1

Lp 14 Proteine

PROTEINELE PLASMATICE
Proteinele serice totale valori normale: 6,5 8 g/dl
Proteinele serice sunt reprezentate de albumina si globuline sintetizate in cea mai mare parte de ficat cu excepia gamma globulinelor sintetizate de plasmocite. Plasma conine in plus pe langa proteinele serice si fibrinogen. Valorile sub normal poarta numele de hipoproteinemie iar cele peste normal poarta numele de hiperproteinemie. Hipoproteinemia sau hiperproteinemia poate fi : relativa datorita variaiei volumului plasmatic (cantitatea efectiva de proteine e normala, se modifica doar concentraia acestora in volumul plasmatic modificat) : hiperhidratare, deshidratare. absoluta (se modifica cantitatea efectiva de proteine ): Hipoproteinemie absoluta - deficit de aport: malnutriie, malabsorbtie - deficit de sinteza: congenital/ dobndit: insuficiena hepatica - pierderi (mai ales albumine): renale (sd. nefrotic); digestive (enteropatii exudative); cutanate (arsuri plasmexodie). Hiperproteinemii absolute : creterea sintezei proteice, de obicei in alte sedii dect ficatul; se sintetizeaz mai ales imunoglobuline in exces: - in sindroamele inflamatorii cronice - gamapatii monoclonale maligne(mielom multiplu, macroglobulinemie Waldestrom etc.) Funciile proteinelor plasmatice: - meninerea presiunii coloid-osmotice a plasmei - in special datorita albuminelor - aprarea imunologica Ig, complement - transportori de metale, hormoni,vitamine, lipide, metabolii,medicamente etc. - implicarea in echilibrul fluido-coagulant (factorii coagulrii, factorii fibrinolizei, reglatorii) - funcii enzimatice (ex.LCAT = lizolecitin-colesterol-acil-transferaza colesteril ester pt. sinteza HDL colest.) - meninerea echilibrului acido-bazic (proteinele fac parte din sistemele tampon) - rezerva de proteine

Electroforeza proteinelor serice

Definiie: Migrarea proteinelor serice (electro negative) intr-un cmp electric spre anod (electro pozitiv), in mediu slab alcalin (gel de agaroza) si separarea lor in funcie de masa moleculara si incarcarea electrica in 5 grupe /benzi de electroforeza (ulterior se pot estima si cantitativ, dup aplicarea unor colorani, prin densitometrie) Raportul normal albumine/globuline: 1,2 1,5 albumine 55-65% 3.55.5 g/dl 1-globuline 4 6% 0.10.3 g/dl 1 anti tripsina, 1 fetoproteina, 1 seromucoid acid, transcortin 2-globuline 6 9% 0.61.0 g/dl 2 macroglobulina, haptoglobina, ceruloplasmina, 2 anti plasmina , antitrombina III -globuline 9 12% 0.71.4 g/dl transferina, proteina C reactiva = CRP, transcobalamina, complement C3, beta lipoproteine -globuline 12 20% 0.71.6 g/dl Ig G dar si Ig A, M, D, E (uneori in banda beta-gamma) DISPROTEINEMIE = modificarea rapoartelor intre fraciile proteice; e asociata/nu cu modificarea valorii proteinelor serice totale; modificarea se face pe seama scderii (inversrii) raportului albumine/globuline.

Exemple de proteine plasmatice( in funcie de migrarea imunoelectroforetica) :

Albumina serica valori normale: 3,5-5,5 g/dl (55-65% din totalul proteinelor serice) greutate moleculara 69 Kda; sintetizata hepatic; producie zilnica 10-12 g; cantitate totala de albumine in organism 250 g - din care 60% in lichidul interstiial si 40% in plasma; funcii: menine 80% din presiunea coloid-osmotice a plasmei, transport, rezerva proteica; Hipoalbuminemie (sub 3.5 g/dl): deficit de aport: malnutriie, malabsorbtie

2
deficitul de sinteza hepatica: congenital - analbuminemie congenitala sau dobndit : ciroza severa cu insuficienta hepatica; caexie; boli infecioase cronice); pierderi: renale (sd. nefrotic); digestive (enteropatii exudative); cutanate (arsuri - plasmexodie). Hiperalbuminemie - rara, de obicei relativa prin scderea volumului plasmatic (deshidratare).

