CICLO CELULAR Y DUPLICACIN DEL ADN

Silvia Mrquez- Sergio Daniel Ifrn- Enrique Zabala

Ciclo celular
Las clulas de los distintos organismos pasan durante su vida por distintos perodos, cada uno
de ellos caracterstico y claramente diferenciado.
Cada tipo celular cumple con sus funciones especficas durante la mayor parte de su vida,
creciendo gracias a la asimilacin de materiales provenientes de su ambiente y con ellos
sintetiza nuevas molculas por medio de complejos procesos regulados por su material
gentico.
Cuando una clula aumenta hasta llegar a un determinado tamao, su eficiencia metablica se
torna crtica, entonces se divide. En los organismos pluricelulares, se produce un crecimiento a
partir de una clula (huevo o cigoto) como as tambin se aumenta la masa tisular y se reparan
los tejidos lesionados o desgastados, por aumento del nmero de clulas.
Las nuevas clulas originadas en esta divisin poseen una estructura y funcin similares a las
clulas progenitoras, o bien derivadas de ellas.

Fig. 12.1 - Ciclo de Divisin Celular
En parte son similares porque cada clula nueva, recibe aproximadamente la mitad de
organoides y citoplasma de la clula madre, pero en trminos de capacidades estructurales y
funcionales lo importante es que cada clula hija, reciba una rplica exacta del material
gentico de la clula madre.
Durante la vida celular, las clulas pasan por un ciclo regular de crecimiento y divisin. A esta
secuencia de fases se la denomina ciclo celular y en general consta de un perodo donde ocurre
un importante crecimiento y aumento de la cantidad de organoides (interfase) y un perodo de
divisin celular (mitosis o meiosis).
La interfase involucra perodos donde la clula realiza los procesos vitales propios de su
funcin. Durante ella, se producen tambin fenmenos a nivel nuclear imprescindibles para la
divisin posterior. Cronolgicamente podemos dividir la interfase en tres etapas G
1
, S y G
2
.
Haciendo un esquema del ciclo celular, el tiempo en que transcurre cada una de las etapas se
representa en la Fig. 12.2.
Es necesario sealar que existen excepciones a este ciclo, ya que no en todas las clulas los
perodos tienen la misma duracin. Incluso si consideramos una poblacin celular homognea
(clulas del mismo tipo), existen variaciones particulares. Siempre que se habla de tiempos
determinados, se hace considerando los promedios de cada tipo celular.
Tambin existen clulas que dejan de dividirse por largos perodos o bien permanentemente.
Por ejemplo, las neuronas permanecen luego de la maduracin del tejido nervioso en una etapa
especial denominada G
0
, donde las clulas entraran como alternativa a G
1
. En la actualidad es
frecuente referirse a este tipo de clulas como "no cclicas" o detenidas en G
1
, ya que no es
seguro que las clulas que no se dividen pasen por un solo estado.

Fig. 12.2 - Fases del Ciclo Celular
ETAPAS Y CARACTERSTICAS
Como ya se mencion, una clula tipo pasa a lo largo de su vida por etapas (G
1
, S y G
2
) antes de
dividirse. Las caractersticas ms relevantes de cada una de las mismas son:
Etapa G
1
: Esta etapa que sucede a la divisin celular es la ms variable en duracin. Las clulas
hijas recientemente originadas presentan una gran actividad metablica producindose un
aumento acelerado del tamao celular. Los organoides de la clula precursora han sido
repartidos de manera ms o menos equitativa entre las clulas hijas, deben entonces aumentar
de tamao y tambin en nmero para mantener las caractersticas de su tipo celular. Se
sintetizan as ribosomas y microtbulos a partir de las protenas y otras molculas que la
conforman. Los organoides del sistema de endomembranas, aumentan considerablemente de
tamao, ya que ambas clulas hijas han recibido parte de estos organoides. Sin embargo,
pueden ser sintetizados de nuevo en caso de no existir precursores. Esto no ocurre con
mitocondrias y cloroplastos que se originan por divisin de estas estructuras preexistentes.
Como se recordar ambos organoides contienen ADN y ribosomas que les permite dividirse de
forma relativamente independiente del ncleo celular.
Todos los procesos de sntesis de nuevos organoides o aumento de tamao de los existentes,
son regulados mediante activacin de complejos enzimticos en un momento determinado.
En este perodo se observa, a su vez, una gran sntesis de ARNm como as tambin ARNt y
ARNr. Estos cidos sern utilizados para la sntesis de protenas estructurales, para la
construccin y o aumento de los organoides, como as tambin la produccin de enzimas
necesarias para dicha sntesis. Cabe destacar que durante este perodo tambin se sintetizan
las enzimas que sern utilizadas en la etapa siguiente, es decir en la duplicacin del ADN, como
as tambin molculas precursoras de los cidos nucleicos.
Cuando las clulas dejan de crecer (si se agotan los nutrientes o por inhibicin por contacto) lo
hacen en G1. Esto implica que tambin se sintetizan las sustancias que estimulan o inhiben
distintas fases del ciclo celular.
Etapa S: el perodo S o de sntesis de ADN tiene como caracterstica fundamental la sntesis
de nuevo material gentico, para que las clulas hijas tengan la misma dotacin. Sin embargo
persisten los altos ndices de sntesis de ARN para obtener enzimas requeridas en la sntesis
de histonas que formarn parte de la macroestructura del ADN y tubulinas relacionadas con el
proceso de divisin celular.
Etapa G
2
: En esta fase, ya con el ADN duplicado, la clula ensambla las estructuras necesarias
para la separacin de las clulas hijas durante la divisin celular y la citocinesis (separacin del
citoplasma).
Etapa M: Durante M, la envoltura nuclear se desintegra, la cromatina se condensa en forma
creciente hasta ser visible los cromosomas al microscopio ptico. Estos cromosomas formados
cada uno por dos cromtidas (cromosomas duplicados) pasaran por cada una de las fases de la
divisin celular (mitosis o meiosis) para concluir con la formacin de las clulas hijas, cada una
con una nica copia de su ADN (cromosomas sin replicar) , que marcan el inicio de un nuevo
ciclo.
SISTEMA DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
El sistema de control del ciclo celular es un dispositivo bioqumico compuesto por un conjunto
de protenas reguladorasinteractivas: las ciclinas y las quinasas dependientes de ciclinas que
inducen y coordinan los procesos bsicos del ciclo, como la duplicacin de ADN y la divisin
celular, a los que denominamos procesos subordinados.
Durante un ciclo tpico, el sistema de control est regulado por factores de retraso que
pueden frenar el ciclo en puntos determinados denominados puntos de control. En estos
puntos, las seales de retroalimentacin que contienen informacin sobre los procesos
subordinados pueden detener momentneamente el avance del ciclo, evitando el inicio del
proceso siguiente antes que el precedente haya terminado. Sobre dichos factores tambin
actan seales del entorno como puede ser una hormona o un factor de crecimiento.
Una analoga que puede ayudarnos a comprender este mecanismo es comparar al sistema de
control del ciclo celular con el funcionamiento de una lavadora automtica (1. Alberts y col -pg929-
930), el programador de la lavadora slo avanza a travs de los diferentes pasos del ciclo de
lavado (etapas del ciclo celular), si recibe determinadas seales. Adentro de la lavadora hay
sensores que miden el nivel de agua o jabn que ingresan. Estos sensores envan seales que
pueden provocar el retraso o la interrupcin del ciclo de lavado. De igual manera en la clula,
las seales generadas en los procesos subordinados (por ej. la sntesis de ADN) o por el
entorno, detienen el ciclo.
A continuacin pasaremos a describir las protenas reguladoras, el mecanismo de regulacin y
los puntos de control del ciclo celular.
PROTENAS REGULADORAS DEL CICLO CELULAR
El pasaje de una clula a travs del ciclo es controlado por protenas citoplasmticas. Los
principales reguladores del ciclo en clulas animales son:
1. Las ciclinas, protenas que controlan la actividad de sus proteinquinasas
dependientes. La concentracin de ciclinas vara en forma cclica, aumentando o disminuyendo
durante el transcurso del ciclo celular. Esto se debe a variaciones en la velocidad de
degradacin de la ciclina, dado que la velocidad de sntesis es casi constante durante todo el
ciclo. En los mamferos existen 6 ciclinas como mnimo, denominadas A, B, C, D, E y F (Fig.
12.4b), pero nosotros las clasificaremos como ciclinas de G1 y ciclinas mitticas. Las ciclinas G1
se unen a sus quinasas dependientes de ciclinas (Cdk2) durante G1 siendo necesarias para
superar el punto de control G1 y pasar a la fase S. Las ciclinas mitticas se fijan a la quinasa
Cdk1 durante G2, siendo necesaria su presencia para que el ciclo supere el punto de control G2
y se inicie la mitosis. (Fig. 12.3 )
2. Las quinasas dependientes de ciclinas (CDK), enzimas que mediante la fosforilacin
de determinadas protenas desencadenan los procesos subordinados del ciclo celular. En los
mamferos se conocen 5 CDK las cuales forman tres grupos principales:

Fig. 12.3 - Complejo ciclina-quinasa dependiente de ciclina activo (ciclina-CDK)

CDK de G1 (Cdk2)
CDK de fase S (Cdk2)
CDK de fase M (Cdk1)
A diferencia de la concentracin de ciclinas, la concentracin de CDK se mantiene durante todo
el ciclo celular, por permanecer constantes tanto la velocidad de sntesis como la de
degradacin (Fig. 12.4 y 12.5)
Las CDK se activan slo cuando se unen a las ciclinas para formar complejos, por lo que
requieren un nivel umbral para desencadenar la transicin a la fase siguiente del ciclo celular.
3. El Complejo Promotor de la Anafase (APC) y otras enzimas proteolticas. El APC
desencadena los eventos que conducen a la destruccin de las cohesinas [1] permitiendo a las
cromtidas hermanas separarse e iniciando la degradacin de las ciclinas mitticas.

