RETROVIRUS Y VIH Integrantes Mayra Alexandra Orozco Ana Carolina Rojas CARACTERSTICAS La familia Retroviridae es una de las ms complejas

de los virus animales. El trmino retro significa hacia atrs, y hace referencia a que tienen un modo inverso de replicar el cido nucledo. Los retrovirus son virus con un genoma constituido por ARN, pero se replican por medio de un ADN intermediario usando la enzima transcriptasa inversa. Entre lo ms caracterstico que encontramos de ellos es: 1. Causan cancer. 2. Causantes del SIDA 3. El genoma de los retrovirus puede integrarse especficamente en el genoma del hospedador gracias al ADN intermediario. CLASIFICACIN DE BALTIMORE El virus del VIH es un virus ARN monocatenario retrotranscrito (o virus ssRNA-RT) perteneciente al grupo VI. Son virus de ARN cuyo genoma podra actuar como mensajero pero in vivo no lo hace. Poseen una transcriptasa inversa que de un genoma ARN transcribe una molcula de ADN, primero de una cadena y luego de dos. Posteriormente y usando los enzimas celulares se elabora un mensajero. Estos virus son capaces de alcanzar el ncleo de las clulas, se insertan a los cromosomas de las clulas que infectan, son los retrovirus. TAXONOMA Y CLASIFICACIN Se dividide en tres subfamilias. La primera, Oncovirinae, comprende los grupos: C, B y D; y un grupo sin nombre donde se encuentra el virus de la leucemia humana de clulas T (o linfotrpico): VLTH-I y VLTH-II. La segunda, Lentivirinae, comprende el grupo de los virus Visna y el VIH. Se parecen a los anteriores en lo que se refiere a su morfologa, a la naturaleza de su genoma y a la posesin de una transcriptasa reversa, pero no transforman clulas. El nombre de la subfamilia alude al largo perodo de incubacin. La tercera, Spumavirinae, comprende los virus espumantes los cuales se encuentran en cultivo de clulas de rin que degeneran de forma espontnea y que provocan la formacin de clulas gigantes vacuoladas y multinucleadas. GENERALIDADES MORFOLGICAS DE LOS RETROVIRUS Presentar una morfologa comn. Un genoma constituido por dos molculas idnticas de ARN de polaridad positiva. Poseen una transcriptasa reversa. Son partculas envueltas. Tienen un dimetro entre 80 y 120 nm. Existen varias protenas en la cubierta de los virus y siete protenas internas tpicas, cuatro estructurales y tres enzimticas. Contienen nucleocpside enrollada dentro de una cubierta probablemente icosadrica. La envoltura contiene glicoprotenas vricas (espculas) adquirida al brotar por gemacin a travs de la membrana plasmtica de la clula husped. Las protenas con actividad enzimtica que se encuentran dentro de la partcula vrica son, la transcriptasa inversa, una endonucleasa de ADN (integrasa) y una proteasa. El virin tambin contiene molculas especficas de ARNt celular que se usan en la replicacin. Caractersticas del genoma El genoma de los retrovirus contiene dos copias de ARN monocatenario de polaridad positiva. El extremo 5 del ARN presenta cap y el extremo 3 esta poliadenilado, de modo que el ARN es capaz de actuar directamente como ARNm, aunque no es usado como tal.

Todos contienen los siguientes genes y en el mismo orden: gag: que codifica protenas estructurales internas (antgeno especifico de grupo). pol: que codifica la transcriptasa inversa, la proteasa y la integrasa. env: que codifica las protenas de la envoltura. REPLICACIN La replicacin inicia por la unin de las espculas a protenas receptoras especficas de la superficie celular. La presencia de receptores para el virus es el determinante inicial del tropismo para tejidos y huspedes concretos. Replicacin del virus Empieza con la entrada a la clula, transcripcin inversa, integracin del ADNc (ADN copia) viral en el genoma hospedador, transcripcin del ADN vrico originando la formacin de ARNm vricos y el ARN de la progenie, encapsidacin en el citoplasma, la gemacin de viriones con envoltura, liberacin de la clula. La transcriptasa inversa es una ADN polimerasa que convierte el ARN viral en una copia de ADN lineal y monocatenario en el citoplasma de la clula husped. Esta enzima muestra tres actividades: 1) sntesis de ADN usando como molde el ARN viral, 2) sntesis de ADN usando como molde ADN, y 3) actividad de ribonucleasa H (degrada la cadena de ARN de un hbrido ARN:ADN).

