Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGA

DEPARTAMENTO DE BIOLOGA

ACADEMIA DE MICROBIOLOGA

BANCO DE REACTIVOS PARA LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA AMBIENTAL

M. EN C. GLORIA LPEZ JIMNEZ

DICIEMBRE 2007 1

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

I.- ESTRUCTURA Y FUNCIN CELULAR La Microbiologa es la ciencia que estudia los microorganismos, menciona cinco caractersticas en las cuales se basa su estudio. 1.1------------------------------------------------------1.2------------------------------------------------------1.3------------------------------------------------------1.4------------------------------------------------------1.5------------------------------------------------------Menciona cinco diferencias entre procariotes (bacterias) y eucariotes. PROCARIOTES EUCARIOTES 4.1 --------------------------------------------------- --------------------------------------------------------4.2---------------------------------------------------- --------------------------------------------------------4.3---------------------------------------------------- -------------------------------------------------------4.4---------------------------------------------------- -------------------------------------------------------4.5---------------------------------------------------- ------------------------------------------------------Que estudia la Microbiologa? _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ ___________ Cmo se denomina al sistema que se aplica para nombrar a los microorganismos? _____________________________________________________ Segn el Sistema binomial de Linneo escribe el nombre correcto de 3 procariotes 1.______________________________________________________ 2. _____________________________________________________ 3. _____________________________________________________ Qu caractersticas de los microorganismos se toman en cuenta para su clasificacin? 1. ____________________________________________________, 2. ____________________________________________________, 3. ____________________________________________________, 4. ____________________________________________________, 5. ____________________________________________________,

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Relaciona Ambas Columnas A) Pili B) Fimbrias C) Flagelos D) Pared celular E) membrana citoplsmica F) Ribosomas G) Mesosomas H) genoma I) cpsula ( ( ( ( ( ( ( ( ( ) Sntesis protenas ) proteccin y deshecho ) Informacin gentica ) inicio de la replicacin ) rigidez y forma ) movilidad ) intercambio gentico ) nutricin, excrecin y transporte ) adhesin especfica

LA CLASIFICACIN DE LOS ORGANISMOS. Indica si la respuesta es verdadera (V) o falsa (F). ( )Haeckel clasific a los microorganismos en Reino Plantae, Reino Animalia, Reino Lapides ( )Copeland clasific a los microorganismos en Reino Mychota, Reino Protoctista, Reino Plantae, Reino Animalia ( )Whittaker clasific a los microorganismos en Reino Monera, Reino Protista, Reino Plantae, Reino Fungi, Reino Animalia ( )Margulis clasific a los microorganismos en Dominio Procaryota (2 subdominios), Dominio Eucaryota (2 subdominios) ( ( )Mayr clasific a los microorganismos en Dominio Prokarya (Un reino), Dominio Eukarya(4 reinos) )Carl Woese clasific a los microorganismos en 3 Dominios (Bacteria, Archae, Eukarya)

( )Cavalier-Smith clasific a los microorganismos en Superreino Procaryota (1 reino), Superreino Eukaryota (5 reinos) ( )Aristteles clasific a los microorganismos en Reino Plantae, Reino Animalia ( )Carl Linneo clasific a los microorganismos en Reino Protista (protozoarios, Protistas atpicos, protophytas), Reino Plantae, Reino Animalia Correlaciona ambas columnas a) Haeckel (1894) ( ) Reino Plantae, Reino Animalia, Reino Lapides

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

b) Copeland (1956 c) Whittaker (1969) d) Margulis (1988) e) Mayr (1990) f) Carl Woese (1990) g) (1998) Cavalier-Smith

( ) Dominio Procaryota (2 subdominios), Dominio Eucaryota (2 subdominios) ( ) Reino Plantae, Reino Animalia ( ) Reino Protista, Reino Plantae, Reino Animalia ( ) Reino Monera, Reino Protista, Reino Plantae, Reino Fungi, Reino Animalia ( ) Superreino Procaryota (1 reino), Superreino Eukaryota (5 reinos) ( ) Reino Mychota, Reino Protoctista, Reino Plantae, Reino Animalia

h) Aristteles i) Carl Linneo (1735)

( ) Dominio Prokarya (Un reino), Dominio Eukarya(4 reinos) ( ) Bacteria, Archae, Eukarya (3 Dominios)

Selecciona con una cruz, la respuesta correcta 1 Pulidor de lentes de orign holands que describi a los microorganismos con detalle. ( )Francesco Redi ( )Anton Van Leeuwemhoek ( )Robert Hooke 2 Cientfico britnico que descubre la penicilina. ( ) John Tyndall ( )Edward Jenner

