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UD.- 4 ESTUDIO DE LAS PROTENAS

NA 4.1.- PROTENAS: Concepto, clasi icaci!n, est"#ct#"a $ #nciones NA 4.%.- &eta'olis(o p"oteico )*e los a(ino+ci*os, NA 4.-.- P"ote.nas plas(+ticas NA 4.4.- Alte"aciones *el (eta'olis(o p"oteico )a(inoaci*opat.as, NA 4./.- Dete"(inaciones anal.ticas

NA 4.1.- PROTENAS: Concepto, clasi icaci!n, est"#ct#"a $ #nciones

1.- Concepto y clasificacin
Las protenas son biomolculas que presentan una gran variedad estructural y tienen funciones biolgicas muy diferentes (estructurales, enzim ticas, transporte!. "odas se caracterizan por ser pol.(e"os *e a(ino+ci*os que se ordenan secuencialmente de manera lineal. #or lo que si nos vara el orden de los amino cidos de una secuencia, tendremos una protena diferente. $lo e%isten %0 a(ino+ci*os *i e"entes. Las protenas est n formadas por una secuencia de m s de &'' amino cidos (( &'' aa protenas!. )ientras que un pptido est formado por una cadena con menos de &'' amino cidos (* &'' aa pptido!. +esde el punto de vista bioqumico, las protenas est n formadas, b sicamente por C, ,, - y . (aunque tambin pueden contener /e, 0, 1!.

$eg2n su composicin, las protenas se pueden clasificar en3

1olop"ote.nas o si(ples (constituidas, slo por aa! - 4lobulares - /ibrosas o filamentosas 1ete"op"ote.nas o con2#3a*as (formadas por aa y por otro elemento! - Cromoprotenas (con grupo prosttico coloreado, como la ,b! - 4lucoprotenas (con un gl2cido como grupo prosttico! en las membranas - Lipoprotenas (con un lpido como grupo prosttico! - -tras (que tienen metales en su grupo prosttico!.

$eg2n su la estructura o configuracin espacial, las protenas se pueden clasificar en3

4lo'#la"es 5i'"osas o ila(entosas

%.- 5structura de los 6 - amino cidos

7 $on molculas que tienen C, ,, - y .. $e caracterizan por estar formados por un grupo carbo%ilo (-C--,! y un grupo amino (-.,8!. 7 Los amino cidos pueden ser 6, 9, :, 1 en funcin de donde se encuentra el grupo amino. $i el grupo amino se encuentra en el carbono despus del grupo carbo%ilo (-C--,!, que se considera el C& 6 7 a(ino+ci*os. $i el grupo amino se encuentra en el segundo carbono despus del grupo carbo%ilo (-C--,!, que se considera el C& 8 7 a(ino+ci*os. 1 7 Las formas m s ;abituales en la naturaleza son los amino cidos L - 6 7 a(ino+ci*os.

7 #ropiedades de los aa3

5.sicas: slidos, cristalinos, con un elevado punto de fusin, solubles en agua y con actividad ptica (porque tienen &C asimtrico!3 levgiros y de%trgiros. 9#.(icas: "ienen un comportamiento anftero< es decir, que pueden actuar como cidos o como bases en funcin del p, en el que se encuentren. ,ay un p, en la que pueden comportarse como molculas neutras (punto isoelctrico!. Los aa son estructuras tetradricas.

-.- Clasificacin de los 6 - amino cidos

7 Los amino cidos se clasifican seg2n el radical que se une al C central. - alifticos: presentan & cadena ;idrocarbonada. - aromticos: con & anillo bencnico. - heterocclicos: con & cadena cerrada (distina al benceno!. - cidos: con m s de & grupo carbo%ilo. - bsicos: con m s de un grupo amino. - modificados: (e=3 >- ;idro%iprolina! - aa no proteico: (e=3 L - ornitina!

4.- "ipos de enlaces en protenas

-ligopptido * &' aa #olipptido ( &' aa #rotena ( &'' aa

- Enlaces #e"tes 7 Los amino cidos se unen entre s mediante el enlace pept.*ico, que es un enlace de tipo covalente, entre el grupo amino (-.,8! de & aa y el grupo carbo%ilo (-C--,! del siguiente aa. 5stos enlaces dan una cadena lineal. 7 "ambin puede ;aber otros enlaces, los enlaces disulfuro.

/.- 5studio de la secuencia de las protenas

Las protenas son polipptidos con una secuencia de amino cidos definida genticamente.

A 5sta secuencia de aminocidos constituye la est"#ct#"a p"i(a"ia *e la p"ote.na y es el nivel fundamental en el que se basan los niveles m s elevados. La secuencia de la protena, que viene determinada genticamente, se escribe enumerando los aa desde el grupo .-terminal (amino! al grupo C-terminal (carbo%ilo!. 5sta cadena se dobla (gracias a enlaces dbiles, como las fuerzas de ?an der @aals, puentes disulfuro, puentes de ;idrgeno, 1!, formando la est"#ct#"a sec#n*a"ia *e las p"ote.nas (o plegado local de la estructural primaria!. 5s decir, la estructura secundaria nos define como se establece la cadena en el plano. 5stas estructuras se pueden establecer de A maneras3 &. 6-;lice3 5structura que se forma al enrollarse sobre s misma la estructura primaria. Cada enlace peptdico realiza un desplazamiento respecto al anterior con una angulacin de &B'C y, despus, sobre esta angulacin, se gira sobre si misma. Los dos movimientos ocurren simult neamente. 5n estos giros, todos los tomos de - quedan orientados en la misma direccin y los tomos de , quedan orientados al lado contrario. 5sta orientacin permite que se formen puentes de ;idrgeno que mantienen la estructura estable. 8. ,lice del col geno3 "iene una estructura espiral< se produce porque tienen prolina (unos aa que dificultan ;acer el giro entero, por lo que no se puede formar la 6-;lice!. #or lo que se forma una hlice extendida. #ara que esta estructura se mantenga estable, siempre se forman grupos de A cadenas unidas mediante enlaces covalentes y puntes de ;idrgeno, dando lugar a la triple hlice de colgeno. A. +isposicin 9 o l mina plegada3 Los amino cidos forman una estructura plegada (parecida a un acorden!. #ara que la estructura tenga estabilidad, tambin se unen varias l minas plegadas. (5=3 queratina! ,ay algunas protenas que, en su estructura secundaria presentan m s de & tipo de estructura a la vez. La est"#ct#"a te"cia"ia de las protenas no es m s que la estructura secundaria plegada sobre s misma. 5n este caso, interaccionan los amino cidos distantes entre ellos. 5n la estructura terciaria podemos encontrar 8 conformaciones3 &. Conformacin globular3 la estructura secundaria adopta una forma esfrica, mediante la unin de aa distantes entre s. Como propiedad, las protenas globulares son solubles en agua y en disoluciones salinas< por lo que son p"ote.nas t"anspo"ta*o"as. 5n las conformaciones globulares podemos encontrar m s de & tipo de estructura secundaria (6 y 9 ;lice a la vez!. (5=3 ;emoglobina, inmunoglobulinas, mioglobina, 1! 8. Conformacin fibrosa o filamentosa3 se mantiene la estructura alargada< 2nicamente se retuerce. Como propiedad, las protenas filamentosas son insolubles en agua y en disoluciones salinas< adem s, son ricas en glicina. (5=3 9-queratina y col geno!. "ambin entran en este grupo las protenas filamentosas que forman te=idos (como la elastina!. "odas ellas son p"ote.nas est"#ct#"ales. La est"#ct#"a c#ate"na"ia se forma por la unin de varias cadenas terciarias (como por e=emplo pasa con la ;emoglobina (,b!, que tiene > cadenas!. $e unen mediante enlaces dbiles. #ueden ser cadenas idnticas, o no, entre ellas. Cada cadena que forma la estructura cuaternaria se denomina p"ot!(e"o (;e%oquinasa3 dmero< ,b3 tetrmero< DE.-pol3 pentmero< filamentos de actina y miosina de los m2sculos3 polmero!.

