considered to be well known taxonomically (Sheffield et al., 2003). The second is an analysis of a subgenus (Dialictus of the genus Lasioglossum), one that is exceptionally complex taxonomically because of morphological monotony, large numbers of single sex species descriptions and caste differences within many of the known species. The results indicate that DNA barcoding works well at both scales.
Materials and Methods

Bees were collected and pinned, or retained in ethanol or propylene glycol until required for DNA barcoding. One midleg was removed from each specimen and forwarded to the Biodiversity Institute of Ontario for sequencing. DNA extraction, PCR and sequencing were done at the Canadian Centre for DNA Barcoding at Guelph University (Guelph, Ontario) using standard protocols described elsewhere (Hebert et al., 2003) and available online at http://www.dnabarcoding.ca/pa/ge/research/protocols. Universal primers for amplifying the DNA barcode sequence for insects (LCO1490 and HCO2198; Folmer et al., 2004 or the variants LEPF and LEPR; Hebert et al., 2004) were used. All sequences were uploaded to the Barcode of Life Database (BOLD; Ratnasingham and Hebert, 2007) and are available for species identification purposes.
278
We present the results of both studies using a neighbour-joining (NJ) algorithm implemented using the analytical tools within BOLD. The NJ trees show the level of divergence among taxa. The use of such phenetic methods has been criticised, with some justification. Consequently, for the taxonomically intensive study of Dialictus we also show the data as a phylogenetic tree obtained from an equal weights parsimony analysis using Winclada (Nixon, 2002) and NONA (Goloboff, 1999). For clarity, only a small subset of the Dialictus species available were included.).
Results
Data for the bees of Nova Scotia indicated that all 150 species could be readily distinguished using DNA barcoding. Sequence divergence within species was typically less than 1%, instances of larger differences proving to be misidentifications. Interspecific sequence divergences were mostly an order of magnitude higher, with only a few instances of divergence of less than 4%. An example of the results obtained for bees in one particularly difficult genus, Andrena, from Nova Scotia is presented in figure 2.
Figure 2. A neighbour joining phenogram for members of the genus Andrena sampled in Nova Scotia, Canada. Large sequence divergences between species are clear in this example. Among other results obtained from this first geographic survey of bees using DNA barcoding are the discovery of a cryptic species of the genus Ceratina and a synonymy within the genus Sphecodes. In the latter, males of one species (known only from males) and the females of another (known only from females) were shown to have identical barcodes. For the taxonomically more intensive study, we chose the subgenus Dialictus (Halictidae: Lasioglossum): one of the most taxonomically difficult groups amongst the bees. In North America, Dialictus are both speciose (over 270 currently recognized names) and often the most commonly collected subgenus of bee (MacKay and Knerer, 1979; Grixti and Packer, 2006; Campbell et al., 2007). Dialictus are also notoriously difficult to identify to species because of their highly monotonous morphology (Michener, 2007; Wheeler, 1928). In most cases, only extremely subtle differences can be used to difAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
279
ferentiate closely related species. Very little taxonomic progress has been made on this group in the last forty years (Mitchell, 1960; Knerer and Atwood, 1966), and there is much work that needs to be done. An ongoing taxonomic revision of the North American species of Dialictus has revealed new species, new synonymies and the incorrectness of past synonymies. The eastern North American species of Dialictus were revised by Mitchell (1960). Four new species from Ontario were described by Knerer and Atwood (1966) but one of these must be synonymised. An integrative approach that uses DNA barcodes in combination with morphological comparison has identified an additional eleven new species in the eastern part of North America (Gibbs, in preparation). Twelve new species have also been found in western Canada but this area has not been as intensively studied, so this is a minimum estimate. Many species of Dialictus have been described from a single sex. Over twenty new synonymies have been identified among North American Dialictus and additional sampling (particularly of males) may allow additional associations. Less frequently, previous synonymies have been determined to be false. Five cases of these erroneous synonymies have been identified and in all cases the species can be differentiated by both morphology and DNA barcodes. Figure 3 shows an example of the complexity that can arise when dealing with this difficult group.
280
Figure 3. A small subset of the over 1500 sequences currently available for bees of the subgenus Dialictus. Figure 3A shows the results analysed using Neighbour-joining. Figure 3B shows the results of a parsimony analysis of the same taxa using L. rufitarse (Zetterstedt) as outgroup. In the latter example, only one individual was included for a species when there were multiple identical sequences. The existence of a cryptic species allied to L. pictum (Crawford) is shown here (as L. pictum). Subsequent study has revealed subtle diagnostic morphological differences between the two DNA sequence types. This figure also shows examples of synonymy detected using this method, within what will be known simply as L. semicaeruleum (Cockerell), two new synonyms for this species have been discovered so far (L. actuarium (Sandhouse) and L. pruinosiforme (Crawford)) . All other results shown here are typical of the dataset as a whole: small intraspecific divergences and clearly larger interspecific differentiation. Overall, the mean intraspecific divergence within Dialictus is less than 1% while the mean intrasubgeneric divergence is over 7%. Comparatively few species belong to clusters in which the DNA data and morphological data either separately or in combination, do not result in clear species boundaries. These amount to perhaps 3% of the total.
Discussion
The ability of DNA barcodes to distinguish between species depends on low levels of intraspecific variation and relatively high levels of interspecific variation. Within a geographically delimited survey of a whole community of bees, the minimal species level differentiation was close to 4% whereas within species variation was rarely more than 1%. The results were similar for a taxonomically intensive and geographically more extensive survey of Dialictus, a morphologically highly monotonous group of bees that have been the bane of North American melittologists for decades. Dialictus presents a particular challenge for DNA barcoding because the group seems to have undergone rapid and frequent speciation. Dialictus comprises hundreds of species that likely evolved in the last 20 million years (Danforth et al., 2004). Such a rapid expansion, in combination with AT-biases in the third codon position (a common feature of many Hymenoptera), would be expected to cause low interspecific genetic variation in Dialictus. Nevertheless, in almost all cases there appears to be a distinct gap between the sequence divergences for within species variation and between species variation. Even though often criticised for using phenetic methods, DNA barcode data is amenable to phylogenetic analysis, although this is not advisable for large datasets especially when there are many identical conspecific sequences. Using both maximum parsimony and Bayesian methods, we have shown that DNA barcode data are as useful as morphology in studies of Dialictus phylogeny (Gibbs, in preparation). Moreover, the results were of more than taxonomic interest in that the data show conclusively that parasitic lifestyles within this genus (these species were previously known under the generic name Paralictus as a result of their obvious loss of morphological adaptations for nest construction and pollen gathering) arose twice rather than once as previously supposed. A global campaign to barcode the bees of the world has been initiated (see the website at: www. bee-bol.org). Preliminary surveys of numerous museum collections from around the world indicate that most specimens that were collected less than 15 years ago and kept dry in the interim yield good quality DNA barcode data. Even material older than that, including samples that had been subjected to relaxing for genitalic preparation, can provide useful information for species assignment even if the full length barcode is not attainable (Smith et al., in preparation).
281
The standard for sampling is to have from 5-10 specimens of each species sequenced. The locations of the samples should at least straddle the type locality (where known) and involve multiple sample sites. When cryptic species are discovered, additional samples willl be required, including some from as close to the type locality as possible. For data to be entered into the database (see http:// www.barcodinglife.org/views/login.php) full identification, identifier, label and repository information are required. At least one digital image per species is also expected. Fernando Silveira is Brazils representative on the steering committee for barcoding the bees of the world.
References
Campbell JW, Hanula JW and Waldrop TA. (2007). Effects of prescribed fire and fire surrogates on floral visiting insects of the blue ridge province in North Carolina.Biol. Conserv. 134: 393-404. Dayrat B (2005). Towards integrative taxonomy. Biol. J. Linn. Soc. 85:407-415. Goloboff, P. (1999). NONA (NO NAME) version 2.0. Published by the author. Tucumn, Argentina. Grixti JC and Packer L (2006). Changes in the bee fauna (Hymenoptera: Apoidea) of an old field site in southern Ontario, revisited after 34 years. Can. Ent. 138: 147-164. Hebert PDN, Cywinska A, Ball SL and DeWaard JR (2003). Biological identifications through DNA barcodes. Proc. Roy. Soc. Lond. Biol. Sci. 270:313-321. Hebert PDN, Penton EH, Burns JM, Janzen DH and Hallwachs W (2004). Ten species in one: DNA barcoding reveals cryptic species in the neotropical skipper butterfly Astraptes fulgerator. PNAS 101:14812-14817. Janjic J and Packer L (2001). New descriptions of Halictus (Seladonia) from the New World (Hymenoptera: Halictidae). J. Hym. Res. 10:55-75. Kimura M (1980). A simple method for estimating evolutionary rates of base substitutions through comparative studies of nucleotide sequences. J. Mol. Evol. 16: 111-120 Knerer G. and Atwood CE (1966). Additional descriptions in the genus Dialictus Robertson (Hymenoptera: Halictidae). Can. Ent. 98: 881-887. MacKay, P.A. and G. Knerer. 1979. Seasonal occurrence and abundance in a community of wild bees from an old field habitat in southern Ontario. Can. Ent. 111: 367-376. Michener CD (2007). The Bees of the World, 2nd Ed. Johns Hopkins University Press, Baltimore, Maryland, xvi+953 pp. Mitchell TB (1960). Bees of the Eastern United States: volume I. N.C. Agr.Exp. Sta.Tech. Bull. 141: 1-538. National Academy of Sciences (2007). The status of pollinators. NAS. Washington DC. Nixon KC (2002). WinClada version 1.00.08. Published by the author. Ithaca, NY, USA. Packer L and Taylor JS (1999). How many hidden species are there? An application of the phylogenetic species concept to genetic data for some comparatively well known bee species. Can. Ent. 129:587-594. Page, T.J., S.C. Choy, and J.M. Hughes. 2005. The taxonomic feedback loop: symbiosis of morphology and molecules. Biol. Lett. 1: 139-142. Sheffield CS, Kevan PH, Smith RF, Rigby SM and Rogers REL (2003). Bee species of Nova Scotia, Canada, with new records and notes on bionomics and floral relations (Hymenoptera: Apoidea). J. Kans. Entomol. Soc. 76:357-384.
282
Wheeler WM (1928). The Social Insects: Their Origin and Evolution, Kegan Paul, Trench, Trubner and Co., Ltd. London, xviii+378 pp. Zayed A and Packer L (2005). Complementary sex determination substantially increases extinction proneness of haplodiploid populations. PNAS 102: 10742-10476.
283
SI MPSIO 13
BIOLOGIA DE ABELHAS SOLITRIAS
Coordenadores: Celso Feitosa Martins, Maria Cristina Gaglianone
284
Dinmica Temporal e Espacial de Abelhas Solitrias no Semi-rido do Nordeste do Brasil

Temporal and spacial dynamics of solitary bees at the semi-arid region of Northeastern Brazil
Fernando C. V. Zanella
Unidade Acadmica de Cincias Biolgicas Universidade Federal de Campina Grande Campus de Patos, Paraba, Brasil Fone: (83) 34239713 fcvzanella@gmail.com
Abstract
Solitary bees can present dormancy as a strategy to overcome unfavorable periods. In the tropical semi-arid region of Northeastern Brazil the dry season is characterized by a reduced availability of floral resources and usually stretch for at least six months. The virtually absence of solitary bees that occur in the dry season in some sites has been interpreted as indicative of dormancy, but few studies confirmed it. An analysis of studies that recorded adults and nesting activities of species along the year in areas of caatinga, including original data, was undertaken. It was considered that species with obligatory diapause must be absent during dry season, as was recently confirmed for Melitomella murihirta (Cockerell). 25 of 39 analized species were collected during the dry season, and it was assumed that they can present adults reproductively active all year long. Data from trap-nest studies confirmed this interpretation for some species. It was concluded that a significant fraction of the solitary bee fauna of caatinga is present as adults over the year and that the absence of records during the dry season at drier sites is the result of its movement to more favorable places. Key words: Solitary bees, caatinga, tropical dry region, seasonality, phenology, population dynamics
Introduo
A variao na frequncia de insetos em reas restritas ao longo do ano pode ser resultado de diferenas no ciclo de vida das espcies, bem como resposta a flutuao na disponibilidade de recursos e a nos padres de ocupao do espao (ver Wolda, 1988). A ocorrncia de uma espcie com adultos ativos ao longo de todo o ano deve indicar a existncia de populaes reprodutivamente ativas mesmo nas pocas desfavorveis em uma regio, mesmo que haja picos de abundncia em perodos favorveis. Mas a ausncia de registros durante a estao desfavorvel, pode significar a existncia de dormncia como estratgia de sobrevivncia ou apenas a menor probabilidade de coleta em populaes de espcies com populao reprodutivamente ativas ao longo do ano devido diminuio do tamanho populacional e/ou a sua movimentao para reas onde h melhores condies de sobrevivncia. A regio semi-rida no Nordeste do Brasil apresenta um clima fortemente sazonal, com uma estao seca que dura normalmente seis meses, mas que em anos mais secos pode se estender por onze meAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
285
ses (Nimer, 1972; Barcelos e Paupitz 1992). Nesse perodo h uma uma forte diminuio na abundncia de espcies de abelhas solitrias, sendo associada escassez de recursos florais (Martins, 1994; Aguiar et al., 1997; Zanella e Martins, 2003). Essa diminuio tem sido interpretada como indicativa da ocorrncia de dormncia como estratgia de vida de espcies solitrias (cf. Barrios, 1994/1995; Martins, 2002), mas os registros de dormncia por espcie so escassos e no permitem uma apreciao geral da sua frequncia. Os poucos registros publicados de espcies solitrias em atividade na estao seca envolviam abelhas de tamanho mdio a grande de Centris e Xylocopa (Martins, 1994). Neste trabalho apresentada uma reviso dos resultados de pesquisas realizadas na regio quanto variao temporal na abundncia de espcies no-eussociais, visando obter uma avaliao preliminar da frequncia de espcies com dormncia obrigatria em algum estgio do ciclo de vida e de como as espcies que mantm populaes reprodutivamente ativas ao longo ao ano ocupam o espao nas estaes seca e chuvosa.
A regio e sua fauna de abelhas

A regio semi-rida do Nordeste do Brasil apresenta clima tropical, cujas estaes do ano so determinadas pela ocorrncia de chuvas. As temperaturas mdias anuais ficam entre 26 e 28C nas regies de menor altitude e variam pouco entre os meses (Nimer, 1972) e a precipitao mdia anual varia entre 276 mm no lugar mais seco a 800 mm nas reas marginais (Reis, 1976). A vegetao predominante a caatinga, sendo xerfila e decdua, durante a estao seca encontra-se praticamente sem folhas e com escassos recursos florais, em forte contraste com da poca chuvosa (Figura 1). Aproximadamente 88% de um total de cerca de duzentas espcies conhecidas para a caatinga podem ser consideradas solitrias, em sentido amplo (Zanella, 2000). A referncia a espcies no-eussociais como solitrias, em sentido amplo, se justifica por poderem apresentar ao menos uma fase da vida de existncia solitria, mesmo que algumas possam formar colnias, como no caso de Bombus. As abelhas eussociais, que mantm colnias perenes, tm que atravessar o longo perodo seco com adultos ativos. As espcies nativas de abelhas sem ferro, que no tem por comportamento habitual o abandono dos ninhos (Michener, 1974; Roubik, 2006), precisam garantir a sua sobrevivncia com os recursos armazenados ou com o eventual florescimento de plantas nas reas prximas. A abelha africanizada abandona o ninho com facilidade e Freitas et al. (2007), estudando populaes do Cear, interpretaram que h uma migrao sazonal entre as reas mais secas de caatinga e as reas midas do litoral e serras, com as colnias abandonando as caatinga no perodo seco e retornando para as reas secas no momento de maior pluviosidade nas reas midas. Apesar do abandono de ninhos ter sido bem documentado durante a seca na caatinga e o concomitante aumento de chegada de colnias no litoral, importante ressaltar que o padro de movimento deve ser considerado quando muito uma migrao nomdica (Gould e Gould, 2007), pois provvel que o conjunto de colnias de uma rea no deve seguir em uma mesma direo, no deve existir uma orientao espacial e as colnias no devem retornar aos mesmos locais aps cessado o fator que determinou o abandono. Desse modo, no h at o momento nenhum registro de migrao, em sentido estrito, para alguma espcie de abelha ou outro inseto na caatinga.
Metodologia
Foi considerado que espcies com diapausa obrigatria como forma de atravessar o perodo desfavorvel devem ser ausentes como adultos durante esse perodo e que o registro durante a poca seca implica que podem manter populaes reprodutivamente ativas durante o ano todo.
286
Considera-se aqui como dormncia um perodo de inatividade ou interrupo no desenvolvimento, seja na forma de uma interrupo programada no desenvolvimento (diapausa) ou como resposta imediata a fatores adversos (quiescncia), conforme Denlinger (1986), mesmo que no seja possvel discrimin-los. So aqui includos dados originais de levantamento da fauna de abelhas da Estao Ecolgica do Serid, unidade de preservao localizada em Serra Negra do Norte, RN, onde foram amostradas, com rede entomolgica, duas reas: uma incluindo o entorno de um aude com gua durante o ano todo (rea 1) e outra, cerca de 3 km distante, sem local com gua livre acumulada na rea ou entorno (rea 2) (Figura 2; para detalhes da metodologia de coleta e das reas, e citao completa das espcies, ver Zanella, 2003). Espcies coletadas em menor nmero no foram includas. Resultados originais de trabalhos com ninhos-armadilhas na ESEC-Serid e em outras reas na regio tambm so relatados, conforme indicado no texto.
Resultados
A variao temporal na abundncia de espcies de abelhas solitrias Dados de amostragens de abelhas visitantes de flores de reas restritas de caatinga demonstram que a ocorrncia de espcies solitrias em vo durante o perodo de estio fortemente reduzida em relao ao perodo chuvoso (Figura 3). No entanto, so poucos os registros baseados na observao de ninhos que documentam a ocorrncia de dormncia. Pick (2007), acompanhando uma rea de nidificao de Melitomella murihirta (Emphorini) na ESEC Serid, relatou que apresenta apenas uma gerao por ano e atravessa o perodo seco em diapausa, construindo seus ninhos cerca de trs meses aps o incio da estao chuvosa. Os registros de coleta dessa espcie em flores na ESEC Serid concordam com esse padro temporal (Figura 4). Outras espcies que apresentaram padro semelhante incluem: Ancyloscelis sp, Anthidium latum, Dicranthidium arenarium, Centris hytidis, Gaesischia rosadoi, G. hyptidis, Megachile asuncicola, M. bernardina, M. paulistana, M. (Dactylomegachile) sp., Acamptopoeum prini, Melissodes nigroaenea e Psaenythia variabilis. Com exceo destas duas espcies, todas tiveram o primeiro indivduo coletado ao menos um ms aps o incio das chuvas e, com exceo de A. prini, P. variabilis, M. asuncicola e M. paulistana, todas foram coletadas nos dois locais.
Figura 1. rea de estudos na Estao Ecolgica do Serid, Serra Negra do Norte, RN. a) estao seca, b) estao chuvosa.
287
Figura 2. Imagem de satlite da ESEC Serid e entorno, Rio Grande do Norte, no perodo seco (fonte: Google earth.com). Setas indicam localizao das reas de coleta, azul=rea 1 e vermelha=rea 2.
Figura 3. Variao temporal na riqueza de espcies de abelhas (excludo Apis e abelhas sem ferro) em vo na rea 2 da ESEC-Serid e precipitao pluviomtrica entre 1994-5.
Figura 4. Variao temporal no nmero de indivduos coletados de Melitomella murihirta e precipitao pluviomtrica na ESEC Serid (rea 1 em azul e rea 2 em vermelho). Evidentemente que o registro de adultos somente na estao chuvosa no permite concluir que essas espcies apresentam dormncia na estao seca, conforme registrado para M. murihirta, mas as espcies que apresentam diapausa obrigatria devem ser ausentes nesse perodo desfavorvel, mesmo nas reas que apresentem recursos florais o ano todo, como a rea 1 do levantamento na ESEC Serid. O padro de ocorrncia de espcies no-eussociais ao longo do ano no local 1, foi muito distinto do observado na rea 2, no apresentando uma clara reduo no nmero de espcies registradas durante o perodo seco (Figura 5).
288
Figura 5. Variao temporal na riqueza de espcies de abelhas coletadas (excludo Apis e abelhas sem ferro) na rea 1 da ESEC-Serid e precipitao pluviomtrica entre 1994-5. De modo correspondente, algumas espcies registradas na rea 2 somente no perodo chuvoso, foram coletadas na rea 1 no perodo seco ou nos dois. Se enquadram nesse caso, Xylocopa cearensis, X. grisescens, Centris fuscata, C. tarsata, C. trigonoides, Exomalopsis analis, Megachile brethesi, M. dentipes, M. lissotate, Augochlora cf. diafractes e Protomeliturga turnerae. interessante notar que, como no caso de X. cearensis (Figura 6), outras espcies tambm foram pouco ou no coletadas durante boa parte do perodo chuvoso. provvel que isso no represente a ausncia de adultos ativos, mas simplesmente a menor probabilidade de captura em virtude da maior abundncia de recursos florais na regio e a consequente disperso das populaes. Essa quase ausncia de registros durante o perodo chuvoso tambm ocorreu em espcies somente coletadas na rea 1, como Pseudaugochlora pandora, Augochloropsis sp. 1 e Diadasina riparia. Tambm foram registradas nas duas estaes: Ancyloscelis apiformis (Figura 7), Ceratina maculifrons, Augochlora thalia, A. (Oxystoglossella) sp., Augochloropsis callichroa, Dialictus opacus, Diadasina paraensis, Epanthidium maculatum e Eulaema nigrita. Caenonomada unicalcarata apresentou um grande nmero de indivduos coletados no perodo chuvoso na rea 1 e na rea 2, teve um indivduo coletado no meio da estao seca na rea 2. Esse registro foi considerado duvidoso e precisa ser confirmado.
Figura 6. Variao temporal no nmero de indivduos coletados de Xylocopa cearensis e precipitao pluviomtrica na ESEC Serid (rea 1 em azul e rea 2 em vermelho).
289
Figura 7. Variao temporal no nmero de indivduos coletados de Ancyloscelis apiformis na rea 1 da ESEC Serid e precipitao. Acompanhamento da nidificao com ninhos-armadilha Algumas espcies solitrias fazem seus ninhos em cavidades preexistentes e a variao temporal nas nidificaes foi acompanhada em reas de caatinga. Aguiar e Garfalo (2004) registraram nidificaes de Centris tarsata em Ipir (BA) apenas no perodo chuvoso, com uma correlao significativa com a precipitao pluviomtrica mensal. Foram reconhecidas trs geraes no ano e para 17 ninhos acompanhados individualmente, quatro apresentaram indcios de diapausa. Mas em Patos (PB), prximo a um aude e a zona urbana, essa espcie fundou ninhos tambm na estao seca e no foi observado indcios de diapausa (Gonalves e Zanella (2003), o que tambm ocorreu com C. analis, Megachile dentipes e Epanthidium tigrinum (Figura 8), alm de E. maculatum. E mesmo para uma espcie de Hylaeus que no apresentou fundaes de ninhos no perodo seco, o tempo para emergncia dos indivduos foi de menos de um ms, no havendo indcios de diapausa.
Figura 8. Variao no nmero de ninhos fundados por espcies de abelhas em ninhos-armadilha em Patos, PB e precipitao pluviomtrica de maio de 2001 a abril de 2003 (Gonalves AF e Zanella FCV, resultados no publicados).
Discusso
Das 39 espcies relacionadas acima, excetuando-se C. unicalcatata e Hylaeus sp, 25 apresentaram registros durante a estao seca, implicando que podem apresentar populaes reprodutivamente ativas durante o ano todo. Apesar do nmero de espcies analisadas corresponder a uma parAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
290
cela relativamente pequena da diversidade presente na caatinga, possvel reconhecer que as espcies no-eussociais sem diapausa obrigatria como forma de atravessar o perodo seco constituem um componente importante da apifauna regional, de modo distinto ao observado nas regies temperadas. O registro de muitas espcies exclusivamente no perodo chuvoso em certas reas pode significar simplesmente que no perodo seco elas se locomovem para reas mais propcias, de modo semelhante ao que deve ocorrer com as populaes ferais de Apis mellifera. Apesar de existirem reas relativamente extensas que ficam com a vegetao completamente seca em parte do ano, locais com acmulo de gua livre, como audes, e com disponibilidade de recursos florais durante a seca so relativamente frequentes, como ilustrado na figura 1. Tambm h enclaves de florestas sempre verde no topo de montanhas e reas de p de serra que se beneficiam da maior umidade no solo e vrias espcies de rvores que florescem na estao seca, sem as quais possivelmente no haveria populaes de abelhas sociais sem ferro na caatinga. Essas reas de exceo na paisagem da regio semi-rida favorecem a ocorrncia de espcies solitrias que mantm populaes reprodutivamente ativas durante o ano todo. Mas isso no significa que essas espcies no apresentem diapausa, ao menos de forma ocasional, como sugerido por Aguiar e Garfalo (2004) para C. tarsata. A ocorrncia desse tipo de diapausa e sua importncia para a sobrevivncia das espcies na regio precisam ser melhor avaliadas. Por outro lado, a biologia das espcies registradas somente no perodo chuvoso precisa ser estudada para se confirmar a obrigatoriedade de diapausa no ciclo de vida e os fatores que determinam o seu incio e trmino.
Agradecimentos
FAPESQ/PB e CNPq pelo apoio s pesquisas; ao Dr. Celso F. Martins pelo convite.
Aguiar CML e Martins CF (1997). Abundncia relativa, diversidade e fenologia de abelhas (Hymenoptera, Apoidea) na Caatinga, So Joo do Cariri, Paraba, Brasil. Iheringia, sr. Zool. 83: 151-163. Aguiar CML and Garfalo CA (2004). Nesting biology of Centris (Hemisiella) tarsata Smith (Hymenoptera, Apidae, Centridini). Rev. Brasil. Zool. 21: 477-486. Barrios MAM (1994/95). Insetos. In: Caatinga-serto, sertanejos. Livroarte, Rio de Janeiro, 255. Denlinger DL (1986). Dormancy in tropical insects. Ann. Rev. Entomol. 31: 239-264. Gonalves AF e Zanella FCV (2003). Ciclos de nidificao de abelhas e vespas solitrias que utilizam cavidades pr-existentes no semi-rido paraibano. In: Anais do VI Congresso de Ecologia do Brasil, Fortaleza, 322-324. Gould JL and Gould JC (2008). Animal Migration. Microsoft Encarta Online Encyclopedia 2008, http://encarta.msn.com/text_761557464__1/ animal_migration.html. Acessado em 06 de agosto de 2008. Martins CF (1994). Comunidade de abelhas (Hym., Apoidea) da Caatinga e do Cerrado com elementos de campo rupestre do estado da Bahia, Brasil. Rev. Nordestina Biol 9 (2): 225-57. Martins CF (2002). Diversity of the Bee Fauna of the Brazilian Caatinga. In: Pollinating Bees - The Conservation Link Between Agriculture and Nature (Kevan P and Imperatriz-Fonseca VL, eds). Ministry of Environment, Braslia, 131-134. Michener CD (1974). The social behavior of bees. Harvard University Press, Cambridge, Massachusetts.
291
Nimer E (1977). Clima. In: Geografia do Brasil - Regio Nordeste. Vol. 2. SERGRAF, IBGE, Rio de Janeiro, 47-84. Pick R (2007). Interao entre abelhas e plantas simptricas na caatinga. Tese de Doutorado, PsGraduao em Cincias Biolgicas (Zoologia), UFPB, Joo Pessoa. Reis ACS (1976). Clima da Caatinga. Ann. Acad. Bras. Ci. 48 (2): 325-35. Roubik DW (2006). Stingless bees nesting biology. Apidologie 37: 124-143. Wolda H (1988). Insect seasonality: why? Ann. Rev. Ecol. Syst. 19:1-18. Zanella FCV (2000). The bees of the Caatinga (Hymenoptera, Apoidea, Apiformes): a species list and comparative notes regarding their distribution.Apidologie 31:579-592. Zanella FCV (2003). Abelhas da Estao Ecolgica do Serid (Serra Negra do Norte, RN): aportes ao conhecimento da diversidade, abundncia e distribuio espacial das espcies na caatinga. In: Apoidea Neotropica. Homenagem aos 90 anos de Jesus Santiago Moure (Melo GAR and Alves-dos-Santos I, eds.). Editora UNESC, Cricima, 231-240. Zanella, FCV e Martins CF (2003). Abelhas da Caatinga: Biogeografia, Ecologia e Conservao. In: Ecologia e Conservao da Caatinga (Leal IR, Tabarelli M and Silva JMC, eds.). Editora Universitria da UFPE, Recife, 75-134.
292
Utilizao de Recursos Florais por Euglossa annectans (Hymenoptera, Apidae, Euglossini)

Marilda Cortopassi-Laurino13, Lvia Leal Dornelles3, Anne Zillikens2, Josefina Steiner3 1 Laboratrio de Abelhas, Departamento de Ecologia, Universidade de So Paulo. Rua do Mato, n 321, 05508-900. So Paulo, SP, Brasil 2 Universitt Tbingen, Medizinisch-Naturwissenschaftliches-Forschungszentrum, Ob dem Himmelreich 7, 72074 Tbingen, Germany, 3 Departamento de Biologia Celular, Embriologia e Gentica, Centro de Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Santa Catarina, 88.040-900 Florianpolis, SC, Brasil Floral Resources used by Euglossa annectans (Hymenoptera, Apidae, Euglossini)
Abstract
In order to analyze the pollen resources used by the orchid bee Euglossa annectans samples of larval provisions from cells under construction were taken from nests built in traps (wooden boxes) on Santa Catarina Island, southern Brazil. The 43 samples collected between 2002 and 2005 represented all months except December. Overall, 74 pollen types from 24 families were distinguished. Among the 26 pollen types that made up more than 10% in monthly means the families Melastomataceae, Bromeliaceae, Ochnaceae, Fabaceae and Myrtaceae were most frequently represented. The results characterize E. annectans as a polylectic species. Aechmea lindenii (Bromeliaceae), one of the flowers most visited has the nectar monitored. Foraging behavior of Euglossa annectans is discussed.
Introduo
Euglossa o maior gnero da tribo Euglossini com 103 espcies descritas e distribudas desde o norte do Mxico at o Paraguay e norte da Argentina (Augusto e Garfalo, 2004). Embora muitas espcies sejam consideradas solitrias, a presena de mais de uma fmea nos ninhos de algumas espcies como E. annectans, E. cordata, E. hyacinthina e E. townsendi (Garfalo et al., 1998, Zillikens et al., 2003 [como E. stellfeldi], Soucy et al., 2003, Augusto e Garfalo, 2004) sugere a ocorrncia de algum tipo de organizao social nestes insetos embora nunca tenham sido considerados eussociais (Zucchi et al., 1969). E. annectans distribui-se em territrio nacional nos estados de ES, MG, RJ, SC e SP (Moure et al., 2007), e apresenta plasticidade no uso de cavidades onde nidifica e o reuso dos ninhos (Garfalo et al. 1998). A utilizao destas caixas isca pode ser de longa durao, constatada em mais de cinco anos no estado de So Paulo. O fato de certas espcies de euglossneos nidificarem em caixas iscas favoreceu a ampliao do conhecimento sobre sua biologia incluindo aqui a dinmica dos recursos para a sua reproduo e as plantas que estas abelhas visitam atuando como mantenedoras da biodiversidade. Embora as abelhas Euglossini tivessem sido primeiramente conhecidas pelos seus machos, que so os nicos polinizadores de muitas orqudeas, elas visitam muitas outras plantas neotropicais (Ramirez-Arriaga
293
e Martinez-Hernandez, 1998; Roubik e Hanson, 2004). Assim como a maioria das abelhas solitrias, ambos os sexos visitam flores para obter o nctar, mas as fmeas visitam ainda as flores para obter plen para a cria e resina para a construo de seus ninhos. Os visitantes de flores das bromlias, pela sua morfologia floral tubular, e outras partes sinalizadoras como spalas coloridas, incluem principalmente beija-flores e algumas espcies de abelhas, compondo perto de 80% dos polinizadores destas plantas. (Varassim, 2002; Mendona e Anjos 2003). Entre as abelhas, os gneros Bombus e Euglossa, que tm lnguas relativamente longas apresentam vantagens na explorao de flores de bromlias, pois estas tendem a ser tubulares e longas (Roubik, 1989). O objetivo deste trabalho foi identificar, atravs da analise polnica, as fontes florais do alimento larval ao longo do ano de vrios ninhos de E. annectans, assim como os teores de acar do nctar utilizados por estas abelhas quando em visitas na bromlia Aechmea lindenii.
Material e Mtodos
Os ninhos estavam instalados em caixas-isca de madeira tipo pinho com 10x10x5cm e com uma entrada lateral de 1cm de dimetro. Elas estavam em alturas prximas de dois metros, amarradas entre os galhos de rvores nas bordas de uma floresta secundria da Ilha de Santa Catarina, na Unidade de Conservao Ambiental Desterro-UCAD (27o31S; 48o30W) e numa rea particular, mais antropizada (Miconietum) contnua desta Unidade, de propriedade da Dra. Maike Hering de Queiroz. A vegetao de floresta ombrfila densa em vrios estgios de regenerao e cortada por trilhas. A nidificao em agregados de E. annectans possibilitou a coleta do alimento larval, cujo aspecto era de uma massa gelatinosa (Figura 1), em uma at dez clulas de cria contemporneas em construo, no perodo entre janeiro e novembro dos anos 2002-2005. As coletas mensais foram feitas em um nico ou vrios ninhos atravs da imerso de um palito no alimento larval. No laboratrio foram montadas lminas destes gros em gelatina glicerina corada com fuccina.
Figura 1. Ninho agregado de E. annectans com clulas abertas mostrando alimento larval com aspecto de massa gelatinosa.
294
Os polens coletados foram identificados por comparaes morfolgicas e fenolgica do material de referncia disponibilizados no Calendrio de Polens de Plantas Apcolas da Ilha de Santa Catarina elaborado pelo LANUFSC (Laboratrio de Abelhas Nativas da Universidade Federal de Santa Catarina), e em bibliografia especializada. Os polens identificados como tipo eram de aspecto ou tamanho semelhante ao gnero ou espcie, no correspondiam poca de florada de acordo com o Calendrio elaborado, ou ainda no constavam da referncia para a regio estudada. A anlise do nctar foi realizada em Aechmea lindenii, uma espcie de bromlia componente da florao seqencial na regio e com visitantes florais j identificados (Dorneles 2006). Durante a florao, nos primeiros dias de outubro de 2005, das 6:00-18:00h o nctar de todas as flores das 3 inflorescncias de A lindenii, com 40, 33 e 32 flores, foi medido de 2/2h, perfazendo um mnimo de 96 horas de observao. Entre 1-10 flores por dia foram mensuradas em cada inflorescncia. Como a retirada do nctar era realizada delicadamente, no ocorria dano na flor e ela continuava produzindo nctar. O nctar foi coletado com capilares de 7,5L. O contedo em acares (mg de acar/100mg de soluo) foi medido em refratmetro de campo para pequenas quantidades (OPTEC). O valor energtico, das mg de acar das flores foi obtido de acordo com metodologia descrita por Dafni (1992).
Resultados
A anlise de 13644 gros de plen de 43 amostras de clulas de cria em construo indicou a presena de 75 tipos diferentes com 24 tipos (32%) sendo representados acima de 10%. Os polens das famlias Melastomataceae, Bromeliaceae e tipo Ouratea (Ochnaceae), tipo Lathyrus (Fabaceae) e Myrtaceae foram os cinco mais coletados, embora outros, menos representados numericamente, como os de Fabaceae, Bignoniaceae, tipo Ocoteia (Lauraceae), Euphorbiaceae, e Solanaceae tambm foram representativos (Figura 2). Ao longo do ano, alguns poucos plen foram coletados durante vrios meses (4-7) como os tipo Lathyrus, Clidemia hirta, Nidularium innocentii, tipo Ourateia, Aechmea ornata e A. lindenii, e tipo Myrcia rostrata, entretanto, a grande maioria (89,3%) s foi coletada durante curtos perodos.
295
Figura 2. Espectro e proporo dos tipos polnicos representados acima de 10% nas clulas de cria de E. annectans da Ilha de Santa Catarina-SC. O nmero de tipos de plen coletados ao longo dos meses variou entre 9-17 por clulas, tendo sido estes valores encontrados no ms de junho e julho respectivamente. Meses com maior nmero de amostras, como abril, no apresentaram maior diversidade de tipos de plen agrupados por famlias botnicas (Figura 3).
Figura 3. Representao sazonal das principais famlias de plantas (>5%) identificadas atravs do plen do alimento larval de E. annectans na Ilha de Santa Catarina-SC. A produo do nctar na bromlia A. lindenii ocorreu em todas as 105 flores disponibilizadas pela planta, mas no apresentou uniformidade no volume dirio que variou entre 0,67-82,11L/flor/ dia, e apresentou um pico entre 10-12:00h . As flores apresentaram todas, um padro decrescente de concentrao do nctar. A maior concentrao, nas primeiras horas da manh, alcanou o valor mximo de 35%, enquanto o menor (6%) ocorreu s 18h. O valor energtico, das mg de acar das flores ao longo do dia, so decrescente e esto representados na Tabela 1.
296
Tabela 1. Dinmica diria do recurso nctar, em mg de acar/flor de A. lindeni. hora 6:00 8:00 10:00 12:00 14:00 16:00 18:00 total mdia 2,25 (n=87) 1,68 (n=98) 1,96 (n=101) 1,51 (n=98) 0,94 (n=82) 0,37 (n=50) 0,25 (n=31) 8,96 calorias 9,0 6,7 7,8 6,0 3,8 1,5 1,0 36 Joules 37,9 28,2 32,9 25,3 15,8 6,2 4,1 151
Discusso
A primeira concluso destas anlises de que E. annectans uma espcie generalista, pois coleta plen em diferentes famlias no relacionadas. A identificao de 75 tipos diferentes de plen indica uma grande disponibilidade floral e preferncia por parte das abelhas. Indica tambm que elas so ativas ao longo de todo ano, mesmo nos meses mais frios quando a temperatura mdia local atinge 16-17oC. No Mxico (15o05N; 92o31W), Euglossa atroveneta apresentou o mesmo comportamento generalista coletando em 71 tipos de plen ao longo do ano (Ramirez-Arriaga e Martinez-Hernandez, 1998). Estes resultados indicam comportamento semelhante embora muito mais ninhos tenham sido analisados no hemisfrio norte. Das famlias mais representadas, Melastomataceae, Bromeliaceae e Myrtaceae, apresentaram um padro sequencial ao longo de todo ano. As Melastomataceae comeam com Clidemia/Tibouchina, Miconia/Tibouchina e terminam o ciclo com espcies no identificadas /Leandra/Tibouchina. Bromeliaceae esteve representada inicialmente por N. innocentii/tipo Neoregelia, A. blumenavii/A. ornata e terminando com A. lindenii/sp no identificada/e tipos A. blumenavii/V. philippocoburgii. Esta famlia considerada caracterstica da regio Neotropical. No Brasil, a Mata Atlntica destaca-se pela riqueza em espcies bem como por sua alta densidade (Fischer e Araujo, 1996). Myrtaceae esteve representada por Gomidesia/tipos Myrcia/Sizygium, Eugenia/Sizygium e terminando com espcies no identificadas/tipo Sizygium/Psidium. Em levantamentos feitos na Mata Atlntica, a famlia Myrtaceae foi registrada como a de maior abundncia e riqueza em espcies (Mamede et al., 2004). Um plen identificado como tipo Lathyrus sp (Fabaceae), que esteve representado ao longo de sete meses consecutivos, sugere ser uma leguminosa cultivada, e, portanto com longa florao e coleta, ocorrida de outubro a maio. No alimento larval de E. atroveneta, assim como em E. annectans, foram comuns a presena de vrias famlias como Myrtaceae, Melastomataceae, Caesalpiniaceae e Solanaceae. A ausncia de bromlias na espcie estudada no Mxico poderia estar associada metodologia de tratamento dos gros de plen pela acetlise, visto que, mesmo nas nossas amostras sem este tratamento, eles com muita freqncia se apresentavam rompidos. Dentre as espcies botnicas mais coletadas destaca-se Dalechampia sp (Euphorbiaceae), que tem sido observada como sendo polinizada por Euglossa spp. na regio do Mxico, Amaznia e So Paulo (Armbruster e Webster, 1979,1981; Sazima et al., 1985). Embora o padro energtico dirio das flores de A. lindenii seja decrescente, variando entre 38-4 Joules, elas so visitadas por E. annectans ao longo de todo dia (Figura 4). Entretanto, so os machos que
297
esto presentes ao longo de todo o dia pelo nctar enquanto as fmeas predominam pela manh principalmente pelo plen e mais raramente pelo nctar, indicando uma dinmica diferenciada de utilizao da energia por parte destas abelhas nesta espcie de planta.
Figura 4. Visitantes florais de A. lindenii distribudos ao longo do dia no perodo entre setembro e novembro de 2005 na regio da Ilha de Santa Catarina-SC.
Agradecimentos
Somos especialmente gratas a Maike Hering de Queiroz e Antnio Diomrio de Queiroz por permitirem trabalhar na sua propriedade situada contiguamente a UCAD. Ao Daniel Falkenberg pela identificao botnica e pela pacincia na elucidao das dvidas sobre as plantas da regio, ao Silvnio G. da Costa, administrador da UCAD, por sempre ter-nos oferecido informaes locais, e aos alunos que contriburam na organizao e confeco das lminas de referncia. Ao apoio financeiro da BMBF (01LB0205), CNPq (690143/01-0), e ao CNPq pela bolsa a primeira autora (39 0270/05-9). Este estudo faz parte do programa Importncia das bromlias para a manuteno da biodiversidade da fauna associada na Mata Atlntica
Referncias
Armbruster WS e Webster GL (1979). Pollination of two species of Dalechampia (Euphorbiaceae) in Mexico by Euglossini bees. Biotropica 11: 278-283. Armbruster WS e Webster, GL (1981). Sistema de polinizao de duas espcies simptricas de Dalechampia (Euphorbiaceae) no Amazonas, Brasil. Acta Amaznica 11(1): 13-27. Augusto SC e Garfalo CA (2004). Nesting biology and social structure of Euglossa (Euglossa) townsendi Cockerell (Hymenoptera, Apidae, Euglossini). Insectes Soc. 51: 400-409. Dafni A (1992). Pollination Ecology. A Practical Approach. Oxford University Press, New York.
298
Dorneles LL (2007). Biologia da Polinizao de Aechmea lindenii (Bromeliaceae) e as fontes de alimento utilizadas por Euglossa annectans (Apidae, Euglossina) em reas florestais da Ilha de Santa Catarina. Monografia apresentada ao Curso de Cincias Biolgicas, UFSC. Fischer EA e Araujo AC (1996). A Flora de Bromlias do esturio do Rio Verde-Juria, So Paulo: uma comparao com outras comunidades neotropicais. Bromelia 3: 19-25. Garfalo CA, Camillo E, Augusto SC, Jesus BMV (1998). Nest structure and communal nesting in Euglossa (Glossura) annectans Dressler (Hymenoptera, Apidae, Euglossini) Rev. Bras. Zool. 15: 589-596. Mamede MCH, Cordeiro I, Rossi L, Fiuza de Melo MMR (2004). Mata Atlntica In: Estao Ecolgica Juria-Itatins. Ambiente fsico, flora e fauna. Holos, Ribeiro Preto, SP. Mendona LB e Anjos L (2003). Bird-flower interactions in Brazil: a review. Ararajuba 11: 195-205 Moure JS, Urban D, Melo GAR (2007). Catalogue of Bees (Hymenoptera, Apoidea) in the Neotropical Region. Sociedade Brasileira de Entomologia, Curitiba, PR. Ramrez-Arriaga E e Martnez-Hernndez E (1998). Resources foraged by Euglossa atroveneta (Apidae: Euglossinae) at Unin Jurez, Chiapas, Mexico. A palynological study of larval feeding. Apidologie 29: 347-359. Roubik DW (1989). Ecology and natural history of tropical bees. New York. Roubik DW e Hanson PE (2004). Abejas de orqudeas de la Amrica tropical. Biologia y gua de campo. INBio-Costa Rica. Sazima M, Sazima I, Carvalho-Okano RM (1985). Biologia floral de Dalechampia stipulaceae (Euphorbiaceae) e sua polinizao por Euglossa melanotricha (Apidae). Rev. Brasil. Biol. 45: 85-93. Soucy SL, Giray T, Roubik DW (2003). Solitary and group nesting in the orchid bee Euglossa hyacinthina (Hymenoptera, Apidae). Insectes Soc. 50: 248-255. Varassim IG (2002). Estrutura espacial e temporal de uma comunidade de Bromeliaceae e seus polinizadores em floresta Atlntica do sudeste do Brasil. Tese de doutorado. UNICAMP, So Paulo. Zillikens A, Kamke R, Steiner J (2003). Communal nesting in orchid bees, co-operation or competition? Etologia (Suplemento) 5: 224-225. Zucchi RD, Sakagami SF, Camargo JMF (1969). Biological observations on a neotropical parasocial bee, Eulaema nigrita with a review on the biology of Euglossinae (Hymenoptera, Apidae). A comparative study. Hokkaido University Journal of the Faculty of Science 17: 271-380.
299
Biologia de Nidificao e Aspectos Comportamentais de Xylocopa ordinaria e Xylocopa frontalis No Norte Fluminense
Programa de Ps-Graduao em Ecologia e Recursos Naturais Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro Campos dos Goytacazes - RJ 1 bernardinoas@pop.com.br; 2mcrisgag@uenf.br
1,2
Andr Sarlo Bernardino1 & Maria Cristina Gaglianone2
Nest biology and behavior of Xylocopa ordinaria and Xylocopa frontalis in the northern Rio de Janeiro state.
Abstract
Bees of the genus Xylocopa, also known as carpenter bees, dig their nests on dry and rotten wooden substrates. They present solitary habits, except for some species that tolerate co-specifics in the nest. Xylocopa bees are important pollinators of native and cultivated plants, being important agents for pollinator management programs. The aim of this paper is to present data on the nest biology and behavior of two species of Xylocopa, X. ordinaria and X. frontalis, in an urban area and in restinga ecosystems in southeastern Brazil. Data on the host plant, distribution of nests, food resources, as well as on the behavior in nests were collected. Both species nested in branches of Terminalia sp. and Eucaliptus sp. but only X. frontalis nested in bamboo culms, while X. ordinaria nested in branches of Pera galabrata. In natural areas X. ordinaria was more common than X. frontalis but they presented similar abundance in the anthropic area. Their nests presented grouped distribution. Substrates characteristics and nest architecture were significantly related for X. ordinaria. Cissites maculata was the most important cleptoparasites in nests of both species. The sexual ratios in nests of these species were biased to produce more females. X. ordinaria was active throughout the year, being multivoltin, while X. frontalis presented bivoltinism. Two behaviors were conspicuous inside the nests: trofalaxis and guard of the nest. Both Xylocopa species were generalist but present floral constancy when collecting pollen.
Introduo
As abelhas do gnero Xylocopa, tambm conhecidas como abelhas carpinteiras, usualmente escavam seus ninhos em madeira seca e em estgio inicial de apodrecimento (Hurd, 1958). Os ninhos podem apresentar um nico, ou vrios canais, sendo esta caracterstica determinada por diferentes fatores, como: clima, tipo de vegetao, disponibilidade de substratos e nmero de reutilizaes de um mesmo ninho (Gerling et al., 1989). Estas espcies geralmente so de hbito solitrio, mas algumas podem apresentar sobreposio de geraes e tolerncia presena de co-especficos no ninho (Velthuis and Gerling, 1983; Gerling et al., 1989), tendo sido observada a reutilizao de ninhos em geraes distintas (Camillo and Garofalo,
300
1989). As interaes entre indivduos de um mesmo ninho foram apontadas como de grande importncia maturao dos indivduos jovens (Velthuis and Gerling, 1983), bem como na competio entre fmeas filhas e me para a obteno da dominncia do ninho (Hogendoorn and Velthuis, 1995). As abelhas do gnero Xylocopa so importantes agentes polinizadores e habitam os mais diversos ecossistemas, desde florestas at ambientes antrpicos, tendo sido registradas 50 espcies no Brasil (Silveira et al. 2002). Estudos sobre polinizadores tm apontado espcies de Xylocopa com importncia regional na polinizao de plantas nativas e cultivadas, e a escassez destas abelhas em reas de cultivo confirma a necessidade do manejo adequado destes polinizadores (Freitas & Oliveira-Filho, 2001). Para tal, o conhecimento das espcies autctones e da sua biologia de nidificao essencial. O objetivo desta palestra apresentar dados da biologia de nidificao e comportamento de duas espcies de Xylocopa mais abundantes na regio Norte Fluminense. Xylocopa ordinaria Smith foi relatada para os estados da BA, ES, RJ, MS, SP e RS, tendo sido indicada como polinizador efetivo de Passifloraceae nativas e cultivadas nos estados do RJ e ES (Varassin and Silva, 1999; Hoffmann et al., 2000; Benevides & Gaglianone, 2006; Gaglianone et al., 2006). Xylocopa frontalis (Olivier) tem distribuio ampla no Brasil e vrios aspectos de sua biologia j foram relatados para outras regies (Camillo & Garfalo, 1982, 1989; Freitas & Oliveira Filho, 2001; Pereira, 2002; Oliveira Filho & Freitas, 2003).
Material & Mtodos

O estudo foi realizado em trs reas distintas: rea antrpica (Rancho de Criao no campus da Universidade Estadual do Norte Fluminense, em Campos dos Goytacazes), e em dois ambientes naturais (Restinga de Grussai/Iquipari em So Joo da Barra, RJ e Restinga de Praia das Neves, Presidente Kennedy, ES). O clima da regio caracterizado como tropical sub-mido a semi-rido, com precipitao pluviomtrica mdia anual variando de 800 a 1.200 mm, com as maiores taxas de precipitao nos perodos de vero (outubro a abril) e as menores nos perodos de inverno (maio a setembro) (RADAMbrAsIL, 1983). Nas reas naturais, os ninhos foram procurados atravs de inspeo visual por um observador sendo sua posio georreferenciada (GPS), medida sua altura em relao ao solo e identificada sua planta hospedeira, no perodo entre ago/2003 e ago/2004. Neste mesmo perodo um inventrio da comunidade de abelhas foi realizado atravs de coleta mensal de abelhas visitantes florais com o uso de redes entomolgicas, para uma avaliao das fontes de recurso utilizadas pelas abelhas Xylocopa. Para estabelecimento do Rancho de Criao, ninhos-matriz foram obtidos nas duas reas naturais entre ago/2006 e ago/2007. Os substratos foram dispostos em prateleiras onde os ninhos permaneciam protegidos da chuva e do sol intenso. Os substratos ofertados junto aos ninhos-matriz foram colmos de bambu (fechados em uma das extremidades em seus prprios ns, como sugerido por Pereira, 2002) e peas de madeira de Pera glabrata, Terminalia sp. e Eucaliptus sp., substratos utilizados por estas espcies (Bernardino & Gaglianone, no prelo; Bernardino, obs. pes.). Os colmos de bambu oferecidos no Rancho de Criao apresentaram dimetro interno mnimo de 1,40 cm e mximo de 2,60 cm (mdia = 1,990,24 cm; n = 70), com a espessura da parede variando entre 0,22 cm e 0,72 cm (mdia = 0,410,13 cm; n = 70), dispostos em tijolos perfurados e em feixes inseridos em garrafas do tipo pet, totalizando 70 colmos de bambu oferecidos ao longo do experimento. As peas de madeira oferecidas apresentaram comprimento e circunferncia variando entre os diferentes substratos e foram posicionadas horizontal e verticalmente nas prateleiras do Rancho de Criao. A arquitetura dos ninhos foi avaliada pelo comprimento e circunferncia dos substratos utilizados, bem como atravs das seguintes medidas: comprimento dos canais, dimetro e volume interno
301
das clulas (v=.r2.h, onde v=volume interno, = 3,14, r = raio da maior largura da clula e h = comprimento da clula (Neves et al. (2006))). A coleta de dados referentes ao comportamento de nidificao das espcies de Xylocopa foi realizada no Rancho de Criao na UENF, entre ago/2006 e dez/2007. Neste perodo, 25 ninhos de X. ordinaria e 23 ninhos de X. frontalis foram observados por 60 dias (mdia de 5 dias em cada ms). As observaes foram conduzidas por um observador no perodo entre 7:00h e 18:00h, sendo tambm feitas observaes espordicas com incio s 5:00h. Cinco ninhos de X. ordinaria e cinco ninhos de X. frontalis recm operculados foram abertos e os imaturos e seu aprovisionamento transferidos para recipientes acrlicos estreis (com tampas perfuradas) para observao de possvel correlao da distribuio dos sexos com a posio no ninho das diferentes clulas de cria. A razo sexual foi determinada calculando-se a proporo do nmero de machos em relao ao nmero de fmeas em cada ninho e na populao de abelhas adultas marcadas nos ninhos. O contedo polnico de massas de aprovisionamento e fezes encontradas em oito e 14 clulas de cria dos ninhos abertos de X. frontalis e X. ordinaria, respectivamente, foi coletado e fixado em lcool 70% para anlise dos morfotipos polnicos presentes. O material polnico foi preparado em trs lminas por amostra e montado em gelatina glicerinada (Dafni, 1992). As diferentes formas polnicas foram fotografadas em cmera digital e 300 gros de plen foram contados e identificados em morfotipos polnicos em campos aleatrios em cada lmina, totalizando 900 gros de plen contados por amostra.
Resultados & Discusso

Em rea de restinga, Xylocopa ordinaria foi a espcie mais abundante do gnero, representando 98% das abelhas carpinteiras, enquanto que em rea antrpica X. ordinaria e X. frontalis apresentaram abundncia similar. Na restinga de Grussai/Iquipari, X. ordinaria nidificou preferencialmente em galhos de Pera glabrata (Euphorbiaceae) (76%) e Sideroxylon obtusifolium (Sapotaceae) (6%), no sendo encontrados ninhos de X. frontalis (Bernardino & Gaglianone, no prelo). J na Restinga de Praia das Neves somente ninhos de X. ordinaria foram encontrados em vegetao nativa (P. glabrata), e ninhos de X. frontalis e X. ordinaria foram encontrados em Terminalia sp. e em moures de Eucaliptus sp., sendo estas ltimas espcies introduzidas na rea. Em rea antrpica, ambas as espcies utilizaram Eucaliptus sp e Terminalia sp, mas somente X. frontalis utilizou colmos de bambu enquanto somente X. ordinaria utilizou galhos de P. glabrata. Na restinga de Grussai/Iquipari, os ninhos de X. ordinaria distribuem-se de forma agrupada (Bernardino & Gaglianone, no prelo), apesar da distribuio uniforme dos substratos preferenciais (Assumpo & Nascimento, 2000), sugerindo o comportamento de filopatria, onde os indivduos emergentes tendem a nidificar nas proximidades do ninho materno (Camillo & Garfalo, 1982). Este comportamento foi tambm observado no Rancho de Criao, onde a agregao de ninhos apresentou valores maiores que os observados para ambientes naturais, no tendo sido freqentes as interaes antagnicas entre indivduos de diferentes ninhos. Desta forma, a viabilidade do manejo destas abelhas parece ser facilitada, uma vez que ninhos-matriz servem de fonte de indivduos jovens que nidificaro nas proximidades dos ninhos maternos. No foram observadas preferncias quanto altura da entrada dos ninhos em relao ao solo, nem quanto s caractersticas de comprimento e circunferncia do substrato utilizado. Contudo, ninhos de X. ordinaria escavados em substratos com maior circunferncia apresentaram maior nmero de canais escavados (r 2= 0,45; F = 18,58; GL= 1 e 23; p < 0,000), indicando que a circunferncia do
302
substrato influencia na arquitetura de seus ninhos, no sendo essa relao observada em ninhos de X. frontalis (r2 = 0,36; F = 2,85; GL= 1 e 5; p = 0,152). Outro fator determinante na arquitetura dos ninhos de X. ordinaria foi a relao positiva entre o nmero de clulas de cria e o comprimento dos canais escavados (r= 0,58; F = 39,4; GL = 1 a 26; p < 0,000). As clulas de cria de machos e fmeas de X. ordinaria e de X. frontalis no apresentaram diferenas significativas em relao ao comprimento, largura ou volume, entretanto todas essas variveis foram maiores em ninhos de X. frontalis. Embora no haja diferenas estruturais entre clulas de cria de machos e fmeas de uma mesma espcie, a distribuio dos sexos nas diferentes clulas parece favorecer a produo de fmeas nas primeiras clulas ou em ninhos com menor nmero de clulas, sendo os machos produzidos nas ultimas clulas de cria ou em ninhos com mais de quatro clulas. A razo sexual das populaes de X. ordinaria (1 : 0,43; X2 = 7,72; p < 0,05) e X. frontalis (1 : 0,26; X2 = 17,16; p < 0,05) apresentou-se desviada maior produo de fmeas, fato observado tambm para outras espcies de Xylocopa (Watmough, 1983). O cleptoparasitismo por Cissites maculata (Coleoptera: Meloidae) foi observado nas duas reas de estudo, chegando a atingir 20% dos ninhos de X. ordinaria e 14% de X. frontalis. Ninhos de X. frontalis construdos em rea antrpica ainda apresentaram 9% de parasitismo por uma espcie de Diptera. As fmeas de X. ordinaria e X. frontalis no apresentaram comportamentos agressivos contra estes parasitas. Por outro lado, a usurpao de ninhos por co-especficos parece ser um comportamento recorrente em X. ordinaria, uma vez que trs observaes de usurpao de um mesmo ninho foram observadas. Discusses relativas presso de seleo exercida por parasitas e cleptoparasitas de Xylocopa podem ser encontrados em Gerling et al. (1989) e Hogendoorn & Velthuis (1995), onde os autores relatam uma importncia secundria destes inimigos naturais. Os dados indicam que Xylocopa ordinaria uma espcie multivoltina, com indivduos jovens ao longo de todo o ano, e sobreposio de geraes. J X. frontalis mostrou-se bivoltina, com maior taxa de nidificao em Dez-Abr. O bivoltinismo de X. frontalis foi observado tambm por outros autores (Camillo and Garfalo, 1982). Ao longo do dia, as abelhas apresentaram maior atividade at s 15h, quando a freqncia das atividades externas ao ninho diminui. As interaes realizadas por indivduos de um mesmo ninho relacionaram-se a alimentao (trofalaxia) e guarda do ninho. No presente estudo, o comportamento de trofalaxia ocorreu aps o retorno da fmea ao ninho, sendo o comportamento de bloqueio da passagem da fmea, pr-requisito primeira transferncia de nctar da me para o jovem. A trofalaxia parece ser um comportamento conservado entre as espcies de Xylocopa, tendo sido relatado para X. frontalis e X. grisescens (Camillo & Garofalo, 1982), X. suspecta (Camillo et al., 1986), dentre outras (Gerling et al., 1989). Em espcies eussociais, este comportamento parece ter um importante papel na comunicao e integrao da colnia (Michener, 1974), enquanto que em espcies que apresentam menor hierarquia social este comportamento foi apontado como importante nutrio dos indivduos jovens, como observado por Velthuis & Gerling (1983) para X. pubescens. O comportamento de guarda do ninho aqui observado apresentou uma seqncia crescente de agressividade, similar ao observado para X. abreviatta (Ramalho et al., 2004), mas diferiu do observado para X. frontalis e X. grisescens (Pereira, 2002; Neves et al., 2006). Esta diferena deve-se ao comportamento de sair em vo do ninho para perseguir a fmea intrusa, o que no ocorreu no presente estudo. Entretanto, quando a fmea j estava em vo, ela era capaz de expulsar indivduos que estivessem prximos ao seu ninho, realizando vos de perseguio. Na restinga, Xylocopa ordinaria visitou 28 espcies vegetais, sendo fontes importantes de plen Solanum curvispitum, Clusia hilariana, Allagoptera arenaria e Byrsonima sericea, enquanto
303
que Arrabidaea conjugata, Mandevilla funiformis, Manilkara subsericea, Passiflora alliacea e Centrosema sp. foram as principais fontes de nctar (Bernardino & Gaglianone, no prelo). Apesar do hbito generalista na coleta de recursos florais, a constncia floral foi detectada para X. ordinaria e X. frontalis, atravs de anlises do contedo polnico de clulas de cria, confirmando a sua importncia na polinizao de diversas plantas nestes ambientes. A constncia fonte de plen, aliada necessidade de realizar vrios vos de forrageio para o aprovisionamento de uma clula de cria, resulta na importncia destas espcies na polinizao de diversas plantas, como indicado por outros autores (Buchmann, 1983; Buchmann & Nabhan, 1996). Desta forma, evidencia-se a viabilidade de utilizao destas abelhas em programas de manejo de polinizadores nativos.
Agradecimentos
A FAPERJ (E26/171.622/2002-Abelhas e plantas melitfilas em rea de restinga no norte fluminense) e PROBIO/MMA/CNPq/BIRD (Convnio 0115-00/04 - Polinizadores do maracuj no norte fluminense) pelo financiamento. FAPERJ pela bolsa de mestrado ao primeiro autor. Ao Programa de Ps-Graduao em Ecologia e Recursos Naturais (UENF) e Laboratrio de Cincias Ambientais (LCA-UENF) pelo apoio logstico. Referncias Bibliogrficas Assumpo J & Nascimento MT (2000). Estrutura e composio florstica de quatro formaes vegetais de restinga no complexo lagunar Grussa/Iquipari, So Joo da Barra, RJ, Brasil. Acta Bot. Bras., 14(3): 301-315. Benevides CR & Gaglianone MC ( 2005). Pollination of Passifloraceae in the Northern Rio de Janeiro, Brazil. Annual Meeting of the Association for Tropical Biology and Conservation. Uberlndia. Brazil. pp 118. Bernardino AS & Gaglianone MC (no prelo). Nest Distribution and Nesting Habits of Xylocopa ordinaria Smith (Hymenoptera; Apidae) in a Restinga Area of So Joo da Barra, RJ. Revta. Bras. Ent. Buchmann SL (1983). Buzz pollination in Angiosperms. In C.E.Jones & R.J. Little (eds.) Handbook of experimental pollination biology. pp. 73-113. Buchmann SL & Nabhan GP (1996). The forgotten pollinators. Island Press/Sheawater Books. Washington D.C. Camillo E & Garfalo CA (1982). On the bionomics of Xylocopa frontalis (Oliver) and Xylocopa grisescens (Lepeletier) in southern Brazil. I - nest construction and biological cycle. Rev. Bras. Biol. 42(3): 571-582. Camillo E, Garfalo CA & Muccillo G (1986). On the bionomics of Xylocopa suspecta (Moure) in the southern Brazil: nest construction and biological cycle (Hymenoptera, Anthophoridae). Rev. Bras. Biol. 46(2): 383-393. Camillo E & Garfalo CA (1989). Social organization in reactivated nests of three species of Xylocopa (Hymenoptera, Anthophoridae) in southeastern Brazil. Insectes Sociaux, 36(2): 92-105. Dafni A (1992). Pollination Ecology A practical approach. Oirl Press at Oxford University Press. Freitas BM & Oliveira Filho JH (2001). Criao Racional de Mamangavas para polinizao em reas agrcolas. Banco do Nordeste. Fortaleza. Gaglianone MC, Bernardino AS, Benevides CR, Vidal EMF et al. (2006). Polinizadores do maracuj no norte fluminense. Relatrio tcnico de projeto de pesquisa. PROBIO/MMA, Braslia.
304
Gerling D, Velthuis HHW & Hefetz A (1989). Bionomics of the large carpenters bees of the genus Xylocopa. Ann. Rev. Ento. 34: 163-190 Hoffmann M, Pereira TNS, Mercadante MB, & Gomes AR (2000). Polinizao de Passiflora edulis f. flavicarpa (Passiflorales, Passifloraceae), por abelhas (Hymenoptera, Anthophoridae) em Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro. Iheringia, 89: 149-152. Hogendoorn K & Velthuis HHW (1995). The role of young guards in Xylocopa pubescens. Insectes Sociaux, 42:427-448. Hurd PD Jr. (1958). Observations on the nesting habits of some new world carpenter bees with remarks on their importance in the problem of species formation (Hymenoptera: Apoidea). Ann. Entomol. Soc. Am. 51:365-375 Michener CD (1974). The social behavior of the bees. Cambridge: Harvard University Press. Neves EL, Silva FO, Teixeira AFR. & Viana BF (2006). Aspectos da nidificao e forrageamento de Xylocopa (Neoxylocopa) grisescens Lepeletier, 1841 (Hymenoptera: Apidae: Xylocopini) nas dunas do mdio So Francisco, Bahia. Sitientibus, Srie Cincias Biolgicas, 6(2):95-100. Oliveira Filho JH & Freitas BM (2003). Colonizao e biologia reprodutiva de mamangavas (Xylocopa frontalis) em um modelo de ninho racional. Cincia Rural. 33(4): 693-697. Pereira M. (2002) Biologia de nidificao de Xylocopa frontalis e Xylocopa grisescens (Hymenoptera, Apidae, Xylocopini) em ninhos armadilha. Tese de doutoramento. Faculdade de Filosofia Cincias e Letras - USP- Ribeiro Preto. Radambrasil (1983). Rio de Janeiro/Vitria; Geologia, Geomorfologia, Pedologia, Vegetao e Uso potencial da terra SF. 23/24. Projeto RADAMBRASIL, Rio de Janeiro. Ramalho M, Batista MA & Silva M (2004). Xylocopa (Monoxylocopa) abbreviata Hurd & Moure (Hymenoptera:Apidae) e Encholirium spectabile (Bromeliaceae): Uma Associao estreita no Semi-rido do Brasil Tropical. Neotr. Entom. 33(4): 417-425. Silveira FA, Melo GAR & Almeida EAB (2002). Abelhas brasileiras: sistemtica e identificao. Belo Horizonte, MG. Varassin IG & Silva AG (1999). A melitofilia em Passiflora alata Dryander (Passifloraceae), em vegetao de restinga. Rodriguesia, 50 (76/77): 5-17. Velthuis HHW & Gerling D (1983). At the brink of sociality: Interactions between adults of the carpenter bee Xylocopa pubescens Spinola. Behav. Ecol. Soc. 12:209-214 Watmough RH (1983). Mortality, sex ratio and fecundity in natural populations of large carpenter bees (Xylocopa spp.). Jour. Ani. Ecol. 52:111-125
305
Biologia de Nidificao da Hospedeira Monoeca haemorrhoidalis (Smith, 1854) e Interaes com Abelhas, Vespas e Besouros Parasitas (Hymenoptera: Apidae, Mutillidae; Coleoptera: Meloidae)
Lo Correia da Rocha-Filho1; Gabriel A. R. Melo2 1 Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto-USP, Ribeiro Preto, SP. 2Departamento de Zoologia, Centro Politcnico, Universidade Federal do Paran-UFPR, Curitiba, PR. Corresponding author: Gabriel A. R. Melo, Departamento de Zoologia, Centro Politcnico, Universidade Federal do Paran-UFPR, C.p. 19020, 81530-980, Curitiba, PR, Tel.: 55 41 3361-1589, Fax.: 55 41 3266 2042, garmelo@ufpr.br Nest biology of host species Monoeca haemorrhoidalis (Smith, 1854) and its interactions with parasitic bees, wasps and beetles (Hymenoptera: Apidae, Mutillidae; Coleoptera: Meloidae)
Abstract
The bee species Monoeca haemorrhoidalis, the largest one in the genus, occurs in the Atlantic rainforest of southwestern and southern Brazil. In this study, conducted at the Mananciais da Serra Reserve, in Piraquara, Brazil, it was studied the nest biology of M. haemorrhoidalis and its interactions with plants and natural enemies. Four nest aggregation areas were studied between Setember/2005 and January/2007. The period of nest construction starts on October and ends on February and females construct its nests on the soil, in dense aggregations, with density values varying from 4 to 27 nests/m2. Brood cells were attacked by the cleptoparasite species Protosiris gigas (Apidae), Tetraolytta gerardi e Tetraonyx distincticollis (Meloidae) and by the parasitoid species Pseudomethoca melanocephala (Mutillidae). Emergence traps allowed investigating the seasonal patterns of M. haemorrhoidalis and its natural enemies at the nest aggregations. It was detected a succession of these four parasitic species along of nesting period, with little superposition between them. The nest aggregations under the cleptoparasitism of P. gigas shows a bimodal emergence pattern of M. haemorrhoidalis, with a marked reduction during the emergence peak of P. gigas, characterizing a probable strategy of scheduled escape. Key words: cleptoparasites, natural enemies, parasitoid, scheduled escape.
Introduo
O gnero Monoeca Lepeletier & Serville, 1828 composto por espcies de colorao negra, que podem apresentar faixas vermelhas ou amareladas no metassoma (Roig-Alsina, 1997). Essas
306
abelhas se distribuem desde o Mxico Central at o extremo sul brasileiro (Michener, 2000). No Brasil, oito espcies esto presentes, cuja faixa de ocorrncia compreende reas ocupadas por ecossistemas de Cerrado e Mata Atlntica (Silveira and Campos, 1995; Alves-dos-Santos, 1999; Silveira et al., 2002; Steiner et al., 2006). Aspectos relacionados biologia da nidificao das espcies desse gnero foram fornecidos para Monoeca schrottkyi (Friese, 1902), que foi observada nidificando em uma zona de barranco no estado de So Paulo por Schrottky (1901); Monoeca lanei (Moure, 1944), que forma densas agregaes no solo e apresenta alta sazonalidade, de maneira que os indivduos adultos esto ativos durante os meses de novembro a abril (Rozen, 1984); Monoeca xanthopyga Harter-Marques, Cunha & Moure, 2001, espcie estudada na regio do Planalto das Araucrias, no Rio Grande do Sul, que constri agregaes em solos argilosos e compactados (Cunha and Blochtein, 2002, 2003) e Monoeca sp., cujo ninho foi registrado no solo, em meio vegetao rasteira (Michener and Lange, 1958). Estudos evidenciam que representantes da tribo Osirini (Apidae) so cleptoparasitas de ninhos de Tapinotaspidini (Camillo et al., 1993; Rozen, 1984; Rozen et al., 2006). A tribo Osirini representada exclusivamente por espcies cleptoparasitas que se restringem aos neotrpicos, com exceo apenas do gnero Epeoloides Giraud, 1863, que ocorre nas regies temperadas da Amrica do Norte e Europa (Roig-Alsina, 1989; Michener et al., 1994; Michener, 2000). Estgios imaturos de Osiris sp. foram encontrados em ninhos de Paratetrapedia (Paratetrapedia) amplipennis (Smith, 1879) (Camillo et al., 1993) enquanto fmeas de Parepeolus niger RoigAlsina, 1989 esto associadas aos ninhos de Tapinotaspoides serraticornis (Friese, 1899) (Aguiar et al., 2004; Rozen, 1984). Rozen et al. (2006) registraram invases dos ninhos de Monoeca haemorrhoidalis (Smith, 1854) pela espcie Protosiris gigas Melo, 2006. Neste mesmo trabalho, larvas de Parepeolus minutus Roig-Alsina, 1989 foram encontradas em ninhos de Lanthanomelissa betinae Urban, 1995. H ainda possveis associaes a respeito do cleptoparasitismo de Osirini em ninhos de Tapinotaspidini, como a espcie Osirinus parvicollis (Ducke, 1911) como provvel inimigo natural de Arhysoceble huberi (Ducke, 1908) (Ducke, 1910) e a cleptoparasita Ecclitodes stuardi (Ruiz, 1935), cujas fmeas foram observadas sobrevoando os ninhos de Chalepogenus caeruleus (Friese, 1906) (Aguiar et al., 2004; Roig-Alsina, 1989). Este estudo teve como objetivo Estudar a relao de M. haemorrhoidalis com as espcies de inimigos naturais, especialmente as abelhas do gnero Protosiris.
Material & Mtodos

O estudo foi conduzido na rea de Proteo Ambiental (APA) Mananciais da Serra (252930S e 485930W), localizada no Municpio de Piraquara/PR, distando aproximadamente 40 km da capital Curitiba. A reserva dos Mananciais da Serra conta com mais de 2.249 hectares de rea e monitorada pela Companhia de Saneamento do Estado (SANEPAR). Sua rea est sob os domnios da Mata Atlntica e a vegetao composta por um ectono de Floresta Ombrfila Densa e Floresta Ombrfila Mista, com a presena de diversas formaes secundrias de vegetao natural, resultantes da interferncia antrpica (Itcf, 1987; Lacerda, 1999). As reas de nidificao estudadas foram as mesmas que Rozen et al. (2006) encontraram na reserva dos Mananciais da Serra. Essas agregaes localizam-se em reas abertas e expostas luz solar, sendo que a maioria ocorre na estrada vicinal que corta a reserva. Dessas reas, quatro foram selecionadas para estudo, sendo duas delas de maior extenso. Esses stios de nidificao foram delimitados com o auxlio de trenas e caracterizados quanto vegetao.
307
Para a obteno de informaes referentes razo sexual, perodo de emergncia, identificao de inimigos naturais e taxa de parasitismo e mortalidade, foram utilizadas armadilhas de emergncia nos stios de nidificao. Essas armadilhas consistem de uma armao construda com hastes de madeira, que apresenta o formato de um tronco de pirmide, cuja base maior mede 1 m2 e a base menor tem 0,03 m2 de rea. Este arcabouo, de 50 cm de altura, foi revestido com tule negro e, sobre a sua base menor, foi acoplado um recipiente plstico contendo um pino central aberto que, por sua vez, circundado por um foo. Neste espao, foi vertida uma soluo composta por 10 mL de formaldedo a 10% diludos em 1 litro de gua, cuja reposio ocorria mensalmente. Sobre este vasilhame, foi encaixada uma forma de plstico, impossibilitando, dessa forma, a fuga dos insetos que emergissem na rea compreendida pela armadilha. Quatro armadilhas de emergncia foram dispostas nas agregaes, sendo que as duas reas maiores foram guarnecidas com duas armadilhas cada, correspondendo a 4 m2 de rea amostral. As agregaes foram subdivididas em parcelas de 1 m x 1 m e as armadilhas foram sorteadas aleatoriamente para a sua disposio nos stios.
Resultados
No primeiro ano de estudo, as armadilhas de emergncia permaneceram no campo por 162 dias, entre 24 de setembro de 2005 e 04 de maro de 2006. Durante este perodo, emergiram 1.764 indivduos, representados por cinco espcies: M. haemorrhoidalis, Tl. gerardi, Pr. gigas, Tn. distincticollis e Ps. melanocephala. Por sua vez, no segundo ano, as armadilhas foram instaladas em 25 de setembro de 2006, permanecendo nos stios de nidificao at 12 de fevereiro de 2007, totalizando 142 dias, de modo que 920 espcimes foram coletados durante esse perodo. A exemplo do primeiro ano de estudo, as cinco espcies anteriores tambm foram coletadas nas armadilhas, correspondendo mesma ordem de porcentagem de emergncia. Alm dessas espcies, tambm emergiram insetos das ordens Orthoptera, Coleoptera, Diptera, Lepidoptera e Hymenoptera, os quais no esto relacionados a M. haemorrhoidalis e seus inimigos naturais. Fmeas e machos de M. haemorrhoidalis comearam a emergir a partir de 22/10/05, sendo que o perodo de emergncia dos machos terminou em 03/02/06, ao passo que as fmeas continuaram a emergir at 25/02/06. No segundo ano, a emergncia dessa espcie foi antecipada, sendo que os primeiros machos comearam a emergir a partir de 25/09/06. Contudo, o fim do perodo de emergncia ocorreu antes do que foi registrado no primeiro ano de estudo, de forma que a ltima fmea foi coletada em 05/02/07. De acordo com a soma dos dados obtidos nos dois anos de estudo, as fmeas apresentaram maior porcentagem de indivduos emergentes, com 1.456 exemplares (59,89%), enquanto os machos foram representados por 975 indivduos (40,11%), sendo que a razo sexual da espcie foi de 1,49 fmea para 1 macho. Os grficos de emergncia de M. haemorrhoidalis apresentaram curvas bimodais, com picos maiores entre 11/11 e 27/11/05 e 30/12/05 e 20/01/06 no primeiro ano e entre 16 e 30/10/06 e 11/12/06 a 15/01/07 no segundo ano. O coleptero Tl. gerardi foi a segunda espcie com maior percentual de emergncia, contando com 128 indivduos (4,77%). Esta cleptoparasita foi a primeira espcie a emergir, de modo que seu perodo de emergncia se estendeu de 24/09 a 16/12/05 no primeiro ano e no segundo foi compreendido entre 25/09 a 20/11/06. Alm de emergir primeiro, as atividades dessa espcie se findaram antes das demais, sendo que dezembro/2005 e novembro/2006 foram os ltimos meses nos quais Tl. gerardi foi observada. A cleptoparasita Pr. gigas foi representada por 73 indivduos (2,72%), com 39 fmeas e 34 machos emergentes. No primeiro ano, o perodo de emergncia dessa espcie foi de 18/11 a 30/12/05,
308
para ambos os sexos, enquanto no segundo foi de 30/10 a 25/12/06. Logo aps Pr. gigas, destaca-se Tn. distincticollis, que teve 40 espcimes emergentes (1,49%), entre 18/11/05 e 20/01/06 no primeiro ano e entre 02/10/06 e 01/01/07. A espcie Ps. melanocephala foi representada por sete machos (0,37%). Esse parasitide emergiu entre 10/02 e 04/03/06 e entre 18/12/06 e 12/02/07. Em ambos os anos de estudo, essas espcies de inimigos naturais exibiram atividades em perodos distintos, cada qual apresentando picos de emergncia em uma dada poca. Discusso A abundncia de insetos que emergiram nas armadilhas dispostas nas reas de nidificao elucida a alta prevalncia de M. haemorrhoidalis, seguida por Tl. gerardi, Pr. gigas, Tn. distincticollis e Ps. melanocephala. Em armadilhas colocadas sobre 15 ninhos de M. xanthopyga, foram obtidos 99 insetos, sendo 95,96% (n = 95) de M. xanthopyga e apenas 3,04% (n = 4) da espcie parasitide Traumatomutilla sp. (Mutillidae) (Cunha and Blochtein, 2003). A distribuio bimodal das curvas de emergncia de M. haemorrhoidalis indica uma queda brusca em seu perodo de atividades, o que evidencia um baixo nmero de fmeas nidificantes no ms de dezembro, considerando-se o primeiro ano de observao e em novembro, de acordo com o segundo ano. Esta caracterstica pode ser um importante estratagema de M. haemorrhoidalis contra o ataque da cleptoparasita Pr. gigas, cujos picos de atividades so concomitantes ao decaimento da poca em que sua hospedeira est nidificando. Minchella (1985) cita a alterao no perodo de emergncia e sazonalidade como uma variao no ciclo de vida da espcie hospedeira, que pode ser interpretada como um ardil para neutralizar o efeito de sua parasita. Outra hiptese relacionada a este fato refere-se s condies ambientais desfavorveis, uma vez que, considerando todo o perodo fenolgico de M. haemorrhoidalis, foram registrados os menores ndices de precipitao e umidade relativa do ar no ms de dezembro, o que pode ter provocado o ressecamento e drenagem do solo, tornando-o imprprio para a construo de ninhos. Entretanto, no segundo ano de coleta, a queda no perodo de atividades de M. haemorrhoidalis ocorreu em novembro, que apresentou um dos maiores ndices de pluviosidade acumulada, contrastando com os dados obtidos no primeiro ano. Desse modo, a presso exercida por Pr. gigas parece ser o fator responsvel pelo brusco decrscimo no perodo de atividades de sua hospedeira M. haemorrhoidalis. No houve sobreposio entre as fenologias das espcies de inimigos naturais, visto que, cada qual, emergiu em diferentes perodos, destacando-se Tl. gerardi como a primeira espcie emergente, seguida por Pr. gigas, Tn. distincticollis e Ps. melanocephala, respectivamente. O fato dessas espcies emergirem em pocas distintas poderia estar associado a alguma estratgia para evitar a sobreposio fenolgica e, consequentemente, a competio por clulas para o parasitismo.
Agradecimentos
Os autores agradecem aos taxonomistas John Pinto (University of Illinois) e Roberto Cambra (Universidad de Panam) pela identificao das espcies de Meloidae e Mutillidae, respectivamente.
Referncias
Aguiar AJC, Melo GAR, Rozen JG, Alves-Dos-Santos I (2004). Synopsis of the nesting biology of Tapinotaspidini bees (Apidae: Apinae). In: Proceedings of the 8th International Conference on
309
Tropical Bees and VI Encontro sobre Abelhas 2004, Ribeiro Preto, 80-85. Alves-dos-Santos I (1999). Abelhas e plantas melferas da Mata Atlntica, restinga e dunas do litoral norte do estado do Rio Grande do Sul. Rev. Bras. Entomol. 43: 191-223. Camillo E, Garfalo CA, Serrano JC (1993). Hbitos de nidificao de Melitoma segmentaria, Centris collaris, Centris fuscata e Paratetrapedia gigantea (Hymenoptera, Anthophoridae). Rev. Bras. Entomol. 37: 145-156. Cunha R and Blochtein B (2002). Estrutura de ninhos de Monoeca xanthopyga (Hymenoptera, Apoidea, Tapinotaspidini) no Planalto das Araucrias, Rio Grande do Sul. Biocincias 10: 25-33. Cunha R and Blochtein B (2003). Bionomia de Monoeca xanthopyga Harter-Marques, Cunha and Moure (Hymenoptera, Apidae, Tapinotaspidini) no Planalto das Araucrias, Rio Grande do Sul, Brasil. Rev. Bras. Zool. 20: 107-113. Ducke A (1910). Contribution la connaissance de la faune du Nord-Est du Brsil. III Hymnoptres recolts dans lEtat du Ceara en 1909 et supplments aux deux lists antrieures. Revue dEntomol. 28: 78-122. Itcf (1987). Plano de gerenciamento da rea Especial de Interesse Turstico do Marumbi. Instituto de Terras, Cartografia e Florestas do Paran, Curitiba. Lacerda AEB (1999). Levantamento florstico e estrutural de vegetao secundria em rea de contato da Floresta Ombrfila Densa e Mista-PR. Masters thesis, UFPR, Curitiba. Michener CD (2000). The bees of the world. John Hopkins University Press, Baltimore. Michener CD and Lange RB (1958). Observations on the ethology of Neotropical Anthophorine bees (Hymenoptera: Apoidea). Univ. Kansas Sci. Bull. 39: 69-96. Michener CD, Mcginley RJ, Danforth BN (1994). The bee genera of North and Central America (Hymenoptera: Apoidea). Smithsonian Institute Press, Washington. Minchella DJ (1985). Host life history variation in response to parasitism. Parasitology 90: 205-216. Roig-Alsina A (1989). The tribe Osirini, its scope, classification, and revisions of the genera Parepeolus and Osirinus (Hymenoptera, Apoidea, Anthophoridae). Univ. Kansas Sci. Bull. 54: 1-23. Roig-Alsina A (1997). A generic study of the bees of the tribe Tapinotaspidini, with notes on the evolution of their oil-collecting structures. Mitt. Mnch. Entomol. Gesell. 87: 3-21. Rozen JG (1984). Comparative nesting biology of the bee tribe Exomalopsini (Apoidea: Anthophoridae). Am. Mus. Novit. 2798: 1-37. Rozen JG, Melo GAR, Aguiar AJC, Alves-dos-Santos I (2006). Nesting biologies and immature stages of the tapinotaspidine bee genera Monoeca and Lanthanomelissa and of their osirine cleptoparasites Protosiris and Parepeolus (Hymenoptera: Apidae: Apinae). Am. Mus. Novit. 3501: 1-60. Schrottky C (1901). Biologische notizen solitarer bienen von S. Paulo (Brasilien). AlIg. Zeitschr. Ent. 6: 209-216. Silveira FA and Campos MJO (1995). A melissofauna de Corumbata (SP) e Paraopeba (MG) e uma anlise da biogeografia das abelhas do cerrado brasileiro (Hymenoptera, Apoidea). Rev. Bras. Entomol. 39: 371-401. Silveira FA, Melo GAR, Almeida EAB (2002). Abelhas brasileiras: sistemtica e identificao. F. A. Silveira, Belo Horizonte. Steiner J, Harter-Marques B, Ziilikens A, Feja EP (2006). Bees of Santa Catarina Island, Brazil a first survey and checklist (Insecta: Apoidea). Zootaxa 1220: 1-18.
310
Caractersticas Comportamentais das Espcies de Euglossa Latreille (Hymenoptera, Apidae) e a Origem Da Eussocialidade Nas Abelhas
Caracterticas comportamentais das espcies de Euglossa Solange Cristina Augusto1 & Carlos Alberto Garfalo2 1 Instituto de Biologia, Universidade Federal de Uberlndia, 38400-902, Uberlndia, MG, Brasil. 2 Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, USP, 14040-901, Ribeiro Preto, SP, Brasil. Autor para correspondncia: S.C. Augusto E-mail: scaugusto@umarama.ufu.br Telefone: (34) 32182243 Fax: (34) 32182243 Behavioral characteristics of Euglossa Latreille (Hymenoptera, Apidae) and origin of eusociality in bees.
Abstract.
The social structure of five species of Euglossa was presented including hypothesis about how the sociality could have arisen in Apidae corbiculate. Solitary foundation, nest reactivation, multi-females colonies and reproductive division of task were observed among these species studied. The most of females return to the natal nest after the first fly pos emergence and began to reactivate it. The Euglossa species presented small colonies with semisocial and eusocial organization. In E. cordata and E. fimbriata colonies one female becomes the dominant reproductive and the others behave as subordinate females. The subordinate females provision and oviposit their cells while the dominant female becomes the major guard bee, and oviposits in cells oviposited in by subordinate females. Oviposition by dominant female is preceded by oophagy. Agonistic interactions occur among dominant and subordinate females. The oviposition by subordinate, and later replace their eggs with her own would also be, leads a complete reproductive skew and the behavior performed by dominant could be a prudent selfish strategy to avoid the group dispersal or lethal fighting, as predicted by transactional models of reproductive skew. In E. townsendi, E. truncata and probably E. melanotricha nests more than one female stay in the nests and performed oophagy in cells oviposited (=egg-laying females) by forage-egg-laying females. The presence of more than one egg-laying females in these nests may be associated with the absence of within-group aggression among the females and leads to the occurrence of lower skew reproductive It seems to support the predictions by tug-of-war models. The behavior displayed by dominant female is characteristic of brood parasitism and fits the parental parasitism. Key words: Euglossa, nesting behavior, brood parasitism, reproductive skew, corbiculate
Introduo
Embora as relaes filogenticas entre os Apidae corbiculados sejam incertas, anlises mais recentes apontam Euglossini como txon mais basal, grupo irmo de todos os outros taxa (Bombini,
311
Meliponini e Apini) ( Roig-Alsina & Michener, 1993, Schultz et al., 1999), sendo tambm o nico grupo que apresenta espcies com comportamento solitrio. Dados sobre a biologia da nidificao de Euglossa spp., gnero que apresenta maior riqueza de espcies, evidenciam a ocorrncia de espcies com comportamento social, bem como a presena de caractersticas bionmicas que podem ser precursoras do comportamento eussocial nos Apidae corbiculados (Augusto & Garfalo, 2004). Fundao solitria, nidificao em cavidades preexistentes, reativao dos ninhos por sucessivas geraes, associaes de fmeas adultas, foram verificadas para a maioria das espcies de Euglossa com ninho conhecidos (Zucchi et al., 1969; Garfalo, 1985, 1992; Augusto, 1993, 1999; Augusto & Garfalo, 2004; Augusto & Garfalo, 2007). Para essas espcies estudadas mais detalhadamente quanto aos hbitos de nidificao, constatou-se que nas associaes formadas, todas as fmeas adultas so totipotentes. Dessa forma, a diviso de trabalho que cada fmea assume depende da condio do ninho quando as fmeas jovens emergem, como tambm observado para algumas espcies de halictdeos (Schwarz et al., 2007). Evidncias de reativaes e ninhos com mais de uma fmea, observado na maioria das espcies de Euglossa com ninhos conhecidos, sugerem que estas caractersticas podem ocorrer com maior freqncia bem como a ocorrncia de espcies com comportamento sociais. At mesmo para as espcies que constroem ninhos areos, consideradas inicialmente solitrias (Young, 1985), foi verificado a ocorrncia de ninhos comunais (Soucy et al., 2003). Atualmente, pelo menos dez espcies foram identificadas quanto ao nvel de organizao social apresentado (Tabela 1), sendo todas as do subgnero Euglossa consideradas eussociais. Tabela 1- Nvel de organizao social apresentado por diferentes espcies de Euglossa. Espcies Status social Referncia Garfalo (1985, 1992); Augusto (1993) Ramiez-Arriaga et al. (1996) Augusto (1999); Augusto & Garfalo, in press. Augusto & Garfalo (2002) Augusto & Garfalo (2004) Augusto et al. no publicado Roberts & Dodosn (1967) Roberts & Dodosn (1967) Garfalo et al. (1998) Soucy et al. (2003)
Euglossa (Euglossa) cordata Semi-social/Eussocial (Linnaeus, 1758) Euglossa (Euglossa) Semi-social/Eussocial atroveneta Dressler, 1978 Euglossa (Euglossa) fimbriata Semi-social/Eussocial Rebelo & Moure, 1995 Euglossa (Euglossa) truncata Semi-social/Eussocial Rebelo & Moure, 1995 Euglossa (Euglossa) towsendi Semi-social/Eussocial Cockerell, 1904 Euglossa (Euglossa) Semi-social/Eussocial melanotricha Moure, 1967 Euglossa (Glossura) imperialis Comunal Cockerell 1922 Euglossa (Glossura) Comunal ignita (Smith 1954) Euglossa (Glossura) Comunal annectans Dressler, 1982 Euglossa (Glossurella) Comunal hyacinthina Dressler, 1982
312
Uma anlise da diviso reprodutiva de trabalho em colnias de Euglossa cordata, Euglossa fimbriata, Euglossa townsendi, Euglossa truncata e Euglossa melanotricha, de acordo com os modelos de reproductive skew (Reeve and Keller, 2001), apresentada. Adicionalmente discutida a hiptese do parasitismo parental (Charnov, 1978; Stubblefield & Charnov, 1986) como uma alternativa para explicar a origem do comportamento eussocial em Euglossini.
Estrutura social e origem da eussocialidade no gnero Euglossa

A fundao solitria e em nidificao em cavidade preexistente tem sido o comportamento predominante nas espcies de Euglossa (Zucchi et al., 1969; Garfalo, 1992). Apenas para E. annectans foi constatada fundao pleometrtica (Garfalo et al., 1998). Estudos desenvolvidos com espcies mantidas em caixas de observao e acompanhamento direto das atividades intranidal de E. cordata e E. townsendi (ver Garfalo, 1985, 1992, Augusto, 1993, Augusto & Garfalo 2004) revelam que a fmea fundadora, aps fechar um nmero varivel de clulas (1 a 14), geralmente permanece no ninho at a emergncia dos descendentes. As fmeas filhas, aps a emergncia tendem a retornar do primeiro vo ps-emergncia e participar da reativao do ninho materno, formando pequenas colnias, geralmente, de 2 ou 3 fmeas. Durante a primeira reativao do ninho, freqente o estabelecimento de uma associao matrifilial. Embora todas as fmeas sejam fecundadas, desenvolvam ovrios e ovipositam frequentemente, a produo de descendentes monopolizada por uma das fmeas associadas, no caso a me, que realiza a oofagia, e na seqncia a oviposio, nas clulas aprovisionadas e ovipositadas pelas filhas. As reativaes subseqentes podem ocorrer na presena ou ausncia de fmea(s) da reativao anterior e por fmea(s) que emerge(m) durante essas reativaes. Estabelecem-se assim associaes entre fmeas de uma mesma gerao (geralmente irms) ou diferentes geraes. Nesse ltimo caso, o parentesco entre elas, dependente da funo assumida pela fmea da reativao anterior que permanece na nova reativao. Processos de reativao subseqente fundao foram acompanhados tambm para E. fimbriata (Augusto & Garfalo, in press), E. truncata (Augusto e Garfalo, 2002) e E. melanotricha (Augusto et al., no publicado). Nessas associaes dois padres de comportamentos foram observados. Em E. cordata (Garfalo, 1985) e E. fimbriata (Augusto & Garfalo, 2008), uma das fmeas assume a dominncia reprodutiva do ninho. Nessas espcies alm da oofagia, a dominante exibe comportamentos agonsticos durante as atividades das fmeas forrageadoras (Augusto, 1993; Augusto & Garfalo, 1994), as quais assumem a funo de subordinadas. Esses dois comportamentos parecem garantir que toda a prole produzida seja de uma nica fmea. Nesse caso, a dominante permite a reproduo da subordinada, mas substitui seus ovos, o que pode ser considerado uma prudent selfish strategy, pois evita a disperso das fmeas ou lutas letais entre elas e apenas uma das fmeas controla totalmente a reproduo do grupo, como prediz o transactional model of reproductive skew (concession model) (Reeve and Keller, 2001, Langer 2004). A vantagem da fmea subordinada seria o ganho gentico indireto, ao cuidar da prole produzida pela dominante e a possibilidade de substituio da dominante, quando essa fmea morre ou desaparece do ninho durante uma reativao, conforme constatado em E. cordata e E. fimbriata (Garfalo, 1985, 1987; Augusto, 1993, 1999). Em ambas as espcies, geralmente, a fmea mais velha torna-se a dominante o que sugere que a idade o fator preponderante na diviso de trabalho, conforme mostrado por Augusto (1993) em E. cordata e como tambm observado para algumas outras espcies de abelhas e vespas (Schwarz & Woods, 1994; Tsuji & Tsuji, 2005; Bridge & Field, 2007).
313
Em colnias de E. townsendi, semelhante a E. cordata e E. fimbriata, todas as fmeas so reprodutivamente ativas. Observaes diretas do comportamento das fmeas revelam, contudo, que mais de uma fmea pode permanecer no ninho e atuar apenas como poedeira, semelhante a uma fmea dominante (Augusto & Garfalo, 2004). A presena de mais de uma fmea poedeira promove a ocorrncia de mltiplas oofagias e substituio dos ovos em uma mesma clula, enquanto que em E. cordata e E. fimbriata, cada clula aberta uma nica vez e o vo da subordina substitudo pelo ovo da dominante (Garfalo, 1985, 1987; Augusto, 1993). Em E. truncata (Augusto & Garfalo 2002), durante o acompanhamento de apenas um processo de reativao observou-se uma situao semelhante E. townsendi. Na associao formada, uma fmea atuou como forrageadora e poedeira e outras trs atuaram apenas poedeiras. No foram observadas interaes agonsticas entre as fmeas, semelhante a E. townsendi. Mais recentemente, observaes das atividades intranidal exibidas por fmeas em um ninho de E. melanotricha, mantido em caixa de observao (Augusto et al. n.p), revelaram um estrutura semelhante a E. townsendi e E. truncata. Nessa espcie, reativao por mais de uma fmea, sobreposio de geraes, diviso reprodutiva de trabalho ocorrem. Embora ainda no conclusivo, existem evidncias da presena de mais de uma fmea poedeira, visto que em todas as reativaes observadas (n=5), apenas uma fmea atuou como forrageadora na presena de at duas fmeas que permaneciam no ninho, sem atividade de forrageamento. Interaes agonsticas raramente foram observadas. Por outro lado, embora observaes mais detalhadas necessitem ser feitas, em E. townsendi e E. truncata a presena de mais de uma poedeira tem como conseqncia um baixo reproductive skew, pois a prole parece ser dividida entre as fmeas poedeiras, como prediz o modelo tug-of-war of reprodutive skew. Um menor skew reprodutivo observado em colnias de E. townsendi e E. truncata, poderia ser explicado pelo a ausncia de interaes agonsticas entre as fmeas associadas, o que difere marcadamente de E. cordata e E. fimbriata. Os comportamentos apresentados pelas fmeas dominante ou poedeira das espcies de Euglossa, so caractersticos de uma fmea parasita e determinam a diviso reprodutiva de trabalho entre as fmeas associadas, um dos principais aspectos envolvidos na transio do comportamento solitrio para o eussocial. Esses comportamentos fortalecem hiptese do parasitismo parental, desenvolvida por Charnov (1978) e Stubblefield & Charnov (1986), para explicar a origem de comportamento social os insetos. De acordo com esses autores, a me sofre uma forte presso seletiva para parasitar suas filhas quando ela tem a oportunidade para faz-lo. Nas espcies de Euglossa essa oportunidade ocorre durante uma reativao. O comportamento de oofagia da fmea dominante proporciona a essa fmea um ganho quantitativo e qualitativo de nutrientes que permite um aumento da longevidade e fertilidade e assim a explorar as vantagens do parasitismo. De fato as fmeas que atuam como dominante ou poedeira tem um maior tempo de permanncia no ninho, determinado indiretamente pelo tempo de permanncia no ninho, quando comparado com as fmeas que atuam como subordinada ou forrageadora e poedeira (Augusto, 1993, 1999; Augusto & Garfalo, 2004). As informaes disponvies sobre os comportamentos intranidal apresentado por fmeas de Euglossa sugerem que o comportamento social nesse grupo pode ser muito mais frequente do que o comportamento solitrio e que a oofagia e comportamentos agressivos exibidos pela dominante de E. cordata e E. fimbriata so provavelmente precursores do comportamento das rainha das abelhas corbiculadas altamente eussociais.
Augusto SC (1993). Aspectos da estrutura social de Euglossa cordata (Hymenoptera; Apidae; Euglossini). Dissertao de Mestrado. FFCLRP-USP, Ribeiro Preto.
314
Augusto SC (1999). Bionomia e organizao social de Euglossa (Euglossa) fimbriata REBLO & MOURE, 1995 e Euglossa (Euglossa) townsendi COCKERELL, 1904. Tese de Doutorado. FFCLRP-USP, Ribeiro Preto. Augusto SC and Garfalo CA (1994). Comportamento das fmeas nas associaes formadas em ninhos de Euglossa cordata (Hymenoptera; Apidae; Euglossini). In: I Encontro sobre Abelhas, Ribeiro Preto, SP, Brasil, 1: 171-181. Augusto SC and Garfalo CA (2002). Desenvolvimento de um ninho de Euglossa truncata (Apidae; Euglossinia). In: Encontro sobre Abelhas, Ribeiro Preto, SP, Brasil, 5: 305. Augusto SC and Garfalo CA (2004). Nesting biology and social structure of Euglossa (Euglossa) townsendi Cockerell (Hymenoptera, Apidae, Euglossini). Insect. Soc. 51: 400-409. Augusto SC and Garfalo CA (2007). Nidificao de Euglossa (Euglossa) melanotricha Moure (Hymenoptera: Apidae) no solo do Cerrado. Neotrop. Entomol. 36: 153-156. Augusto SC and Garfalo CA (2008). Bionomics and Sociological Aspects of Euglossa fimbriata (Apidae, Euglossini). Genet. Mol. Res. (in press). Bridge C and Field J (2007). Queuing for dominance: gerontocracy and queue-jumping in the hover wasp Liostenogaster flavolineata. Behav. Ecol. Sociobiol. 61: 1253-1259. Charnov EL (1978). Evolution of eusocial behavior: offspring choice or parental parasitism? J. Theor. Biol. 75: 451-465. Eberhard WG (1988). Group nesting in two species of Euglossa bees (Hymenoptera: Apidae). J. Kansas Entomol. Soc. 61: 406-411. Garfalo CA (1985). Social structure of Euglossa cordata nests (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Entomol. Gener. 11:77-83. Garfalo CA (1992). Comportamento de nidificao e estrutura de ninhos de Euglossa cordata (Hymenoptera: Apidae: Euglossini). Rev. Bras. Biol. 52:187-198. Garfalo CA, Camillo E, Augusto SC, Vieira-de-Jesus BM and Serrano JC (1998). Nest structure and communal nesting in Euglossa (Glossura) annectans Dressler (Hymenoptera, Apidae, Euglossini). Revta. bras. Zool. 15:589-596. Langer P, Hogendoorn K and Keller L (2004). Tug-of-war over reproduction in a social bee. Nature. 428:844-846. Ramrez-Arriaga E, Cuadriello-Aguilar JI and Hernndez EM (1996). Nest structure and parasite of Euglossa atroveneta Dressler (Apidae: Bombinae: Euglossini) at Unin Jurez, Chiapas, Mxico. J. Kansas Entomol. Soc. 69: 144-152. Reeve HK and Keller L (2001). Test of reproductive-skew models in social insects. Annu. Rev. Entomol. 46: 347-385. Roig-Alsina A and Michener CD (1993). Studies of phylogeny and classification of long-tonguedbees (Hymenoptera: Apoidea). Univ. Kans.Sci. Bull. 55: 124-162. Schultz T, Engel MS and Prentice M (1999). Resolving conflict between morphological and molecular evidence for origem eusociality in the corbiculate bees (Hymenoptera, Apidae): a hypothesis-testing approach. Univ. Kans. Nat. Hist. Mus. Sepc. Publ. 24: 125-138. Schwarz MP and Woods RE (1994). Order of adult eclosion is a major determinant of reproductive dominance in the allodapine bee Exoneura bicolor. Anim. Behav. 47: 373-378. Schwarz MP, Richards MH and Danforth BN (2007). Changing paradigmasin insect social evolution: Insights from halictine and allodapine bees. Annu. Rev. Entomol. 52: 127-150. Soucy SL, Giray T and Roubik DW (2003). Solitary and group nesting in the orchid bee Euglossa hyacinthina (Hymenoptera, Apidae). Insect. Soc. 50: 248-255.
315
Stubblefield JW and Charnov EL (1986). Some conceptual issues in the origin of eusociality. Heredity 57: 181-187. Tsuji K and Tsuji N (2005). Why is dominance hierarchy age-related in social insects? The relative longevity hypothesis. Behav. Ecol. Sociobiol. 58: 517-526. Young AM (1985). Notes on the nest structure and emergence of Euglossa turbinifex Dressler (Hymenoptera: Apidae) in Costa Rica. J. Kansas Entomol. Soc. 58: 538-542. Zucchi R, Sakagami SF and Camargo JMF (1969). Biological observations on a tropical parasocial bee, Eulaema nigrita, with a review on the biology of Euglossinae (Hymenoptera, Apidae). A comparative study. J. Fac. Sci. Hokkaido Univ. Series IV, Zool. 17:271-380.
316
SI MPSIO 14
BIOGEOGRAFIA DE ABELHAS EM REAS ABERTAS NA AMRICA DO SUL
Coordenador: Fernando Amaral da Silveira
317
Biogeografia de Abelhas de reas Abertas na Amrica do Sul Uma Retrospectiva

Biogeografia de abelhas na Amrica do Sul Fernando A. Silveira Departamento de Zoologia, Instituto de Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Minas Gerais. Caixa postal 486, 30123-970 Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil. Tel: 55-31-3409-2902. Fax: 55-31-3409-2899. E-mail: fernando@icb.ufmg.br
Abstract
Biogeography of bees in open areas of South America a retrospective. South America, normally praised by its exuberant tropical forests, is also rich in dryer environments covered by open vegetation. The largest such domains are the semidesertic areas of southern Argentina and Chile, the Pampas, the Chaco, the Cerrado and the Caatinga. These domains coalesced and were isolated from each other in alternation many times during the geologic history and there is evidence that this alternation was important in defining regional faunistic composition. Interest on the biogeography of bees in South American open areas is recent and was initially expressed by the description of diversity patterns and of the taxonomic composition of their regional faunas. The first phylogeny-based biogeographic analises of bee taxa were unable to reveal any detail on the historic relationships among open-vegetation domains in South America. This was due to the fact that the bees studied (Meliponina) did not occur in temperate regions of the continent and for the lack of resolution in the internal relationships of one recognized endemism area, which included the Chaco-Cerrado-Caatinga dry corridor. However, a phylogenetic analysis of Caenonomada indicated two vicariance events in this dry corridor, separating three endemism areas, each one in the core of one of its component domains. According to this, the Caatinga was first separated from the Cerrado and the Chaco, which separated from each other later. Due to the recent development of phylogenetic studies on some different bee groups inhabiting temperate and/or tropical open areas, it is now possible to make further inferences on the biogeographic history of these domains. Keywords: Bees, Diversity, Faunistic composition, Phylogeny, Vicariance Palavras-chave: Abelhas, Diversidade, Composio faunstica, Filogenia, Vicarincia
Introduo
A biogeografia tem sido tradicionalmente dividida em dois grandes campos que correspondem, tambm, a fases de seu desenvolvimento Biogeografia Descritiva e Biogeografia Histrica. Na primeira, descrevem-se os padres de distribuio dos organismos; na segunda, a evoluo desses padres ao longo da histria geolgica da Terra. Dentro da biogeografia, h, ainda, uma certa disputa entre dois enfoques disciplinares a biogeografia estudada dentro da ecologia, que supe que o conjunto de organismos encontrado em
318
uma dada comunidade fruto meramente das interaes entre os organismos na comunidade, e a biogeografia estudada em conexo com a sistemtica (largamente coincidente com a biogeografia histrica) e que pretende explicar a composio das biotas exclusivamente como fruto da histria geolgica da Terra e de seu impacto sobre a evoluo dos organismos envolvidos. Embora ainda haja um certo preconceito com relao biogeografia descritiva e uma desconfiana mtua entre eclogos e sistematas, todas esses enfoques so importantes, cada qual contribuindo com determinadas pores da informao de que necessitamos para o entendimento dos padres de distribuio geogrfica da biodiversidade terrestre. A Amrica do Sul, normalmente exaltada pela exuberncia de suas florestas tropicais, rica tambm em ambientes mais secos, dominados por vegetao aberta. Ao longo da histria geolgica do continente, essas formaes coalesceram e se isolaram alternadamente inmeras vezes e h evidncias de que isto tenha deixado marcas na composio das faunas dos vrios domnios fitogeogrficos envolvidos. O interesse pela biogeografia das abelhas nestas formaes abertas recente e se expressou, inicialmente, pelo reconhecimento de padres na distribuio da diversidade e na composio taxonmica das faunas regionais. Atualmente, com o desenvolvimento de estudos sobre a filogenia de diferentes grupos de abelhas, tem sido possvel fazer inferncias sobre a histria biogeogrfica desses domnios fitogeogrficos. Nesta breve reviso, apresenta-se uma retrospectiva da evoluo do conhecimento sobre os padres e a histria biogeogrfica dos grupos de abelhas que ocorrem em reas de vegetao aberta na Amrica do Sul, a ttulo de introduo aos demais trabalhos apresentados, neste simpsio, sobre a biogeografia histrica de txons especficos de abelhas neste continente.
Biogeografia descritiva padres biogeogrficos das faunas de abelhas de reas abertas da Amrica do Sul
Um marco inicial para se falar de padres biogeogrficos envolvendo as reas abertas da Amrica do Sul o trabalho de Michener (1979), Biogeography of the Bees. Neste trabalho, Michener sugeriu que houvesse um aumento da diversidade de abelhas do Brasil central em direo ao sul do continente, com o Cerrado abrigando uma fauna menos rica que os campos sulinos e os semidesertos de Argentina e Chile. Ele chamou ateno, ainda, para a riqueza extremamente baixa de espcies da Caatinga, comparada dos outros domnios fitogeogrficos vizinhos e, principalmente, a de outras reas xricas do planeta, especialmente as regies semidesrticas temperadas. Outra questo biogeogrfica interessante tratada por Michener (1979) a disjuno de determinados txons presentes em regies semidesrticas das Amricas do Sul e do Norte e largamente ausentes nas regies msicas intermedirias, tais como espcies do gnero Anthophorula (Silveira , 1995; Gonzlez-Vaquero e Roig-Alsina, 2005). Embora tenha sugerido que as abelhas, no geral, no sejam eficientes na transposio de grandes barreiras geogrficas, as explicaes de Michener (1979) para os padres de distribuio geogrfica privilegiavam francamente a disperso sobre a vicarincia como fator causador de disjunes. Ao longo da dcada de 1990, vrios inventrios das faunas locais nos domnios do Cerrado e da Caatinga vieram a sugerir alguns padres faunsticos para essas regies. Sumrios dos padres encontrados foram publicados por Silveira e Campos (1995) para o cerrado e por Zanella (2000) para a Caatinga. Sobre a fauna de abelhas do cerrado, por exemplo, Silveira e Campos (1995) sugeriram que seria caracterizada pela grande diversidade de txons tais como Centridini, Tapinotaspidini, Tetrapediini e Meliponina e pela diversidade relativamente baixa de Andrenidae e Halictidae. Eles sugeriram, ainda, que o Cerrado teria uma fauna de abelhas muito mais diversificada do que o imaginado mas que esta diversidade seria mascarada pelas densidades populacionais baixas da grande maioria das
319
suas espcies. Sugeriram, tambm, que o nmero de espcies endmicas deste domnio seria muito pequeno e que essas espcies seriam mono ou oligolticas, estando geograficamente confinadas s reas de ocorrncia de suas plantas hospedeiras, que seriam, tambm, endmicas do Cerrado. Em contraste, Zanella (2000) caracterizou a Caatinga como relativamente pobre em espcies de abelhas, pobre nos grupos mais diversificados no cerrado mas com uma diversidade relativamente alta de espcies de Diadasina, Melitoma e Leiopodus. Ao contrrio do que aparentemente ocorre no Cerrado, as espcies endmicas podem chegar a representar cerca de um tero de toda a fauna regional. A importncia de fatores histricos na determinao de padres de distribuio geogrfica foi reconhecida por Silveira e Cure (1993) em um curto estudo sobre a fauna de abelhas de reas de altitude no sudeste brasileiro. Esses autores observaram que uma parte desta fauna era composta por espcies que ocorriam amplamente nas regies subtropicais e temperadas do Brasil e pases limtrofes e que, ao norte do Trpico de Capricrnio, estavam limitadas a macios altitudinais. Eles postularam que essas populaes seriam remanescentes de um perodo dominado por clima mais frio (provavelmente no Pleistoceno) em que estas espcies teriam se dispersado desde o sul do pas at esta regio. Com o aquecimento climtico posterior, elas teriam ficado confinadas s reas mais altas, com clima mais ameno.
Biogeografia histrica reas de endemismo de abelhas e vicarincia de reas abertas da Amrica do Sul
No h dvida de que, para estudar a histria biogeogrfica de uma dada regio, o ideal seria termos em mos as filogenias do maior nmero possvel das linhagens que nela ocorrem. Na falta dessas filogenias, entretanto, h mtodos que nos permitem adiantar hipteses sobre o relacionamento entre reas de endemismo. Um exemplo destes mtodos a anlise de parcimnia de endemismos (PAE), empregada por Azevedo e Silveira (no publicado) para estudar as relaes histricas entre as ilhas de campos de altitude e campos rupestres no centro-leste do Brasil. Neste trabalho, macios acima de 1000 metros de altitude, isolados uns dos outros por reas abaixo de 800 m, foram tratados como txons e as espcies de abelhas endmicas de altitude na regio, tratadas como caracteres. Este estudo levantou interessantes hipteses para o relacionamento entre o Planalto Central (representado pela Chapada dos Veadeiros), a Serra da Canastra (no sudoeste mineiro), os vrios macios da Cadeia do Espinhao, a Serra da Mantiqueira, outros macios menores imersos no domnio da Floresta Atlntica (Serra do Ibitipoca, Serra do Brigadeiro e Serra do Capara) e a regio subtropical-temperada do sul do Brasil e pases vizinhos. Os resultados sugerem uma ligao pretrita entre todas essas reas, com um primeiro grande evento de vicarincia separando duas grandes regies, uma a oeste (compreendendo a Serra da Canastra, a Cadeia do Espinhao e o Planalto Central) e outra a leste (compreendendo as regies subtropicais e temperadas e os macios associados Floresta Atlntica, no sudeste do Brasil). Tanto no ramo ocidental quanto no oriental, os eventos de vicarincia seguintes parecem ter ocorrido de norte para o sul, de forma que, no ramo oriental, por exemplo, a Serra da Mantiqueira teria estado em contato com o sul do continente por mais tempo que os macios mais ao norte, como o Capara e a Serra do Brigadeiro. Embora a regio abaixo do Trpico de Capricrnio no tenha sido dividida em reas de endemismo no estudo de Azevedo e Silveira, a distribuio geogrfica de algumas espcies sugere que suas pores mais a oeste (representadas, por exemplo, pelos enclaves de Cerrado no oeste do estado do Paran) poderiam ter tido associao mais recente com as reas elevadas a oeste (e.g. Planalto Central e Cadeia do Espinhao) do que com aquelas a leste (e.g. Serra da Mantiqueira).
320
Os primeiros estudos de biogeografia histrica baseados em hipteses sobre a filogenia de abelhas neotropicais foram os de Camargo e Moure (1994, 1996), Camargo (1996), Pedro e Camargo (2003) e Camargo e Pedro (2003), envolvendo linhagens de Meliponina. Os grupos estudados por esses autores, entretanto, apresentam distribuio tropical, no ocorrendo nas reas temperadas abertas do continente. Nestes trabalhos, Camargo e colaboradores identificaram cinco grandes reas de endemismo para abelhas na Amrica do Sul. Embora essas reas sejam congruentes com as encontradas para outros grupos animais (e.g. Amorim e Pires, 1996), as relaes entre elas ainda no puderam ser completamente elucidadas. Uma dessas reas de endemismo coincide, em grande parte, com a grande diagonal de reas de vegetao aberta, que inclui os domnios do Chaco, do Cerrado e da Caatinga. Infelizmente, as anlises de Camargo e colaboradores no tiveram resoluo suficiente para tratar das relaes internas deste componente biogeogrfico. Entretanto, estudos posteriores realizados por Zanella (2002) sobre a filogenia de Caenonomada,sugeriram a ocorrncia de dois grandes eventos de vicarincia nesta diagonal de reas abertas. O primeiro deles teria separado a Caatinga do Cerrado e do Chaco e o segundo teria separado estes dois ltimos domnios. A disponibilizao de hipteses robustas para a filogenia de vrios grupos distintos de abelhas, associados total ou parcialmente com as reas de vegetao aberta na Amrica do Sul, nos permite, agora, uma anlise mais cuidadosa das possveis relaes histricas entre essas reas. Nas demais apresentaes deste simpsio, Antnio J. C. Aguiar e Gabriel A. R. Melo falaro sobre a biogeografia de Tapinotaspidini (Apidae, Apinae); Eduardo A. B. Almeida e Fernando A. Silveira apresentaro os resultados de um trabalho sobre a biogeografia de Exomalopsis (Phanomalopsis) (Apidae, Apinae) e Laurence Packer e Eduardo A. B. Almeida apresentaro os resultados de anlise biogeogrfica realizada com base na filogenia de Xeromelissinae (Colletidae).
Referncias
Amorim DS e Pires MRS (1996). Neotropical biogeography and a method for maximum biodiversity estimation. In: Proceedings of the Workshop Methods for the Assessment of Biodivesity in Plants and Animals (Bicudo CEM e Menezes NA, eds.). CNPq, Braslia, 183219. Camargo, JMF (1996). Meliponini neotropicais (Apinae, Apidae, Hymenoptera): biogeografia histrica. Anais do Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto (USP) 2: 107-121. Camargo JMF e Moure JS (1994). Meliponini neotropicais: os gneros Paratrigona Schwarz, 1938 e Aparatrigona Moure, 1951 (Hymenoptera, Apidae). Arq. Zool. (So Paulo) 32: 33109. Camargo JMF e Moure JS (1996). Meliponini neotropicais: o gnero Geotrigona Moure, 1943 (Apinae, Apidae, Hymenoptera), com especial referncia filogenia e biogeografia. Arquivos de Zoologia 33: 95161. Camargo JMF e Pedro SRM (2003). Meliponini neotropicais: o gnero Partamona Schwarz, 1939 (Hymenoptera, Apidae, Apinae) bionomia e biogeografia. Rev. Bras. Entomol. 47: 311372 Gonzlez-Vaquero R e Roig-Alsina A (2005) Revisin de las especies sudamericanas de Anthophorula Cockerell (Hymenoptera, Apidae, Exomalopsini). Rev. Mus. Cienc. Nat., n.s., 7: 67-76. Michener CD (1979). Biogeography of the Bees. Ann. Missouri Bot. Gard. 66: 277-347. Pedro SEM e Camargo JMF (2003). Meliponini neotropicais: O gnero Partamona Schwarz, 1939 (Hymenoptera, Apidae). Rev. bras. Entomol. 47 (suplemento 1): 1-117. Silveira FA (1995). Phylogenetic relationships and classification of the Exomalopsini with a new tribe, Tetratognathini (Hymenoptera: Apoidea). Univ. Kansas Sci. Bull. 55: 425454.
321
Silveira FA e Campos MJO (1995). A melissofauna de Corumbata (SP) e Paraopeba (MG) e uma anlise da biogeografia das abelhas do cerrado brasileiro (Hymenoptera, Apoidea). Rev. bras. Entomol. 39: 371401. Silveira FA e Cure JR (1993). High altitude bee fauna of Southeastern Brazil: Implications for biogeographic patterns (Hymenoptera: Apoidea). Stud. Neotrop. Fauna and Environ. 28: 4755. Zanella, F.C.V. (2000). The bees of the Caatinga (Hymenoptera, Apoidea, Apiformes): a species list and comparative notes regarding their distribution. Apidologie 31: 579-592. Zanella, F. C. V. (2002). Systematics and biogeography of the bee genus Caenonomada Ashmead, 1899 (Hymenoptera: Apidae: Tapinotaspidini). Stud. Neotrop. Fauna and Environ. 37:249-261.
322
Biogoegrafia das reas Abertas da Amrica do Sul, com nfase em Abelhas da Tribo Tapinotaspidini
Biogeografia de Tapinotaspidini
1
Antonio J. C. Aguiar1,2 e Gabriel A. R. Melo1
Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran, Cx. postal 19020, 81531-980, Curitiba, PR, Brasil. 2 Endereo atual: Museu de Zoologia da Universidade de So Paulo, Av. Nazar 481, So Paulo, SP.
Abstract
Biogeography of open areas of South America with emphasis on the Tribe Tapinotaspidini. The open areas of South America involve a diverse range of distinct plant physiognomies, such as the Cerrado, Pampas, Chaco, Llanos and Caatinga. Here we compile biogeographic patterns of species of the bee tribe Tapinotaspidini, as well as phylogenetic studies, to investigate the historic relationships between the open areas of South America. The basal clades in the tribe, represented by the genera Caenonomada, Tapinotaspoides, Tapinotaspis, Chalepogenus, Arhysoceble, Lanthanomelissa, exhibit many endemic species associated to the diagonal of open dry formations (Caatinga, Cerrado and Chaco), while the more derived clades, Trigonopedia, Tropidopedia, Xanthopedia, Lophopedia, Paratetrapedia, occupy mostly forested areas in the Atlantic coast of Brazil and Amazon basin, with elements in Central America. The biogeographic patterns exhibited by the Tapinotaspidini indicate a complex history for the open areas of South America. Among the main areas of endemism, the Chaco behaves as a hybrid component, with a portion more closely related to the Cerrado and another more related to the Caatinga. Future studies should allow for more refined delimitation of areas of endemism within the main regions covered with open formations in South America. Keywords: Bees, Biogeography, Neotropical, Open savanas, Cerrado, Abelhas Palavras chave: Abelhas biogeografia, Neotropical, Savanas abertas, Cerrado, Abelhas
Introduo
As abelhas da tribo Tapinotaspidini representam elementos conspcuos da fauna Neotropical, sendo comumente coletados tanto em reas cobertas por florestas, quanto reas com vegetao aberta. Todos os gneros so coletores de leos florais em diversas famlias de plantas (Cocucci et al., 2002; Aguiar e Melo, em prep.), sendo somente o gnero Tapinotaspoides coletor de secrees de tricomas extra-florais (Melo e Gaglianone, 2005). Os estudos sobre a biogeografia de abelhas da regio Neotropical so ainda incipientes, sendo os mais abrangentes aqueles publicados por Camargo e Moure (1996), Camargo (1996) e Camargo e Pedro (2003), todos focados em clados associados principalmente a florestas midas. Poucos estudos tratam da biogeografia de clados com distribuio centrada nas reas abertas da Amrica do Sul (Silveira e Campos, 1995; Zanella, 2000, 2002; Aguiar e Melo, 2007a,b; Ramos e Melo, 2007).
323
Material e mtodos
O presente estudo envolveu a amostragem dos registros geogrficos de material depositado em diversas colees, trabalhos de campo, revises taxonmicas e reconstrues filogenticas entre e dentro dos gneros da tribo Tapinotaspidini (Aguiar, 2006, em prep.; Aguiar e Melo, 2006, 2007a,b; Melo e Aguiar, 2008). As hipteses filogenticas entre as espcies dos gneros Caenonomada e Tapinotaspoides foram superpostas aos padres de distribuio geogrfica, de modo a inferir as relaes histricas entre as reas de endemismo. Para simplificao, as reas de endemismo so referidas pelo nome do bioma em que esto inseridas.
A tribo Tapinotaspidini representa um grupo cuja diversificao inicial parece ter ocorrido na poro temperada da Amrica do Sul. Segundo as hipteses filogenticas disponveis (Roig-Alsina e Michener 1993), o provvel grupo irmo da tribo Tapinotaspidini seria a tribo Emphorini, que tambm exibe um padro semelhante de diversificao e de associao com reas cobertas por vegetao aberta e sob clima semi-rido. Apesar da filogenia da tribo Tapinotaspidini ainda no estar completamente resolvida (Roig-Alsina, 1997; Aguiar e Melo 2006), hipteses estveis para os relacionamentos entre as espcies dentro da maioria dos gneros esto disponveis (Zanella 2002; Coccuci et al. 2000; Aguiar, 2006, em prep.; Aguiar e Melo, 2006, 2007a,b; Melo e Aguiar, 2008). Os gneros Caenonomada, Tapinotaspoides e Tapinotaspis, que segundo as filogenias disponveis ocupam uma posio mais basal dentro da tribo, tm suas distribuies associadas principalmente diagonal de reas abertas secas (Figuras 1 e 2). Os trs gneros apresentam espcies endmicas do Chaco, Caatinga e Cerrado, exceto por Tapinotaspis que no tem ocorrncia registrada no Cerrado. Tapinotaspoides difere dos outros gneros com distribuio nas reas abertas da Amrica do Sul por possuir uma espcie endmica nas savanas dos Llanos e florestas secas do norte da Amrica do Sul (Melo e Aguiar, 2008). A posio desta espcie como grupo irmo das demais do gnero (Aguiar e Melo, em prep.) sugere um antigo intercmbio entre as reas abertas da poro sudeste da Amrica do Sul com o Llano e reas secas da Colmbia e Venezuela (Figura 1).
324
Figura 1. Filogenia para as espcies do gnero Tapinotaspoides superposta s respectivas reas de ocorrncia.
Figura 2. Filogenia para as espcies do gnero Caenonomada superposta s respectivas reas de ocorrncia. O padro de distribuio de Chalepogenus mais complexo, com um grande nmero de espcies com distribuio andina (Coccucci et al., 2000), embora as linhagens basais (parte delas ainda indita; Melo e Aguiar, em prep.) estejam associadas diagonal de reas secas, incluindo os Pampas. Apesar do gnero Monoeca apresentar posio incerta junto aos grupos basais da tribo, ele possui basicamente dois clados, um relacionado com as reas florestadas do sudeste brasileiro (Melo in Rozen et al., 2005) e outro principalmente com reas abertas do Brasil central. A presena de espcies endmicas no Mxico e Amrica Central e ausncia na bacia amaznica, incluindo sua poro sudoeste, sugere a ocorrncia de conexes pretritas entre o sudeste com o noroeste da Amrica do Sul e Amrica Central, semelhante ao observado para outros grupos de abelhas, incluindo Tapinotaspoides. O gnero Lanthanomelissa est distribudo predominantemente sobre as reas de campo e margens da floresta ombrfila de araucria do sul do Brasil. Arhysoceble apresenta uma condio especial, com cinco das espcies descritas ocupando a diagonal de reas abertas, sendo o Cerrado especialmente diversificado, com trs espcies. Xanthopedia apresenta uma condio intermediria na ocupao de ambientes florestais e abertos, com dois clados, um deles com suas espcies distribudas nas reas abertas e outro nas reas florestadas. Os gneros Trigonopedia, Paratetrapedia, Lophopedia e Tropidopedia so predominantemente de reas florestadas, com algumas poucas espcies dos trs ltimos gneros no Cerrado e no havendo nenhum endemismo em reas xricas ou frias como o Chaco e a Caatinga. As filogenias disponveis para os gneros sugerem que a ocorrncia de endemismos no Cerrado representa uma condio derivada na histria desses clados (Aguiar e Melo, 2007b).
325
A distribuio geogrfica dos gneros de Tapinotaspidini pode ser explicada, em parte, tambm pela relao com as famlias de plantas fornecedoras de leos, onde Malpighiaceae representa a principal fonte nas reas de floresta e no Cerrado, enquanto as demais famlias fornecedoras de leo (Krameriaceae, Scrophulariaceae, Solanaceae, Iridaceae) esto presentes somente nas reas abertas secas, como Cerrado, Chaco, Pampa e Caatinga. As espcies fornecedoras de leo da famlia Orchidaceae tambm esto relacionadas com os grupos florestados, porm com menor importncia que Malpighiaceae, em funo da sua menor abundncia no meio. As anlises conduzidas com os padres exibidos por Tapinotaspidini sugerem que as reas abertas da Amrica do Sul apresentam uma histria complexa, com subreas diferentemente relacionadas entre si. Dentre as principais reas de endemismo, sugere-se que o Chaco seja um componente hbrido, contendo um Chaco seco mais estreitamente relacionado com a Caatinga e um Chaco mido diretamente relacionado com o Cerrado, e com eventos de disperso sobre o Pampa. Estudos adicionais envolvendo a filogenia da tribo devero permitir um refinamento nos padres de distribuio e uma compreenso mais detalhada da evoluo e biogeografia da fauna de abelhas da Amrica do Sul, principalmente aquela associada a reas abertas. Como um passo adicional nesta direo, pretende-se buscar reconhecer subreas de endemismo no Cerrado e na Caatinga.
Agradecimentos
O primeiro autor agradece ao CNPq pela bolsa de ps-doutorado; ao Museum of Comparative Zoology (Harvard) pela bolsa de estudos que possibilitou visitar colees entomolgicas nos Estados Unidos.
Referncias
Aguiar AJC (2006). Filogenia e reviso taxonmica do gnero Paratetrapedia Moure (Apidae, Tapinotaspidini). Tese de doutorado. Universidade Federal do Paran. Aguiar AJC e Melo GAR (2006). Filogenia e classificao da tribo Tapinotaspidini (Hymenoptera, Apidae). In: Anais do VII Encontro sobre Abelhas, CD-ROM (Santana WC, Lobo CH e Hartfelder KH, eds.). FFCLRP-USP, FMRP-USP, Ribeiro Preto, 160164. Aguiar AJC e Melo GAR (2007a). Taxonomic revision, phylogenetic analysis, and biogeography of the bee genus Tropidopedia (Hymenoptera, Apidae, Tapinotaspidini). Zool. J. Linn. Soc. 151: 511554. Aguiar AJC e Melo GAR (2007b). Systematics and biogeography of the bee genus Paratetrapedia s.l. (Hymenoptera, Apidae, Tapinotaspidini): cerrado as a composite area. Darwiniana 45(Supl.): 5860. Camargo, JMF (1996). Meliponini neotropicais (Apinae, Apidae, Hymenoptera): biogeografia histrica. In: Anais do II Encontro sobre Abelhas (Garfalo CA et al., eds.). USP, Ribeiro Preto, 107121. Camargo, JMF e Moure JS (1996). Meliponini neotropicais: o gnero Geotrigona Moure, 1943 (Apinae, Apidae, Hymenoptera), com especial referncia filogenia e biogegrafia. Arq. Zool. 33: 95161. Camargo JMF e Pedro SRM (2003). Meliponini neotropicais: o gnero Partamona Schwarz, 1939 (Hymenoptera, Apidae, Apinae) - bionomia e biogeoografia. Rev. Bras. Entomol. 47: 311372. Cocucci AA, Sersic A e Roig-Alsina A (2000). Oil-collecting structures in Tapinotaspidini: their diversity, function and probable origin (Hymenoptera: Apidae). Mitt. Mnch. Entomol. Ges. 90: 5174.
326
Melo GAR e Gaglianone MC (2005). Females of Tapinotaspoides, a genus in the oil-collecting bee tribe Tapinotaspidini, collect secretions from non-floral trichomes (Hymenoptera, Apidae). Rev. Bras. Entomol. 49: 167168. Melo GAR & Aguiar AJC (2008). New species of Tapinotaspoides (Hymenoptera, Apidae, Tapinotaspidini). Zootaxa 1749: 5361. Ramos KS e Melo GAR (2007). Phylogeny and biogeography of the bee genus Parapsaenythia (Apidae, Protadrenini), in the Chacoan subregion of South America. Darwiniana 45(Supl.): 117119. Roig-Alsina A (1997). A generic study of the bees of the tribe Tapinotaspidini, with notes on the evolution of their oil-collecting structures (Hymenoptera, Apidae). Mitt. Mnch. Entomol. Ges. 87: 321. Rozen JG, Jr., Melo GAR, Aguiar AJC e Alves-dos-Santos I (2006). Nesting biologies and immature stages of the tapinotaspidine bee genera Monoeca and Lanthanomelissa and of their osirine cleptoparasites Protosiris and Parepeolus (Hymenoptera: Apidae: Apinae). Am. Mus. Novit. 3501: 160. Silveira FA. e Campos MJO (1995). A melissofauna de Corumbata (SP) e Paraopeba (MG) e uma anlise da biogeografia das abelhas do cerrado brasileiro (Hymenoptera, Apoidea). Rev. bras. Entomol. 39: 371401. Zanella FCV (2000). The bees of the Caatinga (Hymenoptera, Apoidea, Apiformes): a species list and comparative notes regarding their distribution. Apidologie 31: 579592. Zanella FCV (2002). Systematics and biogeography of the bee genus Caenonomada Ashmead, 1899 (Hymenoptera: Apidae: Tapinotaspidini). Stud. Neotrop. Fauna Environ. 37: 249261.
327
Biogeografia Histrica de Exomalopsis (Phanomalopsis) Michener & Moure, 1957 (Apidae: Exomalopsini)
Biogeografia de Exomalopsis (Phanomalopsis) Eduardo A. B. Almeida1,2 e Fernando A. Silveira1,3 1 Departamento de Zoologia, Instituto de Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Minas Gerais. Cx. Postal 486. Belo Horizonte, MG. 30.123-970. Brasil 2 Endereo atual: Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran. Cx. Postal 19020. Curitiba, PR. 81.531-980. Brasil. E-mail: eabalmeida@gmail.com 3 E-mail: fernando@icb.ufmg.br
Abstract
Historical Biogeography of Exomalopsis (Phanomalopsis) Michener & Moure, 1957 (Apidae: Exomalopsini). Species of Exomalopsis (Phanomalopsis) are distributed from the Argentinean Patagonia to Texas (USA), with maximum diversity in semidesertic temperate areas in South America. The historical biogeography of this bee subgenus is investigated through a cladistic biogeographic approach, using the Brooks Parsimony Analysis (BPA). Areas of endemism for the species of E. (Phanomalopsis) were delimited by contrasting their distribution patterns and areas defined for other insect taxa, and seeking for congruent patterns. Morrones proposal for subdivision of Latin America into biogeographic regions and provinces proved to be a good description of the distributional pattern studied here, because they too were highly congruent. According to the results of the BPA, two ancestral events of vicariance are important to understand the history of E. (Phanomalopsis): the separation of two clades, one in southern and one in northern South America, and the separation of an eastern and a western lineage of species in southern South America. Keywords: Biogeography, Neotropical Region, Bee, Apoidea Palavras chave: Biogeografia, Regio Neotropical, Abelha, Apoidea
Introduo
Exomalopsini uma tribo de abelhas restrita s Amricas, com diversidade mxima em reas temperadas desrticas e semidesrticas. As relaes filogenticas de Exomalopsini foram estudadas por Silveira (1995), resultando em uma classificao revisada para os gneros de Exomalopsini e para os subgneros de Exomalopsis. Conforme a proposta de Silveira, Exomalopsis passou a ser dividido em quatro subgneros: Exomalopsis s.str., E. (Diomalopsis), E. (Phanomalopsis) e E. (Stilbomalopsis). exceo de E. (Stilbomalopsis), todos os subgneros so endmicos ou mais diversificados na Amrica do Sul. Silveira (1995) demonstrou que E. (Phanomalopsis), com a remoo de um grupo de espcies para E. (Stilbomalopsis), um txon monofiltico. Silveira e Almeida (aceito) realizaram a reviso
328
taxonmica de E. (Phanomalopsis) e propuseram uma hiptese filogentica para suas espcies. De acordo com esse estudo, E. (Phanomalopsis) inclui 12 espcies, a maioria delas com distribuio nas reas temperadas e sub-tropicais da Amrica do Sul, a leste dos Andes. De acordo com a anlise cladstica, dois grandes grupos de espcies podem ser reconhecidos no subgnero: o grupo de E. jenseni Friese e o grupo de E. aureosericea Friese. E. (Phanomalopsis) solitaria Brthes seria o grupo irmo dessas duas linhagens (Silveira e Almeida, aceito). Com relao ao tipo de ambiente em que as espcies de E. (Phanomalopsis) ocorrem, as seguintes informaes so evidentes na anlise: (1) no grupo auresosericea, o clado composto por E. aureosericea e E. atlantica Silveira, que ocorrem no domnio da Floresta Atlntica, o nico que ocorre em ambientes florestais; (2) o clado irmo destas espcies formado por E. trifasciata Brthes e uma espcie nova, e se associa a biomas subtropicais e reas de cerrado em altitudes mais altas; (3) E. solitria e o grupo jenseni encontram-se distribudos principalmente em ambientes semidesrticos subtropicais ou temperados. Neste trabalho, realizamos uma anlise de biogeografia histrica das espcies de Exomalopsis (Phanomalopsis).
Material e Mtodos
Um dos maiores desafios no estudo da biogeografia histrica reside na delimitao de reas de endemismo informativas para o grupo taxonmico a ser investigado. Apesar de ser negligenciado por vrios autores, o tpico de grande importncia, pois dele depende a definio das unidades de cuja histria os mtodos analticos de biogeografia trataro. No existe consenso sobre um mtodo de delimitao de reas de endemismo que satisfaa as caractersticas de quaisquer grupos de organismos. Com isso, a resposta dada por biogegrafos tem sido bastante variada, desde a utilizao de reas definidas exclusivamente pela distribuio dos organismos (PAE, panbiogeografia de traos, etc.), o uso de reas propostas para outros grupos previamente estudados (e.g. provncias biogeogrficas propostas por Morrone, 2001, 2006), ou de reas definidas com base em padres globais de biodiversidade (e.g. ecorregies sensu Olson e Dinerstein, 2002). Para o estudo das espcies de E. (Phanomalopsis) adotamos uma abordagem hbrida, que incorporasse a distribuio conhecida destas abelhas e que levasse em considerao os limites de reas ou regies de importncia demonstrada para a biogeografia de outros grupos de insetos. Os critrios propostos por Axelius (1991) foram inicialmente adotados para determinar as menores unidades de rea potencialmente importantes para as anlises histricas (reas formadas pela sobreposio de duas espcies foram tratadas como reas separadas das reas no sobrepostas). Morrone (2001, 2006) detalhou uma diviso da Amrica Latina em provncias e regies biogeogrficas, resultantes da congruncia de estudos biogeogrficos de diversos grupos de insetos. O padro encontrado para as reas de distribuio das espcies de E. (Phanomalopsis) foi comparado s regies propostas por Morrone (2001, 2006) e ajustado pela subdiviso ou fuso dessas regies. A rvore filogentica de consenso encontrada por Silveira e Almeida (aceito) foi adotada para os procedimentos de biogeografia cladstica realizados aps a delimitao das reas. Empregamos a Anlise de Parcimnia de Brooks (Brooks Parsimony AnalysisBPA), para as investigar o padro de biogeografia histrica de E. (Phanomalopsis). Aps a sobreposio dos dados de distribuio das espcies e as relaes de parentesco entre elas (cladograma de txons e reas), uma matriz de dados foi confeccionada para a anlise de BPA primria e outra, para a BPA secundria (Brooks, 1981; Brooks et al., 2001). As anlises cladsticas foram realizadas com o PAUP* (Swofford, 2002). As distribuies de vrias espcies apresentam redundncias, o que traz problemas anlise de BPA primria, que ainda
329
mais dificultada pela presena de espcies amplamente distribudas, como E. trifasciata ou E. solitaria. A BPA secundria busca eliminar os artefatos causados por distribuies amplas e redundncia de reas, permitindo detectar os casos em que a presena atual de txons em reas se deve histria de vicarincia de seus ancestrais, dos casos em que distribuio atual dos organismos resultado de eventos secundrios de, por exemplo, disperso (Brooks ,1990; Brooks et al., 2001).
Resultados
O sistema de diviso da Amrica Latina em provncias, subregies e regies, conforme proposta de Morrone (2001, 2006) mostrou-se grandemente congruente com os padres de distribuio verificados para as espcies de E. (Phanomalopsis). As reas de endemismo propostas para as espcies estudadas, aplicando-se os princpios de Axelius (1991), foram congruentes s provncias biogeogrficas ou consistiam de subdivises das mesmas. As anlises de BPA indicaram uma relao de grupo irmo entre as reas que compem a Subregio Chaquenha (Morrone, 2001, 2006), com exceo do Cerrado, e as reas da Subregio Paranaense mais o Cerrado. As reas localizadas ao norte da Amrica do Sul, Amrica Central e sul da Amrica do Norte foram posicionadas na base do cladograma de reas, como grupo-irmo das demais. Esses resultados indicam dois eventos de vicarincia importantes para compreender a histria das linhagens ancestrais de E. (Phanomalopsis). O primeiro teria ocorrido entre grupos do norte e do sul da Amrica do Sul e o segundo teria levado formao de uma linhagem ocidental e outra oriental dos ancestrais distribudos no sul da Amrica do Sul.
Discusso
Um grande nmero de estudos biogeogrficos j foi realizado com grupos presentes nas Regies Neotemperada (e.g. Morrone, 1993) e Neotropical (e.g. Amorim e Pires, 1996 e referncias citadas nesse artigo), inclusive os realizados por Camargo e colaboradores para abelhas (Apidae, Meliponina) (Camargo & Moure, 1994, 1996; Camargo, 1996; Camargo & Pedro, 2003). So mais raros, contudo, os trabalhos que tratem de grupos com distribuio similar de E. (Phanomalopsis). Isso dificulta a comparao dos padres encontrados neste trabalho e padres mais gerais de relaes entre as reas de endemismo onde as espcies de E. (Phanomalopsis) se distribuem. A comparao de hipteses biogeogrficas diferentes permitir, quando isso for possvel, buscar indicaes de eventos de vicarincia comuns, o que aumenta a confiabilidade das hipteses biogeogrficas. Por outro lado, foi possvel verificar grande congruncia entre os padres de distribuio das espcies de E. (Phanomalopsis) e das reas generalizadas resultantes do estudo de muitos txons (Morrone, 2001, 2006). Uma exceo a isso foi a indicao de proximidade entre Cerrado e reas da Subregio Paranaense, j que, de acordo com Morrone, o Cerrado deveria se mostrar mais proximamente relacionado s demais reas da Subregio Chaquenha. Cabe ressaltar, contudo, que a espcie de E. (Phanomalopsis) com ocorrncia no cerrado e em reas do sul do Brasil segue o padro descrito por Silveira e Cure (1993) para vrias espcies de abelhas. Espcies com distribuio em grande parte da Regio Sul do Brasil e, em alguns casos, de pases fronteirios, no so encontradas em reas baixas da Regio Sudeste, mas podem se distribuir, disjuntamente, em elevaes acima de 1000 m em Minas Gerais e no Planalto Central Brasileiro. A presena desta espcie exclusivamente em reas elevadas indicativa, por si s, de relao mais prxima Subregio Paranaense que com as reas da Subregio Chaquenha, apesar de sua presena no interior do domnio do Cerrado. interessante que o sistema de regionalizao biogeogrfica proposto por Morrone (2001, 2006) permite comparaes
330
de congruncia com distribuio de txons, como com resultados de uma anlise de biogeografia cladstica, devido natureza hierrquica desse sistema. Vanzolini (1974) descreveu como tpica a fauna de ambientes de vegetao aberta da grande diagonal da Amrica do Sul, que vai do noroeste argentino ao Maranho e engloba os biomas Caatinga, Cerrado e Chaco. No caso de E. (Phanomalopsis), as espcies se distribuem em reas abertas tambm, mas no ocorrem na Caatinga e, no Cerrado, apenas por uma espcie restrita a reas altas, como discutido acima. Ao invs da diagonal de reas de vegetao aberta a nordeste do Chaco, dois eixos geogrficos partindo do Chaco descrevem a distribuio das espcies de E. (Phanomalopsis). O primeiro eixo, a norte, inclui as espcies distribudas do norte da Amrica do Sul at a Amrica do Norte. O segundo eixo passa pela Provncia do Pampa e compreende as provncias da Subregio Paranaense e estende-se at o Planalto Central Brasileiro. A diferenciao dos grupos de espcies distribudos no Chaco e reas adjacentes, e nesses dois eixos pode ter ocorrido em resposta a eventos ancestrais de vicarincia, conforme os resultados das anlises de biogeografia histrica. Hipteses referentes s reas ocupadas pelo ancestral de E. (Phanomalopsis) dependero de uma compreenso melhor das relaes filogenticas entre este grupo e os demais subgneros de Exomalopsis.
Agradecimentos
Kelli Ramos, ao Gabriel Melo e ao Antonio Aguiar por discusses sobre biogeografia da Regio Neotropical. Ao CNPq pela bolsa de Ps-Doutorado Jnior concedida a E.A.B. Almeida (Proc. 150626/2007-0).
Referncias
Amorim DS e Pires MRS (1996). Neotropical biogeography and a method for maximum biodiversity estimation. In: Proceedings of the Workshop Methods for the Assessment of Biodivesity in Plants and Animals (Bicudo CEM e Menezes NA, eds.). CNPq, Braslia, 183219. Axelius B (1991). Areas of distribution and areas of endemism. Cladistics 7: 197199. Brooks DR (1990). Parsimony analysis in historical biogeography and coevolution: methodological and theoretical update. Syst. Zool. 39: 1430. Brooks DR, van Veller MGP e McLennan DA (2001). How to do BPA, really. J. Biogeogr. 28: 345358. Camargo, JMF (1996). Meliponini neotropicais (Apinae, Apidae, Hymenoptera): biogeografia histrica. Anais do Encontro sobre Abelhas de Ribeiro Preto (USP) 2: 107-121. Camargo JMF e Moure JS (1994). Meliponini neotropicais: os gneros Paratrigona Schwarz, 1938 e Aparatrigona Moure, 1951 (Hymenoptera, Apidae). Arq. Zool. (So Paulo) 32: 33109. Camargo JMF e Moure JS (1996). Meliponini neotropicais: o gnero Geotrigona Moure, 1943 (Apinae, Apidae, Hymenoptera), com especial referncia filogenia e biogeografia. Arquivos de Zoologia 33: 95161. Camargo JMF e Pedro SRM (2003). Meliponini neotropicais: o gnero Partamona Schwarz, 1939 (Hymenoptera, Apidae, Apinae) bionomia e biogeografia. Rev. Bras. Entomol. 47: 311372 Morrone, JJ (1993). Cladistic and biogeographic analyses of the weevil genus Listroderes Schoenherr (Coleoptera: Curculionidae). Cladistics 9: 397411. Morrone JJ (2001). Biogeografa de Amrica Latina y el Caribe. Manuales y Tesis SEA (No. 3), Zaragoza.
331
Morrone JJ (2006). Biogeographic areas and transition zones of latin america and the caribbean islands based on panbiogeographic and cladistic analyses of the entomofauna. Ann. Rev. Entomol. 51: 467494. Silveira FA (1995). Phylogenetic relationships and classification of the Exomalopsini with a new tribe, Tetratognathini (Hymenoptera: Apoidea). Univ. Kansas Sci. Bull. 55: 425454. Olson DM e Dinerstein E (2002). The Global 200: Priority ecoregions for global conservation. Ann. Missouri Bot. Gard. 89: 199224. Silveira FA e Almeida EAB (aceito). Revision of the species of the subgenera of Exomalopsis Spinola, 1853 ocurring in South America. IIPhanomalopsis Michener & Moure, 1957 (Hymenoptera, Apidae). Lundiana (submetido em 04/2007). Silveira FA e Cure JR (1993). High altitude bee fauna of Southeastern Brazil: Implications for biogeographic patterns (Hymenoptera: Apoidea). Stud. Neotrop. Fauna and Environ. 28: 4755. Swofford DL (2002). PAUP*. Phylogenetic Analysis Using Parsimony (*and Other Methods), v4.0b10. Sinauer Associates, Sunderland. Vanzolini PE (1974). Ecological and geographical distribution of lizards in Pernambuco, northeastern Brazil (Sauria). Pap. Avulsos Zool. (So Paulo) 28: 6190.
332
Biogeography of the Xeromelissinae (Hymenoptera: Colletidae)

