I.

INTRODUCCIN

En Ecuador, los cultivos de banano, hortalizas, leguminosas, gramneas, ornamentales y frutales y otros, son infestados por los nemtodos causantes de prdidas de produccin. Estos daos no solo se refieren a la reduccin de las cosechas si no tambin a prdidas de la calidad comercial, reduccin de la asimilacin de agua y nutrientes y al aumento de los daos por los complejos de enfermedades con patgenos del suelo. En suelos cultivados, los nemtodos presentan generalmente una distribucin en conglomerados; pero de manera particular se pueden encontrar en la zona de las races y otros tejidos de las plantas hospederas. Debido a que los nemtodos poseen un movimiento limitado en el suelo, las poblaciones generalmente se mantienen poco variables y se incrementan cada ciclo de cultivo, si los hospederos son apropiados para su desarrollo. Se estima que la mayor cantidad de ellos se encuentra en los primeros 30 cm de la superficie del suelo Entre los nemtodos que causan grandes prdidas econmicas se encuentran los agalladores de races endoparsitos Meloidogyne spp y Rotylenchulus reniformis. Los nemtodos del gnero Meloidogyne generalmente aparecen en la mayora de todas las plantaciones, estas especies de nematodos les afecta la inundacin del suelo, sin embargo no se conoce el tiempo en que desaparecen, puesto que se ha observado que en campos sobresaturados de agua, despus de un corto perodo nuevamente resurgen. R. reniformis es otro nemtodo que tiene muchos hospederos entre ellos la soya, tomate pimiento, frjol, papaya, pia y se encuentra en todas las regiones tropicales y subtropicales. Las densidades poblacionales son alarmantes en los ltimos dos aos. Una de las caractersticas de estos nemtodos es que pueden vivir en suelos hmedos y aparentemente secos. Sin embargo, se desconoce el tiempo que el nemtodo puede sobrevivir en suelo seco y tambin inundado. En la actualidad se estn buscando otras alternativas para reducir las poblaciones de nemtodos sin el uso de qumicos, que estn ocasionando un gran impacto ecolgico por su mal manejo, por esta causa se estn realizando varios tipos de investigaciones con el propsito de mejorar la situacin actual de nuestro medio natural; por lo cual, la importancia de esta investigacin es observar lo que sucede con las poblaciones

deMeloidogyne spp y R. reniformis con diferentes condiciones de humedad en el suelo en diferentes fases de tiempo. Considerando que ciertos nemtodos son sensibles a condiciones de inundacin y sequa se utilizarn estos mtodos para reducir sus poblaciones, en diferentes fases de tiempo, para poder observar cual sera el tiempo necesario para su control. Conociendo con detalle el efecto de stos dos factores abiticos en la reduccin de la densidad poblacional de los dos gneros de nematodos mencionados, se podr utilizar sta alternativa para su manejo, en cultivos de ciclo corto. OBJETIVOS. 1. Determinar el tiempo de permanencia de humedad y secamiento del suelo que permita reducir la densidad poblacional de Meloidogyne spp y Rotylenchulus reniformis. 2. y Determinar el remanente de las densidades poblacionales de Meloidogyne spp R. reniformis, mediante bioensayo despus de evaluar los tratamientos.

HIPTESIS Con el uso de controles fsicos (humedad y sequedad), se reduce la incidencia poblacional de Meloidogyne spp y Rotylenchulus reniformis.

II. REVISIN DE LITERATURA

2.1. Caractersticas de Meloidogyne spp.

Segn Guiran (1979), los nemtodos de este gnero son endoparsitos sedentarios presentan dimorfismo sexual bien marcado entre hembras y machos. Estos nemtodos pertenecen a la siguiente clasificacin taxonmica. Clase Orden Superfamilia Familia Subfamilia Gnero Especie Secermentea Tylenchida Tylenchoidea Meloidogynidae Meloidogyninae Meloidogyne spp.

Los nemtodos denominados fitoparsitos se alimentan de las plantas y estn provistos por una especie de aguja hipodrmica en miniatura llamada estilete que le sirve para succionar la savia, perfora con el estilete la pared de una clula y absorbe su contenido; la succin es iniciada por contracciones de un bulbo muscular situado en el esfago del nemtodo. El dao ocurre en diversas formas, la planta se debilita al interrumpirse el flujo de nutrientes, se altera la conformacin de los tejidos y disminuye la asimilacin, se liberan enzimas secretadas por el nemtodo, por lo tanto existen cambios fisiolgicos e histolgicos (Eguiguren y Defaz, 1992).

Saiguda citado por Lordello (1973), sostiene que las hembras de Meloidogyne spp produce un promedio de 400 a 500 huevos; sin embargo hay registros de hembras que ovipositan hasta 2000 huevos.

Chistie citado por Arregui (2002), considera que para existir una eclosin de larvas o se inicie el proceso embriolgico de huevos en la matriz es necesario un estimulo con temperaturas de 20 C, humedad y oxigeno; los mismos que estn presentes cuando se cultiva una planta, siendo esta la razn por la cual en cualquier momento una planta susceptible puede ser infectada.

Es un nemtodo endoparsito sedentario, el primer estado juvenil muda al interior del huevo, formando el segundo estado juvenil que es el que eclosiona, Luego que este se establece en un hospedero adecuado, hay un periodo de alimentacin que dura entre tres a

ocho semanas, luego de las cuales muda rpidamente tres veces y se desarrolla el adulto. El segundo estado juvenil es mvil y vermiforme, los restantes estados son sedentarios y con forma de saco. Los machos son mviles, vermiformes y no se alimentan, luego de la cuarta muda abandonan las races. Cuando las plantas estn bajo estrs, los juveniles producen una cantidad mayor de machos, que al no alimentarse liberan a la planta del estrs, siendo un muy buen mecanismo de sobre vivencia (Bayer, 2002).