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:.- #ropiedades de las ;oloproteinas

Las propiedades de las ;oloproteinas dependen de los radicales libres de la molcula. #or lo cual, en funcin de estos radicales pueden reaccionar con otro tipo de molculas. $olubilidad3 Las 3lo'#la"es son solubles en agua y en soluciones salinas, por lo que formar n soluciones coloidales< mientras que las ila(entosas son insolubles. +esnaturalizacin3 Consiste en la inte""#pci!n *e los enlaces que mantienen una configuracin secundaria, terciaria o cuaternaria, pasando a una configuracin anterior. $e produce por calor, por cambio del p,, por productos qumicos, etc. La desnaturalizacin puede ser reversible (e=3 pelo!, por lo que puede renaturalizarse< o irreversible (e=3 ;uevo cocido!. Cuando se desnaturaliza una protena, tambin se inactiva< por lo que de=a de realizar su funcin y precipitan. 5specificidad Capacidad amortiguadora3 Las protenas pueden comportarse como cidos y como bases< por lo que tienden a neutralizar el p, del medio en el que se encuentran. (5=3 ;emoglobina!

;.- Clasificacin de las protenas

4lo'#la"es: globulinas, protaminas (se encuentran asociadas al D+.!, ;istonas, prolaminas (con muc;a #rolina, se encuentran en las semillas de vegetales!, gluteninas, alb2minas. 5ila(entosas: col geno, elastinas (a nivel de los tendones y de los vasos sanguneos!, queratinas (en las uFas y el cabello!. P"oteinas con2#3a*as: cromoproteinas (con pigmentos porfirnicos (,b, mioglobina! o no porfirnicos!< glucoproteinas (con un gl2cido en el grupo prosttico (;ormonas /$,, "$,, L,< lquidos sinoviales!< lipoproteinas< nucleoproteinas (con un cido nucleico en el grupo prosttico!.

<.- /uncin de las protenas

&. 8. A. >. G. H. I. 5structural3 col geno, elastina, 1 "ransporte 5nzim ticas3 actuando como biocatalizadores. ,ormonal3 ;ormona tiroidea, 1 +efensa3 :-globulinas. Contr ctil3 actina y miosina. Eeserva3 si el organismo no tiene gl2cidos, utiliza lpidos, y si no tiene lpidos, utiliza protenas.

NA 4.%.- &eta'olis(o p"oteico *e los a(ino+ci*os

1.- Jalance nitrogenado
,ay una serie de patologas relacionadas con el riFn y el ;gado en las que es importante tener en cuenta la relacin entre el nit"!3eno que se ingiere y el que se elimina. #or la cual cosa, dado que las protenas contienen . en su molcula, su degradacin nos va a permitir valorar el balance (.itrgeno ingerido K .itrgeno eliminado por orina!. - $i la ingestin es superior a las prdidas3 'alance positi=o< - $i la ingestin es inferior a las prdidas3 'alance ne3ati=o (en estados de inanicin, en insuficiencias renales (0E!!.

%.- +igestin y absorcin de las protenas

La fuente principal de aa para nuestro organismo son las protenas e%genas< por lo que se ingieren una serie de amino cidos esenciales. Cuando las protenas llegan a nuestro t#'o *i3esti=o, se ;idrolizan y dan lugar a los amino cidos que las constituyen< esta ;idrlisis se conoce con el nombre de protelisis. - Los enlaces del e%tremo de la cadena se rompen gracias a los en>i(as p"oteol.ticos e?opepti*asas, que act2an a un p, de entre I y B. - Los enlaces m s internos de la cadena se rompen mediante en>i(as p"oteol.ticos en*opepti*asas, que actuan a un p, cido a nivel del estmago ( pepsina producidas por las clulas g stricas! o a un p, m s alcalino a nivel del intestino ( tripsina, quimotripsina, producidas por el p ncreas!. La mayor parte de los enzimas proteoltcos se secretan en forma de >i(!3enos o p"oen>i(as< es decir, en formas inactivas. #or la accin de un estmulo, se activan y pueden e=ercer su funcin. - Pepsin!3eno: secretado por las clulas principales de la mucosa g strica < y por accin del ,Cl pasa a pepsina. - 9#i(ot"ipsin!3eno: dar lugar a la quimotripsina< por accin de la tripsina. 5s secretada por el p ncreas y act2a a nivel intestinal, en el duodeno. - T"ipsin!3eno: dar lugar a la tripsina< por accin de la enteroquinasa. 5s secretada por el p ncreas y act2a a nivel intestinal, en el duodeno. - P"oca"'o?ipepti*asa: dar lugar a la carbo%ipeptidasa< por accin de la tripsina. 5s secretada por el p ncreas. Las protenas empiezan a digerirse (o a ;idrolizarse! en el estmago por accin de la pepsina y del +ci*o clo"@.*"ico (,Cl!. #or lo que obtenemos oligopptidos y polipptidos que seguir n degrad ndose en el intestino delgado por accin de la quimotripsina, la tripsina y carbo%ipeptidasas (el p ncreas libera, a la segunda parte del duodeno, las enzimas en forma de zimgenos!. /inalmente, obtendremos oligopptidos de entre 8 a H aa. 5stos pptidos pequeFos se absorben a nivel intestinal f cilmente, mediante un transporte activo dependiente del sodio. +espus de pasar a sangre, son captados por el ;gado< donde se producir la catabolizacin de los mismos.

