Quim. Nova, Vol. 26, No.

4, 475-478, 2003 DETERMINAO POTENCIOMTRICA EM FLUXO DE CLORETO DE CETILPIRIDINIO EM DESINFECTANTES BUCAIS Paula C. S. Baptista, Alberto N. Arajo e Maria da Conceio B. S. M. Montenegro* CEQUP/Departamento de Qumica Fsica, Faculdade de Farmcia, Rua Anbal Cunha, 164, 4050-047 Porto- Portugal Recebido em 27/5/02; aceito em 10/12/02

POTENTIOMETRIC DETERMINATION OF CETYLPYRIDINIUM CHLORIDE IN ORAL DESINFECTANTS BY FLOW INJECTION ANALYSIS. The work describes a new procedure for cetylpyridinium chloride determination in oral disinfectants, based on a flow-injection system with potentiometric detection. The determination was based on the measurement of picrate concentration decrease as result of ion-pair reaction with the analyte present in the injected sample. In the optimised set-up the sample injection volume was kept at 400 L and merged downstream with the reagent solution containing 1,0 x10-5 mol/L of picrate adjusted to pH 5.0 with citrate/citric acid buffer. The flow rate was fixed at 8 mL/min and the reactor length at 40 cm. The proposed procedure enables the determination of cetylpyridinium in the analytical range of 5,0x10-6 7,5x10-5 mol/L at a sampling rate of 60/h. The results for real samples had a precision better than 3% and were comparable to the labelled values. Keywords: potentiometry; oral disinfectants; FIA.

INTRODUO Os surfactantes catinicos encontram uma grande aplicao em diversas indstrias destacando-se a qumica (pesticidas), papel, txtil, plsticos e tintas. Alm disso, so frequentemente usados na preparao de produtos de limpeza domstica e de higiene pessoal1 nomeadamente em desinfectantes bucais, pastas dentfricas, cremes de barbear, champs e desodorizantes, por possurem, para alm de outras, propriedades anti-spticas. o caso do cloreto de cetilpiridinio, tambm designado por cloreto de hexadecilpiridinio que apresenta aco antimicrobiana, sobre bactrias gram negativas e que frequentemente utilizado em frmulas desinfectantes bucais. Embora sob o ponto de vista ambiental a sua determinao seja menos importante que a dos surfactantes aninicos2 conveniente o seu controlo analtico nos produtos comerciais referidos. Para a determinao de surfactantes catinicos so descritos diversos procedimentos baseados na utilizao de mtodos volumtricos 3,4 espectrofotomtricos 5-7 , cromatogrficos 8-10 , electroforese capilar11,12 e potenciomtricos13-25. Estes ltimos, aplicados de forma geral determinao indirecta de surfactantes catinicos em solues desinfectantes oferecem como vantagens a determinao rpida, a preparao simples das amostras, a elevada sensibilidade e um grau de selectividade que conduz obteno de resultados mais exactos26,27 . O desempenho analtico dos elctrodos selectivos de ies, poder ainda ser incrementado recorrendo a mtodos de fluxo contnuo, em particular tcnica Anlise por Injeco em Fluxo (FIA). A eliminao da soluo de referncia interna dos elctrodos tem possibilitado a sua construo com configurao tubular e incorporao em montagens FIA simples, fisicamente robustas, resultando em algumas situaes a um aumento de reprodutibilidade das medidas28 e da sensibilidade analtica (mV/dec)29 e mais frequentemente a diminuio das interferncias30 . Estes aspectos so vantajosos sob o ponto de vista do controlo de rotina em laboratrios de produo industrial. Procurando aproveitar as vantagens da potenciometria com elctrodos selectivos de io como processo de deteco em FIA esta*e-mail: mcbranco@ff.up.pt

beleceu-se uma metodologia simples para a anlise do cloreto de cetilpiridinio em desinfectantes bucais vulgarmente disponveis no comrcio. A determinao baseava-se na reaco entre o cloreto de cetilpiridinio e o picrato, com formao de um complexo inico, sendo posteriormente o picrato remanescente monitorado potenciometricamente. Para isso utilizou-se um detector, de configurao tubular, sensvel aquele anio, construdo segundo a metodologia proposta anteriormente31. PARTE EXPERIMENTAL Reagentes e solues Para a preparao das solues usou-se gua bidesionizada com condutncia especifica igual ou inferior a 0,1 S/cm. Todos os reagentes usados eram de qualidade analtica ou semelhante, sem terem sido submetidos a qualquer purificao adicional. A soluo stock de picrato de sdio, com concentrao igual a 6,0 x10-2 mol/L, foi obtida a partir de uma soluo de cido pcrico (Merck, ref. 623), com igual concentrao, previamente titulada com hidrxido de sdio at pH 6,0, garantindo a desprotonao total do cido pcrico. As solues padro de picrato de sdio foram obtidas a partir da anterior, por diluio com sulfato de sdio 3,3 x10-2 mol/L, por forma a ajustar a fora inica a um valor igual a 0,1 mol/L. Estas solues foram usadas na preparao do sensor inico das membranas dos elctrodos e na avaliao das caractersticas de funcionamento das unidades construdas, em condies de fluxo. Na seleco da soluo reagente usada no procedimento desenvolvido utilizaram-se solues de picrato de sdio preparadas em tampo cido ctrico/citrato de sdio com pH igual a 5,0. As solues de referncia de cloreto de cetilpiridinio (Fluka, ref. 52349) usadas na calibrao do procedimento proposto foram preparadas por diluio de uma soluo 1,0x10-2 mol/L. As diluies foram efectuadas com gua bidesionizada. As membranas dos elctrodos foram preparadas com cloreto de bis(trifenilfosforanilideno)amnio (Aldrich, ref. 22383-2), 2nitrofeniloctilter (Fluka, ref. 73732) e PVC (Fluka, ref. 81431).