Meloidogyne spp. causa hinchazones o agallas en las races. Estos se forman por el conjunto de clulas gigantes como consecuencia de una hipertrofia e hiperplasia provocada por el segundo estado juvenil (J2) del nemtodo al inyectar enzimas hidrolticas en el tejido. Las agallas causadas por el nemtodo se diferencian por los ndulos bacterianos porque estos ltimos se desprenden con facilidad al tocarlos con las yemas de los dedos (Trivio, 2004). Meloidogyne spp. o nemtodo agallador de races es una de las plagas de mayor importancia econmica en Ecuador, est distribuido en todos los estratos geogrficos y M. incognita es la especie ms abundante, con el 80 % de incidencia; las poblaciones ms altas se encuentran en las reas climticas clidas incluyendo los valles altos de la Sierra. (Trivio, 2004).

Eguiguren (1992), manifiesta que M incognita es un nemtodo patognico de los cultivos de Ecuador, produce nudosidades en el sistema radical, plantas achaparradas, clorticas con marchitamiento incipiente, niveles altos de infestacin que reduce hasta un 70 % la produccin de tomate, est ampliamente adaptado a una gran diversidad de hospederos que crecen desde el nivel de mar hasta los 1600 m.s.n.m, en todo tipo de suelo y clima desde muy seco (40 mm de precipitacin) hasta muy hmedos (3000 mm de precipitacin) y con temperaturas que varan entre 14 a 30 C

Segn Sasser (1979), a los nemtodos del gnero Meloidogyne se los conoce como agalladores de races y que son los de mayor importancia econmica en el mundo, esto se debe a su patogenicidad, amplia distribucin geogrfica, capacidad de adaptacin a una enorme variedad de agroecosistema, amplio rango de hospederos y un alto potencial de reproduccin; caracterstica que le permite sobrevivir bajo las condiciones ms adversas.

Segn (Taylor y Sasser, 1983) citado por (Trivio, 2001), Meloidogyne tiene alrededor de 800 plantas hospedantes incluyendo malezas.

En Ecuador son susceptibles a este nemtodo los siguientes cultivos: meln, pepino, achocha, sanda, tomate, pimiento, berenjena, zanahoria, lechuga, coliflor, zapallo, haba pallar, frjol, caup, arbejas, soya, papaya, babaco, naranjilla, tomate de rbol, maz, caa de azcar, arroz (M. graminicola); plantas ornamentales como rosas, ginger, dalias, entre otras (Trivio, 2001).

El dao que causan es mayor en regiones calidas con suelos ligeros y arenosos, las plantas infestadas con nematodos tienen un crecimiento reducido de races, bajo rendimientos y mala calidad de frutos (Montiel et.al., 1997). La importancia econmica radica en que Meloidogyne es un nemtodo polfago que se encuentra distribuido en todo el mundo, ocasionando serias prdidas en una gran gama de cultivos. La presencia de estos nemtodos facilita la penetracin de algunos hongos fitopatgenos que se manifiestan con mayor virulencia, ocasionando perdidas considerables debido al doble ataque a que son sujetos. Aparte al dao que ocasionan al cultivo al reducir su rendimiento y calidad, los costos de control tambin son elevados y la reinfeccin se da muy rpidamente debido al mal manejo de los cultivos (Petit, 1990).

2.2. Caractersticas de Rotylenchulus reniformis

Corresponde a la siguiente clasificacin taxonmica Orden Sub-orden Familia Gnero Tylenchida Tylenchina Hopolaimidae Rotylenchulus

Especies mayoritarias: Rotylenchulus borealis, R. parbus, R. reniformis. La morfologa comprende con dimorfismo sexual total. Las hembras inmaduras son vermiformes pequeas (0.23-0.64 mm) libres en el suelo, cuando mueren se arquean ventralmente, en forma de C. La regin ceflica redondeada a conoide, contina con el

resto del cuerpo, estriada. La hembra madura (sobre las races) hinchada en forma de riones, la parte anterior irregular. Son semiendoparsitos sedentarios en races. El dimorfismo sexual es notorio por la regin del labio, estilete y la longitud del cuerpo, expresndose como una regin del labio cnica en las hembras y ms hemisfrico en machos que tambin pueden tener estiletes ms cortos y cuerpos largos (Castillo et al., 1993). Robinson et al (1997), explica que el tiempo de desarrollo de los estados de este nemtodo vara con la temperatura y con el tipo de hospedero, pero generalmente los huevos eclosionan entre una o dos semanas despus de la oviposicin, y la etapa de infeccin se alcanza de una o dos semanas despus de la eclosin. Una vez ocurrida la penetracin en las races, la hembra alcanza la madurez reproductiva en una o dos semanas ms; en ausencia de un hospedero en estados vermiformes pueden permanecer indefinidamente en el suelo en estado latente. El ciclo de vida puede ser de tres semanas, pero puede llegar a dos aos si no est presente un hospedero y el suelo est seco.

La determinacin de la supervivencia en el suelo de R. reniformis, sin hospedero, indic que las poblaciones del nemtodo se mantienen mas o menos constantes en rangos de humedad en el suelo de 3.47 % a 45%, un rango bastante amplio (Rivas et al., 2002).

