UNIVERSIDAD POLITCNICA SALESIANA REA DE CIENCIAS DE LA VIDA ESCUELA DE BIOTECNOLOGA DE LOS RECURSOS NATURALES

CULTIVO DE ANTERAS Y MEJORAMIENTO DE PLANTAS

FITOMEJORAMIENTO

OCTAVO SEMESTRE

CAROLINA ROBALINO GEOVANNY PATIO GABRIEL SALAZAR JENIFER JARAMILLO

DMQ, 14 de enero de 2014

INTRODUCCIN La biotecnologa est aportando productos revolucionarios en cuanto al mejoramiento de plantas, entre los beneficios est el perfeccionar las tcnicas ya existentes y proporcionar apoyo a programas de mejoramiento, permitiendo que se fijen sistemas genticos de gametos individuales reducidos y fciles de evaluar en cualquier etapa de un programa de mejoramiento. Se descubri en 1964 y se ha extendido en ms de 150 especies limitndose a cultivos de importancia econmica. Est tcnica est limitada debido a renuencia a la regeneracin de plantas y los bajos rendimientos de plantas haploides que han generado un lento desarrollo.

CULTIVO DE ANTERAS Las anteras inmaduras en donde se encuentra el polen en una etapa determinada se colocan en medios para que se forme embriones o callos. Formando plantas haploides estriles aunque suele ocurrir una duplicacin espontnea de cromosomas en las etapas de desarrollo del callo y regeneracin de la planta.

CONDICIONES QUE AFECTAN EL CULTIVO DE ANTERAS Genotipo de las plantas donantes: este factor es el ms importante, la variabilidad se ha hallado entre especies y dentro de ellas y se ha demostrado la heredabilidad particularmente en cultivos de arroz. Adems la capacidad genotpica se ha

determinado rasgos heredados independientemente respecto a componentes especficos de la andrognesis como la induccin de callo y la regeneracin de plantas.

Albinismo: factor especial de los cereales, es la ocurrencia de plantas albinas procedentes de polen. Las variedades albinas se caracterizan por una alta regeneracin de la planta aunque no se da en los hbridos. No se comprende plenamente el fenmeno pero se sabe que est relacionado con la supresin del ADN de los plstidos y la deficiencia de ARN ribosomal de los plstidos. La regeneracin de plantas en los hbridos F1 es mayor que el promedio de los valores del progenitor respecto a ese factor en las variedades progenitoras adems muestra heterosis. Al usar una planta hbrida como donante de anteras se espera que aumente el nmero de plantas productoras de polen.

FISIOLOGA DE LAS PLANTAS DOMINANTES El fotoperiodo, la intensidad de la luz, la temperatura y la nutricin mineral de las plantas dominantes influyen en el rendimiento de los embriones procedentes de micro esporas. Solo el polen que carece de la mayora de sus elementos estructurales, que presenta una tincin suave y de tamao pequeo (es decir inmaduro), ser idneo para iniciar una ruta de desarrollo embriognico, la frecuencia de dichos granos de polen est presente al comienzo de la floracin , por el estado de desarrollo de las plantas dominantes . Desarrollo del polen: las pequeas diferencias en el desarrollo del polen daran lugar a cambios notables en la produccin de plantas derivadas de polen. La mejor respuesta se obtuvo cuando las anteras se cultivaron en una etapa del desarrollo del polen comprendida entre la micro espora tarda y el polen temprano, as el punto de divergencia hacia una va andrognica est marcado por la ocurrencia de una divisin mittica ecuacional de las micro esporas. Figura 1. Pre tratamiento de anteras: la temperatura baja o alta, con otros estmulos tiende a aumentar la produccin de plntulas, por ejemplo el tratamiento de las anteras o de las panculas de arroz con 35C durante 10 a 15 minutos, seguido por un periodo de 8 das a 10C, aumenta la respuesta al cultivo de anteras .El tratamiento con frio se relaciona con una disminucin en el albinismo de cereales.
Figura 1: Estado ptimo para la induccin al desarrollo embrionario del polen.

