ACADEMIE DAIX-MARSEILLE UNIVERSITE DAVIGNON ET DES PAYS DE VAUCLUSE Ecole doctorale ED 306, Sciences des procds, sciences des

aliments

UNIVERSIT DE GABS COLE NATIONALE DINGNIEURS DE GABS

THESE
Prsente pour obtenir le grade de Docteur en Sciences de LUniversit dAvignon et des Pays de Vaucluse & LEcole Nationale dIngnieurs de Gabs tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

SPECIALITE : Sciences des Procds, Sciences des Aliments

Vapo-Diffusion assiste par Micro-ondes : Conception, Optimisation et Application

par

Asma FARHAT
Soutenu le 5 Novembre 2010

Grard VILAREM
Ingnieur de recherches, Institut National Polytechnique de Toulouse

Xavier FERNANDEZ
Matre de Confrences, Universit de Nice

Mehrez ROMDHANE,
Professeur des Universits, Universit de Gabs-Tunisie

Olivier DANGLES
Professeur des Universits, Universit d'Avignon

Farid CHEMAT
Professeur des Universits, Universit d'Avignon

Anne Sylvie FABIANO-TIXIER, Matre de Confrences, Universit d'Avignon

1

Avant-propos
Une partie des travaux relats dans ce manuscrit de thse a donn lieu la publication de deux articles scientifiques dans des journaux internationaux comit de lecture. Ces travaux ont galement t valoriss scientifiquement par deux communications par affiche.

Publications scientifiques dans des revues comit de lecture

1. Journal of Food Chemistry (accepte) Microwave steam diffusion for extraction of essential oil from orange peel: Kinetic data, tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 extracts global yield and mechanism A. Farhat, A-S. Fabiano-Tixier, M. El Maataoui, J-F. Maingonnat, M. Romdhane, F. Chemat 2. Journal of Chromatography A 1216 (2009) 5077-5085 Eco-friendly and cleaner process for isolation of essential oil using microwave energy Experimental and theoretical study A. Farhat, A-S. Fabiano-Tixier, M. Romdhane, F. Chemat 3. Journal of Chromatography A (accepte) A surprising method for green extraction of essential oil from caraway seeds: Microwave drydiffusion and Gravity A. Farhat, A-S. Fabiano-Tixier, M. Romdhane, F. Chemat

Communications par affiche

1. Third international Symposium on Medicinal and Aromatic Plants (SIPAM), March 26-28 (2009), Djerba, Tunisia. An original microwave steam diffusion for extraction of essential oil from oranges peels: -Experimental and theoretical studyA. Farhat, M. Romdhane, F. Chemat 2. 4th Franco-Italian Chemistry Journey, April 26-27th (2010), Genova, Italy Microwave Steam Diffusion (MSDf): New and green process for extraction of essential oils A. Farhat, A-S. Fabiano-Tixier, M. Romdhane, F. Chemat

Table des matires

Page Introduction gnrale. Chapitre 1. Extraction assiste par micro-ondes : Analyse bibliographique.. I.1. Lnergie micro-ondes: cl pour maitriser les procds dextraction. I.1.1. Les micro-ondes dans le spectre lectromagntique I.1.2. Mcanisme de chauffage micro-onde : Interaction onde matire.. I.1.3. Le four micro-ondes.. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 I.1.4. Spcificit du chauffage micro-onde.. I.2.1. Les huiles essentielles.. I.2.2. Distillation par entrainement la vapeur. I.2.3. Hydrodistillation.. I.2.4. Expression froid I.3. Procds dextraction des huiles essentielles assiste par micro-ondes Distillation (CAMD) .. I.3.2. Hydrodistillation par micro-ondes sous vide puls Vacuum Microwave 21 Hydrodistillation (VMHD) . I.3.3. Hydrodistillation assiste par micro-ondes Microwave Assisted 23 Hydrodistillation (MAHD) ....... I.3.4. Extraction sans solvant assiste par micro-ondes Solvent Free Microwave 25 Extraction (SFME) .. I.3.5. Extraction sans solvant amliore assiste par micro-ondes Improved Solvent- 28 Free Microwave Extraction (Improved SFME) ... I.3.6. Hydrodiffusion assist par micro-ondes et gravit Microwave Hydrodiffusion 30 and Gravity (MHG) . I.3.7. Entrainement la vapeur assist sous micro-ondes Microwave Steam 32 Distillation (MSD) . I.3.8. Vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes Microwave Steam Diffusion 33
3

1 3 4 4 5 10 12

I.2. Procds conventionnels dextraction des huiles essentielles 13 13 16 18 19 20

I.3.1. Entrainement lair assist par micro-ondes Compressed Air Microwave 20

(MSDf) .. I.4. Comprhension de lextraction des huiles essentielles assiste par micro-ondes.. I.4.1. Mcanisme de lextraction des huiles essentielles par micro-ondes 34 34

I.4.2. Facteurs influenant lextraction des huiles essentielles par micro-ondes... 37 I.4.2.1. Temps lextraction. 37 I.4.2.2. Effet thermique des micro-ondes.. I.4.2.3. Puissance micro-ondes.. I.4.2.4. Solide vgtal 38 39 39

Chapitre 2. Vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf): Conception, optimisation 40 et application aux coproduits dorange. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 II.1. Partie exprimentale. II.1.1. Lorange II.1.1.1. Description. II.1.1.2. Composition chimique et structure morphologique de lorange II.1.1.3. Les coproduits de lorange. II.1.1.4. Valorisation des huiles essentielles de lorange. phase Gazeuse couple la Spectromtrie de Masse (CG/SM).. II.1.3. La Microscopie Optique... II.1.5. Conduite de la vapo-diffusion (SDf). II.1.6. Conception de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) II.1.6.2. Principe de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf).. II.1.6.4. Protocole et procdure dextraction II.2.1. Optimisation.. II.2.1.1. Identification et choix des paramtres... II.2.1.2. Analyse de rsultats II.2.1.2.1. Modle mathmatique. II.2.1.2.2. Analyse de la variance
4

42 42 42 42 43 44

II.1.2. Analyse par Chromatographie en phase Gazeuse (CG) et Chromatographie en 45

47

II.1.4. Mthodologie des plans dexprience 47 50 51

II.1.6.1. Origine de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) 51 51 II.1.6.3. Montage : prototype laboratoire.. 52 52 II.2. Rsultats et discussions..... 54 54 54 55 55 56

II.2.1.3. Conditions optimales.. II.2.3. Analyse de la composition chimique de lhuile essentielle de lorange II.2.4 Analyse cyto-histologyque de lorange par Microscopie Optique. II.2.5. Effet de la temprature.. II.2.6. Modlisation des donnes cintiques II.2.6.1. Bilan matire sur les huiles essentielles. II.2.6.2. Cintique de transfert de matire

58

II.2.2. Cintique dextraction 59 60 62 65 66 67 68

II.2.6.3. Rsultats de la modlisation 69 II.2.7. Comprhension des phnomnes mis en jeu et mcanisme de lextraction par 71 MSDf.... tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 II.2.8. Cot, nergie et impact environnemental.. 73

Chapitre 3. Vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf): application aux fleurs de 75 la lavande.. III.1. Partie exprimentale ... III.1.1. La lavande et lindustrie de la distillation.. III.1.1.2. Huile essentielle de la fleur de lavande. III.1.1.2.2. Mode dobtention.. 76 76

III.1.1.1. Description. 76 76 III.1.1.2.1. Structure morphologique de la fleur de lavande 76 77 III.1.1.3. Composition chimique... 78 III.1.2. Analyse par Chromatographie en phase Gazeuse (CG) et Chromatographie en 78 phase Gazeuse couple la Spectromtrie de Masse (CG/SM).. III.1.3. La Microscopie Optique... III.1.4. Conduite de la vapo-diffusion (SDf) III.2. Rsultats et discussions... III.2.1. Optimisation. III.2.1.1. Dbit de vapeur deau.. III.2.1.2. Puissance micro-ondes. III.2.2 Cintique dextraction.. III.2.3. Composition chimique.
5

80 80

III.1.5. Conduite de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf)... 80 81 81 81 84 85 87

III.2.4. Analyse de la morphologie des calices des fleurs de lavande .... III.2.5. Modlisation des donnes cintiques... III.2.6. Cot, nergie et impact environnemental

89 91 93

Chapitre 4. Diffusion a sec gnre par micro-ondes (MDG): Nouvelles perspectives 95 pour lextraction des huiles essentielles... IV.1. Partie exprimentale... IV.1.1.1. Description.. IV.1.1.2. Composition chimique et structure morphologique de la graine du carvi... IV.1.1.3. Utilisation des grains de carvi.. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 phase Gazeuse couple la Spectromtrie de Masse (CG/SM).. IV.1.3. La Microscopie Optique... 99 IV.1.4. Conduite de lhydrodistillation (HD)... IV.1.5. Conception de la diffusion a sec gnre par micro-ondes (MDG). IV.2. Rsultats et discussions .. IV.2.1. Optimisation. IV.2.2. Cintique dextraction. IV.2.3. Composition chimique. IV.2.4. Effet de la technique dextraction sur la morphologie de la gaine de carvi IV.2.5. Effet de la temprature IV.2.6. Mcanisme de lextraction par MDG. IV.2.7. Cot, nergie et impact environnemental 99 100 102 102 103 105 107 108 109 111 96 IV.1.1. Le carvi 96 96 96 97

IV.1.2. Analyse par Chromatographie en phase Gazeuse (CG) et Chromatographie en 97

Conclusion gnrale 112 Rfrences bibliographiques . 114 Liste des figures.. Liste des tableaux... Rsum 124 127 129

Introduction gnrale

Des nos jours, l'extraction des huiles essentielles et des armes, pour les industries de la cosmtique, de la parfumerie et de lagroalimentaire, est ralise via deux grandes techniques : la distillation azotropique et lextraction par solvant. Ces mthodes traditionnelles, prouves mais peu coteuses, sont aujourd'hui remises en cause. Elles sont extrmement consommatrices en nergie et en solvant. Ces derniers, gnralement issus du ptrole, sont de plus en plus dcris pour leur impact sur la sant et l'environnement. Parmi les technologies dextraction les plus prometteuses, l'extraction par microondes, est lune des mthodes les plus rcentes pour lextraction de molcules dintrt avec un impact environnemental positif : moins dnergie, de solvants et des eaux uses. En effet, depuis 1960, cette technologie est bien implante dans des domaines vairs comme : la synthse organique [1,2], lanalyse des moisissures [3], lenvironnement [4,5], lagroalimentaire [6,7], le schage [8], la mdecine [9] et lextraction [1,10]. Les premiers travaux utilisant les micro-ondes pour extraire des composs organiques ont t publis en 1986. Depuis cette date, les micro-ondes sont de plus en plus utiliss dans le domaine de lextraction des produits vgtaux dont les trois principaux procds sont: lextraction par solvant assiste par micro-ondes MAE [11], lhydrodistillation par micro-ondes sous vide puls VMHD [12] et lhydrodiffusion assiste par micro-ondes MHG [13]. Ainsi, grce un chauffage volumique et slectif, la technologie de lextraction par micro-onde parat tre une alternative intressante puisquelle autorise lutilisation rduite de solvant, des temps de traitement plus courts, des rendements plus levs et une meilleure slectivit.

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Dans le contexte de chimie et procds durables , nous avons dvelopp un nouveau systme dextraction des huiles essentielles sous micro-ondes nomm: vapo-diffusion assist par micro-ondes ou MSDf : microwave steam diffusion . Le procd repose sur le principe de lhydrodiffusion classique utilisant les micro-ondes comme technologie dintensification. Ce procd apparat comme une procdure douce permettant un gain de temps et d'nergie considrable.

Ce manuscrit est compos de quatre parties et a pour but de prsenter la conception, la mise au point, la validation et la valorisation de ce nouveau procd : vapo-diffusion assist par micro-ondes MSDf.

Le premier chapitre est une tude bibliographique dans laquelle nous prsenterons au dbut la thorie du chauffage par micro-ondes ainsi que sa spcificit dans le domaine de lextraction. Ensuite, nous dcrirons les diffrents procds dextractions des huiles essentielles utilisant les techniques traditionnelles et micro-ondes. Le deuxime chapitre est consacr la conception, la mise au point, loptimisation et tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 lapplication de cette nouvelle technique lextraction dhuiles essentielles partir des coproduits doranges. Une tude comparative entre le procd MSDf et le procd dhydrodiffusion classique (SDf), sera ralise en terme de rendement, de cintique dextraction et de composition chimique des huiles essentielles obtenues. Un mcanisme dextraction sera propos la fin dans le but de mieux comprendre les phnomnes mis en jeux lors de lextraction par MSDf.

Le troisime chapitre est une validation du procd MSDf lextraction dun matriel vgtal sec. Ainsi ce procd sera utilis et optimis pour lextraction de lhuile

essentielle de lavande. Aussi, une tude comparative entre le procd MSDf et le procd dhydrodiffusion classique (SDf), sera ralise en terme de rendement, de cintique dextraction et de composition chimique des huiles essentielles obtenues.

Le quatrime chapitre est destin ltude dune nouvelle approche pour lextraction des huiles essentielles partir de matrices aromatiques sches et sans ajout de vapeur ni deau : Diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG). Cette nouvelle perspective sera applique lextraction des huiles essentielles partir des graines de carvi.

Chapitre 1 Extraction assiste par micro-ondes : Analyse bibliographique

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Rsum Ce chapitre constitue une synthse bibliographique des diffrentes notions abordes tout au long de cette thse. Dans une premire partie, nous exposerons la thorie du chauffage par micro-ondes ainsi que les bases de llectromagntisme : nature et propagation des ondes, mcanisme de chauffage, interaction onde matire. La deuxime partie de ce chapitre sera consacre aux huiles essentielles (dfinition, composition chimique, mode dobtention) ainsi que les diffrents procds dextraction des huiles essentielles par la mthode microondes et la spcificit induite par ce type dextraction.

I.1. Lnergie micro-ondes: cl pour maitriser les procds dextraction I.1.1. Les micro-ondes dans le spectre lectromagntique Les micro-ondes ou hyperfrquences sont des ondes lectromagntiques non ionisantes, composes dun champ lectrique et dun champ magntique. Les frquences des micro-ondes se situent dans le domaine des frquences allant de 300 MHz 300 GHz ce qui correspond une longueur donde de 1 millimtre 1 mtre. Elles sont donc du mme ordre grandeur que les dimensions des objets qui nous entourent. La propagation des micro-ondes obit, quelle que soit la nature du milieu, aux quations de Maxwell (quations 1 et 2).

div D div B
tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

0 B t D t

loi de Coulomb

rot E rot H
Avec

loi de Faraday J loi d' Ampere modifie

(1)

J D B

.E .E .H (2)

O : E et H sont les champs lectrique et magntique (E en V.m-1 et H en A.m-1), D et B sont les inductions lectrique et magntique (D en A.s.m-2 et B en Tesla), J est la densit de courant lectrique (A.m-2), est la densit de courant (C.m-2), = permittivit lectrique (F.m-1), = permabilit magntique (H.m-1), = conductivit lectrique (S.m-1).

Dans

le

spectre

lectromagntique

les

micro-ondes

se

situent

dans

les

hyperfrquences, entre les ondes radios et linfrarouge (Figure I.1). La frquence de 2.45 GHz ( = 12,2 cm) est gnralement la plus utilise pour les applications industrielles afin dviter le risque dinterfrence avec les radiocommunications et les radars [14].
10

Longueur donde (m)

103

102 10 1

10 0

10-1

10-2 10-3

10-4 10-5 10-6 10-7

10-8 10 -9 10-10 10 -11 10-12

----------------------------------------

Ondes radio

Infrarouge Micro-ondes

Ultraviolet Rayons X

Rayons gamma

Visible

Frquence (Hz)

106

107 10 8

109 1010

10 11 1012 1013 1014 10 15 1016 10 17 1018 1019 10 20

12.2 cm 2.45 GHz

Figure I.1. Spectre lectromagntique.

Les applications des micro-ondes sont nombreuses et diverses ; Elles sont classs en trois grandes catgories [1, 15]: tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 les applications de mesures (dimensions des objets en cavit raisonnante, temprature par radiomtrie), les applications de tlcommunications (tlvision, transportation de linformation dun point un autre, tlcommunications par liaisons hertziennes et spatiales) les applications nergtiques (schage, chauffage, cuisson, dconglation...).

I.1.2. Mcanisme de chauffage micro-onde : Interaction onde matire Contrairement aux techniques classiques de chauffage qui utilisent la convection ou la conduction pour amener lnergie dans un matriau, le chauffage par micro-ondes rsulte de la dgradation en chaleur de lnergie dune onde lectromagntique au sein du matriau lui mme [1,14]. Un matriau sensible aux micro-ondes est un matriau dilectrique pertes cest--dire absorbant ou attnuant les ondes lectromagntiques. Dans un milieu pertes, deux types de mcanismes sont lorigine de lchauffement, le premier est relatif la prsence de charges libres, le deuxime est li la nature polaire des molcules. Dans le premier cas, les charges lectriques libres (ions) soumises un champ lectrique E vont migrer dans le sens du champ et sont lorigine dun courant de conduction Jc. Il sagit du mcanisme de conduction ionique.

Jc
O jc : courant de conduction : conductivit lectrique E : champ lectrique

.E

(3)

11

Les oscillations de ces charges, gnes par la prsence de molcules fixes, produisent un chauffement par chocs, suivant la loi dOhm.

Polarisation dipolaire Lapplication dun champ lectrique statique ou alternatif au sein dun matriau dilectrique provoque une dformation des molcules ainsi quune rorientation de ses moments dipolaires permanents. La polarisation dilectrique est leffet observ dans un matriau dilectrique soumis un champ lectrique [16]. Suivant la frquence du champ lectrique, la polarisation dilectrique est la somme des diffrents types de polarisations:

(4)

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

avec t = polarisation totale, e = polarisation lectronique, a = polarisation atomique, d = polarisation dipolaire, i = polarisation interfaciale. La polarisation lectronique est un dplacement des lectrons par rapport aux noyaux alors que la polarisation atomique est un dplacement relatif dun noyau par rapport un autre atome auquel il est li par liaison covalente. Les deux premires polarisations (lectroniques et atomiques) sont toujours en phase avec le champ lectrique : les phnomnes de polarisation et de dpolarisation sont plus rapides que le changement dalternance du champ lectrique. Par consquent elles ne contribuent pas au dgagement de chaleur [16-18]. La polarisation dipolaire est la base du dgagement de chaleur : les temps de rponse et les vitesses de relaxations des diples sont du mme ordre que la frquence dalternance du champ. Un produit, dpourvu de moment dipolaire permanent, ne peut donc pas schauffer directement sous champ micro-ondes [16-18]. La polarisation interfaciale responsable de laccumulation des charges linterface est similaire la frquence de changement dorientation du champ. Les molcules sont en gnral des difices lectriques globalement neutres dont la rpartition des charges lectriques est souvent asymtrique : les molcules possdent un moment dipolaire permanent. En labsence de champ lectrique, les diples dun milieu dilectrique se trouvent orients au hasard sous leffet de lagitation thermique du milieu. Sous l'effet d'un champ lectrique continu, les molcules tendent s'orienter dans la direction du champ lectrique. Plus le champ lectrique est intense, plus l'agitation thermique qui tend
12

dsorganiser l'alignement a une importance plus faible. Lorsque toutes les molcules sont orientes, il apparat un moment dipolaire global induit. Sous l'effet d'un champ lectrique alternatif de frquence f, les diples s'orientent dans la direction du champ sur une demi alternance, se dsorientent lorsque le champ s'annule et se rorientent dans l'autre sens pendant la seconde demi alternance : c'est la rotation dipolaire [14,18]. L'nergie lectrique est convertie en nergie cintique par la rotation des diples. L'nergie cintique est transforme partiellement en chaleur : l'alignement des diples par rapport au champ lectrique est contrari par les forces d'interaction entre molcules (forces de liaison par pont hydrogne, forces de liaisons de Van der Waals). Ces forces peuvent tre assimiles des forces de frottement internes qui existent dans les contacts solide-solide. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Elles s'opposent ainsi la libre rotation des molcules. De la friction ainsi produite, nat le dgagement de chaleur [18]. La dissipation d'nergie par le produit peut tre maximale si la frquence du champ lectrique est gale la frquence de relaxation. Le phnomne de relaxation correspond l'apparition d'un dphasage entre l'oscillation du champ lectrique et celui des diples. Les frquences micro-ondes tant imposes, l'chauffement d'un produit avec une efficacit maximale est exceptionnel. Dans ce cas, une grande partie des molcules soumises laction du champ micro-onde ne tournent pas avec le changement alternatif du champ mais frissonnent comme le montre la figure I.2.

+ +
a

+
b

+
c

Figure I.2. Distribution des diples sous leffet dans un champ lectrique.
a: absence de champ lectrique, b: sous champ lectrique continu, c: sous champ lectrique alternatif. 13

Proprits dilectriques dun matriau Certains matriaux vont tre sensibles aux micro-ondes, dautres ne le sont pas. Pour la mise en uvre dun tel mode de chauffage dans un procd de transformation de la matire, il est donc important didentifier et de connatre les facteurs qui permettent de caractriser le comportement du produit vis vis des micro-ondes. La proprit qui dcrit le comportement dun dilectrique soumis un champ lectromagntique, est la permittivit complexe suivante : (F.m-1) qui est dfinie par la relation

avec tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

' - j ''

' r

'' r

(5)

- la permittivit (F.m-1) (partie relle) - le facteur de pertes dilectriques (F.m-1) (partie imaginaire) ou encore, en introduisant la permittivit du vide - la partie relle de la permittivit relative r = /
0 0

F.m

- la partie imaginaire de la permittivit relative r = / Le facteur de pertes dilectriques

r

exprime la capacit du matriau dgrader

lnergie lectromagntique en chaleur ; cest le terme dabsorption du matriau, qui correspond la composante dissipative de la permittivit. Les produits qui possdent un facteur de pertes suprieur 1 ont la particularit de bien schauffer sous micro-ondes ; cest le cas de leau liquide, des produits aqueux, des solvants polaires comme les alcools. Si la valeur du facteur de pertes est comprise entre 0,1 et 1, cest le cas de solvants peu polaires comme lactate dthyle - les produits ont quelques difficults chauffer. Les gaz, les molcules apolaires, les mtaux (qui rflchissent les ondes), les matriaux qui ne se polarisent pas comme le quartz, le tflon, sont insensibles aux micro-ondes et possdent un facteur de pertes quasi nul. La permittivit relative r appele encore constante dilectrique indique la facult du matriau se polariser, cest--dire sorienter sous laction du champ lectrique. Ce terme correspond la composante non dissipative de la permittivit. Le rapport entre ces deux paramtres (tan / , appel tangente de langle de perte ou facteur de dissipation, est souvent utilis et traduit le dphasage induit sur lorientation des diples aprs lapplication du champ lectrique.
14

La constante dilectrique , le facteur de pertes dilectrique et le facteur de dissipation tan sont les paramtres qui dtermineront le comportement dilectrique dun matriau soumis lirradiation micro-onde. Le tableau I.1 indique les valeurs de facteur de dissipation tan pour diffrents produits, diffrentes frquence. Tableau I.1. Facteur de dissipation (tan ) pour diffrentes produits [16]. Tan a 1.350 0.941 0.825 0.659 0.275 0.174 0.123 0.091 0.042 0.040 0.020 Tflon Quartz 0.00028 0.00006 Matriaux Tan c Glace Eau Eau Eau Eau 0.00027 (0C)d 0.207 0.123 0.097 0.056 (0C)b (20C)a (25C)b (50C)b Tan

Solvant Ethylne glycol Ethanol DMSO tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Mthanol NMP Acide actique Eau Chloroforme Dicholoromthane Tolune Hexane

Solide/liquide

a : (20C) 2.45 GHz, b : 2.0 GHz, c : (20C) 3 GHz, d : 2.45 GHz Lorsquune onde lectromagntique rencontre un matriau, une partie de cette onde est rflchie la surface, lautre, gnralement plus importante y pntre. Lnergie de cette onde est transforme en nergie thermique et diminue au fur et mesure que londe pntre dans le matriau, elle sattnue de faon exponentielle. La profondeur de pntration est donc un paramtre fondamental considrer pour le dveloppement du chauffage par micro-ondes, car il nous donne une ide sur le rapport des dimensions gomtriques dun matriau avec la longueur donde dans le milieu [17]. On appelle profondeur de pntration de londe, la distance depuis la surface pour laquelle la puissance micro-onde est gale la puissance transmise au niveau de la surface multiplie par le facteur 1/e (63% de la puissance initiale a t alors cde au matriau). Cette profondeur de pntration d (exprime en mtre) est donne par lexpression suivante :

15

' 2 ''

(6)

Avec = longueur donde (m) dans le matriau dilectrique Ceci montre que pour tudier les interactions des ondes lectromagntiques avec un matriau, il faudra regarder le rapport de ses dimensions gomtriques avec la longueur donde dans le milieu. Ainsi, un matriau peu sensible aux micro-ondes aura une profondeur de pntration leve, alors que pour un produit absorbant, la profondeur de pntration sera faible (par exemple, 25C, pour une frquence de 2450 MHz, d pour leau est de 3,4 cm, pour lthylne glycol, d a une valeur de 1,3 cm). Notons aussi que la valeur de ce paramtre va tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 voluer en fonction de la temprature par lintermdiaire des caractristiques dilectriques. Ainsi, pour leau, la profondeur de pntration augmente de 2,7 cm 15C 14 cm 95C. La pntration de londe dans le matriau dpend de la nature de celui-ci. On classe un produit comme tant [14]: - un isolant parfait, lorsque
r est

voisin de 0. Londe lectromagntique pntre alors presque

en totalit dans le matriau et se propage au sein de celui-ci sans sattnuer. Cest ce type de matriau que lon peut qualifier de transparent aux ondes lectromagntiques qui doit tre utilis comme contenant pour raliser une transformation dans un procd. Ainsi, le verre avec une valeur du facteur de pertes
r

= 0,026 est viter ; le quartz est recommand (

r

0,0008) ainsi que le tflon et le PTFE (polytrafluorure dthylne) ( - un isolant avec pertes, lorsque
r

= 0,0003).

est positif et

est suprieur 1. Londe lectromagntique

pntre dans le milieu, et son amplitude diminue au fur et mesure de sa pntration. - un matriau conducteur, lorsque la permittivit est trs leve. Londe ne pntrant quasiment pas dans le milieu, est rflchie. Cest le cas des mtaux.