R. reniformis se ha encontrado en asociacin con cientos de cultivos y plantas nativas del trpico, subtrpico y regiones de temperatura clida en miles de localidades de Sudamrica, Centroamrica, Norteamrica, el Caribe, frica, sur de Europa (solo Malta y Espaa), India, sur de Asia, China, Japn, Filipinas, y el Pacfico. sta extensa distribucin probablemente se debe a que este nemtodo posee un excepcional rango de hospederos y tiene habilidad para sobrevivir a extensos periodos de deshidratacin (Robinson et al., 1997)

Segn Fernndez (2004), R. reniformis en Puerto Rico est muy diseminado en el pltano, estimndose como parte del conjunto de nemtodos que causa depresin al cultivo, pero por s solo no es capaz, ya que los daos provocados son muy superficiales, principalmente en las races mas finas y tampoco afecta los cormos.

Segn Trivio citado por Surez (2006), en Ecuador se encuentra a R. reniformis en la pennsula de Santa Elena, zona de Milagro, Naranjito, Boliche-El Triunfo, en reas soyeras de la Provincia de Los Ros, en el valle del Ro Portoviejo, en Loja. Esto no significa que en otros lugares no est presente, desafortunadamente an no se ha realizado un monitoreo nacional. 2.3. Manejo fsico del suelo

El objetivo del manejo no es eliminar los organismos potencialmente perjudiciales, sino regular el incremento de las poblaciones para evitar la necesidad de tratamientos o acciones de represin directas (Maturana, 2005).

Segn Rivas et al. (2002), debido a que los nemtodos poseen un movimiento limitado en el suelo, las poblaciones generalmente se mantienen poco variables y se incrementan cada ciclo de cultivo, si los hospederos son apropiados para su desarrollo. Se estima que la mayor cantidad de ellos se encuentra en los primeros 30 cm de la superficie del suelo y que en una capa de 2.5 cm, en una hectrea existen en promedio unos 6,000 millones de especmenes. Las aplicaciones de diversos plaguicidas al suelo, perturban el equilibrio normal de la microbiota y matan muchos enemigos naturales de los nemtodos; lo cual resulta en algunos casos en el aumento de sus poblaciones. Algunos nematicidas solamente actan como nemastticos y tienen un efecto reducido para el manejo qumico de poblaciones de nemtodos.

La proteccin vegetal integrada es un concepto en el que se aplican todos los mtodos ecolgica y econmicamente razonables con la mejor coordinacin posible para mantener las plagas por debajo del umbral econmico de los daos, ponindose en un primer plano el uso de factores limitadores naturales (Borner, 2004).

La induccin de sequa en suelos infestados por nemtodos ha demostrado que muchas especies se deshidratan a una atmsfera de 50 % de humedad relativa durante 34 das; pero que el 90 % de la poblacin se recuper al ser sumergidos en agua. Ningn nemtodo es activo en condiciones de sequa, pero las especies con habilidad a sobreponerse tienen ms

posibilidades de constituir poblaciones densas en reas de sequa. Este se supone es un factor selectivo para colonizar habitas particulares. Se sabe que el contenido de oxgeno en los suelos esta en relacin directa con el contenido de humedad. Para los nemtodos el consumo de oxgeno es bastante elevado, requieren alrededor de 1000 ml/kg/h (Rivas et al., 2002).

La inundacin es uno de los mtodos ms ampliamente utilizado en Japn en reas cultivadas de berenjena, tomate, fresa, y pepino. Las enfermedades del suelo y los nemtodos son controlados. Este mtodo parece ser una de las vas ms prometedoras para el control de plagas del suelo en el futuro (FAO, 2002).

La relacin temperatura-precipitacin favorece los aumentos o disminuciones de las poblaciones de Rotylenchulus reniformis y posiblemente de otras especies fitoparasitarias. Perodos lluviosos y temperaturas altas inducen el aumento de poblaciones de nematodos en el suelo (Rivas et al., 2002).

El suelo solarizado solo o en la combinacin con proporciones reducidas de fungicidas o nematicidas se ha sugerido como una alternativa al bromuro del metilo para el control de patgenos del suelo que estn afectando los campos cultivados (Lamberti et al., 2000). La solarizacin de la tierra es un mtodo hidrotrmico de desinfectacin de la tierra que usa el calor solar entrampado y conservado a travs del plstico de polietileno transparente. La prctica se ha usado para controlar Verticillun, Fusarium e insectos. Esta estrategia tambin puede ser til para mejorar los suelos contra plagas, particularmente en los trpicos semiridos, dnde las temperaturas mximas en verano pueden exceder 40 C durante varios das (Sharma, 1990).

Segn Lawrence et al, (2005), ste nemtodo podra sobrevivir en suelo en barbecho, para los perodos largos, se menciona que, el 23% de una poblacin de R. reniformis sobrevivi un mes en suelo hmedo almacenado y colocado en bolsas de polietileno a 20 25 C. Posteriormente la poblacin declin causando una eficaz reduccin de R. reniformis

Segn Sotomayor et al., (1999), realizaron experimentos con perodos de 12 semanas en microparcelas para el control de Meloidogyne arenaria. La inundacin del suelo indujo condiciones anaerbicas en el suelo, la inundacin redujo las densidades finales de Meloidogyne arenaria. El nmero de agallas encontrado en races de tomate como resultado de inundaciones continuas e intermitentes fueron < 1.

Los mtodos fsicos destruyen directamente los agentes dainos, estn dirigidos a frenar su desarrollo, o bien impiden su difusin en el espacio (Borner, 2004).

