Antigen = substan strin organismului, susceptibil s declaneze o reacie imunitar provocnd formarea de anticorpi.

Anticorp = protein a serului sanguine secretat de plasmocite, provenite din limfocitele de tip B ca reacie la introducerea n organism a unei substane strine. Reacia antigen (Ag) aticorp (Ac) = presupune legarea gruprii determinante a Ag (epitop) de situsul de combinare al Ac (paratop). n funcie de natura Ag i de metodele aplicate pentru vizualizarea lor reaciile Ag! Ac se pot mpri n" # Reacii de precipitare: ! difuzii n gel: ! simpl bidimensional ! dubl bidimensional (dubla difuzie Ouchterlon ) ! combinate cu migrare n cmp electric" ! imunoelectroforeza ! imunofi$are ! contraimunoelectroforeza ! electroimunodifuzie ! n mediu lic%id" ! n inel ! imunonefelometrie # Reacii de aglutinare: ! direct ! indirect ! in%ibarea aglutinrii ! mediat de anticorpi anti&imunoglobuline ('oombs, (aaler&)ose) # Reacii de neutralizare" ! cu participarea complementului ()*', determinarea imuno%emolitic a ') ! cu reacti!i marcai: ! detecie prin imunofluorescen (*+A)" utilizeaz marcarea cu molecule fluorescente (fluorocromi), ! detecie imunoenzimatic ("#$%A): utilizeaz marcarea cu enzime ! detectare radioimunologic ()+A)" utilizeaz marcarea cu radioizotopi (-./+, -0-+, 0 1, -2', 0.3), 4estele imunoc%imice pot fi utilizate fie pentru determinarea Ag, fie a Ac. 3rincipala caracteristic a testelor imunoc%imice cu reactivi marcai const n marcarea Ag sau a Ac cu o substan care genereaz un semnal ce poate fi msurat, facilitnd astfel detectarea comple$ului Ag&Ac. Analiza imunoenzimatic &estul "#$%A (enz me'lin(ed'immuno'sorbent'assa ) 4estul 56+7A reprezint o metod sensibil deoarece fiecare molecul de enzim poate converti mai multe molecule de substrat servind ca amplificator al reaciei. 5nzimele produc produi colorai care precipit astfel nct nu difuzeaz de la locul de formare. 3rocedeul const ntr&o serie de reacii i anume" Ac (primul reactant) este imobilizat pe un suport solid (tuburi, bile, plci de plastic cu godeuri), Ag din proba de testat se leag specific de Ac imobilizat cu formarea comple)ului Ag Ac specific*
1

 7e adaug un reactant marcat enzimatic (con+ugat enzimatic) care va reaciona cu comple$ul AgAc format. )eactantul marcat enzimatic este format din Ac con8ugat cu o enzim, acesta fiind activ att imunologic (reacioneaz cu Ag din prob acum imobilizat pe suportul solid prin comple$ul Ag!Ac format) ct i enzimatic (reacioneaz cu substratul corespunztor enzimei care se adaug ulterior). 7e adaug un substrat cromogen corespunztor enzimei utilizate pentru a vizualiza reacia de mai sus (reactant enzimatic ! comple$ AgAc). 5nzima anterior reinut n godeu acioneaz degradativ asupra substratului cromogen, incolor. 9egradarea substratului sub aciunea enzimei antreneaz o$idarea cromogenului care devine un compus colorat. 7e dezvolt astfel o culoare posibil de apreciat cu oc%iul liber, care indic astfel prezena sau absena Ag din proba analizat. n vederea determinrii cantitative, intensitatea culorii obinute se citete la spectrofotometru la o lungime de und corespunztoare. 'omple$ Ag!Ac ! )ectant marcat enzimatic ! 7ubstratul cromogen al enzimei

De exemplu pentru determinarea %ormonului 42 suita de reacii este urmtoarea" Ac'anti&, sunt imobilizai pe un suport solid (plci de plastic cu godeuri). 7e pipeteaz proba n care se urmrete determinarea &, (Ag). Astfel proba de analizat este pus n contact cu acest suport solid ncrcat cu Ac specifici : n cazul prezenei &, (Ag) n prob se formeaz comple)ul specific &,Ac' anti&,. 7plarea surplusului (materialul nelegat este splat) 7e adaug un reactant marcat enzimatic (con8ugat enzimatic) format din pero)idaz&Ac'anti&, care se leag de &, imobilizat acum pe suportul solid prin formarea comple$ului specific 42Ac&anti42. 7plare pentru ndeprtarea Ac nelegai

 se adaug un substrat cromogen corespunztor enzimei utilizate pentru a vizualiza reacia de mai sus. 7ubstratul pero$idazei este apa oxigenat iar cromogenul este ortofenildiamina. n cazul prezenei 42 (Ag) n proba analizat con8ugatul enzimatic este legat proporional cu cantitatea acestuia din prob iar intesitatea culorii obinute este direct proporional cu aceast cantitate. n vederea determinrii cantitative, intensitatea culorii obinute se citete la spectrofotometru.