Fig. 12.4 -Generalizacin del sistema de control del ciclo celular en eucariotas


Fig. 12. 5 - Ciclinas y CDK en un ciclo celular de vertebrados
MECANISMO DE REGULACIN DEL CICLO CELULAR
Al finalizar la mitosis aumenta la expresin de la ciclina G1 (E), esta ciclina se unir a la su
quinasa (Cdk2) formando un complejo activo conocido como factor promotor de Fase S (FPS
). Este FPS slo puede actuar sobre cromosomas en estado Pre-Replicativo. As se denominan
por poseer sobre cada origen de replicacin un complejo multiproteico llamado Pre-Replicativo.
Los orgenes de replicacin (ORI) se presentan en nmero de 20 a 80 sobre cada lazo de
cromatina y se caracterizan por poseer una secuencia comn denominada secuencia de
replicacin autnoma (ARS) formada por dos secuencias "GAGGC" sobre las que se halla unido
a lo largo de todo el ciclo celular, el complejo de reconocimiento del origen de replicacin
(ORC), uno de los complejos protecos que forma parte del complejo Pre-Replicativo (PreR). El
segundo componente del complejo PreR es la protena Cdc6p (cell division cycle protein), que
se sintetiza en G1 e inserta sobre los orgenes de replicacin al ltimo componente,
las protenas de mantenimiento de los minimicrosomas (MCM). (Fig. 12.6)
El nivel creciente de FPS al inicio de la fase S induce la apertura de los orgenes de replicacin,
activando a las molculas responsables de la sntesis de ADN e induciendo la separacin del
complejo Pre-R del componente Cdc6p y MCM. Separados estos componentes, se inicia la
sntesis, y por lo tanto el FPS no se requiere ms, siendo su componente lbil, la ciclina de G1,
degradada en los proteosomas.
Los cromosomas a partir de este momento se denominarn cromosomas Post-Replicativos (slo
presentan asociado a los orgenes de replicacin el ORC). Los cromosomas se mantendrn en
estado Post-R hasta el inicio de la anafase.
Degradadas las ciclinas G1, el nivel de ciclinas mitticas aumenta.
Un nuevo participante entra al ciclo, el complejo promotor de la mitosis, FPM, formado por
las ciclinas mitticas ms las quinasas dependientes de ciclinas de M (Cdk1). ste inicia el
ensamblado del huso mittico, la desintegracin de la envoltura nuclear y la condensacin de los
cromosomas, al inducir la fosforilacin de diferentes sustratos como las lminas nucleares,
conduciendo a la clula a la metafase.
A esta altura del ciclo, el FPM activa el complejo promotor de la Anafase, APC, que permite
la separacin de las cromtides hermanas y su migracin a los polos (anafase). As se completa
la mitosis, se destruyen las ciclinas de fase M y se activan las ciclinas de G1 para el prximo
ciclo celular.

Fig. 12.6 - Modelo simplificado propuesto para la replicacin de cromosomas eucariotas

CONTROL DE CALIDAD DEL CICLO CELULAR (Fig. 12.7)
Durante el ciclo celular, la clula pasa al menos tres puntos de control (checkpoints):
Punto de control G1, en este punto el sistema de control de la clula pondr en
marcha el proceso que inicia la fase S. El sistema evaluar la integridad del ADN (que no este
daado), la presencia de nutrientes en el entorno y el tamao celular. Aqu es donde
generalmente actan las seales que detienen el ciclo (arresto celular) .
Punto de control G2, en l se pone en marcha el proceso que inicia la fase M. En este
punto, el sistema de control verificar que la duplicacin del ADN se halla completado (que no
este daado), si es favorable el entorno y si la clula es lo suficientemente grande para
dividirse.
Punto de control de la Metafase o del Huso, verifica si los cromosomas estn
alineados apropiadamente en el plano metafsico antes de entrar en anafase. Este punto
protege contra prdidas o ganancias de cromosomas, siendo controlado por la activacin del
APC.


Fig. 12.7 - Puntos de Control e Ingreso de la informacin Reguladora al Sistema de Control del Ciclo
Celular

Protena p53, el guardin del genoma
Como hemos mencionado en los prrafos precedentes, tanto en el punto de control G1 como G2
se verifica la integridad del ADN. Ante la presencia de ADN daado se genera una seal que
retrasa la entrada en fase M. El mecanismo depende de una protena llamada p53, que se
acumula en la clula en respuesta a las alteraciones de ADN, deteniendo el sistema de control
en G1 y por lo tanto impidiendo la posterior entrada en mitosis. El gen p53 es uno de los genes
supresores de tumores ms conocidos, que no slo detiene el ciclo (arresto celular), sino
tambin participa en la apoptosis (muerte celular programada) forzando a las clulas al suicidio
cuando el dao en el ADN es irreparable.
Las clulas que presentan los dos alelos del gen p53 mutados, tendrn protena p53 no
activa y por lo tanto continuarn dividindose a pesar del dao en su genoma, por lo tanto
desarrollarn cncer. Las mutaciones del gen p53 presenta una alta incidencia en la mayora de
los cnceres humanos.
Cmo acta la p53?
Cuando el ADN presenta un dao "limitado", aumentan los niveles de protena p53. Dicha
protena activa la transcripcin del gen p21, que codifica a la protena p21. Esta ltima protena
ejerce su efecto inhibidor unindose al complejo ciclina-Cdk2 y deteniendo el ciclo. Cuando el
ADN es reparado, la protena p53 se libera del promotor del gen p21, provocando el descenso
en los niveles de p21. Esto permite restaurar la actividad del complejo ciclina-Cdk2.




Fig. 12.8 - Accin de la Protena p53 en el Control del Ciclo Celular
ONCOGENES Y CNCER
Los genes supresores de tumores, codifican para productos celulares que inhiben la
proliferacin celular. Para impedir el efecto protector que ejercen sobre el genoma, se
requiere la mutacin de sus dos alelos.
Los genes conocidos como protooncogenes codifican protenas que estimulan la divisin celular,
por ejemplo, factores del crecimiento o receptores de factores del crecimiento.
La mutacin de uno de los dos alelos que codifican para un protooncogen, lo transforma en
un oncogen capaz de originar productos celulares que estimulan la divisin celular de forma
incontrolada conduciendo al cncer, con alteracin de los mecanismos de control del ciclo
celular.
En la siguiente tabla se mencionan a titulo informativo los oncogenes y genes supresores de
tumores mejor conocidos por su expresin durante el ciclo celular.
Tabla 12.1 - ALGUNOS GENES RELACIONADOS CON CNCERES EN HUMANOS
ONCOGENES
Genes para factores de crecimiento o sus receptores
PDGF
Codifica el Factor de crecimiento derivado de las plaquetas.
Responsable de glioma (un cncer del cerebro)
erb-B Codifica al Factor de crecimiento epidrmico. Relacionado con
gliobastoma (cncer del cerebro) y cncer de mama.
erb-B2 Codifica receptor de factor de crecimiento. Relacionado con cncer
de mama, glndulas salivales y ovario.
RET Codifica receptor de Factor del crecimiento. Relacionado con
cncer de tiroides.
ONCOGENES
Genes para transductores citoplasmticos en vas estimuladoras
Ki-ras Responsable de cncer de pulmn, ovario, colon y pncreas.
N-ras Relacionado con leucemias.
Genes para factores de transcripcin que activan genes promotores del
crecimiento
c-myc Relacionado con leucemias y cnceres de estmago, pulmn y mamas
N-myc Relacionado con neuroblastoma (cncer de clulas nerviosas) y
glioblastoma
L-myc Relacionado con cncer de pulmn.
Genes para otros tipos de molculas
Bcl-2 Codifica para una protena que normalmente bloquea la apoptosis.
Relacionado con linfoma de clulas foliculares B.
Bcl-1 Tambin llamado PRADI. Codifica la ciclina D1, un ciclina reguladora
del ciclo celular. Relacionada con cncer de mama, cabeza y cuello.
MDM2 Codifica un antagonista de la protena p53. Participa en sarcomas y
otros cnceres.
GENES
SUPRESORES DE
TUMORES
Genes de protenas citoplasmticas
APC Relacionada con cncer de coln y estmago.
DPC4 Codifica para una molcula transductora en una va que inhibe la
divisin celular. Relacionada con cncer pancretico.
NF-1 Codifica para una protena que inhibe a la protena Ras. Relacionada
con neurofibroma y feocromocitoma (cncer del sistema nervioso
perifrico) y leucemia mieloide.
NF-2
Relacionado con meningioma y ependinoma (encfalo) y
schwanoma (nervios perifricos)
Genes de protenas nucleares
MTS1 Codifica para la protena p16, uno de los frenos del sistema de
control del ciclo celular. Relacionada con muchos cnceres.
RB Codifica para la protena RB (retinoblastoma). Esta protena es uno
de los principales frenos en el ciclo celular.
p53 Codifica para la protena p53, la cual detiene la divisin celular e
induce a las clulas anormales al suicidio (apoptosis). Relacionado
con la mayora de los cnceres .
WT1 Relacionado con el Tumor de Wilms del rin.
Genes que codifican protenas de ubicacin an no determinada
BRCA1 Relacionado en cnceres de mama y ovario.
BRCA2 Relacionado con cncer de mama.
VHL Relacionado con cncer de clulas renales.


DUPLICACIN DEL ADN
CARACTERSTICAS DE LA DUPLICACIN DEL ADN
Aunque los principios generales de la duplicacin o replicacin del ADN son sencillos y pueden
considerarse como consecuencia directa de su estructura, el proceso requiere una maquinaria
compleja que contiene una gran cantidad de enzimas y protenas que actan en conjunto.

Fig. 12.9 - La duplicacin del ADN se produce previo desenrollamiento de las dos cadenas de la
doble hlice, usando cada una como molde para sintetizar las nuevas cadenas.
1. MLTIPLES PUNTOS DE ORIGEN
Los cromosomas eucariontes tienen una gran cantidad de ADN, el cual se halla contenido en
dos molculas lineales, una para cada cromtide. Si estas molculas se replicasen a partir de un
sitio nico de origen, la etapa S de la Interfase sera extremadamente larga. Las clulas
eucariontes resuelven este problema disponiendo de mltiples sitios de origen de la replicacin
en cada cromosoma. En ellos, el ADN presenta secuencias especiales de nucletidos. Adems
todos los orgenes tienen en comn secuencias conservadas de aproximadamente doce pares de
nucletidos, llamados ARS (autonomus replication secuence).