Biogeography of the Xeromelissinae Laurence Packer1 e Eduardo A. B. Almeida2 1 Department of Biology, York University, 4700 Keele St. Toronto, ON, M3J 1P3, Canada 2 Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran. Cx. Postal 19020. Curitiba, PR. 81.531-980. Brasil. E-mail: eabalmeida@gmail.com
Abstract
We present the results of a Brooks Parsimony Analysis and Dispersal-Vicariance Analysis of the historical biogeography of the bee genus Xeromelissa based upon a preliminary phylogenetic analysis of morphological data. We perform more cursory investigations of the biogeography of other groups within the subfamily that have yet to receive phylogenetic analysis. Keywords: Bees, Brooks parsimony analysis, Dispersal-vicariance analysis, Neotropical, Phylogeny Introduction The Xeromelissinae is a subfamily of the bee family Colletidae. It is largely restricted to South America, with a few species reaching Central America and Mexico (Ascher et al., 2008; Michener, 2007). They are predominantly small bees and most species nest in pithy stems, although some are known to nest in loose sand (Packer, 2006). There are 122 described species in the subfamily (Ascher et al., 2008), with at least an additional 65 species awaiting description. The subfamily is divided into 4 genera: Chilicola, Geodiscelis, Xenochilicola and Xeromelissa. Based upon morphological data, the phylogenetic relationships among the genera are: Chili cola[Xenochilicola[Geodiscelis+Xeromelissa]] (Packer, 2008). However, molecular and combined morphological and molecular data (albeit with a different sample of taxa), suggest the relationship: [[Xenochilicola+Chilicola][Geodiscelis+Xeromelissa]] (Almeida et al., 2008). Two of the genera are small: Geodiscelis has two described species (Packer, 2005), with one undescribed species known and Xenochilicola has three described species (Genaro and Packer, 2005) with another two undescribed. Xeromelissa, including the recently subsumed Chilimelissa, is known from 21 described species with at least another 19 awaiting description (Packer, unpublished data). This genus is known for the remarkable modifications of the mouthparts and extreme development of secondary sexual characteristics of males in some species. The remaining genus, Chilicola, is by far the largest with 96 described species (Ascher et al., 2008) and approximately 50 undescribed. It is the only xeromelissine genus that has been divided into subgenera, of which there are 15, the phylogenetic interrelationships among which were studied by Packer (2008). This genus is also known for elaborate secondary sexual characteristics in the males in some subgenera.
333
Materials and Methods

Phylogenetic analyses are available for the subfamily at the generic level (Packer, 2008; Almeida et al., 2008), for subgenera of Chilicola (Packer, 2008) and for species of the subgenera Chilicola s. str. (Gibbs and Packer, 2006), Chilioediscelis (Willis and Packer, 2007) and Oroediscelis (Michener, 2002). A preliminary phylogenetic analysis of the genus Xeromelissa, including the 19 undescribed species, is also available (Packer L, unpublished results) and this was used for biogeographic analyses of its species. For both the more cursory and the detailed analyses, we apply the known geographic distributions of taxa to the biogeographic regions and provinces as outlined by Morrone (2006). Two analytical methods were used to examine the historical biogeogeography of Xeromelissa: primary Brooks Parsimony Analysis (BPA) (Brooks, 1990; Brooks et al., 2001) and Dispersal-Vicariance analysis: (DIVA) (Ronquist, 1996, 1997). For these analyses, we used as input information the phylogenetic and distributional information encoded on the taxon-area cladogram. DIVA allows reconstruction of ancestral distributions, maximizing vicariant events and minimizing dispersal and extinction events, but unlike pattern based methods of cladistic biogeography (e.g. BPA), it allows nonhierarchical area relationships (Ronquist, 1997). To reconstruct the ancestral distribution of clades of Xeromelissa, we used DIVA 1.1 (Ronquist, 1996). We expect that the application of multiple analytical approaches may provide evidence of ancestral events of vicariance responsible for present-day distribution of the lineages of Xeromelissa. Because most subgenera of Chilicola are both moderately widespread and have yet to receive phylogenetic treatment, we provide only superficial comments on the historical biogeography of these bees.
Results
The Xeromelissinae are known from all of Morrones biogeographic regions but by far most species are found in the South American transition zone and the Andean region; ie the western and southern portions of the continent (Table 1). This is not surprising for a group whose closest relatives are primarily Gondwanan (Almeida, 2007). Only a few subgenera of Chilicola are found outside of these two regions. The humid parts of the Neotropical region are inhabited by species in the subgenera Hylaeosoma, Pseudiscelis, Prosopoides and Oediscelisca and all except perhaps Pseudiscelis seem more diverse in this region than further west or further south. The more northern Nearctic Region and Mexican Transition Zone are inhabited only by some species of Anoediscelis and Hylaeosoma. At a finer scale, the high altitude Puna Biogeographical Province also has large numbers of Anoediscelis and Hylaeosoma species and the subgenus Oroediscelis seems restricted to this region and has radiated there to comprise at least 17 species. Three subgenera are primarily restricted to the Andean region (Chilicola s. str., Chilioediscelis, Toroediscelis) with several species being found in both southern Argentina (Chubut and/or Santa Cruz) and Maule biogeographic provinces. Mapping of geography onto the phylogeny for the first two of these subgenera suggest additional vicariance or dispersal events between these two biogeographic provinces. One subgenus (Heteroediscelis) is endemic to Chile, extending from Atacama to Maule provinces, while three subgenera are restricted to Argentina. Two (Unicarinicola and Obesicola) are found from Central Patagonia to the Prepuna and the other, monospecific subgenus, Capitatiscopa is known only from the Prepuna.
334
A preliminary phylogeny for species of the genus Xeromelissa is provided in figure 1, based upon 96 morphological characters. It resulted from 2 rounds of successive approximations character weighting starting from 13 equally most parsimonious trees with a length of 557, CI of 49 and RI of 74. The biogeographic provinces from which the species are known are listed in the figure legend. Most outgroup and almost half of the species of Xeromelissa are known only, or primarily, from the Atacama biogeographic province. Brooks Parsimony Analysis and Dispersal-Vicariance Analysis indicated the biogeographic
Figure 1. Most parsimonious tree resulting from successive approximations character weighting as explained in the text. The biogeographic provinces are shown by numbers after the species name and are as follows: 1-Coastal Peruvian Desert, 2-Puna, 3-Atacama, 4-Prepuna, 6-Coquimbo, 7-Santiago, 8-Maule, 9-Central Patagonia.
The genera Xenochilicola and Geodiscelis are found primarily in the South American transitional zone and as these are the genera most suitable as outgroups for Xeromelissa, it seems probable that a transitional zone biogeographic origin for the latter genus can be posited.
335
proximity of provinces in central and southern Chile (Santiago, Coquimbo, Maule, and Patagonia, all comprised in the Andean Region sensu Morrone, 2006). These provinces were separated from the northern biogeographical provinces (Atacama, Coastal Peruvian Desert, Puna, and Prepuna, comprised in the South American transition zone sensu Morrone, 2006) by a series of vicariance events that occurred prior to the separation of the provinces of the Andean Region.
Discussion
The results of the phylogenetic analysis and biogeographic mapping, suggest an Atacamanian origin for the genus Xeromelissa. Almost half of the known species occur in this region. One major clade of the genus is restricted to the eastern side of the Chilean/Argentinean border primarily in the Puna and Prepuna biogeographical provinces. This clade contains 10 species, only one of which, the Central Patagonian X. irwini, has been described. As this is a comparatively deep divergence within the phylogeny, it is possible that its origin represents a vicariance event coinciding with the rapid uplift of the Andes 10-7 million years ago (Garzione et al., 2006). In addition to this group of species, three other Xeromelissa are known from Argentina: X. australis (Toro and Moldenke) and an undescribed species related to it and a single specimen that is indistinguishable from X. pedroi. These are undoubtedly more recent events and may be indicative of dispersals. Another major clade occurs outside but to the south of the Atacama biogeographical province. This is the clade encompassing X. machi and X. farellones and it is found primarily in the Santiago and Maule biogeographic provinces. Other than these two major groupings, there are few species that occur outside of the Atacama biogeographic province or the adjacent Coquimbo province to its south. One undescribed species related to X. nortina is found near Santiago, and three species are found in Southern portions of the Coastal Peruvian Desert, though two of them are likely on the margins of the Atacama biogeographic province. Among the Xeromelissinae, the only species (other than X. pedroi noted above) that are found on both sides of the Andean divide are southern (i.e. Patagonian) species. These include C. hahni, lonco, michelbacheri, vernalis (all in subgenus Oediscelis), C. (Chilicola s.str.) aisenensis and C. (Chilioediscelis) mirzamaleae. Finding species on either side of the national border between Chile and Argentina is not so surprising this far south as the Andes are much lower than they are further north. Southern South America had a complex history of vicariance in the Cenozoic because of a number of marine introgressions (Donato et al. 2005). The subdivision of a currently continuous area, such as Chile, into a number of isolated patches of land has been hypothesized to be responsible for the concordant biogeographic patterns found in a number of studies in Chile (Soares and Carvalho, 2005 and references therein). This also helps explaining why it is possible to propose a regionalization of southern South America that is highly congruent for a number of groups of insects (Morrone, 2006). Additional complexities in the biogeography of the Atacama desert are not as well accounted for in Morrones classification of biogeographic regions of Latin America. In particular, the rapid switch from winter to summer rainfall as one moves northwards in the Atacama. For example, at Caspana (220S, 3260m), east of Calama, approximately 90% of the 73 millimetres of mean annual rainfall occurs in the months of January to March whereas at Potrerillos (26.50S, 2850m), only 200km south, only 10% of the annual rainfall occurs in these months with almost all the rest falling between June and September (Betancourt et al., 2000). Several pairs of related species have one species within the winter rain and one within the summer rainfall parts of the Atacama: X. sielfeldi+ X.nortina, X. nolanai+X.sp 11, X. xanthorhina+X. wilmattae (in each case the first named member of a pair is the more southern).
336
Two additional species are found in areas of both winter and summer rainfall X. luisa and X. rozeni. It would be interesting to perform molecular taxonomic studies on these two species. The Atacama desert is the oldest in the world (Hartley et al., 2005) having been arid for approximately 150 million years, i.e. since before the origin of bees. This clearly has given the region time for bee diversification in an arid environment. However, the hyperaridity of the Atacama began only in the mid Miocene (Latorre et al., 2003). Obtaining some estimates of the relative ages of xeromelissine lineages, as for example has been done for Halictine bees (Brady et al., 2006) could prove very illuminating for the biogeographic history of these bees that seem to have diversified in the worlds oldest and driest desert.
References
Almeida EAB (2007). Systematics and Biogeography of Colletidae (Hymenoptera: Apoidea), PhD Dissertation, Cornell University, Ithaca. Almeida EAB, Packer L and Danforth BN (2008). Phylogeny of the Xeromelissinae (Hymenoptera: Colletidae) based upon morphology and molecules. Apidologie 39: 75-85. Ascher, J. S. et al. (2008). Apoidea species guide. http://www.discoverlife.org/mp/20q?guide=Apoidea_ species Betancourt JL, Latorre C, Reich JA, Rylander KA and Quade J. (2000). A 2000-yr record of monsoonal precipitation from northern Chiles Atacama Desert. Science 289: 1542-1546. Brady SG, Sipes S, Pearson A, Danforth BN. (2006). Recent and simultaneous origins of eusociality in halictid bees. Proc. Roy. Soc. Biol. Sci. 273: 1643-1649. Donato M, Posadas P, Miranda-Esquivel DR, Jaureguizar EO and Cladera G (2003). Historical biogeography of the Andean region: evidence from Listroderina (Coleoptera: Curculionidae: Rhytirrhinini) in the context of the South American geobiotic scenario. Biol. J. Linn. Soc. 80: 339-352. Garzione CN, Molnar P, Libarkin JC, MacFadden BJ (2006). Rapid late Miocene rise of the Bolivian Altiplano: evidence for removal of mantle lithosphere. Earth Planet. Sci. Lett. 241: 543-556. Genaro JA, Packer L (2005). A revision of the genus Xenochilicola (Hymenoptera: Apoidea, Colletidae), with the description of a new species. Zootaxa 1054: 1-14. Gibbs J, Packer L (2006). Revision and phylogenetic analysis of Chilicola sensu stricto (Hymenoptera: Colletiae), with the description of a new species. Zootaxa 1355: 1-37. Hartley AJ, Chong G, Houston J and Mather AE (2005). 150 million years of climatic stability: evidence from the Atacama Desert, northern Chile. J. Geol. Soc. 162: 421-424. Latorre C, Betancourt JL, Rylander KA and Quade J. (2002). Vegetation invasions into absolute desert: a 45000 yr rodent midden record from the Calama-Salar de Atacama basins, northern Chile (lat 22o -24oS). Geol. Soc. Amer. Bull. 114: 349-366. Michener CD (2002). The bee genus Chilicola in the tropical Andes, with observations on nesting biology and a phylogenetic analysis of the subgenera (Hymenoptera: Colletidae: Xeromelissinae). Sci. Pap. Nat. Hist.Mus. U. Kans. 26: 1-47. Michener CD (2007). The bees of the world. John Hopkins University Press, Baltimore. Morrone JJ (2006). Biogeographic areas and transition zones of Latin America and the Caribbean Islands based on panbiogeographic and cladistic analyses of the entomofauna. Ann. Rev. Ent. 51: 467-494. Packer L (2004). Taxonomic and behavioural notes on Patagonian Xeromelissinae with the description of a new species (Hymenoptera: Colletidae). J. Kans. Entomol. Soc. 77: 95-110.
337
Packer, L (2005). A new species of Geodiscelis (Hymenoptera: Colletidae: Xeromelissinae) from the Atacama desert of Chile. J. Hym. Res. 14: 84-91. Packer L (2008). Phylogeny and classification of the Xeromelissinae (Hymenoptera: Apoidea, Colletidae) with special emphasis upon the genus Chilicola. Sys. Ent. 33: 73-96. Ronquist F (1996). DIVA, v. 1.1. Uppsala University, Uppsala. http://www.ebc.uu.se/systzoo/research/diva/diva.html Ronquist F (1997). Dispersal-vicariance analysis: A new approach to the quantification of historical biogeography. Syst. Biol. 46: 195-203. Soares EDG and Carvalho CJB (2005). Biogeography of Palpibracus (Diptera: Muscidae): An integrative study using panbiogeography, parsimony analysis of endemicity, and component analysis. In: Regionalizacin biogeogrfica en Iberoamrica y tpicos afines (Llorente J and Morrone JJ eds.). Las Prensas de Ciencias, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Mxico, 485-494. Willis E, Packer L (2007[2008]). Revision and phylogenetic analysis of Chilioediscelis (Hymenoptera: Colletidae). Zootaxa 1762: 29-52.
338
SI MPSIO 15
APRESENTAES ORAIS DOS PS GRADUANDOS DO LABORATRIO DE BIOLOGIA DO DESENVOLVIMENTO DE ABELHAS - LBDA - USP
Coordenador: Aline Mackert dos Santos
339
Exoesqueleto de Apis mellifera: Modelo Ontogenticona Investigao da Maturao Cuticular em Abelhas Corbiculadas
Moyss ELIAS-NETO; Mrcia Maria Gentile BITONDI Departamento de Biologia; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo Ribeiro Preto, SP, Brasil meliasneto@pg.ffclrp.usp.br Apis mellifera exoskeleton as an ontogenetic model in studies on corbiculate bees cuticular maturation.
Abstract
The evolutionary success of the insects is, to a large extent, due to the structural and mechanical properties of the integument, which is made up of an outer cuticle layer and the subjacent epidermis. As an effective interface between the insect soft body and the environment, the integument performs all the functions of a skin and of an exoskeleton. Building and maturation of the adult exoskeleton include complex biochemical pathways, which culminate in cuticle pigmentation and sclerotization. It was our aim to characterize the morphogenesis of exoskeleton in the honey bee as a first step for an evolutionary approach on cuticular maturation in corbiculate bees. Exoskeleton formation and differentiation were investigated using conventional histology, and reverse transcription PCR for characterization of the expression of a molecular marker of cuticle sclerotization, the gene encoding laccase, Amlac 2. Our analyses evidenced that Amlac 2 is highly expressed in the integument of pharate adults in correlation with cuticle synthesis and differentiation. A comparative approach using honey bee workers, queens and drones also revealed caste- and sex-specific patterns of adult integument differentiation. We now intend to verify whether the heterochrony of cuticle tanning, or the delay in adult exoskeleton maturation in eusocial bees, is effectively an evolutionary conserved ontogenetic phenomenon related to sociality. Such ontogenetic and evolutionary approaches possibly will yield a comprehensive view of integument differentiation in corbiculate bees. Key-words: Apis mellifera, exoskeleton, morphogenesis, corbiculate bees
Introduo
O exoesqueleto (cutcula) considerado um dos grandes responsveis pelo sucesso evolutivo dos insetos. Isso se deve no s proteo e ao suporte que lhes confere, mas tambm interface que representa entre o animal e o meio ambiente. Pode ser dividido em duas camadas: a epicutcula, fina, de composio extremamente complexa (lipdeos e uma variedade de protenas), e internamente a procutcula, espessa, contendo protenas e o polissacardeo estrutural quitina (Hepburn, 1985). Toda
340
essa estrutura produto de secreo da camada celular epidrmica subjacente, sendo, portanto, fisiologicamente indissocivel dela. O conjunto formado pela epiderme e a cutcula denominado tegumento, cenrio de grandes modificaes durante a metamorfose. A cutcula apresenta uma srie de particularidades inerentes espcie biolgica, etapa do desenvolvimento e localizao no corpo do animal. Tamanha variao se relaciona s presses pelas quais passam os diferentes organismos ao longo de seus ciclos de vida e de sua diversificao evolutiva. Ontogeneticamente podem ser distinguidos dois tipos bsicos de cutcula: a incolor, flexvel e reativa, e a pigmentada, rgida e estabilizada. O segundo tipo deriva necessariamente do primeiro, que se diferencia por um processo denominado tanning (curtimento), caracterizado pelo escurecimento (melanizao) e pelo enrijecimento (esclerotizao). A maturao do exoesqueleto uma caracterstica marcante da metamorfose, particularmente no que diz respeito diferenciao do adulto. Tal processo, entre outros fatores, conseqncia da ao de enzimas denominadas lacases e se relaciona intimamente s oscilaes do ttulo de ecdisterides na hemolinfa. Nesse contexto, o exoesqueleto de Apis mellifera possui um prolfico potencial em investigaes do processo de maturao cuticular. Os diferentes estgios do desenvolvimento pr-imaginal das castas e sexos desta abelha j foram caracterizados (Rembold et al., 1980; Michelette e Soares, 1993; Nunes-Silva et al., 2006; Tozetto et al., 2007). Tambm so conhecidos os ttulos de ecdisterides que regem o ltimo estgio larval das fmeas (Rachinsky et al., 1990) e o estgio pupal de fmeas e zanges (Feldlaufer et al., 1985; Pinto et al., 2002; Tozetto et al., 2007). Entretanto, so escassos e relativamente antigos os trabalhos que utilizaram esta espcie como modelo biolgico em estudos da cutcula. Thompson (1978) descreveu, embora sem documentao, a histologia da cutcula durante o desenvolvimento do adulto de Apis mellifera adansonii (raa africana). Em uma abordagem comparativa, tambm foram investigadas algumas propriedades qumicas e mecnicas da cutcula desta sub-espcie (Thompson e Hepburn, 1978; Andersen et al., 1981). O objetivo do presente trabalho envolve o estudo da morfognese do exoesqueleto de Apis mellifera em um contexto morfolgico, fisiolgico e gentico. Em carter comparativo, foram contrastados tegumentos de sucessivas fases do desenvolvimento e provenientes de diferentes regies corporais com distintos graus de maturao, bem como tegumentos de operrias, rainhas e zanges no mbito da diferenciao dos sexos e das castas. Tal pesquisa teve como finalidade a construo de um modelo de investigao a ser utilizado na busca por padres ontogenticos e evolutivos do processo de maturao do exoesqueleto em abelhas corbiculadas.
Materiais e Mtodos
Material biolgico Operrias, rainhas e zanges de Apis mellifera africanizada foram coletados no apirio experimental da Universidade de So Paulo (USP) Campus Ribeiro Preto. A identificao das diferentes fases do desenvolvimento se baseou nos trabalhos de Thompson (1978) e de Michelette e Soares (1993). Disseco do tegumento A poro dorsal do tegumento torcico e abdominal de pupas e adultos em desenvolvimento foi dissecada e submetida a uma lavagem rpida em soluo de Ringer (NaCl 0,17M; KCl 0,01M; CaCl2 0,003M), onde foi isolada, o quanto possvel, de corpo gorduroso e msculos.
341
Histologia do tegumento Tegumentos torcicos e abdominais de operrias, rainhas e zanges recm-emergidos foram contrastados por meio de preparaes histolgicas convencionais para microscopia ptica. O material dissecado foi fixado por 24 horas a 4C em soluo de 4% de paraformaldedo em tampo fosfato (0,1M; pH 7,3). Em seguida, as amostras foram desidratadas em uma srie de solues de concentraes crescentes de etanol (70%, 80%, 90% e 95%), permanecendo 30 minutos em cada soluo. Aps a desidratao, os tegumentos foram infiltrados por 24 horas em metacrilato e transferidos para frmas apropriadas contendo resina de polimerizao (Historesina-Leica), onde permaneceram por mais 24 horas temperatura ambiente. Aps a secagem completa dos blocos, estes foram retirados das frmas para a realizao de cortes histolgicos de 5m com navalhas de vidro. Os cortes foram montados em lminas de vidro e deixados em estufa a 50C por cerca de 2 horas. Aps este perodo, as lminas foram coradas com uma soluo de azul de metileno e fucsina bsica por 3 minutos, lavadas rapidamente em gua destilada e seladas com lamnula em Entellan. Os cortes de tegumento foram ento examinados e fotografados em microscpio ptico (Axioskop II, Zeiss). Estudo de expresso do gene codificador da enzima Lacase 2, Amlac 2, por RT-PCR semiquantitativa Tegumentos de pupas e adultos de operrias devidamente dissecados foram colocados imediatamente em Trizol (Invitrogen), com o nmero estipulado de 6 tegumentos por amostra. O RNA total foi extrado segundo recomendaes do fabricante do Trizol. Aps tratamento com DNAse I, a primeira fita de cDNA foi sintetizada a partir de uma quantidade padronizada de 6 g de RNA total, utilizando-se o sistema de sntese da SuperScript TM II (Invitrogen). Para as amplificaes por PCR (Applied Biosystems, geneAmp, PCR System 9700) foram utilizados os cDNAs sintetizados e primers especficos para o gene Amlac 2 (GB11321 - http://zulu.fmrp.usp.br/beelab) (F: 5 GGT ACG CAC TTC TGG CAC G e R: 5 CGT CAT GAA ACC GGT GTT G 3) nas seguintes condies: desnaturao inicial a 95C por 2 minutos; seguida por 30 ciclos (desnaturao/anelamento/extenso) de 94C, 30 segundos / 58C, 45 segundos /72C, 50 segundos; e uma extenso final a 72C por 10 minutos. O controle da amplificao foi realizado utilizando-se primers especficos para o gene codificador de actina de Apis mellifera, de expresso constitutiva, Amact (AB023025) (F: 5 TGC CAA CAC TGT CCT TTC TG 3 e R: 5 AGA ATT GAC CCA CCA ATC CA 3). Neste caso, as condies de amplificao seguiram os mesmos padres das usadas para Amlac 2, com exceo dos valores especficos para a temperatura de anelamento dos primers (62 C) e do nmero de ciclos (27). importante ressaltar que o nmero de ciclos das reaes de amplificao, tanto de Amlac 2 como de Amact, foi testado e definido de modo a evitar saturao. Por fim, o cDNA amplificado por PCR foi analisado em gel de agarose 1% contendo brometo de etdio (0,01l/ml de gel de agarose) em tampo 1x TBE (0,45M Tris Base; 0,45M cido Brico; 0,5M EDTA, pH 8,0). Aps a eletroforese, cada gel foi visualizado digitalmente com o uso de um foto-documentador KODAK EDAS 290. Um marcador de peso molecular com intervalo de 100 pares de base foi utilizado em uma das pistas de cada gel.
Resultados
A diferenciao do tegumento adulto de Apis mellifera ocorre essencialmente durante a fase farata de desenvolvimento, condio na qual uma nova forma ontogentica se diferencia ainda envolvida pela cutcula da forma anterior, ou seja, da pupa. Nesse perodo so observadas todas as etapas caractersticas do ciclo de muda. Aps a aplise, ou desprendimento da cutcula pupal, a epiAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
342
derme se reorganiza por proliferao celular e pseudo-estratificao e inicia a sntese do exoesqueleto imaginal. Em seguida, observado um perodo de deposio cuticular. Essa etapa ento sucedida por um perodo de diferenciao cuticular, marcado pela melanizao e pela intensificao da esclerotizao. Durante este processo, a cutcula que recobre o trax torna-se mais rgida e escura e se diferencia mais rapidamente que aquela que recobre o abdome. (Elias-Neto M, Soares MP e Bitondi MMG, submetido para publicao). A transcrio do gene Amlac 2 foi analisada no tegumento de pupas e adultos faratos, em operrias, atravs da avaliao da abundncia relativa de transcritos por RT-PCR semi-quantitativa. Tambm foram contrastados tegumentos provenientes de diferentes regies do corpo (trax e abdome). O perfil transcricional gerado evidenciou correspondncia com os processos de diferenciao do tegumento, bem como com a oscilao do ttulo de ecdisterides na hemolinfa (Figura 1). H o
Figura 1: Transcrio diferencial de Amlac 2 no tegumento de operrias de Apis mellifera.Transcritos codificadores de Lacase 2 em amostras de tegumentos do dorso do trax e do dorso do abdome em pupas e adultos faratos. O perfil transcricional foi contrastado com a flutuao do ttulo de ecdisterides na hemolinfa (baseado em Pinto et al., 2002) e com as sucessivas etapas de morfognese do exoesqueleto caractersticas do estgio pupal. RT-PCR semi-quantitativa visualizada em gel de agarose 1% corado com brometo de etdio. A transcrio do gene Amact (codificador de actina em Apis mellifera) foi utilizada como controle da amplificao devido ao seu padro constitutivo caracterstico.
343
predomnio de transcritos no perodo farato. A transcrio atinge seus nveis mais elevados ainda durante o perodo de sntese da cutcula adulta, mantm-se alta na fase de diferenciao cuticular e se atenua nas vsperas da ecdise. Nota-se ainda um relativo atraso no incio da transcrio desse gene no tegumento abdominal. Em abordagem comparativa, tegumentos de operrias, rainhas e zanges adultos recm-emergidos foram analisados por meio de preparaes histolgicas convencionais para microscopia ptica. A anlise revelou um grau de maturao cuticular diferencial entre as castas e sexos. (Figura 2). No momento da emergncia da clula de cria, o exoesqueleto dos machos se apresenta relativamente mais pigmentado e esclerotizado em comparao ao das fmeas. Levando-se em considerao as cas-
Figura 2: Anlise histolgica comparativa do tegumento Cortes sagitais (5 m) do tegumento torcico dorsal e do tergito do terceiro segmento abdominal de operrias, rainhas e zanges recmemergidos da clula de cria. Os cortes foram corados com soluo de azul de metileno e fucsina bsica. ct (cutcula); ep (epiderme). tas, a cutcula de rainhas se encontra em um estgio de diferenciao levemente atrasado em relao de operrias. Ambos os padres, casta e sexo-especficos, so observados tanto para o tegumento torcico quanto para o abdominal.
Discusso
Pode-se dividir o perodo farato do desenvolvimento do adulto em Apis mellifera em duas fases distintas (uma de sntese e outra de diferenciao cuticular), com base no prprio padro de morfognese do tegumento. Duas ou mais subdivises de cada um desses perodos podem ou no ser caracterizadas, dependendo da convenincia, levando-se em considerao a espessura e gradao de cor da cutcula.
344
A anlise da transcrio diferencial de Amlac 2 ao longo da morfognese do tegumento, tanto no tempo como no espao, evidenciou fortemente uma relao entre a ao da enzima Lacase 2 e a diferenciao do exoesqueleto imaginal. Os resultados sugerem ainda uma possvel regulao da expresso desse gene exercida por hormnios ecdisterides. Padres de transcrio similares j foram caracterizados para o gene Mslac 2, do lepidptero Manduca sexta (Dittmer et al., 2004), e para os genes Tclac 2 e MaLac 2, dos colepteros Tribolium castaneum e Monochamus alternatus, respectivamente (Arakane et al., 2005; Niu et al., 2008). Dessa forma, o perfil transcricional de genes codificadores de Lacase 2 em diferentes espcies pode oportunamente ser utilizado como um marcador gentico relacionado maturao cuticular. Os resultados das preparaes histolgicas do tegumento de operrias, rainhas e zanges so condizentes com os respectivos perfis cronolgicos de desenvolvimento. Sabe-se que o tempo total de ontognese dentro da clula de cria, desde a postura do ovo at a emergncia do adulto, varia na faixa de 14-17 dias para rainhas, 16-24 dias para operrias e 20-28 dias para zanges (Winston, 2003). Ainda que os valores absolutos oscilem em funo de uma srie de fatores (temperatura do ninho, nutrio da cria, posio da clula no favo, tipo de raa da abelha, etc), a relao de tempo zango > operria > rainha se mantm incondicionalmente em cada colmia. Esse descompasso no desenvolvimento das castas e sexos decorrente principalmente de diferenas na durao do perodo metamrfico (pupao e diferenciao do adulto). Dessa forma, os diferentes graus de maturao do exoesqueleto do adulto recm-emergido podem ser explicados pelo prprio padro heterocrnico de desenvolvimento pr-imaginal, casta e sexo-especfico. As rainhas emergem de modo relativamente precoce e apresentam nessa ocasio o exoesqueleto em estado ainda imaturo, enquanto os zanges passam pela ecdise imaginal mais tardiamente e assim emergem das clulas de cria num momento em que a cutcula j se encontra em acentuado grau de diferenciao. As operrias apresentam um cenrio intermedirio. Em outras espcies de abelhas corbiculadas, entretanto, o processo de maturao do exoesqueleto muito pouco explorado. Apesar de uma srie de estudos envolvendo glndulas excrinas associadas ao tegumento (reviso em Cruz-Landim e Abdalla, 2002), a diferenciao cuticular foi abordada com maiores detalhes apenas em Melipona quadrifasciata (Meliponini) (Oliveira, 1997). A escassez de trabalhos, no entanto, no condizente com o grande potencial investigativo nesse grupo de abelhas. A eussocialidade representa uma interessante oportunidade para o teste de hipteses evolutivas relacionadas a mecanismos adaptativos do tegumento ao contexto social. O ambiente protetor das colnias possivelmente reflete um relaxamento das presses seletivas sobre a diferenciao cuticular, permitindo, por exemplo, a emergncia de adultos com exoesqueleto relativamente imaturo. A heterocronia da maturao cuticular aparentemente um fenmeno ontogentico conservado ao longo da evoluo de abelhas altamente sociais, em comparao ao padro observado em abelhas solitrias ou primitivamente sociais. Assim, a utilizao de marcadores relacionados diferenciao do exoesqueleto, sejam morfolgicos (melanizao e eclerotizao da cutcula), fisiolgicos (ttulo de ecdisterides) ou genticos (estrutura e expresso de genes codificadores da Lacase 2), representa uma interessante estratgia para a investigao da evoluo da maturao cuticular em abelhas corbiculadas. Agradecimentos A Lus R. Aguiar, pelo apoio tcnico no apirio experimental. Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP), pelo suporte cientfico e financeiro (processos 05/03301-5 e 07/08300-2).
345
Bibliografia Andersen SO, Thompson PR, Hepburn HR (1981). Cuticular sclerotization in the honeybee (Apis mellifera adansonii). J. Comp. Physiol. 145: 17-20. Arakane Y, Muthukrishnan S, Beeman RW, Kanost MR, et al. (2005). Laccase 2 is the phenoloxidase gene required for beetle cuticle tanning. P. Natl. Acad. Sci. 32: 11337-11342. Cruz-landim C e Abdalla FC (2002). Glndulas excrinas das abelhas. FUNPEC, Ribeiro Preto. Dittmer NT, Suderman RJ, Jiang H, Zhu YC, et al. (2004). Characterization of cDNAs encoding putative laccase-like multicopper oxidases and developmental expression in the tobacco hornworm, Manduca sexta, and the malaria mosquito, Anopheles gambiae. Insect Biochem. Molec. 34: 29-41. Feldlaufer MF, Herbert JrEW, Svoboda JA, Thompson MJ, et al. (1985). Makisterone A the major ecdysteroid from the pupa of the honey bee, Apis mellifera. Insect Biochem. 15: 597-600. Hepburn HR (1985) Structure of the integument. In: Comprehensive Insect Physiology, Biochemistry and Pharmacology (Kerkut GA e Gilbert LI, eds.) vol. 3. Pergamon Press, Oxford, 1-58. Michelette ERF, Soares AEE (1993). Characterization of preimaginal developmental stages in Africanized honey bee workers (Apis mellifera L). Apidologie 24: 431-440. Niu B-L, Shen W-F, Liu Y, Weng H-B, et al. (2008). Cloning and RNAi-mediated functional characterization of MaLac2 of the pine sawyer, Monochamus alternatus. Insect Mol. Biol. 17: 303-312. Nunes-Silva P, Gonalves LS, Francoy TM, De Jong D (2006). Rate of growth and development time of africanized honey bee (Apis mellifera) queens and workers during ontogenetic development. Braz. J. Morphol. Sci. 23: 325-332. Oliveira SAR (1997). Alteraes morfolgicas dos componentes tegumentares de estgios imaturos de Melipona quadrifasciata anthidioides Lep. (Hymenoptera, Apidae). Tese de Doutorado, IBRC, UNESP, Rio Claro. Pinto LZ, Hartfelder K, Bitondi MMG, Simes ZLP (2002). Ecdysteroid titers in pupae of highly social bees relate to distinct modes of caste development. J. Insect Physiol. 48: 783-790. Rachinsky A, Strambi C, Strambi A, Hartfelder K (1990). Caste and metamorphosis: hemolymph titers of juvenile hormone and ecdysteroids in last instar honeybee larvae. Gen. Comp. Endocr. 79: 31-38. Rembold H, Kremer J-P, Ulrich GM (1980). Characterization of postembryonic developmental stages of the female castes of the honey bee, Apis mellifera L.. Apidologie 11: 29-38. Thompson PR (1978). Histological development of cuticle in the worker honeybee, Apis mellifera adansonii. J. Apic. Res. 17: 32-40. Thompson PR, Hepburn HR (1978). Changes in chemical and mechanical properties of honeybee (Apis mellifera adansonii L.) cuticle during development. J. Comp. Physiol. 126: 257-262. Tozetto SO, Bitondi MMG, Dallacqua RP, Simes ZLP (2007). Protein profiles of testes, seminal vesicles and accessory glands of honey bee pupae and their relation to the ecdysteroid titer. Apidologie 38: 1-11. Winston ML (2003). A biologia da abelha. Magister, Porto Alegre.
346
Genes Codificadores de Protenas Cuticulares em Abelhas Apis mellifera: Expresso Diferencial e Regulao Durante a Formao do Exoesqueleto
1
Michelle Prioli Miranda Soares1, Moyss Elias Neto2, Mrcia Maria Gentile Bitondi3 miprioli@pg.ffclrp.usp.br, 2meliasneto@pg.ffclrp.usp.br, 3mmgbit@usp.br Departamento de Biologia; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo Ribeiro Preto, SP, Brasil Differential expression and regulation of cuticle protein genes during exoskeleton formation in the honeybee, Apis mellifera.
Abstract
The insect cuticle (exoskeleton) is composed of proteins and chitin arranged in a way to provide protection to inner tissues. Insects produce a new cuticle every time they molt, and this requires activation and repression of specific cuticle protein genes. Studies on these genes in the honeybee are important for the knowledge of cuticle structure and metamorphosis in social insets in comparison with non-social insects, for which cuticle protein genes have long been studied. In this context, our goal was to characterize the structure and expression of three cuticle protein genes - AmelCPR14, AmelCPR18 and AmelGRP - in the honeybee. The corresponding cDNAs were partially sequenced, the genomic sequences were identified in the published honeybee genome and their respective structures were characterized. To investigate whether these genes are hormonally regulated, experiments were performed to manipulate the levels of ecdysteroids in vivo, or in integument pieces incubated in vitro. We verified that the three honeybee cuticle protein genes are extensively transcribed during the pharate adult stage, just when the adult cuticle is being synthesized. A decrease in AmelCPR18 and AmelGRP gene expression precedes the adult ecdysis, but a high level of AmelCPR14 transcripts is maintained throughout the adult stage. A pulse of 20E is required for the increase in expression of AmelCPR14 and AmelGRP, but not of AmelCPR18. Together, our analyses revealed differences in the structure and expression of these genes, and in their responses to 20E, and strongly suggest that they have a role in adult exoskeleton construction. Key-words: Cuticle protein genes; Apis mellifera; Ecdysteroids; Integument; Honeybee
Introduo
A cutcula dos insetos funciona como um exoesqueleto, protegendo os tecidos internos e fornecendo suporte estrutural e mecnico ao organismo. Dentre seus principais componentes destacamse filamentos de quitina embebidos em uma matriz de protenas estruturais distintas as protenas cuticulares secretadas pela epiderme subjacente. Juntos, esses componentes proporcionam ao exoesqueleto vrios graus de flexibilidade, dureza e estabilidade (Willis et al., 2005).
347
O crescimento dos insetos depende da renovao peridica da cutcula, que se desprende e digerida enquanto ocorre a biossntese de uma nova cutcula, substituta. Tal renovao caracteriza a muda e metamorfose e ocorre s custas da ativao ou represso de conjuntos de genes. Todo este processo coordenado por hormnios, com destaque para os ecdisterides. De acordo com o modelo proposto por Ashburner, a ao dos ecdisterides mediada pelo receptor de ecdisona (EcR) que acoplado protena ultraspiracle (Usp) induz a transcrio de um conjunto de genes (early genes), que por sua vez codificam protenas transreguladoras, as quais induzem secundariamente a transcrio dos late genes (Ashburner, 1990). As protenas cuticulares estruturais so produtos dos late genes, ou genes codificadores de protenas cuticulares, ou simplesmente, genes cuticulares. A transcrio destes genes geralmente requer ativao por nveis relativamente altos de ecdisterides (Braquart et al., 1996). No entanto, a expresso de alguns genes cuticulares somente ocorre aps o pico de ecdisterides, quando o ttulo destes hormnios decai (Hiruma e Riddiford, 1990; Apple e Fristrom, 1991). O grande avano nas tcnicas moleculares e a concluso do genoma de alguns insetos tm contribudo para a identificao de vrias seqncias codificadoras de protenas cuticulares. Os dados e informaes sobre estas protenas esto disponveis no website cuticleDB (http://bioinformatics2.biol.uoa. gr/cuticleDB/index.jsp) (Magkrioti et al., 2004). A maior famlia de protenas cuticulares - a famlia CPR - definida pela presena de um domnio conservado denominado Consenso R&R, primeiramente identificado por Rebers e Riddiford (1988). A verso estendida deste consenso, Pfam PF00379, foi subseqentemente descrita. Esta famlia de protenas foi dividida em trs classes de acordo com o tipo de Consenso R&R. A classe de protenas RR-1 predomina em cutculas flexveis e hidratadas, enquanto a classe RR-2 foi identificada em cutculas mais duras e esclerotizadas (Andersen, 1998). O Consenso RR-3 foi identificado em apenas cinco protenas da cutcula ps-ecdisial de insetos e em algumas protenas cuticulares de outras classes de artrpodes (Andersen, 2000). A ligao destes domnios ao polissacardeo estrutural da cutcula, quitina, foi investigada e confirmada experimentalmente (Rebers e Willis, 2001; Hamodrakas et al., 2002; Togawa et al., 2004; Iconomidou et al., 2005). O seqenciamento do genoma completo de Apis mellifera (The Honeybee Genome Sequencing Consortium, 2006), revelou um menor nmero de genes cuticulares quando comparado aos genomas de Drosophila, Anopheles e Tribolium. Isto foi atribudo, a princpio, ao tipo de organizao social das abelhas, que preserva os imaturos no ambiente protetor das colmias, talvez contribuindo para a evoluo de uma estrutura cuticular menos complexa. No entanto, esta comparao incluiu apenas genes cuticulares que codificam protenas contendo o Consenso R&R. O banco de dados cuticleDB relaciona vinte e oito protenas cuticulares de A. mellifera que foram preditas com base na presena deste Consenso, e outras duas protenas que no tm este motivo. Recentemente, outros trs genes que codificam protenas cuticulares destitudas do Consenso R&R foram identificados no genoma desta abelha (Kucharski et al., 2007). Uma busca ampla por genes cuticulares no genoma de A. mellifera, incluindo aqueles cujos produtos de traduo preditos no tm o Consenso R&R, poderia elucidar se realmente a cutcula deste inseto social apresenta menor grau de complexidade que a de insetos no-sociais. O intuito deste trabalho consistiu em caracterizar a estrutura e expresso de trs genes cuticulares de A. mellifera como um passo inicial para o conhecimento das caractersticas e especificidades do genoma cuticular de um inseto social.
Material e mtodos
Operrias A. mellifera foram coletadas de colnias mantidas no Apirio Experimental do Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto,
348
Universidade de So Paulo. O RNA total foi extrado do tegumento torcico e abdominal de abelhas operrias em desenvolvimento (pupas e adultos-faratos) e adultas. A primeira fita de cDNA foi sintetizada por transcrio reversa e amplificada (RT-PCR semiquantitativa) utilizando-se primers especficos para trs genes cuticulares, AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP. Os produtos de PCR foram analisados em gel de agarose 1% contendo brometo de etdio. A expresso do gene codificador de actina foi usada como controle interno. Eventualmente, os nveis de transcritos foram quantificados por RT-PCR em tempo real. Os cDNAs obtidos por transcrio reversa foram clonados e seqenciados para confirmar a identidade destes genes. As seqncias obtidas foram confrontadas com o banco pblico de dados GenBank (National Center for Biotechnology Information NCBI - http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) e com o genoma de A. mellifera, verso Amel_pre_release2OGS (http://zulu.fmrp.usp.br/beelab) para caracterizar a estrutura gnica. O software Artemis Release 7 (The Sanger Institute) foi utilizado para anotao dos genes estudados. Para verificar se a expresso destes genes regulada por 20-hidroxiecdisona (20E), pupas ou o tegumento isolado de pupas foram expostos a diferentes tratamentos realizados in vivo (injeo de pupas com 1 g de 20E dissolvido em 1 l de soluo de etanol em salina de Ringer 1:3 v/v), ou in vitro (incubao de tegumentos torcicos em meio de cultura contendo 1g de 20E/ml). Em complementao a estes experimentos de manipulao hormonal, pupas tambm foram submetidas a um procedimento de ligadura na regio que separa o trax do abdome, com a finalidade de bloquear a passagem da hemolinfa e isolar a cutcula abdominal da influncia da ecdisona, liberada pelas glndulas protorcicas.
Caractersticas dos genes AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP Os genes cuticulares da abelha A. mellifera, AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP, foram parcialmente seqenciados e caracterizados. Em comum com a maioria dos genes cuticulares de outras espcies de insetos, os de A. mellifera codificam protenas pequenas, constitudas por 145, 134 e 332 aminocidos, respectivamente. Outra caracterstica marcante dos genes cuticulares em geral, tambm verificada para estes trs genes, que a maioria no possui mais que dois ntrons (Figura 1), sendo que geralmente, um dos ntrons interrompe o peptdeo sinal (Willis et al., 2005). As respectivas protenas, deduzidas das seqncias nucleotdicas, revelaram caractersticas tpicas de protenas cuticulares. Duas destas, AmelCPR14 e AmelCPR18, apresentam o Consenso RR-1. A protena predita AmelGRP contm regies ricas em glicina (35% do total de aminocidos), evidenciando uma provvel classe de protenas cuticulares indita em abelhas. Motivos GGG(I/L) repetem-se vrias vezes em tandem e a maioria dessas repeties localiza-se nas regies N- e C-terminais, como observado para algumas protenas cuticulares ricas em glicina de outros insetos (Suzuki et al., 2002; Zhong et al., 2006). Aparentemente, estas regies ricas em glicina conferem flexibilidade e resistncia cutcula (Zhong et al. 2006).
349
Figura 1 - Esquema da estrutura dos genes AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP, contendo as representaes de xons e ntrons em forma de caixas e linhas, respectivamente. Os cdons de incio e trmino esto indicados esquerda e direita da figura, respectivamente. O nmero de nucleotdeos (nt) assim como a direo da transcrio (flecha) esto indicados. Nesta e nas demais figuras, os dados referentes ao gene AmelCPR14 tambm constam da publicao Soares et al., (2007). Padro de expresso dos genes cuticulares em relao muda e metamorfose A expresso dos genes AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP modulada, de modo que altos nveis de transcritos so detectados em alguns estgios, enquanto baixos nveis ou ausncia de transcritos ocorrem em outros. Anlises dos perfis de transcritos dos trs genes cuticulares de A. mellifera no decorrer de todo o estgio pupal (Figura 2), revelaram maior abundncia nos adultos faratos, nos quais a cutcula definitiva est sendo sintetizada em reposta ao pulso de ecdisterides. A quantidade de RNAm de AmelCPR18 e AmelGRP diminui com a aproximao da ecdise adulta, mas os nveis de RNAm de AmelCPR14, se mantm abundantes inclusive no estgio adulto. De maneira semelhante, transcritos do gene cuticular ACP-20 de Tenebrio molitor, cuja expresso antecede a ecdise adulta, tambm foram detectados aps a ecdise. No entanto, a expresso deste gene cessa poucas horas depois (Charles et al., 1992), enquanto a expresso de AmelCPR14 permanece ao longo do estgio adulto, inclusive em abelhas de 20-30 dias de idade, indicando que est em contnua atividade, mesmo aps a ecdise adulta.
Figura 2 Perfil de transcritos dos genes cuticulares AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP de abelhas operrias A. mellifera em desenvolvimento, em comparao com a flutuao do ttulo de ecdisterides. Utilizou-se o tegumento torcico para anlise da expresso gnica por RT-PCR semiquantitativa. Os produtos de PCR foram analisados em gis de agarose corados com brometo de etdeo. Pw e Pp correspondem s fases pupais. Pdp, Pb, Pbl, Pbm e Pbd so as sucessivas fases do desenvolvimento adulto-farato. RE, AC e FG representam abelhas recm-emergidas, alimentadoras de crias e forrageadoras, respectivamente. O gene codificador de actina foi usado como normalizador. O ttulo de ecdisterides foi redesenhado de Pinto et al. (2002) e Hartfelder et al. (2002).
350
Regulao dos genes cuticulares por ecdisterides Estudos de eventos do desenvolvimento regulados por ecdisterides tm demonstrado que a expresso de certos genes cuticulares necessita de um pulso de ecdisterides, ou seja, da exposio ao hormnio seguida de sua remoo, para que tenha incio a transcrio (Apple e Fristrom, 1991; Hiruma et al., 1991; Suzuki et al., 2002; Noji et al., 2003). No tegumento de abelhas adultas faratas, o aumento do nvel de transcritos dos genes cuticulares AmelCPR14, AmelCPR18 e AmelGRP ocorre quando o ttulo de ecdisterides na hemolinfa comea a decair (Figura 2). Este padro de expresso sugeriu que estes genes poderiam ser regulados por um pulso de ecdisterides. Diferentes abordagens experimentais foram ento utilizadas para testar esta hiptese. A preveno do aumento do ttulo de ecdisterides no abdmen, proporcionado pela ligadura abdominal, retardou o aumento dos nveis de transcritos AmelCPR14 e AmelGRP nas abelhas adultas faratas, apesar deste efeito no ter sido to evidente em relao aos transcritos de AmelCPR18 (Figura 3).
Figura 3 - Abundncia dos transcritos dos genes cuticulares AmelCPR14, AmelGRP e AmelCPR18 no tegumento abdominal de pupas submetidas a ligadura (L) no incio do estgio pupal (fase Pw) em comparao com pupas controles, no ligadas (NL). A expresso foi verificada 1, 2, 4, 5 e 6 dias (d) aps a ligadura abdominal. Pw e Pp so as sucessivas fases pupais e Pb, Pbl e Pbm correspondem s fases do desenvolvimeto adulto-farato. Produtos de RT-PCR semiquantitativa analisados por eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etdeo. O gene da actina foi usado como normalizador. Em abordagem experimental complementar, pupas iniciais foram injetadas com 20E para retardar ou evitar o decaimento do ttulo de ecdisterides, e subseqentemente a expresso de AmelCPR14 foi analisada. Este experimento demonstrou que a manuteno de alto ttulo de ecdisterides endgenos impede o aumento dos nveis de transcritos AmelCPR14 nas abelhas adultas-faratas (Figura 4). Este resultado reforou a hiptese de que o declnio do ttulo de ecdisterides importante para o aumento da atividade deste gene. Experimentos in vitro foram ento realizados com a finalidade de testar se a exposio do tegumento a uma concentrao fisiolgica de 20E, seguida de sua remoo, induziria aumento da transcrio. Os resultados evidenciaram que o pulso de 20E capacita os genes AmelCPR14 e AmelGRP, mas no o gene AmelCPR18, para alta expresso (Figura 5). Em conjunto, os perfis temporais de expresso gnica e os resultados obtidos dos experimentos de manipulao hormonal mostraram que o pulso de ecdisterides necessrio para o aumento da atividade de AmelCPR14 e AmelGRP durante o processo de sntese e diferenciao da cutcula adulta de A. mellifera.
351
Figura 4 Efeito da injeo de 20E sobre a expresso de AmelCPR14 no tegumento torcico: 1g de 20E foi injetado em pupas iniciais (Pw) e o nvel de transcritos foi analisado aps 18 e 48h, em comparao com controles: sem interveno (C) ou injetados com o solvente de 20E, etanol/Ringer (Et/R). (A) Produto de RT-PCR analisado por eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etdeo. O gene da actina foi utilizado para controle da RT-PCR; (B) Quantificao do RNAm AmelCPR14 por RT-PCR em Tempo Real usando trs amostras independentes para cada grupo: C, Et/R, e 20E. Os resultados (mdia e erro padro), expressos como 2-CT, foram calculados relativamente aos controles. O grupo tratado com 20E apresentou quantidade significativamente menor de transcritos que os grupos Et/R e C (P<0,001). Et/R no difere de C (P>0,05). (One way ANOVA com comparaes post-hoc utilizando-se Holm-Sidak multiple comparison test. Software Jandel SigmaStat 3.1, Jandel Corporation, San Rafael, CA, USA).
Figura 5 Nveis de transcritos AmelCPR14 (A), AmelCPR18 (B) e AmelGRP (C) em tegumentos torcicos de pupas Pw incubados in vitro durante 6 h em meio de cultivo contendo 1g de 20E (por mL), ou incubados nestas mesmas condies mas em seguida reincubados por 15 ou 24 horas em ausncia de 20E (lavagem). Anlise por RT-PCR, seguida de eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etdeo. O gene codificador de actina foi utilizado como normalizador. Note que a remoo do hormnio efetivada pela substituio do meio de cultura contendo 20E, por meio de cultura sem 20E (lavagem), resulta em induo da expresso dos genes AmelCPR14 e AmelGRP.
352
Andersen SO (1998). Amino acid sequences studies on endocuticular proteins from the desert locust, Schistocerca gregaria. Insect Biochem. Mol. Biol. 28, 421-434. Andersen SO (2000). Studies on proteins in post-ecdysial nymphal cuticle of locust, Locusta migratoria, and cockroach, Blaberus craniifer. Insect Biochem. Mol. Biol. 30, 569-577. Apple RT, Fristrom JW (1991). 20-Hydroxyecdysone is required for, and negatively regulates, transcription of Drosophila pupal cuticle protein genes. Devel. Biol. 146, 569-582. Ashburner M (1990). Puffs, genes and hormones revisited. Cell. 61, 1-3. Braquart C, Bouhin H, Quennedey A, Delachambre J (1996). Up-regulation of an adult cuticular gene by 20-hydroxyecdysone in insect metamorphosing epidermis cultured in vitro. Eur. J. Biochem. 240, 336-341. Charles JP, Bouhin H, Quennedey B, Courrent A, Delachambre J (1992). cDNA cloning and deduced amino acid sequence of a major, glycine-rich cuticular protein from the coleopteran Tenebrio molitor: temporal and spatial distribution of the transcript during metamorphosis. Eur. J. Biochem. 206, 813-819. Hamodrakas SJ, Willis JH, Iconomidou VA (2002). A structural model of the chitinbinding domain of cuticle proteins. Insect Biochem. Mol. Biol. 32, 15771583. Hartfelder K, Bitondi MMG, Santana WC, Simes ZLP (2002). Ecdysteroid titer and reproduction in queens and workers of the honey bee and of a stingless bee: loss of ecdysteroid function at increasing levels of sociality? Insect Biochem. Mol. Biol. 32, 211-216. Hiruma K, Hardie J, Riddiford LM (1991). Hormonal regulation of epidermal metamorphosis in vitro: control of expression of a larval-specific cuticle gene. Dev. Biol. 144, 369-378. Hiruma K, Riddiford LM (1990). Regulation of dopa decarboxylase gene expression in the larval epidermis of the tobacco hornworm by 20-hydroxyecdysone and juvenile hormone. Dev. Biol. 138, 214-224. Iconomidou VA, Willis JH, Hamodrakas SJ (2005). Unique features of the structural model of hard cuticle proteins: implications for chitinprotein interactions and cross-linking in cuticle. Insect Biochem. Mol. Biol. 35, 553560. Kucharski R, Maleszka J, Maleszka R (2007). Novel cuticular proteins revealed by the honey bee genome. Insect Biochem. Mol. Biol. 37, 128134. Magkrioti CK, Spyropoulos IC, Iconomidou VA, Willis JH, Hamodrakas SJ (2004). cuticleDB: a relational database of Arthropod cuticular proteins. BMC Bioinformatics 5, 138-143. Noji T, Ote M, Takeda M, Mita K, Shimada T, Kawasaki H (2003). Isolation and comparison of different ecdysone-responsive cuticle protein genes in wing discs of Bombyx mori. Insect Biochem. Mol. Biol. 33, 671-679. Pinto LZ, Hartfelder K, Bitondi MMG, Simes ZLP (2002). Ecdysteroid titers in pupae of highly social bees relate to distinct modes of caste development. J. Insect Physiol. 48, 783-790. Rebers JE, Riddiford LM (1988). Structure and evolution of a Manduca sexta larva cuticle gene homologous to Drosophila cuticle genes. J. Mol. Biol. 203, 411-423. Rebers JE, Willis JH (2001). A conserved domain in arthropod cuticular proteins binds chitin. Insect Biochem. Mol. Biol. 31, 1083-1093. Soares MPM, Elias-Neto M, Simes ZLP, Bitondi MMG (2007). A cuticle protein gene in the honey bee: expression during development and in relation to the ecdysteroid titer. Insect Biochem. Mol. Biol. 37, 12721282.
353
Suzuki Y, Matsuoka T, Iimura Y, Fujiwara H (2002). Ecdysteroid-dependent expression of a novel cuticle protein gene BMCPG1 in the silkworm, Bombyx mori. Insect Biochem. Mol. Biol. 32, 599-607. The Honey Bee Genome Sequencing Consortium (2006). Insights into social insects from the genome of the honey bee Apis mellifera. Nature. 443, 931949. Togawa T, Nakato H, Izumi S (2004). Analysis of the chitin recognition mechanism of cuticle proteins from the soft cuticle of the silkworm, Bombyx mori. Insect Biochem. Mol. Biol. 34, 10591067. Willis JH, Iconomidou V, Smith RF, Hamodrakas SJ (2005). Cuticular proteins. In: Gilbert, L., Iatrou, K., Gill, S. (Eds.), Comprehensive Molecular Insect Science, vol. 4. Elsevier, Oxford, pp 79110. Chapter 2. Zhong YS, Mita K, Shimada T, Kawasaki H (2006). Glycine-rich protein genes, which encode a major component of the cuticle, have different developmental profiles from other cuticle protein genes in Bombyx mori. Insect Biochem. Mol. Biol. 36, 99-110.
354
Expresso de Caderinas em Gnadas de Apis mellifera

Mnica M. Florecki; Klaus Hartfelder
Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patognicos, Universidade de So Paulo Ribeiro Preto, Brasil Avenida Bandeirantes, 3900, Monte Alegre, 14049-900 (16) 3602-4541 zeiflo@yahoo.com.br Expression of Cadherins in the Honey Bees (Apis mellifera) Gonads
Abstract
The gametogenesis in honeybees initiates with the division of a germline stem cell that generates a new stem cell and a cystoblast committed to the differentiation process. Each cystoblast undergoes successive mitotic divisions to form a cyst of germ cells connected by intercellular bridges. In oogenesis the germ cells subsequently differentiate into oocyte and nurse cells. Studies in Drosophila ovarioles and testioles revealed that E-cadherin is important to anchor the germline stem cells at the top of the germarium. Mutants for shotgun, the gene which encodes E-cadherin, fail to maintain the process of oogenesis. These results prompted us to study the expression and localization of cadherins in Apis mellifera gonads. Immunolabeling experiments using pan-cadherin antibodies in immunofluorescence protocols were performed in ovaries of adult queens and in testes of drone larvae. Cadherins were visualized in the cytoplasm and in nuclear focal points of germ and somatic cells all across the testioles and ovarioles. These results evidence that cadherins may have additional roles besides intercellular adhesion such as signaling between the cell surface and the nucleus. Studies of classic cadherins and protocadherins expression were performed also. The transcripts of shotgun, starry night, N-cadherin, fat and fat-like genes were detected in ovaries and testes indicating that not only classic cadherins but also protocadherins may have a role in Apis mellifera gametogenesis, although we cant identify which. Key words: Apis mellifera, cadherin, gonads
Introduo
Ovognese no Ovrio Merostico Politrfico O ovrio de Apis mellifera classificado como merostico politrfico, no qual a ovognese se inicia com a diviso assimtrica de uma clula-tronco germinativa localizada no pice do germrio (Figura 1). Essa diviso origina uma nova clula-tronco e uma outra clula chamada cistoblasto que comprometida com o processo de diferenciao (King et al., 1970; Spradling et al., 2001). Esta, por sua vez, passa por sucessivas divises mitticas incompletas, formando uma roseta com cistcitos interconectados por canais em anel que caracterizam o ovrio merostico (King & Bning, 1985; Bnig, 1994). Esses canais so cobertos por anis de actina e preenchidos por uma organela chamada fusoma que se distribui de forma desigual entre os cistcitos. Aps a formao da roseta, uma das clulas se diferencia em ovcito, localizado posteriormente
355
no grupo (Gutzeit et al., 1993), enquanto as outras clulas se diferenciam em clulas trofocticas poliplides. Superficialmente, a roseta coberta por clulas somticas que formam um epitlio folicular. Durante a fase pr-vitelognica de abelhas melferas, uma constrio aparece entre o ovcito e a cmara trofoctica para formao de uma abertura central que permite, posteriormente, a passagem do contedo citoplasmtico dos trofcitos para o ovcito (Snodgrass, 1956). Mas antes da regresso das clulas trofocticas, formam-se espaos entre as clulas foliculares para passagem, a partir da hemolinfa, de vitelogenina que ser absorvida pelo ovcito durante a vitelognese (Fleig et al., 1991). Na ltima fase da ovognese o ovcito recoberto pelo crion, uma secreo das clulas foliculares, para posteriormente ser liberado no oviduto.
Figura 1: Desenho esquemtico de um ovarolo de Drosophila (Bning, 2006). Espermatognese em Abelhas Melferas A espermatognese se inicia em abelhas melferas com a diviso de uma clula-tronco germinativa tambm chamada de espermatognia primria que se localiza ao redor da clula somtica apical (Figura 2). A diviso origina uma nova clula-tronco e uma espermatognia secundria, o cistoblasto, comprometido com o processo de diferenciao (Cruz-Landim, 2004). Cada cistoblasto envolvido por uma clula somtica chamada clula cisto e passa por uma srie de divises mitticas incompletas, originando cistcitos conectados por pontes citoplasmticas (Hoage & Kessel, 1968). Em seguida o cisto forma uma roseta com as pontes citoplasmticas posicionadas centralmente e preenchidas pelo fusoma (Bning, 1994; Tozetto, 1997). Aps o trmino das divises mitticas, os cistcitos entram na prfase da meiose, originando espermatcitos primrios que abortam a primeira diviso da meiose. Ocorre duplicao e condensao do DNA, mas no lugar da diviso celular, h eliminao de centrolos supranumerrios, aps a qual, os espermatcitos primrios passam a ser chamados de espermatcitos secundrios (Hoage & Kessel, 1968). Estes, por sua vez, sofrem diviso mittica que origina espermtides de tamanhos diferentes, das quais somente a maior forma espermatozide pelo processo de espermiognese.
356
Figura 2: Desenho esquemtico de um testolo maduro (CRUZ-LANDIM, 2004). Ca -clula apical, ci - clulas do cisto, ct - cistcitos, e - espermatozides, ep - espermtides, ept - espermatcitos, espA - espermatognia A, espB - espermatognia B ou cistoblasto, fu fusoma. Superfamlia de Caderinas A superfamlia de caderinas composta por glicoprotenas transmembranas responsveis pela adeso intercelular mediada por ons Ca+2 (Kemler et al., 1977; Takeichi, 1977; Hyafil et al., 1980; Hirano et al., 1987). Os membros mais conhecidos pertencem ao grupo de caderinas clssicas como E-caderina (epitlio) e N-caderina (clulas neuronais), assim nomeadas em funo dos tecidos nos quais foram encontradas inicialmente (Bertolotti et al, 1980; Nose & Takeichi, 1986). Caderinas clssicas apresentam uma regio extracelular, poro transmembrana unipasso em -hlice e domnio citoplasmtico conservado. A regio extracelular contm cinco repeties s quais se ligam os ons Ca+2 que protegem a protena da degradao (Takeichi, 1977; Hatta et al., 1988). A adeso intercelular do tipo homoflica e mediada, em E-caderinas, pela primeira repetio da regio extracelular conforme observado por Tomschy et al. (1996). Primeiramente formado um dmero na superfcie de uma clula, para posterior associao de dois dmeros de clulas adjacentes que originaro um tetrmero. Outros grupos que compem a superfamlia de caderinas so as glicopretenas desmossomais que interagem com filamentos intermedirios, as protocaderinas que apresentam seis repeties extracelulares, Fat com trinta e quatro repeties extracelulares e Flamingo ou Starry Night com sete domnios transmembrana e nove repeties extracelulares. Papel das Caderinas na Organizao Estrutural dos Ovarolos e Testolos Em Drosophila, a E-caderina essencial para o ancoramento de clulas-tronco germinativas no germrio de ovarolos e testolos, estabelecendo, por junes aderentes, o contato entre as mesmas e as clulas somticas do filamento terminal que secretam protenas responsveis pelo controle da diviso e diferenciao das clulas-tronco germinativas (King et al., 2001; Song et al., 2002; Yamashita et al., 2003). O posicionamento do ovcito no folculo tambm depende da expresso de caderinas na membrana dos trofcitos e do prprio ovcito (Godt & Tepass, 1998). Na ausncia de E-caderina, o ovcito no migra para a extremidade posterior do folculo (Gonzles-Reyes & St. Johnston, 1998). Mutaes no gene armadillo, codificador de uma protena com mesmo nome que interage com o domnio citoplasmtico da caderina (Peifer & Wieschaus, 1990), apresentam efeitos similares aos
357
observados com mutaes no gene shotgun, que codifica E-caderina, como a impossibilidade de migrao do ovcito para a regio posterior do folculo (Peifer et al., 1993). Esses estudos mostram a importncia das junes formadas por caderinas na gametognese de Drosophila, que asssim como Apis mellifera, apresenta ovrio merostico politrfico.
Objetivos
- Imunolocalizao de caderinas em ovrios e testculos para anlise de sua distribuio nas gnadas e concluses sobre seu possvel papel na gametognese de Apis mellifera. - Identificar a expresso de alguns membros da superfamlia de caderinas nas gnadas.
Materiais e Mtodos
Abelhas Neste trabalho foram utilizadas abelhas rainhas adultas, virgens e acasaladas, aps confinamento em colmias tipo recria entre 3 e 25 dias e larvas de zango na fase L5F3 (peso entre 270 e 400mg) da espcie Apis mellifera do Apirio Experimental do Departamento de Gentica da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo. Imunofluorescncia As gnadas foram removidas em Ringer e posteriormente fixadas em paraformaldedo 4% diludo em PBS(100mM; pH 7.4) por uma hora a temperatura ambiente. A permeabilizao das membranas foi feita com PBST (Triton X-100 2%) e o bloqueio dos stios inespecficos foi realizado por imerso de 1 hora em BSA (1%) e 1 hora em PBSBT (BSA 0.1%; soro no-imune de cabra 10%). Para imunofluorescncia foi utilizado anticorpo primrio policlonal anti-pan-caderina produzido em coelho. No primeiro experimento o anticorpo foi diludo a 1:100 em PBST-BSA (0.1%) e no segundo a 1:25 em PBST-BSA (0.1%). A incubao em anticorpo primrio foi feita durante 24 horas a 4C. Aps as lavagens com PBS e PBST foi feita a incubao em anticorpo secundrio por 3 horas a temperatura ambiente. O anticorpo secundrio era fragmento F(ab) de anticorpo policlonal anti-IgG de coelho, produzido em ovelha e conjugado Cy3 (Sigma). A diluio do anticorpo secundrio foi de 1:1000 em PBST-BSA (0.1%) no primeiro experimento e 1:300 no segundo. Para marcao nuclear no segundo experimento,as gnadas foram incubadas durante 30 minutos com Hoechst (0.05g/ml) em PBST e as lminas foram montadas em glicerol e n-propilgalato (glicerol 90%; n-propilgalato 3%; PBS 0.1M). As anlises foram realizadas por microscopia laser confocal - Sistema Leica TCS-SP5 e TCS-SP2, respectivamente (Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Pategnicos, FMRP-USP). RT-PCR Para Anlise da Expresso de Caderinas Testculos e ovrios foram homogeneizados em TRIzol (Invitrogen) cada um e estocados para extrao do RNA conforme protocolo sugerido pelo fabricante. Antes da leitura em espectrofotmetro, as amostras foram tratadas com DNAse (livre de RNase) diluda em gua DEPC, durante 40 minutos, a 37C em banho seco. A inativao da DNAse foi feita em banho seco, durante 15 minutos, a 70C. Para quantificao, o RNA foi diludo em gua com DEPC. A leitura a 260 e 280 nm foi feita em sistema Genequant (Amersham).As primeiras fitas cDNAs foram obtidas a partir de 2g de RNA. Oligo(dt) (Invitrogen) foi utilizado como primer para sntese
358
da primeira fita e a enzima SuperScriptTM (Invitrogen) foi utilizada segundo as instrues do fabricante. O volume final da reao foi 20l. As amplificaes dos genes especficos foram realizadas com a enzima Platinum Taq DNA Polimerase (Invitrogen) ou com PCR Master Mix (Eppendorf), utilizando-se primers desenhados a partir de seqncias preditas para caderinas de Apis mellifera .
Resultados
Imunofluorescncia No primeiro experimento foi possvel observar marcao para caderinas em clulas do filamento terminal, consideradas como possveis clulas-tronco da linhagem germinativa (Tanaka, 2002; Tanaka & Hartfelder, 2004). So clulas que se encontram intercaladas entre as clulas somticas e apresentam contedo citoplasmtico reduzido, em contraste com os ncleos grandes (Tanaka, 2002). A imunomarcao perinuclear para caderinas evidencia o aspecto arredondado dessas clulas (Figura 3A), ao contrrio das clulas somticas que so achatadas. Um foco nuclear de caderinas tambm foi detectado, provavelmente co-localizado com o nuclolo das clulas (Figura 3A). No incio da formao dos folculos pr-vitelognicos as clulas trofocticas e os ovcitos apresentam marcao distribuda por todo o citoplasma, (Figura 3B), assim como alguns pontos de concentrao de caderinas nos ncleos das clulas trofocticas. Folculos pr-vitelognicos mais adiantados, com clulas foliculares rodeando os ovcitos, tambm possuem marcao citoplasmtica ao redor dos ncleos tanto nas clulas germinativas quanto nas somticas (Figura 3C) e esse padro se mantm ao longo do ovarolo, mesmo aps a separao entre a cmara do ovcito e a cmara trofoctica e o total envolvimento do ovcito pelas clulas foliculares (Figura 3D).
Figura 3: Localizao de caderinas por imunofluorescncia em ovarolos de rainhas adultas. (A) Filamento terminal com supostas clulas germinativas marcadas perinuclearmente (seta) e pontualmente no ncleo (cabea de seta). (B) Clulas trofocticas (seta) e ovcitos (estrela) de folculos pr-vitelognicos, em incio de formao no germrio, apresentam marcao distribuda pelo citoplasma. Focos pontuais de caderinas podem ser observados nos ncleos das clulas trofocticas (cabea de seta). (C) Folculo pr-vitelognico com clulas foliculares situadas ao redor do ovcito marcadas perinuclearmente (seta) e pontualmente no ncleo (cabea de seta). (D) A distribuio das caderinas pelo citoplasma do ovcito (seta) e dos trofcitos (cabea de seta) mantida mesmo aps a separao das respectivas cmaras.
359
No segundo experimento, as clulas somticas do filamento terminal foram analisadas e notouse que as caderinas esto distribudas pelo citoplasma reduzido ao redor do ncleo (Figura 4A). Marcaes pontuais nos ncleos tambm esto presentes, conforme observado nas putativas clulas-tronco germinativas. No incio da formao das rosetas, localizadas no germrio, a imunomarcao pode ser visualizada no citoplasma dos cistcitos (Figura 4B), porm, no possvel observar concentrao pontual de caderinas nos ncleos, talvez devido ao menor aumento da imagem. O mesmo padro permanece posteriormente na regio do germrio (Figura 4C), na qual as rosetas esto mais distanciadas entre si e apresentam nmero maior de cistcitos (Tanaka, 2002). Quando os folculos pr-vitelognicos comeam a se formar, a localizao citoplasmtica das caderinas fica mais evidente nas clulas germinativas (Figura 4D e 4E) com distribuio uniforme, sem evidncias de acmulo na membrana plasmtica ou em pontos de adeso intercelular. Em clulas trofocticas esto presentes os pontos nucleares de concentrao das caderinas. Aps a separao entre a cmara trofoctica e a cmara do ovcito, todas as clulas germinativas permanecem com marcao distribuda pelo citoplasma (Figura 5A e 5B). Os pontos focais de caderinas nos ncleos dos trofcitos aumentam em nmero e diminuem em tamanho, acompanhando o processo de poliploidizao das clulas. Folculos vitelognicos apresentam caderinas dispersas pelo citoplasma das clulas foliculares e germinativas (Figuras 5C e 5D).
Figura 4: Localizao de caderinas por imunofluorescncia em ovarolos de rainhas adultas. (A) Clulas somticas do filamento terminal com caderinas distribudas pelo citoplasma ao redor do ncleo (seta) e concentradas pontualmente no ncleo (cabea de seta). (B) Incio da formao das rosetas com cistcitos marcados no citoplasma (seta). (C) Regio do germrio com rosetas mais afastadas, nas quais os cistcitos apresentam o mesmo padro de imunolocalizao observado na figura C (seta). (D) Folculo pr-vitelognico com marcao no citoplasma do ovcito (asterisco) e dos trofcitos (seta) que tambm apresentam pontos focais de caderinas no ncleo (cabea de seta). (E) Folculo pr-vitelognico com marcao no citoplasma (seta) e pontualmente no ncleo (cabea de seta) dos trofcitos
360
Figura 5: Localizao de caderinas por imunofluorescncia em ovarolos de rainhas adultas. (A) Aps a separao entre as cmaras dos trofcitos e do ovcito, as caderinas permanecem dispersas por todo o citoplasma das clulas trofocticas (cabea de seta) e o nmero de pontos focais nos ncleos aumenta (seta). (B) O ovcito (asterisco) e as clulas foliculares (seta), localizados na cmara ovoctica, tambm apresentam marcao citoplasmtica. Concentraco pontual de caderinas pode ser observada nos ncleos das clulas foliculares (cabea de seta). (C) Clulas trofocticas de folculo vitelognico com marcaes no citoplasma (seta) e marcaes na regio do ncleo (cabea de seta). (D) Ovcito de folculo vitelognico com caderinas dispersas pelo citoplasma (asterisco) e ncleos acessrios marcados com Hoechst (seta). Testolos de larvas de zango na fase L5F3 tambm foram preparados para o primeiro experimento e apresentaram marcao ao longo dos tbulos (Figura 6A). O padro observado para localizao das caderinas no permite distinguir as clulas ou identific-las (Figura 6B), mas a imunomarcao provavelmente est distribuda no citoplasma das clulas germinativas e somticas e concentrada em alguns pontos nucleares ao longo dos testolos (Figura 6B). Testolos tambm foram analisados no segundo experimento. Na regio do germrio, as caderinas so visualizadas de forma nitidamente agregada por todo o citoplasma das espermatognias (Figura 6C). Nos ncleos, so observados alguns focos de marcao mais intensa, mas analisando a imagem no se pode saber se esto localizados dentro ou ao redor dos ncleos. Prosseguindo em direo regio posterior dos tbulos, o padro de marcao citoplasmtica permanece o mesmo, distino das clulas somticas e germinativas (Figura 6D).
361
Figura 6: Localizao de caderinas por imunofluorescncia em testolos de larvas de zango na fase L5F3. (A) Testolo com caderinas localizadas ao longo do tbulo. (B) Marcao citoplasmtica nas clulas germinativas e somticas (seta), sem possibilidade de identificao das mesmas. Alguns pontos com marcao mais intensa podem ser observados ao longo dos tbulos (cabea de seta). (C) Espermatognias, localizadas no germrio dos testolos, apresentam caderinas distribudas de forma agregada pelo citoplasma (seta) e alguns focos mais intensos na regio dos ncleos (cabea de seta). (D) Pontos de concentrao de caderinas (cabea de seta) so observados nos testolos enquanto marcao menos intensa, provavelmente no citoplasma das clulas germinativas e somticas, distribuda pelos tbulos (seta). Anlise de Expresso por RT-PCR Como a regio citoplasmtica da N-caderina de galinha utilizada para a sntese dos anticorpos primrios, o gene predito para codificao dessa protena, em Apis mellifera, foi um dos primeiros escolhidos para amplificao por PCR convencional. O gene shotgun, que codifica a E-caderina, tambm foi selecionado devido alta similaridade entre os domnios citoplasmticos de caderinas clssicas, enquanto o gene que codifica Starry Night foi escolhido pelo fato de ser a protocaderina mais prxima das caderinas clssicas. Os trs genes preditos foram identificados em Apis mellifera, por similaridade com os ortlogos de Drosophila. Com base em imunomarcaes de Fat1 humana, obtidas em ncleos de clulas HeLa e HEK293 (Magg et al., 2005), os primers foram desenhados a partir do ortlogo de Drosophila. Entretanto, o verdadeiro gene ortlogo de fat1 humano, em Drosophila, o gene fat-like ou fat2 (Castillejo-Lpez et al., 2004) que teve seu predito identificado para elaborao dos primers. Para anlise de expresso de cada gene, dois pares de primers foram desenhados. Nas respectivas RT-PCRs, detectamos a presena de transcritos de todos estes genes preditos, tanto em ovrios de rainha acasalada, quanto em testculos de larva de zango na fase L5F3. Para N-caderina foram desenhados quatro pares de primers, pois amplificaes realizadas com os dois primeiros pares, em ovrios de rainha, resultaram em duas bandas (Figura 7), provavelmente representando isoformas de N-caderina, conforme j detectado em Drosophila (Zhu & Luo, 2004).
362
Figura 7: Deteco por PCR convencional dos transcritos de shotgun, starry night, N-caderina, fat e fat-like em ovrios de rainhas adultas e testculos de zanges na fase larval L5 F3. Os nmeros abaixo das bandas representam os pares de primers utilizados, cuja numerao segue a seqncia presente em Materiais e Mtodos.
Discusso
Poucos trabalhos foram publicados a respeito da localizao e do papel das caderinas em invertebrados para que possamos estabelecer uma comparao com os resultados obtidos. A espcie mais estudada certamente Drosophila melanogaster na qual a importncia das caderinas foi observada em diversos processos, entre eles, a ovognese. Entretanto, os estudos mostram a localizao de caderinas na superfcie celular e os efeitos decorrentes da perda de adeso entre as clulas, diferindo de nossas anlises que evidenciam localizao diferenciada de caderinas em gnadas de Apis mellifera. Como nossos experimentos foram realizados com anticorpos policlonais pan-caderina, no surpreende que o padro apresentado seja diferente do de Drosophila. Raras so as imunomarcaes especficas para E-caderina que demonstrem a disperso da protena por todo o citoplasma. Um exemplo o embrio humano, cujas clulas, at o quarto dia de desenvolvimento, apresentam marcao citoplasmtica (Alikani, 2005). No quarto dia, a marcao deslocada para reas de contato intercelular, um passo considerado fundamental para que ocorra a compactao do embrio (Alikani, 2005). Outro exemplo a aranha marrom, Loxosceles intermedia, cujos ovcitos nos estgios iniciais apresentam caderinas localizadas ao redor dos ncleos e posteriormente, nos estgios mais avanados, distribudas por todo o citoplasma (Morishita, 2003). A autora sugere que as caderinas tm funo de pool materno a ser utilizado no incio da ovognese. O mesmo poderia ser sugerido para Apis mellifera, porm, o padro de localizao citoplasmtica das caderinas observado tanto nos ovarolos quanto nos testolos analisados e no somente em clulas germinativas, mas tambm em clulas somticas, como as situadas na bainha peritoneal. O padro de distribuio parece ser o mesmo independente do tipo celular ou do sexo.Uma hiptese seria a de que caderinas apresentam alguma outra funo nas clulas alm da adeso intercelular, embora no possamos dizer qual. A deteco de caderinas nos ncleos das clulas parece confirmar essa hiptese. Outra possibilidade que as caderinas reconhecidas no sejam protenas inteiras, mas talvez apenas a poro citoplasmtica, conforme observado em imunomarcaes para Fat1 humana em clulas HeLa e HEK293 que demonstraram a presena do domnio citoplasmtico da protena endgena no nucleoplasma das clulas, enquanto uma protena quimrica com o mesmo domnio citoplasmtico, fusionado a GFP, foi detectada nos nuclolos e em estruturas nucleares pontuais que lembram speckles (Magg et al., 2005). Os resultados obtidos so corroborados pela presena de um motivo encontrado perto da regio N-terminal do domnio citoplasmtico e cuja seqncia parece determinar localizao nuclear. Uma possvel explicao para a localizao de Fat1 seria o envolvimento da protena em uma via de sinalizao entre o ncleo e a membrana plasmtica, assim como para a localizao de caderinas em gnadas de Apis mellifera. No filamento terminal de rainhas virgens de Apis mellifera, actina foi visualizada pontualmente nos ncleos de algumas clulas, aparentemente co-localizada com os nuclolos (Tanaka & Hartfelder, 2004). Imunolocalizao para -tubulina, ao contrrio, apresenta um padro mais prximo ao observado para caderinas, com marcaes no citoplasma perinuclear e nos ncleos tanto das clulas germinativas quanto das somticas observadas ao longo dos ovarolos (Tanaka & Hartfelder, 2004). Os resultados indicam funes alternativas, alm da adeso intercelular, para protenas do citoesqueleto nos ncleos de diferentes tipos celulares em Apis mellifera.
363
Algumas diferenas entre as marcaes nucleares podem ser notadas entre os experimentos de imunofluorescncia. No primeiro experimento os pontos focais nucleares so claramente visualizados nas clulas dos testolos, conforme observado em imunodeteco por peroxidase, enquanto no segundo experimento as marcaes parecem ser mais escassas ao longo dos tbulos. Provavelmente as diferenas entre os resultados obtidos so conseqncia da afinidade ente cada anticorpo primrio e caderinas. Referncias Bibliogrficas Alikani M (2005). Epithelial cadherin distribution in abnormal human pre-implantation embryos. Human Reproduction, 20:3369 3375. Bertolotti R, Rutishauser U, Edelman GM (1980). A cell surface molecule involved in aggregation of embryonic liver cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 77:4831 4835. Bning J (1994).The insect ovary. Chapman and Hall, London. Bning J (2006). Ovariole structure supports sistergroup relationship of Neuropterida and Coleoptera. Arthropod Systematics and Phylogeny, 64:115 126. Castillejo-Lpez C, Arias WM, Baumgartner S (2004). The fat-like gene of Drosophila is the true orthologue of vertebrate fat cadherins and is involved in the formation of tubular organs. Journal of Biological Chemistry, 279:24034 24043. Cruz-Landim C (2004). Biologia do desenvolvimento em abelhas. Rio Claro. http://www.rc.unesp. br/ib/biologia/Cap2.pdf Fleig R., Gutzeit HO, Engels W (1991). Structural organization of ovarian follicle cells in the cotton bug (Dysdercus intermedius) and the honeybee (Apis mellifera). Cell Tissue Research, 265:297 305. Godt D, Tepass U (1998). Drosophila oocyte localization is mediated by differential cadherin-based adhesion. Nature, 395:387 391. Gonzles-Reyes A, St Johnston D (1998). The Drosophila AP axis is polarised by the cadherin-mediated positioning of the oocyte. Development, 125:3635 3644. Gutzeit HO, Zissler D, Fleig R (1993). Oogenesis in the honeybee Apis mellifera: cytological observations on the formation and differentiation of previtellogenic ovarian follicles. Rouxs Archive of Developmental Biology, 202:181191. Hatta K, Nose, A, Takeichi M (1988). Cloning and expression of cDNA enconding a neural calciumdependent cell adhesion molecule: its identity in the cadherin gene family. Journal of Cell Biology, 106:3525 3534. Hirano S, Nose A, Hatta K, Kawakami A, Takeichi M (1987). Calcium-dependent cell-cell adhesion molecules (cadherins): subclass specificities and possible involvement of actin bundles. Journal of Cell Biology, 105:2501 2510. Hoage TR, Kessel RG (1968). An electron microscope study of the process of differentiation during spermatogenesis in the drone honey bee (Apis mellifera L.) with special reference to centriole replication and elimination. Journal of Ultrastructure, 24:6 32. Hyafil HF, Morello D, Babinet C, Jacob F (1980). A cell surface glycoprotein involved in compaction of embryonal carcinomal cells and cleavage stage embryos. Cell, 21:927 934. Kemler R, Babinet C, Eisen H, Jacob F (1977). Surface antigen in early differentiation. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States, 74:4449 4452. King RC (1970). Ovarian development in Drosophila melanogaster. Academic Press, New York. King R C, Bning J (1985). The origin and functioning of insect oocytes and nurse cells. In: G.A.
364
Kerkut, L.I. Gilbert, Comprehensive Insect Physiology Biochemistry and Pharmacology, London: Pergamon Press, 1:37-82. King FJ, Szakmary A, Cox DN, Lin H (2001). Yb modulates the divisions of both germline and somatic stem cells through piwi- and hh-mediated mechanisms in the Drosophila ovary. Molecular Cell, 124:497 508. Magg T, Schreiner GPD, Solis EGB, Hofer HW (2005). Processing of the human protocadherin Fat1 and translocation of its cytoplasmic domain to the nucleus. Experimental Cell Research, 307:100 108. Morishita R (2003). Estudo das interaes entre ovcitos e clulas foliculares no ovrio da aranha marrom, Loxosceles intermedia. Dissertao, Universidade Federal do Paran, Curitiba. Nose A, Takeichi M (1986). A novel cadherin adhesion molecule: Its expression pattern associated with implantation and organogenesis of mouse embryos. Journal of Cell Biology, 163:2649 2658. Peifer M, Wieschaus E (1990). The segment polarity gene armadillo encodes a functionally modular protein that is the Drosophila homolog of human plakoglobin. Cell, 63:1167 1178. Peifer M, Orsulic S, Sweeton D, Wieschaus E (1993). A role for the Drosophila segment polarity gene armadillo in cell adhesion and cytoskeletal integrity during oogenesis. Development, 118:1191 1207. Snodgrass RE (1956). Anatomy of the honey bee. Cornell University Press, London. Spradling, A.; Drummond-Barbosa, D.; Kai, T. (2001) Stem cells find their niche. Nature, 414:98 104. Song X, Zhu C, Doan C, Xie T (2002). Germline stem cells anchored by adherens junctions in the Drosophila ovary niches. Science, 296:1855 -1857. Takeichi M. (1977). Functional correlation between cell adhesive properties and some cell surface proteins. Journal Of Cell Biology, 75:464 474. Tanaka ED (2002). Das clulas-tronco ao ovcito: fases iniciais da ovognese nas castas em Apis mellifera. Dissertao, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto. Tanaka ED, Hartfelder K (2004). The initial stages of oogenesis and their relation to differential fertility in the honey bee (Apis mellifera) castes. Arthropod Structure & Development, 33:431 442. Tomschy A, Fauser C, Landwehr R, Engel J (1996). Homophilic adhesion of E-cadherin occurs by a co-operative two-step interaction of N-terminal domains. EMBO Journal, 15:3507 3514. Tozetto SO (1997). Hormonelle Steuerung in der Entwicklung von Drohnen (Apis mellifera carnica). Dissertation, Eberhard-Karls Universitt Tbingen, Tbingen. Yamashita YM, Jones DL, Fuller MT (2003). Orientation of asymmetric stem cell division by the APC tumor suppressor and centrosome. Science, 301:1547 1550. Zhu H, Luo L (2004). Diverse functions of N-cadherin in dendritic and axonal terminal arborization of olfactory projection neurons. Neuron, 42:63 75.
365
A Via de Sinalizao de Insulina em Apis mellifera

Sergio Vicente de Azevedo1, Klaus Hartfelder2 Universidade de So Paulo-Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, 1Departamento de Gentica, 2 Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patognicos, Avenida Bandeirantes 3900, 14049-900 Ribeiro Preto, SP Brasil. E-mail adress: 1svazevedo@rge.fmrp.usp.br (Azevedo, S.V), 2Klaus@fmrp.usp.br (K.Hartfelder) The insulin signaling pathway in honeybee Apis mellifera
Abstract
The insulin/insulin-like signaling (IIS) pathway is an evolutionarily conserved module in the control of body size and correlated organ growth in metazoans. In the highly eusocial bees, the caste phenotypes differ not only in size and several structural features but also in individual fitness and life history. We investigated the developmental expression profiles of genes encoding the two insulin-like peptides (AmILP-1 and AmILP-2) and two insulin receptors (AmInR-1 and AmInR-2) predicted in the honeybee genome. Quantitative PCR analysis for queen and worker larvae in critical stages of caste development showed that AmILP-2 is the predominantly transcribed ILP in both castes, with higher expression in worker than in queens. Expression of both InR genes sharply declined in fourth instar queen larvae, but showed little modulation in workers. On first sight, these findings are non-intuitive, considering the higher growth rates of queens, but they can be interpreted as possibly antagonistic crosstalk between the IIS module and juvenile hormone. Analyzing AmInR-1 and AmInR-2 expression in ovaries of queen and worker larvae revealed low transcript levels in queens and a sharp drop in AmInR-2 expression in fifth instar worker larvae, indicating relative independence in tissue-specific versus overall IIS pathway activity.
Introduo
Em uma colmia de Apis mellifera encontram-se duas castas fmeas, operrias e rainhas, que so distintas quanto a morfologia, anatomia, fisiologia, longevidade e comportamento (Page and Peng, 2001) oque pode garantir uma maior eficincia na execuo das suas respectivas tarefas: reprodutivas (rainha) e manuteno da colnia (operrias). As diferenas morfolgicas e fisiolgicas so definidas durante os primeiros trs dias e meio de vida larval por fatores externos, especialmente a nutrio (Rembold and Hanser, 1964; Weaver, 1975). A alimentao diferenciada em qualidade e quantidade das larvas de operrias e rainhas gera ambientes distintos dentro dos organismos de cada casta oque causa respostas diferenciais neuroendcrinas (Wilde, 1976), endcrinas (Hartfelder and Engels, 1998) e transcricionais (Evans and Wheeler, 2000; Cristino et al., 2006) que levam ao desenvolvimento de dois fentipos distintos nas fmeas adultas. Conforme os modelos estudados at agora, a expresso de fentipos alternativos em insetos , na sua maioria, dependente de fatores ambientais que so traduzidos em respostas especficas do sistema endcrino, principalmente nos ttulos de HJ e de ecdisterides (Ecd) (para reviso ver: Dingle
366
and Winchell, 1997; Hartfelder, 2000a; Hartfelder, 2000b; Hartfelder and Emlen, 2005). No entanto, nem todas as respostas observadas podem ser explicadas com relao a esses dois hormnios as quais deixam lacunas quanto a integrao dos sinais extrnsecos (alimentao) com as respostas intrnsecas (neuroendcrinas, endcrinas e transcricionais). O mdulo de sinalizao insulina-receptor de insulina (IIS) representa um dos mais antigos e evolutivamente conservados sistemas de sinalizao no controle do crescimento de metazorios e est relacionado a diferentes processos como: crescimento e proliferao celular, regulao do envelhecimento, metabolismo energtico e fertilidade (Brogiolo et al., 2001; Oldham and Hafen, 2003; Stern, 2003). De um modo geral, o mdulo IIS reage a alteraes em concentraes de nutrientes, principalmente aucares, e as traduzem em respostas adequadas de acordo com o tecido e a fase da vida do organismo. Estudos em insetos mostraram que a insulina e peptdeos similares insulina so produzidos por clulas neurosecretoras do crebro em resposta a alimentao (Wu and Brown, 2006). A via de sinalizao IIS participa de eventos como crescimento e proliferao celular, regulao do envelhecimento, metabolismo energtico e fertilidade os quais so sabidamente distintos entre as castas de Apis mellifera oque intuitivamente leva suspeita do papel da via IIS como um dos componentes de sinalizao chave envolvidos na integrao do estmulo ambiental com as respostas intrnsecas caractersticas de cada casta. Nos ltimos dois anos, tal suspeita vem se demonstrando realidade e o papel da via IIS no processo de diferenciao de castas est sendo colocado tona. Wheeler e colaboradores (2006) analisando por qPCR os genes codificadores para o peptdeo insulnico 1 (AmILP-1, GB17332), para o peptdeo insulnico 2 (AmILP-2, GB10174) e para o receptor de insulina-2 (AmInR-2, GB 18331) durante o segundo, terceiro e quarto instars larvais em amostras de operrias e rainhas submetidas a transferncias recprocas, as influncias de cada tipo de nutrio na transcrio dos componentes da via IIS. Wheeler e colaboradores (2006) observaram que os nveis de transcrio dos mRNAs dos genes AmILP-1, AmILP-2 e AmInR-2 variavam de acordo que o meio onde as larvas eram postas. Corona e colaboradores (2007) demonstraram diferenas na expresso de AmILP-1 na cabea de operrias e rainhas de diferentes idades e verificaram que em rainha ocorre uma diminuio na sinalizao IIS no sentido de aumentar o tempo de vida, enquanto que em operrias foi observado o contrrio, pois a expresso de AmILP-1 aumentou cerca de dez vezes nas operrias de um ms. Patel e colaboradores (2007) verificaram aps tratamento de larvas de abelhas com RNAi e com o farmaco rapamicina (o inibidor de TOR) que a elevada atividade do gene TOR est relacionada com o destino das larvas em se tornarem rainhas. No presente estudo investigamos de maneira mais aprofundada os nveis de transcritos dos genes codificadores dos peptdeos de sinalizao insulnicos (AmILP-1 e AmILP-2) e dos receptores (AmInR-1, GB15492, e AmInR-2) em larvas de rainhas e operrias, focando principalmente nos quartos e quintos intars larvais onde ocorrem os maiores perodos de crescimento e a entrada na metamorfose. Adicionalmente, verificamos a transcrio dos componentes da via IIS em amostas de ovrios e as comparamos com as amostras de corpo inteiro.
Material e Mtodos
Utilizamos nesse trabalhos larvas de operrias e rainhas de abelhas Apis mellifera africanizadas mantidas em nosso apirio mantido junto ao departamento de gentica da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto-USP. As larvas de operrias, coletadas diretamente dos quadros
367
das colmias, e as rainhas, obtidas por transfrencias de larvas no primeiro instar, foram classificadas de acordo com o peso e tamanho do dimetro da cpsula cellica seguindo critrio de Michelette e Soares (1993) estabelecido para abelhas africanizadas. Os larvas ps tecelagem do csulo e pr-pupas foram classificados de acordo com critrios morfolgicos definidos por Rachinsky e colaboradores (1990) e as pupas foram classificadas de acordo com a colorao dos olhos e pigmentao do corpo (Rembold et al., 1980). As amostras foram homogeneizadas em TRIzol (Invitrogen) e a extrao seguiu-se de acordo com o protocolo para extrao de RNA total indicado pelo fabricante. Os RNAs obtidos foram tratados com DNAse para remover possveis contaminaes e a sntese da primeira fita de cDNA ocorreu a partir de 2,5g de RNA para as amostras de corpo inteiro e 0,9g de RNA para as amostras de ovrios as quais foram incubadas com a enzima transcriptase reversa SuperscriptII (Invitrogen) e com primers Oligo(dT)12-18. Os produtos da reao (o perfil genmico de cDNA) foram utilizados para as amplificaes por qPCR. Os primers utilizados para os genes codificados dos peptdeos insulnicos AmILP-1 e AmILP-2 e AmInR-2 foram previamente validados por Wheeler e colaboradores (2006) e o par de primers do gene codificador do receptor de insulina 1 ( AmILP1 ) validado por (Azevedo and Hartfelder, 2008). Como controle endgeno utilizamos o gene da protena ribossomal 49, j validado por Loureno e colaboradores (2008). Os estudos de PCR quantitativa (Real Time) foram perfomados usando-se a metodologia SYBR Green (Applied Biosystems) no sistema Real Time PCR 7500 (Applied Biosystems). A especficidade dos produtos foram checadas por curva de melting e a verificao do tamanho do fragmento em gel de Agarose 1,2%. A eficincia dos primers foram verificadas atravs de PCRs com dilues seriais de 1:10 de amostras de cDNA e considerados satisfatrios apenas os pares de primers que com um coeficiente r>0,95 e valores E prximo de 2. Todas as reaes foram realizadas em triplicatas. Para obteno dos valores de C T (quantificao relativa) utilizados na confeco dos grficos seguimos a metodologia Pfaffl (2001). Para validar os dados estatsticamente utilizamos do teste ANOVA two-ways seguida da correo de Bonferroni.
Resultados
Transcrio dos genes codificadores dos peptdeos insulnicos Em ambas as castas o peptdeo insulnico AmILP-2 foi mais transcrito do que AmILP-1 (figura 1A). A transcrio dos genes codificadores de ILP, especialmente o AmILP-2, aumentou gradualmente durante os estgios de alimentao do ltimo instar larval (L5F1-F3). Esse padro foi observado em ambas as castas, ainda que em larvas de operrias o aumento dos transcritos de AmILP-2 ocorreu mais cedo. Mudando a perspectiva e olhando separadamente os padres de transcrio dos ILPs entre as castas (Figura 1B), a diferena na regulao do tempo entre as larvas de rainhas e operrias tornou-se mais evidente. Em rainhas a transcrio do AmILP-1 alcanou seu pico nos estgios L5F1-L5F2 quando o crescimento das larvas de rainhas maior do que o crescimento das larvas de operrias. Para o peptdeo do gene AmILP-2, o ILP predominantemente transcrito, foi observado uma relao invertida com as larvas de operrias apresentando o nvel de transcrio mais pronunciado e com a maior diferena em relao aos de rainha em L5F3. A diferena na transcrio do gene AmILP-2 ainda se mantem em L5S1, aps tecelagem do csulo, enquanto que para o gene AmILP-1 os nveis de transcrio cairam em nveis basais ao trmino da fase de alimentao e ingresso no programa de metamorfose.
368
Fig. 1. Anlise por PCR quantitavia dos genes codificadores dos peptdeos insulnicos: AmILP-1 e AmILP-2 no desenvolvimento de castas em abelhas. O perodo estudado cobre do terceiro instar at o final do estgio de alimentao no quinto instar larval de rainhas e operrias. O painel esquerda (A) compara os nveis de transcrio de AmILP-1 e AmILP-2 separadamente para cada casta. O painel direita (B) compara a modulao dos nveis de transcrio de cada gene codificador de ILP entre as castas. Foram analisadas trs amostras independents em cada estgio do desenvolvimento em triplicatas e normalizadas para a protena ribossomal RP49. Representando as mdias SEM das amostras. As diferenas estatisticamente significativas foram indicadas por asterisco (ANOVA, Bonferroni post hoc test, * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001). Transcrio dos genes codificadores dos receptores de insulina Quando comparamos os nveis de transcrio dos dois genes codificadores para os receptores de insulina em ambas as castas separadamente, verificamos um padro temporal semelhante para ambos os receptores dentro de cada casta e, embora no haja uma diferena significativa, os nveis dos transcritos AmInR-2 foram maiores quando comparados aos nveis dos transcritos AmInR-1 (Figura 2A).Olhando do ponto de vista entre as castas, verificamos uma variao significante entre os transcritos AmInR-1 e AmInR-2, especialmente no terceiro instar larval (Figura 2B). No estgio de desenvolvimente L3, os nveis de AmInR-1 em rainhas foi cerca de 30 vezes mais alto do que o observado em operrias, enquanto que para os transcritos do gene AmInR-2 essa diferena foi de uma vez e meia.
369
Fig. 2 Anlise por PCR quantitiativa dos genes codificadores dos receptores de insulina: AmInR-1 e AmInR-2 no desenvolvimento de castas em abelhas. O perodo estudado cobre o terceiro instar at o final do estgio de alimentao no quinto instar larval de rainhas e operrias. O painel esquerda (A) compara os nveis de transcrio dos AmInR-1 e AmInR-2 separadamente para cada casta. O painel direita (B) compara a modulao dos nveis dos transcritos de cada gene InR entre as castas. Foram analisadas trs amostras independents em cada estgio do desenvolvimento em triplicatas e normalizadas para a protena ribossomal RP49. Representando as mdias SEM das amostras. As diferenas estatisticamente significativas foram indicadas por asterisco (ANOVA, Bonferroni post hoc test, * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001). Transcrio dos genes codificadores dos receptores de insulina em ovrios de operrias e rainhas Uma vez que o desenvolvimento dos rgos reprodutivos um fator crucial na diviso de trabalho entre rainhas e operrias de insetos sociais, ns investigamos a trascrio dos dois receptores de insulina (AmInR-1 e AmInR-2) nos ovrios de larvas. Iniciamos nossas anlises no quarto instar larval e estendemos at o final do desenvolvimento pr-pupal, uma vez que nesse perodo de tempo que o nmero de ovarolos primordiais reduzido pelo programa de morte celular (Schmidt-Capella and Hartfelder, 1998). Uma vez que essas anlises foram realizadas com um pool de ovrios de organismos no mesmo estgio em uma nica amostra, no realizamos anlises estatsticas. As anlises dos transcritos para os receptores de insulina em ovrios demonstraram que ambos receptores diferem drasticamente em seus padres (Figura 3). Os nveis de AmInR-1 em ambas as castas demonstraram um aumento durante a fase prpupal, sendo que esse aumento foi mais gradual
370
em ovrios de operrias do que no de rainhas. Uma paisagem completamente diferente foi observada para os transcritos de AmInR-2. Para esse receptor, o nvel de transcrio em ovrios de rainhas variou muito pouco ao longo das fases analisadas, j o padro de transcrio observado para ovrios de operrias apresentou uma alta transcrio durante o quarto instar, seguida de um drstica reduo em L5F3. Embora pouco conclusivas essas diferenas estmulam estudos mais aprofundados sobre a regulao tecido especfica da via IIS ao longo desses estgios de desenvolvimento.
Fig. 3 Anlise por PCR quantitiativa dos genes codificadores dos receptores de insulina: AmInR-1 e AmInR-2 em ovrios de operrias e rainhas. (A) nveis de transcrio relativa para o gene AmInR-1 e (B) nveis de transcrio relativa para o gene AmInR-2. As amostras anlisadas incluem o quarto instar larval e o final do perodo pr-pupal. As barras representam os valores da expresso relativa de simples amostras por estgio do desenvolvimento, consistindo cada amostra de um pool de cDNA preparado a partir de 8-12 pares de ovrios de rainhas e operrias.
Discusso
Fazendo uso de predies dos genes relacioanados via IIS obtidos a partir do sequenciamento do genoma de abelhas (The Honey Bee Genome Sequencing Consortium 2006), ns analisamos nesse trabalho os perfis de transcrio temporal de quatro genes relacionados via IIS durante os estgios de desenvolvimento ps-embrionrio de rainhas e operrias. Nosso estudo estende os dados obtidos por Wheeler e colaboradores (2006) sobre os perfs de transcrio de dois genes codificadores para os peptdeos insulnicos (ILPs) e do gene codificador do receptor de insulina 2 (AmInR-2). Em adio, ns
371
incluimos o gene codificador do receptor de insulina 1 (AmInR-1). Enquanto Wheeler e colaboradores observaram em larvas entre 16 e 88h do desenvolvimento, final do primeiro instar larval at o quarto instar larval, os efeitos das variaes nutricionais via transferncias recprocas de um tipo de alimentao para outro, rainha para operria e vice versa, ns estendemos as anlises at a fase de inicio da metamorfose oque nos deu uma paisagem que permite relacionar os perfs dos peptdeos constituintes da via IIS com outros perfs conhecidos, como por exemplo os ttulos dos hormnios morfogenticos (HJ e Ecd). De maneira semelhante ao observado por Wheeler e colaboradores (2006) nos estgios iniciais, verificamos que o peptdeo insulnico AmILP-2 foi mais transcrito em operrias do que em rainhas tambm nos estgios larvais tardios e, alm disso, nossos resultados demonstraram que o peptdeo insulnico 2 foi predominante em ambas as castas, atingindo seus maiores nveis especialmente durante a fase de maior crescimento no quinto instar larval. nesse instar que a rainha ganha cerca de 95% de seu peso e as operrias 85% antes de entrarem em metamorfose (Wang, 1965; Rembold et al., 1980). Uma observao importante que em rainhas a expresso de ambos os receptores de insulina, inicialmente em altos nveis, apresentaram um rpido declinio aps o terceiro instar larval e se recuperando levemente na segunda metade do estgio de alimentao no quinto instar larval. Essas observaes apresentam uma relao potencialmente interessante com as curvas de crescimento geral de larvas de operrias e rainhas e tambm com os ttulos do hormnio juvenil medidos durante esses estgios (Rembold, 1987; Rachinsky et al., 1990). Larvas de operrias apresentam uma alta taxa de crescimento durante os estgios larvais iniciais sendo superado pelo crescimento das rainhas apenas no final do quarto instar larval onde a curva de crescimento de rainhas mais acentuado (Wang, 1965; Rembold et al., 1980). Essa inverso na dinmica de crescimento ocorre em um perodo quando as larvas de operrias tem sua dieta alterada de uma dieta de secrees glandulares para uma dieta modificada consistindo de secreo glandular suplementada com plem e mel (Haydak, 1970). Essa relao entre taxas de crescimento e tipos de dietas do origem a interessantes questes: Por que o nvel de transcritos de AmILP-2 maior em larvas de operrias e por que a transcrio de AmInRs decaem de maneira dramtica em larvas de rainhas mesmo que elas sejam alimentadas, com gelia real, mais frequentemente durante a fase de crescimento? De maneira similar surge outra questo, por que os nveis de AmILP-2 aumentam em larvas de operria aps a troca nutricional e por que os nveis de ambos os transcritos para os receptores de insulina apresentam baixa modulao aparente em relao a essa troca? Se operrias so simplesmente uma verso pouco nutrida de rainhas, pode-se esperar que a via IIS seja menos ativa durante os crescimentos larvais de operrias que o que ocorre para a sinalizao TOR onde os nveis mais altos de transcrio para o gene AmTOR so encontrado em rainhas e, adicionalmente, a interferncia na via TOR pelo farmacolgico rapamicina ou por RNAi fez com que as larvas destinadas a se tornarem rainhas apresentassem caractersticas de operrias (Patel et al., 2007). Embora AmTOR seja mais transcrito nos nveis iniciais em rainhas do que em operrias seus nveis so semelhantes para as duas castas na fase de tecelagem, mesmo estgio onde os nveis de transcrio do peptdeo insulnico 2 foram altos podendo estar relacionado a um mecanismo de compensao no decaimento da sinalizao via TOR. Alternativamente, os nveis de transcrio dos receptores de insulina pode no necessariamente refletir o estado de atividadeda via IIS, uma vez que Puig e colaboradores (2003) demonstraram que o estatus nutricional de moscas, refletido em seus nveis de secrees de ILP, pode levar a uma up-regulao ou down-regulao da transcrio de InR via um mecanismo de feedback envolvendo o fator de transcrio FOXO. Nossa anlise da transcrio dos receptores de insulina nas amostras de ovrios demonstrou um resultado no intuitivo, pois de maneira geral os nveis dos transcritos foram maiores em operrias do que em rainha tinhamos esperado uma maior transcrio para os ovrios de rainhas onde a ativiAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
372
dade predominante o crescimento celular (Schmidt-Capella and Hartfelder, 1998). Alm do mais, ficou claro que o padro de transcrio para os receptores de insulina apresenta caractersticas tecido especfica quando comparada ao perfil de transcrio das amostras de corpo inteiro. Tal caracterstica evidencia de maneira adicional a complexidade no controle do tamanho dos rgos durante o desenvolvimento de castas em Apis mellifera. De maneira interessante, um estudo recente dos nveis de transcritos do receptor de insulina em operrias adultas (Ament et al., 2008) revelou tambm um padro de transcrio tecido especfico quando comparadas amostras do crebro e abdomen de nutridoras com o de forrageiras, refletindo que h um status nutricional diferente nos dois estgios de vida. Em concluso, os resultados obtidos por qRT-PCR revelaram diferenas no intuitivas nos nveis dos transcritos dos dois peptdeos insulnicos e dos dois receptores de insulina nos estgios de maior crescimento do corpo de larvas de rainhas e operrias. Ns esperavamos uma relao positiva entre os componentes da via IIS e o crescimento acentuado em larvas de rainha, como sugerido para a via TOR (Patel et al., 2007). A observao da diminuio na transcrio dos receptores de insuilna abre espao para novas consideraes das possiveis interaes existentes na via IIS, como o feedback via FOXO (Puig et al., 2003), assim como as relaes entre a via IIS e os hormnios morfogenticos, particularmente em insetos que exibem plasticidade fenotpica, como as castas em insetos sociais. Tais consideraes vm emergindo a partir de estudos do crescimento em Drosophilas mutantes para genes da via IIS na glndula protorcica (Colombani et al., 2005). Conexes entre o hormnio juvenil e a via IIS vem sendo estabelecidas, principalmente, no campo da reproduo e envelhecimento em D. Melanogaster (Flatt et al., 2005; Tu et al., 2005). Em abelhas tais conexes esto sendo agora direcionadas para o contexto de diferenas quanto a reproduo e envelhecimento entre operrias e rainhas (Corona et al., 2007; Grozinger et al.,2007; Page & Amdam, 2007) e principalmente, evidncias para uma atpica regulao da sinalizao via IIS nos insetos sociais esto emergindo a partir de estudos de transcrio por qRT-PCR de genes codificadores dos peptdeos insulnicos e dos receptores de insulina em operrias nutridoras e forrageiras em relao estao do ano e seu status nutricional (Ament et al., 2008).
Bibliogrfia
Ament SA, Corona M, Pollock HS, Robinson GE (2008). Insulin signaling is involved in the regulation of worker division of labor in honey bee colonies Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 105: 4226-4231. Azevedo SV and Hartfelder H (2008). The insulin signaling pathway in honeybee (Apis mellifera) caste development-differential expression of insulin-like peptides and insulin receptors in queen and worker larvae. Journal of Insect Physiology (aceito para publicao em 11 de abril de 2008). Brogiolo W, Stocker H, Ikeya T, Rintelen F, Fernandez R, Hafen E (2001). An evolutionarily conserved function of the Drosophila insulin receptor and insulin-like peptides in growth control. Current Biology 11: 213-221. Colombani J, Bianchini L, Layalle S, Pondeville E, Dauphin-Villemant C, Antoniewski C, Carre C, Noselli S, Leopold P (2005). Antagonistic actions of ecdysone and insulins determine final size in Drosophila. Science 310: 667-670. Corona M, Velarde RA, Remolina S, Moran-Lauter A, Wang Y, Hughes KA, Robinson GE (2007). Vitellogenin, juvenile hormone, insulin signaling, and queen honey bee longevity. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104: 7128-7133. Cristino AS, Nunes FMF, Lobo CH, Bitondi MMG, Simes ZLP, Costa LF, Lattorff HMG, Moritz
373
RFA, Evans JD, Hartfelder K (2006). Caste development and reproduction: a genome-wide analysis of hallmarks of insect eusociality. Insect Molecular Biology 15: 703714. Dingle H and Winchell R (1997). Juvenile hormone as a mediator of plasticity in insect life histories. Archive of Insect Biochemistry and Physiology 35: 359-373. Evans JD, Wheeler DE (2000). Expression profiles during honeybee caste determination. Genome Biology 2.1, 6 pages, http:// genomebiology.com/2000/2/1/research/0001.1. Flatt T, Tu MP, Tatar M (2005). Hormonal pleiotropy and the juvenile hormone regulation of Drosophila development and life history. Bioessays 27: 999-1010. Grozinger CM, Fan YL, Hoover SER, Winston ML (2007). Genome-wide analysis reveals differences in brain gene expression patterns associated with caste and reproductive status in honey bees (Apis mellifera). Molecular Ecology 16: 4837-4848. Hartfelder K and Engels W (1998). Social insect polymorphism: hormonal regulation of plasticity in development and reproduction in the honeybee. Current Topics in Developmental Biology 40: 45-77. Hartfelder K (2000a). Insect juvenile hormone: from status quo to high society. Brazilian Journal of Medical and Biological Research 33: 157-177. Hartfelder K (2000b). Arthropoda-Insecta: Caste differentiation Reproductive Biology of Invertebrates 10B: 185-204. Hartfelder K and Emlen DJ (2005). Endocrine control of insect polyphenisms. In: Gilbert, L. I., K. Iatrou, S. J. Gill (Eds.), Comprehensive Insect Molecular Science. Vol. 3, Elsevier, Oxford, pp. 651-703. Haydak HM (1970). Honey bee nutrition. Annual Review of Entomolgy 15: 143-156. Loureno AP, Makert A, Cristino AS, Simoes ZLP (2008). Validation of reference genes for gene expression studies in the honey bee, Apis mellifera, by quantitative real-time RT-PCR. Apidologie (in press). Michelette ERF, Soares AEE (1993). Characterization of preimaginal developmental stages in Africanized honey bee workers (Apis mellifera L.). Apidologie 24: 431-440. Oldham S and Hafen E 2003. Insulin/IGF and target of rapamycin signaling: a TOR de force in growth control. Trends in Cell Biology 13: 79-85. Page REJ and Amdam GV (2007). The making of a social insect: developmental architectures of social design. Bioessays 29: 334-343. Page REJ and Peng CYS (2001). Aging and development in social insects with emphasis on the honey bee, Apis mellifera L. Experimental Gerontology 36: 695-711. Patel A, Fondrk MK, Kaftanoglu O, Emore C, Hunt G, Frederick K, Amdam GV (2007). The making of a queen: TOR pathway is a key player in diphenic caste development. PLoS One 2(6), e509. Pfaffl MW (2001). A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR. Nucleic Acids Research 29: (9):e45. Puig O, Marr MT, Ruhf ML, Tjian R (2003). Control of cell number by Drosophila FOXO: downstream and feedback regulation of the insulin receptor pathway. Genes and Development 17: 2006-2020. Rachinsky A and Hartfelder K (1990). Corpora allata activity, a prime regulating element for castespecific juvenile hormone titre in honey bee larvae (Apis mellifera carnica). Journal of Insect Physiology 36: 189-194. Rembold H and Hanser G (1964). On the royal jelly of honey bees.8. Demonstration of the determining principle in the jelly of queen bee larvae. Hoppe-Seyler Zeitschrift der Physiologische Chemie 339(1): 251-254.
374
Rembold H, Kremer JP, Ulrich GM (1980). Characerization of the postembryonic stages of the female castes of the honey bee, Apis mellifera L. Apidologie 11:29-38. Rembold H (1987). Caste-specific modulation of juvenile hormone titers in Apis mellifera. Insect Biochem. 17: 1003-1006. Schmidt-Capella IC, Hartfelder K (1998). Juvenile hormone effect on DNA synthesis and apoptosis in caste-specific differentiation of the larval honey bee (Apis mellifera L.) ovary. Journal of Insect Physiology 44: 385-391. Stern D (2003). Body-size control: How an insect knows it has grown enough. Current Biology 13: R267-R269. The Honey Bee Genome Sequencing Consortium (2006). Insights into social insects from the genome of the honeybee Apis mellifera. Nature 443: 931-949. Tu MP, Yin CM, Tatar M (2005). Mutations in insulin signaling pathway alter juvenile hormone synthesis in Drosophila melanogaster. General and Comparative Endocrinology 142: 347-356. Wang DI (1965). Growth rates of young queen and worker honeybee larvae. Journal of Apicultural Research 4: 3-5. Weaver N (1957). Effects of larval age on dimorphic differentiation of the female honey bees (Apis mellifera L, Hymenoptera: Apidae) Annals of the Entomological Society of America 50: 283-294. Wheeler DE, Buck N, Evans JD (2006). Expression of insulin pathway genes during the period of caste determination in the honey bee, Apis mellifera. Insect Molecular Biology 15: 597-602. Wild JD (1976). Juvenile hormone and caste differentiation in honey bee (Apis mellifera L.) In: Phase and Caste Determination in Insects (M. Lucher, ed.) pp.5-20. Pergamon Press, Oxford. Wu Q, Brown MR (2006). Signaling and function of insulin-like peptides in insects. Annual Review of Entomology 51: 1-24.
375
O Status Nutricional e a Dinmica do Metabolismo do Hormnio Juvenil na Vida Adulta de Apis mellifera
Aline Mackert1,*, Gustavo Conrado Couto Rosa2, Ana Durvalina Bomtorin1, Marcela A. F. Bezerra Laure1, Mrcia Maria Gentile Bitondi2 and Zil Luz Paulino Simes2 1 Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, So Paulo, Brazil 2 Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, So Paulo, Brazil *Corresponding author: Aline Mackert Departamento de Gentica, FMRP, Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes, 3900, 14040-900, Ribeiro Preto, SP, Brazil Tel.: +1-55-16-3602-3153; Fax: +1-55-16-3633-0069 E-mail address: mackert@rge.fmrp.usp.br Juvenile hormone metabolism dynamics in adult Honey bee, Apis mellifera , is influenced by nutritional status
Abstract
As an attempt to study nutrition effects over juvenile hormone (JH) regulation we identified genes involved in CA synthesis using Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae sequences as queries in BLASTP analysis over sequences from Honey bee genome. We identified the cDNAs of enzymes involved in the mevalonate pathway portion, juvenile hormone specific steps, basal mitochondrial metabolism and also involved in the methyl transfer portion. There is a single gene encoding each enzyme of this pathway, with the exception of farnesyl diphosphate synthase (FPPS), for which we identified seven homologs, but only four of these enzymes are expressed in the corpora allata (CA), as indicated by quantitative RT-PCR analyses. Two enzymes isoform for adenosylhomocysteinase and mitochondrial citrate transport protein were found. For investigate the rule of nutrition into the JH metabolism, we kept newly-emerged workers during seven days and fed them with two different diets. The sugar-rich diet was able to increase CA levels of methyl farnesoate epoxidase gene (mfe) and also decrease the amounts of two JH degradation enzymes in fat body and hemolymph: JH esterase and JH epoxide hydrolase, respectively. Just the opposite was observed for a protein-lipidrich diet. Our data suggest that the sugar-rich offered to workers created an environment corroborating to JH increase and probably leads to the forager behavior observed in adult workers.
Introduo
A modulao dos nveis de hormnio juvenil controlada precisamente por vrios processos fisiolgicos e bioqumicos, sendo eles: sntese, degradao, ligao a protenas especficas na hemolinfa e secreo. Destes, a regulao da sntese tem sido considerada de extrema importncia e um grande nmero de evidncias tem se acumulado a respeito do controle estimulatrio (alatotrpico) e inibitrio (alatosttiAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
376
co) feito pelo sistema nervoso sobre os corpora allata (CA), um par de glndulas onde o HJ sintetizado (Gilbert et al., 2000). A quantidade de HJ na hemolinfa est diretamente relacionada sua produo pelos CA, uma vez que no so conhecidas informaes sobre estocagem neste rgo. A regulao dos passos finais da produo do HJ, nas castas e estgios especficos, pode contribuir para diferenas observadas nos ttulos de HJ (Rachinsky et al., 2000). Segundo Tobe & Stay (1985), os dois passos finais na produo de JH III, geralmente so: (1) a metilao do cido farnesico (AF) para metil farnesoato (MF) catalisado pela enzima o-metil transferase (FAMET); e (2) uma epoxidao do MF para JH III pela enzima metil farnesoato epoxidase (MFE). Alm da diminuio da sntese do hormnio juvenil, uma intensa atividade hidroltica retira o hormnio juvenil de circulao em momentos crticos do desenvolvimento (Hinton & Hammock, 2001). Duas enzimas foram identificadas desempenhando o papel de degradao, a esterase do HJ (JHE) que est presente na hemolinfa e tecidos, e a epxido hidrolase do HJ (JHEH) a qual est ligada a tecidos especficos e primariamente associada frao microssomal (de Kort & Granger, 1996). O catabolismo destas duas enzimas produz trs metablitos (HJ-cido pela JHE; HJ-diol pela JHEH e HJ-cido-diol, por ambas) (Hammock, 1985). Embora ao HJ-cido seja atribuda atividade metablica (Ismail et al., 1998), a retirada do HJ de circulao essencial para o desenvolvimento dos insetos. O estudo da modulao do HJ de grande interesse em A. mellifera, principalmente devido seu papel durante a diferenciao de castas e no polietismo etrio. O recente sequenciamento do genoma de A. mellifera pelo Baylor Humam Genome Center e a viabilidade de obteno das seqncias oferecem uma grande oportunidade de conhecimento dos genes da via de sntese do HJ e consequentemente uma anlise detalhada da sua regulao.
Materiais e mtodos
Anlise de genes da via de sntese do hormnio juvenil Os genes da via de sntese do hormnio juvenil foram preditos utilizando a base de dados proveniente das anotaes do genoma de A. mellifera (Glen Official Set). Para tanto foram utilizadas as seqncias descritas para Anopheles gambiae e Drosophila melanogaster como fonte para as buscas, estas seqncias foram obtidas a partir de Noriega et al. (2006). Obteno do RNA total, confeco de cDNA e RT-PCR quantitativa em tempo real A extrao de RNA foi utilizando-se reagente TRIzol para estudos de quantificao em diferentes tecidos ou Kit GenElute Mammalian Total RNA Kit (Sigma) para extrao de RNA de CA. O RNA foi tratado com DNase (RQ1 Rnase-Free Dnase, Promega). A sntese de cDNA foi feita utilizando-se o sistema de sntese Superscript II (Invitrogen). Os experimentos para quantificao relativa por RT-PCR em tempo real (qRT-PCR) foram realizados utilizando-se metodologia SYBR Green em um aparelho de PCR em tempo real (7500 Real Time PCR, Applied Biosystems). Os valores de Ct foram transformados em valores de quantificao usando o mtodo comparativo de Ct de acordo com Applied Biosystems (user bulletin #2). Western Blot 50 g de protena total foram separadas por SDS-PAGE. As protenas foram transferidas para membrana de PVDF. A deteco dos antgenos imobilizados na membrana foi realizada utilizando-se o Kit ECL Western Blotting Detection Reagents and Analysis System (Amersham Biosciences). Os anticorpos utilizados foram produzidos em coelhos a partir de seqncias parciais das protenas JHE e JHEH de A. mellifera. A diluio utilizada foi 1:100 e 1:500 para JHE e JHEH, respectivamente.
377
Experimento de manipulao do alimento em abelhas adultas Operrias recm-emergidas foram coletadas das colnias e confinadas em caixas de Madeira de 8 x 11 x 13 cm providas com alimento em duas diferentes condies: abelhas alimentadas com uma dieta a base de acar (xarope 50% - 50% de acar em gua) e abelhas alimentadas com acar e plen (30% beebread plen fermentado coletado diretamente nos favos - em xarope 50%). Todas as abelhas receberam alimento e gua ad libitum. As abelhas foram mantidas durante sete dias em uma estufa regulada 34C e 80% de umidade relativa.
Resultados
Foram selecionados genes putativos para enzimas da via de sntese do HJ (Tabela I). As anlises de quantificao gnica tiveram o objetivo de selecionar genes que tivessem nveis de transcritos mais altos nos CA quando comparados a outros tecidos em um momento do ciclo de vida de abelhas cujos ttulos de HJ esto altos, operrias forrageiras. Aps anlises de quantificao dos nveis de transcrio por RT-PCR em tempo real foram selecionados sete genes cuja expresso foi acentuada nos CA-CC em relao outros tecidos (crebro, corpo gorduroso e ovrio): Os dados gerados mostraram que os genes codificadores de oito protenas tm altas taxas de transcrio nos CA: ach, fpps3, hmgs, hmgr, iddi, mt, famet e mfe (Figura 1). Apenas dois genes tiveram transcrio exclusiva nos CA: mfe e mt; estes genes so considerados especficos da via de sntese do HJ. Os genes: famet, hmgr, hmgs, iddi, ach1 e fpps3, possuem os mais altos nveis de transcrio nos CA, mas tambm so transcritos em outros tecidos. Os nicos genes que aparentemente no so transcritos nos CA so: fpps1 e fpps4, genes quase exclusivamente transcritos no CG; e scd, cuja transcrio se limita amostra de crebro. Os demais genes: cs, mctp1, mctp2, atpcl, mat, ahc2, ak, aat, mk e pmk, possuem expresso em aparentemente todos os tecidos analisados (Figura 1).
Figura 1 Quantificao relativa dos nveis de genes envolvidos no metabolismo do HJ em diferentes tecidos de operrias forrageiras de A. mellifera por RT-PCR em tempo real (qRT-PCR). (CA-CC) corpora allata/corpora cardaca; (FB) corpo gorduroso; (Brain) crebro; (ovary) ovrio. Cada barra representa uma amostra formada de pools de 20-25 CA-CC ou pools de CG, Ce ou Ov de 10 abelhas. A expresso do gene da RP49 foi utilizada para normalizao, e o maior valor de expresso foi corrigido para 1 para cada gene individualmente. Para a sigla dos genes ver tabela I.
378
Tabela I: Enzimas da via de sntese do hormnio juvenil. A tabela mostra os nmeros de acesso no GenBank dos ortlogos em Anopheles gambiae e Drosophila melanogaster assim como o gene predito em A. mellifera e o respectivo e-value fornecido pelas anlises.
Enzima Ab. E.C. Anopheles gambiae Drosophila melanogaster Apis mellifera GB12956 GB12497 GB18242 GB14701 GB11982 GB18308 GB12385 GB12859 GB11866 GB15337 GB10756 GB18623 GB12522 GB20002 GB10517 GB15634 GB12573 GB17499 GB15259 GB10992 GB15781 GB14324 GB15919 GB13063 4e-80 0.0 e-141 e-120 0.0 e-132 0.0 e-116 e-110 e-value 2e-78 e-169 0.0 1e-30 6e-40 5e-30 4e-76 4e-69 3e-63 8e-54 2e-51 4e-04 5e-57 2e-94
Acetoacetil CoA tiolase AAT 2.3.1.9 XP_321828 NP_612094 Hidroximetilglutaril-CoA sintase HMGS 2.3.3.10 XP_315872 NP_725570 Hidroximetilglutaril-CoA redutase HMGR 1.1.1.34 XP_307890 NP_996271 Mevalonato kinase MK 2.7.1.36 XM_319701 NM_176158 Fosfomevalonato kinase PMK 2.7.4.2 XP_310779 Q9VIT2 Isopentenil-difosfato delta-isomerase IDDI 5.3.3.2 XM_321388 NP_650962 Farnesil difosfato sintase FPPS 2.5.1.1/10 XP_308653 NP_477380 (preniltransferase) Desidrogenase de cadeia curta SCD - XM_556135 NM_132467 cido farnesico O-metiltransferase FAMeT - XP_318631 NP_611544 homloga a crustceos (FAMeT) Metiltransferase do HJ-cido MT - XP_314173 NP_609793 (JHAMT) ortlogo Bombyx mori Metil farnesoato epoxidase (CYP15) MFE - XP_315675 NP_649151 Citrato (si)-sintase CS 2.3.3.1 XM_320478 - Protena de transporte do MCTP - XP_308964 NP_727450 citrato na mitocndria ATP citrato liase ATPCL 2.3.3.8 XM_319323 - Metionina adenosil transferase MAT 2.5.1.6 XM_307861 M_164362 Adenosilhomocisteinase AHC 3.3.1.1 XM_311257 NM_078609 Adenosil kinase AK 2.7.1.20 XM_307001 NM_168532
Com o objetivo de confirmar o status dos oito genes selecionados previamente sobre a regulao do HJ, cinco deles foram analisados para quantificao dos nveis de mRNA nos CA-CC em quatro fases do desenvolvimento de rainhas e operrias: rainhas e operrias na fase de pupa de olho branco (Pw), quando os nveis de HJ esto basais na hemolinfa e duas fases cujos ttulos de HJ esto altos, operrias forrageiras, ou esto aumentando, rainhas recmemergidas, os altos ttulos de HJ nestes casos esto envolvidos na atividade de vo (Robinson et al., 1991; Giray e Robinson, 1996; Tozetto et al., 1997). Aps a quantificao por RT-PCR em tempo real, os cinco genes analisados mostraram o mesmo perfil (Figura 2A): altos nveis de transcritos acompanhando altos ttulos de HJ, e baixos nveis de mRNA em fases cujos ttulos de HJ so reconhecidamente baixos (Elekonich et al., 2003). Para relacionar os nveis de transcritos com os nveis de protena nos CA de um dos genes analisados, foram executadas anlises por western blot , utilizando-se um anticorpo anti-HMGR de B. germanica. Foram utilizados extratos proticos de CA-CC nas mesmas fases utilizadas para as investigaes do nmero de transcritos. Os resultados revelaram uma nica banca de 68KDa correspondente HMGR de A. mellifera. Os nveis de protena mostraram exatamente o mesmo perfil observado para a expresso do gene hmgr (Figura 2B). Estes resultados levaram a concluso de que exista um controle liga-desliga na produo de enzimas participantes da via de sntese do HJ nos CA durante o ciclo de vida das abelhas.
379
Figura 2 (A) Quantificao relativa dos nveis de genes envolvidos no metabolismo do HJ nos corpora allata/corpora cardiaca (CA-CC) de A. mellifera por RT-PCR em tempo real (qRT-PCR) em pupas e abelhas adultas. Cada barra a mdia de trs pools de 8 CA-CC. A expresso do gene da RP49 foi utilizada para normalizao, e o maior valor de expresso foi corrigido para 1 para cada gene individualmente. Para a sigla dos genes ver tabela I. (B) Perfis de HMGR nos CA-CC, 3 g de protena total foram separados por SDS-PAGE e utilizados para experimentos de western blot. Um anticorpo anti-HMGR de B. germanica foi utilizado, sendo detectada uma nica banda de 68 KDa.
Estudos envolvendo a regulao dos nveis de HJ durante o processo de diferenciao de castas, no estgio larval de A. mellifera, mostraram que a nutrio tem um papel essencial na regulao deste processo (Michener, 1969; Wheeler, 1986; Hartfelder e Engels, 1998). O aumento na quantidade e qualidade de comida ingerida pelas larvas leva a um aumento nos ttulos de HJ na hemolinfa, como o caso de larvas que originaro rainhas (Rachinsky e Hartfelder, 1990). Baseada nesta informao, nosso objetivo foi testar se o status nutricional capaz de alterar a regulao dos nveis de sntese de HJ (utilizando como indicativo a expresso de genes envolvidos neste processo) e a degradao do HJ em abelhas adultas. Operrias recm-emergidas foram mantidas durante 7 dias em caixas e alimentadas com dois tipos diferentes de dietas: uma dieta rica em acar (xarope 50%) e uma dieta rica em protenas (30% beebread em xarope 50%). A quantificao dos nveis de transcrito de genes envolvidos na sntese de HJ foi feita utilizando amostras de CA-CC. As anlises revelaram que os genes codificadores das enzimas MFE e IDDI so regulados pelo status nutricional (Figura 3A). A primeira delas, metil farnesoato epoxidase, o passo final na sntese de HJ-III em A. mellifera, portanto, um passo especfico desta via. A outra enzima, Isopentenil-difosfato deltaisomerase, um passo intermedirio na sntese de isoprenides. As alteraes observadas para os genes da via de sntese do HJ foram justamente opostas s alteraes observadas para o processo de degradao do
380
HJ. Quando as abelhas foram alimentadas com uma dieta baseada em acar, o mfe e iddi tiveram os nveis de transcritos aumentados significativamente nos CA (t-test; P=0,010 e P=0,043, respectivamente Figura 3A). Ao mesmo tempo, os nveis de transcritos de Amjhe no corpo gorduroso (P=0,005; t-test; Figura 3B), e tambm os nveis de AmJHE e AmJHEH na hemolinfa e no corpo gorduroso, respectivamente, diminuram (resultados por western blot; Figura 3C). Estes resultados sugerem que uma dieta pobre em protenas possa ser um mecanismo regulador que cause um aumento nas taxas de sntese de HJ nos CA (atravs do aumento de cpias de enzimas da via de sntese) e tambm a diminuio da degradao deste hormnio na hemolinfa e tecidos. Este resultado uma forte evidncia que no apenas a sntese de HJ, mas tambm o controle de sua degradao sejam mecanismos essenciais para a manuteno dos ttulos de HJ.
Figura 3 (A) Quantificao relativa dos nveis de genes envolvidos no metabolismo do HJ nos corpora allata/corpora cardiaca (CA-CC) de A. mellifera por RT-PCR em tempo real (qRT-PCR) aps a manipulao da dieta em abelhas operrias adultas. Operrias recm-emergidas foram mantidas por 7 dias em caixas e alimentadas com duas diferentes dietas consistindo em xarope 50% ou 30% de beebread em 50% de xarope. Cada barra a mdia de trs pools de 8 CA-CC. A expresso do gene da RP49 foi utilizada para normalizao, e o maior valor de expresso foi corrigido para 1 para cada gene individualmente. Para a sigla dos genes ver tabela I. (B) Expresso normalizada dos genes jhe e jheh de A. mellifera no corpo gorduroso por RT-PCR semiquantitativa (SqRT-PCR). As barras representam a mdia de trs amostras constitudas de pools de cinco indivduos. A expresso do gene da RP49 foi utilizada para normalizao, e o maior valor de expresso foi corrigido para 1 para cada gene individualmente. (C) Perfis de JHE e JHEH na hemolinfa e corpo gorduroso, respectivamente. As anlises foram feitas por western blot, 50 g de protena total foram separados por SDS-PAGE e utilizados para os experimentos. Os asteriscos representam diferenas estatisticamente significativas nos tratamentos (t-test).
381
Discusso
Na tentativa de identificar o complexo transcriptoma dos CA de insetos, vrios trabalhos foram realizados utilizando differential display e anlises de ESTs nesta glndula (Shinoda e Itoyama 2003, Noriega et al. 2006, Helvig et al. 2004), como resultado uma lista de genes envolvidos na via de sntese do HJ est disponvel. A disponibilidade do genoma de A. mellifera e as seqncias de genes da via de sntese do HJ geradas abriram a possibilidade de identificar ortlogos putativos para os genes envolvidos na produo de HJ pelos CA. Em relao ao penltimo passo da via de sntese de HJ que envolve uma metiltransferase, foram analisados dois genes. O primeiro deles o ortlogo cido farnesico O-metiltransferase (FAMeT) de crustceos e o segundo o ortlogo HJ-cido metiltransferase (JHAMT) de B. mori. A FAMet foi estudada na abelha Melipona scutellaris (Vieira et al., 2008), os autores encontraram diferenas quanto expresso deste gene entre castas, no entanto, no est claro se a FAMeT participa ou no da via de sntese do HJ. Um estudo recente sobre a FAMeT em D. melanogaster descartou a participao desta enzima na via de sntese do HJ (Burtenshaw et al., 2008). A FAMeT de D. melanogaster foi isolada e uma FAMeT recombinante (rFAMeT) clonada, expressada e um anticorpo especfico produzido. A rFAMeT foi testada para atividade enzimtica em ensaio radioqumico, mas nenhuma atividade foi detectada. O anticorpo gerado confirmou a presena da FAMeT nos CA, mas os autores concluram que a FAMeT de D. melanogaster no tem nenhuma ao sobre a via de sntese de sesquiterpenides. A FAMeT de A. mellifera no apresenta nenhum domnio de metiltransferase segundo anlises de busca pelo NCBI Conserved Domain. Apesar da existncia do transcrito correspondendo FAMeT ter sido encontrado nos CA, o gene da metiltransferase ortloga JHAMT de B. mori parece reter a funo de metiltransferase da via de sntese do HJ em A. mellifera, pois, esta enzima possui um domnio metiltransferase SAMdependente, e tem os nveis de transcritos muito altos nos CA quando comparados a outros tecidos. Anlises por micro-arranjos de DNA em camundongos recebendo diferentes dietas base de colesterol revelaram que apenas um conjunto de genes de enzimas da via dos isoprenides so afetados significativamente em seus nveis de transcritos, sendo eles os genes codificadores da HMGS, IPP isomerase e FPPS (Soccio et al., 2002). De maneira similar, anlises por micro-arranjos de DNA mostraram que a mevalonato kinase a enzima mais afetada por protenas de ligao a um elemento de resposta ao esterol (Horton et al., 2003). Em nossos experimentos, ns mostramos que apenas dois genes, sofrem alteraes transcricionais em resposta ao status nutricional, sendo eles: mfe e iddi. Geralmente, os dados tm mostrado que os nveis de HJ podem ser melhor compreendidos em termos de regulao coordenada de enzimas de sua sntese e controle do metabolismo (Gibbons, 2003; Keeling et al., 2004), do que em termos de um passo regulatrio. Contudo, Rachinsky et al. (2000) mostrou que no incio do quinto instar larval, quando os CA sintetizam menos HJ naturalmente, que uma produo limitada dos precursores de HJ pode ser observada juntamente com um bloqueio casta e estgio especfico do passo final da via de sntese do HJ, que envolve a MFE. Neste trabalho nos mostramos que os perfis de expresso de alguns genes da via de sntese so coordenados e que o padro de expresso acompanha os ttulos de HJ. No entanto, em relao aos efeitos da dieta sobre os nveis de transcrio de genes da sntese do HJ apenas dois genes so afetados. Os nossos dados aliados aos dados proporciados por Rachisnky et al. (2000) indicam a MFE como uma possvel enzima limitante da sntese do HJ, mas que a maioria dos passos da via de sntese do HJ so ligados ou desligados em momentos especficos, provavelmente como uma resposta nos CA como um todo. Nossas observaes sugerem que uma mudana na alimentao de operrias adultas, que passam a receber uma dieta exclusiva de carboidratos, no s capaz de aumentar a transcrio do
382
passo final da via de sntese do HJ-III, como tambm altera os nveis de JHE e JHEH. Culminando num momento biolgico propcio para o aumento dos nveis de HJ na hemolinfa. Nossa hiptese, que a alimentao com acar mimetize os momentos que antecedem a atividade de forrageamento. Durante o desenvolvimento normal este o momento em que a operria muda de dieta e passa a alimentar-se com uma dieta rica em acar (Haydak, 1970). At o momento as evidncias sugerem para a nutrio como um fator de importncia na regulao dos CA no estgio adulto. Tal processo j bem entendido durante o desenvolvimento larval de fmeas que leva formao de dois fentipos completamente distintos: rainhas e operrias. No entanto, este trabalho mostra evidncias que apontam a nutrio como mecanismo regulatrio para a atividade dos CA e da atividade de degradao do HJ no processo de polietismo etrio.
de Kort CDA Granger NA (1996). Regulation of JH titers: The relevance of degradative enzymes and binding proteins. Arch. Insect Biochem. Physiol. 33: 1-26. Elekonich MM Jez K Ross AJ Robinson GE (2003). Larval juvenile hormone treatment affects preadult development, but not adult age at onset of foraging in worker honey bees (Apis mellifera). J. Insect Physiol. 49: 359-366 Gibbons GE (2003). Regulation of fatty acid and cholesterol synthesis: cooperation or competition? Progr. Lipid Res. 42: 47997. Gilbert LI Granger NA Roe RM (2000). The juvenile hormones: historical facts and speculations on future research directions. Insect Biochem. Mol. Biol. 30:617644. Giray T Robinson GE (1996). Commom endocrine and genetic mechanisms of behavioral development in male and worker honey bees and the evolution of division of labor. PNAS 93: 11718-11722. Hammock BD (1985). Regulation of juvenile hormone titre: degradation. In: Kerkut GA, Gilbert LI (eds) Comprehensive Insect Physiology, Biochemistry and Pharmacology, vol 7. Pergamon, Oxford, pp 431472. Hartfelder K Engels W (1998). Social insect polymorphism: hormonal regulation of plasticity in development and reproduction in the honeybee. Curr. Topics Dev. Biol. 40: 45-77 Haydak MH (1970). Honey bee nutrition. Annu. Rev. Entomol. 15:143-156. Helvig C Koener JF Unnithan GC Feyereisen R (2004). CYP15A1, the cytochrome P450 that catalyzes epoxidation of methyl farnesoate to juvenile hormone III in cockroach corpora allata. PNAS 101(12):4024-4029. Hinton AC Hammock BD (2001). Purification of juvenile hormone esterase and molecular cloning of the cDNA from Manduca sexta. Insect Biochem. Molec. Biol. 32: 57-66. Horton JD Shah NA Warrington JA Anderson NN Park SW Brown MS Goldstein JL (2003). Combined analysis of oligonucleotide microarray data from transgenic and knockout mice identifies direct SREBP target genes. PNAS 100: 1202712032. Ismail SM Satyanarayana K Bradfield JY Dahm DH Bhaskaran G (1998). Juvenile hormone acid: evidence for a hormonal fat body of the bean bug, Riptortus clavatus by mRNA differential display. Insect Biochem. Mol. Biol. 28: 181-189. Keeling CI Blomquist GJ Tittiger C (2004). Coordinated gene expression for pheromone biosynthesis in the pine engraver beetle, Ips pini (Coleoptera: Scolytidae). Naturwissenschaften 91: 324328. Michener CD (1969). Comparative social behavior of bees. Ann. Review Entomol. 14: 299-342.
383
Noriega FG Ribeiro JMC Koener JF Valenzuela JG Hernandez-Martinez S Pham VM Feyereisen R (2006). Comparative genomics of insect juvenile hormone biosynthesis. Insect Biochem. Mol. Biol. 36: 366374. Rachinsky A Hartfelder K (1990). Corpora allata activity, a prime regulating element for caste-specific juvenile hormone titre in honey bee larvae (Apis mellifera carnica). J. Insect Physiol. 66, 189-194. Rachinsky A Strambi C Strambi A Harfelder K (1990). Caste and metamorphosis: hemolimph titers of juvenile hormone and ecdysteroids in last instar honey bee larvae. Gen. Comp. Endocrinol. 79: 31-38. Robinson GE Strambi C Strambi A Feldlaufer MF (1991). Comparison of juvenile hormone and ecdysteroid titers in adult worker and queen honey bees (Apis mellifera). J. Insect Physiol. 37: 929-935. Shinoda T Itoyama K (2003). Juvenile hormone acid methyltransferase: a key regulatory enzyme for insect metamorphosis. PNAS 100: 1198691. Soccio RE Adams RM Romanowski MJ Sehayek E Burley SK Breslow JL (2002). The cholesterolregulated tarD4 gene encodes a StAR-related lipid transfer protein with two closely related homologues, StarD5 and StarD6. PNAS 99: 69436948. Tobe SS Stay B (1985). Structure and regulation of the corpus allatum. Adv. Insect Physiol. 18: 305-432. Tozetto SO Rachinsky A Engels W (1997). Juvenile hormone promotes flight activity in drones Apis mellifera carnica). Apidologie 28: 77-84. Vieira CU Bonetti AM Simes ZLP Maranho AQ Costa CS Costa MCR Siquieroli ACS Nunes FFF (2008). Farnesoic Acid O-Methyl Transferase (FAMeT) Isoforms: Conserved Traits and Gene Expression Patterns Related to Caste Differentiation in the Stingless Bee, Melipona scutellaris. Arch. Insect Biochem. Physio, 67: 97106. Wheeler DE (1986). Developmental and physiological determinants of caste in social Hymenoptera: evolutionary implications. American Naturalist 128: 13-34.
384
SI MPSIO 16
AVANOS OBTIDOS APS 10 ANOS DA DECLARAO DE SO PAULO SOBRE POLINIZADORES
Coordenadores: Vera L.I. Fonseca, Marina C. P. P. Landeiro
385
Cursos Internacionais Sobre Polinizao no Brasil

Blandina Felipe Viana Instituto de Biologia, Universidade Federal da Bahia Avenida Ademar de Barros s/n, Campus Universitrio de Ondina, Salvador, Bahia 40190-170 blandefv@ufba.br Para implementar as aes do Programa Brasileiro para conservao e uso sustentvel dos polinizadores (IBP) essencial investir na formao de profissionais para atuarem no manejo e conservao dos polinizadores autctones. Nesse contexto, iniciativas que visam o desenvolvimento de estratgias pedaggicas inovadoras, que logrem bons resultados em curto espao de tempo devem ser incentivadas no mbito desse programa. Os cursos internacionais sobre polinizao uma dessas iniciativas. O formato original desses cursos foi concebido e desenvolvido pelo Prof. Dr. Peter Kevan, da Universidade de Guelph no Canad. No Brasil j foram realizadas quatro edies desses cursos, sendo 03 na Bahia (Chapada Diamantina) e uma no Cear (Limoeiro do Norte). O curso terico pratico e tem a durao de duas semanas,. Na primeira semana ministrada a maioria das aulas tericas e realizados exerccios e demonstraes em campo e em laboratrio, Ao final dessa semana os participantes devero elaborar propostas de mini-projetos, em grupos, que sero, em uma primeira etapa, apresentados e debatidos com o conjunto de professores e, posteriormente, compartilhados com os demais membros do curso. Na segunda semana esto previstas a execuo dos mini-projetos e a apresentao dos resultados, onde se espera que os alunos estabeleam uma conexo entre os contedos tericos especficos, a gerao de hipteses, o planejamento da coleta de dados e a discusso dos resultados. As criticas e sugestes sero incorporadas para a formatao do trabalho escrito, que devero ser entregues posteriormente. A nossa experincia nos leva a crer que uma estratgia pedaggica bem planejada e estruturada, como esses cursos de campo sobre polinizao, que alie informaes tericas consistentes e bem argumentadas com atividades prticas participativas pode causar um grande impacto na formao de profissionais que repercutiro em aes afirmativas voltadas para a conservao e manejo dos polinizadores. Apoio: PNUD/MMA; FAPESB, UFBA, UFC, Bando do Nordeste, UNIMED, Associao de Produtores, REPOL.
386
SI MPSIO 17
DESVENDANDO A PRPOLIS: DA ABELHA AO HOMEM.
Coordenador: Ademilson E.E. Soares
387
Uso de Resinas Pelas Abelhas e Fatores Que Alteram a Produo de Prpolis.