1. Alfa1 globulinele
Sunt reprezentate in proporie de aproape 90% de alfa 1 antitripsina, restul de 10% fiind reprezentat de alfa1 seromucoid acid, alfa 1 fetoproteina, si anumite proteine transportoare ca transcortin (cortisol binding protein). Alfa 1 globulinele cresc in inflamatiile acute dar si in timpul sarcinii sau dup administrare de estrogeni. Valori sczute (absenta) se nregistreaz in deficitul congenital e alfa1 antitripsina. a) Alfa 1 antitripsina - concentraie serica 200-400 mg/dl; glicoproteina sintetizata in ficat; greutate moleculara 50-54 KDa; rol: antiproteaza = inhiba enzime proteolitice: tripsina, chemotripsina, plasmina; transportor de bilirubina; aparine proteinelor de faza acuta valori sczute: deficit de sinteza hepatica(congenitala - asociata cu emfizem pulmonar juvenil, sau dobndita insuficienta hepatica), pierderi ( sindrom nefrotic); valori crescute in : reaciile inflamatorii acute b) Alfa 1 seromucoid acid - concentraie serica 55-140 mg/dl; glicoproteina sintetizata in ficat; greutate moleculara 44 KDa (traverseaz fiziologic membrana glomerulara); rol: eliminarea detritusurilor celulare, transport de glucocorticoizi, vit. B12; aparine proteinelor de faza acuta valori sczute : malnutriie, deficit de sinteza hepatica, pierderi (sindrom nefrotic). valori crescute: rspuns inflamator acut, sarcina, administrare de estrogeni; c) Alfa 1 fetoproteina - concentraie serica < 10 12 nanograme/ml prin metoda ELISA la normal este sintetizata de hepatocitele fatale avnd ca funcii in viaa intrauterina: meninerea presiunii coloid osmotice a plasmei (sinteza de albumina va debuta mai trziu), transport de hormoni, de activare a limfocitelor T supresor(scderea aciunii grefa contra gazda) valori crescute: afeciuni maligne (carcinoame hepato-celulare, metastaze hepatice ale altor cancere, carcinoame gastrice, teratoame etc.)- e folosita ca marker tumoral de urmrire si de prognostic al afeciunii ( nu de diagnostic) ; afeciuni non-maligne : in ciroza hepatica in perioada de regenerare (creterea AFP poate sugera malignizarea cirozei), in convalescenta dup o hepatita acuta *valori normal crescute ale concentraiei serice - in sarcina; poate fi folosita ca indicator de urmrire a sarcinii

2. Alfa2 globulinele
a) Haptoglobina - concentraie serica 100-150 mg/dl; greutate moleculara 75-85 KDa; glicoproteina sintetizata hepatic; rol: leag hemoglobina libera rezultata in urma hemolizei intravasculare, aparine proteinelor de faza acuta valori sczute: deficit de sinteza congenitala sau dobndita (hepatopatii severe), consum crescut = in hemoliza intravasculara (complexele haptoglobina-hemoglobina sunt captate si catabolizate la nivel hepatic de macrofagele sist. reticuloendotelial) valori crescute: in inflamaiile acute ; b) Ceruloplasmina - concentraie serica 50-150 mg/dl sintetizata hepatic; greutate moleculara 151 KDa; funcii: cupleaz si transporta cuprul (leag 8 atomi), capteaz si inactiveaz RLO (radicali liberi de oxigen) aparine proteinelor de faza acuta

3
valori crescute: in inflamaii acute, sarcina; valori sczute in deficit de sinteza (congenitala sau dobndita), pierderi (sindrom nefrotic), boala Wilson c) Alfa2 macroglobulina - concentraie serica 150-400 mg/dl greutatea moleculara 820 KDa; glicoproteina sintetizata hepatic; funcie de antiproteaza (inhiba plasmina, tripsina) aparine proteinelor de faza acuta valori crescute: in inflamaii acute, pierderi proteice-ex. sindrom nefrotic (se pierd proteine cu greutate molecula mica fiind stimulata sinteza hepatica de proteine; cele cu greutate molecula mai mica se pierd in continuare dar cele cu greutate moleculara mare ca Alfa2 macroglobulina nu trec prin filtrul renal alterat) ; valori sczute: in deficitul de sinteza hepatica. d) Alfa 2 antiplasmina inhibitor de plasmina; valori sczute: deficit de sinteza hepatica congenital/nu => sd. fibrinolitic primar si sd. hemoragipar e) Alfa 2 antitrombina (AT III) anticoagulant natural; inhiba trombina, Xa dar si IXa, XIa, XIIa

