COMPLEXUL MAJOR DE HISTOCOMPATIBILITATE (MHC)

Cursul V: Major Histocompatibility Complex (MHC)

1

Semnificaia MHC

Rol n rspunsul imun Rol n transplant Rol n predispoziia fa de boli

MHC a fost iniial recunoscut ca fiind o reg. genetic

controlnd principala barier a transplantrii esuturilor

Studiul MHC s-a dezvoltat datorit experimentelor de transfer al tumorilor. n 1933, J.B.S. Haldane a recunoscut faptul c imunitatea fa de tumori nu era dirijat mpotriva unei caracteristici unice a

tumorii, ci se datora unor Ag ale esuturilor N

prezente pe suprafaa tumorilor, similar Ag de grup sanguin

Aceste Ag sunt cele care determin dac o tumor

aprut ntr-o specie de animale inbred va crete

i la animale din alt specie inbred.

n 1930 Gorer lucreaz pe linii de oareci tehnica transplantului tumoral. Utilizeaz 2 linii de animale i observ c: dac se transplanteaz o tumor de la de linia A la B, atunci tumora, iniial este acceptat pt. ca dup 1012 zile s fie respins; dac . A este imunizat mai nti cu celule tumorale provenite de la B i apoi se transplanteaz tumora, aceasta nu se dezvolt. Iniial s-a crezut c este rezultatul Ac dezvoltai fa de celulele tumorale;

dac i A a fost imunizat n prealabil cu celule N provenite de la B i apoi s-a transplantat tumora, aceasta nu crete.
4

n 1946 Snel i Little obin linii pure (cosanguine) de

genetic identici i observ c unele sunt 100%

sensibile, iar altele rezistente la apariia tumorii.

Ei demonstreaz c prinderea sau respingerea

unui esut depinde att de structura antigenic

a donatorului ct i de cea a receptorului i

denumesc Ag rspunztoare de rejet drept

antigenice de transplantare sau compatibilitate

histologic.
5

Vor fi formulate ideile de baz pt imunologia de

transplant, legile lui Snell:

transplantul de esut dintre membrii unei linii pure (inbred) sunt acceptate n totalitate; transplantul de esut prelevat de la un donator aparinnd unei linii inbred la o gazd ce aparine altei linii este respins

ntotdeauna;
transplantul de la o linie parental la descendenii de prima generaie (F1) este acceptat, dar de la F1 la parental este respins; cea mai mare parte din descendenii F2 (75%) accept

grefa, iar 25% o resping.

Tipuri de grefe
autogrefele sunt grefe efectuate n cadrul aceluiai individ; singrefele sau izogrefele implic transferul de esut N ntre indivizi identici genetic (singeneici) adic gemeni monozigoi sau animale din aceeai specie inbred.

alogrefele sau homogrefele reprezint transferul esutului N ntre indivizi genetic diferii (alogenici) din cadrul aceleai specii;
heterogrefele sau xenogrefele implic
transferul esuturilor ntre indivizi din specii diferite.
7

izogrefele i autogrefele supravieuiesc un interval de timp nedefinit. Grefele alogenice sau xenogenice duc la un fenomen de rejet imunologic, fenomen care nu poate fi mpiedicat prin utilizarea agenilor imunosupresori. Reacia de rejet : primar (apare n 14 zile) secundar (instalat n 7 zile). Rejetul grefei este un fenomen imunologic Reacia de rejet prezint att specificitate ct i
memorie.
8

Transplant = nlocuirea unui esut defect cu un alt esut, funcional

n n

Autotransplant de la/la acelai individ Isotransplant ntre doi indivizi identici genetic (gemeni) Allotransplant ntre doi indivizi genetic diferii, dar din aceeai specie Xenotransplant ntre dou specii diferite

Progrese in transplantul de organe

Exist 2 categorii de complexe genice:

complexul major de histocompatibilitate (MHC)

complexul minor de histocompatibilitate (mHC). La

toate speciile exist un singur MHC i mai multe mHC,

situate pe diferii cro , care controleaz sinteza unor molecule proteice. MHC nu se limiteaz doar la imunitatea de transplant, el are un rol major n generarea RI .

