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PARASITOLOGA PRCTICA VETERINARIA, LA COPROLOGIA COMO TCNICA DE DIAGNOSTICO.

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UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA
PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA

PARASITOLOGA PRACTICA VETERINARIA

Edison A. Cardona Z
1
.

Este documento trata sobre la coprologa como tcnica de diagnostico, sin embargo es necesario
aclarar que el diagnstico parasitolgico veterinario no se basa exclusivamente en coprologa,
existen tambin mtodos inmunolgicos, xenodiagnsticos y otras tcnicas consideradas de eleccin
de acuerdo al parsito a diagnosticar (Frotis sanguneos en hemoparsitos etc.). La coprologa es
una herramienta til principalmente para diagnosticar parsitos gastrointestinales, hepticos y
pulmonares pero siempre considerando los hallazgos clnicos y las anamnesis de los pacientes a
diagnosticar por tanto esta siempre ser un apoyo al diagnstico clnico.


LA COPROLOGIA COMO TCNICA DE DIAGNOSTICO

A. RECOLECCIN DE LAS HECES (MATERIAS FECALES)

Al realizarse un examen general de uno o varios animales para un determinado caso clnico o
como trabajo rutinario, es recomendable que se complemente con un examen coprolgico,
aunque aparentemente no est relacionado el caso con un problema de origen parasitario.

La razn a lo anterior se basa en el hecho de que en ciertos casos, un alto ndice de parasitismo
puede hallarse enmascarado y en un determinado momento puede desencadenarse un problema
grave para el o los animales. Las heces frescas y muy especialmente aquellas que se obtienen
directamente del recto, son las ms recomendadas para hacer un examen coprolgico por no
presentar elementos extraos que dificulten su interpretacin. De no ser posible esto, se
recolectan aquellas observadas en el momento de su eliminacin y en ltimo caso las ms
frescas que se encuentren en el piso, evitando que estn contaminadas con tierra, sustancias
extraas o heces de otros animales del mismo lote o de otras especies.

Para su obtencin del recto se deber contar con guantes de ltex en buen estado. En caso de no
tenerse a la mano dichos elementos, se aconseja como experiencia personal la utilizacin como
ltimo recurso, una bolsa de polipropileno de pared delgada ( bolsa de plstico delgada). De esta
manera se reemplaza el guante, siendo ms cmodo y econmico, puesto que la bolsa se puede
desechar o si es necesario tambin puede servir como medio para envasar el contenido de la
muestra, invirtiendo la bolsa directamente sobre s misma. Debe recordarse que antes de
introducir la mano con la bolsa en el recto (en grandes especies), o los dedos (en las pequeas
especies), es necesario humedecer muy bien la bolsa o el guante con agua corriente, al igual que

1
Mdico Veterinario, Registro profesional. N 08097; Especialista en Diagnstico de Enfermedades Parasitarias; Magster en
Entomologa. Doctorando en Biologa. Coordinador Lnea de Investigacin en Entomologa y Parasitologa Veterinaria, Grupo
Centauro, Categora A. COLCIENCIAS 2005. Facultad de Ciencias Agrarias Universidad de Antioquia. Medelln -
Colombia. E-mail: parasitocard61@yahoo.es

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la regin anal, con el fin de no maltratar dicha regin. Cuando un animal se halla esttico =
estreido ( no da del cuerpo, es decir no elimina heces ), no ha ingerido alimentos o presenta
pocas evacuaciones, se aconseja aislarlo por un tiempo prudente a un lugar limpio
(especialmente libre de heces), para obtener as las muestras frescas. Ejemplos: las aves y
conejos en jaulas individuales; los equinos y bovinos, etc., en pisos de cemento. Si no fuese
posible su obtencin en las formas anteriores, se recomienda un enema ( depositar liquido va
transrectal) a base de agua corriente (nunca jabonosa) y la muestra que se obtenga, se llevar a
la centrfuga si es muy lquida. El sedimento obtenido se procesa por el mtodo de solucin
salina saturada u otro mtodo de enriquecimiento. Algunos recomiendan tambin, en casos
especiales, utilizar la muestra que se adhiere al termmetro rectal, luego del examen clnico
(especialmente en pequeos animales) o del guante utilizado en la palpacin rectal (en grandes
animales). Estos utensilios se lavan y dicha muestra tambin podr centrifugarse para obtener
una mayor concentracin.