3. Beta globulinele
a) Transferina - concentraia serica 200-400 mg/dl; sintetizata hepatic avnd rolul de transportor de fier ( 1 molecula leag 2 atomi e fier); greutatea moleculara 90 KDa aparine proteinelor de faza acuta fiind consumata in focarul inflamator valori crescute: anemia feripriva ( e stimulata sinteza hepatica), sarcina; valori sczute: inflamaii, infecii, tumori maligne (datorita catabolismului crescut), pierderi renale (sindrom nefrotic), deficit de sinteza hepatica (ciroza hepatica) *In hemocromatoza (diabet bronzat) creste saturaia cu Fe a transferinei (CLLF) b) Fraciunea C3 a complementului - concentraie serica 50-150 mg/dl; valori crescute : neoplazii, infecii acute. valori sczute : consum crescut = glomerulonefrita poststreptococica, angioedem ereditar (deficit congenital de C1 inhibitor), AHAI, LES ; c) Proteina C reactiva (reacioneaz cu Ag C al pneumococului) - concentraie serica < 1 mg/dl sintetizata hepatic avnd rol de opsonina nespecifica: se leag de fosfocolina exprimata pe suprafaa celulelor moarte si pe anumite tipuri de bacterii cu scopul de a activa complementul pe calea clasica; aparine proteinelor de faza acuta valori crescute in inflamaii acute si cronice creste si scade rapid in funcie de severitatea procesului inflamator fiind utila in evaluarea eficacitii tratamentului.

4. Gamma globulinele (Imunoglobulinele)

Regiunea gamma este compusa predominant din IgG; IgA, M, D, E se gsesc mai degrab in jonciunea beta gamma. Valori normale: IgG: 7001500 mg/dl IgA: 70350 mg/dl IgM: 50300 mg/dl IgD: 0 -14 mg/dl IgE: 24430 g/L 75-80% 10-15% 5-10% <1% - Scderea unei clase sau a tuturor claselor de Ig :hipo/agammaglobulinemie care poate fi primara (congenitala) sau secundara in sindromul nefrotic, tratamente cortizonice/steroizi ndelungate, infecii severe. - Creterea unei singure clase sau a tuturor claselor de Ig: gammapatii sau gammaglobulinopatii gamapatii policlonale - creterea produciei a mai multor clase de Ig de obicei datorate expunerii ndelungate la antigene in concentraii nalte: in boli cu componenta inflamatorie cronica/ boli inflamatorii cronice ( boli de

4
colagen - LES, PR sau in hepatite cronice, ciroza hepatica)- datorita stimulrii antigenice de durata apare o proliferare reactiva a plasmocitelor si sinteza unor cantitati crescute de anticorpi. gamapatii monoclonale- produse de o clona de celule care prolifereaz in exces - caracterizate de o cretere focala/unica spikelike in aria gamma. a) Gamapatii monoclonale "benigne": existenta in plasma a unui Ig aparinnd unei singure clase sau existenta in urina a unui singur tip de lan uor ca produs al unei clone de plasmocit/limfocit B si care migreaz electroforetic omogen in zona gama, in absenta unui proces neoplazic al plasmocitelor sau limfocitelor B. idiopatice secundare asociate cu neoplazii altele dect cele ale plasmocitelor/limfocitelor B: leucemii, limfoame, cancer pulmonar, colorectal asociate cu boli nonneoplazice - LES, PR, ciroza ; boli infecioase cr. TBC, boala Paget a os, sarcoidoza, SIDA; * Majoritatea condiiilor nonneoplazice sunt asociate mai degrab cu gammapatii policlonale dect monoclonale. * Gammapatii monoclonale de semnificaie incerta (MGUS - monoclonal gammopathy of uncertain significance) cuprind att gammapatiile monoclonale idiopatice cat si cele secundate nonmaligne; pacienii cu MGUS pot dezvolta mielom multiplu, Waldestrom. b) Gamapatii monoclonale maligne: proliferarea maligna a unei clone de plasmocite/ limfocit B care va sintetiza in exces o singura clasa de Ig /sau un singur tip de lan uor / greu. Mielomul Multiplu = plasmocitom - proliferarea maligna a unei clone de plasmocite care invadeaz MOH si produce metastaze sistemice; sunt sintetizate nivele nalte de Ig care pot fi G sau A, +/- un tip de lan uor lambda sau kappa ; lanurile uoare se filtreaz glomerular si datorita cantitatii crescute e depita capacitatea de reabsorbtie tubulara => proteinurie prin mecanism prerenal = proteine Bence-Jones ; se pot evidenia printrun test de coagulabilitate la cldura (heat test) care evidetiaza precipitarea lor la nclzire la 60 grade C si resolubilizarea la 90 grade C. excesul de proteine plasmatice determina creterea vascozitatii sangvine; Macroglobulinemia Waldestrom: proliferare maligna a unei clone de limfocit B la nivel ganglionar si splenic caracterizata de sinteza de IgM monoclonale => adenopatii, splenomegalie, hipergammaglobulinemie (fara proteinurie prerenala), sindrom de hipervascozitate (microtromboze si microinfarctizari in diverse teritorii dispnee, afectri neurologice, de vedere) boala lanurilor grele ;

