UNIVERSIDAD ANDRES BELLO Facultad de Ciencias de la Salud Departamento de Ciencias Biolgicas Curso BIO376

Transporte a travs de membrana: Transporte de agua

Dr Pedro Gallardo M. Ph.D.

Caractersticas del transporte de agua La osmosis es el movimiento pasivo de agua desde un compartimiento de mayor a menor presin En tejidos animales la principal fuerza impulsora para la osmosis es la diferencia de presin osmtica entre dos compartimientos. Esta diferencia de presin osmtica equivale tambin a una diferencia de potencial qumico del agua La presin osmtica es una propiedad coligativa que depende del nmero y no de la naturaleza de las partculas

Modelo fsico para explicar la osmosis

A contiene una solucin, la membrana es impermeable al soluto y B contiene agua pura Gradiente de potencial qumico del agua porque hay ms agua pura en B que en A Gradiente de presin osmtica= = A -B

Presin osmtica ()

A = CA RT y

B = CB RT

CA = concentracin total de solutos en A (mol/L) R= 0.082 atm L/mol K; T en escala absoluta = coeficiente de reflexin, ndice de permeabilidad relativa de la membrana al soluto y agua = 0 para un soluto permeable = 1 para un soluto impermeable

= A - B

Condicin de equilibrio h1 h2

Condicin inicial Flujo osmtico (Jw) es 0, h1=h2

Jw = LpA () (Ph)

Equilibrio es 0 h1>h2 genera presin hidrosttica en A Jw neto = 0

Jw = Ph =

Osmol efectivo, osmol inefectivo, coeficiente de reflexin

Soluto est restringido al compartimiento A y nunca pasa a B Osmol efectivo: restringido a un compartimiento y 1 Na+, Cl-, HCO3Na+ y aniones acompaantes estn restringidos al espacio extracelular

Osmol efectivo, osmol inefectivo, coeficiente de reflexin

Soluto no est restringido al compartimiento A y difunde desde A a B Osmol inefectivo: membrana es relativamente permeable al soluto. 0 El movimiento del soluto a favor de su gradiente provoca un movimiento de molculas de agua

Osmolalidad, osmolaridad Osmoles/kg solvente (Osm) Osmoles/L solvente Osmolalidad Osmolaridad

Osmoles/L = C (mol/L) n (nmero de partculas en solucin) La medicin del volumen es dependiente de la temperatura y no as la medicin de la masa del solvente Para soluciones diluidas existe escasa diferencia entre la osmolalidad y la osmolaridad Osmolalidad del lquido extracelular = 285 mOsm

Relacin entre concentracin y osmolalidad de una solucin Osmoles/L = C (mol/L) n (N de partculas en solucin) Solucin 0,15 M de NaCl y 0,15 M de glucosa Solucin de NaCl NaCl (s) Na+ (aq) + Cl- (aq) 2 partculas 0,15M x 2 = 0,3 Osmoles/L 300 mOsm Solucin de glucosa Glucosa (s) Glucosa (aq) 1 partcula

0,15M x 1 = 0,15 Osmoles/L 150 mOsm

Tonicidad La tonicidad se refiere al impacto que tiene una solucin sobre el volumen celular Isotnica: no cambia el volumen celular Hipotnica: aumenta el volumen celular Hipertnica: reduce el volumen celular

300 mOsm 300 mOsm

a) soluto impermeable alto coeficiente de reflexin b) soluto permeable bajo coeficiente de reflexin

Soluto externo impermeable i = e = 285 mOsm Jneto de H2O = 0 Volumen celular constante

Caractersticas de la solucin externa: Isotnica porque no altera el volumen celular Isoosmtica porque tiene la misma osmolalidad que el plasma. Soluto presente es impermeable (osmol efectivo)

Soluto externo permeable

S H2O

Soluto puede entrar a la clula a favor de una gradiente de concentracin Al flujo de soluto de soluto le sigue un flujo de agua Aumento del volumen celular La solucin que es isoosmtica es tambin hipotnica al provocar un aumento del volumen celular Soluto de la solucin externa es un osmol inefectivo

 Una solucin isoosmtica: Puede ser hipotnica si el soluto tiene un bajo coeficiente de reflexin y entra a la clula. En otras palabras, es permeable al soluto y ste entra a la clula Puede ser isotnica si el soluto tiene un coeficiente de reflexin alto. Es decir la membrana es poco permeable al soluto

Tonicidad de la solucin externa y volumen celular Una solucin externa isotnica no altera el volumen celular Una solucin externa hipotnica aumenta el volumen celular Una solucin externa hipertnica disminuye el volumen celular Cmo regulan las clulas su volumen frente a cambios en la tonicidad del medio externo?

