Biologia molecular

A Biologia Molecular o estudo da Biologia em nvel molecular, com especial foco no estudo da estrutura e funo do material gentico e seus produtos de expresso, as protenas. Mais concretamente, a Biologia Molecular investiga as interaces entre os diversos sistemas celulares, incluindo a relao entre DNA, RNA e sntese proteica. um campo de estudo alargado, que abrange outras reas da Biologia e da Qumica, em especial Gentica e Bioqumica.

ndice

1 Relao com outras cincias biolgicas de nvel molecular 2 Tcnicas em Biologia Molecular o 2.1 Reaco em cadeia da polimerase o 2.2 Electroforese em gel o 2.3 Southern blot o 2.4 Northern blot o 2.5 Western blot 3 Ligaes Externas

Relao com outras cincias biolgicas de nvel molecular

Na Biologia Molecular so frequentemente combinadas tcnicas e ideias provindas da Microbiologia, Gentica, Bioqumica e Biofsica (veja a seco Tcnicas em Biologia Molecular, mais abaixo). Historicamente, a Microbiologia exerceu um papel fundamental no desenvolvimento da Biologia Molecular, pois a maioria dos conceitoschave e das tcnicas de Biologia Molecular se originou a partir de estudos e experimentos realizados principalmente com bactrias, fungos e vrus (especialmente bacterifagos, que so vrus que infectam bactrias). No existindo distines muito definidas entre as disciplinas mencionadas, pode-se considerar a Biologia Molecular na interface entre a Bioquimica e a Gentica, como mostra o esquema abaixo.

Esquema correlacionando a Biologia Molecular como uma disciplina na interface da Bioqumica e da Gentica

A Bioqumica define-se, de uma forma geral, como o estudo das reaces qumicas em organismos vivos; a Gentica ocupa-se especificamente do estudo das consequncias de diferenas no material gentico nos organismos. A Biologia Molecular ocupa ento um espao prprio, mas relacionando conhecimentos dos dois campos, ao investigar os mecanismos de replicao, transcrio e traduo do material gentico. Muito da investigao em Biologia Molecular relativamente recente, e muitos trabalhos tm sido feitos recorrendo-se Bioinformtica e Biologia Computacional. Estes recursos tornaram o estudo da estrutura e funo de genes, ou Gentica Molecular, num dos campos mais proeminentes em Biologia Molecular.

Tcnicas em Biologia Molecular

Muito do trabalho feito no mbito da Biologia Molecular relaciona-se com a obteno, identificao e caracterizao de genes. Assim sendo, diversas tcnicas tm sido desenvolvidas no meio da biologia aqui vao sendo citadas algumas

Reaco em cadeia da polimerase

Ver artigo principal: PCR A reaco em cadeia de polimerase, ou PCR, uma tcnica de grande versatilidade que permite obter mltiplas cpias de um segmento de DNA. O PCR tambm usado para introduzir locais de restrio e mutaes pontuais ou para identificar um fragmento particular de DNA numa biblioteca de cDNA.

Electroforese em gel
Ver artigo principal: electroforese em gel A electroforese em gel uma das principais ferramentas de trabalho em Biologia Molecular. Em geral, DNA, RNA e protenas podem ser separados segundo o seu tamanho numa matriz usando um campo elctrico aplicado. Na electroforese em gel de agarose, o DNA ou o RNA separado fazendo a amostra migrar atravs de um gel de agarose. As protenas so normalmente separadas segundo o seu tamanho usando electroforese em gel de acrilamida; tambm podem ser separadas segundo a sua carga elctrica usando focagem isoelctrica.

Southern blot
Ver artigo principal: Southern blot O Southern blot uma tcnica que permite obter informao sobre a massa molecular e a quantidade relativa de uma determinada sequncia de DNA. A tcnica, desenvolvida por Edwin Southern, uma combinao de electroforese em gel do DNA (este frequentemente fragmentado por enzimas de restrio antes de fazer o Southern), transferncia deste para uma membrana e hibridizao com uma sonda marcada (radioactiva ou fluorescente). Aps a hibridizao, a membrana lavada para remover

sonda no ligada a DNA e obtm-se uma imagem atravs de autoradiografia ou autofluorescncia. A imagem obtida d a(s) localizao(es) do DNA que liga a sonda, com a intensidade do sinal dando uma medida relativa da quantidade de DNA que hibridiza.

Northern blot
Ver artigo principal: Northern blot O Northern blot estuda o perfil de expresso de RNA mensageiro, onde, quando e quanto de determinado RNA mensageiro (correspondente expresso de um determinado gene) est presente numa dada amostra. uma das formas mais simples de determinar em que momento certos genes esto a ser expressos em sistemas vivos. Neste processo, o RNA separado numa electroforese em gel, transferido para uma membrana e detectado de forma similar ao DNA no Southern blot.

Western blot
Ver artigo principal: Western blot O Western blot usa o mesmo princpio do Southern blot e do Northern blot mas aplicado a protenas. Estas so separadas usando electroforese em gel de poliacrilamida, na presena do detergente dodecilo sulfato de sdio (SDS).