Ademilson Espencer Egea Soares Depto. de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, USP. Av. Bandeirantes, 3900 14.049-900 Ribeiro Preto, SP e-mail: aesoares@fmrp.usp.br Um dos maiores custos para evoluo da sociabilidade foi a sua exposio aos patgenos. (Mller et al. 1993; Schmid-Hempel 1998; Nunn et al. 2000; Tella 2002). Notadamente nos insetos eussociais (Holldobler & Wilson 1990) e em particular nas abelhas, que vivem geralmente em colnias com divises de trabalho e onde o contacto com o meio externo fundamental para a sua sobrevivncia, elas se expem continuamente aos patgenos que podem ingressar nas colnias pelas operrias forrageadoras. O ambiente interno da colnia propcio ao desenvolvimento de fungos, leveduras e bactrias, que muitas vezes esto associados a prpria integridade da colnia, como na fermentao do plen utilizado na alimentao das larvas. Assim, entre os insetos sociais surgiram diferentes mecanismos fisiolgicos e comportamentais, que puderam minimizar os efeitos dessa convivncia, incluindo simbiontes produtores de antibiticos, (Currie et al 1999), alo e alto grooming (Rosengaus et al. 1998, Gramacho, 1999), secrees com funes antibiticas (Rosengaus et al. 2000; Poulsen et al. 2002), remoo de lixos e restos de corpos estranhos (Hart & Ratnieks 2001) e defesas imunolgicas (Moret & Schmid-Hempel 2000; Traniello et al. 2002). Um outro potencial mecanismo de defesa pode ser atribudo ao uso de resinas de plantas que apresentam propriedades antimicrobianas. Evidencias fsseis encontradas no mbar Dominicano provenientes das minas localizadas na Cordilheira Setentrional e datadas do Euceno Superior (24-40 milhes de anos atrs) indicam dois usos de resinas por abelhas e seus predadores (Poinar Jr, 1992). A Proplebeia dominicana (Meliponinae: Apidae) encontrada apresentava resinas em suas corbculas e pouqussimos gros de plen, sugerindo que isto poderia estar associado a construo do seu ninho (Willie & Chandler, 1964). Os insetos Reduviidae, conhecidos como percevejos assassinos, so particularmente predadores de abelhas do gnero Trigona (Johnson, 1983a) e utilizam as resinas para imobilizar as suas presas. As abelhas do gnero Apis , normalmente coletam resinas, exsudatos e restos de fragmentos vegetais, que so manipulados, acrescidos de cera, secrees glandulares, constituindo a prpolis que usada principalmente para vedao de frestas, soldagem dos favos, revestimento interno dos ninhos e de grande importncia para isolar pequenos animais em decomposio. As abelhas Meliponina (Trigonini e Meliponini) utilizam as resinas vegetais associadas com cera, formando o cerume normalmente de consistncia slida, que utilizado na construo dos potes de alimento, invlucros e favos de cria. Entretanto, algumas abelhas com a Tetragonisca angustula Latreille, 1811 e Plebeia sp (Apidae, Meliponinae) a resina depositada no interior da colnia em pontos estragticos e apresenta uma consistncia mole e pegajosa, que utilizada por essas abelhas como defesa. Durante um ataque as abelhas se movimentam rapidamente para estes depsitos que so mais freqentes
388
nas proximidades da entrada do ninho e depositam pequenas bolotas no invasor, dificultando a sua mobilidade. (Santos, 2007). Verificou tambm que essas bolotas de resinas variavam numericamente ao longo do ano e a atividade de elaborao e manejo dessa resina pegajosa era feita pelas operrias com mais de 20 dias de idade e que tinham as glndulas salivares da cabea mais desenvolvidas. As abelhas Meliponina, tambm pode confeccionar o batume, que uma mistura de cerume e/ou prpolis com barro ou argila, que so utilizados normalmente para vedao de frestas e delimitar o envoltrio onde o ninho est sendo construdo. Embora a relao de coleta de resinas pelas abelhas tenha se estabelecido h milhares de anos, somente nos meados do sculo XX que se iniciaram os trabalhos associando as possveis origens botnicas das resinas coletadas e o seu papel na construo e defesa dos ninhos contra eventuais patgenos. J era bastante conhecido que as abelhas do gnero Trigona eram exmias coletoras de resinas, quando Johnson (1983b) determinou na Amrica Central que a Trigona fulviventris fulviventris Guerin, coletava resina de Bursera, Bombacopsis, Hymenaea e Machaerium para a construo de seus ninhos. Absy e Kerr (1977) trabalhando na Amaznia Brasileira verificaram que a abelha Melipona seminigra merrilae Cockerell, 1919 (Apidae: Meliponinae) utiliza sementes e ltex dos frutos de Vismia sp (Clusiaceae), misturadas com barro e resinas, para confeccionar o batume usado em seus ninhos. Roubik (1989) verificou que a Melipona fuliginosa Lepeletier, 1836 (Apidae, Meliponinae) do Panam e Amaznia, utilizam na confeco de seus ninhos sementes misturadas com resinas alaranjadas provenientes dos frutos de Vismia sp. Porm na Amaznia Central essa mesma abelha e alguns outros meliponneos utilizam, sementes de Coussapoa asperifolia magnifolia (Cecropiaceae), (Garcia et al, 1992). Martinez, et al (1966) testaram em Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e em Candida albicans a atividade antimicrobiana de 23 extratos de 12 espcies de plantas de Cuba usadas tradicionalmente na medicina popular. A bactria mais suscetvel foi Staphylococcus aureus e a planta com melhor atividade antibacteriana foi Schinus terebenthifolius, (Anacardiaceae) que uma fonte importante de resina para as abelhas Tetragonisca angustula (jata) e apresenta entre seus leos essenciais o cido linolico como composto majoritrio (Noneam & Ghoneim, 1986). O plen e o nctar secretado pelas plantas so os principais recursos florais, oferecidos como recompensa aos polinizadores. Entretanto, Vogel (1969 apud Pianaro, 2007) descreve a sndrome floral em cinco famlias de plantas (Iridaceae, Krameriaceae, Malpighiaceae, Orchidaceae e Scrophulariaceae) relacionando a secreo de leos florais produzidos pelas elaiforos. Buchmann (1987) realizou um amplo levantamento e determinou que aproximadamente 2.402 espcies de plantas pertencentes a 8 ordens, 10 famlias e 79 gneros, produzem leos florais e/ou nctar e plen. Ele observou coleta de leos florais em Malpighiaceae, Gesneriaceae e Melastomataceae, por trs espcies do gnero Trigona (Apidae: Meliponinae) e uma espcie do gnero Melipona (Apidae: Meliponinae). Os leos florais coletados pelas abelhas, nem sempre esto associados com a obteno de energia e alimento larval como, por exemplo, nos Anthophoridae e Melittidae, mas podem ser usados tambm na construo dos ninhos, como tem sido aventado por Roubik (1989), para as abelhas Tetragona dorsalis (Smith, 1854), Trigona spinipes (Fabricius, 1793). Trigona pallens (Fabricius, 1798) e Trigona cilipes (Fabricius, 1804) (Apidae:Meliponinae). Os leos essenciais obtidos de plantas nativas de Baccharis dracunculifolia e Baccharis uncinella, tambm conhecido como leo-de-vassoura, utilizado em perfumaria, proporcionando um aroma extico a diversos perfumes. Eles apresentam tambm diferentes atividadades alelopticas, antioxidante, antimicrobiana, citotxica e antiinflamatrios. Os processos de extrao e a regio geogrfica influenciam na concentrao de compostos oxigenados, principalmente o nerolidol e o espatulenol.
389
Ferronato, et al (2007) investigaram a ao desses leos em 4 cepas de E. coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa e verificaram que eles apresentam atividades antimicrobianas contra esses patgenos. A atividade antibacteriana dos leos essenciais liberados a partir da prpolis, tem sido usada para reduzir a incidncia de bactrias patognicas em baias de animais confinados e em escolas. (Bevilaqua, et al 1977, Pianaro, (2007) analisando estruturas abdominais de Tetragonisca angustula Latreille, 1811 (Apidae, Meliponinae), constatou que essas abelhas estavam coletando leos florais, provenientes particularmente da Lophanthera lactescens Ducke (Malpighiaceae). Embora no tenha ficado claro a utilizao desse leo pela abelha, foi detectado que ele apresenta como componente majoritrio o cido 3-acetoxi-octadecanico. Trata-se do primeiro relato sobre a coleta de leos pela abelha jata. Um dos trabalhos pioneiros com a prpolis no Brasil foi realizado por Breyer, (1980), que editou o livro Abelhas e Sade, onde relata os efeitos da Propolina. Mas foi nos anos 90 que as pesquisas com prpolis passaram a tomar novos rumos e vrios grupos de pesquisas se preocuparam em caracterizar as propriedades fsico-qumicas das prpolis oriundas de diferentes regies, bem como as suas atividades antimicrobianas, inibidores de tumores, regenerao de tecidos, ao cicatrizante, atividade anti-cariognica, antiinflamatria, anti-oxidante, hepatoprotetora, analgsica, atividade estrognica, antiangiognica e regenerativa de cartilagens (Menezes, 2005, Adelmann, 2005). A prpolis brasileira produzida no cerrado, rica em derivados prenilados do cido-p-cumrico (Bankova; Marcucci, 1999), conhecida internacionalmente como prpolis verde, green propolis, a qual tem como principal fonte vegetal espcie de Baccharis dracunculifolia D.C., (Bastos, 2000, 2001, Bastos et al 2000) possuindo uma colorao caracterstica que utilizada pelos japoneses para sua rpida identificao no processo de comercializao (Park et al., 2004). A prpolis verde amplamente consumida no Japo como suplemento alimentar na profilaxia de doenas devido as suas timas caractersticas organolpticas e tambm em razo do menor teor de poluentes ambientais, bem como a sua atividade antitumoral, que est relacionada principalmente com os cidos fenlicos: drupamina, artepelinC e bacarina, que podem varias de acordo com a regio e a poca do ano. Os diprinilados encontrados nessa prpolis so agentes antioxidantes importantssimos, capturando eltrons livres da cadeia respiratria e prevenindo os danos na molcula de DNA. O preo da prpolis verde no auge da exportao para o Japo, chegou a ser cotado at $200/ kg. Com o passar do tempo houve uma possvel saturao do mercado internacional e o preo caiu. O preo mdio de prpolis verde em janeiro de 2007 estava cotado a US$ 83/kg, e em janeiro de 2008, ele atingiu o preo de US$ 97/kg. O Brasil o terceiro maior produtor mundial de prpolis atrs da Rssia e China, com uma produo de 42 toneladas/ano. Minas Gerais lidera a produo nacional com aproximadamente 29 toneladas/ano, Recentemente um novo tipo: a prpolis vermelha oriunda dos manquezais e de rios dos estados da Paraba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe e Bahia, passou a ter repercusso internacional. Ela produzida a partir de um exsudato resinoso vermelho secretado pela Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub. (Vernica branca, Rabo-de-bugio) uma leguminosa pertencente a famlia Fabaceae, como resposta as leses provocadas por insetos. (Silva, et al 2007, Daugsch, et al 2007). Li et al (2007) associam a inibio de tumores de prstata, hepatites e tumores virais, a alguns flavonides na prpolis vermelha como isoliquiritigenina, daidzeina, dalbergina, formononetina e biochamina A. A prpolis vermelha produzida no Brasil est como preo oscilando no mercado internacional entre $200 a $250/Kg e a nossa produo ainda insuficiente para atender a demanda. Atualmente os USA
390
so os principais compradores. A produtividade pode ser evidentemente aumentada pela adequao e uso correto de coletores, localizao dos apirios, manejo, sazonalidade, flora disponvel e sobretudo, pelo uso de rainhas geneticamente melhoradas. (Lima, 2005; Manrique, 2001; Manrique e Soares, 2002ab) Embora as resinas e as prpolis j tenham sido demonstradas como potenciais fornecedores de matria prima para a indstria farmacutica, um dos grandes desafios compreender o verdadeiro papel dessas resinas no interior das colmias como eventuais controladores de doenas e como as abelhas detectam a necessidade de coletar e como encontrar a resina adequada. Bastos, et al (2008) constatou a eficincia da prpolis verde no controle in vitro do Paenibacillus larvae, agente causal da cria ptrida americana e isto extremamente relevante no cenrio internacional, pois abre a possibilidade de um controle natural evitando o uso indiscriminado de antibiticos e extermnios de colmias contaminadas. A grande diversidade florstica e o amplo espectro das nossas prpolis, associado capacidade coletora das abelhas africanizadas, poder assegurar ao Brasil a obteno de produtos orgnicos altamente diferenciados e aceitos no mercado internacional.
Bibliografia
ADELMANN, J. 2005. Prpolis: variabilidade composicional, correlao com a flora e bioatividade antimicrobiana / antioxidante. Dissertao de Mestrado, Cincias Farmacuticas, Universidade Federal do Paran, 167 pginas. ALENCAR, S.M.; CADORIN, T.L.; CASTRO, M.L.; RIBEIRO, I.S.; COSTA NETO, C.M.; CURY, J.A.; ROSALEN, P L. & IKEGAKI, M. 2007 Chemical composition and biological activity of a new type of Brazilian propolis: red propolis. Journal of Ethnopharmacology, 113:278-283. BASTOS, E.M. 2000. Origem botnica, propriedades fsico-qumicas e atividade antimicrobiana da prpolis verde, produzida em Minas Gerais. Anais do IV Encontro sobre Abelhas, Ribeiro Preto, SP, pp. 233-238. BASTOS, E.M. 2001. Origem botnica e indicadores de qualidade da prpolis verdeproduzida no estado de Minas Gerais, Brasil. Tese de Doutorado, Entomologia, FFCLRP-USP, 137 pginas. BASTOS, E.M.; OLIVEIRA, V.D. & SOARES, A.E.E. 2000. Microscopic characterization of the green propolis, produced in Minas Gerais, State, Brazil. Honeybee Science, 21(4):179-180. BASTOS, E.M.A.F.; SIMONE, M.; JORGE, D.M. SOARES, A.E.E. & Spivak, M. 2008. In vitro study of the antimicrobial activity of Brazilian propolis against Paenibacillus larvae. Journal of Invertebrate Pathology, 97:273-281. BEVILACQUA, M.; BEVILACQUA, M.; SERRA, E.; VIANELLO, A.; GARROU, E.; SPARAGNA; BARALE, U. & ZACCAGNA, C.A. 1977. Natural resin association such as incense and propolis zoocthenology. Agriculture, Ecosystems & Environment, 62:247-252. BREYER, E.U. 1980. Abelhas e sade. Fundao Faculdade Estadual de Filosofia, Cincias e Letras. Coleo Vale do Iguau, n 40, 1 Edio. Uniporto Grfica e Editora Ltda. Unio da Vitria, PR. 70 pp. BUCHMANN, S. L. 1987. The ecology of oil flowers and their bees. Annual Review of Ecology and Systematics, 18, 343-369. CURRIE, C.R., SCOTT, J.A., SUMMERBELL, R.C. & MALLOCH, D. 1999. Fungus-growing ants use antibiotic-producing bacteria to control garden parasites. Nature, 398, 701704. DAUGSCH, A. 2007. A prpolis vermelha do nordeste do Brasil e suas caractersticas qumicas e biolgicas. Tese de Doutorado, Cincia de Alimentos, UNICAMP, Campinas, SP.
391
DAUGSCH, A.; MORAES, C.S.; FORT, P. & PARK, Y.K. 2007. Botanical origin of Brazilian reddish propolis and its major chemical constituents. Honeybee Science, 27(2):55-62. DAUGSCH, A.; MORAES, C.S.; FORT, P. & PARK, Y.K. 2007. Brazilian red propolis - Chemical composition and botanical origin. eCAM Advance Access published July 7, 2007 FERRONATTO, R.; MARCHESAN, E.D.; PEZENTI, E.; BEDNARSKI, F. & ONOFRE, S.B. 2007. Atividade antimicrobiana de leos essenciais produzidos por Baccharis dracunculifolia D.C. e Baccharis uncinella D.C. (Asteraceae). Revista Brasileira de Farmacognosia, 17(2): 224-230. GARCIA, M. V. B.; OLIVEIRA, M. L.; CAMPOS, L. A. O. 1992. Use of seeds of Coussapoa asperifolia magnifolia (Cecropiaceae) by stingless bees in the Central Amazonian Forest (Hymenoptera: Apidae: Meliponinae). Entomologia Generalis, 17, 255-258. GRAMACHO, K.P. 1999. Fatores que interferem no comportamento higinico das abelhas Apis mellifera. Tese de Doutorado, Entomologia, FFCLRP-USP, 252 pginas. HART, A.G. & RATNIEKS, F.L.W. 2001. Task partitioning, division of labour and nest compartmentalisation collectively isolate hazardous waste in the leafcutting ant Atta cephalotes. Behav. Ecol. Sociobiol., 49, 387392. HOLLDOBLER, B. & WILSON, E.O. 1990. The Ants. Springer-Verlag, Berlin. Collective medication in ants 21_2003 Blackwell Publishing Ltd/CNRS JOHNSON, L.K. 1983a. Apiomerus pictipes (Reduvio, Chinche Asesina, Assassin bug). In: D.H. Janzen (Ed.). Costa Rican natural history, pp. 684-687. University of Chicago Press. JOHNSON, L.K. 1983b. Trigona fulviventris (Abeja Atarr. Abeja Jicote, Culo de Vaca, Trigona, Stingless bee). In: D.H. Janzen (Ed.). Costa Rican natural history, pp. 770-773. University of Chicago Press. LI, H.; KAPUR, A.; YANG, J.X.; SRIVASTAVA, S.; MCLEOD, D.G.; PAREDES-GUZMAN, J.F.; DAUGSCH, A.; PARK, Y.K. & RHIM, J. S. 2007. Antiproliferation of human prostate cancer cells by ethanolic extracts of Brazilian propolis and its botanical origin. Int. J. Oncol., 31(3):601-606. LIMA, M.G. 2005. Efeito de variveis ambientais, rainhas selecionadas e sistemas coletores na produo de prpolis por abelhas africanizadas Apis mellifera (Hymenoptera, Apoidea). Tese de Doutorado, Instituto de Biocincias, UNESP, Rio Claro, SP, 73 pginas MANRIQUE, A.J. 2001. Seleo de abelhas africanizadas para a melhoria na produo de prpolis. Tese de Doutorado, FMRP-USP, 108 pginas. MANRIQUE, A.J. & SOARES, A.E.E. 2002a. Incio de um programa de seleo de abelhas africanizadas para a melhoria na produo de prpolis e seu efeito na produo de mel. Interciencia, 27(6):312-316. MANRIQUE, A.J. & SOARES, A.E.E. 2002b. Seleccin de abejas africanizadas para produccin de prpoleo. Zootecnia Tropical, 20(2):235-246. MARTINEZ, M.J.; BETANCOURT, J.; ALONSO-GONFILEZ, N. & JAUREGUI, A. 1996. Screening of some Cuban medicinal plants activity for antimicrobial activity. Journal of Ethnopharmacology 52:171-174. MENEZES, H. 2005. Prpolis: uma reviso dos recentes estudos de suas propriedades farmacolgicas. Arq. Inst. Biol., So Paulo, 72(3):405-411. MLLER, A.P., DUFVA, R. & ALLANDER, K. 1993. Parasites and the evolution of host socialbehavior. Adv. Study Behav., 22, 65102. MORET, Y. & SCHMID-HEMPEL, P. 2000. Survival for immunity: The price of immune system activation for bumblebee workers. Science, 290, 11661168.
392
NONEAM, N.M. & GHONEIM, T. 1986. Gas chromatographic analysis of total fatty acids extracted from Schinus terebenthifolius berries. Journal of Chromatography, 361:391-395. NUNN, C.L., GITTLEMAN, J.L. & ANTONOVICS, J. 2000. Promiscuity and the primate immune system. Science, 290, 11681170. PIANARO, A. 2007. Ecologia qumica das abelhas brasileiras: Melpona rufiventris, Melipona scutellaris, Plebeia droryana, Nannotrigona testaceicornis, Tetragonisca angustula e Centris trigonoides. Dissertao de Mestrado, Instituto de Qumica, UNICAMP, 132 pginas. POINAR JR. G. O. 1992. Fssil evidence of resin utilization by insects. Biotropica, 24(3): 466-468. POULSEN, M., BOT, A.N.M., NIELSEN, M.G. & BOOMSMA, J.J. 2002. Experimental evidence for the costs and hygienic significance of the antibiotic metapleural gland secretion in leafcutting ants. Behav. Ecol. Sociobiol., 52, 151157. ROSENGAUS, R.B., LEFEBVRE, M.L. & TRANIELLO, J.F.A. 2000. Inhibition of fungal spore germination by Nasutitermes: Evidence for a possible antiseptic role of soldier defensive secretions. J. Chem. Ecol., 26, 2139. ROSENGAUS, R.B., MAXMEN, A.B., COATES, L.E. & TRANIELLO, J.F.A. 1998. Disease resistance: a benefit of sociality in the dampwood termite Zootermopsis angusticollis (Isoptera: Termopsidae). Behav. Ecol. Sociobiol., 44, 125134. ROUBIK, D. W. 1989. Ecology and Natural History of Tropical Bees. Cambridge: Cambridge University Press, 514 p. SANTOS, C.G. 2007. Aspectos comportamentais e morfolgicos de Plebeia emerina (Friese, 1900) (Hymenoptera, Apidae, Meliponini) relacionados prpolis. Tese de Doutorado, Zoologia, Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul, 59 pginas. SCHMID-HEMPEL, P. 1998. Parasites in Social Insects. Princeton University Press, Princeton NJ. SILVA, B.B.; ROSALEN, P.L.; CURY, J.A.; IKEGAKI, M.; SOUZA, V.C.; ESTEVES, A. & ALENCAR, S.M. 2007. Chemical composition and botanical origin of red propolis, a new type of Brazilian propolis. eCAM Advance Access published July 7, 2007 TELLA, J.L. 2002. The evolutionary transition to coloniality promotes higher blood parasitism in birds. J. Evol. Biol., 15, 3241 TRANIELLO, J.F.A., ROSENGAUS, R.B. & SAVOIE, K. 2002. The development of immunity in a social insect: evidence for the group facilitation of disease resistance. Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 99, 68386842. TRUSHEVA, B.; POPOVA, M.; BANKOVA, V.; SIMOVA, S.; MARCUCCI, M.C.; MIORIN, P.L.; PASIN, F.R. & TSVETKOVA, I. 2006. Bioactive constituents of Brazilian red propolis. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine, 3(2): 249-254. WILLIE, A. & CHANDLER, L.C. 1964. A new stingless bee from the tertiary amber of the Dominican Republic (Hymenoptera; Meliponini). Rev. Biol. Trop., 12:187-195.
393
Estudo das Fontes Vegetais de Prpolis Brasileira por Espectrometria de Massas.

Alexandra Christine Helena Frankland Sawaya Universidade Bandeirante de So Paulo, UNIBAN, Mestrado em Farmcia, Rua Maria Cndida 1813, Vila Guilherme, CEP 02071-013, So Paulo, 011-29679147, franksawaya@terra.com.br
Resumo
A prpolis uma resina obtida de plantas que as abelhas utilizam, acrescida de cera, para proteger sua colmia contra a entrada de correntes de ar, de predadores e de microrganismos. A composio qumica e fontes vegetais de prpolis obtida das abelhas Apis mellifera de regies de clima temperado como Europa e Amrica do Norte, j foi estudada, constando da literatura pesquisada. Com o objetivo de determinar a composio qumica e fontes vegetais de prpolis brasileira, foram feitos vrios estudos, utilizando a espectrometria de massas com ionizao por eletrospray (ESI-MS). Foram analisadas amostras de prpolis de Apis mellifera provenientes de todas as regies do Brasil e da Bulgria, Inglaterra, Finlndia, Amrica do Norte e Moambique. Tambm foram extratos de plantas sugeridas como fontes vegetais de prpolis destas regies. Inicialmente, amostras e prpolis da abelha nativa brasileira (Tetragonisca angustula) proveniente do sul, sudeste e nordeste do Brasil foram comparados entre si e com extratos de plantas visitadas por estas abelhas, permitindo a identificao da fonte vegetal desta prpolis. Depois, prpolis diversas abelhas nativas sem ferro de cinco regies do Brasil foram comparadas entre si e com de extratos de plantas e prpolis de A. mellifera das mesmas regies, determinando padres na composio de prpolis de abelhas nativas. Os resultados obtidos contriburam para um melhor conhecimento da varivel composio qumica de prpolis brasileira. Palavras chave: prpolis, fontes vegetais, resinas, espectrometria de massas, abelhas nativas sem ferro, Apis mellifera. Study of the plant origins of Brazilian propolis by mass spectrometry.
Abstract
Propolis is a resin, collected from plants, which bees mix with wax and use to protect their hives against air currents, predators and microorganisms. The chemical composition and plant origins of propolis obtained from Apis mellifera bees from temperate regions such as Europe and North America, have already been studied and can be found in literature. With the objective of determining the chemical composition and plant origins of Brazilian propolis, several studies were carried out, using electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS). Samples of propolis from all regions of Brazil from Bulgaria, England, Finland, North America and Mozambique, were analyzed by direct insertion ESI-MS. Extracts of plants that were previously indicated as plant sources of propolis from those regions. Initially propolis samples of the native bee (Tetragonisca angustula) from the south, southeast and northeast of Brazil were compared with each other and with extracts of plants visited
394
by T. angustula, allowing us to identify the main plant source of this type of propolis. Next, propolis of several species of native stingless bees from five regions in Brazil were also compared with plant extracts and propolis of A. mellifera from the same regions, identifying patterns in the composition of propolis from native Brazilian stingless bees. The results obtained contributed to a grater understanding of the variable composition of Brazilian propolis and its plant sources. Key words: propolis, plant sources, resins, mass spectrometry, native stingless bees, Apis mellifera.
Introduo
A prpolis uma resina obtida de plantas que as abelhas utilizam, acrescida de cera, para proteger sua colmia contra a entrada de correntes de ar, de predadores e de microrganismos. Devido a suas propriedades antimicrobianas vem sendo usada desde o antigo Egito. Sendo utilizada empiricamente como remdio tradicional na Europa, os primeiros paises a estudar a prpolis foram os do bloco comunista da Europa oriental, portanto a composio qumica da prpolis de regies de clima temperado como Europa e Amrica do Norte foi a primeira a ser estudada. Sabe-se que as abelhas Apis mellifera, nativas da Europa, visitam preferencialmente as rvores do gnero Populus e os principais compostos encontrados na prpolis europia so flavonides. (Cizmarik e Matel, 1970; Bankova et al., 1988; Greenaway et al. 1990). Em regies onde rvores do gnero Populus no so nativas, como na Amrica do Sul, as abelhas procuram resinas de outras plantas para fabricar a prpolis. Na prpolis da Venezuela foram encontradas benzofenonas preniladas, que levou os autores do estudo (Toms-Barbern et al.1993) a crer que resinas comuns a todas estas amostras partiram de plantas do gnero Clusia, tpicas de clima tropical. Os primeiros estudos da composio da prpolis brasileira, obtida de abelhas Apis mellifera, mostraram que ela diferente da europia (Aga et al., 1994; Bankova et al., 1995) e que tambm varia de acordo com a regio geogrfica da qual provem (Marcucci et al., 2000). No Brasil encontramos prpolis de cores que variam do verde ao vermelho, passando por tons de amarelo e marrom, indicativas de variao na sua composio. O tipo de prpolis brasileira mais estudada (e exportada) a prpolis verde do sudeste, proveniente de abelhas A. mellifera, que caracterizada por conter derivados prenilados do cido p-cumrico (Marcucci et al., 1998) e deriva de resinas da Baccharis dracunculifolia ou vassourinha. H tambm crescente interesse na prpolis oriunda de abelhas nativas sem ferro, que so as polinizadoras naturais da Amrica do Sul. Por serem pouco agressivas, so de fcil manejo e a propagao de suas colnias ajuda a manter a biodiversidade. Apesar disto h um baixo nvel de domesticao destas abelhas (Heard, 1999), uma exceo sendo a abelha nativa do Brasil Tetragonisca angustula, conhecida como jata, encontrada do Mxico at a Argentina (Oliveira et al., 2004). Apicultores freqentemente mantm colnias destas abelhas, pois o seu mel vendido a preos mais altos que o mel de abelha comum, alm de colnias de abelhas Apis mellifera, porm at recentemente pouco se sabia sobre as origens vegetais de sua prpolis. Para a anlise dos componentes volteis e semivolteis da prpolis, a cromatografia gasosa acoplada espectrometria de massas (GC-MS) foi usada (Bankova et al 1992, Marcucci et al 1998, Pereira et al 2000). Porm, a prpolis contm muitos compostos de baixa volatilidade e alta polaridade que no so adequados para anlise por GC-MS (Bankova et al 1982, Marcucci et al., 2001) mesmo com derivatizao (Pereira et al 2000) Muitos desses compostos, como os derivados prenilados do cido p-cumrico j citados, tm importante atividade farmacolgica. Por este moAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
395
tivo importante usar tcnicas mais modernas, como espectrometria de massas com ionizao por electrospray (ESI-MS) que so mais adequadas para o estudo destes compostos polares, na anlise da prpolis (Sawaya et al., 2004; Sawaya et al., 2006; Sawaya et al., 2007) e na identificao das fontes vegetais de suas resinas. A ESI uma tcnica branda que transfere as molculas ionizadas em soluo diretamente para a fase gasosa. A ESI-MS pode ser usada com insero direta, obtendo um perfil da amostra, chamado de fingerprint; ou pode ser acoplada a cromatografia lquida de alta eficincia (HPLC-ESI-MS) para analisar os compostos isolados. A ESI conveniente para anlise direta de extratos naturais complexos porque a maioria dos compostos que contm stios cidos ou bsicos ser detectada como um nico on, na sua forma protonada [M+H]+ ou desprotonada [M-H]-. A espectrometria de massas seqencial (MS/MS) com dissociao induzida por coliso dos [M+H]+ ou [M-H]- pode ser usada para elucidao estrutural. A espectrometria de massas constitui hoje uma das mais abrangentes e versteis tcnicas instrumentais em cincia, sendo de fundamental importncia para a anlise e identificao de compostos naturais.
Objetivos
Foram realizados vrios estudos comparativos de amostras de prpolis de abelhas A.mellifera de abelhas nativas sem ferro provenientes de vrias regies do Brasil, amostras de prpolis de A.mellifera de outros pases e extratos de plantas visitadas pelas abelhas, por ESI-MS visando: 1.Identificar padres de composio regional da prpolis de Apis mellifera. 2.Identificar padres de composio de prpolis de abelhas nativas sem ferro. 3.Comparar a composio dos tipos de prpolis com extratos de plantas que podem ser fontes vegetais de suas resinas.
Material e mtodos
Espectrmetro de massas Foi usado um espectrmetro de massa Q-TOF (Micromass) hbrido com um quadrupolo e um analisador de massas por tempo de vo (TOF) com alta resoluo. As condies de ESI-MS usadas foram: capilar +3000 V, cone +40V, temperatura de dessolvatao 100 C. Para as anlises por ESI-MS com insero direta foi usada uma bomba de seringa marca Harvard Apparatus, com fluxo de10 L/min. Extrao e diluio de amostras Amostras de prpolis de Apis mellifera do Brasil e outros pases, bem como amostras de prpolis de abelhas nativas foram extradas por macerao em um shaker por 7 dias, velocidade de 100 opm, temperatura de 30 oC com etanol e depois filtrados para retirar as partes insolveis. Estes extratos foram mantidos em um freezer por 24 horas e novamente filtrados temperatura de 16 oC para retirar as ceras. Depois o solvente foi evaporado em banho Maria a 50 oC e obtidos os extratos secos. Estes foram dissolvidos a uma concentrao de aproximadamente 50 ng/mL em uma soluo contendo 70% de metanol grau cromatogrfico e 30% de gua purificada por Milli-Q. Para anlise em modo negativo as solues foram acrescidas de 0,5% de hidrxido de amnio e para anlise em modo positivo as solues foram acrescidas de 0,5% de cido frmico. Foram feitos extratos metanlicos por macerao das partes areas de mais de vinte plantas visitadas por abelhas, incluindo Baccharis dracunculifolia, Araucria angustifolia e Schinus terebenthifolius. TamAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
396
bm foram feitos extratos superficiais por sonicao de 10 minutos com diclorometano e com metanol, bem como extratos por macerao de uma semana com diclorometano e com metanol, com as flores, frutos e folhas de Schinus terebenthifolius. Estes extratos foram secos e re-diludos como os de prpolis. Quimiometria A quimiometria foi utilizada para correlacionar as amostras estatisticamente. A anlise de Componentes Principais foi executada usando a verso 2.60 do programa Pirouette (Infometrix, Woodinville, WA, USA). A idia principal por trs desta anlise a reduo da dimenso dos dados em uma situao onde h um numero grande de variveis correlacionadas, facilitando o agrupamento de amostras.
Fingerprint de prpolis de Apis mellifera por ESI-MS. (Sawaya et al., 2004) Os extratos de prpolis de Apis mellifera do Brasil (estados de Minas Gerais, So Paulo, Paran, Mato Grosso do Sul, Bahia e Alagoas), Bulgria, Inglaterra, Finlndia, Amrica do Norte e Moambique, obtidos e diludos da maneira descrita acima, foram inseridos diretamente e analisados por ESIMS. Foram obtidos espectros na faixa de 100 a 1000 m/z, em modo positivo e negativo das amostras de prpolis, porm, somente os fingerprints obtidos em modo negativo caracterizaram claramente as amostras. Isto se explica pelo fato que os compostos mais importantes da prpolis contm grupos cidos e fenlicos, que se ionizam mais facilmente em modo negativo. Deste modo, a comparao dos fingerprints das amostras permitiu que estas pudessem ser divididas em grupos diretamente relacionados sua origem geogrfica . Como no foram observados ons intensos com m/z acima de 500, os fingerprints so apresentados de m/z 100 a 650. As amostras do sudeste do Brasil (de cor predominantemente verde) tm entre si composio bsica muito similar, e formaram o grupo G. Este grupo compreendeu o maior nmero de amostras analisadas (5 de SP, 12 de MG e 1 PR) com ons caractersticos em m/z [M-H]- 231, 299, 363. Um segundo grupo, de cor marrom esverdeada formou o grupo B2 (6 amostras do PR, 1 de MS), cujo fingerprint mostra os mesmos ons do grupo G e mais ons em m/z 229, 301, 319, 351 e 361. No grupo B1 (4 amostras do PR) de prpolis marrom observamos a presena dos ons em m/z 253, 255, 301, 319, 351 e 361 nos seus fingerprints e a ausncia dos ons caractersticos em m/z 229, 231 e 299. Um estudo dos fingerprints das amostras neste grupo mostrou que amostras B2 apresentam uma mistura dos ions dos grupos B1 e G, acrescida do on m/z 229, que caracterstico somente para este grupo. As amostras do nordeste, de cor avermelhada, apresentaram dois fingerprints diferentes. As amostras do grupo R1 (2 da BA e 1 de AL) com ons mais intensos em m/z 255, 267, 271, 285, 519 e 601 apresentaram cor vermelho rubi enquanto as amostras do grupo R2 (5 amostras da Bahia) com ons mais intensos em 255, 281, 311, 325, 339 e 441 apresentaram cor marrom avermelhada. As amostras de Moambique apresentaram um fingerprint diferente das brasileiras e das amostras de pases com clima temperado. Os ons mais intensos desta amostra foram m/z 239, 255, 269, 369 e 373. As duas amostras dos Estados Unidos apresentaram fingerprint similares s amostras de origem europia, que coerente com o fato que prpolis de pases temperados tm sua origem nas resinas de Populus. Os ons mais intensos observados foram m/z 253, 255, 269, 271 e 313. Os mesmos ons foram os mais intensos encontrados em uma amostra de prpolis europia por Mauri e Pietta (2000) utilizando ESI-MS em modo negativo.
397
Estudo comparativo da composio de prpolis proveniente de Apis mellifera e Tetragonisca angustula (jata) das mesmas regies do Brasil por ESI-MS. (Sawaya et al., 2006) Como a composio da prpolis proveniente de abelhas Apis mellifera, que no nativa do Brasil, varia consideravelmente de acordo com a regio da qual provm, avaliamos amostras de prpolis da abelha Tetragonisca angustula (jata), das mesmas regies e extradas seguindo o mesmo procedimento que as amostras de prpolis de Apis mellifera. A inspeo visual dos fingerprints mostra que as amostras de prpolis de jata das regies nordeste, sudeste e sul apresentam os mesmos ons [M-H]principais, indicando que uma planta seja a principal fonte das resinas empregadas na confeco da prpolis. Seguindo indicaes dos apicultores sobre as plantas visitadas por estas abelhas, foram feitos extratos metanlicos das partes areas de mais de vinte plantas e analisadas por ESI-EM em modo negativo, do mesmo modo que as amostras de prpolis. Somente uma planta, Schinus terebenthifolius, apresentou alguns dos componentes encontrados na prpolis de jata. Portanto esta planta, conhecida popularmente como aroeira vermelha ou aroeira mansa, foi estudada mais detalhadamente. Foram feitos extratos com as flores, frutos e folhas desta planta. Os resultados de estudos da planta S. terebenthifolius, encontrados na literatura demonstrram que ela contm vrios triterpenos (Kaistha and Kier 1962 a b,Campello e Marsaioli, 1974, Campello e Marsaioli, 1975, Lloyd et al., 1977). Destes, os cidos masticadienico e masticadienlico tem propriedades farmacolgicas. Eles so inibidores da fosfolipase A2 e podem ser usados para o controle de processos inflamatrios (Jain et al., 1995). Estes compostos foram encontrados nas flores e frutas de S. terebenthifolius bem como em prpolis de jata. Comparao da prpolis de Apis mellifera das regies sul e sudeste do Brasil com extratos de plantas. (Marcucci et al., 2008) Foram analisados amostras de prpolis provenientes de abelhas A. mellifera do sul e sudeste do Brasil e extratos de plantas que podem ser as fontes vegetais das resinas de prpolis destas regies. Foram comparados fingerprints das amostras de prpolis verde de So Paulo e Minas Gerais com o do extrato da planta, Baccharis dracunculifolia, que j foi citada como fonte vegetal deste tipo de prpolis. Observa-se que ambos tm muitos ons principais em comum, confirmando a semelhana entre a composio dos dois. Ao comparar o fingerprint de B. dracunculifolia com aquele obtido de uma amostra de prpolis verde do Paran, verifica-se que tambm h muita semelhana entre os ons observados nos fingerprints dos dois. A principal diferena entre prpolis verde do sudeste e a verde do Paran a presena do on de m/z 229 (cido 2,2-dimetil -2H-1-benzopirano-6-propenico) encontrado na prpolis do Paran, mas somente encontrado ao nvel de traos na propolis verde do sudeste. Este composto est presente tambm nos extratos de B. dracunculifolia, sugerindo que esta planta tambm seja a fonte vegetal da prpolis verde do Paran. Mudanas no metabolismo da planta, talvez relacionadas ao clima, poderiam levar a um aumento na biossntese do cido 2,2-dimetil-2H-1-benzopirano-6-propenico, resultando na maior concentrao deste composto na prpolis verde do Paran. Mais ao sul do Brasil (Paran e Santa Catarina) encontra-se a prpolis marrom. O fingerprint deste tipo de prpolis tem muitos ons em comum com as resinas de Araucria angustiflia, uma planta tpica das florestas daquela regio. Ao compar-los observam-se vrios ons intensos em comum (m/z 301, 319, 333 e 361) que foram identificados como terpenos. Destes, apenas o composto, cido E/Z comnico, fora identificado em amostras de prpolis brasileira e em resinas de A. angustiAnais do VIII Encontro sobre Abelhas, 2008 Ribeiro Preto - SP, Brasil
398
folia (Bankova et al., 1999). Por outro lado, flavonides encontrados nas amostras de prpolis do sul (crisina e pinocembrina de m/z 253 e 255 respectivamente) no foram encontrados nas resinas de A. angustifolia, indicando que outra planta fornece parte das resinas da prpolis marrom do sul. No estado do Paran encontramos ainda um tipo de prpolis marrom mista contendo compostos observados na prpolis verde do Paran e na marrom do sul. Esta prpolis resultante da colheita de resinas de ambas fontes vegetais (B. dracunculifolia e A. angustifolia). coerente que as amostras deste tipo de prpolis sejam provenientes do estado do Paran, onde h a mudana entre a zona tropical e subtropical, com a superposio da vegetao destes dois climas. Comparao de prpolis de abelhas nativas de diversas regies. (Sawaya et al., 2007) Ao longo dos estudos efetuados com prpolis de A. mellifera e T. angustula foram coletadas amostras de outras abelhas nativas sem ferro. A identificao da espcie de abelha foi feita pelos apicultores e pesquisadores que forneceram as amostras. A anlise por PCA dos fingerprints das amostras de prpolis as divide em trs grupos principais correspondentes a ons caractersticos observados nos fingerprints. Uma anlise detalhada destes ons nos permitiu identificar as fontes vegetais de dois grupos de amostras. O Grupo 1 composto de 9 amostras de prpolis de abelhas nativas e de A. mellifera do interior da Bahia. Como exemplos tpicos do grupo 1, temos fingerprints de T. angustula de Minas Gerais e de P. droryana de So Paulo. Os ons de m/z 371, 373, 401, 455, 469 e 471 que so diagnsticos destas amostras, so tambm caractersticos de prpolis de T. angustula em todo o Brasil, e derivados de resinas de S. terebenthifolius, que fonte vegetal principal deste grupo. O Grupo 2 tambm composto de 9 amostras de prpolis: 7 provenientes de abelhas nativas e de A. mellifera oriundas do Paran; uma de Melipona favosa de Mato Grosso do Sul e uma de M. quadrifasciata de So Paulo. Os ons de m/z 301, 315, 317, 319, 333, e 361 so caractersticos desta amostras e de amostras de prpolis marrom de A.mellifera do sul do Brasil. Estes ons tambm foram encontrados em resinas de rvores do gnero Araucria. A maioria das amostras do Grupo 2 provem do estado do Paran, onde estas rvores so comuns e estas resinas aparentemente so a principal fonte vegetal para prpolis de abelhas nativas e A. mellifera. Nos fingerprints das amostras de prpolis do sul do Brasil encontramos tambm os ons de m/z 253, 255 (crisina e pinocembrina) flavonides caractersticos da prpolis de A. mellifera do sul do Brasil, e de prpolis europia. Duas amostras de prpolis (P. droryana de So Paulo e P. remota do Paran) obtiveram suas resinas de ambas as fontes vegetais ; S. terebenthifolius e araucria. O Grupo 3 composto de seis amostras de prpolis: da Bahia e Amazonas; on mais caracterstico destas amostras o de m/z 271. Notamos tambm o on de m/z 601, caracterstico de prpolis vermelha do litoral da Bahia observado com baixa intensidade em vrias amostras de prpolis de abelhas nativas desse estado. Tambm observamos no fingerprint de prpolis deste grupo, ons menos intensos, porm caractersticos de S. terebenthifolius (m/z 373, 401, 453 e 469), indicando que at na regio norte esta rvore uma fonte vegetal importante para prpolis de abelhas nativas. A maioria dos fingerprints de prpolis de abelhas nativas apresentou ons caractersticos de S. terebenthifolius , e somente trs no apresentaram sequer traos desses ons. Estes resultados so coerentes com os relatos de diversas abelhas nativas visitando esta rvore. Em regies onde outras fontes vegetais esto presentes, as abelhas nativas se adaptam e podem usar tambm outras plantas (como araucaria no sul do Brasil), porm em nenhuma amostra de prpolis de abelhas nativas foram observados marcadores de B. dracunculifolia , a principal fonte vegetal de prpolis verde de A. mellifera.
399
Agradecimentos
Pesquisas financiadas por FAPESP e CNPq.
Aga, H., Shibuya, T., Sugimoto, T. et al. (1994). Isolation and Identification of Antimicrobial Compounds in Brazilian Propolis. Biosci. Biotech. Biochem. 58: 945-6. Bankova, V., Popov, S.,Marekov,N. et al. (1982) High performance liquid chromatographic analysis of flavonoids from propolis. J. Chromatography,242:135-43. Bankova, V., Popov, S.,Marekov,N. et al (1988) On the chemical composition of some propolis fractions with antiviral action. Acta Microb.Bulg.23: 52-7. Banova, V.; Dyulgeov, A.; Popov, S. et al.(1992). Propolis produced in bulgria and Monglia: phenolic composition and plant origin. Apidologie, 23:79-85. Bankova, V., Christov, R., Kujumgiev, A., et al.(1995) Chemical Composition and Antibacterial activity of Brazilian Propolis, Z.Naturforsch. 50 C:167-72. Bankova, V.; Bourdourova-Krasteva, G.; Sfocin J. M. et al.(1999)Phytochemical evidence for the plant origin of Brazilian propolis from So Paulo state. Z. Naturforsch. 54 C:401-5. Campello J. P., Marsaiolli, A. J. (1974) Triterpenes of Schinus terebenthifolius, Phytochemistry13: 659-60. Campello J. P., Marsaiolli, A. J. (1975) Terebinthifolic acid and bauerenone: New Triterpenoid Ketones from Schinus terebenthifolius. Phytochemistry. 14: 2300-2. Cizmarik, J.; Matel, I. (1970) Examination of the chemical composition of propolis. Experientia, 26:713. Greenaway, W., Scaysbrook, T., Whatley, F. R. (1990) The composition and plant origins of propolis, Bee World,71: 107-118. Heard, T. A.(1999) The role of stingless bees in crop pollination, Ann.Reviews Entomol. 44:183-206. Jain, M. K.; Yu, B.; Rodgers, J. M. et al.(195) Specific competitive inhibitor of secreted Phospholipse A2 from berries of Schinus terebenthifolius, Phytochemistry 39: 537-47. Kaistha, K. K.; Kier,L. B. (1962 a) Structural studies on Terebinthone from Schinus terebenthifolius, J. Pharm. Sci. 51: 245-8. Kaistha, K. K.; Kier,L. B. (1962 b) Structural studies on the triterpenes of Schinus terebenthifolius, J. Pharm. Sci. 51: 1136-9. Lloyd, H. A.; Jaouni, T. M.; Evans, S. L. et al. (1977) Terpenes of Schinus terebenthifolius, Phytochemistry.16: 1301-2. Marcucci, M. C.; Rodriguez, J.; Ferreres, F. et. al. (1998) Chemical composition of Brazilian propolis from So Paulo State. Z. Naturforsch. 53C:117-9. Marcucci, M.C., Ferreres, F., Custdio, A.R., et al., (2000) Evaluation of Phenolic Compounds in Brazilian Propolis from Different Geographic Regions, Z. Naturforsch. 55C: 76-81. Marcucci, M.C., Ferreres, F Garcia-vigueira, V. C. et al.(2001) Phenolic compounds from Brazilian propolis with pharmacological activities. J. Ethnopharm. 74: 105-12. Marcucci MC, Sawaya ACHF, Custodio AR, Paulino N, Eberlin MN. (2008) HPLC and ESI-MS Typification: New approaches for natural therapy with Brazilian propolis. IN: Scientific evidence of the use of propolis in ethnomedicine. Research Signpost, India, in press.
400
Mauri, P.; Pietta P.(2000) Electrospray characterization of selected medicinal plant extracts. J. Pharm.Biomed. Anal.23:61-8. Oliveira, R. C.; Nunes,F. M. F.; Campos,A. P. S. et al.(2004) Genetic divergence in Tetragonisca angustula Latreille, 1811 (Hymenoptera, Maeliponiae, Trigonini) based on rapd markers. Gen. Molecular Biol.27:181-6. Pereira, A. S.; Norsell, M.; Cardoso, J. N. et al. (2000)Rapid screening of polar compounds in Brazilian propolis by high-temperature high-resolution gas chromatography-mass spectrometry. J. Agric. Food Chem. 48:5226- 30. Sawaya, A. C. H. F., Tomazella, D. M., Cunha, I. B. S., et al.(2004) Electrospray ionization mass spectrometry fingerprinting of propolis. Analyst 129: 739- 44. Sawaya, A. C. H. F., Cunha, I. B. S., Marcucci, . C., Oliveira, R. F., Eberlin, M. N. (2006) Brazilian Propolis of Tetragonisca angustula and Apis mellifera, Apidologie 37: 398-407. Sawaya, A. C. H. F., Cunha, I. B. S., Marcucci, . C., Aidar, D. S., et al., (2007) Electrospray Ionization Mass Spectrometry Fingerprinting of Propolis of native Brazilian stingless bees. Apidologie 38: 93-103. Toms-Barbern, F. A., Vigueiera, C. G., Vishinevskaya, L. I., et al.(1993) Phytochemical evidence for the botanical origin of tropical propolis from Venezuela. Phytochemistry 34:191-5.
401
Phenolic Composition, Antimicrobial and in Vitro Antioxidant Activities of Brazilian Red Propolis
Phenolic composition and biological activities of Brazilian propolis Oldoni, T.L.C.1; Cabral, I.S.R.1; Rosalen, P.L.2; Ikegaki, M.3; Alencar, S.M.1* 1 Departamento de Agroindstria, Alimentos e Nutrio. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Universidade de So Paulo Piracicaba/SP. 2 Departamento de Cincias Fisiolgicas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba Universidade Estadual de Campinas Piracicaba/SP. 3 Departamento de Farmcia. Universidade Federal de Alfenas Alfenas/MG. * Corresponding author. Tel.:0xx19 3429- 4150; Fax: 0xx19 3429-4288. E-mail address: alencar@esalq.usp.br
Abstract
Natural products have been a successful source for developing new and effective drugs and most of the currently commercially available drugs are from or derived from natural products. Propolis, a nontoxic beehive product, presents anticariogenic, antimicrobial, antiinflammatory and anticarcinogenic properties, and new drug and patent have been derived from this natural product. A new type of propolis produced in the northeastern of Brazil, denominated red propolis, had its raw ethanolic extract (EEP) submitted to partition with unmiscible solvents to generate a hexanic fraction (H-fr) and a chloroformic fraction (Chlo-fr). Thus, the aim of this study was to evaluate the chemical composition and biological activity of Brazilian red propolis. The EEP was analyzed by CG-MS and 20 compounds were identified, 7 having never before been found in Brazilian propolis samples, among which 4 were isoflavones. The EEP and Chlo-fr presented antimicrobial activity against S. aureus ATCC 25923 and S. mutans UA159, but the Chlo-fr was the most active fraction with lower MIC ranging from 25 to 50 g/mL. The best sequestrating activity for the free radical DPPH was obtained for the H-fr that presented the highest total flavonoid content (158 mg/g) and lowest total phenolic compound concentration (167 mg/g). As the fractions were more active than the EEP, these results demonstrated that the biological properties of this propolis are not the function of a synergism among the various compounds. Introduction Natural products have been invaluable as tools for deciphering the logic of biosynthesis and as plataforms for developing front-line drugs (Newman et al., 2000; 2002). They are still the major sources of innovative therapeutic agents for infectious diseases, cancer, lipid disorders and immunomodultation (Clardy and Walsh, 2004). Twenty eight percent of all new approved drugs by the Food and Drug Administration (FDA) or comparable entities in other countries were natural products (vs. 33% of totally synthetic drug), and 39% were derived from natural product (Newman et al., 2003). The value of natural products is clearly recognized and the challenges are to identify the novel active compounds and to elucidate the mechanisms of action.
402
Among these natural products, propolis, a resin collected by bees of the species Apis mellifera from various parts of plants, such as shoots, flower buds and resinous exudates (Ghisalberti, 1979), has demonstrated several biological activities, such as antimicrobial, antiinflammatory (Park et al., 1998; Kujumgiev et al., 1999; Marcucci et al., 2001), anticariogenic (Koo et al., 2000; Duarte et al., 2006), anticarcinogenic, antioxidant (Chen et al., 2003; Aso et al., 2004; Kumazawa et al., 2004; Alencar et al. 2007) as well as the possibility of application in the pharmaceutical and food industries in the form of functional foods (Ackermann, 1991). At present, a new type of propolis, denominated red propolis, because its intense red color, which demonstrated antioxidant and antimicrobial activities in preliminary in vitro assays in our laboratory, suggesting a detailed study about its biological properties and chemical composition. Thus, the aim of this study was to assess the phenolic composition and antimicrobial and antioxidant activities of the raw ethanolic extract of Brazilian red propolis (EEP) and its hexanic (H-fr) and chloroformic (Chlo-fr) fractions. Material and methods Propolis samples and fractionation The samples of the raw red propolis produced by Apis mellifera bees were collected in the northeastern region of Brazil, State of Alagoas, on month of March 2005, and classified as a new type of Brazilian propolis when compared to Parks classification (Park et al., 2000). The ethanolic extract of propolis (EEP) was prepared by the extraction of 100 grams of propolis in 450 mL of 80% ethanol, at 70C, for 30 min. A serial partition of the EEP was done with hexane and chloroform solvents. The hexanic (H-fr) and chloroformic (Chlo-fr) fractions were concentrated in a rota-evaporator at 70C to obtain a yield of 11.1 g and 28.5 g, respectively. Total polyphenol and flavonoid contents Total polyphenol contents in EEP, H-fr and Chlo-fr were determined by the Folin-Ciocalteau colorimetric method (Singleton et al., 1999). Extract solutions (0.5 mL) were mixed with 2.5 mL of the Folin-Ciocalteau reagent (1:10) and 2.0 mL of 4% Na2CO3, and the absorbance was measured at 740 nm after 2h incubation at room temperature, in the dark. EEP and its fractions were evaluated at the final concentration of 90 g/mL. Total polyphenol contents were expressed as mg/g (gallic acid equivalents). Total flavonoid contents in extracts were determined by the Park et al. (1995) method, with minor modifications. To 0.5 mL of EEP, H-fr or Chlo-fr solution, 4.3 mL of 80% ethanol, 0.1 mL of 10% Al(NO3)3 and 0.1 mL of 1M potassium acetate was added. After 40 min at room temperature, the absorbance was measured at 415 nm. EEP, H-fr and Chlo-fr were evaluated at the final concentration of 2 mg/mL. Total flavonoid contents were calculated as quercetin (mg/g) from a calibration curve. Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) EEP analyses were performed after methylation of the extracts, as described by Markham et al. (1996). EEP aliquots of 400 L (10 mg/mL) were introduced into glass vials. A solution of CH2N2 was added to each of the sample solutions. Samples of the methylated solutions were analyzed by GC-MS using a 30 m x 0.25 mm i.d. CBP5 column installed in a GC 17A (Shimadzu Co.) instrument interfaced with a QP 5000 mass selective detector operated in scanning mode
403
(m/z 40-400). GC-MS analysis was temperature programmed from 50 C (0.3 min hold) to 285 C (15 min hold) at 6 C min. Samples were injected with a AOC-17 autoinjector using a splitless injection technique (0.6 l injection volume). The GC-MS peaks were identified by comparison with data from the literature and the profiles from the Wiley 138 and Nist 98 libraries. Antimicrobial activity The antimicrobial activity of EEP, H-fr and Chlo-fr was examined by determining the minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) in accordance with the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) guidelines and Koo et al. (2000). The bacterial strains used were Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Streptococcus mutans UA159. To determine MIC, the starting inoculum was 1-2108 CFU/mL, and the test extract concentrations ranged from 12.5 to 1600 g/mL. The control vehicle was ethanol (final ethanol concentration: 0.6%, v/v). MIC was defined as the lowest concentration of test extracts that inhibited bacterial growth (no visible growth) (Koo et al., 2000) For determining MBC, an aliquot (50 L) of all incubated tubes with concentrations higher than MIC was sub-cultured on BHI agar, supplemented with 5% of defibrinated sheep blood with a Spiral plater (Whittley Automatic Spiral Plater). MBC was defined as the lowest concentration that allows no visible growth on the agar (Koo et al., 2000a). Triplicate of three separate experiments were conducted for each concentration of the extracts tested. Free Radical-Scavenging Activity on DPPH The effect of DPPH radical scavenging was evaluated in accordance with the method of Chen et al. (2003) with a slight modification. The assay mixture contained 0.5 mL of EEP, H-fr or Chlofr solution, 3.0 mL of ethanol P.A and 0.3 mL of 0.5 mM DPPH ethanolic solution. After 40 min of incubation at room temperature in the dark, the absorbance was recorded at 517 nm. Results were expressed as percentage decrease with respect to control values. EEP, H-fr and Chlo-fr samples were evaluated at final concentration of 90 g/mL, and -tocopherol and BHT at the same concentration were used as the reference samples. Results and Discussion In this study, a new type of Brazilian propolis, denominated red propolis, collected from northeastern is presented. It has an intense red color and chemical composition different from that of the 12 types of Brazilian propolis classified by Park et al. (2000). The analysis of the red propolis by GC-MS has enabled the identification of 20 compounds (Table 1). The following compounds were identified for the first time in Brazilian propolis samples: methyl o-orsellinate (6), methyl abietate (11), 2,4,6-trimethylphenol (15), homopterocarpin (13), medicarpin (14), 4,7-dimethoxy-2-isoflavonol (16) and 7,4-Dihydroxyisoflavone (17). The presence of at least 4 isoflavones, never before reported in propolis, could be observed, and the isoflavones homopterocarpin (13), medicarpin (14) and 4,7-dimethoxy-2isoflavonol (16) presented as the most abundant compounds by the CG-MS technique. There are several studies in the literature, showing that these isoflavones have antimicrobial, antifungal, anticancer and antioxidant action (Soby et al., 1997; Militao et al., 2006). The isoflavones are typical compounds of the legume family and thus, these compounds may be useful as chemical markers of this new type of Brazilian propolis.
404
Table 1: Chemical compounds assessed by GC-MS of EEP from Brazilian red propolis (RT: retention time, min) Peak No RT Compounds Butanedioic acid, dimethyl ester hydroxy-butanedioic acid, dimethyl ester m-guaiacol 1-methoxy-4-(1-propenyl)-benzene methyleugenol methyl o-orsellinate 1,2,3-trimethoxy-5-(2-propenyl)-benzene methoxyeugenol hexadecanoic acid, methyl ester 10-octadecenoic acid, methyl ester methyl abietate benzoic acid homopterocarpin medicarpin 2,4,6-trimethylphenol 4,7-dimethoxy-2-isoflavonol 7,4-Dihydroxyisoflavone 2H-1-benzopyran-7-ol 2,2,6-beta-trimethyl-bicyclo(4.3.0)non-9(1)-en-7.alpha.-ol 1,1,2-trimethyl-3,5-bis(1-methylethenyl)-, (2.alpha., 3.alpha., 5.beta.)-cyclohexane
1 9.88 2 12.46 3 15.31 4 16.82 5 19.67 6 21.27 7 23.14 8 24.21 9 30.26 10 33.38 11 36.40 12 37.11 13 40.41 14 41.39 15 41.74 16 43.79 17 44.41 18 44.86 19 45.66 20 46.37
The total phenolic compound content found in EEP for red propolis (232 mg/g) (Table 2) is higher than that ever found for Brazilian propolis samples (Kumazawa et al., 2004). These values are similar to the phenolic compound concentrations present in temperate climate propolis whose origin is the species Populus sp.,a vegetable producer of a resin rich in polyphenols (Ahn et al., 2004; Kumazawa et al., 2004). Chlo-fr presented a concentration of 324 mg/g, almost double the concentration found in H-fr, thus demonstrating the existence of phenolic compounds of different polarities (Table 2). The flavonoid contents in EEP and in Chlo-fr were low, values similar to those normally found for Brazilian green propolis (Kumazawa et al., 2004). But when the results of H-fr are observed, it is noted that almost all the phenolic compounds present (167 mg/g) are compounds of the flavonoid class (158 mg/g) (Table 2), as they formed stable complexes with the aluminum cation and could be determined at 415 nm.
405
Table 2: Total polyphenol and flavonoid ofethanolic extract of propolis (EEP) and its fractions (H-fr and Chlo-fr) Extract/Fraction EEP H-fr Chlo-fr Total polyphenol (mg/g) 232 22.3 167 2.2 324 4.2 Flavonoid (mg/g) 43 1.0 158 0.9 10 0.6
Each value is the mean standard deviation.
This new type of Brazilian propolis also demonstrated a notable antimicrobial activity against the microorganisms S. aureus ATCC 25923 and S. mutans UA159. The results of MIC and MBC presented in Table 3 indicate that EEP and Chlo-fr presented antimicrobial activity with good inhibition potential for the two tested bacteria, in the following order: Chlo-fr > EEP. The H-fr did not present any activity and the MIC value for the Chlo-fr was between 25 to 50 g/mL for both microorganisms. As expected, the bactericide concentration for all the extracts was 4 times higher than MIC. EEP and Chlo-fr demonstrated pronounced antibacterial activity at lower concentrations than compared with other samples of Brazilian propolis, recognized as having strong antimicrobial power (Koo et al., 2000), when MIC values were between 25 to 400 g/mL.
Table 3: Minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values of ethanolic extract of red propolis and its fractions. Extract/fraction EEP H-fr Chlo-fr S. aureus ATCC 25923 MIC* 50-100 - - 25-50 MBC* 200-400 - 100-200 S. mutans UA159 MIC* 50-100 25-50 MBC* 200-400 100-200
(-) = absence of inhibition. * The MIC and MBC are expressed in g/mL.
The sequestrating activity of the free radical DPPH of EEP, H-fr and Chlo-fr are presented in figure 1. As presented in figure 1, the H-fr demonstrated strong sequestrating activity of the free radical DPPH (78%), against 57% and 55% of EEP and Chlo-fr, respectively. The H-fr fraction was the one that presented the highest flavonoid contents, compounds recognized as having free radical sequestrating action (Furusawa et al., 2005). These results demonstrated that different phenolic compounds of this propolis are responsible for the sequestration of the radical DPPH. Kumazawa et al. (2004) verified the low sequestrating capacity of Brazilian propolis from the southeast of Brazil (around 40%), however, the sequestrating activity of a pure compound isolated from this propolis (artepillin C), was around 80%.
406
EEP
H-fr
Chlo-fr
-tocopherol
BHT
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
DPPH free radical scavenging activity (%)
Figure 1. DPPH radical-scavenging activity of ethanolic extract of red propolis and its fractions. EEP, H-fr, Chlo-fr and reference samples (BHT and -tocopherol) were used for the assay at a final concentration of 90 mg/ml. Measurements were carried out in triplicate. Means and standard deviations are indicated. Brazilian red propolis may be the beginning of studies with new classes of biologically active compounds that have never before been reported in propolis. As the fractions were more active than the EEP, these results demonstrated that the biological properties of this propolis are not the function of a synergism among the various compounds, and thus isolation and identification of the various bioactive compounds responsible for the antioxidant, antimicrobial and anticancer activities are required. Acknowledgments The authors thank FAPESP (Proc. No. 04/08635-6), and SEBRAE/AL and beekeepers for providing the propolis samples. References Clardy J and Walsh C. (2004). Lessons from natural molecules. Nature. 432: 829-837. Newman DJ, Cragg GM, Holbeck S, Sausville EA. (2002). Natural products and derivatives as leads to cell cycle pathway targets in cancer chemotherapy. Current Cancer Drug Targets. 2: 279-308. Newman DJ, Cragg GM, Snader KM. (2000). The influence of natural products upon drug discovery. Nat. Prod. Rep. 17: 215-234. Newman DJ, Gragg G M, Snader KM. (2003). Natural products as sources of new drugs over the period 1981-2002. J. Nat. Prod. 66: 1022-1037. Ghisalberti EL. (1979). Propolis: a review. Bee World. 60: 59-84.
407
Park YK, Koo MH, Ikegaki M, Cury JA, et al. (1998). Antimicrobial activity of propolis on oral microorganisms. Curr. Microbiol. 36: 24 - 28. Kujumgiev A, Tsvetkova I, Serkedjieva Y, Bankova V, et al. (1999). Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis of different geographic origin. J. Ethnopharmacol. 64: 235-240. Marcucci MC, Ferreres F, Garcia-Viguera C, Bankova VS, et al. (2001). Phenolic compounds from Brazilian propolis with pharmacological activities. J. Ethnopharmacol. 74: 105-112. Koo H, Rosalen PL, Cury JA, Ambrosano GMB, et al. (2000). Effect of a new variety of Apis mellifera propolis on mutants Streptococci. Curr. Microbiol. 41: 192 - 196. Duarte S, Rosalen PL, Hayacibara MF, Cury J. et al. (2006). The influence of a novel propolis on mutans streptococci biofilms and caries development in rats. Arch. Oral Biol. 51: 15-22. Chen CN, Wu CL, Shy HS, Lin JK. (2003). Cytotoxic Prenylflavanones from Taiwanese Propolis. J. Nat. Prod. 66: 503-506. Aso K, Kanno S I, Tadano T, Satoh S, et al. (2004). Inhibitory effect of propolis on the growth of human leukemia U937. Biol. Pharm. Bull. 27: 727-730. Kumazawa S, Hamasaka T, Nakayama T. (2004). Antioxidant activity of propolis of various geographic origins. Food Chem. 84: 329-339. Alencar SM, Oldoni TLC, Castro ML, Cabral ISR, et al. (2007). Chemical composition and biological activity of a new type of Brazilian propolis: red propolis. J. Ethnopharmacol. 113: 278-283. Ackermann T. (1991). Fast chromatography study of propolis crudes. Food Chem. 42: 135-138. Park YK, Ikegaki M, Alencar SM, Moura FF. (2000). Evaluation of Brazilian propolis by both physicochemical methods and biological activity. Honeybe Science 21, 85 - 90. Singleton VL, Orthofer R, Lamuela-Raventos RM. (1999). Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of Folin-Ciocalteau reagent. Methods of Enzymology 299, 152178. Park YK, Koo MH, Sato HH, Contado JL. (1995). Survey of some components of propolis which were collected by Apis mellifera in Brazil. Arq. Biol. Tecnol. 38: 1253-1259. Markham RK, Mitchell KA, Wilkins AL, Daldy JA, et al. (1996). HPLC and GC-MS identification of the major organic constituents in new Zealand propolis. Phytochemistry 42: 205-211. Park YK, Alencar SM, Aguiar CL. (2002). Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis. J. Agr. Food Chem. 50: 2502 - 2506. Soby S, Bates R, VanEtten H. (1997).Oxidation of the phytoalexin Maackiain to 6,6a-dihydroxyMaackiain by Colletotrichum gloeosporioides. Phytochemistry. 45: 925-929. Militao GCG, Dantas INF, Pessoa C, Falcao MJC, et al. (2006). Induction of apoptosis by pterocarpans from Platymiscium floribundum in HL-60 human leukemia cells. Life Sci. 78: 2409-2417. Ahn MR, Kumazawa S, Hamasaka T, Bang KS, et al. (2004).Antioxidant activity and constituents of propolis collected in various areas of Korea. J. Agr. Food Chem. 52: 7286-7292. Furusawa M, Tanaka T, Ito T, Nishikawa A, et al. (2005).Antioxidant activity of hydroxyflavonoids. J. Health Sci. 51: 376-378.
408
Determinao de Origem Geogrfica da Prpolis Verde e Parmetros Biolgicos Associados.

Esther Margarida Bastos Diretoria de Pesquisa/ Fundao Ezequiel Dias/ Belo Horizonte/ Minas Gerais embastos@funed.mg.gov.br A proplis substncia resinosa processada por abelhas Apis mellifera, a partir de resinas vegetais e ou leo essenciais, plen, cera e pequenas concentraes de acares. A origem botnica da prpolis tem sido enfatizada por KONIG (1985) e CRANE (1990), ambos autores mencionaram ser as gemas, cascas de rvores e arbustos as principais fontes de resina coletadas pelas abelhas na Europa, Amrica do Sul, Oeste da sia e Norte da frica. No Brasil as plantas fornecedoras de resinas para as abelhas ainda esto sendo estudadas. As resinas so misturas complexas de flavonides, terpenos e substncias gordurosas e sua produo est ligada ao crescimento vegetativo das plantas, haja visto que o precursor da biossntese de um dos hormnios de crescimento das plantas a giberelina um terpenide. Indicando assim que, resinas em grandes quantidades so secretadas pelas plantas durante o crescimento de pices vegetativos de folhas, caules ou troncos, sempre antes da florao. Durante a visita s plantas para a coleta de resinas, as abelhas carregam fragmentos de folhas, tricomas glandulares e tectores, cristais de oxalato de clcio, discos secretores e gros de plen que podem ser encontrados na prpolis e servem como elementos indicadores das espcies visitadas pelas abelhas. As prpolis verde, marrom e preta, produzida no Estado de Minas Gerais, foram avaliadas quanto a sua origem botnica, atravs de observaes de campo e observaes morfolgicas comparativas entre as plantas indicadoras e os fragmentos vegetais encontrados na prpolis produzida. Foram encontrados na anlise microscpica tricomas glandulares, tectores e fragmentos de epiderme de Baccharis dracunculifolia (alecrim do campo) na prpolis verde, Vernonia polyanthes. O estudo da origem botnica da prpolis verde, foi muito importante para a valorizao deste produto, haja visto que antes destes resultados a prpolis produzida no Brasil, era comercializada como sendo originada de Eucalyptus, o que a colocava em concorrncia comercial com a prpolis produzida na Austrlia e Nova Zelndia. A indicao de origem geogrfica da prpolis verde produzida em Minas Gerais, correlaciona as caractersticas do solo, qualidade da gua, os teores de flavonides e fenlicos da prpolis e a presena ou ausncia de herbvoros que visitam a planta e so os responsveis por estimular a produo de resina. A importncia de determinar a origem botnica e geografica das prpolis, se deve a: certificao de um produto genuinamente brasileiro, proteo de origem, agregao de valor, segurana do produto, evitar falsificaes e favorecer a implantao da rastreabilidade da prpolis na cadeia apcola, atendendo os requisitos internacionais para exportao.
409
R E SU M OS
410
AVANOS EM CRIAO DE ABELHAS
411
WEBLABS DE SERVIOS AMBIENTAIS UM ESTUDO DE CASO EM COLNIAS DE Melipona quadrifasciata

Marcelo Succi de Jesus Ferreira, Pedro Luiz Pizigatti Crrea, Antnio Mauro Saraiva Laboratrio de Automao Agrcola - Escola Politcnica da Universidade de So Paulo Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, n 158, sala C2-56 - So Paulo - SP msucci@terra.com.br Servios Ambientais - purificao do ar, estabilizao do clima, polinizao de culturas, etc. - so funes fundamentais na sustentao da vida humana e tm sua importncia econmica cada vez mais evidenciada. Para melhor estudar estes Servios e saber como eles se comportam, so necessrias novas abordagens para disponibilizar, integrar e compartilhar os dados existentes sobre eles. O projeto ViNCES (Virtual Network Center of Ecosystem Services) prope a utilizao de laboratrios acessveis via internet - weblabs - com foco em Servios Ambientais a fim de promover uma melhor compreenso destes servios. Uma arquitetura que permite o acesso aos diversos weblabs do projeto de maneira integrada, disponibilizando os dados de experimentos realizados a um maior nmero de pesquisadores apresentada. Esta arquitetura aproveita outras pesquisas na rea de Ecoinformtica, considerando solues j existentes no projeto SEEK (Science Environment for Ecological Knowledge). Desta maneira, adota o padro de metadados EML (Ecological Metadata Language) para a transferncia e armazenamento de dados dos experimentos, permitindo que os experimentos fiquem disponveis a outros pesquisadores que utilizem a infra-estrutura do projeto SEEK. A arquitetura apresentada e um estudo de caso mostrado para um experimento envolvendo uma colnia de abelhas da espcie Melipona quadrifasciata. Apoio: Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP) - Projeto ViNCES, processo no. 03/08134-4 Palavras-chaves: weblabs, SEEK, Melipona quadrifasciata
412
PRODUO DE RAINHAS EM Plebeia lucii MOURE (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA)

Lila Vianna Teixeira*, Mara Garcia Tavares, Lucio Antonio de Oliveira Campos * Programa de Ps graduao em Entomologia, Universidade Federal de Viosa; Departamento de Biologia Geral, Universidade Federal de Viosa Campus Universitrio; 36571.000 - Viosa - MG - Brasil lv_teixeira@yahoo.com.br O presente trabalho teve como objetivos estudar o processo pelo qual so construdas as clulas reais em colnias normais de Plebeia lucii e verificar se rainhas de emergncia so produzidas em resposta condio de orfandade da colnia. Nas colnias normais (com rainha), as clulas reais so produzidas pela adio de clula auxiliar construda por operrias, adjacente a clulas cujas larvas esto terminando de se alimentar e ainda no iniciaram a tecelagem do casulo nem a eliminao das fezes. A larva estabelece uma conexo entre as duas clulas atravs da qual insere parte do corpo e ingere o alimento contido na clula auxiliar. Essa larva, posteriormente, se diferencia em uma pupa de rainha. As colnias rfs de P. lucii responderam condio de orfandade produzindo clulas reais pelo mesmo processo que colnias normais. A produo de rainhas em colnias rfs maior que aquela observada em colnias com rainha. Apoio: Capes, Fapemig, CNPq Palavras-chaves: rainha de emergncia, castas, Plebeia
413
MONITORAMENTO DE APIRIO ATRAVS DE REDES DE AUTOMAO

Miguel dos Santos Alves Filho, Carlos Eduardo Cugnasca, Rafael de Aquino Cunha, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Antonio Mauro Saraiva
*Escola Politcnica da USP; Instituto de Biocincias da USP Avenida Prof. Luciano Gualberto, travessa 3 n 380 - CEP - 05508-900 - So Paulo - SP miguel.alves@poli.usp.br
O conhecimento das condies ambientais de cada colmia e outras informaes como, sons emitidos pelas abelhas e atividades de vo, so importantes para o entendimento do seu comportamento do ponto de vista cientfico e produtivo. A obteno desses dados permitir entender, detectar padres de comportamento e condies ambientais inadequadas na colmia, que podem ser consideradas nocivas ao seu desenvolvimento e produtividade. A adoo de dispositivos de monitoramento que utilizem as redes de controle oferece facilidade de instalao nas colmias, economia em termos de cabeamento e infraestrutura, alm da facilidade de modularidade. A tecnologia LonWorks oferece todas as vantagens comuns s redes de controle, adicionando o conceito de programao distribuda e acrescentando instalao o conceito de custo efetivo. Atualmente LonWorks uma tecnologia aberta considerada padro no mercado de automao Europeu e Chins, e padronizada por um rgo internacional, chamado LonMark, que garante a interoperabilidade de diversos produtos mesmo sendo de fabricantes diferentes. Essa padronizao faz com que o usurio, possa escolher livremente de qual fabricante ir adquirir determinado equipamento de controle, alm de continuar livre para mudar de fabricante quando desejar. Hoje, o monitoramento apirio possui dois equipamentos funcionando em paralelo. Um deles capaz de captar o som e as imagens das abelhas dentro da colmia para o armazenamento e visualizao em tempo real. O outro um dispositivo de automao capaz de: contar a movimentao das abelhas na sada e na entrada da colmia; medir os nveis de temperatura e a umidade dentro da colmia; medir a luminosidade do ambiente; deteco de movimento perto da colmia; realizar o controle de um sistema de aquecimento ou luminosidade atravs de uma sada dimerizada. Essa ferramenta alm de auxiliar o pesquisador a ampliar seus conhecimentos a respeito do mundo das abelhas, o auxilia a aumentar sua produtividade atravs de equipamentos voltados a suprir suas dificuldades e de fcil instalao. Apoio: LAA - Laboratrio de Automao Agrcolo (Escola Politcnica-USP) Palavras-chaves: Monitoramento, Redes de Controle, LonWorks, Apirio, Sensoreamento
414
AQUECEDORES DE BAIXO CUSTO PARA MELIPONICULTURA

Ayrton Vollet Neto, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Cristiano Menezes Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil ayrtonneto@yahoo.com.br A meliponicultura se estende por todos os estados brasileiros, incluindo regies mais frias. No inverno, algumas espcies entram em diapausa ou diminuem a postura, o que pode causar enfraquecimento e morte das colnias. Os poucos sistemas de aquecimento existentes na literatura so de alto custo e pouca aplicabilidade meliponicultura. O presente trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de aquecedores de baixo custo para colmias racionais de abelhas sem ferro. O sistema constitudo de uma caixa de isopor retangular (12x15x7cm), com o lado de cima aberto (sem tampa), forrada com papel alumnio e com um soquete para lmpadas internamente. O aquecedor colocado sob a colmia. O teste foi feito em estufa B.O.D., onde a temperatura foi variada a cada duas horas de 2 em 2 graus, entre 0 e 36 C. Foi analisada a temperatura em trs pontos internos da colmia vazia (base, 1 andar e 2 andar) e em dois tamanhos de colmias (16x14x14cm e 16x19x19cm), com lmpadas de 7 e 15 Watts. Tambm foi verificada a eficincia em colmias habitadas com Melipona quadrifasciata, Scaptotrigona depilis e Nannotrigona testaceicornis durante noites frias (mnima de 15 C). A temperatura interna das colmias vazias variou, em mdia, de 5 a 10 C acima da temperatura ambiente, de acordo com o tamanho da colmia e da lmpada utilizada. Quando as colmias esto habitadas o aumento da temperatura do ninho fica mais constante, em mdia 5 C maior do que quando o aquecedor no est ligado, independentemente do tamanho das colmias e das espcies de abelhas testadas. O custo de cada aquecedor ficou em torno de R$7,00 podendo ser utilizados em diversos tipos de caixas, com diferentes intensidades de lmpadas, propiciando uma plasticidade para o meliponicultor adaptar sua criao e s condies de sua regio. Apoio: Fapesp; CNPq Palavras-chaves: Aquecedores, Meliponicultura, Abelha sem ferro, temperatura, colmias racionais
415
EMERGNCIA E MANUTENO DE Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) EM CMARAS CLIMATIZADAS

Deodoro Magno Brighenti*, Csar Freire de Carvalho, Carla Regina Guimares Brighenti,Stephan Malfitano Carvalho *Departamento de Entomologia - UFLA; Campus Avanado do Alto Paraopeba - UFSJ Campus da UFLA Cx Postal 3037, 37200-000 Lavras, Minas Gerais, Brasil deodorobrighenti@oi.com.br Avaliou-se a sobrevivncia de adultos de Apis mellifera confinados em laboratrio utilizando-se como alimento o plen armazenado do favo e mel oriundo da prpria colnia de origem. A pesquisa foi realizada no laboratrio de Biologia de Insetos do Departamento de Entomologia da Universidade Federal de Lavras UFLA. Os insetos, na fase de pupa, foram obtidos de um quadro de ninho em uma colmia selecionada do Apirio Central da UFLA, colocado na gaiola de emergncia (emergapis) e mantido em cmara climtica a 35 C, UR 70 10 % e na ausncia de luz, at a emergncia dos insetos. Aps a emergncia os adultos foram transferidos para gaiolas de PVC de 10 x 15 cm e mantidos em laboratrio a 28 C, UR 70 10% e 12 horas de fotofase. Os tratamentos utilizados foram: 1. mel, 2. plen e 3. mel + plen. Foram utilizadas dez repeties para cada tratamento, cada uma composta de dez abelhas. Contou-se o nmero de abelhas sobreviventes a cada 12h at completar 546 horas ajustando-se a curva de sobrevivncia baseada na distribuio Weibull. Estimou-se o tempo mdio de vida e os valores de TL10, TL20, TL50 e para o TL99. Constatou-se que, a utilizao de gaiola de emergncia emergapis permitiu um controle da idade real dos indivduos e uma estimativa real da longevidade. Entre os tratamentos testados, no 2 ocorreu a menor longevidade com mdia de 2,5 dias. No houve diferena significativa entre os tratamentos 1 e 3 em que o tempo mdio de vida foi de aproximadamente 11,5 dias. Contudo, os adultos oriundos do tratamento 3, apresentaram comportamento diferenciado, aparentando serem mais ativos. Apoio: FAPEMIG Palavras-chaves: sobrevivncia, tempo letal, gaiola de emergncia, plen, Weibull
416
Bombus atratus REARING FOR POLLINATION MANAGEMENT IN COLOMBIA

Maria Teresa Almanza, Jos Ricardo Cure*, Dieter Wittmann Facultad de Ciencias - Universidad Militar Nueva Granada (UMNG); Institute of Crop Science and Resource Conservation (INRES) University of Bonn cra 11 N 101-80 Bogota DC -Colombia jrcure@umng.edu.co We report the results of the first Neotropical bumblebee species that has been reared in captivity for pollination purposes. As the result of a cooperation project, we developed a bumblebee rearing technique for Bombus atratus combining knowledge from INRES at the University of Bonn, Germany and experiences at UMNG in Colombia. We started by studying the characteristics of wild nests to adapt rearing conditions to natural nesting conditions. We captured mated gynes in the wild and put them in a rearing room with controlled ambient temperature and relative humidity. The gynes were fed adlibitum with fresh honeybee-collected pollen and a sugar solution every three days. The development of the colonies was tracked to report mortality of immature stages as well as larvae feeding behavior by the workers. In Colombia, wild colonies of B. atratus are commonly found at open terrain of pastures nesting under the grass, and gynes emerge mainly in January and June after the two rainy seasons are over. In the rearing room, gynes started oviposition after 3 to 10 days without any initiation method. Big colonies with more than 100 workers were produced and the switch point of 20% of the colonies was reached. The new gynes mated with drones to produce F1 colonies. The colonies that were used to pollinate tomato crops under greenhouses developed properly only if high environment temperatures higher to 30 C were not reached and relative humidity in the nest was lower than 60%. One of those colonies reached the switch point and produced 51 gynes with the same size of wild captured ones. The pollination effect on tomato production was proven to increase 37%. Studies of bumblebee pollination of native Solanum species are currently being done and preliminary results are also promising. With these results, we made a first step to build an Integrated Pollination Program in Colombia. Apoio: Vicerrectoria de Investigaciones UMNG; DAAD German Academic Exchange Service Palavras-chaves: Bombus atratus, bumblebee rearing, crop pollination, Neotropical bee ecology
417
PRODUO IN VITRO DE RAINHAS EM Tetragonisca angustula LATREILLE 1811 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Mauro Prato*, Ademilson Espencer Egea Soares Programa de Ps-graduao em Entomologia da Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Av. Bandeirantes, 3900; Bairro Monte Alegre; Ribeiro Preto - SP mauroprato@pg.ffclrp.usp.br A quantidade de alimento recebido pelas larvas o fator responsvel pela determinao das castas em T. angustula, as larvas de rainhas se desenvolvem em clulas maiores, chamadas realeiras, recebendo mais alimento que as larvas de operrias que se desenvolvem em clulas menores. Visamos estabelecer a produo in vitro de rainhas de Tetragonisca angustula, atravs de alimentao larval controlada quantitativamente e anlise da viabilidade das rainhas produzidas atravs de sua fecundao natural, montagem e manuteno de colnias. Utilizamos 6 colnias mantidas no Meliponrio do Departamento de Gentica da FMRP USP. Favos com clulas de cria recm operculadas, inclusive realeiras, foram utilizados para quantificao do alimento larval por meio de microcapilares graduados. Houve retirada de favos de cria com larvas de operrias/machos em estgio L1 e a transferncia destas para placas de acrlico com pocinhos contendo 50 L de alimento, previamente coletado. Estas placas foram acondicionadas em estufa BOD a 28C e 70% de umidade relativa at as abelhas emergirem, as quais foram pesadas, marcadas com tinta atxica no mensonoto e transferidas para ncleos rfos. A quantidade de alimento encontrada nas realeiras (53,5 3,7 L) maior que a encontrada em clulas de cria de operrias/machos (8,0 0,1 L), o que reflete diretamente sobre o peso dos indivduos recm-emergidos. De 15 rainhas produzidas, apenas a introduzida no ncleo rfo 2 foi fecundada e se tornou funcional, o que pde ser evidenciado pela construo de clulas de cria, postura de ovos e permanncia da rainha marcada neste mesmo ncleo. As larvas que se tornam rainhas recebem 6,62 vezes mais alimento que aquelas que se tornam operrias. O estabelecimento da fisogastria de uma das rainhas produzidas, torna clara a possibilidade de produo in vitro de rainhas em T. angustula, pelo controle da quantidade de alimento oferecido s larvas. Apoio: Fapesp 2007/51055-9 Palavras-chaves: Tetragonisca angustula, alimento larval, produo de rainhas, multiplicao de colnias
418
ALIMENTAO COM DIFERENTES TIPOS DE PLEN EM COLNIAS DE Scaptotrigona depilis E Melipona quadrifasciata (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Mara Martins Franco*, Fernando Mendes Barbosa, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Fernanda Helena Nogueira-Ferreira, Cristiano Menezes Instituto de Biologia, Universidade Federal de Uberlndia; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Rua Cear, s/n, Bloco 2D, CEP 38400-902, Uberlndia, Minas Gerais, Brasil maira.anauat@gmail.com O plen essencial para o desenvolvimento das colnias de abelhas sem ferro, especialmente para colnias manejadas para multiplicao. Porm, a alimentao com plen ainda muito problemtica, pois muitas vezes as abelhas no o utilizam. O objetivo deste trabalho foi testar a preferncia e aceitao por diferentes tipos de plen em colnias normais e em colnias experimentais rfs de Melipona quadrifasciata e de Scaptotrigona depilis. Foram utilizadas 8 colnias de cada espcie, sendo que, metade delas eram mantidas confinadas no laboratrio e metade no Meliponrio. Foram feitos quatro tratamentos de plen e fornecidos simultaneamente em potes artificiais. Trs dos tratamentos foram feitos com plen de Apis mellifera (acrescido de gua at atingir consistncia pastosa): plen fresco, desidratado e fermentado; e um tratamento com plen co-especfico (dos potes de outras colnias). A verificao do consumo foi feita diariamente por meio da diferena no peso dos potes artificiais e o alimento de todos os potes foi renovado quando algum dos potes se esvaziava. Nas colnias experimentais rfs constatou-se a existncia de preferncia pelo plen fresco, para ambas as espcies, com mdia de consumo de X=0,52mg e de X=0,23mg, respectivamente. Esse resultado reflete a preferncia das operrias pelo tipo de plen mais prximo ao encontrado na natureza. Vale ressaltar que nessas colnias no havia postura, portanto, o plen era utilizado para nutrio das operrias. Nas colnias normais, o pote artificial que continha plen fermentado, para ambas as espcies, foi o que mais rapidamente se esvaziou (mdia de consumo para S. depilis de X=0,81mg e para M. quadrifasciata de X=0,39mg). Entretanto, possvel que este estivesse sendo descartado pelas operrias. Em alguns casos houve rejeio a todos os tipos de plen. Isso pode estar relacionado ao fato de que as operrias tinham livre acesso ao campo e estavam suficientemente supridas com o prprio plen. Apoio: Fapesp Palavras-chaves: Abelhas sem ferro, manejo, Alimentao artificial, Melipona quadrifasciata, Scaptotrigona depilis
419
CUPINZEIROS (CUPIM DE MONTCULO) COMO COLMIA ARTIFICIAL PARA ABELHAS SEM FERRO COM NIDIFICAO SUBTERRNEA
Robson Mendes*, Pedro Jovchelevich, Dirk Koedam
Associao Brasileira de Agricultura Biodinmica; Departamento de Botnica, Instituto de Biocincias, UNESP CP 1016, CEP 18603-970, Botucatu, SP, Brazil rdms22@hotmail.com
Para melhorar o manejo e a reproduo de colnias das espcies de abelhas sem ferro (Apidae) que nidificam no cho foi desenvolvido um sistema simples, barato e durvel de nidificao artificial. Para este fim foram coletados cupinzeiros de cupim de montculo, provavelmente Cornitermes cumulans (Termitidae), no campo. Estes cupinzeiros de barro tm uma parede grossa e dura, com labirintos que apresentam pequenas cmaras e canais. Antes de ser instalado, a cmara celulsica foi removida do interior do cupinzeiro para criar um espao onde a colnia de abelhas ir permanecer. Para facilitar a manipulao necessria da colnia, a parte superior do montculo foi retirada de tal maneira que obteve-se uma tampa removvel. Depois destes preparos iniciais, o montculo foi montado numa pequena plataforma de concreto, perto do nvel do solo. Com ajuda de uma furadeira foi feito um pequeno tnel para possibilitar o acesso das abelhas para o exterior. Assim, o montculo recebeu a colnia. As conexes entre a parte principal do montculo, sua tampa e a plataforma foram feitos com uma mistura de barro e cimento. At agora duas espcies, Paratrigona sp e Nannotrigona testaceicornis, foram testadas. A mesma metodologia ser testada com abelhas que constroem ninhos externos, como Trigona spinipes. Apoio: Associao Biodinmica Palavras-chaves: abelhas subterrneas, ninho artificial, cupim de montculo
420
RAINHAS DE Nannotrigona testaceicornis PRODUZIDAS in vitro SO VIVEIS

Cristiano Menezes, Vera Lucia Imperatriz Fonseca FFCLRP - USP Av. Bandeirantes, 3900 menezes.cristiano@gmail.com Nas abelhas sem ferro, com exceo do gnero Melipona, as castas so determinadas pela quantidade de alimento ingerido pela larva. Experimentos com alimentao controlada mostraram que 100% das larvas fmeas so capazes de gerar rainhas. Porm, a viabilidade dessas rainhas ainda no foi devidamente verificada. O presente trabalho tem o objetivo de verificar se rainhas produzidas in vitro so capazes de fundar colnias. Foram produzidas 21 rainhas in vitro de Nannotrigona testaceicornis e introduzidas em mini-colnias compostas por 40-50 operrias e um favo com 40-50 pupas. As mini-colnias foram mantidas fechadas por 18 dias e o comportamento das rainhas foi filmado diariamente por 40 min. Aps esse perodo, foram abertas ao ambiente, permitindo a realizao do vo nupcial. Depois que as rainhas ficaram fisogstricas, cada mini-colnia recebeu 80-100 novas operrias e outro favo com 80-100 pupas. Semanalmente, as mini-colnias com rainhas recm fisogstrias receberam um favo com cerca de 50 pupas. Das 21 rainhas, 8 morreram antes da abertura para o ambiente e duas morreram poucos dias aps a abertura. As causas das mortes provavelmente foram fisiolgicas, pois no foram observadas agresses por parte das operrias. Onze rainhas realizaram o vo nupcial; uma delas entrou na colnia errada e foi recolocada na colnia original; 6 delas no voltaram do vo, provavelmente se perderam ou foram predadas; 5 delas foram fecundadas com sucesso. O tempo para incio da postura variou muito entre as rainhas (mnimo de 34, mximo de 83 dias aps a emergncia), mas a evoluo da taxa de postura foi semelhante para todas as rainhas. Apesar da alta taxa de mortalidade das rainhas (75%), conclui-se que rainhas produzidas in vitro so viveis. possvel que o aperfeioamento das tcnicas de manejo e formao de mini-colnias possam futuramente aumentar a taxa de sucesso das rainhas. Apoio: Fapesp; CNPq Palavras-chaves: in vitro, rainhas, Nannotrigona, castas, mini-colnias
421
RELAO ENTRE A DENSIDADE, TEMPERATURA E UMIDADE NA PRODUO DE MACHOS EM Scaptotrigona postica (HYMENOPTERA, MELIPONINI)
Naiara Rabelo Valle, David Barros Muniz*, Lenira de Mello Lacerda Departamento de Cincias Biolgicas, Universidade Federal do Maranho Campus Universitrio do Bacanga; Av. dos Portugueses, S/N; CEP:65085-580. So Luis/Maranho, Brasil david_bio@yahoo.com.br A produo de machos em abelhas Meliponina tem sido estudada em varias espcies, porem no se tem, ate o momento, conhecimento acerca dos mecanismos que determinam a sua produo, independentemente destes se originarem de ovos produzidos por rainhas ou operarias. O objetivo deste trabalho foi verificar se a produo de machos em colnias de S. postica poderia ser influenciada pela variao da temperatura e umidade internas e/ou externas. Para isto mediu-se, no perodo de abril de 2007 a janeiro de 2008 (duas vezes por semana), a temperatura e umidade externas e internas de trs colnias, que apresentaram, no decorrer do perodo, variaes nas suas condies internas. As colnias foram instaladas no meliponrio do departamento de biologia da UFMA, e as medies foram feitas com termo-higrmetro digital. Os testes indicaram que a temperatura interna no variou entre as colnias, e tambm no diferiu da temperatura externa. A umidade interna das colnias, todavia, foi estatisticamente superior externa. No foi encontrada correlao entre a porcentagem de machos produzidos e os dois parmetros testados. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Temperatura, Umidade, Scaptotrigona postica, produo de machos
422
AVANOS EM GENTICA E FISIOLOGIA DE ABELHAS
423
ACID PHOSPHATASE PATTERNS ON NARCOTIZED HONEYBEE QUEENS

Bruno Berger, Carminda da Cruz-Landim Unesp-Rio Claro Avenida 24A n 1515 Bela Vista Rio Claro SP. CEP 13506-900 parameciumsp@yahoo.com.br Cells present different kinds of phosphatases important in several cellular events. The objective of this work is to contribute for the knowledge of alterations provoked by the narcosis with CO2 on ovary cells of Apis mellifera, through the study of the activity of the acid phosphatase in those cells. It was presumed that the narcosis might damage the ovarian cells causing degenerative changes identifiable by acid phosphatase reaction. The queens were submitted to narcosis at emergence and when were 3, 5 and 10 days old. Their ovaries were analyzed when they were 5, 10 and 15 days old. A control group was also made. In all ages was possible observed the phosphatasic activity in cells of the germ line and in the tunica propria without noticeable differences between the experimental and control groups. Positive reaction to acid phosphatase was found in the nucleus of cells of the germ line, located in the nucleoli and in the chromatin. In the nucleoli was observed a considerable heterogeneicity in the intensity of the reaction, what can reflect differences in nucleolus functional stage, once in literature, the enzyme is active during the transcription of rRNA. For the positive reaction seen in the nuclear chromatin, the suggestion is that it might be acting in the dephosphorilation of intracellular kinasis that act in the gene expression. In the tunica propria, the acid phosphatase can represent a signalizing or controlling factor of the exchanges between the ovary and the hemolymph. The present results permit conclude that the narcosis did not change the pattern of phosphatasis activity in the ovaries in the control and experimental group. Apoio: FAPESP Processo n05/53999-9 Palavras-chaves: Apis mellifera, Acid phosphatasis, narcosis, honeybee, ovaries
424
PROTENAS DE ESTOCAGEM E IMUNIDADE EM ABELHAS Apis mellifera: UMA RELAO DEPENDENTE DA DIETA
Anete Pedro Loureno*, Juliana Ramos Martins, Karina Rosa Guidugli-Lazzarini, Mrcia Maria Gentile Bitondi, Zil Luz Paulino Simes * Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo; Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil anete@rge.fmrp.usp.br As protenas de estocagem esto envolvidas em diversos processos em insetos, como no metabolismo, na reproduo e na imunidade. No entanto, poucos trabalhos tm mostrado a participao destas protenas na resposta imune de abelhas. Assim, neste trabalho avaliamos as protenas de estocagem Vitelogenina (Vg), Hexamerina 70a (HEX 70a), Lipoforina I (LpI), Lipoforina III (LpIII) e os receptores de Vitelogenina (VgR) e de Lipoforina (LpR) em abelhas alimentadas com diversos tipos de dietas e infectadas por bactrias. Para isto, abelhas recm-emergidas foram mantidas em estufa com trs tipos de alimentao: xarope (50% acar em gua), beebread (30% plen em 70% xarope) e gelia real (30% gelia real em 70% xarope). Destas abelhas um grupo recebeu gua com a bactria Serratia marcescens e o outro somente gua. As coletas foram feitas aps seis dias, para posterior quantificao de transcritos por real-time RT-PCR. Em abelhas no infectadas, somente alimentao com beebread proporcionou um aumento significativo de todas as protenas de estocagem aqui estudadas. A infeco com S. marcescens provocou diminuio significativa nos nveis de transcritos de vg, vgR, hex 70a e lpIII somente em abelhas que apresentavam, antes da infeco, altos nveis de RNAm destes genes, ou seja, naquelas alimentadas com beebread. Estes resultados mostram que a alimentao com xarope ou gelia real pode ser restritiva ativao da resposta imune, e ainda que, a alimentao rica em protena (beebread) proporciona maior acmulo destas protenas de estocagem e, por conseqncia, recursos para uma abelha responder a uma infeco com maior eficincia. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Apis mellifera, resposta imune, protenas de estocagem
425
AVALIAO DA ADEQUAO DA REGIO CITOCROMO OXIDASE I/ CITOCROMO OXIDASE II PARA ESTUDOS DE VARIABILIDADE GENTICA POPULACIONAL EM Xylocopa frontalis
Cndida Maria Lima Aguiar*, Gilberto Marcos de Mendona Santos, Marco Antonio Costa Universidade Estadual de Feira de Santana; Universidade Estadual de Santa Cruz Universidade Estadual de Feira de Santana, DCBIO, Laboratrio de Entomologia, BR 116, km 3, Feira de Santana, BA. 44031-460 candida.aguiar@gmail.com Apesar da importncia dos estudos de variabilidade gentica para embasar decises sobre manejo e conservao das populaes, os aspectos genticos das populaes de Xylocopa ainda no so conhecidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a utilidade da regio CO I/CO II para estudos de variabilidade gentica populacional em X. frontalis, utilizando seqncias de DNA. Amostras de populaes de X. frontalis foram obtidas em oito localidades da Chapada Diamantina BA. O DNA total foi extrado usando protocolo de fenol-clorofrmio. A amplificao da regio CO I/CO II foi realizada atravs de PCR, usando primers testados anteriormente em Melipona. DNA de 3 a 5 indivduos por populao foi seqenciado. As sequncias de mtDNA analisadas (500 pb alinhadas) foram altamente conservadas dentro e entre as populaes. A ausncia da regio intergnica nesta espcie, onde seria esperado encontrar maior variabilidade, combinada ao alto grau de conservao nas regies codificadoras deste fragmento, indicam que a regio CO I/CO II inadequada para estudos de variabilidade populacional em X. frontalis, ao menos na escala geogrfica testada neste trabalho. Outras regies do DNA nuclear e do DNAmt sero testadas para deteco de variabilidade interpopulacional em X. frontalis atravs de PCR RFLP. Apoio: CNPq; MCT PPBIO Semi-rido; FAPESB Palavras-chaves: polinizadores, conservao, gentica de populaes, Xylocopa, DNA mitocondrial
426
PERFIL RFLP DA REGIO CITOCROMO OXIDASE I/CITOCROMO OXIDASE II DE Xylocopa frontalis

Gilberto Marcos de Mendona Santos, Cndida Maria Lima Aguiar*, Marco Antonio Costa Universidade Estadual de Feira de Santana; Universidade Estadual de Santa Cruz Universidade Estadual de Feira de Santana, DCBIO, Laboratrio de Entomologia, BR 116, km 3, Feira de Santana, BA. 44031-460 candida.aguiar@gmail.com Este trabalho integra um estudo sobre variabilidade gentica em abelhas solitrias com potencial para polinizao. Aqui so apresentados os resultados sobre o perfil de restrio da regio CO I/CO II de Xylocopa frontalis. As amostras populacionais foram obtidas em oito localidades da Chapada Diamantina (Bahia). O DNA total foi extrado usando protocolo de fenol-clorofrmio. A amplificao da regio CO I/CO II foi realizada atravs de PCR, usando os primers 5 TCTATACCACGACGTTATTC 3 e 5 GATCAATATCATTGATGACC 3. DNA de 3 a 5 indivduos por populao foi seqenciado. A seqncia consenso (500 pb alinhadas) foi submetida ao programa Webcutter 2.0 para o mapeamento dos stios de restrio. Foram identificados stios de restrio para 47 enzimas. Para 10 destas enzimas foram localizados dois (Bsp143I, DpnI, DpnII, Kzo9I, MboI, NdeII, Sau3AI, SspI) ou trs (AcsI, ApoI) stios de restrio, sendo potencialmente teis para a deteco de variaes intraespecficas. No foi observado polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrio nesta regio em nvel intraespecfico em Xylocopa frontalis, como registrado para Apis mellifera. O perfil de restrio de X. frontalis foi distinto do encontrado em X. grisescens, o que indica que a tcnica de RFLP pode ser til para estudos comparativos entre espcies prximas deste gnero. Apoio: CNPq; MCT PPBIO Semi-rido; FAPESB Palavras-chaves: polinizadores, conservao, gentica de populaes, DNA mitocondrial, Xylocopa
427
EFEITO DA DIETA PROTICA SOBRE A EXPRESSO DE vg, TTULO DE VG E HJ NA HEMOLINFA DE OPERRIAS DE Melipona quadrifasciata (APIDAE: MELIPONINI)
Weyder Cristiano Santana, Erica Tanaka, Karina Rosa Guidugli Lazzarini, Klaus Hartfelder Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP; Departamento de Biologia Celular, Molecular e Bioagentes Patognicos - FMRP/USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-900, Ribeiro Preto, SP wcs@usp.br A sntese de vitelogenina (Vg) est relacionada com a funo de nutridora nas operrias de Melipona quadrifasciata, representando 40-50% do total de protena da hemolinfa. Esta protena incorporada dentro dos ocitos em crescimento via endocitose mediada por receptores e estocada dentro dos ovos como maior protena do vitelo. Neste experimento, foram avaliados os efeitos de dietas com e sem protena (plen) sobre os nveis de RNAm de vg e de sua respectiva protena (Vg), dos ttulos de hormnio juvenil (HJ) e do totais de protenas (PT) presentes na hemolinfa de operrias confinadas. Os contedos de HJ, Vg e PT na hemolinfa das operrias foram analisadas por RIA, SDSPAGE e Bradford, respectivamente. RNA extrado do corpo gorduroso serviu para analisar os nveis de transcritos de vg por RT-PCR. A dieta sem protena (dieta 3), constituda por uma soluo de 50% de sacarose (p/v), alm de impedir o aumento significativo dos ttulos de Vg (P<0,05; Kruskal-Wallis on Ranks), tambm promoveu uma diminuio significativa dos nveis de RNAm de vg presentes no corpo gorduroso (P <0,05; ANOVA One Way). Operrias alimentadas com uma dieta contendo plen natural (dieta 1) ou por uma dieta protica manipulada (dieta 2), no apresentaram alteraes significativas tanto nos nveis do RNAm de vg no corpo gorduroso, bem como nas concentraes de Vg na hemolinfa destas abelhas. J a dieta sem protena (dieta 3) promoveu uma alterao significativa na quantidade de PT na hemolinfa destas abelhas (P <0,05; ANOVA One Way). Entretanto o ttulo de HJ na hemolinfa das abelhas no sofreu modificaes significativas nos trs tratamentos. Portanto, a sntese de vg, a quantidade de PT e Vg, fundamentais a funo de abelhas nutridoras, esto diretamente relacionados com a qualidade da dieta recebida pelas operrias em M. quadrifasciata. Apoio: CAPES; FAPESP 02/11729-7 Palavras-chaves: Melipona quadrifasciata, dieta protica, vitelogenina, hormnio juvenil, RNAm vg
428
EMPREGO DAS PROTENAS PRINCIPAIS DA GELIA REAL (MRJPs) COMO MARCADORES MOLECULARES PARA PRODUO DE GELIA REAL EM Apis mellifera AFRICANIZADA
Tatiane Vicente Baitala, Patricia Faquinello, Maria Claudia Colla Ruvolo-Takasusuki*, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo Departamento de Biologia Celular e Gentica, Universidade Estadual de Maring; Departamento de Zootecnia, Universidade Estadual de Maring Avenida Colombo, 5790, 87020-900, Maring-PR, Brasil mccrtakasusuki@uem.br O objetivo desse estudo foi avaliar o potencial das MRJPs como marcador molecular associado produo da gelia real (GR) em A. mellifera africanizada. As anlises da freqncia allica dos locos mrjp3, mrjp5 e mrjp8, e as anlises de produo, foram estimadas para 34 mini-recrias produtoras. Os valores das freqncias allicas foram utilizados para fazer as anlises de regresso linear mltipla com valores de DEP (diferena esperada na prognie) das rainhas das mini-recrias. As anlises de varincia foram significativas (p< 0,05) somente para o loco mrjp3, e a equao mais ajustada foi observada em funo dos alelos C, D e E. Essas anlises indicam que este loco exerce influncia no valor gentico para produo de GR. O coeficiente de determinao (R2) calculado para os alelos significativos do loco mrjp3 indicou que 36,85% da variao da DEP explicada pela variao dos alelos C, D e E. Portanto, esses trs alelos exercem um forte efeito na variao do valor gentico da produo da GR. A anlise de trilhas permitiu observar que estes alelos apresentaram efeitos diretos positivos sobre a DEP, indicando que a maior produo de GR tem contribuio direta do produto desses genes. Estes resultados mostram que o loco mrjp3 tem potencial para ser usado como marcador molecular na seleo de rainhas africanizadas para produo de GR. Apoio: Palavras-chaves: Apis mellifera, MRJPs, melhoramento, produo de gelia real, marcadores moleculares
429
VARIABILIDADE GENTICA DOS LOCOS DAS PROTENAS PRINCIPAIS DA GELIA REAL (MRJPs) EM Apis mellifera AFRICANIZADAS PRODUTORAS DE GELIA REAL
Tatiane Vicente Baitala, Patricia Faquinello, Ana Lucia Stuchi, Maria Claudia Colla RuvoloTakasusuki*, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo Departamento de Biologia Celular e Gentica, Universidade Estadual de Maring; Departamento de Zootecnia, Universidade Estadual de Maring Avenida Colombo, 5790, 87020-900, Maring-PR, Brasil mccrtakasusuki@uem.br A variabilidade gentica foi avaliada em trs locos (mrjp3, mrjp5 e mrjp8) que codificam as protenas principais da gelia real em Apis mellifera. As anlises moleculares foram realizadas em nutrizes provenientes de 34 mini-recrias destinadas a ciclos de produo de gelia real. Os trs locos foram polimrficos e produziram um total de 17 alelos. Os valores da heterozigosidade mdia, para os ciclos I e II de produo da gelia real, foram de 0,5838 e 0,5819 respectivamente, revelando um elevado grau de diversidade gentica, indicando que estas abelhas possuem potencial de seleo. No entanto, foi observada uma grande diferena entre a Ho e a He para o loco mrjp3 em ambos os ciclos de produo, mostrando que est ocorrendo uma reduo na heterozigosidade para este loco. O valor de FIS (0,2025) sugere um excesso de homozigotos, que pode ser explicado neste caso pela seleo das rainhas de cada mini-recria para produo de gelia real. O baixo valor de FST (0,0068) revela que as nutrizes dos dois ciclos de produo da gelia real ainda no esto diferenciadas geneticamente. O elevado grau de variabilidade allica observada para os locos analisados, especialmente os mrjp3 e mrjp5, permite indicar esses locos como marcadores genticos eficientes para caracterizao de estrutura populacional em A. mellifera africanizada. Apoio: Palavras-chaves: Apis mellifera, MRJPs, produo de gelia real, variabilidade gentica, marcadores moleculares
430
ESTRUTURA SOCIOGENTICA INTRANIDAL DE Centris tarsata (HYMENOPTERA: APINAE) DETERMINADA POR MARCADORES ALOZMICOS
Camilla Helena da Silva*, Marco Antnio Del Lama *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Universidade Federal de So Carlos - UFSCar Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil silvacamillahelena@gmail.com A espcie Centris tarsata da tribo Centridini constituda de abelhas de elevado potencial polinizador nos ecossistemas neotropicais. O conhecimento atual da biologia deste grupo de abelhas esparso; os estudos realizados referem-se principalmente biologia da nidificao. Informaes sobre a estrutura gentica de ninhos e populaes de Centris no so disponveis. Este trabalho objetiva determinar a estrutura familial de ninhos de Centris tarsata coletados por meio de ninhos-armadilha, dispostos no campus da Universidadde Federal de So Carlos em Araras. Ninhos fundados no local foram retirados e mantidos no laboratrio at a emergncia dos adultos. Estes tiveram peso e sexo anotados emergncia e foram estocados a baixas temperaturas at o momento das anlises genticas. A estrutura familial foi estabelecida a partir de fentipos proticos determinados por sete locos polimrficos; a deteco das variantes foi feita aps eletroforese em gel de amido e colorao histoqumica. A segregao dos polimorfismos bioqumicos em machos e fmeas adultos de cada ninho indicou que a estrutura gentica familiar simples, em que a fmea acasala-se com um macho. Embora preliminares, os achados indicam que usurpao de ninho pouco freqente e que monandria a condio usual nos ninhos de Centris tarsata. Estes dados devero ser corroborados com a incluso de um maior nmero de ninhos coletados. Apoio: CNPq , FAPESP 06/60863-9, BIOTA FAPESP 04/15801-0 Palavras-chaves: Centris tarsata, Alozimas, herana sociogentica intranidal
431
A SEQNCIA DE cDNA E O PERFIL DE EXPRESSO DO RECEPTOR DE ECDISONA (EcR) EM Apis mellifera E SUA POSSVEL FUNO NA DETERMINAO DE CASTAS
Aline Carolina Aleixo Silva Teles *, Angel Roberto Barchuk, Zil Luz Paulino Simes Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto USP; Universidade Federal de Alfenas; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP. Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil alinea@usp.br A ecdisona, juntamente com o hormnio juvenil (HJ), inicia e coordena os processos de muda e metamorfose em insetos, estimulando cascatas de expresso gnica atravs de ligao ao seu receptor. O receptor de ecdisona funcional , na verdade, um heterodmero composto pelo produto do gene EcR e pelo produto de um outro gene, o usp (ultraspiracle), um ortlogo do receptor de cido retinico (RXR) de vertebrados. Ambos pertencem superfamlia dos receptores nucleares, fatores de transcrio que do origem a protenas subdivididas em cinco domnios com funes diferentes, mas complementares. Estes domnios so: o A/B (modulador), o C de unio a DNA, o D de conexo, o E de unio a ligante e o F, cuja funo ainda desconhecida. A seqncia de DNA e anlises por Northern Blot, mostraram que EcR de A. mellifera um gene de cpia nica, como na maioria das espcies j estudadas, mas que no d origem a diferentes isoformas. Nesta abelha o gene apresenta a tpica estrutura em mdulos e possui elevado grau de identidade com EcR de outras espcies de insetos e artrpodes. Alm disso, os perfis de expresso de EcR em rainhas e operrias apresentaram importantes picos, alguns correspondentes aos picos de ecdisterides e HJ das duas castas. Mas, apesar de semelhantes, os perfis de EcR em ambas apresentaram algumas diferenas em relao fase e intensidade em que cada pico de expresso ocorre, sugerindo a diferente fisiologia entre elas e uma possvel funo deste gene no desenvolvimento de A. mellifera, principalmente em relao determinao de castas. Apoio: Fapesp; CNPQ Palavras-chaves: receptor de ecdisona - EcR, castas, expresso gnica
432
EXPRESSO DIFERENCIAL DE GENES RELACIONADOS AO PROCESSO REPRODUTIVO EM OPERRIAS DE Apis mellifera

Liliane M. F. de Macedo*, Karina R. Guidugli-Lazzarini, Marcela A. F. Bezerra Laure, Zil Luz Paulino Simes
*Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil lilianefmacedo@yahoo.com.br
A abelha rainha Apis mellifera a nica fmea, na colnia, com capacidade de acasalar e botar ovos fecundados. As operrias, facultativamente estreis, arcam com todos deveres no reprodutivos. Ambas sintetizam vitelogenina (Vg), principal protena do ovo, porm, a modulao da expresso do gene codificador dessa protena, a regulao, traduo e funo exercida por ela, diferem nas castas. Inmeros agentes podem estimular ou reprimir a sntese da Vg. O tratamento das rainhas com dixido de carbono (CO2) eleva os ttulos de Vg na hemolinfa, acelera o desenvolvimento ovariano e promove postura precoce. Nas operrias, o efeito antagnico. Nosso objetivo foi analisar como a expresso de genes, importantes em processos reprodutivos, afetada pelo tratamento com CO2. Operrias foram tratadas no terceiro e quarto dias aps a emergncia, no dcimo foram extrados corpo gorduroso e ovrio para anlises moleculares. Os genes selecionados para a anlise de expresso, por RT-PCR sq, foram os codificadores de: Vg e seu receptor, Lipoforina (Lp) e seu receptor, Transferrina, Hexamerina 70a e Buffy. O tratamento promoveu aumento da expresso da Lp e do seu receptor. Nos demais, a expresso foi maior no grupo controle, cujos ovrios apresentaram-se predominantemente ativados, infere-se que estes genes possam fazer parte da rede que regula a esterilidade funcional em operrias. Vg e Lp compartilham funes como transporte de lipdios e estocagem, portanto, o aumento da expresso de Lp, talvez seja para compensar a diminuio de Vg. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: vitelogenina, tratamento com CO2, reproduo
433
CONSEQNCIAS DO SILENCIAMENTO DO GENE CODIFICADOR DE VITELOGENINA NO DESENVOLVIMENTO PS-EMBRIONRIO DE RAINHAS DE Apis mellifera
Francis Morais Franco Nunes*, Luiz Roberto Aguiar, Vera Lcia Castelo Figueiredo, Klaus Hartfelder, Zil Luz Paulino Simes Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil francis@rge.fmrp.usp.br O sucesso reprodutivo em Apis mellifera dependente do desenvolvimento de ovrios nas rainhas e, conseqentemente, da sntese de protenas vitelognicas, em especial a vitelogenina (Vg). A sntese e secreo de grande quantidade dessa protena e seu transporte at os ovcitos so condies primrias para que a ovognese ocorra. Em rainhas, h pequena expresso de Vg na fase larval e alta nas formas adultas. Induzimos o silenciamento do gene codificador de Vg na fase larval oferecendo 0,5 ou 5,0 g de RNA de fita dupla (dsRNA) especfico para o silenciamento de Vg (dsVg) na dieta natural de larvas de segundo estgio, e observamos seus efeitos no desenvolvimento. Indivduos sem tratamento e tratados com dsRNA para o gene exgeno GFP (dsGFP, green fluorescence protein) foram usados como controle. Larvas que ingeriram 5,0 g de dsRNA no atingem a fase adulta, e somente 30% das que ingeriram 0,5 g de dsRNA apresentaram operculao das clulas de cria e emergncia dos indivduos adultos, mostrando efeitos colaterais dose-dependentes. No houve alterao nos ttulos de hormnio juvenil entre larvas de quinto estgio sem tratamento e as que receberam 0,5 g de dsVg. Das rainhas que emergiram, houve uma reduo mdia de 70% na abundncia de transcritos de Vg em relao aos controles (ANOVA, F=5,2992, seguido por teste de Bonferroni, p<0,05). Os dados sugerem que os transcritos de Vg, quando parcialmente silenciados na fase larval permitem o desenvolvimento at a fase adulta, enquanto que o silenciamento prximo a 100% inviabiliza a metamorfose. Anlises do contedo protico da hemolinfa por eletroforese em gis de poliacrilamida mostram que a maquinaria de traduo de Vg em rainhas adultas altamente eficiente, uma vez que, mesmo com reduo significante de transcritos, a abundncia de sua protena alta, justificando sua importncia reprodutiva. Apoio: FAPESP (proc. # 2005/03926-5) e CNPq (proc. # 142034/2003-7) Palavras-chaves: RNAi, Apis mellifera, rainha, vitelogenina, desenvolvimento
434
ANLISE DE LIGAO GENTICA PARA ESTUDO DE HOMOLOGIA DE GENES ESTERSICOS DE Apis mellifera
Keize Nagamati Junior*, Ktia Maria Ferreira, rika de Simone Molina, Marco Antnio Del Lama *Universidade Federal de So Carlos Rodovia Washington Lus, km 235, 13565-905, So Carlos, Brasil knjr.ufscar@gmail.com Estudos eletroforticos em gel de amido permitiram identificar nove regies de atividade estersica em Apis mellifera, as quais foram preliminarmente caracterizadas bioqumica e geneticamente. No entanto, suas respectivas funes ainda no so conhecidas. A partir de similaridades bioqumicas com esterases bem caracterizadas de outros organismos, possveis relaes de homologia podem ser estabelecidas. O objetivo deste trabalho foi verificar a homologia entre a esterase-1 de A. mellifera e a esterase-D humana e entre a esterase-1a de A. mellifera e a esterase-6 de Drosophila melanogaster. Para tal, procuramos encontrar uma completa associao entre fentipos estersicos e padres de RFLP das seqncias candidatas em zanges produzidos por uma rainha segregante para os dois marcadores genticos. Os resultados preliminares no foram conclusivos para estabelecer a homologia da esterase-1a com a esterase-6 de D. melanogaster; ao contrrio, total associao entre fentipo de esterase-1 e padro de RFLP foi encontrada, corroborando a homologia proposta com a esterase-D humana. Os resultados demonstram que este delineamento eficaz para estudos desta natureza. A validao da homologia e identificao do gene da esterase-1 pode contribuir para estudos funcionais dessa enzima e para estudos sobre a evoluo dessa famlia de enzimas de A. mellifera. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Apis mellifera, esterase, homologia, ligao gentica, RFLP
435
ORGANIZAO ESTRUTURAL OVARIANA DE ABELHAS SEM FERRO Melipona quadrifasciata

rica Donato Tanaka, Weyder Cristiano Santana*, Klaus Hartfelder * Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto USP Avenida Bandeirantes, 3900, 14040-901, Ribeiro Preto SP, Brasil donato@rge.fmrp.usp.br A condio reprodutiva de Melipona quadrifasciata nos instigou a estudar a ovognese nestas abelhas sem-ferro comparativamente a Apis mellifera em funo das muitas diferenas do sistema reprodutor. Em ambas as castas de Melipona cada ovrio contm somente quatro ovarolos e o desenvolvimento de folculos ovarianos ocorre normalmente em rainhas e operrias. Sabemos que em Apis somente nas operrias em situao de orfandade so encontradas as fases finais da ovognese enquanto nas operrias criadas na presena de rainha, os folculos no entram em vitelognese. Por outro lado, as operrias de Melipona mantm seus ovrios ativos e podem, mesmo na presena de rainha, ovipositar dois tipos de ovos: trficos e reprodutivos. Ns investigamos a organizao estrutural dos ovrios de rainhas e operrias de M. quadrifasciata mantidas em diferentes condies sociais. J na emergncia, rainhas e operrias apresentaram, no mnimo, um folculo pr-vitelognico em seus ovarolos. As castas mostraram pequena diferena morfolgica relacionada ao comprimento do germrio e, consequentemente, ao nmero inicial de folculos. Entretanto as fases iniciais da ovognese acontecem igualmente nas castas de M. quadrifasciata independente do acasalamento e do tipo de ovos produzidos. Quando comparadas com A. mellifera, o arranjo das clulas germinativas no incio da formao dos folculos em M. quadrifasciata no apresenta a configurao do tipo cometa observada em Apis, mas a atividade mittica sincrnica nos ovarolos, a deteco de F-actina nos fusomas iniciais e a presena de um segundo tipo celular no filamento terminal so caractersticas compartilhadas entre estas abelhas. Apoio: FAPESP 02/11729-7, CAPES Palavras-chaves: Melipona quadrifasciata, ovognese, operrias, reproduo, morfologia
436
CARACTERIZAO DO GENE CODIFICADOR DA PROTENA HP19 EM Apis mellifera

Guaracini Aparecida Loterio*, Juliana Ramos Martins, Mrcia Maria Gentile Bitondi
*Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil guaracini_loterio@yahoo.com.br
Hexamerinas so protenas produzidas e estocadas na hemolinfa larval e funcionam como fonte nutricional que garante o desenvolvimento pupal e adulto de insetos holometbolos. O seqestro destas protenas pelas clulas do corpo gorduroso deve-se fosforilao de um receptor especfico, mediada por uma tirosina quinase e pelo hormnio 20-hidroxiecdisona e, em certas etapas do desenvolvimento, o seqestro inibido pela protena HP19. Pouco se sabe sobre esta protena em insetos, no existindo estudos em Apis mellifera. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o gene codificador de HP19. Para tal, identificou-se o ortlogo de HP19 de Corcyra cephalonica no genoma de Apis (verso 4.0) para desenho de primers especficos utilizados para isolamento da seqncia alvo e subseqente clonagem, seqenciamento e anlises de bioinformtica. Um total de 826 nucleotdeos (nt) foram seqenciados, sendo 86 nt e 119 nt relativos s regies parciais das extremidades 5 e 3 no-traduzidas (UTR), respectivamente. Os demais 621 nt correspondem a regio codificadora (CDS) organizada em 4 xons. O polipeptdeo de 206 resduos de aminocidos (aa) apresenta peso molecular estimado de 23kDa e ponto isoeltrico de 8,43. Alm disso, HP19 uma protena rica em leucina (12,6% dos aa) e lisina (9,2%), estvel (ndice de instabilidade de 29,01) e hidroflica (ndice de hidropaticidade de -0,227), com 11 stios de fosforilao e ausncia de regio transmembrana. Apresenta domnios conservados da famlia GST-like, relacionados ao sistema de defesa frente ao estresse oxidativo, assim como aos mecanismos de desintoxicao. Os estudos de expresso deste gene ao longo do desenvolvimento dos morfotipos de A. mellifera corroboram a dinmica de secreo e seqestro de hexamerinas durante a ontognese desse inseto. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: HP19, Domnio GST-like, Apis mellifera, Seqenciamento, Hexamerinas
437
MTODO NO-LETAL DE AMOSTRAGEM DE DNA EM ABELHAS EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIDAE)

Cntia Akemi Oi*, Marco Antnio Del Lama Laboratrio de Gentica Evolutiva de Himenpteros, Departamento de Gentica e Evoluo, Universidade Federal de So Carlos Rodovia Washington Lus, km 235 - SP-310, So Carlos-SP, CEP 13565-905, Laboratrio de Gentica Evolutiva de Himenpteros, Departamento de Gentica e Evoluo, Universidade Federal de So Carlos cintiaakemioi@gmail.com Mtodos no-letais esto sendo descritos em diversos estudos genticos. As abelhas Euglossini so abelhas corbiculadas, importantes polinizadores da regio neotropical. Durante experimentos de marcao-recaptura, foi observado que alguns indivduos de Euglossa cordata e Eulaema nigrita apresentavam as antenas danificadas ou mesmo a ausncia completa de uma delas, o que sugeriu que a falta parcial ou completa de uma antena pode no afetar sua sobrevivncia. Nesse trabalho, procurou-se estimar taxas diferenciais de sobrevivncia entre abelhas capturadas das quais a metade de uma das antenas foi seccionada e abelhas capturadas cujas antenas no foram alteradas. A marcao e recaptura dos adultos foi realizada quando as abelhas visitavam flores de Thevetia peruviana (Apocynaceae) da cidade de So Carlos (SP). As coletas foram realizadas pelo menos uma vez por semana, entre 7 - 17 horas, nos meses de fevereiro/2006 a maro/2007. As antenas foram armazenadas em eppendorf com etanol absoluto e estocadas em freezer (-20C) at a extrao. O DNA extrado (Paxton 1996) foi amplificado por PCR e os fragmentos produzidos visualizados em gis de poliacrilamida corados com nitrato de prata. Em Eg. cordata, foram marcados 209 indivduos (65 recapturados) e 171 indivduos com antena seccionada (44 recapturados), demonstrando igual chance de recaptura (X = 0.926, P = 0.33). Em El. nigrita, foram marcados 66 indivduos (10 recapturados) e 57 indivduos com antena seccionada (6 recapturados), exibindo igual chance de recaptura (X= 0.493, P = 0.48). Estes resultados indicam que a retirada de metade de uma das antenas parece no afetar a sobrevivncia de Eg. cordata e El. nigrita. Considerando que o DNA extrado a partir da antena seccionada permitiu a amplificao via PCR de alguns genes mitocondriais testados, os dados permitem concluir que a seco parcial de uma antena constitui mtodo no-letal adequado para amostragem de DNA de adultos de euglossneos. Apoio: Fapesp Palavras-chaves: Eg. cordata, El. nigrita, mtodo no-letal, Antena, PCR
438
INFLUNCIA DA DIETA ALIMENTAR SOBRE O DESENVOLVIMENTO LARVAL DE OPERRIAS Apis mellifera