Regulacin del volumen celular Las clulas tienen la capacidad de detectar cambios en el volumen celular Las clulas regulan su volumen a travs de la activacin de mecanismos de transporte que median la entrada o la salida de iones y osmolitos orgnicos. El movimiento de osmolitos orgnicos y iones va seguido de un flujo osmtico Frente a un aumento del volumen celular, las clulas activan transportadores que producen una salida neta de solutos y agua Lo opuesto es vlido frente a una reduccin del volumen celular

Osmolitos orgnicos Los osmolitos orgnicos son molculas que se acumulan en las clulas en respuesta a un medio externo hipertnico. Su acumulacin favorece la mantencin del volumen celular sorbitol: sintetizado a partir de glucosa por la enzima aldosa reductasa betana, taurina, myo-inositol son acumulados por las clulas en respuesta a la hipertonicidad Entran a las clulas a travs de cotransportadores Na+dependientes: BGT1: cotransportador Na+-betana SMIT: cotransportador Na+-myo-inositol TauT: cotransportador Na+-taurina

glucosa sorbitol

AR
hipertonicidad acumulacin de osmolitos orgnicos

Na+/betana Na+/myoinositol

Na+/taurina hipertonicidad activacin del factor de transcripcin activado por hipertonicidad (TonEBP) TonEBP estimula la transcripcin de genes que codifican para protenas que median la acumulacin de osmolitos orgnicos

Mecanismos de regulacin del volumen celular

Vas de paso de agua en las clulas animales

bicapa lpdica

protena

Permeabilidad al agua Liposoma = 97 x 10-4 cm/s Eritrocito fantasma= 540 x 10-4 cm/s El paso de agua a travs de una bicapa es ms lento que a travs de una membrana celular

Canales de agua o acuaporinas (AQPs)

Referencia: P. Agre et al. Journal of Physiology 542 (1):3-16. 2002 www.jphysiol.org

Estructura general de las acuaporinas

monmero de AQP-1

La topologa de las AQPs en la membrana sera similar a un reloj de arena La mayora de las AQPs existen en las membranas como homotetrmeros

Modelo tridimensional de AQP-1 mostrando los aminocidos que forman el poro por donde pasan las molculas de agua

Organizacin tetramrica de AQP-1 en la membrana

Pf unitaria de AQP-1: 3 x 109 molculas de H2O/s

AQP-1 existe como un homotetrmero en la membrana celular Otras AQPs como AQP-2 tambin adquieren esta organizacin

Familia de las AQPs en humanos

transportadoras estrictas de agua AQP-1: ubicua AQP-2: regulada por la hormona antidiurtica AQP-4: insensible a Hg

transportadoras de agua y de solutos orgnicos pequeos: urea, glicerol

Expresin funcional de AQP-1 del tbulo renal en oocitos

AQP-1

agua

Abundancia de AQP-1 en el tbulo renal de rata extraccin de RNA rin de rata sntesis de de cDNA inyeccin de oocitos con a: cRNA de AQP-1 o b: agua

expresin de AQP-1 en oocitos y ensayo funcional

Compartimientos corporales y distribucin del agua en el organismo Agua total corporal = 60% del peso corporal Membrana plasmtica separa los compartimientos intra y extracelulares. La membrana es permeable al agua Compartimiento intracelular = 40% del peso corporal Compartimiento extracelular= 20% del peso corporal Endotelio capilar separa el compartimiento vascular del intersticial: del LEC es fluido intersticial del LEC es corresponde a plasma

Distribucin del agua en los compartimientos corporales

Movimientos de solutos y agua en el organismo Todos los solutos entran y salen del organismo a travs del lquido extracelular Los compartimientos extra e intracelular estn en equilibrio osmtico El equilibrio osmtico se logra a travs de movimientos de agua a travs de la membrana celular

Osmolalidad intracelular y extracelular Compartimiento extracelular 285 mOsm Jneto de H2O =0 Sales de Na+ Sales de K+ Compartimiento intracelular 285 mOsm 3Na+ 2K+

Na+

Osmolalidad extracelular = [Na+] x 2

Adicin de 1 L de agua Agua entra medio extracelular posterior a la absorcin en el intestino delgado Disminucin de la osmolalidad del medio extracelular La reduccin de la osmolalidad extracelular provoca la entrada de agua a las clulas para mantener el equilibrio osmtico Aumento transitorio del volumen celular La homeostasis de los lquidos corporales se mantendr mediante la eliminacin de 1L de agua

Adicin de 1 L de agua 1L de H2O

[Na+]extraceluar

H2O
Compartimiento intracelular

[Na+] extracelular Osmolalidad plasmtica

Adicin de 1L de NaCl isotnico (0,9 % p/v) La solucin entra al compartimiento extracelular a travs de una infusin endovenosa Solucin es isotnica y por ende no altera el volumen celular La osmolalidad del fluido agregado es la misma que la del medio extracelular y formada por solutos principalmente restringidos al medio extraceluar El resultado neto es el aumento del volumen extracelular

Adicin de 1 L NaCl 0,9 % (p/v) 1L NaCl 0,9%

[Na+]extracelular

Jneto de H2O = 0
[Na+]extracelular no cambia Osmolalidad plasmtica se mantiene constante
Compartimiento intracelular