-.- )etabolismo de los amino cidos

La mayor parte de las clulas de nuestro organismo utilizan los amino cidos para la re-sntesis de protenas. )ientras que los que se degradan, sirven para la sntesis de compuestos nitrogenados.

H "ambin se pueden utilizar como fuente de glucosa (entran a la va de la gluconeognesis! en situaciones de ayuno. ,ay amino cidos cetognicos que pueden irse ;acia la formacin de los cidos grasos. L por 2ltimo, los amino cidos pueden degradarse completamente para dar energa. A.&.- Catabolismo o degradacin de los amino cidos La sntesis y la degradacin de los amino cidos est n totalmente ligadas. #ues mientras se sintetizan unos, otros se catabolizan. La catabolizacin de los amino cidos se produce en el @.3a*o (a nivel ;ep tico!. "ambin se pueden degradar en otras clulas, pero van a dar como producto amonaco (que es muy t%ico a nivel sanguneo!. &. +egradacin total de los grupos amino (que se convertir n en iones amonio y, despus, en urea!. 8. +egradacin de las cadenas carbonadas Los productos que salgan del catabolismo de los amino cidos pueden ir a la formacin de3 pir2vico, acetil coD o intermediarios del ciclo de Mrebs.
Esquema apuntes

-- /ases del catabolismo de los amino cidos 1. Eliminacin del grupo amino cetocido $e produce por una srie de reacciones que son comunes para todos los amino cidos. 7 "ransaminacin y desaminacin o%idativa3 77 "ransaminacin3 traspaso del grupo amino de un amino cido pasa a un ceto cido (mediado por las enzimas transaminasas o aminotransferasas< muy abundantes en el ;gado, el corazn, el m2sculo esqueltico y en el riFn!3 aa1 A ceto+ci*o1 ceto+ci*o% A aa% Dceptores de grupo amino3 alp;a-cetoglut rico, o%olacetato, piruvato y glio%alato.
Asp+"tico A 6-ceto3l#t+"ico AST o GOT o?alacetato A 3l#t+(ico Alanina A 6-ceto3l#c+"ico ALT o GPT pi"#=ato A 3l#t+(ico

$e produce a nivel citoplasm tico. 77 +esaminacin o%idativa3 se produce a nivel mitocondrial. 4l#t+(ico A NADA )o NADPA, 6-ceto3l#t+"ico A N14A A NAD1 )NADP1, 5l amonaco sirve para la formacin de bases nitrogenadas (para la formacin de nucletidos! y la formacin de urea. 7 +esaminacin no o%idativa 7 +esaminacin ;idroltica 7 +esaminacin %. Eliminacin de las cadenas carbonadas: Las cadenas carbonadas de ceto cidos se catabolizan ;acia el ciclo de Mrebs. $e acaban transformando en piruvato, acetil coD o intermediarios del ciclo de Mrebs. "ambin pueden reconvertirse en energa, si se catabolizan totalmente.

I La mayor parte de los amino cidos son glucognicos (como la alanina y la serina!. ,ay otros amino cidos cetognicos (como la leucina y la lisina!. A.8.- +egradacin de los amino cidos a nivel muscular3 $e degradan los amino cidos leucina, isoleucina y valina. $ufren transaminacin y desaminacin o%idativa. .o son capaces de transformar los iones amonio en urea. Nn e%ceso de amonaco en sangre causa problemas neurolgicos. D nivel muscular, la manera de circular en sangre los iones amonio es transform ndolos en alanina y en glutamina. +e manera que, al llegar al ;gado, acabaran dando urea. 7 "ransaminacin a nivel muscular3 5l aceptor de los grupos amino es el piruvato (o pirvico), que se transformar en alanina. 5sta alanina ser transportada en sangre ;asta el ;gado, donde ser degradada en el ;gado.
a(ino+ci*o A pi"#=ato ceto+ci*o A alanina

7 +esaminacin a nivel ;ep tico3 se acaba produciendo la desaminacin total de los amino cidos, y acabamos obteniendo #"ea. A.A.- $ntesis o anabolismo de los amino cidos3 La principal fuente de amino cidos es la dieta, a partir de las protenas. D parte de eso, las clulas tambin pueden sintetizar amino cidos (como la alanina, el aspartato, la glutamina y la serina! a partir de otros amino cidos. A.>.- La glutamina3 5s un amino cido que podemos encontrar a nivel de las clulas y a nivel plasm tico (ya que transporta los grupos amonio ;asta el riFn, donde se degradar en urea!. O1P La glutamina se forma a partir del glutamato (gracias a la adicin de & molcula, & amonio, y con consumo de D"#!.

4.- Dlteraciones del metabolismo de los amino cidos Q #D"-L-4RD$

(5rrores innatos o congnitos del metabolismo de los amino cidos! &. Dminoacidopatas3 enfermedades causadas por carencias enzim ticas del metabolismo de los amino cidos. Dlteraciones del transporte de los amino cidos3 por un fallo en el transportador, que afecta a varios amino cidos. Las alteraciones se producen a nivel intestinal y a nivel renal (aminoacid2rias3 eliminacin de amino cidos por orina!. Dlteraciones generales del transporte a nivel renal $ndrome de /anconi $obresaturacin 5mbarazo. Dlteraciones especficas del transporte Cistinuria3 afecta a la eliminacin de los amino cidos b sicos. 5liminacin de la cistina a travs de la orina. 5sta cistina cristaliza y encontramos cristales de cistina en orina. Ddem s, suelen acompaFarse de lisina, ornitina, etc. 5nfermedad de ,artnup o $ndrome del paFal azul3 afecta al transporte de los amino cidos neutros (triptfano, 1!.

