Cromatografia

Fundamentos, Instrumentao e Aplicaes

Martha Adaime
(UFSM)
Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
Departamento de Qumica
Programa de Ps Graduao em Qumica
Grupo de Pesquisa em Anlises Cromatogrficas
Programa
Fundamentos Gerais da Cromatografia
- Fundamentos e Classificao Geral
- Principais mecanismos de separao
- Principais Parmetros Cromatogrficos: t
R
, n, Rs, e relao entre eles
Cromatografia Gasosa (GC)
Fundamentos Tericos;
Instrumentao (Injetores, Colunas e Fases Estacionrias, Fase mvel, Detectores)
Aplicaes;
Estado da Arte e Tendncias.
Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC)
Fundamentos Tericos;
Modos de Separao: adsoro, partio, troca inica, excluso;
Instrumentao (Bombas, Injetores, Colunas e Fases Estacionrias, Fase mvel,
Principais Detectores);
Aplicaes;
Estado da Arte e Tendncias.
Cromatografia Acoplada Espectrometria de Massas
GC-MS/MS
LC-MS/MS
2
Por que usar CROMATOGRAFIA ? ? ?
3
HISTRICO
M. TSWEET (1903): Separao de misturas de
pigmentos vegetais em colunas recheadas com
adsorventes slidos e solventes variados.
ter de
petrleo
CaCO
3
mistura de
pigmentos
pigmentos
separados
Cromatografia =
kroma [cor] + graph [escrever]
(grego)
4
Princpio Bsico
Separao de misturas por interao diferencial dos seus
componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (lquido ou
slido) e uma FASE MVEL (lquido ou gs).
5
Classificao da Cromatografia
Cromatografia
Planar Coluna
FM Lquida
C.Camada
Delgada
C.Papel
FM Gasosa FM Lquida
C. Gasosa CLAE CCC
CCC-Cromatografia em Coluna Clssica.
CLAE-Cromatografia Lquida de Alta Eficincia.
6
Cromatgrafo a Gs
1
2
3
4
6
5
1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso.
2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra.
3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna.
4 - Detector.
5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal.
6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador).
7
Cromatgrafo a Lquido
8
Fase Estacionria
Slida - constituda por adsorventes slidos (p),
tais como Slica, Alumina, Carvo ativo, Zelitos
sintticos, etc.
A base para a separao, neste caso, a Adsoro.
Lquida - constituda por uma pelcula delgada (de
lquidos orgnicos de alto ponto de ebulio) que
impregnam o slido (p) inerte ou a parede interna
da coluna capilar.
A base para a separao, neste caso, a Partio
da amostra dentro ou fora da pelcula lquida, devido
a solubilidade seletiva dos compostos.
9
Fase Mvel
Gasosa - Na Cromatografia Gasosa a Fase Mvel o
prprio Gs de Arraste cuja funo transportar os
analitos atravs do Sistema (Injetor /Coluna
/Detector).
Os principais Gases de Arraste so o Hlio,
Nitrognio, Hidrognio e o Argnio.
Lquida Na Cromatografia Lquida emprega-se uma
mistura de solventes, denominada Eluente, como Fase
Mvel. Os principais so: metanol, acetonitrila e gua.
10
Mecanismos da Cromatografia
apolar
F
l
u
x
o
polar
polar
apolar
F
l
u
x
o
11
Mecanismos da Cromatografia
12
Mecanismos da Cromatografia
13
TEORIA BSICA
Constante de Distribuio, K
C
Ocorre um equilbrio de distribuio do
analito entre a FE e a FM.
| |
| |
M
S
C
A
A
K =
K
C
= Constante de Distribuio
[A]
S
= concentrao do analito na FE
[A]
M
= concentrao do analito na FM
MENOR RETENO !!!