( )Alexander Fleming

3 Aport grandes avances a la Microbiologa principalmente en los procesos de fermentacin, vacuna de la Rabia, y la eliminacin del concepto de la generacin espontnea . ( ) Luis Pasteur ( ) Edward Jenner ( ) Joseph Lister 4 Dio origen al concepto de la vacunacin y cre la Vacuna contra la viruela ( ) Luis Pasteur ( ) Edward Jenner ( ) Joseph Lister 5 Sus investigaciones dieron origen al concepto de la quimiolitotrofa ( ) Martinus Beijerinck ( )Sergei Winogradsky ( ) Robert Koch

II. TCNICAS MICROBIOLGICAS MICROSCOPA Define a travs de su frmula matemtica los siguientes conceptos: Resolucin----------------------------------------------------------Amplificacin o aumento de un microscopio compuesto----------------------------------------Apertura numrica------------------------------------------------Indice de refraccin------------------------------------------------

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Escribe en el espacio correspondiente la palabra que completa la definicin. 1. En el microscopio de -----------------------------------, el condensador est constituido por electroimanes, la muestra se coloca en una mallita de metal y la imagen se imprime sobre una placa fotogrfica o se observa a travs de una pantalla de televisin y posee dos variantes--------------------------------------- y -----------------------------------------------------

2. El microscopio de ------------------------------------- consta de un filtro polarizante, un condensador de------------------------------ y un prisma que permite la separacin completa del rayo de luz en rayos directos y rayos difractados, y que al unirse y pasar por el objeto producen una imagen interferida. 3. En el microscopio de -----------------------------------, el condensador enfoca la luz sobre el objeto en forma oblicua, por lo que no se observa una imagen ntida, sino un reflejo brillante sobre fondo oscuro. 4. En el microscopio de ---------------------------------, la visualizacin de los microorganismos y sus estructuras, no requieren de tincin y la imagen que se observa est en funcin de la densidad de la muestra. 5. En el microscopio de -----------------------------------, la luz que incide sobre la muestra es diferente en longitud de onda, a la luz emitida y es de amplia utilizacin en Histologa e inmunologa. Relaciona las dos columnas colocando la letra en el parntesis correspondiente. ( ( ( ( ) ) ) ) Microscopio compuesto Microscopio de epifluorescencia Microscopio electrnico Microscopio de contraste de fases a)Usa condensador de contraste de fases b) usa condensador electromagntico c) La longitud de onda incidente es menor que la observada (i= Luz UV, obs.= 490 nm) d) usa condensador de Abb o acromtico e) Se pueden observar preparaciones en fresco f) Requiere tinciones con colorantes especiales como naranja de acridina, bromuro de etidio g). Se observan microorganismos en movimient o h). Tiene un poder de resolucin de 0.2 nm i) Requiere fijacin especial, deshidratacin y tincin especial con metales como el oro.

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

9.- Calcula la amplificacin de la imagen obtenida en un microscopio de contraste de fases, con el objetivo de inmersin (100X), valor del ocular: 15 X, valor del tubo del ocular 2 X. 10.- Calcula la apertura numrica de la lente de inmersin de un microscopio compuesto, iluminada con luz azul (490 nm), con un ngulo de luz incidente de 30.

TINCIONES: Completa los siguientes enunciados 1 En la tincin de Gram: la pared celular de las bacterias Gram _____________, posee una capa de_____________ ms gruesa que la de las Gram______________, al deshidratar con ____________________, la malla se hace ms cerrada e impide que salga el complejo _____________________________, las clulas quedan teidas de color ___________________ 2 En la tcnica de tincin de Ziehl Neelsen, los cidos _______________, son los responsables de que las bacterias ______________________________________, no se decoloren con el ___________________________, por lo que las bacterias quedan teidas de color rojo 3 Las tcnicas para teir endosporas bacterianas o flagelos, son del tipo: a) especfica b) diferencial c) simple 4 Las tcnicas de Gram y Ziehl Neelsen son tinciones: a) especficas b) diferenciales

c) Simples

Indica si la respuesta es falsa( F) o verdadera(V) en los siguientes enunciados. 1 Un colorante es un compuesto que solamente reacciona con algn componente celular 2 Los grupos auxocromos, por si solos imparten el color 3 Los grupos carbonilo, etenilo y azo, son ejemplos de grupos cromforos 4 La tincin de Gram se fundamenta en la disolucin y fijacin del cristal violeta en el citoplasma 5 La Tincin de Ziehl Neelsen es una tincin especfica 6 La tincin de Sheaffer y Fulton tie endosporas 7 Para teir a los microorganismos es imprescindible que estn fijados 8 El colorante naranja de acridina es para teir cidos nucleicos 9 El calor y el etanol son agentes para fijar las preparaciones ( ( ( ( ( ( ( ( ( ) ) ) ) ) ) ) ) )