Segn Maturana, (2005), el control natural es un concepto que se refiere al mantenimiento de la densidad de la poblacin de los organismos dentro de ciertos lmites, por la accin de factores naturales biticos (controladores naturales) y abiticos (fsicos). III. MATERIALES Y MTODOS

3.1. Ubicacin del ensayo Este trabajo se realiz en los terrenos de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Tcnica de Babahoyo, que se encuentra ubicada en el km 7 de la va Babahoyo-Montalvo, en la provincia de Los Ros. Las caractersticas geogrficas son 79 30 de longitud oeste, 1 49 de longitud sur, 8 msnm. La zona presenta un clima tropical hmedo, con una temperatura media anual de 25.6 C y con una precipitacin anual de 2.307 mm. 3.2. Materiales Gentico: Se utiliz tomate para Meloidogyne spp. y

variedad Floradade R. reniformis.

como

planta

indicadora

Laboratorio: Microscopio, estereo-microscopio, licuadora, tamices, vasos de vidrio graduado, pipeta, piceta, cmaras contadoras de nematodos, contadores (chequeadores), refrigeradora. Campo:

Herramientas agrcolas, cinta mtrica, estacas, regaderas, machete, plstico de polietileno, baldes. 3.3. Factores en estudio - Cuatro tiempos de permanencia de humedad del suelo. - Meloidogyne spp y R. reniformis. 3.4. Tratamientos

Los tratamientos estudiados se detallan en el siguiente Cuadro. No 1. 2. 3. 4. Condicin del suelo Inundado (10 cm. lmina agua) Tiempo de permanencia Das 15 30 60 90

5. 6. 7. 8.

Saturado

15 30 60 90

9. 10. 11. 12.

Capacidad de campo (testigo)

15 30 60 90

13. 14. 15.

Seco

15 30 60

16.

90

3.5. Diseo Experimental Se utiliz el diseo de parcelas divididas con 4 tratamientos (factor A humedad de suelo: inundado, saturado, capacidad de campo, seco), 4 subtratamientos (factor B tiempo de humedad: 15, 30, 60, 90 das) y 3 repeticiones. 3.5.1. Anlisis de la Varianza Grados de libertad 3 2 6 3 9 24 47

Fuente de variacin Factor A(tratamientos) Bloque Error A Factor B (subtratamiento) Interaccin (A x B) Error B Total 3.5.2. Prueba de significancia

Para la comprobacin de las medias de tratamientos, se utiliz la Prueba del Rango Mltiple de Duncan, con una probabilidad del 5%. 3.6. Caractersticas del rea experimental Nmero de tratamientos Nmero de repeticiones Nmero total de parcelas rea / parcela rea til total del ensayo Distancia entre repeticiones Distancia entre tratamientos 16 3 48 1 m2 48 m2 1.5 m. 1 m.

rea total del ensayo 3.7. Manejo del experimento 3.7.1. Construccin de las parcelas.

264 m2

En un lote de campo de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, se construyeron 48 parcelas de 1 m2. el suelo de las parcelas se extrajo hasta aproximadamente 30 cm de profundidad, en las paredes y fondo de stas se coloc una cubierta de polietileno, para evitar la percolacin del agua y nemtodos durante la ejecucin del trabajo. 3.7.2. Inoculacin de los nemtodos

Las parcelas nuevamente se rellenaron con el suelo extrado. Durante un mes (preliminar) se sembr plantas de tomate inoculadas con Meloidogyne spp. y R. reniformis, esto se realiz para iniciar el trabajo con una densidad poblacional de los dos gneros de nemtodos aproximadamente alta y homognea. 3.7.3. Toma de muestra inicial.

Para realizar esta labor se eliminaron las plantas (preliminar), se mezcl bien el suelo en cada parcela y se recolect una muestra de aproximadamente 500 g. a sta se le efectu un anlisis nematolgico donde se conoci la densidad poblacional inicial del trabajo. (ver anexos, cuadro 5) 3.7.4. Instalacin de los tratamientos.

Seguidamente se procedi a instalar los tratamientos. En las parcelas inundadas, se suministr agua hasta que estuvieron con una lmina de 10 cm (se marc el plstico). En el tratamiento saturado (donde se reg hasta que el suelo perdi su capacidad de filtracin) se mantuvo el suelo encharcado pero sin lmina de agua. En el tratamiento capacidad de campo se reg el suelo solamente para que est siempre hmedo como se maneja el riego para un cultivo normal. Finalmente, en el tratamiento suelo seco, se procedi a secar la tierra con anticipacin, (se la mantuvo sin riego durante todo el ensayo), para que los cuatro tratamientos o condiciones diferentes de humedad, tengan el mismo da de inicio.

3.7.5.

Toma de muestra de los tratamientos

Posteriormente, a los 15. 30, 60 y 90 das de permanencia de cada tratamiento, se extrajo un kg. de suelo por parcela, donde se utiliz 100 cm3 en anlisis nematolgico (mtodo de incubacin), el resto del suelo se utiliz en las pruebas de bioensayos. 3.7.6. Prueba de bioensayo.