Volatilidade
[A]
M
Afinidade pela FE
[A]
S
14
TEORIA BSICA
Quantificao da Eficincia
Cada estgio de equilbrio
chamado de PRATO TERICO
Coluna mais
eficiente
t
R
w
b
n
15
Nmero de pratos tericos (n)
n = 16 (t
R
/ w
b
)
2
n = segmento da coluna onde se atinge um equilbrio entre
fase mvel, estacionria e analito
quanto > n > rendimento da coluna (picos mais finos)
Injeo
t
R
16
Tempo de Reteno / Largura Pico
t
R
= tempo de reteno
t
o
= tempo de volume morto
w
b
= largura da base
Injeo
Tempo
t
R
17
Seletividade (o)
o = k
2
/k
1

o = posio relativa de 2 picos

Ideal: o > 1
Tempo
K
1
= 1.5 K
2
= 2.1
18
Resoluo (Rs)
Rs = 2 (t
R2
t
R1
)
2
/ w
b1 +
w
b2
Rs = separao real dos picos
Rs = 0 (sem separao),
Rs = 1 (separao parcial),
Rs = 1.5 (separao na linha base)
I njeo
W
W
t
Tempo
19
A migrao um analito pela
coluna provoca
inevitavelmente o
alargamento da sua banda.
TEMPO
Efeitos do alargamento excessivo de picos:
Separao deficiente de analitos
com retenes prximas
Picos mais largos e menos
intensos = menor detectabilidade
EFICINCIA: Capacidade de eluio com o mnimo de disperso do analito.
Eficincia de Sistemas Cromatogrficos
20
INTRODUO A
CROMATOGRAFIA GASOSA
Martha Adaime
Depto de Qumica-CCNE
UFSM
CROMATOGRAFIA GASOSA
Aplicabilidade
Quais misturas podem ser separadas por CG ?
Misturas cujos constituintes sejam
VOLTEIS (=evaporveis)
(para uma substncia qualquer poder ser
arrastada por um fluxo de um gs ela
deve ser dissolver - pelo menos parcialmente -
nesse gs)
DE FORMA GERAL:
CG aplicvel para separao e anlise de misturas cujos constituintes tenham
PONTOS DE EBULIO de at 300
o
C e que termicamente estveis.
22
O Cromatgrafo a Gs
1
2
3
4
6
5
1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso.
2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra.
3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna.
4 - Detector.
5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal.
6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador).
23
INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
Fase Mvel em CG: NO interage com a amostra - apenas a
carrega atravs da coluna. Assim usualmente referida como
GS DE ARRASTE
Requisitos:
INERTE No deve reagir com a amostra, fase estacionria ou
superfcies do instrumento.
PURO Deve ser isento de impurezas que possam degradar a
fase estacionria.
Impurezas tpicas em gases e seus efeitos:
oxida / hidroliza algumas FE
incompatveis com DCE
H
2
O, O
2
hidrocarbonetos
rudo no sinal de DIC 24
Curvas de Van Deemter para diferentes Gases de Arraste
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
Velocidade linear mdia (cm/seg) u
He
H
N
2
2
C at 175 C
k = 4.95
Vidro W.C.O.T.
OV.101
25m x 0.25 mm
17
H
E
T
P

(
m
m
)
10 20 30 40 50 60 70 80 90
25
FASE MVEL ou Gs de Arraste
Requisitos:
CUSTO Gases de altssima pureza podem ser muito caros.
COMPATVEL COM DETECTOR Cada detector demanda um
gs de arraste especfico para melhor funcionamento.
C
U
S
T
O
PUREZA
A
B
C
A = 99,995 % (4.5)
B = 99,999 % (5.0)
C = 99,9999 % (6.0)
26
LINHA DE GS
Componentes necessrios linha de gs:
controladores de vazo / presso de gs
dispositivos para purificao de gs (traps)
1
2
3
4
5
6
1 - Cilindro de Gs
2 - Regulador de Presso Primrio
3 - Traps para eliminar impurezas do gs
4 - Regulador de Presso Secundrio
5 - Regulador de Vazo (Controlador Diferencial de Fluxo)
6 - Medidor de Vazo (Rotmetro)
27
Dispositivos de Injeo de Amostra
Os dispositivos para injeo (INJETORES ou
VAPORIZADORES) devem prover meios de introduo
INSTANTNEA da amostra na coluna cromatogrfica
Injeo instantnea:
Injeo lenta:
t = 0
t = x
t = 0
t = x
28
Injeo Split (com Diviso)
Considerando a geometria dos injetores split-splitless, a razo de diviso
normalmente ajustada variando-se a vazo total de entrada de gs de arraste:
CONTROLE DE
VAZO TOTAL
Deve ser regulado
at o SR desejado
CONTROLE DE PRESSO
Altera presso vazo na
coluna (NO DEVE SER
MODIFICADA VISANDO
REGULAGEM DE SR !!!!!)