La transcriptasa inversa necesita un cebador, que es un ARN de transferencia especfico (ARNt) de origen celular. Usando el ARNt como cebador, se transcribe a ADN un centenar de nucletidos cercanos al extremo 5 del ARN viral, all el proceso de transcripcin se detiene Para copiar el resto del ARN viral (que representa la mayor parte), se emplea un mecanismo distinto. Primero se eliminan secuencias terminales redundantes del extremo 5 de la molcula de ARN por medio de la ribonucleasa H. Esto conduce a la formacin de un pequeo ADN monocatenario que es complementario al segmento de ARN que esta en el otro extremo del ARN vrico (3). Este pequeo trozo de ADN hbrida luego el otro extremo de la molcula de ARN (3) donde continua la copia de las secuencias del ARN vrico (cambio de plantilla), as se crea una cadena negativa de ADN. Estas LTRs contienen promotores transcripcionales y estn relacionadas con el proceso de integracin.La integracin del genoma viral puede ocurrir en cualquier zona del ADN celular (que una vez integrado se denomina provirus) pasa a ser un elemento gentico estable. As, el provirus puede expresarse o permanecer en un estado latente y no expresarse. Si se activan los promotores en la LTR adecuada, se transcribe el ADN proviral integrado formndose transcriptos que pueden ser encapsidados en partculas vricas o pueden ser procesados y traducidos a protenas vrales. Cuando

las protenas vricas se acumulan en suficiente cantidad, tiene lugar el ensamblaje de la nucleocpside que luego se mueven hacia la membrana citoplasmtica para la constitucin final de las partculas vricas con envoltura. Patogenia de los retrovirus La mayora de los retrovirus afectan a un espectro de huspedes y especies muy limitado. El espectro restringido de huspedes y el tropismo tisular limitado han dificultado la consecucin de sistemas celulares apropiados para su cultivo. La capacidad para integrarse en los cromosomas y permanecer all, dificulta su deteccin, estudio y tratamiento. Los retrovirus han proporcionado un instrumento fundamental para la biologa molecular y han permitido el anlisis del crecimiento y la diferenciacin de las clulas y de la oncognesis a travs del estudio de los oncogenes vricos.Aunque no todos los retrovirus causan cncer, son muy comunes los retrovirus tumorales. VIH- VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA SIDA sindrome de inmunodeficiencia adquiridad es una inmunodepresin progresiva que sin acciones teraputicas y preventivas puede llegar a ser fatal. Puede presentarse desarrollo de infecciones oportunistas, neoplasias segundarias y manifestaciones neurologicas. El primer caso de SIDA fue descrito en Estados Unidos actualmente los pacientes infectados con VIH se concentra en los pases pobres (95%) y se encuentra en aumento, estimndose unas 14.000 infecciones diarias a nivel mundial a fines del 2003 la cifra aproximada de personas infectadas por VIH es de 40 millones, siendo el frica subsahariana la regin ms afectada, segn la OMS La terapia antirretroviral disponible en los pases industrializados, ha disminuido la progresin de la enfermedad, las muertes y la transmisin vertical; el nmero de nuevas infecciones se ha mantenido constante. Predomina la transmisin sexual (71%) sobre la sangunea(25,4%), seguida de la perinatal (3,6%). Existe adems un porcentaje de casos en los que no se ha determinado la forma de transmisin. Existe un periodo de incubacin desde la primoinfeccin por el virus y el desarrollo del SIDA, que vara en general desde 1 a 15 aos. El virus VIH-1, es el ms ampliamente estudiado y es el que est ms distribuido a nivel mundial. Los casos de VIH/SIDA continan diseminndose por todas las regiones del mundo en diferentes proporciones. El virus VIH-1, es el ms ampliamente estudiado y es el que est ms distribuido a nivel mundial. TRANSMISION DEL VIH Puede trabsmitirse por contacto sexual, inoculacin parenteral, pasaje vertical madre e hijo. Situaciones que facilitan el intercambio de sangre o lquidos orgnico que contienen el virus o clulas infectadas por este. Grupos de alto riesgo de adquirir infeccin Varones homosexuales o bisexuales Usuarios de drogas intravenosas Usuario de drogas no intravenosas, inhaladas Hemoflicos Receptores de sangre y hemoderivados no hemoflicos La transmisin sexual es la principal forma de infeccin en el mundo, responsable de aproximadamente el 75% de todos los casos El virus se transmite de dos formas: 1) a travs de las clulas de Langerhans (clulas dendrticas) de la mucosa y 2) por la inoculacin directa en los vasos sanguneos rotos por traumatismos

