Universidad Rafael Landvar

Facultad de Ciencias de la Salud

Fundamentos del Mtodo Cientfico




















Efectividad de la guayaba frente al Metronidazol para combatir la amebiasis en ratones
experimentales Mus Musculus


Trabajo de investigacin presentado por Tayra Mara lvarez Muoz, Ana Regina Flores Cruz, Carlos
Suriel Huitz Jereda, Lilian Jannet Ortiz Alvarado, Ronny Roberto Ramos Medina y David Jos
Rendn Estrada





















Guatemala
2013
2
I. NDICE

II. Lista de cuadros................................................................................................................. 3
III. Lista de figuras................................................................................................................... 4
1. Planteamiento del problema............................................................................................... 5
2. Justificacin........................................................................................................................ 7
3. Objetivos............................................................................................................................. 8
4. Marco terico...................................................................................................................... 9
4.1. Amebiasis..................................................................................................................... 9
4.1.1. Definicin............................................................................................................ 9
4.1.2. Agente etiolgico................................................................................................ 9
4.1.3. Sntomas............................................................................................................. 10
4.1.4. Prevencin.......................................................................................................... 11
4.1.5. Diagnstico......................................................................................................... 12
4.1.5.1. Serologa.................................................................................................. 12
4.1.5.2. Examen de heces.................................................................................... 12
4.1.6. Tratamiento......................................................................................................... 12
4.1.6.1. Composicin y uso del Metronidazol....................................................... 12
4.1.6.2. Efectos secundarios del Metronidazol..................................................... 13
4.2. Guayaba como tratamiento para la amebiasis............................................................. 13
4.2.1. Composicin y beneficios................................................................................... 13
4.2.2. Efecto sobre la amebiasis................................................................................... 14
4.3. Ratones como modelo experimental............................................................................ 14
5. Hiptesis............................................................................................................................. 16
6. Materiales y mtodos......................................................................................................... 17
7. Referencias bibliogrficas.................................................................................................. 21

























3
II. LISTA DE CUADROS

CUADRO PGINA
1. Presencia de parasitismo con respecto a las caractersticas demogrficas de los
nios que asisten a la Escuela Rural Mixta Sitio de las Flores (N=64)...................... 5
2. Frecuencia de protozoarios en los nios que asisten a la Escuela Rural Mixta Sitio
de las Flores (N=64).................................................................................................... 6
3. Ventajas y desventajas de utilizar ratones como modelos experimentales.................. 14
4. Recursos materiales y financieros para el proyecto de investigacin sobre la
efectividad de la guayaba frente al Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones
Mus musculus............................................................................................................... 17
5. Cronograma de actividades realizadas del proyecto de investigacin sobre la
efectividad de la guayaba frente al Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones
Mus musculus............................................................................................................... 18
6. Clasificacin de las variables utilizadas para el estudio sobre la efectividad de la
guayaba frente al Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones Mus
musculus....................................................................................................................... 19


































4
III. LISTA DE FIGURAS

ILUSTRACIN PGINA
1. Quiste y Trofozoito de Entamoeba histolytica......................................................... 9
2. Cadena epidemiolgica de la amebiasis................................................................. 10














































5
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La amebiasis se define como la infeccin producida por el protozoario Entamoeba histolytica que
afecta principalmente al intestino grueso. Esta puede invadir la mucosa intestinal, produciendo
lceras, y localizaciones extra intestinales, daando otros rganos como el hgado y, rara vez, los
pulmones o el cerebro. (1)

La E. histolytica tiene una transmisin fecoral, es decir que se propaga a travs de bebidas o
alimentos contaminados con heces que contienen dicho parsito. Esta contaminacin suele suceder
cuando se utilizan excrementos humanos como fertilizantes de cultivos. (1) Por lo tanto, el no tener
medidas de saneamiento y de higiene, ya sea por no lavarse las manos o lavar los alimentos, es
causa de que la E. histolytica se propague infectando a las personas.

En la mayora de los casos, las personas expuestas a este parsito son asintomticas; pero en los
casos donde s se presentan sntomas, las personas suelen padecer de clicos abdominales, gases
excesivos, diarrea, mucha prdida de peso y fatiga. Pero, cuando la colitis amebiana empeora, se
presentan fiebres, escalofros y diarreas intensivas, con sangre y mucosidad; y puede desarrollarse
la apendicitis amebiana. (2) Todas estas dolencias son consecuencias que el paciente sufre, bajando
su rendimiento en la vida.