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

ESTERILIZACIN. Relaciona las dos columnas, colocando la letra en el parntesis, puede haber ms de una respuesta: 1. Proceso que se realiza a 121 C, 15 min, 15 lb/ pulg2 y requiere superficies porosas 2. Se basa en la capacidad de transferencia de calor por contacto del material 3. Emplea filtros de acetato de celulosa, nitrato de celulosa, nylon de 0.22, 0.47, 0.8 m 4. Se aplica a artculos termoestables, soluciones, ropa, desechos contaminados, agua 5. La destruccin de los microorganismos ocurre por oxidacin de la materia orgnica 6. Con este proceso se esteriliza material empacado en papel o plstico (jeringas 7. Destruccin de enzimas, predominando las reacciones de desnaturalizacin e hidrlisis 8. Las condiciones de operacin de este procesos son: 160180C/120 min, 140C/180 min 9. Es el tiempo necesario a una temperatura fija, dosis de radiacin requerida para reducir un logaritmo decimal la poblacin microbiana. 10. Las condiciones de proceso son: humedad relativa del 60%, a 40-50C, concentracin de 400 mg/L, 6-24 h 11. Es el incremento necesario en temperatura para reducir el valor D, en un 90%. 12. Esteriliza enzimas, antibiticos, carbohidratos, aminocidos y aire 13. Por medio de este proceso podemos esterilizar alimentos o productos enlatados. 14. Es el proceso por el cual se matan o se eliminan los microorganismos ( ) Esterilizacin por calor hmedo ( ) Formaldehdo ( ( ) Factor de inactivacin ) Procesos de esterilizacin

( ) Esterilizacin microfiltracin

por

( ) Esterilizacin con xido de etileno ( ) Valor D

) Esterilizacin por calor seco

) Valor Z

( ) Esterilizacin por radiacin gamma

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

15. Las condiciones de este proceso son 40-50C, humedad relativa de 60% y una concentracin del gas de 400 mg/ml, X 24 h. 16. Este valor nos indica cuantos ciclos de valor D se requieren para reducir la probabilidad encontrar unidades no estriles despus de procesar AISLAMIENTO Y NUTRICIN. SUBRAYA LA RESPUESTA CORRECTA, QUE COMPLETE LAS SIGUIENTES PREGUNTAS: 1.- Esta tcnica se puede aplicar para aislar y contar procariotes (bacterias): a) Estra cruzada b) Extensin con varilla de vidrio c) Nmero ms probable 2.- La tcnica por estra cruzada nos permite a) Observar morfologa colonial b) Diluir el inculo c) aislar colonias d) todas las anteriores e) ninguna de las anteriores 3.- La desventaja de esta tcnica de aislamiento, es que las bacterias quedan incluidas en el agar: a) Estra cruzada b) vaciado en placa c) NMP 4.-Este medio consiste en una mezcla balanceada de nutrientes, con salinidad y pH controlados, sin inhibidores: a) Simple b) enriquecido c) enriquecimiento 5.- Los medios de cultivo que nos sirven para demostrar alguna actividad metablica de los microorganismos son: a) Selectivos b) diferenciales c) indicadores 6.- Los medios de cultivo que permiten poner de manifiesto a ciertos microorganismos, porque tienen inhibidores como antibiticos, colorantes o metales pesados son: a) Selectivos b) diferenciales c) indicadores

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

7.-Estos medios, generalmente emplean sustancias como indicadores de pH, sales biliares, que permiten poner de manifiesto a dos o mas microorganismos por las caractersticas de su morfologa colonial a) Selectivos b) diferenciales c) indicadores 8- A estos medios de cultivo se les aaden sustancias como el suero fetal bovino, sangre o jugo de verduras: a) Sintticos b) complejos c) simples 9 Clasifica los siguientes medios (1 y 2) de acuerdo a los componentes de su formulacin y consistencia: Medio 1 Es un medio: Componentes a)_____________________ Glucosa b)_____________________ K2HPO4 c)_____________________ KH2PO4 MgSO4 (NH4)2SO4 Agua

Medio 2 Componentes Extracto de carne Peptona Lactosa Sales biliares Citrato de sodio Tiosulfato de sodio Citrato frrico Agar al 1.5 % Verde brillante Rojo neutro Agua destilada

Es un medio: a)_____________________ b)_____________________ c)_____________________