Fig. 12.10 - La replicacin siempre comienza en los sitios de origen en cada cromosoma. En ellos
el ADN presenta secuencias especiales de nucletidos
2. DESENROLLAMIENTO DE LAS CADENAS DE ADN
En cada cromosoma, las dos cadenas del ADN se encuentran arrolladas una a la otra como los
hilos de una soga. Si tratamos de separarlas, la soga debe apretarse ms en las vueltas
restantes o girar. Algo similar ocurre en el ADN, cuando las cadenas complementarias se
separan para iniciar la duplicacin. En ese momento aumenta la tensin torsional en el sector no
duplicado de la doble hlice.

Fig. 12. 11 - Separacin progresiva de las dos cadenas de ADN a nivel de la horquilla de
replicacin y su posible consecuencia biolgica.
El desenrollamiento es realizado por las enzimas ADN-helicasas, las cuales recorren la hlice
desenrollando las hebras del ADN a medida que avanzan. Una vez separadas, las cadenas se
combinan con las protenas SSB, llamadas tambin protenas desestabilizadoras, que evitan el
autoapareamiento entre las bases complementarias libremente expuestas.

Fig. 12.12 - Cadenas adelantada y retrasada del ADN durante la replicacin. La helicasa separa
a las dos cadenas del ADN y las protenas SSB evitan autoapareamientos entre las bases
complementarias libremente expuestas en la cadena atrasada.
A medida que la enzima helicasa abre la doble hlice, dos enzimas complementarias:
la topoisomerasa I y latopoisomerasa II o girasa, van disminuyendo la tensin torsional
acumulada por el superenrollamiento en el sector no replicado de la doble hlice.
La topoisomerasa I primero corta una de las cadenas del ADN, luego la cadena cortada gira
una vuelta en torno a su propio eje y finalmente vuelve a unir los extremos cortados.
La topoisomerasa II corta las dos cadenas, las cuales luego de girar una vuelta alrededor del
eje de la doble hlice, restablecen sus uniones.
Ambas enzimas utilizan energa del ATP y se comportan como nucleasas (cortando las cadenas
de ADN) y luego comoligasas (restableciendo las uniones fosfodister).
Las topoisomerasas I y II se diferencian no slo porque la primera corta una de las cadenas y
la segunda corta las dos, sino tambin porque la topoisomerasa I realiza desenrollamientos de
corto alcance y la girasa abarca una extensin de ADN bastante mayor.

Fig. 12.12 - Efecto hipottico de la topoisomerasa II para evitar el superenrollamiento que se produce en
el ADN como consecuencia de la separacin progresiva de sus cadenas.
3. LA DUPLICACIN DEL ADN ES BIDIRECCIONAL
Al abrirse la doble hlice se forma una burbuja de replicacin, cuyo tamao aumenta a
medida que avanza la separacin de las dos cadenas del ADN, fenmeno que se produce en
ambos extremos de la burbuja en forma simultnea. Se establece de este modo, en cada uno
de los extremos, una estructura en forma de Y, a la que llamamos horquilla de replicacin,
cuyos brazos representan a las cadenas ya separadas de ADN y el tronco la doble hlice en
vas de separacin. As cada burbuja tiene dos horquillas de replicacin que a partir de un
punto de origen comn avanzan en direcciones opuestas. Las horquillas desaparecen cuando se
van integrando a las burbujas contiguas. Las horquillas que recorren los telmeros desaparecen
cuando se separa el ltimo par de nucletidos.
El segmento de ADN que se sintetiza a partir de un origen de replicacin (con sus dos
horquillas), lo llamamos replicn.De este modo la replicacin del ADN termina cuando se
ensamblan los sucesivos replicones. Esto permite que el ADN se sintetice en un tiempo
bastante breve para el ciclo de vida de una clula.

Fig. 12. 14 - Esquema que muestra dos replicones contiguos y los puntos donde se origina la
replicacin (flechas). Puede observarse el carcter bidireccional de la replicacin y los
sectores donde el ADN se sintetiza en forma continua y discontinua.
4. LA SNTESIS DE ADN ES DISCONTINUA
Una de las caractersticas de las ADN-polimerasas es que slo pueden actuar en direccin 5
3, por agregado de nucletidos en el extremo 3 de las cadenas nuevas. Como vimos, a
medida que se separan las cadenas progenitoras en la horquilla de replicacin, una presenta sus
nucletidos en direccin 5 3 y la otra en direccin 3 5. De manera que la primera al
ser copiada debera formar una cadena hija en sentido 3 5, algo que las polimerasas no
pueden hacer.
Las clulas solucionan esta situacin utilizando estrategias distintas en la construccin de cada
una de las nuevas cadenas. La cadena hija que se form en direccin 5' 3 se construye en
forma continua mediante el agregado de nucletidos en el extremo 3 a medida que avanza la
horquilla de replicacin. En cambio la otra cadena hija es sintetizada de manera discontinua, en
pequeos tramos, llamados fragmentos de Okazaki, los cuales se unen entre s a medida que se
sintetizan, por accin de la enzima ADN-ligasa.
Por lo expuesto, podemos decir que la sntesis del ADN es un proceso bidireccional, no slo
porque se produce en dos direcciones divergentes a partir de una misma burbuja de
replicacin, sino tambin porque las cadenas de la doble hlice son sintetizadas en direcciones
opuestas.

Fig. 12. 15 - Replicacin semiconservativa del ADN.

5. MODELO SEMICONSERVATIVO
Como las nuevas hlices de ADN estn formadas por una cadena original (preexistente) que
sirvi de molde y una cadena nueva (recin sintetizada) decimos que el mecanismo de
replicacin es semiconservativo.
INICIO DE LA SNTESIS DE ADN
Para iniciar la sntesis de las cadenas complementarias se requiere adems del ADN molde
un cebador o primer , que consiste en una pequea cadena de ARN de unos diez nucletidos de
largo. La sntesis del cebador es catalizada por una enzima llamada ARN-primasa y. el cebador
queda unido al ADN temporariamente. Una vez sintetizado el cebador la sntesis contina si la
ADN-polimerasa tiene disponibles suficientes desoxirribonucletidos trifosfatados (dATP,
dGTP, dCCP y dTTP). stos se agregan en la cadena nueva de acuerdo a la secuencia de
nucletidos de la cadena que sirve de molde.
Gran parte de la energa requerida durante la replicacin la aportan los desoxirribonucletidos
trifosfatados, que hidrolizan los ltimos dos grupos fosfato (liberando energa) cuando se unen
entre s.
Al iniciarse la sntesis continua del ADN, en cada origen se forman dos cebadores orientados
divergentemente uno en cada cadena de la doble hlice y a continuacin la ADN-
polimerasa cataliza la sntesis de la cadena continua agregando nucletidos en el extremo 3
de la hebra en formacin. Mientras tanto los cebadores son removidos por unanucleasa
reparadora y su lugar es reemplazado por un fragmento de ADN equivalente sintetizado por la
ADN-polimerasa .
Como vimos la cadena continua requiere un solo cebador que se forma a comienzo de la
replicacin, en cambio la cadena discontinua necesita muchos cebadores, uno para cada
fragmento de Okazaki. La enzima responsable de la sntesis discontinua es la ADN-
polimerasa . Cabe sealar que las ADN-polimerasas son sostendas por un anillo proteico
llamado PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) mientras realiza el deslizamiento por la
cadena de ADN

Fig. 12.16 - Doble hlice de ADN desenrrollndose. Cada cadena servir de molde para la
sntesis de cadenas nuevas


Fig. 12.17 - La energa para el proceso de replicacin la proveen los mismos
desoxirribonucletidos trifosfatados, con la hidrlisis de los ltimos dos grupos fosfato-

Fig. 12. 18 - Unin del aro de PCNA a la ADN polimerasa
Los fragmentos de Okazaki alcanzan una longitud de 200 nucletidos. Una vez completa la
sntesis de un fragmento ambas enzimas se liberan y vuelven juntas hacia el ngulo de la
horquilla de replicacin, dejando atrs los 200 nucletidos del segmento que acaban de
sintetizar y otros tantos del ADN molde que se usar para copiar el prximo fragmento de
Okazaki.
Como ocurre con la polimerasa d en movimiento, la ADN-polimerasa a no se desprende del ADN
debido a que se le asocia un aro de PCNA. Luego el cebador es hidrolizado por una nucleasa, la
que se encarga tambin de reparar errores (segundo sistema de reparacin) y los huecos son
rellenados con desoxirribonucletidos por la ADN-polimerasa .Finalmente los fragmentos de
Okazaki son unidos por la ADN-ligasa.
La discontinuidad de la sntesis hace que la hebra mal orientada crezca ms lentamente que la
otra, que lo hace en forma continua, por esta razn se les asign el nombre de cadena
rezagada y cadena adelantada respectivamente.
Replicacin de la heterocromatina
La heterocromatina por estar muy compactada se replica tardamente durante la fase S del
ciclo celular.
Sntesis de histonas
Hemos sealado que el ADN se replica en forma semiconservativa, es decir que las cadenas de
la doble hlice progenitora, al separarse para su replicacin, se comparten por igual en ambos
cromosomas hijos. En cambio no se sabe como se segregan las histonas. Es posible que al cabo
de la replicacin sean heredadas totalmente por uno de los cromosomas hijos, en este caso el
otro cromosoma hijo debe procurarse de la totalidad de histonas nuevas.
En su mayor parte las histonas se sintetizan durante la fase S de la interfase y se incorporan
al cromosoma apenas es duplicado el ADN
Replicacin en Procariontes
Muchas de las caractersticas esenciales de la duplicacin del ADN son universales, aunque
existen algunas diferencias entre procariontes y eucariontes debido a que su material gentico
est organizado de manera distinta.
En las bacterias casi todo el ADN se encuentra formando una cadena circular, en cambio en los
eucariontes cada cromosoma no duplicado contiene una cadena lineal asociada a una gran
cantidad de protenas y algo de ARN.
En procariontes al existir un nico punto de origen se forma slo un ojal de replicacin. Aqu
actan tres ADN-polimerasas:
ADN-polimerasa I, es la que elimina el cebador y reemplaza los ribonucletidos de ste por
desoxirribonucletidos, rellenando los huecos dejados por la ADN-polimerasa II. Adiciona 10
nucletidos/seg.
ADN-polimerasa II, tiene actividad de nucleasa, es decir que retira nucletidos de la cadena
de ADN en los sitios donde se produjeron errores o desemparejamientos.
ADN-polimerasa III, es la enzima responsable de alargar las cadenas en el proceso de
replicacin. Adiciona 500 nucletidos/seg.