Las tasas de prevalencia de la amebiasis son ms elevadas en pases tropicales y en vas de
desarrollo, frica, Asia, Centroamrica y Suramrica se consideran endmicos para esta
enfermedad. La amebiasis es una de las principales causas de diarrea en nios menores de cinco
aos y la cuarta causa de muertes en el mundo debido una infeccin por protozoarios. Existen
aproximadamente 50 millones de casos anualmente, 90% de estos son asintomticos y solo el 10%
son sintomticos, principalmente a nivel intestinal. (3)

Un estudio sobre la frecuencia de parsitos protozoarios en la poblacin infantil asistente a la escuela
rural mixta Sitio de las Flores, en la aldea Sitio de las Flores, Asuncin Mita, en Jutiapa demostr
que los nios menores de 9 aos son ms propensos a padecer enfermedades parasitarias, como se
puede ver en el siguiente cuadro. (4)


Fuente: (4)

Cuadro 1.
6
Tambin se determin que dentro de las enfermedades parasitarias gastrointestinales, la amebiasis
se encuentra en el quinto lugar de las enfermedades ms frecuentes de este tipo, como puede
observarse en el cuadro nmero dos. (4)


Fuente: (4)

El tratamiento de eleccin es el Metronidazol y uno de los propuestos como alternativa, la guayaba,
por lo que se plantea como pregunta central de investigacin: Es la guayaba igual de efectiva que el
Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones Mus musculus? Y de esto se desarrollaron las
siguientes preguntas auxiliares:

Cunto tiempo tarada un ratn infectado de amebiasis en recuperarse, utilizando tratamiento
de Metronidazol?
Cunto tiempo tarada un ratn infectado de amebiasis en recuperarse, utilizando tratamiento
de guayaba?
Existir la posibilidad que se presenten posibles efectos secundarios en los ratones
infectados de amebiasis; causados por el tratamiento con Metronidazol y/o por el tratamiento
con guayaba?
Se eliminan las amebas en los ratones infectados tratados con Metronidazol y en los ratones
tratados con guayaba?




















Cuadro 2.
7
2. JUSTIFICACIN

Se ha observado dentro de las comunidades de Guatemala que la mayora de la poblacin que sufre
de amebiasis no tiene la capacidad econmica para costear un medicamento para tratar la
enfermedad, como el Metronidazol. Por esta razn es necesario encontrar una alternativa ms
econmica para tratar con dicha enfermedad. Una buena opcin sera la utilizacin de la guayaba,
sin embargo no se ha comparado su accin con la del Metronidazol, razn que da origen a esta
investigacin.

Si bien los medicamentos de origen natural se han asumido como preventivos, en este caso se trata
de demostrar su importancia en el segundo nivel de atencin propuesto por Lewell y Clark, como lo
es el tratamiento precoz de enfermedades. Demostrada su efectividad, este tratamiento podra ser
promovido entre la poblacin, con el modo correcto de uso y preparacin, as como buenas prcticas
higinicas, disminuyendo la prevalencia e incidencia de la enfermedad en el pas.





































8
3. OBJETIVOS

General

Comparar la efectividad de la guayaba frente al Metronidazol para tratar la amebiasis en
ratones experimentales Mus musculus, dentro del laboratorio de biologa de la Universidad
Rafael Landvar.

Especficos

Identificar posibles efectos secundarios en los ratones infectados de amebiasis, causados por
el tratamiento con Metronidazol y por el tratamiento con guayaba.
Comparar el tiempo de recuperacin del ratn infectado de amebiasis, utilizando el tratamiento
de Metronidazol, frente al tiempo de recuperacin del mismo, utilizando el tratamiento de
guayaba.
Determinar, por medio de exmenes de heces, la posible eliminacin de la amebiasis en los
ratones infectados tratados con Metronidazol as como de ratones tratados con guayaba.


































9
4. MARCO TERICO

4.1. AMEBIASIS

4.1.1. Definicin

La amebiasis es una infeccin mundial causada por el parsito protozoario Entamoeba histolytica.
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) define a la amebiasis como la infeccin producida por
Entamoeba histolytica, protozoario entrico que tiene su hbitat normalmente en el intestino grueso;
puede invadir la mucosa intestinal produciendo ulceraciones y tener localizaciones extra intestinales,
propagndose hacia otros rganos. (5)

Existen dos tipos de amebiasis: intestinal y heptica. Sus tasas de prevalencia son ms elevadas en
pases en vas de desarrollo y tropicales; frica, Asia y Centro y Suramrica se consideran
endmicos para amebiasis. Es una de las principales causas de diarrea en nios menores de cinco
aos y la cuarta causa de muerte en el mundo debida a infeccin por protozoarios; la susceptibilidad
del husped y las diferencias en la virulencia del organismo son determinantes. Existen
aproximadamente 50 millones de casos anualmente, 90% de estos, son asintomticos y solo el 10%
son sintomticos, principalmente a nivel intestinal. (6)

La gran diferencia que existe entre las personas infectadas que no presentan sntomas y las que s,
es porque el protozoario E. histolytica es morfolgicamente idntico a otras cepas como Entamoeba
coli y Entamoeba hartmann, mas genotpicamente son distintas. (7)

4.1.2. Agente etiolgico

La Entamoeba histolytica es un protozoario que se presenta en dos formas en su ciclo vital: quiste y
trofozoito. El quiste se conforma de estructuras redondeadas de 10 a 16 m, con una cubierta gruesa
y que presenta en su interior 1 a 4 ncleos, es inmvil, se encuentra en las heces de la persona
infectada ya que es la forma resistente de E. histolytica. Pueden vivir varios das, inclusive semanas
en el suelo o en el agua. El trofozoito vive en el intestino de la persona, tiene un dimetro de 20 a 40
m y es mvil, su ncleo presenta un cariosoma compacto central y cromatina en grnulos uniformes
en tamao y localizacin. Tienen la capacidad de colonizar la mucosa intestinal. (8,5)