Principala funcie biologic a MHC este de prezentare

a fragmentelor peptidice din Ag (epitopilor) limfocitelor T.
12

Caracteristici ale antigenelor de histocompatibilitate

Ag de histocompatibilitate ( Ag de transplantare) sunt Ag prezente pe suprafaa esuturilor sau celulelor, care determin compatibilitatea sau incompatibilitatea esuturilor transplantate; Ag induc rspunsul imun al organismului gazd care poate cauza rejetul esutului transplantat; cele mai importante Ag de histocompatibilitate sunt produii genelor complexului major de histocompatibilitate (MHC).
13

Genele MHC sunt submprite n 3 clase: genele clasei I codific Ag de transplantare de pe suprafaa celular (implicate i n rspunsurile mediate celular) i Ag serologice (care induc formarea deAc); genele clasei II codific o serie de Ag numite Ag Ia (immune associated), exprimate primar pe limfocite; genele clasei II controleaz i nivelul rspunsului fa de anumite Ag i de aceea se mai numesc gene Ir (immune
response);

genele clasei III controleaz expresia unor componente ale sistemului complement.
14

ANTIGENELE IMPLICATE N TRANSPLANT Antigenele majore de histocompatibilitate (MHC/HLA) Antigenele minore de histocompatibilitate Alte antigene
De grup sanguin Specifice de esut superantigene

ANTIGENELE MHC
Clasificare: MHC clasa I - prezint antigene limfocitelor Tc CD8+ (citotoxice) - exprimate la suprafaa tuturor celulelor nucleate (-hematii) MHC clasa II - prezint antigene limfocitelor TH CD4+ (helper) - exprimate la suprafaa celulelor prezentatoare de antigen (APC) MHC clasa III - orice alte molecule codificate n zona MHC - fr rol n transplant MHC uman complex HLA (Human Leukocitary Antigen). Clasa I = gene A, B i C HLA-A, HLA-B and HLA-C Clasa II = gene DP, DQ i DR HLA-DP, HLA-DQ and HLA-DR MHC la oarece complex H-2.

- heterodimer

MHC clasa I

- 2 lanuri legate necovalent - lanul greu alfa (a1, a2, a3)(43kDa) - codificat de gene MHC - transmembranar - lant usor beta2-microglobulina (12kDa) - nu este codificat de gene MHC - nu traverseaz membrana MHC I nu pot fi exprimate n absena b2-microglobulinei a1 i a2 formeaz situsul de legare a Ag a3 are rol structural, nu intervine direct n legarea peptidului antigenic CD8 se leag la nivelul domeniului a3

MHC clasa I
b2microglobulina

antigenul

Situsul de legare antigenic poate fixa peptide a 8-10 AA

MHC clasa I leag peptide Ag i le prezint limfocitelor T CD8+

Rolul HLA I

Recunoasterea Atg de catre Lf T

citotoxice CD8+
In rejetul de grefa

MHC clasa II

- heterodimer - 2 lanuri legate necovalent -lant alfa (alfa1, alfa2) -lant beta (beta1, beta2) - ambele codificate in MHC - ambele transmembranare - ambele lanuri sunt necesare pentru exprimarea MHC II

- a1 i b1 formeaz situsul de legare al Ag - a2 i b2 au rol structural, nu intervin direct n legarea Ag - la nivelul domeniului b2 se leag CD4

MHC clasa II

antigenul

Lanul beta

Situsul de legare antigenic poate fixa peptide a 13 -18 AA

MHC clasa II leag peptide Ag i le prezint limfocitelor T CD4+

MHC clasa I

MHC clasa II

Peptid Situs de legare peptid

Membrana celulara

Genele MHC - cromozomul 6

class II
DP DQ DR

class I
B C A

B
2 2 1 1 2 2 3

C
1 1 1

A
2 3 9

DP

DQ

DR

Haplotip
= gene +alele de pe 1 crz care se transmite la descendenti Atg HLA I+II=polimorfe pt a recunoaste

fragm de atg care sunt si ele polimorfe

Rol: transplantul de organ
Haplotip identic100% = compatibilitate 100%
50% = 50% <50% = risc de rejet

Polimorfismul MHC
La nivelul unui singur locus genetic, o variaie >1% varianta Fiecare variant polimorfic = o alel Au fost identificate peste 1200 alele MHC la om

381
No of polymorphisms

317
Class I

Class II

657 alleles 185 91 2 19 89

492 alleles

20

45

a b a b DR DP

a b DQ

Data from http://www.anthonynolan.org.uk/HIG/index.html July 2000

La om, complexul MHC se afl pe braul scurt al cromozomului 6. MHC reprezint aproximativ 2% din ADN-ul cromozomului 6 i 1/3000 din totalul genomului uman MHC are un nr f mare de gene dispuse n 3 regiuni.