29
Injetor on-column Convencional
1
2
3
4
1 - Septo (silicone)
2 - Alimentao de gs de arraste)
3 - Bloco metlico aquecido
4 - Ponta da coluna cromatogrfica
30
Injeo on-column de lquidos
2 3
1 - Ponta da agulha da microseringa introduzida no incio da coluna.
2 - Amostra injetada e vaporizada instantneamente no incio da coluna.
3 - Plug de vapor de amostra forado pelo gs de arraste a fluir pela coluna.
1
31
Parmetros de Injeo
TEMPERATURA DO INJETOR Deve ser suficientemente elevada para que a
amostra vaporize-se imediatamente, mas sem decomposio
Regra Geral: T
inj
= 50
o
C acima da temperatura de
ebulio do componente menos voltil
VOLUME INJETADO Depende do tipo de coluna e do estado fsico da amostra
COLUNA
Amostras
Gasosas
Amostras
Lquidas
empacotada
C = 3,2 mm (
1
/
4
)
0,1 ml ... 50 mL 0,2 L ... 20 L
capilar
C = 0,25 mm
0,001 ml ... 0,1 mL 0,01 L ... 3 L
Slidos: convencionalmente se dissolve em um solvente
adequado e injeta-se a soluo
32
Microsseringas para Injeo
LQUIDOS Capacidades tpicas: 1, 5 e 10 L
mbolo
corpo (pirex)
agulha (inox 316)
Microseringa de 10 L:
Microseringa de 1 L (seo ampliada):
corpo
guia
mbolo (fio de ao
soldado ao guia)
agulha
33
Colunas: Definies Bsicas
EMPACOTADA
C = 3 a 6 mm
L = 0,5 m a 5 m
CAPILAR
C = 0,1 a 0,5 mm
L = 5 m a 100 m
34
INSTRUMENTAO
Colunas: Definies Bsicas
Coluna empacotada e capilar.
Empacotadas
analticas:
- Ao inoxidvel;
- 1 4 mm (d.i.)
- 1 3 m
Capilares:
- Slica fundida;
- Poliimida;
- s 0,32 mm (d.i.)
- 10 100 m
35
TEORIA BSICA
Quantificao da Eficincia
ALTURA EQUIVALENTE A UM PRATO TERICO (H) Tamanho de cada
estgio de equilbrio
Valores tpicos de H e N:
d
C
d
f
H N
0.10 0.25 0.081 370370
0.25 0.25 0.156 192308
0.32 0.32 0.200 150000
0.32 0.50 0.228 131579
0.32 1.00 0.294 102041
0.32 5.00 0.435 68966
0.53 1.00 0.426 70423
0.53 5.00 0.683 43924
2.16 10% 0.549 3643
2.16 5% 0.500 4000
Capilares, L = 30 m
Empacotadas, L = 2 m
Valores de H para colunas capilares e empacotadas so prximos, mas como
L para capilares MUITO maior tipicamente elas so mais eficientes
(L = comprimento da coluna)
36
Temperatura da Coluna
PRESSO DE VAPOR (p
0
).
p
0
= f
Estrutura qumica
do analito
Temperatura
da coluna
Temperatura
da
coluna
Presso
de
vapor
Velocidade
de
migrao
ANALITO ELUI MAIS RAPIDAMENTE
37
Temperatura da Coluna
T
E
M
P
E
R
A
T
U
R
A

D
A

C
O
L
U
N
A
38
Programao Linear de Temperatura
Misturas complexas (constituintes com volatilidades
muito diferentes) separadas ISOTERMICAMENTE:
T
COL
BAIXA:
T
COL
ALTA:
39
Programao Linear de Temperatura
A temperatura do forno pode ser variada linearmente durante a separao:
TEMPO
T
E
M
P
E
R
A
T
U
R
A
t
INI
t
FIM
T
INI
T
FIM
R
Parmetros de uma programao de temperatura:
40
Programao Linear de Temperatura
Possveis problemas associados PLT:
VARIAES DE VAZO DO GS DE ARRASTE A viscosidade
de um gs aumenta com a temperatura.
viscosidade vazo
DERIVA (DRIFT) NA LINHA DE BASE Devido ao aumento
de volatilizao de FE lquida
41
42
FASES ESTACIONRIAS
LQUIDOS Depositados sobre a superfcie de: s-lidos porosos inertes
(colunas empacotadas) ou de tubos finos de materiais inertes (colunas
capilares)
FE
lquida
SUPORTE
Slido inerte
poroso
Tubo capilar de
material inerte
Para minimizar a perda de FE lquida por volatilizao, normalmente
ela :
Entrecruzada Quimicamente ligadas
43
FASES ESTACIONRIAS
SELETIVA Deve interagir diferencialmente com os
componentes da amostra.
