1

.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.

Anlisis de la estructura fsica, morfolgica y bioqumica de la semilla de Ahuyama
(cucrbita sp.). Determinacin del porcentaje de viabilidad y curva de imbibicin.
Laboratorio N. 1
Biologa V Semestre Fisiologa Vegetal - Facultad de Ciencias Bsicas
Universidad de la Amazonia

RESUMEN
El presente trabajo se llev a cabo en el Laboraturio de la Universidad de la Amazonia
INTRODUCCION
La semilla es el vulo fecundado, transformado y maduro, representan la evolucin
reproductiva de las plantas, es decir, que de esta estructura dependen las plantas
superiores para sobrevivir. La semilla se forma mediante la embriognesis cigtica,
luego existe la formacin del cigoto y finalmente la maduracin del embrin. (Celeste,
2013). Est formada por tres estructuras, el embrin, la cubierta seminal y una reserva
alimenticia, (endospermo), una vez bien formada y desarrollada la semilla emerge de la
planta madre, donde inicia el proceso de maduracin y desecacin que consiste
bsicamente en una deshidratacin de la semilla, en este proceso adquiere un estado
fisiolgico y estructural que le otorga resistencia para condiciones ecolgicas (Curvetto,
et al, 2010). Una vez madura la semilla inicia un evento de germinacin que marca la
transicin entre dos estados de desarrollo de la planta: la semilla y la plntula. Es el
conjunto de procesos que se inician con la imbibicin de la semilla y finaliza cuando
una porcin del embrin emerge por la cubierta de la misma (Curvetto, et al, 2010), la
imbibicin es un proceso puramente fsico, que consiste en la absorcin de agua por
parte de la semilla seca, sin importar si sta se encuentra viable o no, y la emergencia es
el proceso por el cual el eje embrionario, se extiende y atraviesa las estructuras que lo
rodean. En la germinacin ocurre la escarificacin que puede ser mecnica o qumica, la
primera consiste en debilitar la cubierta con un instrumento cortante y la segunda se da
cuando se somete a concentraciones de cidos fuertes o a cambios bruscos de
temperatura, adicionalmente, la cubierta se debilita en el medio natural siendo atacada
por microorganismos (hongos y bacterias), efectundose una degradacin biolgica que
puede llevar semanas o meses.
Para el desarrollo de una planta es importante determinar el porcentaje de viabilidad,
que nos indica un promedio del total de plntulas que se van a obtener, este trabajo se
realiza en laboratorio, y consiste en aplicarle cloruro de trifenil tetrazolium 1%, a la


2
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.

mitad de la semilla, el embrin tiene que estar en contacto total con el reactivo. Una
tincin roja total, parcial, y sin tincin es el resultado para obtener el porcentaje.
El presente trabajo tiene como finalidad determinar el porcentaje de viabilidad de la
semilla de la ahuyama (Cucurbita sp.) la curva de imbibicin, entre otras cosas como la
caracterizacin fsica, morfolgica y bioqumica
METODOLOGIA
RESULTADOS
1. Curva de imbibicin

Figura 1. Curva de imbibicin de semillas de Cucurbita sp.

2. Prueba de viabilidad

Tabla 1. Viabilidad del embrin de semilla Cucurbita sp.
Embriones
tincin
roja total
% Total Embriones
tincin
roja
parcial
% Parcial Embriones
sin tincin
roja
% Sin
tincin
7 35 11 55 2 10


3. Caracterizacin general de la semilla
0
2
4
6
8
10
12
14
16
9:18 10:18 11:18 12:18 1:18 2:18 3:18 4:18 5:18 6:18 7:18
A
g
u
a

a
b
s
o
r
b
i
d
a

(
g
r
)

Tiempo de imbibicion (h)
Curva de imbibicion


3
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.


3.1 Caracterizacin fsica

Tabla 2. Promedio de la medida fsica de las semillas.






3.2 Caracterizacin morfolgica





Figura 2. Forma de la semilla, ubicacin del embrin y endospermo.

3.3 Caracterizacin anatmica

Tabla 3. Observacin al microscopio de la semilla de Cucurbita sp.
Objetivo 10x Tejidos celulares
N
Semillas Alto (mm)
Ancho
(mm)
Espesor
(mm)
50 16,88 8,808 2,12

Embrin
Endospermo


4
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.










Clulas del embrin y el
endospermo










3.4 Caracterizacin bioqumica
Tabla 4. A. tincin con Sudan III, B. tincin con lugol.
Objetivo 10x Observacin
Embrin


5
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.








Coloracin roja, prueba
positiva para lpidos, pero
presenta bajo contenido.







Coloracin oscura del
endospermo, prueba positiva
de almidn, presenta alto
contenido.











A
B


6
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.

Tabla 5. Prueba de Biuret.
IMAGEN PROTEINA AUSENCIA/ PRESENCIA





Albuminas y
globulinas




Prueba positiva
Coloracin lila.






Glutelinas





Prueba positiva
Coloracin lila.