Cuando se trate de rebaos (ovejas y cabras), o un lote de aves. cerdos y terneros, las muestras
se tomarn al azar: entre un 10 a un 20/o de los animales, segn su nmero. Dicho muestreo se
mezcla bien ( se hace un pool) y luego se realizan varios exmenes para obtener un promedio
aproximado.

Luego de obtenerse la muestra individual o colectiva, el envase se rotula con los datos
completos. Los utensilios y las manos utilizados para la toma de las muestras requieren un
lavado perfecto, especialmente si es indispensable tomar muestras de otros animales, evitando
en esta forma la contaminacin de las heces entre s. Los frascos que se envan al laboratorio
con las muestras, se llenarn completamente hasta el borde con el fin de eliminar cuanto sea
posible el aire, para disminuir la velocidad de desarrollo y eclosin de los huevos.

Si la muestra no se va a procesar inmediatamente y no se conserva en forma adecuada durante el
examen aparecern huevos embrionados y larvas. En este cas no se podr dar un diagnstico
confiable y por tanto se considera como una muestra inapropiada. Si esto sucede, se debe
solicitar una nueva muestra, dando las recomendaciones especficas para la realizacin de un
nuevo examen. En casos especiales en los cuales no fuera posible tomarse nuevamente otra
muestra (debido a lugares muy distantes, animales indciles, etc.), el examen coprolgico se
procesar con la muestra recibida, no importando su deficiente conservacin. Posteriormente se
har un anlisis conjunto de dicho examen y los sntomas clnicos presentados por el animal.

Con respecto a los factores que limitan la seguridad de los resultados sobre l recuento de
huevos, se mencionan los siguientes:

a) fluctuacin diurna bastante irregular. Por tanto, en caso de exmenes seriados
se aconseja recoger las heces a la misma hora del da;

b) la poca uniformidad de los huevos en las heces, especialmente si son muy
abundantes o muy lquidas, tal como sucede normalmente en los bovinos y en otras
especies cuando presentan graves problemas de diarrea.

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Para las muestras de las aves, se aconseja el envo del intestino completo, en una bolsa de
polipropileno. Tambin puede hacerse un muestreo en el galpn (pool), y se enva una muestra
representativa de todo el lote.

Cuando se trata de conejos, es necesario enviar el intestino y el hgado, sobre todo cuando se
sospecha conjuntamente de una helmintiasis y de una coccidiosis heptica o intestinal. Adems
puede realizarse un muestreo tomando heces de diferentes jaulas y marcando los frascos
correspondientes a cada lote.

Si se sospecha de una coccidiosis en los bovinos, cabras, cerdos y otras especies se les debe
adicionar a las heces bicromato de potasio al 2.5/o, cuando las muestras no pueden enviarse
inmediatamente. Igualmente, si es posible realizar la necropsia del animal, se envan pequeos
trozos de intestino, sobre todo de las regiones ms sospechosas a coccidiosis. Estas muestras se
fijarn en formol al 10/o (una parte de tejido por 9 volmenes de solucin de formol) y de esta
manera se pueden realizar cortes histopatolgicos. Esta misma solucin puede utilizarse para los
diferentes tejidos sospechosos a otros parsitos o enfermedades que requieran un anlisis
patolgico.


B. CANTIDAD DE HECES A RECOLECTAR POR ESPECIE

El volumen de las muestras que se requiere enviar al laboratorio tiene relacin con el tamao de
la especie domstica o salvaje que se desea investigar. Por ejemplo, para bovinos y equinos son
necesarios unos 100 gramos aproximadamente. En especies como cabras, ovejas y cerdos, sern
suficientes unos 50 gramos. En cambio para el examen en conejos se requieren unos diez bolos
de heces y finalmente en las aves se enva una defecacin completa o el intestino completo si se
ha realizado una necropsia.

De todas maneras, se aconseja siempre que sea posible, que la cantidad de heces sea suficiente,
especialmente en aquellos casos en que se deba repetir el examen por cualquier razn o cuando
se soliciten exmenes por mtodos diferentes y para los distintos parsitos. Ejemplo: la muestra
de un bovino en que se desea investigar la Fasciola heptica, la bronquitis verminosa, parsitos
gastrointestinales y protozoarios (coccidias).