8. Dlteraciones en el metabolismo de amino cidos arom ticos3

B /5.0LC5"-.SE0D3 es una de las patologas me=or conocidas. 5s de diagnstico neonatal. Dlteracin del metabolismo de la enilalanina producida por el dficit de fenilalanina hidroxilasa que transforma la fenilalanina en tirosina. #or lo que no se forma tirosina, como consecuencia de acumula fenilalanina y se desva el metabolismo ;acia la formacin de cido fenilpir2vico, cido fenil ctico y cido fenilactico. #or lo que encontraremos una alta O P de estos productos en orina, que son t%icos a nivel neuronal. 5s una enfermedad que se ;ereda por @e"encia a#tos!(ica "ecesi=a. Los niBos que la sufren son "#'ios, *e piel cla"a $ con o2os a>#les , debido a que la fenilalanina disminuye la produccin de melanina. $u orina tiene un olor caracterstico a ratn. Ddem s, sufren un "et"aso psico(oto" i(po"tante< que es m s grave cuanto m s tarde se diagnostique la enfermedad. 5n cambio, si la fenilceton2ria se diagnostica al nacer y se elimina la fenilalanina de la dieta, este niFo tendr una vida completamente normal. "0E-$0.5)0D$3 $e deben a una alteracin del metabolismo de la ti"osina, a consecuencia de dficits enzim ticos. "irosinemia 0 o "irosinosis3 5s muy poco frecuente o rara. 5%crecin elevada del #,##D. $obretodo, afectacin renal y ;ep tica. 5l daFo renal que produce, ocasiona el $ndrome de /anconi. "irosinemia 003 $e produce por dficit de tirosina aminotransferasa ;ep tica, que transforma la tirosina en cido p;idro%ifenilpir2vico. ,ay un ac2mulo de tirosina que forma cristales< stos precipitan causando lesiones articulares, oculares y cut neas. $e determina por aumento de tirosina tanto en sangre como en orina (donde tambin encontramos cristales de tirosina, con aspecto de agu=a y muy refringentes!.
/enilalanina /5.0LC5"-.SE0D

"irosina "0E-$0.5)0D 00

Tc. p;idro%ifenilpir2vico (#,##D! Tc. ;omogentsico DLCD#"-.SE0D

Tc. maleilacetoactico "0E-$0.5)0D 0 ("0E-$0.-$0$!

Tc. fumarilacetoactico

Y
Tc. acetoactico U Tc. fum rico

DLCD#"-.SE0D3 5s una enfermedad poco frecuente. $e debe a la ca"encia o dficit de la en>i(a o!ogent"sico o#idasa< que transforma el cido ;omogentsico en cido maleilacetoactico. #or lo que ;ay un aumento de cido ;omogentsico en orina. 5s muy caracterstica porque la orina que se e%creta oscurece al de=arla en reposo. 5sto se produce porque el cido ;omogentsico por accin de la polifenol oxidasa origina el cido benzoquinoactico< y ste 2ltimo origina polmeros que se depositan en el cartlago, produciendo a"t"itis (inflamacin del cartlago! $ un osc#"eci(iento *el ca"t.la3o )oc"onosisi,. $e diagnostica determinando el cido benzoquinoactico en orina. DLJ0.0$)-3 5rror congnito del metabolismo de la tirosina con un *C icit *e p"o*#cci!n *e (elanina. $e debe a un dficit de tirosinasa y origina una @ipopi3(entaci!n *e la piel, *el c#e"o ca'ell#*o $ *e los o2os . "ambin presentan fotosensibilidad y alteraciones visuales. $e puede presentar de 8 formas3 /orma ocular /orma culo-cut nea (albinismo tipo 0!3 &V&'.''' nacimientos.

A. Dlteraciones en el metabolismo de amino cidos azufrados3 ,-)-C0$"0.SE0D3 $e debe a un dficit del enzima cistationina sintetasa que transforma la ;omocistena en cistena. $e ;ereda con ca"+cte" a#tos!(ico "ecesi=o. L el acD(#lo *e @o(ociste.na da lugar a lesiones esquelticas, tromboemblias, dislocacin del cristalino, retraso mental, etc. "odo esto se conoce con el nombre de $ndrome de )arfan. $e diagnostica mediante la presencia de ;omocistena en orina.
C0$"D"0-.SE0D3 5rror congnito del metabolismo de la metionina. $e ac#(#la cistationina que se elimina a travs de la orina. $e ;ereda con ca"+cte" a#tos!(ico "ecesi=o.

>. Dlteraciones en el metabolismo de amino cidos ramificados3 +ficits enzim ticos que metabolizan amino cidos como la leucina, isoleucina y valina. 5sto produce un ac2mulo de cidos org nicos y por eso se les conoce con el nombre de aci*#"ias o"3+nicas (los cidos que se forman a partir de los aa se eliminan por orina!. DC0+W)0D 0$-?DLWE0CD (Tcido isovalrico!3 La orina tiene un olor caracterstico a queso rancio. 5sta patologa cursa con ;ipotermia, ;ipotonia, trombocitopenia y neutropenia. 5./5E)5+D+ +5 LD -E0.D +5 XDEDJ5 +5 DEC53 -rina con olor a =arabe de arce. $e produce por eliminacin de o%o cidos por orina. 5sta patologa cursa con retraso mental (encefalopata t%ica grave por acidosis! y muerte en pocas semanas o pocos meses.

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NA 4.-.- P"ote.nas plas(+ticas

!g" #$% libro" Estudio general del metabolismo de las protenas

1.- #rotenas sricas o plasm ticas3 concepto y funciones

&.&- Concepto Las p"ote.nas plas(+ticas son las protenas que se encuentran en los lquidos corporales (plasma, lquido sinovial, 1!. Las protenas plasm ticas, por lo tanto, nos dar n una valoracin del estado del metabolismo proteico< con fines diagnsticos.
5l n2mero de protenas plasm ticas identificadas son, apro%imadamente A''. 5l con=unto de protenas plasm ticas se denominan p"ote.nas totales (es decir, el total de protenas que podemos encontrar en el plasma!. Los valores de las p"ote.nas totales en plasma oscilan entre GI K B' gVL (o G,I K B gVdL!< aunque los =alo"es no"(ales oscilan entre ;0 7 <0 3EL (o ; 7 < 3E*L!. Las protenas totales se dividen en G grupos3 Dlb2mina, 6&-globulinas, 68-globulinas, 9-globulinas y :-globulinas. +entro de las protenas totales, podemos encontrar3 #rotenas espec. icas3 son las que realizan su funcin a nivel del plasma. #rotenas no espec. icas (la mayora!3 son transportadoras o aparecen cuando ;ay una lesin o una patologa.

