DETERMINACION DEL ANTGENO ESPECFICO DE PROSTATA POR MEDIO DE UN ELISA Objetivo Determinar cuantitativamente la concentracin de PSA (antgeno prosttico

especifico) en el suero humano. Introduccin El antgeno prosttico especfico es una protena producida por las clulas de la glndula de la prstata. El anlisis del PSA mide la concentracin del mismo en la sangre. El mdico extrae una muestra de sangre y se mide en el laboratorio la

cantidad de PSA en esa muestra. Ya que el PSA es producido por el cuerpo y puede usarse para detectar la enfermedad, a veces se le llama marcador biolgico o

marcador de tumores. Es normal que el hombre tenga una concentracin baja de PSA en su sangre; sin embargo, el cncer de prstata o las afecciones benignas (no

cancerosas) pueden elevar la concentracin de PSA. Al envejecer los hombres, son ms comunes tanto las afecciones benignas de la prstata como el cncer de prstata. Las afecciones benignas ms comunes de la prstata son la prostatitis (inflamacin de la prstata) y la hiperplasia benigna de la prstata No existe evidencia de que la prostatitis o la hiperplasia benigna de la prstata causen cncer, pero es posible que un hombre padezca ambas afecciones y que tenga tambin cncer de prstata. La concentracin de PSA por s sola no ofrece informacin suficiente para que los mdicos puedan distinguir entre las afecciones benignas de la prstata y el cncer. Sin

embargo, el mdico tomar en cuenta el resultado de este anlisis al decidir si debe investigar ms a fondo en busca de signos de cncer de prstata. Material Micro pozos recubiertos con MAb PSA Estndares de PSA Enzima conjugada PSA Sustrato TMB Solucin de paro

Buffer de lavado 20X

Procedimiento En los micro pozos apropiados se agregaron 50 l del estndar y de la muestra

proporcionada. Se agregaron 100l de la enzima conjugada en cada micro pozo y se mezclo por 30 segundos. Se incubo los micro pozos por 60 minutos a temperatura ambiente. Despus de haber transcurrido este tiempo se retiraron los micro pozos y lse lavaron tres veces con 300l de solucin de lavado. Se aadieron 100l de TMB en cada pozo y se mezclo suavemente por 5 segundos, se volvi a incubar durante 15 minutos ms a temperatura ambiente. Despus se agregaron 50 l de solucin stop en este caso HCl en cada micro pozo y se mezclo suavemente. Se observo y determino cualitativamente por medio de coloracin la presencia de PSA al comparar con los estndares. Resultados Al comparar nuestra muestra con los estndares pudimos determinar

aproximadamente la cantidad de PSA presente, en este caso fue de 0 ya que la muestra era incolora y en esta prueba la coloracin es directamente proporcional a la cantidad de PSA por lo que se puede decir que el paciente no presenta alguna enfermedad de la prstata. Discusin La determinacin y cuantificacin de PSA es de gran importancia ya que con ella podemos determinar la presencia de enfermedades que se pueden presentar en los hombres desde una prostatitis hasta cncer de prstata Bibliografa Hoja informativa. Departamento de salud y servicios humanosde los Estados Unidos. Instituto nacional de cncer.http://www.cancer.gov