A FE deve ter caractersticas tanto quanto possvel prximas das
dos solutos a seremseparados (polar, apolar, aromtico ...)
FE Seletiva: separao
adequada dos
constituintes da
amostra
FE pouco Seletiva: m
resoluo mesmo com
coluna de boa eficincia
44
FASES ESTACIONRIAS
Substituintes Nomes Comerciais Observaes
- - SE-30 OV-1 OV-101 SP-2100 mais apolares da srie
pouco seletivas
carborano ? - Dexsil 300GC similar a PDMS
estvel at > 400
o
C
fenil 5 % - SE-52 SE-54 OV-3 OV-5
OV-73
pouco polar
cianopropil 7% fenil 7% OV-1701 SPB-7 CP-Sil 19CB moderadamente polar
fenil 50 % - OV-17 SP-2250 HP-50+
SPB-50
moderadamente polar
retm aromticos
trifluoropropil 50% - OV-210 QF-1 moderadamente polar
retm compostos carbonlicos
cianopropil 50% fenil 50% OV-225 SP-2300 CP-Sil
43CB
polar
retem doadores de eltrons
cianopropil 100% - SP-2340 SP-2330 Silar-9 CP altamente polar
Diferenas entre FE de composio similar provenientes
de fornecedores diferentes: pureza, viscosidade.
45
FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Separao de pesticidas - FE = 100 % PDMS
1 - TCNB
2 - Dichloram
3 - Lindano
4 - PCNB
5 - Pentacloroanilina
6 - Ronilano
7 - Antor
8 - pp-DDE
9 - Rovral
10 - Cypermetrin
11 - Decametrin
Coluna: CP-Sil 5 (25 m x 0,32 mm x 0,12 m)
T
COL
:195
o
C (6,5 min) / 195 a 275
o
C (10
o
C min
-1
)
Gs de Arraste: He @ 35 cm min
-1
Detector: FID
Amostra: 2 L de soluo dos pesticidas on-column
17 min
46
FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Separao de piridinas - FE = 100 % CNpropilsilicone
1 - piridina
2 - 2-metilpiridina
3 - 2,6-dimetilpiridina
4 - 2-etilpiridina
5 - 3-metilpiridina
6 - 4-metilpiridina
3 min
Coluna: CP-Sil 43CB (10 m x 0,10 mm x 0,2 m)
T
COL
: 110
o
C (isotrmico)
Gs de Arraste: N
2
at 16 cm min
-1
Detector: FID
Amostra: 0,1L de soluo 1-2% das piridinas em 3-metilpiridina
47
FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Separao de fenis - FE = fenilmetilsilicones
50% Ph
50% Me
5% Ph
95% Me
48
FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais
Separao de ismeros ticos:
FRMACOS Em muitos frmacos apenas um dos ismeros ticos tm
atividade farmacolgica.
PRODUTOS BIOLGICOS Distino entre produtos de origem
sinttica e natural (natural = normalmente substncias oticamente puras;
sinttico = muitas vezes so misturas racmicas).
Propriedades fsico-qumicas de ismeros ticos so MUITO SIMILARES
FE convencionais no interagem diferencialmente com ismeros ticos
Separao de misturas de ismeros ticos s possvel
com FE oticamente ativas = FE Quirais
49
ANLISE QUALITATIVA
Conceitos Gerais
Fontes de Informaes Qualitativas
RETENO Uso de dados de reteno de um analito para sua
identificao
DETECO Detectores que fornecem informaes estruturais sobre as
substncias eludas
Identificao individual das espcies
contidas na amostra
Determinao da identidade da amostra
propriamente dita
Aplicaes
Qualitativas de
CG
50
ANLISE QUALITATIVA
Tempos de Reteno
t
R
= f
Interaes analito / FE
Presso de vapor do analito
Condies operacionais (T
COL
, F
C
...)