Figura 1: Quiste y Trofozoito de Entamoeba histolytica

Fuente: (5)

10
Su ciclo de vida comienza al entrar al organismo de la persona por medio de alimentos o agua
contaminada con heces. Es resistente al pH cido estomacal, por consiguiente, llega a los intestinos
como quiste, all se divide y se convierte en trofozoito. Estos migran hacia el intestino grueso, en
donde colonizan y enquistan, y son expulsados por medio de las heces fecales. Muchas veces estos
no salen del organismo por meses o aos, dando lugar a una amebiasis heptica pues algunos
trofozoitos ingresan al torrente sanguneo llegando hasta el hgado, principalmente. Pueden moverse
hacia otras partes del cuerpo como el cerebro o pulmn, originando infecciones con un grado mayor
de complicacin. (5)

Figura 2: Cadena epidemiolgica de la amebiasis

Fuente: (5)

4.1.3. Sntomas

Las personas expuestas a este parsito son, en su mayora, asintomticas, es decir, no presentan
sntomas. Cuando la amebiasis intestinal presenta sntomas, estos se deben a la localizacin del
agente. Dichas manifestaciones pueden ir de una colitis ulcerativa a una apendicitis amebiana,
pasando por el megacolon txico y el ameboma. (9)

Agente
infeccioso:
Entamoeba
histolytica
Reservorio:
Intestinos del
husped
Puerta de
salida:
Materia Fecal
Modo de
transmisin:
Ingestin de
alimentos o
agua
contamida
Puerta de
entrada:
Orofecal
(alimentos o
agua
contamina-
da)
Susceptibili-
dad del
hesped:
Mala higiene
11
En la colitis amebiana los sntomas ocurren mayoritariamente cuando las amebas atacan las paredes
del intestino grueso; causando un dolor abdominal creciente. Tambin se pueden presentar sntomas
adicionales como diarrea con sangre o mucosidad de color amarillento, deposiciones frecuentes o
una continua necesidad de ir al bao, as como, en un tercio de los casos, tambin puede producir
fiebre. (10)

Cuando la colitis amebiana empeora, se presentan fiebres, escalofros y diarreas intensivas, con
sangre y mucosidad. A esta enfermedad se le conoce como apendicitis amebiana, la cual con
frecuencia conduce a la deshidratacin. Es importante mencionar que esta enfermedad solo se
presenta en casos muy extremos y en raras ocasiones. (10)

La formacin de focos de infeccin en distintos rganos se debe a que las amebas se desplazaron
por va sangunea a otras partes del cuerpo. De todos los casos, el 1% infectan al hgado, causando
una dolencia llamada amebiasis heptica. Esta enfermedad incluye sntomas como: fiebre, dilatacin
del abdomen, dolor e hper-sensibilidad en la zona del hgado justo debajo de las costillas derechas.
(10)

Como se mencion, comnmente la mayora de las personas con esta enfermedad no presenta
sntomas. Si se presentan, se observan en un rango de 7 a 28 das despus de estar expuesto al
parsito. Estos sntomas se clasifican en leves y graves. (11)

Sntomas leves:
Clicos abdominales
Diarrea
Fatiga
Gases excesivos
Dolor rectal durante la defecacin

Sntomas graves:
Sensibilidad abdominal
Heces con sangre
Fiebre
Vmitos

4.1.4. Prevencin

Todava no existe ninguna vacuna o frmaco profilctico para poder controlar o erradicar a la
amebiasis, por lo que la prevencin depende de la pureza de nuestras fuentes de agua, de la
eliminacin adecuada de las heces humanas y de la utilizacin correcta de las medidas de higiene.
(12)

Algunas medidas para prevenir la amebiasis son:
Mejorar las medidas higinicas ambientales y en el hogar.
Lavar, desinfectar y cocer bien los alimentos antes de su consumo.
Evitar defecar en la tierra, sembrados y cuerpos de agua.
Hervir el agua si no es potable.
Lavar bien las manos, despus de ir al bao y antes de tocar, preparar o consumir los
alimentos.
Evitar comer en la calle y en sitios donde la higiene est deficiente.

12
Cuando salga de viaje, principalmente a pases tropicales, en los cuales las condiciones de
salubridad son inadecuadas, tome agua potable o hervida y no coma verduras crudas, ni frutas sin
pelar. Todas las medidas de salud pblica deben incluir purificacin y desinfeccin de agua con cloro,
adems de incluir programas de aguas residuales. (12)

4.1.5. Diagnstico

La amebiasis es una infeccin parasitaria difcil de diagnosticar, ya que existen otras enfermedades
disentricas y amebianas que presentan agentes infecciosos similares. Principalmente se realiza
pruebas y estudios al microscopio, pero debido a la dificultad de diferenciar organismos
morfolgicamente similares, como en el caso de Entamoeba histolytica y Entamoeba dispar, es
preferible realizar pruebas ms especficas. (12)

Actualmente se realizan pruebas de laboratorio en sangre, o serologa, y muestras de heces fecales,
siendo estas ltimas las ms certeras y confiables, ya que las pruebas serolgicas tienen un bajo
ndice de identificacin y especificidad en el diagnstico de amebiasis y otras enfermedades
parasitarias. (12)