Fig. 12.19 - Mecanismo de replicacin del ADN en clulas procariontes

Fig. 12.20 - Mecanismo de replicacin en procariotas

Cuadro 12.1 - MLTIPLES FUNCIONES DE LAS ADN-POLIMERASA EN E. COLI
Poli. I y Poli. III
Sntesis de ADN en sentido 5 3
Exonucleasa en sentido 3 5
Correccin de errores, removiendo
nucletidos en sentido 5 3
Poli. I Exonucleasa en sentido 5 3

Cuadro 12.2 - PRINCIPALES ENZIMAS QUE ACTUAN EN LA REPLICACIN
Enzimas Reacciones que catalizan
ADN-polimerasa I (procariontes)
Elimina el cebador, reemplazando los
ribonucletidos por desoxirribonucletidos.
Rellena los huecos del ADN.
ADN-polimerasa II (procariontes) Nucleasa, corrige errores.
ADN-polimerasa III (procariontes)
Principal enzima de la replicacin. Sintetiza la
cadena nueva a partir del cebador. Realiza
correccin de pruebas.
ADN-polimerasa (eucariontes Sintetiza los fragmentos de ADN
discontinuos a partir del cebador.
ADN-polimerasa (eucariontes)
Rellena los huecos dejados por el cebador y
repara errores como un segundo sistema de
reparacin.
ADN-polimerasa (eucariontes)
Sintetiza la hebra continua a partir del
cebador y realiza lecturas de prueba.
Helicasas
Rompen los puentes de hidrgeno, separando
las cadenas del ADN.
Primasas Sintetizan el primer o cebador.
Protenas SSB
Se extienden sobre las hebras del ADN
evitando autoapareamientos entre las bases
libremente expuestas
Topoisomerasas I y II Corrigen el superenrollamiento