III. RUTAS METABLICAS PARA LA OBTENCIN DE ENERGA Coloca una letra ( V ) si la respuesta es verdadera o ( F ) si es falsa. La fotofosforilacin cclica puede existir tanto en la fotosntesis oxignica como en la anoxignica ( )

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

La Fotofosforilacin es semejante a la respiracin porque en ambas existe una cadena transportadora de electrones Mediante el Ciclo de Calvin, la enzima Ribulosa 5 fosfato carboxilasa fija una molcula de CO2 en la clula Los carotenos, Ficobilinas, son pigmentos accesorios en la fotosntesis Las reacciones luminosas se realizan en el citoplasma de la clula En la fotosntesis oxignica hay hidrlisis del agua Las bacterias obtienen la energa para su crecimiento a travs de la luz y de compuestos qumicos En las reacciones de la fase luminosa se obtiene NADH como producto final Los organismos que pueden realizar la fotosntesis poseen pigmentos fotosensibles como la clorofila Los fotoauttrofos utilizan fuente de energa luminosa y CO2 como fuente de carbono La fosforilacin a nivel de sustrato es un sistema usado por ciertas bacterias quimiorgantrofas El cido lctico, cido actico y el cido succnico son productos de la fermentacin butrica Los gneros Streptococcus y Pediococcus realizan la fermentacin homolctica Las bacterias metanognicas no utilizan el Bixido de carbono como aceptor final de electrones Los organismos nitrato reductores pertenecen al grupo de las bacterias desnitrificantes Los quimio-organtrofos utilizan energa qumica y fuente de carbono inorgnica Los anaerobios facultativos y las levaduras utilizan la fermentacin como ruta para la obtencin de energa Entre las bacterias oxidantes de amoniaco se encuentra el gnero Nitrosomonas Los organismos sulfatorreductores utilizan compuestos inorgnicos como aceptores finales de electrones Los organismos anaerobios estrictos, pueden sobrevivir en presencia de pequeas concentraciones de O2 En la fermentacin el donador y el aceptor de electrones es un compuesto orgnico y ocasionalmente el CO2
Llena los espacios vacos con la palabra que completa la definicin: 1. fotoorgantrofas 3. captan energa lumnica en presencia de sustancias inorgnicas 2. captacin de energa qumica a partir de sustancias inorgnicas

( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( ( (

) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) ) )

10

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Respiracin 5. Fotosntesis anoxignica 6.

4. Aceptor final de electrones interno y Fosforilacin a nivel de sustrato 6. Va de transformacin de CO2 a un carbohidrato, en donde participa la enzima denominada RubisCo

Completa la descripcin con la respuesta correcta: Las flavoprotenas, se pueden autooxidar en presencia de O2, produciendo perxido de hidrgeno (H2O2), que es un compuesto muy txico; Algunos anaerobios facultativos y aerobios estrictos producen ______________, capaz de eliminar cualquier perxido. Tambin se pueden generar pequeas cantidades de otro producto txico, el radical ____________________; este radical es muy txico, de modo que todas las bacterias aerobias y anaerobias aerotolerantes presentan la enzima superxido dismutasa (SOD), que cataliza su conversin en _______________ y _____________________.. En el ciclo de Calvin-Benson, la Ribulosa 5 fosfato carboxilasa introduce una molcula de __________________ y despus de 6 vueltas del ciclo se produce una molcula de ____________________. Los pigmentos en la fotosntesis oxignica que participan en el Fotosistema II, y que captan la energa luminosa de longitud de onda de 680nm, son ______________________________ y __________________________ y las protenas que participan en el transporte de electrones hacia el fotosistema I son: ___________________________, _________________________________, _______________________________. __________________________ En la utilizacin del almidn como fuente de carbono, es necesario degradarlo hasta glucosa, la amilasa transforma el almidn a _____________________ y ________________________. En la utilizacin de la pectina como fuente de carbono, es necesario degradarlo hasta compuestos ms simples y la enzima que participa en esta biotransformacin se denomina _________________

IV. CRECIMIENTO MICROBIANO Esquematiza la forma en que determinaras la temperatura ptima de crecimiento de Pseudomonas sp. en un medio base mineral con bifenilos policlorados como fuente de carbono Se requieren aislar las bacterias que degradan compuestos organoclorados y que se encuentran en un suelo contaminado. Describe la estrategia que seguiras para aislar y cuantificar las bacterias que degradan esos compuestos mencionados 1. Esquematiza el aislamiento por la tcnica de vaciado en placa, indica la fuente de carbono que utilizaras.