I.1.3. Le four micro-ondes Tout systme de chauffage micro-ondes comporte trois lments : - le gnrateur donde, qui produit des ondes lectromagntiques, - le guide donde dont le rle est damener les ondes lectromagntiques depuis le gnrateur vers lenceinte dapplication, - lapplicateur (appel aussi enceinte) dans lequel est plac le produit traiter.

16

Gnrateur Le magntron est le type de gnrateurs dondes le plus rpondu pour la production des ondes lectromagntiques. Il constitue le cur du four micro-ondes, cest lui qui sera la base de la production dnergie lectromagntique [14,17,19]. Le magntron est un tube vide circulaire qui est constitu dune cathode centrale, chauffe par un filament, et dune anode concentrique compose de cavits rsonnantes de formes diffrentes selon le magntron. Il co-existe deux types de champs : - un champ magntique axial produit par deux aimants placs lextrmit du tube, - un champ lectrique gnr entre l'anode et la cathode perpendiculaire au champ magntique. Une tension trs leve (quelques kilovolts) est applique dans un espace trs restreint tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 de quelques millimtres entre lanode et la cathode qui gnre ainsi la production dlectrons. Le champ lectrique accrot leur nergie cintique et le champ magntique incurve leur trajectoire. Les lectrons ainsi acclrs rayonnent de l'nergie sous la forme d'ondes lectromagntiques. Un systme de refroidissement du bloc anodique lair ou bien par circulation eau pour les magntrons de forte puissance est utilis. Guide donde Le guide donde est une pice mtallique qui conduit les ondes depuis le gnrateur jusqu lapplicateur. Il sagit dun tube paralllpipdique creux de dimensions bien prcises dans lequel se trouvent des ondes progressives. Ces dimensions conditionnent le mode de propagation des ondes lectromagntiques [14,17,19].

Applicateur Lapplicateur est une cavit ferme qui doit assurer le transfert de lnergie lectromagntique depuis la sortie du guide jusquau produit traiter. Deux architectures de base existent selon le mode de propagation dvelopp : monomode ou multimode. Un applicateur est dit monomode lorsque ses dimensions gomtriques permettent de conserver un seul mode de propagation, donc une seule configuration du champ. Ce type dapplicateur permet le contrle prcis du champ lectrique mais est rserv au traitement de produits de petits volumes ; celui-ci est alors plac dans le guide donde. Dans une cavit multimode, les ondes lectromagntiques se rflchissent sur les parois et dveloppent un rseau dondes stationnaires (une onde stationnaire oscille sans se
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dplacer et possde des minima (nuds) et des maxima (ventres) d'amplitude fixes dans l'espace). On dit que lon a une cavit rsonnante. Il existe donc plusieurs configurations de champ avec une distribution variable. Dans cette cavit, on peut traiter une quantit de produit plus grande que dans une cavit monomode, mais il est difficile de contrler la distribution du champ et de forts gradients de temprature peuvent se dvelopper dans le produit. Pour palier ce problme, une solution technique courante consiste utiliser des brasseurs dondes ou des plateaux tournants (comme dans les fours domestiques).

I.1.4. Spcificit du chauffage micro-onde Les lments qui ont t prsents prcdemment indiquent que le chauffage par micro-ondes possde incontestablement un caractre htrogne. En effet, le champ de tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 temprature au sein dun matriau va dpendre : - du champ appliqu localement qui est lui-mme htrogne du fait de la prsence des ondes stationnaires et par le phnomne dattnuation des ondes pntrant dans le matriau. - de la conductivit thermique du matriau qui va dterminer la qualit du transfert thermique. La rapidit de la vitesse du chauffage micro-onde va gnrer au sein du matriau des htrognits en temprature, lquilibre thermique tant plus difficilement atteint. - des pertes thermiques en surface et en paroi. Il faut remarquer ici que, compte-tenu de la particularit des micro-ondes, les parties les plus froides se trouveront en surface et en paroi, contrairement ce que lon peut observer par les techniques de chauffage classique pour lesquelles les parois constituent les zones de temprature les plus leves comme le montre la figure I.3.

Chauffage par micro-onde

Chauffage classique

Transfert de chaleur

Figure I.3. Transfert de chaleur sous chauffage classique et sous chauffage par micro-onde.
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I.2. Procds conventionnels dextraction des huiles essentielles I.2.1. Les huiles essentielles Les huiles essentielles et les armes extraits partir des herbes aromatiques et dpices sont le rsultat dun mlange complexe de substances volatiles [20,21]. Ils sont gnralement prsents de trs faibles concentrations dans les plantes parfum. Avant de pouvoir utiliser ou analyser de telles substances, il est ncessaire de les extraire de leur matrice. Plusieurs mthodes dextraction ont t mises au point telles que lhydrodistillation, lentranement la vapeur, lhydro-diffusion et la distillation-extraction simultane [22]. Elles sont ensuite spares de la phase aqueuse par des procds physiques. L'huile ainsi obtenue possde certaines caractristiques physico-chimiques qu'il est possible de mesurer au laboratoire l'aide de techniques simples ou d'appareillages plus complexes. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Les huiles essentielles doivent rpondre des critres physiques imposs par les normes. En effet, elles sont liquides temprature ambiante, de consistance huileuse mais non grasse, leur densit est infrieure celle de leau lexception de quelques cas (cannelle, sassafras et vtiver), volatiles, insolubles dans leau, rarement colores, et solubles dans les huiles vgtales, dans lther et dans lalcool jusqu' un certain pourcentage. Elles sont peu polaires, et il convient de les conserver labri de lair et de la lumire [22,23]. Les huiles essentielles se localisent dans toutes les parties vivantes de la plante et se forment dans le cytoplasme de certaines cellules vgtales spcialises [24]. Elles peuvent tre stockes et emmagasines dans diverses structures de la plante telles que les poils scrteurs ou les trichomes, les cellules pidermiques, les cellules scrtrices internes, les poches scrtrices et les canaux scrteurs. La figure I.4 illustre la localisation des cellules contenant les huiles essentielles pour quelques plantes aromatiques [1].

Thym
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Menthe

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Carvi

Lavande

Cardamone

Citrus

Figure I.4. Localisation des structures scrtrices pour quelques plantes aromatiques [1].

Les huiles essentielles sont des mlanges complexes et varis, constitus de composs organiques de structures et de fonctions chimiques trs diverses. Gnralement, on classe ces composs en deux groupes : les hydrocarbures terpniques et les composs oxygns [1,25]. Le tableau I.2 prsente les composs les plus communs que lon trouve dans les huiles essentielles et qui sont classs selon leurs poids molculaires, leurs tempratures dbullition et leurs solubilits dans leau [1].

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Tableau I.2. Diffrents types de molcules dans lhuile essentielle [1].

Formule molculaire Monoterpnes Limonne Pinne Sabinene Myrcne -Terpinne para-Cymne Sesquiterpnes -Caryophyllene -Santalene -Zingeberene -Curcumene Diterpne Phytol Alcools Graniol Linalool Aldhydes Citral Cuminic aldhyde Ketones Camphor Carvone Phnols Thymol Eugnol Actates Neryl actate Linalyl actate Oxydes 1,8-Cineol Linalool C10H16 C10H16 C10H16 C10H16 C10H16 C10H16 C15H24 C15H24 C15H24 C15H24 C20H40O C10H17OH C10H17OH C10H16O C10H12O C10H16O C10H14O C10H14O C10H12O2 C12H20O2 C12H20O2 C10H18O C10H18O

Temprature dbullition 175.4 157.9 164 167 183 173.9

Solubilit dans leau (g.L-1) < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3 < 10-3

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

268.4 247.46 270.7 266

335.5

229.5 198.5

0.67 0.67

210.9 254.6 207.4 230.5

2.61 0.26 0.92 1.60

233 255 274.5 220

0.85 2.52 0.71 0.57 5.8 x 10-3 0.67

174.8 198.5

Les terpnes Les composs de type terpnique sont largement rencontrs dans les huiles essentielles. Bien que les hydrocarbures terpniques aient des structures trs diverses, ils sont forms dun multiple pair ou impair dunits de 2-mthylbuta-1,3-dine ou appel encore isoprne. On distingue ainsi selon le nombre de carbone constituant les molcules de ce
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groupe: les monoterpnes (C10), les sesquiterpnes (C15), les diterpnes (C20), les triterpnes, (C30) et les ttraterpnes (C40). Les terpnes le plus rencontrs dans les huiles essentielles sont les terpnes les plus volatils cest dire ceux dont la masse molculaire nest pas trop leve telles que les mono et les sesquiterpnes.

Les composs phnoliques Les composs phnoliques drivs du phnylpropane (C6-C3) sont beaucoup moins frquents que les terpnes. Souvent, ils sont des allyl, des propnylpnnols et parfois des aldhydes. Selon le mode dextraction, les huiles essentielles peuvent renfermer dautres composs chimiques, le plus souvent de faible masse molculaire tel que : les carbures (linires et tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 ramifis, saturs ou non saturs), les acides (de C3 C6), les alcools, les aldhydes, les ctones, les esters acycliques, les lactones et les coumarines La composition chimique, la qualit et la quantit extraite dune huile essentielle dpendent de plusieurs paramtres savoir : - Intrinsques: les facteurs gntiques, la localisation, le degr de maturit - Extrinsques : le sol, le climat, lenvironnement - Technologiques : type de culture, mode de rcolte, mode dextraction. Par consquent la composition chimique dune huile essentielle peut varier au sein dun mme genre botanique. Parfois ces variations peuvent sobserver au sein dune mme espce, on parlera alors de chmotypes : il sagit dun polymorphisme chimique.

Les huiles essentielles possdent de nombreuses activits biologiques selon leurs constituants majoritaires. En phytothrapie, elles sont utilises pour leurs proprits antiseptiques contre les maladies infectieuses dorigine bactrienne. Dans les domaines phytosanitaires et agroalimentaires, les huiles essentielles ou leurs composs actifs pourraient galement tre employs comme agents de protection contre les microorganismes, les champignons et le processus doxydation des aliments.

I.2.2. Distillation par entrainement la vapeur L'entranement la vapeur d'eau (Figure I.5) est l'un des procds d'extraction les plus anciens et lune des mthodes officielles pour lobtention des huiles essentielles. Dans ce systme dextraction, le matriel vgtal est soumis laction dun flux de vapeur descendant ou ascendant sans macration pralable. Le plus souvent, de la vapeur deau est injecte au
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bas dune charge vgtale. Les vapeurs charges en composs volatils sont condenses avant dtre dcantes et rcupres dans un essencier (vase de dcantation pour les huiles essentielles) [26,27].

Condenseur

Racteur

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Matriel vgtal Huile essentielle Phase aqueuse Cohobe Vase florentin Chaudire

Figure I.5. Extraction par entranement la vapeur.

Dans le cas des huiles essentielles superficielles contenues dans des glandes situes la surface du matriel vgtal, la vapeur provoque la rupture dun grand nombre de ces glandes dont le contenu se rpand lextrieur du vgtal [28]. Dans le cas des huiles essentielles contenues lintrieur du matriel vgtal, lhuile essentielle doit diffuser travers le vgtal pour entrer en contact avec la vapeur deau. Dans un premier temps, la vapeur deau condense imprgne la charge. Le gradient thermique qui stablit dans la charge est tel que la temprature la plus basse se situe au cur de chaque morceau du vgtal. Les molcules dhuile essentielle, qui sont lgrement solubles dans leau, vont diffuser lentement lintrieur du vgtal, jusqu entrer en contact avec la vapeur deau circulant lextrieur. La diffusion de lhuile essentielle tant le facteur qui limite la vitesse de lextraction, la vapeur deau se charge en huile essentielle mais sans atteindre la saturation. Par consquent, lextraction des huiles essentielles non superficielles est plus longue et exige plus de vapeur que celle des huiles essentielles superficielles.

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I.2.3. Hydrodistillation Lhydrodistillation (Figure I.6) proprement dite, est la mthode norme pour lextraction des huiles essentielles partir des pices sches, ainsi que pour le contrle de qualits des huiles essentielles au laboratoire. Son principe consiste immerger la matire vgtale dans un bain deau, ensuite lensemble est port bullition sous pression atmosphrique. La chaleur permet lclatement et la libration des molcules odorantes contenues dans les cellules vgtales. Ces molcules aromatiques forment avec la vapeur deau un mlange azotropique. Sachant que la temprature dbullition dun mlange est atteinte lorsque la somme des tensions de vapeur de chacun des constituants est gale la pression dvaporation, elle est donc infrieure chacun des points dbullition des substances pures. Ainsi le mlange azotropique eau + huile essentielle distille une tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 temprature gale 100C pression atmosphrique alors que les tempratures dbullition des composs aromatiques sont pour la plupart trs leves. Il est ensuite refroidi et condens dans un essencier ou vase florentin. Un fois condenses, eau et molcules aromatiques du fait de leurs diffrences de densit, se sparent en une phase aqueuse et une phase organique : lhuile essentielle. La distillation peut seffectuer avec ou sans cohobage des eaux aromatiques obtenues lors de la dcantation [26, 27].

Condenseur Colonne de distillation

Cohobe

Huile essentielle Phase aqueuse Vase florentin

Racteur Matriel vgtal Eau

Figure I.6. Extraction par hydrodistillation.

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Durant la distillation, leau bouillante pntre dans les cellules vgtales et solubilise une partie de lhuile essentielle des glandes scrtrices. La solution aqueuse charge de composs volatils, diffuserait ensuite travers une paisseur de tissu, plus ou moins dense, selon lorgane, vers la surface extrieure o lhuile essentielle serait vaporise et entrane sous forme dazotrope. Cependant, Von Rechenberg attribue le terme dhydrodiffusion ce type de transport contrl par la polarit des constituants [29]. Elle serait responsable de la vitesse relative de la distillation des diffrents composs aromatiques, dpendant davantage de leurs solubilits dans leau que de leurs points dbullition [29]. La prsence de leau engendre notamment des phnomnes dhydrolyse. Les constituants de lhuile essentielle native sont soumis aux effets combins de lacidit et de la chaleur, et peuvent subir des modifications chimiques. Lhuile essentielle rcupre est un produit qui diffre sensiblement tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 de lessence originelle, dautant plus que la dure dhydrodistillation est longue.

I.2.4. Expression froid Lexpression froid (Figure I.7) est une extraction sans chauffage rserve aux agrumes. Le principe de ce procd mcanique est fond sur la rupture des pricarpes riches en huiles essentielles. Lhuile essentielle ainsi libre est entrane par un courant deau. Une mulsion constitue deau et dessence se forme. Lessence est alors isole par dcantation [30-31].

Moteur Aiguille

Collecteur

Figure I.7. Schma du montage de lexpression froid [32]. Lutilisation de grandes quantits deau dans cette technique peut altrer les qualits des huiles essentielles, par hydrolyse, par dissolution des composs oxygns et par transport de micro-organismes. Cest pour cette raison que les constructeurs cherchent saffranchir de lutilisation de leau lors dune telle extraction. Ainsi, pour viter ces altrations, de nouveaux procds physiques usuels sont apparus. Ils sont bass sur louverture des sacs olifres par clatement sous leffet dune dpression, ou lutilisation du principe de labrasion de lcorce frache [32].
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I.3. Procds dextraction des huiles essentielles assiste par micro-ondes I.3.1. Entrainement lair assist par micro-ondes Compressed Air Microwave Distillation (CAMD) Lentrainement lair assist par micro-ondes (CAMD) a t propos en 1989 par Craveiro et coll [33], comme la premire technique dextraction des huiles essentielles sous chauffage micro-ondes [33]. Le systme de CAMD se compose de trois parties : un compresseur envoyant de lair dans le rcipient o se trouve la matire vgtale, un four micro-ondes et un systme de rfrigration (Figure I.8).

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Compresseur air

Four micro-ondes
Matriel vgtal

Vase de rcupration Racteur

Systme de rfrigration

Figure I.8. Entrainement lair assist par micro-ondes (CAMD). Cette technique repose sur le principe de lentranement la vapeur et utilise de lair comprim la place de la vapeur pour extraire des huiles essentielles. Elle consiste injecter en continu de lair comprim dans le racteur dextraction o la matrice vgtale est immerge dans de leau et chauffe sous micro-ondes. La vapeur deau sature en molcules volatiles est ensuite entrane vers un vase de rcupration plong dans un systme de rfrigration et situ lextrieur du four micro-ondes. En quelques minutes, leau ainsi que les molcules aromatiques constituant lhuile essentielle sont donc condenses et rcupr es dans des proportions identique celle dun procd classique. Cette technique a pu montrer des rsultats sensiblement quivalents, de manire qualitative et quantitative, en seulement 5 min compares aux 90 min requises pour lentranement la vapeur classique [33-35].
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I.3.2. Hydrodistillation par micro-ondes sous vide puls Vacuum Microwave Hydrodistillation (VMHD) Le procd VMHD a t labor et brevet, en 1994, par la socit Archimex [34,35]. Ce procd, bas sur l'utilisation conjointe des micro-ondes et d'un vide puls, les microondes acclrant le transfert des molcules extraire vers le milieu extrieur, le vide puls permettant de raliser lentranement azotropique une temprature infrieure 100 C. La figure I.9 reprsente le schma de principe dun pilote VMHD, constitu principalement dun racteur double enveloppe quipe d'un agitateur, muni dun gnrateur micro-ondes, dun condenseur et dun systme de rgulation de la pression l'intrieur du racteur ainsi que de la temprature de la double enveloppe.

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Condenseur

gnrateur micro-ondes

Vase florentin Huile essentielle Phase aqueuse Racteur double enveloppe Matriel vgtal Pompe vide

Figure I.9. Hydrodistillation par micro-ondes sous vide puls (VMHD). Ce procd dextraction seffectue en deux tapes : le matriel vgtal traiter, frais ou sec (auquel cas on lui rajoute une quantit deau requise), est chauffe durant un temps t1 laide des micro-ondes, puis durant un temps t2 un vide puls (denviron 100 200 mbar) permet lentranement azotropique du mlange eau-huile une temprature infrieure 100C. Pendant toute la dure de l'extraction, la puissance micro-ondes est maintenue constante comme le montre la figure I.10.

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Puissance micro-ondes

~ 0,2 1 KW/Kg matire premire

0 Pression

p 0

200 mbar ------------Temprature

Tc

------------- 70 90 C

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Rendement dextraction

Temps (min)

Figure I.10. Evolution des principaux paramtres du procd VMHD en fonction du temps.

Sous l'effet des micro-ondes et de la double enveloppe, la temprature du matriel vgtal augmente jusqu' la temprature de consigne, gnralement comprise entre 65 et 80C. On applique alors pendant le temps t1 une pression rduite infrieure la tension de vapeur de l'eau cette temprature. En raison de leffet endothermique de lvaporation de leau, la temprature du produit baisse. Aprs le temps t1, lapport dnergie (micro-ondes et double enveloppe) est insuffisant pour maintenir le dbit de condensat, on revient la pression atmosphrique et la temprature se remet augmenter pendant le temps t2 jusqu' atteindre nouveau la temprature de consigne Tc. Par dfinition, un cycle est dfini comme la somme t1 + t2. En quelques cycles, la quasi-totalit de l'huile essentielle est extraite et rcupre sous forme d'eaux blanches aromatiques. Lextraction par VMHD est 5 10 fois plus rapide que lhydroditillation classique, pour un rendement quivalent et un extrait de composition identique. Ce procd permet galement de travailler des tempratures dextractions infrieures 100C (ce qui rduit les risques de dgradation thermique), et consomme moins dnergie [36-38]. Les huiles essentielles extraites prsentent un profil trs proche des essences contenues dans la matire premire et conservent la note "frache" du vgtal d'origine.
28

I.3.3. Hydrodistillation assiste par micro-ondes Microwave Assisted Hydrodistillation (MAHD) Lhydrodistillation assiste par micro-ondes (MAHD) est un procd dvelopp par Stashenko et coll. [39,40]. Ce procd, bas entirement sur le principe de lhydrodistillation classique, consiste placer une partie du montage dhydrodistillation dans le four microondes (Figure I.11). Le matriel vgtal est donc plac en prsence dune quantit deau suffisante dans un racteur dispos dans lenceinte du four micro-ondes. Le systme de rfrigration ainsi que la partie prvue pour la rcupration des essences sont situs lextrieur du four.

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Condenseur Vase florentin Huile essentielle Phase aqueuse

Racteur Eau Matriel vgtal Four micro-ondes

Figure I.11. Hydrodistillation assiste par micro-ondes (MAHD). Cette technique a t applique pour lextraction des huiles essentielles partir de plusieurs plantes aromatiques et pices [39-46]. Ainsi, les plantes ayant fait lobjet dune extraction de leurs huiles essentielles par hydrodistillation assiste par micro-ondes (MAHD)
29

sont recenses dans le tableau I.3. Ces tudes ont montre que le procd MAHD, compare lhydrodistillation classique (HD), permet un temps dextraction plus court pour un rendement et une composition chimique de lhuile similaire. Cette technique rapide apparait compatible avec lenvironnement et offre une conomie en nergie par rapport lhydrodistillation classique (HD).

Tableau I.3. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par Lhydrodistillation assiste par micro-ondes (MAHD). Conditions opratoires dextraction 100g (500g HD), 2000mL eau (4000 mL eau HD), Patm, 800 W, t= 30 min (2 h HD) 100g, 1000 mL eau (1000 mL eau HD), Patm, 800 W, t= 30 min (2 h HD) Thym (Thymus vulgaris L.) 60g, 2000 mL eau (2000 mL eau HD), Patm, 990 W, t= 120 min (4 h HD), R = 2,52 % (2,39 % HD) Zataria multiflora boiss 60g, 1200 mL eau (1200 mL eau HD), Patm, 990 W, t= 120 min (4 h HD), R = 3,7 % (3,4 % HD) Satureja hortensis 30g, 600 mL eau (600 mL eau HD), Patm, 660 W, t= 180 min (4 h HD), R = 3,1 % (3,1 % HD) Satureja montana 60g, 1200 mL eau (1200 mL eau HD), Patm, 660 W, t= 90 min (4 h HD), R = 0,7 % (0,7 % HD) Eryngium foetidum L. 300g, 1000 mL eau, Patm, 900 W t= 27 min (6 h HD), R = 0,061 % (0,053 % HD) Lavande (Lavandula angustifolia Mill.) 80g, 1500 mL eau (4L eau HD), Patm, 500 W t= 20 min (4 h HD), R = 7,40 % (7,62 % HD) [46] [45] [44] [43] [43] [42] [41] [40]

Espce botanique Xylopia aromatica tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 (Lamarck) Lippia alba (Mill.)

Rfrences [39]

Aneth (Anethum graveolens 100g, 1000 mL eau, Patm, 500 W L.) Coraindre (Coriandrum sativum L.) t= 60 min (3 h HD), R = 2 % (2,1 % HD) 100g, 1000 mL eau, Patm, 500 W t= 60 min (3 h HD), R = 0,4 % (0,4 % HD)
30

[46]

I.3.4. Extraction sans solvant assiste par micro-ondes Solvent Free Microwave Extraction (SFME) Lextraction sans solvant assiste par micro-ondes (SFME) a t dveloppe et brevete, en 2004, par Chemat et coll. [47,48]. Le SFME est lune des techniques les plus rcentes, pour lextraction des lhuiles essentielles assiste par micro-ondes, sans solvant et sans eau pression atmosphrique. Le procd SFME est constitu principalement par quatre parties (Figure I.12): - un racteur dans lequel est uniquement place la matire vgtale traiter, - un four micro-ondes, - un systme de rfrigration, - un essencier o est recueillie lhuile essentielle. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Condenseur Vase florentin Huile essentielle Phase aqueuse

Racteur Eau Matriel vgtal Four micro-ondes

Figure I.12. Extraction sans solvant assiste par micro-ondes (SFME).

Base sur un principe relativement simple, ce procd dcrit une distillation sche assiste par micro-ondes qui consiste placer le matriel vgtal frais dans un racteur microondes sans ajouter ni eau ni solvant organique. Le chauffage de leau de con stitution de la matire premire permet la rupture des glandes contenant lhuile essentielle. Cette tape libre lhuile essentielle qui est ensuite entrane par la vapeur deau produite partir de leau de la matire vgtale. Un systme de refroidissement lextrieur du four micro-ondes permet la condensation du distillat, compos deau et dhuile essentielle, de faon continue et le retour
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de lexcs deau lintrieur du ballon permet de maintenir le taux dhumidit propre la matrice vgtale. Ce procd, a t appliqu plusieurs types de plantes fraiches et sches telle que les pices, les herbes aromatiques et les citrus [49-64]. Le tableau I.4 recense les plantes ayant fait lobjet dune extraction de leurs huiles essentielles par le procd SFME.

Tableau I.4. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par lextraction sans solvant assiste par micro-ondes SFME. Conditions opratoires dextraction 250g (500g + 6000 mL eau HD), Patm, 500 W, t= 30 min (4,5 h HD) R = 0,029 % (0,028 % HD) Menthe des jardins (Mentha 250g (500g + 6000 mL eau HD), Patm, 500 W, crispa L.) t= 30 min (4,5 h HD) R = 0,095 % (0,095 % HD) Thym (Thymus vulgaris L.) 250g (500g + 6000 mL eau HD), Patm, 500 W, t= 30 min (4,5 h HD) R = 0,160 % (0,161 % HD) Ajowan (Carum ajowan L.) 250g imbib dans leau pour 1h (250g + 4000 mL eau HD), Patm, 500 W, t= 60 min (8 h HD) R = 1,41 % (3,34 % HD) Cumin (Cuminum cyminum L.) 250g imbib dans leau pour 1h (250g + 4000 mL eau HD), Patm, 500 W, t= 60 min (8 h HD) R = 0,63 % (1,43 % HD) Anise toil (Illicium verum) 250g imbib dans leau pour 1h (250g + 4000 mL eau HD), Patm, 500 W, t= 60 min (8 h HD) R = 1,38 % (4,16 % HD) Cardamome (Elletaria cardamomum L.) 100g imbib dans leau (67% dhumidit) (100g + 1000 mL eau HD), Patm, 390 W, t= 75 min (6 h HD) R = 2,70 % Orange (Citrus sinensis L.) 200g, (200g + 2L eau HD), Patm, 200 W t= 30 min (3 h HD), R = 0,42 % (0,39 % HD) [52] [51] [50] [50] [50] [49] [49]

Espce botanique Basilic (Ocimum basilicum L.) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Rfrences [49]

32

Orange (Citrus sinensis L.)