Fibrinogenul valori normale 200 400 mg/dl plasma

greutate moleculara 400 KDa, sintetizat hepatic ; migreaz in zona beta a electroforezei prot. plasmatice rol in coagulare (factorul I al coagulrii) proteina de faza acuta: contribuie la formarea reelei de fibrina care limiteaz focarul inflamator crescut in inflamaii acute si cronice, pierderi de proteine (sindrom nefrotic); sczut in deficit de sinteza ( congenital sau dobndit - ciroza) sau consum crescut (CID, sindrom fibrinolitic)

TIPURI DE DISPROTEINEMIE (patternuri electroforetice)

DISPROTEINEMIA DIN INFLAMAIA ACUTA (DE FAZA ACUTA) proteinele serice totale - normale scderea albuminei (sinteza inhibata de citokinele inflamatorii) - valorile absolute pot fi normale creterea alfa-1 si alfa-2 globulinelor (majoritatea sunt proteine de faza acuta) scderea raportului albumina /globuline creterea VSH creterea fibrinogen creterea proteina C-reactive apare in : fazele iniiale ale infeciilor acute, inflamaii acute: reumatisme inflamatorii cu debut acut, infarct miocardic, necroza tisulara, arsuri, chirurgie,

5
DISPROTEINEMIA DIN INFLAMAIA CRONICA proteinele serice totale normale sau uor crescute (sub 10 g / dl) scderea albuminei; creterea gamma-globulinelor, (polyclonal proliferation of plasma cells); scderea raportului albumina / globuline; creterea VSH creterea fibrinogen creterea proteinei C-reactive apare in : infecii cronice, inflamaii cronice (boli de colagen) *pot apare pusee de acutizare cu modificarea profilului electroforetic (tranziii reversibile intre paternul cronic si acut) DISPROTEINEMIA DIN SINDROMUL NEFROTIC proteinurie ( exista o proteinurie fiziologica < 100 mg/zi) proteinuria patologica poate fi de cauza glomerulara/tubulara/alte cauze (prerenala= prot. Bence-Jones) proteinuria patologica : selectiva = se pierd doar albumine : neselectiva = se pierd si globuline (evaluare prin electroforeza prot. urinare) modificarea funcionala (modif. incarcarii electrice) sau structurala a permselectivitatii glomerulare determinnd pierderi anormale de proteine in urina; proteinurie de rang nefrotic = > 3, 5 g/24 h se pierd in primul rnd albumine datorita masei moleculare mici dar se pot pierde si globuline: 1-globuline; transferina [se pierde si fier=> anemie (+ sintezei de eritropoietina)] si chiar Ig; NU se pierd: fibrinogen, 2 macroglobulina ( si in general 2-globuline), globuline (mai puin transferina) se perturba metabolismul lipoproteinelor => dislipidemie: cresc lipoproteinele (sinteza hepatica a acestora + li se altereaz catabolismul) care conin apoproteina B (din banda ) - VLDL, IDL, LDL - creste iniial colesterolul, ulterior si trigliceridele in ser; HDL N/ in formele cu pierderi severe de proteine scderea proteinelor serice totale < 4 g/dl; scderea marcata a albuminei (inclusiv in valori absolute) creterea importanta a alfa-2 (2 macroglobulina) pana la 40%; creterea beta-globulina pana la 20% +/- scderea alfa1 si gamma globulinelor scderea raportului albumina /globuline creterea fibrinogen; creterea VSH CRP normala scderea proteinelor plasmatice determina hepatocitele sa creasc producia de proteine; scderea albuminelor plasmatice/ presiunii oncotice ar stimula citirea genelorpentru albumine si unele globuline la nivel hepatic, dar sinteza crescuta de albumine nu e suficienta pentru a compensa pierderile.

DISPROTEINEMIA DIN GAMMAPATIILE MONOCLONALE (PARAPROTEINEMIE)

creterea proteinelor serice totale (>10 g / dl); scderea % albuminei (relative) pana la 30% ; in valori absolute poate fi normala creterea importanta a gamma globulinelor sub forma unui vrf unic subire (M protein / paraprotein) pana la 50%; scderea raportului albumina /globuline exista o clona maligna de celule care sintetizeaz un anumit tip de Ig: in MM - IgG/IgA/IgD; in macroglobulinemia Waldestrom IgM

***DISPROTEINEMIILE DIN AFECIUNILE HEPATICE - vor fi prezentate la evaluarea funciei hepatice