11

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

2. Si en la dilucin 1 X 10-8 existen 225 ufc /mL, cuantas bacterias por gramo existen en el suelo. 3. Si se desean aislar solo bacterias halfilas termfilas bajo que condiciones las cultivaras? El tiempo de generacin de la bacteria A, es el mitad del valor de la bacteria B, cuando se cultivan en un medio con Queroseno, sin embargo cuando ambas se cambian a otro medio que contiene una mezcla de compuestos organoclorados, el tiempo de duplicacin de la bacteria A, se incrementa tres veces el valor que tena cuando se cultiv en Queroseno y en su curva de crecimiento se observa una fase lag de 3 h, que en Queroseno no tena, mientras que la bacteria B, no tiene un cambio perceptible en su curva de crecimiento. Explica brevemente 1. El efecto que tiene la fuente de carbono sobre el crecimiento de ambas bacterias. 2. A que se debe que la bacteria A presente esa fase lag tan prolongada

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO. En un solo rengln define los brevemente los siguientes trminos: 1. Pasteurizacin:

2. Temperatura ptima de crecimiento: 3. Microorganismo psicrtrofo: 4. Microorganismo termodrico: 5. Micoorganismo termorresistente: 6. Microorganismo extremfilo: 7. Concentracin mnima inhibitoria: 8. Agente bactericida: 9. Agente bacteriosttico:

Selecciona con un crculo la respuesta correcta: Los detergentes y fenoles tienen efecto inhibitorio sobre las bacterias y su sitio blanco es: 1. La pared celular 2. la membrana citoplsmica 3. los cidos nucleicos Los perxidos y los halgenos como el cloro y el yodo, tienen su efecto sobre algunos componentes de la clula como: 1. El cido ribonucleico

12

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

2. los grupos SH de las protenas 3. los fosfolpidos Los aldehdos como el formaldehido y glutaraldehdo inactivan las protenas porque interactan con los grupos: 1. SH 2. NH2 3. COOH Los antispticos se aplican para disminuir la carga microbiana en; 1. superficies 2. piel y mucosas Los antibiticos como la penicilina tienen su efecto letal sobre la clula bacteriana Gram positiva porque: 1. Inhibe la sntesis de la pared celular 2. Inhibe la sntesis de la membrana citoplsmica 3. Inhibe la sntesis de los cidos nucleicos La eritromicina, el cloranfenicol y las tetraciclinas tienen efecto sobre la clula bacteriana porque: 1. inhibe la sntesis del cido ribonucleico 2. inhibe la sntesis de cidos nucleicos 3. inhibe la sntesis de protenas El gnero bacteriano que participa en el ciclo del nitrgeno en la Nitrificacin produciendo Nitritos es; 1. Nitrobacter 2. Pseudomonas 3. Nitrosomonas Las bacterias sulfatorreductoras como Desulfovibrio sp. participan en l ciclo del Azufre y el producto final durante el metabolismo desasimilatorio de los sulfatos es; 1. Sulfuros 2. Tiosulfato 3. Azufre Relaciona las columnas, tcnica para determinar el crecimiento Vs la forma de medir el crecimiento. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Recuento en Cmara de Neubauer Cuenta viable por vaciado en placa Cuenta en Tubo rodado Determinacin de cidos nucleicos Determinacin de Peso seco Determinacin de protenas Cuenta de Breed Determinacin de la Densidad ptica ( ( ( ( ( ( ) ) ) ) ) ) Medicin de la absorcin de la luz UV Recuento de clulas muertas Recuento de clulas vivas Medicin de la refraccin de la luz Recuento directo de clulas vivas y muertas Medicin de absorbancia a 580 nm

13

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Define los siguientes trminos, correlacionando las columnas: 1. Pasteurizacin ( ) Microorganismo que tolera presin hidrosttica superior a 300 atm 2. Esterilizacin por calor ( ) Bacillus subtilis y Clostridium sporogenes hmedo 3. Microorganismo psicrtrofo ( ) Pyrococcus, Pyrodictium 4. Microorganismo termodrico ( ) Microorganismos que tienen temperaturas ptimas de crecimiento por arriba de 80C 5. Microorganismo ( ) Proceso que se realiza por calentamiento a 121C durante 15 termorresistente minutos a una atmsfera de presin 6. Microorganismo ( ) Microorganismo que soporta el proceso de pasteurizacin hipertermfilo 7. Microorganismo barfilo ( ) Halobacterium sp. 8. Microorganismo halfilo ( ) Methanosarcina sp. ( ) Proceso que se realiza en dos etapas, calentamiento entre 63 y 105C durante un tiempo establecido y un enfriamiento rpido a 5C. ( ) Microorganismo que soporta tratamientos trmicos por arriba de 65C V.- BACTERIAS DEL AGUA Selecciona una opcin que corresponda a la respuesta correcta: Como se clasifica el agua de acuerdo a su origen: a) Aguas subterrneas y aguas superficiales b) De consumo humano y residual c) Dulce y salada Procesos fsicos para el tratamiento del agua a) Filtracin, adsorcin, floculacin, sedimentacin. b) Coagulacin, desinfeccin, ablandamiento, oxidacin. c) Digestin aerobia, Digestin anaerobia, Lodos activados