28

Nomenclatura (phnotypes)
HLA-A1, HLA-A2 ; HLA-B7, HLA-B8 ; HLA-Cw2, HLA-Cw4 ; HLA-DR-2, HLA-DR4 HLA-A1, A2 ; B7, B8 ; Cw2, Cw4 ; DR2, DR4 HLA-A1,2 ; B7, 8 ; Cw2, 4 ; DR2, 4

Gntique : transmission par haplotypes

Lhaplotype HLA

QuickTime et un dcomp resse ur GIF sont requis pour visualiser cette ima ge.

Classe II

Classe III

Classe I

QuickTime et un dcompresseur GIF sont requis po ur visualiser cette imag e.

29
ING 2003-4-139

Gntique : transmission par haplotypes

QuickTime et un dcompresseur GIF sont requis po ur visualiser cette imag e.

30
ING 2003-4-140

Gntique : contenu de lhaplotype humain

31
ING 2003-4-143

Gntique : polymorphisme
Produits de classe I
Srie HL A Nombre de spcif icits reconnues laide de la s rologie Nombre de cara ctres dtermins laide de llectrofocal isation 34 52 11 a2 a3
b2 m

H L A-A H L A-B H L A-C

18 28 8 a1

fb
% de caract re s e xprim s
ING 2003-4-146

ha

fb

ha

fb 0

fb 0
32

35 54 30 49

Gntique : polymorphisme
Produits de classe II
H L A -D R Srol ogi e A ll les 27 69 H L A -D Q 9 13A, 19B H L A -D R 7 8A, 31B

Gntique : dsquilibres de liaison

Haplotype HLA-B8, HLA-DR3 : Fc(B8-DR3) = F(B8) x F(DR3)

soit 0,9 % x 10 % = 0,9

D entre (Fo - Fc) : dsquilibre de liaison, ici D = 6,1

33
ING 2003-4-147

Gntique : rsum
1. 30 35 gnes sur les chromosomes 6 & 15. 2. Transmission par haplotypes. 3. Deux classes (I et II).

4. Chaque classe avec deux loci (sous-classes) A et B.

5. Les produits des gnes de chaque sous-classe se combinent pour donner une molcules HLA.

6. Plus de 59 allles par gne.

7. Un des systmes le plus polymorphe. 8. Diversit entre allle dun mme locus. 9. Diversit essentielle populations). limmunit (Immunit des

10. Diversit essentielle la reconnaissance du soi.

ING 2003-4-148

34

n regiunea MHC de clasa I exist 3 loci principali: HLA A, HLA -B, HLA -C, care codific moleculele clasice omonime HLA de clasa IA Regiunea MHC de clasa II HLA-D situat mai aproape de centromer are 23-25 de gene i pseudogene grupate n 3 subregiuni (subloci) principale, sau a genelor clasice: DR, DP, DQ. Fiecare subregiune conine 1 sau mai multe gene A i B care codific lanurile polipeptidice a, respectiv b. Pe lng genele clasice exist gene neclasice DM, DN, DO, gene care controleaz anumite etape ale procesrii Agului n APC (transportorul de peptide TAP-1, TAP-2) n strns asociere cu genele LMP-2 i LMP-7 (care codific componente ale proteasomilor un complex de enzime proteolitice), precum i pseudogene.
35

Regiunea MHC de clasa III

este situat ntre regiunile MHC-I i II, cuprinde alte gene care codific proteine cu funcii imune:
Proteine ale sist complement: C2, Bf (factor B), C4A, C4B Gena 21 steroid hidroxilazei implicat n sinteza hormonilor steroizi; Genele pentru dou citokine - TNFa i TNFb Dou proteine de oc caloric HSP70.2, HSP70.1, care au funcie de capion, se asociaz cu moleculele celulare alterate de stress, cldur, oxidare i le asigur transportul i eliminarea.
36