[1] Cohesinas: protenas que mantienen unidas transitoriamente a las cromtidas hermanas.
Control celular
Resumen de:WEISZ, PAUL B., Y KEOGH RICHARD N.: LA CIENCIA DE LA BIOLOGA.
1.-CONTROL CELULAR
Control Celular: Todas las clulas poseen metabolismo. El metabolismo es el proceso qumico
que se desarrolla en el interior del organismo o en alguna de sus partes. Comprende la desintegracin
de compuestos orgnicos (catabolismo), liberacin de energa, elaboracin de compuestos complejos a
partir de compuestos ms simples (anabolismo). Catabolismo y anabolismo actan desintegrando y
sintetizando ADN en un sistema de reacciones enzimticas. Los metabolismos de los seres vivos son
muy parecidos.
2.-Introduccin
La funcin de las actividades de control es mantener las condiciones de vida ptima
desarrollando mecanismos de defensa contra los agentes "desorganizadores". El resultado de estas
actividades de control se llama estado de equilibrio u homeostasis. Todos los seres vivos comparten el
mismo modelo de homeostasis basado en los siguientes componentes: enzimas, genes y vitaminas.
3. Modelos de control celular
Modelo
Cualquier condicionante con tendencia a desequilibrar un organismo vivo recibe el nombre de
tensin, y los seres vivos siempre estn sometidos a ellas en mayor o menor grado. Para que el
estado de equilibrio pueda contrarrestar esta tensin necesita de capacidades tales como
reconocimiento y reaccin (estmulo - respuesta).
Operaciones de control
La informacin permanente entre las partes del sistema y la capacidad de seleccin si existen
varias respuestas posibles son caractersticas bsicas de las actividades de control o de la
homeostasis.
Los sistemas de control son sistemas de comunicacin que encontramos a todos los niveles
organizativos de los seres vivos y que implican los siguientes componentes: mensajes (en la forma
que sean), portadores de mensajes, transmisores y receptores, vas de transmisin, canales,
selectores de canales, conmutadores y rels.
Los sistemas de control reaccionan mediante el sistema estmulo - respuesta. Un estmulo irrita
o excita a un receptor que emite una seal a travs de una va sensitiva o sensorial Hacia un selector
de respuestas llamado modulador. Este rgano ser el encargado de emitir la seal por la va motora
hacia el rgano o msculo efector. El ejemplo " mquina" que regula el nivel de agua mediante el
cierre o apertura e sus vas de entrada-salida.
Los esquemas que ilustran estas operaciones son:
1. Tensin- Flujo de informacin, reconocimiento del estmulo - lleno de tensin- seleccin de
respuesta- neutralizacin de tensin.
2.- estmulo- receptor- va sensorial- modulador - va motora- efector- respuesta.
Caractersticas de los sistemas de control:
La transmisin de informacin y la puesta en marcha de los motores necesita deenerga
operacional .Es suministrada por el ATP producido por la respiracin.
La segunda caracterstica es que todo el proceso de respuesta no es sbito, sino en pequeos
pasos y muchas veces repetido. Las seales entre los componentes de los sistemas de control no
cesan nunca, lo que ocurre es que cambia el mensaje (cambio - no cambio).
A este flujo continuo, en que los efectores son informados bien de su actividad, o de su
inactividad, se llama retroalimentacin.
Retroalimentacin y ciclos continuos de informacin explican la tercera caracterstica de los
sistemas de control, se trata del funcionamiento mediante ensayo-error para proporcionar el equilibrio
correcto.
Cuarta caracterstica: Sus lmites de eficacia. La presin sobre estos sistemas pueden provocar
errores. Estos fallos estructurales dan origen, en los seres vivos, a las enfermedades.
SISTEMAS DE CONTROL
La misma jerarqua establecida en los rdenes de vida se reproduce en los sistemas de control,
es decir, molculas y orgnulos son sistemas de control de las clulas, que a su vez lo son de los
tejidos, estos lo son a su vez de los rganos y as sucesivamente. A nivel celular los orgnulos suelen
tener mltiples actividades reguladoras. Este nivel es el primero en el que se originan respuestas
seleccionadas. El nmero de respuestas seleccionadas depende del nmero de controles moleculares
de los que disponga el orgnulo en cuestin.
Los contactos entre las clulas se producen a travs de los sistemas de transporte, son por
contacto directo y reciben el nombre de xilema y floema en las plantas, y circulacin sangunea en los
animales. Las respuestas llegan a configurarse a travs de cadenas de informacin, esta regulacin es
esencialmente celular.
Las plantas utilizan generalmente el modelo celular, al no contar con clulas u orgnulos
especializados en estas funciones, en los animales se producen distintos niveles de organizacin
dependiendo de la especializacin celular en las funciones de control.
El sistema nervioso es el mejor ejemplo de estos rganos especializados en funciones de control.
Slo cuando existe una estructura compleja de control se elaboran respuestas-reflejo.
Los sistemas endocrinos ejercen esta misma regulacin a travs de las hormonas.
Estos sistemas especializados no excluyen que todos y cada uno de los rganos tenga su propia
funcin reguladora. Sin embargo, el sistema regulador no implica la aparicin de vida., sino que es el
gen o cido nucleico el que determina a un organismo como tal (vivo).
4. EL CONTROL DE LAS CLULAS
Independientemente de como afecten las tensiones a las clulas o de cuales sean las respuestas
que se elaboren, a quien si afectan es a las reaccionesmetablicas, y estas mismas son las que
producen las respuestas.
Es decir, los estados de equilibrio pueden ser mantenidos si la clula es capaz de reajustar el
modelo de sus reacciones qumicas. Estas reacciones son controladas en su rea ms extensa por las
enzimas. Los niveles en los que operan son:
- Alteraciones estructurales en la organizacin de los genes.
- Controles de la trascripcin del RNA.
- Controles posteriores a la trascripcin
- Controles de la traduccin
- Controles posteriores a la traduccin.
En todos estos niveles se hallan actividades que aumenta o disminuye la cantidad de enzimas.
Pero los procesos de los eucariticos son an muy desconocidos. Los mejores resultados se han
obtenido con procariticos. Este tipo de clulas es mucho ms fcil de criar que las eucariotas, y se
prestan ms a los experimentos. Adems sus esquemas gnicos son ms complejos. Sus modelos de
desarrollo lo son y por tanto tambin los cambios de especializacin que sufren sus genes. Muchas de
las cadenas gnicas especializadas estn desconectadas unas de otra (las enzimas del rin no actan
en el hgado y viceversa). Los genes procariticos se traducen como unidades mientras que los
cromosomas de los eucariticos se mantienen dispersos y en varias cadenas.
Niveles superiores de control gnico en los procariotas
Los mecanismos ms estudiados son los de trascripcin.
Control de la trascripcin
El ejemplo que ilustrar toda la explicacin es el de la metabolizacin de la lactosa. No hay que
olvidar que son respuestas a sustancias inductoras o inhibidoras (bien podran ser hormonas).
La induccin enzimtica es realizada por dos tipos de genes: estructurales y reguladores.
Los genes responsables de la metabolizacin (estructurales) se agrupan en una cadena de DNA
regulada por el operador (nucletidos), junto al operador existe otra estructura similar llamada
promotor A todo este conjunto se le llama OPERN.
La molcula de RNA polimerasa se fija al promotor se desplaza ms all del operador y a travs
de lo genes estructurales se convierte en RNAm. Entra en ese momento en el citoplasma y se liberan
los enzimas producidos por separado.
El gen regulador est situado cerca del opern y produce una sustancia represora que mide los
niveles de enzimas. (Operones inducibles).
El otro gran tipo de operones es el de los represibles, que actan casi constantemente.
Permite ahorro de energa por parte de la clula, y especifidad en la produccin enzimtica.
Control de la traduccin
Es el control ejercido en la velocidad de la produccin enzimtica.
Existen dos hiptesis sobre este mecanismo: por un lado la fijacin de ribosomas a velocidad
diferente o en frecuencias diferentes.
La degradacin de las molculas y la velocidad a la que sus moldes producen es otra forma de
estudiar este proceso.
Niveles superiores de control gnico en los eucariotas
Los mecanismos de control a nivel celular son muy diferentes y desconocidos.
Alteraciones estructurales en la organizacin de los genes
Los dos ejemplos siguientes ilustran las formas de regulacin de la expresin gnica a travs de
la organizacin de los propios genes:
Amplificacin gnica
En las clulas eucariticas la produccin de genes idnticos es suficiente para realizar todos los procesos
(algunas veces no) sin embargo en las clulas procaritica la mayora de los genes estn representados
una sola vez.
Las clulas eucariticas algunas veces son insuficientes en la produccin de RNAr, mientras que
las procariticas consiguen un nivel de produccin satisfactorio mediante la amplificacin gnica, (slo
se ha podido comprobar ese proceso en la fabricacin de RNAr) que consiste en: multiplicar el nmero
de genes en un tiempo especfico.
Reordenacin gnica
Fragmentos de DNA que cambian constantemente de lugar e intervienen en distintos procesos
(la mayora desconocidos) como la produccin de inmunoglobina.
Se pensaba que la reordenacin del DNA era debido a las histonas. En 1973 J: Paul demuestra
que las histonas no podan controlar los genes. Los genes son conectados por protenas no histnicas.
La cromatina ha de ser desenrollada antes de que se produzca la sntesis de RNAm. Los
segmentos no desenrollados no son expresados.
Esto, en algunos casos (saliva de insectos, con cromatina gigante (politenicos) puede ser
observado a microscopio.
No todos los genes de las clulas estn activos al mismo tiempo (puffs cromosmicos).
Toda explicacin sobre este mecanismo es hipottica no se sabe como funciona en realidad.
Controles posteriores a la traduccin
En las clulas procariticas de traduce al mismo tiempo que se produce.
En las eucariticas el RNAm sufre modificaciones antes de ser transportado.
Encajamiento de adenina: Un extremo de RNAm alterado.
Adicin de adenina: Extremo de RNAm al que se le aade una cadena de nucletidos.
Estos procesos podran influir en la estabilidad y vida media del RNAm. As como en los cortes de
las cadenas del RNAm.
Controles de la traduccin
La vida media del RNAm eucariota es superior a la de los procariotas. La traduccin del RNAm
eucariota es continua.
Algunas RNAm animales permanecen sin traducir mucho tiempo.
Controles posteriores a la traduccin
Enzimas:
moduladores de reacciones metablicas (recepcin, estmulo, respuesta)
Funcionamiento modulador:
regulado por los efectos alostricos (interactividad de enzimas con pequeas molculas)
Moduladores primarios:
El producto final de una secuencia enzimtica suele inhibir el producto inicial impidiendo que continu la
produccin Los cambios de Ph tambin modifican la enzima y sus funciones.
Factores de crecimiento
Son conocidos con este nombre los modificadores secundarios. Se trata de agentes de control
exteriores a la clula. La mayora acta en niveles posteriores a la trascripcin.
MINERALES:
Son necesarios para cualquier organismo tanto como nutriente como cofactores inicos. Tambin son
componentes estructurales.
HORMONAS:
Molculas orgnicas ms complejas que activan o inhiben la trascripcin de RNA, velocidad del RNAm etc.
VITAMINAS:
Excepto los animales, la mayor parte de los organismos las elaboran Las diferencias sintetizadoras
marcaban que sean factores de crecimiento en uno u otro organismo. Existen ms de 30 compuestos. Se
trata de materias primas fabricadas por coenzimas. Su carencia prolongada perjudica los procesos
metablicos. Existen dos grandes grupos de vitaminas:
1) Liposolubles: A, D, E, K
2) Hidrosolubles: B, C
Grupos de vitaminas
Grupo A( Liposoluble)
Derivados de los pigmentos caretoneoides (se sintetizan en plastidios) Plantas como zanahorias,
boniatos, calabaza etc. Espinacas, yema huevo. Identificacin con color amarillo a rojo. (Tomates)
Una molcula de caroteno en agua son dos molculas de vitamina A. Presente en el hgado.
Los efectos de su carencia son: ceguera, crecimiento.
Grupo B
Tiamina, riboflavina, cido nictico, piridoxina, biotina, B12, cido pantotnico, a.flico y colina.
Se encuentran juntas en animales y vegetales. Alimentos de todo tipo. Sintetizacin mediante
bacterias intestinales.
Deficiencias causadas por falta de tiamina: fatiga, debilidad, astenia, beriberi.
Deficiencias causadas por falta de riboflavina: calvicie, prdida de visin, detencin del
crecimiento.
Deficiencias de niacina: pelagra, enfermedad de la piel y sistema nervioso.
Deficiencia de B12 y cido flico: anemia
Colina: deformaciones seas y hemorragias internas.
Piridoxina y cido pantotnico: detencin del desarrollo, anemia, disminucin de defensas,
perturbaciones de piel y sistema nervioso.
Grupo C
cido ascrbico, sintetiza en plantas (ctricos), coles y tomates. Las mayora de los animales
(hombre no) la fabrican. Se destruye por coccin y se disuelve en los jugos de los enlatados. Su
carencia produce escorbuto.
Grupo D
Diez compuestos relacionados D2 y D3' ms potentes. Presentes en la piel se las conoce como
vitaminas de la luz solar. Alimentos ricos en A tambin en D. Si deficiencia conduce a raquitismo, su
sobredosis conduce al calcificamiento de masa muscular.
Grupo E
Inestables, en grupos se encuentran en grasas, su deficiencia provoca esterilidad y no suele ser
habitual. Su funcin celular es transportar electrones a los mitocondrios.
Grupo K
Intervienen en la coagulacin sangunea. Su deficiencia produce fallos en la coagulacin
(formacin de clculos biliares). Directamente relaciona don el sistema biliar. Similares a las vitaminas
E.
5. CONTROL HORMONAL
Control hormonal
Modelos de control
Los procesos metablicos son muchos dependiendo de la actividad que vaya a realizar el
organismo, en plantas y animales, est controlado por hormonas. La hormona necesita de clula
blanco que generalmente se encuentra alejada y dispone de un receptor de identificacin. En plantas y
animales no vertebrados circulan por las clulas y savia, pero en los vertebrados circulan a travs de
la sangre.
Las hormonas no son como las enzimas, sino que son iniciadores de secuencias celulares. La
fo4rma de fijacin o conexin de la hormona con su receptor es todava muy desconocida aunque hay
procesos ya conocidos: fijacin en receptores y segundo mensaje; Penetracin; Alteracin de la
permeabilidad de la membrana celular.
Molculas muy potentes en cuanto a los cambios que pueden originar.
Modelo de control en los animales.
Caractersticas generales de las hormonas
Todos los agentes que producen efectos reguladores y coordinadores a nivel qumico se conocen
como agente humorales. Estos pueden ser segregados por clulas endocrinas, transportadas y
descargadas en lquidos corporales. Tambin pueden ser fabricadas (mayora de invertebrados) por las
mismas neuronas (neurosecretoras) Por ejemplo as estara regulada la muda del exoesqueleto
(insectos) provocado por la ecdisona.
Los vertebrados cuentan con glndulas endocrinas especializadas y la mayora de sus funciones
necesitan de un empuje hormonal. Los sistemas formados son neuroendocrinos.
Los nombres de las hormonas suelen llevar a confusiones dado que lo reciben tomando como
base la parte del cuerpo a la que afecta ms visiblemente su carencia o exceso, aunque pueden tener
o intervenir en muchas otras funciones (ejemplo: prolactina).
Por otro lado su composicin qumica vara enormemente, aminocidos, protenas, compuestos
simples o complejos, esteroides... algunas de ellas son sintetizadas en laboratorio pero otras son
prcticamente desconocidas.
Mecanismos de la accin hormonal
Las formas de actuacin son muy diversas, por lo que es dudoso que las hormonas acten bajo
un patrn igual para todas. (Ejemplo: tiroxina)
La cantidad de hormonas presentes en los lquidos corporales depende de los transportadores
libres, el resto son destruidas o inactivadas.
El mecanismo de recepcin de hormonas es de lo ms estudiado y de lo ms difcil de conocer,
se conocen as dos receptores, uno sera el receptor situado en la superficie externa de la clula que
se une con hormonas protenicas y peptdicas en general. Otro, situado en la membrana plasmtica
corresponde generalmente a la unin con esteroides y vitaminas: fatiga, debilidad, astenia, beriberi.
EL NCLEO CELULAR