200g, (200g + 2L eau HD), Patm, 200 W t= 10 min (3 h HD, 1h CP), R = 0,4 % (0,4 % HD, 0,15 % CP)

[53]

Citrus (Citrus limon L.)

200g, (200g + 2L eau HD), Patm, 200 W t= 30 min (3 h HD), R = 0,24 % (0,21 % HD, 0,05 % CP)

[54]

Romarin (Rosmarinus officinalis L.) Romarin (Rosmarinus officinalis L.) Nigelle (Nigella sativa L.) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

200g, (200g + 2L eau HD), Patm, 200 W t= 30 min (3 h HD), R = 0,57 % (0,57 % HD) 250g, (250g + 4L eau HD), Patm, 500 W t= 40 min (3 h HD), R = 0,39 % (0,31 % HD) 150g, (150g + 3L eau HD), Patm, 850 W t= 10 min (2,5 h HD), R = 0,20 % (0,18 % HD) 150g imbib dans leau pour 1h, (150g + 1,5L eau HD), Patm, 622 W, t= 35 min (3 h HD), R = 0,054 mL/g (0,048 mL/g HD) 25g imbib dans leau pour 1h, Patm, 850 W, t= 20 min (4 h HD), R = 3,3 % (4,8 % HD) 150g imbib dans leau pour 1h, (150g + 1,5L eau HD), Patm, 622 W, t= 85 min (195 min HD), R = 0,0235 mL/g (0,022 mL/g HD) 25g imbib dans leau pour 1h, (200g + 2L eau HD), Patm, 622 W, t= 20 min (4h HD), R =1,9 % (2,3 % HD) 280g imbib dans leau, (280g + 2L eau HD), Patm, 85 W, t= 50 min (3h HD), R =0,15 % (0,16 % HD) 140g imbib dans leau, (140g + 2L eau HD), Patm, 85 W, t= 50 min (3h HD), R =0,42 % (0,41 %HD)

[55]

[56]

[57]

Origan (Origanum vulgare L.)

[58]

Origan (Origanum glandulosum Desf.) Laurier (Laurus nobilis L.)

[59]

[60]

Thym (Saccocalyx satureioides Coss. et Dur.)

[61]

Mlisse (Melissa officinialis L.)

[62]

Laurier (Laurus nobilis L.)

[62]

Buplvre (Bupleurum fruticosum L.) Sarriette calament (Calamintha nepeta L. Savi)

Patm, 500 W, t= 30 min (3 h HD), R = 0,21 % (1,71 % HD) 60g (140g HD), Patm, 250 W, t= 40 min (4h HD), R =0,38 %
33

[63]

[64]

Les rsultats obtenus ont montr que le procd SFME est avantageux par apport lhydrodistillation classique dun point de vue : quantitatif : des rendements similaires ou parfois meilleur ceux obtenus par hydrodistillation classique. qualitatif : les huiles essentielles obtenues par SFME prsentent une proportion plus importante de composs oxygns, les plus valorisables sur le plan olfactif temps dextraction: le procd SFME se ralise avec un court temps dextraction conomique : Comme le temps dextraction est rduit, le procd est plus conomique en temps et en nergie et par la suite en cout. environnemental : le systme SFME nutilise ni solvant organique ni eau.

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

I.3.5. Extraction sans solvant amliore assiste par micro-ondes Improved Solvent Free Microwave Extraction (Improved SFME) Improved SFME a t propose par Wang et coll. en 2006 [65]. La mthode rside en lutilisation dun montage dextraction sans solvant assiste par micro-ondes dans lequel une poudre de fer de carbonylique CIP (Carbonyl iron powders) est ajoute et mlange avec des matires vgtales sches dans le fond du racteur (Figure I.13). Les particules sphriques de fer de carbonylique (CIP) sont capables dabsorber une partie de lnergie micro-onde mise et de la restituer au milieu sous forme de chaleur. Ainsi, le matriel vgtal peut tre chauff par simple conduction sans apport dnergie auxiliaire.

Condenseur Vase florentin Huile essentielle Phase aqueuse

Racteur

Matriel vgtal
Fer de carbonylique (CIP) Four micro-ondes

Figure I.13. Extraction sans solvant amliore assiste par micro-ondes (Improved SFME).
34

Actuellement, diffrentes types de matires capables d'absorber les radiations microondes, ont t aussi utilis telle que : le graphite GP (graphite powders), le charbon actif ACP (active carbon powders) et le liquide ionique IL (1-hexyl-3-methylimidazolium

Hexafluorophosphate) [67,68]. Cette mthode a t applique diffrentes types de plantes sches et aussi fraiches telle que les pices, les citrus et les herbes aromatiques [65-70] (Tableau I.5). Lavantage de cette mthode est quelle permet d'acclrer le temps d'extraction par apport aux autres mthodes telle que le SFME, MAHD et HD et de n'avoir besoin d'aucun prtraitement.

Tableau I.5. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par lextraction sans solvant amliore assiste par micro-ondes (Improved SFME). tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Conditions opratoires dextraction 100g + 20g CIP, Patm, 85 W, t= 30 min (50 min SFME, 90 min MAHD, 180 min HD) 100g + 20g CIP, Patm, 85 W, t= 30 min (50 min SFME, 90 min MAHD, 180 min HD) [65]

Espce botanique Cumin (Cuminum cyminum L.) Poivre de Sichuan (Zanthoxylum bungeanum Maxim.) Orange (Citrus reticulata Blanco)

Rfrences [65]

100g + 20g CIP, Patm, 85 W, t= 30 min (90 min MAHD, 180 min HD)

[66]

Menthe (Mentha haplocalyx 100g + 20g CIP, Patm, 85 W, t= 30 min (90 min Briq) MAHD, 180 min HD)

[66]

Anis toil (Illicium verum 100g + 20g CIP (ou + 20g GP ou + 20g ACP), Hook. f.) Patm, 85 W, t= 30 min (50 min SFME, 90 min MAHD, 180 min HD) Gingembre (Zingiber officinale Rosc.) 100g + 20g CIP (ou + 20g GP ou + 20g ACP), Patm, 85 W, t= 30 min (50 min SFME, 90 min MAHD, 180 min HD) Anis toil (Illicium verum Hook. f.) Cumin (Cuminum cyminum L.) 20g + 15mL IL, Patm, 440 W, t= 15 min (180 min HD) 20g + 15mL IL, Patm, 440 W, t= 15 min (180 min HD)

[67]

[67]

[68]

[68]

35

I.3.6. Hydrodiffusion assist par micro-ondes et gravit Microwave Hydrodiffusion and Gravity (MHG) Lhydrodiffusion assiste par micro-ondes et gravit (MHG) a t brevet par Chemat et coll. en 2008 [71]. Ce procd a t conu pour lextraction des huiles essentielles de diffrentes matrices vgtales par hydrodiffusion via un rayonnement micro-onde sous pression atmosphrique. Comme le montre la figure I.14, le systme MHG est constitu principalement de quatre parties: - un racteur dans lequel est uniquement place la matire vgtale traiter, - un four micro-ondes, - un systme de rfrigration, - un essencier o est recueillie lhuile essentielle. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Output

Four micro-ondes matriel vgtal Racteur Support

---------------

Systme de rfrigration

Huile essentielle

Phase aqueuse Vase florentin

// / / / / / / / /

Figure I.14. Hydrodiffusion assist par micro-ondes et gravit (MHG). Cette technique consiste placer le matriel vgtal dans un racteur lintrieur du four micro-ondes, sans ajouter ni eau ni solvant organique. Les micro-ondes provoquent un chauffement de leau contenue dans la matire vgtale ce qui permet la destruction des
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cellules contenant lhuile essentielle. Les huiles essentielles ainsi que leau interne du matriel vgtal sont libres et transfres de lintrieur de la plante vers lextrieur. Il sagit du phnomne dhydrodiffusion. Un systme de refroidissement lextrieur du four microondes permet la condensation du distillat. Ce procd, a t appliqu plusieurs types de plantes telle que des plantes aromatiques et les citrus [72-74] (Tableau I.6). Le tableau I.6 recense les plantes ayant fait lobjet dune extraction de leurs huiles essentielles par le procd MHG.

Tableau I.6. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par lhydrodiffusion assiste par micro-ondes et gravit (MHG). Conditions opratoires dextraction 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 20 min (90 min HD), R = 0,95 % (0,90 % HD) Menthe (menthe spicata L.) 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 20 min (90 min HD), R = 0,6 % (0,59 % HD) Citron: Eureka (Citrus limon 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W L.) t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 0,7 % (0,8 % HD, 0,1 CP) Citron: Villa Frana (Citrus 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W limon L.) t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 1,6 % (1,7 % HD, 0,2 CP) Lime (Citrus aurantifolia 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W (Chrism.) Swing) t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 0,8 % (0,8 % HD, 0,2 CP) Pomelo: Marsh Seedless 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 1 % (1,1 % HD, 0,2 CP) Orange douce: Tarocco (Citrus sinensis L.) 500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 1,2 % (1,3 % HD, 0,3 CP) [73] [73] [73] [73] [73] [72]

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Espce botanique Menthe (menthe pulegium L.)

Rfrences [72]

(Citrus paradisi L.)

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Orange douce: Valencia late (Citrus sinensis L.)

500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 1 % (1,1 % HD, 0,2 CP)

[73]

Orange douce: Washington Naval (Citrus sinensis L.)

500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 0,9 % (1 % HD, 0,2 CP)

[73]

Tengelo Seminole (Citrus paradisi Macf.)

500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 15 min (3h HD, 1h CP), R = 1,2 % (1,3 % HD, 0,3 CP)

[73]

Romarin (Rosmarinus. officinalis L.) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

500g, (500g + 3L eau HD), Patm, 500 W t= 15 min (3h HD), R = 0, 33 % (0,35 % HD)

[74]

Les rsultats obtenus ont montr que le procd MHG est avantageux par apport aux autres mthodes conventionnelles, l hydrodistillation (HD) et lexpression froit (CP), dun point de vue :

quantitatif : des rendements identiques ceux obtenus par hydrodistillation classique. qualitatif : le MHG fournit des huiles essentielles de haute valeur (composs oxygns en grand pourcentage). temps dextraction : un temps dextraction plus court conomique : Comme le temps dextraction est rduit, le procd est plus conomique en temps et en nergie et par la suite en cout. environnemental : le MHG nutilise ni solvant organique ni eau.

I.3.7. Entrainement la vapeur assist sous micro-ondes Microwave Steam Distillation (MSD) Lentrainement la vapeur assist sous micro-ondes (MSD) a t dveloppe par Sahraoui et coll. en 2008 [75]. Le procd repose sur le principe de lentranement la vapeur classique (EV) dans lequel une irradiation micro-ondes est exerce uniquement sur le racteur dextraction (Figure I.15). Le systme de rfrigration ainsi que la partie prvue pour la rcupration de lhuile essentielle est place lextrieur du four micro-ondes.

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Condenseur

Vase florentin Huile essentielle Phase aqueuse ----------------------

Four micro-ondes Racteur Matriel vgtal Support

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Gnrateur Vapeur

Figure I.15. Entrainement la vapeur assist sous micro-ondes (MSD). Cette mthode a t applique pour lextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande (L. angustifolia Mill.) [75]. Lavantage de cette mthode est d'acclrer le temps d'extraction (6 minutes contre 30 minutes par entranement la vapeur (EV)) avec une composition chimique similaire celle obtenu par entranement la vapeur (EV).

I.3.8. Vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes Microwave Steam Diffusion (MSDf) La vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) a t propos par Farhat et coll. en 2009 [76]. Le procd MSDf est compos principalement de cinq parties: un gnrateur de vapeur, un racteur dans lequel est uniquement place la matire vgtale traiter, un four micro-ondes, un systme de rfrigration et un essencier o est recueillie lhuile essentielle (figure I.16). Ce procd consiste placer le matriel vgtal dans un racteur lintrieur dun four micro-ondes et un flux de vapeur fournie traverse la matire vgtale solide den haut vers le bas. Ce flux descendant profite ainsi de laction osmotique de la vapeur deau. Lapplication des rayonnements magntiques, durant le passage de la vapeur au travers de la matrice solide, permet un transfert de chaleur particulier au sein du matriel vgtal, ce qui induit lclatement des glandes renfermant lhuile essentielle. Ainsi lhuile essentielle qui est diffuse avec la vapeur sous laction de la chaleur est vhicule vers un systme de refroidissement.
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Gnrateur vapeur

Four micro-ondes matriel vgtal Racteur Support

-----------------

Systme de rfrigration

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Huile essentielle Phase aqueuse

Vase florentin
// / / / / / / / /

Figure I.16. Vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf). Ce procd a t appliqu pour lextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande [76]. Le procd MSDf offre des avantages importants par rapport la technique traditionnelle : temps dextraction plus court, impacts environnementaux moindres (conomie dnergie) et obtention dune huile essentielle de qualit. I.4. Comprhension de lextraction des huiles essentielles assiste par micro-ondes I.4.1. Mcanisme de lextraction des huiles essentielles par micro-ondes Gnralement, dans le cas des huiles essentielles, le mcanisme dextraction seffectue par une diffusion provoque par un gradient de concentration en solut. Durant lextraction, le transfert de matire implique un tat non stationnaire, ce qui explique une srie de processus successifs traduisant la variation de la concentration du solut dans le solide vgtal et son interaction avec le solvant (Figure I.17).

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-------------------------------------1 4

Milieu extrieure (Solvant)

--------------------------------------

3 Milieu intrieure

Poche contenant lhuile essentielle lhuile essentielle

(Solide vgtal)

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Figure I.17. Diffrentes tapes du processus de transfert de matire lors de lextraction dhuiles essentielles. La totalit de lopration se droule en quatre tapes successives: 1. Diffusion du solvant dans la matrice solide, 2. Dissolution du solut dans le solvant, 3. Diffusion du solut dissous vers la surface solide, 4. Transfert du solut prs du solide vers le solvant. La cintique de ces quatre processus intervenant dune faon successive voluent diffremment selon les conditions opratoires incluant la nature du solvant, la temprature laquelle se droule lopration, les molcules extraire (solut), la structure de la matire solide, lagitation... La cintique est gnralement exprime en termes de concentration du solut dans le solide par unit de temps (dx/dt). La pntration du solvant dans le solide est gnralement rapide par rapport aux autres processus. Cette tape peut donc tre nglige dans le modle cintique. Alors que, la phase du transfert du solvant travers la matrice vgtale solide constitue ltape la plus lente donc ltape limitante du processus dextraction des huiles essentielles dans la plupart des matires vgtales solides. En effet, la complexit de la microstructure naturelle des vgtaux engendre une mauvaise aptitude quant la diffusion interne des liquides. Aussi, la diffusion du solut
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vers la surface extrieure du solide joue un rle galement important dans la cintique de transfert de matire. Cependant, le passage du solut vers la masse de solvant ne constitue pas une tape limitante comme une bonne agitation homognise le milieu et assure son transfert dans latmosphre. La vitesse globale dextraction des huiles essentielles devra prendre en compte les diverses vitesses, alors que le processus diffusionnel est ltape limitante [77-80]. Lobjectif que nous nous sommes fix dans ltude du mcanisme dextraction des huiles essentielles est la dfinition dune intensification du processus limitant. Cette intensification peut tre dfinie en deux processus : internes et externes. Lintensification du processus de transfert externe durant lextraction dhuiles essentielles par distillation classique peut tre mise au point par une simple augmentation de gradient de temprature. En effet une mise sous pression permet laugmentation de la tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 temprature de la surface du matriel vgtal; la pression partielle de chacun des composs volatils doit galement augmenter. Cependant, une telle opration pourrait, en raison de sa dure, engendrer une dgradation, quelque fois trop importante, de la qualit de lhuile essentielle. La diminution de la temprature du condenseur et la rduction de la distance le sparant de la surface du matriau solide sont possibles mais leur effet est trs limit. La diffusivit des molcules dans latmosphre est gnralement faible et son augmentation ne peut pas tre retenue comme moyen dintensification possible. Le processus de transfert interne des lhuiles essentielles contenues au sein du matriel vgtal est nettement plus complexe. Si ces huiles sont sous forme liquide, elles vont migrer par diffusion. Cette diffusion est gnralement dcrite par la seconde loi de Fick :

X t

-D

X (7)

Avec X est la fraction de solut dans le solide et Dx le coefficient de diffusion molculaire du solut. Cette quation est valide pour la diffusion dun solut dans un corps poreux rigide sous la condition que la structure soit considre comme quasi homogne et macroscopiquement isotrope [81]. Cependant, ce coefficient doit dpendre de la structure, de la porosit et de la tortuosit des matrices vgtales tudies. Si ces huiles sont sous forme gazeuse, leur extraction ncessite une pression partielle la surface interne du matriel vgtal infrieure celle qui existe au cur de ce mme matriel vgtal. Dans le but damliorer ce processus de transfert interne, nous avons choisi lapplication des micro-ondes comme source de chauffage. Le gradient de temprature qui est
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alors instaur, du cur du matriel vgtal vers la priphrie, implique un gradient de pression partielle des composs volatils (huile essentielle) allant dans le mme sens et agissant ainsi en vue de contribuer leur extraction (Figure I.18).

Extraction par micro-ondes dhuiles essentielles

Extraction conventionnel dhuiles essentielles

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---------

Transfert de chaleur

Transfert de chaleur
Transfert de matire

Transfert de matire

Figure I.18. Schma du processus de transfert de matire et de chaleur lors de lextraction dhuiles essentielles par chauffage conventionnel et par micro-ondes. Dautre part, le chauffage par micro-ondes pourrait contribuer la fragilisation voire la rupture des parois cellulaires, couples ventuellement une certaine expansion de lespace interstitiel. Ces divers lments contribuent invitablement une intensification trs pertinente et par consquent une acclration de la cintique de lopration dextraction des huiles essentielles [82, 83]. Cependant, ces activations ou acclrations importantes de la cintique dextraction des huiles essentielles sous chauffage micro-ondes sont souvent affectes par plusieurs facteurs tel que : le temps dextraction, leffet thermique des microondes (Temprature), la puissance dirradiation des micro-ondes et la texture du matriel vgtal. I.4.2. Facteurs influenant lextraction des huiles essentielles par micro-ondes I.4.2.1. Temps dextraction Pour la majorit des plantes tudies, le paramtre le plus valorisable est incontestablement le temps dextraction. La rapidit dextraction parait tre le principal atout dans lextraction des huiles essentielles par micro-ondes. La littrature montre que, pour des
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-----------------

---------

rendements similaires en extraction des huiles essentielles, lemploi de chauffage par microondes permet une rduction significative du temps dextraction en comparaison avec la mthode classique (Tableau I.7).

Tableau I.7. Recensement des plantes soumises une extraction par micro-ondes par diffrentes mthodes. Temps dextraction (min) 20 (90 HD) 15 (180 HD) 15 (180 HD) 30 (270 HD) 30 (270 HD) 60 (480 HD) 10 (150 HD) 6 (30 EV) 30 (180 HD) [72] [73] [74] [49] [49] [50] [57] [75] [65]

Plant matriel

Mthode dextraction

Rfrences

Menthe (menthe pulegium L.) Citron (Citrus limon L.) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Romarin (R. officinalis L.) Thym (Thymus vulgaris L.) Basilic (Ocimum basilicum L.) Ajowan (Carum ajowan L.) Nigelle (Nigella sativa L.) Lavande (L. angustifolia Mill.) Cumin (Cuminum cyminum L.)

MHG MHG MHG SFME SFME SFME SFME MSD ISFME

De plus, en raison de la rapidit du procd, on observe parfois une augmentation de la slectivit de lextraction par rapport la mthode conventionnelle pour un mme rendement dextraction [49].

I.4.2.2. Effet thermique des micro-ondes Llvation de la temprature augmente la solubilit et la diffusivit de la solution et rduit sa viscosit. Mais elle augmente aussi la permabilit des parois cellulaires et donc diminue la slectivit. La temprature opratoire est limite par les risques de dgradation thermique des produits finis. Dans le cas de lextraction des huiles essentielles par microondes, plusieurs quipes ont tudi linfluence de la temprature sur la cintique dextraction des huiles essentielles de diffrents types de matriel vgtal [21,27]. Ils mettent en vidence linfluence de la vitesse de la monte en temprature sur la cintique dextraction mais galement son implication dans la dgradation des huiles essentielles. Son augmentation est plus rapide et par consquent facilite la diffusion, mais elle reste toujours aux alentours de la
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temprature dbullition de leau (100C). La temprature favorise ainsi lclatement des cellules et entrane lextraction de lhuile essentielle sans dgradation de sa qualit.

I.4.2.3. Puissance micro-ondes A quelques exceptions, les puissances appliques sont relativement leves (suprieure 500W) par rapport la quantit de vgtal traiter (infrieure 100g). Cependant la quantit de puissance applique est troitement lie au temps dextraction mais reste aussi en troite relation avec la temprature de la matrice. La puissance doit tre correctement choisie pour viter une temprature excessive qui pourrait mener la dgradation des huiles essentielles donc la combinaison dune basse ou modre puissance avec une plus longue exposition peut tre une approche sage. Les donnes de la littrature, ont montr que le tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 procd dhydrodistillation assiste par micro-ondes sous vide puls (VMHD) ncessite des puissances sensiblement plus leves (1200W) pour des temps dextraction de 15 minutes en moyenne. Par contre le procd de SFME applique des puissances en rapport direct avec la quantit de matire vgtale traiter do la notion plus approprie de densit de puissance. Cette grandeur reprsente la quantit de puissance applique en Watts par kilogramme de matriel vgtal trait (gnralement de 2 Watts par gramme de matire vgtale traite) [84].

I.4.2.4. Solide vgtal Le solide vgtal a une double influence sur le transfert de matire lors de lextraction des huiles essentielles, lune par sa taille, lautre par sa structure. La matire vgtale a une microstructure complexe et variable, forme de cellules, despaces intercellulaires, de capillaires et de pores. Sa description par les outils classiques de gnie chimique nest pas toujours aise. Gnralement, dans le cas de lextraction des huiles essentielles par microondes, une diffrence de taille des particules lors de lextraction modifie la vitesse dextraction. La cintique dextraction est plus rapide son dbut car les huiles essentielles contenues dans les petites particules et les couches superficielles sont facilement accessibles. Ltablissement de lquilibre entre les deux phases dpend ensuite de la taille du matriel vgtal. Plus elles sont grosses, plus lquilibre sera long tablir car ltape de diffusion travers la matrice vgtale est trs lente, donc limitante. Par consquent lextraction des huiles essentielles par micro-ondes de certains organes parait plus rapide que dautres. En effet le temps dextraction des huiles essentielles par micro-ondes des fleurs ou des feuilles est de 3 4 fois plus rapide que celui des graines [1,85].
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Chapitre 2 Vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf): Conception, optimisation et application aux coproduits dorange*

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Rsum Un nouveau procd dextraction dhuiles essentielles assiste par micro ondes nomm vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) , a t conu, mis au point et optimis. Ce procd ncessite lemploi des micro-ondes comme une technologie dintensification et permet lextraction dhuiles essentielles de faon simple et rapide. Le procd MSDf a t appliqu et valid pour lextraction dhuiles essentielles partir des peaux doranges. Son tude a concern la faisabilit, la conception, loptimisation, la modlisation, la cintique ainsi que la qualit des huiles essentielles obtenues. Dans le cadre du prsent travail, nous cherchons tendre le concept et mieux comprendre les processus en vue de bien matriser et gnraliser ce nouveau procd.

*Une partie des travaux relats dans ce chapitre a fait lobjet dune publication accepte Microwave steam diffusion for extraction of essential oils from orange peel: Kinetic data, extracts global yield and mechani sm A. Farhat, A-S. Fabiano-Tixier, M. El Maataoui, J-F. Maingonnat, M. Romdhane, F. Chemat Food Chemistry

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Introduction Dans un contexte mondial qui est la recherche de procds propres permettant lextraction de nouveaux ingrdients forte valeur ajoute, nous proposons un nouveau procd dextraction dhuiles essentielles nomm Vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) . Il sagit dun dispositif de laboratoire permettant lextraction dhuiles essentielles par combinaison de la technique de lhydrodiffusion et de lnergie radiative des micro-ondes comme technologie dintensification. Les objectifs de cette mthode sont de pouvoir obtenir la mme qualit de lhuile essentielle extraite tout en diminuant les dures dextraction, en simplifiant les protocoles opratoires et en diminuant la consommation dnergie. Le procd MSDf a t valid et appliqu pour lextraction dhuiles essentielles dun tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 coproduit trs abondant dans le monde, les peaux doranges. La mise au point et la conception du procd MSDf sont dfinies et commentes dans ce chapitre. Aprs avoir conu le prototype, une mthodologie en surface de rponse a t exprimente afin de considrer la performance du procd dans lextraction de lhuile essentielle des peaux dorange et dinvestiguer la pertinence des variables impliques dans le dispositif. Les huiles essentielles extraites avec les rglages affins ont t compares celles obtenues par mthode conventionnelle en terme de rendement, de temps dextraction et de composition. Une analyse de la structure de lcorce dorange aprs traitement par MSDf ainsi quune analyse du profile de la temprature ont permis dinterprter les phnomnes susceptibles de jouer un rle particulier lors de lextraction. Afin de valoriser les donnes exprimentales obtenues et pour une meilleure comprhension des phnomnes dextraction par MSDf, nous nous sommes intresss la modlisation de ce procd dextraction. Ce modle nous a permis de dterminer un coefficient de transfert de matire globale. Enfin, nous avons essay de poser les bases de la comprhension des phnomnes mis en jeu et de proposer un mcanisme dextraction spcifique.