1.%.- /unciones de las protenas plasm ticas

1. )antenimiento de la presin onctica del plasma3 fundamentalmente, la alb2mina (porque es la protena que est en mayor concentracin!. %. "ransportadores3 protenas que son transportadoras de metales (transferrina, celuloplasmina, 1!, transportadoras de sustancias insolubles en agua (lipoprotenas!, ;ormonas catalizadoras, etc. -. )antenimiento del equilibrio cido K b sico3 protenas que funcionan como amortiguadores o sistemas tampn (todas las protenas totales, al ser anfteras!. 4. /unciones defensivas3 inmunoglobulinas, protena C reactiva, 1 /. Coagulacin :. 5nzimas, in;ibidores enzim ticos, 1 ;. "ransporte de f rmacos

%.- )etabolismo de las protenas plasm ticas

La concentracin de protenas plasm ticas en un momento determinado va a depender de3

&& 5l "it(o *e s.ntesis: la mayora de protenas se sintetizan a nivel ;ep tico (en el ;gado! y en otros te=idos perifricos. 5l mecanismo de sntesis de protenas es el mismo para todas. ,ay un control de la sntesis proteica, e=ercido sobre la transcripcin de &'(. #or e=emplo, en procesos inflamatorios agudos, aumenta la produccin de protenas de la fase aguda (por accin de las citoquinas, 0L-&, 0L-H, 1!. 5l =ol#(en l.F#i*o: en situaciones de hemoconcentracin o hemodilucin, los valores de O P de protenas plasm ticas dan valores alterados. Las protenas plasm ticas, podemos encontrarlas dentro o fuera del endotelio (seg2n su masa molecular!. Las protenas m s pequeFas, pasan a travs del endotelio ;acia el e%terior por pinocitosi, a travs de las uniones interendoteliales. #or lo que ;ay una diferencia de O P proteica seg2n los espacios< es decir, ;ay un Z de protenas que cambian de un lquido a otro. 5n $istema .ervioso, el movimiento de protenas a travs del endotelio est muy limitado, dado que la barrera de proteccin es muy selectiva. 5n cambio, a nivel de los sinusoides ;ep ticos (en el ;gado! o a nivel esplnico (en el bazo!, el movimiento de protenas es constante y muy abundante. 5l "it(o al F#e se *e3"a*an o *e3"a*aci!n: el catabolismo de las protenas se produce en todas las clulas. Dl liberarse amino cidos, estas mismas clulas pueden sintetizar nuevas protenas. 5n el ;gado tambin se degradan muc;as protenas y, en el riFn, se degradan protenas de pequeFa masa molecular (por e=emplo, globulinas de cadenas pequeFas!.

-.- 5studio de las protenas plasm ticas

-.1- #rotenas totales Las protenas totales es el con=unto de protenas que ;ay en el plasma, formando una solucin coloidal. 5stas p"ote.nas totales pueden aumentar o disminuir, seg2n la situacin3 - si aumentan3 @ipe"p"oteine(ia (Gp"oteinas totalesH I < 3E*L!. cuando ;ay una disminucin de la volemia (;emoconcentracin!, aumenta la O P de protenas plasm ticas. #ero no es una disminucin real, sino relativa. 5=3 en situaciones de des;idratacin. aumento real de la O P de protenas 5=3 en enfermedades crnicas.
si disminuyen3 @ipop"oteine(ia (Gp"oteinas totalesH J 4 3E*L ;ipoproteinemias que producen ede!as (paso de lquido del lquido intersticial!!. cuando ;ay un aumento de la volemia (;emodilucin!, disminuye la O P de protenas plasm ticas 5=3 durante el embarazo< en 0E (por mala eliminacin del agua!< 1 prdida real de protenas por orina (sndrome nefrtico!< en enteropata pierde alb2minas< en grandes quemados. cuando ;ay una disminucin de la sntesis proteica 5=3 cuando no se ingieren protenas (dficit en la dieta!, en sndromes de mala absorcin y en ;epatopatas graves.

-.%.- /racciones electroforticas La elect"o o"esis es una tcnica fisico-qumica que permite separar y cuantificar las fracciones m s importantes de protenas presentes en el plasma

&8 en suero, son G fracciones3 alb2mina, fraccin alp;a &, fraccin alp;a 8, fraccin beta y fraccin gamma< en plasma, adem s de estas G fracciones, encontraremos fibringeno (que migra entre la fraccin beta y la gamma!.

Lo 2nico que comparten las protenas plasm ticas, es que migran cuando las sometemos a electroforesis.

#rotenas plasm ticas3 - #realb2mina3 (o transtirretina! protena no glicosilada. $e sintetiza en el ;gado. "iene una vida media muy corta (de &8;! en plasma. o /uncin3 "ransporte de la vitamina D. "ambin se denomina transtirretina porque adem s de transportar la vitamina D, tambin transporta EJ# (protena ligadora de retinol! [ reactante de fase aguda negativa (protena que suele disminuir en un proceso inflamatorio!. o prealb2mina3 por ;epatopatas y desnutricin.
Dlb2mina3 refle=o del metabolismo proteico. Eepresenta, apro%imadamente, el GGZ de las protenas plasm ticas. 5s una protena soluble, estable, y con un #) (peso molecular! ba=o. "iene una vida media de &G das. o /unciones3 responsable de la presin onctica o osmtica< dado que es capaz de retener agua. Ddem s, interviene en la reaccin del equilibrio electroltico, funcionando como sistema amortiguador. #or 2ltimo, es un transportador especfico de m2ltiples sustancias (bilirrubina, cidos grasos, calcio, 1! o ?alores normales3 apro%. A,G K G,8 gVdL (o AG K G8 gVL! o Dumento alb2mina3 en casos de des;idratacin (es un aumento relativo!. o +isminucin3 en ;epatopatias, infeccin crnica, neoplasias, enfermedades renales (0E, $ndrome nefrtico, 1! y en desnutricin. Cuando ;ay una ;ipoalbuminmia, encontramos un e*e(a que se acompaFa de @ipocalce(ia. 4lobulinas3 grupo de protenas muy ;eterogneo (encontramos lipoprotenas, glicoprotenas, 1!. D nivel electrofortico podemos diferencias3 o Alp@a 3lo'#linas: &GZ del total de las protenas. La O P oscila entre 0,- 7 0,; 3E*L. Dumentan cuando ;ay lesiones en los te=idos (alteraciones ;sticas!. Dlp;a & globulinas3 Dlp;a & antitripsina3 es un in;ibidor de la tripsina. 5l dficit (! provoca un enfisema pulmonar (rotura de los sacos alveolares, con ampliacin e%cesiva de la ca=a tor cica! o en cirrosis heptica infantil. Dumenta (! en procesos de tipo inflamatorio. Dlp;a & L#3 transportan colesterol al ;gado, para destruirlo. Dumentan (! cuando ;ay una hiperlipoproteinemia.