Que agentes se utilizan para la desinfeccin del agua de consumo humano? a) Cloro, ozono, radiacin ultravioleta b) ultrafiltracin, centrifugacin, smosis inversa c) adsorcin, oxidacin, intercambio inico

De acuerdo a su origen el agua se clasifica como: a) Aguas subterrneas y aguas superficiales b) De consumo humano y residual c) Dulce y salada d) todos los anteriores e) ninguno de los anteriores

14

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Que agentes se utilizan para la desinfeccin del agua de consumo humano? a) Cloro, ozono, radiacin ultravioleta b) ultrafiltracin, centrifugacin, smosis inversa c) adsorcin, oxidacin, intercambio inico d) todos los anteriores e) ninguno de los anteriores Los gneros bacterianos que a continuacin se mencionan son enterobacterias a) Staphylococcus, Pseudomonas b) Citrobacter, Pectobacterium, c) Mycobacterium, Nocardia d) todos los anteriores e) ninguno de los anteriores Los gneros bacterianos que a continuacin se mencionan son organismos patgenos transmitidos por el agua: a) Shigella y Salmonella b) Vibrio cholerae y Legionella c) todos los anteriores d) ninguno de los anteriores Despus de aplicar el proceso de potabilizacin al agua, el cloro residual y los organismos patgenos se encuentran en los siguientes lmites: a) 0.2- 2 mcg/ mL , Ausentes b) 0.1-0.2 mcg/ mL , 2 NMP/100 mL c) 0.2-0.6 mcg/mL., Ausentes d) todos los anteriores e) ninguno de los anteriores Responde las siguientes preguntas: Menciona tres parmetros fsicos para determinar la calidad del agua: a) ------------------------------------------------------------------------------------------------------------b) _________________________________________________________________ c) ___________________________________________________________________ Menciona tres parmetros qumicos para determinar la calidad del agua: a) ------------------------------------------------------------------------------------------------------------b) _________________________________________________________________ c) __________________________________________________________________ Menciona tres parmetros biolgicos para determinar la calidad del agua: a) ------------------------------------------------------------------------------------------------------------b) _________________________________________________________________ c) ___________________________________________________________________

15

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Menciona tres fuentes de contaminacin del agua de origen antropognico: a) __________________________________________ b) __________________________________________ c) __________________________________________ Correlaciona los enunciados con la Norma correspondiente 1.-Procedimientos sanitarios para el muestreo de agua para uso y consumo humano distribuida por sistemas de abastecimiento pblicos y privados 2.-Que establece los lmites mximos permisibles de contaminantes en las descargas residuales en aguas y bienes nacionales 3. Que establece los limites mximos permisibles de contaminantes para las aguas residuales tratadas que se re usen en servicios al pblico 4. Determinacin de bacterias coliformes. Tcnica del nmero ms probable 5.- Salud ambiental, agua para uso y consumo Humano-limites permisibles de calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilizacin 6. Que establece los lmites mximos permisibles de contaminantes en las descargas residuales a los sistemas de alcantarillado urbano o municipal ( ( ( ( ( ( )NOM-001-SEMARNAT-1996 ) NOM-112-SSA1-1994 )NOM-003-SEMARNAT-1997 )NOM-002-SEMARNAT-1996 )NOM-127-SSA-2004 )NOM-014-SSA1-1993

Complementa el prrafo con la respuesta correcta Los organismos coliformes son bacilos cortos, Gram ____________________________, aerobios o ____________________________, no esporulados que fermentan la ______________________________ con produccin de cido y gas en 48 horas. Los gneros bacterianos que forman parte de este grupo son: __________________, ___________________, ___________________, ____________________.