4.1.5.1. Serologa

Las pruebas de laboratorio en sangre, suelen mostrar leucocitosis moderada, ya que se presentan
procesos infecciosos e inflamatorios en el cuerpo. El examen ms completo en serologa, que puede
indicar la presencia de E. histolytica es el IHA y ELISA, siendo certeros en casi un 90% de casos con
amebiasis, principalmente, amebiasis heptica. (13)

4.1.5.2. Examen de heces

Otra forma de diagnosticar la amebiasis es realizando pruebas de antgenos y anticuerpos en heces
para diferenciar especies de agentes infecciosos y parasitarios, los cuales pueden provocar la
disentera y otros sntomas relacionados a la amebiasis.

Al momento de realizar una prueba en heces, se pueden observar trofozoitos, y quistes del agente
etiolgico para lo que se necesita de tincin tricrmica. El anlisis de los quistes y su diferenciacin
inmunolgica e isoenzimtica, as como de conformacin, es el mecanismo ms certero y confiable
de diagnosis e identificacin de la Entamoeba histolytica. (10)

4.1.6. Tratamiento

Depende del tipo de amebiasis con el que se haya diagnosticado el paciente y el cuadro clnico que
presente. Sin embargo, algunos medicamentos como el Metronidazol, de la familia de los
Nitroimidazoles, contienen un compuesto luminal y tisular, que lo hace efectivo y completo para tratar
cualquier tipo de amebiasis en comparacin con otros medicamentos. (12)

4.1.6.1. Composicin y uso del Metronidazol

El Metronidazol es un medicamento derivado del 5-nitromidazol que acta al nivel de la sntesis de
DNA, a travs del grupo nitro reducido por ferredoxinas y por otros compuestos bacterianos (12).
Este medicamento tiene funcin antimicrobiana, utilizada para actuar contra bacterias anaerobias y
algunos protozoos as como la Entamoeba histolytica. (13)

13
Debido a su fcil absorcin por medio del intestino delgado y su fcil dispersin por medio de los
tejidos, es muy eficaz al tratar la amebiasis, ya que ataca a la E. histolytica, cuyos trofozoitos se
alojan en la pared intestinal o en tejidos cercanos, afectando su ADN y evitando su proliferacin as
como su agresividad. (11, 14)

4.1.6.2. Efectos secundarios del Metronidazol

Este medicamento puede presentar efectos secundarios en los humanos, como nuseas y vmitos,
dolor abdominal, cefalea y un sabor metlico en la boca. Por otra parte, puede ocasionar reacciones
mucho ms graves como ataxia, vrtigo, confusin y parestesia, y en casos muy raros, convulsiones
y encefalopatas. Tambin se ha demostrado que puede ocasionar leucopenia, y dao en los
espermatozoides, puede ser mutagnico y genotxico al ser consumido en altas dosis y por mucho
tiempo. (11, 14)

4.2. GUAYABA COMO TRATAMIENTO PARA LA AMEBIASIS

4.2.1. Composicin y beneficios

Como tratamiento alternativo, evitando frmacos y basndose en la medicina tradicional, se
encuentra a la guayaba como una fruta utilizable para el tratamiento de la amebiasis. La guayaba,
cuyo nombre cientfico es Psidium guajava L., es una fruta tropical que pertenece a la familia
Myrtaceae. Esta puede ser consumida tanto cruda como procesada en forma de pulpas, jugos o
mermeladas. (15) A pesar de su aspecto de mal gusto a causa de sus numerosas semillas, se
considera a la guayaba como una de las frutas ms aromticas y agradables. (16)

La guayaba posee un alto contenido de fibra de 8.15 % y de cido ascrbico de 160 mg/100g. De
igual manera, es una buena fuente de vitamica C, vitamina A, fsforo, calcio y hierro. (16) Al mismo
tiempo, la guayaba es poseedora de los siguientes compuestos:

Flavonoides: que poseen propiedades antimicrobianas, antiinflamatorias, antioxidantes,
anticancergenas y cardiotnicas. Disminuyen el colesterol, protegen al hgado y al estmago.
Taninos: que poseen propiedades antidiarreicas, antioxidantes, antibacterianas y
antiinflamatorias, adems que tambin disminuyen el colesterol.
cido elgico: que posee propiedades antioxidantes y antitumorales.
Cariofileno: que posee propiedades antioxidantes y antifibrognicas.
Nerolidol: que es antiinfeccioso, antiviral, antiparasitario, antiinflamatorio, estimulante de las
glndulas suprarrenales e inmunoestimulante.