Si una muestra resulta negativa, se aconseja repetir el examen unos das despus con el fin de
descartar una posible parasitosis una vez transcurrido el tiempo de prepatencia (Perodo
prepatente) debido quizs a una infeccin reciente que no permiti la aparicin de los parsitos
que se sospechaban en un primer examen. Algunos recomiendan hacer las tomas de las muestras
fecales en las horas de la maana, antes de darse el primer alimento. Dicha muestra se debe
mezclar completamente debido a que las formas parasitarias pueden hallarse irregularmente
repartidas sobre todo en especies como los bovinos y los equinos. Si el examen coprolgico es
negativo, se recomienda siempre repetir el examen antes de aplicar un tratamiento en forma
indiscriminada y sin un previo diagnstico, especialmente si se trata de un rebao, debido a los
altos costos que resultaran tanto por los medicamentos como por la mano de obra y el stress de
los animales. Se sabe que toda movilizacin de animales como el ganado de carne, produce un
desgaste de energas, causante de prdidas econmicas, difciles de evaluar.
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C. CONSERVACIN DE LAS HECES


Si existiese dificultad para realizar inmediatamente el examen de heces en el laboratorio, se
recomienda que stas sean guardadas en refrigeracin por unos pocos das especialmente en el
caso de la Fasciola heptica cuyos huevos son ms estables. Tambin puede sustituirse el
mtodo anterior, agregndole a las heces formol (formaldehido, aldehido frmico o formalina),
en solucin al 10% en agua corriente o en solucin salina fisiolgica. La cantidad que algunos
recomiendan es de un 10 a un 15% del total de heces. Ejemplo: si se tienen diez gramos de
heces, se debe agregar aproximadamente 1 a 1.5 c.c. de la solucin. Sin embargo, es preferible
aumentar la solucin de formol hasta un 20 25%. De esta manera, se tiene una mayor
seguridad que las heces queden en contacto con la solucin conservadora. Adems, no debe
olvidarse que una buena homogenizacin de dichas sustancias dar los resultados perseguidos.

Si se desea investigar la presencia de larvas en las materias fecales (Dictyoculus, etc.) por el
mtodo de Baermann, no podr agregarse ningn preservativo, debido a que dicho examen se
basa en la migracin de las larvas que por ello, deben permanecer vivas.

Para el examen de protozoarios se aconseja que su procesamiento se haga lo ms pronto posible
para poder detectar, tanto los trophozoitos como los quistes.
Los diferentes trophozoitos. en pocas horas se deforman o destruyen totalmente lo que inutiliza
la muestra, para lo cual se deja al medio ambiente o en refrigeracin moderada por poco tiempo,
pero nunca se deber utilizar la incubacin, debido a que se presenta la destruccin de los
trophozoitos.


D. ENVI DE LAS MUESTRAS DE HECES AL LABORATORIO


Uno de los mtodos ms sencillos para la conservacin y el envo de las heces al centro de
diagnstico es el empleo del hielo corriente, especialmente si se desea llevar al laboratorio que
se halla muy distante del sitio donde fueron tomadas. En esta forma las heces pueden
conservarse por 24 a 48 horas.

Los bloques de hielo se pueden mezclar con aserrn de madera y la muestra se guardar en un
recipiente hermtico, como frascos de vidrio tapados, tratando de que quede rodeada de una
temperatura uniforme; para esto se coloca en el centro del aserrn con el hielo. Tambin se podr
recurrir al hielo seco pero en este caso la muestra se debe guardar en una bolsa plstica. El hielo
se debe envolver en papel corriente, evitando que se ponga en contacto directo con la muestra de
materias fecales y pueda presentarse su congelacin.

No se debe guardar la muestra con hielo seco en un recipiente de vidrio o caja metlica
hermtica, puesto que al evaporarse el hielo, se presenta un aumento de la presin que puede
producir una explosin.

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E. METODOLOGA PARA LOS EXAMENES COPROLOGICOS


1. Examen Macroscpico.

Luego de recolectarse las muestras de materias fecales, es muy importante mirar su consistencia,
el color, el olor, etc.. y de ser posible comparar con las heces de otros animales del mismo lote
que se encuentren en buen estado de salud. Se debe tener presente la clase y la calidad de
alimentos que recibi el o los animales problemas ( en cuestin), puesto que si un animal
presenta diarrea, podra sospecharse inicialmente de un parasitismo y la verdadera causa podra
haberse originado por la ingestin de alimentos inadecuados (descompuestos, fermentados, con
hongos, etc.). o quizs a una infeccin intestinal de origen bacteriano, por administracin de
medicamentos laxantes, a cambios bruscos en la alimentacin, intoxicacin qumica, etc. Por
esta razn se requieren los anamnsicos completos para evitar errores de procedimiento, puesto
que en un determinado momento es posible que se presente un ligero parasitismo al examen
coprolgico, pero la causa de la diarrea podra deberse a un problema alimenticio.