MEDIO DE CULTIVO La tcnica del cultivo de anteras en medio lquido (Chen, 1986) eleva enormemente el rendimiento de las plantas andrognicas, pero existe una correlacin entre el medio de induccin del callo y la tasa de regeneracin de plantas en el arroz, un porcentaje mayor de regeneracin se puede obtener de los callos si estos se inducen en un medio lquido y no en un semislido.

La adicin de extracto de papa al medio de induccin aumenta la produccin de plantas de polen, adems del tipo de agente gelatinizador, otros componentes como la sacarosa y los reguladores de crecimiento, tambin desempean un papel en la andrognesis. En general se requieren niveles ms altos de sacarosa para la induccin al callo y ms bajos para la regeneracin de plantas. En el cultivo de anteras el embrin y el callo requieren generalmente una mayor concentracin de auxina que la regeneracin de plantas.

CULTIVO DE ANTERAS APLICADAS AL FITOMEJORAMIENTO El Potencial que posee el cultivo de anteras surge de la constitucin gentica de las clulas del polen. Las clulas del polen de los hbridos F1contienen la dotacin gentica de las plantas paternas y las recombinaciones esperadas segn las proporciones mendelianas. Estas clulas son haploides y permiten al mejorador seleccionar eficazmente los recombinantes deseables, alcanzar la homocigosidad constituye una de las

aplicaciones ms importantes del cultivo de anteras en el desarrollo de variedades nuevas ya que el tiempo, espacio y los costos necesarios para desarrollar lneas verdaderamente mejoradas disminuyen considerablemente. Especies econmicamente importantes en los que se ha integrado esta tcnica con el mejoramiento practica: arroz, cebada, trigo, papa, tabaco, colza oleaginosa y maz.

VARIEDADES OBTENIDAS MEDIANTE EL CULTIVO DE ANTERAS Generan una produccin rpida de plantas homocigotas diploides Es til en especies de ciclo largo o cuando los cultivos de ciclo corto se desarrollan lentamente (1 cultivo por ao). Ejemplos: Arroz: 7 a 8 meses para obtener homocigocidad compara a los 4 o 6 aos empleando tcnicas tradicionales Trigo Invernal: Se ahorran de 3 a 4 aos en el proceso de mejoramiento Tabaco: Presenta el sistema ms avanzado para el desarrollo de haploides duplicados

Trigo, Cebada y Arroz: De 14 variedades mejoradas, 4 se han mejorado con la intervencin de un haploide duplicado. CULTIVO DE ANTERAS EN ARROZ

El trabajo inicial (1980-1981) , con el cultivo de anteras de arroz mediante la colaboracin del Programa de arroz

se desarroll

y Unidad de Investigacin

Biotecnologa CIAT , los cuales implementaron un programa de produccin a gran escala de plantas derivadas del cultivo de anteras, buscando acelerar el desarrollo de las mejores variedades de arroz, debido a las limitaciones de este cultivo ya que depende del genotipo, nmero de plantas regeneradas procedentes polen es bajo, limitacin que presentan los hbridos al manifestar heterosis en respuesta cultivo de anteras. En el caso del arroz este proceso, que se inicia mediante la formacin de un tejido no diferenciado que se denomina callo y culmina en la formacin de embriones y plantas, se conoce como andrognesis.