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II.1. Partie exprimentale II.1.1. Lorange II.1.1.1. Description Originaire du Sud-Est asiatique, loranger ou Citrus sinenisis (L). Osbeck. est un arbre fruitier de la famille des Rutaces, pouvant atteindre 10 mtres, avec un feuillage vert sombre persistant et ncessitant une temprature moyenne de 14C [86]. Il sagit de lespce du genre citrus la plus importante, tant par le nombre de varits quelle renferme, que par limportance de ses productions. Les oranges sont de forme, de taille et de couleur variable suivant les varits, ce qui permet de les classer en quatre groupes : les oranges navels, les oranges blondes, les oranges sanguines et les oranges sans acidit [86,87]. II.1.1.2. Composition chimique et structure morphologique de lorange Avec plus de 85 % d'eau, l'orange est un fruit particulirement juteux. C'est dans cette eau de constitution que se trouvent, sous forme dissoute, les principaux lments nutritifs tels que les glucides, les acides organiques, les substances aromatiques, les pigments, les vitamines, les minraux, les oligolments et les fibres [88,89]. Du point de vue botanique, lorange est un fruit charnu de type baie avec un pricarpe structur en trois parties bien diffrencies : lpicarpe (exocarpe) appel flavdo, le msocarpe appel albdo et lendocarpe (pulpe) (Figure II.1).

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picarpe (Flavdo) Msocarpe (Albdo) Endocarpe Pricarpe

Ppin (Graine) Loge Carpellaire

Figure II.1. Schma dtaillant la structure du pricarpe dorange. Le flavedo, color par les pigments carotnodes quil renferme, reprsente 8 10% du fruit. Il contient de nombreuses glandes scrtrices dessences aromatiques qui sont rparties
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de faon trs irrgulire et pouvant tre extraites selon diffrents procds. Ce sont des poches bordes par plusieurs assises de cellules scrtrices dont la formation fait intervenir des cellules pidermiques et des nodules mristmatiques superficiels [105]. Ces glandes se dveloppent galement au niveau des pices florales, des feuilles, et des tiges de loranger. Lalbdo se prsente sous la forme dune couche blanche, spongieuse et plus ou moins paisse par rapport la taille du fruit, dont elle peut constituer la plus grande partie (12 30 % du fruit) (Figure II.2). Elle est intimement associe au flavdo avec lequel elle forme ce quil est convenu dappeler corce ou peau de lorange [87]. Lendocarpe est constitu dune fine membrane qui tapisse les nombreuses loges carpellaires (Figure II.1 et 2). Du ct interne, cette membrane porte des poils succulents dont lensemble forme la partie comestible ou pulpe renfermant les graines ou ppins. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

picarpe (Flavdo)
Glandes huile essentielle

Poils Ppin(Graine)

Msocarpe (Albdo) Endocarpe Loge Carpellaire

Figure II.2. Schma dtaillant la structure du pricarpe dorange. II.1.1.3. Les coproduits de lorange Les oranges sont les fruits les mieux adapts, au niveau mondial, la fabrication de jus, ce qui constitue environ 50% du poids des fruits [90,91]. Le jus doranges ou gnralement dagrumes est devenu lune des boissons les plus importantes dans les pays dvelopps. Il en rsulte la formation d'importantes quantits de coproduits, qui restent pour la plupart inutiliss. En effet, la rcupration des coproduits des oranges constitue un aspect conomique important des oprations de transformation des agrumes, et elle est particulirement approprie lorsqu'un gros volume de fruits est transform [92]. Les coproduits provenant de lextraction du jus doranges sont gnralement constitus de trois fractions : lcorce, les ppins et la pulpe. Cette dernire prsente des teneurs leves en eau et en sucres solubles. De ce fait cest un coproduit prissable qui fermente et qui dveloppe rapidement des moisissures. Par ailleurs et afin de diminuer le cot du transport, la quasi-totalit de la pulpe produite est sche au niveau des usines de
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transformation, elle se prsente alors sous forme granule ou agglomre. Cet aliment de qualit nutritionnelle apprciable, est particulirement riche en nergie digestible et offre des possibilits dutilisation chez plusieurs catgories de ruminants [93]. Les ppins sont trs riches en huile, en matires azotes et en extrait thr. En effet, lhuile de ppins a connu plusieurs applications grce surtout ses proprits antimicrobiennes. Les corces sont riches en essences odorantes, en pectines et en huiles essentielles [9496]. Celles-ci sont trs utilises par l'industrie agro-alimentaire afin de donner de la saveur aux boissons et aux aliments. Elles sont galement l'un des intrants de l'industrie pharmaceutique pour la prparation de mdicaments, de savons, de parfums et autres produits cosmtiques, ainsi que pour des produits d'entretien usage domestique. Elles sont encore tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 riches en d-limonne qui est employ dans la formulation de solvants industriels mais aussi en tant qu'lment de synthse dautres produits chimiques [97]. II.1.1.4. Valorisation des huiles essentielles de lorange Avec le dveloppement des industries du jus dorange, le volume des rsidus et des dchets constitus surtout par les corces augmente et forme une masse considrable puisqu'elle reprsente l'arrive en gros, les deux tiers du tonnage des fruits. C'est donc par milliers de tonnes que ces dchets sortent des ateliers d'extraction des jus. En effet, chaque anne en Afrique du Nord plusieurs milliers de tonnes de dchets d'oranges et gnralement dagrumes sont dverss la mer, ou dans des cours o ils sont laisss pourrir au soleil. L'accumulation de produits putrescibles constitue un danger pour la rgion [93]. En effet, lhuile essentielle doranges ou gnralement dagrumes est la seule tre extraite par le procd dexpression froid, qui est bas sur la rupture des parois des glandes scrtrices [32,98]; cette huile est ensuite entrane par un courant deau froide. Une mulsion constitue deau et dhuile se forme. Lhuile est alors isole par dcantation. Cependant, lutilisation de ce procd peut entraner une dgradation de la qualit de lhuile essentielle dorange, du fait de lutilisation de grandes quantits deau. En effet, lhuile essentielle se trouve sous forme de gouttelettes disperses dans une phase aqueuse. Lutilisation de grandes quantits deau provoque la solubilisation de molcules hydrophiles souvent trs odorantes, lhydrolyse desters odorants (actate de linalyle) mais aussi lactivation de certaines ractions biochimiques dues des micro-organismes et des enzymes. Ce procd est aussi trs onreux en maintenance, et il est devenu non rentable ce qui a amen plusieurs pays ne plus produire dessence dagrume. En Argentine et au Mexique
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(grands producteurs mondiaux dagrumes), on utilise exclusivement lentranement la vapeur pour lextraction de lhuile essentielle de la lime, du citron, du pamplemousse et de lorange amre. Cependant, il faut rester vigilant vis--vis de la distillation car les essences dagrumes sont thermosensibles. Les inconvnients des mthodes dextraction conventionnelles des huiles essentielles dcorces doranges nous amne chercher de nouvelles techniques dextraction plus performantes, plus rapides et surtout plus cologiques. Le but de ce travail a t l'tude d'une possible valorisation de ce coproduit, en ralisant lextraction de lhuile essentielle laide de micro-ondes. Lextraction par micro-ondes propose une nouvelle vision de lextraction, en utilisant un procd innovant appele la Vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf).

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

II.1.2. Analyse par Chromatographie en phase Gazeuse (CG) et Chromatographie en phase Gazeuse couple la Spectromtrie de Masse (CG/SM) Les huiles essentielles rcupres par les diffrents procds on t analyses par chromatographie en phase gazeuse seule sur un appareil de marque Hewlett Packard 6890 et par couplage de celle-ci la spectromtrie de masse (appareil Hewlett Packard 5973A). Deux colonnes capillaires, lune polaire (Stabilwax) et lautre apolaire (HP5 MS), ont t utilises (Tableau II.1 et 2).

Tableau II.1. Conditions opratoires des analyses en chromatographie en phase gazeuse.

Paramtres Colonne capillaire Longueur diamtre interne paisseur de phase Temprature du dtecteur (FID) Gaz vecteur Dbit Temprature de linjecteur HP5 MS 30 m 0,25 mm 0,25 m 320C Azote 0,3 ml 250C 2C/min de 60C 280C Programmation du four 8 min 60C 15 min 280C
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Stabilwax 60 m 0,25 mm 0,25 m 320C Azote 0,3 ml 250C 2C/min de 60C 280C 8 min 60C 15 min 280C

Concentration des chantillons Quantit injecte Mode dinjection

pur 1 L Split 1 :20

pur 1 L Split 1 :20

La prparation de la table des n-alcanes pour la mesure des indices de Kovats des composes identifis dans les huiles essentielles a t faite comme suit : Solution des nalcanes de C8 C26 (origine: Aldrich et Fluka Chemicals) 5% dans le pentane. Soit 0,1 g de chaque alcane dans 20 ml de pentane, conserv au rfrigrateur. Lidentification des composs a t effectue par comparaison de leurs indices de rtention (indices de Kovats) et des spectres de masse ions-fragments caractristiques obtenus exprimentalement ceux cits dans la littrature [99] et/ou inventoris dans les banques de librairies spectrales (Wiley7, Nist tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 2002). Tableau II.2. Conditions opratoires des analyses en CG/SM.

Paramtres Mode de dtection: Impact lectronique Courant dionisation Colonne capillaire Longueur diamtre interne paisseur de phase Gaz vecteur Dbit Pression en tte de colonne Pression (source, analyseur) Temprature dinterface Temprature de linjecteur 10-7 mbar 280C 250C 2C/min de 60C 280C Programmation du four 8 min 60C 15 min 280C Concentration des chantillons Quantit injecte Mode dinjection pur 1 L Split 1 :20
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70 eV HP5 MS 30 m 0,25 mm 0,25 m Hlium 0,7 ml

70 eV Stabilwax 60 m 0,25 mm 0,25 m Hlium 0,3 ml 10-7 mbar 280C 250C 2C/min de 60C 280C 8 min 60C 15 min 280C pur 1 L Split 1 :20

II.1.3. La Microscopie Optique Aprs chaque procd dextraction, des chantillons de peau dorange ont t collects et traits pour des observations cytohistologiques en comparaison avec des tmoins. Les chantillons ont t fixs dans le mlange : formol-acide actique-alcool (1:1:8, v/v/v) pendant une nuit, rincs leau courante et conservs dans une solution dalcool 70%. Ils ont ensuite t dshydrats dans de lalcool (srie de 80 100%) et inclus dans lhistorsine (Kultzer, Wehrheim, Germany) selon les recommandations du fournisseur. Les sections (3 m dpaisseur) ont t ralises laide du microtome rotatif Leica RM 2165 (Leica Microsystems, Wetzlar, Germany), collectes sur des lames porte-objets et conserves 40C pendant 48h dans une tuve. Elles ont t colores pour visualiser spcifiquement les polysaccharides et les protines en utilisant respectivement le test tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 histochimique PAS (acide priodique/ractif de Schiff et le naphtohol blue black. Les polysaccharides (cellulose, amidon, pectines) apparaissent en rouge tandis que les protines insolubles (nucloprotines) apparaissent en bleu. Aprs coloration, les lames ont t sches sur une plaque chauffante avant dtre montes dans le milieu Sugipath (Sugipath, Richemond, Canada). Les observations et les micrographies ont t ralises laide dun microscope optique (Leica DM 2000) quip dune camra numrique (Leica DFC 30 FX) au laboratoire de microscopie de lINRA PACA, site dAgroparc. Approximativement, 3 fragments ont t analyss pour chaque traitement [100]. II.1.4. Mthodologie des plans dexprience La mthodologie des plans dexprience repose sur llaboration dune srie de tests exprimentaux ayant pour but dobtenir divers renseignements sur les effets des paramtres impliqus sur un critre doptimisation. De manire classique, la mthodologie consiste fixer tous les paramtres et nen faire varier quun, tout en observant une rponse investigue (critre doptimisation). Ceci peut reprsenter un nombre dessais considrable augmentant de faon quasi-exponentielle avec le nombre de facteurs (variables impliques dans le modle tudi) et de niveaux (tats distincts pouvant prendre chaque facteur) impliqus. Les analyses multivaries trouvent ici tout leur intrt ; elles vont permettre de rduire le nombre dexpriences ncessaires ltude de faon importante tout en offrant une complte exploration du domaine exprimental tudi sans pour autant nuire la prcision des rsultats.
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De nombreuses informations utiles, comme linfluence des variables, les interactions entre les facteurs ou les paramtres optimums pourront ainsi tre dfinis. Dans le cadre de notre tude, nous nous sommes intresss aux relations qui unissent variables et variable rponse avec pour but final, de modliser mathmatiquement les rponses tudies et de les optimiser. Ainsi, nous avons choisi de travailler avec une procdure exprimentale de type Box-Wilson [101, 102] plus communment appele plan composite centr. Cette tude multivarie va permettre dutiliser la mthodologie des surfaces de rponses et de modliser ainsi un phnomne ou une rponse tudie sous la forme dune quation polynomiale du second degr. Cette mthode exprimentale propose des prdictions de haute qualit et prsente lavantage destimer un modle courbe, et non linaire, avec prcision. Des surfaces de rponses permettront de dterminer les diffrentes rponses possibles tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 laide du modle estim, sans avoir raliser dexpriences supplmentaires. Cependant ce modle reste limit par le nombre de facteurs pouvant tre tudis et ncessite donc une tude prliminaire permettant de cibler les variables les plus influentes [102]. Cette tude multivarie est base sur un plan factoriel complet deux niveaux auquel on aura ajout des niveaux supplmentaires au centre et lextrieur du domaine exprimental. Le domaine exprimental tudi pourra tre reprsent sous la forme dun carr lorsque deux facteurs sont sollicits, ou encore sous la forme dun cube lorsque trois facteurs seront investigus. Dans le cadre de notre tude, nous nous sommes appliqus la ralisation dun plan composite face centr 2 variables et 5 niveaux. Un plan factoriel complet deux niveaux (cods 1) : NF = 22 expriences ralises aux coins du cube. Ce plan permet de former la base du plan composite partir de deux variables codes leurs niveaux hauts et bas. Des rptitions au centre du domaine exprimental (codes 0) : Nc = nombre dexpriences qui peut tre fonction de lexprimentateur. Ces expriences permettent dvaluer la rptabilit des essais. Des points toile (cods ) : Na = 2 x 2 expriences axiales ou toiles ralises sur les axes des facteurs du cube une distance du centre du domaine. Ces points exprimentaux permettront de dfinir les paramtres quadratiques du modle mathmatique (effet pouvant impliquer la courbure des surfaces de rponses). La valeur de est les essais sur les faces du cube ( = 1) et par la suite les facteurs nont que trois niveau. Au niveau du plan exprimental, Nexp = NF + Nc + Na = 4 + 4 + 4 = 12 expriences seront ralises de manire pouvoir estimer le modle mathmatique de la rponse investigue. On
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aura en rsum, 4 expriences reprsentant un plan factoriel complet, 4 points exprimentaux raliss au centre du domaine exprimental et enfin 4 expriences ralises lextrieur du domaine exprimental. Les diverses rponses, analyses de donnes et interprtations seront ralises en utilisant un logiciel informatique de plans dexpriences statistiques : Statgraphics Plus 2000 (Statgraphics, Manugistics, Rockville, USA). La mthodologie des surfaces de rponses va permettre de modliser les rponses tudies sous la forme dune quation polynomiale du second degr prsente ci-aprs :
2 2 i i 1 i i 1 ii 2 ii

(8)

T reprsente la rponse ou critre doptimisation tudi (rendement, acides gras), tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 - 0 reprsente la moyenne des rponses obtenues aux rplications du centre du domaine exprimental, - n reprsente le nombre de variables impliques dans le modle, - i,j sont des constantes reprsentant les coefficients de rgression du modle mathmatique adopt, ils ne sont pas connus et seront dtermins grce ltude des rsultats exprimentaux, - i illustre les variables opratoires impliques dans le modle mathmatique, reprsente le niveau attribu au facteur i par lexprimentateur afin de raliser un essai. Le logiciel statistique concdera la ralisation de diffrentes oprations fondes sur lanalyse de la variance permettant de proposer un modle polynomial comme prsent cidessus (8). Cette analyse de la variance concdera la dtermination des divers coefficients de rgression du modle mathmatique et permettra dvaluer si une variable quantitative est significativement influente ou non. Lanalyse de la variance consiste tester une hypothse nulle (les moyennes sont gales entre elles) contre lhypothse alternative (au moins une moyenne diffrente). Le principe est alors de comparer la variance de diverses rptitions dun chantillon la variance des moyennes entre tous les chantillons. Le rapport entre ces deux variances est appel ratio-F. cette valeur est compare une table statistique permettant lacceptation ou le rejet de lhypothse nulle de dpart. Pour chacun des paramtres, la significativit des effets linaires, quadratiques et des interactions intervenant entre les variables est ainsi teste puis reprsente sur un diagramme de Pareto. Ces tests permettront de juger de la pertinence des variables et de modliser au final la rponse tudie sous la forme dun modle polynomial du second degr [103]. Ladquation du modle par rapport aux mesures exprimentales pourra tre exprime laide dun coefficient de dtermination
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R (le modle sera dautant plus adapt que la valeur de R2 sera proche de 1). Enfin, le modle mathmatique pourra tre reprsent graphiquement laide de surfaces de rponses permettant de visualiser lvolution de la variable rponse tudie, ainsi que les zones o elle est maximale, en fonction des effets des facteurs. II.1.5. Conduite de la vapo-diffusion (SDf) Le schma du montage utilis pour de la vapo-diffusion (SDf) est prsent dans la figure II.3.
Gnrateur vapeur

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

matriel vgtal Racteur Support

-----------------

Systme de rfrigration

Huile essentielle Phase aqueuse

Vase florentin
// / / / / / / / /

Figure II.3. Montage de la vapo-diffusion (SDf).

Base sur un principe relativement simple, le procd de la vapo-diffusion (SDf) consiste mettre en uvre un flux descendant de vapeur deau au niveau dun racteur batch o sont placs 250 g de peaux dorange fraiche sous forme dun lit fixe. Le passage de la vapeur travers ce matriel vgtal conduit lclatement des glandes renfermant lhuile essentielle. Ainsi lhuile essentielle qui est diffuse avec la vapeur sous laction de la chaleur forme le mlange eau + huile essentielle . Ce mlange eau + huile essentielle ainsi
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form, et vhicul vers le systme de refroidissement qui est muni dun rfrigrant double enveloppe. Ce systme de condensation est galement muni dune canule passant lintrieur des ses spires et permettant un refroidissement rapide et complet. Le mlange eau + huile essentielle est dirig vers le vase florentin. Par simple dcantation, lhuile essentielle est collecte puis sche par le sulfate de sodium et stocke 4C.

II.1.6. Conception de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) II.1.6.1. Origine de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) La vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) est un nouveau procd destin lextraction des huiles essentielles qui permet de raliser les expriences rapidement en un minimum dtapes et avec un rendement comparable voir mme identiques ceux obtenus par tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 les procds traditionnels tout en rduisant la consommation dnergie. Ce procd est bas sur la combinaison dune technique dextraction classique : lhydro-diffusion et lnergie radiative des micro-ondes comme la seule source dnergie. Aprs avoir dcrit le dispositif que nous avons adapt, nous donnerons les rsultats obtenus pour lextraction de lhuile essentielle de peaux doranges. Les paramtres et les conditions dextraction seront alors adapts aux caractristiques de ces matires, en vue de lobtention dune huile essentielle de mme qualit que celle obtenue par les procds traditionnels.

II.1.6.2. Principe de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) Vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) est un nouveau concept dextraction des huiles essentielles, base sur un principe relativement simple, qui consiste mettre en uvre un flux descendant de vapeur deau au niveau dun racteur batch o est plac le matriel vgtal solide sous forme dun lit fixe. Lutilisation des micro-ondes implique une interaction directe entre les rayonnements magntiques, la matire vgtale solide et la vapeur deau. Le chauffage par micro-ondes produit un transfert dnergie particulier au sein du matriel vgtal solide, ce qui induit la rupture des glandes renfermant lhuile essentielle, par la suite un transfert de matire se produit et son mcanisme diffrent notablement de ceux de lextraction traditionnelle des huiles essentielles. Cette tape permet de librer lhuile essentielle qui est ensuite entrane par la vapeur deau. Un systme de refroidissement lextrieur du four micro-ondes permet la condensation du distillat, compos deau et dhuile essentielle, facilement sparable par simple dcantation.

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II.1.6.3. Montage : prototype laboratoire Les lments ncessaires aux extractions par MSDf sont dcrits ci-dessous: - un racteur batch dans lequel est uniquement place la matire vgtale solide traiter, - un support en tflon, inerte aux micro-ondes, qui permet de positionner la matire vgtale solide dans le racteur, - un systme de gnration de vapeur, - un systme de condensation des vapeurs charges en molcules aromatiques, - un essencier o est recueillie lhuile essentielle. Ces lments constituent le montage de base du prototype auquel doit tre ajout un four micro-onde muni de deux orifices, une sur sa face suprieure et lautre sur sa face inferieure. Diffrents racteurs, systmes de condensation de vapeurs et gnrateur de vapeurs tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 ont t utiliss et tests dans le but de proposer un systme optimis permettant la ralisation dextractions simples et efficaces. II.1.6.4. Protocole et procdure dextraction Suite des tests prliminaires, un protocole exprimental a pu tre dress : une illustration basique de la vapo-diffusion assiste par micro-ondes est prsente en figure II.4.
Gnrateur vapeur

Four micro-ondes matriel vgtal Racteur Support

-----------------

Systme de rfrigration

Huile essentielle Phase aqueuse

Vase florentin
// / / / / / / / /

Figure II.4. Reprsentation schmatique de la vapo-diffusion Assiste par Microondes (MSDf).

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- Un gnrateur de vapeur de capacit 5l, fonctionnant automatiquement, muni dun rgulateur de dbit de vapeur permettant la production de vapeur humide ou plutt de brouillard d'eau rchauffe puisque la temprature reste aux alentours de 100C. - Le racteur, contenant le matriel vgtal solide extraire, est une enceinte construite sur mesure en verre de type pyrex et adapt aux microondes. Le matriel extraire est plac sur un support en Tflon poreux transparent aux micro-ondes. - Un four micro-ondes Millestone, dont la temprature, le temps et la puissance sont contrls et automatiss. Louverture suprieure du four micro-ondes permet le passage de la vapeur deau au travers dun tube en verre plac au dessus du racteur. Le flux de vapeur fournie traverse la matire vgtale solide de haut en bas. Lapplication des rayonnements magntiques, produit par le four micro-ondes, durant le passage de la vapeur travers le matriel solide, permet un tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 transfert de chaleur au sein du matriel vgtal, ce qui conduit lclatement des glandes renfermant lhuile essentielle. Ainsi lhuile essentielle qui est diffuse avec la vapeur sous laction de la chaleur forme le mlange eau + huile essentielle . Ce mlange eau + huile essentielle ainsi form, est vhicul vers le systme de refroidissement qui est muni dun rfrigrant double enveloppe. Ce systme de condensation est galement muni dune canule passant lintrieur des spires, permettant un refroidissement rapide et complet. Le mlange eau + huile essentielle est dirig vers le vase florentin. Par simple dcantation, lhuile essentielle est collecte puis sche sur le sulfate de sodium et stocke 4C. Les peaux dorange, utiliss lors de lextraction par MSDf ou SDf, ont t slectionnes en fonction de leurs critres botaniques mais galement de leur intrt conomique (Tableau II.3). Pour les deux procds (MSDf et SDf), le rendement en huile essentielle est estim par le rapport des masses dhuiles essentielles et de la matire vgtale. Il est exprim en pour cent (%).

Tableau II.3. Conditions opratoires utilises lors de lextraction par MSDf et SDf. Pourcentage dhumidit (%) 90

Espce botanique

Varits

Masse vgtale frache (g)

Orange douce (Citrus sinenisis (L). Osbeck.)

Valancia Late

250

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II.2. Rsultats et discussions II.2.1. Optimisation II.2.1.1. Identification et choix des paramtres Loptimisation des extractions par MSDf a t tudie laide dune mthodologie en surfaces de rponses conduite partir dun plan composite face centr. De manire gnrale, les plans dexpriences permettent une meilleure comprhension des phnomnes impliqus dans les nouveaux procds dvelopps et permettent dapprhender une variable rponse rapidement. Aujourdhui, de nombreux auteurs traitent de lutilisation de plans dexpriences dans des domaines divers et varis dans le but dtudier, doptimiser, de comparer ou destimer divers critres. Une tude prliminaire compose de plusieurs expriences a t conduite et nous a permis de dterminer deux facteurs influents particulirement sur la cintique dextraction de tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 lhuile essentielle. Ainsi, le dbit de vapeur deau (Gv) et la puissance fournie par le four micro-ondes (Pw) ont t tudis laide dun plan composite face centr. Le choix des domaines de variation des paramtres tudis, dfinis lissu des essais prliminaires, ainsi que les valeurs codes et non codes de la matrice du plan composite centr sont prsentes dans le tableau II.4. Tableau II.4. Domaine de variation dans le plan dexpriences.

Variables de commande Valeurs - -1 0 +1 + codes Gv (Dbit de vapeur deau en g. min-1) 10 10 25 40 40 Pw (Puissance micro-ondes en W) 50 50 200 350 350

Ces paramtres ont t tudis de manire optimiser une seule rponse : le temps dextraction de lhuile essentielle des peaux doranges (t) exprim en minutes. Ce temps dextraction correspond au moment pour lequel nous nobservons plus daugmentation de la quantit dhuile essentielle dans le distillat. Il dtermine la fin du processus.Avec deux paramtres, ayant chacun cinq niveaux, quatre combinaisons sont possibles, ainsi que quatre points axiaux dont la valeur est gale 1. Nous considrons un nombre de rptitions de
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quatre au centre. Au total nous obtenons 12 points raliser (Tableau II.5). Il faut galement noter que les expriences ont t excutes de faon alatoire afin dviter toute influence de lexprimentateur sur la rponse. En pratique, on suppose que les interactions dordre suprieur ou gal trois sont ngligeables. En effet, ces interactions sont trs frquemment non significatives dans lanalyse de variance et peuvent difficilement tre interprtes.

Tableau II.5. Expriences ralises dans le plan exprimental et rponses obtenues. Gv (g.min-1) 1 -1 1 -1 0 0 -1 1 0 0 0 0

N 1 2 3 tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Pw (W) 1 1 -1 -1 -1 1 0 0 0 0 0 0

t (min) 15 18 35 120 35 12 30 12 12 12 12 12

II.2.1.2. Analyse de rsultats II.2.1.2.1. Modle mathmatique Les rsultats de lextraction des huiles essentielles par vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf) sont rsums sous la forme dune quation polynomiale du second degr et les effets estims de chaque coefficient sont regroups dans le tableau II.6. Lanalyse de ce tableau rvle que les effets linaires de dbit de vapeur deau (Gv) et de la puissance micro-ondes (Pw) sont les plus importants et les plus influenants sur le temps dextraction.