Algunos conocidos virus tumorales causan sarcomas o leucemia aguda y poseen un alto potencial oncognico. La infeccin con uno de estos virus puede originar transformacin celular y la formacin de tumores. Se cree que estos retrovirus poseen un gen transformante u oncogn que codifica una protena responsable de la transformacin celular. Este gen codifica una fosfoprotena que posee actividad de protena quinasa, estas catalizan la fosforilacin de protenas, mecanismo que regula la actividad de las protenas. En las clulas normales se han encontrado genes similares, los protooncogenes, lo que sugiere que estos genes son importantes en el crecimiento celular. Los retrovirus son capaces de incorporar esas secuencias normales, que luego se alteran o se expresan de modo anormal. En consecuencia, los retrovirus son agentes mediante los cuales tales genes se transfieren de clula a clula. Un retrovirus importante, el VIH causante del SIDA, es un retrovirus no tumoral. TAXONOMIA Y CLASIFICACIN Es un virus perteneciente a la familia Retroviridae, se ubica en la subfamilia lentivirinae. En esta familia estn tambin: el virus de inmunodeficiencia felina, el virus de inmunodeficiencia de los simios, el virus visna de las ovejas y el virus de la anemia infecciosa equina VIH-1 y VIH-2 poseen antgenos comunes existen pruebas especificas para detectarlos a ambos. VIH-1, tiene M, O (u outlier) y N (o no M/no O). El grupo M a su vez se divide en distintos subtipos que van de A-L. El grupo M es el responsable de la pandemia SIDA, mientras que el grupo O est restringido a unos pocos pases del frica occidental. VIH-2, se divide en cinco subtipos (A-E). MORFOLOGIA VIRAL Es un virin esfrico de 100-200 nm de dimetro, contiene una nucleocpside electrondensa en forma de cono, rodeado de una bicapa lipdica que proviene de la membrana de la clula husped. La protena p24 es el antgeno ms fcil de detectar y son los anticuerpos contra l, los que se utilizan para el diagnostico de infeccin por VIH por medio de ELISA. El ncleo del virus contiene: la protena de la cpside, p24 (p26 en VIH-2); la protena p7/p9 de la nucleocpside; dos copias de ARN; y tres enzimas virales (proteasa, transcriptasa inversa e integrasa).

GENOMA VIRAL Dos molculas de ARN de cadena simple de 9400 pares de bases, unidas por enlaces no covalentes. Los clsicos genes estructurales gag, pol, y env codifican protenas precursoras que sern divididas luego por la proteasa en protenas maduras. El precursor gag es clivado en cuatro protenas p17-18 para el VIH-1 y p16 para el VIH-2, una protena mayor, parte de la