Se induce la formacin de micro callos colocando las anteras en un medio cuya composicin estimule selectivamente la divisin mittica de las microsporas, a expensas de las clulas somticas presentes en el filamento, el tejido conectivo y la pared de la antera. El medio para inducir esa formacin debe tener altas concentraciones de auxinas. El cultivo de anteras es una tcnica para la produccin de haploides y/o plantas diploides las cuales son un gran potencial para los mejoradores de plantas. La haploida puede intervenir en el mejoramiento de las plantas autgamas de dos modos diferentes. De una parte, ella facilita la identificacin y seleccin de mutantes recesivos a nivel de plantas y de clulas. De otra parte, la induccin de haploides en los hbridos, seguido de un doblamiento cromosmico permite la obtencin de lneas perfectamente homocigticas evitando una larga serie de autofecundaciones. La haploida acelera notablemente los programas de seleccin despus del cruzamiento. Los principales procedimientos para desarrollar la metodologa son los siguientes: Seleccin de progenitores Cruces hechos seleccin de plantas f1 (100 plantas cruce) Escisin y cultivo de anteras anteras / cruce) 100 anteras / frasco 100 frascos / cruce (10000

Induccin de callo Regeneracin de plantas R1 Semilla R2 (homocigtica)

40% (400 callos / cruce) 2 % anteras (200 plantas) 50 % (100 lneas R2/ cruce) 7 MESES 5

Evaluacin de plantas R2 y semilla R3 MESES

20 % (20 lneas r3 / cruce)

Calidad de grano, tipo de planta, enfermedades, toxicidad de hierro, temperatura baja Evaluacin de R4 y R5 en campo de agricultores. Multiplicacin de semillas 3 4 aos

HAPLOIDES DUPLICADOS DEL CULTIVO DE ANTERAS Estabilidad Gentica: Generan progenies homogneas, las cuales se pueden usan para fines de mejoramiento. Se obtienen lneas estables, homocigticas y diploides

mediante la duplicacin de los cromosomas de clulas haploides. Existe inestabilidad en plantas derivadas de polen, llamada variacin gametoclonal. Las plantas homocigotas demuestran estabilidad total a medida que aumentan las generaciones. La segregacin R2 ocurrida en plantas de arroz se gener gracias a los siguientes fenmenos: a) Variacin en la estructura y numero de los cromosomas b) Origen de las plantas c) Mutaciones genticas El nivel en que debe realizarse la andrognesis depender del sistema de mejoramiento y de los objetivos de este. Desempeo agronmico: No se encontraron diferencias agronmicas (rendimiento, altura de la planta, fecha inicial de floracin) entre plantas de cebada multiplicadas por los siguientes mtodos: a) Haploides duplicadas b) Lneas homocigticas desarrolladas por el mtodo del pedigr c) Descendencia de una sola semilla

Esto indica que el cultivo de anteras no reduce el rendimiento. Se pueden obtener lneas de haploides duplicados de alto rendimiento. La eleccin de las plantas progenitoras para hacer los cruzamientos es crtica para el comportamiento de los haploides duplicados.

EL FUTURO DEL CULTIVO DE ANTERAS Es el mtodo ms eficaz y accesible para crear plantas haploides. En cultivos de trigo, arroz y papa, se presentan las siguientes limitaciones: 1. Fuerte dependencia genotpica 2. Escaso nmero de plantas regeneradas Es necesario realizar comparaciones entre cultivos derivados mediante la

reproduccin por anteras y derivados por mecanismos convencionales. La principal ventaja es que se logra conseguir cultivos homogneos rpidamente. Los haploides duplicados presentan homogeneidad y estabilidad, lo cual permite realizar selecciones ms efectivas en cuanto a ciertos caracteres. Otras de las ventajas son: Obtencin de haploides duplicados a partir de hbridos F1 Es una fuente de variacin gametoclonal para el mejoramiento intravarietal Produccin de lneas homocigticas en especies altamente heterocigticas Permitir la rpida introduccin de caracteres citoplasmticos, como la esterilidad en ciertas variedades. Emplear las micro esporas y las clulas haploides como receptores para la transferencia de genes Crear y acrecentar reservas citogenticas y citoplasmticas de los principales cultivos.

Bibliografa
Chen, Y. (1986). Anther and pollen culture of rice. China Acad.: Publishing, Beijing.p.3-25. V. Nez. (2005). Cultivo de anteras y mejoramiento de plantas. En W. Roca, Fitomejoramiento (pgs. 272 - 293). Cali: UIB.