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Tableau II.6. Effets estims des coefficients.

Coefficient Constante Gv Pw Gv Gv Gv Pw Pw P w

Estimations 9,58 -17,66 -24,16 16,25 20,5 18,75

Ainsi le modle mathmatique sous la forme dune quation polynomiale du second degr relative au domaine exprimental dfini et impliquant les deux facteurs tudis scrit : tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

9,58 - 17,66 G v - 24,16 Pw

16,25 G v

20,5 G v Pw

18,75 Pw

Gv et Pw sont respectivement les coefficients linaires de dbit de vapeur deau (g.min-1) et de la puissance micro-ondes (W), Gv Pw reprsente linteraction entre les variables et Gv2 et Pw2 reprsentent les effets quadratiques des variables.

II.2.1.2.2. Analyse de la variance Une analyse de la variance a t ralise sur les rsultats obtenus. Le tableau II.7 rsume les rsultats obtenus. Cette analyse permet de tester la pertinence des variables impliques dans le modle tudi et de reprsenter graphiquement limportance de chaque facteur sur la rponse tudie. Ainsi leffet linaire du dbit de vapeur deau et de la puissance micro-ondes influencent de faon significative (p<0,05) le temps dextraction de lhuile essentielle des peaux doranges. Il convient de noter galement une interaction significative (p>0.05) entre ces deux variables. Le modle dvelopp prsente un coefficient de rgression gale 91.82% (Tableau II.7), ce qui traduit une bonne adquation avec le phnomne exprimental.

62

Tableau II.7. Rsum de lanalyse de la variance du modle statistique.

source Gv: Dbit de vapeur deau Pw: Puissance micro-ondes Gv Gv Gv Pw Pw P w Erreur totale Total R2 = 91.82 % tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Somme des carres 1872,67 3504,17 704,167 1681,0 937,5 846,833 10360,9

Ddl 1 1 1 1 1 6 11

Carrs moyens 1872,67 3504,17 704,167 1681,0 937,5 141,139

Ratio-F 13,27 24,83 4,99 11,91 6,64

Valeur-p 0,0108 0,0025 0,0669 0,0136 0,0419

Le diagramme de Pareto (Figure II.5) illustre les diffrents effets par ordre dimportance pour chaque variable. La longueur des barres sur ce graphique est proportionnelle la valeur absolue de lamplitude des effets estims des coefficients. La barre transversale reprsente lamplitude minimale partir de laquelle les effets seront considrs comme tant statistiquement significatifs sur la variable rponse tudie, considrant un niveau de confiance de 95%. Lanalyse de ce diagramme montre que leffet linaire du dbit de vapeur deau (Gv) et la puissance micro-ondes (Pw) sont les variables prsentant linfluence la plus importante. Linteraction entre ces deux variables prsente galement une influence importante.

Gv : Dbit de vapeur deau

Pw: Puissance micro-ondes

G v Pw Pw Pw Gv Gv

Figure II.5. Diagramme de Pareto prsentant linfluence standardise de chaque effet.

63

Dautres effets suivent avec une importance moins significative mais cependant remarquable. En effet, il convient de signaler linfluence de leffet quadratique de la puissance micro-ondes (PwPw) qui dpasse lgrement la barre verticale. Cependant leffet quadratique du dbit de vapeur deau (Gv Gv) apparait non significatif dans le domaine exprimental tudi.

II.2.1.3. Conditions optimales La figure II.6 illustre la surface de rponse des effets combins de la puissance microonde et du dbit de vapeur deau obtenue pour la rponse tudie, savoir le temps dextraction. Cette figure rvle que le temps dextraction est beaucoup plus important lorsque le dbit de vapeur deau et la puissance micro-ondes diminuent. Cependant il convient tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 de noter que le temps dextraction diminue rapidement lorsquon commence augmenter le niveau du dbit de vapeur deau. En effet comme soulign prcdemment lors de lanalyse du diagramme de Pareto, leffet linaire du dbit de vapeur deau prsente une influence plus prononce. La courbe semble montrer un temps dextraction optimal lorsque le dbit de vapeur deau et la puissance micro-ondes ont des valeurs proches de celle du centre du domaine exprimental. Par consquent un dbit de vapeur deau gale 25 g. min-1 et une puissance micro-ondes gale 200 W permettent un temps dextraction optimal.

Temps dextraction

Puissance micro-ondes Dbit de vapeur deau

Figure II.6. Surfaces de rponses du dbit de vapeur deau et de la puissance micro-ondes obtenues pour le temps dextraction.

64

II.2.2. Cintique dextraction Le temps dextraction est thoriquement le temps ncessaire la rcupration de la totalit de lhuile essentielle contenue dans le matriel vgtal. Or en pratique, il est difficile de rcuprer toute lhuile. Ce temps correspond alors au moment pour lequel nous nobservons plus daugmentation de la quantit dhuile dans le distillat. Il dtermine la fin du processus. Dans les conditions optimales qui ont t dtermines prcdemment, nous avons suivi la cintique dextraction de lhuile essentielle des peaux doranges par MSDf et SDf. La figure II.7 illustre lvolution du rendement en huile essentielle des peaux doranges pour les deux techniques (MSDf et SDf).

1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 0

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Rendement d'extraction (%)

10

20

30

40

50

60

Temps d'extraction (min) Figure II.7. Cintique dextraction des huiles essentielles des peaux doranges obtenue par MSDf () et SDf (). Lextraction par MSDf permet lobtention dhuile essentielle avec des rendements similaires ceux obtenus par SDf (1,54% par MSDf et 1,51% par SDf). Ces rsultats sont dautant plus intressants que le temps dextraction par MSDf ne dpasse pas 12 minutes alors que la mthode conventionnelle SDf ncessite un temps dextraction de lordre de 40 minutes.
65

Nous avons ainsi pu constater que lun des avantages de lextraction par MSDf est incontestablement le gain de temps et donc par consquent lconomie dnergie. Le comportement des deux courbes de cintique dextraction est similaire pour les deux techniques et montre lexistence de trois parties : - Une premire partie correspond une droite croissante reprsentant une augmentation rapide en rendement. Dans cette phase lextrait reprsente les huiles essentielles les plus accessibles. - La seconde partie correspond lextraction des huiles essentielles situes au cur de la plante dont la pente est inferieure la premire. - La troisime partie reprsente le temps partir du quel le rendement en huile essentielle atteint un plateau. Il est important de signaler quune grande partie des huiles essentielles extraites par MSDf sont facilement accessibles et reprsente environ 77% de la totalit des huiles tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 essentielles. Des rsultats similaires sont obtenus par SDf (environ 71%). II.2.3. Analyse de la composition chimique de lhuile essentielle de lorange Les huiles essentielles rcupres selon les deux procds (MSDf et SDf) ont t analyses par chromatographie en phase gazeuse couple un spectromtre de masse (GC/MS). Les conditions opratoires sont dtailles prcdemment. Le tableau II.8 regroupe la composition qualitative des huiles essentielles extraites par les deux mthodes : MSDf et SDf. Lhuile essentielle des peaux doranges, quelle soit extraite par MSDf ou par SDf est constitue par un nombre de composs aromatiques identiques (31 composs). Le limonne est incontestablement le compos majoritaire des huiles essentielles quelle que soit la mthode dextraction raison respectivement de 94,88% et 95,03% par MSDf et SDf. Les autres composs sont prsents avec une teneur relativement faible savoir l-pinne (0,45% en MSDf et 0,43% en SDf), le -myrcne (1,59% en MSDf et 1,54% en SDf) et le linalool (0,29% en MSDf et 0,22% en SDf). La composition chimique de lhuile essentielle dorange est principalement base sur des composs hydrocarbons avec dominance du limonne et du -myrcne. L-pinne, le sabinne et l-phellandrne sont identifis dans la quasi-totalit des varits. La fraction oxygne, trs minoritaire, est principalement compose de linalol et de granial. Lensemble de ces rsultats sont en accord avec ceux proposs par Ferhat et coll au cours de lextraction assiste par micro-ondes (ESSAM) de plusieurs varits de C. sinensis [52-54].

66

Tableau II.8. Composition de l'huile essentielle des peaux doranges obtenue par MSDf et SDf.

Composs Monoterpnes

RI apolaire

RI polaire

MSDf (%) 98.23

SDf (%) 98.13 0.43 0.32 0.02 1.54 0.23 0.28 95.03 0.28 0.35 0.22 0.01 0.02 0.01 0.02 0.01 0.05 0.01 0.13 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.07 0.03 0.02 0.01 0.53 0.30 0.15 0.05 0.02 0.01 0.91 98.26

1 2 3 4 5 6 7 8

-Pinene Sabinene -Pinene -Myrcene - Phellandrene 3-Carene Limonene -Terpinene Monoterpnes Oxygns

926 961 974 988 1001 1014 1030 1103

1023 1121 1109 1165 1268 1290 1206 1285

0.45 0.53 0.04 1.59 0.28 0.24 94.88 0.22 0.43

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

9 10 11 12 13 14 15 16

Linalool Citronellal Terpin-4-ol -Terpineol Nerol Neral Geranial Perilla alcohol Sesquiterpnes

1125 1167 1191 1203 1237 1268 1284 1313

1538 1478 1590 1677 1781 1670 1714 1991

0.29 0.01 0.01 0.02 0.02 0.01 0.06 0.01 0.16

17 18 19 20 21 22 23

-Copaene -Elemene (E)-Caryophellene Trans--Bergamotene -Humulene (E)--Farnesene Valencene Sesquiterpnes Oxygns

1357 1373 1391 1437 1450 1453 1488

1491 1583 1594 1577 1657 1650 1705

0.01 0.01 0.01 0.01 0.02 0.01 0.09 0.04

24 25 26

Caryophellene oxide -Sinensal Nootkatone Autres Composs Oxygns

1570 1701 1799

1977 2341 2250

0.02 0.01 0.01 0.41

27 28 29 30 31

n-Nonanal Decanal Undecanal -Terpinyl acetate Citronellyl Acetate Composs Oxygns Totaux (%) Composs non Oxygns Totaux (%)

1126 1211 1318 1335 1342

1400 1497 1592 1684 1645

0.15 0.18 0.06 0.01 0.01 0.88 98.39

67

II.2.4. Analyse cyto-histologyque de la peau dorange par Microscopie Optique Lanalyse microscopique de sections ralises partir des chantillons de peaux tmoins montre une structure typique du fruit des Citrus [87]. De lextrieur vers lintrieur, on distingue (Figure II.8a et b) : un piderme doubl dune importante couche de cuticule, un parenchyme compact, form de cellules parois paisses et au sein duquel sont amnages les glandes huiles essentielles, et un parenchyme lacuneux qui forme lessentiel de lalbdo.

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

GC

IP

GC

GC

IP

c
Figure II.8. La structure des peaux doranges non traite. GC= cavit de glande, E = piderme, and IP = cellules intrieures de parenchyme Bars = 25 m (a), 15 m (b), 18 m (c)
68

Les glandes prsentent un contour piriforme avec une lumire borde de grandes cellules parenchymateuses vacuolises, parois trs fines et trs ondules suggrant une fonction scrtrice (Figure II.8c). Vers lextrieur, les cols de ces glandes sont en rapport avec des dpressions o elles ne sont protges que par lpiderme et quelques couches souspidermiques (Figure II.8a) [103-106]. Ltude comparative des sections confectionnes partir dchantillons traits par MSDf et par SDf na pas rvl de profondes modifications cytologiques. Ces deux mthodes ont entran louverture des cavits glandulaires et la dstructuration cellulaire. Celle -ci se manifeste par la glification du systme parital et par une rtraction du cytoplasme lorigine dun effondrement de larchitecture gnrale des cellules au niveau de to us les tissus fondamentaux (Figure II.9). Cependant, lextraction via MSDf a entran dimportants remaniements cytologiques affectant lintgrit du parenchyme scrteur des glandes huiles tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 essentielles. Tous les chantillons analyss aprs une extraction MSDf ont en effet montr des lumires dpourvues de ce parenchyme (Figure II.9a) ou contenant seulement des dbris cellulaires (Figure II.9b). En revanche, chez les sections dchantillons extraits via SDf (Figure II.9c), le parenchyme de scrtion est encore en place, avec toutefois des cellules fortement comprimes. Lensemble de ces observations suggre que les micro-ondes induisent des effets dstructurants plus marqus, cibls sur les lments cellulaires spcifiquement impliqus dans la synthse et dans laccumulation des huiles essentielles dans le flavdo de lorange. Au plan physique, ceci est certainement en rapport avec llvation brutale de la temprature lintrieur des structures cellulaires riches en eau provoquant une augmentation de la pression interne des cellules. Cette augmentation de la pression interne des glandes peut rapidement atteindre des niveaux qui excdent la capacit dexpansion des tissus protecteurs entranent ainsi leur dsintgration et au largage de leur contenu dans le milieu dextraction [107]. Cette rduction du temps ncessaire la rupture des tissus glandulaires fait de la MSDf une technique dextraction plus rapide que la technique classique quest la SDf. Les rsultats obtenus sont en accord avec ceux proposs par Par et Blanger et repris par Chen et Spiro, au cours de lextraction assiste par micro-ondes de feuilles de romarin en prsence dhexane [107,108]. Aussi elles sont en accord avec ceux obtenus par Ferhat et coll pour lextraction des huiles essentielles de lorange par le procd SFME [52].

69

GC IP

GC

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

GC

c
Figure II.9. La structure des peaux doranges traite par MSDf (a, b) et par SDf (c). GC= cavit de glande, E = piderme, and IP = cellules intrieures de parenchyme Bars = 25 m (a), 15 m (b), 18 m (c)

70

II.2.5. Effet de la temprature Dans le but de mieux expliquer la rapidit de lextraction par MSDf en comparaison celle de SDf, la cintique dvolution de la temprature a t tudie, comme le montre la figure II.10. La cintique dvolution de la temprature durant lextraction de lhuile essentielle de peau dorange par MSDf et SDf seffectue en deux tapes. Pour les deux techniques, la premire tape est reprsente par une droite croissante jusqu' ce que la temprature sensiblement gale la temprature dbullition de leau (100 C) soit atteinte. On observe ainsi lextraction de la premire gouttelette d'huile essentielle.

120

Temperature ( C)

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

100

80

60

40

20

0
0 10 20 30 40 50 Temps (min) 60

Figure II.10. Profile de la temprature au cours de lextraction de lhuile essentielle de lorange par MSDf () et SDf ().

Dans la deuxime partie, la temprature d'extraction se traduit par un palier de temprature situ au niveau de la temprature dbullition de l'eau et la pression atmosphrique dans le cas de SDf tandis qu'elle est gale 105C dans le cas du MSDf. Nous avons pu constater que le procd MSDf permet une augmentation plus rapide de la temprature dextraction ce qui engendre une acclration des taux d'extraction. Il est clair que laugmentation de la temprature note avec le procd MSDf explique en partie la cintique dextraction rapide obtenue avec ce procd compar au procd SDf. En effet, lexcs dnergie et de la temprature apport par les micro-ondes sont dune part
71

lorigine de la destruction des glandes scrtrices et dautre part laugmentation de la quantit des huiles essentielles vapores. Il est vident que le stress thermique svre li aux micro-ondes et provoqu essentiellement au niveau des glandes contenant lhuile essentielle, est lorigine de cette cintique rapide puisquil peut causer laugmentation de la pression interne dans les glandes. Cette pression, quand elle dpasse une valeur limite, on attient la capacit dexpansion maximale des glandes et elles clatent.

II.2.6. Modlisation des donnes cintiques Dans le cadre dune meilleure comprhension des phnomnes mis en jeux lors de lextraction de lhuile essentielle de peau doranges par MSDf nous avons tudi la modlisation des mcanismes de transfert de matire de la phase solide vers la phase liquide tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 [109]. Nous avons tenu raliser une approche permettant une estimation approximative de lordre de grandeur du coefficient global de transfert de matire lors de lextraction des peaux doranges par le procd MSDf. Pour raliser cette tude, nous devons poser plusieurs hypothses simplificatrices savoir: 1- Aucune raction chimique na lieu. 2- L'huile essentielle est considre comme un solut unique (bien quil soit en ralit un compos de grande varit de constituants). 3- La pression et temprature sont maintenues constantes le long du reacteur. 4- On considre que le systme se comporte comme un lit fixe dans les trois phases (les particules ne bougent pas durant l'coulement de la vapeur). On pourra ainsi supposer que toutes les phases sont parfaitement mlanges. 5- Les particules solides sont assimiles des formes sphriques simples. 6- La dimension et la distribution de la particule solide sont maintenues constantes. 7- Les particules doranges sont considres comme une matire poreuse. 8- Le transfert de masse est semblable un transfert entre la particule solide (structure poreuse) et la phase fluide. 9- La rpartition initiale (la composition) en huile essentielle est considre comme tant homogne. 10- La condensation interne de vapeur est ngligeable, la diffusion de vapeur l'intrieur des particules solides est ngligeable.

72

II.2.6.1. Bilan matire sur les huiles essentielles Le schma de bilan matire sur lappareillage peut scrire de la manire suivante : Entre E Sortie = S Accumulation =
dm dt

A (1)

G v y 0 - G v y(t)

Avec : Gv : dbit de vapeur (g/min) y : composition massique de vapeur en huile essentielle (HE) m : masse des HE contenues dans la matire vgtale (MV) lentre de la colonne la vapeur deau est pure, do y0 = 0, lquation (1) scrit tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010
y(t) 1 Gv dm dt

(2)

Soit M : la masse de la MV Mi : la masse de linerte dans la MV ( l'exclusion des HE) A chaque instant t on a :
Mi M (1 - x (t))

(3)

Avec : x(t) : la fraction massique dHE dans la MV linstant t.

Mi 1 - x (t)

(4)

Do la masse instantane dHE dans la MV le long de la colonne dextraction, m(t) sexprime alors :

m(t)
Donc :

M x (t)

Vc y(t)

(5)

dm
Avec : Degr de vide du racteur
s

Mi

dx (1 - x ) 2

Vc dy (6)

: Masse volumique du vapeur deau (Kg/m3)

Vc : Volume de la colonne (m3)

73

Dou le bilan matire scrit en fonction de x :

- G v y(t) dt

Mi

dx (1 - x ) 2

Vc dy (7)

Lintgration de lquation (7) entre linstant initial et une dure dpuisement t nous permet de dterminer x(t) :
t

y(t) dt
0

Mi Gv

dx (1 - x ) 2 x0

y s

Vc
y0

dy (8)

Avec xo : fraction massique initiale dHE dans la MV

t

y(t) dt
0

Mi Gv

1 1- x

1 1 - x0

Vc y - y 0

(9)

Avec Mo masse initiale de MV, on a tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Mi
Lquation 9 scrit :
t

Mo (1 - xo )

y(t) dt
0

Mo Gv

1 - x0 1- x

Vc

y - y0

(10)

Par la suite lexpression de x (t) est sous la forme suivante :

x(t) 1 1 - x0 Gv 1M0
t

y(t) dt
0

Vc

(11)
y0 - y

M0

Avec x0 = 0,0154

II.2.6.2. Cintique de transfert de matire Pour dcrire la cintique dextraction des HE, on pose lexpression suivante :
dm dt K x - x*

(12)

Avec : K : Coefficient de transfert de matire globale (g. m-2. min-1) : Surface dchange entre la MV et la vapeur deau (m2) x* : Fraction dHE dans la MV en quilibre avec la phase vapeur, la dtermination de x * est inaccessible par lexprience et la thorie, on est alors amen poser x * comme tant proportionnel la tension de vapeur de compos majoritaire dHE dorange (Limonne).
x* P0
74

(13)

Lquation 12 devient :
dm dt K xP0

(14)

Do partir de lquation (6) et (14) on peut crire :

Mi
En posant a =

1 dx 2 (1 - x ) dt

Vc

dy dt

-K

x-

P0

(15)

/ M0 et avec lquation (3) prise aux conditions initiales (cd Mi = M0 (1-x0))

lquation (15) se transforme plus simplement en :

1 - x 0 dx (1 - x ) 2 dt

dy dt

-Ka x

K a P0

(16)

Avec a : surface spcifique dchange entre la MV et la vapeur (m2 / g). Lquation 16 peut tre simplifie, on posant que x est trs faible par apport 1. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010
dx dt s dy dt -Ka x K a P0

(17)

La reprsentation graphique de lquation 16 nous permet de dterminer Ka et

K a P0 .

P 0 est prise gale celle de Limonne fraction prpondrante dans le cas des HE dorange

(95% Limonne). P 0 a t calcul en utilisant le logiciel ACD / Chem Sketch.

P 0 limonne = 0,093325 bar

II.2.6.3. Rsultats de la modlisation partir de lquation 16, nous avons calcul les valeurs de coefficient de transfert de matire globale (K) et de paramtre de proportionnalit () pour les deux techniques (MSDf et SDf) dans les conditions optimales. Le tableau II.9 montre que le coefficient de transfert de matire globale (K) obtenu par MSDf est trois fois plus grand que celui obtenu par SDf. Le paramtre de proportionnalit (), qui est un coefficient proportionnel la fraction dhuile essentielle dorange (95% Limonne) dans la matire vgtale en quilibre avec la phase vapeur, est aussi plus important dans le cas de lextraction par MSDf que par SDf.

Tableau II.9. Rsultat de transfert de Masse.

MSDf K (g. m-2. min-1) (bar-1) 510,9 0,02

75

SDf 158,2 0,013

Ces rsultats sont en accord avec ceux obtenues lors de la cintique dextraction (Figure II.7). En effet, lextraction de lhuile essentielle dorange par MSDf est plus rapide que celle par SDf. Cependant pour mieux comprendre la rapidit de cette nouvelle technique, les donnes exprimentales obtenues durant la cintique dextraction, sont converties en taux d'extraction N (g HE extrait min1m2). Do N sexprime comme suit :
N - Mi t x

(18)

La figure II.11 illustre le taux dextraction N en fonction de la fraction massique en huile essentielle obtenu par MSDf et SDf.
5

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

B A

0,002

0,004

----------------------------------------------

N (g min-1m-2)

0,006

0,008

0,010

0,012

x (g oil g-1 solid)

Figure II.11. Taux dextraction en fonction de la fraction massique en huiles essentielles obtenue par MSDf () et SDf ().

Cette figure montre bien que la vitesse d'extraction de l'huile essentielle d'orange obtenue par MSDf est clairement plus rapide que celle obtenu par SDf et confirme aussi les rsultats obtenus lors des tudes prcdentes (Figure II.7). De mme pour les deux techniques

76

(MSDf et SDf), le taux dextraction de lhuile essentielle dorange seffectue en deux tapes avec deux pentes diffrentes. - Une premire partie (CB) correspondant une grande pente, suggre que l'huile essentielle soit facilement accessible par la vapeur, ce qui reprsente une augmentation rapide en rendement. C'est la phase d'extraction de l'huile essentielle. - La deuxime partie (BA) correspond une pente moins grande. Cest la phase durant laquelle les huiles essentielles situes au cur des peaux dorange sont extraites. Ces rsultats sont en accord avec ceux obtenues prcdemment et confirme ceux obtenues dans lanalyse cytohistologique des glandes qui renferment lhuile essentielle dorange. II.2.7. Comprhension des phnomnes mis en jeu et mcanisme de lextraction par tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 MSDf La principale question qui se pose tout au long de ce chapitre est pourquoi les oprations dextraction de lhuile essentielle doranges sont acclres par MSDf. En effet, la synthse des diverses tudes ralise sur leffet de lextraction sous micro-ondes en terme de cintique dextraction, de morphologie des corces doranges extraites, de modlisation de la cintique dextraction, allie celle de leffet de la temprature, a permis de rpondre ce type de question et de faire ressortir un mcanisme possible spcifique au procd MSDf. Du point de vue de la chimie quantique, lnergie quantique associe au chauffage micro-ondes, dune frquence de 2450 MHz, est de lordre de 1.62 10 -24 J (10-5 eV). Elle est trs infrieure aux nergies d'activation chimique : 13 eV pour la liaison covalente OH, 5 eV pour la liaison hydrogne, moins de 2 eV pour les liaisons de Van Der Waals et mmes infrieures lnergie du mouvement Brownien 37C (0.027 eV) [1]. De ce constat scientifique, lactivation molculaire directe par micro-ondes ne peut tre mise en cause pour justifier des effets apports dans diverses investigations physiques et/ou chimiques [1,110]. Egalement, la thorie dune accumulation lente et continue dnergie cdant un tat hautement activ ne peut tre accepte cause du phnomne de relaxation molculaire trop rapide. Ainsi, dans le domaine de lextraction, seul leffet thermique des micro-ondes peut tre avanc pour expliquer les rendements obtenus. Cependant, lacclration des rendements dextraction peut tre du une combinaison synergique des deux phnomnes de transport : gradients de masse et de chaleur. En effet, dans le cas de lextraction par SDf, le transfert de masse se produit de l'intrieur vers l'extrieur tandis que le transfert de chaleur se produit de l'extrieur vers l'intrieur. Pour
77

l'extraction par MSDf, les deux phnomnes de transport sont dans la mme direction de l'intrieur vers l'extrieur (Figure II.12).

Extraction par micro-ondes dhuiles essentielles

Extraction conventionnel dhuiles essentielles

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

---------

Transfert de chaleur

Transfert de chaleur
Transfert de matire

Transfert de matire

Figure II.12. Schma du mcanisme dextraction dhuile essentielle dorange par MSDf.

Ainsi le transfert de chaleur sous chauffage micro-ondes est compltement invers par rapport au chauffage conventionnel (Figure II.13). Le transfert de chaleur classique se transmet de l'extrieur vers lintrieur du rcipient. Sous chauffage micro-onde, le volume trait devient lui mme source de chaleur. On parle de dgagement de chaleur de lintrieur vers l'extrieur du matriel vgtal trait. Cest un mode de chauffage instantan en volume et non en surface.