Con esto, se puede concluir que la guayaba es una fruta con propiedades antidiarricas,
antimicrobianas y antioxidantes. Por la misma razn, la guayaba puede ser utilizada con fines para
tratar casos de diarreas, de enfermedades del estmago y espasmos abdominales. (17)

Existen varios mtodos que utilizan la hoja de guayaba para el tratamiento de la amebiasis, entre uno
de ellos se encuentra el recomendado por Ismael Gmez Snchez, en su proyecto final de mster
titulado Tratamiento tradicional del sndrome diarreico con infusin de hojas de P. guajava L.
(guayaba). (17)

Otro mecanismo que se puede utilizar para el tratamiento de la amebiasis es el que recomienda el
Ministerio de Salud, el cual se describe a continuacin:

1. Agregar 3 hojas de guayaba en una taza de agua.
14
2. Agregar jugo de limn y miel.
3. Tomar 1 taza de la mezcla 4 veces al da y antes de acostarse.
4. Repetir este procedimiento durante 7 das.

En nios mayores de 5 aos, la dosis se rebaja a media taza 4 veces al da y antes de acostarse
durante 7 das. (17)

4.2.2. Efecto sobre la amebiasis

Se ha demostrado que la guayaba cocida en agua tiene efectividad contra algunas cepas. Ha
mostrado actividad antibacterial contra la S. flexneri y Vibrio cholerae. Se redujo la produccin de
toxinas de E. coli y de clera. De igual manera se inhibi la adhesin de Escherichia coli
enteroinasiva y S. flexneri a las clulas. (17)

4.3. RATONES COMO MODELO EXPERIMENTAL

Un modelo experimental permite obtener prcticas adaptables a la experimentacin, ligada con la
observacin y medicin, para comprobar un conocimiento emprico. (18)

El ratn es un modelo experimental ideal, debido a su pequea talla, corto tiempo generacional, fcil
mantenimiento y gran rendimiento reproductivo, adems en l se han realizado gran cantidad de
experimentos in vivo de biologa y medicina, debido a que se encuentra dentro de los mamferos
mejor estudiados genticamente; la longitud del genoma del ratn es similar a la longitud del genoma
humano, adems contiene 90% de genes en comn, lo que proporciona una base gentica clara
para el uso del ratn como modelo de desarrollo y patologa humana. (19)

Cuadro 3. - Ventajas y desventajas de utilizar ratones como modelos experimentales
Ventajas Desventajas
Especie definida
Dificultad al administrar drogas o
medicamentos fuertes
Mltiples caractersticas que
funcionan como modelo
Difcil recopilacin del material
gentico
Costo accesible y corto tiempo
de reproduccin
Impedimento de mtodos
quirrgicos
Fuente: (18)

En cuanto a su taxonoma los ratones de laboratorio son de clase mammalia y proveniente de la
familia muridae; la especie del mismo es musculus del gnero Mus.

Los ratones domsticos tienden a adaptarse a la diversidad de condiciones ambientales, sin embargo
tienen una preferencia por climas clidos y secos, tienen sangre caliente y preferencia por los
lugares oscuros o con poca claridad, su comportamiento est mediado por feromonas. En cuanto a
sus sentidos: su audicin es muy sensible por lo que los ruidos fuertes causan alteracin a los
mimos, su sentido del olfato es sumamente desarrollado tanto como para percibir alimentos, su visin
es muy baja y son daltnicos.

Un ratn adulto oscila entre los 12 y 15 centmetros de longitud desde la cola hasta la nariz, con un
peso aproximado a 30 gramos; en cuanto a las cras, tienen un peso de 1 a 2 gramos y ganan peso
durante el periodo de lactancia. El periodo de su vida es de 10 a 12 meses. (20)

15
Los animales de laboratorio se clasifican de acuerdo a la presencia o ausencia de microorganismos
patgenos. Los patgenos por controlar son parsitos, virus, bacterias y hongos. (20)

Segn esta clasificacin los animales pueden ser:
Haloxnico: son conservados en instalaciones abiertas (sin control de sanitario estricto), sin
embargo no albergan enfermedades infecciosas transmisibles al hombre.
Miroxnico: se mantienen bajo condiciones sanitarias estrictas, se encuentran infectados por
una fraccin de microorganismos no patgenos, provenientes de un haloxnico; no se
encuentra infectado por organismos patgenos trasmisibles.
Gnotobitico con microbiota definida: se mantienen en un sistema cerrado y estril, pero se les
introduce premeditadamente especies microbianas conocidas.
Heteroxnico: son libres de grmenes patgenos especficos, mantenidos en sistemas
cerrados, y pueden albergar microbiota proveniente de su medio.
Axnico: son animales libres de especies microbianas vivientes detectables: virus, bacterias,
parsitos y hongos. Son nacidos y criados en un ambiente totalmente estril, con revisin
peridica. (20)

Se ha comprobado que los ratones Balb/c (Mus musculus) infectados con trofozoitos de Entamoeba
histolytica presentan dao en el tejido heptico, en distintos periodos de tiempo, (aproximadamente
de 24 horas); y muestran una respuesta inmune, ya que ocurre una necrosis en el tejido heptico,
causando un dao irreversible. (21)






























16
5. HIPTESIS

Hiptesis de investigacin
La guayaba es ms efectiva que el Metronidazol para combatir la amebiasis.

Hiptesis nula
La guayaba no es ms efectiva que el Metronidazol para combatir la amebiasis.