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As amostras de produtos comerciais analisados, obtidas de modo aleatrio no comrcio local, foram sujeitas a diluio apropriada (1:100 v/v) com gua desionizada antes da sua introduo no sistema FIA. Material e equipamento utilizado na montagem FIA Na montagem FIA estabelecida (Figura 1), as solues eram impulsionadas atravs de uma bomba peristltica, de quatro canais Gilson, modelo Minipuls 2 (Gilson Inc., Villiers-le-Bel, Frana) usando-se tubos de impulso de PVC da mesma marca, com dimetro interno de 2 mm. As solues padro e as amostras eram inseridas no fluxo transportador atravs de uma vlvula de injeco rotatria manual Rheodyne, modelo 5020 (Rheodyne, So Francisco, EUA). O volume de amostra injectado foi definido pelo comprimento do tubo de PTFE com 0,8 mm de dimetro interno, usado como ala de amostragem. As ligaes entre os diferentes componentes da montagem FIA foram efectuadas usando tubos de PTFE, com 0,8 mm de dimetro interno, munidos de terminais e ligadores da marca Gilson. Para promover uma mistura adequada entre a amostra e a soluo de picrato, o reactor L1 foi enrolado, em forma de oito, sobre uma rede plstica, com uma altura de aproximadamente 2 cm. Para promover a confluncia das solues usou-se uma pea com um percurso tubular gravado em forma de Y, com dimetro interno de 0,8 mm. A clula potenciomtrica era constituda por um elctrodo indicador de configurao tubular, sensvel ao anio picrato associado a um elctrodo de referncia de dupla juno, da marca Orion, modelo 90-00-29 (Thermo Orion, Beverly, EUA) que continha no compartimento externo sulfato de sdio 3,3x10-2 mol/L. A escolha desta soluo, decorreu da baixa interferncia do anio sulfato no comportamento dos elctrodos sensveis a picrato31 Para reduzir o rudo elctrico induzido pelo sistema de propulso foi inserido no sistema FIA um elctrodo de terra construdo de acordo com o descrito na literatura32. Os suportes para os referidos elctrodos foram construdos em poli(metacrilato de metilo)33 de modo a possibilitarem a sua colocao no sistema numa posio fixa. A medida da diferena de potencial entre os elctrodos indicador e de referncia foi efectuada com um decimilivoltmetro da marca Crison, com impedncia de entrada superior a 12 M, modelo MicropH 2002 (Crison, Barcelona, Espanha) acoplado a um registador Metrohm, Labograph, modelo E-586 (Metrohm Ltd., Herisau, Suia).