Juliana Ramos Martins*, Rodrigo Pires Dallacqua, Luis Roberto Aguiar, Mrcia Maria Gentile Bitondi Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto USP; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Av. Bandeirantes, 3900- Ribeiro Preto-SP robberbella@gmail.com O perodo larval dos insetos caracterizado pelo acmulo de reservas nutricionais para a metamorfose e desenvolvimento pupal e adulto. Em Apis mellifera, diferenas qualitativas e quantitativas na dieta alimentar oferecida s larvas levam diferenciao de castas e, em operrias adultas, a sntese de protenas de estocagem e a ativao dos ovrios so diretamente dependentes das reservas nutricionais. O objetivo deste trabalho consistiu em investigar se o desenvolvimento das larvas e, particularmente, de seus ovrios, influenciado pela dieta oferecida s abelhas operrias nutridoras (que alimentam as larvas). Para investigar esta relao, abelhas operrias foram alimentadas com dietas preparadas com diferentes quantidades de plen (5% e 15%). Ao final de 7, 8 e 9 dias, as larvas atendidas por estas operrias foram pesadas e dissecadas para anlise da expresso do gene hex 70c, codificador de uma hexamerina (protena de estocagem) no corpo gorduroso, e dos genes de apoptose iap1, iap3, bruce, buffy (ativadores) e ark (inibidor) nos ovrios. As larvas alimentadas por operrias que consumiram dieta contendo 15% de plen apresentaram peso corporal significantemente maior (P<0,001). No entanto, no houve diferena entre nveis de transcritos de hex 70c entre ambos os grupos de larvas. O desenvolvimento dos ovrios no sofreu alteraes significativas, mas foram observadas pequenas flutuaes nos nveis de transcritos dos genes de apoptose. Em conjunto, estes dados sugerem que o teor de plen oferecido s operrias nutridoras influencia processos do desenvolvimento larval, sendo o mais evidente, o peso corporal. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Apis mellifera, desenvolvimento larval, hexamerina, apoptose
439
HETEROCRONIA DA MATURAO DO EXOESQUELETO ENTRE CASTAS E SEXOS DE Apis mellifera

Moyss Elias Neto*, Mrcia Maria Gentile Bitondi Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901, Ribeiro Preto, SP, Brasil meliasneto@pg.ffclrp.usp.br O dimorfismo sexual e a diferenciao de castas correspondem a variaes fenotpicas intraespecficas e descontnuas denominadas polifenismos, os quais compreendem verdadeiros desvios no fentipo potencialmente influenciados pelo ambiente e pelo gentipo. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho consiste na investigao de uma potencial condio polifnica relacionada maturao do exoesqueleto adulto em Apis mellifera. Tegumentos torcicos e abdominais de operrias, rainhas e zanges recm-emergidos foram contrastados por meio de preparaes histolgicas convencionais para microscopia ptica. No momento da emergncia, o exoesqueleto dos machos se apresenta relativamente mais pigmentado e esclerotizado em comparao ao das fmeas. Alm disso, a cutcula de rainhas se encontra em um estgio de diferenciao levemente atrasado em relao de operrias. Na tentativa de investigar a origem ontogentica de tal padro histolgico, foi realizada a anlise do perfil transcricional do gene codificador da enzima cuticular Lacase 2, AmLac 2, a qual tem funo preponderante na esclerotizao do exoesqueleto. Amostras de RNA total extrado do tegumento de pupas e adultos faratos de castas e sexos em diferentes fases do desenvolvimento foram submetidas a RT-PCR. Embora a anlise qualitativa da expresso gnica tenha revelado equivalncia entre castas e entre sexos, provvel a existncia de diferenas quantitativas, potencialmente explorveis por RT-PCR quantitativa. Em um contexto geral, o padro heterocrnico observado inserese num cenrio evolutivo no qual o ambiente protetor das colnias possivelmente reflete um relaxamento das presses seletivas sobre a diferenciao cuticular, permitindo, desse modo, a emergncia de adultos com exoesqueleto relativamente imaturo. Apoio: CAPES; FAPESP Palavras-chaves: Apis mellifera, tegumento, exoesqueleto, Lacase 2, polifenismo
440
CARACTERIZAO DO GENE AmelGrp, CODIFICADOR DE UMA PROTENA CUTICULAR RICA EM GLICINA

Michelle Prioli Miranda Soares, Mrcia Maria Gentile Bitondi Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Avenida Bandeirantes, 3900, 14040-901, Ribeiro Preto, Brasil miprioli@pg.ffclrp.usp.br Os insetos so recobertos por uma estrutura extracelular, a cutcula. Dentre seus principais componentes destacam-se as protenas cuticulares, as quais so sintetizadas pela epiderme e secretadas em momentos precisos dos ciclos de muda. O presente trabalho se desenvolve dentro de uma abordagem ampla que visa obter informaes sobre estrutura, funo e regulao hormonal de genes codificadores de protenas integrantes das diferentes cutculas que recobrem a abelha Apis mellifera em seus estgios larval, pupal e adulto. Neste contexto, foi investigada a expresso de um gene codificador da protena cuticular AmelGrp. O RNA foi extrado do tegumento (epiderme e cutcula) dos diferentes estgios e utilizado em experimentos de RT-PCR semiquantitativa para sntese de cDNA, amplificao, clonagem e seqenciamento. A protena predita apresentou regies ricas em glicina, evidenciando uma provvel classe de protenas cuticulares indita em abelhas. A expresso de AmelGrp se restringe a perodos especficos do desenvolvimento e no est sujeita a regulao espacial. O aumento dos transcritos AmelGrp, tanto no trax quanto no abdmen, coincide com o declnio do ttulo de ecdisterides na hemolinfa. Experimentos in vitro confirmaram que AmelGrp regulado por estes hormnios. Western blots mostraram que os nveis da protena AmelGrp se relacionam positivamente com os nveis do respectivo transcrito nas diferentes fases do desenvolvimento. No presente momento estamos utilizando o RNA de interferncia como ferramenta para investigar a funo do gene AmelGrp. Apoio: FAPESP, CNPq Palavras-chaves: gene codificador de protena cuticular, Apis mellifera, tegumento, ecdisterides
441
EFEITOS DOS ECDISTERIDES NA EXPRESSO DE ftz-f1 UM POSSVEL REGULADOR DA TRANSCRIO DE vitelogenina NO TEGUMENTO E NO CORPO INTEIRO DE PUPAS DE Apis mellifera
Tathyana Rachel Palo Mello*, Angel Roberto Barchuk, Aline C. A. S. Teles, Michelle Prioli M. Soares, Mrcia M. Gentile Bitondi, Zil Luz Paulino Simes Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Dept.. Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Alfenas Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil tathybio@gmail.com FTZ-F1 membro da superfamlia dos receptores nucleares. Em Drosophila melanogaster, ftzf1 codifica duas variantes proticas: a e . FTZ-F1 atua como fator de competncia para a ao dos ecdisterides. Em Apis mellifera, o knockdown de vitelogenina (vg), a principal protena do vitelo e que tambm participa na resposta imune e longevidade, resultou na queda da expresso de ftz-f1. Nossos objetivos foram analisar as caractersticas, expresso e funes de ftz-f1 no desenvolvimento de A. mellifera. O gene predito ftz-f1 possui 15.612 pares de base (pb) e seis exons. Foram seqenciados 2041pb a partir do cDNA. Os padres de expresso foram determinados por PCRsq e PCRq e so similares em rainhas e operrias. O nvel mais alto de expresso de ftz-f1 ocorre no ltimo estgio pupal (Pbd) onde 9,4 vezes maior em rainhas. Um pico na expresso de vg tambm ocorre neste estgio, o qual sugere a participao de FTZ-F1 na regulao da expresso deste gene. Como em outros insetos, picos de expresso de ftz-f1 ocorrem em perodos de baixos ttulos de ecdisterides no final do quinto instar larval (S3) e em pr-pupa (PP3). Anlises do cDNA extrado de tegumento pupal incubado em 1g de 20-hidroxiecdisona confirmam que este hormnio inibe a transcrio de ftz-f1. O mesmo ocorreu em corpo inteiro de pupas tratadas com 5g deste hormnio. Estes resultados sugerem que, tambm na abelha, FTZ-F1 pode atuar como fator de competncia para ecdisterides, j que os nveis de expresso de ftz-f1 so maiores quando os ttulos hormonais so baixos e sua expresso reprimida por estes hormnios. Para a elucidao dos processos aqui discutidos esto sendo realizados experimentos de knockdown. Apoio: FAPESP 06/01901-8 Palavras-chaves: Fator de transcrio, Real-Time PCR, RT-PCR, Apis mellifera
442
A VIA DE SINALIZAO INSULNICA EM ABELHAS Apis mellifera: EXPRESSO DIFERENCIAL DOS PEPTDEOS INSULNICOS E DOS RECEPTORES DE INSULINA EM LARVAS DE RAINHAS E OPERRIAS
Sergio Vicente de Azevedo*, Klaus Hartfelder Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil svazevedo@rge.fmrp.usp.br A via de sinalizao insulnica (IIS) representa um mdulo evolutivamente conservado no controle do tamanho do corpo e, tambm, est relacionada com o crecimento de rgos em metazorios. Nas abelhas altamente eussociais, os fentipos das castas diferem no apenas no tamanho e caractersticas morfolgicas, mas tambm no fitness individual e histria de vida. Investigamos os perfis de expresso de genes codificadores de dois peptdeos tipo-insulina (ILP, insulin-like peptide),AmILP-1 e AmILP2, e dois receptores de insulina (AmInR-1 e AmInR-2), todos preditos no genoma de abelha. Anlises por qPCR em larvas de rainhas e operrias, durante estgios crticos no desenvolvimento, demonstraram que AmILP-2 o ILP predominantemente transcrito em ambas as castas, com transcrio maior em operrias do que em rainhas. Em rainhas a transcrio de ambos os genes para os InR declinaram acentuadamente no quarto instar enquanto em operrias foi observado pouca modulao. primeira vista, esses resultados no so intuitivos, pois em rainhas as taxas de crescimento so maiores, mas, sob uma anlise mais ampla, podem ser interpretados como uma possvel relao antagonista entre a via IIS e o hormnio juvenil. Analisando a transcrio dos genes AmInR-1 e AmInR-2 em ovrios de larvas de rainhas e operrias verificamos baixos nveis de transcritos em rainhas e uma queda acentuada na transcrio de AmInR-2 no quinto instar larval de operrias, indicando uma relao independente da transcrio geral dos genes versus transcrio tecido-especfica. Apoio: FAPESP, CNPq Palavras-chaves: AmInR-1, AmInR-2, AmILP-1, AmILP-2, Apis mellifera
443
O PADRO DE DISPERSO SEXOASSIMTRICO NOS EUGLOSSNEOS (HYMENOPTERA: APIDAE: EUGLOSSINI)? UM ESTUDO DE CASO: Euglossa cordata
Natlia de Campos Muradas Cerntola*, Marco Antnio Del Lama Universidade Federal de So Carlos - UFSCar Rodovia Washington Lus, km 235 SP 310, 13565-905, So Carlos, Brasil nataliacerantola@yahoo.com.br As abelhas Euglossini so importantes polinizadoras da regio neotropical e apresentam grande capacidade de vo. Espcies desse grupo tm presena marcante nas cidades, utilizando as flores de Thevetia peruviana (Apocynaceae) como fonte de nctar. Estudos de marcao-recaptura em So Carlos/SP demonstraram baixa disperso da populao urbana na coleta de nctar. Alm disso, os dados de marcadores moleculares indicaram comportamento filoptrico das fmeas, em razo da estruturao populacional verificada via genes mitocondriais. Considerando a aparente discrepncia entre estes dados e os descritos na literatura, esse trabalho visa determinar por meio de marcadores de herana uniparental (RFLP-mtDNA) e biparental (microsatlites) a estrutura gentica de populaes de Euglossa cordata coletadas em T. peruviana em cidades ao longo de um transecto norte/sul do Estado de So Paulo. Anlises alozmicas confirmaram a identificao especfica dos indivduos coletados e os resultados preliminares indicam que as populaes de seis cidades so estruturadas em relao aos dados de mtDNA; porm, no foi verificada associao entre as distncias gentica e geogrfica com base nos microsatlites. Estes achados indicam filopatria das fmeas e que os machos constituem o sexo dispersor, corroborando a hiptese de disperso sexo-assimtrica nesta espcie. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Euglossini , disperso , Euglossa cordata, RFLP , microssatlite
444
CARACTERIZAO FUNCIONAL DAS ESTERASE DE Tetragonisca angustula COM A UTILIZAO DE pCMB

Ana Lcia Paz Barateiro Stuchi*, Tatiane Vicente Baitala, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo, Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki Universidade Estadual de Maring Departamento de Biologia Celular e Gentica; Departamento de Zootecnia Avenida Colombo 5790, 87020-900 Maring, Brasil analuzoo@yahoo.com.br T. angustula angustula apresenta 2 esterases (EST-1 e EST-3) e T. angustula fiebrigi 3 esterases (EST-1, EST-2 e EST-3). A classificao dessas enzimas pode ser baseada na sua funcionalidade, que est associada ao seu padro de inibio com paracloromercuriobenzoato (pCMB), sulfato de eserina e organofosforados. Assim, foi realizada a caracterizao funcional das esterases de T. angustula. Foram analisadas operrias adultas das duas subespcies. Cabea/trax foram homogeneizados em soluo de 2-mercaptoetanol e glicerol. Foram utilizados os mesmos indivduos no gel controle e no gel com inibidor pCMB em 4 concentraes (0,010g; 0,020g; 0,040g; 0,060g). As amostras foram submetidas eletroforese vertical em gis de poliacrilamida a 8%. A colorao para esterase foi feita empregandose como substrato o a- e b-naftilacetato juntos. Na concentrao de 0,010g no foi observada inibio para as esterases. Em 0,020g observou-se uma completa inibio da EST-2 de T. a. fiebrigi e 90% de inibio da EST-3 nas duas subespcies. A partir da concentrao de 0,040g foi observada 100% de inibio das duas esterases. Os resultados obtidos ainda no so definitivos, pois foram realizados testes com pCMB e parcialmente com malathion, permitindo inferir que essas esterases so colinesterases. Apoio: CAPES Palavras-chaves: pCMB, inibio, Tetragonisca angustula, colinesterases, esterase
445
PERFIL DE EXPRESSO E ANLISE DOS PROMOTORES DE GENES POTENCIALMENTE ENVOLVIDOS EM VIAS DE DIFERENCIAO SEXUAL SOMTICA EM Apis mellifera
Flvia Cristina de Paula Freitas*, Alexandre dos Santos Cristino, Zil Luz Paulino Simes Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Departamento de Gentica, USP Av. dos Bandeirantes, n. 3900 - Ribeiro Preto/SP flaviacpfreitas@usp.br Genes envolvidos na determinao do sexo em ,Drosophila melanogaster esto conservados no genoma de Apis mellifera e algumas evidncias indicam que o gene doublesex (dsx) transcrito diferencialmente como uma isoforma alternativa de mRNA especfico de macho. O gene dsx est entre os genes mais conservados que participam da determinao do sexo em insetos e ocupa a base da hierarquia reguladora dos genes envolvidos na diferenciao sexual somtica. O dsx codifica um fator de transcrio (DSX) que regula a transcrio sexo-especfica de vrios genes. Em D. melanogaster, o pr-mRNA do gene dsx sofre processamento alternativo que determina duas isoformas para o DSX: DSXF e DSXM, expressos em fmeas e em machos, respectivamente. A funo melhor caracterizada do DSX a regulao da expresso de protenas de estocagem tais como a Protena do ovo (Yp1) em D. melanogaster, a Vitelogenina (Vg) em Bombyx mori e a Hexamerina 1.2 (Hex1.2) em Ochlerotatus atropalpus. O principal objetivo deste estudo foi a caracterizao do perfil de expresso de quatro genes (dsx, ix, vg e hex110) em operrias, rainhas e zanges nos estgios larval 5 e recm-nascido . O fato de dsx apresentar-se conservado em metazorios indica que as vias regulatrias e os genes-alvo controlados por este fator pleiotrpico possam tambm estar conservados. As anlises filogenticas e da regio promotora dos genes vg e hex110 em insetos indicam ser estes os candidatos a terem expresso diferencial nos sexos de A. mellifera. Contudo, foi observado que no parece haver um perfil de expresso especfico de sexo ou casta para os genes ix, vg e hex110, mas sim uma expresso diferencial (em nveis de transcritos) entre os sexos e castas. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Diferenciao sexual, doublesex, Apis mellifera, Regulao Gnica
446
DESENVOLVIMENTO CASTA-ESPECFICO DAS PERNAS POSTERIORES DE Apis mellifera

Ana D. Bomtorin*, Marcela A. F. B. Laure, Angel R. Barchuk, Zil L. P. Simes Dept.. Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo; Dept.. Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Alfenas; Dept.. Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes 3900, Ribeiro Preto, Brasil ana_durva@rge.fmrp.usp.br O difenismo em fmeas adultas de Apis mellifera resulta de alimentao diferencial durante o desenvolvimento larval. Dentre as diferenas morfolgicas encontradas entre as castas encontram-se estruturas relacionadas coleta de plen e prpolis nas pernas posteriores de operrias, p.e. a corbcula. Estudos prvios (Barchuk et al., BMC Dev Biol, 2007) utilizando microarrays de cDNA mostraram quatro genes (de um total de 240 diferencialmente expressos) relacionados ao desenvolvimento das pernas (ataxin-2, cryptocephal, grunge e dachshund). Utilizando PCR quantitativo, analisamos o perfil de expresso dos genes abdominal-A, ataxin-2, cryptocephal, grunge e ultrabithorax durante o desenvolvimento das pernas posteriores das fmeas. ataxin-2, cryptocephal e grunge, genes relacionados formao de cerdas e elongao dos discos imaginais, no so diferencialmente expressos. ultrabithorax e abdominal-A so expressos durante o desenvolvimento das pernas posteriores, sendo mais expressos em operrias no incio do estgio pupal. As pernas das ninfas de gafanhotos e grilos apresentam um padro de expresso gnica similar ao encontrado em abelhas. Drosophila, durante os estgios pupais, apresentam maior expresso de ultrabithorax na regio das pernas desprovida de cerdas. Utilizando Microscopia Eletrnica de Varredura, observamos que as cerdas e as estruturas coletoras j esto formadas nas pernas de pupas de olho marrom e a corbcula uma regio privada de cerdas com uma nica cerda central, que parece ser sensorial. Nossos resultados sugerem ultrabithorax como um elemento chave na formao da corbcula e na diferenciao de castas em Apis mellifera. O silenciamento gnico de ultrabitohrax por RNAi (em andamento) dar-nos- mais informaes sobre o desenvolvimento de pernas em abelhas. Apoio: FAPESP (05/03926-5, 06/05437-4) Palavras-chaves: polifenismo, corbcula, genes diferencialmente expressos, desenvolvimento
447
INFLUNCIA DO PARASITA Varroa destructor NA RESPOSTA IMUNE DE OPERRIAS E ZANGES DE Apis mellifera
Patrick Almsy Zanello, Anete Pedro Loureno, Zil Paulino Simes Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil patrickzanello@hotmail.com As abelhas Apis mellifera podem apresentar diversos parasitas, como o caro Varroa destructor, conhecido como varroa. Este caro age perfurando o tegumento das abelhas para assim se alimentar de sua hemolinfa. A influncia do caro no sistema imune da abelha um tpico de grande importncia, uma vez que a varroatose causa grandes problemas em abelhas europias. Outro fato que pode influenciar no sistema imune a transmisso do vrus da asa deformada (dwv) pela varroa. Para o estudo do sistema imune em abelhas africanizadas infestadas pela varroa, foram coletadas pupas de operrias e zanges parasitadas com nmeros variveis de varroas. O RNA total das amostras foi purificado para sntese do cDNA e posterior amplificao por PCR. A PCR com primers especficos de defensina, um peptdeo antimicrobiano, foi usada para se verificar ativao ou supresso do sistema imune. A presena do vrus foi observada com uso de primers especficos para dwv. Pela anlise do perfil de expresso de defensina e da grande quantidade de vrus nas amostras coletadas, observamos que em zanges a varroa um vetor do vrus dwv. As operrias tambm apresentaram grande quantidade de transcritos da defensina em abelhas infestadas por varroas. Estes resultados mostram que em abelhas africanizadas, a infestao por varroas provoca ativao do sistema imune com o aumento na quantidade de transcritos da defensina. Estes resultados so inditos e diferenciam-se do que j foi descrito em abelhas europias, uma vez que o sistema imune destas abelhas suprimido quando infestadas por varroa. Apoio: Palavras-chaves: Apis mellifera, Varroa destructor, Imunidade, defensina
448
QUANTIFICAO DO CONTEDO GENMICO DE TRS ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, MELIPONINAE) POR CITOMETRIA DE FLUXO
Denilce Meneses Lopes*, Carlos Roberto de Carvalho, Wellington Ronildo Clarindo, Milene Miranda Frana, Mara Garcia Tavares Universidade Federal de Viosa Av. P H Rolfs, s/n , 36.570-000, Viosa, Minas Gerais, Brasil denilceml@yahoo.com.br O conhecimento do tamanho do genoma tem recebido crescente ateno nos ltimos anos e a citometria de fluxo tem sido aplicada para determinar o contedo de DNA de vrios organismos. O tamanho do genoma de muitas espcies de abelhas no conhecido, apesar da importncia ecolgica deste grupo de insetos em diversos ecossistemas. Neste trabalho a citometria de fluxo foi utilizada para medir o contedo de DNA de trs espcies de abelhas, Melipona mondury, M. rufiventris e Scaptotrigona xanthotricha, importantes polinizadores das matas brasileiras. A suspenso de ncleos foi preparada utilizando-se o gnglio cerebral dos indivduos e tampo OTTO. A anlise foi realizada em citmetro de fluxo Partec PAS, utilizando-se como controle interno, clulas do gnglio cerebral de Drosophila melanogaster e de S. xanthotricha. Os histogramas obtidos demonstraram coeficientes de variao de 2,87 a 4,14%. As medidas de citometria de fluxo evidenciaram que o contedo 2C de DNA nuclear de M. mondury e M. rufiventris foi equivalente a 1,89 pg e 1,85 pg respectivamente, enquanto o contedo de DNA nuclear de S. xanthotricha foi de C = 0, 42 pg para machos e 2C = 0, 88 pg para as fmeas. Esta diferena pode ser justificada pela quantidade de heterocromatina em M. mondury e M. rufiventris comparado ao observado em S. xanthotricha. O valor encontrado para essa espcie corresponde ao que tem sido visto em outras abelhas estudadas. Apoio: FAPEMIG; CAPES Palavras-chaves: Hymenoptera, Citometria de fluxo, Contedo de DNA
449
EXPRESSO DE LOCALIZAO DE CADERINAS EM OVRIOS DE RAINHAS E TESTCULOS DE LARVAS DE Apis mellifera

Mnica Mazzei Florecki, Klaus Hartfelder Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil zeiflo@yahoo.com.br Caderinas so glicoprotenas transmembranas responsveis pelo processo de adeso intercelular que compem uma superfamlia dividida em caderinas clssicas e protocaderinas. As caderinas clssicas so as mais conhecidas e so expressas em diferentes tecidos de vertebrados. Entre os invertebrados, a espcie mais estudada Drosophila melanogaster, na qual a E-caderina exerce papel importante durante a gametognese, pois fundamental para o ancoramento de clulas tronco germinativas no pice do germrio. Para obtermos informaes a respeito da expresso de caderinas em gnadas de Apis mellifera, realizamos experimentos de imunolocalizao para microscopia de luz e microscopia eletrnica de transmisso com anticorpo anti-pan-caderina. Em ovrios de rainhas adultas e testculos de zango na fase L5F3 as caderinas encontram-se distribudas pelo citoplasma de clulas somticas e germinativas. Pontos focais nucleares colocalizados com os nucllolos tambm foram observados nos dois tipos celulares. Para que pudssemos estudar a expresso de possveis protenas reconhecidas pelo anticorpo primrio, foi realizada RT-PCR para deteco dos transcritos de E-caderina, N-caderina, Starry Night, Fat e Fat-like, cujas seqncias foram confirmadas por seqenciamento. Os resultados indicam possveis funes alternativas para caderinas durante a gametognese de Apis mellifera, evidenciadas pela localizao nuclear e expresso de protocaderinas nas gnadas. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Caderina, Ovrio, Testculo, Microscopia, Apis mellifera
450
A COLONIZAO DE UMA REA POR ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO - UM ESTUDO DE CASO: Partamona helleri (FRIESE, 1990) (HYMENOPTERA: APIDAE: MELIPONINI)
Ktia Maria Ferreira, Marco Antonio Del Lama Laboratrio de Gentica Evolutiva de Himenpteros, Departamento de Gentica e Evoluo, Universidade Federal de So Carlos Rodovia Washington Lus, Km 235, CEP 13565-905, So Carlos - So Paulo - Brasil kamaferre@gmail.com O desenvolvimento de estratgias de manejo das abelhas, visando sua conservao e utilizao sustentvel como polinizadores, requer o conhecimento da biologia reprodutiva e a estrutura populacional das espcies, assim como dos fatores que tornam bem sucedida a colonizao de certa rea pelas espcies de abelha. Com o objetivo de testar a hiptese de que uma rea pode ser colonizada por um nmero reduzido de fmeas fundadoras, foram analisados 58 ninhos de Partamona helleri, sendo 34 distribudos no Campus da Universidade Federal de So Carlos (UFSCar), 15 no Campus da Universidade de So Paulo de Ribeiro Preto (USP-1) e 9 provenientes do Campus da Universidade de So Paulo em So Paulo (USP-2). O seqenciamento de um fragmento de 485 pb do gene mitocondrial citocromo b demonstrou um nico hapltipo presente nas 24 colnias analisadas da UFSCar. A deteco de somente uma linhagem mitocondrial confirma a hiptese deste trabalho de que uma rea colonizada por um nmero reduzido de fmeas. Nos ninhos provenientes da USP-1 e USP-2, seis hapltipos foram encontrados nas duas amostras. O significado desta diferena dever merecer especial ateno a partir da construo da rede haplotpica. A anlise de segregao dos alelos dos locos microssatlites heterlogos Mbi232 e Mbi254 em operrias adultas de 50 ninhos demonstrou que a fmea de Partamona helleri se acasala com um nico macho (monandria). Apoio: FAPESP - 05/60893-2 Palavras-chaves: Partamona helleri, colonizao, microssatlites, DNA mitocondrial, monoandria
451
IDENTIFICAO DO GENE DA ENZIMA METIL FARNESOATO EPOXIDASE DE Apis mellifera E SUA RELAO COM O STATUS NUTRICIONAL
Gustavo Conrado Couto Rosa*, Zil Luz Paulino Simes, Aline Mackert Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil guconrado@hotmail.com O Hormnio Juvenil (HJ), sintetizado nos corpora allata (CA), um regulador de processos fisiolgicos em insetos. O estudo da regulao dos ttulos de HJ importante no caso de Apis mellifera, devido a sua atuao na diferenciao de castas, rainhas e operrias. A regulao do ltimo passo na sntese do HJ-III, nico HJ encontrado em Apis mellifera, a epoxidao do metil farnesoato para HJ-III, realizada pela enzima metil farnesoato epoxidase (MFE). O gene codificador da MFE foi descrito em Diploptera punctata. Em A. mellifera nove potenciais parlogos para o gene foram identificados por ferramentas de bioinformtica a partir de seqncias preditas pelo projeto genoma deste organismo. Apenas a seqncia referente ao GB15634 (Official Gene Set) revelou um perfil de expresso compatvel com a taxa de sntese de HJ. Este gene tambm foi considerado por anlises de filogenia molecular (Claudianos et al., 2000 Insect Mol. Biol. 15:615-636.) como o ortlogo do gene codificador da MFE em Apis mellifera. Os nveis de transcritos do GB15634 so aumentados em abelhas alimentadas com acar em relao quelas que receberam acar e plen. Os resultados apontam para o GB15634 como sendo o gene participante da via de sntese do HJ, e ainda, que este gene pode ser um passo importante na modulao dos ttulos deste hormnio, uma vez que o status nutricional j conhecido como um importante regulador dos nveis de HJ em abelhas melferas. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Hormnio Juvenil, Metil farnesoato epoxidase, Apis mellifera, Corpora allata, Status nutricional
452
MITOCHONDRIAL GENE ORDER AND THE EVOLUTION OF BEES (HYMENOPTERA, APIDAE)

Maria Cristina Arias*, Daniela Silvestre Universidade de So Paulo Departamento de Gentica e Biologia Evolutiva, rua do Mato, 277 sala 320 05508-090 So Paulo, Brasil mcarias@ib.usp.br The classification of bees and their phylogenetic relationships are controversial questions still. Mitochondrial gene order is cited by several authors as a promising molecular marker to study the phylogeny of major groups, like Insecta orders. Thus comparative analyses of mtDNA may constitute a good character source to infer the phylogeny among tribes, subfamilies and families of bees. We selected 13 bee species representing 11 different tribes for mtDNA analysis. Regions comprising tRNA genes were amplified with primers derived from other insects. All fragments were cloned and sequenced from both directions. Sequences were analyzed to determine gene order and compared among species. We verified a large amount of gene rearrangements. Unfortunately, comparing all species of this work, gene translocations had not generated sufficient data to obtain a phylogenetic tree. However we could apply our data to a previous phylogenetic tree proposed by Michener (2000) where subfamilies and families of bees are related, but divided in two groups: short and long-tongued taxa. It is clear that bees have an accelerated rate of mitochondrial genome evolution, including base substitution and also gene order rearrangement. Data are congruent to previous studies on wasps. More investigations on that insect order can lead to a better understanding of molecular evolution. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: bees, evolution, gene order, mitochondrial dna
453
INFLUNCIA DA DISTNCIA GEOGRFICA SOBRE A SIMILARIDADE GENTICA DE ABELHAS Melipona quinquefasciata POR INTERMDIO DO TESTE DE MANTEL, USANDO A REGIO ITS-1 PARCIAL DO DNA RIBOSSMICO NUCLEAR.
Jlio Otvio Portela Pereira*, Darci de Oliveira Cruz, Daniel Macedo de Melo Jorge, Davi Coe Torres, Carlos Eduardo Alves Soares, Breno Magalhes Freitas, Thalles Barbosa Grangeiro Faculdade de Tecnologia Centec - FATEC Sobral; Universidade Federal do Cear - UFC Av. Dr. Guarany, 317, Betnia, Sobral-CE. CEP: 62040-730 pereirajop@yahoo.com.br Recentemente foi relatada a ocorrncia da abelha sem ferro Melipona quinquefasciata no nordeste do Brasil, identificada por caracteres morfolgicos no totalmente conclusivos. O objetivo deste estudo foi verificar a influncia da distncia geogrfica sobre a similaridade gentica das abelhas encontradas no Nordeste e no Centro-Oeste, por intermdio do teste de Mantel. Foram coletadas em nove colnias, amostras de abelhas, distribudas nos estados do Cear, Piau e Gois. A regio ITS1 foi amplificada por PCR a partir de amostras de DNA genmico (extrao com reagente CTAB) usando-se os iniciadores ITS2 e ITS5. Seqncias parciais da extremidade 3 dos produtos amplificados foram obtidas usando-se o iniciador ITS2, e analisados no seqenciador MegaBACE 1000. A matriz de similaridade gentica foi montada com o auxlio do programa MEGA v3, e da distncia geogrfica foi calculada por intermdio do programa GPS Trackmaker 11.7, a partir dos pontos amostrais georeferenciados. Os resultados aps o seqenciamento mostrou elevado grau de similaridade entre as amostras, 0,015 e tamanho de 491 a 572pb. O teste de Mantel revelou que a distncia geogrfica afetou a similaridade gentica entre as abelhas com 95% de probabilidade. J que, o H0 formulado pelo programa Mantel, foi rejeitado, quando o valor g=3,4966 foi superior ao valor crtico gerado 1,645 (p<0,05), existindo portanto autocorrelao espacial. Conclui-se que, embora se tratando da mesma espcie, o distanciamento geogrfico afetou, em pequeno grau, a dissimilaridade gentica das populaes estudadas. Apoio: CNPq; CAPES; FUNCAP; FATEC Sobral Palavras-chaves: Melipona quinquefasciata, teste de Mantel, DNA genmico, ITS-1
454
BIOLOGIA DA POLINIZAO
455
IDENTIFICATION OF CALMODULINBINDING PROTEINS IN BRAIN OF WORKER HONEYBEES

Luciana Karen Calbria*, Liudy Garcia Hernandez , Renata Roland Teixeira, Marcelo Valle de Sousa, Foued Salmen Espindola Instituto de Gentica e Bioqumica, Universidade Federal de Uberlndia; Centro de Aplicaciones Tecnolgicas y Desarrollo Nuclear; Instituto de Cincias Biolgicas, Universidade de Braslia Av Par s/ nmero, Campus Umuarama, 38400-902 Uberlndia, Brasil lkcalabria@yahoo.com.br Calmodulin is a Ca+2-binding protein important in a variety of cell functions. The Ca+2/ calmodulin complex interacts with and regulates various enzymes and target proteins, known as calmodulin-binding proteins (CaMBPs). In this study, we revealed a comparative identification of the CaMBPs composition in the worker honeybee (Apis mellifera) brain, considering two different honeybee behaviors in the colony. To this end, the CaMBPs of forager and nurse workers were purified by affinity chromatography, separated in 1D gel, digested and submitted to peptide mass fingerprinting (PMF). In the PMF analysis, 15 different proteins, considered behavior-specific proteins, were identified, one of them exclusively in forager workers and 10 in nurses. All the proteins were classified in terms of their function and cell localization, revealing a greater expression of metabolism-related CaMBPs in both worker subcastes. Protein sequences were then analyzed for the presence of the calmodulinbinding sites. Therefore, the honeybee brain CaMBPs profiles presented differences between worker subcastes. This is the first identification of calmodulin-binding proteins in the brain of Apis mellifera upon nursing and foraging behaviors in the colony and this diversity of target proteins for Ca+ 2/CaM may be involved in terms of the function of these proteins in the nervous system. Apoio: CAPES; UFU; TWAS; CNPq; UNB; Apirios Girassol Palavras-chaves: Apis mellifera, brain, calmodulin, calcium, MALDI-TOF
456
ALTERAES NEUROFISIOLGICAS CAUSADAS PELO FORRAGEAMENTO EM OPERRIAS DE Apis mellifera

Cynthia Renata de Oliveira Jacob*, Hellen Maria Soares, Lilian M. M. Cesar Tognoli, Roberta C. F. Nocelli, Osmar Malaspina, Mario Sergio Palma Centro de Estudos de Insetos Sociais - UNESP - Rio Claro Av: 24A, 1515 - Bela Vista re_jacob@yahoo.com.br As operrias de Apis mellifera apresentam estruturas e fisiologia diferentes conforme a idade, o que as torna aptas ao desempenho de variadas tarefas que se iniciam dentro da colnia e culminam com a sada para o campo quando a mesma se torna forrageira. Com a sada do ninho, a operria se expe a uma srie de estmulos externos novos. O gene fos um gene de expresso imediata presente em neurnios e sua transcrio ocorre aps a ocorrncia de uma vasta gama de estmulos, o que o tornou, nos ltimos anos, um importante indicador de alteraes dos processos fisiolgicos ocorridos nestas clulas como resultado destes estmulos. Com o objetivo de verificar quais estruturas do sistema nervoso so mais sensveis aos estmulos extra-coloniais, grupos de operrias nas idades recm-emergida, 21, 28 e 35 dias foram coletadas, seus crebros dissecados, includos em parafina e submetidos marcao com anticorpo anti c-fos. A marcao positiva para a protena Fos foi verificada apenas a partir dos 21 dias de idade, nas regies dos ocelos e dos olhos compostos. O resultado positivo para a expresso da protena Fos nestas regies est relacionado com a fase, dentro do polietismo etrio, em que estas se encontram, uma vez que passam a realizar a atividade de forrageamento, ou seja, as abelhas deixam de realizar apenas as tarefas no interior do ninho, e tem os primeiro contatos com o ambiente externo passando a receber estmulos como variaes nas intensidades de ondas luminosas, contato com substncias qumicas presentes no meio e com predadores. Apoio: CNPq; FAPESP Palavras-chaves: abelha, forrageamento, Proteina Fos, crebro, Apis mellifera
457
ESTIMATES OF GENETIC AND PHENOTYPIC PARAMETERS FOR WEIGHT AND THORAX MORPHOMETRIC MEASUREMENTS IN Apis mellifera AFRICANIZED QUEENS
Vagner de Alencar Arnaut de Toledo*, Fabiana Martins Costa-Maia, Elias Nunes Martins, Patrcia Faquinello, Alexandre Leseur dos Santos, Maria Josiane Sereia Departamento de Zootecnia UEM; Programa de Ps-Graduao em Zootecnia UEM; Departamento de Engenharia de Alimentos UTFPR Av. Colombo, 5790, 87020-900, Maring, Paran, Brasil vagner_abelha@yahoo.co.uk This research was carried out to estimate the genetic and phenotypic parameters for Apis mellifera Africanized queens weight and thorax morphometric measurements. At emergence 829 queens were weighed and measured to determine live queen weight (mg), length, thorax width and height (mm). Data were submitted to unitraits and multicharacter analyses by Bayesian methods through the software MTGSAM. The general averages and standard deviation for queen live weight, length, thorax width and height were 177.22 25.71mg, 4.79 0.39mm, 4.80 0.42mm and 4.90 0.34mm, respectively. Heritability estimates for live queen weight, length, and thorax width and height were 0.37, 0.50, 0.21 and 0.44 by unitraits analysis and 0.05, 0.65, 0.66 and 0.56 by tetracharacter analysis, respectively. Heritability estimates for thorax measurements were higher by tricharacter than by unitraits analysis. Estimates of genetic and phenotypic parameters for thorax measurements of Africanized Apis mellifera queens show evidence that there is potential selection in all characteristics. When combined with thorax measurements, the weight is not a characteristic with potential selection. Apoio: CAPES; FUNDAO ARAUCRIA Palavras-chaves: Bayesian inference, bee breeding, heritability, MTGSAM, queen rearing
458
PERFIS DE HIDROCARBONETOS CUTICULARES DA ABELHA Apis mellifera E SUA RELAO COM O EIXO IDADE-FUNO
Carlos H. Lobo*, Michelle Manfrini, Rogrio A. Pereira, Marcela A. B. Lauri, Luis Aguiar, Zil L. P. Simes, Jrgen Heinze, Klaus Hartfelder4 Dept. de Gentica da FMRP/USP; Dept. de Entomologia da FFCLRP/USP; Universidade Regensburg/Alemanha; 4 Dept. de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patognicos da FMRP/USP Av. Bandeirantes, 3900, Monte Alegre - Ribeiro Preto - SP - Brasil chlobo@rge.fmrp.usp.br Em sistemas complexos como colnias de insetos sociais essencial a comunicao entre indivduos para garantir uma maior eficincia na diviso de trabalhos, e neste contexto, a comunicao olfativa por feromnios e substncias volteis em geral constitui um elemento fundamental da coeso. Hidrocarbonetos compem a maior parte das substncias volteis. Estes podem ser encontrados na cutcula de praticamente todos os insetos. Alm de sua funo primaria de funcionar como uma barreira a perda de gua, hidrocarbonetos cuticulares tambm esto envolvidos em comunicao semioqumica em insetos. Alm dos hidrocarbonetos cuticulares, secrees de glndulas ceflicas s exercem papel fundamental na comunicao entre os indivduos da colmia. O objetivo deste trabalho estudar as associaes entre as mudanas de funo da glndula hipofarngea com os respectivos perfis de hidrocarbonetos. Para tal montou-se uma colnia Single-cohort com aproximadamente 3000 abelhas recm-emergidas. Para o estudo dos hidrocarbonetos ceflicos as amostras coletadas em Ribeiro Preto foram analisadas em cooperao com o grupo da Universidade de Regensburg, Alemanha. Os testes incluram um total de 25 amostras. As anlises foram feitas com a tcnica de cromatografia gasosa e os resultados analisados com o programa Statistica 6.0. Para as anlises estatsticas 29 picos de hidrocarbonetos foram escolhidos. Os resultados mostraram que em sua maioria os hidrocarbonetos so alcanos e alquenos. A primeira vista pode-se observar uma tendncia de separao apenas para as abelhas forrageiras novas em comparao aos demais grupos. Apoio: Fapesp; Capes Palavras-chaves: Hidrocarbonetos Cuticulares, Apis mellifera, Idade-funo, glndula hipofarngea, operrias
459
FORRAGEAMENTO E POTENCIAL POLINIZADOR DE Scaptotrigona bipunctata (MELIPONINI) EM INFLORESCNCIAS DE Cupania vernalis (SAPINDACEAE) EM TRS COROAS, RS, BRASIL
Daniela Loose Ferreira*, Annelise de Souza Rosa, Irving Bolzan, Diego Kwecko Lima, Betina Blochtein Faculdade de Biocincias da Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul Av. Ipiranga 6681, Porto Alegre, RS daniloose@gmail.com Cupania vernalis, conhecida como camboat-vermelho, freqente em formaes florestais distribudas desde Minas Gerais at o Rio Grande do Sul. indicada na recuperao de reas degradadas e suas rvores exibem abundantes floradas melitfilas. Estudos preliminares no Rio Grande do Sul indicam que Scaptotrigona bipunctata um dos principais visitantes de suas flores. Nesse contexto, considerando-se a importncia da polinizao no sucesso reprodutivo das plantas, questiona-se a efetividade polinizadora deste inseto antfilo. O estudo foi conduzido em fragmento florestal em Trs Coroas, RS, Brasil. Observou-se o comportamento de S. bipunctata durante 325 visitas a flores de C. vernalis no perodo de 25 a 27/04/2008, entre 9h e 15:30h. Em cada observao registraramse: (1) recursos coletados, (2) contato com anteras e estigmas, (3) nmero de flores visitadas/ramo e o (4) tempo de permanncia nas flores. A (5) fidelidade C. vernalis foi verificada a partir de 30 indivduos coletados nas flores. Suas cargas polnicas foram retiradas das corbculas e analisadas com microscpio ptico calculando-se o percentual de plen da planta-alvo. (1) Durante as visitas as abelhas coletavam nctar ativamente e tocavam anteras, assim o plen era obtido passivamente. (2) Invariavelmente tocavam os estigmas. (3) As abelhas visitaram 1-16 flores/ramo (o= 2) e o (4) tempo de permanncia/flor variou de 1-25s (o= 5). (5) As cargas polnicas das abelhas continham 99,% de plen de camboat. O transporte de plen da planta-alvo, o contato com os estigmas, a visita consecutiva (de curta permanncia) s flores e o elevado ndice de polens de camboat aderidos s abelhas indicam sua elevada ao polinizadora. Sugere-se a execuo de testes de polinizao para verificar a contribuio de S. bipunctata, bem como de outros insetos, na produtividade de frutos e sementes de C. vernalis. Apoio: Capes, CNPq Palavras-chaves: abelha sem ferro, camboat-vermelho, polinizao, espcie melitfila, Mata Atlntica
460
LEVANTAMENTO DE ABELHAS E ATUAO NA POLINIZAO DE ESPCIES VEGETAIS EM REMANESCENTE DE CERRADO, CAMPO GRANDE, MS
Jennifer Elaine Maier*, Mrcia Rocha Vicente, Renato Gatti Fernades, Paulo Alexandre Bogiani, Maria Rosngela Sigrist Laboratrio de Botnica, Departamento de Biologia/CCBS UFMS Cidade Universitria s/n, 79070-900 Campo Grande, MS, Brasil jemaier@gmx.net As abelhas so reconhecidas como o mais importante grupo de polinizadores dos ecossistemas tropicais e da flora brasileira, mas geralmente sua atuao na polinizao de plantas nativas e cultivadas ignorada, subestimada ou desconhecida. Neste estudo foi realizado o levantamento de abelhas em flores de espcies de remanescente de cerrado da Universidade de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, de agosto/2007 a maro/2008, com intuito de verificar o potencial polinizador destes insetos. Foram coletados 444 indivduos de abelhas, distribudos em 12 gneros e 23 espcies (quatro indeterminadas) pertencentes s famlias Apidae (12 spp., 408 indivduos) e Halictidae (7 spp., 30). As abelhas foram coletadas ao longo de todo o perodo de estudo, principalmente de outubro a dezembro, e durante todo o dia, com pico entre 08h00-10h00 e 14h00-15h00. Paratrigona lineata foi a espcie mais abundante (144), seguida de Apis mellifera (137) e Trigona spinipes (52). Paratrigona lineatae T. spinipes tambm visitaram maior nmero de espcies floridas (7 e 9 spp., respectivamente). O levantamento das abelhas foi realizado em 59 espcies vegetais, pertencentes a 18 famlias, das quais foram amostradas espcies de nove famlias, destacando-se Malpighiaceae com sete espcies amostradas. Byrsonima intermedia e Matayba cf. guianensis destacaram-se pela riqueza e abundncia de abelhas coletadas nas flores (14 spp./158 exemplares e 11 spp./203, respectivamente). Durante as visitas, as abelhas coletaram plen (22 spp.), leo (13 spp.) e/ou nctar (10 spp.). A maioria das abelhas age com potencial polinizador das espcies vegetais amostradas, embora pelo menos 50% das abelhas possam tambm atuar como pilhador de algum tipo de recurso floral. Apoio: FUNDECT, CNPq Palavras-chaves: Apoidea, polinizao, pilhagem, recurso floral, Malpighiaceae
461
ABELHAS VISITANTES DE Davilla kunthii (DILLENIACEAE) NA AMAZNIA CENTRAL, ASPECTOS ECOLGICOS E COMPORTAMENTAIS
Andr Rodrigo Rech *, Maria Lucia Absy , Fatima Cristina Manente Balestieri , Jos Benedito Perrella Balestieri , Carlos DÀpolito Junior * Ps-graduao em Botnica, Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia; Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia, INPA; Faculdade de Ciencias Biolgicas e Ambientais, FCBA-UFGD Rua 2, casa 29, Apto 03, Bairro Aleixo, Conjunto Vilar Camara, cep 69083-360 arech2003@yahoo.com.br Neste trabalho estudou-se a estrutura da comunidade de visitantes florais de Davilla kunthii A. St. Hil (DILLENIACEAE) em seu perodo de florao na regio de Itacoatiara,AM. As observaes foram realizadas durante o perodo de 05 a 17.08.07, das 6:00 s 12:00 horas. Foram realizadas coletas por vinte minutos a cada hora e as abelhas separadas para estudo de freqncia, abundncia, riqueza e constncia. Registrou-se 43 espcies de abelhas coletando plen em D. kunthii. De acordo com mtodo estabelecido por Bdenheimer, nenhuma espcie foi considerada constante, seis foram classificadas como acessrias e as demais como acidentais. Concomitante florao de D. kunthii ocorreram outras 22 espcies, o que pode estar relacionado alta riqueza de espcies visitantes com baixa freqncia nas flores. O horrio de maior forrageamento ocorreu entre 8 e 11 horas. O gnero Trigona spp. foi o mais abundante e freqente, apresentando o comportamento monopolizador da fonte alimentar, como tambm observado em Camargoia camargoi Moure, 1989, ambas interagiram agonisticamente com Melipona marginata Lepeletier, 1836 e com as abelhas menores, perseguindoas e fazendo com que se mantivessem afastadas. Nas flores ocorreram formigas que predavam abelhas em forrageamento, causando o afastamento das abelhas que as avistavam. Melipona marginata comeou a forragear antes da deiscncia das anteras, apresentando ento comportamento mordedor para retirada de plen. No incio da manh percebeu-se que as abelhas maiores forrageavam nas plantas de D. kunthii localizadas sobre o dossel, vindo a forragear abaixo de 3 metros entre nove e dez horas, o que provavelmente esteja relacionado diminuio da competio com as outras espcies que a forrageavam at este horrio, destacando, dentre essas Trigona spp., cujo forrageamento concentrou-se nos primeiros horrios da manh. Apoio: Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia Palavras-chaves: polinizao, inseto-planta, interaes, estrutura, comunidade
462
ABELHAS E VESPAS COMO POLINIZADORES DE Ipomoea pescaprae (CONVOLVULACEAE)

Eliana de Medeiros Oliveira*, Anne Zillikens, Josefina Steiner Laboratrio de Abelhas Nativas, Centro de Cincias Biolgicas, UFSC; Med.-Naturwissenschaftliches-Forschungszentrum, Universitt Tbingen, Germany Predio Fritz Mller - Bloco B - Campus Universitrio UFSC, Trindade, 88.040-900 Florianpolis SC, Brasil eli_sin80@yahoo.com.br Ipomoea pes-caprae uma planta rastejante que coloniza a duna frontal na Restinga e atua como fixadora de areia. A espcie autoincompatvel, e suas flores dependem das visitas dos insetos para a polinizao. O objetivo deste estudo foi conhecer o espectro de abelhas e vespas visitantes florais para estabelecer os possveis polinizadores de I. pes-caprae. Entre dezembro/2006 e maro/2007, semanalmente 3 a 4 flores foram observadas durante toda antese. Foram registradas a freqncia, o horrio e o comportamento dos visitantes. Em 2-3 individuos por espcie o plen aderido aos corpos das abelhas e vespas foi analisado a fim de verificar se elas transportavam plen de I. pes-caprae. Quinze espcies de abelhas e 3 de vespas foram registradas. Apis mellifera, Melitoma segmentaria, Augochlora sp. e Pseudagapostemon hurdi coletaram plen e nctar, as outras espcies coletaram s nctar. As abelhas que coletaram principalmente plen visitaram as flores com maior freqncia entre 6 e 8 h. Visitantes que s buscavam nctar como as vespas e a abelha cleptoparasita Mesonychium littoreum, mostraram maior atividade entre 8 e 12 h. Apis mellifera, Melitoma segmentaria, Centris leprieuri, Bombus morio e a vespa Campsomeris cf hesteriae (Scoliidae) foram considerados os polinizadores devido alta freqncia de contato com as estruturas reprodutivas da flor, presena de plen de I. pes-caprae no corpo e ao comportamento de vo tipo trap-lining visitando muitas flores co-especficas. Apoio: CNPq e BMBF. Palavras-chaves: Ipomoea pes-caprae, visitantes florais, polinizadores
463
DB EXPERTS - BANCO DE DADOS DE ESPECIALISTAS EM ESPCIES POLINIZADORAS

Diogo Borges Krobath, Prof. Dr. Antonio Mauro Saraiva , Prof. Dr. Pedro Luiz Pizzigatti Correa , Etienne Amrico Cartolano Jnior, Elizabeth Sellers Escola Politcnica da Universidade de So Paulo, National Biological Information Infrastructure Laboratrio de Automao Agrcola - Escola Politcnica da USP. Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, n 158, sala C2-56. Edifcio de Engenharia Eltrica Cidade Universitria - So Paulo SP. CEP 05508-900. Fone: (11) 3091-5366 Fax: (11) 3091-5294 diogo.krobath@usp.br Um dos componentes da Rede Temtica de Polinizadores (PTN), projeto que faz parte da Rede Inter-Americana de Informaes sobre Biodiversidade (IABIN), um Banco de Dados de Especialistas em Espcies Polinizadoras. Trata-se de uma ferramenta que apresenta essencialmente funcionalidades para consulta e insero de dados relacionados a especialistas em polinizadores e polinizao. Possui como objetivos suprir necessidades de consulta e armazenamento de informaes sobre especialistas para a comunidade cientfica e para a sociedade em geral, atravs de interfaces de fcil acesso via Web. Este sistema fornece condies ao especialista de modificar quando conveniente as suas informaes pessoais, indicar quais so as suas reas de especialidade, tanto em relao a regies geogrficas quanto a grupos taxonmicos, entre outros dados. Essas informaes digitalizadas pelos especialistas so automaticamente disponibilizadas para consulta. O sistema de busca funciona utilizando critrios definidos com relao s necessidades dos prprios usurios de acesso ao sistema. Tais critrios refinam a quantidade dos registros de especialistas mostrados pela pgina de resultados da busca, apresentam a possibilidade de escolha de parmetros de consulta como regio de localidade e especialidade do especialista, seleo de nomes cientficos de especialidade, busca por nome ou trechos do mesmo, entre outros. A manuteno do sistema realizada atravs de usurios administradores. Estes so os nicos que possuem permisses para adicionar especialistas e outros usurios. Utilizou-se para o desenvolvimento desta ferramenta a linguagem de programao PHP, o banco de dados MySQL e o webserver Apache. O banco pode ser acessado no portal da IABIN-PTN (iabinptn. pcs.usp.br) ou a partir da pgina web do projeto IABIN-PTN em pollinators.iabin.net. Apoio: Inter-American Biodiversity Information Network IABIN, FAPESP Projeto BioAbelha. Palavras-chaves: Polinizadores, Especialistas, Biodiversidade, Banco de Dados, Polinizao
464
COMPORTAMENTO DE VISITA DE ABELHAS SILVESTRES EM FLORES DE BERINJELA (Solanum melongena L.)

Elizandra Goldoni Gomig*, Maria Jos de Oliveira Campos Universidade Estadual Paulista (UNESP) - Campus Rio Claro/SP Av.24A, 1515 Bela Vista, 13506-900 Rio Claro-SP, Brasil eligomig@yahoo.com.br A agricultura apresentou mudanas profundas nas ltimas dcadas, afetando os habitats de plantas no agrcolas e de insetos a elas associados, necessitando atualmente de pesquisas sobre a biologia da polinizao de alguns cultivos comerciais. O objetivo do estudo foi caracterizar a fauna de abelhas associada s flores de berinjela quanto composio, freqncia de visitao e comportamento nas flores. As observaes foram realizadas em uma propriedade no Municpio de Rio Claro SP, utilizando canteiros de berinjela do cultivar Npoli, nos meses de maro, abril, junho e julho de 2006. Foi feito o reconhecimento da fauna de abelhas visitante, identificao da freqncia de visitas e descrio do comportamento dessas espcies nas flores de berinjela. A tribo mais representativa em nmero de visitas s flores de berinjela foi a Exomalopsini, seguida da tribo Augoclorini, Xylocopini, Centridini e Bombini. Para as tribos Xylocopini, Centridini e as espcies do gnero Exomalopsis o pico de visita nas flores de berinjela foi no intervalo das 9:00 as 11:00 horas. A tribo Apini, representada pela espcie Apis mellifera, visitou as flores no perodo das 9:00h as 13:00h. As abelhas do gnero Bombus e das Tribos Xylocopini e Centridini, ambas com tamanho de corpo mdio a grande, tiveram o comportamento vibrtil de coleta do plen, com o envolvimento da extremidade do cone de anteras e do estigma pelo corpo do inseto. As abelhas da famlia Halictidae, com corpo menor, frequentemente vibravam as anteras individualmente. Apoio: UNESP Palavras-chaves: abelha silvestre, conservao, berinjela
465
BEE-VISITING FAUNA OF NASTURTIUM (Tropaeolum majus)

Carlos DÀpolito Jnior , Andr Rodrigo Rech*, Alcides Moraes Neto, Fatima Cristina de Lazari Manente Balestieri, Jos Benedito Perrella Balestieri Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia; Universidade Federal da Grande Dourados Laboratrio de Palinologia. Av. Andr Arajo, 2936, Aleixo, CEP 69060-001, Manaus - AM arech2003@yahoo.com.br The fauna of bees visiting flowers of Nasturtium (Tropaeolum majus) was surveyed in Dourados, MS during the months of August, September and October from 2005 to 2007. The study site was the medicinal plants garden of the Universidade Federal da Grande Dourados where T. majus has been raised for pharmaceutical purposes among many other cultivars. Insects which landed on flowers were collected (nest-sweeping method) identified and then behavioral aspects such as resource choose, visits period and relationships observed (only the bee fauna is presented here). The honey bee Apis mellifera and the stingless native bee Trigona spinipes were the most abundant and frequent visitors and also indicate a probable pollination relation as they both may contact anthers and stigmas when gathering pollen. Moreover, Halictidae bees and Exomalopsis (Exomalopsis) sp. were frequently observed harvesting pollen but due to their non compatible sizes stigmas were not contacted. Followed the frequency sequence Oxaea flavescencs, this bee appeared always as primary robber, most of the time early in the morning. T. spinipes was a primary robber and interacted agonistically with A. mellifera keeping it away but still it was seen as a secondary robber. Rare bees were Geotrigona mombuca, Centris spp., Xylocopa spp. and a Megachilidae, all registered only once. Apoio: Laboratrio de Abelhas Nativas UFGD-MS Palavras-chaves: Bees, Visitors, Nasturtium, interaction, pollination
466
A DEPENDNCIA MTUA ENTRE Cordia leucocephala (CORDIACEAE) E Ceblurgus longipalpis (ROPHITINAE: HALICTIDAE)
Paulo Milet-Pinheiro*, Clemens Schlindwein Departamento de Botnica, Universidade Federal de Pernambuco Av. Prof. Moraes Rego, s/n, 50670-901 Recife, PE - Brasil miletpinheiro@hotmail.com A planta distlica Cordia leucocephala e a abelha Ceblurgus longipalpis so endmicas da Caatinga e apresentam uma estreita relao. Nesse estudo procuramos entender a ecologia da polinizao de Cordia leucocephala e perguntamos: 1) quais caracteres divergem entre os tipos florais brevi e longistila? 2) Quais so seus polinizadores efetivos? 3) Ceblurgus longipalpis possui aparatos morfocomportamentais especiais para a coleta de plen? e 4) Os parceiros so inter-dependentes? O estudo foi conduzido na Fazenda Gentio, municpio de Pedra. A antese foi acompanhada em 50 flores previamente ensacadas da abertura at a absciso. O sistema reprodutivo da espcie foi determinado a partir dos experimentos usuais de polinizao. Os visitantes florais foram coletados e os polinizadores efetivos determinados a partir da freqncia, comportamento e anlise de fidelidade. Cordia leucocephala uma espcie xenogmica inter-morfa e suas flores brevi e longistila divergem em caracteres como nmero, tamanho e ornamentao dos gros de plen, tamanho do pistilo e dos lbulos estigmticos e quantidade de nctar por flor. Apesar de brancas e vistosas, suas flores tubulares produzem pouco nctar e de difcil acesso. Machos e fmeas de Ceblurgus longipalpis so os nicos visitantes e polinizadores de Cordia leucocephala, enquanto as flores dessa planta so as nicas fontes de plen utilizadas por estas abelhas. Ceblurgus longipalpis apresenta adaptaes morfo-comportamentais nicas e adequadas para a explorao dos recursos florais como tamanho do corpo, glossa longa e pilosa e pilosidade no clpeo e o grande nmero de frutos formados naturalmente mostra a efetividade dessas abelhas como polinizadores. Os machos ainda utilizaram as flores como stio de acasalamento e dormitrio. Ceblurgus longipalpis monoltica em flores de Cordia leucocephala o que significa que coleta plen exclusivamente em suas flores. O estudo mostra que existe uma dependncia reprodutiva mtua entre a planta e a abelha. Apoio: CNPq-Universal, UFPE Palavras-chaves: Abelhas solitrias, Caatinga, Heterostilia, Oligoletia, Polinizao
467
AGENTES POLINIZADORES NA CULTURA DE ABBORA CAIPIRA

Guilherme dos Reis Vasconcelos*, Andr Luiz Halak, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Darclet Teresinha Malerbo-Souza Centro Universitrio Moura Lacerda Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510 Ribeiro Preto, Brasil grvascon@yahoo.com.br Os objetivos deste trabalho foram estudar a biodiversidade de polinizadores em uma cultura de abbora caipira (Cucurbita mixta), em 2007, quanto aos insetos visitantes nas flores masculinas e femininas, o tipo de coleta desses insetos e seu comportamento forrageiro, em Ribeiro Preto, SP. A atratividade das flores masculinas com relao s femininas foi avaliada durante a observao da freqncia das visitaes ao longo do dia. A freqncia das visitaes dos insetos e o tipo de coleta efetuado nas flores (nctar e/ou plen), no decorrer do dia, foram obtidos por meio de contagem, nos primeiros 10 minutos de cada horrio (das 7h00 s 18h00), percorrendo, aleatoriamente, o local do experimento, com quatro repeties, anotando-se os insetos presentes nas flores e o que eles estavam coletando.O comportamento forrageiro de cada espcie de inseto foi avaliado atravs de observaes visuais, no decorrer do dia, durante todo o perodo experimental. Observou-se que as flores se abrem s 6h00, permanecendo abertas at por volta das 12h00, quando murcham, no se abrindo mais. A partir das 13h00, as flores femininas comeam a fechar gradativamente e logo aps as masculinas fecham tambm, reduzindo a atividade dos agentes polinizadores. O inseto mais freqente nas flores da aboboreira foi abelha africanizada Apis mellifera (79,25%) seguida da abelha Trigona spinipes (irapu) (20,75%). Foram observadas visitas espordicas de dpteros, uma espcie de abelha nativa da famlia Halictidae, vespas e besouro Diabrotica speciosa (brasileirinho). A abelha A. mellifera visitou as flores das 7h00 s 12h00 e preferiu coletar nctar nas flores masculinas (36,9%), quando comparado a plen nas flores masculinas (33,9%) e nctar nas flores femininas (29,2%). Pelo seu comportamento e constncia a abelha A. mellifera foi considerada agente polinizador da cultura. Apoio: Centro Universitrio Moura Lacerda Palavras-chaves: Polinizao, insetos, abelhas, abbora caipira, Cucurbita mixta
468
AGENTES POLINIZADORES E PRODUO DE SEMENTES EM CULTURA DE GIRASSOL

Guilherme dos Reis Vasconcelos*, Andr Luiz Halak, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Darclet Teresinha Malerbo-Souza *Centro Universitrio Moura Lacerda Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510 Ribeiro Preto, Brasil grvascon@yahoo.com.br O objetivo do presente estudo foi identificar os insetos visitantes nos captulos do girassol (Helianthus annuus L.), em Ribeiro Preto, SP. Para isso, foram realizadas contagens dos insetos presentes nos captulos, nos primeiros 10 minutos de cada horrio, das 7h00 s 18h00, com trs repeties, em dias distintos, em maro de 2007. Observou-se que os insetos mais freqentes nos captulos do girassol foram Apis mellifera (82,06%) seguida de Tetragonisca angustula (7,92%) e Trigona spinipes (4,22%). As abelhas A. mellifera visitaram as flores das 7h00 s 18h00, sendo mais freqentes entre 8h00 e 10h00. Essas abelhas foram observadas coletando nctar e plen, nessas flores. As abelhas T. angustula foram observadas nos captulos das 8h00 s 15h00, apresentando vrios picos de freqncia, no decorrer do dia. Essa abelha coletou apenas plen nos captulos do girassol. Com a presena dos insetos, a produo de sementes (aqunios) foi 26,56% maior comparado aos captulos onde foi impedida a visita dos insetos. Pelo comportamento e constncia, a abelha A. mellifera foi considerada agente polinizador da cultura. Apoio: Centro Universitario Moura Lacerda Palavras-chaves: Polinizao, insetos, abelhas, girassol, Helianthus annuus
469
COMPORTAMENTO DE FORRAGEAMENTO DE ABELHAS EM FLORES DE Gossypium barbadense (MALVACEAE) NO DISTRITO FEDERAL BRASIL
Viviane Cardoso Pires*, Aline Costa Botelho, Glauce Cristina P. C. Gonalves, Pablo Bernardo C. das Chagas, Fernando A. Silveira,Edison R. Sujii, Eliana Fontes, Carmem S. S. Pires Ps-graduao Ecologia Conservao e Manejo da Visa Silvestre ICB/UFMG; Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia Rua Cana Verde, n 261 Apto 201 Jaragu, Belo Horizonte Minas Gerais vica_natmel@yahoo.com.br A espcie Gossypium barbadense um algodoeiro silvestre amplamente distribudo pelo Brasil. O objetivo do presente trabalho analisar o comportamento de diferentes espcies de abelhas nas flores de G. barbadense, indicando seus provveis polinizadores. Esses dados serviro para subsidiar as anlises de risco de fluxo gnico dos algodoeiros geneticamente modificados para G. barbadense. Os dados foram coletados em 16 plantas localizadas em cinco propriedades rurais entre fevereiro e abril de 2008. Foram observados o local de chegada e sada das abelhas (corola ou estruturas reprodutivas), o recurso coletado (nctar ou plen), se os indivduos tocavam as anteras e o estigma e se saam com plen no corpo. Sempre que possvel o tempo de visita era cronometrado e registrado. Ao final das observaes as abelhas foram coletadas para identificao taxonmica. Foram observadas, at o momento, nove espcies de abelhas distribudas entre as famlias Apidae (6 espcies, 29 indivduos), Halictidae (2 espcies, 20 indivduos) e Andrenidae (1 espcie, 2 indivduos). As espcies mais freqentes foram Melissodes cfr. nigroaenea e Augochlora cfr. thalia, com 28% de freqncia cada. Ambas tocaram estigma e antera durante o forrageamento, o que favorece a polinizao. As demais espcies observadas foram: Melitoma segmentaria (14%); Augochlora cfr. dolichocephala (12%); Ceratina (Crewella) sp. (8%); Rhophitulus sp (4%); Paratrigona lineata(2%), Ptilothrix plumata(2%); e Apis mellifera(2%). Observaes adicionais e experimentos de primeira visita esto sendo realizados para verificao da eficincia dessas abelhas como polinizadoras de G. barbadense. Essas informaes sero teis para proposio de medidas de manejo do fluxo de plen entre os algodoeiros cultivados e os silvestres. Apoio: CNPq; Finep Palavras-chaves: algodoeiro silvestre, polinizao, Melissodes cfr. nigroaenea, Augochlora cfr. thalia
470
VISITANTES FLORAIS DE Couepia uiti (MART. & ZUCC.) BENTH. EX HOOK. F. (CHRYSOBALANACEAE), NO PANTANAL DO MIRANDA-ABOBRAL, MATO GROSSO DO SUL, BRASIL
Samuel Boff, Morgana Sazan*, Andra Cardoso Arajo, Arnildo Pott *Departamento de Biologia, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Cidade Universitria 549, 79070-900 Campo Grande, MS - Brasil mssazan@gmail.com Os visitantes florais de Couepia uiti (Mart. & Zucc.) Benth. ex Hook. F. (Chrysobalanaceae) foram estudados na sub-regio pantaneira do Miranda-Abobral, Mato Grosso do Sul. Abelhas da espcie Centris spilopoda Moure foram responsveis por 74,8% do total de 1122 visitas observadas, tendo sido consideradas as principais polinizadoras das flores de C. uiti devido alta freqncia de visitas nas flores bem como ao seu comportamento de visita. Outros visitantes freqentes foram Epicharis xanthogastra Moure e Seabra, Apis mellifera L. e Nannotrigona aff melanocera Schwarz. Abelhas do gnero Xylocopa sp. e Bombus sp., apesar de menos freqentes tambm so polinizadores efetivos de C. uitidevido ao seu grande porte e ao comportamento de visitas em linhas de captura, que maximiza as chances de polinizao cruzada para esta espcie auto-incompatvel. Centris spilopoda realizou em mdia 83 visitas s flores de C. uiti em intervalos de 10 minutos a cada hora, ao passo que para os demais visitantes, foram registradas em mdia apenas 23,2 visitas. Assim na regio de Miranda-Abobral C. uiti depende da visita de abelhas, principalmente C. spilopoda, para sua reproduo. Apoio: Fundect/CAPES, PROPP/UFMS Palavras-chaves: Abelhas, freqncia de visitas, comportamento, polinizadores, Pantanal
471
BIOLOGIA FLORAL DO URUCUZEIRO Bixa orellana CULTIVADOS NA REGIO DE CAUCAIA NO ESTADO DO CEAR
Francisca Ligia Aurelio Mesquita*,Thiago Mahlmann Vitoriano Lopes Muniz, Marcelo de Oliveira Milfont, Breno Magalhes Freitas, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo *Universidade Federal do Cear UFC Av. Mister Hull, s/n - Pici - CEP 60455-760 - Fortaleza CE, Brasil apisrainha@yahoo.com.br Neste trabalho pretendeu-se determinar a biologia floral do urucuzeiro de Bixa orellana atravs de seu perodo de florescimento, receptividade do estigma, horrio de antese, formato das flores, cor, cheiro, nmero de estames, caractersticas das anteras e maturidade sexual da flor. O perodo de florescimento da cultura foi de maro a agosto na regio de Caucaia - CE, iniciando a maturao dos frutos aps 60 dias do florescimento. Entre os meses de maio e junho, o ritmo de florescimento diminuiu, cessando por completo entre os meses de julho e agosto. A receptividade do estigma foi testada em 290 flores de urucuzeiros, sendo os horrios de maior receptividade os horrios de 09:00 h. s 12:00h. As flores de urucuzeiros apresentaram antese antes do amanhecer do dia, por volta das 4:00 h da manh, levando uma hora para completar sua abertura. A flor varia da cor rseo claro branca e apresenta odor caracterstico. O formato de todas as flores observadas do tipo actinomorfa, so pentmeras, cclicas, perfeitas, polindricas tendo em torno de 378 anteras por flor e apresentam heterostilia, sendo que em maior freqncia os estigmas encontram-se mais altos que anteras. As anteras so ditecas, amarelas e de deiscncia poricida e o estigma, que apresenta sua poro terminal alongada quando da antese, gradualmente abre-se ao meio, tornando-se uma superfcie em forma de um disco achatado, ampliando a rea de captura de gros de plen. As flores persistem por 24 horas e aps as 18:00 h, inicia-se o processo de senescncia at tornar-se totalmente murcha. Apoio: Palavras-chaves: Bixa orellana,, florescimento, receptividade, heterostilia, senecncia
472
VISITANTES FLORAIS DO BAMBURRAL (Hyptis suaveolens) E POTENCIAIS POLINIZADORES, NA CHAPADA DO APODI, MUNICPIO DE LIMOEIRO DO NORTE, ESTADO DO CEAR, NO ANO DE 2008
Jlio Otvio Portela Pereira*, Roberto Henrique Dias da Silva,Trsio Thiago Lopes Alves, Joo Paulo de Holanda Neto, Crisanto Alves de Arajo, Daniel Santiago Pereira
Instituto Centro de Ensino Tecnolgico CENTEC; Secretaria do Desenvolvimento Agrrio do Estado do Cear; Universidade Federal Rural do Semi-rido Av. Dr. Guarany 317 Cidao, Sobral, Cear. CEP 62.040-730 pereirajop@yahoo.com.br
O Bamburral (Hyptis suaveolens) trata-se de uma erva fortemente aromtica com 1,5 m de altura, ramos de seco quadrangular. As folhas so ovaladas com 3-5 cm de comprimento e 2-4 cm de largura apresentando margem serreada. A superfcie inferior lmina foliar densamente pilosa. As flores encontram-se em densos captulos globosos, axilares, pedunculadas, distribudas nas pontas dos ramos, estes com poucas ou pequenas folhas. O clice apresenta-se com 5mm de tamanho na florao e 10mm na frutificao. A corola azulada. Na poca de sua florada, diversos visitantes florais podem ser observados, sendo esta reconhecida como de importncia apcola. Neste sentido, foi conduzido um trabalho sobre seus visitantes florais e potenciais polinizadores, na rea experimental do Instituto CENTEC, no municpio de Limoeiro do Norte, estado do Cear (S 5o1101,0/O 38o0042,2), durante o ms de maio de 2008. Foram realizadas coletas de toda a entomofauna presente, e com comportamento de potencial polinizador, durante todo o dia, das 4 s 18 horas. Nessa florada, foram coletados diversos insetos distribudos da seguinte forma: 7,7% de Hemipteras, 23,1% de Dipteras (2 espcies de Syrphidae), 7,7% de Coleoptera (Bombiliidae), 30,8% de Hymenoptera (Chalcidoidea), machos e fmeas de Anthidium sp., Anthidiini, e Protomeliturga sp. e 30,8% de Lepdoptera (4 espcies). Devido maior freqncia nas coletas, e comportamento peculiar, sugere-se que as abelhas Anthidium sp. sejam consideradas a priori os principais polinizadores do bamburral. Apoio: CENTEC, SDA-CE, Curso Internacional em Ecologia da Polinizao 2008 Palavras-chaves: Anthidium sp., bamburral, anlise faunstica, polinizao, visitantes florais
473
VISITANTES FLORAIS EM CULTURA DE MANGA (Mangifera indica)

Andr Luiz Halak*, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos
*Graduando em Agronomia do Centro Universitrio Moura Lacerda; Centro Universitrio Moura Lacerda Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510 Ribeiro Preto, Brasil andrehalak@yahoo.com.br O presente experimento foi conduzido no campus do Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto, SP, em 2007, para estudar a freqncia, tipo de coleta (nctar e/ou plen) e o comportamento dos insetos visitantes nas flores da mangueira (Mangifera indica) e seu efeito na produo de frutos. A freqncia dos insetos nas flores foi obtida anotando-se os insetos presentes nas flores, durante os primeiros 10 minutos em cada horrio, das 7h00 s 18h00, com quatro repeties, e o tipo de coleta efetuado por esses insetos (nctar e/ou plen). O teste de polinizao foi realizado utilizando-se dois tratamentos: inflorescncias cobertas para impedir a visita dos insetos e inflorescncias descobertas (controle) onde foi permitida a visita dos insetos. Os insetos observados visitando as inflorescncias da mangueira foram mosca das frutas (33,9%), seguida pela abelha Tetragonisca angustula (jata) 26,1%, Diabrotica speciosa (brasileirinho) 15,6%, Musca sp. (mosca domstica) 13,2%, formigas (6,8%) e a abelha africanizada Apis mellifera (4,4%). Os frutos do tratamento descoberto apresentaram uma porcentagem de frutificao maior comparado ao tratamento coberto. Apoio: FAPESP (06/58046-2) Palavras-chaves: Polinizao, insetos, abelhas, Mangifera indica, manga
474
VISITANTES FLORAIS DE Butia capitata (MART.) BECC. EM ARAMBAR, RIO GRANDE DO SUL
Juliana Stephanie Galaschi Teixeira *, Sidia Witter, Letcia Azambuja Lopes, Bruno Brito Lisboa, Gilson Schlindwein, Adilson Tonietto Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul, Faculdade de Biocincias, Laboratrio de Entomologia - Ecologia de Abelhas Fundao Estadual de Pesquisa Agropecuria, RS. 3 Universidade de So Paulo, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ri Avenida Ipiranga 6681, 90619-900, Porto Alegre/RS, Brasil julianagalaschi@gmail.com Butia capitata uma palmeira nativa, encontrada em reas abertas de cerrados e solos arenosos. um recurso natural com grande potencial de explorao econmica de forma sustentvel. A polinizao preferencialmente entomfila. As inflorescncias so visitadas por uma grande diversidade de insetos, porm as abelhas nativas so consideradas o mais importante grupo de polinizadores. Esse estudo tem por objetivo conhecer a diversidade de visitantes florais a fim de identificar potenciais polinizadores de butiazeiro. O trabalho foi conduzido em rea de aproximadamente 400ha de butiazais naturais em Arambar/RS. Os insetos foram coletados diretamente nas flores em rea de 25X100m com 72 plantas, durante o perodo de florao entre dezembro de 2007 a fevereiro de 2008. As amostragens foram realizadas em perodos de 30 min a cada hora, entre 9h e 14h totalizando 26 horas de coleta. Dentre os 204 indivduos coletados, Hymenoptera foi a ordem com maior abundncia (87,2%), seguida por Diptera (10,3%), Coleoptera (1,5%) e Hemiptera (1%). Entretanto, as abelhas (Apoidea) constituem o grupo mais representativo, totalizando 116 indivduos, distribudos nas famlias Apidae (87,9%), Halictidae (7,8%) e Megachilidae (4,3%). Espcies de Halictidae foram consideradas principais polinizadores de B. capitata na rea de restinga em Santa Catarina. No entanto em rea de restinga no Rio Grande do Sul os resultados mostram que a maior freqncia de Apis mellifera nas coletas (n=98) indica que a mesma tambm seja potencial polinizador de flores de butiazeiro. Sugere-se a investigao de outros fatores para a avaliao da eficincia dessas abelhas, como fidelidade e freqncia de visitas s flores e seu impacto na produo de frutos. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Butia capitata, visitantes florais, abelhas, restinga, polinizao
475
PRODUO DE FRUTOS EM CULTIVOS DE MELO (Cucumis melo) EM FUNO DA DISTNCIA DE INSTALAO DAS COLMEIAS
Jos Hugo de Oliveira Filho, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo Universidade Federal do Tocantins - UFT; Faculdade de Tecnologia Centec Serto Central Instituto Centec; Emater-CE / Secretaria de Desenvolvimento Agrrio Br 153 Km 112 Cx postal 132. Zona rural Araguaina, Tocantins Brasil Cep:77804970 jhugo@uft.edu.br A cultura do melo (Cucumis melo) apresenta-se como uma das atividades agrcolas de explorao intensiva na regio Nordeste do Brasil. A produtividade obtida um fator decisivo para tornar a atividade rentvel e possibilitar sua continuidade. Em funo do alto grau de degradao nas reas cultivadas e da necessidade de um agente polinizador bitico para polinizar as flores do meloeiro (Cucumis melo), atualmente torna-se obrigatrio a introduo de colmias com abelhas melferas (Apis mellifera) nos cultivos. A distncia das colmias em relao cultura influencia a freqncia de coletoras nas flores, bem como pode comprometer as prticas culturais, visto a defensividade das abelhas. O presente trabalho teve como objetivo estudar os nveis de freqncia de coletoras, fecundao das flores e produo de frutos em reas de cultivo aberto, polinizadas por colmias instaladas em distncias variadas: no interior do cultivo, a 50 metros e a 300 metros da cultura. Os tratamentos com introduo de colmias no interior e a 50 metros da rea cultivada apresentaram resultados semelhantes para as variveis estudadas, diferindo estatisticamente (P<0,05) do tratamento onde as colmias localizavam-se a 300 m da cultura. possvel concluir que, colmias instaladas nas proximidades dos cultivos possibilitam a introduo de polinizadores suplementares direcionados cultura, ao mesmo tempo em que contribuem para diminuir o risco com acidentes. Apoio: CNPq; UFT; INSTITUTO CENTEC; EMBRAPA/CNPAT Palavras-chaves: Polinizao, Apis mellifera, Produtividade, Cucumis melo
476
INFLUNCIA DO COMPORTAMENTO DE PASTEJO DAS ABELHAS MELFERAS Apis mellifera NA PRODUO E QUALIDADE DOS FRUTOS EM CULTIVOS DE MELO Cucumis melo
Raimundo Maciel Sousa*, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo, Breno Magalhes Freitas *Faculdade de Tecnologia Centec Serto Central- Instituto Centec; Emater-CE / Secretaria de Desenvolvimento Agrrio Avenida Geraldo Bizarria de Carvalho S/N, 638000-000 Quixeramobim, Brasil rdomaciel@centec.org.br A maior parte da produo de melo Cucumis melo tem como objetivo a exportao. Os requisitos de qualidade dificultam a expanso desse mercado. So considerados mais apropriados para o mercado externo frutos de menor tamanho. O tamanho dos frutos sofre a influncia da quantidade de frutos em desenvolvimento por planta, que est relacionada a presena de polinizadores biticos, como as abelhas, o tipo e a intensidade da atividade exercida por elas nas flores da cultura. O presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito da induo ao pastejo para coleta de plen por abelhas melferas Apis mellifera na produo e qualidade dos frutos na cultura do melo Cucumis melo. Colmeias foram introduzidas em reas de cultivo no perodo de florescimento da cultura e receberam os seguintes tratamentos: oferta de alimentao energtica, instalao de coletores de plen e testemunha. O tratamento no qual foi fornecida alimentao energtica para as abelhas obteve os melhores ndices de vingamento de frutos, a maior produo de frutos e a maior proporo de frutos tipo exportao, sendo estatisticamente superior (P<0,05) aos tratamentos com a instalao de coletores de plen e testemunha, que no diferiram entre si. Conclui-se que o estmulo coleta de plen influencia positivamente a produo e a qualidade dos frutos, sendo a oferta de alimentao energtica a tcnica mais eficiente para este objetivo. Apoio: CNPq; INSTITUTO CENTEC; UFC; EMBRAPA/CNPAT Palavras-chaves: Pastejo, Plen, Apis mellifera, Cucumis melo
477
FIDELIDADE DE Apis mellifera A FLORES DE Brassica napus (CV. HYOLA 432) NO RIO GRANDE DO SUL, BRASIL
Annelise de Souza Rosa*, Diego Kwecko Lima, Andressa Paladini, Sdia Witter, Betina Blochtein * Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul - PUCRS; Fundao Estadual de Pesquisa e Agropecuria - FEPAGRO Avenida Ipiranga, 6681, 90619-900 Porto Alegre, Brasil annesouzar@gmail.com Brassica napus L., popularmente conhecida como canola, uma planta herbcea anual de crescente interesse econmico, por seu leo servir como alimento funcional e suas sementes serem apropriadas produo de biodiesel. Embora seja considerada uma cultura auto-frtil, estudos indicam que a polinizao realizada por Apis mellifera eleva sua taxa de produtividade. Essas abelhas possuem comportamento peculiar de potenciais polinizadores dessa cultura, pois, na busca por recursos alimentares visitam poucas flores/planta, despendem pouco tempo em cada uma e tocam suas anteras e estigmas favorecendo a polinizao cruzada. Alm desses requisitos, para ser considerado efetivo polinizador de determinada espcie, fundamental que o visitante floral transporte predominantemente gros de plen da espcie-alvo. Neste contexto, objetivou-se avaliar o grau de fidelidade de A. mellifera a flores de B. napus em lavoura comercial (13ha), em Trs de Maio, RS, Brasil. Para isso, 25 operrias com plen nas corbculas foram coletadas nas flores (25/07, 01/08 e 25/08/2007), com auxlio de rede entomolgica e acondicionadas individualmente. As cargas polnicas foram retiradas e preparadas em lminas com gelatina glicerinada/fucsina. A anlise de 1000 gros de plen de cada amostra revelou que as cargas polnicas apresentaram exclusivamente plen de B. napus. A plena constncia de A. mellifera espcie-alvo pode ser justificada pela abundante oferta nctar e plen ao longo do dia. Embora floradas melitfilas, a exemplo de (Raphanus sativus L.), tenham ocorrido simultaneamente, as abelhas que forrageavam em flores de canola mantiveram-se fiis a espcie. O comportamento das abelhas nas flores e a comprovao da fidelidade de A. mellifera em flores de B. napus permitem consider-las efetivos polinizadores dessa cultura. Entretanto, o acrscimo de produtividade de gros com o uso de abelhas dever ser quantificado atravs de experimentos nas regies de cultivo comercial do Rio Grande do Sul. Apoio: Cnpq Palavras-chaves: polinizao, canola, abelhas, comportamento, constncia
478
EFICINCIA DE POLINIZAO POR BEIJA-FLORES E ABELHAS EM Aechmea lindenii (BROMELIACEAE)

Livia Leal Dorneles*, Anne Zillikens & Josefina Steiner Universidade Federal de Santa Catarina, CCB,BEG; Universidade de Tbingen, Alemanha Laboratrio de Abelhas - Prdio Fritz Muller, Dept. de BEG/ CCB, UFSC, 88.040-900 Florianpolis, SC d_livia@hotmail.com A maioria das bromeliceas conhecida por apresentar sndrome de polinizao ornitfila, entretanto raras vezes essa ornitofilia foi comprovada atravs de testes. Este trabalho objetiva testar a eficincia de polinizao por beija-flores e abelhas em uma bromlia endmica de Santa Catarina, Aechmea lindenii. Os testes foram realizados em reas de Floresta Atlntica secundria na Ilha de Santa Catarina entre agosto e novembro de 2005. Controlou-se o tipo de visitante e o nmero de visitas por flor de maneira que para cada espcie de visitante floral foram permitidas apenas uma, cinco ou dez visitas at conseguir 8 flores para cada classe de visitao controlada. Antes e depois dos testes as flores foram cobertas com fil. Os frutos maduros foram abertos e as sementes contadas. O nmero de sementes produzidas variou de zero a 285. O beija-flor Thalurania glaucopis foi o polinizador mais eficiente, com um mdia de 176.75 sementes formadas aps uma visita, seguido pela abelha Bombus morio com 64.37 e Xylocopa brasilianorum com 23 sementes. A produo de sementes aps visitas pelas abelhas Euglossa annectans e Plebeia droryana foi baixa, independente da quantidade de visitas. Os resultados mostraram que algumas abelhas so capazes de polinizar as flores de A. lindenii, apesar de o beija-flor ser o melhor polinizador desta espcie de bromlia. Essas aves so conhecidas por serem as polinizadoras de muitas espcies de bromeliceas. A oferta de nctar por A. lindenii durante todo o dia provm aos visitantes recursos constantes, reforando o aprendizado da posio da planta, o que favorece o comportamento do tipo trap-line, observado no beija-flor, em Bombus, Xylocopa e Euglossa. As abelhas grandes contactavam as partes reprodutivas em todas as visitas, enquanto Euglossa s as contactava ao coletar plen. Operrias de P. droryana agiram como pilhadoras de plen em todas as visitas, permanecendo sobre a mesma inflorescncia at encher as corbculas. Esses dados relatam polinizao mista para esta espcie, efetuada por beija-flores e abelhas, o que significa que existe redundncia neste servio ambiental. Mesmo que algumas abelhas tenham baixas taxas de sementes/visita, suas altas freqncias de visitao comparadas ao beija-flor podem compensar essa mais baixa eficincia. Apoio: CNPq 590040/2006-5 e BMBF (Alemanha) 01LB0205A1 Palavras-chaves: eficincia de polinizao, abelhas, beija-flor, Aechmea lindenii, servios ambientais
479
ASSOCIAO OBRIGATRIA ENTRE UMA ABELHA E UMA PLANTA AQUTICA EM ALAGADOS EFMEROS DE CAATINGA
Airton Torres Carvalho*, Clemens Schlindwein Programa de Ps-Graduao em Biologia Vegetal, Universidade Federal de Pernambuco Laboratrio Plebeia - Ecologia de Abelhas e da Polinizao Av. Prof. Moraes Rego, S/N, CEP:50670-901, Cidade Universitria, Centro de Cincias Biolgicas, Departamento de Botnica carvalhoairton@yahoo.com.br Durante a curta e muitas vezes irregular estao de chuvas na regio da Caatinga, forma-se alagados temporrios, caracterizados por plantas aquticas. Hydrocleys martii (Limnocharitaceae) um elemento freqente nesses alagados, e sua condio aqutica restringe sua ocorrncia a essas pequenas manchas midas e a poucos messes por ano. A abelha de Protodiscelis palpalis (Paracolletinae), um dos poucos representantes dos Colletidae do nordeste do Brasil, visita flores de H. martii. Estudamos essa interao no Brejo dos Cavalos, Caruaru, Pernambuco e amostramos 25 alagados em oito municpios de cinco estados nordestinos. H. martii auto-incompatvel e depende de polinizadores para formar frutos. Os recursos florais so acessveis somente a visitantes comportamentalmente adaptados para acessar a cmara de plen. Os estamindios cobrem as anteras frteis e somente fmeas e machos de P. palpalis foram capazes de entrar nas flores. Abelhas dessa espcie chegaram at a cmara de plen seguindo a espiral formada pelos estamindios. Esse foi o nico polinizador efetivo da espcie, e na maioria dos alagados amostrados (76%) o nico visitante floral de H. martii. P. palpalis oligoletica nas flores dessa espcie e machos patrulham as flores, que so os locais de cpula. Experimentos de polinizao aberta na ausncia da espcie oligoltica resultaram em uma baixssima frutificao o que aponta para interdependncia reprodutiva. No sabemos como essas pequenas abelhas localizam esses alagados efmeros e se h fluxo gnico entre essas ilhas midas. Apoio: CAPES, CNPq Palavras-chaves: Protodiscelis, Limnocharitaceae, oligoletia, Hydroceys, Colletidae
480
ABELHAS GENERALISTAS COMO POLINIZADORES DE PORTULACCEAS EFMERAS NO NORDESTE DO BRASIL

Carlos Eduardo Pinto*, Clemens Schlindwein Laboratrio Plebeia - ecologia de abelhas e da polinizao; Departamento de Botnica; Universidade Federal de Pernambuco Av. Prof. Moraes Rego, s/n, 50670-901 Recife, PE As espcies de abelhas podem ser classificadas de acordo com a sua relao com as plantas fontes de plen. Existem dois grandes grupos abelhas oligolticas, ou especialistas, que visitam um grupo restrito de espcies de plantas, e abelhas polilticas, ou generalistas, que visitam um amplo espectro de espcies vegetais. Dentre as abelhas generalistas encontram-se as espcies eussociais, que apresentam uma alta fidelidade floral, tornando-as polinizadores eficientes. No Parque Nacional do Catimbau ocorrem duas ervas efmeras, Portulaca hirsutissima Cambess. e P. grandiflora Hook. (Portulacaceae), que floram aps as chuvas durante cerca de seis semanas. Durante fevereiro e maro de 2006 foi estudada a polinizao destas duas espcies. As espcies de abelhas mais freqentes foram do gnero Ceratina e operrias de Trigona spinipes, que foram considerados polinizadores efetivos por tocarem e depositarem plen nos estigmas. Tambm foram recordados indivduos de Halictidade, Plebeia e Ceratinula, mas no foram vistos contatado o estigma. Apesar de indivduos de Ceratina serem polinizadores efetivos, as operrias de T. spinipes visitaram as flores de Portulaca numa freqncia trs vezes maior que Ceratina, e demonstraram fidelidade floral. Na maioria dos estudos de polinizao as operrias de T. spinipes so reportadas como ofensivas s plantas, mostrando comportamento destrutivo ou agindo como pilhadores de recursos florais. Porm, para as espcies de Portulaca estudadas, as operrias de T. spinipes foram polinizadores efetivos. Apoio: IBAMA ;Fundao O Boticrio de Proteo Natureza; PPBIO; CAPES e CNPq. Palavras-chaves: semi-rido, pilhadores, polinizao, abelhas sociais
481
COLETA DE RESINA POR ABELHAS (HYMENOPTERA: APIDAE) EM Clusia nemorosa G. MAY. (CLUSIACEAE) E Dalechampia scandens L. (EUPHORBIACEAE) EM REA DE RESTINGA
Orleans Silva1*, Mrcia Maria Corra Rgo2, Patrcia Maia Albuquerque2 1 Programa de Ps-graduao em Biodiversidade e Conservao UFMA. Endereo: Av. dos Portugueses s/n, Campus do Bacanga 65085-580, So Lus, MA. regommc@uol.com.br A resina o principal material de construo de ninho para muitas espcies de abelhas, constituindo um recurso essencial para a manuteno de suas populaes em restinga. Neste trabalho foram estudados o comportamento de coleta de resina floral, biologia floral e sistema reprodutivo de Clusia nemorosa (Clusiaceae) e Dalechampia scandens (Euphorbiaceae) em rea de restinga do Parque Nacional dos Lenis Maranhenses, Brasil. O visitante mais abundante em C. nemorosa foi Trigona fulviventris (103 indivduos; 44,8%), seguido por Trigona pallens (87 indivduos; 37,8%) e Euglossa cordata (40 indivduos; 17,4%). D. scandens foi visitada exclusivamente por abelhas Euglossina: Euglossa cordata (35 indivduos; 87,5%) e Eufriesea surinamensis (5 indivduos; 12,5%). Registra-se pela primeira vez o fenmeno de pilhagem de plen por Eg. cordata em D. scandens. A ocorrncia de autocompatibilidade nesta planta sugere que esta possa se reproduzir mesmo em um cenrio de reduo de polinizadores, sendo uma estratgia reprodutiva de uma espcie pioneira e que ocorre principalmente em reas abertas. Por outro lado, a auto-incompatibilidade de C. nemorosa indica que esta planta depende de vetores de plen para seu sucesso reprodutivo. As plantas estudadas constituem importantes fontes de resina para Euglossina e Meliponina. Apoio: PROBIO/MMA; FAPEMA Palavras-chaves: resina, Euglossina, restinga, Clusiaceae., Euphorbiaceae
482
PADRO DE ATIVIDADE DIRIA DO GNERO Xylocopa NAS FLORES DE Caesalpinia pyramidalis (LEGUMINOSAE, CAESALPINIOIDEAE)
Murilo Dantas de Miranda*, Miriam Gimenes, Patrcia Oliveira-Rebouas 1 Graduando em Cincias Biolgicas, Laboratrio Entomologia, UEFS. Dept.. Cincias Biolgicas, Laboratrio Entomologia, UEFS Rua A, caminho 1, n 12 Feira VI, 44021-000 Feira de Santana BA/BR biomurilodantas@gmail.com Caesalpinia pyramidalis, conhecida por pau-de-rato, uma espcie endmica da caatinga. As flores desta espcie so visitadas por abelhas que vo em busca de recursos como plen e nctar. O objetivo desse trabalho foi verificar o padro de atividade diria do gnero Xylocopa durante a fase de florescimento de C. pyramidalis em Banza (janeiro e fevereiro), rea de caatinga na Bahia. A temperatura mdia anual da localidade do estudo de c.a. de 24,3C e a precipitao de 700 mm. As observaes das atividades dirias das abelhas foram feitas durante trs dias consecutivos, das 04:30 h s 18:30 h. A atividade das abelhas nas flores foi entre 04:45h e 17:50h, principalmente entre 08:30h e 10:30h. Os horrios correspondentes aos ngulos mdios para ambas as abelhas ocorreram mais cedo em janeiro (07:32h para Xylocopa grisescens e 08:48h para Xylocopa frontalis) do que em fevereiro (10:55h para X. frontalis e 10:32h para X. grisescens), no havendo diferena significativa . No houve diferena significativa entre os horrios de maior atividade de ambas as abelhas nos dois meses. A diferena entre os horrios de visita nestes meses provavelmente no est relacionada com os fatores climticos, pois no houve diferena suficiente para explicar. Outra possibilidade que outras espcies de planta iniciaram seu florescimento no ms de fevereiro, deslocando temporalmente as abelhas de C. pyramidalis. A partir destes resultados as ambas as espcies de abelhas foram consideradas diurnas e matinais. Apoio: PROBIC/UEFS Palavras-chaves: interao abelha-flor, caatinga, horrio de visita, Xylocopa, Caesalpinia pyramidalis
483
ASSOCIAO DE FLORES DE TURNERACEAE COM ABELHAS OLIGOLTICAS E POLILTICAS NO PARQUE NACIONAL DO CATIMBAU, PERNAMBUCO
Diana Corra de A. Penante, Paulo Milet-Pinheiro, Clemens Schlindwein Universidade Federal de Pernambuco Av. Prof. Moraes Rego, S/N, Centro de Cincias Biolgicas, Dept. de Botnica, Cidade Universitria, Recife - PE diana_nymph@yahoo.com.br Turneraceae uma das 28 famlias heterostlicas de angiospermas, exibindo duas diferentes morfas: brevistila e longistila. A formao de frutos em espcies heterostlicas depende da polinizao cruzada inter-morfa que, em geral, realizada por insetos. Procuramos conhecer os visitantes florais de espcies de Turneraceae no Parque Nacional do Catimbau, determinando a importncia deles na reproduo das plantas e vice-versa. Foram amostradas cerca de 30 espcies de visitantes em flores de seis espcies de Turneraceae (Turnera cearensis, T. hermannioides, T. melochioides, T. subulata, Piriqueta sidifolia e Piriqueta sp.). Todas as flores oferecem como recursos nctar e plen. Foram registrados apenas insetos nas flores, entre eles borboletas, besouros e, principalmente, abelhas. Os principais visitantes incluram abelhas generalistas, como Apis mellifera, Trigona spinipes, Plebeia sp., Ceratina sp., Callonychium brasiliensis, entre outros, e abelhas oligolticas, como Protomeliturga turnerae e P. catimbaui. Esta ltima foi descrita em 2005 e, at o momento, coletada apenas na regio do Parque Catimbau. As flores de Turneraceae no dependem apenas dos visitantes oligolticos para a polinizao, visto que os generalistas tambm so polinizadores efetivos. No entanto, as abelhas Protomeliturga turnerae e P. catimbaui foram encontradas coletando plen exclusivamente em flores de Turneraceae e dependem dessas fontes de plen para alimentar suas larvas. A espcie de Perditomorpha oligoltica em Sida e Herisantia (Malvaceae), porm, as abelhas tambm visitaram as flores de Turnera para coletar nctar e plen. Aparentemente, na ausncia de flores de Malvaceae, esta abelha utilizou as de Turneraceae como fontes alternativas de plen. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Abelhas, Heterostilia, Oligoletia, Polinizao, Protomeliturga
484
POLINIZAO E PRODUTIVIDADE DO CAJUEIRO Anacardium occidentale NO NORDESTE BRASILEIRO

Joo Paulo de Holanda Neto*, Raimundo Maciel Sousa, Robert Paxton, Breno Magalhes Freitas, Tarsio Thiago Lopes Alves, Crisanto Alves Arajo4 Queens University Belfast - UK; Instituto Centec CE; Universidade Federal do Cear; 4 Emater - CE Rua Dr. Jos Furtado 1660, 60822-300 Fortaleza, Brasil calves@ematerce.ce.gov.br O cajueiro Anacardium occidentale uma importante fonte de renda para o Nordeste Brasileiro por causa da produo de castanha de caju, pseudo-fruto e da extrao do leo da casca da castanha (LCC). Suas flores so geralmente polinizadas por insetos, principalmente por abelhas (Apis mellifera) em pomares comerciais, mas o requerimento de polinizao desta espcie ainda no foi devidamente estudado. O experimento foi realizado seguindo a metodologia da polinizao manual controlada (PMC), restrita (PR) e livre (PL), sendo um nico clone escolhido como planta me (CP-1001 Embrapa CNPAT). A PMC foi feita com fontes de polens diferentes, uma fonte com auto-plen (AP) e outras trs fontes de polens cruzados (PC). Na PR as flores ficaram ensacadas para evitar a visitao de polinizadores e na PL as flores ficaram abertas para visitao dos polinizadores existentes no pomar do experimento. O tratamento AP apresentou resultados inferiores quando comparados com o resultado do tratamento PC. Entretanto o tratamento AP no diferiu do tratamento PL. O tratamento PR no produziu frutos. Com a disponibilidade de gros de polens, de origem gentica diversa, as abelhas polinizadoras podero promover o aumento na freqncia de polinizao cruzada nestes pomares, e consequentemente o aumento da produtividade. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Polinizao cruzada, Anacardium occidentale, Apis mellifera, Caju, Castanha de Caju
485
COMPORTAMENTO DE PASTEJO DO Anthiudium sp. NAS FLORES DO BAMBURRAL (Hyptis Suaveolens)

Crisanto Alves Arajo*, Joo Paulo de Holanda Neto, Jlio Otavio Portela Pereira, Daniel Santiago Pereira4,Roberto Henrique Dias da Silva3, Tarsio Thiago Lopes Alves * Emater CE; Queens University Belfast - UK; Instituto Centec CE; Emater CE; 4 UFERSA - RN Rua Dr. Jos Furtado 1660, 60822-300 Fortaleza, Brasil priskawski@hotmail.com No permetro irrigado do DNOCS, na chapada do Apod no Estado do Cear, foram coletados dados sobre o comportamento de pastejo do Anthidium sp. nas flores do Bamburral (Hyptis suaveolens. A coleta de dados foi realizada em maio de 2008 na estao experimental do Instituto CENTEC situada no municpio de Limoeiro do Norte. As abelhas Anthidium sp. so membros da famlia Megachilidade de vida solitria, caracterizado no compartilham nenhum tipo de trabalho em todo seu ciclo de vida com membros de sua famlia ou de sua espcie. O bamburral uma planta herbcea densamente encontrada em reas abertas ou degradadas na caatinga. Possuidora de um aroma caracterstico e de bastante intensidade. O estudo do comportamento de pastejo desta espcie nos fornece informaes sobre como est espcie obtm alimento para suprir suas necessidades individuais e ainda as necessidades para a criao de sua prole. O nmero de visitas por planta e o nmero de visitas por viagem foram observadas no perodo das 10:00 s 15:00 horas. O comportamento de pastejo de 38 individuos, entre abelhas machos e fmeas, foram acompanhados nas flores do bamburral. Conclui-se que pelo seu comportamento de pastejo esta espcie indica ser de importnca polinizadora do bamburral. Apoio: Curso sobre Ecologia da Polinizao; com nfase em Agricultura 2008; Instituto CENTEC ; Instituto Agropolos do Cear/SDA Palavras-chaves: Bamburral , Pastejo, Anthidium sp., Hyptis Suaveolens
486
AVALIO DO POTENCIALDE PRODUO NCTAR DO BAMBURRAL Hyptis suaveolens NA CHAPADA DO APODI

Crisanto Alves Arajo* , Joo Paulo de Holanda Neto, Tarsio Thiago Lopes Alves, Roberto Henrique Dias da Silva, Daniel Santiago Pereira4, Jlio Otavio Portela Pereira * Emater CE; Queens University Belfast - UK; Instituto Centec CE; 4UFERSA - RN Rua Dr. Jos Furtado 1660, 60822-300 Fortaleza, Brasil calves@ematerce.ce.gov.br O bamburral (Hyptis suaveolens) uma espcie com potencial apcola de grande densidade populacional em reas abertas e/ou degradas na caatinga. O mel oriundo de suas flores tem cor clara e sabor apreciado pelo mercado nacional e internacional. O bamburral uma espcie herbcea que tem hbito de florescimento no perodo chuvoso, com flores de cor roxa azulada e de aroma caracterstico, bastante atrativo para os insetos. A avaliao de produo de nctar foi realizada na Fazenda Experimental do CENTEC, no permetro irrigado do DNOCS, na Chapada do Apodi, no Estado do Cear no ms de maio de 2008. O estudo mostrou que a espcie tem um potencial estimado de produo de 893 flores/planta, apresentando nmero mdio de 47 flores/ramo, 57,23 mg/dia de nctar. e 44,12% de acar. Conclui-se que o bamburral uma importante fonte de nctar para produo de mel na caatinga. Apoio: Curso sobre Ecologia da Polinizao com nfase em Agricultura; Instituto Centec; Instituto Agropolos do Cear/SDA Palavras-chaves: Pastejo, Bamburral, Hyptis suaveolens, Apis mellifera
487
AGENTES POLINIZADORES NA CULTURA DE BERINJELA (Solanum melongena L.)

Andr Luiz Halak*, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Flvio Augusto Santos Silva, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos Centro Universitrio Moura Lacerda - CUML Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda 1520, 14076-510 Ribeiro Preto, Brasil andrehalak@yahoo.com.br Este experimento foi conduzido no Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto SP, em 2006 e 2007, e teve como objetivos estudar a biodiversidade de polinizadores, bem como, a freqncia, o tipo de coleta e o comportamento desses insetos nas flores da berinjela, Solanum melongena L. Para isso, observou-se a freqncia dos insetos, nos primeiros 10 minutos em cada horrio, das 7h00 s 18h00, com trs repeties (dias distintos). Observou-se que as flores da berinjela no tm um horrio de abertura das flores, se abrindo no decorrer do dia, que os estigmas permaneceram receptivos durante todo o dia e que a viabilidade do plen foi de 100% em todos os horrios observados (9h00, 12h00 e 15h00), mostrando que as flores enquanto abertas ficam aptas fecundao. Em 2006, os insetos visitantes das flores foram Exomalopsis sp (29,9%), Pseudaugochloropsis gramnea (23,9%), Bombus atratus (20,9%), Oxaea flavescens (19,1%) e Trigona spinipes (6,2%). Esses insetos coletaram apenas plen das flores e apenas T. spinipes no apresentou comportamento vibratrio. Em 2007, novamente, apenas espcies de abelhas visitaram as flores da berinjela. Os insetos visitantes das flores da berinjela, foram B. atratus (38,6%), Pseudaugochloropsis gramnea (25,9%), Exomalopsis sp (21,3%) e O. flavescens (14,2%). Neste ano no foram observadas abelhas T. spinipes visitando as flores. Apoio: FAPESP - 2007/2008 Palavras-chaves: comportamento, forrageiro, polinizao, ,Solanum melongena , berinjela
488
BIOLOGIA FLORAL E POLINIZAO DE Cucurbita moschata DUSCHENE (CURCUBITACEAE) NA REGIO DE DOURADOS-MS

Sedilei Pereira Da Silva, Jos Benedito Perrella Balestieri *, Mnica Maria Bueno de Moraes, Ftima Cristina De-Lazari Manente-Balestieri* Programa de ps-graduao em Entomologia e Conservao da Biodiversidade; Professor adjunto da FCBA - UFGD Rodovia Dourados Itahum, Km 12, Bloco da FCBA, Cidade Universitria, CEP 79.804-970 Dourados, MS zezo.perrella@ufgd.edu.br, crisdelazari@yahoo.com.br A biologia da polinizao de Cucurbita moschata Duschene foi estudada na cidade de Dourados, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. As reas pesquisadas esto localizadas entre as latitudes 2214 S e longitude 5449 W. Foram obtidos dados de antese floral, os locais de absoro e reflexo dos raios ultravioleta, caractersticas morfolgicas, concentrao de acar no nctar, receptividade do estigma, localizao de glndulas de odor, sistema reprodutivo, bem como freqncia, constncia, diversidade e comportamento dos visitantes florais. A espcie monica com flores efmeras e antese diurna. Ambos os tipos florais so nectarferos e a concentrao de acar no nctar variou entre 30% (flores femininas) e 35% (flores masculinas). Foi detectada a presena de osmforos na superfcie interna da corola, absoro de luz ultravioleta e estigma receptivo durante a pr-antese e antese. A espcie autocompatvel, formando frutos tanto nos tratamentos de xenogamia como nos de geitonogamia. O percentual de formao de frutos em condies naturais foi de 66,6%. Apis mellifera Linnaeus e Trigona spinipes Fabricius foram considerados como principais polinizadores efetivos dessa espcie. A presena e eficcia destes polinizadores so fundamentais para que se estabelea o fluxo de plen entre as flores femininas e masculinas. Apoio: Palavras-chaves: abelhas, abbora, polinizao, flor
489
VISITANTES FLORAIS E SUCESSO DA POLINIZAO NATURAL EM UMA POPULAO DE Qualea parviflora (VOCHYSIACEAE) NO PARQUE ESTADUAL DA SERRA DE CALDAS NOVAS, GO
Alice Maria Guimares Fernandes Vilhena*, Solange Cristina Augusto, Paulo Eugnio Alves Macedo de Oliveira Universidade Federal de Uberlndia-UFU alicefernandes130@hotmail.com alicefernandes130@hotmail.com Qualea parviflora uma das espcies mais representativas do Cerrado. Apresenta um sistema de reproduo xenogmico e produz nctar em um clcar como recompensa aos visitantes. Esse trabalho teve como objetivos identificar os polinizadores efetivos de Q. parviflora e analisar a eficincia da polinizao natural na populao vegetal estudada. O estudo foi realizado durante os dias 23, 24 e 25 de outubro de 2007 em uma rea de Cerrado sensu stricto no Parque Estadual da Serra de Caldas Novas, GO. As observaes foram feitas das 06:00 s 17:00 horas, em intervalos de 20 minutos. Para verificar a polinizao natural, foram coletados 10 pistilos de segundo dia de oito indivduos, totalizando 80 pistilos. Foram registradas 20 espcies de abelhas, sendo Apis mellifera e Bombus atratus as espcies mais observadas, responsveis por 43,95% e 10,19% das visitas, respectivamente. Dezessete espcies coletaram somente nctar e trs coletaram plen e nctar, como A. mellifera, Euglossa melanotricha e Exomalopsis sp. Apenas Trigona sp. foi considerada pilhadora de nctar, sendo todas as outras polinizadoras efetivas ou ocasionais. O perodo com a maior freqncia de visitas foi entre 13:00 e 16:00, abrangendo aproximadamente 44% das visitas observadas. Mais de 50 tubos polnicos germinaram em 42,5% dos pistilos, sendo esse valor considerado uma estimativa do sucesso de polinizaes naturais. As espcies de abelhas visitantes no diferiram marcadamente de outros estudos realizados com Q. parviflora. A riqueza e o nmero de visitas registrados podem estar relacionados com o fato de tal espcie ser adaptada polinizao por abelhas, pois apresenta caractersticas que a incluem na sndrome da melitofilia, como zigomorfia das flores, presena de plataforma de pouso, corola violcea, presena de guia de nctar e antese diurna. No entanto, foi observado que a polinizao s efetivada por abelhas de mdio e grande portes. Apoio: Fundao de Amparo a Pesquisa do Estado Minas Gerais- FAPEMIG Palavras-chaves: abelhas, Cerrado, nctar, polinizador, melitofilia
490
ENTOMOFAUNA VISITANTE DE Senna macranthera (COLLAD.) IRWIN & BARNEBY, NA REGIO DE DOURADOS- MS, DURANTE SEU PERODO DE FLORAO
Maria Lcia Rossi Rigoni, Jos Benedito Perrella Baletieri*, Monica Maria Bueno de Moraes, Ftima Cristina De Lazari Manente-Balestieri* Mestre pelo Programa de ps-graduao em Entomologia e Conservao da Biodiversidade; Professor efetivo da FCBA-UFGD Rodovia Dourados-Itahum, Km 12; Bloco FCBA; CEP 79.804-970; Cidade Universitria, Dourados,MS zezo.perrella@ufgd.edu.br, crisdelazari@yahoo.com.br Realizaram-se estudos sobre sistemas de reproduo de Senna macranthera (Collad.) Irwin & Barneby (Leguminosae-Caesalpinoideae) observando-se a diversidade e freqncia dos insetos visitantes em diferentes horrios. Os resultados de polinizao manual sugerem que S. macranthera autocompatvel, porm, a xenogamia o sistema de reproduo predominante. As inflorescncias foram visitadas por uma grande quantidade de insetos, havendo predominncia de abelhas. O horrio de maior ocorrncia dos insetos nas flores de S. macrantherafoi das 7 s 13h e de menor ocorrncia das 16 s 18h. Quanto ao comportamento dos insetos em relao a flor de S. macranthera, observou-se que Bombus atratus Franklin, Centris sp Fabricius, Xylocopa sp Latrielle possuem comportamento e morfologia adequados aos polinizadores efetivos; Oxaea flavescens Klug foi considerado polinizador ocasional. Trigona spinipes Fabricius, Trigona hyalinata Lepeletier, Scaptotrigona depilis Moure, Tetragonisca angustula Latrielle, Halictidae sp Moure e Plebeia sp Schwarz foram considerados pilhadores. A polinizao por vibrao o mtodo usado pelas abelhas para coleta de plen. Apoio: Palavras-chaves: polinizao, abelha, vibrao, plen, flor
491
DIVERSITY, FORAGING BEHAVIOUR, AND DIEL PATTERN OF BEES VISITING FLOWERS OF Aechmea nudicaulis (BROMELIACEAE) ON SANTA CATARINA ISLAND, SOUTHERN BRAZIL
Simone Grohme , Anne Zillikens , Josefina Steiner Zoological Institute, University of Tbingen, Germany; Dept.. BEG/CCB, UFSC Ob dem Himmelreich 7, 72074 Tbingen, Germany simigrohme@hotmail.com Aechmea nudicaulis is a terrestrially and epiphytically growing bromeliad. Tubular, yellow flowers and red bracts are signs of an ornithophilous pollination syndrome. However, bees and other insects can also be observed at the flowers. Therefore, we aimed to systematically record the spectrum of flower visitors and to document behavior and resource use. On Santa Catarina Island, 93 inflorescences of A. nudicaulis were observed on 35 days November 2005 through November 2007 during the flowering season between 5:00 17:00h totalling 352.5 hours of observation. All flower visitors and their behavior were recorded. Aside from three bird species and 17 other insects, bees were the most diverse group (32.3% of all taxa). Moreover, they accounted for an even higher proportion (78.3%) of all individual flower visits. 76.15% of the bee visits occurred between 6:00 11:00h, the main period of pollen collection. Thereafter pollen was not available any more but nectar was collected until 17:00h. Bees with long tongues such as Euglossa annectans and Bombus brasiliensis were able to collect nectar in addition to pollen while small bees like Plebeia droryana and augochlorine sweat bees could not reach the nectar at the bases of the narrow flower tube; they collected pollen only. Our data reveals that the flowers of this bromeliad attract a huge variety of bees. Although the ornithophilous syndrome suggests hummingbirds as the main pollinators, the flowers provide rich food resources for various bee species. Apoio: BMBF (01LB0205A1), CNPq (690143/01-0) Palavras-chaves: Aechmea nudicaulis, bromeliads, bee-plant interactions, flower visitors, pollination
492
CARACTERIZAO POLNICA DE PLANTAS APCOLAS DE REA URBANA NA UNIVERSIDADE DE SO PAULO, CAMPUS RIBEIRO PRETO, SP
Natlia de Paula S*, Ademilson Espencer Egea Soares, Marilda Cortopassi-Laurino *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP, Instituto de Biocincias USP, SP R:1, 27. Coroado, Manaus-AM. 69082-690 napaulasa@gmail.com O conhecimento da morfologia do gro de plen permite a caracterizao das espcies vegetais regionais e das fontes alimentares das abelhas, por meio da identificao do plen em produtos apcolas: cargas corbiculares, mel e prpolis. O objetivo deste trabalho a descrio morfolgica dos gros de plen das plantas apcolas arbreas e arbustivas e a montagem de um laminrio de referncia com fotomicrografias dos gros. A rea de coleta foi de 0,282 km2 ao redor do meliponrio da FMRP-USP. Anteras de botes florais foram retiradas das plantas coletadas e lminas de referncia foram montadas, pelo mtodo da acetlise. Os caracteres utilizados na descrio foram: a forma; o nmero de aberturas; a ornamentao da exina e a relao P/E (razo eixo polar pelo dimetro equatorial). Neste trabalho foram descritos 57 gros de plen de 20 famlias, sendo Fabaceae e Malvaceae as famlias com maior nmero de espcies (8 cada). O tamanho dos gros foi predominantemente pequeno, variando de 12 a 23 m, sendo que quanto a sua forma 35% so oblato esferoidais e tricolporados. A maioria dos gros apresentou-se como mondes, exceto a subfamlia Fabaceae-Mimosoideae, na qual foram encontradas dittrades e a famlia Onagraceae, cujos gros esto dispostos em ttrades. Deste modo, este estudo fornece informaes que auxiliaro em pesquisas sobre fonte de recursos vegetais para as abelhas, anlise polnica dos produtos apcolas e incremento do pasto apcola. Apoio: FAPESP 2007/51054-2 Palavras-chaves: morfologia, abelhas , acetlise , mel , plen
493
ABELHAS DAS ORQUDEAS: EVIDNCIA DE INTERAES ATRAVS DA PRESENA DE POLNEAS ADERIDAS

Mariana Taniguchi*, Isabel Alves-dos-Santos, Rodrigo B. Singer Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Instituto de Biocincias - USP; Instituto de Biocincias - UFRGS R. Cnego Eugnio Leite, 594, ap. 161, 05414-000, So Paulo, Brasil marit8@uol.com.br Flores da famlia Orchidaceae apresentam o plen aglutinado em pequenos pacotes denominados polneas. Essas estruturas possuem poro adesiva e se fixam nos visitantes florais, podendo ser levadas a outras orqudeas, polinizando-as. Entre os visitantes mais freqentes esto as abelhas e vespas (Hymenoptera, 60%). Porm raramente so observadas visitas nessas flores. O presente trabalho teve como objetivo resgatar as abelhas visitantes das orqudeas em colees entomolgicas, evidenciadas pela presena de polneas aderidas; identificar tais orqudeas correspondentes e analisar os dados cruzados desses organismos a fim de obter mais informaes sobre as interaes. Espcimes de abelhas foram examinados em trs colees entomolgicas: CEPANN/IBUSP, MZUSP e UFMG. Os exemplares foram fotografados para que as polneas fossem identificadas e um banco de dados foi construdo com as informaes sobre a coleta da abelha, identificao da planta, nmero de polneas e local de aderncia no corpo da abelha. Foram encontradas 118 abelhas pertencentes a 36 espcies, sendo uma identificada at o nvel de morfoespcie, e de 10 tribos: Euglossini, Bombini, Meliponini, Centridini, Xylocopini, Tetrapediini, Melectini, Tapinotaspidini, Ericrocidini e Augochlorini. As polneas pertenciam a 20 espcies de orqudeas (subtribos: Spiranthinae, Oncidiinae, Stanhopeinae, Maxillariinae, Catasetiinae, Laeliinae e Cyrtopodiinae), alm de uma espcie da famlia Apocynaceae e uma espcie indeterminada. Foi encontrado um elevado nmero de euglossneos na amostra (84,75%), comprovando a forte ligao desse grupo com orquidceas, muitas vezes denominados abelhas das orqudeas. Apoio: PIBIC/CNPq Palavras-chaves: Euglossini, Orchidaceae, polinrio, visitante floral, acervos entomolgicos
494
RELAO ENTRE Melipona capixaba E ORQUDEAS DA SUBTRIBO MAXILLARIINAE

Helder Canto Resende*, Fbio de Barros, Lcio Antnio de Oliveira Campos, Mara Garcia Tavares, Tnia Maria Fernandes Salomo Universidade Federal de Viosa UFV; Instituto de Botnica - IBT Departamento de Biologia Geral. Campus Universitrio. Viosa/MG. CEP 36570-000 heldercanto@yahoo.com A abelha sem ferro Melipona capixaba uma espcie restrita Mata Atlntica da regio das montanhas capixabas. Apesar da importncia ecolgica dos meliponneos como polinizadores, poucos estudos tm investigado a relao entre M. capixaba e as plantas que lhe fornecem recursos florais. Este trabalho relata a observao de seis operrias de M. capixaba carregando polinrio preso ao escutelo. As abelhas foram coletadas em colnias diferentes localizadas nos municpios de Conceio do Castelo e Venda Nova do Imigrante/ES. A identificao dos polinrios foi feita com base em sua morfologia, por comparao com polinrios de espcimes previamente conhecidos. Os polinrios encontrados possuem quatro polnias cartilaginosas, em dois pares com tamanhos distintos, obovadoassimtricas, superpostas, ligeiramente achatadas dorsi-ventralmente, presas a um estipe curto e um viscdio em forma de meia-lua, o que caracteriza bem alguns representantes da subtribo Maxillariinae (subfamlia Epidendroideae, tribo Cymbidiae), em especial dos gneros Maxillaria sensu lato e Xylobium. A observao de operrias de diferentes colnias e localidades carregando polinrios sugere uma relao de polinizao efetiva de orqudeas por M. capixaba. Durante o forrageamento, mesmo voltando ao ninho, o polinrio ainda se mantm fixo ao escutelo da abelha. Operrias carregando polinrios iro continuar forrageando ao longo do dia havendo, portanto, chances de transferncia da polnia para outras flores e conseqente polinizao cruzada. Estudos esto sendo realizados para determinar quais so as espcies de orqudeas visitadas por indivduos de M. capixaba, a efetiva polinizao destas flores por estes insetos e os recursos e mecanismos de atrao envolvidos nas visitas. Apoio: CNPq - FAPEMIG Palavras-chaves: Polinizao, Melipona capixaba, Orqudea, Maxillaria , Xylobium
495
INTERAES ENTRE ABELHAS COLETORAS DE LEO E FLORES DE Angelonia (PLANTAGINAECEAE) EM DIFERENTES REAS DE VEGETAO ABERTA DO BRASIL
Aline Cristina Martins*, Antonio Jos Camillo de Aguiar, Isabel Alves dos Santos * Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo Rua do Mato trav. 14, n. 321 - 05508-900 - So Paulo - SP - Brasil aline_cmartins@yahoo.com.br As interaes entre cinco espcies de Angelonia (Plantaginaeceae) e abelhas visitantes vm sendo estudadas em diferentes biomas do Brasil: A. integerrima (Campos Sulinos), A. salicariifolia (Chaco), A. eryostachis, A. goyazensis (Campos Rupestres) e A. cornigera (Caatinga). Angelonia so plantas que produzem leos florais coletados por abelhas que os utilizam na nidificao. Sua ocorrncia abrange as reas neotropicais abertas. Neste estudo, os principais vistantes foram abelhas do gnero Centris, corroborando os resultados de outros autores. A. integerrima visitada por C. (H.) vulpecola. Compartilhando semelhanas morfolgicas com a anterior, A. eryostachis visitada para coleta de leo por C. (X.) bicolor e C. (P.) burgdorfii e Tetrapedia sp, que atua como pilhador de leo, j que no contata os estames e, eventualmente, explora os elaiforos externamente flor. A. salicariifolia e A. goyazensis tambm compartilham caractersitcas morfolgicas entre si; ambas so visitadas por Centris, a primeira por C. (P.) hyptidoides e C. (H.) tarsata e a segunda por C. (P.). burgdorfii, C. (P.) klugii e C. (C.) aenea. Em Angelonia ocorre protandria, o que evita a auto-polinizao. Todas Centris observadas exploram os elaiforos com as pernas anteriores e, simultaneamente, contatam os estigmas com o mesoscuto ou a fronte, ficando o plen aderido aos plos. Abelhas da tribo Tapinotaspidini tambm foram registradas coletando leo em Angelonia, exceto em A. eryostachis, sendo algumas potenciais polinizadores destas flores. Em A. cornigera observamos um visitante no registrado em estudos anteriores, Caenonomada unicalcarata, cuja fonte de leo permanecia desconhecida at ento. Dialictus sp, abelhas halictneas que coletam plen de Angelonia, podem atravs deste comportamento atuar na transferncia do plen entre os indivduos, promovendo assim a polinizao. A congruncia morfolgica entre as flores de Angelonia, o tamanho de Centris e a freqncia de visitao, permite que estas abelhas atuem como os efetivos polinizadores. Apoio: FAPESP (Processo N 04/00274-4), CNPq (Bolsa de Mestrado) Palavras-chaves: elaiforos, plantas produtoras de leo, Angelonia, Centris, polinizao
496
ECOLOGIA DA POLINIZAO DE Lycopersicon esculentum (SOLANACEAE)

Thlita Gianini Brito Franco*, Ftima Cristina De Lazari Manente Balestieri, Jos Benedito Perrella Balestieri Universidade Federal da Grande Dourados-UFGD Rua Cuiab 2750,79800-000 Dourados, Brasil tha_gianini@hotmail.com A polinizao um importante evento dentro da dinmica dos ecossistemas assim como para o manejo e desenvolvimento de culturas agrcolas. Neste sentido, estudos sobre a biologia da polinizao se tornam importantes, pois fornecem informaes sobre a reproduo da planta estudada; contribuindo para a conservao, manejo sustentado e explorao comercial pelo homem. No presente trabalho, desenvolvido no Campus da UFGD, observaes e coletas dos visitantes foram realizadas durante a florao de Lycopersicon esculentum (Solanaceae), planta considerada uma das hortalias mais importantes por sua ampla adaptao, popularidade e por se constituir em um produto de valor nutritivo. Foram realizadas 12 horas de observao em dias alternados durante o ms de maro de 2008, onde foram coletados os visitantes para posterior identificao. Testes laboratoriais foram feitos com as flores e os visitantes montados e identificados. L. esculentum possui flores reunidas em grupos de trs ou quatro, estames em nmero de seis, anteras desenvolvidas e poricidas que se renem em volta do estigma formando um cone. Atravs do teste com vermelho neutro, foi detectado a presena de osmforos nas ptalas e nas anteras. O plen psilado e do tipo mnade. Observou-se que suas flores foram visitadas principalmente por abelhas, sendo os mais freqentes Halictidae, Paratrigona, Exomalopsis e Anthophorini. Apoio: UFGD,CNPQ Palavras-chaves: polinizao, Lycopersicon esculentum, visitantes florais, comportamento, biologia floral
497
INFLUNCIA DA FASE DE FLORESCIMENTO NO VINGAMENTO E QUALIDADE DOS FRUTOS EM CULTIVOS DE MELO (Cucumis melo)
Jos Hugo de Oliveira Filho, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo Prof. Assistente - Universidade Federal do Tocantins UFT; Faculdade de Tecnologia Centec Serto Central Instituto Centec; Emater-CE / Secretaria de Desenvolvimento Agrrio Br 153 Km 112 Cx postal 132. Zona rural Araguaina, Tocantins Brasil Cep:77804970 jhugo@uft.edu.br Dentre as atividades agrcolas de explorao intensiva na regio Nordeste do Brasil destaca-se a cultura do melo (Cucumis melo), que concentra a maior parte da produo nacional nos estados do Rio Grande do Norte e do Cear. A produtividade e a qualidade dos frutos so fatores que determinam a viabilidade econmica da atividade, sendo observados comumente casos de perdas por m formao de frutos e por frutos com padro de tamanho exagerado. Aspectos ligados a polinizao e a fecundao das flores, bem como a fase da cultura em que isso ocorre podem influenciar a produo dos frutos e suas caractersticas. O presente trabalho teve como objetivo estudar os nveis de fecundao, vingamento de frutos e suas caractersticas em flores produzidas nos ramos primrios e secundrios do meloeiro (Cucumis melo). Linhas da cultura foram plantadas com uma diferena de dez dias. Nas plantas mais velhas foi permitido o desenvolvimento de frutos nas primeiras flores perfeitas, quando as plantas mais jovens comearam a produzir flores perfeitas foi feita a polinizao cruzada manual nas flores perfeitas dos dois grupos de plantas. As flores dos ramos primrios apresentaram nveis superiores de fecundao e desenvolvimento de frutos, diferindo significativamente (P<0,05) das flores secundrias. Conclui-se que, as primeiras flores perfeitas apresentam maior capacidade de vingamento e de desenvolvimento de frutos, desde que sejam polinizadas adequadamente. Apoio: CNPq; INSTITUTO CENTEC; UFT; EMBRAPA/CNPAT Palavras-chaves: Polinizao, Fecundao, Produo de frutos, Cucumis melo
498
INSETOS VISITANTES NAS FLORES EM CULTURA DE CAF (Coffea arabica) NO MUNICPIO DE ALTINPOLIS - SP
Ana Paula Roncolato*; Andr Palma Ribeiro; Guilherme dos Reis Vasconcelos; Andr Luiz Halak; Flvio Augusto Santos Silva; Darclet Teresinha Malerbo-Souza *Graduando em Agronomia do Centro Universitrio Moura Lacerda; Centro Universitrio Moura Lacerda Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510 Ribeiro Preto, Brasil anap_roncolato@hotmail.com Os objetivos desta pesquisa foram estudar os insetos visitantes das flores em cultura do caf (Coffea arbica), a fim de verificar os mais freqentes, bem como o seu comportamento. O experimento foi conduzido em Altinpolis, SP, no ms de setembro de 2007 e a variedade usada foi Catua Vermelho. Foram avaliados a freqncia das visitaes dos insetos e o tipo de coleta (nctar e/ou plen) desses insetos nas flores, no decorrer do dia, por meio de contagem nos primeiros 10 minutos de cada horrio, das 7h00 s 18h00, com trs repeties. Os insetos mais freqentes nas flores foram abelhas africanizadas Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) (70,30%), seguida das abelhas irapu Trigona spinipes (Hymenoptera: Apidae) (17,50%) e abelhas jata Tetragonisca angustula (Hymenoptera: Apidae) (12,2%). As abelhas africanizadas preferiram coletar nctar (54,5%) que plen (45,5%) e observou-se que, para nctar, essa abelha visitou as flores das 7h00 s 14h00 diminuindo sua freqncia no decorrer do dia. Para plen, essa abelha visitou as flores das 9h00 s 18h00, com pico de freqncia s 14h00. As abelhas irapu coletaram tanto nctar (47,2%) quanto plen (52,8%) no decorrer do dia. As abelhas jata coletaram exclusivamente plen nessas flores visitando as flores das 7h00 s 16h00, apresentando dois picos de freqncia, entre 7h00 e 8h00 e s 15h00. As abelhas A. mellifera foi uma espcie constante nas flores, j as abelhas T. spinipes e T. angustula foram espcies acessrias. Apoio: Centro Universitrio Moura Lacerda Palavras-chaves: Polinizao, abelhas, Coffea arbica, Apidae
499
INVENTRIO E FENOLOGIA DA FLORA APCOLA DA UNIVERSIDADE DE SO PAULO, CAMPUS RIBEIRO PRETO, SP

Natlia de Paula S*, Ademilson Espencer Egea Soares, Marilda Cortopassi-Laurino *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP; Instituto de Biocincias USP, SP Gentica Bloco A, FMRP/USP; Av. Bandeirantes, 3900. Monte Alegre, 14049-900 - Ribeirao Preto, SP - Brasil napaulasa@gmail.com Poucos so os estudos relacionados com o perodo de florao de espcies vegetais e sua potencialidade apcola. O presente trabalho apresenta um estudo florstico e fenolgico das espcies arbreas e arbustivas localizadas no campus da USP-RP. A rea de estudo corresponde a uma rea circular de aproximadamente 0,286 km2 ao redor do meliponrio do Departamento de Gentica da FMRP. As coletas e os registros das plantas foram feitos quinzenalmente de maro de 2007 a fevereiro de 2008, obtendo-se 60 espcies de plantas, sendo 64 % de espcies nativas. As espcies coletadas podem ser enquadradas como apcolas, pois oferecem recursos como plen, nctar ou ambos s abelhas. As famlias mais representativas foram Fabaceae e Malvaceae ambas com 8 espcies. Cerca de 20% das espcies apresentaram florao apenas no perodo mido, 17% apenas no perodo seco, totalizando 37% de plantas que apresentam florao anual. Houve uma relativa predominncia de florao no perodo mido, porm a sazonalidade no foi marcante em 63% das espcies. Das espcies que apresentam florao longa, 47% so cultivadas e ornamentais, proporcionando recursos durante o ano todo para as abelhas da regio. Assim, as informaes obtidas visam lanar mais conhecimentos no manejo da flora apcola de reas urbanas, possibilitando incrementar o pasto apcola e o atender maior nmero de espcies de abelhas. Apoio: FAPESP 2007/51054-2 Palavras-chaves: Florao, Pasto apcola, Abelhas, Sazonalidade, Plantas ornamentais
500
BIOLOGIA E MANEJO DE ABELHAS AFRICANIZADAS
501
COLETA DE PLEN POR PASTEJO INDUZIDO EM ABELHAS MELFERAS Apis melifera NA CULTURA DO MELO Cucumis melo
Raimundo Maciel Sousa*, Odaci de Sousa Aguiar, Antonio Abreu da Silveira Neto, Crisanto Alves Arajo Faculdade de Tecnologia Centec Serto Central Instituto Centec; Emater-CE / Secretaria de Desenvolvimento Agrrio Avenida Geraldo Bizarria de Carvalho S/N, 638000-000 Quixeramobim, Brasil rdomaciel@centec.org.br A cultura do melo Cucumis melo que ocupa lugar de destaque na fruticultura brasileira intensivamente explorada nos estados do Rio Grande do Norte e do Cear, concentrando nessa regio a maior parte da produo nacional. As prticas utilizadas na agricultura moderna reduzem sensivelmente os ndices de polinizao em reas cultivadas e tornam necessria a introduo de agentes polinizadores suplementares. Tendo em vista as condies de cultivo comercial de melo na Regio Nordeste do Brasil, bem como a necessidade de aumentar a atividade de coleta de plen para melhorar a eficincia da polinizao dirigida, o presente trabalho teve como objetivo estudar o uso de tcnicas de manejo para induzir a coleta de plen por abelhas melferas Apis mellifera nas flores do meloeiro Cucumis melo. Colmeias foram introduzidas em reas de cultivo no perodo de florescimento da cultura e receberam os seguintes tratamentos: oferta de alimentao energtica, instalao de coletores de plen e testemunha. Durante os horrios de observao, a oferta do xarope obteve altas freqncias de coletoras de plen nas flores e retornando as colmeias, sendo significativamente superior (P<0,05) aos demais tratamentos. Conclui-se que a oferta de alimentao energtica causa mudanas de comportamento de pastejo em colnias de abelhas melferas, aumentando a proporo de coletoras de plen. Apoio: CNPq; INSTITUTO CENTEC; UFC; EMBRAPA/CNPAT Palavras-chaves: Pastejo, Plen, Apis mellifera, Cucumis melo
502
ANLISE DOS COMPORTAMENTOS HIGINICO E DEFENSIVO COMO NDICES DE SELEO EM PROGRAMAS DE MELHORAMENTO GENTICO EM COLNIAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS, Apis mellifera L.
Daiana Almeida De Souza,*, Katia Peres Gramacho Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Tecnologia e Cincias-Salvador-BA - Curso de Cincias Biolgicas Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil daianasouz@usp.br A Apicultura brasileira vem ganhando grande destaque na economia nacional e as pesquisas em torno da sua prospeco vm se tornando cada vez mais necessrias. Os Programas de Melhoramento Gentico (PMGs), visam seleo de indivduos com caractersticas biolgicas de grande interesse e a reproduo destas nas geraes seguintes. O comportamento higinico consiste numa destas caractersticas, j que atua na preveno e combate a doenas que atacam as colnias. Da mesma forma, a alta defensividade das colnias consiste num problema atividade apcola, e o seu controle implica em maior segurana nas atividades de manejo e manuteno das colnias. Sendo assim, objetivamos com esse estudo, avaliar a influncia destes dois comportamentos (Higinico e Defensivo) sobre a produtividade de mel. Para isso foram utilizadas 14 colnias de abelhas africanizadas, Apis mellifera, provenientes de coletas na natureza. A avaliao do Comportamento higinico (CH) baseou-se no mtodo de perfurao de crias com idade entre 11 a 14 dias das colnias e avaliao da remoo destas aps 24hs. O comportamento defensivo (CD) foi quantificado de acordo com a metodologia de anlise subjetiva de campo, na qual se avaliou a reao das colnias mediante as aes do observador, classificando-as em categorias, previamente estabelecidas, que variaram de 0 a 4. A produo de mel (PP) foi mensurada com a pesagem dos quadros de mel maduro colhidos das melgueiras de cada colnia. A anlise de correlao de Pearson identificou ausncia de correlaes significativas entre as variveis CH e PP (p= -0,073) e CH e CD (p= 0,206), ou seja, o a expresso de uma destas caractersticas biolgicas no est atrelada ao desempenho da outra. Observou-se ainda uma baixa, mas no significativa correlao positiva entre CD e PP (p= 0,490). A ausncia de ligao entra estas variveis analisadas, permite o emprego destas, como ndices de seleo em PMGs visando o aumento da produtividade de mel. Apoio: FAPESB Palavras-chaves: Abelhas africanizadas, Comportamento higinico, Comportamento defensivo, Produo de mel
503
SELEO DE COLMEIAS PARA O PROGRAMA DE MELHORAMENTO GENTICO EM ABELHAS Apis mellifera DO ESTADO DO CEAR
Joo Paulo de Holanda Neto*, Raimundo Maciel Sousa, Roberto Henrique Dias da Silva, Tarsio Thiago Lopes Alves, Crisanto Alves Arajo *Queens University Belfast - UK; Instituto Centec CE; Emater - CE Rua Dr. Jos Furtado 1660, 60822-300 Fortaleza, Brasil calves@ematerce.ce.gov.br O Programa de Melhoramento Gentico em Abelhas Melferas do Estado do Cear uma das polticas de inovao tecnolgica mais importantes, pois tem como objetivo principal o aumento da produtividade de mel das colmias de apirios fixos. A seleo colmias geneticamente superiores trata-se de uma fase inicial, porm determinante para o sucesso do programa de melhoramento gentico para qualquer espcie a ser trabalhada. A partir de uma populao de 1826 colmeias, distribudas em oito territrios do estado, foram selecionadas 85 colmeias com alta produtividade de mel para produo de rainhas. O Programa de melhoramento gentico consiste de trs fases: seleo, produo e distribuio de rainhas. A produtividade mdia da populao base apresentou o valor de 29,009 kg 11,775 e a produtividade mdia das colmias selecionadas apresentou o valor de 45,202 kg 17,684. A diferena na produtividade tambm foi externada quando comparados com dentre as colmeias de cada territrio. Esses resultados mostram uma diferena na produtividade entre os grupos de 55% demonstrando a existncia de variabilidade gentica na populao, fato que justifica a seleo de colmias consideradas genticas superiores. Apoio: FUNCAP; CAPES; SDA CE; CENTEC; EMATER - CE Palavras-chaves: Seleo, Rainhas, Apis mellifera, Apicultura
504
INFLUNCIA DO DIXIDO DE CARBONO NA MORTALIDADE DE Apis mellifera (HYMENOPTERA: APIDAE)