Hiptesis alterna
La guayaba y el Metronidazol son igualmente efectivos para combatir la amebiasis.









































17
6. MATERIALES Y MTODOS

6.1. RECURSOS

Para poder realizar el proyecto de investigacin sobre la efectividad de la guayaba frente al
Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones experimentales Mus musculus, dentro del
laboratorio de biologa de la Universidad Rafael Landvar, se requerir los siguientes recursos
humanos, materiales, financieros y temporales:

6.1.1. Recursos humanos

Encargados de laboratorio
Encargados de proyecto (integrantes del grupo)

6.1.2. Recursos materiales y financieros

Cuadro 4. - Recursos materiales y financieros para el proyecto de investigacin
sobre la efectividad de la guayaba frente al Metronidazol para tratar la
amebiasis en ratones Mus musculus.
Insumo Cantidad Precio por
unidad
Precio
total
1
Guayaba para el tratamiento
de los ratones
10 unidades Q 5.00 Q 50.00
Metronidazol en jarabe para el
tratamiento de los ratones
1 caja Q 44.10 Q 44.10
Ratones Mus musculus
2
15 unidades Q 80.00 Q 1,200.00
Jaula para ratn

3 unidades Q 180.00 Q 540.00
Viruta para jaula
3
3 bolsas Q 15.00 Q 45.00
Alimento de ratn
3
3 bolsas Q 80.00 Q 240.00
Bebedero para ratn 3 unidades Q 20.00 Q 60.00
Exmenes de heces
4
6 exmenes Q 50.00 Q 300.00
Agente causal: Entamoeba
histolytica
5
1 unidad Q 0.00 Q 0.00
Total de inversin para la investigacin Q 2,479.10
Total cubierto por los investigadores Q 694.10
1
Los precios pueden variar
2
Ratones donados por el criadero
3
Donado por tienda de mascotas
4
Donado por laboratorio
5
No a la venta, por lo que el cultivo de la cepa se obtiene por donacin











18
6.1.3. Recursos temporales

Cuadro 5. - Cronograma de actividades realizadas del proyecto de investigacin sobre la
efectividad de la guayaba frente al Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones Mus
musculus.
Actividad
Julio Agosto Septiembre Octubre Noviembre
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Delimitacin del ttulo
de trabajo

Realizacin del marco
terico

Realizacin del
planteamiento del
problema

Inicio del experimento
en ratones

Desarrollo del
experimento en
ratones

Conclusin del
experimento en
ratones y anlisis de
resultados

Discusin de
resultados,
conclusiones y
recomendaciones

Realizacin del trabajo
final

Presentacin del
trabajo final


6.2. MTODOS

6.2.1. Sujeto de estudio

Los sujetos de estudio son los tratamientos con Metronidazol y guayaba, los cuales se compararn
para determinar su eficacia al combatir la amebiasis, realizando pruebas en ratones Mus musculus
infectados.

6.2.2. Enfoque, tipo de estudio y diseo

Este estudio tiene un enfoque cuantitativo, con un tipo de estudio explicativo y un diseo
experimental puro.

6.2.3. Contexto de investigacin

El estudio se realizar dentro del laboratorio de biologa de la Universidad Rafael Landvar, durante el
mes de noviembre del ao 2013.


19
6.2.4. Poblacin

La poblacin para el estudio son 15 ratones de la especie Mus musculus, los cuales se dividirn en 3
grupos de 5 ratones cada uno. De estos, 2 grupos estarn infectados con el parsito Entamoeba
histolytica y uno se encontrar sano como grupo control.

6.2.5. Muestra

No hay muestra debido a que el estudio ser realizado con toda la poblacin de ratones dentro del
laboratorio.

6.2.6. Criterios de inclusin y exclusin

El estudio se realizar exclusivamente en ratones de la especie Mus musculus, que no sean menores
de 2 meses ni mayores de 5 meses de edad. Se utilizar la guayaba ya que se han realizado
estudios previos sobre sus beneficios y propiedades a nivel gastrointestinal, pero no especficamente
para combatir la amebiasis; as mismo el estudio se enfocar en amebiasis debido a que es una
enfermedad frecuente en Guatemala.

6.2.7. Variables de estudio

Cuadro 6. - Clasificacin de las variables utilizadas para el estudio sobre la efectividad de la
guayaba frente al Metronidazol para tratar la amebiasis en ratones Mus musculus.
Variable Definicin general
Clasificacin
Codificacin
Naturaleza
Escala de
Medicin
Interrelacin
Tratamiento
Conjunto de medios
y acciones de
cualquier tipo, cuyo
fin es la curacin o
alivio de un
padecimiento.
Indicador: Tipo de
tratamiento
utilizado.

Cualitativo Nominal Independiente
1. Guayaba
2. Metronidazol
3. Ninguno
Efectividad
del
tratamiento
Medicin de los
resultados de un
tratamiento
aplicado en
condiciones
ideales, respecto a
un evento en salud.
Indicador: Ausencia
de amebiasis luego
de tomar el
tratamiento por una
semana.
Cualitativa Nominal Dependiente
1. Si
2. No



20
6.2.8. Instrumentos de medicin de variables

Evaluacin y medicin de peso de los ratones utilizando balanzas de precisin marca OHAUS
para poder determinar la dosis de medicamento necesaria.
Pruebas de laboratorio para evaluar la presencia o ausencia de amebiasis en los ratones Mus
musculus.
Observacin y evaluacin del comportamiento y evolucin de la enfermedad en los ratones,
para determinar posibles efectos secundarios y beneficios de cada tratamiento respecto a
nuestro grupo control.