Silvia Mrquez- Andrea Lassalle- Viviana Sabbatino- Gladys Glvez
INTRODUCCIN
El ncleo es la estructura ms destacada de la clula eucarionte, tanto por su morfologa
como por sus funciones. Su tamao es variable (5 a 10 mm) al igual que su ubicacin
siendo en la mayora de los tipos celulares central.
El ncleo tiene tres funciones primarias, todas ellas relacionadas con su contenido de
ADN. Ellas son:
1. Almacenar la informacin gentica en el ADN.
2. Recuperar la informacin almacenada en el ADN en la forma de ARN.
3. Ejecutar, dirigir y regular las actividades citoplasmticas, a travs del producto de
la expresin de los genes: las protenas.
En el ncleo se localizan los procesos a travs de lo cuales se llevan a cabo dichas
funciones. Estos procesos son:
1. La duplicacin del ADN y su ensamblado con protenas (histonas) para formar la
cromatina.
2. La transcripcin de los genes a ARN y el procesamiento de stos a sus formas
maduras, muchas de las cuales son transportadas al citoplasma para su traduccin y
3. La regulacin de la expresin gentica.
ESTRUCTURA DEL NCLEO (Fig. 10.1)
El ncleo est rodeado por la envoltura nuclear, una doble membrana interrumpida por
numerosos poros nucleares. Los poros actan como una compuerta selectiva a travs de
la cual ciertas protenas ingresan desde el citoplasma, como tambin permiten la salida
de los distintos ARN y sus protenas asociadas.
La envoltura nuclear es sostenida desde el exterior por una red de filamentos
intermedios dependientes del citoesqueleto, mientras que la lmina nuclear, la cual se
localiza adyacente a la superficie interna de la envoltura nuclear, provee soporte interno.
El ncleo tambin tiene un nucleoplasma, en el cual estn disueltos sus solutos y un
esqueleto filamentoso, la matriz nuclear la cual provee soporte a los cromosomas y a los
grandes complejos proteicos que intervienen en la replicacin y transcripcin del ADN.
Los cromosomas aparecen ocupando lugares especficos. Los genes que codifican
productos relacionados, aunque estn localizados en diferentes cromosomas, pueden
estar ubicados prximos en el ncleo interfsico. Por ejemplo, los cromosomas humanos
13, 14, 15, 21 y 22 poseen un gran nmero de genes que codifican para ARNr. Dichos
cromosomas estn agrupados de tal forma que los genes de los ARNr estn todos juntos
y confinados en el nuclolo, el lugar donde se sintetizan, procesan y ensamblan los ARNr.
Esta separacin fsica asegura que los ARNr puedan ser eficientemente ensamblados
dentro de las subunidades ribosomales.
En el ncleo, los genes transcripcionalmente activos tienden a estar separados de los
inactivos. Los activos se encuentran ubicados centralmente, mientras que los silentes
estn confinados prximos a la envoltura nuclear.
Tan pronto como las clulas entran en mitosis o meiosis, los fragmentos de la matriz
nuclear dirigen la condensacin de los cromosomas, constituyndose en la parte central
de los mismos.

Fig. 10.1 - Esquema de un ncleo interfsico
LA ENVOLTURA NUCLEAR
La envoltura est formada por dos membranas concntricas interrumpidas por poros
nucleares y por la lmina nuclear.

Fig. 10.2- Microfotografa electrnica de la envoltura nuclear
Las membranas delimitan un espacio de 10 a 50 nm, el espacio o cisterna
perinuclear. La membrana externa en contacto con el citoplasma tiene ribosomas
adheridos, que sintetizan las protenas que se vuelcan al espacio perinuclear. El espacio
perinuclear se continua con el REG.
La membrana interna posee protenas integrales que le son propias, que se unen a la
lmina nuclear y a los cromosomas.
La lmina nuclear, capa fibrosa de 10 a 15 nm en la que apoya la membrana interna, est
formada por protenas del tipo de los filamentos intermedios, polmeros de lamina o
laminina nuclear. Ellas se unen a las protenas integrales de membrana.
La fosforilacin de las laminas provoca el desensamble de la lmina nuclear causando la
ruptura de la envoltura al inicio de la divisin celular.
La lmina nuclear confiere estabilidad mecnica a la envoltura nuclear. Adems, al
interactuar con la cromatina participa en la determinacin de la organizacin
tridimensional del ncleo interfsico.
Si bien la formacin de la lmina no se requiere durante los pasos iniciales, la
organizacin de la envoltura es indispensable para el crecimiento posterior y el
mantenimiento de su integridad. Las laminas se incorporan luego que la cisterna
perinuclear rodea al ADN y se inicia el transporte entre el ncleo y el citoplasma. (Fig.
10.3)
La envoltura nuclear es un derivado del sistema de endomembranas, siendo esto evidente
al inicio de la divisin celular, cuando la envoltura se desorganiza y pasa a formar parte
del sistema de cisternas y vesculas del retculo endoplsmico.
La aparicin de la envoltura nuclear permiti que los eucariontes aislaran los procesos
genticos principales, como la autoduplicacin del ADN o la sntesis de ARN. Adems esto
posibilit que el ARNm se modifique dentro del ncleo antes de ser traducido en los
ribosomas. Estas modificaciones no ocurren en los procariontes, ya que a medida que la
ARN polimerasa sintetiza el ARN, simultneamente el extremo 5 se une al ribosoma y
comienza la traduccin.

Fig. 10.3 - Mecanismo de formacin y desintegracin de la membrana nuclear
COMPLEJOS DE PORO NUCLEAR
La envoltura nuclear presenta estructuras discoidales llamadas complejos de
poro nuclear (CPN) (Fig. 10.4).
El nmero de CPN es variable, incrementndose a medida que aumenta la actividad
celular. En una clula de mamfero hay entre 3000 a 4000 complejos de poro. Cada CPN
es una estructura macromolecular compleja constituida por un gran nmero de protenas
de disposicin octamrica. Est formado por:
Ocho columnas proteicas, que forman las paredes laterales del poro.
Un anillo externo, formado por ocho unidades proteicas.
Un anillo interno, tambin con estructura octamrica.
Protenas de anclaje que fijan cada columna al espacio perinuclear.
Protenas radiales que se proyectan desde las columnas hacia la luz del poro, a manera
de diafragma
Protenas fibrilares fijas al anillo interno y externo. En la cara nuclear convergen para
formar una canastilla o cesta. A lo largo de estas fibrillas se ubican nucleoporinas que
intervienen en el transporte de sustancias a travs del poro.
Un poro central o abertura.

Fig. 10.4 - Esquema del complejo de poro nuclear
La luz de los CPN suele presentarse obturada por las protenas que circulan a travs del
poro, como por las carioportinas (Kap) que actan como eficientes transportadores en el
trfico ncleo/citoplasma.
Los CPN presentan uno o varios canales acuosos a travs de los cuales las pequeas
molculas solubles en agua difunden (transporte no regulado). Las molculas de mayor
peso molecular son transportadas en forma activa, por lo que requieren energa y
molculas transportadoras.
Se importan dentro del ncleo:
Las protenas sintetizadas en el citoplasma necesarias para ensamblar los ribosomas.
Los factores de transcripcin requeridos en la activacin o inactivacin de los genes.
Los factores de empalme necesarios en el proceso de maduracin de los ribosomas.
Las molculas y macromolculas ensambladas y exportadas desde el ncleo al
citoplasma incluyen:
Las subunidades ribosomales
ARNm
ARN de transferencia
Factores de transcripcin que son devueltos al citoplasma para ser reutilizados.
Los mecanismos implicados en el transporte a travs del poro son diferentes al
transporte de protenas en las membranas de otros organelos . Por ejemplo, las protenas
nucleares son transportadas a travs del poro manteniendo su conformacin plegada, por
el contrario las protenas que no se localizarn en el ncleo se despliegan durante el
transporte.
Los complejos de poro nuclear hacen de la envoltura nuclear una barrera selectiva entre
el ncleo y el citoplasma. Estos complejos constituyen la principal va de comunicacin
entre el compartimiento nuclear y citoplasmtico de la clula ante el pesado trfico
molecular. Aun cuando las protenas pequeas y otras molculas viajan a travs de los
canales perifricos, las protenas de gran tamao deben poseer una etiqueta para
ingresar por el canal central. Estas protenas sintetizadas en el citoplasma contienen la
seal de localizacin nuclear (nuclear signal localization, NSL).
Tampoco los ARN pueden salir de ncleo por s mismos. Ellos salen a travs del complejo
de poro con una protena especial que posee una seal nuclear de exportacin (nuclear
export signal, NES). Ambas NSL y NES consisten en una secuencia corta de aminocidos,
muchos de los cuales tienden a estar ubicados centralmente dentro de las protena.
Observemos en la Fig. 10.4, como las proyecciones filamentosas desde la cara citoslica
del complejo pueden enlazar protenas, conducindolas dentro del poro central. Los
filamentos citoslicos, el poro central y la canasta nuclear se proyectan dentro del
compartimiento nuclear. Se cree que la canasta puede ser un rea importante de paso
para la preparacin de las ribonucleoprotenas (RNP) antes de ser exportadas.
Las molculas de mayor tamao requieren de una protena transbordadora o
carioportina. La superfamilia de carioportinas esta integrada por: importinas . exportinas
y transportinas .
IMPORTACIN DE PROTENAS (Fig. 10.5)
Las importinas son heterodmeros, formados por dos subunidades, la subunidad-a se une
a la NSL de la protena nuclear permitiendo la unin con la subunidadad-b. Esta unin
origina una importina funcional que lleva unida a la protena nuclear a ser transportada.
El complejo importina funcional se pone en contacto con los filamentos citoslicos, donde
guiado por las nucleoporinas (Nup), llega al poro central. La translocacin de complejo
importina/carga es regulado por la pequea RanGTPasa [1] , que se une a la
subunidad b de la importina. Esta b-importina es la encargada de interactuar con el poro
provocando su dilatacin y posibilitando el ingreso de la protena nuclear. La translocacin
de protenas es un proceso activo. Cuando el complejo penetra al interior del ncleo, las
subunidades de importina se separan y la carga es liberada. La disociacin de las
subunidades causa entonces un nuevo cambio en su forma, dejando al descubierto la NES
de cada subunidad. Otras protenas en el poro central reconocen la NES y retornan las
subunidades al citoplasma.

Fig. 10.5 - Modelo de mecanismo de importacin a travs del CPN
EXPORTACIN DE ARN
Los ARN maduros se asocian a protenas llamadas transportinas, las cuales actan como
transbordadores permitiendo el pasaje de ARN al citoplasma. En la fig. 10.6 se
esquematiza como el ARNm es llevado fuera del ncleo. Los ARNm maduros que
presentan la poli A se asocian con varias protenas, formando una partcula de
ribonucleoprotena (RNP). Estas partculas se mueven linealmente a travs de la canasta
nuclear. Al igual que las importinas, las RNP son recicladas hacia el ncleo. En el
citoplasma, las CRBP ( del ingls, cytoplasmic RNA-binding proteins) reemplazan a las
RNP para guiar a los ARNs a sus destinos citoslicos correctos.

