BIOFSICAy

Fronteiras

uidas
Propriedades elsticas da membrana variam segundo o tipo e a funo da clula
Ricardo Zorzetto

ada clula do organismo como uma metrpole agitada em que, em vez de carros e pessoas, circulam continuamente molculas e estruturas de tamanhos e tipos variados, essenciais para mant-la viva. Toda essa movimentao, por vezes frentica, ocorre em um espao limitado, denido por uma estrutura extremamente delgada e malevel: a membrana celular. Formado por uma dupla camada de lipdios, um tipo de gordura que lhe d a viscosidade de um leo no e o torna relativamente uido, esse revestimento das clulas abriga aqui e ali protenas incrustadas. Nos ltimos anos vem crescendo a compreenso de que a membrana, de aspecto frgil ao microscpio, desempenha funes bem mais complexas do que a de somente separar o contedo interno do meio externo das clulas. A membrana muito mais do que o pacote envolvendo o contedo celular, resume o bilogo Bruno Pontes, pesquisador da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ). Atualmente em um estgio de ps-doutorado no Instituto de Mecanobiologia da Universidade Nacional de Cingapura, no Sudeste Asitico, Bruno integra uma equipe no Rio que investiga as caractersticas fsicas da membrana celular e recentemente mediu, com nvel indito de preciso, suas propriedades elsticas. Coordenado pelo fsico Herch Moyss Nussenzveig, conhecido internacionalmente por seus
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estudos em ptica, o grupo da UFRJ inclui bilogos, matemticos, alm de, claro, fsicos. Em uma srie de testes feitos nos ltimos anos os pesquisadores usaram um feixe de laser bastante concentrado para manipular em laboratrio a membrana de clulas do crebro, do sangue e de outros tecidos. Com essa ferramenta chamada de pina ptica no ponto de maior concentrao, o laser induz o surgimento de dipolos eltricos que permitem atrair e mover objetos microscpicos e, por exemplo, manusear clulas vivas sem as danicar , eles constataram que tipos distintos de clulas apresentam propriedades elsticas de membrana diferentes. Em experimentos bastante delicados, Bruno usou o laser da pina para aprisionar esferas microscpicas de um material plstico e, em seguida, faz-las aderir a diferentes pontos da membrana das clulas. Segundos mais tarde ele puxava cada uma das esferas a uma velocidade constante at que se formasse um tubo alongado de membrana a fora necessria para esticar a membrana e formar um tubo da ordem de dezenas de piconewtons, alguns trilionsimos da fora que a gravidade exerce sobre uma ma. Medindo o raio do tubo e a fora necessria para form-lo, foi possvel obter as duas grandezas fsicas que determinam a elasticidade da membrana: a tenso supercial (resistncia a se

NIBSC / SCIENCE PHOTO LIBRARY

Captura: clula de defesa chamada macrfago (amarelo) emite prolongamentos e envolve uma hemcia, antes de a digerir

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romper) e a rigidez de curvatura (resistncia a se dobrar). Em alguns casos, a elasticidade da membrana variou tanto de um tipo celular para outro que, segundo Nussenzveig, saltou aos olhos que deve existir uma relao direta entre as propriedades da membrana e a funo que a clula desempenha no organismo.