HLA este un complex multigenic, multialelic (polimorf), strns legat i cu o exprimare codominant. Caracterul poligenic este cauzat de faptul c exist 3 gene pt. HLA de clasa I i 3 perechi de gene a i b pt. clasa II, care codific proteine cu specificiti diferite n privina legrii peptidelor. Codominana: din fiecare halotip se exprim cte o alel pt. fiecare locus. De obicei persoana este heterozigot pt. fiecare locus. De ex: HLA-A5 A32. n cazul homozigoilor (gemeni univitelini) genotipul celor 3 loci va fi identic. Polimorfismul - pt fiecare gen exist alele multiple. Genele MHC sunt cele mai polimorfe gene cunoscute din organism. La capacitatea SI de a fi apt s rspund la o multitudine de ageni patogeni contribuie faptul c genele MHC sunt poligenice i polimorfe, deci pot lega o gam larg de peptide.
37

Transcomplementarea fenomen prin care apar molecule HLA hibride, cele 2 lanuri a i b, fiind codificate de gene din halotipuri diferite. Legarea: toate genele HLA se transmit n bloc de la prini la copii, ca o singur unitate denumit haplotip; descendenii vor avea deci o jumtate de haplotip de la mam i una de la tat. Dezechilibre de legare se refer la legarea mai strns ntre alela unui locus i alela altui locus. Aceste fenomene sunt frecvente n anumite populaii A1-B8-DR3 sau A3-B7-DR2.
38

O parte din MHC codific antigenele de histocompatibilitate HLA. Moleculele HLA codificate de genele MHC sunt divizate n dou clase:

antigene de clasa I : HLA-A, HLA-B, HLA-C, antigene de clas II : HLA-D (HLADP, HLA-DQ, HLA-DR).
39

Att moleculele de clas I ct i cele de clas II sunt componente ale suprafeei celulare. Antigenele MHC de clas I se gsesc pe suprafaa tuturor celulelor nucleate i pe plachete. Antigenele MHC de clas II se gsesc mai ales pe suprafaa macrofagelor, celulelor T umane activate, celule dendritice celulelor endoteliale i a limfocitelor B. Distribuia diferit a celor 2 tipuri de molecule MHC este consecina funciilor efector diferite ale celulelor T care le recunosc.
40

Distribuia moleculelor MHC

Structura moleculelor MHC

Moleculele MHC de clas I i II sunt glicoproteine de suprafa celular, cu structur i funcie similar, conin 10%

carbohidrai i 90% proteine.

41

Este constituit din 2 lanuri polipeptidice: a (lan greu), codificat n regiunea MHC b2-microglobulina un lan mai mic, asociat necovalent. Lanul a (44kDa) are domenii cu rol n recunoaterea i legarea peptidelor antigenice. Partea cea mai mare a lanului greu (a) este organizat n 3 domenii globulare (a1, a2, a3), care sunt expuse la suprafaa celulei. Lanul a are 340 de AA , 90 n fiecare domeniu i 60 n fiecare bucl nchis prin cte o punte disulfidic. Lanul greu este ancorat n membran printr-o poriune hidrofob transmembranar, format din 40 de reziduuri de AA . b2-microglobulina (12 kDa), este o protein care migreaz la electroforeza serului mpreun cu b globulinele, nu este codificat n regiunea MHC (gena se afl pe cromozomul 15), nu este polimorf i nu prezint o 42 regiune transmembranar.

MHC I

Structure molculaire
CMH de classe I
Poche (peptides)
a1 b2m a2 a3 a1 a2

CMH de classe II Poche (peptides)

b1 b2

43
ING 2003-4-149

Structure molculaire

QuickTime et un dcomp resseur GIF sont requis pour visualiser cette ima ge.

44
ING 2003-4-150

Structure molculaire

45
ING 2003-4-152

Buclele, n structur tridimensional, formeaz o ni (ntre a1 i a2) destinat legrii epitopilor din Ag care va fi prezentat de APC. Ancorarea celular este realizat de o regiune transmembranar i una intracitoplasmatic (C-terminal).

Aspectul tridimensional al moleculei a fost evideniat prin cristalografie cu raze X. Domeniul a1 i b2microglobulina (b2m) au secvena AA i structura compactat, meninut de puni S-S, similar cu cea a domeniilor Ig. Domeniile a1 i a2 se ncolcesc mpreun pt a forma o structur unic, o cavitate realizat dintr-un planeu rigid, cu structur de foie b plisate i 2 perei laterali creai din 2 spirale ale lanului 46 polipeptidic , dou a helixuri.