En algunos casos las heces pueden ser muy pocas y pastosas, esto sucede con frecuencia por
diversas causas. Durante este examen inicial se pondr mucho cuidado para determinar la
posible presencia de sangre o cogulos en las heces que con frecuencia se manifiestan en la
coccidiosis bovina y aviar, de moco entrico, la existencia de parsitos como Ascaridia galli,
Strongylus spp., Moniezia spp. Ascaris en general y finalmente, segmentos de tenias.

Adems se tendrn en cuenta datos accesorios como sucede con la expulsin involuntaria de
anillos o progltides de algunas tenias que vencen el esfnter anal, tales como los de Dipylidium
caninum ( perros y gatos) o los de Taenia saginata ( Humanos).

Para estos casos se solicitarn adems de las materias fecales, las muestras de los anillos que se
debern conservar en alcohol al 70%. Si los anillos son recogidos en frascos corrientes sin
ningn lquido, es posible que la mayora de las cpsulas ovgeras o los huevos (segn la
especie) se adhieran a las paredes del recipiente, debido a que los anillos con sus movimientos
los expulsan al exterior. Si el frasco contiene agua, pueden estar suspendidos en ella, por lo cual
se debe enjuagar el recipiente y recoger el lquido que se llevar a la centrfuga a 1500 r.p.m. (
revoluciones por minuto) durante cinco minutos, luego se elimina el sobrenadante y se debe
examinar el sedimento al microscopio.

2. Examen microscpico.

Para realizar el estudio microscpico es necesario hacerlo en forma completa y sobre todo,
tenindose la certeza del diagnstico. Al iniciarse el estudio de una lmina con un extendido de
sangre, un frotis directo de heces, una flotacin, etc.. es conveniente hacerlo en forma metdica
para obtener un diagnstico confiable.

Aunque la metodologa es muy personal, puede darse la siguiente pauta:

1. Iniciar la revisin de la muestra partiendo del extremo superior izquierdo de la
laminilla.
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2. Hacer el recorrido hasta la parte inferior
3. Luego continuar hasta el borde superior
4. Continuar seguidamente el proceso pasando por los dems extremos sucesivos.

Luego de realizarse un examen coprolgico, el resultado obtenido se puede expresar en una de
las tres formas siguientes:

1. Utilizando un sistema convencional con cruces. En esta forma se da la presencia de un
nmero no determinado de formas parasitarias, cuando se utiliza un mtodo cualitativo
(frotis directos de heces, solucin salina saturada, etc.). La mayora de los laboratorios
clnicos utilizan hasta un total de cuatro cruces como indicativo del parasitismo
intestinal, formas bacteriales, eritrocitos, etc. En la orina y en forma semejante para otros
exmenes. En el caso de la parasitologa, tambin se utiliza este sistema para dar el
resultado de un examen coprolgico; pero, el nmero de cruces va relacionado con el
campo microscpico que presente el mayor nmero de formas parasitarias, as:

Una cruz ( + ) si el campo presenta de 1 a 3.
Dos cruces ( ++ ) si el campo presenta de 4 a 7.
Tres cruces ( +++ ) si el campo presenta de 8 a 10.
Cuatro cruces ( ++++ ), cuando presenta ms de 10.

( Esta metodologa YA NO ES MUY EMPLEADA, aunque alguno laboratorios la
siguen utilizando para reportar cargas parasitarias.

2. Dando el resultado de formas parasitarias (huevos, ooquistes. quistes, etc.) por gramo de
heces, cuando se utiliza un mtodo cuantitativo (McMaster, Sloss, etc.). MUY
UTILIZADA

3. Finalmente, el resultado puede darse como: "no se observaron parsitos", cuando al
finalizar el examen no fue posible detectar formas parasitarias. No es aconsejable dar
como "negativo" un caso determinado; puesto que, el animal aparece como libre de
parsitos y, es posible que en cierto momento pudo presentarse fallas en la conservacin,
en el envo de las muestras, en la ejecucin de la tcnica, soluciones inadecuadas, etc.