s neurnios, as clulas mais abundantes no crebro, responsveis pelo armazenamento e pela transmisso de informaes, foram tambm aquelas com membrana mais flexvel entre os cinco tipos de clula avaliados. Com formato bastante caracterstico, o neurnio tem uma regio mais volumosa, o corpo celular, onde ca o ncleo, e outra composta por prolongamentos mais estreitos e alongados, os axnios e dendritos, por onde os sinais eltricos trafegam at chegar ao neurnio seguinte. No crebro, um neurnio se conecta a outros por meio dessas extenses que podem ser remodeladas constantemente. Como preservam essa plasticidade e so bastante assimtricos, faz sentido, segundo o grupo da UFRJ, que sua membrana seja mais malevel. O segundo colocado nessa espcie de ranking de exibilidade foram os astrcitos, de acordo com os resultados que os pesquisadores publicaram em julho deste ano na revista PLoS One. Os astrcitos tm a aparncia de estrela e so o segundo tipo de clula mais abundante no crebro, onde desempenham os papis essenciais de nutrir os neurnios e de regular a formao de sinapses, conexes entre um neurnio e outro. Curiosamente, a clula cerebral com membrana mais rgida tambm a que costuma ser mais ativa e capaz de sofrer mais deformaes: a micrglia. Semelhante ao astrcito, mas com prolongamentos mais extensos, a micrglia a principal clula de defesa do sistema nervoso central. Com esses prolongamentos, ela sonda o ambiente o tempo todo procura de clulas doentes e agentes infecciosos. Quando os encontra, emite prolongamentos e os engloba para em seguida os destruir, num processo chamado fagocitose. Na interpretao dos pesquisadores, faz todo o sentido que as propriedades fsicas da membrana variem segundo o tipo de clula. Anal, clulas diferentes desempenham funes distintas no organismo.
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A membrana faz a interface entre o interior da clula e o meio externo, permitindo a interao Pesquisadores da UFRJ usaram entre ambos, lembra o fsico, pinas pticas para extrair esferas coordenador do Laboratrio de plsticas aderidas superfcie Pinas pticas da UFRJ. Ela das clulas e medir propriedades tambm detecta sinais qumielsticas da membrana cos e estmulos mecnicos do ambiente ao redor e os transmite para o interior da clula. Ao mesmo tempo, serve de plataProjeo da forma para a clula exibir sinais membrana para o restante do organismo, Esfera indicando, por exemplo, a necesplstica sidade de se produzirem antiNeURnIO corpos. Alm disso, a membrana d forma clula e tambm se deforma, permitindo clula se mover por meio da emisso de projees, conclui. Nos experimentos feitos na UFRJ, Bruno e os outros pesquisadores da equipe de Nussenzveig constataram tambm que a membrana da micrglia FONTE HeRCh MOYSS NUSSenZVeIG e BRUnO POnTeS / UFRJ apresenta as mesmas propriedades elsticas da membrana Para o grupo da UFRJ, uma origem de outras clulas de defesa: os macrfagos, que so produzidos na medula dos embrionria comum pode explicar o fato ossos e lanados na corrente sangunea, de a membrana dos macrfagos e a das por meio da qual se espalham pelo corpo micrglias compartilharem as mesmas (com exceo do sistema nervoso cen- propriedades elsticas. Ambas as clulas tral). De modo semelhante micrglia, so provenientes da mesoderme, uma os macrfagos tambm realizam fago- das trs camadas de clulas que forcitose, emitindo prolongamentos que mam o embrio em seus estgios iniidenticam, englobam e destroem tanto ciais (as demais clulas do sistema nerclulas velhas como agentes infecciosos voso central se originam na ectoderme). E conservam muitas caractersticas em e partculas estranhas ao organismo. comum, embora migrem para regies diferentes do corpo durante o desenvolvimento a micrglia vai para o sistema nervoso central, enquanto o macrfago circula pelos tecidos perifricos. Origem So como irmos que foram criados embrionria juntos na infncia e depois de adultos foram viver em pases diferentes, compara comum pode Bruno. Eles preservam muitas caractersticas em comum, embora vivam separados explicar e em contextos diferentes. Nussenzveig lembra que tanto a micrglia quanto o mapropriedades crfago tm de suportar foras intensas e elsticas grande deformao da superfcie durante a fagocitose, o que justicaria que tivessemelhantes sem membranas mais resistentes. Essa rigidez, porm, no permanenentre clulas te. Ela cerca de quatro vezes superior da membrana dos neurnios quando diferentes a micrglia e o macrfago esto inativos, em um estado de dormncia. E cai a

Puxa, dobra e estica

Protena da membrana

NeURnIO

MembRAnA CeLULAR

Ao ser puxada, a membrana arrasta com os lipdios o citoesqueleto de actina

Ncleo celular

Camada dupla de lipdios

CITOEsQUElETO
Proje o da me mbrana

Laser permite mover a esfera e esticar a membrana, que se deforma e origina um tubo como o que a clula emite na fagocitose