6.2.9. Intervenciones

Debido a la naturaleza de la investigacin, no ser necesario utilizar prueba piloto.

6.2.10. Ejecucin de la investigacin

En esta investigacin, se comprobar la efectividad de la guayaba frente al Metronidazol como
tratamiento para combatir la amebiasis. Para ello, se trabajar con 15 ratones de la especie Mus
musculus, los cuales se dividirn en 3 grupos de 5 ratones cada uno; uno ser tomado como el grupo
control, el segundo grupo ser tratado comprobando la efectividad de la guayaba y el ltimo grupo
ser tratado comprobando la efectividad del Metronidazol.

Al iniciar la investigacin, se infectar a los ratones con el parsito Entamoeba histolytica, el cual
provoca la amebiasis. Para comprobar dicha infeccin, se realizarn exmenes fecales en
laboratorio. Para comenzar a tratar a los ratones, el tratamiento, ya sea guayaba o Metronidazol, se
administrar en forma oral (infusin y jarabe respectivamente) mediante el agua que estos ingieran
de los bebederos, observando siempre su comportamiento y cualquier circunstancia que se vaya
presentando a lo largo de la investigacin.

Al finalizar el estudio, se realizarn nuevamente estudios de heces en laboratorio, comprobando as
la ausencia de Entamoeba histolytica, y por ende de la amebiasis, observando y analizando la
eficacia y efectividad de cada tratamiento mediante la evaluacin del estado de salud gastrointestinal
de los ratones.

6.2.11. Presentacin de resultados

Para la presentacin de resultados utilizaremos tablas, grficas y por ltimo un breve anlisis que
exponga las observaciones a lo largo del estudio. Las tablas se utilizarn para comparar los
resultados; beneficios y posibles efectos secundarios que se presentaron durante el tratamiento con
Metronidazol y guayaba, as como su comparacin con el grupo control. As mismo se incluirn todos
los aspectos relevantes que susciten dentro del estudio, respecto al estado de salud de los ratones
evaluados.

En las grficas se presentar la evolucin en el proceso de curacin de la amebiasis en los ratones
Mus musculus, proporcionando informacin como el tiempo transcurrido y los beneficios observados,
utilizando los resultados de las pruebas de laboratorio.

Por ltimo, se realizar un anlisis de todos los datos obtenidos a lo largo del estudio, siendo los
encargados de la investigacin los que evalen la efectividad de la guayaba frente al Metronidazol
para tratar la amebiasis en ratones Mus musculus.

21
7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Gonzales Vsquez, M.C.; Carabarin Lima, A.; Baylon Pacheco, L.; Rosales Encina, J.L.; et. Al.
De amibas y amebiasis; Entamoeba histolytica [tesis en internet]. 2012 13-18 [citado 28 agosto
2013] Disponible en: http://www.elementos.buap.mx/num87/pdf/13.pdf

2. Polana Lizcano H, Cabrera Daz R. Ameboma cecal. Complicacin de la amebiasis intestinal.
Revista Colombiana De Gastroenterologa [revista en Internet]. Julio 2011 [citado 13 agosto
2013]; 26(3): 227-229. Disponible en: MedicLatina. URL:
http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=2ad3481d-d3a6-4956-886a-
b8ff1597b388%40sessionmgr114&vid=2&hid=11

3. Gonzles Salazar, F.; Mata-Cardenas,B.; Vargas-Villareal, J. Sensibilidad de trofozoitos de
Entamoeba histolytica a ivermectina [atculo en lnea] Junio 2009 [citado 28 agosto 2013] 69;
318-320. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=e1e7bfbc-
4832-432b-bfbc-05d536119110%40sessionmgr12&vid=2&hid=11

4. Silva Sandoval, K. Determinacin de la frecuencia de parsitos protozoarios en la poblacin
infantil asistente a la escuela rural mixta Sitio de las Flores, en la aldea Sitio de las Flores,
Asuncin Mita, Jutiapa. Biblioteca Universidad de San Carlos de Guatemala [tesis en lnea].
Guatemala; 2010 [citado 28 de agosto de 2013]. Disponible en:
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_2903.pdf.

5. Gonzales Vsquez MC; Carabarin Lima, A.; Baylon Pacheco, L.; Rosales Encina JL.; et. Al. De
amibas y amebiasis; Entamoeba histolytica [Tesis en internet] Mxico2012 13-18 [citado 13
agosto 2013] Disponible en: http://www.elementos.buap.mx/num87/pdf/13.pdf

6. Gonzles Salazar F.; Mata-Cardenas B.; Vargas-Villareal J. Sensibilidad de trofozotos de
Entamoeba histolytica a ivermectina [artculo en lnea] Junio 2009 [citado 13 agosto 2013] 69;
318-320. Disponible en: http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=e1e7bfbc-
4832-432b-bfbc-05d536119110%40sessionmgr12&vid=2&hid=11