capside, p24-25 en el VIH-1 y p26 en el VIH-2, nucleocpside p7 El gen pol la proteasa que cliva los productos de gag y pol; la transcriptasa reversa y la integrasa El gen env, a las glicoprotenas de envoltura, que sern sintetizadas como un gran precursor que luego es clivado dejando una protena transmembrana (gp41) El genoma del VIH contiene adems otros genes: tat, rev, vif, nef, vpr y vpu, encargados de la regulacin de la sntesis y de la organizacin de las partculas virales infecciosas: La protena Tat aumenta 1000 veces la transcripcin de los genes virales, favorece la replicacin del virus. La protena Rev tiene su efecto a nivel postranscripcional, regulando el transporte de ARNm desde el ncleo al citoplasma. El gen vpu fundamental para la gemacin del virus desde las clulas infectadas. Interfieren con la unin intracelular del precursor env con CD4. La protena Nef necesaria para el desarrollo de la infeccin progresiva, producira la apoptosis de algunas clulas y una regulacin en baja de las molculas del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase I en las clulas infectadas por el VIH. El gen vpr facilita la infeccin de las clulas que no estn en divisin (por ej.: macrfagos) y detiene el ciclo celular en fase G2, con esto incrementa al mximo la proteccin del virus. El gen vif es importante para la creacin de virus libre con capacidad de infectar otras clulas. SINTESIS E INTEGRACIN DEL ADN VIRAL Ingresa a la clula luego, las dos molculas de ARN son transcriptas en forma reversa en una molcula lineal de ADN de doble cadena. La sntesis en el citoplasma el ADN viral es transportado al ncleo La cadena positiva de ADN tiene dos sitios de origen distintos para su sntesis El VIH tiene una segunda regin en el centro de su genoma que se utiliza como sitio de origen adicional, este sitio mejora el proceso de transcripcin reversa se integra a la cedula husped, esta reaccin es mediada por una integrasa codificada por un sector del ADN viral. REGULACIN DE LA EXPRESIN GNICA La regin LTR del VIH contiene promotores virales activos que para su transcripcin requieren la presencia de activadores celulares. La protena Tat es requerida para la transcripcin y se une a una parte de la regin R del LTR y junto con los activadores transcripcionales de origen celular (SP-1, NF-B) promueven el inicio de la transcripcin y la elongacin del transcripto aparecen en la infeccin aguda tres clases de transcriptos: molculas de ARN que producen las protenas gag y pol molculas para las glicoprotenas de envoltura y molculas para las protenas reguladoras. El sistema Rev controla la exportacin citoplasmtica y estabilidad de estos transcriptos. VARIABILIDAD GENETICA La regin ms variable del genoma es la que codifica para las glicoprotenas de envoltura. La regin mas conservada es la de los genes gag y pol. Las glicoprotenas de envoltura evaden el sistema inmune porque se originan en regiones hipervariables. Gracias a esta variabilidad el virus escapa a la respuesta inmune antiviral. MECANISMOS DE PATOGENICIDAD En los infectados con el VIH es usual observar distintas anormalidades inmunolgicas severa linfopenia, principalmente de clulas T CD4 + reacciones de hipersensibilidad cutnea

retardada disminuidas o ausentes perdida de la funcin citotxica de las clulas natural killer (NK) funcin anormal de los monocitos, hipergammaglobulinemia policlonal La molcula CD4 sirve como receptor del VIH, el virus no solo infecta a los linfocitos T CD4 +, sino a otras clulas que tambin expresan este receptor, como monocitos de sangre perifrica, precursores de clulas T de la medula sea y el timo, y macrfagos tisulares reduce la capacidad funcional global de los linfocitos T perifricos y de las clulas presentadoras de antgeno, e inhibe la produccin y maduracin de los precursores de la medula. ENTRADA A LA CELULA El virus necesita de: la presencia de otro correceptor que son los denominados receptores para quemoquinas. receptor CD4. Las quemoquinas son pptidos pequeos, con funcin quimiotactica para las clulas que intervienen habitualmente en los mecanismos de defensa: neutrofilos, macrfagos, linfocitos. En presencia de un proceso inflamatorio, estas clulas son atradas hacia el foco de infeccin, por medio de sustancias: las quemoquinas. Estas clulas presentan en su superficie receptores para quemoquinas, a su vez son correceptores para el VIH. Se inicia cuando una partcula viral completa encuentra una clula con receptor CD4. La glicoprotena gp120 se une fuertemente a este receptor para que la clula sea infectada por el VIH. Debe expresar un correceptor (quemoquinas) al que se unir la gp41, produciendo entonces la fusin del virus y la clula. Existen dos tipos de correceptores, presentes en tipos distintos de clulas: CCR-5: se encuentra en monocitos y macrfagos CXCR-4: se encuentra en los linfocitos T