Los organismos coliformes poseen algunas caractersticas que son importante para utilizarlos como indicadores de contaminacin fecal en el agua, selecciona con una (X ), las caractersticas que los definen como indicadores: ( ( ( ( ) Exclusividad en la materia fecal ) Se localizan en el aire, en el agua y en el suelo ) Abundancia en la materia fecal ) Incapacidad de reproduccin en el agua

16

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

( ( (

) Porque se fermentan azcares ) Sobrevivencia semejante a la de los organismos enteropatgenos. ) Facilidad para demostrarse en el laboratorio

La Secretara de Salud requiere establecer la aprobacin para la liberacin del producto de una planta purificadora de agua, a partir de agua de pozo y cuyo tratamiento se realiza mediante filtracin y smosis inversa. Para lo cual ha tomado muestras de agua antes y despus del tratamiento. Para la muestra de agua del pozo, se transfieren volmenes de 0.1 ml, 0.01 ml y 0,001 ml de muestra a cada uno de los tubos de las series de 5 respectivamente con 10 ml de caldo lactosado de concentracin sencilla. De cada tubo que mostr formacin de gas, tomaron una azada y sembraron en un nmero igual de tubos con medio de confirmacin. Incubaron a 35 0,5 C por 24 2 horas. Para la muestra de agua despus del tratamiento, se transfieren volmenes de 10 ml de muestra a cada uno de los tubos de las series de 5 respectivamente con 10 ml de caldo lactosado de concentracin doble, 1 mL y 0.1 mL de muestra a cada uno de los tubos de las series de 5 respectivamente con 10 ml de caldo lactosado de concentracin sencilla. De cada tubo que mostr formacin de gas, tomaron una azada y sembraron en un nmero igual de tubos con medio de confirmacin. Incubaron a 35 0,5 C por 24 2 horas. Para el agua de pozo, en la prueba confirmatoria obtuvieron los siguientes tubos positivos resultados: Dilucin 10-1 = 5 Dilucin 10-2 = 5 Dilucin 10-3 = 5 Para el agua despus del tratamiento, en la prueba confirmatoria obtuvieron los siguientes tubos positivos resultados: Sin diluir (10 mL) = 4 Sin diluir (1 mL) = 4 Dilucin ( 0.1 mL)= 0 1.-Calcula el Nmero mas probable de organismos que haya en cada muestra. 2.-De acuerdo a la metodologa establecida que determinaron en cada muestra? 3.-Se encuentra el agua despus del tratamiento, apta para consumo humano?, porque?

VI Y VII.- BACTERIAS DEL AIRE Y SUELO En las siguientes preguntas, anota lo que se te pide en cada una de ellas Tres gneros de bacterias fijadoras de Nitrgeno 1 ___________________________________________________

17

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

2 ___________________________________________________ 3 ___________________________________________________ Cuatro grupos fisiolgicos de microorganismos del suelo (10 puntos) 1___________________ 2___________________ 3___________________ 4 ___________________ Tres caractersticas qumicas del suelo 1____________________ 2____________________ 3____________________ Tres fuentes de contaminacin del suelo 1___________________ 2___________________ 3___________________ 4 ___________________ Tres caractersticas fsicas del suelo 1____________________ 2____________________ 3____________________ Tres caractersticas del microambiente en el suelo que afectan el crecimiento de los microorganismos 1___________________ 2___________________ 3___________________ Tres caractersticas del suelo que favorezcan el crecimiento de los microorganismos 1___________________ 2___________________ 3___________________

Indica si la respuesta es correcta (C) o Incorrecta ( I ): Los amonificadores utilizan aminocidos como fuente de nitrgeno, produciendo amoniaco como producto final Los denitrificadores utilizan amoniaco como fuente de carbono produciendo nitratos como producto final Las bacterias sulfatorreductoras producen cido sulfhdrico como producto final en el metabolismo asimilatorio En el ciclo del carbono, las bacterias metangenas reducen el CO2 ( )

( ( (

) ) )

18

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

El suelo se puede clasificar como arcilla, limo y arena Las bacterias metiltrofas participan en el ciclo del carbono, oxidando los compuestos orgnicos a metano Durante la nitrificacin, el Nitrgeno atmosfrico se transforma a nitritos La enzima dinitrogenasa reductasa es la responsable de la reduccin del N2 Los microorganismos quimiolittrofos como Thiobacillus y Beggiatoa, oxidan el cido sulfhdrico (H2S) a S0 y SO4 Las bacterias que pertenecen a los gneros Desulfovibrio y Desulfobacter, realizan metabolismo desasimilatorio, liberando cido sulfrico al medio ambiente Desulfovibrio y Desulfuromonas son gneros de bacterias fijadoras de nitrgeno. Los gneros con capacidad de crecimiento litotrfico sobre compuestos reducidos de azufre son: Hidrogenobacter, Rhodobacter, Paracoccus, acidiphilum, Thiobacillus, etc. Las eubacterias que reducen el sulfato va desasimilatoria se han aislado de ambientes en condiciones extremas de salinidad y temperatura, altas concentraciones de azufre y sulfuros, en anaerobiosis estricta a grandes profundidades. En el ciclo del carbono, las bacterias auttrofas fijan el CO2 a travs del ciclo de Calvin El suelo se puede clasificar como gneo, sedimentario y metamrfico Las bacterias metangenas participan en el ciclo del carbono, oxidando los compuestos orgnicos a metano Durante la nitrificacin, el Nitrgeno atmosfrico se fija en las clulas