Chauffage par micro-onde

Chauffage classique

Transfert de chaleur

Figure II.13. Transfert de chaleur sous chauffage classique et sous chauffage par micro-onde.
78

-----------------

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Les phnomnes thermiques de conduction et de convection ne jouent plus quun rle secondaire d'quilibrage de la temprature. Ces constatations mettent en vidence la diffrence existant entre le chauffage conventionnel et lirradiation par micro-ondes. Dans le chauffage conventionnel, le transfert de chaleur dpend de la conductivit thermique et de la diffrence de temprature existant au travers de lchantillon ; et pour les fluides, il dpend des courants de convexion. De ce point de vue, la temprature augmente plutt lentement dans le milieu tudi. En opposition, et grce leffet volumtrique du chauffage par microondes, une monte en temprature est obtenue plus rapidement, dpendant de lnergie ou de la puissance micro-ondes apporte et du facteur de pertes dilectriques du matriel vgtal irradi. En effet, lors de lextraction de lhuile essentielle doranges par MSDf, le matriel vgtal solide est travers par courant de vapeur deau chauff par micro-ondes. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Lchauffement du matriel vgtal solide seffectuera par conduction via le courant de vapeur deau qui est un solvant sensible aux micro-ondes. Une fois porte sa temprature dbullition, il solubilisera le solut. Ce processus est identique celui mis en uvre dans un procd dextraction classique, le gain porte alors seulement sur la rduction de la dure de chauffe. En effet, Le chauffage micro-ondes na pas linertie thermique du chauffage par conduction et convection partir dune paroi chaude, pour lequel lefficacit du transfert thermique est limite notamment par la surface de contact du produit avec la double enveloppe et par la temprature maximale pouvant tre supporte par le produit en contact avec la paroi chaude. Par consquent, ce gradient thermique invers va stablir dans le matriel vgtal, avec la temprature la plus leve au cur de celui-ci. Il est admis que sous leffet de ce gradient thermique invers, la vitesse de diffusion des soluts est augmente. Ainsi leffet du chauffage micro-onde se traduit par une rduction de la dure dextraction (Figure II.7), une monte rapide en temprature et un rendement restant gnralement comparable celui obtenu avec une mthode classique.

II.2.8. Cot, nergie et impact environnemental Le procd MSDf t dvelopp comme tant une mthode dextraction douce , cologique, rapide et adapte lextraction de lhuile essentielle doranges. Cette technologie respectueuse de lenvironnement fournit une huile essentielle de haute qualit et quasiidentique celle obtenu par la mthode conventionnelle. La rduction du cot dextraction de lhuile essentielle doranges par MSDf est mise en vidence en termes de temps requis et dnergie. En effet, lextraction par MSDf permet lobtention dune huile essentielle
79

doranges avec des rendements similaires ceux obtenus par SDf (voir tableau II.10). Ces rsultats sont dautant plus intressants que le temps ncessaire la ralisation dune extraction par la technique MSDf ne dpasse pas 12 minutes alors que la technique conventionnelle SDf ncessite un temps dextraction de lordre de 40 minutes. Tableau II.10. Le procd MSDf vs. le procd SDf pour lextraction de lhuile essentielle doranges.

SDf Temps dextraction (min) Rendement dextraction (%) Impact environnemental (Kg CO2 rejet. kg -1 HE) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Consommation dnergie (KWh. kg -1 HE) Les eaux uses (litre. kg -1 HE) 40 1.51 238 300 290

MSDf 12 1.54 95 120 85

Lnergie ncessaire pour la ralisation des deux mthodes dextraction est respectivement : 300 kWh.kg-1 dhuile essentielle pour la mthode SDf (nergie ncessaire la ralisation de ltape dextraction) et 120 kWh .kg-1 dhuile essentielle pour la mthode MSDf (nergie ncessaire la ralisation de ltape dextraction et lnergie ncessaire au fonctionnement du four). Les calculs nergtiques ont t raliss laide dun Wattmtre plac sur les prises de courant lectrique lentre du four micro-ondes et des chauffages lectriques. Du point de vue de limpact environnemental, la quantit calcule, en mission de dioxyde de carbone dans latmosphre, est plus leve dans le cadre des extractions par SDf (238 Kg CO2 rejet. kg
-1 -1

huile essentielle) que par MSDf (95 CO2 rejet. kg

huile

essentielle). Ces calculs ont t raliss selon la littrature : pour obtenir 1 kWh partir de charbon ou de fuel, 800 g de dioxyde de carbone sont mis dans latmosphre lors de la combustion de lnergie fossile [111]. Le procd MSDf est aussi plus conomique en termes deaux uses lors de lextraction de lhuile essentielle doranges (85 litre. kg essentielle) compar au SDf (290 litre. kg -1 huile essentielle). Ce procd de MSDf apparat dans ce chapitre comme tant une procdure dite verte permettant de raliser des conomies nergtiques et de diminuer les rejets de CO2 et deaux uses.
-1

huile

80

Chapitre 3 Vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf): application aux fleurs de la lavande*

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Rsum Lobjectif de ce chapitre est la validation et lapplication du procd MSDf lextraction dun matriel vgtal sec : les fleurs de la lavande. Dans une premire partie de ce chapitre, nous prsenterons la lavande dun point de vue botanique. Dans une seconde partie, le procd MSDf sera utilis et optimis pour lextraction de lhuile essentielle de lavande dans le but de proposer, une technique simple, rapide et efficace dextraction. Afin de raliser une tude aussi complte que possible nous avons effectu un suivi cintique, une analyse de la composition de lhuile essentielle obtenue, une analyse de la morphologie des fleurs extraites et une modlisation de la cintique dextraction.

* Une partie des travaux relats dans ce chapitre a fait lobjet dune publication Eco-friendly and cleaner process for isolation of essential oil using microwave energy Experimental and theoretical study A. Farhat, C. Ginies, M. Romdhane, F. Chemat Journal of Chromatography A 1216 (2009) 5077-5085

81

III.1. Partie exprimentale III.1.1. La lavande et lindustrie de la distillation III.1.1.1. Description La lavande, est une plante mdicinale utilise ds lantiquit par les Egyptiens, les Grecs et les Romains qui s'en servaient comme parfum, pour les bains et l'entretien du linge. Dun point de vue morphologique, la lavande est un sous-arbrisseau appartenant la famille des Lamiaces ou Labies, du genre lavandula, de 30 80 cm de hauteur, feuilles opposes et de fleurs le plus souvent de couleur pourpres bleu violaces disposes en pis [112]. Les fleurs de lavande sont trs utilises en infusion, en poudre (glules) et surtout sous forme d'huile essentielle pour combattre l'anxit, la nervosit et les insomnies, mais aussi pour soulager les rhumatismes et soigner les infections des voies respiratoires. Ses nombreux composants lui confrent une grande polyvalence thrapeutique. En effet, l'huile essentielle de tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 lavande entre dans la composition d'un grand nombre de spcialits pharmaceutiques : antiseptiques, cicatrisantes, anti-inflammatoires. De plus, avec la nouvelle tendance qui consiste utiliser les fleurs en cuisine, la lavande a fait son entre dans certaines prparations sucres de lindustrie alimentaire [113-117]. Il existe plusieurs espces et varits de lavandes, dont les deux principales sont la lavande vraie (Lavandula angustifolia) et le lavandin (Lavandula intermedia) [118]. La Premire espce, produit lhuile essentielle de trs bonne qualit olfactive. Au contraire, le lavandin est un hybride naturel qui a t cultiv partir des annes 1930 et qui est aujourd'hui encore l'espce la plus cultive. Sa fleur donne plus dhuile essentielle que celle de la lavande vraie, mais son essence prsente une moins bonne qualit olfactive. Elle est surtout utilise dans la parfumerie industrielle, en entrant dans la formulation de diffrents produits.

III.1.1.2. Huile essentielle de la fleur de lavande III.1.1.2.1. Structure morphologique de la fleur de lavande Lhuile essentielle de fleur de lavande est emmagasine dans des structures cellulaires spcifiques appeles glandes scrtrices . Ces structures, qui constituent autant de petites usines de production d'huiles essentielles, sont formes par une succession rgulire de ctes et de sillons abritant les structures ou les glandes productrices des essences. Ces glandes pidermiques, de forme sphrique, sont regroupes dans les creux des sillons avec un pais feutrage de "poils'' appel les trichomes tecteurs qui recouvre les ctes. Les glandes scrtrices sont formes en gnral de 8 cellules (figure III.1), regroupes pour former une "tte" porte par un large pied unicellulaire qui le fixe l'piderme du calice.
82

La tte pluricellulaire de la glande scrtrice est recouverte d'une "peau'' appele cuticule. Au fur et mesure que les cellules scrtrices vont produire l'huile essentielle, celle-ci va tre accumule sous la cuticule qui se soulve petit petit jusqu' permettre un volume de stockage suprieur au double de celui des cellules scrtrices elles-mmes.

Cuticule
Cavit subcuticulaire de stockage de lhuile

Cellules scrtrices Cell. Pied Epiderme

Cellule basique

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Figure III.1. Glande scrtrice charge d'huile essentielle dune fleur de lavande.

Elles sont rparties sur l'ensemble de la plante. Rares sur les faces suprieures des feuilles et des tiges, elles sont un peu plus nombreuses sur le dessous des feuilles, mais elles abondent surtout sur le calice des fleurs. III.1.1.2.2. Mode dobtention Le moyen le plus appropri pour extraire lhuile essentielle de lavande ou du lavandin est la distillation la vapeur deau que lon ralise dans des alambics [112,119,120]. De la vapeur d'eau passe travers les fleurs et entrane les huiles essentielles. Le mlange vapeur d'eau + essence est ensuite refroidi dans un serpentin o il retourne l'tat liquide. Aprs dcantation, l'essence plus lgre que l'eau, se spare spontanment et remonte la surface. Les premiers alambics datent de 1905. Il sagit dalambics feu nu, en cuivre et faonns la main. Dans les annes 1920, une volution technique importante va modifier les appareils : lalambic bain-marie fait son apparition. La fabrication devient industrielle avec la mise au point dune chaudire permettant de distiller plusieurs vases de fleurs en alternance. Lhuile essentielle gagne ainsi en qualit et le distillateur en temps. Dans les annes 90 est apparu une nouvelle mthode dextraction de lhuile essentielle o les fleurs sont coupes et broyes par une machine de type ensileuse, elles sont ensuite distilles sans schage pralable. Le travail manuel est ainsi supprim. Le rendement de la production est suprieur la distillation classique mais au dtriment de la qualit.
83

III.1.1.3. Composition chimique La composition chimique et la quantit d'huile essentielle de lavande varient en fonction des conditions de culture, de la saison, de la varit et mme de la technique d'extraction. Lhuile essentielle de lavande contient principalement du linalol (25% 38%) et de l'actate de linalyle (25% 45%). On trouve galement des espces chimiques en moins grande quantit: du graniol, du pinne, du camphre, du cinol, de l'actate de lavandulyle, de la coumarine et de l'thylmamylctone.

III.1.2. Analyse par Chromatographie en phase Gazeuse (CG) et Chromatographie en phase Gazeuse couple la Spectromtrie de Masse (CG/SM) Les huiles essentielles rcupres par les diffrents procds on t analyses par chromatographie en phase gazeuse seule sur un appareil de marque Hewlett Packard 6890 et tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 par couplage de celle-ci la spectromtrie de masse (appareil Hewlett Packard 5973A). Deux colonnes capillaires, lune polaire (Stabilwax) et lautre apolaire (HP5 MS), ont t utilises (Tableau III.1 et 2).

Tableau III.1. Conditions opratoires des analyses en chromatographie en phase gazeuse.

Paramtres Colonne capillaire Longueur diamtre interne paisseur de phase Temprature du dtecteur (FID) Gaz vecteur Dbit Temprature de linjecteur HP5 MS 30 m 0,25 mm 0,25 m 320C Azote 0,3 ml 250C 2C/min de 60C 280C Programmation du four 8 min 60C 15 min 280C Concentration des chantillons Quantit injecte Mode dinjection pur 1 L Split 1 :20
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Stabilwax 60 m 0,25 mm 0,25 m 320C Azote 0,3 ml 250C 2C/min de 60C 280C 8 min 60C 15 min 280C pur 1 L Split 1 :20

La prparation de la table des n-alcanes pour la mesure des indices de Kovats des composes identifis dans les huiles essentielles a t faite comme suit : Solution des nalcanes de C8 C26 (origine: Aldrich et Fluka Chemicals) 5% dans le pentane. Soit 0,1 g de chaque alcane dans 20 ml de pentane, conserv au rfrigrateur. Lidentification des composs a t effectue par comparaison de leurs indices de rtention (indices de Kovats) et des spectres de masse ions-fragments caractristiques obtenus exprimentalement ceux cits dans la littrature [99] et/ou inventoris dans les banques de librairies spectrales (Wiley7, Nist 2002).

Tableau III.2. Conditions opratoires des analyses en CG/SM.

Paramtres tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Mode de dtection: Impact lectronique Courant dionisation Colonne capillaire Longueur diamtre interne paisseur de phase Gaz vecteur Dbit Pression en tte de colonne Pression (source, analyseur) Temprature dinterface Temprature de linjecteur 10-7 mbar 280C 250C 2C/min de 60C 280C Programmation du four 8 min 60C 15 min 280C Concentration des chantillons Quantit injecte Mode dinjection pur 1 L Split 1 :20 10-7 mbar 280C 250C 2C/min de 60C 280C 8 min 60C 15 min 280C pur 1 L Split 1 :20 70 eV HP5 MS 30 m 0,25 mm 0,25 m Hlium 0,7 ml 70 eV Stabilwax 60 m 0,25 mm 0,25 m Hlium 0,3 ml

85

III.1.3. La Microscopie Electronique Balayage Les chantillons vgtaux, recueillis aprs lextraction de lhuile essentielle par chauffage micro-ondes et par chauffage traditionnel ont t analyss par Microscopie Electronique Balayage au laboratoire de microscopie de lINRA PACA, site de St Maurice Montfavet. Aprs avoir t prlevs avec prcaution, les chantillons ont t lyophiliss afin dliminer toute trace deau afin de conserver le vgtal en tat en vue des analyses MEB futures. Les chantillons ont t mtalliss par une fine couche dor avant dtre observs en microscopie lectronique balayage sur un microscope XL 30 (Philips FEI) sous les conditions opratoires suivantes : sous vide dair ; tension dacclration 15 KV ; taille du spot : 5 ; distance de travail 15 mm.

III.1.4. Conduite de la vapo-diffusion (SDf) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Le protocole exprimental est identique celui suivi pour la vapo-diffusion (SDf) des peaux dorange. Afin de mettre en place un protocole applicable aux fleurs de lavande choisies et doptimiser les rendements de lextraction tout en conservant la qualit de lhuile essentielle, plusieurs expriences prliminaires ont t menes. La charge de matire vgtale traite, la dure dextraction, ainsi que la quantit de vapeur deau utiliser sont les paramtres qui ont t modifis au fil des expriences, dans le but de trouver le meilleur compromis entre chacun deux. Ainsi, 30 g de fleurs de lavande sche ont t soumises dun flux descendant de la vapeur deau. Le passage de la vapeur travers ce matriel vgtal conduit lclatement des glandes renfermant lhuile essentielle. Ainsi lhuile essentielle qui est diffuse avec la vapeur sous laction de la chaleur forme le mlange eau + huile essentielle . Ce mlange eau + huile essentielle ainsi form, et vhicul vers le systme de refroidissement qui est muni dun rfrigrant double enveloppe. Ce systme de condensation est galement muni dune canule passant lintrieur des ses spires et permettant un refroidissement rapide et complet. Le mlange eau + huile essentielle est dirig vers le vase florentin. Par simple dcantation, lhuile essentielle est collecte puis sche par le sulfate de sodium et stocke 4C.

III.1.5. Conduite de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) Le protocole exprimental est identique celui suivi lors de lextraction des huiles essentielles des peaux dorange tudies prcdemment. Les expriences menes, lors de lextraction des huiles essentielles de lavande, ont t ralises avec le mme montage illustr dans la figure II.4. Ainsi, un flux de vapeur descendant traverse 30 g de fleurs de lavande
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sche travers dun tube en verre plac au dessus du racteur. Lapplication des rayonnements magntiques, produit par le four micro-ondes, durant le passage de ce flux de vapeur, permet lclatement des glandes renfermant lhuile essentielle. Ainsi lhuile essentielle qui est diffuse avec la vapeur sous laction de la chaleur forme le mlange eau + huile essentielle . Ce mlange ainsi form, est vhicul vers un rfrigrant double enveloppe. Ce dernier est galement muni dune canule passant lintrieur des spires, permettant un refroidissement rapide et complet. Le mlange eau + huile essentielle est dirig vers le vase florentin. Par simple dcantation, lhuile essentielle est collecte puis sche sur le sulfate de sodium et stocke 4C. Le rendement en huile essentielle est estim par le rapport des masses dhuiles essentielles et de la matire vgtale. Il est exprim en pour cent (%).

III.2. Rsultats et discussions tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 III.2.1. Optimisation Dans le but doptimiser lapplication du procd de vapo-diffusion assiste par microondes (MSDf) lextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande, nous avons procd lutilisation de la mthodologie exprimentale classique, qui consiste fixer le niveau de toutes les variables sauf une et mesurer la rponse du systme pour diffrentes valeurs de cette variable. Lefficacit de ce procd dextraction, dpend essentiellement de deux paramtres opratoires: le dbit de vapeur deau (Gv) et la puissance micro-ondes (Pw) qui apparaissent comme tant les facteurs les plus influenant. III.2.1.1. Dbit de vapeur deau Dans un premier temps, nous allons tudier linfluence du dbit de vapeur deau sur la cintique dextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande par SDf. Pour cela des variations de dbit de vapeur de 3 60 g. min-1 ont t ralises et la cintique dextraction de lhuile essentielle au cours de temps a t suivie dans chaque cas. Les rsultats obtenus sont illustrs la figure III.2. Ce graphique montre que plus le dbit de vapeur deau est important plus la cintique dextraction est rapide. Par consquent, pour la suite de nos tudes il sera plus intressant de travailler avec un dbit assez lev. En effet, des que le dbit de vapeur atteint 25 g. min-1 le rendement massique en huile essentielle de fleurs de lavande se stabilise et on atteint la meilleur cintique dextraction. Par consquent, nous avons adopt ce dbit de vapeur, qui nous permet dobtenir le meilleur rendement en un minimum de temps.

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5 Rendement (%) 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1

Gv = 3 g/min Gv = 6 g/min Gv = 25 g/min Gv = 50 g/min Gv = 60 g/min

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Yield(%)

0,5 0 0 20 40 60 80 Time (min) 100 120 140 160

Temps (min)

Figure III.2. Influence du dbit de vapeur sur la cintique dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande.

Pour mieux comprendre ces rsultats nous allons procder la modlisation de la cintique dextraction des huiles essentielles obtenues par MSDf. La forme hyperbolique des cintiques dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande par MSDf (Figure III.2) nous permet de dire que cette cintique dextraction est comparable la cintique dune raction chimique du premier ordre. On peut schmatiser la cintique dextraction par MSDf comme suit : Huile essentielle (Contenue dans la matrice) A t=0 t> 0 x x - xt Huile essentielle (Extrait) B 0 xt

Avec :
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xt = le rendement en huile essentielle l instant t, x = le rendement total en huile essentielle la fin de lextraction. En suivant le rendement au cours de lextraction, on peut dire qu linstant t = 0 (dbut de lextraction), la totalit des huiles essentielles "x" se trouve dans le substrat vgtal, la lavande, et un instant t quelconque une quantit dhuile essentielle a t rcupre ce qui nous permet davoir la valeur de "xt". Il reste dans le matriel vgtal ce temps t une quantit dhuile essentielle proportionnelle "x - xt". Si on assimile la cintique de MSDf celle dune raction chimique dordre 1, la vitesse de cette raction est donne par la formule suivante : v = - d [A]/dt = k [A] k dt = - d [A]/[A]

Par intgration de cette quation on obtient : tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 -kt = Log [A]/[A0] -kt = Log [(x - xt)/x) = Log (1 - xt/x)

En gnral, lextraction suit une cintique de premier ordre dont lquation "Log (1 xt/x) = f(t)" est linaire. Dans le cas, de lextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande par MSDf, la cintique dextraction est bien similaire celle dune raction chimique du premier ordre, dont les valeurs de la constante cintique k et du temps dextraction infini t sont reprsentes dans la figure III.3 ci dessous. t reprsente le temps partir duquel le rendement devient constant.
140 120 100 80 60 40 20 0 0 10 20 30 40 Gv (g/min) 50 60 70 K 10-2 (min-1), t (min)

Figure III.3. Constante cintique k () et temps t () dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande par MSDf fonction de dbit de vapeur.
89

Nous observons que 25 g. min-1 correspond au dbit de vapeur optimum pour lextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande par MSDf, puisqu partir de cette valeur la constante de vitesse devient stable tout en assurant un rendement dextraction optimal, en un minimum de temps (20 min). Ceci peut tre expliqu par le fait qu partir de 25 g. min-1 lnergie apporte par la vapeur deau est, dune part, suffisante pour lui permettre dentrer plus facilement lintrieur de la matire vgtale et dautre part, assure une convection ncessaire autour des particules solide pour saffranchir les rsistances au transfert externe. III.2.1.2. Puissance micro-ondes Dans un second temps nous avons voulu observer linfluence de la puissance microondes. Pour cela, nous avons fait varier cette dernire de 50 400 Watt tout en ayant fix le dbit de vapeur 25 g. min-1. Daprs les rsultats obtenus (figure III.4) nous pouvons tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 constater quen augmentant la puissance micro-ondes, la cintique dextraction devient plus rapide. En effet, laugmentation de la puissance de 50 400 Watt fait passer le temps dextraction de 20 3 min avec des rendements comparables en huile essentielle. C ependant cette dmarche peut provoquer laltration de la qualit de lhuile essentielle obtenue. Par consquent, il convient de trouver un compromis entre la productivit, la rapidit et la qualit des huiles essentielles obtenues par MSDf.

Rendement (%)
5
Pw1 = 50 W

4,5 4 3,5

Pw2 = 100 W Pw3 = 200 W Pw4 = 300 W Pw5 = 400 W

Yield (%)

3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 0 1 2 3 4 Time (min) 5 6 7 8

Temps (min)

Figure III.4. Influence de la puissance micro-ondes sur la cintique dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande.
90

Nous avons suivi la mme dmarche que prcdemment et modlis la cintique dextraction de lhuile essentielle de lavande par MSDf. La figure III.5 illustre les valeurs de la constante de vitesse et du temps infini dextraction en faisant varier la puissance microondes, le tout avec un dbit de vapeur de 25 g. min-1.

5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5

K (min-1), t (min)

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

1 0,5 0 0 100 200 300 Pw (watt) 400 500

Figure III.5. Constante cintique k () et temps t () dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande par MSDf en fonction de la puissance micro-ondes. De mme, nous constatons qu partir de 200 Watt la constante de vitesse se stabilise tout en assurant un rendement dextraction optimal en un minimum de temps (3min). III.2.2. Cintique dextraction Dans les conditions optimales que nous avons pu dterminer laide des expriences prcdentes (25 g. min-1, 200 Watt), nous avons suivi la cintique dextraction de lhuile essentielle des fleurs de lavande par MSDf et nous lavons compar celle obtenue par SDf. La Figure III.6 ci-dessous illustre lvolution du rendement en lhuile essentielle pour les deux techniques. Daprs les rsultats obtenus nous pouvons constater que lopration dextraction de lhuile essentielle des fleurs de lavande par MSDf a permis dobtenir le meilleur temps dextraction avec des rendements comparables ceux obtenus par SDf (Tableau III.3).

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5
4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 0

Rendement (%)

10

15

20

25

30

temps d'extraction(min)

Figure III.6. Cintique dextraction des huiles essentielles des fleurs de lavande obtenue par MSDf () et SDf (). Tableau III.3. Dtails des paramtres de lextraction des fleurs de lavande par MSDf et SDf. Paramtre Masse de la matire vgtale (g) Puissance micro-ondes (Watt) Rendement (%) Temps dextraction (min) MSDf 30 200 4,42 3 SDf 30 0 4,43 20

Les cintiques dextraction de lhuile essentielle de fleurs de lavande, par MSDf et SDf montre un comportement lgrement diffrent. En effet, avec le procd SDf, on a enregistr une cintique semblable celle obtenue avec les oranges : - Une premire partie assez rapide (t < 5 min) durant laquelle on extrait les huiles essentielles superficielles. - La deuxime partie moins rapide (5min < t < 15 min) et correspondante lextraction des huiles essentielles situes au cur de la matire vegetale. - La troisime partie (t > 15 min) o le rendement reste invariable. Alors que avec MSDf on enregistre pratiquement que deux tapes :

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- Une vitesse dextraction constante (t < 3 min) jusqu atteindre un palier de 4,42% en huile
essentielle. Ceci veut dire que les huiles essentielles, situes aussi bien la surface quau cur de la plante, ont t rcupres avec la mme vitesse. Ce rsultat est attribu aux effets des micro-ondes.

- la deuxieme partie (t > 3 min) o le rendement reste constant. Nous avons ainsi pu constater que lun des avantages de lextraction par MSDf est incontestablement le gain de temps et donc par consquent lconomie dnergie.

III.2.3. Composition chimique Le Tableau III.4 regroupe la composition chimique de lhuile essentielle de fleurs de lavande extraites par les deux mthodes : MSDf et SDf. Lhuile essentielle rcupre lissu de lutilisation des deux procds a t analyse par chromatographie en phase gazeuse couple un spectromtre de masse (GC/MS). Les conditions exprimentales utilises sont tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 dcrites dans le chapitre 2. Lhuile essentielle de fleurs de lavande, quelle soit extraite par MSDf ou par SDf est constitue par un nombre de composs aromatiques identiques (40 composs). Le linalol et lactate de linalyle sont les composs majoritaires des huiles essentielles de lavande quelle que soit la mthode dextraction. En effet, le linalol est prsent 27.1% par MSDf et 28.88% par SDf, cependant lactate de linalyle est prsent 21% par MSDf et 33.48% par SDf. Lhuile essentielle de lavande obtenu par MSDf est plus riche en composs hydrocarbons tel que le limonne (4.4% par MSDf et 1.2% par SDf), leucalyptol (4.9% par MSDf et 2% par SDf), l-pinne (0.32% par MSDf et 0.083% par SDf), le pinne (0.53% par MSDf et 0.138% par SDf) et le -myrcne (0.347% par MSDf et 0.02% par SDf). La fraction oxygne, est galement plus importante dans le cas de lhuile essentielle obtenue par MSDf. Elle est, principalement compose de linalol, de camphre (8.152% par MSDf et 2.5% par SDf), de berneol (6.225% par MSDf et 2.12% par SDf) et de terpinen-4-ol (7.47% par MSDf et 2.71% par SDf). Les composs sesquiterpniniques sont beaucoup plus prsents dans le cas de lhuile essentielle extraite par SDf : caryophyllene (1.84% par MSDf et 2.29% par SDf), (Z)--farnesene (2.65% par MSDf et 3.63% par SDf) et germacrene D (1.37% par MSDf et 1.7% par SDf). Les composs sesquiterpniniques oxygns sont galement prsents avec une teneur notable dans le cas de lhuile essentielle extraite par SDf savoir l-bisabolo (2. 31% par MSDf et 7% par SDf). Lanalyse de ces rsultats montre que lhuile essentielle obtenue par MSDf est plus riche en composs oxygns alors que celle obtenue par SDf est plus riche en composs sesquiterpniniques et sesquiterpniniques oxygns.