CICLO VIRAL Retrotranscripcin: en el citoplasma celular la enzima transcriptasa inversa convierte en ARN viral en ADNc. Integracin: el ADN viral as formado migra hacia el ncleo donde es integrado al ADN celular con la ayuda de la integrasa. Una vez incorporado el genoma celular el ADN viral pasa a llamarse provirus Transcripcin: para la produccin de nuevos virus se necesita de ARNm, sintetizado en el proceso de transcripcin utilizando enzimas de origen celular. Los genes virales controlan este proceso a travs de el gen tat. Traduccin: el ARNm procesado en el ncleo es transportado al citoplasma, aqu el gen rev es critico, sin la protena rev no existiran protenas estructurales. En el citoplasma el ARNm, utilizando la maquinaria de sntesis proteica celular, sintetiza las largas cadenas de protenas y enzimas virales Ensamblaje y brotacin: las protenas del core, las enzimas y el ARN se ubican debajo de la membrana celular, mientras que las protenas de envoltura viral se agregan a la membrana celular. Esto da origen a formas virales inmaduras (no infecciosas an) que surgen de la superficie celular adquiriendo una envoltura que incluye protenas virales y celulares. Nuevas generaciones de partculas infectivas por gemacin se acumulan partculas virales en el interior de la clula infectada, producindose la destruccin

de sta, liberndose al exterior esas partculas virales, la mayora de las cuales son defectivas ya que carecen de la cubierta necesaria. EVENTOS DE LA INFECCIN Vida sexual permite la entrada del virus a travs de las mucosas: orofarngea, genital y anal. La efectividad de la transmisin es mayor si es por va parenteral Las partculas virales que viajan en las secreciones vaginales o en el semen, atraviesan la barrera mucosa se encuentran en la mucosa o la submucosa con las CPA. Las clulas reconocen a la partcula viral como extraa la incorporan a su superficie por medio de fagocitosis para ser presentados a los linfocitos. El macrfago es incapaz de destruir a la partcula viral. En un macrfago es posible encontrar innumerables partculas virales. La partcula viral puede encontrarse adems con los linfocitos CD4+. el virus una vez atravesada la barrera mucosa puede: a) quedar dentro de un macrfago c) adherirse directamente a los linfocitos CD4+ y comenzar a multiplicarse en su interior b) ser presentado a los linfocitos CD4 por las CPA, las clulas foliculares dendrticas, se encuentran en los ganglios linfaticos regionales Estas tienen en su superficie numerosas proyecciones con receptores CD4a los que se unirn las partculas virales libres de la circulacin, atrapando de esta manera innumerables virus. Estos son presentados por estas clulas a todos los linfocitos que estan circulando por la linfa o la sangre, pasan por dichos ganglios, siendo as infectados. Las partculas virales se diseminan por todo el organismo infectando varios rganos particularmente rganos linfoides como ndulos linfoides, bazo, amgdalas y adenoides. Si bien tiene una diseminacin sistmica, el blanco fundamental del VIH es el sistema inmune y dentro de ste, los linfocitos CD4+. En la etapa temprana se puede detectar gran cantidad de partculas virales a nivel plasmtico La carga viral, en esta etapa de la infeccin puede llegar a 10 millones o ms de partculas por ml de plasma (10/ml). Estas partculas tienen una corta vida media libre en el plasma (aproximadamente unos 10-15 minutos). Los linfocitos CD4 que estn produciendo virus tienen una vida media de 1-2 das La partcula viral, una vez liberada al plasma busca nuevas clulas con receptores CD4 para poder infectar continuar su ciclo de replicacin viral fase aguda: las clulas CD4+ decrece en 20 a 40%, por muerte celular o por dejar la circulacin. De dos a cuatro semanas las personas sufren sntomas similares a un gripe. De dos a tres meses se van generando una serie de respuestas por parte del sistema inmune del husped, producindose de manera espontnea una drstica cada de la carga viral, sin que medie un tratamiento antiviral la carga viral cae, y no existen sntomas, la replicacin viral contina permanentemente. Se establece un equilibrio, por el cual habra una produccin y destruccin de 10 billones de partculas virales por da, as como una produccin y destruccin de 2 billones de linfocitos CD4 por da PERIODO DE ENFERMEDAD CLINICA Existen variaciones en el perodo de infeccin sin clnica de enfermedad. Distintos factores influyen en la progresin hacia la enfermedad edad, diferencias genticas entre los individuos, la virulencia de las diferentes cepas y la coinfeccin con otros microorganismos. La existencia de mutaciones en los correceptores puede influenciar el curso evolutivo hacia la enfermedad. Cuando el paciente alcanza el estadio clnico de SIDA, aparecen infecciones oportunistas caractersticas y neoplasias el curso de la enfermedad esta caracterizado por la hiperactivacin del sistema inmune con consecuencias negativas.