Fixas as condies operacionais, o tempo de reteno ajustado de
um analito uma constante
AMOSTRA
PADRO
51
ANLISE QUALITATIVA
Tempos de Reteno
Identificao por t
R
muito pouco confivel:
Dependncia com F
C
e T
COL
Variaes nestas condies
afetam sensivelmente os t
R
VARIAO DE 1%
NO t
R
AT
COL
= 0,1%
AF
C
= 1%
Sobrecarga na coluna Aumento excessivo na massa de
material eluido deforma o pico cromatogrfico e altera o seu t
R
M
A
S
S
A
52
ANLISE QUALITATIVA
Tempos de Reteno
Comparao de t
R
usando dopagem (spiking) da amostra com
o analito suspeito: aumento da confiabilidade de identificao.
53
DETECTORES
Definies Gerais
Dispositivos que geram um sinal eltrico proporcional
quantidade eluida de um analito
~ 60 detectores j usados em CG
~ 15 equipam cromatgrafos comerciais
4 respondem pela maior parte das aplicaes
DCT TCD
Detector por
Condutividade
Trmica
DIC FID
Detector por
Ionizao em
Chama
DCE ECD
Detector por
Captura de
Eltrons
EM MS
Detector
Espectromtrico de
Massas
54
INSTRUMENTAO
Detectores
Mais Importantes:
DETECTOR POR CAPTURA DE ELTRONS (DCE OU ECD)
Supresso de corrente causada pela absoro de eltrons por eluatos
altamente eletroflicos.
DETECTOR POR CONDUTIVIDADE TRMICA (DCT OU TCD)
Variao da condutividade trmica do gs de arraste.
DETECTOR POR IONIZAO EM CHAMA (DIC OU FID) ons gerados
durante a queima dos eluatos em uma chama de H
2
+ ar.
REGISTRO
DE
SINAL
ANALGICO
Registradores XY
DIGITAL
Integradores
Computadores
55
DETECTORES
Detector por Condutividade Trmica
PRINCPIO Variao na condutividade trmica do gs quando da
eluio de um analito.
Cela de Deteco do DCT:
1
2
3
5
4
i
1 Bloco metlico (ao)
2 Entrada de gs de arraste
3 Sada de gs de arraste
4 Filamento metlico (liga W-Re) aquecido
5 Alimentao de corrente eltrica para
aquecimento do filamento
56
DCT: Aplicaes
Coluna: CP Sil 5CB
(50 m x 0,32 mm x 5 m)
Gs de Arraste: He, 3 ml min
-1
T
COL
: 40 C Detector: DCT
1 N
2
2 CH
4
3 CO
2
4 n-C
2
5 NH
3
6 n-C
3
7 i-C
4
8 n-C
4
Separao de Gases e Hidrocarbonetos:
57
Detector por Ionizao em Chama
O efluente da coluna misturado com H
2
e
O
2
e queimado. Como numa chama de H
2
+
O
2
no existem ons, ela no conduz
corrente eltrica.
Quando um composto orgnico elui, ele
tambm queimado. Como na sua queima
so formados ons, a chama passa a
conduzir corrente eltrica
58
Detector por Captura de Eletrons
Um fluxo contnuo de eletrons lentos
estabelecido entre um ando (fonte
radioativa
| -emissora) e um catodo.
Na passagem de uma substncia
eletroflica alguns eletrons so
absorvidos, resultando uma
supresso de corrente eltrica.
59
Caractersticas Operacionais do DCE
SENSIBILIDADE :QMD = 0,01 pg a 1 pg (organoclorados),
10 fg Lindano (C
6
H
6
)
-ECD HP-6890
PESTICIDAS
1 tetracloro-m-xileno
2 o - BHC
3 Lindano
4 Heptachlor
5 Endosulfan
6 Dieldrin
7 Endrin
8 DDD
9 DDT
10 Metoxychlor
10 decaclorobifenila
~250 fg cada analito
60
DCE: Aplicaes
Contaminantes em ar atmosfrico - deteco paralela DIC +DCE
DIC
DCE
1, 2, 3 - Hidrocarbonetos aromticos
4, 5, 6 - Hidrocarbonetos clorados
61
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempenho
QUANTIDADE MNIMA DETECTVEL Massa de um analito que gera um pico
com altura igual a trs vezes o nvel de rudo
S
I
N
A
L

(
S
)
RUDO (N)
= 3
S
N
RUDO Qualquer componente do sinal gerado pelo detector que no se
origina da amostra
Fontes
de
Rudo
Contaminantes nos gases
Impurezas acumuladas no detector
Aterramento eltrico deficiente
62
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempenho
LIMITE DE DETEO Quantidade de analito que gera um pico com S/N = 3 e w
b
=
1 unidade de tempo
Mesmo detector, nvel de rudo e massa de analito MAS diferentes larguras de
base:
w
b
QMD = f
Detector (sinal gerado, rudo)
Largura do pico cromatogrfico
Definindo limite de deteco como:
LD independente da eficincia do sistema cromatogrfico !