sensor inico resultou da reaco estequiomtrica que decorreu da adio a uma soluo de picrato de sdio 1,0x10-3 mol/L, de igual volume de uma soluo aquosa de extractor inico, o cloreto de bis(trifenilfosforaniliden)amnio, na mesma concentrao. Os cristais obtidos (picrato de bis(trifenilfosforanilideno) amnio), foram lavados com gua bi-desionizada e guardados em frasco de vidro escuro no excicador. Aps a sua secagem, dissolveram-se 0,0431 g dos cristais em 0,7886 g de 2-nitrofeniloctilter (solvente mediador). Esta soluo sensora foi imobilizada em PVC (0,18 g) previamente dissolvido em tetrahidrofurano e foi posteriomente depositada no orifcio central do elctrodo tubular33. As membranas dos elctrodos eram secas temperatura ambiente durante 24 h. O seu condicionamento era efectuado com os elctrodos inseridos na montagem FIA, fazendo-se passar a um caudal de cerca de 0,2 mL/min, uma soluo de picrato com concentrao igual a 1,0x10-5 mol/L, durante cerca de 2 h. RESULTADOS E DISCUSSO Antes de proceder ao desenvolvimento e optimizao de uma montagem de fluxo que permitisse a anlise de cloreto de cetilpiridinio em frmulas comerciais, avaliou-se a resposta dos detectores potenciomtricos construdos no sistema FIA de baixa disperso. Para o efeito, procedeu-se ao traado de curvas de calibrao, utilizando solues com concentrao crescente em picrato de sdio. O volume de injeco seleccionado foi de 200 L e usou-se um fluxo transportador de sulfato de sdio 3,3x10-2 mol/L que continha picrato de sdio em concentrao igual a 1,0x10-6 mol/L para estabilizar a linha de base. O transportador flua a um caudal de 6 mL/min, dirigindo-se para o detector potenciomtrico colocado a uma distncia de 40 cm do ponto de injeco. Nestas condies, a resposta dos elctrodos era linear no intervalo de concentraes entre 1,0x10-6 e 1,0x10-3 mol/L, com um declive de 54,5 0,3 mV/dc e um coeficiente de correlao quadrtico igual a 0,998. Para viabilizar a determinao do surfactante em estudo, estabeleceu-se uma montagem FIA com a configurao representada na Figura 1. Nesse sistema, uma alquota da amostra era injectada na soluo de transporte de sulfato de sdio, com concentrao igual a 3,3x10-2 mol/L, misturando-se de seguida em Y com uma soluo de picrato de sdio de concentrao e pH conhecidos e fixados. Ao longo do reactor L1 ocorria a formao do par inico entre o cloreto de cetilpiridinio e o picrato, sendo a diminuio da concentrao deste anio quantificada atravs do elctrodo tubular. Os diferentes parmetros da montagem estabelecida foram optimizados pelo mtodo univariado, de modo a obter o melhor compromisso entre sensibilidade, reprodutibilidade, repetibilidade, frquncia de amostragem e economia de reagentes. Para optimizar a concentrao do reagente utilizaram-se diferentes solues de picrato, preparadas em soluo 3,3x10-2 mol/L de Na2SO4, com concentraes do anio que variaram entre 1,0x10-6 e 1,0x10-4 mol/L. Este estudo foi realizado fixando o volume de injeco em 200 L, a concentrao de cloreto de cetilpiridinio em 5,0x10-5 mol/L, o comprimento do reactor de mistura L1 em 40 cm e o caudal a 4 mL/min. Nestas condies a intensidade do sinal analtico obtido aumentou de cerca de 32 1 para 47 1 mV quando a concentrao de picrato variou entre 1,0x10-6 mol/L e 1,0x10-5 mol/L, no se registando alteraes na intensidade dos sinais obtidos para as concentraes mais elevadas do reagente. O efeito do pH na extenso da reaco de complexao foi avaliado para solues de picrato com concentrao igual a 1,0x10-5 mol/L, preparadas em tampes com pH de 4,0; 5,0; 7,0; 7,5 e 9,0. Para ajustar o pH a 4,0; 5,0; e 7,0 usou-se tampo de cido ctrico/citrato de sdio; enquanto para os valores 7,5 e 9,0 recorreu-se ao tampo Tris/HCl. Os resultados obtidos (Figura 2)

Figura 1. Esquema da montagem FIA desenvolvida para a determinao de cloreto de cetilpiridinio com deteco potenciomtrica. B bomba peristltica; Vi volume de injeco; A amostra; T soluo transportadora (Na2SO4 3,3 10-2 mol/L); P picrato tamponado; Y confluncia; L1 reactor; ET elctrodo de terra; ESI elctrodo selectivo ao anio picrato; ER elctrodo de referncia; E esgoto; mV decimilivoltmetro; R registador

Construo dos elctrodos tubulares sensveis ao anio picrato Os elctrodos sensveis ao anio picrato foram construdos segundo o procedimento descrito anteriormente por Lopes et al. 31 . O

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demonstram um mximo de intensidade do sinal analtico para o valor de pH igual a 5,0. Aps a fixao destes parmetros, estudouse a resposta do detector potenciomtrico para caudais que variavam entre 3 e 12 mL/min (Figura 3) registando-se um aumento da intensidade dos sinais analticos com o aumento do caudal at se atingir um patamar no intervalo entre 8-10 mL/min. Optou-se por fixar o valor deste parmetro em 8 mL/min por ser o melhor compromisso entre frequncia de amostragem e sensibilidade. Por outro lado, verificou-se que caudais superiores a 8 mL/min, conduziam a um aumento da irreprodutibilidade dos sinais analticos. Seguidamente, foi efectuado o estudo da influncia do volume de injeco na amplitude do sinal analtico quando se seleccionavam valores entre 100 e 750 L. Os resultados obtidos evidenciaram uma diminuio da disperso da amostra com o aumento do volume injectado. A altura do sinal analtico crescia at um valor mximo e igual a 400 L estabilizando posteriormente o que justificou a escolha deste valor nos ensaios posteriores. O comprimento e a forma de enrolamento do reactor L1, situado entre a confluncia Y e o detector, foram seleccionados de modo a facilitar a mistura entre a soluo reagente e a amostra, sem contudo introduzir um aprecivel incremento da disperso do produto de reaco,verificando-se que para o comprimento de 60 cm se observava o melhor compromisso entre sensibilidade e frequncia de amostragem (Figura 4). Efetuaram-se curvas de calibrao com solues de referncia de cloreto de cetilpiridinio, cuja concentrao variava entre 5,0x10-6 e 1,0x10-4 mol/L evidenciando-se que o procedimento proposto permitia determinaes numa gama de concentraes entre 5,0x10-6 e 7,5x10-5 mol/L, com um con-