La activacin crnica del sistema inmune en la enfermedad puede resultar en una estimulacin masiva de las clulas B, perdiendo stas la habilidad de producir anticuerpos contra otros patgenos. Tambin lleva a la apoptosis y al aumento en la produccin de citoquinas que no solo estimulan la replicacin del VIH, sino que tambin tiene efectos perjudiciales.

RESPUESTA INMUNE La respuesta humoral contra las protenas virales ms importantes (Gag, Pol, Env) aparece entre tres semanas y tres meses luego de la exposicin viral. Posee dos componentes: Componente celular, Componente humoral Componente celular Respuesta de los linfocitos T CD8+ citotxicos: al reconocen en la clula infectada la presencia de partculas virales unidas a molculas del CMH de tipo I; estos liberan enzimas que destruyen la clula infectada. Los linfocitos T CD8+: otro mecanismo es liberando quemoquinas que se unen a los receptores para quemoquinas presentes en las clulas, bloqueado la fusin de nuevas partculas virales a estas clulas. Los linfocitos T CD4+ : reconocen las partculas virales presentadas en conjunto a molculas MHC de tipo II, produciendo linfoquinas que se unen a sus receptores de quemoquinas bloqueando tambin la unin de nuevos virus a clulas Componente humoral Es dada por los linfocitos B Reconocen la presencia de sustancias antignicas y se activan produciendo anticuerpos antiVIH, monta una respuesta humoral, pero el virus, elabora partculas virales capaces de evadir la neutralizacin. Se da un ciclo de neutralizacin, y se producen anticuerpos que pueden ser especficos de tipo o pueden ser especficos de grupo La produccin de anticuerpos: puede detectarse de dos a ocho semanas despus de la infeccin, luego de la declinacin de la viremia inicial. La seroconversin se inicia con la respuesta IgM anti protena Gag; la respuesta IgG se produce entre la primera semana y la 41. los primeros marcadores serolgicos en ser evidenciados son IgG anti-p24 e IgG anti-gp120, seguido de IgG anti-gp41. Luego de la infeccin aguda por VIH sigue una fase de infeccin activa inaparente con una duracin de entre 1 y 15 aos, donde los pacientes estn asintomticos pero con una disminucin lenta y progresiva de su sistema inmune. Despus el sistema inmune,

que hasta ese momento haba sido capaz de equilibrar la produccin y destruccin de las partculas virales, fracasa y ya no logra contener la replicacin viral