La prueba bioensayo se realiz para medir la poblacin remanente en el suelo de los tratamientos, mediante el anlisis en las races de una planta susceptible, que para ste caso fue tomate, para lo cual se efectu un semillero con suelo desinfectado con agua a 100 C, cuando las plantas tuvieron 22 das se procedi al transplante en las fundas con la tierra de los tratamientos. Pasado 30 das del transplante, se tomaron las races de 5 plantas por tratamiento y se llev al laboratorio para realizar el conteo poblacional de los nemtodos. 3.8. Datos evaluados Densidad poblacional inicial de Meloidogyne spp y R. reniformis en el suelo, antes de los tratamientos. Un mes despus de inoculados los nemtodos en cada tratamiento, se extrajo suelo de la rizosfera de cinco plantas y se form una muestra de aproximadamente 1 libra. Luego en el laboratorio se tomo 100 cm3aproximadamente y se colocaron en un juego de platos de aluminio y sobre estos una malla fina plstica y papel kleenex, luego se vaci agua muy cuidadosamente hasta saturar el suelo y se dej por tres das en incubacin. Transcurrido este tiempo se elimin el suelo y se colect el agua en un vaso graduado dejando al final solo 100 ml. Se homogeniz la muestra con una bomba de pecera, se extrajeron alcuotas de 2 ml, y se colocaron en cmaras contadoras donde se cuantific el nmero de nemtodos, con la ayuda de un estereo-microscopio.

Densidad poblacional de Meloidogyne spp y R. reniformis en el suelo, a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos. Para la obtencin de estos datos, de cada parcela se tom una muestra de suelo, para el efecto se tomaron 10 sub muestras recolectando el azar dentro de la parcela hasta completar

un total 1 libra de suelo. Los nemtodos se extrajeron por el mtodo de incubacin, el cual se especifica en la descripcin anterior.

Densidad poblacional de Meloidogyne spp y R. reniformis en races de tomate sembrado en suelo muestreado al final de cada tiempo expuesto en los tratamiento (Bioensayo). Cuando finalizaron los tratamientos de acuerdo a su tiempo propuesto se tomaron porciones de suelo para el bioensayo descrito anteriormente, pasados 30 das se tomaron las races. Para el efecto se las cort en pedazos de 1 cm aproximadamente, se pesaron 10 g, luego se licuaron por 20 segundos en la licuadora utilizando la primera velocidad, este licuado se verti en tres tamices de nmeros 60, 100 y 500 de arriba abajo, respectivamente. El primer tamiz (60) se lav rociando agua de la llave por un minuto, luego el segundo (100) por el mismo tiempo y el sedimento que contiene los nematodos quedaron en el tamiz 500, se recogi en un vaso graduado sacando todo residuo con agua hasta obtener 100 ml; posteriormente se homogeniz la muestra, se extrajo 2 ml y se colocaron en cmaras contadoras donde se cuantific el nmero de nemtodos.

IV. RESULTADOS
Tiempo de humedad y secamiento del suelo requerido para reducir la densidad poblacional de R. reniformis y Meloidogyne spp.

Densidad poblacional de R. reniformis en el suelo, a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos. Segn el anlisis estadstico de los resultados obtenidos en este estudio, se encontr diferencia estadstica altamente significativa en la densidad poblacional de R. reniformis en 100cm3 de suelo y evaluada a los 15, 30, 60 y 90 das de permanecer el suelo en diferentes condiciones de humedad (segn propuesta).

En el Cuadro 1 se presenta que R. reniformis puede vivir hasta los 30 das consecutivos en suelo inundado con 10 cm de lmina de agua, mientras que despus de ste perodo desaparecen los nemtodos, y es as que a los 60 das han sido eliminados en su totalidad. Cuando el suelo permanece aparentemente seco, en estado de polvo, R. reniformis puede sobrevivir hasta 60 das, pero a 90 das ya no se encuentra en el suelo. R. reniformis puede permanecer en poblaciones altas en suelos que estn en capacidad de campo an en ausencia de plantas hospedantes. Esto demuestra que ste nemtodo es una excepcin dentro de las especies que mueren cuando el suelo est en estado de polvo, recomendacin que se hace para evitar que plantas de semillero y vivero sean afectadas por nemtodos. En general, con este estudio se determin que R. reniformises ms fcil que muera con suelo inundado que en suelo aparentemente seco. En ste Cuadro tambin se observar que, las poblaciones disminuyen en sentido inversamente proporcional al tiempo de permanencia de la condicin de humedad del suelo, es decir a 15 das ms nemtodos y a 90 das menos nemtodos. Cuadro 1. Densidad poblacional de R. reniformis en el suelo a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos. Universidad Tcnica de Babahoyo, 2006. R. reniformis /100 cm3 suelo Tratamientos 15 Inundado Saturado Capacidad de campo Seco Media Coeficiente de variacin (%) Significacin estadstica 67 133 450 400 262 a 7.13 ** Tiempo de humedad del suelo 30 60 90 67 0 283 50 100 b 0 0 283 50 83 bc 0 0 150 0 37 c Media 33 b 33 b 292 a 125 b

Para el anlisis estadstico los datos originales se transformaron a x+1. Letras iguales en la columna o en la fila, no difieren estadsticamente segn la prueba del Rango Mltiple de Duncan al 5%.

Densidad poblacional de Meloidogyne spp en el suelo, a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos.