Nota: El campo que se observa al microscopio presenta una forma circular. Aprovechando este
hecho y con el fin de orientar o fijar a otra persona interesada en observar el lugar donde se halla
un determinado objeto o parsito, basta con relacionar dicho crculo con un reloj. De esta
manera se indicar a qu horas se halla el objeto.

El examen de materias fecales se puede realizar de dos formas diferentes: por los mtodos del
frotis directo y por medio de los mtodos indirectos o de enriquecimiento (flotacin, migracin
larvaria, sedimentacin, etc.) hasta terminar la muestra presente en la lmina.

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a. Mtodos directos

1) Mtodo del frotis directo de heces (cualitativo). Este mtodo es muy utilizado para el
diagnstico de los protozoarios intestinales, tanto en sus formas de trophozoitos (o formas
vegetativas), como sus quistes. Igualmente, es de gran ayuda para detectar diferentes helmintos,
aunque en la prctica corriente en Veterinaria se utilizan para este ltimo caso los mtodos de
flotacin y sedimentacin. De acuerdo con lo anterior, este mtodo de frotis directo se lo
abordaremos en el Mdulo de Parasitologa correspondiente a Diagnstico Veterinario
(Protozoologa).

2) Examen directo de la mucosa intestinal (cualitativo). Es un mtodo utilizado en casos
de necropsias en las diferentes especies. La tcnica es semejante al examen directo de heces, y
consiste en hacer un raspado de la mucosa intestinal, especialmente hacia los bordes de las
lesiones sospechosas. El raspado se coloca en una lmina a la cual se le agregan dos gotas de
solucin salina fisiolgica; se cubre con una laminilla e inmediatamente se mira al microscopio.
Con este mtodo se pueden detectar las siguientes formas parasitarias: Flagelados (Giardia,
Hexamita, Trichomonas. Histomonas, etc.); Sarcodinos (Entamoeba, lodamoeba, etc.);
Esporozoarios (Coccidias e Isosporas, en sus formas intra y extracelulares); Nemtodos
(Capillaria y Strongyloides, etc.) y otros parsitos (cabezas de tenias, tenias pequeas,
tremtodos, etc.).

3) Mtodo de Graban: (Tcnica de la cinta de celofn o cinta scotch). Es un mtodo
cualitativo y es muy til en el diagnstico del Oxyuris equi,(equinos) Dipylidium
caninum(perros y gatos) y Enterobius vermicularis (en humanos).

Tcnica: Su metodologa consiste en la utilizacin de una cinta engomada transparente, que se
coloca alrededor del ano y en el rafe perianal. La tcnica se basa en cortar un trozo de la cinta de
unos 5 a 6 cm, luego se impregna del material presente en las regiones antes mencionadas y
finalmente la cinta se adhiere a una lmina o portaobjetos. la cual se lleva al microscopio y se
mira con objetivo de 10X.

Algunos aconsejan la utilizacin de una gota de lugol o de yodo en xilol. El colorante se coloca
levantando un extremo de la cinta que luego se vuelve a fijar en la lmina. De esta manera se
fine o aclara la muestra y se da un contraste con los huevos. En el caso de los humanos
solamente de un 5 al 10/o de las personas dan positivo a la infeccin por el Enterobius
vermicularis con el mtodo de Grahan aunque es til en algunos casos para detectar otros
helmintos como la Taenia saginata, Schistosoma mansoni. S. japonicum. Ascaris lumbricoides y
Trichocephalus sp.


b. Mtodos de concentracin o de enriquecimiento.

Existen varias tcnicas de enriquecimiento que se utilizan con mucha frecuencia con el fin de
obtener una mayor concentracin del nmero de formas parasitarias (huevos y/o larvas), en una
pequea cantidad de la muestra. De acuerdo con dichas formas parasitarias se emplean los
mtodos de flotacin, sedimentacin y migracin larvaria.

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Con estas tcnicas de enriquecimiento pueden obtenerse resultados cualitativos o cuantitativos,
de acuerdo con el mtodo empleado.

1) Flotacin con solucin salina saturada (Koffoyd y Barber).

Este mtodo cualitativo es de uso corriente en las prcticas de diagnstico en Veterinaria, pues
adems de dar muy buenos resultados, es muy fcil la preparacin de la solucin, su
conservacin por largo tiempo y no presenta los inconvenientes de otras soluciones.