Deodoro Magno Brighenti*, Csar Freire de Carvalho, Carla Regina Guimares Brighenti, Stephan Malfitano Carvalho *Departamento de Entomologia - UFLA; Campus Avanado do Alto Paraopeba - UFSJ Campus da UFLA Cx Postal 3037, 37200-000 Lavras Minas Gerais, Brasil deodorobrighenti@oi.com.br Para se anestesiar as abelhas Apis mellifera visando a realizao de experimentos em laboratrio, o processo mais comum a aplicao do dixido de carbono. No entanto, o efeito desse composto normalmente no levado em considerao na avaliao da sobrevivncia durante o perodo de confinamento. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influncia do dixido de carbono na mortalidade de abelhas.O ensaio foi conduzido no laboratrio de Biologia de Insetos do Departamento de Entomologia UFLA e as abelhas submetidas a diferentes tempos de exposio ao dixido de carbono, mantidas em laboratrio at completar 204 horas de experimento. Os tratamentos em tempo de exposio foram: A. testemunha (sem exposio ao CO2), B. 60 segundos, C. 120 segundos, D. 180 segundos, E. 240 segundos e F. 300 segundos. O CO2 foi aplicado as abelhas confinadas em uma gaiola de PVC de 10 x 15 cm de altura, utilizando-se um manmetro acoplado a um cilindro com uma vazo de 10 L/min. Foram utilizadas dez repeties para cada tratamento, cada uma composta de dez abelhas, alimentadas com mel cristalizado e gua ad libitum. Contou-se o nmero de abelhas sobreviventes a cada 12 h ajustando-se a curva de sobrevivncia baseada na distribuio Weibull. Estimou-se o tempo mdio de vida e os valores de TL10, TL20, TL50 e para o TL99. Compararam-se os parmetros de forma e escala estimados para cada curva atravs da tcnica de identidade de modelos. Constatou-se que, para exposies de 120 segundos ao CO2 e aquelas superiores no houve diferena significativa ocorrendo aceleramento da mortalidade em relao testemunha e ao tratamento com exposio de 60 segundos, podendo ser aquela indicada para utilizao em laboratrio. O TL50 no tratamento testemunha foi de 148,35 horas enquanto que, com o uso de CO2 por 60 segundos foi de 155,23 horas. Apoio: FAPEMIG Palavras-chaves: sobrevivncia, tempo letal, anestesia , Weibull, regresso
505
VISITAO DE ABELHAS Apis mellifera EM POPULAES DE Baccharis dracunculifolia PARA COLETA DE RESINA
Paula So-Thiago*, Rnia Mara Santana, Andr Gabriel Ferreira Calaa da Costa, Esther Margarida A. F. Bastos *Laboratrio de Recursos Vegetais, Diviso de Cincias Farmacuticas, Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, MG; ICEX- Departamento de Estatstica, Universidade Federal de Minas Gerais Rua Conde Pereira Carneiro, 80, Gameleira, Belo Horizonte, MG. CEP 3051-010 embastos@funed.mg.gov.br O objetivo deste trabalho foi estudar a associao Apis mellifera x Baccharis dracunculifolia natural e cultivado, visando a determinao de sua capacidade produtora de resina. Foram observadas duas populaes de Baccharis dracuculifolia, uma populao natural localizada na Fazenda So Judas Tadeu (FSJT), municpio de Betim, MG, com 20 indivduos, destes 10 machos e 10 fmeas e outra cultivada, localizada no Horto Experimental da Fundao Ezequiel Dias, composta por 11 indivduos, destes quatro machos e sete fmeas. As observaes foram realizadas entre os meses de junho/ 2007 a maro/ 2008, semanalmente durante o perodo mais quente do dia, entre 10h30 e 15h00. Foram registrados e coletados para identificao todos os visitantes presentes durante o perodo avaliado. Na Fazenda So Judas Tadeu, ocorreu visitao de A. mellifera nos pices vegetativos para coleta de resina, entre os meses de julho/ 2007 a maro/ 2008, sendo que os meses com maior mdia de visitao foram, novembro, dezembro, janeiro e fevereiro. Na populao do Horto, no foi observada a visitao de A. mellifera coletando resina nos pices vegetativos. Em ambas as populaes, os insetos mais freqentemente observados (10-45%), pertencem s ordens Diptera e Hymenoptera; a ordem Coleoptera apresentou freqncia intermediria (5-10%) e as ordens, Hemiptera, Homoptera, Lepdoptera, Mantodea, Odonata, Orthoptera, Neuroptera, Thysanopterae e a classe Arachnida apresentaram freqncia < 1%. Galhas causadas pelo psylldeo Baccharopelma baccharidis estavam presentes e apresentaram maior abundncia nos meses de agosto (25,61) e janeiro (15,39) na FSJT e a populao cultivada no Horto Experimental no desenvolveu estas galhas. Estes resultados sugerem que a grande diversidade de visitantes, associados a presena de galhas de B. baccharidis podem ser os estimuladores da produo de metablitos secundrios em B. dracunculifolia em populaes naturais. Apoio: Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de Minas Gerais Palavras-chaves: Apis mellifera, Baccharis dracunculifolia, resina
506
RAO ARTIFICIAL COMO FONTE ALTERNATIVA DE ALIMENTO PARA ABELHAS MELFERAS (Apis mellifera L.)
Dayana Francys Pessoa Monteiro, Breno Magalhes Freitas*, Marcelo de Oliveira Milfont, Alessandra Pinto de Oliveira, Ellen Pereira Borges Curso de Zootecnia, Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal do Cear - UFC Avenida Humberto Monte, s/n, 60021-970, Fortaleza - Cear, Brasil freitas@ufc.br Apesar do conhecido potencial do Nordeste para o desenvolvimento apcola produtivo e rentvel, faz-se necessrio em grande parte da regio, a utilizao de alimentos para suprir a carncia energtica e protica das abelhas Apis mellifera no perodo da estiagem. Assim, esse trabalho visou avaliar o efeito de uma rao artificial como substituto da alimentao protica natural de abelhas melferas. A eficincia da rao foi avaliada atravs da longevidade de abelhas recm emergidas confinadas em gaiolas de madeira com dimenses de 8 x 11 x 13cm, duas laterais de vidro, piso telado, tela anti-fuga e dois orifcios superiores para o fornecimento da gua e do alimento energtico. Cada gaiola comportou 50 operrias. O experimento constou de trs tratamentos com trs repeties, sendo: T1 - rao artificial (67% p de soja + 33% de mesocarpo de arroz; T2 - 50% rao artificial + 50% plen in natura macerado e T3 - somente plen in natura macerado. O efeito da rao artificial foi estimado pela mensurao do ndice de mortalidade (IM) e do tempo mdio de mortalidade (TMM), onde diariamente eram removidas as abelhas mortas de cada gaiola. Ao final observou-se que no houve diferena significativa (p>0.05) entre os tratamentos, sendo que as mdias e os erros padres mdios do ndice de mortalidade (IM) foram 7,80 1,27 para T1; 5,47 0,27 para T2 e 5,31 0,30 para T3, j o tempo mdio de mortalidade (TMM) foi 4,12 1,35; 6,31 0,54; 5,70 0,35 dias para os tratamentos T1, T2 e T3, respectivamente. Conclui-se que a rao formulada pode ser fornecida de forma paliativa para abelhas melferas em substituio ao plen nos perodos de escassez de alimento. Apoio: UFC e CNPq Palavras-chaves: abelha, escassez de alimento, rao, operrias, longevidade
507
RELAO DO COMPORTAMENTO HIGINICO E GANHO DE PESO SEMANAL DE COLMIAS EM PROCESSO DE SELEO MASSAL PARA PRODUO DE MEL
Izabel Christina da Silva, Dejair Message, Geraldo Neri Ferreira, Cosme Damio Cruz Universidade Federal de Viosa; Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Departamento de Biologia Animal, Universidade Federal de Viosa, 36570-000 Viosa , MG, Brasil icsmel@pg.ffclrp.usp.br Em funo das condies de mercado, com preos baixos e exigncias maiores quanto qualidade do mel, torna-se necessrio desenvolver programas visando aumento da produtividade de mel para se obter um melhor retorno econmico para os apicultores e aumentar a resistncia das abelhas aos diferentes patgenos para se evitar o uso de medicamentos nas colmias. O comportamento higinico um dos mecanismos de resistncia a diferentes doenas que vem sendo utilizado em vrias partes do mundo. Neste trabalho so avaliados o comportamento higinico de colmias em processo de seleo massal para produo de mel utilizando ganho de peso semanal com forrageamento em alimentadores coletivos e natural.(Mtodo UFV de Seleo Massal).Os resultados obtidos mostram que o comportamento higinico de 45 colmias teve uma mdia de 86,1+/-17,5% de eficincia pelo mtodo de perfurao. Este comportamento no apresentou correlao significativa com o ganho de peso semanal em condies artificiais e tambm em condies naturais. No entanto, cerca de 25% das colmias apresentaram valores de ganho de peso semanal e comportamento higinico acima da mdia observada, indicando a possibilidade de seleo. O ganho de peso semanal atravs de forrageamento em alimentadores coletivos e o ganho de peso em condies naturais apresentaram uma correlao positiva altamente significativa,mostrando que a seleo massal pode ser realizada avaliando-se o ganho de peso ao longo de uma semana a partir de alimentao artificial. Apoio: FAPEMIG, CNPQ Palavras-chaves: comportamento higinico, abelhas africanizadas, ganho de peso, seleo massal
508
COMPORTAMENTO DE ABELHAS
509
ESTUDO DAS ATIVIDADES DIRIAS DOS MACHOS DE Eulaema nigrita (EUGLOSSINA, APIDAE), NA ISCA DE VANILINA EM UM FRAGMENTO DE MATA URBANA EM SALVADOR (BA), EM DIFERENTES MESES DO ANO
Miriam Gimenes*, Pedro Nascimento Melo Universidade Estadual de Feira de Santana, Departamento de Cincias Biolgicas; UCSal - Universidade Catlica do Salvador Campus Universitrio, BR 116, Km 03, 44031-460, Feira de Santana, Bahia, Brasil miriam.gimenes@uol.com.br Vrios estudos foram realizados com abelhas da subtribo Euglossina utilizando-se isca de odor como atrativo, porm poucos com enfoque nos padres dirios de atividade de visita das abelhas nas iscas. Este estudo teve como objetivo analisar as atividades dirias dos machos de Eulaema nigrita e a influncia dos fatores climticos ao longo do dia em diferentes meses do ano, na isca de vanilina, em uma mata urbana em Salvador. Foram feitas observaes das visitas das abelhas isca de odor, das 5:00 s 18:00h por 3 dias, bimestralmente em 2006. Fevereiro foi o ms de maior freqncia de visitas das abelhas na isca e junho o de menor. Os machos chegavam na isca mais cedo em novembro, dezembro e fevereiro (entre 5:00 e 6:00h) e mais tarde em abril e setembro (entre 5:30 e 9:00h). Em fevereiro e novembro as abelhas apresentaram um padro de atividade dirio bimodal, com um intervalo de ca. de 3 no meio do dia. Em dezembro o padro de atividade foi unimodal com o valor do ngulo mdio para as visitas ocorrendo s 9:04h. Os padres de atividade diria dos machos de E.nigrita em vanilina podem representar o que ocorre em situao natural em que o horrio de maior nmero de visitas s flores estaria sincronizado com o horrio de maior produo da fragrncia. A temperatura e os demais fatores climticos pouco influenciaram as atividades das abelhas pois a variao destes ocorreu dentro de uma faixa permissiva para o vo das abelhas, tendo a temperatura durante o estudo variado de 23 a 32C, intervalo considerado permissivo para as atividades das abelhas em reas tropicais. Apoio: Programa de Ps-graduao em Ecologia e Biomonitoramento, Instituto de Biologia. Universidade Federal da Bahia e Universidade Estadual de Feira de Santana Palavras-chaves: Eulaema nigrita, mata, vanilina, padro de atividade diria, Nordeste
510
ATIVIDADE EXTERNA DA ABELHA JANDARA Melipona subnitida EM TERESINA, PI

Levi Saimon Monteiro Lopes Neves, Maria Teresa do Rego Lopes*, Fbia de Mello Pereira Ricardo Costa Rodrigues de Camargo , Mrdyla de Sousa Marques Universidade Federal do Piau; Embrapa Meio-Norte Av. Duque de Caxias, 5650, Bairro Buenos Aires, Teresina, PI. CEP: 64006220 mteresa@cpamn.embrapa.br O estudo das atividades externas das abelhas sem ferro importante para a compreenso de sua biologia e comportamento em diferentes ambientes. Neste trabalho objetivou-se avaliar o comportamento de coleta e de limpeza da abelha jandara Melipona subnitida em Teresina, Piau. O experimento foi conduzido no meliponrio da Embrapa Meio-Norte, entre maio e outubro de 2007. Foram observadas seis colnias de abelhas jandara instaladas em colmias racionais, uma vez por semana, entre 7:00 e 17:30, cinco minutos a cada hora. O nmero de abelhas que entravam e saam foi registrado observando-se a quantidade que entrava na colnia com cargas de plen, resina e barro, sem carga na corbcula e saindo da colmia sem carga ou removendo material. A quantidade de nctar foi obtida pela subtrao do nmero de abelhas que entraram na colmia sem carga do nmero de abelhas que removiam material. Foram registrados dados de temperatura, umidade relativa do ar, radiao e velocidade do vento por meio de estao metereolgica localizada na rea. A atividade externa de M. subnitida foi maior nos meses de maio, junho e julho, com significativo decrscimo em agosto e setembro, perodo de poucas floradas na regio. A partir do final de setembro verificou-se aumento na atividade externa, o que pode estar relacionado ao perodo do florescimento do cajueiro. A coleta de alimento (plen e nctar) foi a atividade predominante, correspondendo a 73% da atividade externa. Os horrios de maior coleta de nctar foram 9:00 e 17:00, e de plen foi s 7:00. A coleta de barro, de resina e a atividade de limpeza foram maiores pela manh. Houve acentuado aumento na coleta de barro em setembro e outubro, coincidindo com a implantao de culturas irrigadas em rea prxima ao meliponrio. No houve correlao significativa entre as atividades estudadas e as condies ambientais no perodo. Apoio: FINEP Palavras-chaves: Abelhas indgenas, Meliponina, Atividade de vo, coleta, limpeza
511
ABELHAS (HYMENOPTERA, APIDAE) REGISTRADAS EM PRAAS DO MUNICPIO DE JUIZ DE FORA, MG

Lvia Cabral de Castro*, Fbio Prezoto Laboratrio de Ecologia Comportamental, Programa de Ps-Graduao em Cincias Biolgicas Comportamento e Biologia Animal, Universidade Federal de Juiz de Fora, MG liwinhacabral@yahoo.com.br O processo de urbanizao modifica o ambiente, alterando os locais de nidificao e diminuindo as fontes de recursos trficos de muitas espcies. A presena de reas verdes remanescentes, como praas e parques podem oferecer recursos a muitos animais. O objetivo desse trabalho foi verificar a abundncia de abelhas em reas urbanas. Foram realizadas coletas mensais em trs praas em Juiz de Fora, MG, de outubro/2007 a fevereiro/2008, totalizando 120h de coleta. Em cada coleta trs indivduos de cada espcie foram fixados, sendo os demais indivduos presentes registrados atravs de contagem. Foram contabilizados 4081 indivduos: 2126(52,10%) Trigona spinipes; 807(19,77%) Tetragonisca angustula; 535(13,11%) Nannotrigona testaceicornis; 470(11,52%) Apis mellifera e 143(3,5%) outras espcies. A abundncia significativamente maior (p= < 0,0001) de Trigona spinipes se deve ao fato dessa espcie exibir o hbito de coletar materiais como: tecidos florais, resina e partes do caule para a construo de seus ninhos. Os meses de outubro e fevereiro apresentaram maior nmero de abelhas forrageando, possivelmente por ser a poca de florao de duas espcies muito visitadas pelas abelhas, Euphorbia milii e Malvaviscus arboreus. Esses resultados demonstram a utilizao de recursos por poucas espcies abundantes em ambiente urbano. Apoio: UFJF e CAPES Palavras-chaves: Ambiente urbano, Abundncia, Apini, Praas, Trigona spinipes
512
EFEITO DA DIMINUIO DA DENSIDADE POPULACIONAL SOBRE O POP DE Scaptotrigona postica (HYMENOPTERA, MELIPONINA)
Genilson Rodrigues Ferreira Lima*, Lenira de Melo Lacerda, Gisele Garcia Azevedo, R, Sidnei Mateus Universidade Federal do Maranho UFMA; Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Rua V 9, Quadra 9, Residencial gua Branca 2, Bloco 1, Apto 002, Parque Shalon genilsonlima@hotmail.com A capacidade de auto-regulao das abelhas Meliponina tem sido testada em colnias classificadas como fracas, intermedirias e fortes. Tal classificao baseia-se, principalmente, na estimativa do tamanho da populao, do nmero de favos e de potes de alimento. Apesar disto pouco se sabe sobre o peso, dinmica e interaes entre esses aspectos. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da reduo da populao sobre os comportamentos ligados ao POP. Para isso foram feitas filmagens dos processos de postura de uma colnia com populao original e com populao reduzida. A maior parte dos resultados obtidos na colnia manipulada foi compatvel com outros observados em colnias fracas. Tais alteraes refletiram, principalmente, a influncia direta do reduzido nmero de operrias em atividade, e do menor numero de clulas construdas e aprovisionadas. Alguns resultados, no entanto, no seguiram tal tendncia. No houve alterao do nmero de descargas efetuadas nas colnias manipuladas, todavia as operrias ali produzidas apresentaram maior tamanho. Os resultados preliminares sugerem que a diminuio da populao aumentou a quantidade de alimento disponvel na colnia/indivduo, e esta se refletiu na maior quantidade de alimento contido no papo das mesmas. Melhor entendimento destes resultados depende de mais estudos e de informaes sobre o fluxo de alimento nos ninhos. Apoio: CNPq , CNPq/PIBIC Palavras-chaves: Aprovisionamento, Postura, Scaptotrigona postica, Populao alterada, Morfometria
513
SALIVA SERVING AS PHEROMONE CARRIER, SIGNALLING RESOURCE LOCATIONS IN TRIGONA BEES

Dirk Louis P. Schorkopf*, Stefan Jarau, Wittko Francke, Robert Twele, Ronaldo Zucchi4 Department for Neurobiology and Behavioral Sciences, University of Vienna; Department of Experimental Ecology, University of Ulm; Institute of Organic Chemistry, University of Hamburg; 4 Department of Biologia FFCLRP-USP Department for Neurobiology and Behavioral Sciences, University of Vienna, Althanstrasse14, 1090 Vienna AUSTRIA (EUROPE) Dirk-Louis.Schorkopf@univie.ac.at We show that the South American meliponine species Trigona spinipes (Fabricius 1793)uses its saliva to lay scent trails to communicate the location of profitable food sources,thereby affirming the labial gland hypothesis by Jarau et al. (2006). The labial gland hypothesis states that it is the labial gland (not the mandibular gland) which produces the scent trail pheromones in scent trail laying meliponines. Cephalic extracts of T. spinipes contain octyl octanoate as a major component and we found this volatile to be highly attractive to newly recruited bees when offered during recruitment experiments. Neither the mandibular nor the hypopharyngeal glands of foragers contained any octyl octanoate. However, the latter was abundant (approx. 74% of the volatile substances) in the saliva producing labial glands. We performed chemical analysis with conventional GC and GCMS methods. We also detected the active ester on substrates previously scent marked by foragers returning from a highly profitable sugar source (50% weight/weight unscented sugar solution provided via an artificial feeder) thereby proving that saliva is in fact deposited during scent marking sessions. By means of artificial scent trail experiments we behaviourally tested the significance of octyl octanoate as an active compound concluding that this single compound already elicits full trail following behaviour. By providing an example of a single compound pheromone in a meliponine bee, we considerably facilitate further insights to the scent trail biology in day flying insects. Apoio: FWF to F.G.B (P17530) and the German Fonds der Chemischen Industrie to W.F Palavras-chaves: communication, scent trail, flying insect, saliva
514
COMO Scaura longula (APIDAE, MELIPONINI) PROTEGE SEU NINHO ATRAINDO VESPAS OPORTUNSTICAS Polybia emaciata
Marilda Cortopassi-Laurino*, Mariana Taniguchi, Paulo Nogueira-Neto Laboratrio de Abelhas do IBUSP- So Paulo-SP; Dept. de Biologia FFCLRP-Ribeiro Preto-SP Rua do Mato, travessa 14, n321, 05508-900 mclaurin@usp.br O comportamento de proteo dos ninhos das abelhas sem ferro bastante amplo variando desde estruturas defensivas, nidificao em agregados ou junto com formigas, cupins e vespas at comportamento individual de beliscar a pele em locais sensveis como plpebras e narinas alm de vibrar nos plos e depositar grumos de resina no intruso. Scaura longula (jata negra), espcie dcil, nativa na regio de Gois onde foi observada em fevereiro de 2008, apresentou comportamento inusitado: ao longo de todo dia, abelhas campeiras que retornavam ao ninho depositavam uma ou duas gotculas muito densas, provavelmente nctar, nas proximidades da entrada, que eram rapidamente ingeridas por 1-3 vespas Polybia emaciata. Estas vespas investiam contra as prprias abelhas Scaura e uma barata que foi observada lambendo os detritos de lixo jogados na porta do ninho. Ao longo das observaes, as vespas chegavam cedo, ao mesmo tempo em que iniciava o movimento externo, entre 20.7-20.9C e 84-93% de UR e permaneciam at o final da tarde, quando comeava a escurecer. Havia dominncia de coleta destas gotculas por uma das vespas embora entre elas ocorresse trofalaxis. A maior parte das gotculas (60%, n=109) foi depositada ao redor de 10cm da entrada do ninho e ao longo do dia aumentou progressivamente at uma hora antes do pico do movimento externo, ocorrido as 16:00h, quando elas foram depositadas em at 30cm de distancia. Se este comportamento eventual, no conhecido, mas este perodo de interao abelha-vespa coincidiu com a ampliao do comprimento e largura da porta, provavelmente associado com fase de enxameao do ninho como ocorre em outras abelhas dceis, quando talvez a vulnerabilidade das abelhas e ninhos aumente. Outra possibilidade, independente do tempo, seria a recompensa do monitoramento pelas vespas porque esta abelha joga o lixo na porta, e deste lixo armazenado j emergiram pequenos lepidpteros. Apoio: FAPESP 04/15801-0 Palavras-chaves: Interaes, insetos sociais, Scaura longula, Polybia emaciata
515
RESULTADOS PRELIMINARES SOBRE A ATIVIDADE EXTERNA DE Melipona paraensis (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) EM UM MELIPONRIO NO DISTRITO DE FAZENDINHA, AMAP, BRASIL
Patrcia dos Santos Vilhena*, Richardson Ferreira Frazo, Arley Jos Silveira da Costa Ncleo de Estudos Cientficos e Tecnolgicos sobre Abelhas Regionais (NECTAR/UNIFAP) UNIFAP, Rod. JK, Km 02, PROPESPG, NECTAR, Bloco I, Bairro Universidade, Macap-AP, 68902-280 patricia.vilhena@hotmail.com Na Amaznia, os meliponneos representam o grupo mais diversificado dentro de Apidae, sendo que cada espcie exibe caractersticas comportamentais tpicas. No Amap, as comunidades tradicionais desenvolvem a prtica da meliponicultura, manejando abelhas como Melipona paraensis, portanto, importante identificar os aspectos comportamentais desta espcie, como a atividade de vo. O objetivo deste trabalho foi analisar a atividade de vo em M. paraensis. Neste estudo foram observadas colmias localizadas no Distrito de Fazendinha em Macap-AP entre 7:00 h e 18:00 h, por trs dias. O nmero de abelhas que entraram e saram das colmias foi registrado manualmente, com esforo de 5 minutos por colmia a cada hora. A atividade de vo apresentou uma distribuio bimodal, com os maiores fluxos ocorrendo entre 7:00 e 9:00 horas e entre 14:00 e 16:00 horas. O pico da tarde era em geral menor que o da manh, sendo que os registros de algumas colmias evidenciaram um registro unimodal com fluxo principal pela manh. Este estudo encontra-se em fase inicial e ser ampliado, considerando no apenas os horrios, mas tambm a interferncia de outros fatores ecolgicos sobre a atividade de vo de M. paraensis. Apoio: UNIFAP Palavras-chaves: forrageio, abelhas sem ferro, comportamento, meliponicultura, Amaznia
516
COLNIA MISTA DE Nannotrigona testaceicornis E Scaptotrigona aff. depilis (APIDAE: MELIPONINI) E INDIVDUOS PRODUZIDOS
Ktia Paula Aleixo*, Cristiano Menezes, Vera Lcia Imperatriz Fonseca *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil katialeixo@yahoo.com.br As colnias mistas representam um interessante material biolgico para estudar as interaes entre os insetos sociais. Podem ser formadas artificialmente, mas tambm ocorrem casos naturais ou espontneos, como foi registrado recentemente entre as espcies Scaptotrigona aff. depilis e Nannotrigona testaceicornis. A determinao de castas, bem como a produo de machos, um dos fenmenos que podem ser estudados pela formao de colnias mistas, e constitui o objeto principal do presente trabalho. Uma colnia mista foi preparada utilizando-se um ninho de N. testaceicornis, onde foi adicionado um favo contendo pupas de operrias de S. aff. depilis. As operrias desta espcie, maiores que as da primeira, conviveram pacificamente com as demais e, inclusive, construram clulas de cria tpicas de sua espcie, com volumes de alimento maiores do que as normalmente construdas pelas operrias de N. testaceicornis. Do total dos 383 indivduos analisados, as fmeas de N. testaceicornis representaram pouco mais de 90%, entre elas 32 rainhas. Os machos obtiveram uma representao de 7,57%, incluindo os de tamanho normal e gigante. Machos de S. aff. depilis contriburam com seis indivduos, filhos das operrias. A alta representatividade das rainhas de N. testaceicornis est relacionada oviposio realizada pela rainha dessa espcie em clulas construdas pelas operrias de S. aff. depilis. A ingesto de maior quantidade de alimento foi a causa dessa significncia, reforando a hiptese de que as castas so determinadas pela quantidade de alimento nas abelhas sem ferro, com exceo do gnero Melipona e das rainhas miniaturas. Para averiguar a possvel ocorrncia de operrias gigantes ou intercasta entre as fmeas, anlise por morfometria clssica est em andamento. Apoio: CNPq; FAPESP Palavras-chaves: Colnia mista, Determinao de castas, Rainhas, Nannotrigona , Scaptotrigona
517
POLIETISMO ETRIO ENTRE AS OPERRIAS DE Trigona pallens (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)

Filipi Rogrio Silva*, Sidnei Mateus, Ronaldo Zucchi *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil filipirsilva@yahoo.com.br As abelhas sem ferro (Meliponini) apresentam duas castas de fmeas bem diferenciadas com relao fisiologia, comportamento e morfologia. A funo da rainha basicamente reprodutiva, garantindo a continuidade da colnia. As operrias executam diferentes tarefas de acordo com a idade, como construo de clulas de cria, limpeza da colnia, cuidado com a prole e coleta de alimento. O objetivo do trabalho foi analisar a diviso de trabalho em operrias de Trigona pallens, verificando as idades correspondentes as diferentes tarefas realizadas dentro da colnia. Operrias recm emergidas foram marcadas (n=320) seguindo uma combinao de cores e devolvidas colnia. Diariamente foram realizadas observaes diretas e sesses de filmagens (27/04 a 07/07/2007) focando os indivduos marcados e as tarefas por eles executadas, fornecendo dados comportamentais individuais. A mdia de vida das operrias foi de 28,3 dias 10,9 com idade mxima de 67 dias. Tarefas relacionadas manuteno da colnia apresentaram as seguintes faixas de idade: retirada de cerume das clulas (1-19 dias; 5 dias 2,7), manipulao do batume (7-34 dias; 13,8 dias 6,3), manipulao do lixo (6-33 dias; 19,1 dias 6,1), construo de pilares (2-25 dias; 13 5,6). Atividades de forrageio ocorreram dos 19 aos 60 dias (33,9 dias 7,7). A participao no POP ocorreu dos 4 aos 11 dias de idade (6,9 dias 1,5), sendo a construo de clulas feita por operrias de 2 a 15 dias (6,5 dias 2,6). A seqncia de tarefas executadas pelas operrias de T. pallens semelhante ao de outras abelhas sem ferro podendo ocorrer variaes entres as espcies e devido s condies interna e externa da colnia. Apoio: FAPESP; CNPq Palavras-chaves: Polietismo etrio, Diviso de trabalho, Trigona pallens, Meliponini , Abelhas sem ferro
518
VISITANTES FLORAIS EM CULTURA DE CAF (Coffea arbica) NO MUNICPIO DE CARMO DO PARANABA - MG

Ana Paula Roncolato*, Guilherme dos Reis Vasconcelos, Andr Luiz Halak, Flvio Augusto Santos Silva, Darclet Teresinha Malerbo-Souza *Graduando em Agronomia do Centro Universitrio Moura Lacerda; Centro Universitrio Moura Lacerda Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510 Ribeiro Preto, Brasil anap_roncolato@hotmail.com Os objetivos desta pesquisa foram estudar a biodiversidade entomfila em flores de caf (Coffea arbica), a fim de verificar os insetos mais freqentes, bem como o seu comportamento. O experimento foi conduzido em Carmo do Paranaba, MG, no ms de outubro de 2006 e a variedade usada foi Catua Vermelho. Foram avaliados a freqncia das visitaes dos insetos e o tipo de coleta (nctar e/ou plen) desses insetos nas flores, no decorrer do dia, por meio de contagem nos primeiros 10 minutos de cada horrio, das 7h00 s 18h00, com trs repeties. Os insetos mais freqentes nas flores foram abelhas africanizadas (Apis mellifera) (73,96%), seguida das abelhas irapu (Trigona spinipes) (12,8%) e abelhas jata (Tetragonisca angustula) (6,6%). As abelhas africanizadas preferiram coletar nctar (73,2%) que plen (26,8%) e observou-se que, para nctar, essa abelha aumentou sua freqncia entre 9h00 e 10h00 e posteriormente s 14h00. Para plen, essa abelha visitou as flores at as 17h00, com pico de freqncia s 13h00 e 16h00. Apoio: Centro Universitrio Moura Lacerda Palavras-chaves: Polinizao, insetos, abelhas, caf, Coffea arbica
519
COMPORTAMENTO DE COLETA DE PLEN POR OPERRIAS DE Melipona flavolineata (Apidae: Meliponina) EM UM FRAGMENTO DE CERRADO NO MUNICPIO DE URBANO SANTO MA, BRASIL
Ccero Alves Lima Jr.*, Gisele Garcia Azevedo, Mrcio Romero Marques Carvalho, Lenira de Melo Lacerda,Sidnei Mateus Universidade Federal do Maranho - UFMA; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP AV. dos Portugueses, S/N - CEP 65085-580 So Lus - MA , Brasil gisabelha@yahoo.com.br Com o objetivo de caracterizar a atividade de coleta de plen de Melipona flavolineata, trs colnias instaladas em um fragmento de Cerrado foram observadas mensalmente, de nov./2005 a out./2006, das 5:30h s 18:30h. A cada hora, campeiras foram capturadas para retirada do plen das corbculas. Utilizou-se o mtodo de acetlise de Erdtman (1960) modificado. Os dados foram analisados pelo ndice de diversidade de Shannon-Wiener, correlao linear de Pearson e ANOVA. A atividade de coleta de plen foi mais intensa das 7:30 s 9:30 e das 16:30-17:30. Do total de 279 abelhas, 31 morfo- espcies foram identificadas, das quais 14 foram exclusivas do perodo chuvoso, 12 do perodo seco e 5 de ambos perodos. 84% das fontes pertenceram a apenas 13 morfo-espcies, sendo Arecaceae sp1 (19%), Myrtaceae sp2 (13%), Aechmea tocantina (7%), Solanaceae sp2 (10%), Mimosa caesalpinefolia (6%) e Myrtaceae sp1 (6%) as mais freqentes. A correlao linear de Pearson mostrou que a diversidade de fontes polnicas aumenta significativamente com o aumento de campeiras com plen ao longo do dia (p=0,0003), entretanto esse aumento na diversidade correspondeu coleta de fontes polnicas ocasionais (n=1 abelha) (Sapindaceae sp1, Stryphnodendron sp1 , Myrsia sp , Banara sp , Allamanda sp e Malvaceae sp1), sendo que 97% das abelhas de um mesmo horrio coletaram plen de uma nica morfo-espcie, o que sugere um mecanismo de recrutamento semelhante ao observado para fontes de nctar. A temperatura (p=0,0011) e a umidade (p=0,0022) foram correlacionadas significativamente com a atividade das campeiras, mas no foram significativas para o aumento da diversidade das fontes polnicas coletadas (p=0,06 e p=0,08 respectivamente). A sazonalidade no alterou significativamente a atividade diria de coleta de plen (ANOVA, p= 0,1265) nem a diversidade de fontes polnicas (p=0,2918). As grandes extenses de eucaliptais e matas ciliares podem explicar a prevalncia das famlias Arecaceae, Myrtaceae, Solanaceae e Leguminosaceae. Apoio: CNPq (proc. 471353/2004-3); Comercial Agrcola Paineiras Palavras-chaves: Meliponina, plen, forrageamento, Cerrado, abelha sem- ferro
520
COMPORTAMENTO DA ABELHA Euglossa sp. EM CULTURA DO URUCUM (Bixa orellana) PRESENTE NO MUNICPIO DE CAUCAIA, ESTADO DO CEAR
Francisca Ligia Aurelio Mesquita*,Thiago Mahlmann Vitoriano Lopes Muniz, Breno Magalhes Freitas Universidade Federal do Cear UFC Av. Mister Hull, s/n - Pici - CEP 60455-760 - Fortaleza CE, Brasil apisrainha@yahoo.com.br O urucuzeiro Bixa orellana na sua regio de origem, a Amaznia, uma planta que atrai muitos insetos e principalmente abelhas. Com base nisso objetivou-se acompanhar o comportamento de pastejo das abelhas nativas presentes na cultura do urucum na regio de Caucaia-CE durante 14 dias de observaes diretas no campo. As observaes foram feitas atravs de caminhadas com intervalos de uma hora, iniciando s 4:00 h. e finalizando s 15:00 h. Aps as observaes os insetos eram sacrificados com acetato de etila e posteriormente montados em alfinetes entomolgicos, devidamente etiquetados e identificados. Foi encontrado visitando os urucuzeiros espcies de abelhas das famlias Antophoridae, Halictidae, Andrenidae e Apidae, dentro desta ltima famlia foi observado o comportamento das abelhas Euglossa sp. que aproximavam-se da flor frontalmente e, ao pousarem, agarravam uma pequena parcela das anteras com suas mandbulas e pernas e realizavam movimentos vibratrios (buzz-pollination). Ao realizarem a vibrao nas anteras o plen era liberado, caindo sobre seu corpo. Aps a coleta realizavam comportamento de limpeza, pairando no ar no intervalo entre as visitas, transferindo plen de seu corpo para a corbcula, com auxlio das pernas anteriores e medianas, porm, grandes quantidades de gros de plen, ainda eram vistos sob seu abdmen. Habitualmente, um grande nmero de flores da mesma planta ou de plantas diferentes de Bixa orellana era visitado seqencialmente por essa abelha, apesar dessa espcie raramente ter sido vista tocando o estigma podemos concluir que as abelhas Euglossa sp. coletoras de plen apresenta comportamento caracterstico de agente polinizador efetivo do urucum. Apoio: Palavras-chaves: Comportamento, abelhas, Euglossa sp., urucuzeiros, pastejo
521
INTERAES ENTRE Oxytrigona tataira SMITH, 1863(HYMENOPTERA, APOIDEA, MELIPONINA) E HOMPTEROS EM UMA REA URBANA DE ARACAJU-SE
Larissa Batista Lima*, Kamila F.A. Santana, Maxwell Souza Silveira Universidade Tiradentes/Instituto de Tecnologia e Pesquisa AV. Murilo Dantas, Bairro Farolndia,49032-490, Aracaju, Sergipe limablarissa@yahoo.com.br Os meliponneos apresentam vrias associaes com outros grupos de insetos, eg. colepteros, formigas e trmitas, destacando-se a coleta de exudato em hompteros. Este estudo teve como objetivo identificar as principais interaes, a freqncia de atividade e os padres comportamentais de Oxytrigona tataira, durante a coleta de exudato em uma espcie de Homoptera. As interaes foram observadas em uma populao de hompteros presente em uma mangueira (Mangifera indica), localizada no Campus Farolndia da Universidade Tiradentes, em 24, 25 e 30 de maio de 2008, das 6:00 s 17:00h, totalizando dois dias de observaes. Foram marcados 6 galhos colonizados, com altura mdia de 1,65 m. Ao incio de cada dia de observao foi registrado o nmero de adultos e ninfas presentes em cada galho observado. A freqncia de visita e os padres comportamentais das abelhas foram observados durante 20 minutos, dentro de cada hora de observao. Os dados microclimticos de umidade e temperatura foram registrados em intervalos de 1h com o auxilio de um termo-higrometro digital. Exemplares dos hompteros foram coletados para identificao. Os galhos observados apresentaram 846 indivduos hompteros, sendo 71 adultos e 775 ninfas. Foram registradas 3390 visitas de O. tataira. Destas, 637 foram observadas coletando exudato. A maior freqncia de atividade foi registrada entre 9:00 e 14:00h, com temperatura mdia de 33C. Durante as vistas as abelhas tocavam os hompteros com as antenas. Foi observado que as abelhas desidratavam o exudato durante as visitas. As abelhas apresentaram comportamento agressivo em relao aproximao de outros insetos. O comportamento agressivo de O. tataira na presena de outros insetos durante as visitas pode representar proteo aos hompteros contra predadores, ou evitar competio. Apoio: Palavras-chaves: Comportamento, protocooperao, meliponneos, abelhas sem ferro, exudato
522
INFLUNCIA DO FLUXO ALIMENTAR NOS SINAIS DE RECRUTAMENTO (DANA E VIBRAES TORCICAS) EM Apis mellifera
Camila Maia - Silva*, Michael Hrncir , Walter Marcelo Farina *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Grupo de Estudio de Insectos Sociales, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires - Argentina Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil mimaiabio@hotmail.com Colnias de Apis mellifera exploram fontes ricas de nctar e plen. Sabe-se, que flores com maior volume de nctar e que oferecem maior ganho de energia so mais exploradas. As informaes (direo, distncia e qualidade do recurso) obtidas por uma forrageira so transmitidas para a colnia atravs de danas. Um parmetro importante para a transmisso de tais informaes so vibraes torcicas produzidas durante a dana. Visto que, a lucratividade (energia ganha menos energia gasta durante a coleta) um fator importante para a comunicao, o presente trabalho investigou a relao entre a lucratividade do recurso, a dana e as vibraes torcicas em Apis mellifera. O estudo foi realizado no Campo Experimental da Universidade de Buenos Aires (Argentina) em maro de 2008. Doze abelhas foram treinadas para forragear em um alimentador (localizado a 180m da colmia) contendo soluo de sacarose de concentrao constante (50%) que foi oferecida individualmente s abelhas em fluxos diferentes (4.5, 9.0 e 17.5l de soluo/min). No alimentador, registramos o tempo de coleta gasto por cada abelha e calculamos a quantidade de alimento ingerido multiplicando o tempo gasto pelo fluxo oferecido. No interior da colmia analisamos a probabilidade de dana e as vibraes torcicas produzidas por cada abelha, em cada fluxo. Observou-se que no fluxo alimentar de 4,5 l/min, o tempo gasto pelas abelhas no alimentador (10.62.8min) foi maior e a quantidade de alimento ingerida (47.7l) foi menor do que nos outros fluxos (9l/min: 6.71.8min, 60.6l; 17.5l/ min: 4.03.9min, 70.5l). A probabilidade de dana foi maior nos fluxos 9.0 e 17.5l/min do que no fluxo 4.5l/min (4.5l/min: 52.037.7%; 9l/min: 80.429.0%; 17.5l/min: 91.919.3%). Houve uma correlao positiva entre o fluxo alimentar e o nmero de pulsos vibratrios produzidos pelas abelhas dentro do ninho. Assim, conclumos que a lucratividade do recurso alimentar influencia os sinais de recrutamento em Apis mellifera. Apoio: CNPq; FAPESP - 06/50809-7; APNCyT (PICT2006-1155) Palavras-chaves: Apis mellifera, dana, vibraes torcicas, lucratividade do recurso, fluxo de alimento
523
VISITAO DE Apis mellifera NA CARAMBOLA (Averrhoa carambola L.)

Danielle de Abreu Silva*, Michelle de Oliveira Guimares, Weverton Filgueira Pacheco, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Breno Magalhes Freitas UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR - UFC Av. Mister Hull, s/n - Pici - CEP 60455-760 Fortaleza, CE, Brasil abreudielle@gmail.com O presente trabalho relata o comportamento da abelha Apis mellifera quando em visita s flores de carambola (Averrhoa carambola L.). As observaes de campo foram realizadas em plantas existentes no Setor de Horticultura do Departamento de Fitotecnia, pertencente ao Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal do Cear, durante o perodo compreendido entre 30 de janeiro e 07 de maro de 2007. Foram realizadas 94 observaes de acompanhamento de vo das abelhas entre as 06:00 e 17:00h, distribudas em nove dias durante este intervalo. Foram contados o nmero de flores e inflorescncias visitadas por viagem e cronometrado o tempo gasto nestas. Os resultados sugerem que as abelhas visitaram as flores da carambola apenas para coleta de nctar, j que no foi observado a existncia de plen nas corbculas. Os horrios com os maiores tempos de visitao s flores e/ou inflorescncias ocorreram entre as 10h e 12h (mdias de 20,46 flores em 9,19 inflorescncias), 14h (19,33 flores em 10,89 inflorescncias) e 17 horas (20,5 flores em 9,5 inflorescncias). Quanto aos tempos de visitao, ocorreu variao entre 64,75 e 113,75 segundos (s 13:00h e 16:00h, respectivamente). Dessa forma, supe-se que a carambola uma fonte de nctar para as abelhas, porm faz-se necessrio um estudo mais detalhado sobre a interao desta abelha com esta planta. Apoio: Palavras-chaves: abelha melfera, carambola, nctar
524
EFEITO DA PRESENA DE ABELHAS FORRAGEADORAS DURANTE O PERODO DIURNO E NOTURNO NO COMPORTAMENTO HIGINICO REALIZADO PELAS ABELHAS AFRICANIZADAS Apis mellifera L.
Vanessa de Andrade Bugalho, Tiago Maurcio Francoy, Lionel Segui Gonalves Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Programa de Ps-Graduao em Entomologia - Laboratrio de Biologia e Gentica de Abelhas Av. Bandeirantes, 3900 - 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil vanessabugalho@usp.br Dentre as diversas atividades desempenhadas pelas operrias de Apis mellifera, o forrageamento a ltima delas. Sabe-se, entretanto que tal polietismo no uma estrutura rgida, podendo variar conforme as necessidades da colnia. Portanto, o objetivo deste trabalho verificar se as abelhas forrageadoras influenciam durante a noite (perodo, no qual existe pouca ou nenhuma coleta de recursos) na realizao do comportamento higinico (CH), comumente realizado por abelhas mais jovens. Foram escolhidas aleatoriamente seis colnias de abelhas africanizadas. Dois quadros-testes de CH foram introduzidos em cada colmia, um s 12:00 horas e recolhido s 22 horas, permanecendo, 10 horas na colmia, das quais, 6 horas as campeiras estavam forrageando e 4 horas estavam dentro da colmia. Um outro teste foi introduzido s 0:00 hora e recolhido s 10 horas, permanecendo, portanto, em situao inversa. Assim, cada quadro foi trabalhado por populaes diferentes em tamanho e tipo de abelhas (forrageiras, etc). Registradores automticos de atividades de vo dotados de foto-clulas (Apidmetros) foram instalados nas colnias para confirmar o padro de atividade de vo das abelhas durante os experimentos. Foram feitas duas repeties. A mdia (%) do CH das seis colnias analisadas em cada repetio: das 12:00h s 22:00h e das 0:00h s 10:00h foram respectivamente de 2,8% e 3,7% no primeiro teste e de 1,4% e 4,8% no segundo. A mdia entre os dois testes foi de 2,1% e 4,3%. A baixa porcentagem do CH atribuda ao reduzido tempo de permanncia do teste no interior da colmia, porm mesmo assim possvel ser observado que o maior ndice de remoo total foi encontrado nos quadros-testes que permaneceram por mais tempo no perodo noturno. Novos testes so necessrios para comprovao dos resultados obtidos e para compreendermos melhor o efeito da presena de abelhas forrageadoras no comportamento higinico das abelhas africanizadas. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Polietismo etrio, Comportamento higinico, Forrageamento, Perodo diurno e noturno, Abelhas Africanizadas
525
COMPARAO DE ALGUNS PARMETROS TEMPORAIS RELACIONADOS DIVISO DE TRABALHO DENTRO DE COLMIAS HIGINICAS E NO HIGINICAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS Apis mellifera
Michelle Manfrini Morais*, Vanessa de Andrade Bugalho, Tiago Maurcio Francoy, Rogrio Ap. Pereira, Lionel Segui Gonalves Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil mmanfrini@rge.fmrp.usp.br Em abelhas africanizadas (Apis mellifera), as operrias realizam diferentes tarefas em distintas pocas de suas vidas. Estas diferentes tarefas so conhecidas por diviso de trabalho. No entanto, tal diviso entre as operrias das abelhas sociais temporal e dinmica e varia com a idade, necessidades da colnia e condies ambientais. Assim, torna-se objetivo do nosso trabalho observar detalhadamente as tarefas realizadas pelas operrias em cada idade dentro de colmias selecionadas higinica e no higinica. Sendo assim, um total de 1000 operrias (500 higinicas e 500 no higinicas) recm nascidas foram marcadas com etiquetas numeradas e coloridas fixadas no trax para identificao individual e introduzidas dentro das colmias de observao. Observaes dirias foram realizadas durante os primeiros 28 dias de vida adulta das operrias introduzidas nas colmias. Tais observaes consistiam do acompanhamento individual de 20 operrias (escolhidas ao acaso) por idade sendo que cada operria era observada por 15 minutos, perfazendo um total de cinco horas dirias. As tarefas observadas foram anotadas em uma planilha de tarefas e posteriormente transformadas em curvas de probabilidade relativa de execuo de tarefas. Uma anlise detalhada dos etogramas confeccionados para as diferentes linhagens (H e NH), revelou que os perodos de atividades observados e comparados para as linhagens durante a execuo das tarefas de atendimento das crias, operculao das clulas de cria, remoo de escombros e ventilao, foram respectivamente de 2 a 15 dias (H) e 1 a 17 dias (NH), de 4 a 15 dias (H) e 2 a 14 dias (NH), de 6 a 28 dias (H) e de 7 a 28 dias (NH), de 8 a 27 dias (H) e de 10 a 28 dias (NH). Dessa forma, pudemos concluir que mesmo observando a diviso de trabalho dentro de linhagens selecionadas, as operrias no apresentam diferenas estatsticas significativas para os diferentes comportamentos registrados. Apoio: Capes e Cnpq Palavras-chaves: Diviso de Trabalho, Abelhas Africanizadas, Higinica, No Higinica
526
UTILIZAO DE PORTA-ISCA PARA OBSERVAO DA ATIVIDADE DE VO DOS MACHOS DE EUGLOSSINA (HYMENOPTERA, APIDAE)
Pedro Nascimento Melo*, Miriam Gimenes *UCSal - Universidade Catlica do Salvador, Instituto de Cincias Biolgicas; Universidade Estadual de Feira de Santana, Departamento de Cincias Biolgicas Avenida Pinto de Aguiar, Pituau, 41740-090, Salvador, Bahia, Brasil biopedro@uol.com.br As abelhas da subtribo Euglossina (Hymenoptera, Apidae, Apini) distribuem-se entre cinco gneros e apresentam de 175 a 200 espcies. Os machos so especializados em coletar compostos odorferos em flores de vrias espcies de angiospermas, principalmente nas orqudeas. A utilizao de tcnicas de captura e observao dessas abelhas por meio de iscas odorferas e armadilhas tem permitido o avano dos estudos em vrios campos da biologia e ecologia desses animais. Durante um estudo realizado em um fragmento de mata no municpio de Salvador, Bahia, Brasil, sobre o ritmo de atividades dirias dos machos de Euglossina, desenvolveu-se um sistema de porta-isca para atrair essas abelhas. Cada sistema era constitudo por um chumao de algodo com cerca de 2 cm de dimetro, embebido em uma das fragrncias utilizadas no estudo e colocado dentro de um coletor plstico de cor branca, utilizado em anlises clnicas, no qual foram feitas oito perfuraes de 3 mm de dimetro. Cada recipiente foi preso a um fio de nylon amarrado a um pequeno gancho metlico preso tampa plstica, sobre a qual foi fixada uma lmina de alumnio no ponto de insero do gancho. A utilizao dessa tcnica evitou que durante os momentos de chuva as iscas fossem lavadas pela gua, facilitando o estudo de campo, alm de ampliar a superfcie de pouso dos machos durante a coleta dos compostos. Apoio: Programa de Ps-graduao em Ecologia e Biomonitoramento, Instituto de Biologia, Universidade Federal da Bahia Palavras-chaves: Iscas qumicas, Euglossina, Atividades dirias, Fragmento de mata, Armadilha
527
MACHOS DE Ceblurgus longipalpis (ROPHITINAE: HALICTIDAE) GUARDAM ALIMENTO/RECURSO PARA COPULAR

Paulo Milet-Pinheiro*, Airton Torres Carvalho, Reisla Oliveira, Clemens Schlindwein *Departamento de Botnica, Universidade Federal de Pernambuco. Programa de Ps Graduao em Cincias Biolgicas, Zoologia, Universidade Federal da Paraba Av. Prof. Moraes Rego, s/n, 50670-901 Recife, PE - Brasil miletpinheiro@hotmail.com Ceblurgus longipalpis o nico representante de Rophitinae (Halictidae) no Brasil. Fmeas da espcie so monolticas em flores de Cordia leucocephala (Cordiaceae), sendo abelha e planta endmicas da Caatinga. Neste estudo acompanhamos machos de C. longipalpis marcados individualmente e descrevemos as estratgias por eles utilizadas para se acasalar. Os machos de C. longipalpis recorreram s flores de C. leucocephala em busca de parceiras e utilizaram duas estratgias de acasalamento: defesa de territrios e patrulha aleatria sobre flores. Territrios foram estabelecidos aps interaes agressivas entre machos, antes da chegada das fmeas nas flores. Machos territoriais guardaram de 257 a 443 flores de Cordia, as defendendo contra machos co-especficos e outros insetos visitantes florais. Eles patrulharam ativamente em busca de parcerias, percorrendo rotas fixas e pousando nas mesmas inflorescncias, em geral as com maior nmero de flores do territrio. Apesar de fiis ao stio do seu territrio, aps a atividade de patrulha, machos dormiram em flores nos arredores. Os machos escolheram apenas flores longistila e seguraram o estilete com suas mandbulas, o que evitou a queda das flores. Foram observadas at trs cpulas dirias por macho territorial e nenhuma por machos furtivos. Estes vistoriavam flores de vrios territrios e eventualmente expulsaram seu guardio por meio de mordidas e perseguies em vo. Durante a cpula, os machos seguraram o metassoma das fmeas com suas grandes mandbulas e com um movimento rpido do abdome introduziram sua genitlia. As cpulas duraram no mximo 2 segundos. A patrulha de machos em flores de plantas-recurso um fenmeno comum entre as abelhas oligolticas. Apesar da defesa de territrios envolver embates contra intrusos e maior risco de predao, a guarda de recursos para fmeas e suas crias parece garantir vantagens na corrida por cpulas. Apoio: CNPq-Universal, UFPE Palavras-chaves: Abelhas solitrias, Caatinga, Estratgias de acasalamento, Oligoletia, Territrio
528
RAIO DE VO DE Frieseomelitta varia (APIDAE: APINAE: MELIPONINI)

Ana Rita Tavares de Oliveira Baptistella*, Camila Calixto Moreira de Souza, Ivan Paulo Akatsu, Ademilson Espencer Egea Soares *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil anarbaptistella@yahoo.com.br As abelhas indgenas Frieseomelitta varia esto amplamente distribudas na regio Pantropical desempenhando um papel importante na polinizao da flora brasileira. Dados sobre o raio de vo de operrias desta espcie so importantes para os ecossistemas tropicais, porque podem ser usados para formular modelos de dinmica populacional e conservao da biodiversidade em fragmentos florestais. As observaes esto sendo realizadas no campus USP Ribeiro Preto, com rea de 574,638 ha. A fim de testar o raio de vo de operrias de Frieseomelitta varia, pontos lineares a cada 100 metros da colnia foram marcados, totalizando 1000 metros de distncia. Operrias foram capturadas na entrada do ninho (n=200) e marcadas no trax com tinta atxica de diferentes cores, formando 10 grupos de 20 operrias cada. Os pontos foram posicionados utilizando-se o GPS (Global Position System) e imediatamente as operrias foram soltas. Os dados foram coletados durante trs horas aps a liberao das operrias atravs do mtodo de soltura - recaptura. Das 200 operrias soltas no trajeto de 1000 metros, 89 indivduos retornaram colnia. Nos quatro primeiros pontos (100, 200, 300 e 400 metros), o sucesso no retorno das abelhas foi superior a 50% (85%, 74%, 68 % e 65%, respectivamente) indicando que possivelmente nestas distncias a atividade de forrageio seja mais intensa. Nas distncias de 500, 600 e 700 metros, as operrias retornam colnia, no entanto em porcentagens inferiores a 50% (40%, 45% e 30%). Nos trs ltimos pontos (800, 900 e 1000 metros) o sucesso no retorno das operrias foi igual a 15%, mostrando uma maior dificuldade em se orientar quanto localidade do ninho, indicando que em distncias superiores a 1000 metros o raio de vo das operrias tende a diminuir. No entanto, para ratificar esta informao, mais alguns dados sero tomados. Apoio: Capes Palavras-chaves: Frieseomelitta varia, atividade de vo, abelhas sem fero
529
ATIVIDADE DE COLETA DA ABELHA Apis mellifera NO DECORRER DO ANO

Flavio Augusto Santos Silva*, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Andr Luis Santos Silva, Andr Luiz Halak, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos *Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto, SP Professora do Centro Universitrio Moura Lacerda Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510, Ribeiro Preto, Brasil silvasantos10@yahoo.com.br Este experimento foi conduzido com o objetivo de estudar a atividade de coleta da abelha africanizada Apis mellifera, no decorrer do ano, em Ribeiro Preto, SP, Brasil. Para isso, foi avaliado o nmero de abelhas que entravam na colmia, com plen ou com nctar, nos primeiros 10 minutos de cada horrio, das 7h00 s 18h00, com 12 repeties, sendo cada repetio em um ms diferente (de maro de 2007 a fevereiro de 2008). Observou-se que as abelhas preferiram coletar nctar (73,8%) comparado coleta de plen (26,2%). Para nctar, foi observado que o pico de coleta aconteceu nos meses de maro de 2007 e fevereiro de 2008, sendo que o ms com menor atividade foi maio de 2007. Entretanto, para plen, o pico de atividade de coleta ocorreu entre os meses de abril e maio de 2007, sendo que as piores avaliaes foram entre setembro e outubro de 2007. No decorrer do dia, observou-se que essas abelhas preferiram coletar plen no perodo da manh. Para nctar, a atividade foi registrada durante todo o dia. Apoio: FAPESP 06/59604-9 Palavras-chaves: Apis mellifera, Atividade de coleta, nctar, plen
530
NOTA SOBRE ALGUMAS ABELHAS-SEMFERRO (MELIPONINI) DA AMAZNIA CENTRAL E SUAS ESTRATGIAS PARA A COLETA DE PLEN: OPORTUNISMO E ROUBO
Charles Fernando dos Santos*, Maria Lcia Absy *Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia (INPA), Ps-Graduao em Biologia Tropical e Recursos Naturais; Laboratrio de Palinologia (CPBO/ INPA) Av. Andr Arajo, n 2936, Aleixo, 69060-000, Manaus, Brasil charles-fs@bol.com.br Algumas espcies de plantas possuem flores cujas estruturas impedem a coleta de recompensas por determinadas abelhas. Em castanheira-do-Brasil (Bertholletia excelsa Humb. & Bonpl.: Lecythidaceae), por exemplo, suas flores possuem uma estrutura em forma de capuz, denominada lgula, a qual as abelhas-sem-ferro (Meliponini) no conseguem manipular. Esse estudo apresenta algumas observaes sobre o comportamento de algumas Meliponini com relao coleta de plen em B. excelsa, realizadas adicionalmente, ao trabalho de mestrado do primeiro autor. O cultivo de castanheira estudado localiza-se na Fazenda Aruan Itacoatira/ Amazonas (5845`W, 32`S). Durante o perodo de novembro de 2006 a janeiro de 2007, com o auxlio de andaimes, foram feitas observaes e coletas de visitantes florais em nove indivduos de B. excelsa. Os registros foram feitos, mensalmente, em trs rvores diferentes, com permanncia de trs dias consecutivos em cada uma, durante as 05:00 s 11:00 horas. Seis espcies de Meliponini foram observadas no apenas influenciando o forrageio de duas importantes polinizadoras (Xylocopa frontalis e Eulaema mocsaryi) como, tambm, tendo acesso de modo ilegtimo aos gros de plen da castanheira: Friseomelitta trichocerata, Tetragona goettei e Tetragona kaieteurensis (oportunistas) e Trigona branneri, Trigona fuscipennis e Trigona guianae (ladras). As oportunistas coletavam gros de plen que caam nas folhas devido atividade de manipulao floral realizada pelos polinizadores ou entravam em flores semiabertas aps sada repentina do polinizador; sada essa devido a um toque que as oportunistas, discretamente, davam nos polinizadores quando estes estavam dentro das flores. As ladras atacavam os polinizadores que portavam carregamentos polnicos e os roubavam. Um agrupamento de T. fuscipennis, inclusive, perfuravam flores cadas no cho e coletavam plen. Em abelhas eusociais, a atividade de operrias campeiras que agem como oportunistas e ladras uma estratgia que, embora possa interferir no forrageio de polinizadores efetivos, beneficia suas colnias, pois ampliam o nicho polnico delas. Apoio: CNPQ (Bolsa Mestrado); CNPq Edital Universal (proc. 472563/2006-8); Laboratrio de Abelhas (IB/USP) Palavras-chaves: forrageio, plen, meliponini, mansido, agressividade
531
VISITANTES FLORAIS DO ALGODOEIRO Gossypium hirsutum EM QUIXERAMOBIM E QUIXER NO ESTADO DO CEAR

Eva Monica Sarmento da Silva*, Breno Magalhes Freitas, Mrcia de Ftima Ribeiro, Thiago Mahlmann Lopes, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo *UNIVERSIDADE FEDERALDO VALE DO SO FRANCISCO- UNIVASF; UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR UFC; 3 EMBRAPA-SEMI-RIDO Avenida Presidente Tancredo Neves, 100 Centro Petrolina, PE, Brasil evasarmento@yahoo.com.br O objetivo deste estudo foi investigar os visitantes florais em reas de algodoeiro comercial, cultivar 187 8H, nos municpios de Quixeramobim e Quixer, Cear. O cultivo em Quixeramobim foi feito em uma rea de 15.000 m2, circundada por vegetao nativa. Quando as plantas comearam a florescer foi utilizado o inseticida de nome comercial Thiodan para combater insetos-praga. As aplicaes foram feitas de forma manual no final da tarde, a cada intervalo de oito dias. Em Quixer, a cultura foi implantada em uma rea de 240.000 m2 adjacente a outros plantios com a mesma cultura. Quando as plantas comearam a florescer foi aplicado o mesmo pesticida usado em Quixeramobim. Porm, as aplicaes foram realizadas de forma mecnica, e no havia intervalos regulares de aplicao. Alm disso, no havia horrio estabelecido para as aplicaes, em funo da disponibilidade de mo-de-obra e equipamentos. Os insetos foram observados, contados e capturados por meio de caminhadas em zigue-zague entre as fileiras do algodoeiro, nas reas de Quixeramobim e Quixer. Nas duas reas estudadas, vrias espcies de insetos foram coletadas visitando as flores do algodoeiro:Apis mellifera, Brachygastra lecheguana, Polybia ignobilis, Ancyloscelis sp.1, Ancyloscelis sp.2, Melissoptila uncicornis, Psaenythia sp., Anthrenoides sp. , sendo as trs ltimas espcies novas ocorrncias para o estado do Cear. Todas as espcies observadas visitando as flores do algodoeiro em Quixeramobim estavam tambm presentes nos cultivos de Quixer, exceto Ancyloscelis sp. 1. Por outro lado, em Quixer foram observadas duas outras espcies de abelhas no verificadas em Quixeramobim (Psaenythia sp. 1 e Andrenoides sp. 1). Observou-se que Quixeramobim (n=314) o nmero de visitantes florais foi muito superior ao verificado em Quixer (n=94), possivelmente devido s diferenas no uso de defensivos agrcolas, tamanho das reas e proximidade da mata nativa. Concluiu-se que abelhas e vespas constituem os principais visitantes florais do algodoeiro em Quixeramobim e Quixer. Apoio: CNPq; FACEPE Palavras-chaves: Visita, Comportamento, Diversidade de visitantes, Algodo, Visitantes florais
532
COMPORTAMENTO DE Bombus morio NAS FLORES DE URUCUM

Sheila Alves Abreu*, Rita de Cssia de Souza Carvalho, Ricardo Moreira Santos, Raquel Prez-Maluf Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia - UESB Labisa, Dept. de Cincias Naturais, UESB. Estrada do Bem Querer, Km 04. Vitria da Conquista, BA sheuabreu21@yahoo.com.br O urucum uma cultura perene bem adaptada s condies do semi-rido, podendo representar uma alternativa econmica importante com a produo de corantes naturais para a indstria alimentcia. Estudos indicam a predominncia da polinizao cruzada para o urucum, evidenciando a necessidade de agentes polinizadores. Abelhas de mdio-grande porte so associadas polinizao do urucum por serem capazes de provocar a vibrao das anteras poricidas, liberando os gros de plen. Neste estudo, observou-se o comportamento de Bombus morio nas flores de urucum na florada de janeiro e fevereiro de 2008. Foram feitas observaes ao longo de trs intervalos de 20 min, no perodo matutino, horrio de maior atividade de abelhas nas flores, registrando-se o tempo de forrageio e o nmero de flores visitadas por planta. Ao todo, foram observados 86 indivduos. O nmero mdio de flores visitadas por vo de forrageio foi de 10, 5s, sempre na mesma planta. O tempo mdio de permanncia na planta foi de 45,1s e o tempo mdio de permanncia em cada flor foi estimado em 4,2s. As abelhas aproximavam-se das flores e vibravam ativamente as anteras, produzindo um zumbido caracterstico. O comportamento de deslocamento de Bombus morio nas flores favorece a autopolinizao com a transferncia de plen entre flores da mesma planta. Apoio: UESB; FAPESB; CNPQ Palavras-chaves: polinizao por vibrao, Bixa orellana, estratgias reprodutivas
533
RELAO ENTRE A REA DA CORBCULA, QUANTIDADE DE PLEN TRANSPORTADO E O PESO DA OPERRIA DE Apis mellifera
Daniel Comiran Dallasta*, Angelair Rodrigues Balbino, Valter Vieira Alves Jnior, Anna Ktia Brizola Bonacina, Matheus Comiran Dallasta * Faculdade de Cincias Agrrias - Universidade Federal da Grande Dourados; Faculdade de Cincias Biolgicas e Ambientais - Universidade Federal da Grande Dourados; Departamento de Biologia, Instituto de Biocincias - UNESP, Rio Claro-SP Rodovia Dourados/Itahum KM 12 Cx. Postal 322, 79804-970 Dourados, MS, Brasil dallasta10@yahoo.com.br As abelhas so polinizadoras primrias e constituem a maior diversidade de visitantes florais entre os insetos. Elas utilizam as flores para a obteno de nctar, como fonte de energia e de plen, que consiste na fonte protica para as abelhas. Diversos organismos podem executar a tarefa de polinizao, entretanto, observa-se que para um elevado nmero de plantas cultivadas, o mais eficiente polinizador a abelha Apis mellifera, pertencente famlia Apidae. Nesta famlia, as operrias transportam o plen em uma estrutura especializada localizada nas pernas posteriores, a corbcula, que consiste numa expanso cncava da tbia, ladeada por plos longos e fortes. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a quantidade (peso) total de plen por corbcula transportado pelas operrias, relacionar a rea dessa estrutura com a quantidade de plen, e o peso do indivduo com sua capacidade de transporte. Foram coletadas, de 5 colnias distintas, 30 operrias com plen nas corbculas, para avaliao. As bolotas de plen foram individualizadas secas, pesadas e relacionadas com a rea da corbcula em que se encontrava. Aps serem sacrificadas, as abelhas cuja capacidade de transporte foi avaliada, permaneceram em estufa por 24 horas e o seu peso seco corporal aferido e relacionado com a carga polnica transportada. Os resultados indicaram que a quantidade de plen transportada equivalente para as duas corbculas; os valores obtidos da anlise de Correlao de Pearson (rs) entre a rea de cada corbcula e a quantidade de plen transportado, foram muito prximos de zero, sugerindo fraca relao de dependncia entre essas variveis sendo, rs= 0,141961 para a corbcula direita e rs= 0,075217 para a esquerda. Quanto ao total de plen transportado e o peso da operria, encontrou-se um ndice de relao de 7,84%, no indicando dependncia entre as duas variveis, rs= 0,16534. Apoio: Palavras-chaves: Transporte de plen, Corbcula, Abelha
534
COMPORTAMENTO DE PASTEJO DA ABELHA Apis mellifera NAS FLORES DE GERGELIM (Sesamum indicus)
Patrcia Barreto de Andrade*, Eva Mnica Sarmento da Silva, Breno Magalhes Freitas Universidade Federal do Cear - UFC Av. Mister Hull, s/n - Pici - CEP 60455-760 - Fortaleza - CE, Brasil patricia-ba@hotmail.com Neste trabalho pretendeu-se determinar o comportamento de pastejo da abelha Apis mellifera atravs da atividade de vo: nmero de flores visitadas por abelha, tempo de permanncia na flor, tipo de alimento coletado e horrio de visita. O presente trabalho foi realizado no municpio de Sousa, Paraba. Os dados foram coletados nas flores de gergelim (Sesamum indicus) das 7:00h s 17:00h, em um perodo de 5 dias. O acompanhamento de vo foi feito em cada horrio. Dentre as abelhas em atividade nas flores, escolheu-se uma e registrou-se o nmero de flores que ela visitava com um contador manual, cronometrando o tempo que permanecia nas flores e o tipo de alimento coletado. Esse monitoramento foi realizado at o momento em que a abelha ia embora ou era perdida de vista. Elas concentraram as visitas nas flores para coleta de plen at s 9:00h, com um pico de nmero de flores visitadas s 7:00h. As abelhas gastaram em mdia 35 s em cada visita a uma flor e visitaram em mdia 3,8 flores. Para a coleta de nctar, as abelhas concentraram as visitas s flores no perodo da tarde com a maior freqncia s 14:00h e deram preferncia aos nectrios extraflorais, no tendo contato com os rgos reprodutivos da flor do gergelim. Os valores mdios obtidos nas visitas foram de 209,8 s e uma visita mdia de 17 flores. Quanto coleta de nctar nos nectrios florais, esta foi realizada atravs de orifcios na parte superior das ptalas feitos por abelhas Xylocopa. Uma vez usando esse recurso, as campeiras de Apis passavam a visitar somente flores perfuradas, com mdias de 7,8 flores por viagem e 82,6 s por visita. Conclui-se que apenas as coletoras de plen possuem potencial para atuarem como polnizadoras da cultura, necessitando investigaes neste sentido. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Apis mellifera, gergelim, freqncia, nctar extrafloral, plen
535
COMPARAO DO COMPORTAMENTO HIGINICO DE ABELHAS AFRICANIZADAS Apis mellifera EM PERODOS DIURNO E NOTURNO EM TRS TIPOS DE FAVOS
Rogrio Aparecido Pereira*, Michele Manfrini Morais, Tiago Mauricio Francoy, Lionel Segui Gonalves Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida dos Bandeirantes, 3900 - 14040-901 Ribeiro Preto, SP, Brasil pereiraro@uol.com.br O presente trabalho, realizado na USP de Ribeiro Preto teve como objetivo, verificar se as abelhas realizam o comportamento higinico com a mesma eficincia em perodos diurno e noturno em trs tipos de favos (novos, velhos e congelados). Foram utilizadas duas colmias de observao (1 higinica e 1 no higinica) contendo aproximadamente, cada uma, 3000 abelhas marcadas com etiquetas coloridas e numeradas fixadas no trax. Verificou-se que o tempo gasto pelas operrias para desopercular as clulas de crias, esteve bem prximos em ambos perodos e em ambas colmias. Na colmia higinica, nos favos novos, encontrou-se uma mdia de 26 e 24 segundos para os perodos diurno e noturno respectivamente, nos favos velhos, 45 (perodo diurno) e 41 (perodo noturno) segundos e nos favos congelados, 33 e 32 segundos nos perodos diurno e noturno, respectivamente. J, na colmia no higinica, as mdias encontradas foram de 26 segundos para os favos novos em ambos perodos, nos favos velhos 40 segundos no perodo diurno e 35 segundos no perodo noturno, e nos favos congelados uma mdia de 42 e 32 segundos para os perodos diurno e noturno, respectivamente. J para a remoo da cria, os valores mdios encontrados foram: favos novos, 8,3 e 7,1 minutos no perodo diurno e noturno, respectivamente, favos velhos 7,2 (diurno) e 5,4 (noturno) minutos, e favos congelados, 4,6 minutos em ambos perodos. Na colmia no higinica, nos favos novos, a mdia foi de 8,3 e 7,7 minutos, em perodo diurno e noturno, respectivamente, nos favos velhos 6,9 minutos no perodo diurno e 10,7 minutos no perodo noturno, e para os favos congelados uma mdia de 5,1 e 3,8 minutos, em perodos diurno e noturno, respectivamente. Os resultados obtidos da anlise de varincia com relao ao tempo de desoperculao e remoo mostraram haver uma diferena estatisticamente significativa (p = <0.001) quando se compara os trs tratamentos, no entanto, esta diferena esteve mais relacionada ao tipo de favo do que ao perodo do dia em que foi realizado o teste. Apoio: CAPES Palavras-chaves: comportamento higinico, Apis mellifera, favos novos, favos velhos, favos congelados
536
BIOLOGIA DE NIDIFICAO DE Xylocopa (Neoxylocopa) frontalis (OLIVIER) (HYMENOPTERA, APIDAE, XYLOCOPINI) EM MORRETES, PR, BRASIL
Paola Marchi*, Gabriel A. R. Melo
Universidade federal do Paran - UFPR Caixa Postal 19020, 81531-980 Curitiba-PR, Brasil paola@ufpr.br Este estudo acompanhou as atividades de Xylocopa (Neoxylocopa) frontalis (Olivier, 1789) em uma agregao de ninhos no municpio de Morretes, Paran, onde esta espcie a principal agente polinizadora de Passiflora edulis (maracuj azedo), cultivo predominante na regio. Foram observados o ciclo anual das abelhas, a seleo dos substratos e a aceitao de ninhos-armadilha feitos com quadros de madeira ou de gomos de bambus durante o ano de 2006. Nesta regio a espcie X. frontalis foi univoltina, com maior freqncia de fundao dos ninhos entre outubro e dezembro. As atividades externas aos ninhos iniciaram-se mais cedo no vero e se restringiram aos horrios mais quentes no inverno, e quando correlacionadas mensalmente com o clima, os valores de temperatura mnima foram os que mais influenciaram o nmero de vos. O nmero de fundaes de ninhos foi fortemente associado s mdias climticas histricos da regio de dois meses adiante s fundaes, sugerindo que as abelhas poderiam prever uma melhor poca em relao precipitao, temperatura e fotoperodo para o nascimento da sua prxima gerao. Durante o perodo de florao de P. edulis, houve sincronia entre as atividades dirias de X. frontalis com o horrio de abertura das flores. Os inimigos naturais foram Cissites maculata Swederus, 1787 (Meloidae) e uma espcie do gnero Leucospis Fabricius, 1775. Apoio: CNPQ Palavras-chaves: Atividades externas, mamangavas, ninhos, polinizadores
537
CARACTERIZAO DO PROCESSO DE CONSTRUO E APROVISIONAMENTO DE CLULAS DE CRIA (POP) DE Melipona (Michmelia) flavolineata Friese, 1900 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA EM COLNIAS COM DIFERENTES TAMANHOS POPULACIONAIS
Marcos Henrique Rodrigues Carvalho, Gisele Garcia Azevedo, Lenira de Melo Lacerda, Alexandre Santana Azevedo Universidade Federal do Maranho - UFMA Rua Bom Clima, n 27, Bairro Anil, So Lus - Maranho, Brasil marcoshrc@hotmail.com Na regio Nordeste do Maranho, Melipona (Michmelia) flavolineata conhecida popularmente como uruu. O estudo do processo de postura e aprovisionamento de clulas de cria (POP) ferramenta importante para a compreenso do ritmo dirio e manuteno das colnias. O objetivo desse trabalho foi caracterizar o POP de Melipona flavolineata em colnias com diferentes condies de alimento e populao. Os resultados mostram que colnias fracas so diferentes quantitativa e qualitativamente de colnias fortes. Em decorrncia do menor nmero de operrias, o nmero de clulas construdas e aprovisionadas/POP foi menor. As colnias fortes e fracas construram e aprovisionaram suas clulas sucessivamente, entretanto, o nmero de clulas tratadas/POP ocorreu de forma facultativamente grupado na colnia forte e exclusivamente unitria na fraca. A durao total do POP em colnia fraca foi longo, resultante da maior durao dos estgios de pr-aprovisionamento (pr), aprovisionamento(p), ps-aprovisionamento (ps) e operculao(s). Relacionando nmero mdio de aprovisionamentos/clula e o tamanho das operrias produzidas em colnias fortes e fracas, observou-se que em mdia realizado maior nmero de aprovisionamentos em colnias fracas, porm so produzidos indivduos menores, sugerindo uma menor quantidade relativa de alimento no papo das aprovisionadoras. A relao de tais fatores indicou de fato uma real restrio de alimento em colnias fracas. Portanto, colnias fracas no so apenas colnias pequenas ou menores do que aquelas consideradas fortes. Apoio: PIBIC/UFMA; PESCO; Palavras-chaves: Melipona (Michmelia) flavolineata, POP, Uruu
538
COMPORTAMENTO DE PASTEJO DE ABELHA CANUDO (Scaptotrigona sp.) EM MAMONEIRA (Ricinus communis L.)
Rmulo Augusto Guedes Rizzardo*, Breno Magalhes Freitas, Marcelo de Oliveira Milfont, Eva Mnica Sarmento da Silva Universidade Federal do Cear Rua Humberto Monte, S/N. Campus do Pici, Fortaleza Cear rizzardo.zoot@gmail.com Objetivou-se verificar o comportamento de pastejo da abelha canudo (Scaptotrigona sp.) na mamoneira (Ricinus communis Linnaeus). Foram analisados, em junho de 2006, na Universidade Federal do Cear, seis intervalos de pastejo, com durao de 20min a cada duas horas, entre as 4h e 18h. As visitas da abelha canudo para coleta de plen tiveram incio as 6h (x=36 abelhas), estendendo-se por todo o dia. A maior freqncia de abelhas forrageando nas flores masculinas ocorreu durante as primeiras horas da manh, at as 8h (x=34). Aps este horrio ocorreu uma queda brusca na freqncia de abelhas at o meio dia (x=4,5), mantendo-se a partir de ento baixa durante o restante do tarde, com um pequeno pico s 16h (x=9,5). A procura por nctar mostrou-se muito pequena em relao de plen, tendo seu ponto de maior coleta as 16h (x=2,5). Essa baixa freqncia de coletoras de nctar pode ser explicada devido aos altos teores de acares (87,2%) presentes no nctar da mamoneira, uma vez que os trigonini do preferncia a nctares menos concentrados, que podem estar presentes em outras fontes. Mesmo sendo poca chuvosa, com abundncia de alimento, a coleta por plen na mamoneira mostrou-se relevante. Conclui-se, portanto, que a mamoneira constitui fonte de plen potencial para Scaptotrigona sp., porm seu nctar pouco atrativo para essa espcie de abelha. Apoio: ETENE-FUNDECI, Cnpq Palavras-chaves: Scaptotrigona, Pastejo por abelhas, Mamoneira, Meliponinae
539
NIDIFICAO DE Xylocopa (Monoxylocopa) sp. (HYMENOPTERA, APIDAE) NUMA PORO DE HBITAT DO SEMI-RIDO
Maise Silva Santana dos Santos*, Clemens Schlindwein, Mauro Ramalho Universidade Federal da Paraba*; Universidade Federal de Pernambuco; Universidade Federal da Bahia Centro de Cincias e da Natureza (CCEN). Cidade Universitria - Joo Pessoa - PB - Brasil - CEP - 58059-900 maisesilva@hotmail.com Abelhas do gnero Xylocopa (Apidae) so abelhas grandes, robustas e abundantes nas regies tropicais e subtropicais. Todas as fmeas conhecidas nidificam em substrato vegetal. O trabalho apresenta dados relativos a biologia de nidificao de Xylocopa (Monoxylocopa) sp. e sua relao com as flores no semi-rido pernambucano. Tambm feita uma anlise comparativa com dados publicados sobre Xylocopa (Monoxylocopa) abbreviata a fim de se detectar possveis padres de comportamento quanto ao hbito de forrageio e nidificao no subgnero, at ento considerado monotpico. O estudo foi desenvolvido no Parque Nacional do Catimbau em Pernambuco onde X. (Monoxylocopa) sp. encontrada com relativa facilidade. Foram feitas observaes em quatro ninhos, desde a fundao, durante sete dias consecutivos, mensurando-se o perodo e durao das atividades de forrageio (de nctar e plen), escavao e construo das clulas de cria. Como X. abbreviata, X. (Monoxylocopa) sp. tambm nidifica exclusivamente em hastes de Encholirium spetacbile (Bromeliaceae). O forrageio de plen acontece nas primeiras horas da manh e de nctar a partir das 10h. As fmeas de Xylocopa sp. iniciaram ninhos em hastes senescentes aps fazerem a entrada, escavaram uma cmara linear na parte superior do substrato e, em seguida, iniciaram escavao das clulas na parte inferior (abaixo da entrada). Houve variao no nmero de clulas construdas e nem todas as fmeas escavaram em ambas as direes. As fmeas realizaram, em mdia, 18 viagens sucessivas para coleta de plen e 15 para coleta de nctar e gastaram 60h (3600min) escavando e limpando a cavidade. Mas, em viagens de coleta de plen as fmeas tambm coletaram nctar. As fmeas gastam mais tempo no ninho (cerca de 8300min) do que forrageando (1300min). Cada fmea fundadora de X. (Monoxylocopa) sp. gastou, em mdia, um dia e meio (36h), incluindo tempo de forrageio, desidratao, repouso e limpeza, para completar uma clula de cria. Apoio: CAPES; CNPq Palavras-chaves: Forrageio, Encholirium spectabile, nova espcie, Xylocopa, nidificao
540
PREFERNCIA NA UTILIZAO DE NINHOSARMADILHA POR FMEAS DE Tetrapedia diversipes (Klug, 1810) (HYMENOPTERA, APIDAE, ANTHOPHORIDAE)
Janaina Fernandes da Silva*, Carlos Alberto Garfalo Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Av. Bandeirantes, 3900. Ribeiro Preto - SP janainafernandes_bio@yahoo.com.br Tetrapedia diversipes uma espcie de abelha solitria que utiliza cavidades preexistentes para a construo de seus ninhos. Fmeas dessa espcie coletam leo e solo para construrem seus ninhos e coletam leo e plen para aprovisionarem as clulas de cria. O trabalho foi realizado na Estao Ecolgica de Ribeiro Preto com o objetivo de avaliar a preferncia de fmeas de T. diversipes na escolha do tipo e tamanho dos ninhos-armadilha (NA). Foram utilizados NA feitos com cartolina preta, na forma de pequenos tubos, com 5,8 cm (TP) e 8,8 (TG) cm de comprimento e 0,6 cm e 0,8 cm de dimetro, respectivamente, e gomos de bambu (GB), de comprimentos e dimetros variados. Os GB foram introduzidos em tubos de PVC, de tamanhos apropriados, e os tubos de cartolina em orifcios feitos em duas placas de madeira, cada uma com 55 orifcios, e colocados em suportes de ferro instalados em 4 stios de amostragens. As coletas foram feitas mensalmente, de Novembro/2005 a Outubro/2007. Os ninhos coletados foram levados para o laboratrio e conforme os indivduos emergiam eram capturados, mortos sob vapor de acetato de etila e preparados para identificao. Foram obtidos 45 ninhos de T. diversipes com um total de 343 clulas e 256 indivduos produzidos. Destes ninhos 62,2% eram de GB, 35,5% de TP e 2,2% de TG. As fmeas construram de 8 a 15 clulas em GB, de 2 a 5 clulas em TP e 5 clulas no nico ninho em TG. O nmero de indivduos produzidos tambm foi maior em GB variando de 5 a 13 enquanto, que em TB variou de 1 a 4 e no ninho em TG foram produzidos 4 indivduos. Esses resultados sugerem que essas fmeas possivelmente preferem ninhos de comprimento maiores, o que resulta em um maior nmero de clulas de cria e indivduos produzidos por ninho. Apoio: CNPq Palavras-chaves: ninhos-armadilha, Tetrapedia diversipes, abelha solitria, cavidades preexistentes
541
COMPOSIO NUTRICIONAL DE FUNGOS SAPROFTICOS COLETADOS POR ABELHAS AFRICANIZADAS NO BRASIL

Anna Frida Hatsue Modro*, Izabel Christina da Silva, Dejair Message, Cynthia Fernandes Pinto da Luz *Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz - ESALQ/USP; Universidade Federal de Viosa - UFV; Instituto de Botnica IB/SP Rua Frei Luiz de Santana 35, 13418-090 Piracicaba, Brasil afhmodro@esalq.usp.br O desenvolvimento de fungos sobre plen de abelhas e a coleta ocasional de seus esporos por abelhas do gnero Apis em diversas regies do mundo so bastante conhecidos. O estudo objetivou analisar a composio nutricional de fungos Cladosporium sp. coletados por abelhas africanizadas. O experimento foi desenvolvido no municpio de Paula Cndido, Minas Gerais, Brasil. Foram utilizadas cinco colmias de Apis mellifera (L.), com um coletor de plen acoplado na parte superior de cada colmia. As bolotas de fungos foram separadas das amostras de plen tendo como parmetro principal sua colorao escura. Os fungos foram identificados no Laboratrio de Micologia (UFV Departamento de Fitopatologia) e as amostras foram enviadas ao Laboratrio de Nutrio Animal (UFV Departamento de Zootecnia), para determinao da porcentagem de umidade, matria orgnica, cinzas, protena bruta, extrato etreo e carboidratos totais. A ocorrncia de bolotas de fungos nas amostras foi detectada no perodo entre 10 a 23 de novembro de 2005, perodo caracterizado pela alta umidade relativa do ar, escassez de nctar e plen, e consequentemente, pelo enfraquecimento das colmias de abelhas na regio de estudo. Em sua composio nutricional, as bolotas de fungos apresentaram 15% de umidade, 97,5% de matria orgnica, 2,5% de matria mineral, 28,81% de protena bruta, 2,5% de extrato etreo e 66,19% de carboidratos totais. Cladosporium sp. poderia servir como recurso protico para larvas e crias, no entanto, por se tratar de um gnero predominantemente saprfita, algumas espcies podem induzir a ocorrncia de doenas nas colmias. Os resultados sugerem que, apesar das razes da coleta de fungos saprofticos por A. mellifera serem desconhecidas, a interao entre os fatores climticos (alta umidade), perodo de escassez de alimento e alto valor protico dos fungos, pode t-las influenciado. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Apis mellifera, Cladosporium sp., plen, composio nutricional
542
DIVISO ETRIA DE TRABALHO ENTRE OPERRIAS DE Melipona quadrifasciata quadrifasciata

Priscilla Morgana Ferreira Guimares de Figueiredo*, Lucas Amaral Oliveira, Jos Oliveira Dantas, Fbio Santos do Nascimento Universidade Federal de Sergipe Av. Marechal Rondon, s/n, 49100-000, So Cristvo, Brasil pri_aju@hotmail.com Em colnias de meliponneos, as operrias realizam inmeras atividades para o bom funcionamento da colnia. Para que essas atividades sejam executadas ocorre uma diviso de trabalho entre essas abelhas. Essas tarefas obedecem a uma seqncia determinada pela idade do indivduo polietismo etrio ou de acordo com as necessidades da colnia. O objetivo desse trabalho, ainda em andamento, de caracterizar o polietismo etrio em Melipona quadrifasciata quadrifasciata. Para isso foram retirados favos de cria de uma colnia de M. q. quadrifasciata e colocados numa caixa de tamanho menor que a original. Abelhas jovens foram introduzidas na caixa com o intuito de cuidar dos favos e abri-los para que as novas abelhas emergissem. Quando estas nasciam, eram marcadas e colocadas na colnia original. As atividades executadas por essas abelhas foram observadas e anotadas. Nas abelhas mais novas (1 a 15 dias em mdia), as atividades mais observadas foram o cuidado com os favos de cria, reconstruo do invlucro e construo dos potes de alimento. As operrias mais desenvolvidas (16 a 32 dias) tinham as tarefas de fechar frestas existentes na caixa, receber nctar de outra operria, encher potes de alimento e comunicar-se com outras abelhas. As abelhas mais velhas (32 a 40 dias) se encarregavam de guardar a colnia. A partir da as operrias passaram a exercer atividades fora da colnia, como forrageamento. Os resultados obtidos at o momento serviro para caracterizar a diviso de trabalho em operrias de M. q. quadrifasciata, como tambm traar um perfil comparativo com outras espcies de meliponneos. Apoio: FAPITEC balho Palavras-chaves: Melipona quadrifasciata quadrifasciata, Polietismo etrio, Diviso de tra-
543
ESTUDO PRELIMINAR DO COMPORTAMENTO DE COLETA DE NCTAR EM Melipona (Michmelia) flavolineata (HYMENOPTERA, APINAE, MELIPONINA)
Rafael Cabral Borges*, Joo Marcelo Silva Abreu PET-Biologia/ UFMA; Universidade Federal do Maranho UFMA AV. DOS PORTUGUESES, S/N - CEP 65085-580 rcabralsan@gmail.com Com o objetivo de estudar o comportamento de coleta de nctar por Melipona (Michmelia) flavolineata, em funo da variao da concentrao de acar ao longo do dia, abelhas que retornavam colnia com recursos foram coletadas e sofreram leve presso no metassoma para que o nctar contido no papo fosse regurgitado diretamente no refratmetro. O estudo foi realizado no Meliponrio do Departamento de Biologia/UFMA, no perodo de novembro/2007 a janeiro/2008. Foram observadas 107 abelhas retornando com recurso, sendo 69 com nctar, 23 com plen e 15 com resina. A coleta de nctar ocorreu mais efetivamente entre 8:30-9:30h da manh, e a tarde entre 15:30-17:30h. No pico de coleta da manh, foram observadas concentraes mais baixas (20-48%) e com maior variao, sugerindo a explorao de diferentes de fontes de nctar, ao contrrio do que ocorreu tarde, quando as concentraes foram maiores (52-66%) e com menor variao. A alta concentrao do nctar associado baixa variao e ao aumento do nmero de abelhas com nctar concentrado sugere o recrutamento para essas fontes, que oferecem nctar de melhor qualidade. Os resultados preliminares obtidos nesse trabalho corroboram aqueles que utilizaram alimentadores artificiais, tendo sido observado maior nmero de forrageadoras coletando tarde e trazendo nctar mais concentrado de fontes naturais. Apoio: Palavras-chaves: Nctar, Melpona, Uruu, abelha sem-fero, Meliponina
544
USO DE VDEO PARA MONITORAO EM TEMPO REAL DE COLMIA DE ABELHAS SEM FERRO
Eurpedes Laurindo Lopes Jnior*, Antonio Mauro Saraiva, Joo Eduardo Kogler Jr., Srgio Dias Hilrio, Vera Lucia Imperatriz Fonseca *Escola Politcnica - USP; Instituto de Biocincias - USP Escola Politcnica, Universidade de So Paulo - Av. Prof. Luciano Gualberto, trav. 3, n. 158, sala C2-56 CEP 05508-900 - Cidade Universitria S. Paulo - SPelopes@ib.usp.br elopes@ib.usp.br A preocupao com o declnio e possvel extino de muitas espcies de insetos polinizadores importantes em reas naturais e agrcolas tem aumentado muito, devido sua importncia para a preservao e uso dos recursos naturais como para o agro-negcio. Atravs do trabalho conjunto de diversas iniciativas regionais visa-se a escolha de metodologias que permitam comparaes entre os resultados obtidos nos diferentes continentes para que desta forma possa ser adotado um plano de ao para evitar este declnio. Assim, o estudo mais especfico sobre a biologia das espcies de abelhas importantes na polinizao permite conhecer mais amplamente quais medidas devem ser adotadas para sua preservao e possvel criao. Entre os aspectos a serem abordados, destacam-se os comportamentais. Este trabalho visa buscar melhores formas pra se monitorar colnias de abelhas sem ferro da espcie Melipona quadrifasciata, popularmente conhecidas como Mandaaia utilizando tcnicas de captura, anlise e processamento de vdeo em tempo real. Para isto diversos fatores so analisados, a saber: tipo de colmia, iluminao, cmera, hardware, linguagem de programao e recursos de redes necessrios para que se tenha este ambiente. O ambiente monitorado composto por uma colmia PNN com rea de recrutamento externa, onde feita a captura do vdeo com uma cmera sensvel ao infravermelho. As sequncias de imagens, obtidas dos vdeos capturados, so processadas via software desenvolvido em Labview que faz a segmentao e contagem das abelhas presentes na rea de recrutamento e estima uma medida que caracteriza a agitao das mesmas. Pode-se, ento, relacionar essas informaes com as variveis climticas umidade, temperatura, luminosidade, vento, entre outras e, aps anlise em longo prazo, estimar mudanas nos padres comportamentais. A metodologia poder ser replicada e permitir comparar dados coletados de outras regies e climas para uma viso ampla da espcie sob anlise. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Monitorao, Vdeo, Melipona quadrifasciata, Mandaaia, Comportamento
545
OCUPAO DE DORMITRIO POR Pereirapis sp. (HALICTIDAE, AUGOCHLORINI): MACHOS PREFEREM CHEGAR PENUMBRA
Carlos Eduardo Pinto*, Airton Torres Carvalho, Clemens Schlindwein Laboratrio Plebeia ecologia de abelhas e da polinizao, Departamento de Botnica, Universidade Federal de Pernambuco Av. Prof. Moraes Rego, s/n, 50670-901 Recife, PE eduepronto@gmail.com Dormitrios comunais ocorrem quando animais de uma ou mais espcies se juntam para descansar, podendo ser classificados como: para diapausa, facultativo ou circadiano. Entre vrias espcies de abelhas solitrias conhecido que os machos agregam-se em plantas para dormir. Muitas vezes, voltam repetidamente ao mesmo local de descanso. Encontramos dois dormitrios de Pereirapis sp. em folhas de Bidens sulphurea (Asteraceae). Em trs dias foram mensurados o numero de indivduos por intervalo de hora e a incidncia luminosa, com auxilio de Luxmetro. Os dormitrios perduraram por 16 dias. Os primeiros machos chegaram por volta das 16:00h, e agrupavam-se sempre na metade inferior das mesmas folhas. Ao chegar pousavam na parte adaxial das folhas e quando esta estava preenchida, os prximos ocupavam a parte abaxial. Os indivduos de Pereirapis sp. mantiveram-se sempre a mesma distncia uns dos outros, em geral foi o tamanho das antenas, que equivale a 2,4mm. No houve incremento de indivduos a partir das 18:05h. Foram contados, em mdia, 173 indivduos por dormitrio. Encontramos uma correlao entre o nmero de indivduos pousados e o horrio (R= 0.95; p <0,05; g.l=31), sendo o nmero de abelhas pousadas no dormitrio altamente dependente da intensidade luminosa (R2=0,89; F=237.85; g.l=29; p<0,05) numa relao exponencial. A manuteno diria do mesmo local de descanso classifica este dormitrio como circadiano. A diminuio da luz o fator preponderante para o fim das atividades dirias dos machos dessa espcie. Apoio: Capes; CNPq Palavras-chaves: abelhas solitrias, agregao de machos, luminosidade, Bidens sulphurea
546
STINGLESS BEES (Melipona scutellaris) LEARN TO ASSOCIATE THEIR

Andr Vieira Rodrigues, Ana Carolina Roselino, Michael Hrncir Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Av. dos Bandeirantes, 3.900 - Monte Alegre - Ribeiro Preto/SP xikaum.up@gmail.com Stingless bees leave olfactory footprints on food sources while feeding. These footprints have an attractive affect on bees that forage at artificial food sources, which is probably due to the fact that the reward is unlimited. In natural flowers, however, the food (nectar) is limited. Thus, in their natural environment, stingless bees should use their footprints as a repulsive factor - indicating depleted flowers - rather than as an attractant. The present study tried to answer the question whether stingless bees (Melipona scutellaris) actually learn to associate their footprints with rewarding food sources. In the first phase, the training phase, bees (N=22) were trained to a food-patch consisting of 9 acrylic flowers, each of which contained a droplet of unscented sucrose solution (20% w/w). After a flower had been visited by a bee, we refilled the flower with a droplet of 55% w/w sucrose solution. After a bee had visited this flower-patch 10 times, 2 clean flowers (without potential footprints) were offered to the bees (test phase). After the first visit, we recorded whether the bee chose the marked or the unmarked flower on her second visit. If the bees had learnt during the training phase that their footprints indicate better food, they should choose the marked flower on the second visit in the test phase. And indeed, 16 out of 22 bees (72.7%) chose the marked flower (X=4.55; df=1; P=0.03). In a control experiment, bees (N=22) did not experience a training phase, and were only tested in the same way as described above (test phase). In this control group, 11 out of 22 (50%) bees chose the marked flower. Our results demonstrate that stingless bees need to learn the scent-mark - reward context in order to use their footprints as an attractive factor during their search for food. Apoio: CNPq and FAPESP - 06/50809-7 Palavras-chaves: Stingless bees, footprints, scent-marks, learning, reward context
547
CRONOGRAMA DE ABELHAS MANDAAIA, Melipona quadrifasciata LEPELETIER, 1836, EM COLNIA ARTIFICIAL NO CAMPUS DE SOROCABA DA UFSCAR
Natasha Marcili Laganaro, Srgio Rodrigues Morbiolo, Fbio Camargo Abdalla Faculdade de Biologia - UFSCar - Campus Sorocaba Rodovia Joo Leme dos Santos (SP264) km 110, 18052-780 Sorocaba, So Paulo, Brasil suu.nana@gmail.com As operrias das abelhas eussociais apresentam uma complexa diviso de trabalho, designada polietismo. Muitas vezes estas funes dependem dos estgios do desenvolvimento da operria, constituindo-se num polietismo etrio. A principal funo das operrias jovens cuidar da prole e das operrias mais velhas, a atividade de forrageamento. Entendo a biologia de forrageamento das abelhas sem ferro, podemos tentar anular a influncia dos fatores exgenos para sua conservao, j que estas esto cada vez mais ameaadas com as constantes desmatamentos no Brasil. Portanto, temse como objetivo estabelecer um cronograma de forrageamento em Melipona quadrifasciata com a finalidade de auxiliar futuros trabalhos de pesquisa. Foram realizadas contagens de entrada e sada das operrias em intervalos regulares durante o perodo das 8h s 18h de um nico dia da semana, com intervalos de 10 min. a cada hora, totalizando 110 min. por semana. O projeto abranger a coleta de dados no perodo de um ano. No momento da atividade de campo, outras funes externas, como patrulha, limpeza e reconstruo da entrada do ninho foram observadas, constituindo, secundariamente, alvo de estudos. Foi observado que as operrias tm sua atividade aumentada nas primeiras horas do amanhecer em dias frios; entre 9 e 11 horas em dias mais quentes e aps chuvas fortes. Nesta ltima situao, as atividades principais so a reconstruo da entrada do ninho e o descarte de lixo do interior da colnia. Durante perodos de chuva, ventos fortes e sol intenso (entre 12h e 14h) a atividade interrompida ou reduzida. Estes dados so preliminares. Ao trmino do projeto, uma curva de atividade ser comparada a ndices climticos variados coletados atravs de dados da estao meteorolgica do prprio Campus. Deste modo, ser possvel modelar os fatores que inibem ou estimulam as atividades extranidais das operrias de acordo com o clima da regio. Apoio: FAPESP - 2007/54592-5 Palavras-chaves: clima, forrageamento, atividade
548
EFEITO DO TAMANHO COLONIAL NA PRODUO DE RAINHAS EM Melipona (Michmelia) flavolineata Friese, 1900 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA)
Alexandre Santana Azevedo*, Gisele Garcia Azevedo Universidade Federal do Maranho Rua Marab, Quadra R, Casa 06, Parque Amazonas alxazv@hotmail.com Em Meliponina no h variaes nas clulas que originam operrias e rainhas. Em Trigonina, clulas reais so maiores, recebendo mais alimento. No entanto, em Melipona a determinao das castas sofre influncia genotpica. Fmeas tornam-se rainhas se possurem genes heterozigotos para todos os locus determinantes da casta. Em 1949, Kerr fala sobre a influncia do alimento na determinao das castas. Diz que no basta a fmea ser heterozigota, mas deve receber alimento extra. Kerr & Nielsen (1966) aferiram o alimento indiretamente atravs do peso larval, expondo a vantagem disso na produo de rainhas quando h escassez de alimento. Porm isto no seria vivel, j que em Melipona as rainhas so mortas aps emergirem. Neste estudo 2 favos de colnias fracas produziram (10+39) 49 rainhas, colnias mdias (3+21) 24, enquanto o nico favo de colnia forte no produziu rainha. Utilizando o tamanho colonial como uma forma de estimar indiretamente a quantidade de alimento os presentes dados iriam contra a hiptese de Kerr. No entanto no sabemos se colnias fracas estocam mais alimento nos potes ou investem mais em alimento/clula. Estudos com fluxo de alimento podem esclarecer esse impasse. Indivduos heterozigotos se tornarem rainhas quando o alimento escasso apresenta certa vantagem para a colnia. O ponto seria que, colnias fracas no conseguem satisfazer a dieta da rainha e, como esta possui um grande gasto energtico devido a constante produo de ovos, correria um risco muito grande de substituio natural. Evolutivamente, pode ter ocorrido a seleo de um sistema que favorea a produo de rainhas na falta de alimento como uma forma de assegurar substituies naturais mesmo em colnias fracas. Apoio: CNPq; CNPq-PIBIC; UFMA Palavras-chaves: Melipona flavolineata, tamanho colonial, determinao de castas, rainhas, condio colonial
549
NDICE DE MORTALIDADE DE Apis mellifera APS VISITAS A FLORES DE NEEM INDIANO (Azadirachta indica) EM CONDIES DE LABORATRIO
Jos Everton Alves*, Breno Magalhes Freitas, Jos Ribeiro do Nascimento, Antnio Alves de Oliveira Jnior Universidade Estadual Vale do Acara - UVA; Universidade Federal do Cear - UFC Avenida da Universidade, 850, 62040-370 Sobral, Cear, Brasil professoreverton@msn.com O Brasil est sendo povoado pelo neem indiano (Azadirachta indica). Esta planta possui um princpio ativo chamado azadirachtina, que afeta por contato ou por ingesto cerca de 30 espcies de insetos, dentre elas Apis mellifera, reduzindo as atividades de forrageamento e desenvolvimento de crias. Nenhum trabalho foi encontrado analisando o comportamento de A. mellifera aps visitar suas flores. Objetivou-se neste estudo avaliar a mortalidade de A. mellifera decorrente das visitas s flores de A. indica. O experimento foi realizado no Lab. de Pesq. Apcolas da UVA em set./2007, usando-se 10 gaiolas, cada uma contendo 10 abelhas de mesma idade, nascidas em estufa. Cada tratamento foi realizado em 2 gaiolas com 2 repeties. Os tratamentos adotados foram T1: Flores de neem, gua e plen apcola; T2: Flores do neem, gua e mel; T3: Flores de neem e gua; T4: gua, mel e plen apcola; T5: Odor das flores de neem, gua, mel e plen apcola. Aps 24 horas, no houve mortalidade em T1, T2, T4 e T5, porm morreram 35% das abelhas em T3. Aps 72 horas, morreram 10% em T1, 0% em T2, 87,5% em T3 e 0% em T4 e em T5. Conclui-se que as abelhas A. mellifera que ingeriram somente gua e o nctar das flores de neem apresentaram uma expressiva mortalidade, provavelmente devido a algum tipo de toxidade presente nas flores de A. indica. Apoio: Funcap; IADE; IVA Palavras-chaves: Azadirachta indica, Neem indiano, Apis mellifera, Azadiractina, Toxidez
550
TREINO DISCRIMINATIVO UTILIZANDO RESPOSTAS DIFERENCIADAS EM ABELHAS Melipona quadrifasciata

Antonio Mauricio Moreno*, Gerson Yukio Tomanari, Deisy das Graas de Souza * Departamento de Psicologia- Universidade Federal de So Carlos; USP Rua Carlos Botelho 3206, 13569-230 So Carlos-SP, Brasil mauricio_amm@hotmail.com Estudos sobre estabelecimento de relaes condicionais entre estmulos e emergncia de novas relaes entre estmulos tm demonstrado resultados positivos com sujeitos humanos, enquanto so poucos e geralmente controversos os estudos que relatam desempenhos desse tipo em infrahumanos. Em alguns procedimentos, so ensinadas relaes arbitrrias entre estmulos de tal modo que respostas com topografias diferenciadas so ensinadas no treino de cada relao. Resultados de alguns estudos sugerem que o uso de respostas diferenciadas facilitam o estabelecimento de relaes condicionais entre estmulos. O objetivo do presente estudo foi estabelecer em Meliponas discriminaes condicionais utilizando respostas diferenciadas. Duas operrias receberam treino discriminativo com os estmulos Azul, Amarelo, Branco (lmpadas coloridas) e Apagado (lmpada apagada). Cada estmulo discriminativo era relacionado a uma resposta diferenciada, pressionar uma barra ou atravessar uma torre. Uma das abelhas recebeu treino de discriminao simples do tipo Branco-Torre/ Apagado-Barra. A segunda abelha recebeu dois treinos de discriminao simples dos tipos Branco-Torre/ Apagado-Barra e Azul-Torre/ Amarelo-Barra e um treino de discriminao condicional do tipo Branco-Azul-Torre/ Apagado-Amarelo-Barra. A primeira abelha aprendeu as relaes BrancoTorre e Apagado-Barra em 280 tentativas. Com a segunda abelha, o treino das relaes Azul-Torre e Amarelo-Barra foi finalizado aps 500 tentativas, com 40 respostas corretas consecutivas. O treino das relaes Branco-Torre e Apagado-Barra foi finalizado aps 240 tentativas, com 90% de acertos no ltimo bloco de 20 tentativas. Contudo, esse repertrio se deteriorou com o incio do treino de discriminaes condicionais. Esses resultados mostram que respostas com topografias diferenciadas podem ser colocadas sob controle de estmulos especficos em treinos discriminativos com abelhas, embora mostrem que o uso de respostas especficas no favoreceu o estabelecimento de discriminaes condicionais. Apoio: FAPESP - 04/12998-7 Palavras-chaves: treino discriminativo, respostas diferenciadas, Melipona quadrifasciata, Meliponina, abelhas
551
PERFIL DE HIDROCARBONETOS CUTICULARES DE RAINHAS FISOGSTRICAS DE Melipona marginata E SUA RELAO COM O SUCESSO NA TROCA DE RAINHAS ENTRE COLNIAS
Maria Juliana F. Caliman*, Izabel Cristina C. Turatti, Ronaldo Zucchi *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Cincias Farmacuticas de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil jucaliman@pg.ffclrp.usp.br Os hidrocarbonetos presentes na cutcula dos insetos sociais so responsveis por vrias funes, principalmente, aquelas relacionadas ao reconhecimento entre companheiras de ninho. Vrios estudos revelam que rainhas virgens e operrias de meliponneos no so aceitas quando introduzidas em outra colnia da mesma espcie. O objetivo foi o de investigar as possveis razes pelas quais somente as rainhas so introduzidas com sucesso em colnias de Melipona. Amostras da composio qumica da cutcula abdominal de 6 rainhas de diferentes colnias de Melipona marginata provenientes de Cunha-SP (N=4) e Itanham-SP (N=2) foram extradas com fibra de polidimetilsiloxano e analisadas por Cromatografia Gasosa associada Espectrometria de Massa. Aps a identificao dos principais hidrocarbonetos foram realizados trs testes de aceitao, dois deles trocando rainhas entre as diferentes populaes (Cunha e Itanham), alm da troca entre duas rainhas de colnias provenientes de Cunha. Todas as rainhas foram aceitas aps a introduo, retomando a atividade de postura. A anlise de varincia apontou diferenas significantes na concentrao de 5 dos 17 hidrocarbonetos encontrados na cutcula das rainhas. Os resultados mostram que a variao na concentrao desses compostos no interfere no processo de aceitao pelas operrias. Deste modo, a ocorrncia de um conjunto caracterstico de hidrocarbonetos pode indicar a condio de rainha independente da relao de parentesco entre elas (relacionada procedncia das populaes) e as operrias da colnia receptora. Apoio: CNPq- 134833/2006-6 Palavras-chaves: Hidrocarbonetos cuticulares, Reconhecimento, GC-MS, Meliponini, Rainhas fisogastricas
552
CONSERVAO DA BIODIVERSIDADE DE ABELHAS TROPICAIS
553
COMUNIDADES DE ABELHAS DA FLONA DA RESTINGA DE CABEDELO, PARABA, BRASIL

Maria Cristina Madeira da Silva Centro Federal de Educao Tecnolgica da Paraba Av. 1 de Maio, 720, Jaguaribe. 58015-430, Joo Pessoa, Paraba, Brasil madeiradasilva@yahoo.com.br De modo geral, a fauna das restingas carece de informaes sobre a composio de suas comunidades nos diferentes pontos da costa brasileira. Estudos tratando da auto-ecologia das espcies da fauna tambm so escassos, representando em muitas situaes dificuldade no delineamento de estratgias visando respectiva conservao destas e, por conseguinte, do sistema restinga como um todo. A FLONA - Floresta Nacional - da Restinga de Cabedelo est localizada na plancie litornea da Paraba, no Km 11 da BR-230 (7347S e 345124W). A rea composta por uma mata alta e campo de restinga, manguezal e um rio. A regio apresenta clima tropical, quente e mido, com chuvas de outono e inverno e mdia trmica anual de 25C. O levantamento das abelhas foi feito nos meses de agosto e setembro de 2002. Foram feitas coletas durante visita s flores e com o uso de fragrncias artificiais para atrair as abelhas Euglossina. Um total de 45 espcies, de quatro famlias de abelhas foi amostrado. A famlia Apidae foi a mais diversificada, com 33 espcies, seguida por Megachilidae, com seis espcies e Halictidae, com cinco espcies. A famlia Andrenidae foi representada por uma espcie. O gnero Centris apresentou a maior riqueza de espcies. De maneira geral, anlises da fauna de ambientes de restinga, sobretudo de vertebrados, demonstram que estes apresentam uma baixa diversidade local. Quanto as abelhas, os estudos realizados em reas de restinga no litoral do Nordeste do Brasil revelam uma riqueza entre 40 e 60 espcies. Apoio: Palavras-chaves: Restinga, FLONA, Abelhas
554
DIVERSIDADE DE ABELHAS E RECURSOS FLORAIS NA FLORESTA NACIONAL CONTENDAS DO SINCOR, BA

Rita de Cssia de Souza Carvalho*, Ricardo Moreira Santos, Sheila Alves Abreu, Raquel Prez-Maluf, Avaldo de Oliveira Soares Filho
Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia - UESB Labisa, Dept. de Cincias Naturais. UESB. Estrada do Bem Querer, Km 04. Vitria da Conquista, BA bio.rita@gmail.com A Floresta Nacional Contendas do Sincor a nica Unidade de Conservao de caatinga na Bahia apresentando uma paisagem preservada. O objetivo do estudo foi fazer um levantamento dos gneros de abelhas e plantas visitadas por elas na regio, ao longo das estaes seca e chuvosa. As coletas foram mensais, de 06/2006 a 04/2008, entre 7 e 11h da manh, momento em que as abelhas esto mais ativas nas condies da caatinga. Melipona, Trigona, Xylocopa e Augochloropsis foram os gneros mais freqentes, ocorrendo em mais de 65% das coletas, em perodos seco e chuvoso. Scaptotrigona, Frieseomelitta e Melitoma tiveram ocorrncia sazonal, associada ao perodo chuvoso. Gneros como Bombus e Melissoptila ocorreram em apenas um ms do perodo chuvoso. O nmero de indivduos coletados variou entre os perodos de seca e chuva, porm o nmero de gneros permaneceu relativamente constante, evidenciando uma maior atividade no perodo chuvoso e a permanncia destas abelhas na regio mesmo no perodo de reduo da oferta dos recursos alimentares. Com relao aos recursos florais, foram encontradas 23 espcies: Caesalpinia pyramidales (Caesalpinoidae) esteve presente em todos os meses, e na estao seca, foram as macrfitas Echinodoros sp (Alistamataceae) e Waltheria sp (Sterculiaceae). Apoio: UESB; FAPESB; CNPq Palavras-chaves: interao abelha-flor, caatinga, sazonalidade
555
VARIVEIS QUE AFETAM A MODELAGEM DA DISTRIBUIO GEOGRFICA: UM ESTUDO EM Centris trigonoides (CENTRIDINI, APIDAE)
Tereza Cristina Giannini*, Isabel Alves-dos-Santos, Antonio Mauro Saraiva Instituto de Biocincias da USP; Escola Politcnica da USP R. Mato, Trav.14, n.321, So Paulo, SP, 05508-900 giannini@usp.br A modelagem da distribuio geogrfica das espcies vem sendo utilizada como uma ferramenta para determinao de seu nicho ecolgico. Os modelos so gerados atravs de algoritmos que comparam as variveis ambientais dos pontos de ocorrncia utilizados com as variveis de outras regies, de tal forma a produzir um modelo de reas potenciais de ocorrncia. Para esse estudo foi utilizado o programa openModeller e pontos de ocorrncia da espcie Centris trigonoides com o objetivo de comparar modelos obtidos atravs do GARP (Genetic Algorithm for Rule-set Production). Foram testados trs conjuntos de dados com variaes nos seguintes parmetros: 1) quantidade de pontos de ocorrncia utilizados, onde foram sorteadas 3 amostras do total de pontos obtidos; 2) homogeneidade e heterogeneidade dos pontos de ocorrncia, ou seja, foram utilizados pontos de reas mais prximas e pontos de reas mais distantes entre si; 3) camadas ambientais com variveis diferentes. O melhor modelo foi escolhido baseado na abrangncia da distribuio das reas potenciais obtidas, levando-se em considerao dados de literatura, e na acurcia do modelo, que demonstra a capacidade de prever corretamente a presena dos pontos usados para teste. Os resultados obtidos demonstram que a heterogeneidade dos pontos mais importante que a quantidade deles, provavelmente devido ao fato que as variveis ambientais de reas mais diversas apresentam um espectro mais amplo e, portanto, acarretam um modelo mais abrangente. Para a espcie estudada, o melhor resultado foi obtido com as camadas de temperatura, precipitao e a Hydro1k que considera elevao e ocorrncia de cursos de gua no solo (acurcia do modelo: 96%). Apoio: BioAbelha-FAPESP Palavras-chaves: modelagem, nicho ecolgico, distribuio geogrfica
556
PROPOSTA DE EXTENSO DO ESQUEMA DARWIN CORE PARA SUPORTAR DADOS DE POLINIZAO POR ABELHAS
Etienne Amrico Cartolano Jnior , Tereza Cristina Giannini , Renato De Giovanni , Pedro Luiz Pizzigatti Correa , Antonio Mauro Saraiva Escola Politcnica da Universidade de So Paulo; Instituto de Biociencias da Universidade de So Paulo; Centro de Referncia em Informao Ambiental Laboratrio de Automao Agrcola - Escola Politcnica da USP. Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, n 158, sala C2-56. Edifcio de Engenharia Eltrica Cidade Universitria - So Paulo SP. CEP 05508-900. Fone: (11) 3091-5366 Fax: (11) 3091-5294 cartolano@usp.br A polinizao considerada um dos processos mais importantes para a conservao da biodiversidade. Estudos mostram que a polinizao bem conduzida pode melhorar a quantidade e a qualidade da fecundao das flores e da produo de frutos, incentivando o seu uso em programas ambientais e nas propostas de agricultura sustentvel. No entanto, o sucesso dessas aes est diretamente ligado ao conhecimento sobre os agentes polinizadores, a sua preservao e a interao das espcies com o meio ambiente. Novas iniciativas tm surgido para facilitar e incentivar a disseminao desse conhecimento, entre elas a Inter-American Biodiversity Information Network - IABIN (http:// pollinators.iabin.net) e a WebBee (http://www.webbee.org.br), que publicam informaes sobre polinizadores e tm entre seus principais servios a publicao de dados de relacionamento com plantas. Dada a complexidade do armazenamento e a distribuio dos dados de espcimes, os sistemas de informao dessas iniciativas compartilham e publicam seus servios sob uma arquitetura baseada em provedores e portais, que requerem a utilizao de padres para efetiva comunicao. O Darwin Core2 v1.4 (DwC) um conjunto simples de elementos identificados por marcadores, ou tags, que permitem estruturar dados de registros de espcimes ou de observaes para serem compartilhados por sistemas Internet como um documento XML. Ele contm informaes sobre a taxonomia do espcime, da localizao geogrfica da ocorrncia e de elementos de referncia, mas que devido a sua caracterstica generalista, no suportam relacionamentos entre espcimes. Por esta razo, optouse por criar uma extenso simples e genrica do esquema DwC e uma outra extenso que detalha o relacionamento entre polinizadores. Alm dos aspectos tcnicos importante avaliar a viabilidade prtica da aceitao do padro na comunidade, por isso, as extenses propostas foram publicadas no Biodiversity Information Standards - TDWG (http://www.tdwg.org) para validao da comunidade cientfica da rea. Apoio: Inter-American Biodiversity Information Network IABIN / Organizao dos Estados Americanos- OEA Palavras-chaves: Polinizao, Biodiversidade, XML, Esquemas, Relacionamento
557
MODELAGEM DA DISTRIBUIO GEOGRFICA DE POLINIZADORES POR MEIO DO OPENMODELLER

Antonio Mauro Saraiva, Tereza Cristina Giannini*, Isabel Alves-dos-Santos
Escola Politcnica da USP; Instituto de Biocincias da USP Av. Prof. Luciano Gualberto, n.158, Butant, So Paulo, SP 05508-900 giannini@usp.br
A modelagem da distribuio geogrfica das espcies representa uma ferramenta importante em estudos de biogeografia, ecologia e conservao. Entender, modelar e prever a ocorrncia de espcies essencial para os estudos de biodiversidade ou de avaliao de risco ambiental. Os modelos de distribuio indicam habitats adequados (ou inadequados) para a ocorrncia das espcies enfocadas e apontam para regies em potencial para a conservao ou reintroduo de espcies raras ou ameaadas. O objetivo principal da modelagem gerar um modelo matemtico da distribuio geogrfica potencial da espcie, que possa ser projetado em outras regies e gerar um mapa da distribuio. O modelo gerado pode relacionar dados de ocorrncia das espcies com caractersticas de uma regio, que podem incluir variveis abiticas (temperatura, umidade, etc.) e biticas (vegetao predominante, por exemplo). O openModeller constitui-se em uma ferramenta open source para modelagem de distribuio geogrfica. Um projeto homnimo FAPESP financia atualmente o desenvolvimento sob a coordenao do CRIA, incluindo o INPE (Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais) e a Escola Politcnica da USP (Laboratrio de Automao Agrcola). O openModeller incorpora e disponibiliza diversos algoritmos empregados em modelagem, como o GARP Genetic Algorithm for Rule-set Production, Climate Space Model, Bioclimatic Envelopes, entre outros. Incorpora tambm, ferramentas de limpeza de dados que detectam possveis erros, tais como, pontos fora do padro esperado para os parmetros latitude, longitude e altitude, e facilitam o processo de padronizao dos dados. As etapas da modelagem - pr-modelagem, gerao e validao do modelo - so apresentadas tomando como exemplo a modelagem de distribuio de espcies polinizadoras dentro do projeto BioAbelhaFAPESP. Apoio: FAPESP - projeto BioAbelha e openModeller Palavras-chaves: modelagem, polinizador, nicho ecolgico, abelhas
558
UMA FERRAMENTA DE ENTRADA E PUBLICAO DE DADOS DE RELACIONAMENTO DE POLINIZADORES

Etienne Amrico Cartolano Jnior, Antonio Mauro Saraiva, Pedro Luiz Pizzigatti Correa
Escola Politcnica da Universidade de So Paulo Laboratrio de Automao Agrcola - Escola Politcnica da USP. Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, n 158, sala C2-56. Edifcio de Engenharia Eltrica Cidade Universitria - So Paulo SP. CEP 05508-900. Fone: (11) 3091-5366 Fax: (11) 3091-5294 cartolano@usp.br A Inter-American Biodiversity Information Network (IABIN) um frum tcnico criado para promover a colaborao e a coordenao entre os pases das Amricas na aquisio, compartilhamento e o uso das informaes sobre biodiversidade relevantes para a tomada de deciso na gesto e conservao de recursos naturais, e para promoo do desenvolvimento sustentado na regio. Dentre as suas seis redes temticas, a Rede Temtica de Polinizadores (IABIN PTN) a responsvel por desenvolver ferramentas para troca de informaes especficas sobre polinizadores, entre eles as abelhas. O Portal desenvolvido pela IABIN-PTN oferece servios de busca de ocorrncias, informaes sobre especialistas, compartilhamento de dados entre os portais de biodiversidade e em especial, o servio de relacionamento entre espcimes de polinizadores. Dada a restrio dos esquemas de dados atuais para o suporte a este tipo de informao, a IABIN-PTN, (CoE, ITIS, NBII, USP e outros parceiros) em conjunto com o CRIA, o GBIF e a FAO desenvolveram trs esquemas de extenso para o DarwinCore2 (DwC), agora em processo de validao, para serem tidos como padres nos sistemas de informao para biodiversidade sob a tutela do TDWG. Neste contexto, uma Interface de entrada de dados de relacionamento foi proposta para o Portal IABIN. Escrita em PHP utilizando o Banco de Dados Mysql, ela segue uma arquitetura modular, sob arquivos XML, para permitir a plena configurao dos dados de entrada, sempre seguindo como esqueleto as extenses do DwC propostas pela IABIN-PTN. A ferramenta, que gratuita, tambm conta com um provedor DiGIR embutido, por isso, ela pode ser utilizada pela comunidade cientfica como meio de publicao dos seus dados de relacionamento para outros sistemas de informao para biodiversidade, entre eles o Portal da IABIN-PTN. Apoio: Inter-American Biodiversity Information Network IABIN / Organizao dos Estados Americanos- OEA Palavras-chaves: Polinizao, XML, Provedores, PHP, Esquemas
559
O PORTAL DO PROJETO BIOTA (BIOABELHA)

Julyana Mayumi Kudo*, Pedro Luiz Pizzigatti Corra , Antonio Mauro Saraiva, Vera Lucia Imperatriz Fonseca, Tereza Cristina Giannini Laboratrio de Automao Agrcola - Escola Politcnica da USP Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, n 158 - Cidade Universitria - CEP 05508-900- So Paulo - SP - Brasil julyana.kudo@poli.usp.br As abelhas como polinizadoras tm imensa importncia para a economia e para a preservao do ecossistema do planeta, mas ainda pouco se sabe sobre os seus costumes e prticas. O Projeto temtico da FAPESP: Biodiversidade e uso sustentvel dos polinizadores com foco nas abelhas visa suprir essa lacuna estudando sobre esses importantes polinizadores na agricultura, na segurana alimentar e na conservao de plantas. O Portal BioAbelha o resultado da necessidade de se ter um veculo de divulgao desse projeto. A primeira verso do Portal foi elaborada tendo-se como prioridade a sua leveza e o seu fcil acesso. Nela encontram-se a descrio geral do projeto temtico, as instituies parceiras e somente os dados bsicos de cada projeto integrante como a descrio, os objetivos e a equipe. Na prxima verso disponibilizaremos as publicaes, o estgio em que os projetos se encontram e as ferramentas de Tecnologia de Informao para pesquisa e extenso em servios ambientais sempre com nfase nas abelhas como polinizadores. Essas ferramentas permitiro a realizao do gerenciamento e da divulgao de experimentos com abelhas feitos remotamente. Apoio: FAPESP - 007/2002 Palavras-chaves: Biota, BioAbelha, Polinizadores
560
UTILIZANDO O SOFTWARE SPECIFY PARA CATLOGO DE ESPCIES E ESPCIMES

Leandro Halle Najm*, Pedro Luis Pizzigatti Correa, Julyana Mayumi, Antonio Mauro Saraiva Departamento de Eng. de Computao e Sistemas Digitais - USP Avenida Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, 158, CEP 05508-900 - So Paulo - SP hallenajm@gmail.com Os dados sobre abelhas ou outros animais e plantas so de extrema importncia para os pesquisadores e seus projetos. Por esta razo necessrio haver um controle e uma padronizao em relao ao cadastro e consulta dessas informaes em um banco de dados pra utilizao de outras instituies de pesquisa. Atravs da utilizao e estudo no software gratuito Specify pode-se utiliza-lo para fazer esse controle, visto que um sistema desenvolvido especificamente para catalogao de biodiversidade. O estudo foi realizado migrando informaes de outros catlogos pessoais, sem padro ou em softwares proprietrios, sem encontrar maiores dificuldades, inclusive pela possibilidade de alterao interna do Specify, como criao de novos campos ou a alterao de campos j existentes. O Specify trata os espcimes de maneira isolada, no foi desenvolvido para tratar o caso de polinizao, sendo essa uma dificuldade encontrada, j que na polinizao necessrio o conhecimento do tipo de interao realizada entre o polinizador e a planta coletados. Uma forma encontrada de resolver este problema foi a edio dos formulrios do sistema, utilizando o mdulo administrativo para acrescentar um campo de referncia ao nmero do cdigo do animal observado dentro do cadastro da planta, e a alterao do rtulo de um campo texto sem utilizao, para o tipo de interao observada. Todos esses registros so gravados em um banco de dados SQL Server, podendo ser facilmente controlado, consultado, realizar operaes como backup e restore, etc. e com isso podendo ser utilizado como um sistema padro de catlogo de espcies e espcimes de fcil adaptao pelos pesquisadores. Apoio: Palavras-chaves: Catlogo, Specify, Abelhas, Espcimes, Polinizadores
561
PROVEDORES DE DADOS DE POLINIZADORES PARA PORTAIS DE BIODIVERSIDADE

Pablo Salvanha, Pedro Luiz Pizzigatti Correa, Antonio Mauro Saraiva, Paulo Venancio Lopes
USP www.usp.br salvanha@usp.br
Na atualidade podemos encontrar diversas solues para acesso a informaes referentes a biodiversidade, sendo as mesmas presentes em centros de pesquisa e outras atravs de portais centralizadores. Tais portais centralizadores foram desenvolvidos com o intuito de unificar informaes em uma nica base de dados, atravs de informaes dispersas em diversos pontos diferentes de coleta, os quais so chamados de provedores de dados. Os provedores de dados so responsveis pelo fornecimento de informaes aos portais, sendo que os mesmos geralmente so centros de pesquisa e/ ou instituies as quais fazem as coletas e inserem as mesmas em sistemas locais. O armazenamento torna-se vivel a ser compartilhado aps a instalao de protocolos especficos (DiGIR / TAPIR) os quais encapsulam os dados para transferncia aos portais. Nem todos os potenciais fornecedores de dados so provedores dos mesmos, o caso de fornecedores de dados que no possuem nenhuma aplicao para interoperabilidade desta informao para com os portais. Concluindo, este trabalho visa demonstrar o ponto de vista dos provedores de dados, exibindo o seu papel dentro da distribuio centralizada de dados aos portais, sua identificao e preservao de seus direitos. O estudo de caso envolve provedores de dados para polinizadores, o que inclui espcimes e suas relaes. O relacionamento entre espcimes um ponto em desenvolvimento, estando em definio de padres, no entanto ser demonstrado as possveis solues a serem implementadas futuramente. Apoio: Palavras-chaves: Polinizador, Provedor de Dados, Biodiversidade, Relacionamento de espcimes
562
PORTAL DE BUSCA DE RELACIONAMENTO PARA POLINIZADORES

Paulo Venncio Lopes, Antonio Mauro Saraiva, Pedro Luiz Pizzigatti Corra , Pablo Salvanha Escola Politcnica - USP Escola Politcnica, Universidade de So Paulo - Av. Prof. Luciano Gualberto, trav. 3, n. 158, sala C2-56 CEP 05508-900 - Cidade Universitria cuikiri@gmail.com Com o aumento do nmero de pesquisadores e instituies de pesquisa o nmero de informaes sobre temas especficos vem crescendo exponencialmente e para que se possa armazenar essas informaes os computadores se tornam a soluo ideal para isso. Tanto dentro de um notebook, ou desktop, ou servidor de algum centro de pesquisa esses dados so armazenados para que possam ser usados e guardados para o futuro. O desafio agora disponibilizar esses dados para que todos os pesquisadores e leigos possam utiliz-los e com isso abrir a possibilidade de maior interao sobre esses assuntos. A IABIN-PTN (Inter-American Biological Information Network Pollinator Thematic) vem se esforando para tornar este desafio realidade. A IABIN um frum para promover a colaborao e a coordenao tcnica entre pases das Amricas na coleo, na partilha, e no uso da informao da biodiversidade relevante tomada de deciso na gerncia e na conservao de recursos naturais, e promover o desenvolvimento sustentvel na regio. A PTN uma das diversas redes temticas que do forma a IABIN - outras redes incluem espcies e espcimes, espcie invasora, ecossistemas, e reas protegidas. O PTN o grupo especializado em polinizadores. A soluo adotada foi a internet que hoje em dia relativamente rpida, barata e segura podendo ser acessada de qualquer lugar do globo tanto via cabo como via area. Dentro da internet a arquitetura SOA (Service Oriented Architecture) vem sendo expandida para dar flexibilidade de acesso a informaes distribudas. Cada pesquisador ou centro de pesquisa pode criar um servio que disponibiliza suas informaes pela rede e outros podero consumi-los sem nenhum problema, ou ainda ter um portal que centraliza essas informaes e a disponibiliza para o pblico em geral. Este o tema deste resumo que apresenta a idia fundamental do portal de relacionamento de espcimes e futuramente de espcies para polinizadores. Apoio: Palavras-chaves: espcimes, espcies, informtica, internet, relacionamento
563
DIVERSIDADE DE ABELHAS E FENOLOGIA DA FLORAO DAS PLANTAS MELFERAS EM FRAGMENTOS DA MATA ATLANTICA NO MUNICPIO DE IARA, SANTA CATARINA
Bruna de Costa Alberton*, Beatriz Wessler, Mainara Figueiredo Cascaes, Jaqueline Bonazza Rodrigues, Birgit Harter-Marques *Curso de Cincias Biolgica da Universidade do Extremo Sul Catarinense UNESC Av. Universitria, 1105, Bairro Universitrio, 88806-000 Cricima, SC brualberton@hotmail.com Diversos estudos mostram a importncia da manuteno da diversidade de polinizadores na floresta para assegurar a reproduo das espcies vegetais, no ocorrendo declnio ou extino total dessas populaes. Atualmente, grande parte da biodiversidade das florestas tropicais est se perdendo devido destruio e fragmentao. A fragmentao florestal afeta os processos ecolgicos das populaes, modificando ou mesmo interrompendo os processos de polinizao e disperso, dentre outros. Visando fornecer informaes para o manejo de remanescentes florestais no sul do Estado de Santa Catarina, este trabalho teve como objetivo levantar a apifauna e as plantas melferas utilizadas pelas abelhas, alm de conhecer o comportamento fenolgico da florao das plantas que ocorrem nestes remanescentes. O estudo foi realizado em duas reas de entorno ao Aterro Sanitrio da Empresa SANTEC, municpio de Iara, entre agosto/2007 e maro/2008, onde realizaram-se coletas quinzenalmente. Foram registradas 112 espcies vegetais em flor com o maior nmero de espcies florindo nos meses de outubro a dezembro. A maioria das espcies (76%) apresentou florao curta de duas a quatro semanas e apenas trs espcies mostraram perodo de florao de cinco a sete meses. Foram observadas visitas de 17 espcies de abelhas nas flores de 25 espcies vegetais , correspondendo a 22,3% do total das espcies encontradas em flor durante o estudo. Dentre elas, A. mellifera foi a espcie mais abundante com 55% das visitas registradas. O maior nmero (27 indivduos) e a maior riqueza (11 espcies) de abelhas foram observados em novembro que corresponde ao ms com maior nmero de espcies vegetais em flor. Os resultados mostraram que apesar da presena de um grande nmero de plantas em flor nos remanescentes florestais estudados, a diversidade de abelhas foi muito baixa, provavelmente devido localizao da rea e suas caractersticas, uma vez que os remanescentes so pequenos e encontram-se descontnuos e isolados. Apoio: PIBIC/CNPq/UNESC Palavras-chaves: Fenologia de florao, Apifauna, Fragmentao, Apis mellifera
564
EXTINO DE Bombus bellicosus NA PORO NORTE DE SUA DISTRIBUIO

Aline Cristina Martins*, Gabriel A. R. Melo, Francisco C. C. Barreto Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Rua do Mato, Trav. 14, n.321, CEP: 05508-900 aline_cmartins@yahoo.com.br Seis espcies do gnero Bombus so conhecidas para o Brasil, cinco delas pertencentes ao subgnero Fervidobombus. Ao contrrio das espcies simptricas do gnero, B. bellicosus possui distribuio restrita ao sul do pas e pores do Uruguai e Argentina. A biologia destas abelhas muito pouco conhecida, mas sabe-se que fazem ninhos no cho com detritos vegetais; estes ninhos so protegidos por uma pelcula de cera, caracterstica presente apenas em Bombus do hemisfrio norte. Levantamentos recentes realizados no Paran mostraram que esta espcie no mais encontrada na regio. Muitas causas podem estar envolvidas na extino local de Bombus bellicosus no Paran, entre elas: 1. converso de hbitats e fragmentao 2. poluio e 3. mudanas climticas causadas pelo aquecimento global. Foi construda a distribuio potencial de Bombus bellicosus atravs do programa MAXENT utilizando-se de dados climticos atuais e de uma projeo futura de aquecimento global. Procurando novos dados sobre a espcie, foram feitas coletas em reas do sul do pas. A espcie foi coletada em So Joaquim (SC) e Cambar do Sul (RS), sendo o primeiro local dominado por reas agrcolas. A hiptese 1 torna-se assim questionvel. Os resultados da distribuio potencial mostraram pouca diferena entre projees futuras e atuais. Apesar disso a temperatura mdia anual foi a varivel que se mostrou mais importante na construo dos modelos. A adequabilidade, ao contrrio do que se previa, aumentou na rea norte da distribuio. Outros estudos mostram que a chance de uma espcie ser extinta maior nas reas que limitam sua distribuio, pois as populaes so menores nestes locais. As evidncias ainda so pequenas para indicar uma causa para o desaparecimento de B. bellicosus em locais onde antes era abundante. Sugere-se que esta espcie seja includa nas listas de fauna ameaada do Brasil, e que novos estudos sejam realizados visando sua conservao. Apoio: CNPq Palavras-chaves: conservao, distribuio potencial, campos naturais, Bombus
565
DIVERSIDADE GENTICA DE Eulaema nigrita (APIDAE: EUGLOSSINI) DE QUATRO RESERVAS LEGAIS E UMA RESERVA GOVERNAMENTAL NO SUL DO BRASIL
Gabriele Antico Freiria*, Amlia Nelci Teresita Pascual, Natasha Verdasca Meliciano, Douglas Caldeira Giangarelli, Silvia Helena Sofia *Universidade Estadual de Londrina - UEL; Instututo Nacional de Pesquisas da Amaznia - INPA Rodovia Celso Garcia, Cid Pr 445 Km 380, CEP 86051-990, Londrina - PR gabi_freiria@hotmail.com Apesar da importncia das abelhas Euglossini como polinizadores neotropicais, ainda so escassas as informaes sobre as populaes destas abelhas em fragmentos florestais no Brasil. Este estudo investigou a diversidade gentica de Eulaema nigrita de quatro fragmentos florestais de tamanhos diferentes (20 a 200 ha) constituindo reservas legais em propriedades particulares e de uma reserva florestal governamental (580 ha), localizados na regio norte do estado do Paran. A diversidade gentica foi estimada com base em marcadores moleculares RAPD e marcadores PCR-RFLP, estes ltimos obtidos a partir da anlise da regio 16S do mtDNA desta espcie euglossina. Foi analisado um total de 100 machos de E. nigrita, sendo 20 de cada um dos fragmentos estudados. A amplificao da regio 16S do mtDNA originou um fragmento de cerca de 610 pares de bases, o qual foi digerido com as enzimas de restrio Ase I, Dra I e Ssp I, que produziram, respectivamente, oito, quatro e seis fragmentos de restrio. Contudo, apenas um hapltipo foi encontrado para as cinco amostras estudadas. A proporo de locos polimrficos, estimada a partir de marcadores RAPD, variou de 53,61% a 60,0% entre as amostras de E. nigrita estudadas. As anlises mostraram valores de FST variando de 0,0089 a 0,0630, indicando uma baixa diferenciao gentica entre as amostras dos cinco fragmentos florestais estudados. As anlises revelaram que a maior parte da diversidade gentica encontra-se presente dentro das amostras. Os resultados obtidos com ambos os tipos de marcadores indicam a ocorrncia de uma nica populao de E. nigrita na regio estudada. Tal fato poderia ser explicado, em parte, por uma elevada capacidade de disperso desta espcie, capaz de transpor reas desmatadas, a qual tambm comumente encontrada em habitats alterados. Apoio: FPBN; Fundao Araucria; Klabin; CNPq; CAPES Palavras-chaves: Euglossini, RAPD, PCR-RFLP, 16S mtDNA, Fragmentos Florestais
566
FAUNA DE ABELHAS DA RESERVA NATURAL DE RIO CACHOEIRA, ANTONINA, PARAN, BRASIL

Claudiv Matos Maia*, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo Universidade Federal do Paran - UFPR Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran, cx. Postal 19020, 81531-98, Curitiba, PR, Brasil greenmatos@yahoo.com.br Foram realizadas coletas sistemticas de abelhas em uma rea de floresta ombrfila da Reserva Natural do Rio Cachoeira, Antonina, Paran, Brasil, no perodo de dezembro de 2006 a dezembro de 2007. Os resultados foram analisados comparativamente a outros estudos realizados em reas de floresta Atlntica do sul e sudeste do Brasil. A amostra constituda de 1147 espcimes pertencentes a 119 morfo-espcies de abelhas. Estas morfo-espcies esto distribudas em 41 gneros, 14 tribos e quatro subfamlias. A subfamlia Apinae foi a mais abundante e a segunda mais rica, enquanto Halictinae a mais rica e a segunda mais abundante. Megachilinae e Colletinae foram a terceira e quarta respectivamente tanto em abundncia quanto riqueza. As percentagens das quatro subfamlias em abundncia e riqueza (entre parnteses), excluindo Apis mellifera foram: Apinae 63,5 (35,34); Halictinae 17,66 (43,10); Megachilinae 18,1 (13,7); Colletinae 3,41 (5,12). No foi coletado nenhum representante da subfamlia Andreninae. O gnero mais abundante foi Apis com 31,9% do total de espcimes coletados, seguida por Cephalotrigona (9%) e Bombus (7,2%). Em riqueza os gneros Megachile com 16 espcies (13,67%) e Augochlora com 14 espcies (11,96%) foram os mais representativos. As plantas visitadas correspondem a 42 espcies, pertencentes a 38 gneros e 24 famlias. A famlia Asteraceae com nove espcies teve a maior abundncia de abelhas (46,9%). Comparaes com outros estudos atravs de anlise de correspondncia demonstram um agrupamento deste estudo com outras assemblias em reas de florestas ombrfilas do sul e sudeste do Brasil. Apoio: CAPES / Sociedade de Pesquisa em Vida Selvagem - SPVS Palavras-chaves: Apidae, Levantamento, Floresta Atlntica, Riqueza de espcies, Distribuio regional
567
UMA ARQUITETURA ORIENTADA A SERVIOS PARA COMPARTILHAMENTO DE DADOS ENTRE WEBLABS