[QMD] =
massa
(ng, pg ...)
[LD] =
massa / tempo
(ng.s
-1
, pg.s
-1
...)
63
DETECTORES
Classificao
Detector Tipo Gases Seletividade Faixa
Deteco
Faixa
Dinmica
Ionizaao de
Chama (FID)
Fluxo de Massa
Hidrogenio e ar
Maioria dos compostos
organicos.
100 pg 10
7
Condutividade
Trmica TCD
Concentrao
Referencia Universal
1 ng 10
7
Captura de
Eletrons ECD
Concentraao Make-up Haletos, nitratos, nitrilas,
peroxidos , anidridos,
organometalicos.
50 fg 10
5
Nitrogenio-
fosforo (NPD)
Fluxo de Massa
Hidrogenio e ar Nitrogenio, fosforos
10 pg 10
6
Fotometrico
de Chama
(FPD)
Fluxo de Massa Hidrogenio e ar
possivelmente
oxigenio
Sulforados, fosforados, tin, boro,
arsenico, germnio, selenio,
cromo
100 pg 10
3
Fotoionizaao
(PID)
Concentrao Make-up
Alifaticos, aromaticos, cetonas,
esteres, aldeidos, aminas,
heterociclicos, organosulforados,
alguns organometalicos
2 pg 10
7
Condutividade
Eletrolitica
(HECD)
Fluxo de Massa Hidrogenio ,
oxygenio
Haletos, nitrogenados,
nitrosaminas, sulforados
64
ANLISE QUALITATIVA
Mtodos de Deteco Qualitativos
Cromatografia Gasosa com Deteo
Espectromtrica por Absoro no Infra-Vermelho
(CG-EIV)
Cromatografia Gasosa com Deteo
Espectromtrica de Massas (CG-EM)
Cromatografia Gasosa com Deteo
Espectromtrica por Emisso Atmica (CG-EA)
Identificao muito confivel quando combinados a tcnicas de
identificao baseadas em reteno
65
ANLISE QUALITATIVA
Espectrometria de Massas
1 Molculas da amostra so bombardeadas por eltrons (electron impact =
EI) ou ons (chemical ionization = CI):
ABCDE + e
-
ABCDE
.
+
+ 2 e
-
2 O on formado se fragmenta:
ABCDE
.
+
AB
.
+ CDE
+
ABCDE
.
+
AB
+
+ CDE
.
ABCDE
.
+
A
+
+ BCDE
.
3 Os fragmentos inicos formados so separados magneticamente de
acordo com suas massas moleculares e contados:
A
B
U
N
D

N
C
I
A
MASSA / CARGA
66
ANLISE QUALITATIVA
Espectrmetro de Massas
1
2
3
4
1 Cmara de Ionizao Eletrons gerados por um filamento aquecido
bombardeam a amostra. Os fragmentos ionizados (carga +1) so repelidos pelo
eletrodo positivo e conduzidos ao separador magntico.
2 Sada de Vcuo Todo o interior do EM deve estar sob alto vcuo (natm).
3 Separador Magntico A ao do campo magntico deixa apenas ons com
determinada razo Massa / Carga atravessar esta rea do equipamento.
4 Detector Uma vlvula fotomultiplicadora ou um
fotodiodo gera um sinal eltrico proporcional ao
nmero de ons que incide sobre o elemento.
67
ANLISE QUALITATIVA
Espectro de Massas
m/Z = 118
m/Z = 80
m/Z = 79
- CO
- (CO + H)
m/Z = 90
20 40 60 80 100 120 0
m / Z
68
ANLISE QUALITATIVA
CG-EM: TIC x SIM
Aroma de polpa industrializada de caj aps extrao por SPME
TIC
Aparecem os picos
correspondentes a todas
substncias eludas
SIM (m/z = 149)
Cromatograma construido a
partir dos mesmos dados
acima, mas apenas usando
fragementos com massa = 149
(ftalatos: plastificante)
69
DETECTORES CG
Sensibilidade e Faixa de resposta
70
71