Solucin Salina Saturada

Cloruro de sodio (NaCl) . 331 g.
Agua corriente ........................... 1.000 ce

Calentar mezclando continuamente hasta disolver la sal evitando la ebullicin.

Tcnica:

1. Separar de la muestra de 2 a 5 gramos de heces en un recipiente de boca ancha
(taza o mortero).
2. Agregar de 30 a 50 cc. de solucin salina saturada.
3. Disolver muy bien las heces con una cucharita ( tintera), baja lenguas o varilla de
vidrio.
4. Colar en un cedazo de mallas finas. Puede utilizarse un cedazo (colador) comn
de cocina.
5. Llenar un tubo de ensayo con el lquido filtrado hasta el borde, dejando un
menisco convexo.
6. Eliminar con un palillo las burbujas o sustancias que flotan.


7. Colocar una laminilla y esperar por unos doce a quince minutos y un mximo de
treinta. Pasado este tiempo, los huevos se colapsan o se rompen debido a la accin
osmtica.
8. Retirar cuidadosamente la laminilla y colocarla sobre una lmina.
9. Mirar al microscopio con objetivo de 10X. Los ooquistes de coccidias,
muchos huevos de nemtodos y algunos cstodos flotan y se adhieren a la laminilla. En
esta solucin no flotan algunos huevos de tremtodos (Fasciola heptica), de cstodos
(Taenia solium y Dipylidium caninum) y de nemtodos (Metastrongylus apri y
Spirocerca lupi).

Nota: La solucin presenta como defecto una cristalizacin rpida, especialmente si se utiliza
una bombilla corriente como fuente de luz, debido a la evaporacin de la solucin.

En general, las soluciones utilizadas como medios de flotacin para algunos quistes de
protozoarios, ooquistes de coccidias y huevos de helmintos, no son de mucha utilidad para
huevos de tremtodos y acantocphalos.

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La solucin salina saturada puede ser reemplazada por una de las siguientes soluciones:

2) Flotacin con solucin azucarada de Sheather*

Azcar .............................................................. 454 g
Agua destilada .................................................. 355 ce
Fenol (disuelto en agua el bao marta) .............. 6 ce
El fenol puede reemplazarse con formol en solucin al 10% ...... 6 cc

3) Flotacin con solucin de sulfato de magnesio

Sulfato de magnesia ....................... 331 g
Agua ............................................... 1.000 cc

Nota: Esta solucin es recomendada para el diagnstico de huevos de helmintos, entre los que
est el gnero Metastrongylus spp.

4) Flotacin con solucin de sulfato de zinc (modificado por Faust, 1930).

En esta tcnica como en las anteriores, solamente se obtienen resultados cualitativos. Igualmente
es recomendada debido a que favorece la concentracin de quistes de protozoarios los cuales no
sufren distorsiones en sus estructuras. Tambin se recomienda para el diagnstico de
Metastrongylus spp.

La metodologa es similar a la tcnica de la solucin salina saturada, pero tiene desventajas
como el hecho de que algunos huevos regresan al fondo y adems se retraen y deforman
fcilmente.


5) Mtodo de Mc Mster. (Cuantitativo).

Este mtodo es utilizado para determinar el nmero de huevos por gramo de heces. Tambin se
emplea para las larvas de nemtodos o los ooquistes en las coccidias.

Cmara de McMaster.
Tamao natural.

a) Vista en su parte superior,
b) Vista lateral.







a
b
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Tcnica:

1. Pesar tres gramos de heces (tomadas directamente del recto).
2. Depositarlas en un tubo de ensayo.
3. Agregar 28 cc de solucin azucarada de Sheather.
4. Agitar fuertemente hasta obtener su homogenizacin.
5. Tamizar en una taza con un colador o cedazo metlico corriente (calibre 80).
6. Exprimir el sedimento que se encuentra en el cedazo por medio de una
cuchara o esptula y luego botar dicho sedimento.
7. Completar el tubo con la misma solucin azucarada.
8. Agitar nuevamente y tomar lo ms pronto posible con un gotero o pipeta,
parte de la suspensin. Llenar la cmara, la cual ha sido humedecida previamente con
agua corriente, con el fin de evitar la presencia de burbujas.
9. Esperar unos minutos para que se nivelen por completo los huevos, los
ooquistes y/o las larvas.
10. Hacer el conteo separadamente por gneros de parsitos, de las reas demarcadas en
la cmara, tanto de los huevos como de las larvas y los ooquistes.
11. Contar por lo menos dos cmaras.