Fig. 10.6 - Modelo de mecanismo de exportacin de ARNm a travs del CPN
CROMOSOMAS Y CROMATINA
El ncleo contiene los cromosomas de la clula. Cada cromosoma consiste en una molcula
nica de ADN con una cantidad equivalente de protenas. Colectivamente, el ADN con sus
protenas asociadas se denomina cromatina. La mayor parte de las protenas de la
cromatina consisten en copias mltiples de cinco clases de histonas.
Estas protenas bsicas son ricas en residuos de arginina y lisina cargados positivamente.
Por esta razn se unen estrechamente con los grupos fosfatos (cargados negativamente)
del ADN.
La cromatina tambin contiene pequeas cantidades de una amplia variedad de protenas
no histnicas y RNP. La mayora de ellas son factores de transcripcin (por ej., el
receptor esteroide), siendo su asociacin con el ADN pasajera. Estos factores regulan
que parte del ADN ser transcripta en ARN.

NIVELES DE ORGANIZACIN DE LA CROMATINA
La observacin a travs del microscopio ptico de un ncleo interfsico, nos permite
distinguir dos tipos de cromatina. Laeucromatina o cromatina laxa, de localizacin
central, y la heterocromatina o cromatina densa, en la periferia del ncleo (Fig.10.7).
La heterocromatina representa aproximadamente el 10% del total de cromatina y es
considerada transcripcionalmente inactiva (Fig. 10.8).
La eucromatina se encontrara al menos en dos estados, la eucromatina accesible, que
representa alrededor del 10%, donde se encuentran los genes que se estn
transcribiendo y la eucromatina poco accesible, ms condensada (pero menos que la
heterocromatina), donde estn los genes que la clula no est transcribiendo.
Si el ncleo celular se incuba con nucleasas, enzimas que digieren el ADN, las secuencias
que primero se digieren son las que portan los genes expresados por la clula, lo que
corrobora el menor grado de condensacin de la eucromatina.

Fig. 10.7 - Microfotografa electrnica del ncleo de un hepatocito. a. eucromatina; b. RER


Fig. 10.8 - Microfotografa electrnica del ncleo de un linfocito. a. eucromatina; b.
heterocromatina, c. mitocondria


Fig. 10.9 - H1 y formacin de la fibra de 10 nm
Cuando el cromosoma en interfase se esparce artificialmente sobre agua, tiene la
apariencia de un collar de perlas. Las perlas son los nucleosomas, las unidades de
enrollamiento de la cromatina. (Fig. 10.10b)
Los nucleosomas estn formados por un centro o "core" de histonas. Dicho centro posee
dos copias de cada una de las siguientes histonas: H2A; H2B; H3 y H4
Alrededor del centro de histonas, 146 pares de bases del ADN se enrollan en dos
vueltas. La unin de las histonas al ADN no depende de una secuencia particular de
nucletidos, sino de la secuencia de aminocidos de la histona. Las histonas son unas de
las molculas ms conservadas durante el transcurso de la evolucin. La histona H4 en el
ternero difiere de la H4 de la planta de poroto en slo 2 residuos de aminocidos de una
cadena de 102. Alrededor de 60 pares de bases de ADN unen un nucleosoma con el
prximo. Cada regin de unin es el ADN espaciador. La quinta histona, la H1, conecta a
los nucleosomas y acta como una banda de goma, mantenindolos juntos dentro de una
misma cuerda enrollada. Esta estructura se conoce como fibra de 10nm, siendo el primer
grado del empaquetamiento de la cromatina. (Fig. 10.9)
Los nucleosomas se organizan, a su vez, en fibras de 30nm (solenoide), girando a
manera de resorte alrededor de un eje virtual. Esta estructura es mantenida por la
interaccin de las H1 de nucleosomas cercanos. (Fig. 10.10c)
En el siguiente nivel de empaquetamiento, las fibras de 30 nm se organizan en una serie
de bucles o asas superenrolladas(Fig. 10.10d; Fig. 10.11). Estos bucles se estabilizan
gracias a la interaccin con las protenas de la matriz nuclear o andamiaje nuclear
(scaffold).

Fig. 10.10 - Modelo de empaquetamiento de la cromatina
Cada bucle de cromatina representa un dominio funcional o unidad de replicacin (Fig.
10.10e). Estos dominios contienen alrededor de 100.000 pares de bases, extensin de
ADN suficiente para acomodar varios genes de tamao promedio. Algunos genes, sin
embargo, pueden abarcar varios dominios adyacentes de un cromosoma. Cada cromosoma
puede tener cien o ms dominios.Durante la profase, los cromosomas aparecen en forma
ms condensada, alcanzando la cromatina su mayor nivel de condensacin en
metafase(Fig. 10.10f). La organizacin de los cromosomas envuelve la fosforilacin de la
H1 y otras protenas, lo cual causa el plegamiento y empaquetamiento an ms compacto
de la cromatina. El andamiaje o matriz nuclear se convierte en el centro de la estructura
del cromosoma, y como la compactacin contina, ste se pliega modo de acorden.

Fig. 10.11- Empaquetamiento de la fibra de 30 nm
El grado de condensacin de los dominios de cromatina se mantiene principalmente
debido a la asociacin con la matriz nuclear y a protenas asociadas como la
topoisomerasa II o girasa, encargada de controlar el grado de superenrollamiento del
ADN (Fig. 10.11). La unin entre la cromatina y la matriz se da a nivel de zonas altamente
conservadas, denominadas secuencias SAR o MAR (scaffold associated regions/ matrix
attachment regions). Las SAR son regiones de varios cientos de pares de bases ricas en
residuos de adenina y timina, abundantes en la heterocromatina.
Con coloraciones especiales los cromosomas, revelan diferencias estructurales de
importancia funcional. Las bandas oscuras consisten en cromatina altamente condensada,
mientras que las bandas claras se corresponden con cromatina ms laxa.
El examen de la cromatina en bandas claras y oscuras revela que ambos tipos de
cromatina estn acomodados en bucles de distintos tamaos y que a su vez se proyectan
desde el andamiaje plegado. El andamiaje est muy plegado en la heterocromatina, y es
ms lineal en las bandas de eucromatina, formando bucles ms amplios. Las histonas de la
eucromatina estn fuertemente acetiladas. Estos cambios afectaran el grado de
empaquetamiento de la eucromatina, hacindola ms accesible para la transcripcin de
sus genes.
Las caractersticas de la hetero y eucromatina son:
Tabla 10.1 - Caractersticas de la Cromatina
Tipo de cromatina Estado fsico Cambio qumico Tipo de genes Replicacin
Eucromatina Laxa Acetilada
Activos
Fase S
temprana
Heterocromatina condensada Metilada Silentes Fase S tarda

Los cromosoma en metafase tambin poseen un revestimiento de RNP. Dicho
revestimiento deriva de los componentes del nuclolo. Estos cromosomas se constituyen
en el vehculo para dividir el material nucleolar entre las futuras clulas hijas.El
empaquetamiento de la cromatina permite confinar al ADN dentro del ncleo La molcula
de ADN de un cromosoma humano contiene 50 x 10
6
pares de nucletidos en el
cromosoma ms pequeo (1.7 cm con la molcula extendida) a 250 x 10
6
pares de
nucletidos en el ms largo ( 8.5 cm). Midiendo extremo con extremo el total de
cromosomas de una clula humana diploide, el ADN se extiende ms de 2 metros. El
empaquetamiento del ADN en forma de cromatina, no solamente le permite entrar dentro
de los lmites del ncleo, sino tambin lo protege del ataque de las nucleasas.
EL CROMOSOMA EUCARIOTA (Fig. 10.12)
Cada cromosoma eucariota consiste en una molcula simple de ADN de alrededor de 150
millones de pares de nucletidos.
La molcula de ADN en el cromosoma eucariota es lineal, por lo tanto posee dos extremos
(en contraste con el cromosoma bacteriano que es circular).
La molcula de ADN de un cromosoma tpico eucariota contiene:
Un conjunto lineal de genes que codifican para ARN y protenas interrumpido por
Muchas secuencias de ADN no codificante.
El ADN no codificante incluye:
Secuencias de aproximadamente 170 nucletidos de ADN satlite, repetidas miles de
veces, que corresponden alcentrmero.
Secuencias repetitivas en los extremos del cromosoma llamadas telmeros.
Mltiples secuencias sealizadoras altamente conservadas, denominadas origen
de replicacin (ORI) , necesarias para que se realice la duplicacin del ADN en un tiempo
breve.

Fig. 10.12- Secuencias de un cromosoma eucariota estable en las diferentes etapas del
ciclo celular
El centrmero es una constriccin primaria localizada centralmente o hacia los extremos
de cada cromosoma.
El ADN centromrico como ya mencionamos es altamente repetitivo y se encuentra
siempre condensado siendo parte de la heterocromatina.

Fig. 10.13- Sntesis de telmeros por la telomerasa. a) La telomerasa se une al telomero;
b) La telomerasa alarga los extremos de la cadena 3`; c) La telomerasa avanza; d) La
ADN polimerasa sintetiza la cadena retrasada.
Los telmeros son cruciales en la vida de la clula. Ellos son necesarios para la duplicacin
completa del cromosoma, los protegen de las nucleasas, evitan que los extremos del
cromosoma se fusionen entre s y facilitan la interaccin del cromosoma con la envoltura
nuclear.
Los telmeros de las clulas humanas contienen la secuencia 5'TTAGGG3, que se repite
aproximadamente 2000 veces.
5 '... ..TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG..... 3 '
3 '... ..AATCCC AATCCC AATCCC AATCCC A..... 5 '
La cadena rica en guanosina corre en direccin 5' a 3', extendindose 12 a 15 nucletidos
ms all de la cadena rica en citosina, formando un apndice en una de las cadena en cada
extremo del cromosoma. Este desnivel se mantiene de generacin en generacin por
medio de una enzima especial, la telomerasa, que agrega nuevas unidades al extremo 3'
de la cadena rica en guanosina (Fig. 11.13).
La telomerasa es una ribonucleoprotena, la cual provee un molde de AAUCCC que gua la
insercin de la secuencia TTAGGG. Entonces la telomerasa es una retrotranscriptasa,
sintetiza ADN a partir de un molde de ARN.
Las clulas con telomerasa activa pueden compensar el acortamiento de los telmeros
durante la duplicacin del ADN.
La telomerasa activa se encuentra solamente en:
Las clulas de la lnea germinal, incluyendo clulas troncales embrionarias
Eucariotas unicelulares
Clulas cancerosas
Los cromosomas se diferencian por la ubicacin del centrmero
Durante la mayor parte de la vida de la clula, los cromosomas son demasiado largos y
tenues para ser vistos bajo un microscopio.