Aceast ni lung reprezint zona n care se leag peptida antigenic de molecula MHC. Peptida, format din aproximativ 9 AA este dispus sub form elongat, ancorat de feele interne ale a helixurilor, precum i la ambele capete fiind prezentat limfocitelor Tc. Din cei 9 AA, doar 2 sau 3 sunt specifici, reprezentnd punctele de ancorare, restul sunt indifereni. Din acest motiv o molecul MHC poate s lege o mare varietate de peptide.
(epitopul)
(ca ntr-un buzunar), 47

Structure molculaire

48
ING 2003-4-152

Rolul MHC de clas I a fost elucidat de R. Zinkernagel i P. Doherty, pornind de la constatarea c rezistena la o boal sau alta este competiia ntre capacitatea de multiplicare a agentului etiologic i capacitatea organism de a o mpiedica,iar cea mai eficient aprare n cazul infectiei virale sau cu alte microorganisme cu multiplicare intracelular o realizeaz limfocitul T citotoxic (LTc). Prin experiene efectuate pe oareci s-a evidenia c titrul virusului ajunge la maxim, n organismul inoculat, dup 2-3 zile. Prima armat instruit care apare i atac celula infectat viral este cea a limfocitelor T citotoxice dup 4-6 zile. Apar apoi (ntre ziua 6-10) factorii hepersensibilitii tardive,iar Ac ajung la un titru maxim de abia dup 10-14 zile. mpotriva unor astfel de inte
(celule infectate viral)

Rol biologic

rolul esenial l au aceast categorie de limfocite 49

n acelai timp s-a constatat, de ctre Terasaki i Gorrer, c animalele timectomizate neonatal, iradiate sau la care s-a practicat un drenaj limfatic prelungit accept ntotdeauna un transplant dar mor ulterior din cauza infeciilor bacteriene sau virale. Pt a preveni acest deznodmnt este suficient administrarea a 10.000 limfocite alogene. Concluzia este c limfocitele joac rol i n aprarea antiinfecioas i n transplantare.
50

Restricia de histocompatibilitate
LT citotoxic nu vede virusul liber ca atare, ci numai celula infectat viral. Acest fenomen este posibil deoarece virusul i trdeaz prezena exprimnd la suprafa o serie de determinani antigenici. Se realizeaz n acest fel o dubl recunoatere a celulei infectate viral de ctre LTc: pe de o parte a self-ului adic a MHC I prezente n mod natural pe propriile celule inclusiv pe cele infectate viral, iar pe de alt parte, prin receptorii specifici se cupleaz cu determinantul antigenic al proteinei strine virale. Aceast dubl recunoatere are ca scop eliminarea cel. proprii alterate prin infectarea viral sau cu un parazit intracelular, nainte ca acesta s se nmuleasc prea mult i s atace alte celule.
51

Ea are drept urmare imposibilitatea distrugerii unor cel. strine chiar infectate cu acelai virus, deoarece la nivelul acestora nu exist molecule MHC proprii. Aceast proprietate poart numele de
restricia de histocompatibilitate.

Toate cel. nucleate dintr-un organism animal, prezint anumite molecule sau Ag specific determinate de structuri ereditare i care l fac unic printre membrii aceleai specii. Aceste Ag de histocompatibilitate constituie cartea de vizit care singularizeaz un individ la fel ca i amprentele digitale. Datorit lor, SI are capacitatea de a recunoate ceea ce i aparine ca propriu (self) i ceea ce i este strin (non-self).
52

Modul de apariie a complexului MHC de clasa I peptid antigenic

Moleculele MHC de clas I prezint peptide derivate din proteoliza unor proteine endogene sintetizate n celul, constitueni naturali ai acestora sau ai unor virusuri ori bacterii care se replic n citoplasma celulei (citosol). Aceste proteine sunt degradate n citosol de ctre un complex de enzime proteolitice (proteazom), din care fac parte cele 2 structuri codificate de gene din MHC LMP2 i LMP7. Peptidele rezultate din degradarea enzimatic, formate din aprox. 9 AA, sunt apoi transportate n lumenul reticulului endoplasmatic rugos de ctre un sist. transportator de peptide care cuprinde proteinele TAP-1 i TAP-2 codificate de genele MHC de clasa II
53

n interiorul reticulului endoplasmatic peptidele astfel transportate se asociaz moleculei MHCI, la nivelul cavitii dintre domeniile a1 i a2 ale lanului greu. ntregul ansamblu este apoi stabilizat prin fixarea necovalent a molec. de b2m, nepermind fixarea altor peptide. Apoi, ansamblul este transportat n aparatul Golgi, unde se produce glicozilarea moleculei MHC (a lanului a), apoi prin intermediul unei vezicule de secreie ajunge la nivelul membranei celulare. Aici se realizeaz recunoaterea peptidei antigenice de ctre LT CD8 pozitive.
54