Leonardo Nicacio Bessa*, Prof. Pedro Luiz Pizzigatti Corra, Marcelo Succi de Jesus Ferreira, Cris Gianini, Prof. Antonio Mauro Saraiva Escola Politcnica - USP; Instituto de Biocincias - USP Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3 n 380 - CEP - 05508-900 - So Paulo - SP leonardo.bessa@poli.usp.br Os WebLabs viabilizam novas possibilidades para o ensino e a pesquisa, pois instrumentos de um laboratrio so compartilhados atravs da Internet com usurios que, de outra forma, no teriam acesso a eles. Servios ambientais so servios teis oferecidos pelos ecossistemas, como a regulao de gases e conservao da biodiversidade. Para melhor estudar estes servios, so necessrias novas abordagens para disponibilizar, integrar e compartilhar os dados existentes sobre eles. O presente trabalho teve como objetivo o projeto e implementao de uma arquitetura de sistema de informao aberta e distribuda para WebLabs (de servios ambientais), que possibilite a realizao de experimentos remotamente. Um experimento foi realizado em 3 colnias de Melipona scutellaris. A cada 15 dias entre 12h e 14h, eram inseridos 9 tubos graduados com solues de xarope (gua e acar) nas colmias em diferentes concentraes. Aps 15 minutos eles eram retirados e fazia-se a leitura de quantos mililitros haviam sido consumidos pelas abelhas ao longo do tempo. Alm disso, foram inseridos HOBOS (sensores desconectados) nas colmias e uma estao metereolgica para capturar os valores de temperatura e humidade a cada 15 minutos. Aps a aquisio, os dados foram exportados em formato EML e para serem analisados com uma ferramenta integrada. Os principais resultados encontrados foram: a importao de dados obtidos de forma automtica viabiliza a execuo de experimentos com uma grande massa de dados; a exportao do experimento em formato padronizado facilita a disseminao dos dados e permite o uso de ferramentas de anlise abertas. Estes resultados mostram que o uso da arquitetura orientada a servios facilita o desenvolvimento de padres e a integrao de outros WebLabs de servios ambientais. Apoio: PRO-REITORIA DE GRADUAO DA USP Palavras-chaves: WebLab, Melipona scutellaris, web-Services, Ecological Metadata Language, Termo-Regulao
568
POPULATION ANALYSIS OF Partamona mulata AND Partamona helleri (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI) IN BRAZIL
Maria Cristina Arias*, Rute Magalhes Brito Universidade de So Paulo Departamento de Gentica e Biologia Evolutiva rua do Mato, 277 sala 320 05508-090 So Paulo, Brasil mcarias@ib.usp.br The Partamona genus comprises 33 species distributed from south Mexico to southern Brazil. Molecular approaches were developed to characterize populations of two species presenting a distinct geographic distribution: P. mulata has a small geographic range, found only in central Brazil (savanna); and P. helleri, which ranges largely in eastern Brazil (Atlantic forest). Individuals of P. mulata and P. helleri were collected from 58 and 47 nests, respectively. Both samples were divided into 5 geographic sub-samples or populations following their endemic range. Four PCR amplified mtDNA regions were analyzed by 6 restriction enzymes, and 9 microsatellite loci were amplified by using heterospecific primers. P. mulata presented only 2 haplotypes which differed by presence/absence of one single restriction site. Analyses indicated no differentiation among the populations. Conversely, P. helleri presented 10 haplotypes, being some exclusive and others shared among populations. The microsatellite analysis showed low genetic variability in both species and discrete population structuring, not related to the geographic distribution. The data indicates that P. mulata may have passed through a recent populational bottleneck or recent speciation process. However P. helleri seems to be an ancient species that have suffered a recent isolation probably due Atlantic Forest fragmentation during the Pleistocene. In both species, the low nuclear variability is an evidence of migration of males, since the queens are highly phylopatric; also habitat fragmentation (degradation of savanna and Atlantic forest areas) should be taken in account to explain the current genetic scenario. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: meliponini, Partamona, population genetics, microsatellites, mtDNA
569
DIFERENCIAO DE SEXOS EM QUATRO ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO BASEADO EM MORFOMETRIA GEOMTRICA DAS ASAS
Raphael Antonio de Oliveira Silva, Tiago Mauricio Francoy, Vera Lucia Imperatriz-Fonseca Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP, Instituto de Biocincias - USP Travessa do Rami, 44 - Vila Tiberio- Ribeiro Preto SP raphasilva@pg.ffclrp.usp.br A identificao de espcies j descritas para o grande pblico uma preocupao crescente em programas conservacionistas. As abelhas sem ferro, apresentam um importante papel ecolgico fundamental na manuteno dos biomas, uma vez que so polinizadores extremamente eficientes e constituem um grupo chave nestes programas. Como opo de identificao, a anlise de dados de morfometria geomtrica das posies relativas das junes de nervuras das asas anteriores tem demonstrado bons resultados para grupos de abelhas. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo testar a diferenciao de sexos em espcies dentro do grupo Meliponini. Para cada uma das quatro espcies estudadas (Nannotrigona testaceicornis, Frieseomellita varia, Scaptotrigona depilis e Melipona quadrifasciata) foram coletados em mdia 100 operrias e 100 machos. As asas anteriores direitas das operrias foram retiradas com o auxlio de pinas e colocadas entre lminas de microscopia. As asas foram fotografadas e marcos anatmicos foram marcados nas junes de nervuras das asas e as coordenadas cartesianas das mesmas foram obtida atravs do pacote TPS de softwares de anlise. Os resultados obtidos por meio de Anlise de Componente Principal foram extremamente satisfatrios, obtendo uma excelente separao inter-especifica. J as espcies de Nannotrigona, Frieseomellita e Melipona apresentaram uma diferenciao entre os indivduos de diferentes sexos, corroborando anlises anteriores de outros trabalhos que tambm diferenciaram os sexos em espcies do gnero Plebeia. As diferenas nos padres de venao de asa nos diferentes sexos provavelmente so devidas s diferenas nas atividades de vo apresentadas pelos grupos. Apoio: CNPq, Fapesp Palavras-chaves: morfometria geomtrica, asa, TPS, Meliponini
570
ABUNDNCIA DE Eulaema nigrita LEPELETIER, 1841 (APIDAE, EUGLOSSINA) EM FRAGMENTOS FLORESTAIS URBANOS E RURAIS NA REGIO DE RIO BRANCO, ACRE
Danielle Storck-Tonon*, Elder Ferreira Morato Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia, Universidade Federal do Acre Av. Andr Arajo, 2936, 69060-000, Manaus, AM danistorck@inpa.gov.br As abelhas pertencentes sub-tribo Euglossina so conhecidas como abelhas das orqudeas e ocorrem apenas na regio Neotropical. De modo geral, reas com maior cobertura florestal apresentam maior abundncia e riqueza dessas abelhas. Contudo, a espcie Eulaema nigrita Lepeletier, 1841 vem sendo considerada como indicadora de reas abertas ou impactadas. O objetivo deste trabalho foi investigar a abundncia de El. nigrita em fragmentos florestais urbanos e rurais na regio do municpio de Rio Branco, Acre. As abelhas foram atradas por substncias odorferas e coletadas com rede entomolgica e armadilhas durante 6 dias em 10 fragmentos florestais (5 urbanos e 5 rurais). Foi amostrada tambm uma rea localizada no centro urbano da sede do municpio de Rio Branco, local mais impactado da regio. Foram coletados 357 machos de El. nigrita (44% atrados por escatol e 31% por vanilina). Desses, 90 (25,2 %) foram coletados em fragmentos rurais, 235 (65,8 %) em fragmentos urbanos e 32 (9,0 %) no centro urbano do municpio. A abundncia de El. nigrita no foi influenciada pelo tamanho da rea do fragmento, permetro, conectncia, ndice de borda e nmero de fragmentos vizinhos, mas pela quantidade de cobertura florestal existente dentro de um raio de 3 Km (r = -0,66; p = 0,026), 4 Km (r = -0,72; p = 0,012) e 5 Km (r = -0,79; p = 0,004) a partir dos pontos de coleta. No centro urbano foi coletada a maior proporo desta espcie em relao s demais de Euglossina. Portanto, a quantidade de cobertura de vegetao existente na matriz em que o fragmento est inserido a varivel mais importante para explicar os efeitos da fragmentao florestal sobre a espcie. Apoio: CNPq / UFAC / Mestrado em Ecologia e Manejo de Recursos Naturais Palavras-chaves: Euglossina, Eulaema nigrita, Acre, Fragmentao, Bioindicao
571
EVOLUTIONARY AND ECOLOGICAL EVENTS THAT INFLUENCED THE POPULATION STRUCTURE IN Plebeia remota, A STINGLESS BEE FROM BRAZIL
Flvio de Oliveira Francisco*, Maria Cristina Arias Instituto de Biocincias - USP Rua do Mato 277, 05508-090, So Paulo, SP, Brasil fofrancisco@hotmail.com Multidisciplinary studies have demonstrated that the stingless bee Plebeia remota have distinct behavior, morphometry, chemistry, and genetic characteristics according to the geographic distribution. In order to evaluate which evolutionary and ecological processes may have contributed to this scenario, the genetic structure of P. remota, from four distinct geographic areas in Brazil, was studied through mtDNA and microsatellite data. Seventy nests were sampled and mtDNA was analyzed with 15 restriction enzymes. Microsatellite analysis was performed in 72 individuals from 72 nests, by screening 7 heterospecific loci. Fifteen composite haplotypes were found and a strong mtDNA population structure was detected among all populations. Analysis of microsatellite polymorphism indicated that the four populations are characterized by a low genetic diversity. We believe that vegetation shifts caused by climatic changes and uplift of Brazilian coastal ranges since Tertiary, and also female philopatry were responsible for population isolation. Recent habitat fragmentation caused by human occupation may be the reason for the low nuclear genetic diversity. Microsatellite and mtDNA data showed high genetic distance and isolation between one geographic distinct population and the other 3 ones. Our work and the data already published in literature present evidences that one population might constitute a new species. This information plus the current habitat fragmentation between the populations studied constitute relevant data to conservation strategies. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Plebeia remota, stingless bee, mtDNA, microsatellite, Atlantic forest
572
AVALIAO DO POTENCIAL DE REAS AGRCOLAS COMO HABITAT DE ABELHAS POLINIZADORAS

Gleiciani Brger Patricio*, Maria Jos de Oliveira Campos, Eduardo Magalhes Borges Prata, Elizandra Goldoni Gomig, Bruno Ferreira, Jernimo Kahn Villas-Bas * Universisade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho - UNESP/ Rio Claro Avenida 24 A, 1515; 13506-900. Rio Claro, SP, Brasil gleipatricio@vivax.com.br O conhecimento das necessidades na disponibilidade de alimentos, stios de nidificao e tolerncia s modificaes dos habitats naturais a base para propor prticas de manejo favorveis ao estabelecimento de polinizadores nos campos de cultivo. O objetivo deste trabalho foi avaliar condies para o estabelecimento de uma fauna diversificada de polinizadores, nas regies de Rio Claro e Araraquara. Foram estudados trs remanescentes de vegetao nativa em diferentes reas agrcolas. As plantas foram amostradas, acompanhadas quanto fenologia e abelhas visitantes foram coletadas. No remanescente A, foram coletados 146 espcimes. Nos remanescentes B e P, 80 e 86 abelhas. A espcie vegetal mais visitada no ambiente A foi Gochnatia polymorfa (Less.) Cabr. (Compositae). Nos remanescentes B e P, Vernonia ferruginea Less. (Compositae) se destacou enquanto fonte de recursos florais. A famlia Compositae apresentou maior importncia para o forrageamento da fauna apcola destes ambientes. Foram avaliadas as condies propcias nidificao de abelhas. As reas estudadas apresentaram condies diversas para as espcies de abelhas encontradas. Muitas tm hbito de nidificao no solo, e estes ambientes devem apresentar uma boa capacidade de drenagem e, alm disso, importante receberem luz solar direta. A rea B se destacou nesse aspecto. Nos ambientes de mata ribeirinha das propriedades A e P, o solo encharcado, o que dificulta o estabelecimento de ninhos no cho. No entanto, apresentam estrutura arbrea bem desenvolvida, com indivduos em diferentes idades, desde plntulas a adultos de grande porte, oferecendo assim, locais adequados para abelhas que nidificam em troncos de rvores e cavidades pr-existentes. Os dados confirmaram a importncia destes remanescentes no contexto das paisagens agrcolas, as quais apresentam diferentes condies edficas, com espcies de plantas de hbitos diversos e diferentes caractersticas fenolgicas, oferecendo assim, recursos para o forrageamento e estabelecimento de stios de nidificao para a fauna apcola. Apoio: PROBIO/MMA, CNPq Palavras-chaves: abelhas, polinizadores, remanescenteS, reas agrcolas
573
ESTUDO PRELIMINAR DAS RELAES ENTRE ABELHAS (HYMENOPTERA, APOIDEA) NA EXPLORAO DE RECURSOS NATURAIS NO CERRADO EM DOURADOS (MS)
Anna Ktia Brizola-Bonacina*, Jos Chaud-Netto, Valter Vieira Alves-Jnior, Adan Rider Aristimunho Torres, Filipe Ruiz Zambo, Valeska Marques Arruda, Erico Nomura Cincias Biolgicas e Ambientais UFGD, Dourados-MS Av. 24-A, 1515 - Bela Vista - CEP: 13506-900 - Rio Claro-SP, Brasil annakatia@bonacina.com.br Com sua ampla extenso e heterogeneidade de ecossistemas, o Cerrado abriga uma enorme biodiversidade e abrange cerca de 20% do territrio nacional. O desenvolvimento de pesquisas bsicas sobre a melissofauna do Cerrado possibilita determinar padres dessas comunidades, bem como estratgias de utilizao racional da fauna apcola e de conservao das espcies da regio. Foram amostradas 22 espcies vegetais (EVs) florescentes entre Julho/2007 e Fevereiro/2008, sendo capturados 312 indivduos pertencentes a 51 morfoespcies de abelhas. Apidae apresentou o maior nmero de morfoespcies (40 ou 78,43%), seguida por Megachilidae (6 ou 11,76%), Halictidae (3 ou 5,88%) e Andrenidae e Colletidae, ambas com apenas uma morfoespcie (1,96%). A maior porcentagem de indivduos capturados (67%) ocorreu no perodo matutino, entre 8 e 11h. Os apdeos estiveram presentes em todas as EVs, exceto na EV 21, onde foram capturados apenas halictdeos. Doze das 22 EVs foram visitadas exclusivamente por Apidae. Megachildeos foram capturados em 5 EVs, porm sua maior representatividade ocorreu na EV 10 (Andira humilis Mart., Ex Benth). Colletidae (EV 3) e Andrenidae (EV 6 e EV 17) tiveram apenas um e dois indivduos capturados, respectivamente. O Coeficiente de Correlao de Pearson (r) foi aplicado para avaliar a relao entre as variveis ambientais registradas e o nmero de indivduos capturados (de cada famlia). Halictidae apresentou resultados significativos em relao Temperatura (r = -0,247; p = 0,03), Velocidade do Vento ( r = -0,249; p = 0,03) e Horrio (r = -0,216; p = 0,05). Entre Apidae e Halictidae (r = 0,359; p = 0,001), a relao sugere que os indivduos destas famlias exploram as mesmas plantas ao mesmo tempo. Todos os demais coeficientes de correlao obtidos foram no significativos e muito prximos de zero, o que sugere que a atividade de coleta dos indivduos capturados no teria sido influenciada pelas variveis ambientais. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Cerrado, Melissofauna, Conservao
574
UTILIZAO E ESTUDO COMPARATIVO DO USO DE NINHOS-ARMADILHA PARA ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, APIDAE)
Ricardo Caliari Oliveira*, Cristiano Menezes, Raphael Antnio de Oliveira Silva, Ademilson Espencer Egea Soares, Vera Lcia Imperatriz Fonseca Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo Av. Bandeirantes, 3900 - CEP 14040-901. Ribeiro Preto, So Paulo ricaliari@hotmail.com Os Meliponini destacam-se por possuir grande importncia ecolgica: polinizam at 90% das Angiospermas em algumas formaes vegetais; e econmica: fonte de renda para muitas famlias que comercializam mel. H aproximadamente um ano vem sendo desenvolvido o mtodo da utilizao de ninhos-armadilha na obteno de colnias de Meliponneos da natureza de maneira inofensiva ao meio-ambiente e legalmente aceita. Ninhos-armadilha so conjuntos confeccionados de garrafas plsticas com diferentes volumes (0,5L; 1L; 2L e 3L) banhadas em prpolis de diferentes espcies, com cotovelos de PVC encobertos por cera para serem utilizados como entrada para a colnia. Esses conjuntos so instalados nas rvores a cerca de 1,50 m do cho. Duas reas foram utilizadas para os estudos: O campus da USP Ribeiro Preto e a fazenda Aretuzina em So Simo, ambas no estado de SP. No campus foram instalados 200 conjuntos e, na fazenda, 100. Periodicamente os conjuntos so vistoriados de modo a verificar se houve sucesso na obteno de enxames ou se foram predados de alguma forma. Um software foi desenvolvido especialmente para facilitar a coleta dos dados contemplando grande nmero de variveis tais como: incidncia de sol; localizao; tipo de ocupao; predao; entre outras. Cerca de um ms aps a colnia ocupar a armadilha feita a transferncia para a colmia e local definitivo da colnia. O mtodo demonstrou eficincia com 38 enxames de cinco espcies de Meliponneos na Universidade e, na fazenda, 7 colnias de duas espcies. H correlao entre a eficcia na obteno de enxames nas armadilhas e o nmero de ninhos naturais, assim como o ambiente no qual esto inseridas (reas com rvores esparsas ou prximas) e tambm com a disponibilidade de outros locais para nidificao. Na fazenda Aretuzina houve concorrncia entre ninhos-armadilha e colmias antigas vazias. Outros tipos de materiais sero utilizados para estudos comparativos, porm a os ninhos-armadilha parecem cumprir bem a finalidade a qual se prope. Apoio: FAPESP e CNPq Palavras-chaves: Ninhos-armadilha, Meliponini, abelhas sem ferro
575
ESTUDO DA OCORRNCIA E COMPETIO ENTRE ESPCIES DE MELIPONNEOS E ABELHAS AFRICANIZADAS (HYMENOPTERA: APIDAE), EM FRAGMENTOS FLORESTAIS DA FAZENDA MONTE ALEGRE, KLABIN S.A. PR
Edson Aparecido Proni*, Oilton Jos Dias Macieira *Universidade Estadual de Londrina Campus Universitrio, 86051990 - Londrina, PR - Brasil - Caixa-Postal: 6001 proni@uel.br A manuteno da biodiversidade em um ecossistema de floresta realizada pelo cruzamento entre as plantas onde as abelhas nativas so parte integrante deste mecanismo aumentando a produtividade das plantas cultivadas e a fertilidade das mesmas. Dessa forma, o nmero de espcies de abelhas nativas encontradas em uma floresta pode ser considerado como um indicador de conservao. Os objetivos deste trabalho foram determinar a ocorrncia e processos de competio entre espcies de meliponneos e abelhas africanizadas Apis mellifera nas reas de floresta nativa, reflorestamento de Araucaria angustifolia, Eucalipto spp e Pinus spp da Fazenda Monte Alegre Klabin S.A (Telmaco Borba - Pr). Com o incremento da apicultura nessa rea e no seu entorno, houve um aumento significativo do nmero de caixas dessas abelhas. Ocorreram impactos negativos sobre as populaes de abelhas indgenas devido competio pela flora e invaso de possveis locais de nidificao, bem como o aumento de ataques nas reas de plantio e de preservao, principalmente aos funcionrios e animais confinados no zoolgico. Os resultados obtidos mostraram a ocorrncia de 12 espcies de meliponneos em floresta nativa, 6 em eucalipto, 4 em araucria e 2 em pinus. Considerando-se a extenso da rea estudada e a invaso das africanizadas, a ocorrncia de abelhas nativas apresentou ainda um nvel no satisfatrio, indicando assim um grau de interferncia significativo no processo de conservao dos ecossistemas de floresta e nas reas de reflorestamento. Apoio: KLABIN SA, UEL Palavras-chaves: Abelhas indgenas, Apis mellifera, biodiversidade, competio, hymenoptera
576
RECURSOS ALIMENTARES UTILIZADOS POR ABELHAS DO GNERO Xylocopa EM FRAGMENTOS DE CERRADO NA REGIO DO TRINGULO MINEIRO
Cludia Ins da Silva*, Paulo Eugnio Alves Macedo de Oliveira Instituto de Biologia, Universidade Federal de Uberlndia Rua Cear, s/n, Bloco 2 D, Umuarama, Uberlndia, MG, Brasil claudiainess@gmail.com As abelhas do gnero Xylocopa so consideradas polilticas. No entanto pouco se sabe sobre a relao Xylocopa-planta no cerrado. As fontes alimentares utilizadas pelas abelhas podem ser identificadas atravs de observaes diretas nas flores ou de anlise polnica. Neste estudo, foram investigadas as fontes alimentares utilizadas por quatro espcies de Xylocopa, em fragmentos de cerrado, no perodo de janeiro de 2006 a dezembro de 2007, a partir da anlise de amostras de gros de plen retirados do corpo e dos ninhos (clulas e fezes). O estudo detalhado da fenologia de florao na estratificao vertical, acompanhado da elaborao de uma palinoteca com todas as espcies floridas (178 sp.) nos fragmentos, permitiu a identificao das plantas utilizadas pelas Xylocopa spp. com maior preciso. Do total de plantas amostradas nas reas, Xylocopa spp. visitaram 60,11% delas. Xylocopa suspecta visitou o maior nmero de espcies de plantas (70sp.), seguida por Xylocopa frontalis (68sp.), Xylocopa grisescens (60sp.) e Xylocopa hirsutissima (51sp.). Houve diferena na composio das amostras de plen do corpo e de ninhos, mas, de maneira geral, verificou-se uma sobreposio no uso de recursos alimentares entre as espcies. Entre as flores de plen, os tipos polnicos mais freqentes foram os de Ouratea spectabilis, Senna sylvestris, Senna rugosa, Senna velutina, Tipo Senna occidentalis, Eriotheca gracilipes, Rhynchanthera grandiflora e Solanum lycocarpum. J entre as flores de nctar, os tipos mais freqentes foram os de Caryocar brasiliense, Bauhinia brevipes, Passiflora edulis, Serjania reticulata, Tipo Crotalaria brachystachya e Tipo Citrus. Embora as Xylocopa spp. correspondam a menos de 5% dos Apoidea no cerrado, essas abelhas contribuem significativamente para a polinizao de espcies de plantas nativas e cultivadas, como por exemplo, o maracuj-amarelo. Conhecer e preservar espcies de plantas chave no entorno de cultivos podem auxiliar na manuteno dos polinizadores que desempenhem um papel fundamental no seu sucesso reprodutivo. Apoio: FAPEMIG Palavras-chaves: Conservao, palinologia, recursos florais, abelhas, cerrado
577
DISPERSO DE ABELHAS EUGLOSSINA (HYMENOPTERA:APIDAE) EM MATRIZES DE CANA-DE-ACAR E PASTAGEM NO NORTTE FLUMINENSE

Willian Moura de Aguiar, Maria Cristina Gaglianone Universidade Estadual do Norte Fluminense Rua Alberto Lamego, 2000. Cep:28015-620 wmag26@yahoo.com.br Abelhas da subtribo Euglossina podem ser afetadas pela fragmentao do hbitat e pela matriz ao redor do fragmento florestal. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de matrizes de canade-acar e pastagem na estrutura da comunidade de Euglossina em um remanescente de floresta estacional semidecidual sobre tabuleiros (Mata do Carvo-So Francisco de Itabapoana-RJ), com 1053ha. A leste deste remanescente ocorre o predomnio da monocultura de cana-de-aucar e a oeste, pastagem. Foram realizadas coletas simultneas no interior, nas bordas, a 100m e a 1000m a leste e oeste do fragmento com auxlio de armadilhas contendo iscas aromticas de eucaliptol, cinamato de metila, vanilina, acetato de benzila e salicilato de metila. As armadilhas foram instaladas a 1,5m do solo de 8:00 as 15:00h durante um dia trimestralmente entre abril/07 e maro/08. Foram capturados 433 indivduos. Destes, 61 foram capturados no interior do fragmento, 106 na borda leste, 57 na borda oeste, 55 a 100m leste, 57 a 100m oeste e 49 e 48 a 1000m leste e oeste, respectivamente. Foram identificadas oito espcies de trs gneros. Machos de Euglossa cordata L. e Eulaema nigrita Lep. foram abundantes em todos os pontos de amostragem, porm em menor nmero no interior do fragmento, enquanto Eulaema cingulata Fab. s no foi amostrada a 1000m leste e apenas um indivduo foi coletado a 1000m oeste. Euglossa despecta Moure, E. fimbriata Rebelo & Moure e Exaerete smaragdina Gurin no ocorreram fora do fragmento e Euglossa pleosticta Dressler no foi amostrada a 100m leste e 1000m a leste e oeste. Euglossa securigera Dressler s no foi amostrada a 100m leste do fragmento. Este estudo demonstra que ambas matrizes influenciam negativamente a riqueza de espcies de Euglossina e podem ser consideradas barreiras fsicas para algumas espcies de Euglossina. Estes resultados corroboram resultados j encontrados na literatura. Apoio: Rio-Rural/GEF, BANCO MUNDIAL, FAPERJ/UENF, UENF Palavras-chaves: Fragmento, Mata de tabuleiro, Iscas aromticas, Euglossina, Disperso
578
ABELHAS (HYMENOPTERA: APIDAE) DE UMA REA DE DUNAS MARGINAIS (PRAIA DE PANAQUATIRA, SO JOS DE RIBAMAR-MA, BRASIL): ABUNDNCIA, DIVERSIDADE E SAZONALIDADE
Fabiana dos Santos Oliveira*, Mrcio Wesley Alves Mendona, Mrcia Cristina Silva Vidigal, Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Correia de Albuquerque 1* Laboratrio de Estudos sobre Abelhas, Departamento de Biologia-Universidade Federal do Maranho-UFMA Avenida dos Portugueses s/n, 65085-080 So Lus -MA, Brasil patemaia@hotmail.com Quase cinco mil quilmetros (79%) do litoral brasileiro so constitudos de restingas e dunas que, no Maranho, mistura-se com as vegetaes do cerrado. Como parte desse mosaico, a vegetao de dunas de praia merece ateno devido intensa modificao a que est sujeita e ao papel que desempenha na preservao da morfologia costeira. Foi analisada a estrutura de comunidade de abelhas de uma rea restrita de dunas primrias em So Jos de Ribamar, Maranho, Brasil. Amostragens quinzenais foram realizadas com metodologia padronizada totalizando 24 coletas. As coletas ocorreram no perodo de 12:00 s 18:00 hs no primeiro dia e das 6:00 s 12:00 hs no segundo por dois coletores. Um total de 3305 indivduos de 31 espcies, agrupadas em 14 categorias morfo-funcionais, pertencentes a 4 famlias (Apidae>Halictidae>Megachilidae>Andrenidae) foram coletadas nas flores. Centris com 14 espcies e 890 indivduos foi o gnero mais rico e abundante. O padro de abundncia e riqueza foi bastante semelhante ao de outros habitats de dunas no nordeste brasileiro. Das espcies amostradas, 61% foram representadas por menos de 36 indivduos e apenas 5 espcies foram muito abundantes com mais de 177 indivduos: Apis mellifera Linnaeus, Centris (Centris) leprieuri Spinola, Eulaema nigrita Lepeletier, Eufriesea surinamensis Linnaeus e Xylocopa (Neoxylocopa) cearensis Ducke. As abelhas estiveram presentes durante todo o ano, apresentando picos de abundncia no perodo de maior precipitao. A atividade diria foi maior entre 06:00 e 11:00 hs, quando a temperatura aumentava e a umidade relativa decrescia. Apoio: CNPq/PIBIC/UFMA; FAPEMA Palavras-chaves: Dunas de praia, Diversidade, Abundncia, Nordeste brasileiro, Apidae
579
ESTRUTURA GENTICA DE Euglossa pleosticta (HYMENOPTERA: APIDAE) DE DOIS REMANESCENTES DE MATA ATLNTICA NO SUL DO BRASIL
Francielly Medeiros de Oliveira*, Alessandra Novaga Alves, Gabriele Antico Freiria, Douglas Caldeira Giangarelli, Silvia Helena Sofia Universidade Estadual de Londrina Rodovia Celso Garcia Cid, Pr 445 Km 380, Cx. Postal 6001 CEP 86051-990 Londrina, Paran Brasil franci_elly1@hotmail.com A Mata Atlntica constitui a segunda maior formao de floresta tropical da Amrica do Sul, sendo um bioma com alta biodiversidade e endemismos de espcies. No estado do Paran, a Mata Atlntica est representada por fragmentos florestais com diferentes graus de conservao. No entanto, a fragmentao afeta diversos processos ecolgicos, comprometendo inmeras espcies. Considerando-se as abelhas Euglossini um grupo chave na polinizao de plantas Neotropicais e diante da escassez de informaes sobre a diversidade gentica de euglossinas em reas fragmentadas, este trabalho teve como objetivo reunir informaes sobre a estrutura gentica de Euglossa pleosticta de dois remanescentes florestais (com 200 e 580 ha) de Mata Atlntica, localizados no norte do Paran e distantes cerca de 30 km. Ambos os remanescentes apresentam vegetao nativa conservada. As anlises incluram 24 machos de E. pleostica do fragmento menor e 23 do remanescente maior. Marcadores PCR-RFLP foram obtidos a partir da amplificao das regies 16S e intergnica COI-COII do mtDNA, seguida pela digesto simples com as endonucleases ASE I e DRA I. A anlise da AMOVA detectou uma quantidade maior (72,28%) de variao gentica dentro das amostras analisadas do que entre estas (27,72%). As anlises revelaram uma diferenciao gentica muito alta entre as amostras de E. pleosticta dos remanescentes, com um valor de FST = 0,28. Detectou-se nove hapltiposcompostos, destes o hapltipo AAAA mostrou-se o mais freqente (61%) no remanescente maior e o hapltipo AAAB no fragmento menor (46%). Quatro hapltipos-compostos foram exclusivos para as abelhas do fragmento florestal maior e trs exclusivos para o fragmento menor. Os resultados sugerem uma restrio de fluxo gnico entre as abelhas das duas reas e possveis efeitos de deriva gentica atuando sobre os indivduos destas reas. Apoio: FBNP, Fundao Araucria, Klabin, CNPq Palavras-chaves: Euglossini, Euglossa pleosticta , DNA mitocondrial, PCR-RFLP, fragmentos florestais
580
ANLISE GENTICA DE Euglossa pleosticta (HYMENOPTERA, APIDAE, EUGLOSSINI) DE DOIS FRAGMENTOS FLORESTAIS MANTIDOS COMO RESERVAS LEGAIS
Alessandra Novaga Alves*, Gabriele Antico Freiria, Francielly Medeiros de Oliveira, Douglas Caldeira Giangarelli, Silvia Helena Sofia *Universidade Estadual do Norte do Paran - UENP; Universidade Estadual de Londrina - UEL Rodovia Celso Garcia Cid Pr 445 Km 380 CEP 86051-990 Londrina - PR alenalves@hotmail.com A Mata Atlntica, um dos ecossistemas mais ameaados do planeta, encontra-se hoje representada por um conjunto de fragmentos florestais, distribudos em vrios estados brasileiros. Inseridas na paisagem fragmentada deste ameaado ecossistema, as reservas legais, fragmentos florestais em propriedades particulares, constituem atualmente potenciais reservatrios da biodiversidade da Mata Atlntica. Contudo, at o momento, pouco se conhece sobre a diversidade gentica de populaes de organismos presentes em tais remanescentes florestais. Neste estudo, marcadores moleculares PCRRFLP foram empregados para investigar a diversidade gentica de populaes da espcie Euglossa pleosticta , de duas reservas legais, com tamanhos de 117 e 70 ha e separadas por cerca de 7 km, localizadas no norte do estado do Paran. Foram analisados 46 machos de E. pleosticta , destes 22 foram coletados na reserva menor e 24 na reserva maior. As anlises se basearam nas amplificaes das regies 16S e intergnica COI-COII do mtDNA da espcie estudada, posteriormente submetidas restrio pelas endonucleases Ase I e Dra I. Foram identificados sete hapltipos-compostos, dos quais dois foram comuns s amostras das duas reservas estudadas. Dos dois hapltipos comuns, um apresentou uma freqncia de ocorrncia de 45% em ambas as reservas. Com base na anlise da AMOVA detectou-se que a maior quantidade de variao gentica ocorreu dentro dos grupos (98,82%). Um baixo valor de FST (0,002) foi encontrado, indicando uma baixa diferenciao gentica entre as abelhas das duas amostras. Apesar disto, foi observada a presena de hapltipos-compostos exclusivos s duas amostras de E. pleosticta , um deles presente em uma freqncia relativamente alta (25%). Os resultados obtidos sugerem que, apesar das amostras serem bastante semelhantes geneticamente e da reduzida distncia entre as reservas legais, a ocorrncia de hapltipos-compostos exclusivos em freqncias elevadas, pode estar refletindo a incidncia de efeitos de endogamia ou mesmo deriva gentica entre as amostras de E. pleosticta destas reservas. Apoio: FBPN; Fundao Araucria; Klabin; CNPq Palavras-chaves: Euglossa pleosticta, PCR-RFLP, 16S mtDNA, intergnica COI-COII mtDNA, Remanescentes florestais
581
ESTRUTURA GENTICA DE Euglossa cordata (HYMENOPTERA, APIDAE, EUGLOSSINI) DE DUAS REAS URBANAS
Leandro Nunes de Andrade*, Olavo Pinhatti Colatreli, Karen Mayumi Suzuki, Silvia Helena Sofia Universidade estadual de Londrina Rodovia Celso Garcia Cid Pr 445 Km 380 CEP 86051-990 Londrina - PR nuneslondrina@hotmail.com Euglossa cordata uma espcie de abelha Euglossini que mostra ampla distribuio em territrio brasileiro, sendo comumente encontrada em ambientes urbanos. At o momento, pouco se conhece sobre a estrutura gentica de populaes de E. cordata presentes em reas urbanas. Considerando-se que marcadores moleculares constituem ferramentas teis em anlises genticas populacionais, este trabalho empregou marcadores PCR-RFLP na anlise gentica de amostras de E. cordata de dois fragmentos de mata, de tamanhos diferentes, distantes cerca de 5 km entre si, localizados na cidade de Londrina-PR, so eles: Parque Municipal Arthur Thomas (AT), com 66 ha e fragmento gua Fresca (AF) de 18,5 ha. Foram analisados 48 machos de E. cordata, 24 indivduos de cada fragmento. As anlises envolveram a amplificao de trs regies (16S, COI e intergnica COI-COII) do DNAmt de E. cordata, as quais mostraram, respectivamente, um tamanho aproximado de 615pb, 640pb e 660pb. Trs endonucleases (Ase I, Dra I e Ssp I) foram empregadas na obteno dos fragmentos de restrio. Foram identificados dez hapltipos-compostos com freqncias que variaram de 0,04 a 0,75. O hapltipo AAAA foi o mais freqente entre as abelhas das duas reas, mostrando, contudo, uma freqncia maior (75%) entre os machos de E. cordata do fragmento AF do que entre os machos do Parque AT (54%). Quatro hapltipos-compostos foram exclusivos para as abelhas do Parque AT e outros quatro exclusivos para os indivduos de AF, ocorrendo em freqncias que variaram de 4% a 8%. Tais resultados apontam uma variao no conjunto de hapltipos-compostos das abelhas das duas reas de estudo, a qual pode ser decorrente de uma limitao no fluxo gnico entre as abelhas destas reas e de possveis efeitos de deriva gentica atuando sobre os indivduos dos dois fragmentos urbanos estudados. Apoio: FBPN; Fundao Araucria; Klabin; CNPq Palavras-chaves: Euglossini, Euglossa cordata, rea urbana, PCR-RFLP, mtDNA
582
DISTRIBUIO E DIVERSIDADE DE ABELHAS EUGLOSSINAS (HYMENOPTERA, APIDAE) NUM GRADIENTE DE FITOFISIONOMIAS DO BIOMA CERRADO NA REGIO DE VAZANTE E PARACATU, MINAS GERAIS
Gabriel Caixta Martins*, Valria Lopes de Castro, Edilene Aparecida Leonel, Jefferson Luiz Antunes Santos, Mata Vasconcelos Santos, Guilherme Pereira Cruz , Melinda Rodrigues de Souza, Cludia Ins da Silva *FINOM; TECSOMA; Universidade Federal de Uberlndia Rua: Orlando Ulha Batista, 380A, Vila Mariana, Paracatu, MG gcm_vzt@yahoo.com.br As abelhas Euglossinas apresentam distribuio exclusivamente neotropical, sendo poucos os estudos relatando a diversidade dessas abelhas no Bioma Cerrado. Este estudo faz parte do Projeto Conhecer Preservar, e tem como objetivo estudar a distribuio e diversidade de abelhas Euglossinas num gradiente do Bioma Cerrado. O estudo teve incio em abril de 2008, com previso de trmino da primeira fase em maro de 2009. Foram selecionadas reas de reserva natural de fitofisionomias de mata ciliar, mata mesoftica, cerrado e cerrado sentido restrito. Essas reas esto localizadas nas Fazendas Bom Sucesso e Riacho do grupo Votorantim - Unidade Ao-Florestal nos municpios de Vazante e Paracatu, Minas Gerais. Pouco se conhece sobre a apifauna nessa regio, que apresenta fragmentos isolados nunca antes estudados. Para a coleta dos machos de abelhas Euglossinas, utilizamos quatro iscas odorferas: eucaliptol, eugenol, salicilato de metila e vanilina. De maneira geral, at o presente momento, foram coletados 51 espcimes, distribudos em seis espcies, sendo Eulaema (Apleulaema) nigrita Lepeletier, 1841, a mais abundante (50,94%), seguida por Euglossa (Glossura) imperialis Cockerell, 1922 (24,53%), Euglossa (Euglossella) jacquelynae Nemsio, 2007 (16,98%), Euglossa (Euglossa) fimbriata Reblo & Moure, 1995 (3,77%) Euglossa (Euglossa) pleosticta Dressler, 1982 e Euglossa (Euglossa) townsendi Cockerell, 1904 (1,89%). Eucaliptol e salicilato de metila foram iscas que atraram o maior nmero de espcimes (57,14% e 38,78%, respectivamente). Nessas iscas foram coletadas quatro das seis espcies identificadas nas fitofisionomias. Considerando o gradiente do Bioma Cerrado, na mata mesoftica e no cerrado sentido restrito foi encontrada a maior abundncia, apresentando juntas 67,92% do total de indivduos. Por mais que sejam preliminares, os dados obtidos at o momento mostram que essas fitofisionomias especificamente estudas nessas fazendas podem abrigar, devido ao seu alto grau de preservao, uma grande diversidade de abelhas Euglossinas quando comparadas a outras reas deste e de outros Biomas no Brasil. Apoio: VOTORANTIM METAIS; MEDUSA AMBIENTAL; FINOM; FAPEMIG Palavras-chaves: Conservao, Abelhas, Euglossini, Cerrado
583
LOCOS MICROSSATLITES PARA Melipona rufiventris (HYMENOPTERA: APIDAE)

Denilce Meneses Lopes*, Filipe Oliveira Silva, Tania Maria Fernandes Salomao, Lucio Antonio de Oliveira Campos, Mara Garcia Tavares Universidade Federal de Viosa Avenida PH Rolfs s/n, 36570-000 Vicosa, Brasil denilceml@yahoo.com.br Populaes da abelha sem ferro Melipona rufiventris tm sido reduzidas devido a destruio do seu habitat natural e ao de meleiros, sendo considerada ameaada de extino em algumas regies do Brasil. Assim, existe um interesse crescente no desenvolvimento de marcadores genticos que auxiliem no estudo da diversidade gentica desta espcie. Microssatlites so marcadores moleculares muito teis em estudos populacionais devido ao seu alto grau de polimorfismo,codominncia e multialelismo. Assim, o objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar microssatlites para a espcie M. rufiventris, a partir de primers ISSR (intersimple sequence repeats). As amplificaes foram realizadas utilizando o DNA extrado de um indivduo de M. rufiventris e os seguintes primers ISSR: (CA)8G, (GA)8YG, (TG)8RC, (GATA)2(GACA)2 e DVD(TC)7. Posteriormente, fragmentos ISSR foram purificados e clonados. Aps transformao em Escherichia coli DH5, 32 clones positivos foram seqenciados. A anlise destas seqncias permitiu o desenho de 10 primers microssatlites que foram testados em 20 indivduos de M. rufiventris. O nmero de alelos por loco variou de 2 a 5 (mdia=3,2) e a diversidade gnica variou de 0,10 a 0,76 (mdia=0,48). Diversos locos tambm foram polimrficos em M. quadrifasciata, M. bicolor, M. mondury e Partamona helleri, o que torna estes primers microssatlites teis em estudos populacionais de abelhas sem ferro. Apoio: CAPES; PROBIO; CNPq; FAPEMIG Palavras-chaves: ISSR, Microssatlite, Melipona, Hymenoptera
584
RELAES ENTRE ESTRUTURA DO HABITAT E OCORRNCIA DE ABELHAS E VESPAS SOLITRIAS

Bruno Ferreira, Jos Eduardo de Oliveira*, Maria Jos de Oliveira Campos Universidade Estadual Paulista, Campus de Rio Claro UNESP/RC Dept. de Ecologia. Av. 24-A, 1515, 13506-900, Rio Claro/SP, Brasil zeco@rc.unesp.br A importncia do contexto espacial para o entendimento dos sistemas ecolgicos e os efeitos da configurao das paisagens sobre a estrutura das comunidades biolgicas vm cada vez mais sendo reconhecidos por estudos em ecologia. Fragmentos de habitat terrestres encontram-se inseridos em uma matriz de paisagem que geralmente oferecem diferentes tipos de influncias sobre a diversidade biolgica. A matriz do entorno de um fragmento de habitat pode aumentar ou diminuir a quantidade de recursos disponveis ou recursos adicionais que no ocorrem dentro do fragmento de habitat local, alm de poder influenciar a conectividade estrutural dos fragmentos, possibilitando o aumento ou decrscimo das densidades populacionais locais e dos riscos de extino. Este estudo props a verificao dos efeitos de algumas das caractersticas do hbitat sobre a ocorrncia de abelhas e vespas que nidificam em ninhos armadilha. A rea de estudo compreendeu a regio da Bacia do rio Corumbata (interior de So Paulo). A partir de mapas temticos da classificao do uso e ocupao do solo foram selecionados fragmentos de cerrado na regio, os quais foram analisados dentro de parmetros da ecologia da paisagem. Para amostrar a ocorrncia de abelhas e vespas simultaneamente nos fragmentos selecionados foram utilizados ninhos-armadilhas produzidos a partir de inter-ns de bambu. Os resultados ilustram que a paisagem pode ser determinante na distribuio dos organismos, mas a qualidade do habitat tambm influencia neste parmetro. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Estrutura de habitat, Ninho-armadilha, Contexto da paisagem, Ecologia da paisagem, Fragmentao
585
GENETIC VARIABILITY OF A SMALL POPULATION OF Frieseomelitta varia (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI) THROUGH RFLP OF MITOCHONDRIAL DNA
Paulo Henrique Pereira Gonalves*, Maria Cristina Arias *Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, Brasil Rua do Mato 277, 05508-090, So Paulo, Brasil php@usp.br The stingless bees present great ecological importance because they are the main pollinators of several ecosystems. Some species are threatened due to forest fragmentation and devastation; such human actions are decreasing directly the bee population in special the ones that nest in hollow of trees, like Frieseomelitta varia. This species is characterized by the production of honey quite viscous. Its distribution covers the Brazilian states of BA, MG and SP. The objective of this study was to verify the genetic variability of a small population of F. varia living at the campus of the University of So Paulo, Ribeiro Preto-SP with subsequent inferences about the colonization of new areas by this species and also test Kerr and Vencovskys hypothesis, which postulates a minimum of 44 nests per area to prevent the loss of genetic variability in a population. The DNA was extracted from workers collected in 22 nests. Five mitochondrial regions were amplified: [ND2/COI], [COII], [ATPase 8 and 6/COIII], [ND1/16S], [16S/12S], and digested by the following restriction enzymes, EcoR I, Bcl I, Dra I, Ase I, EcoR V, Bgl II, Hind III, Pst I, Hinf I, Cla I, Ssp I and Bam HI. The results obtained so far, allow us to delineate mitochondrial regions that have accumulated more replacements of bases and the enzymes more effective in detecting them. Among the nest sampled only two haplotypes were identified. This fact indicates that this small population was presumably founded by at least two colonies, considering that the mtDNA has maternal inheritance. Apoio: FAPESP; CAPES Palavras-chaves: MtDNA, Frieseomelitta varia, PCR-RFLP
586
MICROSATELLITE LOCI ANALYSIS IN POPULATION OF Melipona marginata

Alisson Roberto Campos Moresco*, Maria Cristina Arias Instituto de Biocincias - USP Rua do Mato 277 05508-090 So Paulo, Brasil alissonbio@usp.br Melipona marginata is a species of Meliponini found in eight Brazilian states, RS, SC, PR, SP, RJ, ES, MG, BA. This specie is considered the most ancestral from the genus, and like others species from this genus, makes nests in tree hollows. Due to the forest devastation, this species is considered endanger in some states. Also the uncontrolled transportation of colonies mediated by humans can increase the genetic drift among natural and isolated populations. To study the population structure of Melipona marginata we collected specimens from 54 colonies along the geographical distribution of Melipona marginata, and we tested the amplification via PCR of 3 microsatellite loci (Mbi 201, Mbi 215 and Mbi 278), characterized originally in Melipona bicolor. The loci Mbi 278 and Mbi 201 presented a high number of alleles (6 each) and high level of heterozigozity, however the locus Mbi 215 presented only two alleles, being one of them extremely rare. The use of heterospecific primers in order to amplify microsatellite loci in Melipona marginata was not so promising. It is necessary a survey of more loci, including others characterized in Melipona bicolor and Scaptotrigona postica. Apoio: CNPq; FAPESP Palavras-chaves: Microsatellite, Melipona, Melipona marginata , PCR
587
INFLUNCIA DA SAZONALIDADE NA CONECTNCIA DE UMA REDE DE INTERAO MUTUALSTICA ENTRE PLANTAS E VISITANTES FLORAIS, EM UMA REGIO DE CERRADO, ITIRAPINA, SP
Maria Rodrigues Vianna*, Astrid de Matos Peixoto Kleinert Universidade de So Paulo Instituto de Biocincias, Dept.. de Ecologia mariavianna@usp.br Idealmente, todos os componentes em uma determinada teia alimentar coexistem e esto interagindo entre si. No entanto, quando consideramos longos perodos de tempo, a soma de todas as interaes observadas pode se tornar inadequada por que: i) espcies potenciais parceiras podem no apresentar sobreposio fenolgica; ii) espcies com longo tempo de florao podem aparentar ter mais interaes do que em um tempo em particular; e iii) possveis mudanas sazonais podem ser negligenciados. O objetivo deste trabalho foi avaliar se existe uma dinmica de sazonalidade nas redes de interao plantas-visitantes florais, atravs de medies da conectncia momentnea e cumulativa dessas redes. Este trabalho foi desenvolvido na Estao Ecolgica de Itirapina, SP, regio de reconhecida sazonalidade. Foram realizadas trs campanhas de coleta (janeiro, maro e abril de 2008). A construo das redes de interao segue as metodologias de Jordano (1987). O tamanho total do sistema observado at o momento de 18 espcies de plantas, 62 espcies de visitantes florais e 96 interaes realizadas. A conectncia cumulativa foi de 8,6%, e, para cada ms de coleta, 16,4%, 15,6% e 23,0%, respectivamente. No total, cada visitante utilizou 1,551,02 (mdiaDP) espcies de plantas e cada planta foi visitada por 5,335,21 espcies de mutualistas. Apesar dessa diferena, a conectncia independe do tamanho da rede (F(1,2)=8,041; R2=0,701; p<0,105). Ambientes mais secos usualmente tm maior conectncia, mas o cerrado no segue essa tendncia, apresentando, dentre os biomas brasileiros, a menor conectncia. Apoio: CNPq Palavras-chaves: redes trficas, mutualismo, conectncia, cerrado, sazonalidade
588
A POLINIZAO COMO UM SERVIO DO ECOSSISTEMA: UMA ESTRATGIA ECONMICA PARA A CONSERVAO

Flvia Monteiro Coelho Ferreira*, Paulo De Marco Junior Universidade Federal de Minas Gerais ECMVS, Instituto de Cincias Biolgicas, Av. Pres. Antnio Carlos, 6.627 - Pampulha monteirocoelho@gmail.com Os servios do ecossistema tm sido amplamente explorados sob o ponto de vista cientfico, entretanto a ecologia dos servios do ecossistema ainda pouco conhecida, o que limita nossa habilidade em entender seu valor e em planejar sua conservao e manejo. A converso de florestas e a expanso da agricultura tm transformado a paisagem, resultando na perda de biodiversidade e conseqentemente causando danos aos servios do ecossistema. Esse problema tambm atinge as comunidades de abelhas comprometendo a frutificao de muitas plantas nativas e cultivadas. De maneira geral, a polinizao de plantas cultivadas depende do manejo da cultura e da qualidade dos habitats adjacentes. Nosso objetivo foi identificar quais os fatores determinantes para o aumento de produtividade de culturas de caf, sob o aspecto da polinizao, na zona da Mata de Minas Gerais, em trs diferentes escalas: da planta, do sistema de cultivo e da paisagem. Para isso, contamos com experimentos pareados de polinizao em propriedades com sistema de cultivo convencional e agroflorestal e realizamos uma anlise da paisagem com base em imagens de satlite. Os polinizadores foram responsveis por um aumento de 5% na produo de frutos tanto nos sistemas convencionais como nos agroflorestais, que embora floristicamente mais ricos abrigaram uma fauna de abelhas semelhante a dos sistemas convencionais. Os fragmentos mais prximos cultura foram importantes para o ganho em produo por funcionarem como fonte de polinizadores. Entretanto, quando esta distncia superior a 250m ocorre uma competio entre fontes de recursos. Abelhas presentes nos fragmentos provavelmente visitaro a fonte de recurso mais prxima, que pode estar em diferentes pores da paisagem incluindo outras reas de plantio de caf, gerando assim um efeito negativo sobre a produtividade da rea analisada. Apoio: FAPEMIG; UFMG; UFV; CTA Palavras-chaves: polinizao, servios, produo, paisagem
589
DIVERSIDADE DA FAUNA DE ABELHAS DA SUBTRIBO EUGLOSSINA (HYMENOPTERA; APOIDEA; APIDAE) NA ESTAO ECOLGICA DE GUA LIMPA, CATAGUASES-MG
Guilherme do Carmo Silveira, Alice Alves Rodrigues, Georgina Maria de Faria Mucci Programa de Ps-Graduao em Ecologia e Conservao de Recursos Naturais - UFU; Faculdades Integradas de Cataguases-FIC Universidade Federal de Uberlndia - Instituto de Biologia - Campus Umuarama - Rua Cear S/N Bloco 2D guisilve@yahoo.com.br As Euglossina desempenham um importante papel na polinizao de diferentes famlias de plantas, mas principalmente Orchidaceae. Poucos so os estudos realizados sobre a diversidade dessas abelhas em florestas Estacionais Semideciduais de Mata Atlntica no Brasil, destacando-se alguns trabalhos realizados no Estado de So Paulo e Minas Gerais. O objetivo do presente estudo foi fornecer informaes sobre diversidade e sazonalidade de Euglossina em reas de Mata Estacional Semidecidual, alm comparar a diversidade obtida nesse estudo com outros trabalhos realizados em Mata Estacional Semidecidual. O estudo foi desenvolvido na Estao Ecolgica de gua Limpa (E.E.A.L.) (2122 S e 4242 W), uma rea de 70 ha situada na cidade de Cataguases MG. O perodo de realizao do trabalho foi de fevereiro a dezembro de 2007. As amostragens ocorreram a cada quinze dias, das 8:00 s 14:00 horas, com uso de cineol e eugenol como iscas odores. Foram amostrados 240 indivduos, pertencentes a treze espcies. Eulaema nigrita foi a espcie mais abundantemente encontrada, sendo o grau de dominncia, calculado pelo ndice de Berger-Parcker, de 0,48 indicando a importncia proporcional desta espcie em relao s outras. O ndice de diversidade Shannon-Wiener (H) foi de 1,47 e o de equidade (J) foi de 0,57. Tanto o ndice de diversidade quanto o de equidade obtidos no presente estudo foram semelhantes queles encontrados em outras reas de Mata Estacional Semidecidual j estudadas. O mesmo ocorre quando se considera a riqueza de espcies. Isto demonstra que, apesar de pequena, a E.E.A.L. abriga uma importante amostra da fauna de abelhas Euglossina. Apoio: Faculdades Integradas de Cataguases, Universidade Federal de Uberlndia Palavras-chaves: Diversidade, Euglossina, Polinizao, Mata Estacional Semidecidual
590
ESPECTRO POLNICO DE AMOSTRAS DE PLEN COLETADOS NAS CORBCULAS DE Tetragonisca angustula LATREILLE (APIDAE: MELIPONINA) NA ILHA GRANDE, RIO DE JANEIRO
Leila Nunes Morgado*, Rodrigo Morais Nunes, Maria Cristina A. Lorenzon, Vnia Gonalves-Esteves * Departamento de Produo Animal, Instituto de Zootecnia, UFRuralRJ; Laboratrio de Palinologia, Museu Nacional, UFRJ UFRRJ, Km 7 Rod 465, Seropdica, Estado do Rio de Janeiro leilamorgado@uol.com.br Entre o grupo das abelhas sem ferro, destaca-se Tetragonisca angustula, com ampla distribuio nos habitats tropicais e com hbito forrageador generalista. A caracterizao polnica das espcies vegetais da Ilha Grande atravs do estudo de gros de plen de Jata permite diferenciar as espcies vegetais da rea de forrageamento desta abelha e conhecer suas preferncias florais. O trabalho objetivou quantificar e avaliar a carga polnica encontrada nas corbculas de T.angustula. As amostras de plen foram coletadas na entrada de 5 colnias (em caixas), retiradas das corbculas das operrias que retornavam do campo, avaliadas por trs meses (fevereiro, maro, abril) em vegetao de regio insular. A anlise quantitativa de tipos polnicos foi realizada no Laboratrio AbelhaNatureza do Instituto de Zootecnia da UFRuralRJ, atravs da contagem dos tipos e determinao da freqncia. Encontraram-se 14.399 gros de plen, com a presena e freqncia dos seguintes tipos polnicos: Meliaceae (36,6%), Brassicaceae (21%), Euphorbiaceae (8%), Myrtaceae (tipo Eucalyptus) (7,2%), Piperaceae (tipo Piper) (7%), Cecropia (6,8%), morfotipo (4,7%), Ulmaceae (3,85%), Areaceae (3,65%), Arecaceae (3,62%), Mimosaceae (0,7%), Poaceae (0,35%) e Asteraceae (0,08%). Os gros de plen de Brassicaceae ocorreram apenas em abril com 45%, seguido de Myrtaceae (tipo Eucalyptus) (15,6%) e Cecropia (14,7%), o restante obtive um percentual abaixo de 8,3%. O tipo polnico Poaceae, geralmente agrupa plantas anemfilas, esteve presente em todos os meses do estudo, mas abaixo de 1%. Concluiu-se que T. angustula apresenta preferncia variada na busca de recursos, com hbito forrageador generalista, apresentando uma variao na composio de tipos polnicos entre os meses estudados. Apoio: FAPERJ, CNPq, IEF/RJ ras Palavras-chaves: Mata Atlntica, Melissopalinologia, Meliponina, Forrageamento, Campei-
591
ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) DA ILHA DE SANTANA-AP

Lorena Oliveira de Souza , Richardson Ferreira Frazo , Arley Jos Silveira da Costa Bolsista PROBIC, Graduanda de Cincias Biolgicas- UNIFAP; Mestrado Integrado em Desenvolvimento Regional- UNIFAP; Ncleo de Estudos Cientficos e Tecnolgicos sobre Abelhas Regionais- NECTAR/UNIFAP Rodovia Juscelino Kubitschek, KM 2, 68902-280 Macap, Brasil lorena_executiva@yahoo.com.br Abelhas desempenham papel ecolgico fundamental, pois so responsveis pela polinizao e manuteno do fluxo gnico das plantas que visitam, sendo importante conhecer sua diversidade. O esturio amaznico extremamente biodiverso, contudo, a Ilha de Santana, como todo Amap, apresenta lacunas de estudos relacionados biodiversidade, principalmente s abelhas. Objetivando conhecer os meliponneos das ilhas do esturio amaznico, foram realizadas coletas quinzenais nos trs ambientes da Ilha de Santana, Vrzea (predominante), Terra Firme e Savanas (fragmentos), de 08:00h s 16:00h entre agosto de 2007 e julho de 2008. Abelhas foram capturadas com auxlio de rede entomolgica, durante o forrageio em vegetais floridos e em ninhos encontrados com ajuda de moradores da localidade. Espcimes coletados foram sacrificados, montados, identificados e depositados na coleo do NECTAR/UNIFAP. Identificao at gnero foi realizada por chaves e at espcie por especialistas. As espcies encontradas foram: Nanotrigona punctata, Leurotrigona pusilla, Melipona compressipes, Trigona fulviventris, Trigona branneri, Tetragona handlirschii, Melipona cf. ilustris e Partamona ferreira. A diversidade dos meliponneos encontrados demonstra a importncia de preservar os ambientes da Ilha de Santana e conhecer a comunidade das espcies na bacia estuarina do rio Amazonas. Apoio: PROBIC - UNIFAP Palavras-chaves: meliponneos, Amap, biodiversidade, Amaznia, diversidade
592
A COMUNIDADE DE ABELHAS EM UM FRAGMENTO DE MATA ATLNTICA, NO MUNICPIO DE MARACAJ, SUL DE SANTA CATARINA
Mainara Figueiredo Cascaes*, Bruna de Costa Alberton, Beatriz Wessler, Jaqueline Bonazza Rodrigues, Birgit Harter-Marques * Curso de Cincias Biolgica da Universidade do Extremo Sul Catarinense UNESC; Programa de Ps-Graduao em Cincias Ambientais, Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC Av. Universitria, 1105, Bairro Universitrio, 88806-000 Cricima, SC mainaracascaes@hotmail.com Originalmente, o sul do Estado de Santa Catarina era coberto em quase toda sua extenso pela Floresta Ombrfila Densa. Atualmente, esta tipologia florestal encontra-se fragmentada, devido a atividades agrcolas e pela explorao de carvo. A fragmentao resultou em pequenos remanescentes de vegetao nativa que se avizinham a usos agrcolas e a outras formas de uso. No municpio de Maracaj, o Parque Ecolgico Maracaj representa um dos poucos remanescentes florestais de Floresta Ombrfila Densa encontrados na microrregio geogrfica de Ararangu. Estudos relacionados com a apifauna no sul do estado de Santa Catarina so raros e no so conhecidas as relaes da fauna do grupo com a flora local. Considerando o estado atual de degradao das florestas na regio e a carncia de estudos faunsticos, o presente trabalho objetivou proporcionar informaes sobre a diversidade de abelhas e suas fontes de alimento utilizadas no Parque Ecolgico Maracaj com vistas conservao e ao monitoramento ambiental deste remanescente. Realizou-se um levantamento das abelhas e das plantas visitadas por elas de abril/07 a maro/08, quinzenalmente, das 8:00 at 12:00 horas ao longo de dois transectos preestabelecidos. Foram coletadas 350 abelhas representadas por quatro famlias de 45 espcies. Apidae mostrou tanto a maior riqueza como a maior abundncia nas flores (24 espcies, 68,6% das visitas), seguida por Halictidae (13 espcies/22,9%), Megachilidae (5 espcies/3,1%) e Colletidae (3 espcies/5,4%). No foram encontrados representantes da famlia Andrenidae. Registrou-se a ocorrncia de apenas duas espcies de abelhas sociais nativas. As abelhas foram observadas visitar as flores de 49 espcies das 69 espcies vegetais encontradas com flores. Os resultados indicam que a vegetao do parque sustenta um baixo nmero de espcies de abelhas. No entanto, a ocorrncia de um nmero relativamente grande de espcies de abelhas solitrias mostra que no remanescente encontram-se espcies vegetais importantes para a manuteno deste grupo de abelhas. Apoio: PIC 170 VIII; FAPESC CON12219/2007-0 Palavras-chaves: Diversidade de abelhas, Fragmentao, Plantas melferas
593
FLORA VISITADA E UTILIZAO DOS RECURSOS FLORAIS POR ABELHAS SILVESTRES (HYMENOPTERA, APIDAE) EM UMA REA DE DUNAS NA PRAIA DE PANAQUATIRA, MUNICPIO DE SO JOS DE RIBAMAR, MA, BRASIL
Mrcia Cristina Silva Vidigal*, Fabiana dos Santos Oliveira, Mrcio Wesley Mendona, Mrcia Maria Corra Rego, Patrcia Maia Correia Albuquerque *Laboratrio de Estudos sobre Abelhas Departamento de Biologia Universidade Federal do Maranho. Avenida dos Portugueses, S/N, Campus do Bacanga, 65040-080, So Lus-MA, Brasil cynha_10@yahoo.com.br Este trabalho foi realizado com o objetivo de conhecer a flora utilizada pelas abelhas silvestres em um ecossistema de dunas no nordeste brasileiro. Entre maio/2005 e junho/2006, duas vezes por ms, as plantas floridas eram amostradas, registrando-se para cada espcie o perodo de florao, hbito e caractersticas florais como cor, forma e recurso oferecido ao visitante. Um total de 35 espcies vegetais foi observado, das quais 15 receberam visitas de 3.294 indivduos pertencentes a 31 espcies de abelhas. Fabaceae foi a famlia mais importante com 44% do total de visitas. Canavalia rosea (Sw.) DC (38%), Turnera odorata Rich. (27%), Passiflora foetida (DC) (14%), Ipomoea asarifolia (Desr.) Roem & Schult. (12%) e Chamaecrista hispidula (Vahl) H.S. Irwin & Barneby (6%) foram as espcies vegetais predominantemente visitadas. Xylocopa cearensis (Duke) apresentou o nicho trfico mais amplo (1,73), visitando 12 espcies de plantas e X. frontalis (Fabricius), o mais estreito (0,22) em trs espcies vegetais. Centris (Melacentris) sp. , Eulaema nigrita (Lepeletier) e Eufriesea surinamensis (Linnaeus) foram as espcies com maior sobreposio de nichos, concentrando suas visitas em C. rosea. Os tipos polnicos mais freqentes foram T21, P. foetida , T12 e Centrosema brasilianum (L.) Benth, seguidos de T8, T2, Turnera odorata, T28, T23, T32, Diodia sp. e Ipomoea asarifolia . Os recursos florais estiveram disponveis durante todo o ano, havendo maior produo de flores nos meses de maior precipitao. Apoio: FAPEMA Palavras-chaves: Anlise polnica, interao abelha-flor, dunas litorneas, Nordeste brasileiro
594
POLLINATION NETWORK OF A MELITTOPHILOUS COMMUNITY IN THE BRAZILIAN CERRADO: ECOLOGICAL PARAMETERS GIVE INSIGHTS INTO NETWORK STRUCTURE
Simone Caroline Cappellari*, Rosana Tidon, John L. Neff, Beryl B. Simpson The University of Texas at Austin; Universidade de Brasilia; Central Texas Melittological Institute The University of Texas at Austin, 1 University Station A6700, Austin, TX, 78712, USA. scappellari@mail.utexas.edu The conservation of biological diversity, including all components that support ecosystem services such as native plants and pollinators, is essential to the maintenance of sustainable natural and agro-ecosystems. In pollination, species-specific characteristics determine the effectiveness of interactions. Thus, certain species have a more important effect on the fitness of their partners leading to higher interaction strength between the species involved. Consequently, declines in populations of key partners can generate unstable plant-pollinator communities. In this study we use ecological parameters relevant to pollination to analyze the pollination network of a natural Cerrado plant community near Brasilia, DF. During the dry seasons of 2006 and 2007 (May-Aug.), we recorded 52 species of insects interacting with flowers of 50 species of plants, generating a web of 373 interactions. Using a weighted matrix of interactions, we analyzed this community regarding the reciprocity of mutualistic interactions, quantifying interaction strength as well as the role of specialists and generalists in network structure. The unique biotic and abiotic characteristics of this ecosystem suggest that its plant-pollinator communities may have a different structure from other tropical systems analyzed to date. Apoio: Dorothea Bennett Fellowship, UT Austin; Acknowledgments to S. Pawar and E. Economo for analyses support. Palavras-chaves: pollination networks, plant-pollinator interactions, Cerrado, tropical plant communities, melittophily
595
QUANTO TEMPO AINDA SOBREVIVER A RESTRITSSIMA Melipona capixaba?

Helder Canto Resende*, Tnia Maria Fernandes Salomo, Mara Garcia Tavares, Lcio Antnio de Oliveira Campos Universidade Federal de Viosa - UFV Departamento de Biologia Geral. Campus Universitrio. Viosa/MG. CEP 36570-000 heldercanto@yahoo.com Melipona capixaba foi includa na lista de espcies brasileiras ameaadas de extino e est, por isso, legalmente protegida. No entanto, oficialmente, pouco se tem feito para sua conservao. O Prof. W.E. Kerr declarou em 2001 que apenas um programa de criao dessas abelhas residentes, com trocas de rainhas e diviso racional de colnias, poder fazer a espcie atingir o ano 2010. Com o objetivo de conhecer o atual status de conservao destas abelhas, as reas de ocorrncia da espcie foram visitadas. Um total de 218 colnias de Melipona capixaba foram encontradas nos municpios de Afonso Cludio, Alfredo Chaves, Castelo, Conceio do Castelo, Domingos Martins, Santa Teresa e Venda Nova do Imigrante, no Esprito Santo. Um nico meliponicultor possui 94 colnias, resultado de seu sucesso no manejo e diviso de colnias mantidas em colmias racionais. Apenas 13 colnias foram encontradas em rea de mata nativa, sugerindo que a populao remanescente da Melipona capixaba est, em sua maioria, nas mos de criadores. Na maioria dos casos, as colmias so mantidas em troncos retirados da mata o que reduz o nmero de colnias naturais e aumenta o desmatamento. Muitas vezes as colnias mantidas nesses troncos morrem devido falta de cuidados adequados. A criao racional pode ser considerada a ao mais efetiva, e talvez a nica, de preservao dessas abelhas em sua rea de ocorrncia. Um programa de conservao da Melipona capixaba deve envolver a conscientizao da populao sobre a importncia da proteo e manuteno dessas abelhas em seus locais naturais; a multiplicao de colnias e adoo de prticas adequadas de manejo nos meliponrios j existentes; a reintroduo de colnias em reas onde a populao tenha sido extinta ou reduzida; e a recuperao do habitat da espcie. Apoio: CNPq - FAPEMIG Palavras-chaves: Meliponneos, Melipona capixaba, Mata Atlntica, Espcie ameaada, Conservao
596
APIFAUNA ATRADA POR ARMADILHA MOERICKE EM REA AGRCOLA NO MUNICPIO DE RIOS CLARO, SP
Luceli de Souza*, Maria Jos de Oliveira Campos * Universidade So Francisco - USF; Universidade Estadual Paulista - UNESP Avenida So Francisco de Assis, 218 CEP 12916-900 Bragana Paulista, SP, Brasil lucelidesouza@yahoo.com.br A intensificao da agricultura e a conseqente simplificao da estrutura das paisagens agrcolas tm exercido impacto sobre a riqueza da vegetao e da fauna. Diante da preocupao do impacto da agricultura sobre as abelhas nativas este trabalho teve por objetivo fazer um diagnstico da composio da apifauna em uma rea agrcola no municpio de Rio Claro, SP. O local da coleta, uma propriedade de 58.08 hectares, caracteriza-se pela produo de gros, atravs do sistema de plantio direto, sendo que 70% da rea de entorno utilizada para o plantio de cana-de-acar. Foram realizadas duas coletas mensais utilizando 17 armadilhas amarelas do tipo Moericke colocadas diretamente sobre o solo. Este tipo de armadilha tem sido utilizada para amostrar insetos fitfagos e de pragas agrcolas, para levantamento faunstico, monitoramento de populaes de insetos em reas fragmentadas e no manejo de habitat. Com as amostras obtidas com esta metodologia, pode-se estimar a abundncia relativa, a riqueza de espcies e a diversidade. Os exemplares coletados nesta rea agrcola foram triados, identificados e confirmados por especialista. Foram coletadas 456 abelhas distribudas em 20 gneros, pertencentes a trs famlias. Halictidae foi mais freqente (54,4%) seguida de Apidae (40,8%) e Andrenidae (4,8%). Os gneros Dialictus e Diadasia foram predominantes nesta rea. Foi registrada a presena de Callonychium pela primeira vez no Estado de So Paulo. A diversidade de espcies avaliadas pelos ndices de Shannon e Simpson foram, respectivamente, H=1,88 e 1/D=4,15. O ndice de Equitabilidade foi de 0,61. Apoio: Ps-graduao - UNESP Palavras-chaves: diversidade, abelhas nativas, agroecossistema, plantio direto, armadilha de gua
597
ESTRUTURA GENTICA DE Melipona mandaaia SMITH, 1863 (HYMENOPTERA, APOIDEA) NO ESTADO DA BAHIA
Margarete do Valle Werneck*, Lucio Antnio de Oliveira Campos, Ana Maria Waldschmidt2, Rogrio Marcos Alves3, Henrique Batalha Filho, Carolina Gonalves dos Santos* *Universidade Federal de Viosa - UFV; Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia UESB Jequi;3Escola Agrotcnica Federal de Catu - BA Avenida P. H. Rolfs s/n, 36570-000 Viosa, Brasil guetewerneck@hotmail.com Melipona mandacaia uma espcie de abelha indgena sem ferro (Tribo Meliponini) endmica de regies do semi-rido do nordeste do Brasil, importante polinizadora das plantas da caatinga e com grande potencial para meliponicultura. O nmero de colnias dessa espcie est diminuindo em conseqncia da destruio de seu habitat. A estrutura gentica de populaes de Melipona mandacaia de oito localidades da Bahia foi estudada com o emprego de sete microssatlites, primers heterlogos especficos para Melipona bicolor. O maior nmero de alelos encontrado foi seis e trs dos marcadores no apresentaram polimorfismo. A populao de Uiba apresentou um alelo exclusivo. Dois loci, polimrficos nas populaes de So Gabriel e Macurur, esto ligados. A anlise da varincia molecular mostrou que as populaes no esto estruturadas. O nmero de indivduos migrantes calculado indica raro fluxo gentico entre as localidades. As distncias genticas entre as populaes se mostraram muito pequenas e no houve correlao entre distncias genticas e geogrficas. A baixa variabilidade concorda com os dados disponveis para outros grupos de Hymenpteros. A ausncia de estruturao pode ser explicada pela separao recente da espcie. O principal impedimento ao fluxo gnico parece ser a fragmentao da vegetao e eliminao dos locais de nidificao para a espcie. Apoio: UFV, UESB e FAPESB Palavras-chaves: Estrutura gentica de populaes, Melipona mandacaia, Marcadores codominantes, Microssatlites, Gentica na conservao
598
COMUNIDADE DE ABELHAS EM FRAGMENTOS DA MATA ATLNTICA EM PERNAMBUCO

Poliana Yumi Ojima*, Clemens Peter Schlindwein Universidade Federal de Pernambuco - UFPE Rua General Salgado, 50/302, 51130-320, Recife, Brasil poliojima@gmail.com Nas bordas de florestas, em geral, encontra-se uma mistura de espcies de plantas da prpria floresta e de espcies helifitas, como as de clareiras e as ruderais. Espera-se que a apifauna destes habitats tambm seja composta por elementos de vrios ambientes. A Mata Atlntica do Nordeste Brasileiro foi reduzida pequenos fragmentos, de forma que reas de borda da mata e plantaes de cana-de-acar se tornaram mais extensas que a vegetao original. O objetivo deste estudo foi conhecer e caracterizar a fauna de abelhas de bordas de uma rea restrita da Mata Atlntica em Pernambuco. Em coletas mensais de quatro dias consecutivos, durante um ano, abelhas foram coletadas em flores na borda de quatro fragmentos diferentes. Foram amostrados 2270 indivduos em flores de 36 famlias de plantas. Abelhas Apidae foram as mais abundantes (1580; 69%), seguida de Halictidae (595; 26%), Megachilidae (80; 3,5%), Colletidae (11; 0,4%) e Andrenidae (4; 0,1%). Cerca da metade das abelhas amostradas pertecem a tribo Meliponini (1097; 48%) e um quarto Augochlorini (572; 25%). Operrias de Apis mellifera (Apidae, Apini) foram representadas por apenas 11% dos indivduos. Abelhas comuns na floresta Atlntica, como mamangabas (Xylocopini), abelhas corta-folha (Megachilini), abelhas das orqideas (Euglossini) e as Centridini foram pouco frequentes nas bordas de Mata Atlntica amostradas. Interpretamos a baixa frequncia de abelhas destes grupos e de abelhas oligolticas como consequncia da escassez de recursos florais na matriz canavieira. Nesse ambiente, a estreita faixa de borda dominada por abelhas eussociais e/ou polilticas. Apoio: CNPq; Usina So Jos S.A./ Grupo Cavalcanti Petrib Palavras-chaves: Mata Atlntica, Fragmentao, Polinizao, Apifauna, Comunidade de Apoidea
599
AS ABELHAS DO GNERO Centris DAS DUNAS DE SANTO ANTNIO (BA): DIVERSIDADE E USO DOS RECURSOS FLORAIS
Patrcia Oliveira-Rebouas*, Miriam Gimenes, Hosana Amorim, Vinina Ferreira, Murilo Dantas *Dept. Cincias Biolgicas, Universidade Estadual de Feira de Santana UEFS; Programa de Ps-graduao em Zoologia /UESC Km, 03 BR 116 - Campus Universitrio Cx. postal 252-294. Feira de Santana, BA, 44.031-460 plor@bol.com.br As abelhas do gnero Centris so consideradas importantes polinizadores da flora neotropical - plantas produtoras de leos florais, de plen e de nctar. Esses recursos so utilizados para a construo de ninhos e na alimentao de imaturos e adultos, sendo essenciais para a manuteno das populaes dessas abelhas. Esse trabalho teve como objetivo conhecer as espcies de abelhas do gnero Centris e as plantas utilizadas por elas para a obteno de recursos (leo, nctar e plen). O estudo foi realizado na RPPN Dunas de Santo Antonio-BA (1227 S e 3756 W), atravs de coletas mensais entre julho de 2005 a maio de 2006, das 6:00 s 17:00 h, seguindo o mtodo de Sakagami et al (1967). Quatorze espcies de abelhas do gnero Centris foram registradas para essa localidade. C. leprieuri , C. caxiensis, C. aenea e C. pulchra foram as espcies mais constantes nos meses de estudo (C > 70%). As abelhas utilizaram 17 espcies de plantas como fonte de recurso na rea estudada. Chamaecrista ramosa, Byrsonima trioptelifolia, Cuphea brachiata e B. sericeae foram as espcies de plantas mais visitadas. C. leprieuri foi registrada em 82 % das espcies de plantas, podendo ser considerada como importante visitante floral e polinizador potencial para as plantas dessa restinga. Outros trabalhos realizados em reas de dunas e restingas sinalizam para a relevncia dessa espcie de abelha como o principal polinizador da flora dos ambientes costeiros. Dessa forma a disponibilidade de recursos alimentares e locais de nidificao so fatores essncias para a manuteno das abelhas do gnero Centris na costa baiana. Apoio: FAPESB (Bolsistas PP3 e AT3); UEFS Palavras-chaves: Centris leprieuri, Restinga, Centris caxiensis, Centris aenea, Centris pulchra
600
VARIABILIDADE GENTICA DO LOCO csd EM Melipona compressipes manaosensis (HYMENOPTERA, APIDAE) EM POPULAO DE CATIVEIRO
Izaura Bezerra-Francini, Klilton Barbosa da Costa, Gislene Almeida Carvalho-Zilse Conservao e Biologia Evolutiva (GCBEv) do Instituto Nacional e Pesquisas da Amaznia (INPA); Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA/CPCA/INPA); Pesquisadora do GPA/CPCA/INPA Av. Andr Arajo, 2936, Bairro Aleixo; 69.083-000 Manaus AM ibfrancini@yahoo.com.br Na ordem Hymenoptera, com aproximadamente 200.000 espcies, a haplodiploidia o principal mecanismo de determinao do sexo. Todavia, alm da ploidia, outros mecanismos como a Determinao Complementar do Sexo (CSD), tm sido confirmados para vrias espcies, incluindo os meliponneos ou abelhas sem ferro. Em espcies sob CSD, os indivduos homozigotos para o loco sexual csd so machos diplides e os heterozigotos fmeas. Com o objetivo de conhecermos o mecanismo de determinao do sexo em Melipona compressipes manaosensis Schwarz, 1932, monitoramos a segregao sexual em 32 colnias rfs, recm formadas, a partir das existentes no meliponrio GPA/INPA (3 05.838 S e 059 59.103 W), Manaus, Amaznia. Amostramos 2020 indivduos, de maio a dezembro de 2007 e registramos, em duas colnias, segregao caracterstica da produo de machos diplides (1 macho: 1 fmea). Nestas, observamos as operrias atacando e matando os machos logo aps emergirem e tambm a rainha. Estimamos 22 alelos csd de acordo com a equao de Laidlaw et al. (1956) n = 2M(N+1)/(H+1), (n = nmero de alelos csd na populao, N = colnias amostradas, H = colnias que produziram machos diplides e M = machos que inseminaram a rainha). Nossos resultados indicam que M. compressipes manaosensis mais uma abelha sem ferro sob mecanismo de determinao complementar do sexo. Este conhecimento um parmetro importante a ser observado no manejo desta espcie, em cativeiro e em populaes naturais, assim como, em polticas de conservao da biodiversidade. Apoio: Banco Real; CNPq; ProVrzea; SUFRAMA; FAPEAM Palavras-chaves: Macho diplide, Determinao do sexo, CSD, Melipona compressipes manaosensis, Abelha sem ferro
601
CONSERVAO AMBIENTAL, RIQUEZA DE ABELHAS E POLINIZAO DO MARACUJ-AMARELO NO TRINGULO MINEIRO

Marcela Yamamoto*, Ana Anglica Almeida Barbosa, Paulo Eugnio Oliveira Programa de Ps-Graduao em Ecologia e Conservao de Recursos Naturais Instituto de Biologia Universidade Federal de Uberlndia Rua Cear, s/n, Caixa Postal 593, 38400-902 Uberlndia, MG, Brasil yamamotomarcela@yahoo.com.br A conservao de habitats naturais prximos aos cultivos pode ajudar na manuteno dos servios de polinizao. Embora estudos tenham verificado a relao entre declnio da polinizao de cultivos e distncia das reas naturais, no se encontrou um padro nesta relao. Para produzir frutos, o maracuj-amarelo necessita da polinizao cruzada, servio mantido por abelhas nativas de grande porte no Tringulo Mineiro, regio com apenas 18% de reas naturais. O objetivo do estudo foi verificar se a riqueza de polinizadores e a taxa de frutificao natural do maracujamarelo apresentam relao com a proporo das reas naturais no entorno dos cultivos. O estudo foi conduzido em plantios comerciais de Araguari e Uberlndia, de janeiro a abril de 2008. Os visitantes florais foram observados de maneira padronizada por censo em transectos. Flores em antese foram submetidas polinizao cruzada manual e outras observadas quanto polinizao natural. Os frutos foram acompanhados at prximo da maturao. A proporo das reas naturais foi calculada em imagens satlite num raio de 2 km a partir das coordenadas do centro de cada cultivo obtidas por GPS. At o momento, acompanhamos oito plantios e identificamos onze espcies de abelhas, sendo oito polinizadoras e as demais, pilhadoras de recursos. A eficincia de frutificao (frutos PN/ frutos PCM) variou entre zero e 0,64 e a proporo de reas naturais no entorno variou entre 11.1% e 48.6%. A quantidade de visitas e a riqueza de polinizadores apresentaram correlao significativa com a frutificao, mas no com os demais parmetros analisados. Os resultados sugerem que apenas a proporo de reas naturais no entorno dos plantios no explica diretamente a variao na riqueza dos polinizadores e na produtividade natural do maracuj-amarelo. Formas de manejo, substratos para nidificao e a prpria vegetao ruderal resultante do processo de antropizao podem influenciar a riqueza e diversidade de polinizadores. Apoio: FAPEMIG; CAPES; UFU Palavras-chaves: Passiflora edulis f flavicarpa, Xylocopa spp., cerrado, abelhas grandes
602
ECOLOGIA DE ABELHAS NATIVAS
603
VARIAO SAZONAL E DIVERSIDADE DE MACHOS EUGLOSSINI (HYMENOPTERA, APIDAE) EM FRAGMENTOS DE FLORESTA NO SUL DE MINAS GERAIS, BRASIL
Jos Carlos Simo Cardoso Junior*, Maria Jos de Oliveira Campos
Universidade Estadual Paulista (UNESP), Instituto de Biocincias, Departamento de Ecologia Avenida 24A 1515, 13506-900 Rio Claro, Brasil junior_simao@hotmail.com A identificao de compostos presentes nas fragrncias de orqudeas tem permitido a utilizao de inmeros deles, obtidos sinteticamente, como iscas, em estudos visando obteno de dados sobre diversidade, flutuao sazonal e preferncia por compostos de abelhas Euglossini. O objetivo desse estudo foi fornecer informaes sobre a variao sazonal e diversidade de machos de Euglossini em mata fragmentada no sul de Minas Gerais. A rea de estudos localiza-se no municpio de Jacutinga, MG, na Serra da Forquilha (22 17 08 S e 46 26 45 W). Caracteriza-se pela presena de vrios fragmentos de Mata Atlntica, em reas mais elevadas. Quatro pontos de coleta foram amostrados mensalmente, de abril de 2007 a maro de 2008. Em cada ponto foram colocados 3 chumaos de algodo amarrados na vegetao a 1,5 metros do solo, em linha reta, distantes 5 metros entre si. Em cada um utilizou-se um tipo de isca odor: eugenol, eucaliptol e vanilina aleatoriamente distribudos. Os machos atrados para as iscas foram coletados por trs horas a cada dia (entre 09:00h e 13:00h) com rede entomolgica, mortos com acetato de etila, separados por tipo de isca e ponto de coleta, posteriormente identificados e depositados em coleo entomolgica de referncia. Foram coletados 1777 machos distribudos entre quatro gneros e dez espcies. Eulaema nigrita foi a espcie mais abundante (27% dos machos coletados), seguida por Euglossa annectans (21,2%), Eufriesea violacea (20,2%), Eg. truncata (20%), Eg. fimbriata (5,2%), Eg. pleosticta (4%), Eg. melanotrichia (1%), Eg. aff. fimbriata (0,9%), Eg. cordata (0,3%) e Exaerete smaradgina (0,2%). A abundncia das abelhas variou sazonalmente, ocorrendo a freqncia maior na primavera e vero e a menor no fim do outono e no inverno. Machos de Eg. annectans e Eg. truncata foram coletadas durante o ano todo. No foram coletados machos de Eulaema nigrita em junho de 2007. Apoio: Palavras-chaves: Euglossini, Iscas-odores, Mata Atlntica, Flutuao sazonal
604
EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIDAE) DE QUATRO FRAGMENTOS DE MATA ATLNTICA DO ESTADO DE SO PAULO

Guaraci Duran Cordeiro, Heber Couto Cavalheiro, Isabel Alves-dos-Santos
Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Lab. Abelhas, Dept.. Ecologia, Instituto de Biocincias USP Rua do Mato, trav. 14, 321, Cidade Universitria, So Paulo guaradc@usp.br
O objetivo deste trabalho foi analisar a composio, abundncia e sazonalidade de machos da Euglossini atrados por iscas-odores em quatro fragmentos de Mata Atlntica do Estado de So Paulo. O estudo foi realizado entre maro/07 e maro/08. As reas de estudo foram: Parque Estadual da Ilhabela (IB) em So Sebastio; Parque Estadual da Serra da Cantareira (SC) em So Paulo; Estao Biolgica de Boracia (EB) em Salespolis e Parque das Neblinas (PN) em Mogi das Cruzes. As coletas foram mensais entre s 9:00 e 15:00hs. As iscas-odores utilizadas foram: eucaliptol, vanilina e eugenol. Foram coletados 1356 machos pertencentes a 18 espcies dos gneros Euglossa (Eg.), Eulaema (El.), Eufriesea (Ef.) e Exaerete (Ex.). As espcies coletadas, por ordem decrescente de abundncia foram: Eg. cordata, Eg. sapphirina, El. nigrita, Ef. violacea, Eg. truncata, Eg. iopecila, Eg. fimbriata, El. cingulata, Eg. pleosticta, Eg. annectans, Eg. stellfeldi, Eg. viridis, Eg. ioprosopa, Ex. smaragdina, Ef. mussitans, Ef. surinamensis, Ef. smaragdina, Eg. securigera. Do total de indivduos amostrados 75% foram coletados na IB. Das 15 espcies coletadas na IB, Eg. cordata e Eg. sapphirina foram as mais abundantes (86% dos indivduos), sendo que Eg sapphirina foi amostrada exclusivamente nesta localidade. Das 8 espcies coletadas no SC, Ef. violacea e Eg. truncata representaram 72% dos indivduos e Eg. securigera ocorreu somente nesta rea. No PN foram coletadas 10 espcies, El. nigrita, Eg. annectans e Ef. violacea somam 78% dos indivduos, sendo Ef. smaragdina exclusiva desta rea. Das 7 espcies da Boracia, El. nigrita contabilizou 61% dos indivduos. Eucaliptol atraiu 76% dos indivduos, porm as espcies de Eufriesea demonstraram certa preferncia por vanilina. Para todas as reas a abundncia foi maior entre novembro e maro. No geral as espcies de Euglossa e Eulaema no apresentaram sazonalidade, porm as espcies de Eufriesea apresentaram ntida sazonalidade entre outubro e fevereiro. Apoio: FAPESP/Biota 04/15801-0 Palavras-chaves: abelhas das orqudeas, essncias aromticas, ecologia de comunidade
605
OLIGOLETIA EM ALAGADOS SAZONAIS NA CAATINGA: Protodiscelis (PARACOLLETINAE) E MONOCOTILEDNEAS BASAIS

Airton Torres Carvalho*, Clemens Schlindwein
Programa de Ps-Graduao em Biologia Vegetal, Universidade Federal de Pernambuco Laboratrio Plebeia - Ecologia de Abelhas e da Polinizao Av. Prof. Moraes Rego, S/N, CEP: 500630-901, Cidade Universitria, Centro de Cincias Biolgicas, Departamento de Botnica carvalhoairton@yahoo.com.br Alagados temporrios em reas de clima semi-rido so ambientes nicos, comparveis a ilhas midas na Caatinga. Abrigam uma fauna e flora peculiar, muito diferente do entorno, so relativamente raros e altamente sazonais. Todos os representantes de Paracolletinae at ento estudados so oligolticos, ou seja, alimentam suas larvas com plen de uma ou poucas espcies de plantas relacionadas. O gnero Protodiscelis (Colletidae, Paracolletinae), que contm cinco espcies descritas, um dos gneros basais dessa subfamlia, e relacionado Alismataceae e Limonocharitaceae. Essas so duas famlias de monocotiledneas basais aparentadas e que ocorrem nesses alagados temporrios na Caatinga, com fenologia regida pela pluviosidade local. Durante o perodo chuvoso de 2006-2007 coletamos abelhas em flores de Limonocharitaceae e Alismataceae em 40 alagados em nove municpios de cinco estados nordestinos. Foram encontradas as seguintes relaes entre as abelhas de Protodiscelis e as plantas: fmeas de Protodiscelis palpalis foram coletadas exclusivamente em flores de Hydrocleys martii; fmeas de uma espcie ainda no descrita do gnero visitaram somente flores de Limnocharis flava. Em ambos os casos, foram os nicos polinizadores efetivos dessas limnocharitceas. Abelhas de Protodiscelis alismatis visitaram exclusivamente flores de Echinodorus grandiflorus. Essa planta foi, adicionalmente, visitada por uma srie de visitantes florais generalistas. L. flava, H. martii e E. grandiflorus e as respectivas espcies de Protodiscelis associados apresentaram fenologia sincronizada, e a especificidade foi mantida mesmo quando essas espcies ocorreram sintopicamente (simpatricamente no mesmo alagado). Trabalhos anteriores relacionaram Protodiscelis apenas a Alismataceae. A ntima relao de espcies com gneros diferentes de Limnocharitaceae e Alismataceae sugere uma relao antiga, haja vista que os dois grupos so pouco derivados filogenticamente. Apoio: CAPES, CNPq Palavras-chaves: Colletidae, semi-rido, abelhas, Limnocharitaceae, Alismataceae
606
ESTUDO POPULACIONAL DE Nannotrigona testaceicornis (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) ATRAVS DE MARCADORES MICROSSATLITES E mtDNA
Amanda Freire de Assis*, Eddy Jos Francisco Oliveira, Geusa Simone de Freitas, Ademilson Espencer Egea Soares Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil amandafassis@usp.br Nannotrigona testaceicornis pertence subtribo Meliponina que compreende as abelhas conhecidas como abelhas indgenas sem ferro. Nesta espcie as abelhas so eussociais e relativamente mansas sendo seus ninhos largamente encontrados na zona urbana. Os meliponneos esto entre os principais polinizadores da flora brasileira. No entanto, muitas espcies esto seriamente ameaadas de extino em conseqncia da perda do hbitat e isolamento, causados principalmente pelo desmatamento, uso indiscriminado de defensivos agrcolas e grandes queimadas. Este trabalho teve como objetivos avaliar a diversidade gentica em N. testaceicornis, por meio de marcadores DNA microssatlites, isolados a partir de biblioteca genmica enriquecida e marcadores DNA mitocondrial e analisar a eficincia de primers heterlogos em amplificar o genoma mitocondrial da espcie. O estudo abrangeu populaes presentes no Campus da USP-Ribeiro Preto e populaes localizadas em reas urbanas de: Ribeiro Preto, Campinas, Luiz Antnio e Bonfim Paulista, no Estado de So Paulo. Foram estudados 5 locos polimrficos com riqueza allica dos microssatlites variando de 2 a 10 alelos. As populaes externas ao Campus da USP-RP apresentaram alelos privativos. Em relao ao mtDNA foi testada uma combinao de 6 pares de primers sendo amplificadas regies contendo os seguintes genes: 16S; COI; COII; COIII; ATPase 8 e 6; ND3; cyt B. A partir dos dados obtidos observamos que os primers, utilizados apresentaram resultados satisfatrios na amplificao de regies do mtDNA.. Essas anlises permitiro inferncias sobre o grau de isolamento, o padro do fluxo gnico de N. testaceicornis e comparaes com outras espcies de meliponneos. De forma prtica, contribuir para um maior entendimento da biologia, da dinmica de populaes e da diversidade gentica das abelhas nativas do Brasil. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Nannotrigona testaceicornis, microssatlites, DNA mitocondrial, meliponneos, gentica de populaes
607
FONTES DE ALIMENTO UTILIZADAS POR DUAS ESPCIES DE ABELHAS SEM FERRO EM UM REMANESCENTE FLORESTAL NO MUNICPIO DE SIDERPOLIS, SANTA CATARINA
Jaqueline Bonazza Rodrigues*, Mainara Figueiredo Cascaes, Bruna de Costa Alberton, Beatriz Wessler, Birgit Harter-Marques Universidade do Extremo Sul Catarinense UNESC Av. Universitria, 1105, Bairro Universitrio, 88806-000 Cricima, SC Jackie_1bio@hotmail.com Os estudos sobre visitas de flores por abelhas eussociais indicam o uso generalizado de recursos florais. No entanto, trabalhos sobre a diversidade de forrageamento mostram tambm que estas abelhas utilizam apenas poucos recursos intensivamente durante certa poca do ano e diferem na escolha dos seus recursos entre si. Em trabalhos que visam estudar a diversidade de abelhas e as plantas melferas associadas, o mtodo mais utilizado para a obteno dos indivduos consiste na coleta das abelhas diretamente nas flores. Porm, com esta metodologia as outras espcies de plantas importantes na dieta destas abelhas permanecem desconhecidas. Por meio de anlises polnicas do plen armazenado nas colmias, este projeto objetivou investigar quais espcies compem a assemblia de plantas exploradas por duas espcies de abelhas sem ferro em uma propriedade particular, na qual os proprietrios mantm colmias de Plebeia droryana e Melipona quadrifasciata. As amostras de plen foram coletadas mensalmente entre abril/2007 e maro/2008 de potes novos de plen de colmias das duas espcies de abelhas. No total, as duas espcies coletaram plen de 40 espcies vegetais pertencentes a doze famlias e quatro tipos polnicos no identificados. Onze destas espcies vegetais foram utilizadas por ambas as espcies para a coleta de plen, mas apenas trs destas constituram fontes principais para as duas espcies, com representatividade de plen de mais do que 45% nas amostras. As operrias de P. droryana visitaram preferencialmente flores de espcies da famlia Asteraceae (nove espcies), enquanto as de M. quadrifasciata mostraram preferncias para flores de espcies de Myrtaceae (oito espcies). Os resultados mostram que as duas espcies de abelhas utilizam intensivamente um pequeno nmero de recursos florais e apresentam diferentes preferncias florais durante o ano, evitando assim competio pelos recursos. Desta forma, as duas espcies conseguem coexistir em um mesmo local onde a oferta de recursos limitada. Apoio: FAPESC CON12219/2007-0 Palavras-chaves: Anlise polnica, plantas melferas, Melipona quadrifasciata, Plebeia droryana
608
VARIAO NO TAMANHO CORPORAL DE MACHOS DE Eufriesea nigrohirta EM AMBIENTES COM FITOFISIONOMIAS DISTINTAS EM OURO PRETO, MG
Cristiane Martins*, Rudo P. Ferreira, Marina C. Dutra, Caio B. Mentone,
Yasmine Antonini
Instituto de Cincias Exatas e Biolgicas- UFOP Campus Morro de Cruzeiro s/n, 35400-000, Ouro Preto, MG, Brasil crismartinsmg@yahoo.com.br O gnero Eufriesea apresenta sazonalidade bem marcada e muitas espcies so encontradas somente na estao chuvosa. Eufriesea nigrohirta parece ser endmica de regies de campo rupestre ocorrendo em reas de grandes altitudes. Este estudo teve como principal objetivo descrever alguns padres morfomtricos para avaliar as influncias do ambiente sobre a populao de Eufriesea nigrohirta. Machos foram coletados com iscas aromticas, quinzenalmente, em fragmentos de Mata Estacional Semidecidual (MES), Floresta Urbana (FU) e monocultura de Eucalipto (EU). A distncia intertegular (DI) foi tomada como medida de tamanho corporal. Eufriesea nigrohirta esteve ativa durante a estao chuvosa (outubro a fevereiro) sendo novembro o ms de maior abundncia (N=152, 70,37%). Cerca de 60% dos machos amostrados apresentaram valores de DI variando de 7,0 a 7,5mm (N=217, s=0,30). O tamanho corporal dos indivduos apresentou diferenas entre os fragmentos amostrados (F= 3,70; p<0,05), sendo os maiores indivduos presentes na FU e os menores nas reas de monocultura de Eucalipto. O tamanho corporal afeta vrias caractersticas associadas ao valor adaptativo do indivduo, para machos pode assegurar maior deslocamento para evitar competidores e melhores oportunidades de reproduo. A qualidade do habitat tambm pode exercer certas influncias sobre a populao de abelhas, principalmente pela oferta de recursos. Assim em reas pobres em recursos, as fmeas podem investir menos energia na produo de manchos, estas diferenas nutricionais podem refletir em machos menores em reas de poucos recursos, como no caso do Eucaliptal. A qualidade de habitat parece interferir no tamanho corporal dos indivduos, contudo para avaliar esta hiptese maiores investigaes devem ser conduzidas dada a sazonalidade da espcie. Como a medida de tamanho de indivduos algo complexo, outras caractersticas morfomtricas podem tambm refletir as influncias ambientais sobre as populaes de Eufriesea nigrohirta. Apoio: Capes/CNPq Palavras-chaves: Eufriesea nigrohirta, morfometria, distncia intertegular
609
ESTRUTURA ETRIA DAS POPULAES DE Eulaema cingulata (APIDAE: EUGLOSSINA) EM FRAGMENTOS DA REGIO DE OURO PRETO, MG
Marina C. Dutra*, Rudo P. Ferreira, Cristiane Martins, Caio B. Mentone, Yasmine Antonini
Instituto de Cincias Exatas e Biolgicas- UFOP Campus Morro de Cruzeiro s/n, 35400-000, Ouro Preto, MG, Brasil marveider@yahoo.com.br
Eulaema cingulata uma abelha comum com ampla distribuio geogrfica estando ativa durante vrios meses do ano. Esta espcie pode tolerar florestas em estgios iniciais de sucesso e reas fortemente antropizadas. Trabalhou-se com hiptese de que indivduos mais jovens so mais freqentes em iscas aromticas. Machos de Eulaema cingulata foram coletados, quinzenalmente, com o auxlio de iscas-odor, de julho a dezembro de 2007, em fragmentos de floresta semidescdua localizada na cidade de Ouro Preto, Minas Gerais. As idades dos indivduos foram inferidas atravs do desgaste alar, sendo consideradas quatro categorias: idade 1=sem desgaste alar e idade 4=com desgaste de mais de 10% da asa. Idades 2 e 3 foram consideradas desgastes intermedirios. A estrutura etria dos indivduos de Eulaema cingulata variou entre as estaes nos fragmentos amostrados (x=22,84 p<0,05). A presena de machos de idade 1 em todas as amostras evidencia a emergncia destes durante todo o perodo. Na estao chuvosa, coletou-se o maior nmero de indivduos de idade 1 (79,60%), estes representam 34,51% de todos os machos coletados neste perodo. Porm machos de idade 2 predominam tanto na estao seca (42,19%) quanto na chuvosa (49,56%). Durante a estao seca, os indivduos mais velhos (idade 4) representam 90,90% de todos os indivduos capturados nessa categoria, nessa mesma estao. O maior nmero de indivduos com desgaste alar foi observado durante o perodo de setembro, fim da estao seca. Esses dados mostram que as fmeas podem estar intensificando a construo de ninhos e ovoposio no fim do perodo de chuvas para que o maior nmero de emergncias acontea no vero, quando h maior disponibilidade de alimento. Apoio: Capes/CNPq Palavras-chaves: Eulaema cingulata, Estrutura etria, Desgaste alar
610
ABELHAS GENERALISTAS (MELIPONINA) E SUCESSO REPRODUTIVO DE RVORES COM FLORADA EM MASSA DE Stryphnodendron pulcherrimum (WILLD.) HOCHR., NA MATA ATLNTICA (BAHIA)
Daniela Monteiro, Mauro Ramalho, Ciro Tavares Florence, Jaqueline Figueredo Rosa, Marlia Dantas e Silva*, Marli Emilia Almeida Universidade Federal da Bahia Laboratrio de Ecologia da Polinizao ECOPOL/IBIO-UFBA Rua Baro de Jeremoabo, s/n, Campus Universitrio de Ondina, CEP:40.170-115, Salvador, Bahia, Brasil danielam@ufba.br rvores com flores pequenas, de morfologia generalizada, e com florao em massa (MFPG) esto fortemente associadas a pequenos insetos generalistas, principalmente abelhas sociais Meliponina. Entretanto, controvertido o papel dessas abelhas na polinizao desse grupo de plantas, muito comuns no dossel da floresta. Para testar a hiptese de associao estreita entre essas abelhas generalistas e as copas de rvores MFPG e tambm a premissa de efeitos relevantes sobre a produo de frutos (sucesso reprodutivo), analisou-se a freqncia de visitas e a riqueza de abelhas Meliponina nas copas de Stryphnodendron pulcherrimum. Foram amostrados os visitantes florais em 10 indivduos floridos, sorteados aleatoriamente em rea de Mata Atlntica, no sul da Bahia. Foram coletados 554 indivduos visitando as copas, dos quais 438 eram abelhas (79,4%) e 293 (52%) abelhas Meliponina. A proporo de abelhas Meliponina em relao aos demais visitantes variou entre 27 e 87% entre as copas. Os gneros mais abundantes, considerando o conjunto de visitantes, foram: Melipona (11,5%), Paratrigona (9,9%), Scaptotrigona (9,3%), Tetragonisca (5,7%), Schwarziana (5,0%) e Partamona (4,3%). A hiptese de associao ecolgica estreita entre abelhas Meliponina e copas com florao em massa de S. pulcherrimum ficou sustentata (100% das copas foram visitadas por este grupo). Porm as associaes entre riqueza de espcies e abundncia relativa de abelhas Meliponina e produo de frutos de S. pulcherrimum foram fracas e no sustentam a premissa de que essas abelhas generalistas atuem diretamente na frutificao dessas copas com florao em massa. Apoio: CNPq; FAPESB ; MICHELIN Palavras-chaves: abelhas sem-ferro, polinizao, dossel
611
HETEROGENEIDADE NA ABUNDNCIA DE EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIDAE) EM REA DE CERRADO DO PARQUE ESTADUAL SERRA DE CALDAS NOVAS, GO
Rafael Fosca de Freitas*, Solange Cristina Augusto Universidade Federal de Uberlndia - UFU Joaquim Cludio Fernandes 346, 38411-180, Uberlndia, MG, Brasil rafaff.br@gmail.com A composio e a abundncia de espcies podem variar dentro de uma mesma rea, uma vez que pontos prximos podem possuir caractersticas biticas bem diferentes. O objetivo deste estudo foi verificar possveis diferenas na composio e/ou abundncia de espcies Euglossini entre dois diferentes stios de coleta dentro de uma mesma rea. Foram selecionados dois stios de coleta dentro do Cerrado do Parque Estadual da Serra de Caldas Novas, eqidistantes aproximadamente 900m. Durante trs dias consecutivos (23 a 25/10/2007), foram realizadas coletas dirias simultneas, das 9h s 16h, nos dois stios. Tambm foi estimado o nmero de espcimes arbreas floridas em um raio de 100m ao redor dos pontos de coleta. A dominncia de espcies foi calculada usando-se o ndice de Berger-Parker. Para captura dos machos foram utilizadas armadilhas e trs fragrncias artificiais: cineol, beta ionona e salicilato de metila. Foi capturado um total de 207 machos, sendo 155 indivduos no stio 1 e 52 no stio 2. Eulaema nigrita foi a espcie mais abundante (71%), seguida de Euglossa jacquelynae (14%), Euglossa imperialis (8%) e Euglossa melanotricha (7%). A abundncia de indivduos presentes no stio 1 foi significativamente maior que no stio 2 (x=8,51; df=3; a=0,05). No stio 1 foram encontrados 197 espcimes arbreas floridas pertencentes s espcies Qualea grandiflora Mart., Qualea parviflora Mart., Palicourea rigida Kunth e Tocoyena formosa (Cham. & Schlecht.) K., sendo as trs primeiras consideradas fontes de nctar para os Euglossini. No stio 2 somente um indivduo florido de Qualea parviflora foi observado. As variaes encontradas corroboram com a hiptese de que a abundncia de machos de Euglossini pode variar entre dois stios prximos dentro de um mesmo habitat. Essa variao pode estar relacionada com a ocorrncia hot spots de fragrncias naturais e nctar, influenciando o estabelecimento temporrio dos machos preferencialmente em um determinado stio especfico. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Euglossini, Cerrado, heterogeneidade, abundncia, fragrncias
612
BIONOMIA DA ESPCIE CLEPTOPARASITA Protosiris gigas MELO, 2006 E SUA ASSOCIAO COM A ABELHA HOSPEDEIRA Monoeca haemorrhoidalis (SMITH, 1854) (APIDAE: OSIRINI, TAPINOTASPIDINI)
Lo Correia da Rocha-Filho*, Gabriel A. R. Melo *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP; Universidade Federal do Paran UFPR Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901, Ribeiro Preto, SP, Brasil correiadarocha@yahoo.com.br As abelhas cleptoparasitas caracterizam-se por invadirem os ninhos de hospedeiros solitrios e depositarem os seus ovos em uma ou mais clulas de cria. Algumas tribos so compostas exclusivamente por espcies cleptoparasitas, como os Osirini, cujos representantes presentes na regio Neotropical tm como hospedeiros as abelhas da tribo Tapinotaspidini. Este trabalho descreve aspectos da biologia da espcie Protosiris gigas e a sua relao com a hospedeira Monoeca haemorrhoidalis. O estudo foi conduzido na APA Mananciais da Serra, que apresenta um ectono de Floresta Ombrfila Densa e Mista. As coletas de dados foram realizadas entre outubro/2005 e fevereiro/2006, perodo de atividades de M. haemorrhoidalis. A emergncia dos primeiros indivduos de P. gigas ocorreu a cerca de um ms aps o incio das atividades de sua hospedeira e se findou a aproximadamente 40 dias antes do trmino da ocorrncia de M. haemorrhoidalis. Machos de P. gigas, aps emergirem, patrulhavam as reas de nidificao em busca de fmeas para copular, ao passo que estas sobrevoavam os ninhos para parasitarem. A cpula ocorria entre fmeas recm-emergidas e apenas um macho, embora vrios outros pousassem sobre o casal para tentarem copular com a fmea. Ao parasitarem os ninhos, fmeas de M. haemorrhoidalis no expulsavam ou mesmo apresentavam comportamentos defensivos contra suas parasitas que, por sua vez, interagiam agressivamente entre si. Espcimes de P. gigas forrageavam em flores de espcies presentes nas imediaes das reas de nidificao, como Rudgea gardenioides, Coccocypselum condalia (Rubiaceae); Hypochaeris radicata, Erigeron maximus (Asteraceae) e Verbena lobata (Verbenaceae). Aspectos biolgicos de espcies cleptoparasitas podem fornecer importantes subsdios para o estudo da bionomia das espcies hospedeiras, bem como para elucidar os fatores relacionados relao parasita-hospedeiro. Apoio: CNPq Palavras-chaves: cleptoparasitismo, Protosiris gigas, relao parasita-hospedeiro
613
BAIXA PRODUO DE RAINHAS EM Nannotrigona testaceicornis DURANTE A PRIMAVERA E VERO (APIDAE, MELIPONINAE)
Gisele de Carvalho Pinto Cabral*, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca *Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Instituto de Biocincias USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil giselecpc@pg.ffclrp.usp.br Estudar a produo de machos, rainhas e operrias o primeiro passo para possibilitar a multiplicao de colnias em larga escala, viabilizando sua utilizao tanto ecolgica quanto economicamente. possvel perceber que h diferenas no padro de produo de machos, rainhas e operrias entre Melpona e outros gneros. O objetivo deste trabalho avaliar se h diferenas temporais na produo de machos, rainhas e operrias da espcie N. testaceicornis entre a primavera e vero. Para a avaliao do nmero de sexuados foi utilizada uma tcnica no invasiva. A distino entre os sexos e as castas foi feita por caractersticas morfolgicas como tamanho das cabeas, dos olhos compostos, presena ou ausncia de corbcula. Durante os sete meses de coleta de dados, foram abertos 77 favos de onze colnias de N. testaceicornis, totalizando 15465 clulas desoperculadas. Dentre elas, 15191 eram ocupadas por operrias, que corresponderam a 98,23% de todos os indivduos produzidos, 272 machos (1,76%) e duas rainhas miniaturas (0,013%). A produo de operrias foi dada em todos os meses de estudo e em altas porcentagens. Os machos foram produzidos em apenas quatro meses (outubro, novembro, fevereiro e maro) no havendo diferena significativa entre eles. Merece uma ateno especial a produo de rainhas, que foi extremamente baixa. Mesmo sabendo que espcies no pertencentes ao gnero Melipona produzem poucas rainhas, a porcentagem encontrada foi muito menor se comparado com outras espcies, como Trigona (Lepidotrigona) ventralis, com 0,08% das fmeas produzidas e em P. remota, que encontrou 0,11% das fmeas produzidas. Portanto um estudo mais amplo e detalhado deve a ser feito nestas colnias. Mas mesmo assim, pode-se concluir que os fatores internos se pronunciaram mais que os externos s colnias. Apoio: CNPq Palavras-chaves: meliponneos, produo de sexuados, rainhas miniaturas, Nannotrigona testaceicornis
614
ESTRUTURA DE COMUNIDADES DE ABELHAS EUGLOSSINA EM FRAGMENTOS DA REGIO DE OURO PRETO, MG

Ri udo P. Ferreira*, Cristiane Martins*, Marina C. Dutra, Caio B. Mentone, Yasmine Antonini Instituto de Cincias Exatas e Biolgicas- UFOP Campus Morro do Cruzeiro s/n, 35400-000, Ouro Preto, MG, Brasil riudopaiva@gmail.com As abelhas Euglossina so ideais para os estudos de comunidades no s por permitirem uma maneira rpida de quantificao da diversidade, mas tambm por serem mais abundantes nas florestas tropicais. Este estudo avaliou a estrutura das comunidades de Euglossina em fragmentos amostrados na regio urbana de Ouro Preto (MSS, Horto, Jardim e UFOP) e no Parque Estadual do Itacolomi (PEIT) de julho de 2007 a fevereiro de 2008. Machos de Euglossina foram capturados com iscas aromticas. Foram coletados 957 indiv duos pertencentes a 14 espcies. Na maior parte dos fragmentos amostrados Eulaema nigrita e Eulaema cingulata foram as espcies dominantes com abundncia relativa superior a 20%. Nas reas de monocultura de Eucalipto (UFOP) aquela espcie representou cerca de 67,5% dos indiv duos coletados. A menor riqueza foi observada para reas fortemente antropizadas (MSS, 13 espcies). A maioria das espcies encontradas ocorreu tanto nos fragmentos localizados no PEIT (Porteira, Forno e Eucaliptal) quanto naqueles amostrados na matriz urbana. As espcies que tiveram ocorrncia mais baixa foram Euglossa pleiosticta, Euglossa annectans e Euglossa crassipunctata. Aspectos da biologia de Eulaema nigrita associam a ocorrncia desta espcie com reas abertas e perturbadas. Por esta espcie apresentar uma ampla distribuio geogrfica inclusive para grandes altitudes, alm de ser atra da por uma grande variedade de compostos aromticos, Eulaema nigrita pode ser um bom indicador de habitats pertubados. A fauna de Euglossina em Ouro Preto apresenta uma riqueza semelhante quela encontrada para outras regies de Mata Atlntica. Isto sugere que fragmentos na matriz urbana podem ser importantes para a conservao da fauna dessas abelhas. Apoio: Capes/CNPq.UFOP Palavras-chaves: Estrutura de Comunidades, Euglossini, Fragmentos de Mata Atlntica
615
RECURSOS LIMITANTES DA DENSIDADE DE NINHOS NATURAIS DE MELIPONNEOS EM UM FRAGMENTO FLORESTAL

Paulo Emlio Ferreira e Alvarenga, Ivan Paulo Akatsu, Ademilson Espencer Egea Soares Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes, 3900, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Departamento de Gentica, Bloco A, CEP 14049 900, Ribeiro Preto, SP pauloalva@usp.br Como a cobertura vegetal nativa restante na Regio Sudeste compreende principalmente fragmentos vegetais, pequenos na maioria das vezes, as populaes de abelhas indgenas sem ferro esto basicamente restritas a dois tipos de ambientes: reas urbanas e fragmentos de vegetao nativa. Por essa razo, importante compreender alguns fatores ecolgicos relacionados com populaes de meliponneos em pequenos fragmentos florestais. Questionamentos sobre a densidade de ninhos naturais encontrada em um dado ambiente ajudam a compreender melhor a dinmica dessas populaes. O objetivo do trabalho foi averiguar os possveis recursos limitantes da densidade de ninhos naturais de meliponneos na Estao Ecolgica de Ribeiro Preto, Mata Santa Tereza. Neste fragmento foram testados dois recursos como limitantes da densidade de ninhos: alimento e local de nidificao. Para testar alimento como recurso limitante foi realizado um experimento, o qual consistia em acompanhar o desenvolvimento (massa total) de oito colnias de meliponneos (Tetragonisca angustula, Scaptotrigona sp.) alocadas no interior da mata e comparar esse desenvolvimento com nove colnias das mesmas espcies alocadas em uma fazenda (ambiente controle) fronteiria mata. Para testar local de nidificao como recurso limitante foi realizado um experimento com ninhos-armadilha. Os resultados apresentados demonstram que, pelo menos para as espcies testadas, alimento no recurso limitante da densidade de ninhos, uma vez que tanto colnias da mata quanto colnias do ambiente controle se desenvolveram de maneira similar. J local de nidificao foi considerado um recurso limitante da densidade de ninhos para as espcies que nidificam em cavidades pr-existentes. Nossos resultados indicam que em pequenos fragmentos, geralmente em regenerao ou degenerao (efeito de borda), local de nidificao parece ser o principal limitante da densidade de ninhos naturais de espcies que utilizam cavidades pr-existentes. Apoio: Capes Palavras-chaves: Meliponina, Mata Santa Tereza, Densidade de ninhos, Ninho-armadilha, Recurso limitante
616
ALGUMAS PLANTAS VSITADAS PARA OBTENO DE PLEN POR OPERRIAS DE Melipona fasciculta Smith, 1858 EM ANAJATUBA, REGIO DA BAIXADA MARANHENSE
Mrcia Cristina Silva Vidigal*, Fabiana dos Santos Oliveira, Gracy Chrisley Alencar Carvalho, Ana Carolina Alves Malheiros Arajo, Monique Hellen Martins Ribeiro, Mrcia Maria Corra Rego, Patrcia Maia Correia Albuquerque *Laboratrio de Estudos sobre Abelhas Departamento de Biologia Universidade Federal do Maranho Avenida dos Portugueses, S/N, Campus do Bacanga, 65040-080, So Lus-MA, Brasil cynha_10@yahoo.com.br Melipona fasciculata, a tiba, amplamente cultivada em Anajatuba, desse modo toda informao adicional sobre a sua biologia muito importante para a sua explorao econmica. Este estudo est sendo realizado com o objetivo de identificar as fontes de plen utilizadas por M. fasciculata na regio, fornecendo subsdios para o manejo e preservao dessa espcie. As coletas so realizadas em duas caixas racionais, mensalmente, sendo capturadas, a cada hora, duas abelhas ao retornarem para a colnia com cargas de plen entre 6:00 e 17:00 hs. Para o reconhecimento da flora apcola presente na rea, est sendo feita uma palinoteca de referncia, confeccionada a partir dos botes florais das espcies vegetais encontradas prximas s colnias, alm de excicatas, que esto sendo confeciconadas e enviadas para identificao. As anlises polnicas so realizadas conforme o Mtodo de Acetlise de Erdtman (1960). De Outubro/2007 a Fevereiro/2008 foram identificadas 59 tipos polnicos distribudos em 13 famlias, sendo que o nmero de espcies por famlia variou de 1 a 6. Os tipos polnicos mais freqentes foram Solanum jamaicense Mill., T3, Lecythis sp., Japarandiba augusta L., Orbignya phalerata Mart, Citrullus sp., T12, T26 e T37 estando presentes em todos os meses. Analisando-se a carga polnica mensal, os tipos polnicos mais representativos foram S. jamaicense que apresentou um percentual de 48,96% no ms de Janeiro/08 e O. phalerata com 92,5% no ms de Novembro/07 sendo agrupados como polens dominantes. Considerando-se a freqncia total durante os 5 meses, O. phalerata, Lecythis sp. e S. jamaicense obtiveram frequencia relativa de 35,6%, 23,7% e 17,9%, respectivamente sendo considerados polens acessrios, enquanto Vernonia sp. (3,98%) e Syzygium cumini (L.) (9,6%) polens isolados importantes. Apoio: FAPEMA, EMBRAPA Amaznia Oriental, PIBIC/UFMA/CNPq Palavras-chaves: Meliponicultura, anlise polnica, tiba, Baixada Maranhense
617
PROJETO MELIPONRIOS DIDTICOS (JOO PESSOA, PB)

Jernimo Kahn Villas-Bas* , Celso Feitosa Martins Programa Regional de Ps-Graduao em Desenvolvimento e Meio Ambiente (PRODEMA), Universidade Federal da Paraba; Departamento de Sistemtica e Ecologia CCEN, Universidade Federal da Paraba PRODEMA, Universidade Federal da Paraba, Joo Pessoa, PB, Brasil, 58059-900 jeronimokvb@gmail.com A inteno de incentivar a meliponicultura na cidade de Joo Pessoa decorre da avaliao de que essa atividade permite compatibilizar de forma positiva aspectos ambientais, culturais e econmicos, fundamentais para assegurar sua sustentabilidade. Nesse sentido, a prefeitura deste municpio, representada por sua Secretaria de Meio Ambiente, vem desenvolvendo o projeto Meliponrios Didticos. O elevado grau de arborizao urbana da cidade, aliado presena de enclaves florestais significativos, como a Mata do Buraquinho e matas ciliares remanescentes de rios e crregos urbanos, oferecem condies diferenciadas ao forrageio das abelhas. A meliponicultura uma atividade intimamente ligada aos costumes nordestinos, sendo o manejo rstico de abelhas nativas amplamente realizado no interior da Paraba e na prpria cidade de Joo Pessoa. A criao de abelhas sem ferro integrar atividades relacionadas Agenda 21 na periferia da cidade, e aspectos ecolgicos relacionados s abelhas tm oferecido tima oportunidade para a educao ambiental. Dois meliponrios instalados no Parque Arruda Cmara e no SESC Gravat mostraram resultados positivos, uma vez que as atividades previstas para a primeira etapa do projeto ocorreram sem contratempos. As colnias de abelha Uruu (Melipona scutellaris) foram instaladas nos ambientes escolhidos, e alojadas no modelo de caixa racional planejado para abrig-las. As etapas de montagem dos meliponrios, confeco das caixas, aquisio das colnias, transferncia para as novas colmias e fortalecimento dos enxames foram cumpridas. O investimento mostrou o seu valor ao ilustrar o curso de meliponicultura oferecido pela Secretaria de Meio Ambiente em outubro de 2007. O curso contou com a participao de 25 alunos, potenciais agentes meliponicultores de suas comunidades e instituies. Meliponicultura urbana um tema pouco estudado e merece especial ateno por demonstrar potencial de insero em polticas pblicas no Brasil, em especial no Nordeste e no estado da Paraba. Apoio: Prefeitura Municipal de Joo Pessoa Palavras-chaves: Melipona scutellaris, meliponicultura urbana, Agenda 21, Paraba
618
FAUNA DE ABELHAS DA RESERVA NATURAL DO RIO CACHOEIRA, ANTONINA, PARAN, BRASIL

Claudiv Matos Maia*, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo Universidade Federal do Paran Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran, cx. postal 19020, 81531-98, Curitiba, PR, Brasil greenmatos@ufpr.br Foram realizadas coletas sistemticas de abelhas em uma rea de floresta ombrfila da Reserva Natural do Rio Cachoeira, Antonina, Paran, Brasil, no perodo de dezembro de 2006 a dezembro de 2007. Os resultados foram analisados comparativamente a outros estudos realizados em reas de floresta Atlntica do sul e sudeste do Brasil. A amostra constituda de 1147 espcimes pertencentes a 117 morfo-espcies de abelhas. Estas morfo-espcies esto distribudas em 41 gneros, 14 tribos e quatro subfamlias. A subfamlia Apinae foi a mais abundante e a segunda mais rica, enquanto Halictinae a mais rica e a segunda mais abundante. Megachilinae e Colletinae foram a terceira e quarta respectivamente tanto em abundncia quanto riqueza. As percentagens das quatro subfamlias em abundncia e riqueza (entre parnteses), excluindo Apis mellifera foram: Apinae, 63,5 (35,34); Halictinae 17,66 (43,10); Megachilinae 18,1 (13,7); Colletinae 3,41 (5,12). No foi coletado nenhum representante da subfamlia Andreninae. O gnero mais abundante foi Apis com 31,9% do total de espcimes coletados, seguida por Cephalotrigona (9%) e Bombus (7,2%). Em riqueza os gneros Megachile com 16 espcies (13,67%) e Augochlora 14 espcies (11,96%) foram os mais representativos. As plantas visitadas correspondem a 42 espcies, pertencentes a 38 gneros e 24 famlias. A famlia Asteraceae com 9 espcies teve a maior abundncia de abelhas (46,9%). Comparaes com outros estudos atravs de anlise de correspondncia demonstram um agrupamento deste estudo com outras assemblias em reas de florestas ombrfilas do sul e sudeste do Brasil. Apoio: CAPES, SPVS Palavras-chaves: Apidae, Floresta Atlntica, Levantamento
619
ABELHAS E VESPAS VISITANTES DE FLORES EM CAPES NO PANTANAL SUL

*Samuel Boff, Andrea Cardoso Araujo, Arnildo Pott Departamento de Biologia, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Programa de Ps Graduao em Biologia Vegetal; Departamento de Biologia, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Rua Cornlio Pires, 326, Cond. Campos de Sto Antonio, Itu-SP samboff@gmail.com As abelhas e vespas visitantes de flores foram estudadas ao longo de 12 meses na vegetao de borda de capes no Pantanal, sub-regies de Miranda-Abobral, Mato Grosso do Sul. Os visitantes florais foram coletados no interior de 40 parcelas de 100m cada, estabelecidas nas bordas de 10 capes. Todas as espcies em florao no interior das parcelas foram observadas por 10 minutos, sendo os insetos coletados com auxlio de rede entomolgica. Flores de 66 espcies foram visitadas, sendo principalmente representadas em ordem decrescente por espcies das famlias Asteraceae e Fabaceae, Malvaceae e Rubiaceae seguidas de, Lamiaceae e Verbenaceae. Hyptis suaveolens (Lamiaceae) foi visitada pelo maior nmero de espcies de abelhas e vespas (n=24), sendo as demais visitadas por nmero igual ou inferior a 10 espcies. Abelhas de 57 espcies foram observadas em visita s flores, sendo representadas por: Apidae (ca. 54%), Megachilidae (ca 30%), Halictidae (ca. 15%), alm de Colletidae e Andrenidae com aproximadamente 2% cada. A abelha extica Apis mellifera visitou o maior nmero de espcies de plantas (n=30), seguida por Trigona fuscipennis (n=19), Bombus atratus (n=15), Ceratina morrensis (n=12) e Tetragonisca angustula (n=7). Entre as vespas, foram identificadas 31 morfo-espcies, sendo Polystessp.2 (Vespidae) o visitante mais generalista. Este o primeiro levantamento da fauna de abelhas e vespas da regio do Pantanal Sul. Apoio: Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Propp (UFMS), Fundect Palavras-chaves: Capes, visitantes florais, abelhas e vespas, Pantanal, Mato Grosso do Sul
620
Megalopta (HYMENOPTERA: HALICTIDAE) COLETADAS COM ISCAS AROMTICAS NA REGIO CENTRO-OESTE DO ESTADO DE SO PAULO, BRASIL
Ftima do Rosrio Naschenveng Knoll, Leandro Mattos Santos* Faculdade de Cincias, UNESP Campus de Bauru; Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran Caixa Postal 19020, CEP: 81531-980, Curitiba, PR, BRASIL megalopta@gmail.com As abelhas noturnas do gnero Megalopta so coletadas na maioria das vezes em fontes artificiais de luz. Mas, este trabalho prope uma nova metodologia de coleta, utilizando iscas aromticas, semelhantes s usadas para Euglossina. Esta metodologia proposta devido ao grande nmero de abelhas coletadas, entre os anos de 1997 a 2000, em cinco localidades no estado de So Paulo: 1) Reserva Campo Novo Vargem Limpa - UNESP; 2) Campus da Universidade Estadual Paulista (UNESP-Bauru); 3) Estao Ecolgica de Bauru 4) rea de Preservao Permanente da Duratex S.A., em Agudos; 5) Estao Ecolgica dos Caetetus, entre Glia e Alvinlndia. Nas duas primeiras localidades foram colocadas armadilhas com as seguintes substncias: escatol, eucaliptol, eugenol, salicilato de metila e vanilina; nas outras no foi utilizado escatol. Todas as localidades foram amostradas por um perodo de dois anos ou mais, com coletas mensais. Do total (n= 918), Megalopta sp. n. (n=653) foi mais abundante exceto na rea de Preservao da Duratex, onde M. amoena (Spinola, 1853)(n=259) foi encontrada em maior nmero; M. aegis (Vachal, 1904)(n=6) foi pouco capturada, ocorrendo apenas na Reserva Campo Novo Vargem Limpa e na Estao Ecolgica de Bauru. Todos os exemplares capturados so fmeas, encontradas em maior nmero no vero, presentes nos demais meses e com ocorrncia esparsas nos meses mais frios. A substncia eugenol foi a mais atrativa, em abundncia quanto em riqueza. Salicilato de metila foi atrativa em relao abundncia de indivduos coletados; o eucaliptol e vanilina foram eficazes em relao a diversidade, mas no conseguiram atrair muitos indivduos. O escatol foi pouco eficaz e atraiu apenas uma abelha. Este estudo discute a abundncia de Megalopta nos fragmentos florestados e prope uma nova metodologia que permitir novos estudos sobre a diversidade e a biologia dessas espcies na regio Neotropical. Apoio: FAPESP, FUNDUNESP, CNPQ Palavras-chaves: Megalopta, iscas aromticas, fragmentos florestais, abundncia, sazonalidade
621
NATIVE BEES ASSEMBLAGE AS POLLINATORS OF TIMBER TREES IN THE AMAZON FOREST CANOPY: SPECIALIZED AND GENERALIZED SYSTEMS
Mrcia Motta Maus*, Paulo Eugnio A. M. de Oliveira Embrapa Amaznia Oriental; UFU Embrapa Amaznia Oriental, Laboratrio de Entomologia, Trav. Enas Pinheiro s/n, Belm, PA, 66.017-970 marcia@cpatu.embrapa.br Bees are key pollinators at the canopy stratum of the Amazon forest. Canopy pollination studies at the Amazon biome are relatively scarce, due to the difficulties of surveying at the tree top. Here we present data of melittophilous plants at the Tapajs National Forest, Western Amazon, Brazil, with specialized and generalized pollination systems. The pollination processes of four climax woody species, e.g. Jacaranda copaia (Aubl.) D. Don (Bignoniaceae), Dipteryx odorata (Aubl.) Willd. (Leg. Papilionoidae), Manilkara huberi (Ducke) A. Chev. (Sapotaceae) and Carapa guianensis Aubl. (Meliaceae), was studied from 2002 to 2004. The flower visitors were assessed directly on opened flowers using woody towers up to 45 m, as well as single-rope climbing technique. Reproductive phenology was monitored weekly in 30-40 plants of each species. J. copaia was effectively pollinated by a restrict number of medium-bodied bees, namely Euglossa and Centris. Likewise, C. guianensis pollinators were unspecific small-sized bees, mainly Meliponina and small riodinid butterflies. Thus, these two species showed higher specialization in comparison to D. odorata, which was pollinated by medium to large-bodied bees (Eulaema, Eufriesea, Centris, Bombus, Epicharis, Xylocopa, Augochloropsis, Meliponina) plus butterflies, moths, scarab beetles, wasps and hummingbirds. Equally, M. huberi showed a wide group of pollinators, represented by Meliponina, Anthophorina, hoverflies, butterflies, moths, wasps and perching birds. Flower morphology, pollen/nectar accessibility and attractants were significant features on the floral visitors preference. The dry season (September to November) concentrated the majority of flowering season. J. copaia flowered synchronously each year. D. odorata and C. guianensis showed an asynchronous pattern, with a few individuals flowering in the end of the rainy season (March to June), and a larger part from September to December. M. huberi presented a synchronous supra-annual flowering pattern, with gaps of 3-4 years, displayed on the transition from rainy to dry season (June to August). Apoio: Embrapa, DFID (Department for International Development UK) Palavras-chaves: Pollination, phenology, melittophily, Euglossina, Meliponina
622
ANLISE FAUNSTICA DE ABELHAS EM REAS DO PARQUE FLORESTAL DE PATROCNIO E NOVA PONTE CAXUANA S/A REFLORESTAMENTO
Jos Eustquio dos Santos Jnior*, Sebastio Ferreira Lima, Rosinalva da Cunha dos Santos *Centro Universitrio do Cerrado Patrocnio - UNICERP; Professor Doutor do Centro Universitrio do Cerrado Patrocnio - UNICERP Artur Botelho s/n Bairro Dona Diva, 38740-000 Patrocnio, Brasil jrsantos140782@yahoo.com.br O levantamento das abelhas foi realizado quinzenalmente, de novembro/2007 a abril/2008, em duas reas de cerrado pertencentes Caxuana S/A Reflorestamento, Estado de Minas Gerais, com o objetivo de comparar a diversidade de abelhas entre as reas. A primeira rea (Parque Florestal de Patrocnio) uma rea de proteo ambiental e a segunda (Parque Florestal de Nova Ponte) possui alm da rea de proteo ambiental, reas de cultivo e reflorestamento de Pinus e Eucalipto. Nas duas reas foram percorridos transectos, onde os insetos eram coletados com redes entomolgicas. Foram coletadas 799 abelhas, sendo 549 referentes Patrocnio e 250 a Nova Ponte, identificadas em 18 espcies. O ndice de Similaridade entre as reas 83,9%, com 13 espcies comuns. Na primeira rea, obteve-se ndice de Diversidade (Shannon-Wiener) H=1,6 e as espcies predominantes foram Apis mellifera, Trigona hyalinata Lepeletier, Trigona spinipes Fabricius e Trigonisca sp. Moure, e na segunda, obteve-se ndice de Diversidade (Shannon-Wiener) H=1,498 e as espcies predominantes foram Apis mellifera, Trigona spinipes Fabricius, Neocorynura sp. Schrottky e Megachile (Acentron) sp. Mitchell. Apoio: Caxuana S/A Reflorestamento; UNICERP Palavras-chaves: Abelhas, Biodiversidade, Levantamento
623
INFLUNCIA DA IDADE DA RAINHA SOBRE O POP DE Scaptotrigona postica (HYMENOPTERA, MELIPONINA)

Genilson Rodrigues Ferreira Lima*, Alexandre Santana Azevedo, Marcos Henrique Rodrigues Carvalho Universidade Federal do Maranho UFMA Rua V 9, Quadra 9, Residencial gua Branca 2, Bloco 1, Apto 002, Parque Shalon genilsonlima@hotmail.com O processo de aprovisionamento e postura (POP) envolve estreita relao entre rainha e operrias. O fator idade da rainha influencia significativamente as relaes entre as castas. Esse estudo tem por objetivo acompanhar o desenvolvimento, realizado atravs de filmagens, de uma rainha recm fecundada comparando seu comportamento e interaes at seu estabelecimento. Os resultados obtidos apresentam alteraes principalmente nos aspectos ligados ao estgio de pr-aprovisionamento (pr). Em rainhas recm fecundadas o pr sofre um grande retardamento, pois ao subir no favo para iniciar a postura a rainha no consegue interagir com as operrias, podendo levar horas para influencilas a comearem o estgio de aprovisionamento. As visitas durante o intervalo foram mais demoradas e com aspectos de inicio de POP, sendo este muitas vezes ignorado pelas operrias, e ao trmino da postura a rainha freqentemente continuava no favo tentando manter as operrias agitadas. Nessas ocasies, as operrias costumam agredir a rainha avanando em direo com o primeiro par de patas elevado. Isso aumenta o grau de agressividade mtua entre rainha e operrias. Os resultados sugerem que o controle da rainha sobre as operrias incompleto nos primeiros momentos. Possivelmente isso est ligado a um controle hormonal ainda no totalmente desenvolvido pela rainha. Apoio: CNPq , CNPq/PIBIC Palavras-chaves: Aprovisionamento, Postura, Scaptotrigona postica, Rainha recm fecundada, Controle hormonal
624
OCORRNCIA SAZONAL DE OPERRIAS, RAINHAS E MACHOS EM FAVOS MADUROS DE Melipona bicolor schencki (APIDAE; MELIPONINI), EM AMBIENTE NATURAL DE CLIMA SUBTROPICAL, EM SO FRANCISCO DE PAULA, RS, BRASIL
Ney Telles Ferreira Junior*, Betina Blochtein Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul - PUCRS Av. Ipiranga, 6681 - Partenon - Porto Alegre/RS - CEP: 90619-900 tellesferreira@terra.com.br Melipona bicolor schencki considerada vulnervel a extino no sul do Brasil. Dados de perodo reprodutivo de colnias desta espcie podero subsidiar medidas para a sua conservao. Monitorou-se a produo de sexos e castas nas quatro estaes do ano. Operrias, rainhas e machos foram quantificados com a anlise de 1 favo maduro/colnia/ms de cinco colnias polignicas entre 11/2006 e 10/2007. O nmero de operrias foi crescente de novembro (final da primavera) a abril (inicio do outono), quando ocorreu o pico mximo destes indivduos. Estes nmeros podem estar relacionados ao perodo de abundante oferta de recursos alimentares, logo as abelhas respondem a este estmulo produzindo mais operrias para captarem e acumularem reservas de alimento. Rainhas foram produzidas em todos os meses, sendo que em maro e abril houve maior ocorrncia. Maro que corresponde ao final do vero e incio do outono na regio sul, tambm foi o ms de maior ocorrncia de machos. Em espcies de Melipona os machos deixam os ninhos com idade mdia de 18,6 dias. Considerando-se este fato, os machos de M. b. schencki emergidos em maro j estariam fisiologicamente aptos a copular com as rainhas emergidas em maro e abril. Constatada a emergncia de reprodutores em todos os meses do ano e as maiores taxas de adultos reprodutivos em maro e abril, levantam-se as hipteses: a) reproduo pode ocorrer em qualquer poca do ano; b) h preferncia de reproduo no inicio do outono; c) elevadas taxas de reprodutivos no incio do outono, perodo de condies meteorolgicas adversas, atuam como mecanismo de compensao, elevando as chances de sucesso de cpula. Apoio: CNPQ Palavras-chaves: produo de sexos e castas, favos emergentes, clima subtropical, sazonalidade, abelhas sem ferro
625
PROPORO E DISTRIBUIO ESPACIAL DE OPERRIAS, RAINHAS E MACHOS EM FAVOS DE Melipona bicolor schencki GRIBODO, 1893 (APIDAE; MELIPONINI) EM AMBIENTE NATURAL, NO SUL DO BRASIL
Ney Telles Ferreira Junior*, Betina Blochtein Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul - PUCRS Av. Ipiranga, 6681 - Partenon - Porto Alegre/RS - CEP: 90619-900 tellesferreira@terra.com.br Melipona bicolor schencki ocorre na regio Sul do Brasil e em reas de altitude elevada na regio Sudeste. Atualmente a espcie est restrita e isolada em reas com remanescentes de mata nativa, muitas vezes fragmentadas. Objetivou-se a avaliao da proporo e distribuio espacial de sexos e castas nos favos, no intuito de contribuir para o conhecimento da biologia da espcie e proporcionar subsdios para sua conservao. As clulas de cria dos favos foram abertas, expondo a cabea das pupas. Desta forma, indivduos foram quantificados de acordo com a anlise de 1 favo maduro/ colnia/ms de cinco colnias polignicas, durante 12 meses, para obteno da proporo de sexos e castas. Nos mesmos favos considerou-se trs reas concntricas de igual nmero de clulas (poro central, poro mdia e borda), analisando-se assim a distribuio espacial dos diferentes indivduos, pelo teste de Friedman a 95% de significncia. Operrias, rainhas e machos de M. b. schencki compreenderam 79,7%, 15,6% e 4,7% da cria, respectivamente. As colnias apresentam proporo estatisticamente semelhante (p>0,05) de operrias, rainhas e machos em cada uma das reas analisadas. Estudos realizados com Melipona quadrifasciata demonstraram concentrao de machos no centro e rainhas nas bordas dos favos; em Melipona favosa machos tambm so dispostos no centro. Considerando-se que a poliginia natural ocorre exclusivamente em M. bicolor, questiona-se se a oviposio simultnea por mais de uma rainha em colnias desta espcie seja capaz de influenciar na distribuio espacial das castas e sexos nos favos. Apoio: CNPQ Palavras-chaves: proporo de sexos e castas, atividades internas, clulas de cria, abelha-semferro
626
CAPACIDADE DE RESISTNCIA S VARIAES DE TEMPERATURA EM OPERRIAS DE Trigona spinipes (FABRICIUS, 1973) (HYMENOPTERA:APIDAE) DURANTE OS PERODOS DE VERO E INVERNO
Oilton Jos Dias Macieira*, Edson Aparecido Proni Universidade Estadual de Londrina - CCB - BAV Campus Universitrio, 86051990 - Londrina, PR - Brasil - Caixa-Postal: 6001 macieira@uel.br As abelhas sem ferro so consideradas por muitos autores de grande importncia para o ecossistema devido a sua eficincia como polinizadoras. Os experimentos com Ecologia de Tolerncia so muito importantes para se conhecer os limites dentre os quais a maioria dos organismos sobrevivem. O presente trabalho estudou a tolerncia de operrias de Trigona spinipes a variaes extremas de temperatura, com o objetivo de serem determinados os limites trmicos letais para altas e baixas temperaturas durante o vero e inverno. Os resultados mostraram um intervalo de tolerncia entre 3,5C e 40C no vero e de 4,0C at 39,5C no inverno a 50% de sobrevivncia. Os limites a 100% de mortalidade ficaram entre 5C e 41oC no vero e -5C e 40,5C no inverno. Apoio: Klabin S.A., UEL Palavras-chaves: abelhas sem ferro, limites de temperatura, temperatura letal, tolerncia trmica
627
COMUNIDADE DE ABELHAS (INSECTA: HYMENOPTERA) E PRINCIPAIS FONTES DE RECURSOS FLORAIS NO campus DA UNIVERSIDADE ESTADUAL DO NORTE FLUMINENSE, CAMPOS DOS GOYTACAZES, RJ
Joo Manoel da Silva Neto*, Maria Cristina Gaglianone Universidade Estadual do Norte Fluminense - UENF Rua Principal 503, 27985-000 Maca, Rio de Janeiro, Brasil manolo_jmsn@hotmail.com No Brasil, os estudos sobre abelhas em reas urbanizadas ainda so poucos, embora sejam de grande relevncia para o entendimento e conservao das interaes destes insetos com as plantas e sua conseqente ao como polinizadores. Este trabalho teve como objetivo o estudo das abelhas em rea antrpica e a identificao de famlias de plantas que servem como recursos para estas abelhas no campus da Universidade Estadual do Norte Fluminense. As coletas foram realizadas mensalmente entre 8 e 15h, de janeiro a abril/2008 com auxlio de redes entomolgicas, sobre flores ou em vo. Foram coletados 354 indivduos pertencentes a trs famlias de abelhas. Da famlia Apidae foram amostradas 11 espcies. Dentre elas, as espcies eussociais Apis mellifera (24,3% dos indivduos coletados) e Trigona spinipes (13,8%), alm de Exomalopsis auropilosa (42,8%) foram as mais abundantes. As outras espcies pertencem s tribos Euglossini (0,56%), Centridini (1,7%), Ceratinini (0,56%), Xylocopini (4,8%) e Eucerini (1,13%). Das famlias Megachilidae (3,39% dos indivduos) e Halictidae (7,9%) foram amostradas cerca de 5 espcies. Setenta e cinco por cento das abelhas coletadas foram amostradas em 23 espcies de plantas pertencentes a 12 famlias, sendo que as principais fontes de plen foram: Asteraceae, Amarantaceae, Iridaceae, Leguminosae e Malvaceae, enquanto que as principais fontes de nctar foram: Anacardiaceae, Bignociaceae, Convolvulaceae, Cucurbitaceae, Leguminosae, Malvaceae, Moringaceae, Turneraceae e Verbenaceae. Moringaceae, Turneraceae, Leguminosae e Asteraceae destacaram-se em nmero de visitantes totalizando aproximadamente 85%. Os dados obtidos indicam a presena de espcies de abelhas comuns em reas antrpicas e vrias delas com conhecido papel na polinizao de diversos grupos de plantas. Apoio: LCA - UENF Palavras-chaves: estrutura da comunidade, abelhas eussociais e solitrias, rea antrpica, fontes de recursos, relao planta-visitante floral
628
REDE DE INTERAO ENTRE ABELHAS E PLANTAS EM FLORESTA OMBRFILA MISTA, PORTO UNIO, SANTA CATARINA
Cristiane Krug*, Isabel Alves-dos-Santos, Vanilde Citadini-Zanette Programa de Ps Graduao em Entomologia, FFCLRP-USP; Laboratrio Abelhas IBUSP; Herbrio Pe Dr Raulino Reitz, UNESC Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil criskrug@usp.br A comunidade de abelhas e plantas melferas foi estudada em um fragmento de Floresta Ombrfila Mista em Porto Unio, Santa Catarina, entre outubro/2005 e outubro/2006. Mensalmente as plantas floridas foram amostradas, registrando-se para cada espcie o perodo de florao e abelhas visitantes. A representao bipartida de redes mutualistas ilustra explicitamente a reciprocidade envolvida na interao animal-planta e ajuda no entendimento dos padres complexos, que iniciam com relaes mutualistas altamente diversificadas. Uma rede destas interaes entre abelhas e plantas foi construda utilizando o programa Pajek. Foram contabilizadas 95 espcies vegetais visitadas por 1323 abelhas pertencentes a 127 espcies. O maior nmero de espcies em florao foi encontrado nos meses da primavera e vero. Asteraceae foi a famlia mais rica, com 32 espcies. Entre as famlias vegetais mais visitadas pelas abelhas destacaram-se Asteraceae com 43,5% das visitas, Lamiaceae com 11,5% e Brassicaceae com 7,8%. Asteraceae e Lamiaceae tambm foram as que receberam maior espectro de visitantes, 74 e 37 espcies de abelhas respectivamente. As abelhas mais generalistas foram Apis mellifera e Bombus atratus, visitando respectivamente, 55% e 14% das espcies vegetais. A ordenao decrescente de nmero de espcies amostradas em cada famlia de abelha Halictidae > Apidae > Megachilidae > Andrenidae > Colletidae. A apifauna encontrada apresenta diferentes padres de atividade mensal ou sazonal. Na rede de inter-relaes foram observadas 636 interaes entre as abelhas e as plantas. Embora se trate de uma rede complexa, a proporo das conexes observada de fato de apenas 3%, indicando grande especializao e demonstrando ainda o pouco conhecimento sobre estes tipos de interaes. Apoio: CAPES Palavras-chaves: apifauna, interao mutualstica, Mata com Araucria, polinizao, visitantes florais
629
ESTRUTURA DE UMA COMUNIDADE DE ABELHAS EM AREA DE FLORESTA OMBRFILA DENSA MONTANA EM SO BENTO DO SUL, SC
Denise Monique Dubet da Silva Mouga*, Cristiane Krug *Departamento de Cincias Biolgicas da Universidade da Regio de Joinville-UNIVILLE ; Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Departamento de Cincias Biolgicas, UNIVILLE, Campus Universitrio, s/n, Bairro Bom Retiro, CP 246, CEP 89201-972, Joinville/SC, Brasil dmouga@terra.com.br Numa rea de Preservao Ambiental em Floresta Ombrfila Densa Montana (altitude 800 m), foi empreendido um levantamento sobre as comunidades de abelhas e suas plantas melferas, visando conhecer a diversidade local de Apoidea e suas interaes florais, para contribuir com o plano de manejo da rea. Foram realizadas 12 amostragens mensais diurnas (6 horas de durao cada), de abril/2006 a maro/2007, em transectos na rea, onde foram coletadas abelhas sobre plantas floridas, ambas coletadas e preparadas para identificao, material todo depositado na UNIVILLE. Temperatura e umidade relativa foram anotadas. Para avaliar a estrutura da comunidade e a diversidade, foram calculados os ndices de Shannon-Wiener e de Simpson. Foram amostrados 934 indivduos de Apoidea de 72 espcies, visitando 44 espcies de plantas de 19 famlias vegetais. A famlia botnica mais representativa foi Asteraceae, com metade dos txons visitados, sendo o mais atrativo Bidens pilosa (23 espcies de abelhas), seguido por Bidens sulphurea e Vernoanthura twediana (14 espcies de abelhas cada), predominncia esta de escolha floral recorrente no sul do pas. Da comunidade de abelhas, 47% das espcies foi representada por apenas um indivduo, (singletons), correspondendo a menos de 4% dos indivduos. As espcies dominantes perfizeram 15% do total. Com relao s plantas, apenas 26% foram visitadas por apenas uma espcies de abelha. A construo da curva de freqncias acumuladas denotou um padro de riqueza estimada maior. Txons reportados de ocorrncia rara foram encontrados: Lonchopria cingulata (Colletidae), Thygater (Nectarodiaeta) tuberculata (Apidae). Diversas espcies no assinaladas para Santa Catarina tambm foram encontradas (18%). Na anlise da variao dos ndices, o de Simpson, que atribui maior peso a espcies raras, evidenciou uma baixa dominncia entre os txons e de Shannon, que pondera espcies raras e comuns, mostrou oscilao na diversidade, sugerindo influncia sazonal. Apoio: Pr Reitoria Pesquisa Ps Graduao da UNIVILLE Sul Palavras-chaves: diversidade, abelhas nativas, FOD Montana, Comunidade, So Bento do
630
COMUNIDADE DE EUGLOSSINI (HYMENOPTERA, APIDAE) DA ESTAO ECOLGICA DOS CAETETUS, GLIA, SP