&A +isminuyen (! con enfermedades hepticas. "ranscobalamina3 transporta la vitamina J&8. +isminuye (! en casos de malnutricin. #rotrombina3 #recursor de la trombina (un factor de coagulacin!. +ficit (! en hepatopatas o en tratamientos con dicumarnicos (por e=emplo, el sintron!. Dlp;a 8 globulinas3 o Ceruloplasmina3 "ransporta el cobre. +isminuida (! en Enfermedad de )ilson. Dumento (! durante la gestacin y reactante de fase aguda. o ,aptoglobina3 "ransportadora de ;emoglobina. +isminuida (! en hepatopatas y en algunas anemias. Dumentada (! en inflamacin aguda*crnica y reactante de la fase aguda. o 5ritropoietina3 #roduccin de eritrocitos. +isminuida (! en +& ,+nsuficiencia renal! porque se sintetiza en el riFn< y en enfermedades autoinmunes. Dumentada (! en ciertos tipos de anemia. o Dlp;afetoprotena3 protena principal del feto. Dumentada (! en el embara-o< y sobretodo en cncer heptico (o ;epatoma!\\\ o Dlp;a 8 L#3 "ransportadora de lpidos. +isminuida (! en insuficiencia heptica. Dumentada (! en hiperlipidemias" o Keta 3lo'#linas: &8Z del total de protenas plasm ticas. La O P oscila entre 0,4 7 0,< 3E*L. 5s una fraccin que se altera muy poco. "ransferrina3 transportadora del ;ierro. Dumentada en anemias ferropnicas. +isminuida en hepatopatas y en neoplasias. Jeta-lipoprotenas3 "ransportadora del colesterol y de fosfolpidos. L transportadora de ;ormonas. Complemento (cA y c>!3 Dumentados en procesos inflamatorios agudos y inflamaciones agudas*crnicas. +isminuidos en L5$ (Lupus 5ritromatoso $istmico! y en (nmia hemoltica autoinmune.

o 4a((a 3lo'#linas: &&Z del total de protenas plasm ticas. La O P oscila entre 0,: 7 1,1 3E*L.

&> 0g 4, 0g D, 0g ), 0g + y 0g 5: 5st n aumentadas en procesos inflamatorios crnicos (L5$, Cirrosis, 1!. L disminuidas en ;ipogammaglobulinemia, immunosupresin. - 0g) aumentada tras procesos agudos virales. - 0gD aumenta en enfermedades autoinmunes (L5$, ;epatitis, infecciones bacterianas. - 0g4 aumentada en enfermedades con un componente alrgico (asma, infeccin parasitaria, eczema! #rotena C reactiva3 Eeactante de la fase aguda por e%celencia. Dumentada en inflamaciones agudas y en necrosis hstica.

o 5i'"in!3eno: ?alores normales 0,- 3E*L. 5n una electroforesis, migra entre las beta y las gamma globulinas. 5s un "eactante *e ase a3#*a. Dumentado en procesos inflamatorios agudos, durante el embara-o, con el uso de anovulatorios" +isminuido en hepatopatas y en coagulopatas por consumo. o Reactantes *e ase a3#*a: #rotenas plasm ticas cuya O P se altera despus de un traumatismo (cirurgia, infarto de miocardio, 1!, cuando ;ay necrosis o en caso de inflamacin tisular (L5$, 1!.

4.- Dlteraciones de las protenas plasm ticas

&.- Disp"oteine(ias: Dlteracin en la distribucin (es decir, en la cantidad de cada tipo de protena!. - ,ipoalbuminemia3 o #or sntesis insuficiente3 malnutricin o insuficiencia ;ep tica. o #or eliminacin y degradacin e%cesiva3 $ndrome nefrtico, alteraciones gastrointestinales o quemaduras e%tensas. o Drtefactual (por dilucin!3 Dl tomar un e%ceso de lquidos, si se sufre sndrome nefrtico. - ,ipogammaglobulinemia3 - ,iperglobulinemia3 8.- Pa"ap"oteine(ias: #resencia de protenas anormales en el plasma o fracciones de las mismas (sobretodo en el caso de las inmunoglobulinas!. Dumenta de forma espont nea y e%cesiva un ]clon^ proliferante de LJ (por eso se llaman 3a((apat.as (onoclonales!. L aparecen en3 mieloma m.ltiple (aumento de la protena Jence K Xones!, en leucemias / linfomas" Ddem s las paraproteinemias acaban cursando con3 diatesis ;emorr gica, lesiones renales y $ndrome de ;iperviscosidad. A.- C"io3lo'#line(ias: 4rupo de inmunoglobulinas que precipitan al descender la temperatura (fro!. #roducen trastornos circulatorios en las partes m s sacras o distales de las e%tremidades. inflamaciones de los vasos (=asc#litis!. >.- Alte"aciones *e al3#na 'an*a

&G

/.- #atrones electroforticos3 Las electroforesis nos dan, como resultado, p"oteino3"a(as. 5n
general, las protenas normales se encuentran entre ; 7 < 3E*L. - Dlb2mina3 GG K HGZ A,G K G,8 gVdL. - Dlp;a & globulinas3 & K >Z - Dlp;a 8 globulinas3 H K &'Z - Jeta globulinas3 B K &8Z - 4amma globulinas3 &8 K &YZ