Receptorul acesteia este cel care poate face discriminarea dintre peptidele diferite prezentate n complexul peptid- MHC, o molecul HLA de un anumit tip se poate asocia cu mii de peptide (5x1011) care au 8-10 AA, dintre care doar 2-3 se ancoreaz n cavitate. TCR recunoate mai ales AA din partea central a peptidei pe cnd ancorarea sa de MHC se realizeaz n special la extremitile acesteia, pt formarea ansamblului trimolecular TCR peptid-MHC. Pt ca LT s poat fi activat sunt necesare aproximativ 1.000 de molecula HLA asociate cu aceeai peptid.
55

HLA et maladies auto-immunes

Lupus rythmateux dissmin Polyarthrite rhumatode Polyarthrite juvnile Sclrodermie systmique Syndrome de Gougerot-Sjgren Dermatomyosite Pemphigus vulgaire Pemphigode bulleuse Dermatite herptiforme Epidermolyse bulleuse avec auto-Ac Myasthnie Maladie d'Addison auto-immune Maladie de Basedow Myxo-oedme primitif Thyrodite d'Hashimoto Diabte insulino-dpendant Cirrhose biliaire primitive Hpatite chronique auto-immune Syndrome de Goodpasture Sclrose en plaque Syndrome de Guillain-Barr chronique Maladie coeliaque Maladie de Crohn Anmie de Biermer Purpura thrombopnique et anmie hmolytique Syndrome des antiphospholipides
ING 2003-4-168

DR3 ; C4Q0 et DR2 DR4 ; DR1 et DR10 DR5 DR3 ; DR5 et A9 DR3 DR3 DR4 ; DR6 DR5 DR3 ; DR7 DR2 DR3-DR5 DR3 DR3 ; DR5 DR3 DR3 ; DR5 DR3 ; DR4 DR3 DR3 ; CW7, DR2 DR2 DR3 DR3 ; DQ2 ; DR7 DR4 ; DR5 ; DR7 DR5 DR3 DR3
56

Rles des molcules HLA

Virus (Choriomningite lymphocytaire)

Souche A

Souche B

Peptide Du soi Cellules cibles infectes

Peptide viral LTC (anti-CML) Test de cytotoxicit

Prsentation

(A anti-CML)

LTC

LCToxicit
A infecte

+ -

Test de cytotoxicit
(A anti-CML)

LTC

LCToxicit
A non-infecte

LCToxicit
(A anti-CML)

LTC

B infecte 57

ING 2003-4-171

Rles des molcules HLA

Prsentation

58
ING 2003-4-172

Rles des molcules HLA

Prsentation

ING 2003-4-173

59

Rles des molcules HLA

Prsentation

Capture et apprtage

Prsentation CD4+ CD8+

OUI NON
Ovalbumine Peptides (ova) + CMH II

NON OUI
Gne de lovalbumine
ING 2003-4-175

Peptides (ova) + CMH I 60

Este format din asocierea necovalent a 2 lanuri polipeptidice a (34 kDa) i lanul b (29kDa), prezint fiecare 2 domenii extracelulare (a1, a2 i respectiv b1 i b2), o regiune transmembranar i o coad citoplasmatic. Ambele lanuri sunt codificate n regiuni HLA-D strns linkate. Majoritatea epitopilor HLA se gsesc la nivelul lanului b. Mai exist un alt lan (31 kDa), lan invariat (Ii) nu prezint polimorfism - , ale crui gene sunt plasate pe cro 18 la oareci, deci sunt distincte de cele pt MHC. Proteina Ii este unic faa de majoritatea proteinelor prin faptul c are o orientare opus n membran i un subset de molecule Ii este asociat cu proteoglicanul condroitin sulfat. Aceste trsturi particulare ale Ii sunt prezente i n cazul receptorului pt transferin. 61

MHC II

Rles des molcules HLA (Immunologie)

Lyse Natural Killer

Molcule p58. 1 p58. 2 p70 p70 (NKB1 ) p14 0 LIR 1 - ILT2 CD94 /N KG 2 A

PM (k D) 58 58 70 70 14 0 13 0 30 /4 3

Ligand s HLA-C HLA-C HLA-Bw4 HLA-Bw4 HLA-A3 et A11 Molculesde classe I Molculesde classe I