Clculo del recuento:
Huevo por gramo = Recuento total x 100
Nmero de cmaras

Explicacin: Cada cmara presenta 0,15 cm de profundidad por 1 cm2; es decir, se examinan
0.15 centmetros cbicos. Por tanto los 30 cc de la suspensin total (2 gm de heces y 28 cc de
agua) tendrn 200 cmaras pero, como se requiere solamente el nmero total de huevos y/o
ooquistes por gramo, se multiplica por 100 cmaras.

Nota: Existen otras modificaciones de la tcnica de McMaster. utilizando diferentes soluciones
como: la solucin saturada de sulfato de zinc y la solucin saturada de sal comn (NaCl).


6) Mtodo de Sloss modificado. (Cuantitativo).

Se utilizan especialmente las heces frescas para el examen de huevos de diferentes nemtodos y
ooquistes de las coccidias.

Tcnica:

1. Pesar dos gramos de heces (tomadas directamente del recto)
2. Colocarlas en un tubo de ensayo.
3. Agregar 20 cc de agua corriente
4. Agitar fuertemente hasta obtener una suspensin homognea.
5. Tamizar en un colador o cedazo corriente (calibre 80) en una taza.
6. Agregar 10 cc al sedimento del cedazo para lavar los posibles huevos retenidos
7. Exprimir dicho sedimento con una cucharilla, una esptula o un bajalenguas.
El sedimento se desecha luego.
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8. Repartir los 30 cc de suspensin en dos tubos de ensayo (15 cc en cada tubo)
9. Secarlos muy bien externamente y llevarlos a la centrfuga a 1.500 r.p.m.
durante cinco minutos.
10. Esperar que se pare la centrfuga y retirar los tubos.
11. Botar el sobrenadante dejando unos 2 cc de sedimento en cada tubo.
12. Agitar este sedimento y agregar hasta el borde de los tubos de la solucin
azucarada (solucin de Sheather), formando un disco convexo.
13. Retirar las burbujas y fibras que se formen, con un palillo.
14. Colocar a cada tubo su respectiva laminilla, evitando que se formen los vacos.
15. Centrifugar a 1.500 r.p:m. durante cinco minutos.
16. Retirar con cuidado las laminillas y colocarlas sobre lminas o porta-objetos.
17. Mirar al microscopio y contar el nmero total de huevos (discriminarlos por
sus gneros).
18. El nmero total de huevos de las dos lminas, equivale al nmero de huevos en dos gramos
de heces. Si se divide por dos (2). se obtiene el nmero de huevos por gramo de la muestra.
14. Hacer el conteo total de huevos con objetivo de 10X (el conteo se hace
separadamente por gneros).
15. La cifra obtenida se multiplica por 100. para determinar el nmero de huevos
por gramo.


7). Mtodo de Dennis. Para Fasciola heptica (Cuantitativo)

Solucin detergente:

Detergente lquido ....................... 5 cc
Agua destilada ........................ 95 cc
Solucin al l% de sulfato de aluminio y potasio . 8 gotas

Tcnica:

1. Pesar dos gramos de heces recientes o conservadas en refrigeracin hasta por
diez das.
2. Colocarlos en un recipiente de vidrio o plstico con capacidad para 100 cc.
3. Agregar 25 cc. de solucin detergente.
4. Mezclar cuidadosamente con un agitador, pero sin formar espuma.
5. Colocar una malla metlica (No. 80) en un embudo y filtrar la suspensin en
un tubo de 50 cc. de capacidad.
6. Lavar con solucin detergente el recipiente que contena las muestras; filtrar
este lquido y luego agregarlo al tubo de 50 cc.
7. Adicionar ms solucin detergente al sedimento de la malla hasta llenar el tubo.
8. Dejar el tubo en reposo entre 5 y 10 minutos en promedio.
9. Eliminar las tres cuartas (3/4) partes del sobrenadante del lquido
10. Lavar el embudo con la solucin detergente, agregrsela al tubo.
11. Llenar el tubo hasta el reborde con solucin detergente.
12. Dejar en reposo aproximadamente 10 minutos.
13. Eliminar el sobrenadante del tubo, dejando unos 2 a 3 cc del sedimento.
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14. Agregar una o dos gotas de tintura de yodo y dejarla en reposo de dos a cinco
minutos.
15. Verter este contenido en una caja de Petri.
16. Lavar el tubo con 5 cc de agua corriente y agregarlos a la caja de Petri.
17. Mirar al estereomicroscopio y contar los huevos de Fasciola. Si la solucin qued
muy teida, aadir una o dos gotas de hidrxido de sodio (NaOH al l%).

