Practica 7. Cromatografa en columna.

Antecedentes. a) Cromatografa en columna. Para que sirve y sus aplicaciones. La cromatografa en columna, como su nombre lo indica, utiliza una columna rellena con una fase estacionaria slida. Una fase lquida mvil fluye por gravedad (o se aplica presin) a travs de la columna. La cromatografa en columna utiliza las diferencias de polaridad a los materiales separados. Una muestra en una columna cromatogrfica es sometido a dos fuerzas opuestas: (1) la solubilidad de la muestra en el solvente de elucin sistema, y (2) la unin de fuerzas de adsorcin de la muestra a la fase slida. Estas interacciones comprenden un equilibrio. Algunos constituyentes de la muestra se adsorben ms fuertemente; otros componentes de la muestra se disuelven ms fcilmente en la fase lquida-y se eluyen ms rpidamente. Los materiales que eluyen ms rpidamente, caen al final de la columna antes de que sean reabsorbidos y por tanto salen de la columna antes que los componentes ms fuertemente unidos. Mientras ms larga sea la columna, mayor ser el nmero de ciclos de adsorcin de la disolucin y mayor ser la separacin de los componentes de la muestra a medida que se produzca la elucin de la columna. Una molcula que se absorbe fuertemente en la fase estacionaria se mover lentamente hacia abajo la columna; una molcula que es dbilmente adsorbido se mueven a una velocidad ms rpida. Por lo tanto, una mezcla compleja puede ser resuelto en bandas separadas de materiales puros. Estas bandas de material purificado finalmente eluyen de la columna y pueden ser recogidos.

b) Cromatografa de adsorcin, de particin o reparto. La cromatografa de adsorcin o lquido - slido es la forma clsica de la cromatografa de lquidos, que esta constituida de unas fase solida estacionaria y de una fase liquida (el eluyente), mvil. La cromatografa de reparto est formada por la cromatografa lquido-liquido. Esta tcnica se diferencia en la forma en que se retiene la fase estacionaria sobre las partculas del soporte; una fase liquida mvil y una fase estacionaria solida inmiscible.

c) Factores que influyen en una separacin por cromatografa en columna. Polaridad, que sean afines entre si el eluyente y la muestra a purificar. Pureza, tamao de la muestra, temperatura del sistema.

d) Seleccin de eluyentes y adsorbentes para la separacin de compuestos por cromatografa en columna. Adsorbentes de mayor a menor adsorcin de compuestos polares (fase estacionaria) . Alumina > acido silcico > Sulfato de magnesio > celulosa Eluyentes de mayor a menor orden de polaridad (fase mvil). Agua > metanol > etanol > acetona > acetato de etilo > ter > cloruro de metileno > ciclo hexano > pentano

Bibliografa: Williamson K., Masters K., Macroscale and Microscale Organic Experiments, 6 Edicion, Ed. Brooks and Cole, USA, 2010. Pags: 185-190. Dana W. Mayo, Ronald M. Pike, David C. Forbes. Microscale Organic Laboratory: with Multistep and Multiscale Syntheses, Quinta edicin. Ed. Wiley & Sons. USA, 2010, Pgs. 92-94.