La perdida progresiva de linfocitos T CD4+ (calculada entre 60 y 70 linfocitos CD4+ por mm por ao), puede atribuirse a una variedad de mecanismos como, Muerte celular directa, Apoptosis, Formacin de sincicios, Observadores inocentes, Dao a los precursores celulares y Anergia METODOS DE ESTUDIO Diagnstico a personas que se sospechan pueden estar infectadas y requieren de atencin mdica, consejo y educacin sanitaria respecto a su estado. Tambin para la seguridad en las transfusiones, productos hemoderivados y donaciones de rganos. Y la aplicacin de programas de vigilancia serolgica de esta infeccin o en programas de investigacin clnica, farmacolgica, virolgica e inmunolgica. ENSAYOS SEROLOGICOS DE TAMIZAJE Enzimoinmunoanlisis (EIA). La deteccin de anticuerpos anti-VIH con tcnicas de EIA es el mtodo ms empleado, hay distintos principios en la deteccin de los anticuerpos (ELISA indirecto, competitivo, sandwich y captura). Aglutinacin. Estas pruebas estn basadas en la aglutinacin de antgenos de VIH que previamente han sido fijados a partculas capaces de aglutinarse en presencia de suero que contenga anticuerpos antiVIH. Pruebas de EIA de membrana (Dot-Blot). En estas pruebas los anticuerpos anti-VIH son detectados mediante un mtodo inmunoenzimtico. El antgeno, compuesto por protenas recombinantes o pptidos sintticos de uno o ambos virus, est fijado a tiras de nitrocelulosa. Pruebas fluorimtricas. Los antgenos especficos estn ligados a micropartculas y el indicador de la reaccin es un fluorocromo que acta como sustrato. La fluorescencia emitida durante la reaccin es medida por un fluormetro PRUEBAS DE CONFIRMACIN Se utilizan para la confirmacin de sueros positivos, pero en determinados casos pueden emplearse tambin para continuar el estudio en casos dudosos, dada su mayor sensibilidad en muchos casos. radioinmunoprecipitacin (RIPA), inmunofluorescencia indirecta (IFI), inmunoelectrotransferencia o Western Blot (WB) Western Blot: Tcnica de inmunoelectrotransferencia, permite una discriminacin puntual de anticuerpos frente a las distintas protenas del virus. Las tiras de nitrocelulosa contienen, generalmente, casi todas las protenas estructurales del VIH y algunas protenas precursoras de aquellas. Se revela la presencia de anticuerpos frente a las diferentes protenas del virus mediante reacciones inmunoenzimticas distintas. la aparicin de bandas coloreadas de mayor o menor intensidad, en el lugar de la tira de nitrocelulosa en el que estn situadas las protenas del

VIH contra las cuales existen anticuerpos en el suero problema. Existen distintos criterios de positividad para el Western Blot. El propuesto por la OMS resulta el ms sensible cuando se manejan sueros de muy variada procedencia poblacional. Adoptando este criterio un suero es considerado positivo cuando presenta reactividad al menos frente a dos de los siguientes 3 antgenos virales: p24, gp120 y gp4l. Inmunofluorescencia indirecta la confirmacin por esta tcnica est basada en la demostracin de anticuerpos frente a clulas infectadas por VIH, los resultados slo pueden expresarse como positivos o negativos. Las clulas infectadas expresan gran cantidad de antgenos correspondientes a distintos momentos de la infeccin celular, por lo que esta tcnica detecta todo tipo de anticuerpos anti-VIH. Tcnica de radioinmunoprecipitacin demostracin de la existencia de anticuerpos anti-VIH en el suero en estudio, que en presencia de protenas vrales marcadas radioactivamente conduce a la formacin de innunocomplejos. Los complejos protena viralanticuerpo especfico son separados por tcnicas electroforticas segn su peso molecular y se ponen en evidencia mediante la impresin del marcaje radioactivo en una placa fotogrfica. Deteccin de Ag p24: Este antgeno puede detectarse en suero o plasma durante la fase aguda de la infeccin primaria por VIH y durante la fase SIDA. El antgeno p24 es detectable solamente en el 4% de los adultos asintomticos. La deteccin de este antgeno puede utilizarse para el diagnstico de infeccin por VIH en lactantes nacidas de madres VIH positivas. PCR: La amplificacin genmica por reaccin en cadena de la polimerasa, demuestra la existencia de parte del genoma viral a partir de muestras de sangre perifrica.recin nacidos de madres infectadas por VIH (sensibilidad: 75 a 97%), demostracin de infecciones por VIH-2 con serologa no concluyente, deteccin de mutaciones especficas asociadas a la resistencia a los antivricos. Aislamiento viral: el aislamiento del VIH sigue siendo hoy en da una tcnica de referencia, su empleo queda restringido a laboratorios bien equipados. Supone el cultivo del virus a partir de muestras clnicas que contengan partculas virales libres o clulas infectadas. Requiere el cocultivo de linfocitos de sangre perifrica del paciente con linfocitos de un donante no infectado, junto con la adicin de IL-2 para favorecer el crecimiento de clulas Deteccin y cuantificacin de ARN viral: Esto radica en que los recin nacidos presentan en su sangre hasta los seis meses de vida IgG maternos, por lo que los ensayos serolgicos podran arrojar falsos positivos. Por otra los ttulos de IgM en esta poblacin son sumamente bajos. Los ensayos de PCR de ADN proviral y de cultivo de clulas mononucleares de sangre perifrica son los mtodos ms sensibles para la determinacin de la infeccin por VIH, alcanzando un 50% durante el primer mes de vida y cerca del 100% en lactantes mayores de 6 meses. PREVENCION Y CONTROL Anualmente se destinan unos 500 millones de dlares a la investigacin de vacunas eficaces contra el VIH, habindose evaluado desde 1987 hasta el presente unas 30 vacunas candidatas. Hoy en da existen dos de estas vacunas en ensayos de eficacia de fase III, una de ellas en Estados Unidos, basada en el subtipo (B) circulante en esa regin. la otra, en evaluacin en Tailandia, se basa en los subtipos que circulan en dicho pas (B y E). Ambas vacunas estaran dirigidas contra la glicoprotena de envoltura gp120. No existe vacuna disponible para la inmunizacin activa y al alcance de la poblacin con riesgo de contagio por el VIH-1; probablemente requerir an varios aos