DISCUSIN
Se observ que a medida que las semillas de Auyama (Cucurbita sp.) estn ms tiempo
sumergidas en agua, estas absorben ms de ella y por consiguiente aumenta la tasa de
imbibicin que con el paso del tiempo empez a disminuir, en la primera inmersin
absorbi 5 gr, en las siguientes inmersiones la absorcin fue ms baja, obteniendo una
estabilidad en la 10 hora (figura 1), esto se debe a que las semillas embeben agua hasta
determinado tiempo, cuando se presenta esta disminucin significa que va a reiniciarse
la absorcin, generando una curva con dos momentos, uno cuando las semillas
absorben agua en una forma proporcional al tiempo (Mndez, et al. 2008) donde se
presentaron incrementos muy cercanos a 1 g por cada hora transcurrida, aunque en tres
mediciones consecutivas presentaron variaciones muy mnimas despus de comenzar
la imbibicin (Figura 1.) y la otra no absorber ms agua evidenciado en la ltima


7
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.

medicin que disminuyo 0.58mg con relacin al obtenido en la medicin anterior, lo
que nos lleva a inferir que la mayora de semillas sometidas a esta prueba absorben
agua cada vez ms, a medida que va transcurriendo el tiempo para llegar a un punto de
equilibrio donde las semillas dejan de absorber agua y empiezan un segundo proceso
de reabsorcin.
En la segunda prueba realizada para conocer la viabilidad de las semillas de auyama
(Cucurbita sp.) se encontr que el 35% de las semillas presentaron una tincin roja total,
el 55% una tincin roja parcial y el 10% sin tincin , lo que significa que el 90% de las
semillas analizadas son viables para producir una plntula normal y el otro 10% son
semillas con deficiencias o anormalidades de naturaleza (Prez & Pita, 2006 ) (Tabla 1.),
en esta prueba se utiliza una solucin incolora de la sal cloruro 2, 3, 5 trifenil
tetrazolium que permite distinguir las reas vivas como el embrin y endospermo de
las semillas( color rojizo o rosado) y las zonas muertas (color blanco) (Craviotto, 2007),
se obtuvo que un alto porcentaje de las semillas de auyama analizadas no presentan
dormicin o velocidad muy baja de germinacin y hay una alta viabilidad de que si son
sembradas y se les brinda las condiciones ambientales adecuadas se obtendr un alto
porcentaje de germinacin de las mismas.
En cuanto a la caracterizacin fsica de las semillas se evalu el largo, ancho y espesor
de las mismas donde se obtuvo un promedio de 16.88mm de largo, 8.808mm de ancho
y 2.12mm de espesor (Tabla 2.), para la caracterizacin morfolgica se observ la forma
elipsoidal de la semilla (Figura 2.), el endospermo cuya funcin es almacenar las
reservas alimenticias y el embrin da origen a la raz, el tallo y a los cotiledones que
sern las hojas de la nueva planta (Jimnez Mateo, 2011), por ltimo en la prueba
anatmica y bioqumica se observaron los tejidos celulares como el embrin y el
endospermo diferenciando la forma de las clulas, en el embrin son clulas alargadas y
en el endospermo estas son ovaladas (Tabla 3) y la presencia de lpidos, almidn y de
protenas, donde el endospermo de la semilla de auyama como la mayora de las
semillas es rico en aceites, almidones y protenas (Cruz, 2004) (Tabla 4). Las semillas
estn constituidas por protenas estructurales, protenas de actividad biolgica y por
ultimo protenas de reserva o almacenamiento las cuales son depositadas durante el
desarrollo del endospermo (Fukushima, 1991). La funcin fisiolgica de las protenas
es proporcionar esqueletos carbonados y nitrogenados los cuales son utilizados
durante la germinacin de la semilla (Lourdes, 2009). La semilla de Cucurbita sp
presenta protenas como: albuminas las cuales intervienen en el metabolismo de
sustancias almacenadas en la semilla, globulinas (protenas trimericas deficientes de
aminocidos azufrados) y glutelinas (Tabla 5).


8
.




F
I
S
I
O
L
O
G

A


V
E
G
E
T
A
L
.


I
n
f
o
r
m
e

d
e

L
a
b
o
r
a
t
o
r
i
o

N
o
.
1
.




BIBLIOGRAFA
Craviotto, Roque Mario. 2007. Anlisis de semillas. En bsqueda de la mejor
simiente. ISSN en trmite. Biagro.

Mndez Natera, Jess Rafael; Merazo Pinto, Jos Fernando y Montao Mata, Nelson
Jos. 2008. Relacin entre la tasa de imbibicin y el porcentaje de germinacin en
semillas de maz (Zea mays L.), caraota (Phaseoulus vulgaris L.) y quinchoncho
(Cajanum cajan (L.) Mill.) Revista UDO Agrcola 8 (1): 61-66.

Prez Garca, Flix & Pita Villamil, Jos Manuel. 2006. Viabilidad, vigor, longevidad
y conservacin de semillas. Universidad politcnica de Madrid.

Cruz, Abel. 2004. Anorexia. Editorial selector S.A. pg. 203

Fukushima, D. 1991. Strutures of plant storage protein and their funtion. Food rev. J.
Agric. 44:6-29.

Lourdes Peralta Flores, Mara Eulalia. 2009. Caracterizacin bioqumica de las
protenas de la semilla de Jatropha curcas. Instituto politcnico nacional. Centro de
desarrollo de productos biticos.