( ( ( ( ( ( ( ( (

) ) ) ) ) ) ) ) )

( ( ( ( ( (

) ) ) ) ) )

Azotobacter y Azospirillum son gneros de bacterias fijadoras de nitrgeno simbiticas

La enzima dinitrogenasa reductasa es la responsable de la reduccin del N2

Subraya la respuesta correcta

a) Nitrito a Nitrato

Nitrobacter oxida:

b) Amonio a Nitrito

c) Nitrato a Oxido nitroso

En la reduccin asimilatoria del sulfato, los productos finales son: a)aminocidos como metionina b) ac. Sulhdrico e H2

c) Tiosulfato y S0

En la desnitrificacin los gneros microbianos que participan y que actan sobre nitritos y nitratos son: a) Pseudomonas sp. y Bacillus b) Nitrobacter sp. y Nitrosomonas c) Rhizobium sp y

Las bacterias amilolticas degradan materia orgnica presente en el suelo, como por ejemplo: a) hojarasca y madera b) almidn y amilopectina c) quitina y agar

Azotobacter.

19

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Son microorganismos aerobios, metabolizan el hierro, pueden extraer el fierro contenido en las estructuras metlicas y lo depositan en forma de hidrxido frrico hidratado. a) Ferrobacterias b) metanobacterias c) arqueobacterias Describe el aislamiento de bacterias sulfatorreductoras: a) tipo de suelo, mtodo de aislamiento, fuente de carbono, y la forma en que demostraras su presencia. Es la enzima responsable de la reduccin del oxido ntrico a xido nitroso: a) Nitrato reductasa b) Nitrogenasa c) xido ntrico reductasa Las bacterias celulolticas degradan materia orgnica presente en el suelo, como por ejemplo: a) hojarasca y madera b) almidn y pectina c) quitina y agar Esquematiza el aislamiento de bacterias degradadoras de hidrocarburos (hidrocarbonoclastas) indica: Suelo ms adecuado de donde lo aislaras, fuente de carbono, fuente de nitrgeno, fuente de azufre, Mtodo de tratamiento de la muestra y aislamiento, como seleccionaras las colonias que sean hidrocarbonoclastas

VIII. VIRUS Menciona tres mtodos por medio de los cuales se pueden cultivar virus en el laboratorio: 1. _______________________________________ 2. _______________________________________ 3. ______________________________________ Menciona el nombre de tres virus de ADN y tres de ARN ADN 1. _____________________________ 2. _____________________________ 3. _____________________________ 1. _____________________________ 2. _____________________________ 3. _____________________________

ARN

Indica en el parntesis si la respuesta es falsa (F) o verdadera El virus del sarampin, se transmite a travs de transfusiones El virus de la poliomielitis se puede transmitir a travs del agua contaminada El Virus del Sida es un retrovirus El virus del Ebola es un virus de forma icosadrica El virus de la rubola es de forma helicoidal El virus del sarampin, se transmite a travs de transfusiones El virus de la poliomielitis se puede transmitir a travs del agua contaminada El Virus del Sida es un retrovirus Con una cruz selecciona la respuesta correcta.

( ( ( ( ( ( ( (

) ) ) ) ) ) ) )

20

Banco de reactivos de Microbiologa Ambiental

Cubierta constituda por capsmeros que sirve de proteccin al ac. nucleico: Nucleocpside ( ) envoltura ( ) Segn la simetra del virus, la cubierta puede ser: icosadrica y helicoidal ( ) romboide y helicoidal ( )

cpside (

icosadrica y tubular ( )

Los virus cuyo material gentico tiene sentido del ARN mensajero, se les llama: Positivos ( ) negativos ( ) neutros ( ) Los virus que infectan microorganismos se les denominan: Temperados ( ) fagos ( ) El virus del sida (VIH), es un virus: Con envoltura ( ) La va de transmisin de Poliovirus es: Oral ( )

viroides (

desnudo ( )

con cubierta (

sexual ( )

drmica (

Los tipos de Papilomavirus, de alto riesgo en el cncer crvicouterino son: 6 y 11 ( ) 33 y 35 ( )

16 y 18 (

Los virus cuyo material gentico tiene sentido del ARN mensajero, se les llama: Positivos ( ) negativos ( ) neutros ( ) Los virus que infectan microorganismos se les denominan: Temperados ( ) fagos ( )

viroides (

21