de estudios y en la actualidad la posibilidad real de obtener una vacuna efectiva parece todava bastante alejada. En ausencia de una vacuna, la prevencin de la infeccin por el VIH-1 debe basarse en evitar su transmisin TRATAMIENTO ANTIRRETROVIRAL El tratamiento de la infeccin por el virus de la inmunodeficiencia humana se basa en una combinacin de varias drogas se emplean dos inhibidores de la retrotranscriptasa anlogos de nuclesidos (AZT, ddI o didanosina, lamivudina, entre otros) con un inhibidorde la proteasa (nelfinavir, saquinavir, indinavir), logrando una supresin impresionante en la replicacin viral, tanto en nivel como en duracin. diferentes causas que pueden motivar dicho cambio se encuentran Una mala respuesta virolgica temprana a la teraputica Un aumento significativo de la carga viral luego de un mnimo, no correlacionado a una causa corregible La disminucin contina del conteo de clulas T CD4+ El deterioro clnico del paciente bajo tratamiento con un rgimen estable PREVENCIN DE LA TRANSMISIN VERTICAL: EMBARAZO Debe aconsejarse a aquellas mujeres infectadas por el VIH-1 que eviten el embarazo, ya que es posible la transmisin de la infeccin al feto en al menos el 10-30% de los casos. La administracin de zidovudina a partir de las semanas 14-34 del embarazo y en el perodo del parto, y en el recin nacido durante las seis primeras semanas de vida, reduce la tasa de transmisin maternofetal a menos del 8% y se tolera muy bien. La combinacin del tratamiento con AZT y cesrea ha disminuido la transmisin vertical del VIH-1 a menos del 2%. PROFILAXIS POSTEXPOSICIN Para el personal sanitario, el riesgo de infeccin es del 0,2-0,5% en caso de herida accidental con un objeto contaminado con sangre, y si slo ha existido un contacto accidental con la piel y las mucosas intactas. Debe recomendarse el tratamiento triple con AZT o d4T, 3TC e indinavir o nelfinavir. El tratamiento debe instaurarse lo antes posible (menos de cuatro horas) y debe administrarse durante al menos cuatro semanas. PRECAUCIONES UNIVERSALES Es obligatorio la aplicacin de precauciones universales el personal sanitario deber utilizar mtodos de barrera y adoptar precauciones para evitar la produccin de heridas por agujas, bistures u otros instrumentos punzantes en el transcurso de su empleo o limpieza. El descarte de tales elementos debe realizarse en recipientes de paredes rgidas a fin de evitar cortes y pinchaduras. ESTERILIZACIN DEL INSTRUMENTAL SANITARIO Los mtodos habituales de esterilizacin y desinfeccin son adecuados para esterilizar el instrumental sanitario o efectuar una desinfeccin ambiental. Estos virus son rpidamente inactivados por detergentes y desinfectantes efectivos contra otros virus envueltos. Se recomienda el uso de hipoclorito de sodio en una concentracin de 5.000 ppm para superficies contaminadas, emplear concentraciones ms elevadas cuando se trabaje con cultivos virales. BIBLIOGRAFA http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/retrovirus.pdf http://virologia2004.tripod.com/ciclo.htm http://www.maph49.galeon.com/sida/structure.html http://www.maph49.galeon.com/sida/envelope.html http://www.maph49.galeon.com/sida/protein.html

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