Jos Carlos Serrano, Carlos Alberto Garfalo Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes, 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil garofalo@ffclrp.usp.br A Estao Ecolgica dos Caetetus, com uma rea de 2.176,10 ha, est localizada nos municpios de Glia e Alvinlndia (2220 - 2230 S e 4940 - 4945 W), SP. A cobertura vegetal do tipo Floresta Estacional Semidecidual, um dos mais significativos remanescentes da grande floresta que revestia todo o interior do estado de So Paulo. O objetivo desse trabalho foi estudar a comunidade de Euglossini existente na rea proporcionando assim novas informaes sobre a fauna dessa importante reserva florestal que abriga inmeras espcies, animais e vegatais, ameaadas de extino. As amostragens foram feitas uma vez por ms, durante 3 horas, no perodo entre 9:00 e 13:00h, de Maio de 2006 a Abril de 2007. Foram utilizadas como iscas odores cineol, eugenol e vanilina. Para a realizao das coletas, chumaos de algodo, embebidos a cada hora com as respectivas fragrncias, foram pendurados em ramagens da vegetao no local de estudo, a uma altura de 1,5 m e distantes cerca de 5,0 m entre si. Os machos atrados foram coletados com redes entomolgicas e mortos em cmaras mortferas contendo acetato de etila. Dados de temperatura foram obtidos a cada meia hora. Trezentos e setenta e sete machos pertencentes nove espcies foram coletados. O gnero Euglossa foi representado por 6 espcies enquanto os gneros Eulaema, Eufriesea e Exaerete, por apenas uma espcie cada. Euglossa pleosticta, com 46,2% dos machos coletados, foi a espcie mais abundante seguida por Euglossa truncata (19,1%), Eulaema nigrita (12,6%) e Euglossa annectans (11,4%). Exaerete smaragdina, com dois machos coletados, e Euglossa cordata e Eufriesea violacea, ambas com 5 machos coletados, foram as espcies mais pobremente representadas. A abundncia de E. pleosticta refora a concluso de outros trabalhos de que tal espcie a mais representativa nos fragmentos de matas do interior do estado de So Paulo. Apoio: CNPq - FAPESP Palavras-chaves: Euglossini, Apidae, Comunidade, iscas odores, machos
631
CONHECENDO A DIVERSIDADE DE ABELHAS DAS ORQUDEAS (APIDAE: EUGLOSSINI) DA AMAZNIA

Ana Cludia Oliveira Arajo*, Marcio Luiz de Oliveira Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia - INPA Av. Andr Arajo 2936, Petrpolis. Cx. Postal 478. Manaus, AM. Brasil 69011-970 anabio@inpa.gov.br A fauna de abelhas das orqudeas na Amaznia tem sido amostrada de forma padronizada a fim de possibilitar comparaes. Para tanto, tm sido utilizadas grades pertencentes ao Programa de Pesquisa em Biodiversidade (PPBio). A grade uma rea de 25 km2 onde esto instaladas 12 trilhas de 5 km de comprimento, 6 no sentido norte-sul e 6 no sentido leste-oeste. Adjacentes s trilhas que esto dispostas no sentido leste-oeste, existem parcelas permanentes de 250 m x 40 m, orientadas no sentido norte-sul e distantes entre si 1 Km, totalizando 30 parcelas por grade. As abelhas foram coletadas por apenas 3 dias em cada UC (de 09 a 11/10/2007 no PARNA de Viru e de 16 a 18/10/2007 na ESEC de Marac), em cinco armadilhas com cineol, benzil acetato, salicilato de metila, vanilina e metil cinamato, respectivamente. Em cada trilha leste-oeste, em frente a cada parcela, foi instalado um varal de 10 m de comprimento e a 2 metros do solo, onde foram penduradas as armadilhas separadas entre si por 2 metros, totalizando assim 1 varal por parcela e 5 por trilha. Todas as armadilhas foram distribudas nos pontos de coleta at s 8 horas e deixadas no varal por 4 horas, perfazendo-se uma trilha por dia. Foram amostradas 15 parcelas em cada UC. A ESEC de Marac apresentou 8 espcies e 56 indivduos, enquanto o PARNA do Viru apresentou 21 espcies e 219 indivduos. Apesar de distantes cerca de 200 Km e diferentes em termos de vegetao, as UCs apresentaram 7 espcies em comum: Eulaema bombiformis (Packard, 1869); Eulaema pseudocingulata Oliveira, 2006; Exaerete smaragdina (Gurin, 1845); Euglossa imperialis Cockerell, 1922; Euglossa ignita (Smith, 1854); Euglossa avicula Dressler, 1982 e Euglossa sp. n. Foram registradas ainda duas espcies desconhecidas para o Estado de Roraima, Euglossa prasina Dressler, 1982 e Eufriesea vidua (Moure, 1976) provenientes do PARNA do Viru. Trabalho anterior realizado na ESEC Marac registrou apenas 11 onze espcies, o que sugere que esta UC realmente possua uma baixa riqueza de espcies de abelhas das orqudeas. Apoio: Programa de Pesquisas em Biodiversidade - PPBio Palavras-chaves: Apidae, Euglossini, Amaznia, Diversidade
632
MODELAGEM DA DISTRIBUIO GEOGRFICA POR MEIO DO OPENMODELLER: ESTUDO DE CASO DE PLANTAS E POLINIZADORES
Tereza Cristina Giannini*, Antonio Mauro Saraiva, Isabel Alves-dos-Santos Instituto de Biocincias da USP; Escola Politcnica da USP R. Mato, Trav.14, n.321, Butant, So Paulo, SP, 05508-900 giannini@usp.br A distribuio geogrfica de uma espcie depende de suas interaes com o meio, e com outros indivduos, sejam da mesma espcie ou de outras espcies. Dentro da abrangncia geogrfica de uma espcie apenas os habitats apropriados so ocupados, e estes habitats refletem seu nicho ecolgico. Esse nicho caracterizado por fatores abiticos como temperatura, umidade, altitude, e tambm por fatores biticos, como vegetao, solo, locais para nidificao e fontes de recursos alimentares. No caso dos polinizadores, algumas espcies so altamente especializadas na fonte floral e a presena ou ausncia da planta pode ser um fator limitante. A modelagem da distribuio geogrfica de espcies tem sido utilizada levando-se em considerao as interaes biticas e abiticas que caracterizam o nicho ecolgico. O objetivo principal gerar um modelo matemtico da distribuio geogrfica potencial da espcie, que possa ser projetado em outras regies e gerar um mapa da distribuio. O openModeller constitui-se em uma ferramenta open source para modelagem de distribuio geogrfica e incorpora diversos algoritmos empregados em modelagem, como o GARP (Genetic Algorithm for Rule-set Production) e tem sido usado em um estudo sobre a distribuio geogrfica de plantas e polinizadores. Foi escolhido um gnero de abelhas solitrias (Peponapis - Eucerini, Apidae) que so especialistas em flores de Cucurbita (abboras). O padro de distribuio das espcies de Peponapis foi avaliado em relao presena de espcies de Cucurbita, bem como das variveis abiticas que caracterizam seus nichos. Os resultados preliminares tm demonstrado a co-ocorrncia dos dois grupos na maioria das reas estudadas. Apoio: BioAbelha-FAPESP Palavras-chaves: polinizadores, Peponapis, Cucurbita, nicho ecolgico
633
NESTING OF Trigona C.F. spinipes IN THREE PHYTOPHYSIOGNOMIES OF CERRADO IN ITIRAPINA, SO PAULO

Fabiana C. Pioker, Astrid de Matos Peixoto Kleinert Departamento de Ecologia do Instituto de Biocincias, USP Rua do Mato, Tr. 14 n 101, 05508-090 So Paulo, SP, Brasil fpioker@yahoo.com Understanding the population dynamics of pollinators is essential to propose efficient conservation policies. Many animals, from beetles to bats, are responsible for pollination in Cerrado, but bees, mainly the social ones, are the most representative of them. Trigona spinipes is one of the most collected insects on Cerrado flowers. Considering the aspects above, we studied T. c.f. spinipes nesting in 19 ha of three Cerrado phytophysiognomies in Itirapina, from August 2007 to February 2008. We found 16 nests, two in cerrado phytophysiognomy, two in campo cerrado and twelve in campo sujo. We referred to the species as T. c.f. spinipes because although the bees are morphologically similar to T. spinipes, there are some differences in nests morphology, including nest entrances. Nests were found in 11 different plant species, and their height above the ground varied from 0.7 m to 3.5 m. The minimal distance from one nest to other was 143 m, and the density in the studied area was estimated in 0.54 nests/ha. The species showed plasticity both in plant species choice and in nesting height. Thus, spacing among colonies should be due to aggressivity or competition, since nest sites did not appeared to be limitant. This study is still in progress, and campo sujo was most intensively searched than the other two phytophysiognomies. It is still not yet possible to say if there is some preference for one or another phytophysiognomy. More data and observations on field will help to clarify these issues. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Cerrado, nest, Trigona spinipes, population dynamic
634
VARIAO DA DIVERSIDADE DE MELIPONINA(APIDAE; MELIPONINA) EM FRAGMENTOS DE HBITATS FLORESTADOS DE MATA ATLNTICA NA BAHIA
Marlia Dantas e Silva, Mauro Ramalho, Ciro Tavares Florence, Paulo Csar Gouva Leo, Joo Paulo Loyola Oliveira, Daniela Monteiro, Jaqueline Figueredo Rosa, Zafira Evelma Gurgel, Marli Emlia Almeida Universidade Federal da Bahia-Laboratrio de Ecologia da Polinizao-ECOPOL/IBIO-UFBA Rua Baro de Jeremoabo, s/n - Campus Universitrio de Ondina. CEP:40.170-115 SalvadorBahia, Brasil zafiragurgel@hotmail.com As abelhas Meliponina esto associadas especialmente s floradas macias, e desempenham papel central na biologia reprodutiva de rvores do dossel na floresta Atlntica. Espcies com exigncias por condies de micro-hbitats comuns apenas na floresta em estgio avanado de regenerao so mais sensveis perturbao antrpica e potencialmente mais susceptveis aos efeitos da perda de conectividade. O objetivo do presente trabalho caracterizar a variao da diversidade de Meliponina, em fragmentos de hbitats florestados na paisagem em mosaico na Mata Atlntica. A rea de estudo est localizada na poro norte do Corredor Central da Mata Atlntica na Bahia. As coletas foram realizadas mensalmente entre maio/2006 a maro/2007. O delineamento amostral se fundamentou em trs rplicas de Fragmentos Florestados (FF- na escala de dezenas de hectares) e fragmentos de Mata Primria (MP-na escala de centenas de hectares). Foram distribudos dois pontos amostrais ao longo das trilhas preexistentes, e as abelhas foram atradas por iscas de mel com gua (2:1-H2O:mel). Foram coletados 5726 indivduos sendo 95% encontrados nas reas de MP e apenas 5% nos FF. Na MP foram localizadas 21 espcies, distribudas em 5 gneros (Plebeia, Tetragonisca, Partamona, Melipona e Trigona). Nos FF foram encontrados 279 indivduos distribudos em 12 espcies e 4 gneros onde possvel destacar as seguintes espcies: Trigona spinipes e dois morfotipos de Plebeia. O gnero Melipona, encontrado somente nas reas de mata primria, nidifica quase que exclusivamente em cavidades naturais preexistentes e utiliza, sobretudo ocos de rvores. A ausncia deste gnero nos fragmentos pode estar relacionada falta de rvores com grande porte ou devido baixa disponibilidade de cavidades arbreas. Trigona spinipes que se destacou nas reas de fragmento, representa uma espcie que no depende de cavidades preexistentes para o desenvolvimento de seus ninhos visto que os mesmos so expostos podendo ser construdos em vrios substratos. Apoio: CNPq; FAPESB e MICHELIN Palavras-chaves: Fragmentao, Mata Atlntica, Abelhas sem ferro
635
ATIVIDADE DE COLETA DA ABELHA Tetragonisca angustula NO DECORRER DO ANO

Flvio Augusto Santos Silva*, Darclet Teresinha Malerbo-Souza, Andr Lus Santos Silva, Andr Luiz Halak, Ana Paula Roncolato, Guilherme dos Reis Vasconcelos Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto, SP Avenida Dr. Oscar de Moura Lacerda, 1520, Jd Independncia, 14076-510, Ribeiro Preto, Brasil silvasantos10@yahoo.com.br Este experimento foi conduzido com o objetivo de estudar a atividade de coleta da abelha Tetragonisca angustula (jata), no decorrer do ano, em Ribeiro Preto, SP, Brasil. Para isso, foi avaliado o nmero de abelhas que entravam no ninho, com plen ou com nctar, nos primeiros 10 minutos de cada horrio, das 7h00 s 18h00, com 12 repeties, sendo cada repetio em um ms diferente (de junho de 2007 a abril de 2008). Observou-se que as abelhas preferiram coletar nctar (86,5%) comparado coleta de plen (13,5%). Para nctar, foi observado que o pico de coleta aconteceu no ms de maro de 2008, sendo que o ms com menos atividade foi junho de 2007. Entretanto, para plen, o pico de atividade de coleta ocorreu no ms de maro de 2008, sendo que as piores avaliaes foram entre junho e julho de 2007. No decorrer do dia, observou-se que essas abelhas coletaram nctar e plen durante todo o dia. Pode-se concluir que a abelha T. angustula apresenta diferenas na atividade de coleta no decorrer do ano, devido aos fatores climticos e s fontes florais disponveis na regio, em cada ms. Apoio: FAPESP 06/59604-9 Palavras-chaves: Tetragonisca angustula, Atividade de coleta, nctar, plen
636
ANLISE PROTICA E DE AMINOCIDOS DO ALIMENTO LARVAL DE Tetragonisca angustula LATREILLE 1811 (APIDAE, MELIPONINI)
Mauro Prato*, Ademilson Espencer Egea Soares Programa de Ps-graduao em Entomologia da Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Av. Bandeirantes, 3900; Bairro Monte Alegre; Ribeiro Preto - S.P. mauroprato@pg.ffclrp.usp.br A quantidade de alimento recebido pelas larvas o fator responsvel pela determinao das castas em T. angustula, as larvas de rainhas se desenvolvem em clulas maiores, chamadas realeiras, recebendo mais alimento que as larvas de operrias que se desenvolvem em clulas menores; no havendo diferena qualitativa entre o alimento contido em realeiras e clulas de cria de operrias/ machos. Este trabalho visa a comparao qualitativa entre os alimentos larvais de realeiras e clulas de cria de operrias/machos de T. angustula atravs das anlises dos contedos protico e de aminocidos. Favos de cria recm-operculados foram coletados em 5 colnias racionais, suas clulas foram desoperculadas, os ovos foram retirados e o alimento foi coletado com bomba de suco a vcuo. Para anlise do contedo protico, as amostras de alimento foram centrifugadas a 4C e 15.000 RPM por 10 minutos; o sobrenadante foi convenientemente diludo e as amostras (10 l cada) submetidas eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE 7,5%), posteriormente corado em soluo de Azul de Coomassie R-250. A anlise de aminocidos foi realizada pelo mtodo do PTC-aa em HPLC, com hidrlise prvia em HCl bidestilado a 6 N. O gel demonstrou que os padres de bandas proticas foram iguais para todas as amostras de alimento, permitindo-nos afirmar que os alimentos contidos em realeiras e clulas de cria de operrias/machos possuem a mesma composio protica. As anlises dos aminocidos totais, assim como dos aminocidos livres, demonstraram no haver diferenas significativas da quantidade e composio dessas molculas entre os dois tipos de alimentos comparados. Estes resultados demonstram que a composio protica e de aminocidos dos alimentos de realeiras e clulas de cria de operrias/machos so semelhantes, confirmando a hiptese de que as castas em T. angustula so determinadas exclusivamente pela quantidade de alimento oferecida s larvas. Apoio: Fapesp 2007/51005-9 Palavras-chaves: alimento larval, Tetragonisca angustula, determinao de castas, realeiras, clulas de operrias/machos
637
ANLISE DAS ALTERAES NO PERFIL QUMICO EM COLNIAS RFS DE ABELHAS SEM FERRO (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Lucas Garcia von Zuben, Tlio Marques Nunes, Izabel Cristina Casanova Turatti, Norberto Peporine Lopes, Ronaldo Zucchi Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP; Faculdade de Farmcia de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil lucaszuben@yahoo.com.br Nas abelhas sem ferro, o mecanismo de produo de rainha varia entre os diversos gneros. Os mecanismos pelos quais a produo de clulas reais se inicia so pouco conhecidos neste grupo. Sabe-se que, nessas abelhas, as diferentes castas, bem como os machos, apresentam diferenas nos compostos qumicos associados cutcula, os quais so classificados como feromnios de superfcie, e essas substncias so as responsveis por uma grande parte da comunicao intracolonial. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi investigar possveis alteraes qumicas nesses feromnios em colnias rfs da abelha sem ferro, Frieseomelitta varia, durante o processo de produo de clulas reais. Para verificar possveis alteraes qumicas foram utilizadas trs colnias de F. varia pr-estabelecidas. De cada uma dessas colnias foi retirada a rainha e a partir desse dia foram coletadas 10 operrias de 3 em 3 dias at o surgimento de clulas reais. As amostras foram analisadas em um sistema de Cromatografia Gasosa Acoplada a Espectrometria de Massas (GC-MS). Os dados dos perfis qumicos obtidos pelo GC-MS foram, ento, comparados entre os grupos experimentais pela anlise estatstica multivariada. A partir da anlise estatstica foi possvel observar que os grupos de compostos foram significativamente separados e que, alm disso, mostraram uma mudana gradativa no perfil de compostos qumicos ao longo do tempo, at o incio da produo da nova rainha. possvel afirmar, portanto, que a ausncia da rainha provoca alteraes significativas no perfil qumico da colnia. Essas alteraes, possivelmente, esto relacionadas ao incio da produo de novas rainhas em abelhas sem ferro. Apoio: Fapesp - 07/55836-5 Palavras-chaves: Frieseomelitta varia, hidrocarbonetos cuticulares, Produo de rainha, Orfandade
638
COMPOSTOS VOLTEIS LIBERADOS POR RAINHAS VIRGENS DE Melipona quadrifasciata (APIDAE: MELIPONINI)
Adriana Pianaro*, Cristiano Menezes, Vera Lcia Imperatriz-Fonseca, Anita Jocelyne Marsaioli *Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Instituto de Qumica, CEP 13083-970, Campinas-SP, Brasil pianaro@iqm.unicamp.br Os meliponneos ou abelhas sem ferro so abelhas eusociais que ocorrem em regies tropicais. O modo de acasalamento das rainhas da tribo Meliponini levanta vrias questes que ainda no foram respondidas, mas sabe-se que as rainhas virgens atrativas inflam seus abdomes e s acasalam durante vos nupciais ou em arenas experimentais com machos solitrios. As rainhas virgens atrativas de Melipona quadrifasciata liberam um cheiro caracterstico aps inflarem seus abdomes, o qual perceptvel para os humanos. Por isso, este trabalho teve como objetivo identificar os compostos volteis responsveis pelo cheiro das rainhas virgens de M. quadrifasciata atravs da coleta por headspace dinmico dos volteis de rainhas virgens infladas (2 a 3 dias de idade) e de rainhas virgens normais (1 dia de idade), alm da obteno de extratos de partes do corpo destas rainhas para identificao da origem destes volteis. Todas as amostras foram analisadas por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (CG-EM). As anlises das amostras de headspace revelaram que as rainhas virgens infladas de M. quadrifasciata liberam uma mistura de nerol e geraniol, os quais no so liberados pelas rainhas virgens normais. Estes compostos foram observados nos extratos dos abdomes das rainhas virgens de M. quadrifasciata, o que indica que so produzidos por alguma glndula presente no abdome. Ensaios biolgicos para descobrir como estes compostos agem na seleo das rainhas de M. quadrifasciata e se atuam como feromnios de alarme ou sexual esto sendo realizados. Apoio: CAPES; IQ-UNICAMP; CNPq; FAPESP Palavras-chaves: Melipona quadrifasciata, Meliponini, rainhas, headspace, cromatografia
639
FLORA APCOLA DA CAATINGA CEARENSE DE IMPORTNCIA PARA AS ABELHAS JANDARAS (Melipona subnitida)
Jos Everton Alves*, Breno Magalhes Freitas, Celso Braga Magalhes, Emanuelle Bruna Rodrigues Carneiro, Fbio Carreiro Chaves de Melo Universidade Estadual Vale do Acara - UVA; Universidade Federal do Cear UFC Avenida da Universidade, 850, 62040-370 Sobral, Cear, Brasil professoreverton@msn.com As abelhas jandaras (Melipona subnitida) so originadas no nordeste brasileiro, regio onde h uma vegetao que fornece nctar e plen para os meliponneos. O conhecimento das plantas fornecedoras de alimentos para esta espcie de abelha fundamental para o desenvolvimento de um programa de meliponicultura visando a produo de mel. Objetivou-se com este trabalho levantar as espcies fornecedoras de nctar e plen para M. subnitida ao longo do ano. O experimento foi realizado na Fazenda Experimental Vale do Acara da UVA (S33652 e W401826) entre junho/2005 e maio/2006. Foram disponibilizadas 30 colnias de M. subnitida em uma regio de caatinga. A cada 15 dias foram coletados o mel produzido para anlise melissopalinolgica, e o plen para anlise polnica. Verificou-se a existncia de 30 plantas pertencentes a 14 famlias de importncia para M. subnitida. As famlias com o maior nmero de representantes foram Euphorbiaceae, Mimosoidae e Amaranthaceae. Participaram ainda da dieta de M. subnitida plantas das famlias Rubiaceae, Turneraceae, Sterculiaceae, Labiatae, Cactaceae, Caesalpinoidae e Ramnaceae. A maioria das espcies visitadas por M. subnitida floresce na estao chuvosa do ano. Conclui-se que M. subnitida visita um nmero pequeno de plantas, considerando a biodiversidade encontrada na caatinga. Apoio: Funcap; IADE; IVA Palavras-chaves: Melipona subnitida, Caatinga, Flora apcola, Nctar, Plen
640
ABELHAS SOLITRIAS (HYMENOPTERA, APOIDEA) NIDIFICANDO EM CAVIDADES PREEXISTENTES NA ESTAO ECOLGICA DE RIBEIRO PRETO, MATA SANTA TERESA, RIBEIRO PRETO, SP
Janaina Fernandes Silva*, Carlos Alberto Garfalo Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Av. Bandeirantes, 3900. 14040-901 Ribeiro Preto - SP janainafernandes_bio@yahoo.com.br As abelhas constituem o principal grupo de polinizadores de Angiospermas, sendo responsveis pela maior parte do fluxo gnico entre indivduos e populaes adjacentes dessas plantas. Neste grupo existem mais de 20.000 espcies descritas, dessas 85% so solitrias. O objetivo deste trabalho foi conhecer a comunidade de abelhas solitrias que nidificam em cavidades preexistentes na Estao Ecolgica de Ribeiro Preto. Foram utilizados ninhos-armadilha (NA) feitos com cartolina preta, na forma de pequenos tubos, com 5,8 cm e 8,8 cm de comprimento e 0,6 cm e 0,8 cm de dimetro, respectivamente, e gomos de bambu, de vrios comprimentos e dimetros. Os gomos de bambu foram introduzidos em tubos de PVC, de tamanhos apropriados, e os tubos de cartolina em orifcios feitos em duas placas de madeira, cada uma com 55 orifcios. Os NA foram colocados em suportes de ferro instalados em 4 stios de amostragens. As coletas foram realizadas mensalmente, de Novembro/2005 a Outubro/2007. Os ninhos coletados foram levados para o laboratrio e conforme os indivduos emergiam eram capturados e mortos sob vapor de acetato de etila. Foram coletados 64 ninhos de 7 espcies: Centris analis (n=9), Centris tarsata (n=2), Centris sp (n=1), Tetrapedia diversipes (n=45), Tetrapedia rugulosa (n=3), Epanthidium tigrinum (n=3) e Anthidiini (n=1), sendo que 62.5% dos ninhos foram coletados na estao quente e chuvosa (setembro a maio).Coelioxoides waltheriae e indivduos da ordem Coleoptera foram os inimigos naturais associados aos ninhos de T. diversipes. Comparando os resultados obtidos com aqueles relatados para outros fragmentos florestais do estado de So Paulo, pode ser concludo que a Mata Santa Teresa um dos fragmentos mais pobres em espcies de abelhas que nidificam em cavidades preexistentes. Apoio: CNPq; FAPESP Palavras-chaves: abelhas solitrias, cavidades preexistentes, ninhos-armadilha, Hymenoptera
641
GROUP FORAGING IS BENEFICIAL FOR STINGLESS BEES

Elinor M. Lichtenberg, Vera L. Imperatriz-Fonseca, James C. Nieh Division of Biology, University of California, San Diego; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, USP UCSD, MC0116, 9500 Gilman Drive, La Jolla, CA 92093-0116, USA elichten@ucsd.edu Social animals are predicted to increase resource dominance by foraging in groups. We tested the importance of a group foraging strategy for stingless bees (Hymenoptera, Apidae, Meliponini). Using six Brazilian stingless bee species (group foragers: Scaptotrigona aff. depilis, Trigona hyalinata and T. spinipes; solitary foragers: Frieseomelitta varia, Melipona quadrifasciata and Nannotrigona testaceicornis) and an array of artificial flowers, we compared species dominance and visitation under unrestricted foraging conditions and during exclusion of group foraging species. Feeders were generally dominated by one of the group foraging species. Group foragers also limited visitation by solitary-foraging species. Removal of all group foragers increased feeding opportunities for the other three species. Thus, group foraging appears to enable stingless bee colonies to improve competitive ability through dominance of highly rewarding resources. Apoio: NSF; UCSD Palavras-chaves: dominance, competition, superorganism, group foraging, stingless bees
642
A COMUNIDADE DE ABELHAS (HYMENOPTERA, APIDAE) E SUAS FONTES FLORAIS NO PARQUE NACIONAL DA SERRA DO ITAJA, SANTA CATARINA, BRASIL
David Richard da Luz*, Gustavo Valadares Barroso
Fundao Universidade Regional de Blumenau - FURB Rua Antnio da Veiga 140, 89012-060 Blumenau, Brasil drdaluz@gmail.com
A realizao de estudos padronizados das comunidades de abelhas tem permitido a abordagem comparativa entre vrios ecossistemas e a investigao da existncia de padres na estruturao dessas comunidades na regio Neotropical. No estado de Santa Catarina foram realizados poucos estudos sobre a fauna de abelhas e a flora apcola associada. Este trabalho foi conduzido ao longo de quinze meses no Parque Nacional da Serra do Itaja, Sul do Brasil, no domnio Floresta Atlntica. O objetivo deste estudo foi investigar a composio e as relaes de abundncia entre as espcies de abelhas, bem como sua preferncia por fontes florais de alimento. As abelhas foram coletadas entre outubro/2006 e dezembro/2007, entre s 8:00h e s 16:00h, totalizando 151h de amostragem em 10 coletas. As abelhas foram capturadas com rede entomolgica, em flores, em vo, no cho ou forrageando suor nos coletores. Foram coletados 1616 indivduos, compreendendo 89 espcies, 46 gneros, 16 tribos e cinco subfamlias. Apinae foi a subfamlia mais diversificada, com 47 espcies. Os gneros com maior nmero de espcies foram Augochloropsis (9), Ceratina (9) e Dialictus (7). Diferentemente de outras reas do Brasil estudadas, Paratetrapedia fervida foi a espcie mais abundante, compreendendo 11,57% dos indivduos coletados. Foram coletados trs indivduos do macho de Anthrenoides cyphonandrae, at ento desconhecido para a cincia. As plantas visitadas correspondem a 67 espcies, em 52 gneros e 30 famlias. Asteraceae foi a famlia mais rica, com 14 espcies. Lythraceae foi a famlia que recebeu o maior nmero de visitantes (41,26%). Foram assinaladas 12 novas espcies de abelhas para o estado de Santa Catarina. A curva do coletor no chegou a alcanar um ponto de equilbrio, indicando que o nmero de coletas realizadas no foi suficiente para estimar a riqueza de espcies na rea de estudo. Apoio: PIPe/Artigo 170; DCN/FURB Palavras-chaves: Apidae, Comunidade, Fauna de abelhas, Floresta Atlntica, Vale do Itaja
643
PRODUO DE OPERRIAS, MACHOS E RAINHAS EM COLNIAS DE Plebeia emerina (FRIESE, 1900) (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINI)
Juliana Stephanie Galaschi Teixeira*, Betina Blochtein Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul, Faculdade de Biocincias, Laboratrio de Entomologia - Ecologia de Abelhas Avenida Ipiranga 6681, 90619-900, Porto Alegre/RS, Brasil julianagalaschi@gmail.com Plebeia emerina, conhecida popularmente por mirim, apresenta distribuio desde o Paran at o Rio Grande do Sul, inclusive em reas urbanas. Visando o manejo dessas abelhas para a meliponicultura dirigida polinizao, so necessrios conhecimentos a respeito de aspectos reprodutivos, especialmente quanto produo de indivduos das distintas castas e sexos. Este trabalho objetivou quantificar a proporo de machos, rainhas e operrias emergentes, em colnias de P. emerina. No perodo de outubro de 2007 a janeiro de 2008 foi amostrado um favo/colnia/ms, a partir de quatro colnias mantidas no campus central da PUCRS, em Porto Alegre, RS, Brasil. Dos 16 favos de cria analisados, contabilizou-se 6.358 indivduos, 78,33% dos quais representados por operrias e 21,67% por machos. No foi registrada a ocorrncia de rainhas. As colnias apresentaram-se estatisticamente semelhantes quanto aos nmeros de operrias e machos e nmero de total de indivduos presentes nos favos, com exceo da colnia 1, que diferiu significativamente da colnia 3, apresentando maior nmero de machos (p= 0,011) e maior nmero total de indivduos (p = 0,012). Nas quatro colnias evidenciou-se relao positiva entre o nmero total de indivduos e nmero de operrias (r = 0,877), refletindo a importncia das operrias no funcionamento e manuteno do ninho. A relao positiva, tambm verificada entre o nmero total de indivduos e o nmero de machos (r = 0,322), pode ser explicada pelo investimento em indivduos, reprodutivos, uma vez que no houve registro de rainhas. A freqncia de machos e operrias das quatro colnias no diferiu significativamente ao longo dos meses analisados (p = 0,476). O estudo ser prosseguido a fim de acompanhar a emergncia dos indivduos ao longo de um ano. Apoio: CNPq Palavras-chaves: abelhas sem ferro, Plebeia emerina, produo de machos, produo de operrias
644
FORMAO DE NOVAS COLNIAS DE Plebeia remota (APIDAE, MELIPONINI)

Tarsila Amorim Coelho*, Denise de Arajo Alves, Isabel Alves dos Santos Laboratrio de Abelhas, Departamento de Ecologia, Instituto de Biocincias USP Rua do Mato, trav. 14, n 321, Cidade Universitria, So Paulo - SP, CEP: 05508-90, Brasil tarsila.coelho@usp.br Os estudos de meliponneos so de grande importncia tendo em vista o importante papel que esse grupo desempenha na polinizao de inmeras espcies de angiospermas. Neste trabalho nosso objetivo foi avaliar o desenvolvimento de uma colnia de Plebeia remota em estgio inicial quanto ao nmero de clulas produzidas; produo de machos, rainhas e operrias; e a dinmica de estoque de alimento. Simulamos enxameagens formando cinco micro-colnias a partir de outras j estabelecidas. Retiramos de colnias-me favos com abelhas prontas para emergirem, algumas operrias de diferentes idades e potes de mel e plen. Para o estabelecimento da colnia foi necessrio que o favo inserido contivesse uma clula real e a rainha emergisse dentro da nova colnia, j que experincias de introduo de rainhas virgens aprisionadas no obtiveram sucesso. Mapeamos diariamente a construo dos favos contando o nmero de clulas construdas e nmero aproximado de potes de alimento presentes nas colnias. Registramos a razo sexual em doze favos. At o momento emergiram quase na totalidade apenas operrias sendo que, das 2265 clulas analisadas, apenas quatro continham rainhas virgens, trs delas miniatura, e apenas dois machos foram registrados. A baixa ocorrncia de indivduos sexuados era esperada, pois em estgio inicial, a colnia ainda no atingiu tamanho ideal para se reproduzir (enxamear), portanto no deve despender energia na produo intensa destes indivduos e sim de operrias, que so necessrias para a manuteno e crescimento das colnias. Apoio: PIBIC/CNPq Palavras-chaves: Plebeia remota, produo de operrias, produo de sexuados, abelhas sem ferro, razo sexual
645
ESTUDO PRELIMINAR DA COMUNIDADE DE ABELHAS (HYMENOPTERA, APOIDEA, APIFORMES) EM UMA LOCALIDADE URBANA DE ARACAJU SE
Berla Santos Cruz, Anderson Barbosa, Maxwell Souza Silveira Universidade Tiradentes/Instituto de Tecnologia e Pesquisa Av. Murilo Dantas, Bairro Farolndia,49032-490, Aracaju, Sergipe silveira.m.s@bol.com.br O processo de urbanizao provoca mudanas na estrutura e na composio da vegetao nativa, alterando as condies microclimticas e oferta os recursos para as espcies de abelhas. Esse estudo teve como objetivo identificar as espcies de abelhas e suas interaes com a flora em uma localidade urbana de Aracaju. O estudo foi realizado no entorno da Universidade Tiradentes, Campus Farolndia, em reas de rua, composta por jardins e terrenos baldios, e um pequeno fragmento de mata secundria. As coletas foram realizadas entre 07/2007 e 04/2008, em intervalos de aproximadamente 30 dias, das 6:00 s 12:00h, com esforo amostral de 3:00h em cada rea. O incio de cada evento de coleta foi alternado entre as reas. As abelhas foram capturadas com o auxilio de redes entomolgicas, durante as visitas s flores. As abelhas coletadas foram montadas em alfinetes entomolgicos, secas em estufa e etiquetadas com os dados de campo. Amostras das plantas visitadas foram coletadas para identificao. Foram coletados 610 indivduos e identificadas 27 espcies. A espcie mais abundante foi Trigona spinipes, coletada predominantemente visitando plantas exticas utilizadas na ornamentao de jardins residenciais. As espcies vegetais mais visitadas por T. spinipes foram Euphorbia milii e Ixora cf. coccinea. As abelhas solitrias foram amostradas principalmente em terrenos baldios, ou na rea de mata, visitando plantas ruderais. Dentre os Apidae no corbiculados, Xylocopa cearensis foi a espcie mais abundante. As abelhas da tribo Centridini foram capturadas coletando leo floral em um espcime de Byrsonima sericea. Durante o perodo de amostragem houve modificaes antrpicas na rea de mata. A preservao de reas com vegetao nativa e solos permeveis favorece a obteno de recursos florais e locais para nidificao, sendo importante para a conservao das espcies de abelhas em reas urbanas. Apoio: Universidade Tiradentes/Instituto de Tecnologia e Pesquisa Palavras-chaves: Urbanizao, abelhas, comunidades, diversidade, conservao
646
ANLISE DO CUSTO DA PRODUO DE MACHOS EM Melipona (Michmelia) flavolineata FRIESE, 1900 (HYMENOPTERA, APIDAE, MELIPONINA) EM COLNIAS SOBRE DIFERENTES TAMANHOS POPULACIONAIS
Alexandre Santana Azevedo*, Gisele Garcia Azevedo, Marcos Henrique Rodrigues Carvalho, Genilson Rodrigues Ferreira Lima Universidade Federal do Maranho-UFMA Rua Marab, Quadra R casa 06 Parque Amazonas alxazv@hotmail.com Muitos parmetros convergem sinergicamente para o controle da produo de machos em Melipona. Dentre os de maior influncia destaca-se o tamanho populacional (colonial). Melipona flavolineata uma abelha tpica da regio de cerrado com distribuio na AM, MA, PA e TO. O presente estudo se caracterizou por acompanhar colnias em diferentes condies de tamanho populacional, marcando os favos espacialmente com contas coloridas para a anlise da distribuio espacial do sexo. Foi analisado o custo da produo de machos atravs da correlao linear de pearson obtendo-se um p = 0,0000, altamente significativo. Isso significa, de certa forma, que para cada macho produzido a colnia deixou de produzir uma operria. Colnias fracas somando-se os dois favos produziram (0+1) 1 macho, colnias mdias somando-se os dois favos produziram (38+101) 139 machos e um nico favo de colnia forte produziu 388 machos. Este ltimo apresentou uma elevada freqncia de machos (87,191%). Isso revela indcios de um processo sazonal. Em abelhas melferas freqente o processo de enxameamento, enquanto em Melipona a freqncia muito rara. Portanto podemos inferir que investir na produo de machos se tornou uma alternativa mais bem sucedida ao longo do processo evolutivo para disperso dos genes em Melipona. Apoio: CNPq; CNPq-PIBIC; UFMA Palavras-chaves: Melipona flavolineata, zango, tamanho populacional, correlao linear, sazonalidade
647
MORFOLOGIA DE ABELHAS
648
INTERFACE DE AUTOMAO DOS PROCEDIMENTOS MANUAIS NA IDENTIFICAO DE ABELHAS SEM FERRO E PADRONIZAO DA TROCA DE DADOS USANDO MORFOMETRIA GEOMTRICA
Jsus Franco Bueno, Tiago Maurcio Francoy, Vera Lucia Imperatriz-Fonseca, Antonio Mauro Saraiva Laboratrio de Automao Agrcola Departamento de Engenharia de Computao e Sistemas Digitais EPUSP; Laboratrio de Abelhas - Departamento de Gentica da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto - USP Av. Prof. Luciano Gualberto, trav. 3 n. 158 CEP 05508-900 So Paulo SP jesus.bueno@poli.usp.br A Morfometria Geomtrica desenvolvida por Rohlf e Marcus (1993) um conjunto de tcnicas de anlise de formas com aplicao em identificao de espcies. Os espcimes so amostrados pela colocao de marcos anatmicos ou extrao de contornos da estrutura biolgica. As variaes morfolgicas da estrutura possibilitam a diferenciao das espcies. A identificao de abelhas por morfometria tem resultados significativos como 99% de discriminao de espcies (Francoy et al., 2006). No Laboratrio de Abelhas do Departamento de Gentica da FMRP a identificao de abelhas feita pela execuo de procedimentos que usam os pacotes de software de Morfometria Geomtrica, Statistica e SPSS. O pacote de morfometria formado por trs mdulos de programas, tpsUtil, tpsDig2 e tpsRelw, desenvolvidos por James F. Rohlf (http://life.bio.sunysb.edu/morph). Eles produzem como sada quatro arquivos de dados referentes aos marcos anatmicos, matriz de espcimes alinhadas, matriz de pesos e a matriz de deformaes relativas. Esses arquivos so agrupados em um editor de texto e planilha eletrnica para gerar um arquivo nico. Essa transformao uma operao manual que envolve a manipulao de muitos dados, tornando-se uma tarefa montona e exaustiva. Este trabalho apresenta um mdulo de programa em linguagem Pascal, uma interface (Shell), que automatiza a manipulao dos arquivos e possibilita o estudo do formato-padro dos dados de morfometria geomtrica. Como resultado, gerado um arquivo livre de erros de manipulao, adequado para ser usado na etapa seguinte. Uma nova verso da interface em linguagem Java ser disponibilizada. Apoio: FAPESP projeto BioAbelha Palavras-chaves: Morfometria geomtrica, Abelhas sem ferro, Interface de troca de dados
649
MORFOMETRIA DE MACHOS E FMEAS DE Euglossa annectans DRESLER 1982 (HYMENOPTERA, APIDAE, EUGLOSSINI)
Mrcia de F. Ribeiro*, Srgio Dias Hilrio, Marilda Cortopassi-Laurino EMBRAPA SEMI-RIDO; UNIVERSIDADE DE SO PAULO 1 BR 428 Km 152 Zona Rural, CEP 56302-970 Petrolina, PE; 2 R. do Mato, Trav. 14, n. 321 CEP 05508-900 So Paulo, SP marcia.ribeiro@cpatsa.embrapa.br Foram coletados dados de morfometria de machos e fmeas de Euglossa annectans em condies de laboratrio, de um grupo de clulas separado artificialmente, a partir de um ninho alojado espontaneamente em caixa racional de abelhas sem ferro. Os dados foram obtidos com os indivduos previamente colocados no freezer para diminuir sua mobilidade e, em seguida, colocados em um pequeno aparato para medio, sob microscpio estereoscpico com ocular graduada. Foram obtidas as seguintes medidas: largura da cabea (LC), distncia interorbital (DIO), distncia intertegular (DITEG), comprimento do trax anterior (CTORAX 1) e comprimento do trax posterior (CTORAX 2). Alm disso, a largura dos olhos (LO) foi calculada, diminuindo-se a DIO de LC. Os machos (n= 41) e fmeas (n=20) apresentaram mdias semelhantes para todas as variveis analisadas (p>0.05), exceto para a DIO. Neste caso, machos apresentaram uma DIO significativamente maior (x=3,02900,1006 mm) do que as fmeas (x=2,94780,1184 mm) (p=0.030). Pode haver um significado biolgico para isso, uma vez que, os machos usam a viso para localizar as fmeas para o acasalamento, e olhos mais separados poderiam fornecer um maior campo visual, favorecendo sua acuidade visual Apoio: Palavras-chaves: Euglossa annectans, morfometria, Euglossini, macho, fmea
650
AVALIAO MORFOMTRICA DO APARELHO FERROADOR DE OPERRIAS DE Apis mellifera (HYM.: APIDAE) AFRICANIZADAS, EM RELAO AO TAMANHO DA GLNDULA CIDA
Anna Ktia Brizola-Bonacina1*, Emi Nasu2, Valter Vieira Alves Jnior2 1*Departamento de Biologia, Instituto de Biocincias UNESP, Rio Claro-SP; 2Laboratrio de Apicultura (LAPI) - Faculdade de Cincias Biolgicas e Ambientais UFGD, Dourados-MS Av. 24-A, 1515 - Bela Vista - CEP: 13506-900 - Rio Claro-SP, Brasil annakatia@bonacina.com.br O aparelho ferroador da Apis mellifera formado por trs partes constitudas de quitina: o estilete e duas lancetas. As lancetas, estruturas finas e alongadas dispostas ao lado do estilete formando um sistema de vlvulas, possuem farpas na sua extremidade com funo de prender o estilete na superfcie atacada, dificultando sua retirada. O estilete inicia-se em um bulbo e alonga-se posteriormente, formando um aguilho. Assim procurou-se avaliar morfometricamente as estruturas do aparelho ferroador de operrias e relacion-las com a glndula de veneno. A anlise dos resultados mostrou que o comprimento glandular (CG) variou de 10,16mm a 5,28mm e 50% das colnias apresentaram operrias com ramificao glandular. O comprimento mdio das lancetas (CLD - direita CLE - esquerda) foi de 1,53mm a 1,64mm; o comprimento das abas (CAD e CAE) variou entre 0,78mm e 0,91mm; o comprimento total da lanceta (CTLD e CTLE), de 2,34mm a 2,53mm; o nmero de farpas (NFD e NFE) entre 9,6 e 10,7; o comprimento do estilete (CE) de 1,12mm a 1,15mm; o comprimento, largura do bulbo (CB e LB) de 0,84mm a 0,93mm; 0,27mm a 0,29mm, respectivamente, e o comprimento total do estilete (CTE) de 1,94mm a 2,06mm. O Coeficiente de Correlao de Pearson (r) foi aplicado, para se verificar as relaes entre o comprimento glandular e as estruturas morfolgicas do aparelho do ferro; dentre os resultados significativos, observou-se que entre CG e CTLD (r = 0,312; p = 0,0001), CG e CTLE (r = 0,187; p = 0,022), CG e CAD (r = 0,255; p = 0,002), CG e CAE (r = 0,192; p = 0,018), CG e CB (r = 0,333; p < 0,0001) e CG e CTE (r = 0,298; p = 0,0002), o que sugere que essas estruturas morfolgicas do aparelho do ferro estariam associadas ao comprimento glandular total. Apoio: CNPq Palavras-chaves: morfometria, Apis mellifera, abelhas africanizadas, ferro, aparelho ferroador
651
FLIGHT MUSCLE DIFFERENTIAL DEVELOPMENT IN WORKERS, QUEENS AND MALES OF Apis mellifera AND Scaptotrigona postica (HYMENOPTERA: APIDAE)
Fernanda Fernandez-Winckler*, Carminda Cruz-Landim Departamento de Biologia, Instituto de Biocincias, Universidade Estadual Paulista (UNESP) Av. 24A n 1515, CEP 13506-900 Rio Claro, SP, Brazil fernanda-winckler@hotmail.com The flight muscles of bees consist of two pairs of thoracic asynchronous indirect flight muscles arranged as dorsal-ventral and anterior-posterior bundled pairs. The flight capability of the adult bees is intrinsically linked to their colonial functions, such as the nuptial flight for mating in the case of queens and males, and the exploration of new habitats for nesting and food sources in the case of workers. Flight is achieved by the contraction of indirect flight muscles which produces changes in thoracic volume and, therefore, wing movement. The purpose of this work was to examine possible differences in muscle development that may be associated with the flying activity of colony classes of individuals in a given life stage considering the behavioral and physiological differences among the stages and between the two species studied. Measurements of the muscle fibers obtained from light microscopy preparations of muscle were submitted to statistical analysis in order to detect the differences at a given moment or throughout the life of the individual. The several classes of adult individuals present in a colony of eussocial bees have different flight requirements according to age and to the functions they perform. The workers perform a more diverse set of tasks than the queens and males, which are almost exclusively dedicated to reproduction, while all functions required for colony survival are performed by the workers. The results show that muscle morphology is similar in both species, but in A. mellifera it consists of more numerous and thicker muscular fibers than in S. postica. Differences in the fiber thickness according to life stage, in all classes of individuals of both species were detected, specially related to workers labor division. Apoio: FAPESP -04/15023-7 Palavras-chaves: Apis mellifera, muscle, worker, queen, male
652
DESENVOLVIMENTO DAS PAPILAS RETAIS EM Melipona quadrifasciata anthidioides E Melipona scutellaris

Carolina Gonalves Santos*, Jos Eduardo Serro Universidade Federal de Viosa Avenida Peter Henry Rolfs, s/n Campus Universitrio CEP: 36570-000 VIOSA - MG cgsbio@yahoo.com.br O proctodeu, parte final do sistema digestivo dos insetos, dividido em piloro, leo e reto. Nos Hymenoptera, o piloro diferenciado numa vlvula presente entre o ventrculo e o leo. O reto o rgo responsvel pela absoro de gua e sais, funo realizada por estruturas diferenciadas denominadas papilas retais. Comumente so encontras seis papilas distribudas radialmente na regio proximal do reto, sendo estas compostas de dois tipos celulares principais: as clulas principais, voltadas para o lmen, e as clulas basais. Entre essas camadas h presena de um lmen intrapapilar. Muitos estudos descrevem a morfologia e fisiologia do reto, contudo pouca ateno foi dada ao desenvolvimento das papilas, sendo os trabalhos encontrado em Apis mellifera e Vespa vulgaris. Contudo os autores destes divergem quanto origem desta estrutura sendo propostas origem mesodrmica e ectodrmica, e uma origem apenas ectodrmica. O objetivo deste trabalho foi descrever o processo de formao das papilas retais em Melipona quadrifasciata anthidioides e Melipona scutellaris. Nessas abelhas a papila retal formada na pupa de olho branco nos estgios finais do seu desenvolvimento. Inicialmente a papila mais alongada e apresenta-se como um espessamento do epitlio. Nesta fase no observada a camada de clulas basais, nem o lmen intrapapilar. Na pupa de olho rosa ocorre a formao da camada de clulas basais, que est completamente formada na pupa de olho marrom. Nesta fase inicia-se o processo de formao do lmen intrapapilar e o posicionamento das clulas juncionais, que ficam em contato com o epitlio do reto e as clulas principais. Durante as fases de desenvolvimento so observadas inmeras figuras mitticas em todo o reto, foi detectada tambm a ocorrncia de morte celular. Conclui-se que a formao das papilas ocorra por remodelao do epitlio e no migrao celular, sendo esta de origem completamente ectodrmica. Apoio: FAPEMIG, CAPES Palavras-chaves: abelhas, papila retal, desenvolvimento, reto, Hymenoptera
653
HISTOQUMICA DA VLVULA CARDACA E DA PORO ANTERIOR DO VENTRCULO EM ABELHAS (APIDAE)

Stphanie A.M.V. Teixeira* , Jos Eduardo Serro Universidade Federal de Viosa Departamento de Biologia Geral, 36570-000 Viosa, Brasil stephanieassef@yahoo.com.br No trato digestivo das abelhas, a transio do estomodeu para o intestino mdio marcada pela vlvula cardaca que se mostra como uma dobra do epitlio sendo a poro anterior do ventrculo caracterizada por um epitlio formado por clulas finas e altas. Esta regio se mostra longa em Meliponini e curta em Apini. Este estudo comparou histoquimicamente a vlvula cardaca e a regio anterior do ventrculo em Apis mellifera e Melipona scutellaris contribuindo para a compreenso da funo destas regies no trato digestivo destas abelhas. Seces histolgicas foram submetidas aos seguintes testes histoqumicos: PAS, Bromofenol, ATPase e Fosfatase Alcalina. Tanto a vlvula cardaca quanto a poro anterior do ventrculo foram positivas para PAS e Bromofenol em ambas as espcies, evidenciando carboidratos e protenas, respectivamente. Entretanto, nos testes para Fosfatase Alcalina e ATPase, a regio anterior do ventrculo apresentou resultados positivos, enquanto a vlvula cardaca foi negativa para ambos os testes. Estes resultados sugerem que a poro anterior do ventrculo pode estar envolvida no transporte ativo de substncias a partir do lmen. A presena de reservas de glicognio na vlvula cardaca permanece por ter sua funo elucidada uma vez que esta poro do trato digestivo tem como funo principal impedir o refluxo de alimento para o papo. Apoio: CNPq, FAPEMIG Palavras-chaves: Apis mellifera, Melipona scutellaris, intestino mdio, Vlvula Cardaca,Apidae
654
ESTUDOS MORFOLOGICOS DA GLANDULA INTRA-MANDIBULAR de Melipona scutellaris

Douglas Elias Santos, Edmilson Amaral de Souza: Jos Eduardo Serro Departamento de Biologia Geral, Universidade Federal de Viosa ,36570-000, Viosa, MG, Brasil av PH rolfs ,36570-000, Viosa, MG, Brasil douglaseliassantos@hotmail.com Melipona scutellaris tem como caracterstica a produo de grande quantidade de rainhas em seus ninhos. Estas rainhas raramente so fecundadas e a partir de cinco dias de vida estas so mortas pelas operrias. Considerando que as glndulas excrinas das abelhas tm um papel importante no reconhecimento dos indivduos dentro da colnia, este estudo analisou o desenvolvimento das glndulas intra-mandibulares em rainhas virgens e operrias de M. scutellaris. As mandbulas foram analisadas em microscopia eletrnica de varredura, histolgica e histoquimicamente. Os resultados mostraram que a mandbula de ambas as castas apresentam poros na superfcie interna da mandbula e presena de dois tipos de glndulas intra-mandibulares: glndulas epiteliais e glndula unicelulares. O epitlio glandular mostrou-se desenvolvido em rainhas virgens que estavam sendo perseguidas pelas operrias, enquanto nestas ltimas o epitlio formado por clulas cbicas. Em ambas as castas as clulas glandulares apresentam depsitos de glicognio e protenas indicando alta atividade de sntese de substncias. As glndulas unicelulares apresentam-se bem desenvolvidas com acmulo de glicognio e protenas em ambas as castas. Os resultados sugerem que a glndula epitelial intramandibular de rainhas virgens so mais ativas. Apoio: CNPq; FAPEMIG Palavras-chaves: Glndula intra-mandibular, Melipona scutellaris, morfologia
655
HISTOLOGIA DE Apis mellifera INFECTADA POR Nosema ceranae

Dbora Linhares Lino de Souza* , Jos Eduardo Serro Universidade Federal de Viosa Departamento de Biologia Geral, Av.PH.Rolfs, s/n CEP: 36570-000 deb_sbr@yahoo.com A infeco de Apis mellifera por Nosema ceranae ocorre no intestino mdio, pouco depois que a abelha entra em contato com os esporos do parasita. Estudos recentes tm demonstrado que microspordeos podem infectar outras clulas alm daquelas do intestino mdio. Abelhas infectadas por N. ceranae so freqentemente encontradas rastejando fora do ninho. Neste estudo ns analisamos o crebro e as glndulas hipofarngeas de operrias de Apis mellifera infectadas para avaliar se Nosema ceranae pode infectar as clulas destes rgos, resultando em problemas na orientao das mesmas bem como a infeco de outras abelhas pelo mecanismo de trofalaxis. A histologia do crebro, glndulas hipofarngeas e do intestino mdio foi estudada em operrias de Apis mellifera capturadas rastejando prximas aos ninhos. Os resultados mostraram que as abelhas estavam infectadas, uma vez que microspordeos emitindo tubos polares foram encontrados no intestino mdio de todas as abelhas analisadas. Entretanto, o crebro e as glndulas hipofarngeas no apresentaram sinais de infeco pelo microspordeo. Neste sentido os problemas da orientao das operrias no ocorrem por danos ao crebro das abelhas nem a transmisso se d pelo mecanismo de trofalaxis. Novas anlises das glndulas mandibulares e salivares sero realizadas para verificar outros mecanismos de transmisso intra-colonial do microspordeo. Apoio: FAPEMIG/CNPq Palavras-chaves: Apis mellifera, Nosema ceraneae, Glndulas hipofarngeas, Crebro, Intestino Mdio
656
IMMUNOCYTOCHEMICAL LABELING OF CELL DEATH AND CELLULAR STRESS PROTEINS AS A TOOL FOR TOXICOLOGICAL STUDIES OF HONEY BEES
Elaine Cristina Mathias da Silva-Zacarin1*, Ales Gregorc2, Daiane de Jesus3, Osmar Malaspina3 *Universidade Federal de So Carlos (UFSCar) Campus Sorocaba; 2Agricultural Institute of Slovenia, Ljubljana, Slovenia; 3UNESP Campus de Rio Claro, IB, Dept..Biologia e CEIS Rodovia Joo Leme dos Santos, Km 110 - SP-264, Bairro do Itinga, Sorocaba - So Paulo Brasil, CEP 18052-780 elaine@ufscar.br Honey bees are frequently exposed to insecticides on crops where they forage. Chronic exposure to fipronil can induce sublethal effects in the colonies, which are not easily identified. The aim of the present work was the immunocytochemical labeling of cell death and HSPs (cellular stress proteins) in the midgut of Apis mellifera treated chronically with low doses of fipronil. Newly-emerged workers were submitted to bioassays according to the pattern protocol, so that the bees of the control group received an artificial diet while the experimental group received diet contaminated with fipronil (1mg/Kg of food). The total mortality of bees happened only on the 15th day of the bioassay. During the first week of the treatment, most of bees had not showed behavioral signs of intoxication and the survival rate was similar to the control group. On the 6th day, the bees were collected for dissection of the midgut. Organs were fixed in buffered 10% formalin and routinely processed for inclusion in paraffin. The histological sections of the organs were submitted to imunocytochemical detection of cell death and HSP70. The results indicate that keeping the expression of HSP70 in the digestive cells between the control and experimental group had not prevented the cell death rate which increased in these cells observed in the experimental group. On the contrary, the regenerative cells appear negative to HSP70 in the control group and most of these cells are positive to HSP70 in the experimental group. The new expression of HSP70 in regenerative cells prevents cell death, as shown by the negative reaction observed in these cells when the test for cell death detection was applied. The global analysis of these results indicates a possibility of midgut epithelium renewal by the regenerative cells, which displayed mechanisms of adaptation to insecticide exposure during the analyzed period. Apoio: FAPESP, CNPq. Palavras-chaves: adult worker, apoptosis, Apis mellifera, Heat Shock Protein, toxicology
657
ULTRASTRUCTURE OF THE CEPHALIC SALIVARY GLANDS OF WORKERS AND QUEENS OF Apis mellifera AND Scaptotrigona postica (HYMENOPTERA, APIDAE) IN DIFFERENT PHASES OF LIFE
Silvana Beani Poiani*, Carminda da Cruz-Landim Departamento de Biologia, Instituto de Biocincias de Rio Claro (UNESP/RC) Av. 24A, no.1515, Bela Vista, CEP 13506-900, Rio Claro, So Paulo, Brazil spoiani@yahoo.com In some species from Apinae, a pair of functional salivary glands develops in the head: the cephalic salivary glands (CSG). These glands consist of alveolar secretory units interconnected by anastomosing ducts, ending the gland final excretory duct from each gland of the pair in the thoracic duct crossing the head. A comparative study by transmission electron microscopy (TEM) was done on the CSG of workers and queens of Apis mellifera and Scaptotrigona postica. The TEM revealed that the alveolar secretory cells, from both species, are rich in smooth endoplasmic reticulum, mitochondria, Golgi and vesicles containing lipid inclusions. In S. postica the secretory cells contain large amounts of polyribosomes and become flattened as the bee ages, while in A. mellifera they remain cubic. Modified mitochondria are found associated to vesicles containing secretion. The mitochondria suffer the inner membrane disorganization, lose of the matrix electron-density and might become deposits of lipid. In both species, the alveolar size increases progressively. The maximum accumulation is attained in forager workers and fecundated laying queens. In A. mellifera secretion is produced along all lifetime, while in S. postica it seems stop in nurse workers. Therefore, in this last species the secretion delivery seem occurs only in the foragers, while in A. mellifera there is the possibility of a secretion early use and re-filling of the alveolus. The data suggest for the workers secretion a function related with the forager activities and for queens a possible pheromonal function. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: salivary system, labial gland, mitochondria, lipid
658
DIFFERENTIAL CELL DEATH DURING MUSHROOM BODIES DEVELOPMENT OF WORKERS, QUEENS AND MALES OF Apis mellifera (HYMENOPTERA: APIDAE)
Thaisa Cristina Roat*, Carminda da Cruz-Landim Departamento de Biologia, Instituto de Biocincias, UNESP, Rio Claro, So Paulo, Brazil Av. 24-A, n. 1515 - Bela Vista, Rio Claro/SP thaisaroat@yahoo.com.br In a colony of Apis mellifera, are present three classes of adult individuals with well definite functions: the queen and the males are reproductive individuals and the workers perform all necessary tasks to maintenance of the colony. Workers, queens and drones present morphological, physiological and behavioral adaptations acquired during the post-embryonic development, mainly during the metamorphosis, corresponding to their respective functions in the colony. The brain mushroom bodies size is related to the complexity of behavior shown by insects. The present work analyzed comparatively the differences in the rates of cell death that occurs during the metamorphosis in the mushroom bodies of the female castes and males through the TUNEL reaction besides morphological and statistical analysis. It was verified that the cell deaths are present since 5 instar of larval phase and continue up to black eyed pupae in all individual classes. In workers and queens the cell deaths are present only in black eyed pupae, being more numerous in queens and practically inexistent in males. These results suggest a cell death specific regulation, resulting in differences in the cerebral structures that are responsible by the functions characteristics of each individual in the colony. Apoio: FAPESP (Grant 04/03336-0) Palavras-chaves: apoptosis, mushroom bodies, metamorphosis, post-embryonic, brain
659
SCANNING ELECTRONIC MICROSCOPY (S.E.M.) OF MORPHOLOGICAL TRAITS OF TAXONOMIC INTEREST OF SOME MELIPONINI BEES (HYMENOPTERA: APIDAE)
Eda Flavia Lotufo Rodrigues Alves Patricio Laboratorio de Abelhas, Departamento de Ecologia Geral. Instituto de Biociencias.Universidade de So Paulo Rua do Mato. Travessa 14 n. 321 CEP 05508-900 So Paulo SP edaflap@usp.br The first and worldwide mean to identify a bee species has been the use of morphological traits. First observed through naked eyes, then through light microscope, a bee could be described and compared with others and much was inferred from such descriptions, even their place in taxonomic trees. Most descriptions of our stingless bee species have been based on studies like these. More recently, the emphasis on Geographic Distribution, DNA and Chemical Analysis and Statistical Treatment brought fundamental data to better describe a bee species and to correctly identify its taxonomic position. However, peculiar aspects of stingless bees morphology as seen at S.E.M. have been little studied. In the present work we investigate at S.E.M., some amazing morphological aspects of five of our Meliponini bee species, in order to better characterize them and to try to establish eventual relationships between their morphology and function besides hoping to increase the appreciation for our stingless bees. We have already described in previous works, the pollen sac of the digestive tube of some Meliponini bee species and the corbiculae of many others. In the present study we emphasize the morphological aspects of the head structures, of the thorax and abdomen and appendices of adult bees of Schwarziana quadripunctata, Trigona hyalinata, Friesella schrottky, Frieseomelitta varia and Lestrimelitta sp. Apoio: Universidade de So Paulo Palavras-chaves: Meliponini, S.E.M., morphological traits, workers, queens
660
RELAO ENTRE O TAMANHO DOS ESPERMATOZIDES DAS ABELHAS CORBICULADAS E OS DIFERENTES NVEIS DE SOCIABILIDADE
Samira Ravaiano*, Rudo Paiva Ferreira, Yasmine Antonini, Uyr Zama Instituto de Cincias Exatas e Biolgicas- UFOP Campus Morro de Cruzeiro s/n, 35400-000 Ouro Preto, Brasil samiraravaiano@hotmail.com Os Apinae so formados por 19 tribos, sendo quatro corbiculadas, os Apini, Bombini, Euglossini e Meliponini, cujos comportamentos sociais variam de solitrias (Euglossini), a eussociais avanados (Apini e Meliponini), passando por nveis intermedirios (Bombini). Estudos sugerem que grupos mais derivados tendem a apresentar espermatozides maiores (vantagem na competio espermtica intraespecfica). Contudo, acreditamos que nos grupos sociais, seja mais vantajoso ter espermatozides menores, porm mais numerosos, para abastecer a espermateca da fmea em uma nica cpula e que nos solitrios, a melhor estratgia seria de espermatozides maiores (mais eficientes), para garantir a vantagem em vrias cpulas com diferentes fmeas. Assim, o objetivo deste trabalho foi medir os espermatozides nestas tribos e verificar se h relao entre tamanho destas clulas e as estratgias reprodutivas adotadas nos diversos nveis de sociabilidade. Os espermatozides em suspenso foram obtidos nas vesculas seminais de machos adultos de 18 espcies de Meliponini e de Bombus atratus, sendo estes fixados em glutaraldedo e medidos em microscpio acoplado cmera digital Leica. As medidas de Apini, Euglossini e Bonbini foram obtidas na literatura. Para anlise estatstica usamos o teste de Kruskal-Wallis com p<0,05. Os resultados mostram que os espermatozides nos grupos eussociais avanados medem entre 80m (Plebeia remota) e 300m (Frieseomelitta sp) nos Meliponini e 270m em Apis mellifera. Nos parasociais variam de 160-230m (Bombus lucorum e B. lapidarius, respectivamente, sendo 190m em B. atratus) e nos solitrios, variam de 720m (Eulaema nigrita) a 1.500m (Euglossa mandibulares). Estatisticamnete, o tamanho do espermatozide difere entre os solitrios, parassociais e eussociais [Euglossini: 1110,00, Bombini: 188,60 Meliponini: 155,00; Kruskal-Wallis: H (2, N= 12)=6,60; p=0,037]. Assim, conclumos que h uma tendncia do tamanho dos espermatozides variarem com o nvel de sociabilidade apresentado pelo grupo (conforme hiptese), entretanto estamos ampliando o grupo amostral (especialmente em Euglossini) para aumentar a confiabilidade estatstica da anlise. Apoio: PIP/UFOP Palavras-chaves: abelhas, corbiculadas, morfometria de espermatozides, sociabilidade
661
NINHOS DE ABELHAS
662
POSTURA DA RAINHA DA ABELHA CANUDO Scaptotrigona polysticta MOURE, 1950, EM CAIXA PADRONIZADA, NA AMAZNIA
Klilton Barbosa-Costa*, Aramis da Cruz Noronha, Gislene Almeida Carvalho-Zilse Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia Av. Andr Araujo 2936 Aleixo, 69.083-000 Manaus kliltonb@gmail.com Para conhecer o processo de oviposio em uma colnia da espcie Scaptotrigona polysticta foram realizadas observaes dirias, em um perodo de dois meses, em rea urbana. Aps multiplicao, pelo mtodo Perturbao Mnima, em Trigonrio localizado no Grupo de Pesquisas em Abelhas (GPA, Manaus-AM) a colnia-matriz foi alojada em caixa padronizada (caixa Canudo formada por ninho, sobreninho e tampa, com 10,31L). A colnia-matriz foi mantida sobre bancada, no laboratrio do GPA, com uma mangueira plstica conectando a entrada da colnia, por meio de um furo na parede, com a rea externa do laboratrio, em frente floresta. Em semanas alternadas, a colnia foi alimentada com xarope (mistura de gua+acar 1:1+20g de plen), fornecidos trs vezes/semana, em recipientes plsticos (30 mL), no sobreninho da caixa. A observao deu-se das 08h00min s 17h00min, a cada 30 minutos, de maio a junho de 2007. A postura diria foi acompanhada, por meio de marcao superior e lateral das clulas, na borda do disco, e contabilizada por anlise dos registros com mquina digital. Em junho/2007, a colnia-matriz foi multiplicada e procedeu-se tambm o monitoramento (de julho a agosto /2007) da postura na colnia-filha sob as mesmas condies descritas anteriormente. Para a colnia-matriz obtivemos 2.139 ovos, distribudos em sete discos, com mdia de 106,95 ovos/dia, em 20 dias. A colniafilha produziu 3.034 ovos, distribudos em oito discos, com mdia de 108,35 ovos/dia, em 28 dias. Em colnias de Scaptotrigona postica observou-se a produo de at 1.000 ovos. O uso de caixa padro e alimentao artificial um indicativo que o nmero de ovos produzidos por dia pode ser maior, possibilitando o aumento na quantidade de enxames. Apoio: SUFRAMA, CAPES, ProVarzea, CNPq. Palavras-chaves: Amaznia, Meliponicultura, Caixa Padronizada, Postura da Rainha, Scaptotrigona polysticta
663
ABELHAS SEM FERRO (MELIPONINI) E SEUS NINHOS NO CERRADO DE BALSAS, MA, BRASIL
Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Correia de Albuquerque Laboratrio de Estudos sobre Abelhas (LEA) -Departamento de Biologia - Universidade Federal do Maranho-UFMA Campus do Bacanga, Av. dos Portuguesess/n 65000 So Lus-MA , Brazil Av. dos Portugueses s/n Campus do Bacanga regommc@uol.com.br As abelhas sem ferro, Meliponini so notadamente vulnerveis fragmentao dos habitas, pois a grande maioria, constri seus ninhos nos troncos das rvores. Os ninhos de Meliponini foram diagnosticados de julho/ 2006 a novembro/ 2007 em uma rea de cerrado (07 42 58.5S e 46 11 19.8 W) no sul do Maranho. Os ninhos foram devidamente numerados e sua localizao determinada pelo Sistema de Posicionamento Global (GPS). Caractersticas como altura do ninho em relao ao solo, dimetro na altura do peito (DAP) dos troncos das rvores e ou dimetro dos galhos foram anotados, assim como o nome popular das espcies florais, hospedeiras dos ninhos. Foram amostrados 110 ninhos de abelhas. O gnero Scaptotrigona predominou com 36,4% de ninhos quantificados, seguido de Oxytrigona (15,5%) e Frieseomellita (12,7%). Os ninhos foram encontrados, em maior proporo, em galhos e troncos ocos de sucupira-amarela (Pterodon aff. polygalaeflorus - Fabaceae ), piqui (Caryocar brasiliense - Caryocaraceae ) e pu (Mouriri grandiflora - Melastomataceae). Dentre os ninhos inventariados destacam-se os das espcies conhecidas como tubi (duas do gnero Scaptotrigona), tatara (duas do gnero Oxytrigona), man-de-abreu (Frieseomellita flavicornis), bor (Tetragona quadrangula) e jata (Tetragonisca angustula). As rvores com troncos mais espaosos e ocos mais amplos abrigam abelhas maiores, como a uruu (Melipona flavolineata) e a tiba (Melipona fasciculata), ambas j pouco abundantes no cerrado maranhense. Os resultados da Anlise multivariada/ regresso mtipla realizada entre as espcies de abelhas e o substrato com ninhos fundados, e as medidas: DAP, altura e largura das espcies vegetais mostraram que h correlao entre as espcies de abelhas e a largura do substrato (R = 0,20; R2 = 0,04; p = 0,04; tolerncia < 0,05). Apoio: CNPq Palavras-chaves: ninhos, cerrado, abelhas sem ferro, meliponini
664
TRAP NEST SCOUTER: UM SOFTWARE PARA COMPUTADOR DE MO DESTINADO A AUXILIAR EM PESQUISAS COM NINHOSARMADILHA USADOS NA OBTENO DE ENXAMES DE ABELHAS MELIPONINI
Eduardo Matheus Marion Jorge*, Antonio Mauro Saraiva Escola Politcnica da USP, Laboratrio de Automao Agrcola Av. Prof. Luciano Gualberto, travessa 3, n 158, sala C2-56 - Edifcio de Engenharia Eltrica - Cidade Universitria - So Paulo, SP edummjorge@gmail.com Os polinizadores so fundamentais para a reproduo de certos grupos de plantas e, portanto, seu estudo essencial. Em particular na situao atual em que h um declnio dos polinizadores necessrio aumentar o conhecimento existente sobre eles para possibilitar o seu manejo e uso sustentado. Diversos grupos de pesquisa desenvolvem estudos com abelhas sem ferro (Meliponini) no Brasil. Estes estudos so comumente realizados em campo e demandam a coleta de dados em condies de trabalho difceis, seja pelo ambiente seja pela intensidade do trabalho. Nesse processo h grande margem para a introduo de erros de coleta e transcrio e problemas de armazenamento de dados. O Trap Nest Scouter um software que foi desenvolvido visando a coleta de dados em experimentos com ninhos-armadilha utilizados no estudo de diversas espcies de abelhas sem ferro. O software se baseia numa plataforma de computador de mo, e otimiza o processo de aquisio de dados, tornando-o mais rpido, preciso e sistemtico. A verso atual apresenta-se estvel e est sendo utilizada por pesquisadores da FFCL-RP e do Laboratrio de Abelhas (IB-USP), no mbito do projeto BioAbelha-FAPESP. Uma nova verso est sendo finalizada, que possibilita a tomada de fotos e o registro de dados de posicionamento, graas existncia de cmera fotogrfica e receptor GPS embutidos no computador de mo. Apoio: FAPESP; CNPQ Palavras-chaves: Software, Computador de mo, Meliponini, Trap Nest Scouter, Bancos de dados
665
DIVERSIDADE DE NINHOS DE MELIPONINA (APIDAE) NA ESCALA DA PAISAGEM EM MOSAICO NO CORREDOR CENTRAL DA MATA ATLNTICA (BA)
Marlia Dantas e Silva*, Mauro Ramalho, Zafira Evelma da Rocha Gurgel, Ciro Tavares Florence, Paulo Csar Gouva Leo, Joo Paulo Loyola Oliveira, Daniela Monteiro, Jaqueline Figueredo Rosa, Marli Emlia Almeida Universidade Federal da Bahia Laboratrio de Ecologia da Polinizao ECOPOL/IBIO-UFBA Rua Baro de Jeremoabo, s/n - Campus Universitrio de Ondina. CEP:40.170-115 SalvadorBahia, Brasil dantasm@ufba.br As abelhas sem ferro (Apidae, Meliponina) so polinizadores numericamente dominantes nas florestas tropicais pluviais do Brasil, como a Mata Atlntica. Por outro lado, a fauna de meliponneos apresenta variaes em sua diversidade, mesmo em escala espacial local, associadas a diferenas na estrutura da vegetao ou qualidade dos hbitats. O objetivo do presente trabalho foi comparar a distribuio de ninhos de Meliponina entre pequenos fragmentos e grandes remanescentes florestados. A rea de estudo localiza-se na Fazenda Trs Pancadas (13 50S e 39 15W) Reserva Particular do Patrimnio Natural da Michelin/Bahia que se encontra entre os municpios de Ituber e Igrapina no baixo sul do Estado. A rea de aproximadamente 9000 ha, caracteriza-se pela presena de fragmentos de Mata Atlntica inseridos na plantao de seringueira (Hevea brasiliensis). Entre maio a agosto/2007, duas vezes por ms, foram estabelecidas parcelas de 25x25 metros totalizando 3ha em cada poro de habitat: Mata Primria e Fragmento Florestado. Todas as rvores das parcelas foram observadas, com o auxlio de binculos, no perodo da manh (08:00-12:00). Foram encontrados 27 ninhos distribudos em sete gneros de Meliponina. Tetragonisca angustula foi a espcie que apresentou maior abundncia, principalmente nos fragmentos, devido provavelmente essa espcie utilizar uma diversidade muito grande de substratos para a implantao dos seus ninhos. J os gneros Melipona e Scaptotrigona foram encontrados exclusivamente nas reas mais preservadas de floresta, o que evidencia o carter especialista desses gneros, que necessitam de rvores com cavidades maiores para a nidificao. Apoio: CNPq; FAPESB; MICHELIN Palavras-chaves: Fragmentao, Mata Atlntica, Abelhas sem ferro, Nidificao
666
DIVERSIDADE E SAZONALIDADE DE ABELHAS E VESPAS SOLITRIAS (HYMENOPTERA: APOIDEA) EM NINHOS-ARMADILHA NA REGIO DE OURO PRETO, MG
William de Oliveira Sabino*, Yasmine Antonini Universidade Federal de Ouro Preto, Instituto de Cincias Exatas e Biolgicas, Departamento de Cincias Biolgicas, Laboratrio de Biodiversidade sabinoufop@yahoo.com.br A metodologia de ninhos-armadilha largamente utilizada para se obter dados sobre a riqueza e nidificao de vespas e abelhas solitrias em hbitats variados. O presente trabalho visou atingir este objetivo no municpio de Ouro Preto, MG, utilizando ninhos-armadilha em duas regies diferentes: no Parque Estadual do Itacolomi (PEIT) e em uma rea de Canga, no campus da UFOP. Para tal, 600 ninhos foram instalados na Canga e 600 no PEIT. As reas foram vistoriadas mensalmente e os ninhos completos, levados para o laboratrio para anlise. Foram obtidos 64 ninhos no PEIT e 2 na Canga. Essa diferena pode ser explicada pela complexidade do hbitat, pois o PEIT apresenta maior riqueza de plantas que a Canga. As abelhas foram representadas por uma espcie (Megachile anthidioides) que somou 86,36% (N=57) dos ninhos coletados. As vespas foram representadas por trs espcies: Trypoxylon (Trypargilum) sp.2 (7 ninhos) e Monobia angulosa (2 ninhos). As maiores coletas foram registradas nos meses de Agosto e Setembro de 2007, e a sazonalidade no se mostrou significativa (Q= 21.3415, p= 0.1263), provavelmente devido ao pouco tempo de coleta. A taxa de mortalidade foi de 23,8% para as abelhas e de 34,6% para as vespas. As principais causas de morte foram ataques de formigas, fungos e parasitides. Fica evidente a importncia da conservao de abelhas e vespas para a preservao do ambiente sendo que novos estudos devem ser realizados a fim de se obter um pouco mais sobre a estrutura de comunidades de vespas e abelhas solitrias. Apoio: Programa de Incentivo Pesquisa (PIP/UFOP) Palavras-chaves: Ninho-armadilha, Abelhas solitrias, Vespas solitrias, PEIT, Sazonalidade
667
LONGEVIDADE E TAMANHO DE NINHO GREGRIO DE Euglossa annectans EM REA URBANA

Marilda Cortopassi-Laurino*, Sergio Dias Hilrio, Mrcia de Ftima Ribeiro, Paulo Nogueira-Neto Laboratrio de Abelhas da USP-So Paulo, SP; EMBRAPA-SEMI RIDO, Petrolina, PE Rua do Mato, travessa 14, n 321 CEP 05508-900 So Paulo, SP mclaurin@usp.br Observaes em um ninho gregrio foram feitas em um jardim de casa de bairro arborizado da cidade de So Paulo instalado em caixa de madeira para ninhos de abelhas sem ferro a 1.80m de altura e distante 0.70cm de outro ninho em muro. No vero de 2003, o ninho com pelo menos 27 abelhas se distribua em duas gavetas com 108 clulas na parte inferior, junto da entrada, e 31 na parte superior. Destas clulas, 10 continham alimento larval. As clulas (0.87x1.42cm) estavam primariamente apoiadas num pequeno bloco de madeira estando algumas clulas na posio horizontal. Havia muitos caros no ninho. Em maro de 2003 a parte inferior foi removida e restaram 35 clulas sendo 4 com alimento larval. Um ms depois, sem construo, somente trs abelhas foram encontradas dentro do ninho e uma fina camada de resina vedava a entrada da porta. Nesta poca fria, as clulas estavam mais resinosas. No inverno de 2007 o ninho continha cerca de 120 clulas sendo 6 com alimento larval e pelo menos 17 abelhas. No vero de 2007 o ninho com 259 clulas, foi atacado por formigas Camponotus sp. e em maro de 2008 ele continuava sem abelhas adultas, mas mostrava sinais de ecloso de quase todas as clulas. Atividades externas foram anotadas. As observaes permitem concluir que E. annectans : 1.est bem adaptada para viver em reas urbanas, 2. constri ninhos prximos, 3. faz reuso do ninho por pelo menos 5 anos, 4. ativa ao longo de todo ano, 5. distribui a construo das clulas predominantemente na entrada do ninho, 6. apresenta tendncia de crescimento exponencial das clulas de cria 7. apresenta 3 vezes mais abelhas adultas do que clulas em construo, 8. so bastante ativas aos 18C, 9. vespas Melittobia emergiram sincronicamente do ninho (20-21C e 78-81%UR). Apoio: Palavras-chaves: Euglossa annectans, ninho gregrio, longevidade ninho, tamanho ninho
668
ATRATIVIDADE DE ABELHAS SOLITRIAS (HYMENOPTERA, APOIDEA) S CORES E MATERIAIS

Carina de Oliveira*, Maria Cristina Lorenzon Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro BR 465 - Km 7 Seropdica/ RJ - Cep 13054133 carina_ruralrio@yahoo.com.br O hbito das abelhas solitrias nidificarem em cavidades preexistentes permite a realizao de estudos em ninhos-armadilhas (NA). O presente trabalho objetivou verificar a influncia de cores e materiais de NA na atratividade de abelhas solitrias. O estudo foi conduzido no Campus da UFRuralRJ durante um ano. Para construo dos NA foram utilizados trs materiais: madeira, bambu e argamassa-cimento-vermiculita (ACV). As entradas dos ninhos foram identificadas em azul, amarelo e cor dos materiais (testemunha). As armadilhas foram construdas com cartolina, cujos orifcios variavam em 3 10mm de dimetro e entre 4 11 cm de comprimento. As inspees ocorreram semanalmente, os tubos nidificados foram retirados, separados e monitorados. As abelhas emergentes foram sacrificadas, identificadas e organizadas na Coleo do Instituto de Zootecnia da UFRuralRJ. Os dados foram analisados atravs do teste de Kruskal - Wallis. Foram coletados 412 ninhos, sendo 37 de abelhas, 154 de vespas, 15 de moscas, cinco de outros insetos. Observou-se mortalidade em 49% dos ninhos (n=201). Emergiram 58 espcimes de abelhas, 505 vespas, 19 moscas e 11 foram outros insetos. As espcies de abelhas foram: Dicranthidium luciae, Megachile sp. e Centris (Heterocentris) analis, sendo a ltima a mais representativa em nmero de ninhos fundados (n=35) e com a maior abundncia relativa (n=56). Observou-se maior nidificao de abelhas entre dezembro e maro, provavelmente por ser um perodo com maior disponibilidade de alimento. Verificou-se maior procura das abelhas (n=35) por ninhos com 6mm de dimentro e 6cm de comprimento. Para o momento os materiais e cores testados no apresentaram diferenas quanto atratividade (P=0,05), embora outras caractersticas de destaque devam ser consideradas, tais como o custo e facilidade de manejo. Assim, a argamassa-cimento-vermiculita foi o material mais barato e com maior praticidade, devido ao seu baixo peso e resistncia ao ataque de trmitas. Apoio: CNPq Palavras-chaves: ecologia, nidificao, polinizao, ninhos-armadilha, comportamento
669
INFLUNCIA DO COMPRIMENTO E DIMETRO DOS NINHOS-ARMADILHA NO COMPORTAMENTO DE NIDIFICAO DE Centris (Heterocentris ) analis (FABRICIUS)
Carina de Oliveira*, Guaraci Duran Cordeiro, Maria Cristina Affonso Lorenzon *Instituto de Zootecnia - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - Universidade de So Paulo BR 465 - Km 7 Seropdica/ RJ - Cep 13054133 carina_ruralrio@yahoo.com.br Centris (Heterocentris) analis uma espcie nativa de abelha solitria que possui o hbito de nidificar em cavidades preexistentes, permitindo estudos em ninhos-armadilha. Para auxiliar a compreenso da biologia de nidificao desta espcie de abelha, investigou-se a influncia do comprimento e dimetro dos ninhos-armadilha (NA) no nmero de clulas construdas. As observaes foram realizadas durante dois anos (setembro/04 a agosto/05; setembro/06 a agosto/07), no Campus da UFRRJ e na Embrapa-Agrobiologia, localizados em Seropdica (ERJ). Os NA foram construdos com cartolina, com uma das extremidades fechada, os dimetros testados foram: 3, 4, 5, 6, 7, 9 e 10 mm, combinados com os seguintes comprimentos: 4, 5, 6, 10, 11 cm. Os NA foram instalados em estantes e protegidos por coberturas plsticas. Observaram-se 48 ninhos de C. analis, que tinham de uma a seis clulas alongadas, arranjadas em srie linear, orientadas horizontalmente. A correlao (Pearson) entre o comprimento do NA e o nmero de clulas construdas foi positiva (r=0,287; p-valor=0,048). Houve tambm correlao positiva entre o dimetro do NA e o nmero de clulas construdas (r=0,335; p-valor=0,02). O nmero de clulas presentes nos NA variou entre uma a seis (mdia=2,23 1,24). O aumento no comprimento e no dimetro dos NA influenciou a maior ocorrncia de clulas construdas por C. analis, assim, recomenda-se a utilizao das medidas dos NA realizadas neste estudo para a regio em foco. Este estudo permite auxiliar na disposio de condies adequadas para estimular a nidificao de C. analis em cavidades pr-existentes. Apoio: CNPq Palavras-chaves: abelhas solitrias, centridini, ninhos-armadilha, polinizao, ecologia
670
NOTAS SOBRE A BIOLOGIA DE Euglossa (Euglossa) anodorhynchi NEMSIO (APIDAE, EUGLOSSINA): ESTRUTURA DO NINHO E ESPCIES PARASITAS ASSOCIADAS
Paola Marchi, Luiz R. R. Faria Jr.*, Gabriel A. R. Melo Laboratrio de Biologia Comparada de Hymenoptera, Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran Caixa Postal 19.020, 81.531-980, Curitiba, PR, Brasil nuno@ufpr.br So conhecidas, aproximadamente, 110 espcies do gnero Euglossa e, destas, pouco mais de 20 apresentam informaes relacionadas biologia da nidificao. Dada a dificuldade de se encontrar ninhos destas abelhas, a utilizao de ninhos-armadilha tem se mostrado eficiente. Euglossa anodorhynchi foi descrita recentemente e dados biolgicos e a estrutura dos ninhos desta espcie no eram conhecidos, embora esta forma talvez represente apenas uma variante de colorao dentro de Euglossa townsendi Cockerell, que apresenta uma distribuio mais ampla. Quatro ninhos de Euglossa anodorhynchi foram obtidos em ninhos-armadilha instalados em rea de Floresta Atlntica no municpio de Sete Barras, So Paulo, Brasil. De novembro/ 2004 a dezembro/ 2005 as abelhas estabeleceram ninhos nos meses de maro a junho, em dois tipos de ninhos-armadilha: colmos de bambu e blocos de madeira. Todos os ninhos foram construdos em ninhos-armadilha com o maior dimetro disponvel (12 milmetros). As clulas foram construdas com resina vegetal escura, sendo que algumas partculas de resina foram depositadas no fundo da cavidade e na parede dos ninhos-armadilha, principalmente na regio de emenda entre as metades dos ninhos-armadilha, possivelmente para melhor vedar a cavidade. O comprimento dos ninhos variou de 105 a 125 milmetros (distncia entre tampo e fundo). As clulas, de aproximadamente 10 milmetros de altura, foram construdas em srie linear, levemente inclinadas, ocupando aproximadamente metade do dimetro do ninho. O nmero mximo de clulas construdas por ninho foi sete. A estrutura dos ninhos foi bastante semelhante dos ninhos conhecidos de outras espcies do grupo purpurea. Em dois ninhos houve parasitismo de fmeas adultas de E. anodorhynchi por Physocephala bipunctata(Macquart, 1843) (Conopidae, Diptera) e um ninho foi atacado pela vespa Melittobia australica Girault, 1912 (Eulophidae, Hymenoptera). Apoio: CNPq Palavras-chaves: Euglossini, Floresta Atlntica, nidificao, parasitismo
671
EFEITO DO COMPRIMENTO DO NINHO-ARMADILHA NA RAZO SEXUAL DA PROGNIE DE Centris (Heterocentris) analis (FABRICIUS, 1804) (HYMENOPTERA, APIDAE, CENTRIDINI)
Juliana Duarte de Souza Alonso*, Carlos Alberto Garfalo Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901, Ribeiro Preto, SP, Brasil alonso_juliana@pg.ffclrp.usp.br Trabalhos com espcies de abelhas solitrias que nidificam em cavidades preexistentes mostraram que as dimenses dos ninhos-armadilha influenciam a razo sexual dos indivduos produzidos. O presente estudo avaliou o efeito do comprimento dos ninhos-armadilha na razo sexual da prognie produzida por fmeas de Centris analis, uma espcie solitria que nidifica em cavidades preexistentes. O trabalho foi conduzido em trs localidades do municpio de Ribeiro Preto, So Paulo, de janeiro de 2006 a novembro de 2007. Foram utilizados ninhos-armadilha confeccionados com cartolina preta com dimenses de: 5,5; 6,0; 6,5 e 7,0 cm de comprimento e 0,6 cm de dimetro. Quantidades iguais de ninhos-armadilha de cada dimenso foram disponibilizadas. Os ninhos foram introduzidos em orifcios feitos em oito placas de madeira dispostas sob coberturas construdas nos trs stios de nidificao. Durante o estudo foram construdos 221 ninhos, 31,7% deles nos ninhos-armadilha menores; 25,8% naqueles com 6,0 cm; 18,5% nos ninhos-armadilha com 6,5 cm e 24% deles nos ninhos-armadilha maiores. A razo sexual (M/F) da prognie encontrada nos ninhos de 5,5 e 6,0 cm de comprimento foi desviada para machos (p<0,05), enquanto os ninhos de 6,5 cm e 7,0 cm apresentaram razo semelhante a 1 macho : 1 fmea (p>0,05). Os ninhos de 5,5 e 6,0 cm apresentaram semelhana na quantidade de fmeas produzidas por ninho (x=0,0011; p>0,05) mas diferiram dos ninhos de 6,5 e 7,0 cm que, embora similares entre si (x=1,694; p>0,05), apresentaram um maior produo de fmeas por ninho. Considerando que C. analis um eficiente polinizador de algumas frutferas tais como aceroleiras e tamarindeiros, os resultados aqui obtidos indicam que ninhos-armadilha de comprimentos iguais ou maiores que 6,5 cm, seriam os mais adequados para utilizao em tcnicas de manejo visando a criao em massa dessa espcie em campos agrcolas. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Centridini, ninho-armadilha, abelha solitria, razo sexual, dimenso de ninho
672
BIOLOGIA DE NIDIFICAO DE Megachile (Chrysosarus) affabilis (HYMENOPTERA: MEGACHILIDAE) EM NINHOSARMADILHA EM UMA REA ANTRPICA EM CAMPOS DOS GOYTACAZES, RJ
Jos Luiz Pontes da Silva Jnior*, Maria Cristina Gaglianone Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro Av. Alberto Lamego, 2000, 28013-600, Campos dos Goytacazes, RJ juniorpontes21@yahoo.com.br O subgnero neotropical Megachile (Chrysosarus) apresenta sete espcies no Brasil, sendo poucas as informaes a respeito da biologia destas abelhas. Este trabalho tem como objetivo obter dados de flutuao sazonal, atividade de nidificao e arquitetura interna de ninhos de Megachile (C.) affabilis Mitchell, 1930. O estudo foi conduzido no campus da Universidade Estadual do Norte Fluminense utilizando dois tipos de ninhos-armadilha: gomos de bambu e tubos de cartolina, com dimetros de 2 a 23 mm. Foram disponibilizadas 208 cavidades e entre jan/07 e mar/08 M. affabilis concluiu 22 ninhos (5 em cartolina e 17 em bambu), sendo os tubos de 6 a 8mm os mais utilizados (32%). Emergiram 58 abelhas e no foi observada a presena de parasitas. Os maiores picos de nidificao desta espcie (18% dos ninhos concludos) ocorreram na estao chuvosa (maior precipitao mensal de 430,1mm), assim como os picos de emergncia (33% em dez/07 e 28% em fev/08). Dados de emergncia sugerem mais de uma gerao ao ano. O tempo de emergncia variou de 22 a 256 dias. A arquitetura interna dos ninhos revelou clulas com comprimento similar (x = 1,2 0,14 cm; n = 40), construdas por finas camadas de ptalas entremeadas com terra, que o mesmo material que separa as clulas de cria e que constitui o tampo de fechamento (x= 0,542 cm; n= 1). Externamente, as clulas so unidas por um tubo construdo de ptalas. O nmero de clulas variou de 1 a 13. Os dados obtidos corroboram os materiais descritos na literatura para espcies deste subgnero. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Megachile affabilis, Ninho-armadilha, rea antrpica, Arquitetura, Megachilidae
673
ABELHAS QUE NIDIFICAM EM NINHOSARMADILHA (HYMENOPTERA, ACULEATA) EM UMA REA DE MATA PR-AMAZNICA DA RESERVA BIOLGICA DA MERCK, SO JOS DE RIBAMAR/MA
David Barros Muniz*, Gisele Grcia Azevedo, Lenira M. Lacerda Departamento de Cincias Biolgicas - UFMA Campus Universitrio do Bacanga; Av. dos Portugueses, s/n, CEP:65085-580, So Luis/Maranho, Brasil david_bio@yahoo.com.br Com o objetivo de caracterizar a estrutura de comunidade de abelhas solitrias em dois fragmentos de mata amaznica (primria e secundria), ninhos-armadilhas construdos por blocos de madeira, formados por duas peas de 2,5 x 2,5 x 13 cm e dotados de um orifcio central, com dimetros variando de 0,8 a 1,6cm, foram distribudos nas duas reas. Dois ninhos de cada dimetro foram dispostos dentro de caixas impermeveis, cada caixa contendo 10 ninhos, sendo disponibilizados 300 ninhos-armadilhas na rea secundria e 200 na primria. As referidas reas localizam-se na Reserva Biolgica da Merck, localizada no municpio de So Jos de Ribamar/MA. Os ninhos foram inspecionados mensalmente entre maro/2007 e maro/2008. Foram nidificados 130 ninhos com uma taxa de 97,69% (127 ninhos) de sucesso, sendo 71 utilizados por espcies de vespas e 56 por espcies de abelhas, dos quais emergiram 122 indivduos. A maior freqncia de nidificao e de emergncia ocorreu entre outubro/07 a fevereiro/08. As espcies de abelhas amostradas foram: Centris (Hemisiella) tarsata (12,5%), Centris (Heterocentris) analis (10,7%), Megachile sp1. e sp2 (41%), Tetrapedia diversipes (17,8%), Euglossa avicula (7,4%), Anthodioctes sp. (5,3%), Coelioxys (Acrocoelioxys) sp. (3,5%) e 1,8% no identificada. Os dados preliminares apontam que a maior riqueza (n= 6) e diversidade ocorreram na rea de mata secundria (ndice Shannon-Wiener H= 0,67) e a maior abundncia na mata primria, devido s espcies de Megachilidae que nidificaram (n=23 ninhos/44 indivduos) somente nesta rea. Os ninhos de abelha foram parasitados por Coelioxys (Acrocoelioxys) sp., Meloidae e Diptera. Apoio: MERCK Palavras-chaves: Hymenoptera, ninhos-armadilhas, nidificar, Mata primria, Mata secundria
674
RECURSOS ALIMENTARES UTILIZADOS POR ABELHAS COLETORAS DE LEO EM REAS DE CERRADO DO TRINGULO MINEIRO-MG
Lace Souza Rabelo*, Alice Maria Guimares Fernades Vilhena, Thatiana Martins dos Santos Mesquita, Esther Margarida Alves Ferreira Bastos, Solange Cristina Augusto Instituto de Biologia - UFU; Fundao Ezequiel Dias Instituto de Biologia - UFU, Bloco 2D, Rua Cear s/n, Campus Umuarama laicesr@yahoo.com.br Algumas espcies de abelhas coletoras de leo nidificam em cavidades preexistentes, o que facilita o estudo do comportamento de nidificao e dos recursos utilizados para alimentao das larvas, aspectos fundamentais para a conservao e manejo dessas espcies. A anlise do plen presente nos ninhos uma importante ferramenta para a identificao das espcies vegetais visitadas para a coleta dos recursos alimentares. Nesse trabalho foram identificados os gros de plen presentes no alimento larval de Centris analis, Centris tarsata e Tetrapedia peckoltii, espcies abundantemente encontradas em ninhos-armadilha, com o objetivo de determinar a similaridade no uso de recursos, especialmente plen, por essas trs espcies de abelhas coletoras de leo. Ninhos de C. analis, C. tarsata e T. peckoltii, foram obtidos a partir de ninhos-armadilha dispostos em trs coberturas construdas em duas reas prximas Uberlndia-MG: Fazenda gua Limpa (FAL), rea com plantio experimental de diferentes cultivos e com vegetao de Cerrado no entorno; e Reserva Ecolgica do Panga (REP), rea com diferentes fitofisionomias de Cerrado. As coletas foram realizadas, semanalmente, no perodo de maro/2007 e abril/2007. O material coletado foi processado por meio do mtodo de acetlise, sendo confeccionadas trs lminas de cada amostra coletada (n=9). Foi utilizado o ndice de Srensen para comparar a similaridade na utilizao de recursos pelas espcies em cada rea. Solanum lycocarpum, Heteropteris spp., foram as principais fontes de plen de Centris, ressaltando-se que para C. tarsata, Senna rugosa tambm foi um recurso abundante. Em relao a T. peckoltii, as principais fontes de plen foram Kielmeyera rubriflora e Croton spp.. C. tarsata e C. analis apresentaram maior similaridade no uso de recurso na EEP (QS =0,42) quando comparada a FAL (QS=O,20). Ninhos de T. peckoltii s foram obtidos na FAL e a similaridade no uso de recursos com ambas espcies de Centris foi baixa (QS=0,17). Apoio: FAPEMIG Palavras-chaves: Centris analis, Centris tarsata, Tetrapedia peckoltii, plen, ninhos-armadilha
675
OCUPAO DE NINHOS ARMADILHA POR ABELHAS E VESPAS (HYMENOPTERA) EM TRS FISIONOMIAS DE MATA ATLNTICA NO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
Frederico Machado Teixeira*, Maria Cristina Gaglianone Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF) Rua Pedro Marins, 347, Ap.203, Campos dos Goytacazes, CEP: 28.015-180 teixeira_fm@yahoo.com.br A riqueza e composio de abelhas e vespas que utilizam cavidades foram estudadas usando a tcnica de ninhos-armadilha (NA) artificiais, durante um ano, em trs microbacias na regio norte-noroeste do estado do Rio de Janeiro em diferentes fitofisionomias da Mata Atlntica: floresta ombrfila montana (FM), floresta estacional semidecidual submontana (FS) e floresta estacional semidecidual sobre tabuleiros (FT). Foram utilizados dois tipos de NA: bloco de madeira com tubos de cartolina, com dimetros diferentes; e gomos de bambu dentro de cortes de garrafa PET. Foram encontradas trs famlias de abelhas: Apidae, Megachilidae e Colletidae e cinco de vespas: Pompilidae, Vespidae, Sphecidae, Chrysididae e Mutillidae. FS apresentou maior quantidade de ninhos operculados (N=392), com 25 espcies (11 abelhas, 14 vespas); FT (N=295) 8 espcies (1, 7); e FM (N=253) 11 (8, 3). Centris analis e Megachile foram exclusivamente encontrados em FS. Euglossa sp. foi encontrada apenas em FM. Em todas as reas a cartolina teve a maior taxa de ocupao: 88,54% em FM; 85,76% em FT; 64,8% em FS. Embora a maioria dos fragmentos de FS tenham menos de 10ha, a regio apresentou o maior nmero de espcies de abelhas e vespas registradas. A regio de FT, que apresenta fragmentos florestais at 55ha, incluindo a Estao Ecolgica de Guaxindiba (1190ha), apresentou menor nmero de espcies. Apoio: GEF (Fundo Mundial de Meio Ambiente); FAPERJ Palavras-chaves: Abelhas, Vespas, Ninho-armadilha, Mata Atlntica
676
NESTING OF Apis mellifera INSIDE AN EMPTIED NEST OF Trigona C.F. spinipes IN THE CERRADO OF ITIRAPINA, SO PAULO
Fabiana Curtopassi Pioker*, Astrid de Matos Peixoto Kleinert
Departamento de Ecologia, Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo Rua do Mato, Tr. 14 n 101, 05508-090 So Paulo, SP, Brasil fpioker@yahoo.com
Invasion capacity of the exotic bee Apis mellifera and its consequences to native stingless bees in Brazilian natural habitats have been discussed for decades. One issue of this discussion is the ability of Apis to reproduce faster than most stingless bees. The other is its large plasticity to explore food and nesting resources, including trunk cavities previously occupied by the later ones. Here we described an abandoned nest of A. mellifera found inside an external nest of T. c.f. spinipes in the Cerrado of Itirapina. The Trigona nest was oval, with 0.3 m of diameter, 0.35 m tall, built over a small tree fork 1.2 m above the ground. Original entrance and involucrum were intact except for two holes, each with 5 cm of diameter: one over the entrance and one at the opposite side. Inside the involucrum wall, there was an active nest of unidentified ants. Inside the nest there was no remains of the Trigona combs or honey pots. Instead, there were five vertical abandoned combs of A. mellifera, with some closed cells that were covered by a layer of fungi. Inside these cells we found larvae, pupae and one pre-emerged adult, thus allowing the specific identification. We do not know if A. mellifera nesting occurred after death of Trigona or if they caused it. These observations show that: emptied nests of T. c.f. spinipes can supply substrate to nesting of other hymenopterans and the ability of A. mellifera to nest in many kinds of cavities includes external nests of stingless bees. Apis mellifera is very abundant in the studied site, being found on many flowers from August 2007 to February 2008. Perhaps we can be worried about this wide presence, since we do not know if or in which degree A. mellifera can affect negatively native bees. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Apis mellifera, Cerrado, Interaction, nest
677
DISTRIBUIO DE NINHOS DE ABELHAS SEM FERRO NA ESTAO ECOLGICA DO PANGA (UBERLNDIA, MG)
Estefane Leoncini Siqueira, Fernanda Helena Nogueira-Ferreira
Universidade Federal de Uberlndia Rua Cear, s/n, bloco 2D, Campus Umuarama, CEP 38400-902, Uberlndia-MG, Brasil este_ bio@yahoo.com.br Estudos sobre a distribuio de ninhos e sobre os hbitos de nidificao das abelhas sem ferro so importantes parmetros que devem ser conhecidos para se estabelecer estratgias conservacionistas em reas naturais. Este trabalho teve como objetivos localizar e mapear ninhos de abelhas sem ferro e avaliar a riqueza e a abundncia dessas espcies. Foi desenvolvido em uma rea de Cerrado e Mata de Galeria, na Estao Ecolgica do Panga, em Uberlndia-MG, de agosto de 2007 abril de 2008. A localizao dos ninhos foi feita visualmente, a partir de observaes dos possveis locais de nidificao, totalizando uma rea de 100 hectares. Foi encontrado um total de 31 ninhos, representados por 15 espcies distintas de abelhas sem ferro. A maioria dos ninhos (55%) foi encontrada em cavidades pr-existentes em rvores vivas. Esse resultado refora a necessidade de se manter os ambientes protegidos do desmatamento para a manuteno das espcies de abelhas sem ferro em reas naturais, oferecendo-lhes locais para a nidificao. A comunidade de abelhas apresentou diversidade mediana (H= 2,47), com ndice de uniformidade (J= 0,73) e de abundncia (= 4,64) que sugerem uma comunidade que apresenta competio interespecfica intermediria. Dois ninhos Melipona rufiventrisque uma espcie rara na regio, foram amostrados. Pode-se constatar que a rea de estudo, possui um alto potencial para a manuteno das abelhas sem ferro, pois composta por fragmentos de vegetao original, sendo conectados a outros maiores por remanescentes de mata ciliar, o que pode garantir a variabilidade gentica das espcies. Apoio: Cnpq Palavras-chaves: Ninhos, Abelhas sem ferro, Abudncia, Diversidade
678
A FAUNA URBANA DE ABELHAS INDGENAS SEM-FERRO (HYMENOPTERA; APOIDEA; APIDAE) NA REA URBANA DE CATAGUASES, MG
Talitta Guimares*, Paula Netto, Matheus Campista Carvalho, Georgina Maria de Faria Mucci, Lcio Antnio de Oliveira Campos *Ncleo de Extenso, Pesquisa e Ps-Graduao das Faculdades Integradas de Cataguases - FIC; Departamento de Cincias Biolgicas das FIC; Universidade Federal de Viosa - UFV Rua RomualdoMenezes, 701 Bairro Menezes Cataguases, Minas Gerais talitta_fic@hotmail.com O objetivo deste estudo foi analisar a diversidade da fauna de meliponini na rea urbana do municpio de Cataguases, os tipos de substratos utilizados para nidificao e relacionar as espcies mais abundantes no permetro urbano. O trabalho foi realizado de fevereiro de 2007 a abril de 2008. Os ninhos foram encontrados por inspees feitas na cidade, alm de informaes obtidas por entrevistas com os moradores. Os ninhos foram analisados, catalogados e fotografados. Dados como altura da entrada do ninho em relao ao solo, tipo de substrato de nidificao, coordenadas geogrficas e a situao do ambiente prximo ao ninho foram tambm registrados. Foram encontrados 66 ninhos, pertencentes a cinco gneros, sendo a grande maioria Tetragonisca angustula (42 ninhos), seguida de Nannotrigona testaceicornis (12 ninhos), Plebeia sp (nove ninhos), Oxytrigona tataira (dois ninhos) e Tetragona clavipes (um ninho). Foram observados cerca de dez tipos de substratos diferentes, a maioria nidificou em construes de alvenaria. Embora no tenha sido catalogado nenhum ninho da espcie Trigona spinipes muitos indivduos foram observados visitando flores na rea urbana da cidade. Considerando o tamanho do permetro urbano de Cataguases pode-se dizer que a regio est subamostrada. As espcies encontradas so comuns em centros urbanos de diferentes regies. Apoio: Ncleo de Extenso, Pesquisa e Ps-Graduao das Faculdades Integradas de Cataguases - FIC Palavras-chaves: Substrato para nidificao, abelhas sem-ferro, ninhos
679
ABELHAS SOLITRIAS OCUPANTES DE NINHOS-ARMADILHA EM QUATRO LOCALIDADES NO ESTADO DE SO PAULO

Heber Couto Cavalheiro, Guaraci Duran Cordeiro, Isabel Alves-dos-Santos Lab. de Abelhas, Dept.. Ecologia, Instituto de Biocincias USP; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Rua do Mato, trav. 14, n321, CEP 05508-900 hebercouto@yahoo.com.br O objetivo principal do trabalho foi estudar abelhas solitrias que nidificam em ninhos-armadilha em quatro reas florestais do Estado de So Paulo: Estao Biolgica de Boracia(EB) em Salespolis, Parque das Neblinas(PN) em Mogi das Cruzes, Parque Estadual da Ilhabela(IB) em So Sebastio e Parque Estadual da Serra da Cantareira(SC) em So Paulo. Os ninhos-armadilha (NA) foram feitos com tubos de cartolina (6/58; 6/85 e 8/85mm dimetro/comprimento) introduzidos em blocos de madeira, alm de gomos de bambu com tamanhos variados. Para cada localidade foram oferecidas 1000 cavidades/ms, entre janeiro/2007 a maro/2008. Os ninhos foram inspecionados mensalmente e cada ninho fundado foi retirado e reposto por tubo vazio. Os ninhos retirados foram acompanhados em laboratrio at a emergncia dos adultos. Foram fundados 1487 ninhos, sendo 771 ninhos na IB, 344 na EB, 249 na SC e 123 no PN. De 406 ninhos emergiram 967 abelhas e de 255 ninhos emergiram 683 vespas. As espcies de abelhas foram: Hylaeus sp, Tetrapedia diversipes, Tetrapedia sp1, Tetrapedia sp2, Tetrapedia sp3, Centris tarsata, Euglossa truncata, Euglossa anodorhynchi, Megachile sp1, Megachile sp2, Megachile sp3, Megachile sp4, Megachile sp5. As espcies de Tetrapedia predominaram nas fundaes com 87,9% dos ninhos, apresentando preferncia por NA com dimetro 6mm. Centris ocuparam preferencialmente gomos de bambu. Cerca de 20% dos ninhos foram parasitados por abelhas cleptoparasitas (Coelioxoides, Coelioxys, Mesocheira bicolor, Anthrax (Diptera) e Meloidae (Coleoptera). A maior taxa de emergncia ocorreu nos meses de outubro a janeiro com 318 ninhos de Tetrapedia seguido por 34 ninhos de Centris. O aumento da taxa de nidificao ao longo do estudo parece estar relacionado intensificao do movimento nos ninhos pelas abelhas e vespas fundadoras, funcionando como um atrativo para as novas fmeas. Apoio: FAPESP/Biota 04/15801-0 Palavras-chaves: Tetrapedia, Centris, nidificao, Mata Atlntica
680
OCORRNCIA DE NINHOS DE ABELHAS SEM-FERRO (HYMENOPTERA, MELIPONINA) EM DIFERENTES SUBSTRATOS NA FAZENDA PITANGUEIRAS, PARQUE NACIONAL DA SERRA DA BODOQUENA, MATO GROSSO DO SUL, BRASIL
Felipe Varussa de Oliveira Lima*, Jos Benedito Perrella Balestieri Univ. Federal da Grande Dourados, Faculdade Cincias Biolgicas e Ambientais (UFGD / FCBA); Programa de Ps-Graduao - Mestrado em Entomologia e Conservao da Biodiversidade Rodovia Dourados-Itahum, Km 12 , Bloco FCBA (Cidade Univesitria); C.P. - 322 CEP: 79.825-070 Dourados, MS felipe_varussabio@yahoo.com.br A maior diversidade de espcies de abelhas Meliponina est na Regio Neotropical, sendo que a maioria destas nidifica preferencialmente em ocos de rvores, mas podendo nidificar em cavidades no solo, cupinzeiros, formigueiros, alm de outros locais. Esse trabalho objetivou relatar a ocorrncia de algumas espcies de abelhas sem-ferro, o substrato ou local utilizado e aspectos da parte externa da entrada dos ninhos de cada um destes na regio da rea de amortecimento do Parque Nacional da Serra da Bodoquena, localizada na Fazenda Pitangueiras (S 205222,8 e O 0563534,6), Bonito MS. Das espcies registradas tiveram: Partamona sp1, um ninho encontrado em trmita de solo/barro e possua uma entrada tipo boca de barro com uma pequena cavidade; Plebeia sp1 dois ninhos construdos em rvores, considerando a entrada, um possua raias com sulcos pequenos com gros diferentes tons de marrom provavelmente misturados com resina e o outro possua raias com sulcos maiores e a cor branca, porm ambas assemelhando-se ao aspecto e tonalidade do caule; Scaptotrigona depilis um ninho feito em rvore com um tubo externo de resina de colorao escura em forma de tromba na poro distal com cerca 35 cm de comprimento, alm de Tetragonisca angustula fiebrigi seis ninhos em rvore, um em rocha calcrea e outro em caixa de madeira (entradas mltiplas), tendo estes entradas com tubo feito de resina amarelada. A altura das entradas variou de 0 m a 3,07 m em T. a. fiebrigi; 0,78 m a 1,14 m em (Plebeia sp.); 0,70 m (Partamona sp.) e 1, 02 m (S. depilis). Esses resultados reforam a necessidade e a importncia de programas de conservao em reas de vegetao nativa como da rea estudada devido ao desconhecimento das espcies de abelhas nativas. Apoio: UFGD/Programa de Ps-Graduao em Entomologia e Conservao da Biodiversidade Palavras-chaves: Nidificao, Microhabitat, Abelhas nativas, Ninhos, Divesidade de abelhas
681
OCUPAO DE NINHOS-ARMADILHA POR ABELHAS SOLITRIAS NA MATA ATLNTICA DE PERNAMBUCO INTERIOR DE MATA, BORDA E CANAVIAL
Adauto Alex dos Santos*, Clemens Schlindwein Universidade Federal de Pernambuco, Centro de Cincias Biolgicas, Departamento de Botnica, Laboratrio Plebeia Ecologia de Abelhas e da Polinizao. Av. Prof. Moraes Rego, S/N, CEP: 50740-521 Cidade Universitria, Recife, Pernambuco. adauto_alex_s@yahoo.com.br O desmatamento e as alteraes de habitat so as principais causas da modificao na riqueza, composio e abundncia em comunidades de abelhas. Este estudo teve como objetivo comparar riqueza e abundncia de abelhas solitrias que nidificam em ninhos-armadilha em trs ambientes da regio de mata atlntica de Pernambuco: Interior de mata, borda e matriz canavieira. Em cada ambiente foram instalados 10 blocos de madeira, cada um contendo 28 furos com dimetros de 4, 6, 8 e 10 mm, totalizando 280 cavidades por ambiente. Os ninhos foram inspecionados mensalmente de julho de 2007 a maro de 2008. Foram coletados 51 ninhos, fundados por seis espcies de abelhas. Houve maior freqncia de ocupao em dezembro (31%) e fevereiro (27%). No houve ocupao dos ninhos-armadilha entre Julho e Setembro. O maior nmero de ninhos foi encontrado na borda (51% do total de ninhos fundados), seguido pelo canavial (33%). Na borda foram encontradas 4 espcies, no interior de mata 3 e canavial 2 espcies. Centris (Hemisiella) tarsata Smith foi a espcie mais abundante coletada no local (n=33) e a nica a apresentar atividade reprodutiva nos trs ambientes amostrados. Essa espcie apresenta alta tolerncia ecolgica, como j demonstrada em outros estudos. Megachile (Sayapis) dentipes ocorreu apenas no canavial (n=6). Em estudos com metodologia semelhante foi coletado apenas um ninho dessa espcie (Rebio Guaribas, PB), denotando sua raridade em ninhos-armadilha. No interior de mata foram encontrados Centris (Hemisiella) tarsata, Centris (Heterocentris) analis e uma espcie ainda no descrita do subgnero Heterocentris. Surpreendentemente a ocupao de cavidades nos diferentes blocos dos trs ambientes foi muito diferente, dificultando a avaliao dos resultados e sua aplicao em biomonitoramento. Apoio: CNPq/BMBF Palavras-chaves: Alteraes de habitat, Ninhos-armadilha, Abelhas solitrias, Heterocentris, Mata atlntica
682
EFEITO DO TAMANHO DO FRAGMENTO SOBRE A NIDIFICAO DE ABELHAS SOLITRIAS EM REA DE MATA ATLNTICA DE PERNAMBUCO
Adauto Alex dos Santos*, Clemens Schlindwein Universidade Federal de Pernambuco, Centro de Cincias Biolgicas, Departamento de Botnica, Laboratrio Plebeia Ecologia de Abelhas e da Polinizao. Av. Prof. Moraes Rego, S/N, CEP: 50740-521 Cidade Universitria, Recife, Pernambuco. adauto_alex_s@yahoo.com.br Em ambientes fragmentados o tamanho do fragmento um dos fatores mais importantes para a riqueza e diversidade de animais e plantas. Neste trabalho estudamos a influncia do tamanho do fragmento florestal sobre a comunidade de abelhas solitrias que nidificam em ninhos-armadilha na Usina So Jos, Igarassu, regio de floresta Atlntica pernambucana. Foram instalados 10 blocos de madeira em cada um de seis fragmentos estudados: trs grandes (387, 356 e 305 hectares) e trs pequenos (29, 13 e 11 hectares). Cada bloco continha sete furos de dimetros de 4, 6, 8 e 10 mm. Assim, 28 ninhos foram oferecidos por bloco, 1.680 ao todo. Os ninhos foram inspecionados mensalmente de Julho 2007 a Maro de 2008. Apenas 14 blocos (23,4%) foram ocupados por pelo menos um ninho de abelha. Foram encontrados 52 ninhos de quatro espcies de abelhas: Centris (Hemisiella) tarsata (n=23), Centris (Heterocentris) analis (n=18), Centris (Heterocentris) sp.(n=9) e Tetrapedia sp. (n=2). Novembro (50%) e Fevereiro (29%) foram os meses com maior nmero de ninhos, enquanto que julho, agosto e setembro nenhum ninho foi fundado. Ninhos de Centris analis e Centris sp. foram coletados em pelo menos quatro fragmentos estudados e aqueles de Centris (Hemisiella) tarsata, tiveram sua distribuio restrita a apenas dois fragmentos, um grande e outro pequeno. No menor fragmento estudado (11,8ha) no foram encontrados ninhos de abelhas, porm em outro fragmento de tamanho semelhante (13,8ha) a atividade das abelhas nos ninhos-armadilha foi a mais alta entre os remanescentes estudados (53,8%). Em geral, houve baixa riqueza e abundncia de ninhos coletados no local estudado. No encontramos uma relao clara entre tamanho do fragmento e riqueza/abundncia de abelhas nidificantes em ninhos-armadilha. Apoio: CNPq/BMBF Palavras-chaves: Ambientes fragmentados, Ninhos-armadilha, Abelhas solitrias, Centris tarsata , Mata atlntica
683
NIDIFICAO DE Xylocopa spp. EM REAS DE CERRADO DO TRINGULO MINEIRO

Talles Marques Chaves-Alves, Camila Nonato Junqueira, Paulo Eugnio Alves Macedo de Oliveira & Solange Cristina Augusto 1- Programa de Ps-Graduao em Ecologia e Conservao de Recursos Naturais - UFU; 2 Graduando do Curso de Cincias Biolgicas - UFU; 3 - Instituto de Biologia da Universidade Federal de Uberlndia UFU Universidade Federal de Uberlndia - Instituto de Biologia - Campus Umuarama - Rua Cear S/N - Bloco 2D camilanj@hotmail.com A grande maioria das espcies de Xylocopa constri seus ninhos escavando madeira seca como galhos e troncos mortos. A atrao dessas abelhas utilizando-se substratos-armadilha possibilita o conhecimento dos hbitos de nidificao e, consequentemente, fornece subsdios para conservao e manejo, visando o incremento das populaes desses importantes polinizadores do maracuj-amarelo. O objetivo do trabalho foi verificar a taxa de fundao e preferncia por substratos-armadilha, por Xylocopa em reas de cerrado. O estudo foi conduzido em duas reas prximas ao municpio de Uberlndia no Tringulo Mineiro-MG, Estao Ecolgica do Panga e Estao Experimental gua Limpa. Nessas reas foram montadas trs coberturas (ranchos de madeira) para acondicionamento de dois tipos de substratos-armadilha: gomos de bambu (n=56), com dimenses (comprimento x dimetro) de 25 x 1,00 a 2,40 cm, e troncos de Spathodea campanulata com 20,0 a 80,0 x 30,0 a 50cm (n=7). Inspees quinzenais foram realizadas no perodo de janeiro de 2006 a dezembro de 2007. Um total de 88 ninhos foi fundado, sendo 50 (56,8%) em gomos de bambus e 38 (43,2%) em troncos de S. campanulata. Adicionalmente, o reuso de ninhos em bambus (n=26) e troncos de S. campanulata (n=6), foi observado no segundo ano do experimento. Ninhos de Xylocopa frontalis foram os mais abundantes (52,5%), seguidos por Xylocopa suspecta (19,2%), Xylocopa subcyanea (12,5%), Xylocopa grisescens (12,5%) e Xylocopa hirsutissima (3,3%). Nos dois anos de estudo, a mdia de fundao de ninhos foi de 3,75 3,56 ninhos/ms. A fundao de ninhos foi predominantemente no vero com picos nos meses de janeiro. Apoio: FAPEMIG Palavras-chaves: Xylocopa, ninhos, fundao, substrato-armadilha
684
DIVERSIDADE DE ABELHAS SOLITRIAS E OCUPAO DE NINHOS-ARMADILHA EM REA DE CERRADO

Thatiana Martins dos Santos Mesquita*, Solange Cristina Augusto *Universidade Federal de Uberlndia-UFU Rua Ceara S/N, Bolco 2D, Campus Umuarama 38400-000 Uberlndia, Brasil thatibio8@yahoo.com.br Estima-se que 5% das abelhas constroem seus ninhos em cavidades pr-existentes, podendo nidificar em ninhos artificiais. O estudo desses ninhos pode fornecer informaes fundamentais para a conservao e o manejo dessas espcies. Os objetivos desse estudo foram verificar a diversidade de abelhas que nidificam em ninhos-armadilha em uma rea de Cerrado no Tringulo Mineiro e a porcentagem de ocupao desses ninhos. O estudo foi realizado na Estao Ecolgica do Panga (190920S/482320O). Na rea foi instalado um rancho experimental, onde foram disponibilizados ninhos-armadilha (NA) do tipo gomo de bambu (GB), com dimetro de 0,5 a 2,2 cm (n=80), e tubos de cartolina (TC) com dimenses (comprimento x dimetro) de 10,5 x 0,8 cm (n=90) (tubos grandes = TG) e com 5,8 x 0,6 cm (n=90) (tubos pequenos =TP). Os NA foram inspecionados quinzenalmente, sendo os GB de fevereiro de 2007 a fevereiro de 2008 e os TC, de outubro de 2007 a maro de 2008. Foram fundados 73 ninhos pertencentes a seis espcies: Tetrapedia peckoltii (45,2%), Centris (Hemisiella) tarsata (27,4%), Centris (Heterocentris) analis (9,6%), Euglossa sp. (6,8%), Epanthidium tigrinum (5,5%), Megachile sp. (4,1%) e Eufriesea cfr. auriceps (1,4%). A porcentagem de ocupao nos GB foi de 46,3%, nos TG de 26,7% e nos TP 13,3%. Nos GB a espcie mais abundante foi C. tarsata (54,1%), e nos TC foi T. peckoltii (TG= 95,8% e TP= 41,7%). A maior porcentagem de ocupao nos GB pode ser devido ao maior perodo de amostragem utilizando esse tipo de ninho e/ ou maior nmero de espcies que utilizaram esse substrato. Apoio: Fapemig Palavras-chaves: nidificao, cerrado, abelhas solitrias, ninhos-armadilha
685
DISTRIBUIO DOS NINHOS DE ABELHAS SOCIAIS EM DUAS RESERVAS DE CERRADO, UMA EM TRS LAGOAS/MS E OUTRA EM ANDRADINA/SP
Maria Elisa Rebustini*, Laila Cristine Moreira Prado, Maicon Ricardo Zieberg Passini, Patrcia de Carvalho de Oliveira, Tatiele Cristina da Silva Pina * Departamento de Cincias Naturais - CPTL/UFMS Avenida Ranulpho Marques Leal 3484, 79600-100 merebu@ceul.ufms.br O Brasil privilegiado por abrigar uma grande variedade de espcies de abelhas, devido a sua riqueza de ecossistemas. Esses insetos necessitam de habiat que preencha os seguintes requisitos: materiais para a construo de ninhos e quantidade suficiente de alimento (Westrich, in Azevedo & da Silveira, 1996). Em locais com umidade elevada, os ninhos do solo sofrem ao de fungos ou excesso de gua. Para adaptao a esse tipo de ambiente, novos locais de nidificao foram escolhidos (troncos de rvores e construes antrpicas), como o caso das Meliponina encontradas no Brasil (Silveira et al.,2002). Este estudo teve como objetivo verificar e catalogar a diversidade e os locais de nidificao das abelhas na Unidade II do Cmpus de Trs Lagoas-MS da UFMS e no zoolgico da cidade de Andradina-SP. No Cmpus foram delimitadas as reas: A, rea frontal do Cmpus; B, rea do prdio principal; C, rea de preservao e D, rea de cerrado. Foram catalogados 26 ninhos dos quais 16 pertenciam a rea A, 7 a rea B, 3 a rea C e nenhum a rea D. Os gneros mais encontrados foram Trigona, Partamona e Geotrigona correspondendo a 64% do total, e 36% correspondentes a Tetragonisca, Scaptotrigona, Tetragona e Apis. Quanto ao local de nidificao, Copaifera langsdorffi Desf. e solo foram os substratos mais utilizados. No zoolgico as observaes ocorreram de forma geral e foram encontrados 4 gneros de abelhas (Apis, Nannotrigona, Tetragonisca e Trigona) totalizando 14 ninhos, sendo que 5 pertenciam a Nannotrigona e os outros gneros possuam, cada um, 3 ninhos. Gallesia integrifolia foi o substrato mais utilizado para nidificao. Apoio: UFMS Palavras-chaves: diversidade, abelhas, nidificao, habitat, rvores
686
NESTING BIOLOGY OF Monoeca SPEC. NOV. ON SANTA CATARINA ISLAND

Anne Zillikens*, Josefina Steiner *Universidade de Tbingen, Med.-Naturwiss.-Forschungszentrum; Laboratrio de Abelhas Nativas, BEG, CCB, UFSC, Florianpolis, Brasil Ob dem Himmelreich 7, 72074 Tbingen, Germany anne.zillikens@uni-tuebingen.de The genus Monoeca is represented in Brazil by eight species. On Santa Catarina Island we detected a yet undescribed species of Monoeca (Moure, pers. comm.). Here we report some aspects of its nesting biology, natural enemies and plant resources. Nests were found in dense aggregations of up to several hundred nests in two restinga sites in the north and south of the island. Nests were excavated in sandy soils void of vegetation or with sparse and low plant cover. Nesting activity extended from the end of November to mid January. Individuals of the cleptoparasitic bee Protosiris spec. nov. (Melo, pers. comm.) and of the mutillid wasp Hoplocrates specularis were seen in the nest aggregation inspecting nest entrances. Monoeca females were observed foraging on flowers of Malpighiaceae (Tetrapterys or Heteropterys). Pollen obtained from females returning to their nests almost always consisted of 100% pollen from species of Malpighiaceae. Furthermore, males and female were seen on Stachytarpheta cayennensis (Verbenaceae), a nectar source. Our results indicate a univoltine life cycle for Monoeca spec. nov. This species appears to be oligolectic exhibiting a strong preference for pollen of Malpighiaceae. Parasitation of the brood by a species of Protosiris and by Hoplocrates specularis is likely; both have been recorded as natural enemies of another species, M. haemorrhoidalis in Paran. Comparison with other studies on Monoeca species suggest that gregarious nesting, a highly seasonal life cycle and oligolectic foraging behavior are common traits of this bee taxon. Apoio: Funded by: BMBF (01LB0205A1), CNPq (690143/01-0) Palavras-chaves: Monoeca, cleptoparasite, Mutillidae, oligolectic, restinga
687
LEVANTAMENTO DAS ABELHAS SOLITRIAS QUE NIDIFICAM EM CAVIDADES PREEXISTENTES EM REA DE MATA ATLNTICA (SETE BARRAS, SP, BRASIL)
Paola Marchi*, Gabriel A. R. Melo Laboratrio de Biologia Comparada de Hymenoptera, Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran Caixa Postal 19020, 81531-980 Curitiba-PR, Brasil paola@ufpr.br Para conhecer a diversidade das abelhas solitrias que nidificam em cavidades preexistentes na regio do Vale do Ribeira, utilizaram-se ninhos-armadilha de madeira e de bambu, com diferentes dimetros (4 a 12 mm), instalados em ambientes distintos entre dezembro de 2004 e novembro de 2005. Na rea aberta foram encontrados 4 ninhos de Anthodioctes megachiloides Holmberg (Anthidiini, Megachilinae) nos blocos de madeira, com 4 a 6 mm, entre setembro e novembro; 4 ninhos de Euglossa anodorhynchi Nemsio, sendo 2 em bambu e 2 em madeira, com 12 mm, de maro a junho e 14 ninhos de Centris (Hemisiella) tarsata Smith (Centridini, Apinae), 11 fundados em madeira e 3 em bambu, com 8, 10 e 12 mm, de novembro a fevereiro. Na rea de mata, uma espcie nova de Megachile (Chrysosarus) Mitchell (Megachilini, Megachilinae) fundou ninhos no estrato superior da borda da mata, 2 em bambu e 1 em madeira, com 12 mm, de maro a abril. Tambm foram obtidas duas espcies novas pertencentes ao subgnero Ptilosarus Mitchell: Megachile (Ptilosarus) sp. 1, que fundou 2 ninhos em madeira, com 4 mm, no estrato inferior do interior da mata, no ms de dezembro e Megachile (Ptilosarus) sp. 2, que fundou 3 ninhos com 6 mm no estrato inferior da borda da mata, 1 de bambu e 2 de madeira, de maro a junho. Os inimigos naturais encontrados foram Melittobia australica Girault (Eulophidae); Physocephala sp., Physocephala bipunctata (Macquart) (Conopidae, Diptera) e Mesocheira bicolor (Fabricius) (Ericrocidini, Apinae). Apesar do pequeno nmero de ninhos obtidos, esta tcnica forneceu dados sobre as espcies em relao ao local de nidificao, arquitetura dos ninhos e aos parasitas associados. Apoio: CNPq Palavras-chaves: ninhos-armadilha, Mata Atlntica, Vale do Ribeira, Apidae
688
ARQUITETURA DE NINHOS DE ABELHAS E VESPAS SOLITRIAS (INSECTA, HYMENOPTERA) EM REMANESCENTES DE MATA DE TABULEIRO NO NORTE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
Marcelita Frana Marques*, Maria Cristina Gaglianone Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro - UENF Av. Alberto Lamego, 2000, CEP 28013-600 - Campos dos Goytacazes, RJ - Brasil marcelita_marques@yahoo.com.br Em ecossistemas terrestres, as abelhas e vespas solitrias possuem um importante papel nas interaes ecolgicas e a estrutura de seus ninhos pode ser influenciada por estas interaes e por caractersticas ambientais. O objetivo deste trabalho foi descrever comparativamente a arquitetura de ninhos de vespas e abelhas solitrias, relacionando-a a caractersticas ecolgicas conhecidas para os respectivos grupos taxonmicos e a caractersticas das reas de estudo. Foram analisados 174 ninhos construdos em gomos de bambu e tubos de cartolina entre dez/04 e dez/06 em dois fragmentos de floresta semidecidual sobre tabuleiro, Mata do Carvo (1.053ha) e Mata do Funil (150ha). Os ninhos operculados foram levados ao laboratrio para identificao taxonmica e mensuraes. Vespas dos gneros Trypoxylon (2 espcies), Auplopus (2), Pachodynerus (1) e Zethus (1) e abelhas Megachile (2), Centris (2) e Euglossa (1) ocuparam ninhos-armadilha de 6,8 a 27,0 cm de comprimento e 0,5 a 3,0 cm de dimetro. Os materiais utilizados para a construo dos ninhos foram resina, leo, areia, terra, folhas e raspas de madeira. Espcies pertencentes s famlias Meloidae, Mutillidae e Chrysididae foram associadas aos ninhos analisados. Ninhos mistos representaram 5,25% do total de ninhos estudados. Quando comparados nmero de clulas dos ninhos e tamanho dos emergentes da mesma espcie nas duas reas de estudo, a Mata do Carvo mostrou valores significativamente maiores, o que pode ter sido influenciado pela melhor qualidade ou quantidade de recursos nesta rea. Apoio: PROBIO/MMA-Polinizadores; LCA/UENF Palavras-chaves: fragmentao, abelhas e vespas solitrias, ninhos-armadilha, arquitetura de nidificao, comunidades de Hymenoptera
689
NIDIFICAO SIMULTNEA EM UMA CAVIDADE PELAS ESPCIES Trigona hypogea E Cephalotrigona capitata (HYMENOTPTERA: APIDAE: MELIPONINI)
Victor Gardim Rodrigues, Filipi Rogrio Silva, Lucas Jos Bevilaqua, Sidnei Mateus, Ronaldo Zucchi Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil vgrodrigues@usp.br Abelhas da tribo Meliponini em sua grande maioria constroem seus ninhos em cavidades preexistentes de troncos de rvore e galhos. A cavidade interna limitada por paredes chamadas batume. Algumas espcies constroem seus ninhos expostos e areos, dentro de formigueiros, termiteiros, de ninhos de vespas sociais e outras espcies ninhos subterrneos em cavidades preexistentes. A entrada do ninho caracterstica marcante de cada gnero, sendo construda de cerume ou de barro, permitindo a entrada de um ou vrios indivduos por vez. Ninhos so pontos notveis de atividade das abelhas, sejam elas sem ferro ou melferas. Geralmente, estes apresentam longevidade potencialmente igual ao do stio de nidificao, no caso de uma cavidade, o ninho tende a existir tanto tempo quanto a rvore no qual est instalado. Deste modo, as cavidades so de importncia crucial na biologia das abelhas, uma vez que lhes fornece proteo contra predadores e extremos de temperatura e umidade. Casos de ninhos de espcies diferentes dividindo uma mesma cavidade so raramente descritos na literatura. O presente trabalho apresenta a descrio e a documentao fotogrfica de um destes casos, no qual as espcies Trigona hypogea (Silvestri, 1902) e Cephalotrigona capitata (Smith, 1854) faziam uso simultneo de um oco de rvore na rea rural no municpio de Pedregulho-SP. Os ninhos estavam localizados na base do tronco, dimenses internas da cavidade (altura = 47cm; largura = 40,5 cm; profundidade = 36,5 cm.), o ninho de C. capitata na parte superior (17,5 cm), sendo o batume (6,3 cm) a diviso entre os ninhos, na metade inferior da cavidade estava o ninho de T. Hypogea (23,2 cm). As medidas de largura e profundidade das trs pores so equivalentes s do oco, uma vez que o ocuparam por completo. Apoio: FAPESP; CNPq; Departamento de Biologia da FFCLRP-USP. Palavras-chaves: Trigona hypogea, Cephalotrigona capitata, Nidificao, Meliponini, Abelhas sem ferro
690
PRAGAS, PARASITAS E DOENAS DE ABELHAS TROPICAIS
691
CARACTERIZAO GENTICA DO CARO Varroa destructor PELA TCNICA RAPD EM COLNIAS DE Apis mellifera NO ESTADO DE SANTA CATARINA E FERNANDO DE NORONHA-PE
Francisco Estevo Carneiro, Roger Strapazzon, Sabrina Alejandra Ramirez, Jos Carlos Vieira Guerra Jr, Geraldo Moretto Laboratrio de Gentica, Departamento de Cincias Naturais, Centro de Cincias Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau (FURB) Rua Antnio da Veiga, 140 - Victor Konder - 89012-900 - Blumenau - SC genetica@furb.br O caro Varroa destructor causador de mortalidade de abelhas Apis mellifera em vrias partes do mundo. Seus principais danos foram relatados nos pases da Europa e Amrica do Norte. O impacto do caro Varroa est relacionado tambm s condies climticas e a raa de abelhas em cada regio onde a praga se estabeleceu. A Varroa causa poucos danos nas colnias de abelhas africanizadas no Brasil e os nveis de infestao so relativamente baixos e estveis. Vrios estudos foram feitos para caracterizar geneticamente as diferenas apresentadas pelos caros, relacionando-os com o dano causado nas abelhas. Pela tcnica de RAPD, dois gentipos foram descritos; Russo, encontrado nos pases da Europa e Amrica do Norte e Japons, no Japo e Amrica do Sul. O objetivo deste trabalho foi caracterizar geneticamente os caros coletados em Santa Catarina e no arquiplago de Fernando de Noronha Pernambuco. Foram coletadas 150 fmeas do caro Varroa, sendo 130 do estado de Santa Catarina e 20 de Fernando de Noronha. Os resultados obtidos atravs da tcnica RAPD mostraram que o gentipo de todas as varroas coletadas em municpios de Santa Catarina apresentou o padro de bandas correspondente ao gentipo Russo. A anlise feita nos caros de Fernando de Noronha revelou a presena do gentipo Japons. Apoio: PIBIC/FURB Palavras-chaves: RAPD, Variabilidade gentica, Apis mellifera, Varroa destructor, Varroatose
692
DETERMINAO DA VARIABILIDADE GENTICA DO CARO Varroa destructor EM COLNIAS DE ABELHAS Apis mellifera DO ESTADO DE SANTA CATARINA ATRAVS MARCADORES MICROSSATLITES
Roger Strapazzon, Francisco Estevo Carneiro, Sabrina Alejandra Ramirez, Geraldo Moretto Laboratrio de Gentica, Departamento de Cincias Naturais, Centro de Cincias Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau (FURB) Rua Antnio da Veiga, 140 - Victor Konder - 89012-900 - Blumenau - SC genetica@furb.br O caro Varroa destructor um ectoparasita de abelhas que atualmente atinge principalmente as colnias de abelhas Apis mellifera. uma das principais pragas causadoras de prejuzos apicultura comercial mundial. Entretanto, no Brasil, a varroatose no tem sido diagnosticada como sria ameaa as populaes de abelhas, apesar da sua introduo no pas ter ocorrido a partir de 1971. Entre os diferentes biotipos do caro, observa-se diferenas comportamentais, sendo que o gentipo Coreano (K) caracterizado por maior virulncia em relao ao Japons. O presente trabalho estudou a ocorrncia de alelos especficos para os dois bitipos de Varroa, o Japons e o Coreano, em colnias do estado de Santa Catarina. Embora dados comportamentais do caro tenham mostrado uma baixa infestao em abelhas africanizadas, verificamos a predominncia (mais de 97%) nos quatros loci estudados de alelos especficos para o padro Coreano, descrito como causador de maior danos as colmias. Esse resultado, em contraste com a atual situao patolgica do caro, demonstra que outros fatores, como o comportamento higinico e de grooming, so eficientes nas abelhas africanizadas e mantm o equilbrio entre parasita-hospedeiro. Apoio: FAPESC; FURB; Pipe/Art. 170 Palavras-chaves: Apis mellifera, Varroa destructor, varroatose, microssatlites
693
MENOR INFESTAO E REPRODUO DO CARO Varroa destructor EM COLMIAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS (Apis mellifera L.) COM ALTO GRAU DE COMPORTAMENTO HIGINICO
Marcia R. C. Issa*, Michelle M. Morais, Rogrio A. Pereira, David De Jong, Lionel S. Gonalves Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto-Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes 3900, 14040-900, Ribeiro Preto, So Paulo, Brasil mrcissa@rge.fmrp.usp.br O comportamento de remoo de cria, ou comportamento higinico, tido como um mecanismo importante para as abelhas permanecerem livres de doenas apcolas, podendo ser, portanto, um dos fatores que faz com que a abelha africanizada, no Brasil, seja resistente ao caro Varroa destructor e a outras doenas. O grau de comportamento higinico e os ndices de infestao e reproduo do caro foram avaliados em 7 colmias do apirio experimental do Departamento de Gentica - Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo (Ribeiro Preto, So Paulo, Brasil), em agosto de 2006. O final do inverno o perodo em que, mesmo as abelhas africanizadas (que sofrem menos com as vrias doenas), apresentam maior debilidade frente a algumas enfermidades e onde encontramos a presena de abelhas com asas deformadas (asas enroladas) em 2005. Geralmente, depois desse perodo, com a chegada da primavera, as colnias tendem a estabilizar-se. Tambm foram observadas a presena de abelhas com asas deformadas e de imagos desoperculados mortos que no emergiram e que tinham asas deformadas. Os graus de comportamento higinico foram: 92,5%, 87% e 60,13% (higinicas), 22,5%, 20,0%, 6,40% e 9,00% (no-higinicas). Os ndices de infestao pelo caro em crias foram, respectivamente, 10,00%, 13,00%, 14,50%, 15,00%, 17,00%, 21,00% e 36,58%; os de infestao em adultos, respectivamente, 4,07%, 5,84%, 4,19%, 8,29%, 7,06%, 9,62%, 12,75%. As colmias higinicas apresentaram um maior nmero de caro-fmeas sem cria (70,00%, 69,23% e 53,30%) do que as no-higinicas (26,60%, 29,41%, 19,04% e 20,00%). Assim, nas abelhas higinicas, no final do inverno, encontramos uma menor porcentagem de infestao e reproduo do caro. Nas abelhas no-higinicas foram observadas uma maior presena de abelhas com asas deformadas e de imagos desoperculados mortos com asas deformadas que no emergiram e uma menor tendncia a se estabizarem rapidamente aps o final de inverno. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Comportamento Higinico, Apis mellifera, Varroa destructor
694
EFEITO TXICO DO INSETICIDA FIPRONIL PARA ABELHAS Apis mellifera