Con respecto a la densidad poblacional del nemtodo agallador, Meloidogyne spp en suelo (Cuadro 2), expuestos a diferentes tiempos consecutivos de humedad, se determin que hay diferencia altamente significativa entre los tratamientos. En suelo inundado con lmina de agua de 10 cm aproximadamente, el nemtodo puede estar presente hasta 30 das y ser controlado a los 60 das. En suelo aparentemente seco, ste nemtodo, puede permaneces vivo hasta 60 das, pero desaparece a los 90 das. En capacidad de campo, el nemtodo se mantiene en nivel alto hasta 90 das o ms y en suelo sin vegetacin. Esto hace que, estadsticamente la poblacin de Meloidogyne presente en suelo en capacidad de campo sea superior y diferente a las condiciones de inundado, saturado y seco, que a la vez son iguales entre s. Los niveles de Meloidogyne obtenidos segn el tiempo de permanencia del suelo en la condicin de humedad se redujeron inversamente proporcionales al aumento del tiempo de exposicin de los nemtodos.

Cuadro 2. Densidad poblacional de Meloidogyne spp en el suelo a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos. Universidad Tcnica de Babahoyo, 2006. Meloidogyne spp /100 cm3 suelo Tratamientos 15 Inundado Saturado Capacidad de campo Seco Media Coeficiente de variacin (%) Significacin estadstica 117 167 250 117 162 a 7.32 ** Tiempo de humedad del suelo 30 60 90 67 0 167 50 71 b 0 0 217 17 58 b 0 0 183 0 46 b Media 46 b 42 b 204 a 46 b

Para el anlisis estadstico los datos originales se transformaron a x+1. Letras iguales en la columna o en la fila, no difieren estadsticamente segn la prueba del Rango Mltiple de Duncan al 5%.

Determinacin del remanente de las densidades poblacionales de R. reniformis y Meloidogyne spp mediante bioensayos, despus de evaluados los tratamientos.

Densidad poblacional de R. reniformis en races de tomate sembrado en suelo provenientes al final de los tratamientos (Bioensayo). En el Cuadro 3 se presentan los valores promedios de densidades poblacionales de R. reniformis en races de tomate. Se comprob que en los suelos inundados, saturados de agua, y secos, la presencia del nemtodo puede llegar hasta los 60 das; mientras que a los 90 das efectivamente ya no est en el suelo, de all que en sta prueba conocida como "bioensayo", no aparece en las races de tomate. Se observ que las races de tomate provenientes del suelo de los tratamientos en capacidad de campo, fueron los que presentaron poblaciones altas y aproximadamente similares entre los 15 a 90 das. Cuadro 3. Densidad poblacional de R. reniformis en races de tomate, sembrado en suelo colectado al final de los tratamientos como prueba bioensayo. Universidad Tcnica de Babahoyo, 2006. R. reniformis /10 g races Tratamientos 15 Inundado Saturado Capacidad de campo Seco Media 83 117 533 250 246 a Tiempo de humedad del suelo 30 60 90 83 0 250 183 129 b 17 0 150 83 62 bc 0 0 83 0 21 c Media 46 b 29 b 254 a 129 b

Coeficiente de variacin (%) Significacin estadstica

8.33 **

Para el anlisis estadstico los datos originales se transformaron a x+1. Letras iguales en la columna o en la fila, no difieren estadsticamente segn la prueba del Rango Mltiple de Duncan al 5%.

Densidad poblacional de Meloidogyne spp en races de tomate sembrado en suelo provenientes al final de los tratamientos (Bioensayo). En el Cuadro 4 se presentan los valores promedio de densidad poblacional de Meloidogyne spp en races de tomate, realizado el anlisis de varianza report alta significancia estadstica para tratamientos y subtratamientos. El coeficiente de variacin fue de 8.67 %. Realizada a prueba de Duncan se encontr que el mayor promedio de densidad poblacional de Meloidogyne spp en races de tomate lo obtuvo el tratamiento en suelo con capacidad de campo en el tiempo de 15 das de humedad consecutiva con un promedio de 154 nemtodos en 10 gramos de races, siendo superior estadsticamente a los dems tratamientos. Adems con esta prueba de bioensayo se comprob que los resultados obtenidos con la evaluacin del suelo son similares. Cuadro 4. Densidad poblacional de Meloidogyne spp en races de tomate, sembrado en suelo colectado al final de los tratamientos como prueba bioensayo. Universidad Tcnica de Babahoyo, 2006. Meloidogyne spp / 10 g races Tratamientos 15 Inundado Saturado Capacidad de campo Seco Media Coeficiente de variacin (%) Significacin estadstica 183 50 183 83 125 a 8.67 ** Tiempo de humedad del suelo 30 60 90 50 17 150 67 71 b 33 0 150 33 54 b 0 0 133 33 42 b Media 67 b 17 c 154 a 54 bc

Para el anlisis estadstico los datos originales se transformaron a x+1. Letras iguales en la columna o en la fila, no difieren estadsticamente segn la prueba del Rango Mltiple de Duncan al 5%