/.1- Dlteraciones de los proteinogramas 5_D)5.\\\ ?er gr ficas\\\ 0)#-E"D."555\

1. In la(aci!n $Eo lesi!n tis#la" a. Dgudo3 protenas refractantes de fase aguda
` alp;a & y alp;a 8 globulinas Dlb2mina y gamma globulinas3 normales o a

b. Crnico3
` alp;a & y alp;a 8 globulinas ` gamma globulinas Dlb2mina normal o a Jetta globulinas normales

%. 1epatopatias: disminucin de las protenas plasm ticas con aumento de las gamma globulinas. a. C0EE-$0$ ,5#T"0CD3 solapamiento de las fracciones betta y gamma globulina, por aumento masivo de las gamma globulinas. -. S.n*"o(e ne "!tico: Dumento de alp;a (sobretodo alp;a-8! y betta. +isminucin de alb2mina y gamma globulinas. 4. 4a((apat.as (onoclonales: presencia de una inmunoglobulina en cantidades elevadas por proliferacin de un clon celular ;omogneo productor de esta inmunoglobulina. 5n )acroglobulinemia de @alderstrbm. /. 4a((apat.as policlonales: aumento global de las inmunoglobulinas. $e manifiestan en inflamaciones crnicas (brucelosis, lepra, endocarditis! y en ciertas enfermedades autoinmunes (lupus!.

&H

NA 4./.- Dete"(inaciones anal.ticas *e las p"ote.nas (p g. &B' libro!

1.- +eterminacin de protenas totales
#ara la determinacin de las protenas sricas totales, ;ay varios mtodos3 &Cto*o *e L2el*a@l: )todo poco utili-ado. $e basa en la determinacin del nitrgeno proteico. 5s un mtodo muy e%acto. .o se utiliza porque es un mtodo lento, comple=o y actualmente se puede automatizar, pero no se utiliza en la clnica ;abitual. $e puede utilizar para realizar traba=os de investigacin o de referencia. &Cto*o *e Ki#"et: 5s el (Cto*o *e "e e"encia (se utiliza para comparar la precisin, e%actitud, etc. de otros mtodos!. o 5s un mtodo de tipo colorimtrico. .os da un compuesto coloreado en presencia de sales de cobre, en medio b sico. o 5s un mtodo de referencia porque tiene una elevada especificidad. 5s preciso. L est su=eto a pocas interferencias. o $e basa en la formacin de un co!puesto coloreado (violeta) en presencia de sales de cobre y en un medio alcalino. 5s un mtodo a punto final< quiere decir que vamos a determinar el producto que se forma. o $e lee espectrofotomtricamente a una longitud de onda de //0 n(. o Nno de los reactivos que se utiliza el sulfato de cobre (que es muy corrosivo!. &Cto*o *e LoM"$: "ambin es una reaccin a punto final. $e utiliza, sobretodo pa"a (#est"as *il#i*as (como la orina!. o $e lee a ;/0 n(. o /ormacin de color debido al azul de molibdeno y al azul de tungsteno al agregar el "eacti=o para$%enol %olin$ciocalteau en una muestra pre-tratada con una solucin alcalina de sulfato de cobre. o .os dar un valor proporcional a la concentracin de protenas que ;ay en la muestra. o 5s 2til y especfico para (#est"as (#$ *il#i*as (como la orina o otros lquidos biolgicos!. #ero no para muestras muy concentradas como el suero (para la que se utiliza el mtodo de Jiuret!. Ot"os (Cto*os: o Re "act"o(et"ia: este mtodo mide el ndice de refraccin. 5s una valoracin r pida y precisa. Lo malo, es que es un mtodo que est s#2eto a inte" e"encias (sueros lipmicos, 1!.

&I Los resultados varan en funcin de la concentracin de protenas.

o A'so"ci!n en el #lt"a=ioleta: es un mtodo que se caracteriza por la absorcin de la luz ultravioleta en los enlaces peptdicos. La longitud de onda es de %:0 n(. 5s un mtodo sensible, e%acto y preciso.

%.- +eterminacin de alb2mina

La alb2mina, si se valora =unto a las protenas totales< nos permite =alo"a" el esta*o (eta'!lico *e las p"ote.nas. $i tenemos una alb2mina muy ba=a, ;ay problemas. La alb2mina corresponde a la mitad (G'Z! de las protenas totales. &Cto*os *e i2aci!n *e colo"antes: estos colorantes se pueden utilizar tanto manualmente como en sistemas automatizados. 5l colorante se liga a la alb2mina y, por lo tanto, se puede determinar la concentracin de sta por diferentes mtodos. ?erde de bromocresol (NKC! Tcido 8-(>-;idro%iazobenceno!benzoico (1AKA!

-.- #rotenas en orina

$iempre que ;ablamos de las protenas urinarias, la prdida de protenas nos orienta ;acia una alteracin renal. #ero cuando ;ablamos de p"otein#"ia (presencia de protenas en orina!, podemos diferenciar si se produce de manera patolgica o de manera fisiolgica. 5n general, cuando ;ay una p"otein#"ia, se corresponde a una lesin renal. #ero no siempre, ya que podemos encontrar3 #roteinurias no patolgicas3 aparecen - en procesos febriles - en ;ipertensin arterial - durante el embarazo (por aumento de la volemia y compresin de la zona de las cavas! #roteinuria tubular3 a nivel del glomrulo renal, se produce la filtracin de las protenas que tienen un ba=o peso molecular. L a travs de los t2bulos renales se reabsorben todas las protenas. $i los t2bulos no tienen capacidad de absorcin, aparecera una proteinuria. - #ielonefritis - "ubulopatas - $ndrome de /anconi - 5nvenenamientos por metales pesados #roteinurias glomerulares3 por un aumento en la permeabilidad del glomrulo, por lo que pasan m s protenas de las ;abituales (no solo las de ba=o peso molecular!.

&B #roteinurias por sobreproduccin3 Cuando ;ay un e%ceso de protenas en el plasma, se pueden acabar perdiendo por orina. "eniendo en cuenta que las primeras en perderse ser n las de ba=o peso molecular, porque son las primeras que se filtran.