93

Tableau III.4. Composition de l'huile essentielle des fleurs de lavande obtenue par MSDf et SDf. N Composs Monoterpnes -Thujene -Pinne Camphene Sabinene -Pinne -Myrcene - Phellandrene p-Cymene Limonene Eucalyptol Cis--ocimene -Terpinene Monoterpnes Oxygns Terpinolene Oxyde de inalol Linalol Camphor Lavendulol Borneol Terpinen-4-ol -Terpineol Actate de geranyl Sesquiterpnes Caryophyllene (Z)--Farnesene Germacrene D Linalyl isovalerate -Farnesene -Cadinene Sesquiterpnes Oxygns -Sesquiphellandrene Oxyde de caryophyllene -Cadinol -Bisabolo Autres Composs Oxygns 3-Octanone Terpenol(154) Propanoic acid, 2-methyl, hexyl ester Butanoic acid, hexyl ester Butanoic acid, 2-methyl-, hexyl ester Butanoic acid, 3-methyl-, hexyl ester Acetate de linalyl Cyclobutanecarboxylic acid, hexyl ester Unknown diol
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RI

MSDf (%) 0.094 0.32 0.24 0.08 0.53 0.347 0.034 0.058 4.40 4.9 0.14 0.11 0.2 0.47 27.1 8.152 1.1 6.22 7.47 0.49 0.56 1.84 2.65 1.37 0.67 0.15 0.29 0.27 0.43 0.56 2.31 0.2 2. 0.3 1.21 0.3 0.37 21.36 0.56 0.35

SDf (%) 0.01 0.083 0.04 0.032 0.138 0.02 0.13 0.048 1.2 2 0.12 0.06 0.11 0.08 28.88 2.5 0.33 2.12 2.71 0.45 4.25 2.29 3.63 1.7 1.18 0.28 0.45 0.42 1.44 2.49 7 0.06 0.29 0.22 1.1 0.33 0.36 33.38 0.7 0.097

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40

937 937 955 976 971 990 1010 1030 1034 1038 1049 1063 1091 1093 1104 1160 1170 1184 1191 1204 1287 1435 1457 1497 1505 1509 1528 1534 1601 1695 1700 987 1076 1149 1193 1283 1245 1252 1334 1337

III.2.4. Analyse de la morphologie des calices des fleurs de lavande Dans le but dune meilleure comprhension des phnomnes dextraction et afin dobserver le comportement des cellules scrtrices de la fleur de lavande, plusieurs photographies par microscopie lectronique balayage ont t ralises. Cette tude a permis dobserver ltat des cellules avant extraction (figure III.7 a), aprs extraction par MSDf (figure III.7 b) et aprs extraction par SDf (figure III.7 c). Lanalyse de la microscopie lectronique balayage de la lavande avant traitement (figure III.7 a), nous a permis dobserver que les calices des fleurs de lavande prsentent une succession rgulire de ctes et de sillons abritant les structures productrices des huiles essentielles. Ces calices tubulaires apparaissent stris de sillons longitudinaux. Les cellules scrtrices sont regroupes dans les creux des sillons, un pais feutrage de poils protecteurs "les trichomes tecteurs'' recouvre les ctes. Ces glandes pidermiques, de tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 forme sphrique, constituent autant de petites usines de production d'huiles essentielles. Leur activit se traduit par la synthse de tous les constituants des huiles essentielles, puis, ultrieurement, par leur stockage. Sans activit scrtrice proprement parler, ces trichomes tecteurs ramifis, forms de plusieurs bras, participent l'quilibre hydrique de la plante - et notamment du calice - car ils ralentissent l'vaporation et protgent les formations productrices des essences.

a
Poils

Cellules scrtrices

Figure III.7.a. La structure des fleurs de lavande observe au microscope lectronique balayage avant extraction.
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En observant les calices des fleurs de lavande extraites par MSDf (figure III.7 b), nous pouvons constater la disparition et la destruction de lalignement des poils scrteurs. La figure III.7 b montre des cellules trs endommages en raison de lexplosion produite au niveau de la paroi cellulaire, consquence de laugmentation soudaine de la temprature. En effet, quand les glandes sont sujettes un stress thermique trs svre et de hautes pressions localises induites par un chauffage spcifique de type micro-ondes, la pression interne dans les glandes peut excder leur capacit dexpansion extrme.

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Cellules scrtrices vides

Figure III.7.b. La structure des fleurs de lavande observe au microscope lectronique balayage aprs extraction par MSDf. Par ailleurs, la micrographie de lextraction des fleurs de lavande par SDf (figure III.7 c) montre que les parois cellulaires sont galement endommages. En effet sur les figures III.7 c nous pouvons observer que pour chaque glande, la poche contenant les essences, se retrouve vide de son contenu et ne fait que "s'effondrer'' sur les cellules de la tte glandulaire, sans se dchirer. Cela peut sexpliquer par le fait que le stress thermique se produit progressivement et de mme la pression interne dans les glandes peut excder leur capacit dexpansion extrme progressivement. Ainsi ces trichomes ont t plutt vids de leur contenu cause de la longue dure de lextraction.

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Cellules scrtrices vides

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Figure III.7.c. La structure des fleurs de lavande observe au microscope lectronique balayage aprs extraction par SDf. En conclusion, les deux mthodes dextractions utilises produisent des changements distincts sur les surfaces foliaires des fleurs de lavande. Les changements rvls sur la micrographie des fleurs de lavande extraites pendent 3 minutes par MSDf sont plus spectaculaires ; En effet, les parois cellulaires sont plus endommages et ceci nous permet dexpliquer la rapidit de lextraction sous micro-ondes. Ces rsultats confirment le mcanisme dexplosion propos par Par et Blanger, produit au niveau de la paroi cellulaire, et en accord avec ceux obtenues par Iriti et coll et Sahraoui et coll [45, 75, 107, 108].

III.2.5. Modlisation des donnes cintiques Dans le but de mieux comprendre les phnomnes mis en jeux lors de lextraction de lhuile essentielle de lavande par MSDf, nous avons procd galement de la modlisation des mcanismes de transfert de matire de la phase solide vers la phase liquide. Nous avons ralis la mme approche, qui nous permet lestimation approximative de lordre de grandeur du coefficient global de transfert de matire lors de lextraction des fleurs de lavande par le procd MSDf (voir chapitre 2). Nous avons utilis les mmes hypothses simplificatrices que prcdemment sauf quil tait impossible de considrer l'huile essentielle de lavande comme tant un solut unique. Le tableau III.2 montre que lhuile essentielle de lavande est compose, quelque soit la mthode
97

dextraction (MSDf et SDf) dune grande varit de constituants dont le linalol et lactate de linalyle sont les composs majoritaires. Par consquent, la tension de vapeur P 0 a t prise gale la somme de la fraction de ces deux composs majoritaires. Nous avons calcul les valeurs des coefficients de transfert de matire globale (K) et de paramtre de proportionnalit () pour les deux techniques (MSDf et SDf) dans les conditions optimales qui ont t dtermines (200 W et 25g.m-1). Le tableau III.5 montre que le coefficient de transfert de matire globale (K) obtenu par MSDf est six fois plus grand que celui obtenu par SDf. Le paramtre de proportionnalit (), qui est un coefficient proportionnel la fraction dhuile essentielle de lavande dans la matire vgtale en quilibre avec la phase vapeur, est aussi plus important dans le cas de lextraction par MSDf que par SDf. Tableau III.5. Rsultat de transfert de Masse. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

MSDf K (g.m-2. min-1) (bar-1) 32,23 0,387

SDf 6,375 0,187

Ces rsultats sont en accord avec ceux obtenues lors de ltude de la cintique dextraction (figure III.6). Les donnes exprimentales obtenues durant la cintique dextraction, sont aussi converties en taux d'extraction N (g HE extrait min1m2). La figure III.8 illustre le taux dextraction N en fonction de la fraction massique en huiles essentielles obtenu par MSDf et SDf. La figure III.8 montre que la vitesse d'extraction de l'huile essentielle de lavande obtenue par MSDf est clairement plus rapide que celle obtenu par SDf et confirme aussi les rsultats obtenus lors de ltude de la cintique dextraction (figure III.6). De mme pour les deux techniques (MSDf et SDf), le taux dextraction de lhuile essentielle de lavande seffectue en deux tapes avec deux pentes diffrentes. - Une premire partie (AB) correspond une grande pente qui suggre que l'huile essentielle est facilement accessible par la vapeur et implique une augmentation rapide en rendement (environ 94%). C'est la phase d'extraction de l'huile essentielle. - La deuxime partie correspond une pente moins grande et reprsente une huile essentielle plus difficile extraire ou plutt en moins grande quantit. Cest la phase durant laquelle le rendement en huile essentielle atteint un plateau.

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Figure III.8. Taux dextraction en fonction de la fraction massique en huiles essentielles obtenue par MSDf () et SDf (). Ces rsultats sont en accord avec ceux obtenues lors de ltude de la cintique dextraction et confirme ceux obtenues par lanalyse de la microscopie lectronique balayage des glandes renfermant lhuile essentielle de lavande.

III.2.6. Cot, nergie et impact environnemental Comme le montre le tableau III.6 le procd MSDf apparat plus conomique et cologique en terme dnergie requise, de la quantit dmission de dioxyde de carbone dans latmosphre, et de la quantit des eaux uses. En effet, lextraction par MSDf permet

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lobtention dune huile essentielle de lavande de haute qualit avec des rendements similaires ceux obtenus par SDf, en rduisant le temps dextraction. Tableau III.6. Le procd MSDf vs. le procd SDf pour lextraction de lhuile essentielle de lavande.

SDf Temps dextraction (min) Rendement dextraction (%) Impact environnemental (Kg CO2 rejet. Kg Consommation dnergie (KWh. Kg -1 HE) Les eaux uses (litre. Kg -1 HE) tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010
-1

MSDf 3 4.42 69 86 62

20 4.43 HE) 338 424 413

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Chapitre 4

Diffusion a sec gnre par micro-ondes (MDG): Nouvelles perspectives pour lextraction des huiles essentielles*
tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Rsum Un nouveau procd dextraction de lhuile essentielle partir de matrices aromatiques sches, a t dvelopp, nomm: diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG). Ce procd repose sur une extraction cologique des huiles essentielles de carvi par microondes sans ajout deau ou de solvant organique, suivie dune rcupration des huiles dsirs par simple coulement de lintrieur vers lextrieur laide de la gravit. Le MDG apparat comme une procdure dextraction douce permettant de raliser des conomies nergtiques et la diminution des rejets de CO2 dans latmosphre.

* Une partie des travaux relats dans ce chapitre a fait lobjet dune publication accepte A surprising method for green extraction of essential oil from caraway seeds: Microwave Dry-diffusion and Gravity A. Farhat, A-S. Fabiano-Tixier, M. Romdhane, F. Chemat Journal of Chromatography A

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IV.1. Partie exprimentale IV.1.1. Le carvi IV.1.1.1. Description Le carvi (Carum carvi L) est une plante originaire du Moyen Orient. Elle appartient la famille des Umbellifres, de la sous classe des Apiaces. Elle est communment cultive en Europe depuis le moyen ge principalement pour son utilisation en tant qupice. Elle est bisannuelle de 50 75 cm de haut. Ses feuilles sont finement dcoupes et ses fleurs de couleur blanche sont disposes en ombelles. La graine de carvi est petite, allonge et de couleur brune. Elle ressemble aux graines de cumin do son surnom de cousin du cumin . Sa saveur est dlicate et son odeur est proche de celle de lanis [121]. IV.1.1.2. Composition chimique et structure morphologique de la graine du carvi tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Le carvi est constitu par le fruit sec, dissoci en ses mricarpes de Carum carvi L. Ces mricarpes sont spars du fruit par battage, aprs schage. Ils ont une longueur de 3 6 mm, d'une paisseur d'environ 1 1,5 mm et sont de forme lgrement arque, aplati la commissure et anguleux l'extrieur. Sur toute leur longueur, se dtachent 5 ctes de couleur jaune ple ocre, la couleur de la surface entre les ctes tant brune [121]. Dun point de vue chimique, la graine de carvi est constitue principalement deau (11-16%), de sucre (19-25%), de fibres (17-22%), dazote libre (4-5%), dhuile (8-30%), dhuile essentielle (3-7%) et de strine (0.5%). Du point de vue pharmacologique, les substances les plus intressantes dans la graine sont les huiles essentielles, qui possdent une odeur spciale et agrable. Elles sont stockes dans des structures scrtrices comme le montre la figure IV.1.
a b

Figure IV.1. (a) Localisation des structures scrtrices dans la graine de carvi (b) Coupe transversale dune graine jeune (1 : cellules endospermes, 2 : funicules, 3 : poche dhuile valleculaire, 4 : poche dhuile carinale) [121].
102

Nous remarquons, sur cette figure, que la localisation des structures scrtrices est lintrieur de lespace intercellulaire (scrtion endogne). Ces structures scrtrices sont situes au niveau des fosses et des crtes du schizocarpe. Le nombre de cellules les composant diminue aussi au long de la maturation [121]. Le constituant majeur de lhuile essentielle de la graine de carvi, est le S(+)-carvone, connu aussi sous le nom de d-carvone, rsultant probablement de loxydation allylique de R(+)-limonne avec lintermdiaire de carvol. Le monoterpne R(+)-limonne accompagne la carvone dans lhuile volatile des graines de carvi, avec un rapport entre les deux principaux composs variant de 3 pour 2 jusqu 3 pour 1, dpendant de la varit de la plante et des conditions de stockage.

IV.1.1.3. Utilisation des grains de carvi tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Les graines de carvi sont trs utilises en agroalimentaire, comme assaisonnement, pour amliorer, prserver ou augmenter les qualits organoleptiques des plats. Le carvi est utilis comme une pice majeur, le got et lodeur quil confre aux aliments sont dus aux composs qui constituent son huile essentielle. Les graines de carvi sont galement utilises en mdecine humaine et vtrinaire comme un remde pour soigner le dsordre intestinal [122, 123]. Lhuile essentielle de carvi est trs utilise dans les parfums, les dentifrices, les mousses raser, les crmes, les lotions Elle est connue aussi pour ses proprits antibactriennes et antifongiques [122,123]. En effet lhuile essentielle de carvi est utilise en agroalimentaire comme conservateur permettant de substituer dautres conservateurs chimiques et dobtenir des mets plus sains. Elle est aussi utilise en agriculture pour rguler la germination des pommes de terre et pour prvenir les attaques fongiques lors du stockage de ces pommes de terre [124].

IV.1.2. Analyse par Chromatographie en phase Gazeuse (CG) et Chromatographie en phase Gazeuse couple la Spectromtrie de Masse (CG/SM) Les huiles essentielles rcupres par les diffrents procds on t analyses par chromatographie en phase gazeuse seule sur un appareil de marque Hewlett Packard 6890 et par couplage de celle-ci la spectromtrie de masse (appareil Hewlett Packard 5973A). Deux colonnes capillaires, lune polaire (Stabilwax) et lautre apolaire (HP5 MS), ont t utilises (Tableau IV.1 et 2).

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Tableau IV.1. Conditions opratoires des analyses en chromatographie en phase gazeuse.

Paramtres Colonne capillaire Longueur diamtre interne paisseur de phase Temprature du dtecteur (FID) Gaz vecteur Dbit Temprature de linjecteur tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 HP5 MS 30 m 0,25 mm 0,25 m 320C Azote 0,3 ml 250C 2C/min de 60C 280C Programmation du four 8 min 60C 15 min 280C Concentration des chantillons Quantit injecte Mode dinjection pur 1 L Split 1 :20 Stabilwax 60 m 0,25 mm 0,25 m 320C Azote 0,3 ml 250C 2C/min de 60C 280C 8 min 60C 15 min 280C pur 1 L Split 1 :20

La prparation de la table des n-alcanes pour la mesure des indices de Kovats des composes identifis dans les huiles essentielles a t faite comme suit : Solution des nalcanes de C8 C26 (origine: Aldrich et Fluka Chemicals) 5% dans le pentane. Soit 0,1 g de chaque alcane dans 20 ml de pentane, conserv au rfrigrateur. Lidentification des composs a t effectue par comparaison de leurs indices de rtention (indices de Kovats) et des spectres de masse ions-fragments caractristiques obtenus exprimentalement ceux cits dans la littrature [99] et/ou inventoris dans les banques de librairies spectrales (Wiley7, Nist 2002).

104

Tableau IV.2. Conditions opratoires des analyses en CG/SM.

Paramtres Mode de dtection: Impact lectronique Courant dionisation Colonne capillaire Longueur diamtre interne paisseur de phase Gaz vecteur Dbit Pression en tte de colonne tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Pression (source, analyseur) Temprature dinterface Temprature de linjecteur 10-7 mbar 280C 250C 2C/min de 60C 280C Programmation du four 8 min 60C 15 min 280C Concentration des chantillons Quantit injecte Mode dinjection pur 1 L Split 1 :20 10-7 mbar 280C 250C 2C/min de 60C 280C 8 min 60C 15 min 280C pur 1 L Split 1 :20 70 eV HP5 MS 30 m 0,25 mm 0,25 m Hlium 0,7 ml 70 eV Stabilwax 60 m 0,25 mm 0,25 m Hlium 0,3 ml

IV.1.3. La Microscopie Electronique Balayage Les chantillons vgtaux, recueillis aprs lextraction de lhuile essentielle par chauffage micro-ondes et par chauffage traditionnel ont t analyss par Microscopie Electronique Balayage au laboratoire de microscopie de lINRA PACA, site de St Maurice Montfavet. Aprs avoir t prlevs avec prcaution, les chantillons ont t lyophiliss afin dliminer toute trace deau afin de conserver le vgtal en tat en vue des analyses MEB futures. Les chantillons ont t mtalliss par une fine couche dor avant dtre observs en microscopie lectronique balayage sur un microscope XL 30 (Philips FEI) sous les conditions opratoires suivantes : sous vide dair ; tension dacclration 15 KV ; taille du spot : 5 ; distance de travail 15 mm.

105

IV.1.4. Conduite de lhydrodistillation (HD) Lextraction de lhuile essentielle de carvi par hydrodistillation (HD) a t ralise par un appareil de Clevenger pression atmosphrique. Le schma du montage utilis est prsent dans la Figure VI.2. La charge de matire vgtale traite, la dure de lhydrodistillation, ainsi que la quantit deau utiliser sont les paramtres qui ont t optimiss au fil des expriences. En gnral, 200 grammes de carvi sec sont introduits dans un ballon, accompagns de 1 litre deau distille, puis chauffs pendant 3 heures aprs obtention de la premire goutte dhuile essentielle. Grce au systme de cohobation la quantit deau au sein du ballon est quasiment la mme tout au long de la distillation. Lhuile essentielle obtenue est spare de leau par simple dcantation. Aucun solvant organique nest utilis au cours de ce protocole. Lhuile essentielle est au pralable place sur desschant de type sulfate de magnsium tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 (MgSO4), afin dliminer toute trace ventuelle deau, puis est pese afin de calculer le rendement de lextraction par rapport la masse de matriel vgtal frais. Trois expriences ont t effectues pour chaque plante. Les huiles essentielles sont conserves au rfrigrateur labri de la lumire et une temprature de 4C.

Figure IV.2. Montage de lhydrodistillation (HD).

106

IV.1.5. Conception de la diffusion a sec gnre par micro-ondes (MDG) Les lments de base ncessaires aux extractions de lhuile essentielle de carvi par MDG sont les suivants: - un racteur batch dans lequel est uniquement place la matire vgtale sche traiter, - un support en tflon, inerte aux micro-ondes, qui permet de positionner la matire vgtale dans le racteur, - un systme de condensation des vapeurs, - un essencier o est recueillie lhuile essentielle. Ces lments constituent le montage de base du prototype auquel doit tre ajout un four microonde muni de deux orifices, une sur sa face suprieure et lautre sur sa face inferieure. Diffrents racteurs, systmes de condensation de vapeurs ont t utiliss et tests dans le but de proposer un systme permettant la ralisation dextractions simples et efficaces. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 La verrerie dexprimentation se compose dun racteur en verre de type pyrex adapt aux microondes et contenant le matriel vgtal solide extraire. Ce dernier est plac sur un support en Tflon poreux transparent aux micro-ondes. Lappareillage est muni dun tube dextraction en verre plac au dessous du racteur et dun rfrigrant. Le four micro-ondes, quip dune camera, est muni dune ouverture sur sa face inferieure permettant au tube dextraction de stendre de part et dautre du four micro-ondes, depuis lintrieur de la cavit vers lextrieur. Ce tube dextraction assure la liaison avec la partie du montage situe lextrieur de la cavit du four o se trouve le systme de refroidissement, qui est muni dune canule passant lintrieur de ses spires permettant un refroidissement rapide et complet, dun rfrigrant double enveloppe, et de lessencier o est recueillie lhuile essentielle. La temprature, le temps et la puissance sont contrls et enregistrs. Le dispositif adopt pour les oprations dextraction est illustr et prsent sur la figure IV. 3.

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Ecran camera

Output

Four micro-ondes Fibre optic Matriel vgtal Sonde Infra rouge Camera Support Racteur

--------------------

Systme de rfrigration

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Huile essentielle Phase aqueuse Vase florentin // / / / / / /

Figure IV.3. Prototype approuv et reprsentation schmatique de la diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG). La procdure dextraction peut tre divise en plusieurs tapes: - Le matriel vgtal est plac dans un racteur lintrieur du four micro-ondes, sans addition deau ou de solvant. - Lapplication des rayonnements magntiques, produit par le four micro-ondes, provoquent lclatement des cellules contenant les huiles essentielles qui se dtendent provoquant la rupture et la dislocation des glandes et poches contenant les huiles essentielles. Lhuile essentielles est ainsi libre et peut tre transfre de lintrieur de la plante vers lextrieur. - Ainsi lhuile essentielle est recueillie dans le systme de refroidissement puis dirige vers le vase florentin. Par simple dcantation, lhuile essentielle est collecte puis sche sur sulfate de sodium et stocke 4C. Les graines de carvi, utiliss lors de lextraction par MSDf ou SDf, sont fournies par l'Herbier du Diois F-26410 Chtillon-en-Diois en France. Les conditions opratoires utilises lors de lextraction par MSDf et SDf sont regroupes dans le tableau II.3. Pour les

108

deux procds (MSDf et SDf), le rendement en huile essentielle est estim par le rapport des masses dhuiles essentielles et de la matire vgtale. Il est exprim en pour cent (%). Tableau II.3. Conditions opratoires utilises lors de lextraction par MSDf et SDf. Pourcentage dhumidit (%) 7,75

Espce botanique

Masse vgtale sche (g)

Carvi (Carum carvi L.)

200

IV.2. Rsultats et discussions IV.2.1. Optimisation Dans le but doptimiser lapplication du procd de diffusion sec gnre par microtel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 ondes (MDG) lextraction de lhuile essentielle des graines de carvi, nous avons procd lvaluation de linfluence de la puissance du micro-ondes (Pw) sur le procd. Pour cela, nous avons fait varier cette dernire de 50 200 Watt. Daprs les rsultats obtenus (figure IV.4) nous pouvons constater quen augmentant la puissance des micro-ondes, lextraction de lhuile essentielle de carvi devient plus rapide. En effet, partir de lapplication dune puissance gale 100 Watt le temps dextraction devient stable (45 min) avec des rendements comparables en huile essentielle. (2,54% par HD et 2,59% par MDG)
Temps d'extraction (min) 200

150

100

50

0 0 50 100 150 200 250

Puissance Micro-onde (Watt)

Figure IV.4. Influence de la puissance micro-ondes sur le temps dextraction des huiles essentielles de carvi.
109

Ainsi, 100 Watt est la puissance optimum pour lextraction de lhuile essentielle de carvi par MDG, puisqu partir de cette valeur le temps dextraction est minimal tout en assurant un rendement dextraction optimum. Par consquent, nous avons adopt cette puissance, qui nous permet dobtenir le meilleur rendement dextraction en un minimum de temps (45min). IV.2.2. Cintique dextraction Nous avons suivi la cintique dextraction de lhuile essentielle des graines de carvi obtenu par le procd MDG ainsi que celle obtenu par hydrodistillation (HD). La figure V.5 illustre lvolution du rendement en lhuile essentielle pour les deux techniques. Daprs les rsultats obtenus nous pouvons constater que lopration dextraction par MDG permet lobtention dhuiles essentielles avec des rendements similaires ceux obtenus par HD (2,59% tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 par MDG et 2,54% par HD). Ces rsultats sont dautant plus intressants que le temps dextraction par MDG ne dpasse pas 45 minutes alors que la mthode conventionnelle HD ncessite un temps dextraction de lordre de 300 minutes. Nous avons ainsi pu constater que lun des avantages de lextraction par MDG est incontestablement le gain de temps et donc par consquent lconomie dnergie.