7. Araujo J., Garca, M.E.; Daz-Surez O.; Urdaneta, H. Amibiasis: Importancia de su diagnstico y
tratamiento. Mini-revisin. Invest. cln [revista en la Internet]. 2008 Jun [citado 13 agosto 2013];
49(2): 265-271. Disponible en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0535-
51332008000200013&lng=es

8. Santiago R, Gonzlez D, Abad D, Paz K. Protozoarios patgenos primarios clsicos. Archivos
Venezolanos De Puericultura Y Pediatra [revista en Internet]. Noviembre 2010 [citado 13 agosto
2013]; 7320-28. Disponible en: MedicLatina URL:
http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=05c66fe0-ab11-4e84-8aa3-
da7f0ac77649%40sessionmgr113&vid=2&hid=11

9. Polana Lizcano H, Cabrera Daz R. Ameboma cecal. Complicacin de la amebiasis intestinal.
Revista Colombiana De Gastroenterologa [revista en Internet]. Julio 2011 [citado 13 agosto
2013]; 26(3): 227-229. Disponible en: MedicLatina. URL:
http://web.ebscohost.com/ehost/pdfviewer/pdfviewer?sid=2ad3481d-d3a6-4956-886a-
b8ff1597b388%40sessionmgr114&vid=2&hid=11

10. Arroja, B.; Ferreira, S.; Canhoto, M.; Gonalves, C.; Silva F. Invasive Amebiasis (amebiasis
invasiva) Jornal Portugus de Gastroenterologa. [revista en Internet] noviembre-diciembre 2010
22
[citado 13 agosto 2013] 17; 262-265 Disponible en:
http://www.scielo.oces.mctes.pt/pdf/ge/v17n6/v17n6a04.pdf

11. Acha, P.N. Zoonosis y enfermedades Transmisibles comunes al hombre y a los animales. 3.
Edicin. Washington DC. OPS. [revista en Internet] Disponible en:
http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v11n1/v11n1a06.pdf

12. Salles JM, Morales LA, Salles MC. Hepatic Amebiasis. Braz J Infect Dis [revista en la Internet].
2003 [citado 2013 Ago 13]; 7(2): 96-110. Disponible en:
http://www.scielo.br/pdf/bjid/v7n2/a03v7n2.pdf

13. Cortz JA, Cuervo SI, Lpez MC. Amebiasis Intestinal. Infectio [revista en la Internet]. 2007
[citado 2013 Ago 13]; 11(1): 36-45. Disponible en:
http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v11n1/v11n1a06.pdf

14. Falcao Costa C, Moura EA, Faria Almeida R, Bascones A. Antibioterapia en Periodoncia:
Situacin actual I-Antibiticos Sistmicos. Avances en Periodoncia [revista en la Internet]. 2001
Abr [citado 2013 Ago 13]; 13(1): 39-47. Disponible en:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1699-65852001000100005&lng=es.
http://dx.doi.org/10.4321/S1699-65852001000100005.

15. Marquina V, Araujo L, Ruz J, Rodrguez-Malaver A, Vit P. Composicin qumica y capacidad
antioxidante en fruta, pulpa y mermelada de guayaba (Psidium guajava L.). ALAN [revista en la
Internet]. 2008 Mar [citado 2013 Ago 14]; 58(1): 98-102. Disponible en:
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004-06222008000100014&lng=es.

16. Ramrez A, Pacheco E. Composicin qumica y compuestos bioactivos presentes en pulpas de
pia, guayaba y guanbana. Interciencia [revista en la Internet]. 2011 Jan [citado 2013 Ago 14];
36(1): 71-75. Disponible en: http://www.interciencia.org/v36_01/071.pdf

17. Gmez I. Tratamiento tradicional de sndrome diarreico con infusin de hojas de P. guavaja L.
(guayaba). Proyecto final de mster (PFM). Guatemala: Universidad Europea de Cervantes; 2012

18. Alcocer A. Gentica, un enfoque conceptual. 3 Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Madrid,
Espaa. 2009.

19. Montero Gonzlez T, Moreno Quintana P, Berlanga Acosta J, Hurtado de Mendoza AJ, Bacardi
Fernndez D, Urquiza ND et al. Modelo experimental de ratn quemado en investigaciones
biomdicas. Rev Cub Med Mil [revista en la Internet]. 2003 Jun [citado 2013 Ago 15]; 32(2):
94-102. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0138-
65572003000200003&lng=es.

20. Fuentes Paredes FM, Mendoza Yanavilca RA, Rosales Fernndez AL, Cisnero Tarameo RA.
Cuidado de animales de laboratorio: ratn. Centro Nacional de Productos Biolgicos. Instituto
Nacional de Salud. Lima. [Revista en internet] 2008. [Citado 2013 Ago 15] Disponible en:
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/GUIA_ANIMALES_RATON.pdf

21. Gmez EG. Anlisis de la expresin de algunas citocinas en respuesta al tratamiento del
absceso heptico amebiano con apo-lactoferrina. Instituto Politcnico Nacional. Mxico. [Tesis en
internet]. 2012. [Citado 2013 Ago 15]. Disponible en:
http://tesis.bnct.ipn.mx:8080/dspace/bitstream/123456789/11567/1/13.pdf