Tiago Favaro de Souza*, Osmar Malaspina CEIS, Dept. de Biolgia, Instituto de Biocincias -UNESP av 24 A 1515, 13506-900 Rio Claro, Brasil tiagofs@rc.unesp.br O uso irracional de inseticidas nos agroecossistemas pode ocasionar o desequilbrio da populao de abelhas. O desaparecimento de vrias espcies dos campos de cultivo vem preocupando muitos pesquisadores em todo mundo. O fipronil largamente utilizado como defensivo agrcola no pas em diversas culturas. Muitos trabalhos mencionam apenas os efeitos da toxicidade aguda para as abelhas e os efeitos de doses subletais dos inseticidas so pouco estudados, principalmente no Brasil. Esses estudos so importantes, pois os polinizadores possuem grande valor econmico na agricultura, principalmente para a conservao das espcies de vegetais, alm de afetar negativamente a indstria apcola. Inicialmente, foi necessria estipular quais so as doses subletais. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi o de avaliar a dose letal mdia (DL50) para operria de abelhas Apis mellifera. Para isso, foi realizado um teste de aplicao tpica com operrias recm-emergidas. O inseticida foi adicionado a 1mL do solvente acetona e preparada uma soluo na concentrao inicial de 1g/abelha para fipronil. Para cada abelha foi adicionada 1mL da soluo correspondente (1g/L) na regio do pronoto atravs de uma micropipeta automtica. Utilizaram-se dois controles: um controle sem solvente (SS) e outro, o controle solvente (S). A mortalidade das abelhas ser anotada 4 horas aps aplicao do inseticida e depois disso, durante intervalos de 24 horas, at o perodo mximo de 96 horas. A mortalidade do controle no pode exceder a taxa de 10%. Os resultados do teste de aplicao tpica determinaram a concentrao mnima em uma dose capaz de causar a mortalidade de 50% das abelhas, quando administrada por contato (DL50), obedecendo ao limite de confiana de 95%. A DL50 estipulada foi de 0,157 ng/abelha, com intervalo de segurana entre 0,139 a 0,175 ng/abelha (slope = 7.229630, x=15,884). Apoio: FAPESP - 2007/01691-6 Palavras-chaves: doses subletais, inseticida, fipronil, abelhas, Apis mellifera
695
DIAGNSTICO DE INTOXICAO POR PLEN EM CASOS DE CRIA ENSACADA BRASILEIRA NO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
Marta Rodrigues Pacheco*, Ortrud Monika Barth, Maria Cristina Affonso Lorenzon * Departamento de Produo Animal, Instituto de Zootecnia, UFRuralRJ; Laboratrio de Palinologia - UFRJ/FIOCRUZ UFRRJ martarpacheco@hotmail.com A cria ensacada brasileira (CEB) causada pelo plen txico de algumas espcies de Stryphnodendron, vulgo barbatimo. Objetivou-se avaliar a causa da CEB no estado do Rio de Janeiro atravs de trs etapas para o diagnstico de intoxicao por plen em abelhas melferas. Em primeiro lugar, quando ocorre uma suspeita de intoxicao por planta, deve-se obter o maior nmero de informaes para o histrico da ocorrncia, j que as plantas produzem quadro clnico-patolgico caracterstico em pocas e regies determinadas. Em seguida, deve-se verificar se a planta suspeita de estar causando morte ou doena existe no pasto apcola. Finalmente, confirmar se a planta suspeita realmente ingerida pelas abelhas em condies naturais. A primeira etapa foi realizada atravs de 31 questionrios aplicados aos apicultores; a segunda por reviso de literatura e dados do herbrio do Jardim Botnico do Rio de Janeiro; e a terceira por pesquisa palinolgica identificando-se 28 amostras de plen apcola e sete amostras de po de abelhas provenientes de sete apirios afetados pela CEB em trs municpios do estado do Rio. A CEB provoca alta mortalidade nas larvas pr-pupas durante poca de fartura de alimento na colmia, principalmente de outubro a maro. S. pollyphyllum a nica espcie de barbatimo encontrada no estado do Rio de Janeiro. O tipo polnico de Stryphnodendron no esteve presente em nenhuma das amostras analisadas atravs da Palinologia e, portanto, no foi a causa da CEB nos apirios estudados por no ser componente da dieta das larvas mortas em condies naturais. Apoio: Apirios FUMEL e LEO, CAPES, MAPA, FAPERJ Palavras-chaves: Sanidade apcola, Pantas txicas, Apis mellifera, Apicultura, Flora
696
PARASITISMO POR Physocephala (DIPTERA: CONOPIDAE): UM IMPORTANTE FATOR DE MORTALIDADE PARA FMEAS E MACHOS DE Centris (Heterocentris) analis (HYMENOPTERA, APIDAE)
Lucas Tadeu Pelogia Caldano*, Jos Carlos Serrano, Carlos Alberto Garfalo Departamento de Biologia, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto-USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil lucao_biologia@hotmail.com Espcies de Conopidae so consideradas como os mais importantes dpteros parasitas de fmeas e machos de abelhas adultas. As fmeas dos conopdeos atacam seus hospedeiros enquanto eles esto visitando flores ou mesmo em pleno vo, inserindo um ovo no abdmen deles. A larva ao eclodir consome os tecidos do abdmen do hospedeiro ocasionando a sua morte. Em seguida a larva tece seu casulo e aps alguns dias emerge. No Brasil, apenas a associao de duas espcies de Physocephala, P. bipunctata e P. inhabilis com Epicharis bicolor e Centris vittata, respectivamente (Vilhena & Rocha-Filho, 2006) e as observaes de Santos & Garfalo (2006) sobre o parasitismo por espcies de Physocephala em Centris analis, tm sido relatadas. Nesse trabalho so apresentadas novas informaes sobre a ocorrncia de conopdeos associados com C. analis. Acompanhando as atividades de fmeas de C. analis no perodo de dezembro de 2007 a maio de 2008, nidificando em ninhos-armadilhas (NA) no Campus da USP em Ribeiro Preto, foram encontradas 29 fmeas e 19 machos mortos no interior de NA vazios. Ao serem encontrados, os indivduos eram retirados dos NA, levados para o laboratrio, mantidos em frascos individuais, deixados temperatura ambiente e monitorados diariamente para verificar possveis emergncias de parasitides. Dos indivduos encontrados, 26 fmeas (79,3%) e 19 machos (94,7%) tinham sido parasitados por espcies de Physocephala. Enquanto o nmero de fmeas parasitadas diminuiu ms a ms, o nmero de machos aumentou gradativamente at abril. Alta taxa de mortalidade de fmeas de C. analis, como aqui observado, foi relatado por Santos & Garfalo (2006) mas a mortalidade de machos por conopdeos pela primeira vez relatado. Esses dados, somados queles de Santos & Garfalo (2006), mostram os conopdeos como importante fator de mortalidade entre os adultos de C. analis. Apoio: *CNPq - IC Processo 110019/2008-3 Palavras-chaves: Conopidae, Physocephala, Centris analis, Parasitismo, Apidae
697
OCORRNCIA DE FORMIGAS DO GNERO Ectatoma SMITH PREDANDO MOSCAS SARCOPHAGIDAE QUANDO EM ATAQUE S ABELHAS Melipona quinquefasciata LEPELETIER (APIDAE, MELIPONINAE)
Thiago Mahlmann, Favzia Freitas de Oliveira* Universidade Federal do Cear; Universidade Estadual de Feira de Santana Rua Humberto Monte, S/N. Campus do Pici, Fortaleza Cear; Av. Universitria S/N, Km 03 BR 116 (Rodovia Feira de Santana Serrinha), CEP: 44031-460, Feira de Santana, Bahia, Brasil favos@bol.com.br Um dos grandes problemas para a Meliponicultura nacional a grande vulnerabilidade das espcies de abelhas Sem Ferro ao ataque de Dpteros, especialmente aqueles conhecidos popularmente como Fordeos. Insetos de diferentes famlias dessa ordem so conhecidos inimigos naturais das abelhas (exemplo: Foridae, Stratiomidae e Sarcophagidae), dizimando em poucos dias colnias inteiras desses animais. Um dos grandes desafios para a cincia e, consequentemente para a Meliponicultura, a descoberta e desenvolvimento de tcnicas alternativas para controle desses inimigos, a exemplo do controle biolgico. O presente trabalho tem como objetivo relatar a ocorrncia de formigas do gnero Ectatoma Smith, 1858 (Formicidae, Ponerinae) observadas predando moscas Sarcophagidae, quando em ataque a uma colnia de Melipona quinquefasciata Lepeletier, 1836 (Apidae, Meliponinae), encontrada na cidade de Betnia, Cear (Floresta Nacional do Araripe). A colnia de M. quinquefasciata havia sido recentemente explorada por meleiros, que deixaram o ninho semi-aberto, com restos de plen e mel, favorecendo o ataque dos dpteros. As formigas apresentavam movimento erradico ao se locomoverem sobre a entrada do ninho, e ao se chocarem com os dpteros que tentavam adentrar o mesmo, agarrava-os levando-os consigo para seu ninho. Embora no seja possvel indicar o uso de formigas Ectatoma para o controle biolgico dos dpteros supracitados, ainda porque no se sabe ao certo se essas formigas tambm atacam as abelhas, o presente trabalho se refere ao simples relato do ato de predao dos dpteros pelas formigas, que, de certa forma, favoreceram a colnia relacionada. Apoio: UFCE; UEFS dae Palavras-chaves: Meliponinae, Melipona quinquefasciata, Formicidae, Ectatoma, Sarcophagi-
698
AVALIAO DO INDICE DE INFESTAO DO CARO Varroa destructor EM COLNIAS DE Apis mellifera NA REGIO DE BLUMENAU SANTA CATARINA
Francisco Estevo Carneiro, Roger Strapazzon, Geraldo Moretto
Laboratrio de Gentica, Departamento de Cincias Naturais, Centro de Cincias Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau (FURB) Rua Antnio da Veiga, 140 - Victor Konder - 89012-900 - Blumenau - SC genetica@furb.br O ectoparasita Varroa destructor considerado atualmente a praga que mais causa danos a apicultura. A dinmica populacional do caro est relacionada com as diferentes subespcies de Apis mellifera. Em abelhas da raa europia observado um maior ndice de infestao do que nas africanas e seus hbridos. No Brasil, onde a varroa encontra h mais de 30 anos, sempre foi observado um baixo nvel de infestao em abelhas adultas. Por esta razo o controle qumico do caro no foi necessrio. Estudos recentes tm demonstrado que a taxa reprodutiva do caro tem sido maior do que na dcada de 80. Em vista disso o objetivo desse trabalho foi averiguar a sazonalidade no ndice de infestao do parasita em operrias adultas em apirios localizados na regio de Blumenau, SC. O valor mdio alcanando no Vero, Outono, Inverno e Primavera, foi respectivamente 3,23, 3,18, 7,31 e 3,06 varroas a cada 100 abelhas adultas. Estatisticamente verificou-se que o nvel de infestao difere entre as quatro estaes do ano (F = 9,3 ; P = 0.000). Pelo teste de Tukey verificou-se que a infestao foi superior no inverno em relao s demais estaes. Tais valores so similares aos encontrados em outros estudos realizados na dcada de 80 e 90. Apoio: PIBIC/FURB Palavras-chaves: Sazonalidade, ndice de Infestao, Apis mellifera, Varroa destructor, Abelha Africanizada
699
INFESTATION LEVELS OF MITE Varroa destructor IN AFRICANIZED COLONIES SUBMITTED FOR ROYAL JELLY AND QUEEN PRODUCTION
Priscila Wielewski*, Vagner de Alencar Arnaut de Toledo, Patrcia Faquinello, Fabiana Martins Costa-Maia, Elias Nunes Martins, Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki *Universidade Estadual de Maring UEM Av. Colombo, 5790, 87020-900, Maring, Paran, Brasil priskawski@hotmail.com This research was carried out to evaluate the infestation level of mite in adult bees, invasion level in caped brood, total and effective reproduction rates in Africanized honeybee and evaluate if this levels are different on the colonies that are submitted for royal jelly or queen production. The invasion on caped brood and reproduction rates was slow and not statistic different between treatments and the average for those parameters were: 1.57; 0.91; and 0.47 respectively. The royal jelly colonies has bigger infestation (P<0.05) of mite in adult bees in relation on queen colony production. The invasion and infestation rates were influence by month. The values of this research were low and agree with that normally found for Africanized honeybees in Brazil. Apoio: CAPES, CNPq, Fundao Araucria Palavras-chaves: parasite, Varroatose, caped brood, honeybees
700
NEW CLEPTOPARASITES AND LIFE HISTORY DATA FROM TWO SPECIES OF Eufriesea
Rafael Kamke*, Anne Zillikens, Josefina Steiner Universidade Federal de Santa Catarina; Universidade de Tbingen, Alemanha Campus Universitrio, CCB, BEG, Trindade, 88040-900, Florianpolis, SC, Brasil rafael_kamke@yahoo.com.br The bee genus Eufriesea (Euglossini) comprises 62 species distributed from Mexico to southern Brazil. Nests are known for only 10 spp. and studies suggest that these bees are highly seasonal with only one generation per year. Here we present the life cycle and parasites of E. smaragdina and new parasites of E. violacea. Nests of E. smaragdina were obtained through trap-nests in secondary forest on SC Island in March 2003 to 2004, and in restinga forest in Palhoa, from March to September 2005 and in October 2006. Nests of E. violacea were found near houses in SC in summer 2007. From 14 nests and 41 cells of E. smaragdina 17 males and 5 females emerged. Cells, constructed with tree bark chips glued together with sticky dark resin, are arranged in linear series. In 4 years, initial emergence of imagines was on 21 November and the latest on 22 December. Parasites of E. smaragdina were Exaerete dentata (Euglossini) emerged in December, Tetraonyx zonatus (Coleoptera, Meloidae) in November and Melittobia sp. (Hymenoptera, Eulophidae). For E. violacea 58 males and 47 females, 2 Tetraonyx zonatus and 1 wasp (Sapygidae) emerged from 13 nests. Two cells contained dead specimens of Leucospidae (Hymenoptera). Our results suggest a univoltine life cycle for E. smaragdina as well as for its cleptoparasite Exaerete dentata. This new parasite/host record confirms the view that this cleptoparasite may be specialized on Eufriesea hosts. The diapause of Tetraonyx zonatus suggest an association with highly seasonal and large bees but not a specialization on Eufriesea hosts since this parasite was also recorded in nests of Epicharis nigrita in Sao Paulo state. Apoio: CNPq (proc. 690024/2006-1); BMBF (01LB0205A1 - Alemanha) Palavras-chaves: Eufriesea smaragdina, Eufriesea violacea, Tetraonyx zonatus, Exaerete dentata, parasites of bees
701
EFEITO DE Lantana camara (VERBENACEAE) NA SOBREVIVNCIA DE OPERRIAS DE Apis mellifera (HYMENOPTERA, APIDAE)
Andrigo Monroe Pereira*, Jos Chaud-Netto Instituto de Biocincias, Unesp, Rio Claro Av. 24A, 1515, Bela Vista, CEP 13506 900 andrigo@rc.unesp.br A toxicidade de uma planta o efeito deletrio que ela pode causar em outras plantas ou em determinados animais, por meio da liberao de substncias qumicas que podem estar uniformemente distribudas pela planta ou concentradas em diversas partes.Lantana camara uma planta arbustiva com ampla distribuio geogrfica, cuja atividade txica est relacionada com a intoxicao de ruminantes. Seus extratos e leos essenciais apresentam atividade inseticida, bactericida e repelente. Avaliou-se a influncia do macerado floral incorporado na alimentao e da aplicao tpica de extratos folhares na sobrevivncia de abelhas melferas. Operrias recm-emergidas de Apis mellifera foram capturadas, marcadas e transferidas para caixas mantidas em BOD (34 C 1 C e 60 5% de umidade relativa). Os valores mnimos e mximos de sobrevivncia e as medianas obtidas para as operrias alimentadas com pasta-cndi contendo macerado floral de L. camara foram, respectivamente, 8, 35 e 15 dias (concentrao de 10%), 2, 40 e 19,5 dias (7,5%), 4, 41 e 23 dias (5%). No grupo controle, que recebeu somente pasta-cndi, foram registrados 5, 41 e 23 dias. Diferenas significativas entre os dois grupos foram obtidas para as concentraes de 10% e 7,5% (p < 0,001). No teste em que foram aplicados 2 l de extrato folhar os valores respectivos foram 2, 27 e 12 dias (concentrao de 0,08 mg/abelha), 2, 25 e 11 dias (0,04 mg/abelha), 2, 36 e 16 dias (0,02 mg/abelha), enquanto que no grupo controle, que recebeu 2 l de metanol, os valores foram 2, 27 e 14,5 dias. No teste com aplicao tpica no houve diferena significativa entre o grupo experimental e o controle. A presena de substncias txicas somente no macerado floral pode indicar um mecanismo adaptativo para a defesa das peas folhares contra o ataque de insetos. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Apis mellifera, Lantana camara, toxicidade, sobrevivncia
702
ATIVIDADE TXICA DO LEO LIMONENO, POR INGESTO, EM OPERRIAS DE ABELHAS Apis mellifera E Scaptotrigona postica
ris Martins Diamantino, Osmar Malaspina, Tiago Favaro de Souza CEIS, Departamento de Biologia - IB/UNESP Avenida 24 A, 1515, 13506-900, Rio Claro, Brasil irisdiamantino@yahoo.com.br A utilizao de substncias secundrias de plantas permite a formulao de inseticidas botnicos, usados como uma alternativa queles sintetizados quimicamente, no controle de insetos considerados pragas. Contudo, o uso de bioinseticidas pode afetar tambm insetos benficos, como as abelhas, importantes polinizadores. Um derivado botnico muito utilizado o leo limoneno, com reconhecida ao inseticida e repelente, extrado da casca de frutas ctricas. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito txico da ingesto do leo limoneno para operrias de abelhas A. mellifera e S. postica. Para isso, foram realizados bioensaios de ingesto, avaliando o leo em trs concentraes 20 mg/g, 50 mg/g e 100 mg/g. As dietas utilizadas para os bioensaios foram o cndi (mistura de mel com acar) para A. mellifera e o plen, extrado da prpria colnia, para S. postica. As abelhas foram acondicionadas em caixas de madeira, sendo 20 abelhas em cada, e foram conduzidas estufa B.O.D. a 32 1C para A. mellifera e 28 1C para S. postica e 70% de UR. Diariamente, observou-se os nmeros de abelhas mortas. Com os resultados obtidos, foram calculadas as taxas de sobrevivncia diria no Software GraphPad Prism 3.0. Posteriormente, foi aplicado o teste no paramtrico Log Rank Test, na comparao das curvas de sobrevivncia. Essas anlises permitem sugerir que o leo limoneno apresentou atividade txica em todas as concentraes para A. mellifera e apenas na concentrao 100mg/g para S. postica (para todos os resultados significativos p<0,05). Apoio: CNPq/ PIBIC Palavras-chaves: toxicidade, leo limoneno, Apis mellifera, Scaptotrigona postica
703
TOXICIDADE DE EXTRATOS BOTNICOS ABELHA Apis mellifera

Vnia Maria Xavier, Dejair Message, Marcelo Coutinho Picano, Izabel Christina da Silva, Gerson Adriano Silva, Jander Fagundes Rosado, Emerson Cristi de Barros Universidade Federal de Viosa Departamento de Biologia Animal, Universidade Federal de Viosa, 36570-000 Viosa,MG vaniamxavier@yahoo.com.br A utilizao de compostos como inseticidas e acaricidas, podem ocasionar impactos sobre as espcies polinizadoras. Para minimizar os impactos negativos de pesticidas sobre estes organismos necessrio o conhecimento e o desenvolvimento de produtos seletivos a esses organismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos inseticidas botnicos Natualho, Natuneem e Rotenat CE abelha A. mellifera. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com oito repeties. A parcela foi constituda de placas de Petri contendo 5 abelhas cada, e para alimentao foi fornecido cndi (acar e mel) e gua. Para instalao do experimento folhas de cana-de-acar foram imersas em solues com as seguintes doses de 30 ml/ 100L, 100 ml/ 20L e 100 ml/ 20L, para os inseticidas Natualho, Rotenat CE e Natuneem, respectivamente. As mdias de mortalidade e respectivos errospadres nos tempos 12, 24 e 48 horas foram respectivamente: testemunha (0.00/0.00; 0.00/0.00 e 17.50/11.81), Natuneem (35.00/9.57; 41.25/7.18 e 47.50/2.50), Natualho (0.00/0.00; 30.00/10.00 e 36.25/8.98), Rotenat CE (0.00/0.00; 25.00/12.58 e 40.00/14.14). Todos inseticidas testados apresentaram baixa toxicidade abelha A. mellifera. A maior toxicidade foi causado pelo inseticida Natuneem com 48 horas de exposio do inseto a esse produto. Apoio: FAPEMIG, CNPQ, CAPES Palavras-chaves: Apis mellifera, toxicidade, inseticidas botnicos
704
EFEITO TXICO DO IMIDACLOPRIDE PARA OPERRIAS DE Apis mellifera AFRICANIZADA

Caroline de Almeida Rossi*, Osmar Malaspina, Tiago Favaro de Souza Centro de Insetos Sociais, Departamento de Biologia-IB, UNESP-Rio Claro carolar@rc.unesp.br carol_arossi@hotmail.com Na agricultura muitos inseticidas so utilizados para o controle de insetos-praga. No entanto, o uso indiscriminado dessas substncias pode prejudicar as abelhas, que so importantes polinizadores. Muitos trabalhos mencionam apenas os efeitos da toxicidade aguda para as abelhas, mas o efeito das doses subletais dos inseticidas podem induzir mudanas no comportamento, diminuio na atividade de forrageamento ou desorientao, podendo afetar temporariamente toda a colnia. No Brasil, um defensivo agrcola muito utilizado nas culturas de cana-de-acar, citrus e caf o imidaclopride. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a dose letal mdia (DL50) do imidaclopride para operrias Apis mellifera africanizada. Abelhas adultas recm-emergidas foram coletadas diretamente dos favos, no apirio do Instituto de Biocincias do Campus de Rio Claro. As abelhas foram acondicionadas em seis caixas de madeira (10 abelhas por caixa), para cada grupo, previamente forradas com papel-filtro. Os experimentos foram conduzidos estufa B.O.D., com temperatura a 32C 1C e U.R. de 70%. O pesticida foi adicionado dieta das abelhas em doses de 1000 L, nas concentraes de 80, 82, 85, 90, 95 e 100 ng/abelha, e oferecido s abelhas em tampas plsticas recobertas por uma tela de arame. Ao grupo controle foi oferecido apenas xarope. O experimento foi monitorado e as abelhas mortas anotadas em fichas controle, durante 48 horas. Se a mortalidade aumentasse (<10%), aps as primeiras 24 horas, o teste deveria ser estendido at 96 horas de durao. As abelhas do controle no poderiam atingir a taxa de 10% de mortalidade para a validao do teste. Os resultados do teste de ingesto determinaram a concentrao mnima em uma dose capaz de causar a mortalidade de 50% das abelhas, quando administrada oralmente (DL50). A DL50 estipulada foi de 0,1 g/abelha (slope=2.205 1.918, x=21.202). Apoio: CNPq/PIBIC, FAPESP Palavras-chaves: toxicidade, imidaclopride, Apis mellifera, DL50, dose subletal
705
OCORRNCIA DE PARASITISMO EM Exomalopsis aureopilosa SPINOLA, 1853 (HYMENOPTERA, APIDAE) POR Horcomutilla sp. CASAL, 1962 (HYMENOPTERA, MUTILLIDAE)
Felipe Varussa de Oliveira Lima*, Rogrio Silvestre, Rodrigo Aranda, Jos Benedito Perrella Balestieri Univ. Federal da Grande Dourados, Faculdade Cincias Biolgicas e Ambientais (UFGD / FCBA); Programa de Ps-Graduao - Mestrado em Entomologia e Conservao da Biodiversidade Rodovia Dourados-Itahum, Km 12 , Bloco FCBA (Cidade Univesitria); C.P. - 322 CEP: 79.825-070 Dourados, MS felipe_varussabio@yahoo.com.br A famlia Mutillidae compreende vespas solitrias que na fase larval so parasitides de estgios imaturos, principalmente de abelhas e vespas, parasitando tambm insetos de outras ordens. Neste trabalho relatamos a ocorrncia de parasitismo em um ninho de Exomalopsis aureopilosa Spinola, 1853, por uma espcie de Mutillidae do gnero Horcomutilla (Casal, 1962). Os indivduos adultos de E. aureopilosa se mantiveram ativos durante o perodo de fevereiro a junho de 2005, em rea gramada no cmpus da Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD), caracterizada por um solo do tipo Latossolo Vermelho Distrofrrico, no municpio de Dourados-MS. Para espcie de abelha comunal E. aureopilosa, observou-se nidificao em solo, mas no foi notado agregao de ninhos desta; contudo, sua presena prxima a ninho de E. (Megomalopsis) fulvofasciata j foi relatada na literatura. Durante o perodo de observao de atividade externa de E. aureopilosa, relatamos a entrada de uma fmea, em duas ocasies, e a ecloso de um indivduo macho, ambos de Horcomutilla sp.; possibilitando-nos fazer a associao de sexos em Mutillidae com o hospedeiro, situao relatada como rara na literatura. Na maioria dos casos no se consegue associar ambos os sexos de Mutillidae com o mesmo hospedeiro, devido aos hbitos diferenciados entre os sexos, este relacionado principalmente ao dimorfismo sexual apresentado, presena (machos) ou ausncia (fmeas) de asas. Ressaltase ainda que a taxonomia da famlia Mutillidae dificultada pela falta de associao com hospedeiro, assim este registro tem relevante importncia para melhor elucidar as interaes de parasitismo em espcies de Exomalopsis e colabora com a elucidao da problemtica taxonmica da famlia Mutillidae e amplia os registros de hospedeiros do gnero Horcomutilla. Apoio: UFGD Palavras-chaves: Comportamento Comunal, Parasistismo, Abelhas, Mutillidae, Ninhos
706
EFEITO DO MEL DA MAMONEIRA (Ricinus communis) NA LONGEVIDADE DE ABELHAS Apis mellifera L. SOB CONFINAMENTO
Marcelo de Oliveira Milfont*, Breno Magalhes Freitas, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Isac Gabriel Abraho Bomfim, Marcelo Casimiro Cavalcante Universidade Federal do Cear Departamento de Zootecnia ; Campus do Pici - Bloco 809 - CEP: 60021-970; Fortaleza- CE marcelo_m_agro@yahoo.com.br O cultivo de mamoneira (Ricinus communis L.) vem sendo explorado como matria-prima para a obteno do biodiesel, porm suas sementes apresentam uma substncia txica, que caso presente no nctar e seja txica a insetos poder causar prejuzos para apicultura e desequilbrio ecolgico. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar uma possvel toxidez do mel da mamoneira para abelhas melferas (Apis mellifera L.). A existncia de efeito txico s abelhas foi avaliado atravs da longevidade de operrias recm emergidas confinadas em gaiolas de madeira com dimenses de 8 x 11 x 13cm. As gaiolas possuam as duas laterais mais largas de vidro e eram compostas de piso telado, tela anti-fuga e dois orifcios superiores para o fornecimento da gua e do alimento energtico. Cada gaiola comportou 50 operrias. O experimento constou de dois tratamentos com trs repeties, sendo: T1: plen, gua e mel de mamoneira; T2: plen, gua e mel silvestre. Os resultados demonstraram que por volta do sexto dia s abelhas confinadas em ambos os tratamentos apresentaram um aumento de mortalidade, o que gerou uma brusca declividade na curva de longevidade, porm, as abelhas de T1 e T2 apresentaram uma longevidade similar (p>0.05), mdia de 13 dias. Desta forma, conclui-se que o mel de mamoneira no reduz a longevidade das abelhas confinadas em relao ao mel de floradas silvestres, produzido no Nordeste do Brasil. Apoio: FUNDECI; FUNCAP; BRASIL ECODIESEL Palavras-chaves: Mamona, Abelha, toxidez, operrias, longevidade
707
PRODUTOS DAS ABELHAS
708
FLORA DE IMPORTNCIA POLINFERA PARA Apis mellifera (L.) NA REGIO DE VIOSA, MG

Anna Frida Hatsue Modro*, Dejair Message, Cynthia Fernandes Pinto da Luz, Joo Augusto Alves Meira Neto Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz - ESALQ/USP; Universidade Federal de Viosa - UFV; Instituto de Botnica IB/SP Rua Frei Luiz de Santana 35, 13418-090 Piracicaba, Brasil afhmodro@esalq.usp.br O conhecimento da disponibilidade da flora polinfera em uma determinada regio pode apresentar aos apicultores regionais alternativas de explorao comercial de produtos e direcionar o uso de substitutos de plen em perodo de escassez de recursos proticos. Este estudo objetivou conhecer a flora de importncia polinfera para Apis mellifera L., na regio de Viosa, em perodo de entresafra de mel. O experimento foi conduzido no perodo entre 12 de agosto a 13 de dezembro de 2005, em dois apirios distintos localizados na regio de Viosa, Minas Gerais (Brasil). Em cada apirio foram selecionadas cinco colmias de abelhas A. mellifera com coletores de plen tipo intermedirio acoplados em cada uma das caixas. Todas as plantas observadas em florao no entorno destes apirios foram coletadas e identificadas. Foram consideradas plantas polinferas, aquelas cujo tipo polnico foi encontrado nas amostras de plen retidas nos coletores das colmias. Plantas das famlias Asteraceae (21), Fabaceae (9), Myrtaceae (6) e Bignoniaceae (5) contribuem com maior diversidade de tipos polnicos no perodo de entre-safra do mel. As plantas estiveram localizadas, principalmente, em jardins (40,9%), pastagem abandonada (23,8%), rea de cultivo (14,8%), beira de mata (12,5%), mata (5,7%) e rea mida (2,3%). As plantas utilizadas pelas abelhas apresentaram hbito arbreo (34,1%), herbceo (29,5%), arbustivo (27,3%) e trepadeira (9,1%). A maioria das espcies de plantas polinferas identificadas tem origem regional (62%). Os resultados indicam que as plantas nativas localizadas em reas abertas so importantes para o forrageamento de plen por A. mellifera e que a diversidade de plantas polinferas em florao associada a uma maior densidade destas plantas no perodo de entre safra de mel podem garantir uma boa produo de plen apcola neste perodo, na regio de Viosa, MG. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Brasil, plen, recurso proteico, apicultura, abelha
709
VARIAO DE PARMETROS FSICO-QUMICO DO MEL ARMAZENADO NAS CONDIES AMBIENTAIS DO ESTADO DO CEAR
Fernanda Farias Martins*, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Maria Silvia Frota, Crisanto Alves Arajo Faculdade de Tecnologia Centec Serto Central Instituto Centec; Emater-CE / Secretaria de Desenvolvimento Agrrio Avenida Geraldo Bizarria de Carvalho S/N, 638000-000 Quixeramobim, Brasil fer_fa@hotmail.com Os crescentes aumentos obtidos na produo de mel do estado do Cear resultaram na instalao de um parque industrial voltado para a atividade de comrcio exterior. A sazonalidade da produo e a necessidade de manter o mercado regularmente abastecido obrigam o setor a armazenar o mel por perodos relativamente longos. Nas condies climticas da regio Nordeste algumas caractersticas fsico-qumicas do mel podem apresentar uma grande variao, o que gera dificuldades para o comrcio do produto. O presente trabalho teve como objetivo avaliar, quinzenalmente, as variaes fsico-qumicas do mel armazenado a temperatura ambiente, durante 90 dias. Observou-se um aumento nos valores da acidez e uma constante diminuio do pH. Os nveis de HMF apresentaram um contnuo aumento de acordo com o tempo de armazenamento, sendo a caracterstica que apresentou a maior variao. O percentual de acares redutores registrou aumentos contnuos, ao contrrio do percentual de sacarose que teve comportamento inverso. A cor do mel, tendo como base o registro da absorbncia, apresentou aumentos de acordo com o perodo de armazenamento. Todas as variveis estudadas apresentaram diferena estatstica significativa (P<0,05) entre os perodos iniciais e finais de armazenamento. Conclui-se que, o mel armazenado no estado do Cear, a temperatura ambiente, sofre importantes variaes na sua composio fsico-qumica, sendo necessria a climatizao para manter o produto com o padro de acordo com as exigncias do mercado. Apoio: CNPq; INSTITUTO CENTEC; FUNCAP Palavras-chaves: Mel, HMF, Cor, Acares, Comrcio
710
ASPCTOS QUALITATIVOS DE MIS PRODUZIDOS NA REGIO NORTE DO ESTADO DO CEAR

Fernanda Farias Martins*, Raimundo Maciel Sousa, Odaci de Sousa Aguiar, Maria Silvia Frota, Crisanto Alves Arajo *Faculdade de Tecnologia Centec Serto Central Instituto Centec; Emater-CE / Secretaria de Desenvolvimento Agrrio Avenida Geraldo Bizarria de Carvalho S/N, 638000-000 Quixeramobim, Brasil fer_fa@hotmail.com A produo de mel apresenta-se como uma importante atividade econmica para o estado do Cear, tendo marcante papel na gerao de emprego e renda da populao que habita as reas de Caatinga. O controle da qualidade do mel baseado, em parte, nas caractersticas fsico-qumicas e suas variaes dentro da legislao vigente so utilizadas como ferramenta na formao dos preos. O nvel de HMF, a classificao da cor e o percentual de umidade representam os principais fatores de formao do preo. O presente trabalho teve como objetivo estudar as principais caractersticas fsico-qumicas do mel produzido em quatro regies do municpio de Sobral CE. O percentual de umidade apresentou nveis acima dos aceitveis para o mercado externo em todas as amostras, sendo superior ao limite para o mercado nacional nas amostras da localidade 4, que apresentou diferena significativa (P<0,05) com as demais. A colorao apresentou uma grande variao entre as localidades, com classificaes do mbar ao extra mbar claro. Os nveis de HMF apresentaram grande variao de limites, com valores de 4,0 mg/kg a 193,7 mg/kg, com a maioria das amostras dentro dos limites permitidos. Os acares apresentaram pequena variao, com exceo da sacarose que mostrou valores acima do limite permitido em algumas amostras das localidades 1, 2 e 4.Conclui-se que, o mel produzido na regio apresenta colorao considerada de mdia a escura, percentual de umidade alto, nveis de HMF e o percentual de sacarose com algumas variaes acima do permitido, o que pode ser corrigido com a aplicao de boas prticas de produo. Apoio: CNPq; INSTITUTO CENTEC; FUNCAP Palavras-chaves: Mel, HMF, Cor, Umidade, Sacarose
711
CARACTERSTICAS FSICAS, ORGANOLPTICAS E MICROBIOLGICAS DO MEL DE Melipona fasciculata Smith ESTOCADO EM DIFERENTES CONDIES DE LUMINOSIDADE E TEMPERATURA
Nadia Sleiman Mattar*, Maria Jos Abigail Mendes Arajo, Gisele Garcia Azevedo, Rosane Nassar Meireles Guerra, Murilo Srgio Drummond, Flvia Raquel Fernandes do Nascimento Programa de Ps-Graduao em Biodiversidade e Conservao; Laboratrio de Imunofisiologia; Departamento de Biologia Universidade Federal do Maranho (UFMA) Avenida dos Portugueses, s/n, Campus do Bacanga, 65080-040, So Lus-MA, Brasil nadsmat@hotmail.com Na busca do controle de qualidade para comercializao do mel de Melipona fasciculata (tiba), avaliou-se a influncia da luminosidade, temperatura e tempo de estocagem do mel de tiba, sobre suas caractersticas fsicas, organolpticas e microbiolgicas. Amostras de mel de tiba da mesma florada foram coletadas em Viana-MA em uma das unidades de produo do Projeto Abelhas Nativas em dezembro 2006. Aps a coleta em condies asspticas, com auxlio de bomba de vcuo, o mel foi acondicionado em garrafas de vidro de 220 mL. Aps dois meses de maturao do mel, as garrafas foram hermeticamente fechadas e mantidas por 6 meses nas seguintes condies: temperatura ambiente e luminosidade; temperatura ambiente e luminosidade parcial; temperatura ambiente e ausncia de luminosidade; geladeira e ausncia de luminosidade. Aps o estoque, as caractersticas fsicas, organolpticas e microbiolgicas foram avaliadas. As amostras de mel estocadas em temperatura ambiente, independente da condio de luminosidade, apresentaram caractersticas fsicas e organolpticas similares entre si e tambm em relao ao mel recm coletado, ou seja, consistncia fluida, cor marrom claro, ausncia de opacidade e sabor caracterstico, levemente adocicado. Por outro lado, as amostras estocadas em geladeira apresentavam consistncia pastosa, cor branca e forte opacidade, mas o sabor se manteve o mesmo. O mel estocado na geladeira no recuperou sua cor e textura original mesmo aps ter sido mantido fora da geladeira por 10 dias. As amostras de mel no apresentaram nenhum ndice de contaminao microbiolgica, independente das condies de estocagem. As caractersticas do mel estocado em temperatura ambiente se mantiveram similares aquelas observadas no mel fresco, o que sugere que esta temperatura a melhor condio de estocagem. A manuteno das suas caractersticas independe da luminosidade a qual o mel exposto. No houve indcios de contaminao microbiolgica, reforando a esterilidade das condies de coleta. Apoio: UFMA, FAPEMA, CAPES, CNPq Palavras-chaves: Mel, Melipona fasciculata, Abelhas sem ferro
712
PRODUO DE PRPOLIS EM REGIO DE TRANSIO CAATINGA-CERRADO DO ESTADO DO PIAU

Maria Teresa do Rego Lopes*, Fbia de Mello Pereira, Ricardo Costa Rodrigues de Camargo, Jos Maria Vieira Neto, Valdenir Queiroz Ribeiro Embrapa Meio-Norte; Universidade Federal do Piau Av. Duque de Caxias, 5650, Bairro Buenos Aires, Teresina, PI. CEP: 64006220 mteresa@cpamn.embrapa.br Apesar do grande potencial apcola da regio Nordeste, em particular do Estado do Piau, pouca ateno tem sido dispensada produo de prpolis. Nessa regio, so escassas as informaes sobre o potencial produtivo em diferentes biomas, quais os melhores mtodos de produo e quais as caractersticas da prpolis produzida. Nesse sentido, o presente trabalho objetivou avaliar a produo de prpolis em Castelo do Piau, regio de transio caatinga-cerrado, avaliando mtodos e perodos de produo, e selecionando colmias quanto capacidade produtiva. Entre dezembro de 2006 e agosto de 2007, foram avaliadas 10 colnias de Apis mellifera instaladas em colmias Langstroth, sendo cinco colmias com aberturas laterais de 2,0 cm entre o ninho e a melgueira, e cinco com aberturas de 2,0 cm na melgueira. Foram realizadas trs coletas de prpolis nos meses de maro, maio e agosto. Houve produo de prpolis em sete colnias que apresentaram mdia de produo no perodo de 32,1 12,7g. No foram verificadas diferenas significativas na produo de prpolis entre os dois mtodos de coleta pelo teste de Wilcoxon. Verificou-se maior produo no perodo de maro a maio (125,75 g). Foram selecionadas quatro colnias que apresentaram produo mdia de 41,5g para serem utilizadas como matrizes para produo de rainhas. Apoio: BNB/Fundeci Palavras-chaves: Apis mellifera, prpolis, abelhas, coletores
713
TIPIFICAO DO MEL PRODUZIDO POR Apis mellifera L. EM PLANTIO COMERCIAL DE MAMONEIRA Ricinus communis L.
Marcelo de Oliveira Milfont*, Breno Magalhes Freitas, Rmulo Augusto Guedes Rizzardo, Camila Queiroz Lemos, Michelle de Oliveira Guimares, Favzia Freitas de Oliveira Universidade Federal do Cear; Universidade Estadual de Feira de Santana Departamento de Zootecnia Campus do Pici - Bloco 809, CEP: 60021-970, Av. Universitria s/n, Km 3, BR 116, Feira de Santana - Bahia, CEP: 44031-460 marcelo_m_agro@yahoo.com.br Esse trabalho teve como objetivos avaliar e tipificar 22 amostras de mel de Apis mellifera provenientes de 11 colnias instaladas em uma rea de aproximadamente 3200 hectares de mamona Ricinus communisL., no municpio de Canto do Buriti, estado do Piau. As amostras foram submetidas s anlises melissopalinolgicas, fsico-qumicas e sensoriais. O mel em questo mostrou-se monofloral de mamona. Em relao aos parmetros fsico-qumicos avaliados, estes se encontravam enquadrados nas especificaes brasileiras, apresentando-se nos seguintes intervalos: 16,9-17,1% (Umidade); 3,37-3,38 (pH); 19,99-24,16 meq/kg (Acidez); 1-1,5 mL (Prova de Lund); 0,03-0,04% (Slidos insolveis); 31,38-38,10 mg/kg (HMF); 85,14-85,23% (Acares redutores); 0,95-1,46% (Acares no-redutores); 86,18-86,60% (Acares totais); presena de diastase. O mel da mamoneira apresentou colorao mbar-claro de acordo com a escala estabelecida de Pfund. As caractersticas analisadas (cor, viscosidade, aroma e sabor) demonstraram a boa aceitao do produto por parte de provadores, obtendo mdia 8, de acordo com uma escala hednica estruturada de nove pontos (1=desgostei muitssimo; 5= nem gostei nem desgostei; 9= gostei muitssimo). Conclui-se que o mel proveniente da mamoneira atende as especificaes brasileiras, apresenta boa aceitao pelo consumidor e pode ser comercializado como mel de mesa. Apoio: FUNDECI, FUNCAP, BRASIL ECODIESEL Palavras-chaves: Mel de mamoneira, tipificao, abelha, mamona, Apis mellifera
714
ESPECTRO POLNICO DO MEL DA TIBA (Melipona fasciculata SMITH, 1854, HYMENOPTERA, APIDAE)
Adriana Ceclia Lima Martins, La Maria Medeiros Carreira, Claucyanne Mendes Vieira, Mrcia Maria Corra Rgo, Patrcia Maia Correia de Albuquerque* *Universidade Federal do Maranho - UFMA; Museu Paraense Emlio Goeldi MPEG/CBO Avenida dos Portugueses s/n, 65040-080 So Lus-MA, Brasil patemaia@hotmail.com O mel de Melipona fasciculata foi analisado com o objetivo de se identificar as espcies vegetais utilizadas como fontes de nctar por essa espcie. A identificao das plantas visitadas foi realizada com base na anlise dos tipos polnicos encontrados em 12 amostras de mel coletados mensalmente em uma colnia, localizada no municpio de Palmeirndia (024047,6S, 445239,8W), Baixada Ocidental Maranhense. A identificao dos tipos polnicos foi realizada por comparao com as lminas de referncia, confeccionadas a partir dos botes florais das espcies vegetais encontradas no entorno da colnia e por literatura especializada. De cada amostra foram contados 1000 gros e os resultados expressos em porcentagem, seguindo a seguinte classificao de classes de freqncia: plen dominante (>45%), plen acessrio (16-45%), plen isolado importante (3-15%) e plen isolado ocasional (<3%). Para a caracterizao do mel foram considerados monoflorais queles que apresentavam apenas uma espcie dominante; biflorais, quando as espcies presentes no mel constituam plen acessrio e heteroflorais quando no havia dominncia. Foram identificados nas amostras de mel de Melipona fasciculata 50 tipos polnicos distribudos em 42 gneros e 24 famlias. Fabaceae (10 espcies) e Myrtaceae (6 espcies) apresentaram maior representatividade quanto ao nmero de espcies; Pontederaceae (45%) e Fabaceaes (31%) apresentaram a maior freqncia polnica. As espcies mais freqentes foram: Pontederia parviflora (Pontederaceae), espcie freqente em todo perodo de amostragem (37,3%), plen dominante em Outubro (87%), Junho (85%), Julho (76%), Agosto (49%) e Setembro (51%) e plen acessrio em Dezembro, Janeiro e Maro. Mimosa caesalpiniifolia (Fabaceae) foi a segunda espcie mais freqente (22,7%) sendo plen dominante em Novembro (46%), Abril (73%) e Maio (71%). Myrcia eximia (Myrtaceae) e Rhynchospora nervosa (Cyperaceae) foram consideradas plen isolados importante. Os mis em sua maioria so monoflorais (58,3%), havendo tambm mis biflorais (33%) e heteroflorais (0,08%). Apoio: FAPEMA; SECTEC Palavras-chaves: Melissopalinologia, Plantas Nectarferas, abelhassemferro, Melipona fasciculata , Baixada Maranhense
715
AVALIAO DOS PARMETROS DE QUALIDADE DOS MIS DE Melipona fasciculata SMITH DA REGIO DO CERRADO MARANHENSE
Carlos Alexandre Holanda*, Maria Clia Pires Costa Laboratrio de Macromolculas e Produtos Naturais, Universidade Estadual do Maranho - UEMA Campus Paulo VI, Bairro Tirirical, 65055-970, So Lus MA, Brasil netheruema@yahoo.com.br A meliponicultura, produo natural de mel de abelha da espcie Melipona fasciculata Smith, atualmente uma atividade em potencial no cerrado maranhense. Um dos entraves no desenvolvimento da atividade o desconhecimento da qualidade deste produto, haja vista a ausncia de uma legislao especfica para abelhas nativas. Este estudo estabelece caractersticas fsico-qumicas do mel de Melipona com o objetivo de contribuir com informaes que forneam um perfil de qualidade deste produto. Foram realizadas anlises fsico-qumicas de 14 amostras de mis de tiba nos municpios de Barra do Corda, Jenipapo dos Vieiras, Fernando Falco, Carolina e Riacho, localizados no cerrado maranhense e comparados com a legislao para a Apis mellifera. Medidas de acidez, sacarose aparente e cinzas apresentaram-se totalmente dentro dos padres referentes aos valores mximos de 50 meq/kg; 6% e 0,6%, respectivamente. Para HMF e slidos insolveis, 93% das amostras esto dentro da legislao (mximos de 60 mg/kg - HMF e 0,1% - slidos). Duas amostras apresentaram medidas de pH inadequadas (padro: 3,3 4,6). Para acares redutores (mnimo de 65%) apenas 43% das amostras esto adequadas legislao. Tais valores evidenciam um moderado grau de desidratao do nctar floral. Para os parmetros de atividade diastsica e umidade, todas as amostras encontramse fora do especificado: mnimo de 8 Gothe para diastase e mximo de 20 % para umidade. Um teor considervel de diastase seria importante para auxiliar na degradao do amido no organismo humano, e altos ndices de umidade refletem em baixas viscosidades deste mel. As caracterizaes fsico-qumicas do mel de Melipona do cerrado maranhense se apresentaram coerentes com a legislao de Apis. Excees se fazem para os parmetros de umidade, acares redutores e atividade diastsica. Isto pode ser contornado a partir da criao de uma legislao mais especfica para mis da espcie Melipona. Apoio: FAPEMA, UEMA, Banco do Nordeste Palavras-chaves: Mel, Melpona, Cerrado maranhense
716
ESTUDO TOXICOLGICO PR-CLINICO AGUDO COM O EXTRATO HIDROALCOLICO DA PRPOLIS DE Scaptotrigona sp.
Maria Jos Abigail Mendes Arajo*, Nadia Sleiman Mattar, Aramys Silva Reis, Mrcia Cristina Gonalves Maciel, Izabel Cristina Portela Boga Serra, Maria Nilce de Sousa Ribeiro, Adelson de Souza Lopes, Flvia Raquel Fernandes do Nascimento *Laboratrio de Imunofisiologia; Laboratrio de Farmacognosia; Laboratrio de Histologia - Universidade Federal do Maranho (UFMA) Avenida dos Portugueses, s/n, Campus do Bacanga, 65080-040, So Lus-MA, Brasil abigailaraujo@yahoo.com.br Prpolis de Scaptotrigona sp. (tubi) usada popularmente na cura de tumores e para cicatrizar feridas. Avaliou-se a toxicidade aguda pr-clnica do extrato hidroalcolico de prpolis (EHP) de Scaptotrigona sp. As amostras de prpolis foram obtidas no municpio de Barra do Corda, regio do cerrado maranhense, em maro de 2007, submetidas extrao por macerao com lcool etlico a 70%. Camundongos (Swiss, fmeas, 120 dias, 20-30g) receberam por via oral doses nicas de soluo salina, 0,9% (controle) ou EHP nas doses de 750, 1500 e 3000 mg/kg (n=5/grupo). As alteraes fisiolgicas e comportamentais dos animais foram observadas durante 14 dias. No 15 dia, os animais foram sacrificados e submetidos necropsia, pesagem e anlise macroscpica dos rgos (corao, pulmo, bao, linfonodo, fgado, estmago, intestino e rins). O EHP no induziu mortes, mas alteraes pontuais de comportamento: reao de fuga, tremores finos, tremor da cauda e menor motilidade. O tratamento com EHP na dose de 3000 mg/kg revelou diminuio significativa do peso do bao (20,3%), porm aumento do peso do linfonodo (25,5%) quando comparados com o grupo controle. No ocorreram alteraes no peso dos outros rgos. O EHP 750 induziu diminuio do nmero de clulas do bao (50,88%) e da medula ssea (31,7%). A celularidade do peritnio diminuiu em todos os grupos tratados com EHP (EHP 750: 39,55%; EHP 1500: 49,23%; EHP 3000: 45,8%). A anlise histopatolgica revelou um quadro de esteatose heptica nos grupos tratados com as doses de 1500 e 3000 mg/kg. As alteraes comportamentais e fisiolgicas encontradas nos animais, no indicam necessariamente toxicidade, h necessidade dos parmetros hematolgicos e bioqumicos, que esto sob avaliao e somente o conjunto dos resultados podero indicar ou no toxicidade. Apoio: UFMA; CAPES; CNPq; BNB Palavras-chaves: Toxicidade, Prpolis, Scaptotrigona sp., Abelhas sem ferro
717
POTENCIAL ANTIMICROBIANO DE PRPOLIS BRASILEIRA VERDE, PRETA E VERMELHA

Denise de Oliveira Scoaris, Tatiana Kelly Silva, Ana Carolina Peixoto Moreira, Esther Margarida Alves Ferreira Bastos Laboratrio de Recursos Vegetais e Opoterpicos/ Diretoria de Pesquisa e Desenvolvimento/ Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, Minas Gerais; Graduanda em Cincias Biolgicas, Faculdade Pitgoras, Belo Horizonte, Minas Gerais Rua Conde Pereira Carneiro, 80, Bairro Gameleira, CEP 30.510-010, Belo Horizonte, MG, Brasil denise.scoaris@funed.mg.gov.br H hoje no cenrio mundial vrios frmacos largamente empregados na terapia antimicrobiana. No entanto, em razo do aumento da resistncia microbiana a mltiplas drogas, crescente a pesquisa por novas alternativas teraputicas. A prpolis est entre os produtos naturais mais estudados, sendo reconhecida por suas propriedades antimicrobiana, antioxidante, antiinflamatria, imunomodulatria, hipotensiva, cicatrizante, anestsica, anticncer, anti-HIV e anticariognica. Buscando estudar o potencial antimicrobiano da prpolis brasileira, foram analisadas 10 amostras, sendo 5 provenientes do Estado da Bahia, de colorao vermelha e 5 provenientes do Estado de Minas Gerais, sendo 3 pretas e 2 verdes. As amostras vermelhas foram testadas frente a duas espcies bacterianas de ocorrncia natural na pele e cavidade oral, Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Streptococcus mutans ATCC 25175 e as demais foram testadas apenas frente a S. aureus, utilizando a tcnica de difuso em gar. Foram avaliados ainda os indicadores de qualidade: extrato seco, ndice de oxidao, compostos fenlicos e ndice de flavonides. A atividade antibacteriana frente a S. aureus foi positiva para 90% das amostras testadas, na relao: vermelha < preta < verde. As amostras vermelhas apresentaram tambm atividade antibacteriana positiva frente a S. mutans. A avaliao fsico-qumica demonstrou que todas as amostras com atividade antibacteriana se enquadram dentro dos parmetros exigidos pela legislao brasileira. Os resultados obtidos indicam a atividade antibacteriana de amostras de prpolis brasileiras, frente a microrganismos de importncia clnica ocorrentes na pele e cavidade oral. Estas amostras so potenciais matrias-primas para a formulao de novos agentes teraputicos, principalmente de uso tpico, de baixo custo e menor toxicidade do que os antimicrobianos empregados atualmente na dermatologia e odontologia. Apoio: Fundao de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG Palavras-chaves: atividade antimicrobiana, prpolis, Apis mellifera
718
ESTUDO IN VITRO DA VIABILIDADE DE ESPOROS DE Paenibacillus larvae EXPOSTOS A DOSAGENS SUCESSIVAS DE EXTRATO DE PRPOLIS VERDE
Esther Margarida Alves Ferreira Bastos*, Ademilson Espencer Egea Soares, Denise de Oliveira Scoaris, Marla Spivak * Laboratrio de Recursos Vegetais e Opoterpicos, Diretoria de Pesquisa e Desenvolvimento, Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, MG, Brasil; Departamento de Gentica, Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto Rua Conde Pereira Carneiro, 80, Bairro Gameleira, CEP 30.510-010, Belo Horizonte, MG, Brasil embastos@funed.mg.gov.br As abelhas esto continuamente expostas a vrios microrganismos. Entre os patognicos, destaque se d bactria esporulada Paenibacillus larvae, causadora da Cria Ptrida Americana. O Brasil um dos poucos pases onde a doena no se desenvolve. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade in vitro de esporos de Paenibacillus larvae CCT 4443 expostos a dosagens sucessivas de Extrato Alcolico de Prpolis (EAP) verde, atravs de tcnicas de observao micro e macroscpicas. Foi preparada uma bateria de 9 erlenmeyers, com 3 contendo 48 ml de caldo BHIT, 1 ml da suspenso de esporos de P. larvae a 1 x 10E5 UFC/ ml e 1 ml (2% v/v) de EAP. A cada 24 horas, foram adicionados a estes 1 ml de EAP + 1 ml de BHI-T. Foram utilizados 2 grupos controle, com 3 erlenmeyers/ grupo, contendo 48 ml de caldo BHIT + 1 ml da suspenso de esporos. Ao controle positivo, foi adicionado 1 ml de oxitetraciclina (5 mg/ ml) e ao controle negativo, 1 ml de lcool 70%. Todos os tratamentos foram realizados em triplicata, incubados a 37 C, durante 11 dias e ao abrigo de luz. Diariamente foram retiradas alquotas de 1 ml, para avaliao dos aspectos morfotinturiais, presena de movimento browniano e observao de clulas viveis em placas. Nas lminas preparadas para observao morfotinturial foi evidenciada ausncia completa de formas vegetativas de P. larvae, desde o primeiro dia de exposio a prpolis. O movimento browniano foi observado durante todo o experimento, com um espessamento gradativo do dimetro do esporo detectado aps o quinto dia de exposio. O nmero de colnias viveis em placas se manteve em 30 UFC/ ml, em mdia. Estes resultados sugerem que o efeito bacteriosttico da prpolis frente a formas esporuladas de P. larvae semelhante ao obtido para a oxitetraciclina. Apoio: Fundao de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG Palavras-chaves: Paenibacillus larvae, prpolis, Apis mellifera
719
PRODUO DE GELIA REAL EM COLNIAS RECRIAS DE ABELHAS AFRICANIZADAS SUPLEMENTADAS COM RAES ELABORADAS COM LEO DE LINHAA E PALMA
Vagner de Alencar Arnaut de Toledo*, Maria Josiane Sereia, Patrcia Faquinello, Fabiana Martins Costa-Maia, Ana Lcia Paz Barateiro Stuchi, Antnio Cludio Furlan Universidade Estadual de Maring - Departamento de Zootecnia Av. Colombo, 5790, 87020-900, Maring, Paran, Brasil vagner_abelha@yahoo.co.uk A gelia real uma substncia rica em carboidratos, lipdeos, protenas, minerais e vitaminas. Para sua produo necessria a suplementao da alimentao natural das abelhas garantindo a sntese de protenas e enzimas pelas glndulas mandibulares e hipofaringeanas das operrias jovens. O objetivo foi avaliar a produo de gelia real em colnias de abelhas Apis mellifera africanizadas suplementadas com rao formulada com leo de linhaa e palma. Foram avaliadas 20 colnias Apis mellifera africanizadas em sistema de recrias no perodo de janeiro a maro de 2008. As fontes de leo consistiam na mistura de leo de linhaa e de palma (RLP), leo de linhaa (RLI) e outro leo de palma (RLP), sendo que no tratamento controle as colnias no consumiram rao. Foram realizadas 30.000 transferncias e 75 observaes por tratamento. Houve diferena (P=0,0001) para aceitao de larvas total, no sarrafo de cima, mdio e superior para o tratamento RLP (63,45; 20,11; 21,12 e 22,23%) com relao ao tratamento RL (49,71; 16,56; 17,53 e 17,20%), RP (45,8; 14,91; 15,88 e 15,01%) e controle (49,60; 15,67; 16,63 e 15,61%), respectivamente. O total de gelia real produzida foi superior (P=0,0001) no tratamento onde as colnias foram suplementadas com a rao RLP (11,30g/colnia), seguido do tratamento RL (9,31g/colnia) e RP (8,40g/colnia), sendo estes superiores ao tratamento controle (6,35g/colnia). Estes resultados mostram que a suplementao com rao elaborada com a mistura de leo de linhaa e palma aumentou a aceitao e a produo de gelia real por colnia. Apoio: CNPQ - 301943/2005-2 Palavras-chaves: Apis mellifera, gelia real, leo de palma, leo de linhaa, suplementao
720
ANLISE MELISSOPALINOLGICA DE AMOSTRAS DE MEL DE Apis mellifera ORIUNDAS DA REGIO NORTE DO ESTADO DO PIAU
Ricardo Costa Rodrigues Camargo*, Alyne Freire de Melo, Leudimar Aires Pereira, Fbia de Mello Pereira, Maria Teresa do Rgo Lopes *Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria - Embrapa Meio-Norte; Universidade Estadual do Piau- UESPI; Universidade Federal do Piau - UFPI Av. Duque de Caxias, 5650, Bairro Buenos Aires, CEP: 64006-220, Teresina-PI ricardo@ cpamn.embrapa.br O plen das flores coletado pelas abelhas fundamental para o desenvolvimento da colnia, ao ser utilizado na alimentao das larvas. Na colmia os gros de plen aglutinados pelas abelhas so depositados nos alvolos, nesse processo alguns gros acabam impregnando o mel armazenado. De acordo com Barth a presena de gros de plen no mel constitui importante indicador para a sua origem botnica e geogrfica. A anlise melissopalinlogica, por meio da anlise quantitativa e qualitativa dos gros de plen encontrados nas amostras de mel pode ser utilizada como ferramenta para agregao do mel in natura fornecendo informaes de rotulagem referentes sua origem botnica. Esse trabalho teve como objetivo realizar anlise melissopalinlogica para determinar a origem botnica de sete amostras de mel oriundas de diferentes municpios da regio norte piauiense (Esperantina, Piracuruca, Pedro II, Lagoa de So Francisco, So Joo da Fronteira e Brasileira) colhidas em maro de 2008. As anlises foram realizadas no Laboratrio de Controle de Qualidade dos Produtos Apcolas da Embrapa Meio Norte, Teresina-PI. As lminas foram confeccionadas em quadruplicata para cada amostra de mel, de acordo com o mtodo de LOUVEUX e analisadas com auxlio de microscopia ptica em aumento de 40X, para contagem e identificao dos gros plens. Na totalidade foram quantificados 4074 gros de plen, sendo que as famlias mais representadas foram Mimosaceae, Anacardiaceae, Fabaceae, Euphorbiaceae, Rubiaceae e Caesalpiniaceae, respectivamente. Das sete amostras analisadas cinco apresentaram a espcie Mimosa caesalpiniaefolia Benth (sabi ou unha de gato) como plen dominante. A amostra do municpio de Esperantina apresentou o Hytis sp (bamburral) e a do municpio de Piracuruca a Senna occidentalis (Caesalpiniaceae) como plens dominantes. Apesar das amostras terem sido enviadas com identificao de outra florada (marmeleiro), as anlises indicaram outro resultado, demonstrando a importncia da tcnica para auxiliar na devida identificao botnica dos mis. Apoio: FINEP Palavras-chaves: mel, plen, melissopalinologia
721
ANLISE DOS PARMETROS FSICOQUMICOS E MICROBIOLGICOS DO MEL DE Scaptotrigona (HYMENOPTERA, APIDAE, APINAE) DO MUNICPIO DE LUIZ ANTNIO, SO PAULO, BRASIL
Daniela Yumi Yamamoto, Ivan Paulo Akatsu*, Osmar Malaspina, Ademilson Espencer Egea Soares Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil akatsu@usp.br Os mis de meliponneos, abelhas sem ferro, possuem caractersticas que os diferem do tradicional mel de Apis mellifera, conferindo-lhes sabor marcadamente distinto. O objetivo do trabalho foi realizar anlises fsico-qumicas e microbiolgicas de amostras de mis provenientes de colmias de Scaptotrigona bipunctata e Scaptotrigona aff. depilis para averiguar a possibilidade de consumo do mel destas espcies. As colmias estavam instaladas na Estao Experimental de Luz Antnio, SP. As anlises microbiolgicas consistiram em examinar a presena/ausncia de bactrias e fungos e leveduras atravs do mtodo de contagem de placas; e a presena/ausncia de coliformes totais e fecais atravs do mtodo do Nmero Mais Provvel (NMP). Verificou-se ausncia de coliformes totais e fecais, e que a forma mais adequada de coleta do mel foi aquela em que houve o menor contato possvel com o produto. As anlises dos parmetros fsico-qumicos seguiram a metodologia estabelecida pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, exceto a realizao do ndice de HMF, que foi baseada no Official Methods of Analysis (AOAC). As anlises fsico-qumicas indicaram que as amostras analisadas se assemelham ao mel de Scaptotrigona mexicana e Scaptotrigona pectoralis (VIT, MEDINA e ENRIQUEZ, 2004), e que estavam dentro dos parmetros propostos por VILLASBAS (2005). Os parmetros fsico-qumicos e microbiolgicos indicam condies favorveis para o consumo de mel de Scaptotrigona aff. depilis e Scaptotrigona bipunctata, obtidos atravs de manejo semelhante aos usados no estudo. Apoio: CNPq, CAPES Palavras-chaves: Scaptotrigona, Mel, Meliponicultura, Fscio-qumico, Microbiologia
722
ADULTERAO DE MEL VENDIDOS NAS FEIRAS LIVRES DE BOA VISTA, RORAIMA

Silvio Jos Reis Da Silva*, Fabiola Cristina Gibson Alves, Juliana Patrcia Ribeiro Pereira, Rosiclede Lbo *Museu Integrado de Roraima - MIRR / Fundao Estadual do Meio Ambiente Cincia e Tecnologia de Roraima - FEMACT; Universidade Federal de Roraima, Capus do Paricarana Av. Ville Roy, 4935, So Pedro CEP: 69306-040 - Boa Vista, Roraima, Brasil silviojosereisdasilva@yahoo.com.br A adulterao de mel um dos crimes mais comum contra o consumidor. Muitas so as substancias adicionadas ao mel, mas principalmente acares como sacarose e glicose. Em alguns casos a adulterao total, isto , o produto totalmente artificial, sem adio de mel. Em Roraima a produo de mel artificial considervel e concorre com o produto natural, principalmente nas feiras livres. Com o objetivo de verificar o percentual de adulterao de mel de Apis mellifera em feiras livres de Boa Vista, adquirimos 31 amostras de diversas feiras livres. De cada amostra foram separadas trs fraes. Uma frao destinada para anlise de Lund, que consiste na precipitao dos albuminides presentes no mel pelo cido tnico. Outra frao foi destinada para a realizao de anlise polnica e a terceira frao para anlise sensorial. Das 31 amostras analisada 10 (32,2%) deram resultado positivos e 21 (68,8%) deram resultado negativo para a reao de Lund. Na anlise sensorial, realizada por apicultores experientes, somente uma amostra foi considerada indeterminada, as demais resultados coincidiram com os da reao de Lund. A anlise polnica ainda no foi finalizada. Concluso: Com quase 70% das amostras de mis analisadas, provenientes de feiras livres de Boa Vista consideradas adulteradas, fica o alerta para o consumidor e a recomendao para que evite consumir mis de fontes duvidosas e que estejam colocados em frascos ou garrafas sem identificao. Um percentual to alto de adulterao alarmante e exige providncias imediatas por parte dos rgos fiscalizadores. Apoio: FEMACT- RR Palavras-chaves: mel, Apis mellifera, adulterao, Roraima
723
PARMETROS FSICO-QUMICOS E QUMICOS DE PRPOLIS DE Scaptotrigona sp. (TUBI)

Alexandre Michel Costa Nogueira, Richard Pereira Dutra, Bruno Vincius de Barros Abreu, Marisa Cristina Aranha Batista, Maria Jos Abigail Mendes Arajo*, Maria Clia Pires Costa, Maria Nilce de Sousa Ribeiro Laboratrio de Farmacognosia; *Laboratrio de Imunofisiologia, Universidade Federal do Maranho; Departamento de Qumica e Biologia, Universidade Estadual do Maranho-UEMA, So Lus - MA, Brasil Avenida dos Portugueses, s/n, Campus do Bacanga, 65080-040, So Lus-MA, Brasil abigailaraujo@yahoo.com.br Prpolis um material multifuncional utilizado pelas abelhas na construo e na manuteno de suas colmias, cuja composio qumica est relacionada diversidade vegetal visitada pelas abelhas. O trabalho objetivou analisar as caractersticas fsico-qumicas e qumicas de prpolis de Scaptotrigona sp. (tubi), oriundas do municpio de Barra do Corda, regio cerrado maranhense. As amostras de prpolis de Scaptotrigona sp. foram coletadas das colmias oriundas das localidades de Cermica, Trizidela, Araticum e Tamarindo, municpio de Barra do Corda-MA, nos meses de julho a outubro de 2007, as quais foram submetidas anlise sensorial e maceradas em etanol 70% por 24h, temperatura ambiente. As solues extrativas concentradas em evaporador rotativo, para obteno dos extratos hidroalcolicos, e submetidos abordagem fitoqumica (compostos fenlicos, triterpenos, alcalides e esterides), determinao dos teores de compostos fenlicos (reagente FolinCiocalteu) e de flavonides (cloreto de alumnio), medidos em espectrofotmetro de UV-Vis, usando como padro cido glico e quercetina respectivamente. Os perfis cromatogrficos (cromatografia em camada delgada) e espectrofotomtricos (UV-Vis) foram determinados nos extratos. Os resultados demonstraram que a maioria das amostras de prpolis de tubi apresentou odor resinoso, sabor amargo e colorao marrom clara. Nos extratos hidroalcolicos detectamos compostos fenlicos e triterpnicos, mas ausncia de alcalides e esterides. Os teores de fenlicos totais encontrados nos extratos hidroalcolicos de prpolis de tubi foram de 9,40 a 13,53% enquanto os teores de cidos fenlicos variaram de 9,03 a 12,95%. Os teores de flavonides variaram de 0,37 a 0,65%. As anlises cromatogrficas dos extratos hidroalcolicos demonstram composio qumica equivalentes, e as anlises espectrofotomtricas dos extratos hidroalcolicos revelam que a maioria das substncias presente absorve na faixa de comprimento de onda 270 a 300 nm. Os resultados obtidos demonstram parmetros para caracterizao da qualidade da prpolis produzida no municpio de Barra da CordaMA. Apoio: Banco do Nordeste; Banco da Amaznia; FAPEMA; CAPES Palavras-chaves: Prpolis, Compostos Fenlicos, Flavonides, Scaptotrigona sp, Tubi
724
EFEITO ANTIBACTERIANO DO EXTRATO ETANLICO DA PRPOLIS SOBRE BACTRIAS PATOGNICAS DE PEIXE

Eva Mnica Sarmento da Silva*, Nara Patrcia Cavalcanti Andrade, Ana Paula Soares dos Santos, Claudia Luiza Paes Barretto Villaa, Cristina Crewer da Costa, Mateus Matiuzzi da Costa *Universidade Federal do Vale do So Francisco - UNIVASF Avenida Presidente Tancredo Neves, 100 Centro Petrolina, PE, Brasil evasarmento@yahoo.com.br As investigaes sobre as propriedades antibiticas da prpolis tm demonstrado uma eficiente atividade bacteriosttica e bactericida em relao aos diversos gneros de bactrias gram positivas e gram negativas. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito antimicrobiano do extrato etanlico da prpolis sobre 11 isolados patognicos de peixes, sendo 06 Aeromonas spp, 01 Echerichia coli, 01 Micrococcus spp, 01 Pseudomonas spp, 01 Pleseomonas shigelloides e 01 Staphylococcus aureus. Os isolados foram semeados em placas de petri, contendo gar Muller Hinton e levados para estufa a 37C por 24 h, aps esse processo, foram colocadas em microtubos contendo 5ml do caldo (Muller Hinton) e levadas a estufa por 8 h. A turvao do microtubo foi ajustada a escala 0,5 de Mac Farland. Na seqncia, foi retirado 100L desta suspenso e colocados em 9,9 ml do caldo, dos quais foi retirado 10L (5 x 104 UFC) e depositados nos microtubos contendo o caldo com: concentraes de prpolis (15%, 7,5%, 3,75%, 1,88% e 0,94%) e cinco concentraes de lcool etlico numa razo 2. Os microtubos foram retirados da estufa aps 24 h e semeadas novamente em placas de petri contendo gar Muller Hinton voltando para a estufa por mais 24 h, para determinao da Concentrao Bactericida Mnima. Nos isolados Micrococcus spp S. aureus, P. shigelloides e 04 isolados de Aeromonas spp foi verificada a Concentrao Bactericida Mnima (CBM) de 0,94% para o extrato etanlico de proplis. Para E. coli, 02 isolados de Aeromonas spp e Pseudomonas spp foram verificadas as mesmas CBM para o extrato etanlico de prpolis, e para o controle de lcool, indicando a ausncia de atividade antimicrobiana da prpolis para estes microrganismos. Os resultados obtidos demonstraram o efeito inibitrio da prpolis, para alguns patgenos de peixes. Esta constatao indica seu potencial de uso para tratamento e profilaxia de infeces bacterianas nestes animais. Apoio: CNPq; FACEPE Palavras-chaves: Prpolis, Extrato, Bactrias, Antimicrobiano, Patognico de peixe
725
IDENTIFICAO DA FLORA DOS MES ORIGINRIOS DAS ILHAS FLORESTA E LARANJEIRA, MUNICPIO DE QUERNCIA DO NORTE, PARAN, BRASIL
Eloi Machado Alves*, Cssia Mnica Sakuragui, Emi Rainildes Lorenzetti, Alethia Alves da Silva, Carolina Antunes Neves, Vagner Alencar Arnaut de Toledo, Augusta Carolina de C. C. Moreti, Luis Carlos Marchini Universidade Estadual de Maring - UEM; Universidade Federal do Rio de Janeiro - UFRJ; Universidade de So Paulo - USP/ESALQ Avenida Colmbo, 5790 UEM - PPZ, 87020-900 Maring - PR, Brasil eloi.abelha@gmail.com O presente trabalho visou o conhecimento da diversidade vegetal nas ilhas Floresta e Laranjeira contribuindo com o conhecimento da biodiversidade vegetal na rea de preservao ambiental do alto rio Paran. Ento, realizou-se a identificao botnica das espcies e a anlise polnica dos mis para que essas informaes sejam utilizadas, principalmente, na determinao da origem floral do mel produzido nesta regio. Realizaram-se coletas mensais no perodo de agosto de 2005 a agosto de 2006, o material frtil da flora foi coletado e preparado de acordo com as tcnicas usuais de herborizao. Sendo coletado um total de 521 amostras de plantas, destas, relacionamos 132 espcies de plantas, distribudas em 96 gneros e 44 famlias. As famlias mais importantes em nmero de espcies foram Asteraceae (19), Rubiaceae (10), Solanaceae (8) e Fabaceae (7). Os gneros mais diversos foram: Solanum com seis espcies, Ludwigia com cinco espcies e Vernonia, Mikania, Ipomoea e Croton com trs espcies de cada uma. Verificou-se, por meio da anlise polnica do mel produzidos nas ilhas estudadas, que as famlias Euphorbiaceae, Myrtaceae, Asteraceae, Polygonaceae foram as principais fontes de nctar exploradas por Apis mellifera africanizada para a produo de mel orgnico. Portanto, o conhecimento das plantas da rea e sua participao na produo dos diferentes mis vital para o manejo tanto das populaes de plantas quanto das abelhas. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Apis mellifera, flora, mel
726
DESEMPENHO DE COLMIAS DE Apis mellifera ALIMENTADAS COM DIETAS ARTIFICIAIS PARA PRODUO DE GELIA REAL
Regina Helena Nogueira Couto, Leomam Almeida Couto, Daniel Nicodemo* Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias de Jaboticabal - UNESP Via de Acesso Prof.Paulo Donato Castellane s/n. 14884-900. Jaboticabal - SP nicodemo@fcav.unesp.br As abelhas, para produzir gelia real, necessitam de uma dieta equilibrada que apresente quantidades adequadas de protenas, carboidratos, gorduras, vitaminas e sais minerais. Em regies de monocultura e outras com pasto apcola escasso, a produo se torna pequena e, as vezes, invivel devido a deficincia nutricional das abelhas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o desempenho de colmias alimentadas com dietas artificiais e plen, no que refere-se a condio interna das colmias, consumo de rao e aceitao de larvas transferidas para cpulas. Foram utilizadas 12 colmias que apresentavam coletor de plen no alvado. Cada grupo de quatro colmias recebeu um tipo de rao. A primeira rao (T1) era composta de plen. A segunda (T2) apresentava 15% de farinha de soja texturizada e 85% de farelo de trigo e, a terceira (T3), era constituda de 13,8% de farelo de soja e 86,2% de farelo de trigo. Em todas se acrescentou mel para que o alimento tivesse forma pastosa. A colocao de coletor de alvado implicou em diminuio da rea de cria e alimento das colmias. O consumo de rao foi de 14,173,24; 12,83,10 e 14,172,84 g, respectivamente para T1, T2 e T3. No houve diferena entre os tratamentos no que diz respeito a aceitao das larvas transferidas. O ingrediente farelo de soja proporcionou melhores resultados quando comparado a farinha de soja texturizada. A utilizao de dietas artificiais com farelos de soja e trigo viabiliza a produo de gelia real em locais nas quais h falta de alimento para as abelhas. Apoio: CNPq Palavras-chaves: gelia real, dietas artificiais, farelo de soja, farelo de trigo, plen
727
ANLISE SENSORIAL E INTENO DE COMPRA DE LEITE DE CABRA FERMENTADO COM Lactobacillus acidophilus ENRIQUECIDO COM PLEN E MEL DE ABELHAS AFRICANIZADAS, MUNICPIO DE SOBRAL CE
Joo Nelson Melo Vasconcelos*, Jlio Otvio Portela Pereira, Masu Capistrano Camura Portela, Raimundo Sousa Maciel, Antonia Daiana Andrade Arajo, Paulo Roberto Costa Oliveira, Wycisludia Brando Silva, Ana Roberta Arajo Silva FATEC - Cear Avenida Dom Jos, 2456, Centro, Sobral, CE, 62.010-290 nelson_apis@yahoo.com.br Os alimentos probiticos, ativam o sistema imunolgico e regulam a flora intestinal, pois resistem passagem do trnsito gastrointestinal (FERREIRA,1998). Esse trabalho teve como objetivos analisar sensorialmente e inteno de compra do novo produto potencialmente probitico, de leite de cabra fermentado com L. acidophilus sabor natural, enriquecido com mel e plen apcola. As anlises procederam no laboratrio de anlise sensorial da FATEC Sobral- Cear, durante o segundo semestre de 2007. Foram selecionados 44 provadores no treinados, com faixa etria entre 19 e 45 anos de ambos os sexos, com hbito de consumir leite. A amostra foi distribuda em copos descartveis de 50ml sendo avaliada de acordo com a escala hednica de 9 pontos (DUTUCOSKI, 1996), sendo analisados os atributos produto de maneira geral, cor, textura, cheiro e sabor. O atributo cor obteve nota 6,46 (gostei ligeiramente), no havendo uma boa aceitao para este atributo, visto que a nota mnima para aceitao 7 (gostei regularmente); Para o cheiro 5,49 (indiferente); 6,25 para textura; e, 5,46 para o produto de maneira geral. O fator citado como resultante da no aceitao do leite fermentado foi o sabor amargo o que, segundo JR Notcias (2003) ocorre devido presena do plen. No entanto, ao se analisar a inteno de compra observa-se que 30,23% dos provadores compraria o produto, 25,60% talvez compraria e 44,17% no compraria. Sendo a soma dos percentuais que comprariam o produto com os que talvez comprassem superior a 55,83%. Conclui-se que: A no aceitabilidade do leite fermentado pelos provadores deveu-se provavelmente ao hbito alimentar destes, a variao intrnseca existente no sabor do plen, bem como ao desenvolvimento da formulao; O valor agregado ao produto, pela adio de mel de abelhas e plen apcola, alimentos reconhecidos com funcionais, evidenciou a inteno de compra, condicionado a mudana de formulao. Apoio: FUNCAP/EMBRAPA/IDETAGRO/Escola de Fbrica Palavras-chaves: Anlse Sensorial, Leite Fermentado, Plen, Mel, Aceitao
728
ANLISE FSICO-QUMICA DE LEITE DE CABRA FERMENTADO COM Lactobacillus acidophilus ENRIQUECIDO COM PLEN E MEL DE ABELHAS AFRICANIZADAS, MUNICPIO DE SOBRAL CE
Joo Nelson Melo Vasconcelos*, Jlio Otvio Portela Pereira, Masu Capistrano Camura Portela, Raimundo Sousa Maciel, Antonia Daiana Andrade Arajo, Clara Mtia de Paula, Mrcia Meneses Portela, Rafael Ricardo Dutra FATEC - Cear Avenida Dom Jos, 2456, Centro, Sobral, CE, 62.010-290 nelson_apis@yahoo.com.br Leites fermentados so os produtos resultantes da fermentao do leite pasteurizado ou esterilizado, por fermentos lcticos prprios. No caso do leite fermentado exclusivamente com Lactobacillus acidophilus, chamado de leite acidfilo (Brasil, 2000). A presente pesquisa foi realizada com o objetivo de analisar as caractersticas fsico-qumicas do leite de cabra acidfilo, com a adio de mel e plen apcola. As anlises de pH, densidade, acidez, umidade, extrato seco total e gordura foram realizadas segundo LANARA (1981) e, a de lactose pelo mtodo de Adolfo Lutz (2005). Estas procederam no Laboratrio de Biotecnologia da FATEC Sobral - Cear, durante o segundo semestre de 2007. O valor encontrado para o pH foi de 3,66, no entanto, o pH timo para sobrevivncia do L. acidophilus de 3,9 a 5,8 o que mostra a necessidade de correo de pH para maior eficcia do lactobacilo ao ser ingerido. A acidez foi de 1,1g de cido lctico/100g estando de acordo com Brasil (2000), que especifica os valores entre 0,6 a 2g. A umidade foi expressa em 77,7% e extrato seco total 22,3%, valores condizentes com Silveira (2007). Foram encontrados apenas 0,23% de lipdios, sendo sugerida uma ao lipoltica do bacilo visto que o leite de cabra integral contm 2,88%, esta ao foi confirmada por Faria et al( 2006), que utilizou o mesmo microrganismo com leite de bfala. E, para lactose, foi encontrado um percentual de 2,27%, abaixo da mdia do valor encontrado em leites de cabras de 4%, podendo ser usado para pacientes com parcial intolerncia lactose (Faria et al, 2006). Conclui-se que: O leite de cabra fermentado apresentou importante carter nutricional, com baixos teores de gordura e lactose, e caractersticas probiticas; ii ) O leite fermentado em estudo mostrou-se classificado como desnatado, o percentual de gordura inferior a 0,5%. Apoio: FUNCAP/EMBRAPA/IDETAGRO/Escola de Fbrica Palavras-chaves: Leite Fermentado, Plen, Mel, Composio, Fsico-qumica
729
ETNOCONHECIMENTO SOBRE A IDENTIFICAO DO MEL DE ABELHA PELOS MORADORES DO BAIRRO DO LAGUINHO, MACAP, AP, BRASIL
Eliane Rocha Rodrigues* , Daniel de S Cavalcante , Lorena Oliveira de Souza , Arley Jos Silveira da Costa Ncleo de Estudos Cientficos e Tecnolgicos sobre Abelhas Regionais da Universidade Federal do Amap; Mestrado Integrado em Desenvolvimento Regional; UNIFAP Rod. J.K., Km 02, UNIFAP, PROPESPG, NECTAR, Bloco I, Macap-AP, 68902-280 erocharodrigues@yahoo.com.br Etnonhecimento pode ser importante para a sade ao difundir mtodos de identificao de produtos de consumo alimentcio ou medicamentoso. O mel um produto caro, mas sua adulterao fcil e de baixo custo, o que torna necessria sua identificao. Assim, o objetivo desse trabalho foi descrever os conhecimentos sobre origem e mtodos de identificao do mel entre os moradores do bairro do Laguinho, Macap-AP. Foram entrevistados 5 moradores entre 30 e 59 anos. Transcries das entrevistas semi-estruturadas foram depositadas no NECTAR/UNIFAP. O conhecimento sobre mel de abelha transmitido oralmente nas experincias cotidianas. Consumido por todos entrevistados na forma alimentar, medicinal ou esttica, o mel apresenta disponibilidade limitada no mercado e adquirido em pontos comerciais, com vendedores que vm porta ou sob encomenda, sendo esta a forma mais comum. O mel de pontos comerciais considerado caro e as vendas porta so recusadas pela crena na adulterao do mel. Os moradores avaliam aparncia (cor, espumosidade, cristalizao e viscosidade), aroma e sabor do mel para efetuar a compra, mas desconhecem mtodos eficazes de identificao, assim, buscam assegurar a qualidade do mel adquirindo-o preferencialmente da zona rural por encomenda antecipada. Apoio: PROBIC/UNIFAP Palavras-chaves: adulterao, conhecimento tradicional, morador urbano
730
ANLISE MELISSOPALINOLGICA DE AMOSTRAS DE MEL DE ABELHAS NATIVAS DE UMA PROPRIEDADE LOCALIZADA NA ZONA RURAL DE TERESINA-PI
Alyne Freire de Melo, Ricardo Costa Rodrigues Camargo, Fbia de Mello Pereira, Maria Teresa do Rgo Lopes, Leudimar Aires Pereira * Universidade Estadual do Piau UESPI; Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria - Embrapa Meio-Norte; Universidade Federal do Piau - UFPI Av. Duque de Caxias, 5650, Bairro Buenos Aires, CEP: 64006-220, Teresina-PI alynezinha.freire@hotmail.com As Abelhas so importantes polinizadores das regies tropicais, executam uma importante funo na perpetuao das florestas e da biodiversidade, como polinizadores e integrantes da cadeia alimentar, estando relacionadas diretamente com a manuteno dos diversos ecossistemas por existir um processo evolutivo associado e dependente entre abelhas e plantas. A presena de gros de plen no mel constitui importante indicador para a sua origem botnica e geogrfica. Como ferramenta de agregao do mel in natura pode-se proceder anlise melissopalinlogica por meio da anlise quantitativa e qualitativa dos gros de plen encontrados nas amostras de mel objetivo deste trabalho. Foram realizadas anlises melissopalinolgicas de quatro amostras de mel de Abelhas do Gnero Melipona coletadas na Usina Santana na zona rural de Teresina-PI. As lminas foram confeccionadas em quadruplicata para cada amostra de mel, de acordo com o mtodo de LOUVEUX e analisadas com auxlio de microscopia ptica em aumento de 40X, para contagem e identificao dos gros plens. Na amostra 1 foram quantificados 1401 gros de plen representando as famlias Mimosaceae como plen dominante, Fabaceae e Anacadiaceae como plen acessrio e Caesalpiniaceae e Turneraceae como plen ocasional respectivamente. Na amostra 2 foram quantificados 942 gros de plen representando a famlia Fabaceae como plen dominante, Anacadiaceae como plen acessrio e Mimosaceae, Polygonaceae e Caesalpiniaceae como plen ocasional respectivamente. Na amostra 3 foram quantificados 1283 gros de plen representando a famlia Fabaceae como plen dominante, Anacadiaceae Mimosaceae como plen acessrio e Caesalpiniaceae e Turneraceae como plen ocasional respectivamente. Na amostra 4 foram quantificados 587 gros de plen representando a famlia Mimosaceae como plen dominante e Caesalpiniaceae, Fabaceae , Anacardiaceae , Turneraceae e Virtaceae como gros de plen ocasionais respectivamente. Constatou-se tratar de mel polifloral, sendo que as amostras apresentaram grande riqueza em tipos polnicos de variadas espcies vegetais. Apoio: Finep Palavras-chaves: plen, melissopalinologia, abelha nativa, Melipona, mel
731
SISTEMTICA E BIOGEOGRAFIA DE ABELHAS
732
ABELHAS DE RORAIMA. POR QUE TANTAS ESPCIES EM TO POUCO ESPAO?

Marcio Luiz de Oliveira*, Slvio Jos dos Reis Silva, Marcone C. Silva, Ana Cludia O. Arajo, Maria Ivonei Albuquerque, Sheila F. Tavares. Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia, Coordenao de Pesquisas em Entomologia. mlolivei@inpa.gov.br. Fundao Estadual do Meio Ambiente, Cincia e Tecnologia de Roraima/Museu Integrado de Roraima. Secretaria de Educao, Cultura e Desporto Av. Andr Arajo 2936. Bairro Petrpolis. Caixa postal 478. Manaus. AM. Brasil 69011-970. mlolivei@inpa.gov.br A maioria dos trabalhos desenvolvidos com abelhas na regio amaznica tem se concentrado, em termos geogrficos, aos principais rios e arredores das capitais. Ao mesmo tempo, existem colees de abelhas em algumas instituies sediadas na regio que poderiam melhorar esse quadro, mas que nem sempre tm sido aproveitadas. Neste trabalho procuramos fazer um levantamento das espcies e da distribuio geogrfica de abelhas sem ferro (Meliponina) e abelhas das orqudeas (Euglossina) existentes em Roraima, tendo por base as colees do Museu Integrado de Roraima (MIRR), em Boa Vista, e do Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia (INPA), em Manaus. Tambm foram includos exemplares coletados mais recentemente pelos autores. Foram registradas 65 espcies de abelhas das orqudeas, incluindo um novo registro para o Brasil e dois para Roraima, alm de 49 espcies de abelhas sem ferro, sendo 21 novos registros para o Estado. As espcies do gnero Scaptotrigona no puderam ser includas porque estavam emprestadas para estudos taxonmicos. A explicao para tamanha riqueza de abelhas em um Estado relativamente pequeno como Roraima talvez possa ser atribuda ao mosaico de ambientes que o tornam nico na Amaznia, podendo ser encontrados desde florestas amaznicas com sua variantes, at campos e pantanais, alm de uma grande variao de relevo. Os dados obtidos nas duas colees estudadas revelam que a cobertura geogrfica em Roraima ainda bastante precria, pois, que a maioria das localidades amostradas esto concentradas em torno dos dois eixos principais que o cortam no sentido norte-sul que so o rio Branco e a rodovia BR 174. Por outro lado, extensas reas do Estado ainda continuam sem poder serem amostradas pois constituem reas indgenas, as quais apresentam uma srie de obstculos burocrticos e polticos a essa tarefa. Apoio: MCT/Inpa/PPI no. 05.51. FEMACT/MIRR. Palavras-chaves: Apidae, Euglossina, Meliponina, abelhas das orqudeas, abelhas sem ferro
733
AVANOS RECENTES NA SISTEMTICA E TAXONOMIA DE AUGOCHLORINI (HALICTINAE)

Rodrigo B. Gonalves Museu de Zoologia da USP Av. Nazare, 481, CEP 04263-000, Sao Paulo, SP, Brasil rbg@usp.br Augochlorini um grupo monofiltico que possui cerca de 520 espcies descritas e tem distribuio predominantemente Neotropical, com espcies derivadas chegando regio Nertica. Desde a ltima reviso genrica um novo gnero foi descrito e sete gneros foram ou esto sendo revisados, adicionando ao menos 30 espcies para a tribo. Trabalhos taxonmicos e catalogrficos recentes discordam em parte da ltima proposio revisionria, sugerindo que a taxonomia do grupo ainda no est estabilizada. Existem duas hipteses filogenticas baseadas em dados morfolgicos para o relacionamento dos txons em nvel de gnero. As topologias dessas hipteses so parcialmente conclusivas e conflitantes (apenas dois grupos de gneros corroborados). Alm disso notvel o elevado grau de homoplasia nos cladogramas, quando comparado com o grau obtido naqueles de outras tribos de abelhas, medida dada pelo ndice de reteno. Como tema de tese de doutoramento, objetiva-se testar as duas hipteses disponveis atravs da reanlise dos dados morfolgicos j levantados e da proposio de nova hiptese baseada em dados moleculares. Para a primeira anlise, as matrizes dos dois estudos foram compiladas integralmente e submetidas busca das rvores mais parcimoniosas utilizando os parmetros originais. Na segunda etapa foram modificadas a ordenao e a pesagem dos caracteres e variados os parmetros de busca nas matrizes. As topologias resultantes foram as mesmas ou menos resolvidas do que nos cladogramas originais e o ndce de reteno foi o mesmo em todas as anlises. Isto sugere uma forte estruturao das matrizes originais e um baixo poder explicativo de hipteses baseadas em caracteres morfolgicos. A segunda anlise, em andamento, visa gerar uma hiptese de relacionamento entre os gneros de Augochlorini empregando, pela primeira vez, caracteres moleculares. Para tanto, trs genes nucleares de cpia nica sero analisados. Por fim, os dados moleculares sero tambm integrados a dados morfolgicos em uma anlise combinada. Apoio: FAPESP Palavras-chaves: Halictidae, Filogenia, Taxonomia, Neotropical, Sistemtica
734
COMPARAO GENTICA ENTRE DIFERENTES ESPCIES DE Euglossa (HYMENOPTERA: APIDAE: EUGLOSSINI) BASEADA EM MARCADORES MOLECULARES
Giangarelli, D.C., Freiria, G.A., Colatrelli, O.P., Suzuki, K.M., S.C. Augusto., Sofia, S.H. *Departamento de Biologia, CCB. Universidade Estadual de Londrina Rodovia Celso Garcia Cid, Pr 445 km 380, Campus Universitrio dgiangarelli@hotmail.com Dentre as abelhas Euglossini, Euglossa o gnero que apresenta a maior diversidade de espcies (aproximadamente 104), distribudas em seis subgneros. Abelhas deste gnero apresentam tamanho de pequeno a mdio e tegumento metlico. At o presente, ainda so poucos os estudos empregando marcadores moleculares na investigao das relaes genticas de diferentes espcies e subgneros de Euglossa. Neste trabalho, marcadores PCR-RFLP e RAPD foram utilizados na investigao das relaes genticas de machos de 12 espcies de Euglossa (melanotricha, pleosticta, truncata, cordata, fimbriata, securigera, despecta, analis, cognata, imperialis, annectans e sapphirina), membros de 3 subgneros e 6 grupos distintos. Operrias de Apis mellifera e Melipona quadrisfaciata e machos de Eulaema nigrita e Eufriesea violacea foram empregados como grupos externos. Foram utilizados seis primers de RAPD, que produziram 289 locos. As anlises de PCR-RFLP envolveram as regies 16S, COI e COI-COII do mtDNA, cortadas com as endonucleases AseI, SspI e DraI, resultando em 99 fragmentos de restrio. Foram identificados 28 hapltipos distintos. Com base nos perfis eletroforticos, na maioria dos casos, os dois tipos de marcadores foram capazes de discriminar as diferentes espcies analisadas entre si. A. mellifera e M. quadrifasciata, seguidas por E. nigrita e E. violacea, apareceram na parte basal dos dendrogramas de similaridade gentica. Em um dendrograma gerado a partir de marcadores RAPD os maiores valores de bootstrap foram detectados entre os seguintes pares de espcies: 1)E. truncata + E. pleosticta; 2)E. cordata + E. fimbriata; 3)E. melanotricha + E. despecta; cada par compartilhando do mesmo subgnero e grupo de espcies. Os dados de PCRRFLP resultaram em um dendrograma no qual E. cordata aparece como grupo-irmo de E. pleosticta + E. truncata; agrupamento este pouco provvel, apesar do valor de bootstrap de 70.7%. Anlises futuras envolvendo outras regies mitocondriais devem contribuir para um maior entendimento das relaes genticas entre as espcies estudadas. Apoio: Fundao Araucria, FBPN, CNPq, PROPPG-UEL, Klabin S.A. Palavras-chaves: Abelhas, Euglossini, Euglossa, PCR-RFLP, RAPD
735
A APIFAUNA DO PARQUE ESTADUAL DO ITACOLOMI, OURO PRETO, MG

William de Oliveira Sabino *, Rudo de Paiva Ferreira, Yasmine Antonini. Universidade Federal de Ouro Preto, Instituto de Cincias Exatas e Biolgicas, Departamento de Cincias Biolgicas, Laboratrio de Biodiversidade. sabinoufop@yahoo.com.br Aproximadamente 3000 espcies de abelhas so encontradas no Brasil. Com o intuito de conhecer um pouco mais sobre essa diversidade, o presente trabalho teve como objetivo principal inventariar a apifauna da regio do Parque Estadual do Itacolomi (PEIT), em trs paisagens distintas: uma rea de mata fechada, uma rea mais aberta e outra de mata de altitude. As coletas foram quinzenais, sendo que em cada local foi traado um quadrante de 50X10m. Um total de 407 indivduos de 54 espcies, 25 gneros, e 5 famlias foi coletado. 380 indivduos foram coletados na rea mais aberta, 5 indivduos na rea de mata fechada e 22 indivduos na mata de altitude. Apenas 2 espcies ocorreram nos trs locais, 84,7% apenas na rea mais aberta, 1,7% apenas na mata de altitude, e nenhuma foi exclusiva da rea de mata fechada. O baixo nmero de abelhas registrado neste local provavelmente deve-se ao elevado porte das rvores, dificultando a metodologia de coleta. As maiores coletas foram registradas nos meses de Setembro a Novembro, com 46,3% do total de abelhas. Apidae foi a famlia mais coletada, correspondendo a 83,0% do total. Bombus atratus, com 66 indivduos, foi a espcie mais abundante dentre as nativas. As plantas visitadas correspondem a 29 espcies, perfazendo um total de 13 famlias, sendo Asteraceae a mais visitada, com um total de 183 abelhas coletadas. O PEIT apresenta um grande potencial em relao comunidade de abelhas por apresentar uma grande heterogeneidade ambiental oferecendo os recursos necessrios para as abelhas construrem seus ninhos e alimentarem a prole. Apoio: Palavras-chaves: Apifauna, Sazonalidade, Inventrio, Ouro Preto, PEIT
736
ABELHAS MELIPONINA (HYMENOPTERA, APIDAE) DA REGIO CENTRO-OESTE DO AMAP

Richardson Ferreira Frazo*, Arley Jos Silveira da Costa Mestrado Integrado em Desenvolvimento Regional, Universidade Federal do Amap; Ncleo de Estudos Cientficos e Tecnolgicos sobre Abelhas Regionais, Universidade Federal do Amap. Rod. Juscelino Kubitschek, KM-02 - Jardim Marco Zero - CEP 68.902-280 - Macap - AP - Brasil ric_frazoni@yahoo.com.br O Amap possui 72% de sua rea em terras indgenas e Unidades de Conservao, mas o centro-oeste do estado enfrenta presso de empresas de minerao e madeireiras, assentamentos agrcolas e pecuria. Comunidades de abelhas, em especial meliponneos, so importantes na compreenso da biogeografia e de interferncias antrpicas. Objetivo deste trabalho foi identificar a diversidade dos meliponneos da regio centro-oeste do Amap. A rea de estudo compreende assentamentos agrcolas no entorno do PARNA Tumucumaque entre os municpios de Pedra Branca do Amapar e Serra do Navio. Abelhas foram coletadas aleatoriamente na vegetao beira de ramais, vicinais, rodovias e em ninhos encontrados. Coletas ocorreram de 08:00h s 17:00h entre set-dez/2005. Os espcimes foram coletados e enviados ao NECTAR para identificao e armazenagem. A riqueza foi dada por Frieseomelitta aff. trichocerata, F. flavicornis; Melipona captiosa; M. compressipes; M. fuliginosa; M. fulva; M. lateralis; M. parensis; Nanotrigona punctata; Partamona ferreirai; P. vicina; Ptilotrigona lurida; Scaura gr. latitarsis; Tetragona gr. clavipes; Trigona cilipes; T. dallatorreana; T. fulviventris; T. pallens e T. williana. O reduzido nmero de espcies de meliponneos encontradas, comparado ao de outros estudos na Amaznia, pode ser um indcio do impacto da antropizao na regio Centro-Oeste do Amap. Apoio: Cooperao Tcnica Alem - GTZ Palavras-chaves: Meliponneos, Antropizao, Unidades de conservao, Biodiversidade, Amaznia
737
REVISO DAS ESPCIES DE Hylaeus FABRICIUS, 1793 (HYMENOPTERA, COLLETIDAE) PRESENTES NO ESTADO DE MINAS GERAIS, BRASIL
Rodolfo Csar Costa Arantes*, Fernando Amaral da Silveira Departamento de Zoologia, Instituto de Cincias Biolgicas - UFMG Av. Antnio Carlos, 6627 - Pampulha - Belo Horizonte - MG rodolfo2885@yahoo.com.br O gnero Hylaeus Fabricius, 1793 rene abelhas pequenas e esguias e o nico gnero da subfamlia Hylaeinae que ocorre em todos os continentes do mundo. Diferentemente da maioria das abelhas, as fmeas de Hylaeus no possuem aparato externo para o transporte de plen, que levado para o ninho no papo. No Brasil so reconhecidas 20 espcies, nenhuma das quais foi registrada em Minas Gerais (MG). Porm, apenas na coleo taxonmica da UFMG existem 93 exemplares coletados nesse estado. Um trabalho minucioso vem sendo feito para investigar quais espcies de Hylaeus ocorrem em MG e, para isso, cerca de sessenta caracteres morfolgicos vm sendo analisados, alm da distribuio geogrfica destas abelhas. Foram examinados os exemplares do acervo da UFMG e sero feitos estudos em indivduos de outras colees taxonmicas. Vinte e seis morfoespcies foram reconhecidas at o momento, dezesseis das quais tem se tentado identificar com o auxlio da nica chave taxonmica disponvel para as espcies neotropicais do gnero (Moure, J.S. 1960. Bol. Mus. Par. Emilio Goeldi 27), o restante continua sem nome e ser comparado com os holtipos de espcies descritas, em busca da correta identificao ou da descrio de novas espcies. Apoio: ProGrad - UFMG Palavras-chaves: Abelhas, Hylaeus, Colletidae, Taxonomia, Minas Gerais
738
DISTRIBUIO GEOGRFICA DAS ESPCIES BRASILEIRAS DO GNERO Megalopta SMITH 1853 (APIDAE: HALICTINAE)
Leandro Mattos Santos*, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo, Fernando A. Silveira Laboratrio de Biologia Comparada de Hymenoptera, Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paran; Laboratrio de Sistemtica e Ecologia de Abelhas, Departamento de Zoologia, Universidade Federal de Minas Gerais megalopta@gmail.com O gnero neotropical Megalopta encontra-se distribudo do Mxico at o norte da Argentina, com 27 espcies descritas, constituindo o grupo mais diverso de abelhas noturnas. A taxonomia do grupo considerada confusa por muitos. Portanto, uma reviso das espcies brasileiras encontra-se em fase inicial e dados preliminares sero apresentados. Novas informaes sobre a distribuio geogrfica das espcies brasileiras foram obtidas de material de colees entomolgicas das seguintes instituies: UFMG, UFPR, UFV, MZUSP e UFRJ. A identificao das espcies foi feita pela comparao com os tipos de espcies descritas por Vachal, depositados no Museu de Histria Natural de Paris, os de Friese, depositados no Museu de Zoologia da Universidade de Humboldt em Berlim , pela redescrio de Megalopta genalis feita por Schwarz e por comparao com espcimens identificados anteriormente como M. amoena pelo Pe. Moure, depositados na UFPR. Novos registros, tanto de espcies como de distribuio, aparecem no texto em negrito. Os resultados parciais mostram que no Brasil, onze espcies de Megalopta esto presentes nos seguintes estados: aegis (Vachal, 1904) [AL, DF, GO, MG, SP, TO,], aeneicollis Friese, 1926 [MA, MT, PA, RO], amoena (Spinola, 1851) [AL, AM, AP, BA, CE, DF, ES, GO, MA, MG, MT, PA, RJ, RO, RR, SP], cuprea Friese, 1911 [AM], fornix(Vachal, 1904) [AC, MA, MT, PA, RO], genalis Meade-Waldo, 1916 [AM], lecointei Friese, 1926 [PA], opacicollis Friese, 1926 [AM], purpurata Smith, 1879 [AM], sodalis (Vachal, 1904) [BA, ES, GO, PR, RJ, SC, SP], sulciventris Friese, 1926 [ES, PI]. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Abelhas noturnas, Megalopta, Halictinae, Taxonomia, Biogeografia
739
FILOGENIA E EVOLUO DO POLIMORFISMO CEFLICO EM Rhinocorynura SCHROTTKY (HALICTINAE, AUGOCHLORINI)

Rodrigo B. Gonalves, Gabriel A. R. Melo Museu de Zoologia da USP; Departamento de Zoologia da UFPR Av. Nazar, 481, 04263-000, So Paulo, SP goncalvesrb@yahoo.com.br Rhinocorynura um gnero monofiltico restrito Amrica do Sul. Dentre suas espcies apenas R. inflaticeps foi estudada com mais detalhe, tendo seu ninho descrito e reconhecido o polimorfismo ceflico nas fmeas atrelado ao comportamento parasocial. Este polimorfismo envolve uma diferenciao no tamanho corporal, nas propores estruturais da cabea e na morfologia do clpeo. Como parte de um estudo mais amplo da filogenia da tribo Augochlorini pelo autor snior, o gnero Rhinocorynura est sendo revisado e a morfologia das espcies sendo analisada utilizando tcnicas morfomtricas. At o momento, 345 espcimes foram analisados revelando oito espcies, quatro delas novas, cujas relaes filogenticas com base em caracteres morfolgicos so (R. crotonis ((R. sp.1 + R. sp.2) ((R. briseis + R. darwini + R. sp.3) (R. inflaticeps + R. sp.4)))). Todas as espcies apresentam variao de tamanho e nas propores estruturais da cabea, porm a diferenciao na morfologia do clpeo surgiu na linhagem ancestral originria do clado R. inflaticeps e R. sp.4. Para melhor compreender essa variao foi utilizada uma anlise morfomtrica, em que medidas de 11 distncias da cabea, de 16 exemplares de cada espcie, foram submetidas a anlise de componentes principais. Para R. inflaticeps, R. sp.4 e em menor grau R. sp.1, os dois primeiros componentes mostram duas nuvens de pontos (representando os indivduos) indicando um possvel dimorfismo, enquanto que para as demais espcies os pontos apresentam-se mais coesos indicando variao contnua. Ainda possvel visualizar uma maior disperso pontual entre as fmeas maiores do que entre fmeas menores. Todas as medidas esto correlacionadas com o primeiro componente indicando uma forte influncia do tamanho. As variveis mais correlacionadas com o segundo componente foram quilha mandibular, rea supraclipeal, e fronte. Estes dados corroboram a hiptese do surgimento de dimorfismo a partir de variaes polimrficas. Apoio: Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo Palavras-chaves: taxonomia, neotropical, morfometria, polimorfismo, filogenia
740
PHYLOGENETIC RELATIONSHIPS AMONG SPECIES OF GENUS Scaura (HYMENOPTERA: MELIPONINI) INFERRED FROM MTDNA SEQUENCES
Alayne Magalhes Trindade Domingues*, Sidnei Mateus, Maria Cristina Arias
Universidade de So Paulo USP; Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto USP Rua do Mato, N 277 / Sala 320, 05508-090, So Paulo, Brasil alaynedomingues@usp.br
The genus Scaura contains species of stingless bees of small size and dark color pattern. The group presents variation in the nesting behavior including several types of cavities as tree hollows or within active termite nests. Currently, four species are recognized: Scaura latitarsis, S. atlantica, S. longula e S. tenuis. This genus is of particular interest in terms of taxonomy and phylogenetic relationships. However all the literature are based on morphology and behavior data. The present work aim at to establish the pattern phylogenetic in the genus Scaura by using molecular approaches as a new contribution to this bee group. Samples were collected from nests in different regions of Brazil. Five mitochondrial genes (12S, 16S, CO I, CO II and Cyt b) were amplified and sequenced for Scaura species and Schwarzula timida and Schwarziana quadripunctata (outgroups). Phylogenetic relationships among the included taxa were inferred using neighbor-joining and maximum parsimony methods. The results show high A+T content. The tree obtain allowed discrimination of species closely related, making part the same monophyletic group. Further studies using more molecular techniques will contribute to a better understanding of the mechanisms involved in the evolution and to contribute to the correct taxonomic classification of the genus. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Phylogenetic, Scaura, mtDNA, sequences, Meliponini
741
FIRST RECORD OF OBLIGATORY CLEPTOPARASITISM IN ANDRENINE BEES (HYMENOPTERA, APIDAE)

Gabriel Augusto Rodrigues de Melo, Kelli dos Santos Ramos*
Universidade Federal do Paran - UFPR Departamento de Zoologia, Caixa Postal 19020, 81531-980, Curitiba, Brazil kellisramos@yahoo.com.br Obligatory cleptoparasitism has evolved several times independently among bees, and only two large groups lacked known cases, the Andreninae and the Mellitinae. Here we present the first known case of obligatory cleptoparasitism in the Andreninae. The new species, known from two females collected in malaise trap in Morretes, Paran, Brazil, possesses numerous morphological features associated with obligatory cleptoparasistism, such as complete reduction of the pollen collecting apparatus, strong and deep integument punctation, mid femur with rounded lower margin, tergum 5 elongate and lacking a pre-pygidial fimbria. The pygidial and basitibial plates, however, are relatively well developed, indicating that change to obligatory parasitism evolved only recently in the lineage history. The species also exhibits additional features usually associated with males: labral plate with a deep emargination along the distal border, simple mandibles, short 1st flagellomere, yellow maculae on the clypeus and lower parocular area, facial foveae and lateral foveae of tergum 2 reduced, and a glabrous basitibial plate. Although the placement of the new species in Protandrenini is unproblematic, its position within the tribe remains obscure due to the morphological changes associated with cleptoparasitism, as well as due to lack of conspecific males. Among the current lineages of Protandrenini, proximity with Rhophitulus is supported by the presence of two submarginal cells in the forewing and possession of a microsculptured hairy metapostnotum. The generic classification of the tribe, however, is quite precarious, with genera delimited too broadly and likely to represent poly- and paraphyletic assemblages. Therefore, further studies into the tribes phylogeny are required to better understand the position of this new parasitic lineage. Apoio: CAPES Palavras-chaves: Andreninae, Neotropical, New species, Protandrenini, South America
742
DIFERENCIAO DE 24 SUBESPCIES DE Apis mellifera POR TCNICA DE MORFOMETRIA GEOMTRICA

Marina Lopes Grassi*, Vanessa de Andrade Bugalho, Tiago Mauricio Francoy, Lionel Segui Gonalves Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto - USP Avenida Bandeirantes 3900, 14040-901 Ribeiro Preto, Brasil marinalg@usp.br Devido a sua ampla distribuio geogrfica as abelhas Apis mellifera apresentam inmeras diferenciaes comportamentais e ecolgicas, que as possibilitam habitar os mais variados ambientes. Uma diversificada gama de tcnicas j foram desenvolvidas para possibilitar a diferenciao destas subspcies, porm, muitas so demoradas e dispendiosas. Buscando a melhora neste processo e a diferenciao das subespcies de Apis mellifera , decidimos aplicar a tcnica de morfometria geomtrica, mediante a utilizao de pacotes de softwares disponiveis na internet, para a anlise quanto a geometria do formato das nervuras das asas. Foram utilizadas 24 subespcies de Apis mellifera que dispomos para estudo morfomtrico foram previamente montadas entre duas lminas de microscopia, fotografadas com cmera digital acoplada a um estereomicroscpio e armazenadas de modo digital. Aps a realizao das anlises discriminantes, das 34 deformaes relativas geradas, 32 contribuiram significantemente (p<0.05) para a discriminao dos grupos (Wilks = 0,00000001; p = 0,0000001) com a distino correta de 94% das amostras dentro do seu respectivo grupo. Os testes de validao cruzada, de acordo com as equaes geradas a partir das anlises discriminantes, apresentaram xito de 70,7% de acerto na classificao das asas como pertencentes aos seus respectivos grupos, sendo que a maior parte dos indivduos foram classificados entre 99% a 100% de probabilidade de classificao dentro de seus grupos. Com base nos resultados obtidos consideramos ser esta tcnica de muita utilidade nos trabalhos envolvendo morfometria de abelhas pela sua praticidade na identificao e classificao de abelhas . Por outro lado, trata-se de um mtodo rpido e pouco dispendioso, uma vez que a morfometria das asas permite, em apenas um dia, a identificao das abelhas de vrias colmias, diferentemente das tcnicas tradicionais que requerem muito mais tempo. Apoio: CAPES e CNPq Palavras-chaves: Apis mellifera, Asas, Morfometria, subespcies
743
NOTES ON THE BEE GENUS Centris: TAXONOMY, DIAGNOSIS AND GEOGRAPHIC DISTRIBUTION OF THE SPECIES OF THE GROUP hyptidis (HYMENOPTERA: APIDAE: CENTRIDINI)
Felipe Rodrigo Vivallo Martnez-, Gabriel Augusto Rodrigues de Melo Pontificia Universidad Catlica de Valparaso-Chile; Universidade Federal do Paran, Curitiba-PR UFPR rea de Concentrao em Entomologia, Universidade Federal do Paran, caixa postal 19020; CEP 81531-980, Curitiba, Paran, Brasil fvivallo@yahoo.com The group hyptidis is a small ensemble of bees distributed in relatively dry areas in northeastern and central Brazil and northeastern Argentina, associated mainly with flowers of Scrophulariaceae as oil source. This group is formed by the species Centris hyptidis Ducke, distributed in the Brazilian Caatinga (States of Cear, Rio Grande do Norte, Pernambuco, Paraba, Bahia, Tocantins, Gois and Minas Gerais), C. hyptidoides Roig-Alsina in the Chaco (Brazil: Mato Grosso do Sul; Argentina: Formosa), and a previously unknown species distributed in central Brazil (Gois). The females of the group hyptidis present a unique morphological character within the genus: the almost complete reduction of the secondary comb of the elaiospathes of fore basitarsi, which are covered externally with abundant setae of flattened apex, used to grasp the epithelial elaiophores, especially of flowers of the genus Angelonia. The males have the scape and 1st flagellomere subequal in length and the long and abundant pilosity in the lateral areas of sternum 5 form a semicircular comb. A basal laminar projection in the fore and mid trochanters is a feature present in both sexes. These characters suggest that the group is a monophyletic unit, despite the uncertainties as regards the relationships with other groups of species (or subgenera). In the literature it is possible to find the group hyptidis included in the subgenera Centris s. str., Paracentris, Ptilocentris, Ptilotopus, and Wagenknechtia. Unfortunately, there is no published study that strongly supports the relationships of the group with any of the subgenera mentioned above. Some morphological characters, however, suggest that it belongs to an independent lineage, probably close to Wagenknechtia, with which it shares some morphological characters, especially of females. The females of Centris hyptidis and C. hyptidoides can be identified by the secondary posterior giant setae placed beside the primary anterior comb of fore elaiospathes (present in C. hyptidoides, absent in C. hyptidis), the length of forelegs (elongated in C. hyptidis, normal in C. hyptidoides) and by the pubescence of tergum 4 (yellow in C. hyptidoides, black in C. hyptidis). The males of these species are very difficult to distinguish, being the band of yellow pilosity of tergum 1 (interrupted in the middle in C. hyptidis, uninterrupted in C. hyptidoides) and the length of the 1st flagellomere reliable distinguishing features. On the other hand, the male and the female of the new species are easily recognized by the bands of orange pilosity of the metasoma, the yellowish pubescence of hind legs and the triangular black spot on the clypeus present in both sexes. Apoio: CNPq Palavras-chaves: Centris hyptidis, Centris hyptidoides, Centridini, Apidae, oil-collecting bees
744
USO SUSTENTVEL DE ABELHAS
745
MELIPONICULTURA E GERAO DE RENDA EM BOA VISTA DO RAMOS AM

Ana Laura B. Mantovani*, Jernimo K. Villas-Bas Programa Regional de Ps-Graduao em Desenvolvimento e Meio Ambiente PRODEMA; Universidade Federal da Paraba - UFPB Caixa Postal 5122 CEP 58051-970 Joo Pessoa - PB aninha_eco@yahoo.com.br A meliponicultura tem sido considerada atividade de grande potencial para a gerao de renda em comunidades rurais na Amaznia. No entanto, so escassos os estudos que descrevam a efetividade econmica da produo e venda de mel de abelhas sem ferro. Este trabalho teve como objetivo avaliar a participao do mel na renda das famlias meliponicultoras integrantes da ACAI Associao dos Criadores de Abelhas Indgenas da Amaznia, fundada em 2002 em parceria com o Instituto Iraquara no municpio de Boa Vista do Ramos (AM). Na ocasio do estudo, a ACAI contava com 98 famlias associadas, distribudas em 17 comunidades, das quais 47, de 15 comunidades, foram entrevistadas. Os dados foram obtidos por meio da aplicao de questionrio semi-estruturado entre janeiro e fevereiro de 2006, e referem-se produo obtida na safra de 2005. Aproximadamente 75% das famlias entrevistadas produziram mel, totalizando 1205,1 kg, com uma mdia de produo de 34,43 kg/famlia. O quilo foi vendido a R$ 15,00 e gerou uma renda mdia anual de R$ 516,45, proporcional a um acrscimo mdio de 10,45% na renda mensal. Foi detectada considervel disparidade nas rendas declaradas - que oscilam entre R$1000,00 e R$50,00, e representam as diversas condies socioeconmicas das famlias associadas, sendo algumas praticamente sub-existentes e outras engajadas em formas de produo agropecurias. A produo de mel por famlia tambm oscila consideravelmente 257 kg e 1 kg, refletindo na renda mdia mensal a variao de 150% a 0, 27%. As disparidades de produo esto relacionadas, alm do nmero de colnias criadas e qualidade de manejo, com articulaes logsticas com a associao. Geralmente, famlias residentes em comunidades distantes da sede do municpio so prejudicadas pelo auxilio tcnico menos eficiente no que se refere a: fornecimento de materiais, principalmente melgueiras na poca de produo; colheita; e transporte do produto. Apoio: Palavras-chaves: meliponicultura, Amazonas, gerao de renda
746
ENSINO DE BIOLOGIA: UMA PROPOSTA DE VISITA MONITORADA SOBRE O TEMA ABELHAS MELIPONNEAS, NO CAMPUS DA FUNDAO SANTO ANDR
Natlia Brianezi de Almeida*, Mrcia Zorello Laporta Centro Universitrio Fundao Santo Andr Av. Prncipe de Gales, 821 - Bairro Prncipe de Gales - Santo Andr - SP - Brasil na_brianezi@hotmail.com Plantas e os insetos polinizadores, como os meliponneos, tm papel fundamental na manuteno da vida no ambiente terrestre. Estudos sobre esses insetos tm grande relevncia pois, no Brasil, muitas espcies esto ameaadas de extino em conseqncia das alteraes ambientais como uso indiscriminado de agrotxicos, busca predatria de mel e desmatamentos. Atividades que possibilitem conhecer as abelhas brasileiras e seu papel na manuteno da riqussima flora nativa podem desenvolver atitudes responsveis perante o meio ambiente. O objetivo foi elaborar um roteiro de visita monitorada, enfocando as caractersticas das abelhas brasileiras presentes no campus do CUFSA, de forma a possibilitar, a alunos e professores da rede pblica, o conhecimento desses insetos e de sua importncia para os ecossistemas. O roteiro incluiu uma trilha monitorada com observao das colnias e de plantas utilizadas por meliponneos, e observaes em laboratrio relativas morfologia, desenvolvimento e ecologia desses insetos, atividades desenvolvidas com apoio de manuais elaborados para professores e para monitores. A atividade foi aplicada a alunos da 6a srie do E. F. que fizeram questionamentos, colocaram suas idias e participaram ativamente sendo considerada bastante proveitosa pelo professor participante. De uma forma simples e descontrada, os alunos aprenderam um pouco sobre o mundo das abelhas, a importncia da conservao e a diversidade de plantas existentes no Brasil, contribuindo para o desenvolvimento de atitudes preservacionistas e condizentes com os principais conceitos do desenvolvimento sustentado. Apoio: Centro Universitrio Fundao Santo Andr (Programa de Iniciao Cientfica) Palavras-chaves: Meliponneos, Educao Ambiental, Visita Monitorada
747
DIAGNSTICO SCIO-ECONMICO DAS FAMLIAS MELIPONICULTORAS DE BOA VISTA DO RAMOS AM

Ana Laura B. Mantovani*, Jernimo K. Villas-Bas Programa Regional de Ps-Graduao em Desenvolvimento e Meio Ambiente PRODEMA. Universidade Federal da Paraba - UFPB Caixa Postal 5122 CEP 58051-970 - Joo Pessoa PB aninha_eco@yahoo.com.br A fim de contextualizar as condies de vida dos meliponicultores de Boa Vista do Ramos (AM) foi realizado com as famlias integrantes da ACAI - Associao de Criadores de Abelhas Indgenas da Amaznia, um diagnstico scio-econmico. Os dados foram coletados entre janeiro e fevereiro de 2006, por meio de questionrio semi-estruturado aplicado a 47 meliponicultores dentre os 98 cadastrados na associao. Foram includos associados residentes na sede do municpio e em comunidades do interior. Geralmente de palafita, poucas residncias possuem instalaes sanitrias (15,5%) sendo comum a utilizao do banheiro-seco. A gua para uso domstico retirada de poos (70%) chuva, rio ou cacimbas (30%). Mesmo onde h coleta pblica, queimar lixo prtica comum, realizada por 93,6% dos entrevistados. Vidros e latas so enterrados (25,5%) ou jogados na mata (4,25%). A rede pblica de energia atende aos residentes da sede do municpio (27,6%). No interior, utiliza-se gerador individual (6,4%) ou comunitrio (32%), alm de lamparinas e velas (34%). Como combustvel domstico so utilizados lenha (28%), gs de botijo (9%) ou ambos (63%). As mulheres representaram 23,4% dos meliponicultores abordados. 94% dos entrevistados encontram-se na faixa etria potencialmente ativa (15-64 anos) com escolaridade restrita ao Ensino Fundamental incompleto (66%). Mais de 70% dos meliponicultores tem na agricultura, extrativismo e pesca suas principais ocupaes. Destes, 30% dedicam-se exclusivamente produo de subsistncia. Os demais so pecuaristas, aposentados ou funcionrios pblicos. A renda mdia mensal de 68% dos entrevistados de at R$400,00, incluindo auxlios governamentais, recebido por 48,9% das famlias. A criao de abelhas sem ferro tem proporcionado aos integrantes da ACAI renda extra. A realizao de outros diagnsticos, a intervalos regulares de tempo, permitir acompanhar os investimentos realizados e mudanas na qualidade de vida local. Apoio: PRODEMA; UFPB Palavras-chaves: meliponicultura, Amazonas, Diagnstico scio-econmico
748
USO DO MEL DE ABELHA POR MORADORES DO BAIRRO DO LAGUINHO, MACAP-AP: UM ESTUDO ETNOCIENTFICO
Eliane Rocha Rodrigues* , Lorena Oliveira de Souza , Daniel de S Cavalcante , Arley Jos Silveira da Costa Ncleo de Estudos Cientficos e Tecnolgicos sobre Abelhas Regionais da Universidade Federal do Amap; Mestrado Integrado em Desenvolvimento Regional; UNIFAP Rod. J.K., Km 02, UNIFAP, PROPESPG, NECTAR, Bloco I, Macap-AP, 68902-280 erocharodrigues@yahoo.com.br O uso tradicional do mel comum em diversas localidades e est associado s formas de apreenso da realidade pelas comunidades. Assim, este trabalho busca compreender o conhecimento tradicional relativo ao uso do mel de abelha pelos moradores do bairro Laguinho, cuja origem remonta aos negros transferidos da rea central de Macap-AP. Cinco moradores, sendo quatro mulheres (entre 39 e 58 anos) e um homem (44 anos) foram individualmente entrevistados. As entrevistas semi-estruturadas foram gravadas e as transcries depositadas no NECTAR/UNIFAP. As anlises registraram a maneira como os moradores percebem, usam, aprimoram e transmitem seus conhecimentos sobre o mel. Conhecimento sobre o mel est presente em todos os entrevistados que relatam um domnio do gnero feminino sobre a confeco de remdios. O conhecimento a respeito do mel transmitido de gerao para gerao atrelado s atividades cotidianas. Distinguem-se os usos alimentar, esttico e medicinal, sendo este o mais usado. O mel pode ser utilizado desacompanhado como laxativo, com ovo de galinha como fortificante ou associado com andiroba, copaba, alho, algodo, urucum, cebola, jata (casca) de forma profiltica ou curativa para doenas respiratrias. Apoio: PROBIC/UNIFAP Palavras-chaves: Conhecimento tradicional, medicina popular, produtos apcolas, morador urbano, etnocincia
749
AVALIAO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E CICATRIZANTE DE GIS CONTENDO EXTRATO PADRONIZADO DE PRPOLIS EFICCIA PR-CLNICA E CLNICA
Andresa A. Berretta; Juliana Maldonado Marchetti Faculdade de Cincias Farmacuticas de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto, SP, Brasil. labandresa@apisflora.com.br As leses por queimaduras so a terceira causa de morte acidental em todas as faixas etrias, sendo que 75% dessas leses resultam da ao da vtima e ocorrem no ambiente domiciliar. A prpolis, produto elaborado pelas abelhas, apresenta potencial antimicrobiano, cicatrizante, etc. Assim, foram desenvolvidos gis termorreversveis contendo extrato padronizado de prpolis (EPP-AF) a 1,2%, 2,4% e 3,6%, fornecido pela Apis Flora Ltda (Pedido Patente PI0405483-0). O objetivo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro e a reduo do tempo de cicatrizao in vivo. Avaliou-se a atividade antimicrobiana atravs da difuso em agar e a concentrao inibitria mnima (CIM) por microdiluio em microplacas, frente aos microrganismos Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus e Pseudomonas aeruginosa. A atividade cicatrizante foi avaliada em incises cirrgicas no dorso de ratos wistar e em reas doadoras de pacientes queimados (Unidade de Queimados, HC-FMRPUSP). Os resultados demonstraram que os extratos de prpolis, bem como os gis demonstraram atividade antimicrobiana atravs das metodologias empregadas, sendo que a CIM foi de 50 e 200 ug/ mL, respectivamente, para S. aureus e P. aeruginosa. Observou-se que a leso provocada nos animais no tratados obtm a cicatrizao da rea em sete dias. Com a aplicao do gel contendo 3,6% de prpolis a recomposio epitelial e a melhor organizao das fibras do tecido conjuntivo se deu em trs dias de tratamento. Quanto pesquisa clnica, observou-se que o tempo de cicatrizao com a nitrofurazona (medicamento referncia) foi de 10,18 2,48 dias, enquanto com o gel de prpolis foi de 9,75 2,11. Palavras-chaves: queimaduras, gel

VIII Encontro Sobre Abelhas

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

VIII Encontro Sobre Abelhas

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

ii

Paulo Nogueira-Neto, o nosso homenageado

MOLECULAR MAKINGS OF MEMORY: NEUREXIN ANd NEUROLIGIN IN THE HONEY BEE

INTEROPERABILITY WITHIN THE INTERNATIONAL POLLINATOR INITIATIVE

REdE BRASILEIRA dE COLEES dE INSETOS POLINIZAdORES

A REdE TEMTICA dE POLINIZAdORES dA IABN

INSTRUMENTAO VIRTUAL PARA PESQUISAS COM UdIO E VdEO EM MELIPONNEOS

MONITORAMENTO dE COLNIAS dE ABELHAS AFRICANIZAdAS NAS ATIVIdAdES dE ENXAMEAO E FORRAGEAMENTO

SiMpsiO 2 HOW tO Find a FLOWer SMaLL Brains ResOLvinG COMpLeX TasKs

VISUALLY GUIdEd NAVIGATION IN HONEY BEES

HOW HONEY BEES LEARN ANd PROCESS COMPLEX FLORAL SCENTS

INdIVIdUAL ANd SOCIAL LEARNING IN THE STINGLESS BEE MELIPONA QUAdRIFASCIATA

OLFACTORY INFORMATION USE ANd GUIdANCE OF NESTMATES TO FOOd IN STINGLESS BEES

Coordenadores: David De Jong, Dejair Message

SiMpsiO 3 PatOLOGia de AbeLhas

METAGENOMIC ANALYSIS OF MICROORGANISMS IN HONEY BEES FROM BRAZIL

EFEITOS PROVOCAdOS POR AGROTXICOS EM ABELHAS NO BRASIL 41

DOENAS dE ABELHAS NO SUL dO BRASIL

NEW ANd EXOTIC dISEASE THREATS FOR BRAZILIAN BEES

SiMpsiO 4 GenOMics, prOteOMics and MOLecULar evOLUtiOn

NATURAL EXPERIMENTS IN dEVELOPMENTAL BIOLOGY: THE CASE OF HONEY BEE POLYPHENISM

OdORANT RECEPTOR EXPRESSION IN HONEYBEES: A CASE FOR ENVIRONMENTALLY dRIVEN PLASTICITY?

SiMpsiO 5 POLiniZaO na AGricULtUra: UMa abOrdaGeM ecOssistMica

RISK ASSESSMENT OF GM COTTON TO FLOWER VISITORS IN BRAZIL 65

SiMpsiO 6 Apresentaes Orais dOs Ps GradUandOs dO PrOGraMa de EntOMOLOGia - FFCLRP-USP

RECONHECIMENTO EM ABELHA SEM FERRO: UMA ABORdAGEM QUMICA E COMPORTAMENTAL

SiMpsiO 7 BiOLOGia e Gentica de AbeLhas seM FerrO

SEX ANd CASTE IN AMAZONIAN MELIPONA BEES

Carlos Gustavo Nunes-Silva, Spartaco Astolfi-Filho, Gislene Almeida Carvalho-Zilse

AdAPTAES dAS ABELHAS SEM FERRO AO CLIMA TEMPERAdO dO SUL dO BRASIL

NINHOS dE MELIPONNEOS EM UM REMANESCENTE dE MATA COM ARAUCRIA NO RIO GRANdE dO SUL

Coordenadores: Betina Blochtein, Giorgio Cristino Venturieri

SiMpsiO 8 MeLipOnicULtUra SUstentveL

SOBRE SEXO E CASTAS dAS ABELHAS MELIPONA

Jos Javier G. Quezada-Eun, Jorge A. Gonzalez-Acereto, Luis A. Medina-Medina

POTENCIAL NECTARFERO dO AAZEIRO (EUTERPE OLERACEA MART. ARECACEAE) NA AMAZONIA ORIENTAL

Giorgio C. Venturieri, Milene S. Souza, Charles A. B. Pereira, Silvane T. Rodrigues

Coordenadores: Carlos Alberto Garfalo, Isabel Alves dos Santos

SiMpsiO 9 NinhOs ArMadiLha

A UTILIZAO dE NINHOS-ARMAdILHA NO ESTUdO dA ESTRUTURA SOCIOGENTICA dE NINHOS dE EUGLOSSINI (HYMENOPTERA: APIdAE)

A ORIENTAO E O SOMBREAMENTO dOS NINHOS-ARMAdILHA INFLUENCIAM AS TAXAS dE CAPTURA?

BIOLOGIA dA NIdIFICAO EM HYLAEUS (COLLETIdAE)

ABELHAS (HYMENOPTERA, APOIdEA) NIdIFICANdO EM NINHOSARMAdILHA NA ESTAO ECOLGICA dE CAETETUS, GLIA, SP

SiMpsiO 10 CaUsas, cOnseQncias e cOntrOLe de enXaMeaes eM Apis mellifera

ENXAMEAO INdUZIdA POR AUMENTO dE TEMPERATURA EM ABELHAS AFRICANIZAdAS

SiMpsiO 11 COMpOrtaMentO de abeLhas seM FerrO

THE ROLE OF LEKS IN THE REPROdUCTION OF STINGLESS BEES

SiMpsiO 12 FerraMentas para avaLiaO da biOdiversidade eM abeLhas

A MORFOMETRIA GEOMTRICA dE ASAS E A IdENTIFICAO dOS MELIPONINI

MOLECULAR ECOLOGY OF THE STINGLESS BEE NANNOTRIGONA TESTACEICORNIS

REVISO dAS ANLISES dE HIdROCARBONETOS CUTICULARES EM ABELHAS SEM FERRO

Laurence Packer, Jason Gibbs, Cory Sheffield, Peter Kevan

Coordenadores: Celso Feitosa Martins, Maria Cristina Gaglianone

SiMpsiO 13 BiOLOGia de AbeLhas SOLitrias

DINMICA TEMPORAL E ESPACIAL dE ABELHAS SOLITRIAS NO SEMI-RIdO dO NORdESTE dO BRASIL

Marilda Cortopassi-Laurino, Lvia Leal Dornelles, Anne Zillikens, Josefina Steiner

SiMpsiO 14 BiOGeOGraFia de abeLhas eM reas abertas na AMrica dO SUL

BIOGEOGRAFIA dE ABELHAS dE REAS ABERTAS NA AMRICA dO SUL: UMA RETROSPECTIVA

BIOGEOGRAPHY OF THE XEROMELISSINAE (HYMENOPTERA: COLLETIdAE)

346 354 365

EXPRESSO dE CAdERINAS EM GNAdAS dE APIS MELLIFERA

A VIA dE SINALIZAO dE INSULINA EM APIS MELLIFERA

SiMpsiO 16 AvanOs ObtidOs aps 10 anOs da DecLaraO de SO PaULO sObre POLiniZadOres

OS CURSOS INTERNACIONAIS SOBRE POLINIZAO NO BRASIL