Famille

CD16 NH2

p58 (KIR) NH2

S S

Supe rfamille d es Ig S C2 S Supe rfamille d es Ig C2 S S Supe rfamille d es Ig

C2 C2

S S

Supe rfamille d es Ig Supe rfamille d es Ig

ITAM

Src PTK

ITIM
ITIM

Supe rfamille d es Ig Lec tine de type C

ZAP-70 Syk

SHP-1 SHP-2

62
ING 2003-4-177

Rles des molcules HLA (Immunologie)

Rpertoire des lymphocytes T
Diffrenciation

CORTEX

DN
R g, d, b

DP

g d pT-a b DN Apoptose (95 %) a b Ra CMH I DN

DP Expansion
(contact avec le CMH)

DP

CMH II a b CD4

Maturation (5 %)
SP (TCR)

MDULLAIRE
CD8

a b

g d PRIPHRIE

a b

Prthymocyte

SP

63
ING 2003-4-178

Antigenele MHC fac parte din superfamilia Ig. Examinarea structurii de baz a MHC I i II pentru a studia omologia dintre ele a demonstrat c ambele molecule pot fi considerate membri ai superfamiliei Ig: prezint
regiuni legate prin puni disulfidice, care au o structur teriar similar domeniilor constante sau variabile ale Ig.
64

McDevit observ la oareci o dependen a RI i sugereaz c s-ar datora MHC. El desemneaz genele responsabile de rspunsul imun drept gene Ir. Prin studii de hibridizare ntre linii pure de cobai, respectiv , a demonstrat c RI depinde de alt regiune, codificat pe acelai cro 6 la om, 17 la , situat n apropierea regiunii HLA-A, B, C. Aceast reg a fost denumit HLA-D, iar Ag rspunztoare de RI drept antigene ale rspunsului imun Ir. Aceste Ag nu apar la toate cel. nucleate ci doar la acelea implicate n RI : monocite/macrofage, LB, cel Langerhans, cel dendritice, cel endoteliate , i pe LT activat. Unele gene, care le codific, sunt polimorfe, iar altele monomorfe. Controleaz eficient RI prin implicarea n cooperarea LTmacrofag, LT-LB, ntre subseturi LT (Th-Ts), liza cel tumorale sau infectate viral prin cooperarea cu LTc i intervin n creterea sau suprimarea RI.
65

Rol biologic

Restricia de histocompatibilitate
Rolul Ag Ir este de a prezenta Ag limfocitului Th, acesta nefiind capabil s recunoasc Ag strine solubile dect dac sunt prezentate n conjuncie cu Ag MHC II. Pt. a putea fi vzute, intervine macrofagul care prelucreaz Ag , l fragmenteaz, iar peptidele rezultate sunt prezentate la nivelul membranei celulare n contextul AgIr(MHC de clasa II). i aici este valabil modelul dublei recunoateri al molec. MHC I. Dac un Ag este prezentat n conjuncie cu Ag MHC II unui LTh atunci se instituie un RI.Dac acelai Ag este prezentat n conjuncie cu un produs al genelor din regiunea Ir de la alt individ nu se produce stimularea subpopulaiei LTh, deci funcioneaz restricia de histocompatibilitate. n realizarea unui RI adecvat i eficient, trebuie avut n vedere o cascad de evenimente (cooperare celular). Aceasta nseamn o coordonare a activitii limfocitului Th innd cont de rolul i intervenia macrofagului, a LT supresor/citotoxic i/sau a altor subseturi limfocitare T i a subpopulaiei limfocitelor B. 66

Modul de apariie a complexului MHC de clasa II peptid antigenic Ag provenite de la agenii patogeni extracelulari fagocitai, sau moleculele strine endocitare i chiar microbii intracelulari care nu se replic n citosol ci n veziculele din citoplasm au al soart. Ele sunt prezentate limfocitelor Th CD4+ de ctre moleculele MHC de clasa II. Acestea, dup sinteza n ribozomi, sunt asamblate n lumenul reticulului endoplasmatic sub form asociat cu un lan invariabil Ii, care mpiedic fixarea unei peptide n cavitatea format de domeniile a1 i b1 ale moleculei MHC. Complexul astfel format este glicozilat n aparatul Golgi i transportat apoi n endozomi sau lizozomi.
67