A.&.- )todos de determinacin de las protenas en orina3 La concentracin de protenas en orina es muy ba=a (entre 100 7 %00 (3EL!.
&. #ara determinar la proteinuria, se utilizan (Cto*os t#"'i*i(Ct"icos. $on mtodos e%actos, precisos y sencillos de realizar. +eterminan la turbide- debido a la presencia de protenas precipitadas. $on (Cto*os (#$ #tili>a*os. $e puede utilizar como precipitantes3 - Tcido sulfosaliclico3 #roduce m s turbidez con la alb2mina que con las gammaglobulinas. Tcido tricloroactico3 5s m s sensible, es decir, produce la misma turbidez para todas las protenas, por lo que es el p"ecipitante (+s #tili>a*o.

"ambin se puede ;acer con un fotmetro, despus de aFadir el precipitante. 8. "enemos otros mtodos, como los in*ica*o"es *e p13 fi=an las protenas a un indicador de p, y esto determina un cambio de color. $e utiliza en tiras reactivas. L, fundamentalmente, fi=an la alb2mina. 5s un (Cto*o (#$ #tili>a*o. A. &Cto*o Ki#"et: no es adecuado para orina. ,ay muc;as interferencias porque la orina es un lquido muy diluido. >. &Cto*os *e i2aci!n *e colo"antes: son mtodos muy utilizados - Dzul brillante de Coomasie3 5l colorante se fi=a a los radicales amonio de las protenas. $e ;ace una lectura en el espectrofotmetro a /O/ n(. La lectura es proporcional a la concentracin de protenas en la muestra. 5s el colo"ante (+s #tili>a*o, a#nF#e so'"eesti(a la al'D(ina. - Eo=o #onceau3 5l procedimiento es el mismo. La lectura se ;ace a /:0 n(. 5s menos utilizado, porque tiene (enos sensi'ili*a*.

4.- #rotenas en lquido cefalorraqudeo. +eterminaciones

5n el LCE, la concentracin de protenas est entre 1/ 7 4/ (3E*L. Las protenas que encontraremos en el LCE son las *e 'a2o peso (olec#la" (fundamentalmente, alb2mina3 GG K IGZ del total! porque son las capaces de pasar la barrera ;ematoencef lica. La determinacin de protenas en LCE nos permite orientarnos para el diagnstico de algunas patologas. L adem s, nos permite conoce" el esta*o *e la 'a""e"a @e(atoence +lica. Cuando e%iste un proceso neopl sico, inflamatorio, etc< a#(enta la pe"(ea'ili*a* *e la 'a""e"a @e(atoence +lica. #or lo que aumenta la concentracin de protenas en LCE. ,ay algunas patologas, como la meningitis o los tumores, en las que la O P de protenas puede ser I400 (3E*L.

&Y

>.&.- )todos de determinacin de las protenas en LCE3

&. &Cto*os t#"'i*i(Ct"icos: con agentes precipitantes a. Tcido tricloroactico b. Tcido sulfosaliclico 8. &Cto*o *e Ki#"et: .o es demasiado 2til, a no ser que se concentre la muestra. (#asa lo mismo que con la orina!. $e forma un compuesto coloreado, que se medir espectrofotomtricamente.

A. &Cto*o *e LoM"$: se utiliza en reactivo folin ciocalteau. a. 5n la primera reaccin3 muestra pre-tratada con una solucin alcalina de sulfato de cobre. 5l cobre reacciona con las protenas, y se forma un comple0o protena cobre. b. 5n la segunda reaccin3 Las protenas reducen los colorantes cidos (azul de molibdeno y azul de tungsteno! y dan lugar a un c"o(!3eno que es p"opo"cional a la concent"aci!n *e p"ote.nas en LCR. >. &Cto*os *e i2aci!n *e colo"antes: $e utiliza poco porqu es un mtodo que no se puede estandarizar. a. Dzul brillante de Coomasie b. Eo=o #onceau

&IELO&A &PLTIPLE: 5nfermedad neopl+sica (ali3na que produce la formacin de un clon de clulas plasm ticas en mdula sea. 5ntrara dentro de las 4ammapatas monoclonales. - Dfecta a personas de entre G' y H' aFos. L no tiene predileccin por ning2n se%o (se da con igual proporcin en ;ombres y mu=eres!. - $e caracteriza por (Dltiples t#(o"es !seos. Los tumores m s caractersticos afectan al cr neo, aunque se suelen e%pandir por todo el cuerpo. - $e asocia con la alteracin de diversas inmunoglobulinas, siendo el m s frecuente el (ielo(a po" alte"aci!n *e las I34 (H'Z de los casos!. "ambin puede estar afectada la 0gD (8'Z casos!, 1 -- S.nto(as o (ani estaciones cl.nicas i. $e caracteriza por lesiones !seas que se denominan en sacabocados< que provocan muc;o dolor esqueltico y prdida de fuerza. ii. Las clulas plasm ticas producen cantidades anormales de inmunoglobulinas, son fragmentos de cadenas ligeras que se conocen con el nombre de p"ote.na *e Kence-Qones. iii. Dlteracin de la produccin de las otras series ;ematopoticas3 disminucin plaquetas, ;emates, leucocitos y inmunoglobulinas normales. #or lo que nos acabamos encontrando ane(ia $ a#(ento *e la "ec#encia *e in ecciones. iv. D nivel del laboratorio3

8' (umento de las protenas sricas totales, por la gran proliferacin del clon. #or lo que ;ay una gran cantidad de protena anormal de JenceXones. +isminucin de la alb2mina. Proteinuria por prdida de la protena KQ po" o"ina. Lesin renal por precipitacin tubular de la protena JX. #resencia de la protena Jence-Xones en plasma, cuando el riFn ya est muy afectado. .ormalmente, la determinaremos en orina. +estruccin e%cesiva de los ;uesos. Como consecuencia se libera un e%ceso de calcio, por lo que ;abr una hipercalcemia en sangre. (umento del cido .rico ,hiperuricemia1, por destruccin de las clulas. La destruccin de los cidos nucleicos, da como producto metablico cido 2rico. Dlteraciones de gammaglobulinas. $ustitucin de clulas normales por clulas malignas en mdula sea. +ar como resultado ane(ias 3"a=es (por disminucin de ;emates!, @e(o""a3ias (por disminucin de plaquetas! y in ecciones (por disminucin de leucocitos!

A&ILOIDOSIS: 5nfermedad que se caracteriza por el c2mulo de protenas fibrilares entre las clulas de todos los rganos.