sumo de reagente de 18,3 g por medida, com um coeficiente de correlao quadrtico (R2) de 0,996 e com uma frequncia analtica correspondente a 60 amostras/h. Sendo um processo de determinao indirecto, a reduzida faixa analtica obtida comparativamente com o que caracterstico da potenciometria directa com elctrodos selectivos de ies condicionada pela concentrao de picrato no transportador que proporciona maior sensibilidade para baixas concentraes do analito. ANLISE DE AMOSTRAS REAIS Com o sistema de fluxo desenvolvido efetuaram-se anlises em amostras de desinfectantes bucais, nomeadamente Oral B, Aquafresh, Reach e Denthal, comercializadas em Portugal. A Figura 5 representa um fiagrama tpico obtido da anlise de um dos produtos e na Tabela 1 apresentam-se os resultados referentes mdia de 3 determinaes sobre a mesma amostra. Para efeitos de comparao e por no existir nenhum mtodo oficial aplicado anlise deste tipo de produtos, incluem-se igualmente na Tabela 1 os correspondentes valores indicados no rtulo pelos fabricantes. Relativamente aos excipientes das amostras analisadas, cuja indicao era fornecida pelo fabricante, no foram registadas interferncias significativas . Os ensaios de recuperao efectuados por adio s amostras diludas de um volume igual de solues de cloreto de cetilpiridnio com

Figura 4. Influncia do comprimento do reactor L1 na intensidade do sinal analtico e na frequncia de amostragem, quando era disposto rectilineamente. Condies iguais s fixadas na Figura 2 Figura 2.Variao da amplitude do sinal analtico em funo do pH de solues com concentrao de picrato igual a 1 10-5 mol/L. A soluo injectada continha cloreto de cetilpiridinio na concentrao de 1 10-4 mol/L

Figura 3. Influncia do caudal na intensidade do sinal analtico e na frequncia de amostragem. Condies iguais s fixadas na figura anterior

Figura 5. Fiagrama correspondente injeco de uma srie de padres de cloreto de cetilpiridinio, com concentraes: A 5,0 10-6; B 1,0 10-5; C 5,0 10-5; D 7,5 10-5 mol/L, e anlise de uma soluo desinfectante bucal (A2-Aquafresh) e do ensaio de recuperao, correspondente a trs adies de padres de cloreto de cetilpiridinio nas concentraes de, respectivamente, 5,0 10-6 mol/L, 7,5 10-6 mol/L e 1,010-5 mol/L

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Tabela 1. Resultados da determinao de cloreto de cetilpiridinio em desinfectantes bucais pelo procedimento proposto. Os resultados correspondem mdia de trs determinaes Amostras Oral B Aquafresh Reach Deenthal Valor indicado no rtulo (mol/L) 1,39 1,39 1,39 0,70 x10-3 x10-3 x10-3 x10-3 Valor obtido (mol/L) (1,10 0,03) x10-3 (1,10 0,03) x10-3 (1,19 0,01) x10-3 (0,76 0,01) x10-3

concentraes dentro da faixa linear revelaram em todos os casos a obteno de valores de recuperao mdios de 98 3%. Estes resultados permitiram confirmar a boa exactido do procedimento proposto, aspecto que confirma o bom desempenho analtico da potenciometria j evidenciado anteriormente por outros autores 24,25. CONCLUSES O controlo de surfactantes, nomeadamente o cloreto de cetilpiridinio em amostras comerciais possvel recorrendo a um mtodo simples baseado na tcnica de injeco em fluxo com deteco potenciomtrica. O sistema proposto que simples de operar e de fcil recurso a qualquer laboratrio da indstria, apresenta como principal vantagem a possibilidade de fornecer resultados com boa reprodutibilidade a uma elevada frequncia de amostragem e com um baixo consumo de reagentes. Os resultados sugerem a possibilidade de se aplicar uma montagem deste tipo anlise de outros surfactantes em amostras do tipo semelhante, nomeadamente, detergentes, sabes e champs. REFERNCIAS
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