Aici, n mediu acid are loc proteoliza parial a lanului Ii, cu meninerea legat de MHC a unei poriuni trunchiate a acestuia, denumit CLIP (class II associated invariant chain peptide). Peptida respectiv evit legarea unei peptide antigenice de MHC II. O molecul similar MHC II, numit HLA-DM, catalizeaz eliberarea lui CLIP i legarea unei peptide antigenice. Prin clivajul ulterior, sau prin disociere, CLIP este eliminat lsnd locul unei peptide rezultate din prelucrarea Ag n endozomi. Cavitatea moleculei HLA de clasa II poate lega peptide mai mari, de 13-34 AA, derivate din proteazele acide din interiorul endozomilor i lizozomilor.
68

Aceste peptide se leag, ntr-o conformaie extins, de-a lungul anului avnd extremitile libere (nelegate). Scheletul lor aminoacidic este meninut n poziie culcat de interaciunile bilaterale anului. Deosebirile dintre secvenele AA dintre acestea sunt date de diferenele alelice ale molec. MHC i influeneaz capacitatea de legare specific a diverselor peptide. Spre deosebire de alte molecule care leag peptide MHC nu-i poate realiza structura spaial compact i stabilitatea dac nu are legat peptida specific. n cazul n care nu este stabil, molecula este rapid disociat n lanurile consecutive.
69

Complexul peptid: MHC II este transportat pe membrana celulei printr-o vezicul, ca i n cazul MHC I. Recunoaterea lui se face de LTh CD+ al crui receptor recunoate specific secvenele de AA dispuse n interiorul anului, uneori chiar pe cele terminale care atrn n afara anului, care duce la realizarea ansamblului tridimensional TCR peptidMHC de clasa II.
70

Funciile MHC Molec. MHC de clas I i II sunt importante n controlul RI,ntr-un proces numit restricia MHC Moleculele MHC sunt implicate n: 1. Prezentarea antigenului 2. Mol. MHC I i II pot servi drept inte pentru RI n rejetul grefelor 3. Semnalizarea prin intermediul moleculelor coreceptor (MHC I CD8, MHC II CD4) pentru cel. T citotoxice i respectiv, T helper 4. Producerea de Ac anti-MHC la recipientul incompatibil (Ac tip IgM i IgG) n cazul transplantelor
71

5. Reacia limfocitar mixt (MLR): rspunsul limfocitelor T la Ag MHC, cu transformarea blastic a limfocitelor stimulate 6. Reacia gref contra gazd (GVH): apare la introducerea celulei imunocompetente ntr-un animal histocompatibil incapabil s le rejecteze; aceste cel. pot s rspund mpotriva gazdei i s produc reacie gref contra gazd; reacia GVH reprezint echivalentul in vivo al MRL
7. Reacia de limfoliz alogeneic mediat celular (CML): dup efectuarea unei MLR, celulele T citotoxice sensibilizate lizeaz limfocitele stimulatoare; CML reprezint echivalentul in vivo al reaciei de rejet al grefei.
72

Transplantele efectuate ntre indivizi identici HLA pot fi respinse dei ntr-un interval de timp mai lung, cu excepia gemenilor monozigoi. Acest rejet reprezinta consecina existenei Ag minore de histocompatibilitate Astfel, cnd donorul i recipientul sunt identici MHC, dar difer genetic la nivelul altor loci, rejetul grefei apare dup un interval de timp mai mare. De aceea, polimorfismul genetic responsabil de respingerea transplantelor identice MHC este denumit Ag minore de histocompatibilitate sau Ag H minore. Rspunsul fa de Ag minore de histocompatibilitate este mai puin intens dect fa de diferenele la nivelul MHC deoarece frecvena limfocitelor T specifice este mai redus.
73

Cel. care rspund la Ag H minore sunt frecvent limfocite T CD8+, ceea ce nseamn c majorit Ag H minore este format din peptide legate n cupa moleculelor MHC I self. Totui peptidele prezentate de mol. MHC II self pot s participe la rspunsul fa de grefele identice MHC. Se tie c Ag minore de histocompatibilitate sunt peptide provenite din proteine polimorfe, care sunt prezentate de ctre moleculele MHC ale grefei. Teoretic orice protein produs de o celul poate furniza peptide care s fie recunoscute ca Ag H minore. Cum celulele grefei exprim Ag minor de histocompatibilitate, rspunsul fa de aceste Ag va distruge ntreaga gref. Pt aceasta, succesul transplantrii esuturilor depinde de utilizarea drogurilor imunosupresoare puternice
74