V. DISCUSIN
De acuerdo a los resultados obtenidos se puede decir que de los mtodos fsicos de control especialmente los suelos inundados, o saturados a los 60 y 90 das dan buenos resultados en la reduccin poblacin de R. reniformis y Meloidogyne spp. Tambin se observa que R. reniformis se mantiene durante todo el tiempo de ensayo en los suelos con capacidad de campo y en suelos secos hasta los 60 das, siendo stos resultados un poco similares a los encontrados por Robinson et al, (1997). Observando la prueba de bioensayo se tiene que R. reniformis no est presente en el suelo saturado a los 60 das pero s en las plantas de tomate esto puede darse por la presencia de huevos en el suelo que no alcanzaron a eclosionar, pero una vez fuera como segundo estado juvenil ingresaron a la raz de planta susceptible que en este trabajo fue tomate, trabajos de comprobacin similar tambin los ha efectuado Rivas et al, (2002). Meloidogyne spp. es un nemtodo que resiste periodos largos en suelo secos, donde puede encontrarse como huevos, una vez que encuentra un medio adecuado puede realizarse el proceso de eclosin de las larvas, ya que de acuerdo con Saiguda citado por Lordello, Meloidogyne es un nemtodo que oviposita gran cantidad de huevos por lo que se lo considera un nematodo muy infectivo cuando encuentra un hospedero altamente susceptible. Tanto Meloidogyne como R. reniformis de acuerdo a stos resultados han resistido ms tiempo en sequa que en suelos con mucha humedad, (lo contrario sucede con M. graminicola) por lo que, se los considerara como nemtodos con habilidad a sobreponerse a estas condiciones adversas (Rivas et al, 2002). Los mtodos fsicos de acuerdo con Maturana (2005), son buenos para mantener las poblaciones de estos nemtodos en niveles que no causen daos econmicos. Segn (FAO), ya en otros pases como la China se utiliza la inundacin para manejar poblaciones de fitopatgenos del suelo. Segn los resultados Meloidogyne soporta suelos inundados hasta los 60 das luego decae su poblacin, y a los 90 das no se encuentra presente en el suelo pero si en las

plantas de tomate, esto concuerda con Sotomayor et al,(1999), que mencionan que a los 90 das se reporta pero con muy baja incidencia.

debido a

Se puede ver que R. reniformis se encuentra en los suelos con gran humedad hasta un mes, luego decae la poblacin, resultados que concuerdan con lo encontrado por Lawrence et al, (2005).

VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Conclusiones: Los nemtodos formadores de agallas en las races, R. reniformis y Meloidogyne spp., pueden permanecer en suelos inundados por 30 das consecutivos y desaparecer en suelos inundados por perodo de 60 das.

Tanto R. reniformis como Meloidogyne spp. pueden resistir perodos de sequa de hasta 60 das consecutivos. En suelo en capacidad de campo, se mantienen las poblaciones de R. reniformis y Meloidogyne spp. durante 90 das o ms, an en ausencia de plantas hospedantes.

Recomendaciones. Reducir las poblaciones de Meloidogyne spp y R. reniformis inundando o saturando los suelos durante perodos de 30 das o ms. Realizar investigaciones similares con otras especies de nemtodos fitoparsitos.

VII.

RESUMEN

En Ecuador, los cultivos de banano, hortalizas, leguminosas, gramneas, ornamentales y frutales, son infestados por nemtodos causantes de perdidas de produccin. Debido a que los nemtodos poseen un movimiento limitado en el suelo, sus poblaciones generalmente se mantienen poco variables y se incrementan cada ciclo de cultivo, si los hospederos son apropiados para su desarrollo. Entre los ms importantes desde el punto de vista econmico estn Meloidogyne spp y Rotylenchulus reniformis. Se buscan otras alternativas para reducir las poblaciones de nemtodos sin el uso de qumicos. El objetivo de sta investigacin es determinar lo que sucede con las poblaciones de Meloidogyne spp y R. reniformis sometidas a diferentes condiciones de humedad del suelo durante diferentes perodos.

Esta investigacin de la realiz en los terrenos de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Tcnica de Babahoyo, donde se realizaron 48 parcelas de 1 m2 por 30 cm. de profundidad se le coloc un plstico de polietileno y se volvi a llenar de tierra, luego se infestaron con R. reniformis y Meloidogyne spp. en niveles ms o menos homogneos. Los tratamientos investigados fueron suelo inundado, saturado, capacidad de campo y seco durante 15, 30, 60 y 90 das para cada condicin. Pasado el tiempo de cada tratamiento se efectu la evaluacin de la densidad poblacional de cada gnero de nematodo. Estos resultados fueron comprobados con la prueba de bioensayo Los resultados demostraron que R. reniformis y Meloidogyne spp., pueden permanecer en suelos inundados por 30 das consecutivos y desaparecer en suelos inundados por perodo de 60 das. Estos nemtodos pueden resistir perodos de sequa de hasta 60 das consecutivos. Mientras que, en suelo en capacidad de campo, se mantienen las poblaciones de ambos nemtodos durante 90 das o ms, an en ausencia de plantas hospedantes.

VIII.

SUMMARY

In Ecuador, the banana tree cultivations, vegetables, leguminous, gramineous, ornamental and fruit-bearing, are infested by plant-parasitic nematodes which cause lost production. Because the nematodes have limited movement in the soil, their populations generally stay not very variable and they are increased each cultivation cycle, if the host is susceptible. Among the nematodes that cause big economic losses they are the root-knotMeloidogyne spp and Rotylenchulus reniformis. The objective of this research is to determine the period for nematodes reduction populations in flooding soil, saturate soil, field capacities an dry soil. This investigation was carried out in the field of The University of Babahoyo, 48 plot of 1 m2 for 30 cm depth were done, into the plot was placed a polyethylene and filled with soil again, then was transplanted the tomato plants inoculated previously with R. reniformis and Meloidogyne spp. At 15, 30, 60, and 90 days later of initial treatments some soil sample were taking in other to evaluate nematodes densities.

As a result, statistical significancia was obtained for all the valued data. The soil in field capacity treatment was the one that reported Meloidogyne spp and R. reniformis in the all the proposed times. The treatment with saturated and flooded soil at the 60 and 90 days populations of the nematode ones didn't report and neither in the bioassay.