Sentido da fora

Contato entre a esfera plstica e a membrana

Feixe de laser que movimenta a esfera plstica

cerca de metade da inicial quando essas clulas de defesa so ativadas. Os pesquisadores registraram esse aumento de exibilidade quando trataram os macrfagos e as micrglias com compostos encontrados nas paredes de bactrias. Esses compostos despertam as clulas de defesa e as tornam ativas. A diminuio da rigidez de curvatura facilita a essas clulas se dobrarem e emitirem prolongamentos, preparando-se para fagocitar, explica Nussenzveig.
iMaGeM bRUnO pOnTeS / UFRj infoGrfico AnA pAULA CAmpOS ilustraopeDRO hAmDAn

semelhana que encontraram entre macrfagos e micrglias tambm foi observada entre astrcitos e clulas de glioblastoma, um tipo devastador de tumor cerebral que resulta da proliferao descontrolada de astrcitos. Ainda no sabemos os detalhes de como essas propriedades inuenciam a funo de uma clula, diz Bruno. Mas o fato de as constantes elsticas mudarem de acordo com o ambiente e o estado em que a clula se encontra certamente exerce alguma influncia sobre o seu desempenho, conta o bilogo, que em Cingapura trabalha com a equipe de Nils Gauthier tentando compreender melhor como essas propriedades elsticas da membrana poderiam orquestrar uma srie de fenmenos no interior da clula.

Esses so indcios bastante consistentes de que as propriedades elsticas da membrana conservam uma relao direta com a funo da clula no organismo, diz Nussenzveig. No trabalho publicado na PLoS One, a equipe da UFRJ demonstrou tambm que a exibilidade da membrana no depende apenas dos lipdios que a formam. O que determina em grande parte sua rigidez o chamado citoesqueleto de actina: uma rede difusa de lamentos da protena actina que se distribuem pelo interior da clula e se ancoram nas protenas aprisionadas na membrana. Antes desse trabalho, se acreditava que os tubos de membrana que se formam quando a clula manipulada com uma pina ptica fossem constitudos de membrana pura, ou seja, quase exclusivamente lipdios. O grupo da UFRJ demonstrou que ao puxar a membrana, junto com os lipdios, tambm se arrasta o citoesqueleto. Observaes anteriores, realizadas pelo grupo do Michael Sheetz, diretor do Instituto de Mecanobiologia em Cingapura, onde Bruno faz seu ps-doutorado desde o incio do ano, no levavam em considerao a inuncia dessa rede de bras proteicas. Essa situao, para os pesquisadores da UFRJ, no condiz com a realidade. Uma clula com membrana pura, desacoplada do citoesqueleto, no existe porque

seria muito instvel, explica Nussenzveig. Na clula, a membrana ca ancorada em uma espcie de tapete de actina, o crtex, que lhe confere maior rigidez. Seu grupo tambm verificou que a membrana das clulas dezenas de vezes mais resistente do que se imaginava. Especialista em ptica e criador do Laboratrio de Pinas pticas da UFRJ, ele e os fsicos Nathan Bessa Viana e Paulo Amrico Maia Neto perceberam que, de um modo geral, as pinas pticas elas consistem em um sistema de laser acoplado a um microscpio sofriam de uma espcie de defeito de viso, que interferia nas medies. Esse defeito uma aberrao ptica chamada astigmatismo, uma alterao no foco do laser diminui a fora que ele capaz de exercer. Depois de 13 anos estudando o assunto, a equipe da UFRJ arma ter nalmente identicado a causa do problema e encontrado uma forma de corrigi-lo. O trabalho descrevendo essas correes j foi submetido e deve ser publicado em breve, conta Nussenzveig. Finalmente a pina est completamente entendida a partir de primeiros princpios, diz o fsico. Com isso ele acredita que seu grupo conseguiu o controle completo sobre a pina e como aumentar seu poder de captura. At os nossos trabalhos, a calibrao era feita de modo indireto, comparando com fora hidrodinmica, causada pelo atrito da microesfera plstica com o uido, conta. Como consequncia da calibrao menos precisa dos instrumentos, viam-se diferenas grandes, da ordem de at 10 vezes, nas medies feitas por laboratrios distintos. Nosso grupo o nico que at o momento obteve a calibrao absoluta e nossos resultados so conveis dentro da preciso que possvel alcanar em biologia celular, arma Nussenzveig, que, aos 80 anos, continua entusiasmado com suas pesquisas e sabe que ainda se est longe de conseguir um modelo fsico da membrana celular. H teorias que procuram analogias com materiais que a gente conhece para descrever o funcionamento da membrana das clulas, conta. Mas so rudimentares. No basta tratar os materiais como sistemas inertes, passivos. preciso levar em conta as reaes da clula como sistema vivo. n

Artigo cientco
PONTES, B. et al. Membrane elastic properties and cell function. PLoS One. 3 de jul. 2013.

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