Fig. 10.14- Microfotografa electrnica de un cromosoma metafsico
Antes de que una clula se divida, cada cromosoma se duplica (durante la fase S del ciclo
celular).
Al inicio de la divisin celular, los cromosomas duplicados se condensan en estructuras
que pueden teirse con facilidad (por ello denominadas cromosomas), pudindose
observar bajo el MO.
La condensacin es tal que el cromosoma es aproximadamente 10.000 veces ms corto
que la molcula de ADN que contiene (Fig. 10.14). A primera vista, los cromosomas
duplicados se mantienen juntos por el centrmero. Mientras estn juntos, es comn
llamar a cada parte del cromosoma duplicado, cromtida hermana.
Esto no debe confundirnos, cada una de las "cromtidas hermanas" es un cromosoma
completo. El cinetocoro es una estructura proteica discoidal que forma parte del
centrmero y ayuda a separar las cromtidas hermanas. Es el sitio de unin con los
microtbulos del huso, que contienen los motores de dinena que tiran a los cromosomas
en la anafase. Adems proveen una plataforma para ensamblar y movilizar las protenas
que construyen el huso.
La posicin del centrmero, determina el largo de los brazos del cromosoma; en base a
esto se puede clasificar a los cromosomas en: (Fig. 10.15)
Metacntricos: el centrmero en posicin central determina brazos de igual longitud
Submetacntricos: un par de brazos es ms corto que el otro, pues el centrmero se
encuentra alejado del centro.
Acrocntricos: el centrmero se halla prximo a uno de los extremos, por lo tanto uno
de los brazos es casi inexistente.

Fig. 10.15- Tipos de cromosomas
Los cromosomas acrocntricos poseen una masa de cromatina llamada satlite, en el
extremo del brazo corto. El satlite se halla aislado del resto del cromosoma por la
constriccin secundaria. La zona aledaa al satlite de los cromosomas acrocntricos
contribuye a formar el nuclolo (Fig. 10.16)
El ms corto de los dos brazos del cromosoma se llama p; el ms largo es el brazo q.

Fig. 10.16- Partes de un cromosoma mittico.
Todas las especies tienen un nmero caracterstico de pares de cromosomas homlogos
llamado nmero diploide (2n). El nmero diploide del hombre es 46.
El cariotipo es una representacin grfica o fotogrfica de los cromosomas presentes en
el ncleo de una sola clula somtica de un individuo. Cada miembro del par de
cromosomas homlogos proviene de cada uno de los padres del individuo cuyas clulas
examinamos.
El cariotipo de la mujer contiene 23 pares de cromosomas homlogos, 22 pares
son autosomas y el par restante,cromosomas sexuales, ambos " X".
El cariotipo del hombre contiene los mismos 22 pares de autosomas y 1 par de
cromosomas sexuales, un cromosoma sexual "X" y un cromosoma sexual "Y" (un gen en el
cromosoma Y designado SRY es el que pone en marcha el desarrollo de un varn, por lo
tanto determina el sexo).
El anlisis del cariotipo involucra la comparacin de cromosomas por su longitud, la
ubicacin de los centrmeros y la ubicacin y los tamaos de las bandas G.
Durante la mitosis, los 23 pares de cromosomas humanos se condensan y son visibles con
un microscopio ptico.
Preparacin de un Cariotipo: La preparacin de un cariotipo normalmente involucra
bloquear las clulas (glbulos blancos) durante la mitosis con colchicina y marcar los
cromosomas condensados con tincin Giemsa. La tincin marca las regiones de los
cromosomas que son ricos en pares de nucletidos entre A -T produciendo una banda
oscura, la banda G. Luego de la tincin, los cromosomas se fotografan, se recortan y se
ordenan de acuerdo a su longitud. Los de igual tamao se aparean segn la ubicacin de su
centrmero.
Una error comn es suponer que cada banda representa un slo gen. En realidad las
bandas ms pequeas contienen ms de un milln de pares de nucletidos y
potencialmente cientos de genes. Por ejemplo, el tamao de una banda pequea es igual a
toda la informacin gentica de una bacteria.
El anlisis del cariotipo es una de muchas tcnicas que nos permiten investigar las
miles de enfermedades genticas que se pueden encontrar en los seres humanos.

Fig. 10.17 - Cariotipo femenino normal: Los autosomas se ordenan en grupos por tamao y
posicin del centrmero.


Fig. 10.18 - Mapa estndar (Idiograma) de patrones de bandeo del cromosoma 2. Los
nmeros corresponden a las regiones y bandas. A la derecha , idiograma del cariotipo
humano masculino.
El nuclolo
En el nuclolo tiene lugar la formacin de subunidades ribosmicas, la sntesis y
procesamiento de ARNr y actualmente se considera que desempea un importante papel
en la regulacin del ciclo celular. [2]
El nuclolo es un aglomerado de fibras de cromatina de distintos cromosomas. En el
hombre, los pares 13,14, 15, 21 y 22, aportan sectores de cromatina que forman el
nuclolo. Todos estos cromosomas son acrocntricos y presentan constricciones
secundarias denominadas organizadores nucleolares (NOR), donde estn los genes que
codifican ARNr (Fig. 10.19).

Fig. 10.19 - Esquema de nuclolo indicando los bucles de los 10 cromosomas con los genes
para el ARNr

Fig. 10.20 - Microfotografa electrnica del nuclolo. NE, Envoltura nuclear; NO.
Organizador nucleolar; PG, Zona granular; PF, Zona fibrilar.
El nuclolo aparece como una estructura simple carente de componente membranoso, en
la que diferenciamos dos regiones:
Una zona fibrilar central, formada por ADNribosmico y ARNr naciente
Un zona granular perifrica donde los grnulos estn formados por las subunidades
ribosmicas en proceso de ensamblado (Fig. 10.20).
Los nuclolos, al igual que la envoltura nuclear desaparecen en la mitosis y se
reorganizan alrededor de los segmentos de ADNr, que como su nombre lo indica,
codifica ARNr. Siendo el ARNr el ms abundante dentro de los tipos de ARN, existen
mltiples copias del gen que lo codifica. El genoma humano presenta alrededor de 200
copias del gen para ARNr. Estos genes que promedian los 10.000 nucletidos se
localizan en tndem. Cada gen est separado por ADN espaciador y presenta asociado
una molcula de ARN polimerasa I. De cada enzima parten perpendicularmente los
ARNr nacientes, tomando la apariencia caracterstica de un rbol de navidad. Cada
gen produce un transcripto llamado ARNr 45S que ser luego procesado (Fig. 10.21)
El tamao del nuclelo vara entre clulas y en la misma clula segn su actividad, pues si
bien la velocidad de transcripcin puede acelerarse, el ensamblado de las subunidades
ribosomales requiere de un tiempo ms o menos constante; es por ello que en los
nuclolos grandes observamos mayor proporcin de componente granular.

Fig. 10.21 - Microfotografa electrnica de los genes nucleolares (ADNr) durante la transcripcin.
Observe como la longitud de los transcriptos primarios aumenta a medida que nos alejamos del
punto de inicio.
AUTOEVALUACIN
1) La eucromatina se caracteriza por:
a- ser transcripcionamente inactiva
b- teirse debilmente
c- presentarse altamente condensada
d- formar parte de genes que no se expresan
2) En el nuclolo se sintetizan:
a- Precursores de ARNr
b- ARNt
c- Pre ARNm
d- ARNm
3) Los organizadores nucleolares aportan informacin para la sntesis de:
a- ARNm
b- ARNr
c- ARNt
d- Ribosomas
4) La composicin qumica y funcin de las histonas son respectivamente:
a- protenas bsicas y forman parte en la estructura de la cromatina
b- protenas bsicas cuya nica funcin es regular la expresin de los genes
c- son protenas cidas e intervienen en la estructura de la cromatina
d- son protenas cidas e intervienen en la sntesis de ADN polimerasa.
5) El andamiaje o matriz nuclear:
a- est formado exclusivamente por lminas
b- se asocia a la cromatina a nivel de las SAR/MAR del ADN
c- est ms replegado en la eucromatina
d- se desorganiza durante la divisin celular
6) Presentan seal de localizacin nuclear:
a- las hormonas esteroides
b- todas las riboprotenas
c- los factores de transcripcin
d- todas las anteriores son correctas
7) Los dominios funcionales de la cromatina:
a- aparecen por empaquetamiento de la fibra de 10 nm
b- dependen exclusivamente de la interaccin con la H1
c- representan individualmente un gen
d- funcionan como unidades de replicacin del cromosoma.
8) El pasaje de molculas a travs de los CPN:
a- no es regulado y requiere de etiquetas o seales en las molculas transportadas
b- no es regulado para molculas pequeas y solubles que circulan por los canales
perifricos
c- siempre es regulado y no depende del tamao de la molcula a transportar
d- requiere que todas las molculas a ser transportadas tengan una NSL
9) Cul de las siguientes afirmaciones es FALSA con respecto a la telomerasa?
a- es la enzima encargada de formar los telmeros
b- es una ARN polimerasa
c- se inactiva poco despus del nacimiento
d- las clulas cancerosas conservan la telomerasa siempre activa
10) Un investigador inyecto un cultivo celular con suero anti-laminina, y observ:
a- que la clulas no pudieron dividirse
b- que las clulas luego de la mitosis no pudieron organizar su envoltura nuclear
c- que los complejos laminina/antilamina se acumularon dentro del ncleo
d- que la envoltura nuclear formada resulto frgil e inestable
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[1] En el nuclolo se secuestran algunas de las protenas reguladoras del ciclo celular
como la Cdc14, durante G1, S, G2 y metafase.

[2] Las Ran GTPasas nucleares, no slo intervienen en el transporte nuclear, tambin son requeridas durante el
procesamiento de ARN, el ensamblado del aparato mittico, la descondensacin de los cromosomas y el
crecimiento nuclear luego de la mitosis.
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