Nota: El nmero total de huevos de Fasciola se divide por 2 y dar el nmero de huevos
por gramo.


8) Mtodo de Parfitt y Banks. Para Fasciola heptica (Cuantitativo)

Tcnica:

1. Utilizar un tubo de centrfuga cuya longitud no sea menor de 16 centmetros.
Este tubo se marca cada dos centmetros desde el fondo hacia arriba.
2. Pesar un gramo de heces y depositarlos en un tubo de centrfuga.
3. Llenar el tubo con agua corriente hasta la marca de 12 cm.
4. Agitar fuertemente tapando con el pulgar el tubo, hasta disolver perfectamente
las heces.
5. Filtrar en un cedazo y recoger todo el lquido posible, exprimiendo el residuo del
cedazo.
6. Depositar el lquido en el tubo, agitando previamente.
7. Enjuagar el recipiente que contena el filtrado con agua corriente, que se le adiciona al tubo
de ensayo y completar hasta llegar a la marca de 12 centmetros.
8. Tapar con el pulgar e invertirlo por dos o tres veces.
9. Dejar en reposo por cinco minutos, colocando el tubo verticalmente.
10. Decantar el sobrenadante dejando un sedimento hasta la marca de 2 centmetros.
11. Agregar nuevamente agua hasta la marca de 12 centmetros.
12. Nuevamente tapar con el pulgar el tubo, invertirlo por dos o tres veces y
dejarlo en reposo por cinco minutos.
13. Decantar y agregar agua hasta la marca de 12 cm, agitar y dejar en reposo
por cinco minutos.
14. Decantar y adicionar agua hasta la marca 10 cm y agregar tres gotas de azul de
metileno al 0.5% (en solucin acuosa de verde de malaquita al 0.3/o).

15. Tapar el tubo con el dedo pulgar y luego invertirlo por varias ocasiones hasta
mezclar bien el colorante.
16. Dejar en reposo por unos cinco minutos.
17. Decantar, dejando un sedimento hasta la marca de 2 cm.
18. Agitar el sedimento y luego preparar el nmero suficiente de lminas hasta revisar
totalmente el sedimento.
19. Mirar las lminas con objetivo de 4X.

12) Mtodo modificado. Para Fasciola heptica (Cuantitativo)

PARASITOLOGA PRCTICA VETERINARIA, LA COPROLOGIA COMO TCNICA DE DIAGNOSTICO. Pgina 13 de 13
Tcnica:
1. Pesar 5 gramos de heces.
2. Colocarlos en una taza o recipiente.
3. Mezclarlos en 50 ce de agua corriente.
4. Filtrar en una malla fina (calibre No. 80).
5. Colocar la mezcla en un tubo de ensayo.
6. Dejar sedimentar por unos quince minutos.
7. Eliminar el sobrenadante, dejando 2 a 3 ce de sedimento.
8. Llenar nuevamente el tubo con agua y agitarlo.
9. Dejar sedimentar nuevamente por 15 minutos.
10. Eliminar las tres cuartas partes del sobrenadante y agregar de 3 a 4 gotas de
tintura de yodo, homogenizar muy bien el contenido.
11. Colocar el sedimento en una caja de Petri y mirar al estereomicroscopio.

El resultado nos dar el nmero de huevos en los cinco gramos de heces.



BIBLIOGRAFA

Vlez, R. A. 1983. Guas en Parasitologa Veterinaria. Exitodinmica Editores,
Medelln Colombia

Cordero, D. C. ; Rojo, V. M. 1999. Parasitologa Veterinaria. Espaa McGraw-Hill
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Mehlhor, H y piekarski, G. 1993. Fundamentos de Parasitologa: Parsitos del hombre y
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Quiroz, R. H. 1984. Parasitologa y Enfermedades parasitarias de animales domsticos.
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Mxico. ISBN 968 - 18 - 1674 - 9