IX. LITERATURA CONSULTADA

ARREGUI, A. 2002 Evaluacin de la susceptibilidad y ciclo de vida de cultivares de maz al nematodo Meloidogyne incognita. Tesis de grado de Ing. Agrnomo de la Universidad Tcnica de Babahoyo, Facultad de Ciencias Agropecuarias. Babahoyo, EC 48p. BAYER. 2002. Nematodos de las lesiones radiculares (en lnea) Chile, CH Consultado 15 junio. 2006 disponible en http://www. bayercropscience.com/

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ANEXOS

Cuadro 1. Densidad poblacional de Rotylenchulus reniformis en el suelo, a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos. Tratamientos Rotylenchulus reniformis/100cm3 suelo

Tiempo de humedad en das 1. Inundado 15 2. 30 3. 60 4. 90 5. Saturado 15 6. 30 7. 60 8. 90 9. Capacidad de Campo 15 10. 30 11. 60 12. 90 13. Seco 15 14. 30 15. 60 16. 90

I 50 50 0 0 50 0 0 0 250 200 250 150 350 50 50 0

II 50 100 0 0 50 0 0 0 650 450 400 150 400 50 50 0

III 100 50 0 0 300 0 0 0 450 200 200 150 450 50 50 0

Media 67 67 0 0. 133 0 0 0 450 283 283 150 400 50 50 0

Cuadro 2. Densidad poblacional de Meloidogyne spp. en el suelo, a los 15, 30, 60 y 90 das de iniciado los tratamientos Tratamientos Meloidogyne spp /100cm3 suelo Tiempo de humedad en das 1. Inundado 15 2. 30 3. 60 4. 90 5. Saturado 15 6. 30 7. 60 8. 90 9. Capacidad de Campo 15 10. 30 11. 60 12. 90 13. Seco 15 14. 30 15. 60 16. 90 I 100 50 0 0 150 0 0 0 250 200 200 150 100 100 50 0 II 150 50 0 0 150 0 0 0 350 200 250 150 150 50 50 0 III 100 100 0 0 200 0 0 0 150 100 200 250 100 50 50 0 Media 117 67 0 0 167 0 0 0 250 167 217 183 117 67 50 0

Cuadro 3. Densidad poblacional de R. reniformis en races de tomate, sembrado en suelo colectado al final de los tratamientos como prueba de bioensayo Tratamientos Tiempo de humedad en das 1. Inundado 15 2. 30 3. 60 4. 90 5. Saturado 15 6. 30 7. 60 8. 90 9. Capacidad de Campo 15 10. 30 11. 60 12. 90 13. Seco 15 14. 30 15. 60 16. 90 Rotylenchulus reniformis/10 g de raz II III Media 50 50 83 100 50 83 0 50 17 0 0 0 100 0 0 0 800 450 150 100 100 250 100 0 200 0 0 0 400 200 200 100 400 200 50 0 117 0 0 0 533 250 150 83 250 183 83 0

I 150 100 0 0 50 0 0 0 400 100 100 50 250 100 100 0

Cuadro 4. Densidad poblacional de Meloidogyne en races de tomate, sembrado en suelo colectado al final de los tratamientos como prueba de bioensayo Tratamientos Meloidogyne spp /10 g de raz Tiempo de humedad en das I II III Media 1. 250 200 100 183 Inundado 15 50 50 50 50 2. 30 0 0 100 33 3. 60 0 0 0 0 4. 90 5. 100 50 0 50 Saturado 15 0 50 0 17 6. 30 0 0 0 0 7. 60 0 0 0 0 8. 90 9. Capacidad de Campo 15 50 300 200 183 10. 30 200 150 100 150 11. 60 100 150 200 150 12. 90 100 100 200 133 13. Seco 15 50 150 100 83 14. 30 100 50 50 67

15. 16.

60 90

50 0

50 0

0 100

33 33

Cuadro 5. Densidad poblacional de Meloidogyne spp, y R. reniformis en el suelo, antes de los tratamientos. parcela R. reniformis Meloidogyne spp. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 200 350 400 600 450 200 200 300 300 200 600 300 200 300 100 1000 250 300 250 250 550 200 250 1000 200 250 450 200 200 450 200 200 200 250 200 200 200 450 200 450 250 200 200 300 300 200 300 500 ---25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 R. reniformis Meloidogyne spp. 250 250 300 500 550 300 250 450 350 450 750 500 450 200 700 250 200 600 350 1000 550 850 1600 1750 200 200 250 650 250 250 200 250 250 650 400 200 250 250 200 200 200 500 600 550 150 950 750 1850

Grficos comparativos de las poblaciones iniciales y finales de R. reniformis.

Grfico 1.

Grfico 2.

Grfico 3.

Grfico 4.

Grficos comparativos de las poblaciones iniciales y finales de Meloidogyne spp.

Grfico 5.

Grfico 6.

Grfico 7.

Grfico 8. Foto 1. hembra de Meloidogyne spp. (VIFINEX, 2001).

Foto 2. Hembra inmadura de Rotylenchulus spp. (VIFINEX, 2001).

Foto 1. Inoculacin de Meloidogyne spp y Rotylenchulus reniformis

Foto 2. Parcela con plantas de tomate antes de empezar los tratamientos

Foto 3. Instalacin de los tratamientos. UTB

Foto 4. Tratamientos de suelo inundado. UTB

Foto 5. Tratamiento de suelo saturado. UTB

Foto 6. Tratamiento de suelo con Capacidad de campo. UTB

Foto 7. Tratamiento de suelo seco. UTB

Foto 8. Prueba de bioensayo en plantas de tomate.

Foto 9. Raz de planta de tomate de la prueba de bioensayo.