110

-----------------------------------------------------

---------------------------

2,5

Rendement (%)

1,5

0,5

A
0 0

20

40

60

Temps (min)

80

II
tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

--------------------------

--------------------------

--------------------------

2,5

Rendement (%)

1,5

0,5

0
0

100

200

300

400

500

Temps (min)

Figure IV.5. Cintique dextraction des huiles essentielles de carvi obtenue par MDG (I) et HD (II). On distingue, quatre phases dans lanalyse des courbes de la cintique dextraction de lhuile essentielle des graines de carvi, par MDG et HD. Dans le cas de lextraction par MDG les quatre tapes sont dcrites comme suit (figure IV.5I) : - Phase (A) relative au chauffage de la matire vgtale et correspondant la monte en temprature au sein du racteur, tape durant laquelle aucune extraction dhuile essentielle ne se produit. - Phase (B) correspond une initiation reprsentant le dbut dextraction de lhuile essentielle de carvi (environ 13%).

111

- Phase (C) correspond une droite croissante reprsentant une augmentation rapide en rendement (environ 96%). - Phase (D) reprsente le temps partir du quel le rendement en huile essentielle atteint un plateau. Le profil de la cintique dextraction par HD (Figure IV.5II) montre galement lexistence de quatre phase mais diffrentes celles dcrites par MDG. En effet, la premire partie (phase A) aussi relative au chauffage de la matrice vgtale correspond la monte en temprature au sein du racteur, tape durant laquelle aucune extraction dhuile essentielle ne se produit. La seconde phase correspond une droite reprsentant une extraction plus ou moins rapide de lhuile essentielle (environ 70 %). Au cours de la troisime phase la courbe tend vers une droite croissante, qui correspond environ 94.5% du rendement. Enfin au cours de la dernire phase la courbe tend vers un palier, qui correspond au rendement maximum tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 susceptible dtre atteint. Nous constatons que la phase de chauffage est beaucoup plus courte pour lextraction par MDG que pour lhydrodistillation. Lextraction par MDG est plus rapide puisquau bout de 45 minutes nous nobservons plus dextrait.

IV.2.3. Composition chimique Les rsultats de lidentification des constituants des huiles essentielles de carvi extraites par MDG et HD sont prsents dans le Tableau IV.4. Les analyses par chromatographie en phase gazeuse (CPG) et couples la spectromtrie de masse ont t effectues laide dune colonne capillaire polaire (Stabilwax). Quelle que soit la mthode dextraction, lhuile essentielle des graines de carvi est constitue par un nombre de composs aromatiques identiques (18 composs). Le limonne et le carvone sont incontestablement les deux composs majoritaires des huiles essentielles de carvi, quelle soit extraite par MDG ou par HD. En effet, le limonne est prsent 30.10% dans lextrait ralis par MDG et 30.30% pour celui en HD. Les chantillons prsentent une teneur en carvone de 67.59% pour le procd MDG et 66.89% pour le procd HD. Les autres composs sont prsents avec une teneur relativement faible savoir le myrcne (0,16% en MDG et 0,15% en HD), le dihydrocarvone (0,22% en MDG et 0,20% en HD), le carveol (0,28% en MDG et 0,25% en HD) et le (E)--Caryophellene (0,20% en MDG et 0,20% en HD). Lensemble de ces rsultats montre que la composition chimique de lhuile essentielle des graines de carvi, obtenue par MDG ou HD, est constitue par les mmes composs
112

aromatiques dans des proportions identiques. Par consquent, nous pouvons constater que lapplication des rayonnements magntiques, produit par le four micro-ondes ne provoque pas la dgradation des composs chimiques constituant lhuile essentielle.

Tableau IV.4. Composition de l'huile essentielle des graines de carvi obtenue par MDG et HD.

Composs Monoterpnes -Pinene Sabinene 3-Octanone Myrcene p-Cymene Limonene (E)--Ocimene -Terpinene Monoterpnes Oxygns

R.I

HD 30.59

MDG 30.68 0.01 0.02 0.20 0.16 0.04 30.10 0.08 0.07 68.67 0.12 0.07 0.15 0.08 0.22 0.28 67.59 0.08 0.08 0.20 0.20 68.67 30.88

1 2 3 4 tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 5 6 7 8

1023 1121 1253 1165 1268 1206 1282 1285

0.02 0.01 0.02 0.15 0.03 30.30 0.02 0.04 67.64

9 10 11 12 13 14 15 16 17

Linalool (Z)-p-2,8-menthadien-1-ol Oxyde de (Z)-Limonene Oxyde de (E)-Limonene Dihydrocarvone Carveol Carvone Piperitone Perillaldehyde Sesquiterpnes (E)--Caryophellene Composs Oxygns Totaux (%) Composs non Oxygns Totaux (%)

1538 1670 1449 1458 1560 1850 1723 1680 1783

0.07 0.07 0.12 0.07 0.20 0.25 66.89 0.08 0.05 0.20

18

1594

0.20 67.64 30.79

113

IV.2.4. Effet de la technique dextraction sur la morphologie de la gaine de carvi Pour une meilleure comprhension de lextraction de lhuile essentielle de carvi par micro-ondes, des fragments de graines de carvi ont t prlevs aprs extraction par MDG et HD, et ont t observs par microscopie lectronique balayage et compars des fragments de graines non traits (Figure IV.6). Le protocole exprimental de la microscopie lectronique balayage est dtaill dans le chapitre 3.

(a)

(b)

(c)

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

Figure IV.6. La structure des graines de carvi observe au Microscope Electronique Balayage (a) non traite ; (b) traite par HD (300 min) ; (c) traite par MDG (45 min). Lanalyse de la microscopie lectronique balayage de la graine de carvi avant traitement (Figure IV.6 a) nous a permis dobserver que lhuile essentielle est emmagasine dans des cellules scrtrices lintrieur de lespace intercellulaire.
114

La figure IV.6 b et c illustre les changements observs sur la micrographie des graines qui ont subi lextraction par HD et par MDG. Dans le cas de lextraction par MDG, on peut observer des cellules brises en raison de lexplosion produite au niveau de la paroi cellulaire. En effet, quand les glandes sont sujettes un stress thermique trs svre et de hautes pressions localises induites par un chauffage spcifique de type micro-ondes, la pression interne dans les glandes peut excder leur capacit dexpansion extrme. En consquence, une rupture plus rapide survient par rapport celle ralise par chauffage traditionnel. Par contre, la micrographie de lextraction par HD signale que les parois cellulaires sont galement endommages en raison de la longue dure dextraction (300 min). Les deux procds dextractions utiliss produisent des changements diffrents sur la structure de la graine de carvi. Les changements rvls sur la micrographie des graines de carvi extraites par MDG tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 aprs 45 minutes d'extraction sont plus spectaculaires. En effet, lors dune extraction assiste sous micro-ondes, les glandes scrtrices se sont exploses. Cette explosion va permettre une extraction plus rapide puisque le contenu de la glande est directement libr. Ceci permet dexpliquer les diffrences de cintiques observes prcdemment (figure IV.5) et de confirmer le mcanisme dexplosion propos par Par et Blanger, produit au niveau de la paroi cellulaire. Aussi ces rsultats sont en accords avec ceux obtenues par Chemat et coll lors de lextraction des graines de carvi assiste par micro-ondes en prsence dhexane [125].

IV.2.5. Effet de la temprature Dans le but de mieux comprendre la rapidit de lextraction par MDG en comparaison celle de HD, la cintique dvolution de la temprature a t tudie, comme le montre la figure IV.7. Dans le cas de lextraction de lhuile essentielle de carvi par MDG, la temprature augmente au fur et mesure pour atteindre la temprature dbullition de leau (100C), on observe ainsi lextraction de la premire gouttelette d'huile essentielle. Cette temprature continue augmenter jusqu' 150C avec une vitesse de chauffage diffrente. partir du moment o le rendement en huile essentielle atteint un plateau, c'est--dire, quil ny a plus dhuile essentielle extraire, cette temprature augmente rapidement de150C 200C. Cependant, dans le cas de lextraction de lhuile essentielle de carvi par HD la cintique dvolution de la temprature seffectue en deux tapes. La premire tape est reprsente par une droite croissante jusqu' lobtention dune temprature sensiblement gale la temprature dbullition de leau (100 C), on observe ainsi lextraction de la premire gouttelette d'huile essentielle. Durant la seconde tape, la temprature d'extraction se traduit
115

par un palier de temprature situ au niveau de la temprature dbullition de l'eau la pression atmosphrique (100C).

250

---------------------------------------------------------

-----------------------------

200

Temperature (C)

150

100

50

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

10

20

30

40

50

60

70

80

II

120

Temps (min) 1

---------------------------50

100

Temperature (C)

80

60

40

20

100

150

200

250

300

350

Temps (min)

Figure IV.7. Profile de la temprature au cours de lextraction de lhuile essentielle de carvi par MDG (I) et HD (II). IV.2.6. Mcanisme de lextraction par MDG Les informations recueillies suite ltude cintique, morphologique et leffet de lvolution de la temprature durant lextraction de lhuile essentielle de carvi, peuvent expliquer la rapidit dextraction par MDG en comparaison celle de la technique HD; mais elles ne peuvent expliquer ni prvoir le mcanisme dextraction de lhuile essentielle de carvi par MDG. La question qui se pose ici : est ce que le chauffage de leau contenue dans les graines de carvi permet la rupture des glandes renfermant lhuile essentielle et par la suite tre responsable de ce type dextraction ou non ? Pour rpondre cette question nous avons procd aux deux expriences suivantes :
116

Exprience n 1 : Extraction par MDG des graines de carvi sch avec 7,75% dhumidit (prsence de leau in situ). Exprience n 2 : Extraction par MDG des graines de carvi sch dans ltuve 60C (absence de leau in situ).

La figure IV.8 illustre lvolution du rendement en huile essentielle des graines de carvi extraites par MDG, dans les conditions optimales, pour les deux types dexpriences.
3

2,5

Rendement (%)

1,5

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

0,5

0 0 10 20 30 40 50 60 70 80

Temps (min)

Figure IV.8. Profil de la temprature au cours de lextraction par MDG de lhuile essentielle de carvi sch labri de soleil () et sch dans ltuve 60C (). Les rsultats obtenus montrent que le comportement des deux courbes dextraction est similaire pour le deux types dexpriences. Cependant, lexprience n 1 permet lobtention dhuiles essentielles avec un rendement plus important que celui obtenu dans lexprience n 2 (2,59% pour lexprience n 1 et 2,04% pour lexprience n 2). En effet, labsence de leau dans les graines de carvi permet dextraire seulement environ 80% du rendement total en huile essentielle. Daprs ces rsultats nous pouvons constater que le mcanisme dextraction de lhuile essentielle des graines de carvi par MDG se fait en deux phases : - La premire phase : le chauffage de leau contenu dans les graines de carvi sous les radiations micro-ondes permet la rupture des glandes scrtrices renfermant lhuile essentielle et par la suite la diffusion des premires gouttes de lhuile essentielle lieu.

117

- La deuxime phase : comme la quantit de leau contenue dans les graines de carvi est limite (7,75%), les radiations micro-ondes commence chauffer les molcules polarisables dhuiles essentielles et donc provoque sa diffusion de lintrieur vers lextrieur.

IV.2.7. Cot, nergie et impact environnemental La diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG) est prsente comme tant une technique dextraction cologique rapide et adapte lextraction de lhuile essentielle partir dune matrice vgtale sche. La rduction du cot dextraction par MDG est mise en vidence en termes dnergie, des eaux uses et du temps requis. Lexamen du Tableau IV.5 rappelle le temps ncessaire la ralisation dune extraction par la mthode conventionnelle lhydrodistillation (300 min) alors que la technique dveloppe requiert seulement 45 min de tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 chauffage par micro-ondes. Tableau IV.5. Le procd MDG vs. le procd HD pour lextraction de lhuile essentielle de carvi.

HD Temps dextraction (min) Rendement dextraction (%) Impact environnemental (Kg CO2 rejet. kg -1 HE) Consommation dnergie (KWh. kg -1 HE) 300 2.54 130 163

MDG 45 2.59 82 102

La consommation nergtique de lextraction conventionnelle (HD) est de 163 kWh.kg-1 dhuile essentielle alors que lextraction assiste par micro-ondes ne ncessite que 102 kWh.kg-1 dhuile essentielle. Les essais ont t raliss laide dun Wattmtre lentre du systme de chauffage pour lextraction conventionnelle et lentre du four micro-ondes pour lextraction assiste par micro-ondes. Ceci se rpercute directement sur limpact environnemental du procd. Alors que le procd dextraction par MDG ne dgage que 82 Kg de CO2. Kg
-1

dhuile essentielle dans latmosphre, le procd conventionnel en rejette

-1

environ 130 Kg de CO2. Kg

dhuile essentielle. Ceci a t calcul selon la rgle suivante:

pour obtenir un kWh dlectricit, il faut brler soit du gaz naturel, soit du ptrole ou du charbon, et il en rsulte un dgagement de 800 g de CO2.

118

Conclusion gnrale
Dans le cadre de ce travail, nous avons tudi la ralisation, loptimisation et lapplication dun nouveau systme dextraction des huiles essentielles la Vapo-diffusion assist par micro-ondes (MSDf) . Cette nouvelle mthode a t compare la technique conventionnelle de Vapo-diffusion classique (SDf). Plusieurs tapes ont permis de parvenir llaboration et la validation de ce nouveau procd dextraction assist par micro-ondes. Dans un premier temps, les travaux ont permis de tester et dajuster le prototype dextraction. Ainsi, ce procd a t appliqu dans lextraction de lhuile essentielle dun tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 coproduit: les peaux doranges. La Vapo-diffusion assist par micro-ondes (MSDf) a t tudie, selon la mthodologie des plans dexpriences dans le but dvaluer limpact des variables sur lextraction et de dfinir les paramtres optimums dextraction. Alors que la mthode traditionnelle dextraction requiert 40 minutes, les conditions par micro-ondes optimises nous ont permis de raliser lextraction de lhuile essentielle doranges en seulement 12 minutes. Les deux mthodes permettent dobtenir des rsultats quantitativement (rendement en huile essentielle) et qualitativement (composition chimique) quivalents. Au niveau cellulaire, les deux mthodes dextractions utilises produisent des changements distincts sur la morphologie des peaux doranges extraites. Dans le cas du MSDf, les parois cellulaires sont plus endommages permettant dexpliquer la rapidit de lextraction sous micro-ondes. Dans le but de mieux comprendre les phnomnes mis en jeu lors de lextraction des huiles essentielles doranges par MSDf, nous avons dtermin un coefficient de transfert de matire globale. Les rsultats obtenus montrent que le celui-ci est trois fois plus grand lorsquil est obtenu par MSDf que par SDf.

Dans un second temps, et dans le but de gnraliser ce nouveau procd, nous avons tudi lapplication du procd MSDf lextraction dune matrice aromatique sche : les fleurs de lavande. Les conditions opratoires de lextraction de lhuile essentielle de lavande ont t optimises. Lhuile essentielle extraite par MSDf est identique, en terme de rendement et de composition, avec celle obtenue par la mthode conventionnelle SDf. De mme lextraction de lhuile essentielle de lavande par MSDf est plus rapide (3minutes) que celle par SDf (20 minutes). Le coefficient de transfert de matire globale pour lextraction de lhuile essentielle de lavande par MSDf est six fois plus grand que celui obtenu par SDf.
119

Ainsi, nous avons constat que lun des avantages de lextraction de lhuile essentielle doranges et de lavande par MSDf est incontestablement le gain de temps et donc par consquent lconomie dnergie. Cette acclration des rendements dextraction est du une combinaison synergique des deux phnomnes de transport : gradients de masse et de chaleur. En effet, dans le cas de lextraction par SDf, le transfert de masse se produit de l'intrieur vers l'extrieur tandis que le transfert de chaleur se produit de l'extrieur vers l'intrieur. Pour l'extraction par MSDf, les deux phnomnes de transport sont dans la mme direction de l'intrieur vers l'extrieur. Le procd MSDf prsente de nombreux avantages pour lobtention dhuile essentielle de qualit comparable celle obtenue par la mthode conventionnelle (SDf). La rapidit dextraction, la spcificit du chauffage micro-ondes, lconomie dnergie, la simplicit de mise en uvre sont les principaux atouts de lextraction par MSDf. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Dans un dernier temps, nous avons tudi une nouvelle approche pour lextraction des huiles essentielles partir de matrices aromatiques sches et sans utilisation ni de vapeur ni deau: Diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG). Le procd MDG a t appliqu et optimis, pour lextraction de lhuile essentielle des graines de carvi. Lextraction par MDG esr plus rapide (45 minutes) compare celle ralise par lhydrodistillation (300 minutes). Les deux mthodes permettent dobtenir des rsultats quantitativement (rendement en huile essentielle) et qualitativement (composition chimique) similaires. Ainsi, le MDG apparat comme une procdure dextraction douce permettant de raliser des conomies dnergie et de diminuer les rejets de CO2 dans latmosphre.

Il serait important dexploiter les rsultats obtenus lchelle laboratoire pour les transfrer lchelle pilote et industrielle. En effet, lindustrialisation de ce nouveau procd propre dextraction des huiles essentielles doit rpondre aux critres de lindustrie de la parfumerie et de la cosmtique. Il faudrait complter ce travail, par une tude technico-conomique comportant la faisabilit de transformer les alambics existants en incluant les micro-ondes ou bien de construire des alambics micro-ondes avec une tude complmentaire sur le cout, la rentabilit, limpact cologique et la qualit des huiles essentielles.

120

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130

Liste des figures

Figure I.1. Spectre lectromagntique. Figure I.2. Distribution des diples sous leffet dans un champ lectrique. a: absence de champ lectrique, b: sous champ lectrique continu, c: sous champ lectrique alternatif. Figure I.3. Transfert de chaleur sous chauffage classique et sous chauffage par micro-onde. Figure I.4. Localisation des structures scrtrices pour quelques plantes aromatiques. Figure I.5. Extraction par entranement la vapeur de leau. Figure I.6. Extraction par hydrodistillation. tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Figure I.7. Schma du montage de lexpression froid. Figure I.8. Entrainement lair assist par micro-ondes. Figure I.9. Hydrodistillation par micro-ondes sous vide puls. Figure I.10. Evolution des principaux paramtres du procd VMHD en fonction du temps. Figure I.11. Hydrodistillation assiste par micro-ondes. Figure I.12. Extraction sans solvant assiste par micro-ondes. Figure I.13. Extraction sans solvant amliore assiste par micro-ondes. Figure I.14. Hydrodiffusion assist par micro-ondes et gravit. Figure I.15. Entrainement la vapeur assist sous micro-ondes. Figure I.16. Vapo-diffusion assiste par micro-ondes (MSDf). Figure I.17. Diffrentes tapes du processus de transfert de matire lors de lextraction dhuiles essentielles. Figure I.18. Schma du processus de transfert de matire et de chaleur lors de lextraction dhuiles essentielles par chauffage conventionnel et par micro-ondes. Figure II.1. Schma dtaillant la structure du pricarpe dorange. Figure II.2. Schma dtaillant la structure du pricarpe dorange. Figure II.3. Montage de la vapo-diffusion (SDf). Figure II.4. Reprsentation schmatique de la vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf). Figure II.5. Diagramme de Pareto prsentant linfluence standardise de chaque effet. Figure II.6. Surfaces de rponses du dbit de vapeur deau et de la puissance micro-ondes obtenues pour le temps dextraction.
131

Figure II.7. Cintique dextraction des huiles essentielles des peaux doranges obtenue par MSDf () et SDf (). Figure II.8. La structure des peaux doranges non traite. GC= cavit de glande, E = piderme, and IP = cellules intrieures de parenchyme Bars = 25 m (a), 15 m (b), 18 m (c) Figure II.9. La structure des peaux doranges traite par MSDf (a, b) et par SDf (c). GC= cavit de glande, E = piderme, and IP = cellules intrieures de parenchyme Bars = 25 m (a), 15 m (b), 18 m (c) Figure II.10. Profile de la temprature au cours de lextraction de lhuile essentielle de lorange par MSDf () et SDf (). Figure II.11. Taux dextraction en fonction de la fraction massique en huiles essentielles obtenue par MSDf () et SDf (). tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 Figure II.12. Schma du mcanisme dextraction dhuile essentielle dorange par MSDf. Figure II.13. Transfert de chaleur sous chauffage classique et sous chauffage par micro-onde. Figure III.1. Glande scrtrice charge d'huile essentielle dune fleur de lavande. Figure III.2. Influence du dbit de vapeur sur la cintique dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande. Figure III.3. Constante cintique k () et temps t () dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande par MSDf fonction de dbit de vapeur. Figure III.4. Influence de la puissance micro-ondes sur la cintique dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande. Figure III.5. Constante cintique k () et temps t () dextraction des huiles essentielles de fleurs de lavande par MSDf en fonction de la puissance micro-ondes. Figure III.6. Cintique dextraction des huiles essentielles des fleurs de lavande obtenue par MSDf () et SDf (). Figure III.7.a. La structure des fleurs de lavande observe au microscope lectronique balayage avant extraction. Figure III.7.b. La structure des fleurs de lavande observe au microscope lectronique balayage aprs extraction par MSDf. Figure III.7.c. La structure des fleurs de lavande observe au microscope lectronique balayage aprs extraction par SDf. Figure III.8. Taux dextraction en fonction de la fraction massique en huiles essentielles obtenue par MSDf () et SDf (). Figure IV.1. (a) Localisation des structures scrtrices dans la graine de carvi
132

(b) coupe transversale dune graine jeune (1 : cellules endospermes, 2 : funicules, 3 : poche dhuile valleculaire, 4 : poche dhuile carinale). Figure IV.2. Montage de lhydrodistillation (HD). Figure IV.3. Prototype approuv et reprsentation schmatique de la diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG). Figure IV.4. Influence de la puissance micro-ondes sur le temps dextraction des huiles essentielles de carvi. Figure IV.5. Cintique dextraction des huiles essentielles de carvi obtenue par MDG (I) et HD (II). Figure IV.6. La structure des graines de carvi observe au Microscope Electronique Balayage (a) non traite ; (b) traite par HD (300 min) ; (c) traite par MDG (45 min). Figure IV.7. Profile de la temprature au cours de lextraction de lhuile essentielle de carvi tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 par MDG (I) et HD (II). Figure IV.8. Profil de la temprature au cours de lextraction par MDG de lhuile essentielle de carvi sch labri de soleil () et sch dans ltuve 60C ().

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Liste des tableaux

Tableau I.1 Facteur de dissipation pour diffrentes produits. Tableau I.2. Diffrents types de molcules dans lhuile essentielle. Tableau I.3. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par Lhydrodistillation assiste par micro-ondes (MAHD). Tableau I.4. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par lextraction sans solvant assiste par micro-ondes SFME. Tableau I.5. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par lextraction sans solvant amliore assiste par micro-ondes (Improved SFME). Tableau I.6. Recensement des plantes soumises une extraction des huiles essentielles par tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 lhydrodiffusion assiste par micro-ondes et gravit (MHG). Tableau I.7. Recensement des plantes soumises une extraction par micro-ondes par diffrentes mthodes. Tableau II.1. Conditions opratoires des analyses en chromatographie en phase gazeuse. Tableau II.2. Expriences ralises dans le plan exprimental et rponses obtenues. Tableau II.2. Conditions opratoires des analyses en CG/SM. Tableau II.3. Conditions opratoires utilises lors de lextraction par MSDf et SDf. Tableau II.4. Domaine de variation dans le plan dexpriences. Tableau II.5. Expriences ralises dans le plan exprimental et rponses obtenues. Tableau II.6. Effets estims des coefficients. Tableau II.7. Rsum de lanalyse de la variance du modle statistique. Tableau II.8. Composition de l'huile essentielle des peaux doranges obtenue par MSDf et SDf. Tableau II.9. Rsultat de transfert de Masse. Tableau II.10. Le procd MSDf vs. le procd SDf pour lextraction de lhuile essentielle doranges. Tableau III.1. Conditions opratoires des analyses en chromatographie en phase gazeuse. Tableau III.2. Conditions opratoires des analyses en CG/SM. Tableau III. 3. Dtails des paramtres de lextraction des fleurs de lavande par MSDf et SDf. Tableau III.4. Composition de l'huile essentielle des fleurs de lavande obtenue par MSDf et SDf. Tableau III.5. Rsultat de transfert de Masse.
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Tableau III.6. Le procd MSDf vs. le procd SDf pour lextraction de lhuile essentielle de lavande. Tableau IV.1. Conditions opratoires des analyses en chromatographie en phase gazeuse. Tableau IV.2. Conditions opratoires des analyses en CG/SM. Tableau II.3. Conditions opratoires utilises lors de lextraction par MSDf et SDf. Tableau IV.4. Composition de l'huile essentielle des graines de carvi obtenue par MDG et HD. Tableau IV.5. Le procd MDG vs. le procd HD pour lextraction de lhuile essentielle de carvi.

tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010

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Rsum
Un nouveau procd dextraction des huiles essentielles a t dvelopp, mis au point et optimis nomm Vapo-diffusion Assiste par Micro-ondes (MSDf) . Le procd MSDf t appliqu lextraction des huiles essentielles des peaux doranges et de fleurs de lavande. Ce procd est bas sur la combinaison dune technique dextraction classique : lhydrodiffusion et le chauffage micro-ondes comme technologie dintensification. Une deuxime nouvelle approche pour lextraction des huiles essentielles partir de matrices aromatiques sches et sans ajout de vapeur ni deau nomm Diffusion sec gnre par micro-ondes (MDG) . Le procd MDG t appliqu lextraction des huiles essentielles des graines de carvi. Le MSDf et le MDG apparaissent comme des procdures douce permettant un gain tel-00547809, version 1 - 17 Dec 2010 de temps et d'nergie considrable et la diminution des rejets de CO2 dans latmosphre. Mots-cls : Extraction, Micro-ondes, Procd vert, Huile essentielle, Chimie et procd durables.

Abstract
Microwave steam diffusion (MSDf) was developed as a cleaner and new process design and operation for isolation of essentials oils and was compared to conventional steam diffusion (SDf). This green process has been applied and tested using two aromatic matrixes: fresh orange peels and dry lavender flowers. This process is based on the combination of a traditional technique of extraction: hydro-diffusion and the microwave irradiation energy. Without adding any steam or water, we proposed also a novel and green approach for extraction of secondary metabolites from dried plant materials. This steam and water free approach based on a simple principle involves the application of microwave irradiation and earth gravity to extract the essential oil from dried caraway seeds. MSDf and MDG were better than SDf in terms of energy saving, cleanliness and reduced waste water.

Keywords: Extraction, Microwaves, Green process, Essential oil, Green chemistry and processing.
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